Структурно-функциональная реорганизация секреторных экзокриноцитов (клеток Клара) и альвеолоцитов 2 типа при воздействии дестабилизирующих факторов и при хронической обструктивной болезни легких тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат медицинских наук Боркина, Анна Николаевна

• Боркина, Анна Николаевна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Боркина, Анна Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Структурно-функциональная характеристика клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа и их реорганизация при воздействии дестабилизирующих факторов.

1.1. Структурно-функциональная характеристика клеток

Клара.'.'.

1.2. Структурно-функциональная характеристика альвеолоцитов 2-го типа.

1.3. Структурная реорганизация клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа при воздействии дестабилизирующих факторов.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Методы исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Морфо-функциональная характеристика секреторных клеток Клара в бронхиолярном эпителии легких здорового взрослого человека.

3.2. Структурно - функциональная реорганизация секреторных клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа при хронической обструктивной болезни легких.

Структурно-функциональная характеристика секреторных клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа при воздействии сероводородсодержащей газовой смеси.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Структурно-функциональная реорганизация секреторных экзокриноцитов (клеток Клара) и альвеолоцитов 2 типа при воздействии дестабилизирующих факторов и при хронической обструктивной болезни легких»

С момента описания Максом Клара в эпителии периферических воздухоносных путей человека клеток с отличительными цитоплазматическими гранулами прошло более 70 лет (Clara М., 1937). Однако до настоящего времени сведения по локализации этих клеток в эпителиальной выстилке легких человека противоречивы, а об их количественной характеристике при патологических процессах чаще судят по уровню специфического для этих клеток СС16 белка, выявляемого в бронхоальвеолярных смывах, сыворотке крови (Bernard A.M. et al., 1992; Singh G. Et al., 1997). Уровень последнего снижен у шахтеров, курильщиков (Bernard A.et al., 1994), при бактериальной пневмонии (Nomori Н. et al., 1995). Имеются единичные иммуноцитохимические исследования по выявлению клеток Клара в бронхиолярном эпителии легких людей, не имеющих легочной патологии (Boers J.E. et al., 1999; Shijubo N. et al., 1997). Сведения о структурной реорганизации этих клеток при курении и ее зависимости от стажа курения отсутствуют.

В последние годы повсеместно отмечается тенденция к увеличению частоты хронических обструктивных заболеваний легких, из которых основным являются хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ). Одним из основных этиологических факторов ХОБЛ является курение. В России число больных хроническими обструктивными заболеваниями легких превышает 11 млн., число курящих составляет 50% населения. Летальность при ХОБЛ занимает 4-е место, составляя около 4% среди всех причин смерти в общей популяции (Чучалин А.Г., 2003).

Ведущая роль в развитии хронических обструктивных заболеваний легких принадлежит воспалению, оксидативному стрессу, дисбалансу протеаз и антипротеаз (Черняев А.Л., Самсонова М.В., 2004). В процессе эволюции выработались клеточные и гуморальные системы защиты против медиаторов воспаления, которые определяют кинетику и исход этого процесса. В последнее время появились сведения о противовоспалительных свойствах секрета клеток Клара, играющих роль в противовоспалительной защите легкого (Романова Л.К., Горячкина В.Л., 1999; Massaro G.D., 1989). Секреторные низкомолекулярные белки клеток Клара, выявляемые как в бронхоальвеолярной лаважной жидкости, так и в сыворотке крови, являются ингибиторами лейкоцитарных протеаз и цитокинов (Dierynck J. et al., 1995), подавляют активность фосфолипазы А2, которая способствует хемотаксису фибробластов и развитию фиброза (Lesur О. et al., 1995). Структурно-функциональная реорганизация клеток Клара при ХОБЛ не изучена, хотя имеются многочисленные исследования, посвященные анализу патоморфологических изменений в легких при различных обструктивных заболеваниях, раскрывающие особенности структурно-функциональной реорганизации клеточных элементов стенки бронхов разного калибра (Ерохин В.В., 1987; Романова Л.К., 1987; Полосухин В.В., 1997; Черняев А.Л., 1998; Соколов Е.И. с соавт., 2000; Волкова Л.И. с соавт., 2002; Чернеховская Н.Е. с соавт., 2007).

Гистофизиология респираторного отдела зависима от состояния сурфактанта. В образовании последнего участвуют два вида секреторных клеток: альвеолоциты 2-го типа и клетки Клара, в которых экспрессируется М-РНК для апопротеинов А и В альвеолярного сурфактанта (Phelps D.S., Floros J., 1988; Broers J.Z., et al., 1992). Альвеолоциты 2-го типа детально изучены у человека без легочной патологии и экспериментальных животных (Kauffman Sh., 1980, Crapo S. et al., 1982, Williams M. 1977, 1984, Possmayer F., 1984, Zeltner T.B. et al., 1987, Романова Л.К., 1966, 1984, 1987, Ерохин B.B., 1996), однако их субмикроскопическая реорганизация при хронических обструктивных заболеваниях легких не изучена.

