Клинико-иммунологическая характеристика циркулирующих и внутриопухолевых лимфоцитов больных первично-операбельным раком молочной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Хакимова, Шахноз Голибовна

• Хакимова, Шахноз Голибовна
• кандидат наук
• 2016

Оглавление диссертации кандидат наук Хакимова, Шахноз Голибовна

ВВЕДЕНИЕ......................................................................................................................4

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..............................................................................11

Лейкоциты и развитие рака..........................................................................................15

Врожденный иммунитет и развитие рака молочной железы...................................17

Адаптивный иммунитет и развитие рака молочной железы: роль В-лимфоцитов 22 Адаптивный иммунитет и развитие рака молочной железы: роль Т-лимфоцитов 23

Регуляторные клетки.....................................................................................................27

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ......................................................................36

2.1 Общая характеристика клинического материала................................................36

2.2 Лабораторные (иммунологические) методы исследований...............................47

2.2.1 Исследование иммунофенотипа лимфоцитов периферической крови..........47

2.2.2 Исследование цитотоксического потенциала клеток-эффекторов.................48

2.2.3 Исследование иммунофенотипа лимфоцитов инфильтрирующих опухоль.. 49

2.2.4 Цитоморфологический анализ............................................................................50

2.3 Проточно-цитометрический анализ......................................................................50

2.4 Статистическая обработка результатов................................................................51

ГЛАВА 3. КЛИНИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ БОЛЬНЫХ ПЕРВИЧНО-

ОПЕРАБЕЛЬНЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ..............................................52

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОФЕНОТИПА ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ ПЕРВИЧНО-ОПЕРАБЕЛЬНЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ.................................................................................58

4.1 Исследование линейных популяций CD45+ лимфоцитов периферической крови больных РМЖ ..................................................................................................... 58

4.2 Исследование структуры Т-клеток периферической крови больных РМЖ.....60

4.3 Исследование функциональной активности клеток эффекторного звена иммунитета больных РМЖ..........................................................................................64

4.4 Исследование супрессорных/регуляторных минорных популяций лимфоцитов периферической крови больных РМЖ........................................................................68

ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОФЕНОТИПА ЛИМФОЦИТОВ ИНФИЛЬТРИРУЮЩИХ ОПУХОЛЬ БОЛЬНЫХ ПЕРВИЧНО-ОПЕРАБЕЛЬНЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ.................................................................................76

5.1 Количественное исследование степени инфильтрации CD45+ лимфоцитами опухолевой ткани больных РМЖ................................................................................76

5.2 Исследование линейных популяций CD45+ лимфоцитов инфильтрирующих

опухоль больных РМЖ.................................................................................................80

5.3. Исследование структуры Т-клеток и популяций активированных лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы............................................................................................................................81

5.4 Исследование структуры и функциональной активности лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, эффекторного звена иммунитета больных РМЖ.....83

5.5 Исследование супрессорных/регуляторных минорных популяций лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных РМЖ..............................................................84

5.6 Исследование иммунофенотипа CD45+ лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных РМЖ в зависимости от степени инфильтрации опухолевой

ткани...............................................................................................................................86

ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ................................90

ВЫВОДЫ.....................................................................................................................110

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.........................................................................................112

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...........................................................................................113

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы

Рак молочной железы (РМЖ) на протяжении последних десятилетий занимает первое место среди злокачественных новообразований женского населения. В 2014 г. в России зарегистрированы 65678 новых больных РМЖ. Прирост стандартизованного показателя заболеваемости РМЖ в России за последние 10 лет составил 19,94% [3]. Максимальной доля рака молочной железы от всех злокачественных новобразований, является в возрастной группе 40-54 года (29,4%) и 55-69 лет (23,4%) минимальной в 85 лет и старше (11,4%). Ежегодно в мире выявляется 1 250 000 случаев заболевания раком молочной железы [6]. Злокачественные новообразования молочной железы являются одной из актуальных медико-социальных проблем современной онкологии, поскольку поражают трудоспособное население и занимают одно из ведущих мест по утрате трудоспособности и причинам смерти от злокачественных новообразований у женщин [7].

В настоящее время, стандартными клинико-патологическими факторами, позволяющими контролировать течение РМЖ, остаются такие параметры как: размер опухоли, количество пораженных регионарных лимфатических узлов, гистологическая форма опухоли, степень ее злокачественности, наличие рецепторов эстрогена и прогестерона, экспрессия онкобелка Her2, индекса пролиферации Ki67, FISH реакции, мутации генов BRCAI, BRCAII, CHEK2, Tp53. Разработаны оптимальные и эффективные лечебные алгоритмы для каждой конкретной стадии заболевания с учетом ключевых морфологических, клинических и молекулярно-биологических факторов.

Вместе с тем, отдаленные результаты лечения РМЖ остаются мало удовлетворительными. В этой связи возрастает роль исследований, направленных на изучение различных механизмов развития этого заболевания. В настоящее время не вызывает сомнения утверждение, что иммунная система способна распознавать опухоль и генерировать как локальный, так и системный иммунный ответ, направленный на подавление опухолевого роста [83]. Кроме того,

существует понимание процессов, лежащих в основе взаимодействия клеток опухоли с иммунной системой, в частности известно, что продуктивный иммунный ответ и уничтожение клеток опухоли связаны с активацией цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+ или CTL), а их созревание и цитолитический потенциал находятся под контролем Th1 Т-хелперов (CD4+). Анергия CTL связана с привлечением в опухоль супрессорных популяций клеток, таких как регуляторные CD4 Т-клетки, синтезирующие белок Foxp3, миелоидные супрессорные клетки, а также с секрецией иммуносупрессорных молекул, ингибирующих иммунный ответ на опухоль. Вопрос о связи между количеством и иммуносупрессорной активностью регуляторных Т-клеток внутри опухоли, состоянием эффекторных и цитотоксических лимфоцитов, а также общим состоянием иммунной системы исследован недостаточно. Неуклонно растущий интерес к изучению процессов, происходящих в месте действия антиген-специфических Т-клеток, привел к накоплению массива данных, свидетельствующих о том, что в подавляющем большинстве случаев существует прямая связь между составом и количеством TIL определенных субпопуляций и эффективностью лечения опухолей с помощью традиционных и таргетных методов терапии. Кроме того, состав TIL и его изменения коррелируют с клиническим течением заболевания [107]. Этот факт позволяет рассматривать отдельные субпопуляции TIL как клинические маркеры. В частности, для значительного числа видов опухолей фактически доказана связь между клиническим прогнозом и соотношением между количеством CD8+ Т-клеток и регуляторных/супрессорных Т-клеток. Увеличение числа Трег является неблагоприятным фактором, и напротив, повышение пропорции CD8+ Т-клеток повышает вероятность благоприятного исхода. Установлено, что от уровня молекул, которые контролируют активацию эффекторных и цитотоксических Т-клеток, на поверхности TIL, нередко зависит способность иммунной системы успешно узнавать и уничтожать клетки опухоли (концепция иммунных контрольных точек или immune checkpoints). Полученная путем анализа TIL информация о дополнительных регуляторах противоопухолевого иммунитета

привела к разработке новых многообещающих таргетных препаратов, направленных на подавление или активацию отдельных иммунных контрольных точек (PD-1/PD-L1, CTLA4 и т.д.). В перспективе полученные в работе данные могут стать основой для разработки индивидуальных подходов к лечению больных раком молочной железы, что является актуальной, социально-значимой проблемой российского здравоохранения с учетом функционирования иммунокомпетентных клеток.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-иммунологическая характеристика циркулирующих и внутриопухолевых лимфоцитов больных первично-операбельным раком молочной железы»

Цель работы

Провести сравнительную клинико-иммунологическую характеристику циркулирующих лимфоцитов периферической крови и лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы.

Задачи исследования:

1. Изучить структуру линейных популяций CD45+ лимфоцитов (Т-клеток с фенотипом CD45+/CD3+/CD19-, В-клеток с фенотипом CD45+/CD3-/CD19+ и Ж-лимфоцитов с фенотипом CD45+/CD3-/CD16+56+) периферической крови и лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы.

2. Изучить субпопуляционную структуру Т-клеточного звена иммунитета (СD45+CD3+CD4+ Т-лимфоцитов, CD45+CD3+CD8+ Т-лимфоцитов, соотношение CD4/CD8) периферической крови и лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы.

3. Провести исследование функциональной активности Т-эффекторных лимфоцитов (CD45+CD8+Perform+) и ^Ж-эффекторных лимфоцитов (CD45+CD16+Perform+) периферической крови и лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы.

4. Оценить минорные субпопуляции супрессорных/ регуляторных Т-лимфоцитов с фенотипом CD45+CD8+CD28- и CD45+CD4+CD25hlghCD127low/neg, NKТ-лимфоцитов с фенотипом CD45+CD3+CD16+56+ периферической крови и

лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы.

5. Провести сравнительный анализ возможности детекции лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, с помощью иммунологического метода проточной цитометрии и цитоморфологического метода жидкостной технологии.

6. Сопоставить иммунологические показатели с клинико-морфологическими характеристиками больных первично-операбельным раком молочной железы в зависимости от степени инфильтрации опухоли клетками лимфоидной дифференцировки.

Научная новизна исследования

В настоящей работе впервые дано определение 3 основных уровней иммунологических нарушений структуры клеток лимфоидной дифференцировки у онкологических больных. При проведении сравнительного анализа впервые показано, что структура циркулирующих лимфоцитов периферической крови и лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы принципиально отличаются. Определены 4 основных варианта и частота нарушений соотношения CD4/CD8 в периферической крови пациентов с низким показателем. Показано, что в ткани опухоли популяция CD8 клеток более чем на 90% представлена специфическими цитотоксическими Т-лимфоцитами CD45+CD3+CD8+. Определена частота встречаемости субпопуляций супрессорных/регуляторных CD8 клеток (CD45+CD8+CD28-), NKT (CD45+CD3+CD16+CD56+) и CD4 лимфоцитов CD45+CD4+CD25hlghCD127low/neg у больных первично-операбельным раком молочной железы до начала лечения. Дана многопараметровая характеристика иммунофенотипа лимфоцитов в зависимости от степени инфильтрации опухоли.

Теоретическая и практическая значимость

Полученные знания о функционировании различных клеток лимфоидной дифференцировки в периферической крови и в опухолевой ткани позволят установить направление генерации иммунных реакций у больных первично-операбельным раком молочной железы на системном и тканевом уровне.

Выяснение баланса иммунокомпетентных клеток, контролирующих процессы активации и/или супрессии, в сочетании с клинико-патологическими данными послужит основой для определения прогностических факторов клинического течения заболевания и противоопухолевого контроля болезни.

