Сравнительное изучение иммунобиологических свойств вакцинных штаммов Bacillus anthracis с целью повышения эффективности вакцинации коз тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Федюшин Дмитрий Владимирович

• Федюшин Дмитрий Владимирович
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Федюшин Дмитрий Владимирович

ВВЕДЕНИЕ

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА I. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о сибирской язве

1.2 Этиология сибирской язвы

1.3 Факторы вирулентности Bacillus anthracis

1.4 Индикация и идентификация Bacillus anthracis

1.5 Вопросы иммунологии сибирской язвы и всемирные методы контроля сибиреязвенных вакцин

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 ОПИСАНИЕ ИСПОЛЬЗОВАННЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЙ, МАТЕРИАЛОВ И ОБОРУДОВАНИЯ

2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1 Оценка качества вакцин против сибирской язвы отечественных производителей

2.2.2 Анализ поствакцинальных осложнений у вакцинированных против сибирской язвы коз на территории Российской Федерации

2.2.3 Сравнительное изучение свойств культур сибиреязвенных вакцинных штаммов и изготовление мини серий образцов стандартных культур для иммунизации коз

2.2.4 Сравнительная характеристика сибиреязвенных вакцинных штаммов

2.2.5 Определение чувствительности коз разных пород к сибиреязвенным вакцинам и культурам вакцинных штаммов Bac. anthracis 55-ВНИИВВиМ, 34F2, СТИ-1

2.2.6 Определение оптимальной иммунизирующей дозы

сибиреязвенных вакцинных штаммов Bacillus anthracis 55-ВНИИВВиМ, 34F2,

2

СТИ-1 для коз. Разработка схемы иммунизации коз с периодическим контролем титра антител в сыворотке крови животных в РНГА и в тесте пассивной защиты на мышах

2.2.6.1 Определение титра антител в сыворотке крови вакцинированных животных

2.2.6.2 Оценка иммунного ответа вакцинированных коз в тесте пассивной защиты на белых мышах

2.2.7 Сравнительная оценка безвредности вакцин против сибирской язвы из штамма 55-ВНИИВВиМ на кроликах, овцах и козах

ГЛАВА III. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ГЛАВА IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

4.1 Выводы

4.2 Практическое использование полученных научных результатов

4.3 Рекомендации по использованию научных выводов

ГЛАВА V. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительное изучение иммунобиологических свойств вакцинных штаммов Bacillus anthracis с целью повышения эффективности вакцинации коз»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. Сибирская язва особо опасная, острая септическая болезнь животных многих видов и человека, вызываемая Bacillus anthracis, характеризующаяся септицемией, поражением кожи, кишечника, лёгких, лимфатических узлов [8, 93, 94, 95, 28]. Возникнув в какой-либо местности впервые, она может сохранять угрозу повторных вспышек многие десятилетия [48, 216].

В Российской Федерации ежегодно осуществляется массовая вакцинация животных против сибирской язвы. При этом, у части иммунизированных животных разных видов регистрируют поствакцинальные осложнения, иногда с летальным исходом. В связи с чем в некоторых странах для иммунизации коз и лошадей против сибирской язвы выпускают специальные вакцины. При выявлении поствакцинальных реакций животных подвергают лечению с использованием сибиреязвенного иммуноглобулина, антибиотиков и симптоматических средств [22, 41, 42], что исключает формирование у них поствакцинального иммунитета. В итоге, в хозяйствах остаются не иммунные животные, восприимчивые к заражению возбудителем сибирской язвы.

С учётом вышеизложенного научно-исследовательскую работу, посвященную оценке гуморального ответа у вакцинированных коз с использованием разных вакцинных штаммов Bacillus anthracis с оптимизацией их дозировки и схемы применения следует считать актуальной.

Степень разработанности темы. История разработки специфической профилактики сибирской язвы начинается во второй половины 19 века. Так, Bacillus anthracis стала первым открытием среди возбудителей заразных болезней, сделанным Робертом Кохом в 1875 году. Затем французский исследователь Август Шаво (1879-1880 гг.) установил, что овцы становились устойчивыми к заболеванию при введении им малых количеств крови, контаминированной возбудителем сибирской язвы. Решающий вклад в

создание капсульных сибиреязвенных вакцин внес Л. Пастер, разработавший в 1877-1879 исторически первую вакцину [138, 152]. В 1930 году в ЮАР Макс Стерн разработал ветеринарную бескапсульную вакцину.