Имеются сведения, что клетки Клара являются «цитоэкологическим форпостом» легких (Plopper С. et al., 1991; Романова Л.К., 2000). Под воздействием различных химических агентов, поступающих из воздушной среды, происходят существенные изменения структуры и функции легких

Зислин Д.М., Стерехова Н.П., Серденко М.М. с соавт., 1992; Асфандияров Р.И. с соавт., 1995; Величковский Б.Т., 2001; Полякова B.C. с соавт., 2003). Контакт человека с сероводородсодержащим газом происходит во многих отраслях промышленности: газоперерабатывающей, нефтяной, в производстве вискозы, бумаги, в кожевенной промышленности и в сельском хозяйстве. В настоящее время имеются немногочисленные исследования по влиянию на ткани легкого сероводородсодержащих природных газов Оренбургского и Астраханского месторождений (Серденко М.М. с соавт., 1992; Асфандияров Р.И. с соавт., 1995; Полунин И.Н. с соавт., 1999; Боев В.М., Сетко Н.П.,2001; Полякова B.C., 2003, 2006). При экспериментальном исследовании тканей легкого крыс авторы уделяли большое внимание элементам аэрогематического барьера и эпителиальной выстилке внутрилегочных бронхов. Структурная реорганизация клеток, являющихся «цитоэкологическим форпостом» при воздействии сероводородсодержащих газов не изучена.

Таким образом, до сих пор имеются противоречивые сведения о локализации клеток Клара у человека, нет сведений об их структурно-функциональной характеристике у людей с различным стажем курения. Не исследована структурно-функциональная реорганизация клеток Клара и альвеолоцитов 2 типа, совместно участвующих в поддержании гомеостаза в респираторном отделе легких при хронической обструктивной болезни легких и при воздействии сероводородсодержащей газовой смеси.

Цель и задачи исследования

Цель настоящего исследования установить локализацию и структурно-функциональную реорганизацию клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа при воздействии дестабилизирующих факторов и ее особенности при хронической обструктивной болезни легких.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи: 1. Изучить локализацию и морфофункциональную характеристику клеток Клара в зрелом периоде онтогенеза человека.

2. Выявить зависимость структурно-функциональной реорганизации клеток Клара человека от стажа курения.

3. Изучить морфофункциональную характеристику клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа у людей с хронической обструктивной болезнью легких.

4. В условиях эксперимента выявить особенности структурно-функциональной реорганизации секреторных клеток Клара и альвелоцитов 2-го типа при различной продолжительности воздействия сероводородсодержащей газовой смеси.

Научная новизна исследования

Впервые в рамках одного исследования нами выявлена локализация, структурно-функциональная характеристика секреторных клеток Клара в зрелом периоде онтогенеза человека и показана зависимость морфофункциональных параметров этих клеток от стажа курения. Выявлен критический период - стаж курения 10 пачек-лет, когда при отсутствии нарушения функциональных легочных проб появляются морфологические изменения в виде минимального фиброза, выявляемого преимущественно на субмикроскопическом уровне. Впервые дана структурная реорганизация клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа при хронической обструктивной болезни легких и при воздействии сероводородсодержащей газовой смеси.

Практическая значимость работы

Результаты работы создают теоретическую основу для расширения представлений о роли клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа в поддержании тканевого гомеостаза в эпителиальной выстилке респираторного отдела легких и их значение в патогенезе хронических обструктивных заболеваний легких. В дальнейшем они могут быть использованы в разработке методических рекомендаций по коррекции сдвигов в деятельности секреторных клеток респираторного отдела легкого. Выводы данного исследования помогут в разработке профилактических мер защиты организма от воздействия сероводородсодержащей газовой смеси, а также внесут свой вклад в организацию эффективной борьбы с табакокурением.

Внедрение

Полученные результаты используются в учебном процессе на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии и патологической анатомии Оренбургской государственной медицинской академии, на кафедре профилактической медицины Оренбургского государственного университета, а также в просветительской работе о вреде курения с медицинским персоналом и больными в отделении пульмонологии МУЗ «МГКБСМП№1» (г. Оренбург).

Основные положения, выносимые на защиту 1. Во взрослом периоде онтогенеза человека секреторные экзокриноциты (клетки Клара) обнаруживаются в терминальных и респираторных бронхиолах. В респираторных бронхиолах иммуноцитохимически они выявляются в большем количестве.

2. С возрастом количество клеток Клара в респираторных и терминальных бронхиолах у человека уменьшается, количественное их уменьшение больше зависимо от стажа курения.

3. При хронической обструктивной болезни легких наблюдается достоверное снижение числа клеток Клара и зависимая от стажа курения их структурная реорганизация и альвеолоцитов 2-го типа.

4. При воздействии сероводородсодержащей газовой смеси реакция клеток Клара и секреторных альвеолоцитов 2-го типа оказывается сопряженной и однонаправленной, что подтверждается выявленным в этих клетках умеренным стимулирующим метаболическим эффектом, проявляющимся в расширении внутриклеточных компартментов, участвующих в процессах биотрансформации ксенобиотиков (это касается клеток Клара) и активизации процессов выработки сурфактанта альвеолоцитами 2-го типа.