Методология и методы исследования

Методологическую основу исследования составили труды российских ученых в области онкоиммунологии А.Ю. Барышникова и З.Г.Кадагидзе. В работе использован проспективный клинический материал хирургического отделения №5 (опухолей молочных желез) и лаборатории клинической иммунологии опухолей централизованного клинико-лабораторного отдела НИИ клинической онкологии ФГБУ "РОНЦ им. Н.Н.Блохина" Минздрава России.

В исследование включены пациенты с первично-операбельным раком молочной железы в трех клинических группах:

В первую группу вошли пациенты до 40 лет - 7 (10%) человек.

Во вторую группу - пациенты от 40 до 60 лет, что составило 38 (54%) человек. В третью группу - пациенты свыше 60 лет, что составило 25 (36%) человек, соответственно.

При проведении исследования использованы:

• многопараметровая (четырех-цветная) количественная проточная цитометрия для анализа субпопуляционной структуры циркулирующих лимфоцитов периферической крови и лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль больных первично-операбельным раком молочной железы

• цитоморфологическое исследование суспензии опухолевых клеток с помощью метода жидкостной цитологии

• математические методы анализа и обработки результатов, полученных в ходе проспективного исследования.

Степень достоверности результатов

При проведении проспективных исследований использовано сертифицированное современное оборудование, методами статистической

обработки установлена воспроизводимость и правильность результатов исследований, что позволяет считать их статистически значимыми.

Положения, выносимые на защиту

Структура линейных популяций СЭ45+ лимфоцитов (Т-клеток с фенотипом СВ45+/СВ3+/СБ19-, В-клеток с фенотипом СБ45+/СВ37СВ19+ и МК-лимфоцитов с фенотипом СВ45+/СВ37СБ16+56+) периферической крови и лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, больных первично-операбельным раком молочной железы принципиально отличается.

Субпопуляционная структура Т-клеток периферической крови и опухолевой ткани звена иммунитета больных первично-операбельным раком молочной железы различна. В периферической крови снижено количество СВ45+СВ3+СЭ4+ и СВ45+СВ3+СБ8+. Соотношение СВ4/СБ8 циркулирующих лимфоцитов достоверно снижено у 52,8% больных. Среди лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, популяция СБ8 клеток на 93,2% представлена СВ45+СВ3+СБ8+ специфическими цитотоксическими Т лимфоцитами. Соотношение СВ4/СЭ8 равно 1,1 (0,8-1,6). Функциональная активность циркулирующих клеток-эффекторов СЭ16 и СЭ8 больных первично-операбельным раком молочной железы достоверно превышала показатели доноров. В опухолевой ткани число МК эффекторных клеток ниже, чем уровень СЭ8, но цитотоксический потенциал выше, чем у СЭ8 клеток.

Преобладающей популяцией среди циркулирующих минорных супрессорных/регуляторных клеток у больных первично-операбельным раком молочной железы являются ККТ-клетки, чуть ниже оказались СЭ8 клетки, уровень СЭ4 регуляторных лимфоцитов в 3,8 и 3,4 раза определялся реже, чем соответствующие субпопуляции.

Иммунологический подход детекции лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, с помощью метода проточной цитометрии по связыванию с МКА анти -СЭ45 позволяет выявлять клетки лимфоидной дифференцировки в 100% случаев.

В зависимости от увеличения степени инфильтрации СЭ45+ лимфоцитами опухолевой ткани, количество зрелых CD3 Т-клеток снижается. Соотношение

CD4/CD8, отражающее структуру CD3 Т-клеток, напротив, возрастает от 0,7 до

1,3.

Публикации

По материалам диссертации опубликованы 4 научные работы, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ и 2 тезисов в рецензируемых журналах в базе РИНЦ.

Личный вклад автора

Автор принимала непосредственное участие в постановке целей и задач настоящего исследования. Автор участвовала в процессе проспективного исследования 70 больных первично-операбельным раком молочной железы, иммунологической оценке всех больных, включенных в исследуемую группу диссертационной работы. Автором лично проведен анализ научной литературы по теме диссертации, по количественной оценке, систематизации и статистической обработке материала. Проведенный автором статистический анализ полученных непосредственных результатов позволил сделать выводы о роли различных популяций и субпопуляций иммунокомпетентных клеток в генерации системного и местного иммунологического ответа у больных первично-операбельным раком молочной железы.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, общих выводов и списка литературы. Объем работы составляет 133 листа машинописного текста и содержит 29 рисунков, 7 таблиц. Список литературы состоит из 184 источников, в том числе 173 - на иностранном языке.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Рак молочной железы (РМЖ) является самой распространенной формой рака среди женщин во всем мире. В России РМЖ является ведущей онкологической патологией у женского населения, на его долю приходится 20,9% по данным за 2015 год. В структуре смертности женщин, так же наибольший удельный вес имеют злокачественные новообразования молочной железы 16,7% [6].

Особую актуальность эпидемиологической проблеме РМЖ в России придает то, что в структуре смертности от злокачественных новообразований в различных возрастно-популяционных группах лидируют опухоли молочной железы. Только в группе женщин 30-39 лет смертность от РМЖ занимает второе ранговое место (18,6%) после рака шейки матки, а в возрастных категориях 40-49 лет (23,1%), 50-59 лет (22,3%), 60-69 лет (18,2%), после 70 лет (13,2%) -устойчивое первое ранговое место.

В Западной Европе примерно 6,6% рака молочной железы диагностируется у женщин 40 лет и моложе, а в США в 2014 году было зарегистрировано более 40 тысяч новых смертей от РМЖ [38, 39].

Рак молочной железы широко варьирует между различными географическими районами и группами населения: различия между регионами с высоким риском (Европа, Северная Америка, Австралия) и низким (Латинская Америка, Азия, включая Японию, Африка) более чем 8-кратны [126]. Почти повсеместно констатируется более высокая заболеваемость женщин, проживающих в крупных городах, чем жительниц маленьких городков и сельских местностей. Кроме того, в индустриально развитых районах женщины заболевают чаще [39].

Рак молочной железы является одним из самых гетерогенных вариантов опухолей, характеризующийся неоднородностью прогноза и чувствительности к противоопухолевой терапии [53].

Современное развитие молекулярно-профилированных методов диагностики добавило прогностическую информацию к ранее известным

факторам - рецепторный репертуар эстрогенов и прогестеронов, Her2, Ki-67 в сочетании с клинико-патологическими данными о размере опухоли, степени злокачественности (G), вовлеченности лимфоузлов. Дальнейшее улучшение в понимании биологии рака молочной железы связано с изучением геномных аббераций, характеризующих наиболее распространенные молекулярные подтипы; метилирования ДНК, способных оказывать влияние на рецепторный статус опухоли; использованием NGS-секвенирования для анализа гетерогенности опухолевых клеток, включая стволовые опухолевые клетки (CSC) [168,43,148,172].

Особое место среди биологических характеристик опухолевых клеток в пределах организма является их способность к ускользанию от иммунологического надзора. Теория «иммуновыживаемости» первоначально была предложена более 50 лет назад, где авторы утверждают, что иммунная система все-таки распознает и уничтожает перманентно возникающие трансформированные клетки [36].

Несмотря на способность иммунной системы распознавать и разрушать опухолевые клетки, опухоль преодолевает защитные силы организма, растет и метастазирует. Это обусловлено существованием многочисленных негативных молекулярных и клеточных механизмов, которые препятствуют развитию эффективного противоопухолевого иммунного ответа и обеспечивают «ускользание» опухоли от иммунологического надзора. Teng и соавт. разделяют эти механизмы на три категории. (А) редукция иммунного распознавания и стимуляции иммунных клеток в результате снижения или потери экспрессии высоко иммуногенных антигенов, или нарушения механизмов презентации антигенов, или отсутствия костимулирующих молекул. (B) усиление активности механизмов резистентности к цитотоксическим эффекторам иммунитета (например, STAT3), или повышение экспрессии генов, ответственных за выживаемость клеток и генов факторов роста (например, Bcl-2, Her2/neu). (С) формирование иммуносупрессивного микроокружения опухоли в результате: (a) продукции цитокинов (например, VEGF, TGF-P) и метаболических факторов

(например, аденозин, PGE2), (b) индукции/привлечения клеток-супрессоров (например, регуляторных Т-клеток и миелоидных супрессорных клеток, М2Мф), или (с) индукции адаптивной иммунной резистентности, путем взаимодействия соответствующих лигандов с ингибиторными рецепторами (например, CTLA-4, PD-1, Tim-3) клеток-эффекторов противоопухолевого иммунитета [159]. В последние два десятилетия, эти механизмы были объектом интенсивных исследований, направленных на разработку способов их преодоления или блокады.

Взаимодействие иммунной системы со злокачественной опухолью представляет собой тонкий баланс между процессами иммунной активации и иммунной супрессии. Двойственный характер взаимодействия иммунной системы и опухоли в настоящее время рассматривается как динамический процесс иммуноредактирования, интерес мирового сообщества ученых к которой представлен в работе Deepak Mittal с соавторами [58]. Согласно теории «иммуноредактирования», иммунная система активно взаимодействует с опухолью посредством активации врожденных и адаптивных иммунных механизмов в три этапа. На первом этапе, ликвидации или элиминации, трансформированные клетки разрушаются компетентной иммунной системой, за счет активной функции клеток эффекторного звена - CD8+ Т-клеток, NK-клеток, дендритных клеток, CD4+ Т-клеток при участии системы перфоринов и Fas/FasL. Единичные опухолевые клетки, которые выживают, могут затем попасть во вторую фазу равновесия, где происходит редактирование. Данный этап может протекать годами, даже десятилетиями при отсутствии каких-либо клинических проявлений. Фаза эвакуации или ускользания представляет собой третий и заключительный этап процесса, где опухоли начинают постепенно расти, становятся клинически очевидными с проявлениями иммуносупрессивного влияния на организм [140,68].

В основе иммуноредактирования лежит опосредованная Т-клеточная иммуноселекция, ведущая к разрастанию опухолевых клеток с низкой и слабой

иммуногенностью, а интенсивность процесса зависит от степени иммунокомпетентности организма.

Исследования молекулярных механизмов реализации иммунологической толлерантности проводятся уже не одно десятилетие, а определение «контрольных точек иммунитета» или «immune checkpoint» (молекул CTLA-4 и PD1) предопределило активное внедрение в клиническую практику лечения онкологических больных таргетных препаратов иммунологической направленности.