В нашей стране также во второй половине XIX в. образовались группы исследователей, занимающихся разработкой вакцинопрофилактики болезни у животных. В 1882- 884 году Л.С. Ценковский создал самостоятельно вакцину, аналогичную пастеровской.

Первые в мире сибиреязвенные вакцины для медицинского применения были созданы на основе спор живых бескапсульных штаммов Bacillus anthracis советскими военными учеными в конце 1930-х гг. В частности, Н.Н. Гинсбургом в 1930 году была разработана бескапульная вакцина СТИ. В 1933 году С.Г. Колесов изолировал штамм В. anthracis Шуя-2, из которого был селекционирован бескапсульный вариант Шуя-15, послуживший основой для создания в 1951-1952 гг. сибиреязвенной вакцины ГНКИ [55, 87].

Условно исторические этапы по разработке сибиреязвенных вакцин можно представить следующим образом: получение капсулообразующих штаммов сибиреязвенного микроба с ослабленной вирулентностью и использование их в качестве живых вакцин для животных (с 1879 г. по 1930-е гг.); получение протективного антигена B. anthracis и его использование в составе химических вакцин для людей и животных (с 1879 г. по 1960-е гг.); получение бескапсульных штаммов Bacillus anthracis с ослабленной вирулентностью и использование их в качестве живых вакцин для людей и животных (со середины 1930-х гг. по 1960-е гг.); разработка комбинированных сибиреязвенных вакцин для людей и животных, включающих бескапсульные штаммы и протективный антиген Bacillus anthracis (начало 1960-1990-е гг.); получение генно-инженерными методами сибиреязвенных вакцин для людей и животных на основе штаммов-продуцентов близкородственных бацилл (начало 1980-х гг. - настоящее время) [87, 9 ].

На сегодняшний день в Российской Федерации в ветеринарной практике

широко применяется только живая вакцина из бескапсульного штамма

5

Bacillus anthracis 55-ВНИИВВиМ, а в медицинской - вакцина из штамма СТИ-1.

За рубежом для профилактики сибирской язвы у животных применяются вакцины из штаммов Bacillus anthracis 34F2, Ихтиман (Болгария), 1190-R (Румыния) и другие. Все перечисленные вакцинные штаммы содержат плазмиды рХО1 и не содержат плазмиды pXO2 [118, 119].

Работы по совершенствованию специфической профилактики сибирской язвы животных и человека, в том числе по разработке высокоиммуногенных и безопасных противосибиреязвенных вакцин, по-прежнему актуальны.

Цель исследований. Цель работы - сравнительное изучение известных вакцинных штаммов Bacillus anthracis с целью определения наиболее иммуногенной для животных вакцины, ее дозы и схемы применения, исключающих проявления выраженных поствакцинальных осложнений у коз разных пород.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

- провести анализ поствакцинальных осложнений у вакцинированных против сибирской язвы коз на территории Российской Федерации;

- Контроль качества сибиреязвенных вакцин из штамма Bacillus anthracis 55-ВНИИВВиМ отечественных производителей;

- Контроль качества сибиреязвенных вакцинных штаммов Bacillus anthracis 55-ВНИИВВиМ, СТИ-1, 34F2, 1190R-Stamatin, Пастера и стандартной заражающей культуры М-71 в соответствии с паспортным данными и нормативными документами;

- провести сравнительное изучение свойств культур сибиреязвенных вакцинных штаммов 55-ВНИИВВиМ, СТИ-1, 34F2, 1190R-Stamatin, Пастера и изготовить мини серии образцов стандартных культур для иммунизации морских свинок и коз;

- определить чувствительность коз разных пород к сибиреязвенным вакцинным штаммам с учётом местных и общих поствакцинальных реакций, а также сравнительной оценки иммуногенных свойств данных штаммов;

- установить оптимальную иммунизирующую дозу сибиреязвенных штаммов для коз по результатам оценки титра антител у вакцинированных животных в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) и теста пассивной защиты на мышах;

- изучить безвредность вакцины против сибирской язвы из штамма 55-ВНИИВВиМ на кроликах, овцах и козах;

- разработать оптимальные схемы иммунизации коз против сибирской

язвы;

- Разработка проекта инструкции по применению вакцины против сибирской язвы.

Научная новизна. Определена оптимальная иммунизирующая доза сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ для коз. Предложена схема иммунизации коз против сибирской язвы.