Апробация работы и публикации

Материалы работы доложены на VI Межрегиональной научно-практической конференции врачей Приволжско-Уральского военного округа

Актуальные вопросы военной и практической медицины» (Оренбург, 2005); Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы внутренних болезней: традиционные и психосоматические подходы» (Челябинск, 2006); Всероссийской научной конференции с международным участием «Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии» (Белгород, 2006); I Международной (X Всероссийской) Пироговской студенческой научной медицинской конференции «Современные технологии в акушерстве и гинекологии» (Москва, 2006); VIII конгресса Международной ассоциации морфологов в научно-теоретическом медицинском журнале «Морфология» (Орел, 2006); конференции, посвященной 70-летию Тверской государственной медицинской академии и 100-летию профессора И.С. Кудрина (Тверь, 2006); конференции Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова «Актуальные проблемы учения о тканях» (Санкт-Петербург, 2006); Российской научно-практической конференции « Новые технологии микрохирургии глаза (проблемы доказательной медицины)» (Оренбург,2006); Всероссийской научно-практической патологоанатомической конференции «Актуальные проблемы патологоанатомической службы муниципальных учреждений здравоохранения. Вопросы экологической патологии. Современные методы морфологической диагностики в патологоанатомической практике» (Миасс, 2008).

Публикации

По материалам исследования опубликовано 11 работ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 121 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, раздела «Материалы и методы исследования», главы «Результаты собственных исследований», обсуждения, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 4 таблицами, 55 рисунками. Библиография включает 49 отечественных и 92 зарубежных источников литературы.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Боркина, Анна Николаевна

Выводы

1. Во взрослом периоде онтогенеза человека секреторные экзокриноциты (клетки Клара) обнаружены в терминальных и в респираторных бронхиолах. В респираторных бронхиолах они выявляются в большем количестве.

2. С возрастом количество клеток Клара в респираторных и терминальных бронхиолах у человека уменьшается, количественное их уменьшение зависимо от стажа курения. Снижение относительной численности клеток Клара на каждые 10 пачек-лет курения в терминальных бронхиолах составляет 6,4%, в респираторных бронхиолах 11%.

3. Индекс курящего человека равный 10 пачек-лет является критическим, так как при нормальных функциональных пробах у людей без легочной патологии с данным стажем курения, в органе развивается минимальный фиброз.

4. У больных с хронической обструктивной болезнью легких выявлено зависимое от стажа курения уменьшение количества клеток Клара, увеличение степени вакуолизации их цитоплазмы, уменьшение прочности их связей в пласте. В альвеолоцитах 2-го типа обнаружена структурная реорганизация, свидетельствующая о повышении их функциональной активности при непродолжительном стаже курения. При увеличении стажа курения (ИК больше 30) в клетках уменьшается численность митохондрий, увеличивается число измененных пластинчатых телец со сниженным содержанием осмиофильного материала, среди них чаще обнаруживаются деструктивно измененные и дающие положительную иммуноцитохимическую реакцию на выявление фрагментированной ДНК клетки.

5. В условиях эксперимента при исследуемых сроках воздействия сероводородсодержащей газовой смеси в бронхиолах и мелких бронхах увеличивается число клеток Клара. Структурно-функциональная реорганизация клеток Клара и альвеолоцитов 2-го типа свидетельствует о повышении их секреторной активности, направленной на поддержание гомеостаза в респираторном отделе легких.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Боркина, Анна Николаевна, 2008 год

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия.-М.: Медицина, 1990.-384 с.

2. Авцын А.П., Шахламов В.А. Ультраструктурные основы патологии клетки.- М.: Медицина, 1979. 320 с.

3. Антипчук Ю. П., Соболева А. Д. Эволюция респираторных систем.

4. Новосибирск: Наука, 1976.- 206 с.

5. Асфандияров Р.И., Бугин В. Н., Лазько А.Е., Резаев А.А. Острые отравления сероводородсодержащими газами. Астрахань, 1995.- 156 с.

6. Боев В.М., Сетко Н.П. Сернистые соединения природного газа и их действие на организм. М.: Медицина, 2001.-216 с.

7. Бонашевская Т. И. О характере действия газов и паров химических соединений на эпителий воздухоносных путей и респираторных отделов дыхательной системы.// Успехи соврем. биол.-1977.- Т.84.- № 6.- С.441-452.

8. Бонашевская Т.И. Возможности прогнозирования гепатотоксического и нейротоксического эффектов ряда химических веществ по морфологическим показателям.//Гигиена и санитария.-1986.-№ 6.- С.16-19.

9. Бонашевская Т. И., Кумпан Н. Б. Защитно-приспособительные реакции воздухоносных и респираторных отделов легких при воздействии загрязнителей атмосферного воздуха.// Арх. анат.-1986.- Т.90.- №4.- С.41-48.

10. Величковский Б.Т. Молекулярные и клеточные механизмы защиты органов дыхания от неблагоприятных воздействий.// Вестн. АМН, 2001.- №5.- С. 16-21.