РМЖ не считался иммуногенным, так как не имел высокую частоту встречаемости у иммуносупрессированных популяций, которые подвергались иммуносупрессивной терапии [128]. Тем не менее, кажется, что, несмотря на слабое влияние на рост первичной опухоли, иммунная система эффективна в предотвращении метастазов РМЖ [86,60,30]. Гетерогенная экспрессия антигенов опухоли в пределах первичной опухоли или ее метастазов, модификация антигенного профиля во время прогрессирования опухоли, и низкие уровни антигена, белки главного комплекса гистосовместимости и другие костимуляторные белки, необходимые для генерирования сильного иммунного ответа могут объяснить данную низкую иммуногенность. Кроме того, микроокружение опухоли выделяет иммунно-подавляющие факторы, что затрудняет презентацию антигена и имеет негативное влияние на иммунный ответ [112]. Более того, блокируя эндогенные иммунные контрольно-пропускные пункты, которые, как правило, прекращают иммунный ответ после активации антигена, дают возможность уклониться от иммунного разрушения.

Понятие иммуногенности опухоли обычно ассоциировано с почечной карциномой или меланомой, однако есть несколько веских причин, считать иммуногенным рак молочной железы. Во-первых, при раке молочной железы было показано наличие опухоль-ассоциированных антигенов, таких как HER-2 и MUC-1, которые за последние десять лет были успешным направлением развития вакцины с хорошим клиническим ответом. Во-вторых, пассивное использование HER-2 антител в терапии (трастузумаб и пертузумаб), способствовали

выживанию при раке молочной железы. И наконец, использование новых иммуно-терапевтических стратегий, таких как блокада «контрольных точек иммунитета» или «immune checkpoint» (молекул CTLA-4 и PD1), поддерживающих взаимодействие между клетками солидных опухолей и иммунной системы, блокирующие эффективный противоопухолевый иммунный ответ путем «ускользания» опухоли от иммунологического надзора демонстрируют потенциал в лечении рака молочной железы [124].

Стандартные методы лечения, используемые сегодня в лечении больных РМЖ значительно увеличили продолжительность и качество жизни женщин с раком молочной железы. Тем не менее, тот факт, что у 40% больных, по-прежнему, идет прогрессирование болезни подчеркивает необходимость в поиске новых терапевтических подходов лечения и выявлении новых терапевтических мишеней [22].

Лейкоциты и развитие рака

Лейкоциты представляют широкий спектр иммунных клеток миелоидной (врожденный иммунитет) и лимфоидной (адаптивный иммунитет) дифференцировки. Врожденные иммунные клетки, включая макрофаги, гранулоциты, тучные клетки, дендритные клетки (ДК), и натуральные киллеры (NK) клетки, представляют собой первую линию защиты от патогенных микроорганизмов, чужеродных агентов, трансформированных клеток. При нарушении гомеостаза ткани макрофаги и тучные клетки локально секретируют растворимые факторы, такие как цитокины, хемокины, биоактивные медиаторы, которые привлекают дополнительные лейкоциты из кровотока в поврежденную ткань, то есть идет реакция острого воспаления [57]. Иммунные клетки врожденного иммунитета способны непосредственно устранять патогенные агенты in situ. В то же время, дендритные клетки сорбируют чужеродные антигены, в том числе опухолевые антигены и мигрируют в лимфоидные органы, где они представляют свои антигены к иммунным клеткам адаптивного иммунитета. После признания чужеродного антигена, предоставленного ДК или другими антиген-презентирующими клетками, адаптивные иммунные клетки,

такие как Т-лимфоциты или В-лимфоциты, подвергаются клональной экспансии для формирования таргетного «адаптивного» ответа. Острая активация врожденного иммунитета, соответственно создает основу для активации более сложных, антиген-специфичных или адаптивных иммунных реакций с последующим восстановлением тканевого гомеостаза [123,79].

Воспалительные реакции, необходимые для активирования иммунной реакции могут также создать основу для опухолевого заболевания. Уже в 1863 году, Р.Вирхов первым постулировал, что рак возникает на участках хронического воспаления, которое также усиливает пролиферацию клеток [56]. Поврежденные клетки элиминируют по механизму апоптоза, в то время как пролиферация клеток необходима для регенерации тканей. В противоположность этому, при незавершенности гомеостаза в тканях, устойчивые циклы пролиферации, наличие воспалительных клеток и их биоактивных компонентов, могут стимулировать опухолевый рост [50]. Спорадические или унаследованные мутации в генах, регулирующих клеточный цикл, апоптоз, дифферецировку и адгезию могут способствовать онкогенезу, а наличие хронического воспаления -малигнизации.

Исторически сложилось, что лейкоциты в развивающейся опухоли представляют собой попытку организма элиминировать трансформированные опухолевые клетки. Клетки врожденного (МК-клетки) и адаптивного иммунитета (ЦТЛ), играют важнейшую функцию в сдерживании опухолевого развития [68]. Значительное число клинических исследований продемонстрировало достоверную зависимость между количеством определенных популяций иммунокомпетентных клеток в опухолевом микроокружении и периферической крови (ПК) и общей продолжительностью жизни и продолжительностью безрецидивного периода у пациентов со злокачественными новообразованиями [143].

Важную роль в противоопухолевом иммунном ответе играют различные популяции иммунных клеток врожденного и адаптивного иммунитета: ЫК-, Т-, МО-клетки, дендритные клетки (ДК) и макрофаги (Мф). Все эти популяции

являются гетерогенными и содержат в своем составе, как клетки с противоопухолевой активностью, так и регуляторные клетки.

Для развития эффективного противоопухолевого иммунного ответа необходимо в первую очередь распознавание опухоли иммунной системой. Для этого требуется привлечение антигенпрезентирующих (АПК) клеток в опухолевое микроокружение, распознавание ими опухолевых антигенов и миграция в дренирующие лимфоузлы, и активация антиген-специфических Т-клеток. Активированные Т-клетки должны затем мигрировать в опухолевый узел под действием соответствующих хемокинов. В настоящее время накапливаются данные, которые показывают, что локальная функция Т-клеток регулируется различными миелоидными субпопуляциями, среди которых различают четыре основных типа клеток: опухолеассоциированные макрофаги (ОАМ) 1 типа (М1Мф), ОАМ 2 типа (М2Мф), дендритные клетки (ДК) 1 типа (ДК1) и CD103+ ДК 2 типа (ДК2). По данным различных авторов решающую роль в развитии эффективного противоопухолевого иммунного ответа играют CD8a+CD103+ ДК2 [35].

Врожденный иммунитет и развитие рака молочной железы

Главными эффекторными лимфоцитами врожденного иммунитета являются МК-клетки. Они обеспечивают защиту от вирусных инфекций и некоторых других патогенов на ранних стадиях иммунного ответа и участвуют в контроле опухолевого роста и метастазирования. Инфильтрация опухоли этими лимфоцитами во многих случаях коррелирует с благоприятным прогнозом заболевания. Предполагается также, что МК-клетки способны распознавать и уничтожать стволовые опухолевые клетки. Эффекторная функция МК-клеток связана, главным образом, с их цитолитической активностью, однако, благодаря секретируемым ими цитокинам и хемокинам, они могут также усиливать воспалительный процесс и регулировать последующий Т-клеточный ответ, влияя не только на его силу, но и на качество [113]. В исследованиях Кадагидзе З.Г. с соавт., было продемонстрировано, что у пациенток с местно-распространенным раком молочной железы процент CD3-D16+CD56+ МК-клеток в периферической

крови до лечения коррелировал с распространенностью процесса. Только у больных с I стадией он статистически значимо превышал контрольные значения (22,7±1,9 и 16,7±1,3, соответственно Р=0,025), а при II и III стадиях не отличался от нормы [5].

Эпидемиологические данные поддерживают утверждение о том, что цитотоксические Т-лимфоциты (СТЬ) и МК-клетки, несомненно, играют жизненно важную функцию в сдерживании опухолевого развития [68], о чем свидетельствует увеличение заболеваемости вирусно-ассоциированными раковыми заболеваниями, включающие вирус папилломы человека, связанный с шейным и сквамозным раком, герпесвирусом-8-ассоциированной саркомой Капоши и вирусом Эпштейна-Барр, связанным с неходжкинской лимфомой у иммунодефицитных лиц [34, 127, 69, 31, 75]. По аналогии как с вирусно-ассоциированным раком, есть данные, раскрывающие рост заболеваемости канцерогенно-ассоциированных раковых образований у иммунодефицитного населения, в том числе меланомы и аденокарциномы легких [69, 129]

Там, где воздействие канцерогеном и патогенное воздействие не считаются этиологическими факторами, однако, иммунодефицитные женщины демонстрируют пониженный относительный риск для общего эпителиального рака, включая аденокарциномы молочной железы [69, 129,151,76,122].

Изучение функциональной цитотоксической активности МК-клеток опередило период количественного определения данной популяции с помощью моноклональных антител, которые были разработаны спустя 10 лет после идентификации этой клеточной популяции. Ранее полученные данные о функционировании МК-клеток свидетельствуют о том, что МК -клетки играют важную роль при раннем и метастатическом раке молочной железы [110]. У некоторых больных раком молочной железы показана недостаточная функциональная активность МК клеток против клеток-мишеней миелоидной линии К562. Уровни МК активности клеток ниже у женщин при наличии пораженных лимфатических узлов по сравнению с пациентками без пораженных л/узлов, 18% против 31% литической активности, соотв. Цитотоксическая

активность NK клеток была значительно ниже (р<0.005) у лиц с высокой семейной заболеваемостью раком по сравнению с людьми с низким уровнем заболеваемости. Так же было замечено, что пациенты с раком головы и шеи с NK активностью клеток менее чем 60 литических единиц (LU) были более склонны к развитию отдаленного метастатического заболевания, чем аналогичные больные с LU>60(5) [110,51,97,152,139].

Уровни NK-клеточной активности являются более низкими у женщин с наличием метастазов в регионарные лимфатические узлы (N+) по сравнению с больными без метастазов (N0). NK-клеточная цитотоксичность была значительно более низкой у больных с высокой частотой семейного рака в сравнении с пациентами, у которых рак в семье встречался редко. У женщин с поздними стадиями РМЖ отмечено подавление NK-клеточной цитотоксичности в сравнении со здоровыми женщинами. Подавление NK-клеточной активности может быть важным медиатором ускорения опухолевого роста при стрессе [27]. Существуют данные, что NK-клеточный дефицит усугубляется по мере опухолевой прогрессии и зависит от клинической стадии заболевания. Тем не менее, роль NK-клеточной активности в контроле РМЖ остается не до конца понятной. По данным 4 методов изучения NK-клеток, их активность у больных РМЖ и у женщин с доброкачественными процессами в молочной железе не различалась. По данным G. Sachs и соавт. (1995), активность LAK-клеток, а не NK-клеток взаимосвязана с количеством регионарных аксиллярных лимфатических узлов, пораженных метастазами у больных РМЖ. Активность NK-клеток (по лизису клеток-мишеней К-562 и MCF-7) не различалась у больных РМЖ и у пациенток с доброкачественными процессами. Однако большее отношение к прогнозу имела активность в отношении клеток MCF-7. В пуле туморинфильтрирующих лимфоцитов РМЖ NK-клетки составляют небольшую пропорцию. Их функциональная роль не совсем ясна. В целом следует отметить, что в настоящее время отношение к роли NK-клеток не столь однозначное. Помимо позитивной роли в противовирусной и противораковой защите эти клетки могут также угнетать CD8+ Т-цитотоксический иммунный ответ. Кроме

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Хакимова, Шахноз Голибовна, 2016 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Артамонова, Е.В. TILs (инфильтрирующие опухоль лимфоциты) при раке молочной железы: биологическая роль и клиническое значение / Е.В. Артамонова // Сборник материалов большой конференции RUSSCO «Рак молочной железы». -2015. - С.64-71.

2. Борунова, А.А. Перфорин-опосредованная цитотоксичность CD16+-лимфоцитов / А.А. Борунова, Г.З. Чкадуа, Т.Н. Заботина // Иммунология. - 2006.Т. 27.- №1. - С.4-6.

3. Давыдов, М.И. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2012г / М.И. Давыдов, Е.М. Аксель // Издательская группа РОНЦ. - 2014.

4. Заботина, Т.Н. Субпопуляционная структура лимфоцитов у больных раком яичников // Т.Н. Заботина, О.В. Короткова, А.А. Борунова, Н.Ю. Очеева, И.И. Бокин, К.И. Жорданиа, И.В. Паниченко, В.Ю. Сельчук, В.В. Кузнецов, З.Г. Кадагидзе // Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. - 2010. - Т.21.- №1. - С. 4652.

5. Кадагидзе, З.Г. Основные субпопуляции регуляторных лимфоцитов у больн ых злокачественной меланомой и раком молочной железы / З.Г. Кадагидзе, А.И. Черткова,Т.Н. Заботина,О.В. Короткова, А.А. Борунова, Е.Г. Славина // Иммунология. - 2014. - Т.35 - №2 - С.64-67.

6. Каприн, А.Д. Злокачественные новообразования в России в 2015 году (заболеваемость и смертность) / А.Д. Каприн, В.В. Старинский, Г.В. Петров. - М. // МНИОИ им. П.А. Герцена филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России. - 2016. илл. 250 с. ISBN 978-5-85502-227-8.

7. Кваша, Е.А. Вопросы статистики / Е.А. Кваша, Т.Л. Харькова. - 2006. - №8 -С.25-33.

8. Короткова, О.В. Субпопуляции лимфоцитов периферической крови больных РМЖ / О.В. Короткова, Т.Н. Заботина, Л.В. Скотаренко, А.А.Борунова,Н.Ю. Очеева, И.К. Воротников, З.Г.Кадагидзе// Российский биотерапевтический журнал. - 2011г. - Т.10. - №3. - С. 95-98.

9. Савченко, А.А. Роль Т- и в-клеточного иммунитета в патогенезе онкологических заболеваний / А.А. Савченко, А.Г. Борисов, И.В. Кудрявцев, А.В. Мошев // Вопросы онкологии. - 2015. - Том 61, № 6. - Стр. 867-875

10. Черткова, А.И. Эффекторные и регуляторные Т-лимфоциты периферической крови больных раком молочной железы с тройным негативным фенотипом: связь с клиническим эффектом химиотерапии / А.И. Черткова, Е.Г. Славина, М.А. Окружнова, Л.Г. Жукова, Э.К. Шоуа, А.А. Борунова, З.Г. Кадагидзе // Российский биотерапевтический журнал. - 2016. - Т.12 - № 2. - С.43-47.

11. Чобанян, Н.С. Рак молочной железы у женщин молодого возраста / Н.С. Чобанян // автореф. дис. ... д-ра мед наук - М.,1992. - С.41.

12. Aaltomaa, S. Lymphocyte infiltrates as a prognostic variable in female breast cancer / S. Aaltomaa, P. Lipponen, M. Eskelinen, V.M. Kosma, S. Marin, E. Alhava, K. Syrjanen // Eur J Cancer. - 1992. - Vol.28A. - P.859-864.

13. Adams, S. Prognostic value of tumor-infiltrating lymphocytes in triple-negative breast cancers from two phase III randomized adjuvant breast cancer trials: ECOG 2197 and ECOG 1199 / S. Adams, R.J. Gray, S. Demaria еt al. // J Clin Oncol. - 2014. -Vol.32, N27. - P.2959-2966.

14. Ali, H.R. Association between CD8+ T-cell infiltration and breast cancer survival in 12,439 patients / H.R. Ali, E. Provenzano, S.J. Dawson // Ann. Oncol. - 2014. -Vol.25, N8. - P.1536-1543.

15. Altman, J.B. Antitumor responses of invariant natural killer T cells / J.B. Altman, A.D. Benavides, R. Das, H. Bassiri // J Immunol Res. - 2015. - Vol. 652875.

16. Angell, H. From the immune contexture to the Immunoscore: the role of prognostic and predictive immune markers in cancer / H. Angell, J. Galon. // Current Opinion in Immunology. - 2013. - Vol.25, N2. - P. 261-267.

17. Ankita, S.R. Is the Tumor Infiltrating Natural Killer Cell (NK-TILs) Count in Infiltrating Ductal Carcinoma of Breast Prognostically Significant? / S.R. Ankita, M.G. Madhu, M. Annu, K. Sandeep, N.S. Anand // Asian Pac J Cancer Prev. - 2014. -Vol.15, N8. - P.3757-3761.

18. Apetoh, L. Consensus nomenclature for CD8+ T cell phenotypes in cancer / L. Apetoh, M.J. Smyth, C.G. Drake, J.P. Abastado, R.N. Apte, M. Ayyoub, J.Y. Blay, M. Bonneville, L.H. Butterfield, A. Caignard, C. Castelli, F. Cavallo, E. Celis, L. Chen, M.P. Colombo, B. Comin-Anduix, G. Coukos, M.V. Dhodapkar, G. Dranoff, I.H. Frazer, W.H. Fridman, D.I. Gabrilovich, E. Gilboa, S. Gnjatic, D. Jäger, P. Kalinski, H.L. Kaufman, R. Kiessling, J. Kirkwood, A. Knuth, R. Liblau, M. Lotze, E. Lugli, F. Marincola, I. Melero, C.J. Melief, T.R. Mempel, E.A. Mittendorf, K. Odun, W.W. Overwijk, A.K. Palucka, G. Parmiani, A. Ribas, P. Romero, R.D. Schreiber, G. Schuler, P.K. Srivastava, E. Tartour, D. Valmori, S.H. van der Burg, P. van der Bruggen, B.J. van den Eynde, E. Wang, W. Zou, T.L. Whiteside, D.E. Speiser, D.M. Pardoll, N.P. Restifo, A.C. Anderson // Oncoimmunology. - 2015. - Vol. 25, N4(4): e998538.

19. Attallah, A.M. Flow cytometric analysis of peripheral blood T-lymphocyte subsets in colon cancer / A.M. Attallah, A.A. Tabll, M.F. Ismail, A.S. Ibrahim, I. El-Dosoky // Int. J. Cancer Res.- 2006. - Vol.2, N.4. - 409-414.

20. Badoual, C. Prognostic value of tumorinfiltrating CD4(+) T-cell subpopulations in head and neck cancers / C. Badoual, S. Hans, J. Rodriguez et al. // Clin. Cancer Res. -2006. - Vol.12, N2. - P.465-472.

21. Badwe, R.A. Sentinel-node biopsy in breast cancer / R.A. Badwe, M.A. Thorat, V.V. Parmar // N Engl J Med. - 2003. - Vol.349. - P.1968-1971.

22. Balkwill, F. Inflammation and cancer: back to Virchow? / F. Balkwill, A. Mantovani // Lancet. - 2001. - Vol.357. - P.539-545. Meylan, E. Intracellular pattern recognition receptors in the host response / E. Meylan, J. Tschopp, M. Karin // Nature. -2006. - Vol.442. - P.39-44.

23. Balsari, A. FOXP3 expression and overall survival in breast cancer / A. Balsari, A. Merlo, P. Casalini et al. // Journal of Clinical Oncology. - 2009. - Vol.27, N.11. -P.1746-1752.

24. Barry, M. Cytotoxic T lymphocytes: all roads lead to death / M. Barry, R.C. Bleackley // Nat. Rev. Immunol. - 2002. - Vol.2, N.6. - P.401-409.

25. Bates, G.J. Quantification of regulatory T cells enables the identification of high-risk breast cancer patients and those at risk of late relapse / G. J. Bates, S. B. Fox, C. Han et al. // Journal of Clinical Oncology. - 2006. - Vol.24, N34.- P. 5373-5380.

26. Bendelac, A. The biology of NKT cells / A. Bendelac, P.B. Savage, L.Teyton // Annu. Rev. Immunol. - 2007. - Vol.25. - P.297-336.

27. Ben-Eliyahu, S. Evidence that stress and surgical interventions promote tumor development by suppressing natural killer cell activity / S. Ben-Eliyahu, G.G. Page, R. Yirmiya, G. Shakhar // Int J Cancer. - 1999. -Vol.80. - P.880-888.

28. Berzofsky, J. A. NKT cells in tumor immunity: opposing subsets define a new immunoregulatory axis. / J.A. Berzofsky, M.J. Terabe // Immunol. - 2008. - Vol.180. -P.3627-3635.

29. Berzofsky, J.A. The contrasting roles of NKT cells in tumor immunity / J.A. Berzofsky, M. Terabe // Curr. Mol. Med. - 2009. - Vol. 9. - P.667-672.

30. Bidwell, B.N. Silencing of Irf7 pathways in breast cancer cells promotes bone metastasis through immune escape / B.N. Bidwell, C.Y. Slaney, N.P.Withana, S. Forster, Y. Cao, S. Loi, D. Andrews, T. Mikeska, N.E. Mangan, S.A. Samarajiwa, N.A. de Weerd, J. Gould, P. Argani, A. Möller, M.J. Smyth, R.L. Anderson, P.J. Hertzog, B.S. Parker // Nat Med. - 2012. - Vol.18. - P.1224-1231.

31. Birkeland, S.A. Cancer risk after renal transplantation in the Nordic countries / S.A. Birkeland, H.H. Storm, L.U. Lamm, L. Barlow, I. Blohme, B. Forsberg, B. Eklund, O. Fjeldborg, M. Friedberg, L. Frodin et al. // Int J Cancer. - 1995. -Vol.60. - P.183-189.