11. Ерохин В. В. Функциональная морфология респираторного отдела легких.- М.: Медицина.-1987,- 272с.

12. Ерохин В. В., Бацура Ю. Д. Ультраструктура нейроэпителиальных клеток респираторного отдела при воспалительных заболеваниях легких в эксперименте. // Арх. пат.- 1979.- № 8.- С. 13—21.

13. Заварзин А. А. Избранные труды,- Ленинград-Москва: Изд. Акад. наук СССР , 1953.- T.II.-378 с.

14. Зайцева К.К., Симоненкова В.А., Комар Ю.А. Ультраструктурная организация аэрогематического барьера легких лабораторных животных. //Арх. анат.- 1985.- Т.89.-№9.- С.59-66.

15. Зильбер А.П. Регионарные функции легких. Клиническая физиология неравномерности вентиляции и кровотока.- Петрозаводск.-1972.- 280 с.

16. Зислин Д. М., Стерехова Н.П. Клиника острых и хронических профессиональных интоксикаций сернистым газом.//М.:Медицина.-1977.-135 с.

17. Клишов А.А. Гистогенез и регенерация тканей.- Л.: Медицина.- 1984. -232с.

18. Кнорре А.Г. Эмбриональный гистогенез.- Л.Медицина.-1971.-432 с.

19. Кольман Я., Рем К. Наглядная биохимия.- М.: Мир.- 2000. 469 с.

20. Копьева Т.Н., Бармина Г.В., Свищев А.В., Макарова О.В. Морфология и патогенез хронического бронхита.//Арх. Патологии. 1989.-№7.- С. 83-87.

21. Кузнецова Р. А. Ультраструктура слизистой оболочки бронха у детей. // Педиатрия.- 1974.- № 3,- С. 81-85.

22. Лазаренко Ф. М. Закономерности роста и превращения тканей и органов в условиях культивирования (имплантации) их в организме. М.: Медгиз.- 1959. 399 с.

23. Маянский Д. Н. Клетка Купфера и система мононуклеарных фагоцитов. Новосибирск.-Наука.- 1981.- 172с.

24. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика.- М.: Наука, 1981.-С.278.

25. Пирс Э. Гистохимия.- М.: Изд. Ин. Лит., 1962.- 962 с.

26. Полосухин В. В. Альвеолярные макрофаги: структурно-функциональная гетерогенность и хроническое воспаление легких.// Успехи совр. биологии. 1995.-Т. 115,- №6.- С.740 758.

27. Респираторная медицина: в 2 т. / Под ред. Чучалина А.Г. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.- Т.1.-800с.-Т.2.-816с.

28. Романова Л.К. Регуляция восстановительных процессов. М.: из-во Моск. ун-та, 1984.- 175с.

29. Романова Л.К. Органы дыхания. В кн.: Атлас сканирующей электронной микроскопии клеток, тканей и органов. / Под ред. Волковой О.В., Шахламова В.А., Миронова А.А.- М.: Медицина Д987.-С.288-293.

30. Романова Л.К. Воздухоносные пути.- В кн: Клеточная биология легких в норме и при патологии./ Под ред. В.В.Ерохина, Л.К.Романова.- М.Медицина, 2000. -С. 95-113.

31. Романова Л.К. Респираторный отдел легких.- В кн: Клеточная биология легких в норме и при патологии./ Под ред. В.В.Ерохина, Л.К.Романова.-М.Медицина, 2000. С.113-153.

32. Романова Л.К., Горячкина В.Л. Цитофизиология секреторных бронхиолярных клеток легкого-источника «антимедиаторов» воспаления.//Арх. пат.-1999.-Т. 61.-№2.-С.20-27.

33. Саркисов Д. С. Структурные основы гомеостаза. В кн: Гомеостаз. / Под ред. Горизонтова П.Д. -М.: Медицина Д981.-С.256-311.

34. Саркисов Д. С., Аруин Л.И., Туманов В.П. Приспособительные и компенсаторные процессы. В кн: Общая патология человека./ Под ред. Струкова А.И., Серова В.В., Саркисова Д.С. -М.: Медицина Д982.-С.443-546.

35. Сахарова Г.М., Антонов Н.С., Андреева С.А. Табококурение как фактор риска болезней человека. В кн.: Респираторная медицина./ Под ред. Чучалина А.Г.- М.: Издательская группа «Гэотар-Медиа», 2007.- Т. 2.- С. 771-782.

36. Северин М. В., Юшков Б.Г., Ястребов А. П. Регенерация тканей при экстремальных воздействиях на организм,- Екатеринбург,УрГМИ, 1993.-184с.

37. Серебряков И.С. Клеточный состав и секреторная активность легочного эпителия в норме и при изменении функционального состояния вегетативной нервной системы: Автореф. дис. .канд. биол. наук.-М.,1984.-42с.

38. Серденко М.М., Розова Е.В., Великанов Э.Б., Тризно Н.Н., Морфофункциональная характеристика аэрогематического барьера легких у крыс при дыхании газовыми смесями с высоким содержанием сероводорода.// Морфология.- 1992.-Т. 102.-№ 5.-С. 120-129.