32. Birkholz, A.M. Antigen specificity of invariant natural killer T-cells / A.M. Birkholz, M. Kronenberg // Biomed J. - 2015. - Vol.38, N6. - P.470-483.

33. Blake-Mortimer, J.S. Cytotoxic T lymphocyte count and survival time in women with metastatic breast cancer / J.S. Blake-Mortimer, S.E. Sephton, R.W. Carlson, D. Stites, D. Spiegel // Breast J. - 2004. - Vol.10, N3. - P.195-199.

34. Boshoff, C. AIDS-related malignancies / C. Boshoff, R. Weiss // Nat Rev Cancer. - 2002. - Vol.2. - P.373-382.

35. Broz, M.L. Dissecting the tumor myeloid compartment reveals rare activating antigen-presenting cells critical for T cell immunity / M.L. Broz, M. Binnewies, B. Boldajipour, A.E. Nelson, J.L. Pollack, D.J. Erle, A. Barczak, M.D. Rosenblum, A. Daud, D.L. Barber, S. Amigorena, L.J. Van't Veer, A.I. Sperling, D.M. Wolf, M.F. Krummel // Cancer Cell. - 2014. - Vol.26, N5. - P. 638-652.

36. Burnet, M. Cancer; a biological approach. I. The processes of control / M. Burnet// Br Med J. - 1957. - Vol.1, N5022. - P.779-786.

37. C.A. Priorities for the primary prevention of breast cancer / Cancer J Clin. - 2014. - Vol.64, N3. - P.186-194.

38. Canadian Cancer Society/National Cancer Institute of Canada (2015) Canadian Cancer Statistics 2015. Toronto, Canada.

39. Cann, S. A. Hypothesis: Iodini, selenum and the development of breast cancer / S. A. Cann, J. P. Netten, C. Netten // Cancer Causes and Contr. - 2000. -Vol.11, N2. -P.121-127.

40. Casado, J.G. CD8 T cells expressing NK associated receptors are increased in melanoma patients and display an effector phenotype / J.G. Casado, R. Soto, O. DelaRosa, E. Peralbo, M. del Carmen Muñoz-Villanueva, L. Rioj a, J. Peña, R. Solana, R. Tarazona. // Cancer Immunol. Immunother. - 2005. - Vol.54, N12. - P.1162-1171.

41. Chandan, V. Abnormal T regulatory cells (Tregs: FOXP3+, CTLA-4+), myeloid-derived suppressor cells (MDSCs: monocytic, granulocytic) and polarised T helper cell profiles (Th1, Th2, Th17) in women with large and locally advanced breast cancers undergoing neoadjuvant chemotherapy (NAC) and surgery: failure of abolition of abnormal treg profile with treatment and correlation of treg levels with pathological response to NAC / V. Chandan, M.E. Jennifer, R. Adrian et.al. // Journal of Translational Medicine. - 2013. - Vol. 11. - P.1-16.

42. Chanmee, T. Tumor-associated macrophages as major players in the tumor microenvironment / T. Chanmee, P. Ontong, K. Konno, N. Itano // Cancers (Basel). -2014. - Vol. 6, N3. - P.1670-1690.

43. Cheang, M.C. Ki67 index, HER2 status, and prognosis of patients with luminal B breast cancer / M.C. Cheang, S.K. Chia, D. Voduc, D. Gao, S. Leung, J. Snider, M.

Watson, S. Davies, P.S. Bernard, J.S. Parker, C.M. Perou, M.J. Ellis, T.O. Nielsen // J Natl Cancer Inst. - 2009. - Vol.101, N10. - P.736-750.

44. Chen, Q. Macrophage binding to receptor VCAM-1 transmits survival signals in breast cancer cells that invade the lungs / Q. Chen, X.H. Zhang, J. Massague // Cancer Cell. - 2011. - Vol.20. - P.538-549.

45. Cimino-Mathews, A. Metastatic triple-negative breast cancers at first relapse have fewer tumor-infiltrating lymphocytes than their matched primary breast tumors: a pilot study / A. Cimino-Mathews, X. Ye, A. Meeker, P. Argani, L.A. Emens // Hum. Pathol. - 2013. - Vol.44. - P.2055-2063.

46. Clarke, S.L. CD4+CD25+FOXP3+ regulatory T cells suppress anti-tumor immune responses in patients with colorectal cancer / S.L. Clarke, G.J. Betts, A. Plant, K.L. Wright, T.M. El-Shanawany, R. Harrop, J. Torkington, B.I. Rees, G.T. Williams, A.M. Gallimore, et al.// PLoS One - 2006. - Vol.1.- P.129.

47. Columba-Cabezas, S. Induction of macrophage-derived chemokine/CCL22 expression in experimental autoimmune encephalomyelitis and cultured microglia: implications for disease regulation / S. Columba-Cabezas, B. Serafini, E. Ambrosini et al. // J. Neuroimmunol. - 2002. - Vol.30. - P.10-21.

48. Coronella-Wood, J.A. Naturally occurring B-cell responses to breast cancer / J.A. Coronella-Wood, E.M. Hersh // Cancer Immunol Immunother. - 2003. - Vol.52. -P.715-738.

49. Cortazar, P. Pathological complete response and long-term clinical benefit in breast cancer: the CTNeoBC pooled analysis / P. Cortazar, L. Zhang, M. Untch, K. Mehta, J.P. Costantino, N. Wolmark et al. // Lancet. - 2014. -Vol.384. - P.164-172.

50. Coussens, L.M. Inflammation and cancer / L.M. Coussens, Z. Werb // Nature. -2002. - Vol.420. - P.860-867.

51. Cunningham-Rundles, S. Natural cytotoxicity of peripheral blood lymphocytes and regional lymph node cells in breast cancer in women / S. Cunningham-Rundles, D.A. Filippa, D.W. Braun et al. // J Natl Cancer Inst. - 1981. - Vol.67. - P.585-590.

52. Curiel, T.J. Specific recruitment of regulatory T cells in ovarian carcinoma fosters immune privilege and predicts reduced survival / T.J. Curiel, G. Coukos, L. Zou et al. // Nat. Med. - 2004. - Vol. 10. - P.942-949.

53. Dai, X. Breast cancer intrinsic subtype classification, clinical use and future trends / X. Dai, T. Li, Z. Bai, Y. Yang, X. Liu, J. Zhan, B. Shi // Am. J. Cancer Res. - 2015. -Vol.5, N10. - P.2929-2943.

54. Daniel, L. Neural cell adhesion molecule expression in renal cell carcinomas relation to metastatic behavior / L. Daniel, C. Bouvier, B. Chetaille et al. // Hum. Pathol. - 2003. - Vol.34. - P.528-532.

55. Darren, R. B. Breast cancer survival among young women: a review of the role of modifiable lifestyle factors / R.B. Darren, N.T. Brockton, J. Kotsopoulos et.al. // Cancer Causes Control. -2016. - Vol.27. - P.459-472.

56. David, H. Rudolf Virchow and modern aspects of tumor pathology / H. David // Pathol Res Pract. - 1988. - Vol.183. - P.356-364.

57. de Visser, K.E. The inflammatory tumor microenvironment and its impact on cancer development / K.E. de Visser, L.M. Coussens // Contrib Microbiol. - 2006. -Vol.13. - P. 118-137.

58. Deepak, M. New insights into cancer immunoediting and its three component phases — elimination, equilibrium and escape / M. Deepak, M.G. Matthew, D.R. Schreiber, M.J. Smyth // Curr Opin Immunol. - 2014. - Vol.27. - P.16-25.

59. deLeeuw, R.J. The prognostic value of FoxP3+ tumor-infiltrating lymphocytes in cancer: a critical review of the literature / R.J. deLeeuw, S.E. Kost, J.A. Kakal, B.H. Nelson // Clin Cancer Res. - 2012. - Vol.18, N11. - P. 3022-3029.

60. DeNardo, D.G. CD4(+) T cells regulate pulmonary metastasis of mammary carcinomas by enhancing protumor properties of macrophages / D.G. DeNardo, J.B. Barreto, P. Andreu, L. Vasquez, D. Tawfik, N. Kolhatkar, L.M. Coussens // Cancer Cell. - 2009. - Vol.16, N91. - P102.

61. DeNardo, D.G. Inflammation and breast cancer. Balancing immune response: crosstalk between adaptive and innate immune cells during breast cancer progression / D.G. DeNardo, L.M. Coussens // Breast Cancer Res. - 2007. - Vol.9. - P.212.

62. DeNardo, D.G. Leucocyte complexity in breast cancer predicts overall survival and functionally regulates response to chemotherapy / D.G. DeNardo // Cancer Discovery. -2011. - Vol.1, N1. - P.54-67.

63. Denkert, C. Tumor-associated lymphocytes as an independent predictor of response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer / C. Denkert, S. Loibl, A. Noske, M. Roller, B.M. Müller, M. Komor, J. Budczies, S. Darb-Esfahani, R. Kronenwett, C. Hanusch, C. von Törne, W. Weichert, K. Engels, C. Solbach, I. Schrader, M. Dietel, G. von Minckwitz // J Clin Oncol. - 2010. -Vol.28. - P.105-113.

64. Denkert, C. Tumor-infiltrating lymphocytes and response to neoadjuvant chemotherapy with or without Carboplatin in human epidermal growth factor receptor 2-positive and triple-negative primary breast cancers / C. Denkert, G. von Minckwitz, J.C. Brase et al. // J Clin Oncol. - 2015. - Vol.33, N9. - P.983-991.

65. Deschoolmeester, V. Tumor infiltrating lymphocytes: an intriguing player in the survival of colorectal cancer patients / V. Deschoolmeester, M. Baay, M.E. Van et al. // BMC Immunol. - 2010. - Vol.11. - P.1-12.

66. Dieci, M.V. Prognostic value of tumor-infiltrating lymphocytes on residual disease after primary chemotherapy for triple-negative breast cancer: a retrospective multicenter study / M.V. Dieci, C. Criscitiello, A. Goubar, G. Viale, P. Conte, V. Guarneri et al. // Ann Oncol. - 2014. - Vol.25. - P.611-618.

67. Duhen, T. Functionally distinct subsets of human FOXP3+ Treg cells that phenotypically mirror effector Th cells / T. Duhen, R. Duhen, A. Lanzavecchia, F. Sallusto, D.J. Campbell // Blood. - 2012. - Vol.119, N19. - P.4430-4440.

68. Dunn, G.P. The immunobiology of cancer immunosurveillance and immunoediting / G.P. Dunn, L.J. Old, R.D. Schreiber // Immunity. - 2004. -Vol.21, N2. - P.137-148.

69. Euvrard, S. Skin cancers after organ transplantation / S. Euvrard, J. Kanitakis, A. Claudy // N Engl J Med. - 2003. - Vol.348. - P. 1681-1691.

70. Facciabene, A. T-regulatory cells: key players in tumor immune escape and angiogenesis / A. Facciabene, G.T. Motz, G. Coukos // Cancer Res. - 2012. - Vol.72. -P.2162-2171.

71. Filaci, G . CD8+ CD28- T regulatory lymphocytes inhibiting T cell proliferative and cytotoxic functions infiltrate human cancers / G. Filaci, D. Fenoglio, M. Fravega, G. Ansaldo et. al. // J. Immunol. - 2007. - Vol.179, N7. - P.4323-4334.

72. Fontenot, J.D. A well adapted regulatory contrivance: regulatory T cell development and the forkhead family transcription factor Foxp3 / J.D. Fontenot, A.Y. Rudensky // Nat Immunol. - 2005. - Vol.6. - P.331-337.

73. Fontenot, J.D. A well adapted regulatory contrivance: regulatory T cell development and the forkhead family transcription factor Foxp3 / J.D. Fontenot, A.Y. Rudensky // Nat Immunol. - 2005. - Vol.6, N4. - P.331-337.

74. Fridman, W.H. The immune contexture in human tumours: impact on clinical outcome / W.H. Fridman, F. Pages, C. Sautes-Fridman, J. Galon // Nature Reviews Cancer. - 2012.- Vol.12, N4. - P. 298-306.

75. Fung, J.J. De novo malignancies after liver transplantation: a major cause of late death / J.J. Fung, A. Jain, E.J. Kwak, S. Kusne, I. Dvorchik, B. Eghtesad // Liver Transpl. - 2001. - Vol.7. -P.109-118.

76. Gallagher, B. Cancer incidence in New York State acquired immunodeficiency syndrome patients / B. Gallagher, Z. Wang, M.J. Schymura, A. Kahn, E.J. Fordyce // Am J Epidemiol. - 2001. - Vol.154. - P.544-556.

77. Gannon, P.O. Characterization of the intra-prostatic immune cell infiltration in androgen-deprived prostate cancer patients / P.O. Gannon, A.O. Poisson, N. Delvoye et al.// J. Immunol. Methods. - 2009. - Vol.348. - P.9-17.

78. Gershon, R.K. Cell interactions in the induction of tolerance: the role of thymic lymphocytes / R.K. Gershon, K. Kondo // Immunology. - 1970. -Vol.18, N5. - P.723-737.

79. Ghiringhelli, F. Links between innate and cognate tumor immunity / F. Ghiringhelli, L. Apetoh, F. Housseau, G. Kroemer, L. Zitvogel // Curr Opin Immunol. -2007. - Vol.19. - P.224-231.

80. Gianni, L. Adaptive immune system and immune checkpoints are associated with response to pertuzumab (P) and trastuzumab (H) in the NeoSphere study / L. Gianni, G. Bianchini, P. Valagussa et al. // Cancer Res. - 2012. - P.6-7.

81. Glinska, H. 5-lethnie pezycia chorych na raka a ogolna liczba lumfocytow kiwi obwodo wej / H. Glinska, J. Radziszewiska, E. Trabka // Pol. Pzz. chir. - 1985. - Vol.58, N6. - P.449-456.

82. Gruber, I.V. Down-regulation of CD28, TCR-zeta () and Up-regulation of FAS in Peripheral Cytotoxic T-cells of Primary Breast Cancer Patients / I.V. Gruber, S.E. Yousfi, S. Durr-Storzer, D.Wallwiener, E.F. Solomayer, T. Fehm // Anticancer Research. - 2008. - Vol.28. - P. 779-784.

83. Gutkin, D.W. Clinical evaluation of systemic and local immune responses in cancer: time for integration / D.W. Gutkin, M.R. Shurin // Cancer Immunol. Immunother. - 2014. - Vol.63, N 1. - P.45-57.

84. Hayakawa, Y. IFN-y-mediated inhibition of tumor angiogenesis by natural killer T-cell ligand, a-galactosylceramide / Y. Hayakawa, K. Takeda, H. Yagita, M.J. Smyth, L. Van Kaer, K. Okumura, I. Saiki // Blood. - 2002. - Vol. 100, N5. - P.1728-1733.

85. Ho S.B., Kim Y.S. Encyclopedia of cancer. - 1997. - Vol.2. - P.309-24.

86. Itoh, M. Thymus and autoimmunity: production of CD25+CD4+ naturally anergic and suppressive T cells as a key function of the thymus in maintaining immunologic selftolerance / M. Itoh, T. Takahashi, N. Sakaguchi et al. // J Immunol. - 1999. -Vol.162. - P.5317-5326.

87. Izhak, L. Delicate balance among three types of T cells in concurrent regulation of tumor immunity / L. Izhak, E. Ambrosino, S. Kato et al. // Cancer Res. - 2013. -Vol.73. - P.1514-1523.

88. Jiang, H. An integrated view of suppressor T cell subsets in immunoregulation / H. Jiang, L. Chess // J. Clin. Invest. - 2004. - Vol.114. - P. 1198-1208.

89. Juang, C.M. Regulatory T cells: potential target in anticancer immunotherapy / C.M. Juang, C.F. Hung, J.Y. Yeh // Taiwan J Obstet Gynecol. - 2007. - Vol.46, N3. -P.215-221.

90. Karagöz, B. CD8+CD28- cells and CD4+CD25+ regulatory T cells in the peripheral blood of advanced stage lung cancer patients / B. Karagöz, O. Bilgi, M. Gümüs, A.A. Erikfi, O. Sayan, O. Türken, E.G. Kandemir, A. Oztürk, M. Yaylaci // Med Oncol. - 2010. - Vol.27, N1. - P.29-33.

91. Kohrt, H.E. Profile of immune cells in axillary lymph nodes predicts disease-free survival in breast cancer / H.E. Kohrt, N. Nouri, K. Nowels, D. Johnson, S. Holmes, P.P. Lee // PLoS Med. - 2005. - Vol.2. - P.284.

92. Kryczek, I. Human TH17 cells are long-lived effector memory cells / I. Kryczek, E. Zhao, Y. Liu, Y. Wang, L. Vatan, W. Szeliga et al. // Sci. Transl. Med. - 2011. -Vol.3, N.104. - P.104.

93. Ladoire, S. FOXP3 expression in cancer cells and anthracyclines efficacy in patients with primary breast cancer treated with adjuvant chemotherapy in the phase III UNICANCER-PACS 01 trial / S. Ladoire, G. Mignot, C. Dalban et al. // Annals of Oncology. - 2012. - Vol.23. - P.2552-2256.

94. Ladoire, S. Prognostic role of FOXP3+ regulatory T cells infiltrating human carcinomas: the paradox of colorectal cancer / S. Ladoire, F. Martin, F. Ghiringhelli // Cancer Immunol. Immunother. - 2011. - Vol.60, N7. - P. 909-918.

95. Lee, W.J. Selective depression of T-lymphocyte subsets in gastric cancer patients: an mplication of immunotherapy / W.J. Lee, K.J. Chang, C.S. Lee, K.M. Chen // J. Surg. Oncol. - 1994. - Vol.55,N3. - P.165-169.

96. Levy, E.M. Natural killer cells in human cancer: from biological functions to clinical applications / E.M. Levy, M.P. Roberti, J. Mordoh et al. // J. Biomed Biotechnol. - 2011. - P.1-11.

97. Levy, S. Correlation of stress factors with sustained depression of natural killer cell activity and predicted prognosis in patients with breast cancer / S. Levy, R. Herberman, M. Lippman, T. d'Angelo // J Clin Oncol. - 1987. - Vol.5. - P.348-353.

98. Liu, V.C. Tumor evasion of the immune system by converting CD4+CD25- T cells into CD4+CD25+ T regulatory cells: role of tumor-derived TGF-beta / V.C. Liu, L.Y. Wong, T. Jang, A.H. Shah, I. Park, X. Yang, Q. Zhang, S. Lonning, B.A. Teicher, C. Lee // J Immunol. - 2007. - Vol.178, N.5. - P.2883-2892.

99. Liyanage, U.K. Prevalence of regulatory T cells is increased in peripheral blood and tumor microenvironment of patients with pancreas or breast adenocarcinoma / U. K. Liyanage, T. T. Moore, H. G. Joo et al. // Journal of Immunology. - 2002. - Vol.169, N5. - P. 2756-2761.

100. Loi, S. Abstract S1-05: Tumor infiltrating lymphocytes (TILs) indicate trastuzumab benefit in early-stage HER2-positive breast cancer (HER2+ BC) / S. Loi, S. Michiels, R. Salgado et al. // Cancer Res. - 2013. - P.1-5.

101. Loi, S. Prognostic and predictive value of tumor-infiltrating lymphocytes in a phase III randomized adjuvant breast cancer trial in node-positive breast cancer comparing the addition of docetaxel to doxorubicin with doxorubicin-based chemotherapy: BIG 02-98 / S. Loi, N. Sirtaine, F. Piette et al. // J Clin Oncol. - 2013. -Vol.31. - P.860-867.

102. Loi, S. Tumor infiltrating lymphocytes are prognostic in triple negative breast cancer and predictive for trastuzumab benefit in early breast cancer: results from the FinHER trial / S. Loi, S. Michiels, R. Salgado et al. // Ann Oncol. - 2014. - Vol.25. -P.1544-1550.

103. Loi, S. Somatic mutation profiling and associations with prognosis and trastuzumab benefit in early breast cancer / S. Loi, S. Michiels, D. Lambrechts, D. Fumagalli, B. Claes, P.L. Kellokumpu-Lehtinen, P. Bono, V. Kataja, M.J. Piccart, H. Joensuu, C. Sotiriou // J Natl Cancer Inst. - 2013. - Vol.105. - P.960-967.

104. Lu, L. Generation and regulation of CD8+ regulatory T cells / L. Lu, H. Cantor // Cell Mol Immunol. - 2008. - Vol.5, N6. - P.401-406.

105. Mahmoud, S.M. The prognostic significance of B lymphocytes in invasive carcinoma of the breast / S.M. Mahmoud, A.H. Lee, E.C. Paish, R.D.Macmillan, I.O. Ellis, A.R. Green // Breast Cancer Res. Treat. - 2012. - Vol.132. - P. 545-553.

106. Mahmoud, S.M. Tumor-infiltrating CD8+ lymphocytes predict clinical outcome in breast cancer / S.M. Mahmoud, E.C. Paish, D.G. Powe, R.D. Macmillan, M.J. Grainge, A.H. Lee, I.O. Ellis, A.R. Green // J Clin Oncol. - 2011. - Vol.29. - P.1949-1955.