39. Пальцев М.А., Аничков Н.М. Патологическая анатомия. Частный курс. Часть 1. -М.:Медицина, 2005.-Т.2.-512с.

40. Полунин И. Н., Асфандияров Р.И., Тризно Н.Н. Токсический отек легкого при остром отравлении сероводородсодержащим газом.// Астрахань, 1999.-219с.

41. Полякова B.C., Завалеева С.М., Стадников А.А. Структурная реорганизация воздухоносных и респираторных отделов легких при воздействии неблагоприятных факторов воздушной среды.// Вестник ОГУ.- 2003.-№1,- С.66-69.

42. Черняев A.JL, Самсонова М.В. Патологическая анатомия хронических обструктивных заболеваний легких. В кн: Хронические обструктивные болезни легких./Под ред. Чучалина А.Г.- М.:Бином., СПб.:Невский диалект, 1998. - С. 366-400.

43. Черняев A.JL, Самсонова М.В. Патологическая анатомия легких.Атлас.// М.: Изд-во «Атмосфера», 2004.-112с.

44. Чернеховская Н.Е., Федченко Г.Г., Андреев В.Г., Поваляев А.В. Рентгено-эндоскопическая диагностика заболеваний органов дыхания. Учеб. пособие.//М.: «МЕДпресс-информ», 2007.- 240 с.

45. Чучалин А.Г. (ред.) Клинические рекомендации. Хроническая обструктивная болезнь легких.//М.: Изд-во «Атмосфера», 2003.-200с.

46. Чучалин А.Г. (ред.) Хроническая обструктивная болезнь легких.//М.: Изд-во «Атмосфера», 2003.-520с.

47. Шишкин Г. С. Клеточная выстилка респираторных отделов легких. В кн.: Легкое в норме. Новосибирск: Наука, 1975.- С. 38-59.

48. Adriaensen D., Scheuermann D.W. Neuroendocrine cell and nerves of the lung. // Anat. Rec. 1993.- Vol.236.- P. 70-85.

49. Adriaensen D., Brouns I., Van Genechten J., Timmermass J. Functional Morphology of Pulmonary Bodies: Extremely Complex Airway Receptors.// Anat. Rec.-2003. Vol.270.- P.25-40.

50. Bernard A., Lauwerys R., Noel A. et al. Determination by latex immunoassay of protein 1 in normal and pathological urine. // Clin. Chim. Acta. 1991.-Vol. 201.-P. 231-245.

51. Bernard A., Dumont X., Roels H. The molecular mass and concentrations of protein 1 or Clara cell protein in biological fluids: a reappraisal.// Clin. Chim. Acta.-1993 .-Vol. 223 .-P. 189-191.

52. Bernard A., Roels H., Lauwerys R. et al. Human urinary protein 1: evidence for identity with the Clara cell protein and occurrence in respiratory tract and urogenital secretions.// Clin. Chim. Acta. 1992.-Vol. 207.-P. 239-249.

53. Bernard A., Dumont X., Roels H. Clara cell protein in serum and bronchoalveolar lavage.// Eur. Respir. J. 1992.-№ 5.-P. 1231-1238.

54. Bernard A., Thielemans N., Lauwerys R. et al. The renal handling of protein 1 (Clara cell protein): effect of age, sex and renal dysfunction.// Contrib. Nephrol. -1993.-Vol. 101.-P. 66-70.

55. Bernard A. M., Lauwerys R. R., Noel A. et al. Urine protein 1: a sex-dependent marker of tubular or glomerular dysfunction.// Clin. Chem. 1989.-Vol. 35.-P. 21412142.

56. Bernard A. M., Roels H. A., Buchet J. P. et al. Serum Clara cell protein: an indicator of bronchial cell dysfunction caused by tobacco smoking.// Environ. Res. -1994.-Vol. 66.-P. 96-104.

57. Bernard, A., Hermans C., Van Houte G. Transient increase of serum Clara cell protein (CC16) after exposure to smoke.// Occup. Environ. Med. 1997.-Vol. 54.-P. 63-65.

58. Bernard A. M., Thielemans N. O., Lauwerys R. R. Urinary protein 1 or Clara cell protein: a new sensitive marker of proximal tubular dysfunction.// Kidney. Int. -1994. Vol.47.-P. 34-37.

59. Boers J. E., Ambergen A. W., Thunnissen F. B. Number and proliferation of Clara cells in normal human airway epithelium.// Am. J. Respir. Crit. Care Med. — 1999.-Vol. 159. -P. 1585- 1591.

60. Breuer R., Zajicek G., Christensen T. G. et al. Cell kinetics of normal adult hamster bronchial epithelium.//Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1990.-№2.-P. 51-58.

61. Boers J. E., J. L. M. den Brok, Koudstaal J. et al. Number and proliferation of neuroendocrine cells in normal human airway epithelium.// Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1996.- Vol.154.-P. 758-763.

62. Boers J. E., Ambergen A. W., Thunnissen F. B. Number and proliferation of basal and parabasal cells in normal human airway epithelium.// Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998.-Vol.157.-P. 2000-2006.