107. Mao, Y. The Value of Tumor Infiltrating Lymphocytes (TILs) for Predicting Response to Neoadjuvant Chemotherapy in Breast Cancer / Y. Mao, Q. Qu, Y. Zhang, J. Liu, X. Chen, et al. // A Systematic Review and Meta-Analysis PLoS One - 2014. -Vol. 9 , N 12. - P.103-115.

108. Maryann, K. Prognostic and Predictive Value of Tumor-Infiltrating Lymphocytes in Breast Cancer / K. Maryann, S. Adams // JAMA Oncol. - 2015. - Vol.1. - P.448-454.

109. Masaki, T. The immunoregulatory role of type I and type II NKT cells in cancer and other diseases / T. Masaki, J. A. Berzofsky // Cancer Immunol. Immunother. -2014. - Vol.63, N3.- P.199-213.

110. Melief, C.J. Lessons from T cell responses to virus induced tumours for cancer eradication in general / C.J. Melief, W.M. Kast // Cancer Surv. - 1992. - Vol.13. -P.81-99.

111. Meloni, F. Foxp3 expressing CD4+ CD25+ and CD8+CD28- T regulatory cells in the peripheral blood of patients with lung cancer and pleural mesothelioma / F. Meloni, M. Morosini, N. Solari et.al. // Hum. Immunol. - 2006. - Vol.67, N-1-2. - P.1-12.

112. Mittendorf, E.A. Breast cancer vaccines: promise for the future or pipe dream? / E.A. Mittendorf, G.E. Peoples, S.E. Singletary // Cancer. - 2007. - Vol. 110. - P.1677-1686.

113. Moretta, L. Human NK cells: from surface receptors to the therapy of leukemias and solid tumors / L. Moretta, G. Pietra, E. Montaldo, P. Vacca, D. Pende, M. Falco, G. Del Zotto, F. Locatelli, A. Moretta, M.C. Mingari // Front Immunol. - 2014. - Vol.5. -P.87.

114. Morton, B.A. Monoclonal antibody-defined phenotypes of regional lymph node and peripheral blood lymphocyte subpopulations in early breast cancer / A.B. Morton, W.G. Ramey, H. Paderon H, R.E. Miller // Cancer Res. - 1986. - Vol.46, N4. - P.2121-2126.

115. Motohashi, S. A phase I-II study of alphagalactosylceramide-pulsed IL-2/GM-CSF-cultured peripheral blood mononuclear cells in patients with advanced and recurrent non-small cell lung cancer / S. Motohashi, K. Nagato, N. Kunii at.al. // J. Immunol. - 2009. - Vol.182, N4. - P.2492-2501.

116. Mou, D. CD28 Negative T cells: is their loss our gain? / D. Mou, J. Espinosa, D. J. Lo, A. D. Kirk // Am. J. Transplant. - 2014. - Vol.14, N11. - P.2460-2466.

117. Mozaffari, F. NK-cell and T-cell functions in patients with breast cancer: effects of surgery and adjuvant chemo- and radiotherapy / F. Mozaffari, C. Lindemalm, A. Choudhury, H. Granstam-Bj örneklett, I. Helander, M. Lekander, E. Mikaelsson, B. Nilsson, M.L. Ojutkangas, A. Osterborg, L. Bergkvist, H. Mellstedt // Br. J. Cancer. -2007. - Vol.97, N.1. - P.105-111.

118. Mozaffari, M. Systemic immune effects of adjuvant chemotherapy with 5-fluorouracil, epirubicin and cyclophosphamide and/or radiotherapy in breast cancer: a longitudinal study / F. Mozaffari, C. Lindemalm, A. Choudhury, H. Granstam-Bj örneklett, M. Lekander, B. Nilsson, M.L. Ojutkangas, A. Osterborg, L. Bergkvist, H. Mellstedt // Cancer Immunol. Immunother. - 2009. - Vol.58, N1. - P.111-120.

119. Muraro, E. Improved Natural Killer cell activity and retained anti-tumor CD8+ T cell responses contribute to the induction of a pathological complete response in HER2 -positive breast cancer patients undergoing neoadjuvant Chemotherapy / E. Muraro, E. Comaro et al. // J. Transl. Med. - 2015. - Vol.13. - P.204.

120. Murta, E.F. Lymphocyte subpopulations in patients with advanced breast cancer submitted to neoadjuvant chemotherapy / E.F. Murta, J.M. Andrade, R.P. Falcao, S. Bighetti // Tumori. - 2000. - Vol.86, N.5. - P.403-407.

121. Najafian, N. Regulatory functions of CD8+CD28- T cells in an autoimmune disease model / N. Najafian, T. Chitnis, A.D. Salama, B. Zhu, C. Benou, X. Yuan, M.R. Clarkson, M.H. Sayegh, S.J. Khoury // J Clin Invest. - 2003. - Vol.112, N7. - P.1037-1048.

122. Oluwole, S.F. Breast cancer in women with HIV/AIDS: report of five cases with a review of the literature / S.F. Oluwole, A.O. Ali, Z. Shafaee, H.A. DePaz // J Surg Oncol. - 2005. - Vol.89. - P.23-27.

123. Osada, T. Dendritic cell-based immunotherapy / T. Osada, T.M. Clay, C.Y. Woo, M.A. Morse, H.K. Lyerly // Int Rev Immunol. - 2006. - Vol.25. - P.377-413.

124. Page, D.B. Emerging immunotherapy strategies in breast cancer / D.B. Page, J. Naidoo, H.L. McArthur // Immunotherapy. - 2014. - Vol.6, N2. - P.195-209.

125. Pagès, F. Effector memory T cells, early metastasis, and survival in colorectal cancer / F. Pagès, F.A. Berger, M. Camus et al. // The New England Journal of Medicine. - 2005. - Vol.353, N.25. - P. 2654-2666.

126. Parkin, D.M. Cancer incidence in five continents / D.M. Parkin, S.L. Whelan, J. Ferlay et al. // International Agency for Research on Cancer. - 2002.- Vol.8, N.155. -P.603-605.

127. Penn, I. Posttransplant malignancies / I. Penn // Transplant Proc. - 1999. - Vol.31. - P.1260-1262.

128. Penn, I. Tumors of the immunocompromised patient / I. Penn // Ann Rev Med. -1988. - Vol.39. - P.63-73.

129. Pham, S.M. Solid tumors after heart transplantation: lethality of lung cancer / S.M. Pham, R.L. Kormos, R.J. Landreneau, A. Kawai, I. Gonzalez-Cancel, R.L. Hardesty, B.G. Hattler, B.P. Griffith // Ann Thorac Surg. - 1995. -Vol.60. - P.1623-1626.

130. Radi, F.R. Comparative Analysis of CD4+ and CD8+ T Cells in Tumor Tissues, Lymph Nodes and the Peripheral Blood from Patients with Breast Cancer / F. R. Radi, A.T.Soheila, O. Ramesh, H.A. Mohammad, M.H. Zahir // Iranian Biomedical Journal. -2015. - Vol.19, N1. - P.35-44.

131. Roychoudhuri, R. The interplay of effector and regulatory T cells in cancer / R. Roychoudhuri, R.L. Eil, N.P. Restifo // Curr Opin Immunol. - 2015. - Vol. 33. - P.101-111.

132. Ruffel, B. Leucocyte composition in human breast cancer / B. Ruffel, A. Au, H.S. Rugo et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 2012. - Vol.109, N8. - P. 2796-2801.

133. Ruter, J. Altering regulatory T cell function in cancer immunotherapy: a novel means to boost the efficacy of cancer vaccines / J. Ruter, B.G. Barnett, I. Kryczek et al. // Front Biosci. - 2009. - Vol.14. - P.1761-1770.

134. S. Ladoire, L. Arnould, G. Mignot et al., "Presence of Foxp3 expression in tumor cells predicts better survival in HER2- overexpressing breast cancer patients treated with neoadjuvant chemotherapy," Breast Cancer Research and Treatment, vol. 125, no. 1, pp. 65-72, 2011.

135. Sakaguchi, S. Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor alpha-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance causes various autoimmune diseases / S. Sakaguchi, N. Sakaguchi, M. Asano, M. Itoh, M. Toda // J Immunol. - 1995. - Vol.155, N3. - P.1151-1164.

136. Sakaguchi, S. The origin of FOXP3- expressing CD4+ regulatory T cells: thymus or periphery / S. Sakaguchi // J Clin Invest. - 2003. - Vol. 112. - P.1310-1312.

137. Salgado, R. The evaluation of tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) in breast cancer: recommendations by an International TILs Working Group 2014 / R. Salgado, C. Denkert, S. Demaria // Ann Oncol. - 2015. - Vol.26, N2. - P. 259-271.

138. Sathana, D. Relevance of tumor-infiltrating lymphocytes in breast cancer / D. Sathana, P.A. Beavis, P. Savas et al. // BMC Medicine. - 2015. - Vol.13. -P.202.

139. Schantz, S.P. Patterns of recurrence from head and neck cancer. An immunologic perspective / S.P. Schantz, L.J. Peters // Am J Clin Oncol. - 1987. - Vol.10. - P.469-474.

140. Schreiber, R.D. Cancer immunoediting: integrating immunity's roles in cancer suppression and promotion / R.D. Schreiber, L.J. Old, M.J. Smyth // Science. -2011. -Vol.331. - P. 1565-1570.

141. Schröder, W. Lymphocyte subsets in patients with ovarian and breast cancer / W. Schröder, A. Vering, M. Stegmuller, R. Strohmeier // Eur. J. Gynaecol Oncol. - 1997. -Vol.18, N.6. - P.474-477.

142. Seino, K. Natural killer T cell-mediated antitumor immune responses and their clinical applications / K. Seino, S. Motohashi, T. Fujisawa et al. // Cancer Sci. - 2006. -Vol.97. - P.807-812.

143. Senovilla, L. Trial watch: Prognostic and predictive value of the immune infiltrate in cancer / L. Senovilla, E. Vacchelli, J. Galon, S. Adjemian, A. Eggermont, W.H. Fridman, C. Sautès-Fridman, Y. Ma, E. Tartour, L. Zitvogel, G. Kroemer, L. Galluzzi // Oncoimmunology. - 2012. - Vol.1, N8. - P.1323-1343.

144. Shapiro, H.M. Practical Flow Cytometry 4-th Edition / H.M. Sharipo. // Wiley -Liss. (ISBN 0-471-41125-6).

145. Sherene, L. Tumor-infiltrating lymphocytes, breast cancer subtypes and therapeutic efficacy / L. Sherene // OncoImmunology/ - 2013. - Vol.2, N7. - P.24720-24723.