63. Clara M. Zur Histobiologie des Bronchialepithels.// Z. Mikrosk. Anat. Forsch. 1937.- Bd 41.-S. 321 -347.

64. Crapo J.D., Barry B.E., Gehr P. et al. Cell number and cell characteristics of nrmal human lung.//Amer. Rev. Respir. Dis. 1982. - Vol. 125. - P. 332 - 337.

65. Deverreux T.R., Domin B.A., Philpot R.M. Xenobiotic metabolism by isolated pulmonary cells. // Pharmacol. Ther. 1989.- Vol.41.- P.243-256.

66. Dierynck I., Bernard A., Roels H. et al. Potent inhibition of both human interferon-gamma production and biologic activity by the Clara cell protein CC16.

67. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1995.- №12.-P. 205-210.

68. Emura M., Riebe M., Germann P., Brockmeyer C. Functional culture of hamster and human airway epithelial cells and its application to pulmonary toxicology. // Exp. Pathol. 1989. - Vol. 37. - № 1-4. - P.224-227.

69. Evans M.J., Cabral- Anderson L.J., Freeman G. Role of the Clara cell in renewal ofthe bronchial epithelium. //Lab. Invest.-1987.-Vol.38.-P.648-655.

70. Evans M.J., Plopper C.G. The role of basal cells in adhesion of columnar epithelium to airway basement membrane. // Am. Rev. Respir. Dis. 1988. - Vol. 138. - № 2.-P.481-483.

71. Guy J., Dhanireddy R., Mukherjee A. B. Surfactant-producing rabbit pulmonary alveolar type II cells synthesize and secrete an antiinflammatory protein, uteroglobin.//Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992.-Vol.189.-P. 662-669.

72. Hackett B. P., Shimizu N., Gitlin J. D. Clara cell secretory protein gene expression in bronchiolar epithelium.// Am. J. Physiol. 1992.-Vol.262.-P. 399-404.

73. Hagen G., Wolf M., Katyal S. L. et al. Tissue-specific expression, hormonal regulation and 5-flanking gene region of the rat Clara cell lOkDa protein: comparison to rabbit uteroglobin.// Nucleic Acids Res. 1990.- Vol.18.-P. 29392946.

74. Hay J. G., Danel C., Chu C. S. et al. Human CC10 gene expression in airway epithelium and subchromosomal locus suggest linkage to airway disease.// Am. J. Physiol.- 1995.-Vol.268.-P. 565-575.

75. Halatek Т., Hermans C., Broeckaert F. et al. Quantification of Clara cell protein in rat and mouse biological fluids using a sensitive immunoassay.// Eur. Respir. J. -1998. №11.-P. 726-733.

76. Harrison G. A. Ultrastructural changes in rat during long term exposure to oxygen.// Exp. Med. Surgery. 1971. - Vol. 29.- № 1-2.- P. 96-106.

77. Harrison M. W., Conell R.S., Campbel J. R. Microcirculatory changes in the lung of the hypoxic and hypovolemic puppy: an electron microscope study.// Ann. Surgery.- 1977.-Vol. 185.-№ 3.-P. 311-317.

78. Haies D.M., Gil J., Weibel E.R. Morphometric study of rat lung cells. I. Numerical and dimensional characteristics of parenchymal cell population. //Amer. Rev.Resp. Dis. 1981. - Vol. 123.-P. 533.

79. Hermans C., Aly O., Nyberg В. I. et al. Determinants of Clara cell protein (CC16) concentration in serum: a reasessment with two different immunoassays. //Clin. Chim. Acta. 1998. - Vol.272.-P. 101-110.

80. Ishii S., Itoh Y., Okutani R. et al. Sex-associated differences in protein 1 values in urine: immunochemical detection of protein 1 in genital tissues.// Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1994.-Vol.32.-P. 31-36.

81. Itoh M., Kaniwa Т., Horiuchi H., Nonaka T.et al. Effect of clenbuterol on sulfur dioxide-induced acute bronchitis in guinea pigs. // Res. Commun. Mol. Pathol. Pharmacol. 1995.-Vol. 87. - № 2. - P. 199-209.

82. Itoh Y., Ishii S., Okutani R. et al. Protein 1: its purification and application in clinical medicine.//J. Clin. Lab. Anal. 1993.-Ж7.-Р. 394-400.

83. Jackson P. J., Turner R., Keen J. N. et al. Purification and partial amino acid sequence of human urine protein 1: evidence for homology with rabbit uteroglobin. //J. Chromatogr. 1988.-Vol.452.-P.359-367.

84. Johnston C. J., Mango G. W., Finkelstein J. N. et al. Altered pulmonary response to hyperoxia in Clara cell secretory protein deficient mice.// Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1997.-Vol. 17.-P. 147-155.

85. Jorens P. G., Sibille Y., Goulding N. J. et al. Potential role of Clara cell protein, an endogenous phospholipase A2 inhibitor, in acute lung injury.// Eur. Respir. J. -1995.- №8.-P. 1647-1653.

86. Kabanda A., Goffin E., Bernard A. et al. Factors influencing serum levels and peritoneal clearances of low molecular weight proteins in continuous ambulatory peritoneal dialysis.//Kidney Int.- 1995.-Vol.48.-P. 1946-1952.

87. Kauffman Sh.L. Cell proliferation in the mammalian lung.//Intern. Rev. Exp. Pathol.- 1980.-Vol. 22.-P. 132-191.

88. Kocamaz E., Kayisli U. A., Ozcaglar H. U., Asar M., Demir R. The effect of ammonia inhalation on lung parenchuma of rat. //Scr. Sei med.-1997.-Vol.30. №1.-P.83-84.

89. Leslie C.C., Mc Cormick-Shannon K., Mason RJ. Heparin-binding growth factors stimulate DNA synthesis in rat alveolar type II cells. //Amer. J. Resp. Cell Mol. Biol. 1990. - Vol. 4. - P. 99 - 106.

90. Lesur O., Bernard A., Arsalane K. et al. Clara cell protein (CC-16) induces a phospholipase A2-mediated inhibition of fibroblast migration in vitro. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1995.-Vol.152.-P. 290-297.

91. Lesur O., Bernard A. M., Begin R. O. Clara cell protein (CC-16) and surfactant-associated protein A (SP-A) in asbestos- exposed workers.// Chest. — 1996. -Vol.109.-P. 467-474.

92. Levin S. W., Butler J. D., Schumacher U. K. et al. Uteroglobin inhibits phospholipase A2 activity.//Life Sci. 1986.-Vol.-38.-P. 1813-1819.

93. Lum H., Schartz L. W., Dungworth D. L. et al. A comparative study of cell renewal after exposure to ozone or oxygen.// Am. Rev. Respir. Dis.- 1978.-Vol.118.-P.335-345.

94. Mackey J.U., Eriksen M., Shafey O. The Tobacco atlas. // American cancer Society. 2006.- 128 p.

95. Masson R. Palmonary alveolar type II epithelial cells and adalt respiratory distress syndrome. //J.West.Med.-1985.-Vol.l43.-№5.-P.611-615.

96. Mason R.J., Williams M.C. Alveolar type II cells. In: The lung. Scientific foundations. /Eds: R.G. Crystal, J.B. West et al. - New York: Raven Press, 1991. -Vol. l.-P. 235-247.

97. Mango G. W., Johnston C. J., Reynolds S. D. et al. Clara cell secretory protein deficiency increases oxidant stress response in conducting airways.// Am. J. Physiol.-1998.-Vol.275.-P. 348-356.

98. Mantile G., Miele L., Cordelia E. et al. Human Clara cell 10-kDa protein is the counterpart of rabbit uteroglobin.// J. Biol. Chem.- 1993.-Vol.268.-P.20343-20351.

99. Massaro G. D., Singh G., Mason R. et al. Biology of the Clara cell. // Amer. J. Physiol.- 1994.-Vol.266.-P. 101-106.

100. Meyrick В., Reid L. The alveolar wall. // Brit. J. Dis. Chest.- 1970.- Vol. 64.-№3.-P. 121-140.

101. Miele L., Cordelia E., Miele G. et al. Uteroglobin: structure, molecular biology, and new perspectives on its function as a phospholipase A2 inhibitor. //Endocr. Rev. 1987.-Vol.98.-P. 474-490.

102. Muller В., Seifart C., Barth P.J. Effect of pollutants on the pulmonary surfadtant system. // Eur. J. Clin. Ineest.-1998.-Vol.28.- №9.- P.762-777.

103. Murray C.J.L., Lopez A.D. Evidence-based health policy-lessons from the Global Burden of Disease Study. // Science.-1996.-Vol. 274.-№3.-P.740.

104. Nikula K.J., Wilson D.W. Response of rat tracheal epithelium to ozone and oxygen exposure in vitro. // Fundam. Appl. Toxicol. 1990. - Vol. 15. - № l.-P. 121131.

105. Nomori H., Morinaga S., Kobayashi R. et al. Protein 1 and Clara cell 10-kDa protein distribution in normal and neoplastic tissues with emphasis on the respiratory system.//Virchows Arch.- 1994.-Vol.424.-P. 517-523.

106. Nomori H., Horio H., Takagi M. et al. Clara cell protein correlation with hyperlipidemia.//Chest. 1996.-Vol.110.-P. 680-684.

107. Pattle R.E. Properties, function and origin of alveolar lining layer. //Nature.-1955.-Vol.l75.-P.l 125-1126.

108. Peri A., Cordelia E., Miele L. Miele et al. Tissue-specific expression of the gene coding for human Clara cell 10-kD protein, a phospholipase A2-inhibitoiy protein.//J. Clin. Invest. 1993.-Vol.92.-P. 2099-2109.

109. Phelps D.S., Floros J. Localization of pulmonary surfactant proteins using immunohistochemistry and tissue in situ hybridization. // Exp. Lung Res.-1991.-Vol.l7.-№6.- P.985-995.