146. Shevach, E.M. Mechanisms of foxp3+ T regulatory cell-mediated suppression / E.M. Shevach // Immunity. - 2009. - Vol.30, N5. - P.636-645.

147. Song, G. Elevated level of peripheral CD8+CD28- T lymphocytes are an independent predictor of progression-free survival in patients with metastatic breast cancer during the course of chemotherapy / G. Song, X. Wang, J. Jia et al. // Cancer Immunology, Immunotherapy. - 2013. -Vol.62,N.6. - P. 1123-1130.

148. Spitale, A. Breast cancer classification according to immunohistochemical markers: clinicopathologic features and short-term survival analysis in a population-based study from the South of Switzerland / A. Spitale, P. Mazzola, D. Soldini, L. Mazzucchelli, A. Bordoni // Ann Oncol. - 2009. - Vol.20, N4. -P.628-635.

149. St. Gallen 2013r.

150. Stephen, L.S. TH2-Polarized CD4 T Cells and Macrophages Limit Efficacy of Radiotherapy Cancer / L.S. Stephen, R. Brian, G.D. DeNardo et.al. // Immunol. Res. -2015. - Vol.3. - P.518-525.

151. Stewart, T. Incidence of de-novo breast cancer in women chronically immunosuppressed after organ transplantation / T. Stewart, S.C. Tsai, H. Grayson, R. Henderson, G. Opelz // Lancet. - 1995. - Vol.346. - P.796-798.

152. Strayer, D.R. Low natural cytotoxicity of peripheral blood mononuclear cells in individuals with high familial incidences of cancer / D.R. Strayer, W.A. Carter, S.D. Mayberry et al. // Cancer Res. - 1984. - Vol.44. - P.370-374.

153. Strioga, M. CD8+ CD28- and CD8+ CD57+ T cells and their role in health and disease / M. Strioga, V. Pasukoniene, D. Characiejus // Immunology. -2011. -Vol.134.

- P.17-32.

154. Subleski, J.J. The split personality of NKT cells in malignancy, utoimmune and allergic disorders / J.J. Subleski, Q. Jiang, J.M. Weiss, R.H. Wiltrout // Immunotherapy.

- 2011. - Vol.10. - P.1167-1184.

155. Sylvia, A. Prognostic Value of Tumor-Infiltrating Lymphocytes in Triple-Negative Breast Cancers From Two Phase III Randomized Adjuvant Breast Cancer Trials: ECOG

2197 and ECOG 1199 / A. Sylvia, A. Robert, J. Gray, D. Sandra et.al. // J Clin Oncol. -2014. - Vol.32. - P.2959-2966.

156. Tahir, S.M. Loss of IFN-y production by invariant NKT cells in advanced cancer / S.M. Tahir, O. Cheng, A. Shaulov et al. // J Immunol. - 2001. - Vol.167. - P.4046-4050.

157. Taniguchi, M. Discovery of NKT cells and development of NKT cell-targeted antitumor immunotherapy / M. Taniguchi, M. Harada, N. Dashtsoodol, S. Kojo // Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci. - 2015. - Vol.91, N. 7. - P.292-304.

158. Teng, M.W. Classifying cancers based on T-cell infiltration and PD-L1 / M.W. Teng, S.F. Ngiow, A. Ribas, M.J. Smyth. // Cancer Research. - 2015. - Vol.75, N.11. -P. 2139-2145.

159. Teng, M.W. From mice to humans: developments in cancer immunoediting / M.W. Teng, J. Galon, W.H. Fridman, M.J. Smyth // J Clin Invest. - 2015. - Vol.125, N9. -P.3338-3346.

160. Terabe, M. The role of NKT cells in tumor immunity / M. Terabe, J.A. Berzofsky // Adv Cancer Res. - 2008. - Vol.101. - P.277-348.

161. Toes R. CD4 T cells and their role in antitumor immune responses / R. Toes, F. Ossendorp, R. Offringa, C.J. Melief // J. Exp. Med. // - 1999. - Vol.189,N.5. - P.753-756.

162. Tredan, O. Patients with metastatic breast cancer leading to CD4+ T cell lymphopaenia have poor outcome / O. Trédan, M. Manuel, G. Clapisson, T. Bachelot, S. Chabaud, C. Bardin-dit-Courageot, C. Rigal, C. Biota, A. Bajard, N. Pasqual, J. Blay, C. Caux, C. Ménétrier-Caux // Eur. J. Cancer. - 2013. - Vol.49, N7. - P.1673-1682.

163. Tsavaris, N. Immune changes in patients with advanced breast cancer undergoing chemotherapy with taxanes / N. Tsavaris, C. Kosmas, M. Vadiaka et al. // Br J Cancer. -2002. - Vol.87. - P.21-27.

164. Tsutsui, S. Influence of preoperative treatment and surgical operation on immune function of patients with esophageal carcinoma / S. Tsutsui, M.Morita, H. Kuwano, H. Matsuda, M. Mori, S. Okamura et al. // J. Surg. Oncol. - 1992. - Vol.49, N3. - P.176-181.

165. Tumeh, P.C. PD-1 blockade induces responses by inhibiting adaptive immune resistance / P.C. Tumeh, C.L. Harview, J.H. Yearley, I.P. Shintaku, E.J. Taylor, L. Robert, B. Chmielowski, M. Spasic, G. Henry, V. Ciobanu, A.N. West, M. Carmona, C. Kivork, E. Seja, G. Cherry, A.J. Gutierrez , T.R. Grogan, C. Mateus, G. Tomasic, J.A. Glaspy, R.O. Emerson, H. Robins, R.H. Pierce, D.A. Elashoff , C. Robert, A. Ribas // Nature. - 2014. -Vol.515, N7528. - P. 568-571.

166. Twyman-Saint, V.C. Radiation and dual checkpoint blockade activate nonredundant immune mechanisms in cancer / V.C. Twyman-Saint, A.J. Rech, A. Maity, R. Rengan, K.E. Pauken, E. Stelekati et al. // Nature. - 2015. - Vol.520. - P.373-377.

167. Urbaniak-Kujda, D. Increased percentage of CD8+CD28- suppressor lymphocytes in peripheral blood and skin infiltrates correlates with advanced disease in patients with cutaneous T-cell lymphomas / D. Urbaniak-Kujda, K. Kapelko-Slowik, D. Wolowiec et al. // Postepy Hig. Med. Dosw. - 2009. - Vol.63. - P.355-359.

168. Vallejos, C.S. Breast cancer classification according to immunohistochemistry markers: subtypes and association with clinicopathologic variables in a peruvian hospital database / C.S. Vallej os, H.L. Gómez, W.R. Cruz, J.A. Pinto, R.R. Dyer, R. Velarde, J.F. Suazo, S.P. Neciosup, M. León, M.A. Cruz, C.E. Vigil // Clin Breast Cancer. - 2010. - Vol.10, N4. - P.294-300.

169. Van, K.L. NKT cells: T lymphocytes with innate effector functions / K.L. Van // Curr. Opin. Immunol. - 2007. - Vol.19, N3. - P.354-364.

170. Vernon, C. Rapid Flow Cytometric Method for Measuring Lymphocyte Subset Activation Cytometry / C.M. Vernon, A.S. Maria, J.J. Ruitenberg. // Wiley -Liss. -1995. -Vol.20. - P. 127-153.

171. Vignali, A.A. Mechanisms of Treg Suppression: Still a Long Way to Go Dario / A. A. Vignali// Front Immunol. - 2012. - Vol.3. - P. 191.

172. Weigelt, B. The contribution of gene expression profiling to breast cancer classification, prognostication and prediction: a retrospective of the last decade / B. Weigelt, F.L. Baehner, J.S. Reis-Filho // J Pathol. - 2010. - Vol.220, N2. - P.263-280.

173. Wesolowski, R. Tumor Infiltrating Lymphocytes - The Next Step in Assessing Outcome and Response to Treatment in Patients with Breast Cancer / R. Wesolowski, W.E. Carson // J Carcinog Mutagen. - 2014. - Vol.5, N6. - P.199.

174. Whiteside, T.L. Regulatory T cell subsets in human cancer: are they regulating for or against tumor progression? / T.L. Whiteside // Cancer Immunol Immunother. - 2014. - Vol.63, N1. - P.67-72.

175. Whiteside, T.L. What are regulatory T cells (Treg) regulating in cancer and why? / T.L. Whiteside. // Semin Cancer Biol. - 2012. - Vol.22, N 4. - P.327-334.

176. Whitford, P. Flow cytometric analysis of tumour infiltrating lymphocytes in breast cancer / P. Whitford, E.A. Mallon, W.D. George, A.M. Campbell // Br. J. Cancer. -1990. - Vol.62. - P.971-975.

177. Whitford, PGW. Flow cytometric analysis of tumour infiltrating lymphocyte activation and tumour cell MHC class I and II expression in breast cancer patients / PGW Whitford, A.M. Cambell // Cancer Lett. - 1992. - Vol.61. - P.157-164.

178. Wolf, A.M. Increase of regulatory T cells in the peripheral blood of cancer patients / A.M. Wolf, D. Wolf, M. Steurer et al. // Clin Cancer Res. - 2003. - Vol.9. - P.606-612.

179. Wong, P.Y. Functional analysis of tumor-infiltrating leukocytes in breast cancer patients / P.Y. Wong, E.D. Staren, N. Tereshkova, D.P. Braun // J Surg Res. - 1998. -Vol.76. - P.95-103.

180. Wu, L. Natural killer T cells in health and disease / L. Wu, L.V. Kaer // Front Biosci (Schol Ed). - 2013. - Vol.3. - P.236-251.

181. Xystrakis, E. Identification of a novel natural regulatory CD8 T-cell subset and analysis of its mechanism of regulation / E. Xystrakis, A.S. Dejean, I. Bernard, P. Druet, R. Liblau, D. Gonzalez-Dunia, A. Saoudi // Blood. - 2004. - Vol.104, N10. - P.3294-3301.

182. Yang, L. Expression of Th17 cells in breast cancer tissue and its association with clinical parameters / L. Yang, Y. Qi, J. Hu, L. Tang, S. Zhao, B. Shan // Cell Biochem Biophys. - 2012. - Vol.62, N1. - P.153-159.

183. Yi, H. CD4+ and CD8+ T cells have opposing roles in breast cancer progression and outcome / H. Yi, M. Chunling, Z. Qunyuan et.al. // Oncotarget. - 2015. -Vol.6, N.19. - P.17462-17478.

184. Zitvogel, L. Cancer despite immunosurveillance: immunoselection and immunosubversion / L. Zitvogel, A. Tesniere, G. Kroemer // Nat Rev Immunology. -2006. - Vol.6. - P.715-727.