110. Pino M.V., Levin I.R., Stovall M.I., Hyge D.M. Pulmonary inflammation and epithelial injury in response to acute ozone exposure in the rat. // Toxical. Appl. Pharmacol. 1992. - Vol. 112. - № 1. - P.64-72.

111. Plopper C. G., Hyde D. M., Buckpitt A. R. Clara cells. In R. G. Crystal and J. B. West, editors. The Lung: Scientific Foundations.// New York: Raven Press,1991.-P. 215-228.

112. Possmayer F. Metabolism of phosphatidylcholine in lung. In: Phosphatidilcholine metabolism. /Ed. D.E. Vance. - Boca Raton, FL: CRC Press, 1989.-P. 205-223.

113. Saladino A.J., Willey J.C., Lechner J.F., Crafstrom R.C. Effects of formaldehyde, acetaldehyde, benzoyl peroxide, and hydrogen peroxide on cultured normal human bronchial epithelial cells. // Cancer. Res. 1985.- Vol. 45.- № 6.-P.2522-2526.

114. Sato Т., Shamoto M. A simple rapid polychrome stain for epoxyembedded tissue. // Staim Technol.-1973.-Vol.48. №5.-P. 223-227.

115. Singh G., Katyal S. L. An immunologic study of the secretoiy products of rat Clara cells. // J. Histochem. Cytochem. 1984. - Vol. 32. - P. 49-54.

116. Singh G., Katyal S. L., Brown W. E. et al. Amino-acid and cDNA nucleotide sequences of human Clara cell 10 kDa protein.// Biochim. Biophys. Acta. 1989. -Vol. 1007.-№2. -P.243.

117. Singh G., Katyal S. L. Clara cells and Clara cell 10 kD protein (CC10). // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1997.-Vol.17.-P. 141-143.

118. Singh G., Singh J., Katyal S. L. et al. Identification, cellular localization, isolation, and characterization of human Clara cell-specific 10 KD protein.// J. Histochem. Cytochem. -1988.-Vol.36.-P. 73-80.

119. Singh G., Katyal S. L., Brown W. E. et al. Clara cell 10 kDa protein (CC10): comparison of structure and function to uteroglobin.// Biochim. Biophys. Acta.-1990.- Vol.1039.- P.348-355.

120. Singh G., Katyal S. L. Clara cells and Clara cell 10 kD protein (CC10). // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -1997. Vol.17. - P. 141-143.

121. Shijubo N., Y. Itoh Т., Yamaguchi Y. et al. Serum and BAL Clara cell 10 kDa protein (CC10) levels and CClO-positive bronchiolar cells are decreased in smokers.// Eur. Respir. J. 1997. - Vol. 10. - P. 1108 - 1114.

122. Smoking and Tobacco Monograph Series. //U.S. Departament of Health and Human Services, National Institute of Health, National Cancer Institute.- 2006.-Vol. 17.- №1.- P.191.

123. The European Tobacco Control Report 2007. //World Health Organzation.-2007.- 153 p.

124. Umland Т. C., Swaminathan S., Singh G. et al. Structure of a human Clara cell phospholipid-binding protein-ligand complex at 1.9 A resolution.// Nat. Struct. Biol.1994. -№1. P. 538-545.

125. Van Vyve Т., Chanez P., Bernard A. et al. Protein content in bronchoalveolar lavage fluid of patients with asthma and control subjects.// J. Allergy Clin. Immunol.1995.- Vol.95.- P.60-68.

126. Van Winkle L. S., Buckpitt A. R., Nishio S. J.et al. Cellular respnse in naphthalene induced Clara cell unjury and bronchiolar epithelial repair in mice. //Amer. J. Physiol.-1995.-Vol.269.-№6.-P.800-818.

127. Weibel E. R., Gil J. Electron microscopic demonstration of an extracellular duplex lining layer of alveoli. //Resp. Physiol. -1968. №4. - P. 42-57.

128. Williams M.C. Conversion of lammellar body membranes into tubular myelin in alveoli of fetal rat lungs. //J. Cell. Biol. 1977. - Vol. 72. - P. 260 - 277.

129. Williams M.C. Endocytosis in alveolar type II cells: effect of charge and size of tracers. //Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1984. - Vol. 72. - P. 6054 - 6058.

130. Wolf M., Klug J., Hackenberg R. et al. Human CC10, the homologue of rabbit uteroglobin: genomic cloning, chromosomal localization and expression in endometrial cell lines. //Hum. Mol. Genet. 1992. - №1.- P. 371-378.

131. Yoneda K. Pilocarpine stimulation of the bronchiolar Clara cell secretion. //Lab. Invest. 1977. - Vol. 37. - P. 477 - 482.

132. Zeltner T.B., Caduff J.H., Gehr Fret al. The postnatal development and growth of the human lung. I. Morphometry. // Resp. Physiol. 1987. - Vol. 67. - P. 247 -267.

133. Zeltner T.B., Burri P.H. The postnatal development and growth of the human lung. II. Morphometry .//Resp. Physiol. 1987. - Vol. 67. - P. 269 - 282.