Оптимизирован контроль безвредности сибиреязвенной вакцины в части повышения выявляемости нежелательных поствакцинальных реакций.

Предложена схема контроля качества сибиреязвенной вакцины по показателю «безвредность» с учётом требований международных стандартов.

Теоретическая и практическая значимость работы. Применение вакцины из штамма Bacillus anthracis 55-ВНИИВВиМ в установленной оптимальной дозе обеспечивает формирование надлежащего иммунного ответа и исключает проявление поствакцинальных осложнений у коз высокочувствительных пород, требующих проведения медикаментозного лечения.

Эффективная схема иммунизации обеспечит расширение территорий с минимальным риском инфицирования животных и людей возбудителем сибирской язвы.

Подготовлен проект внесения изменений в НД на «Вакцину против сибирской язвы животных из штамма 55-ВНИИВВиМ живой сухой» и в инструкцию по ее применению.

Методология и методы исследования. Диссертационная работа выполнена с использованием средств и методов, выбор которых был обусловлен целью и задачами исследования. Это обеспечило внутреннюю логику и порядок проведения исследований. Основными направлениями научно-исследовательской работы стали изучение свойств разных вакцинных сибиреязвенных штаммов, изучение чувствительности коз разных пород к сибиреязвенным вакцинным штаммам с учётом местных и общих поствакцинальных реакций. Также определяющее значение имели исследования по сравнительной оценке иммуногенных свойств используемых в работе сибиреязвенных штаммов, определению их оптимальной иммунизирующей дозы для коз по результатам оценки титра антител у вакцинированных животных в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) и теста пассивной защиты на белых мышах и наконец - разработка оптимальной схемы иммунизации коз. Объектами исследования служили культуры разных штаммов Bacillus anthracis и вакцины против сибирской язвы, лабораторные (белые мыши, морские свинки и кролики) и сельскохозяйственные животные (козы зааненской, альпийской и русской белой породы и беспородные овцы). В работе использовали микробиологические, серологические, биологические, клинические методы, а также методы статистического анализа.

Степень достоверности. Представленные результаты были получены при использовании утвержденных методов, государственных стандартов, нормативной документации. Исследования проведены на сертифицированном оборудовании и на достаточном количестве объектов. Выборка биоматериала является репрезентативной и достоверно отражает признаки генеральной совокупности изучаемых объектов.

Средние значения и стандартные ошибки подсчитывали в программе Excel, входящей в программное обеспечение Microsoft Office.

Соответствие паспорту специальности. Представленная диссертационная работа соответствует паспорту специальности с шифром 06.02.02 - Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология и раскрывает основные критерии формулы специальности. При осуществлении исследовательской работы изучены морфологические, культуральные, генетические, иммуногенные, реактоганные свойства вакцинных штаммов Bacillus anthracis, проанализированы поствакцинальные осложнения у вакцинированных коз. Иммуногенные свойства вакцинных штаммов были подтверждены контрольным заражением морских свинок после иммунизации, а у коз с помощью РНГА и пассивной защиты на белых мышах.

Работа соответствует паспорту специальности 06.02.02. - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микробиология с микотоксикологией и иммунология (п. 1-5).

Степень достоверности и апробация результатов работы. Все этапы исследования выполнены в аккредитованной лаборатории ФГБУ «ВГНКИ» с использованием сертифицированных откалиброванных приборов и оборудования, что обеспечивает высокую достоверность полученных результатов. Полученные данные обработаны методом статистического анализа.

Материалы диссертационной работы рассмотрены, обсуждены и одобрены на заседаниях Ученого совета ФГБУ «ВГНКИ», а также на НТС Россельхознадзора.

Основные положения работы доложены и одобрены на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней, общих для человека и животных», г. Ставрополь, 24 - 25 апреля 2019 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 научные работы, в том числе 3 статьи — в изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Разработаны предложения по внесению изменений в НД на сибиреязвенные вакцины из штамма 55-ВНИИВВиМ и инструкцию по их применению.

Личный вклад автора. Все этапы работы: анализ поствакцинальных осложнений у вакцинированных против сибирской язвы коз на территории Российской Федерации, оценка качества вакцин против сибирской язвы отечественных производителей в соответствии с ГОСТ Р 52616-2006, сравнительное изучение свойств культур сибиреязвенных вакцинных штаммов и изготовление мини серий образцов стандартных культур для иммунизации животных, определение чувствительности коз разных пород к сибиреязвенным вакцинам и культурам некоторых вакцинных штаммов Bacillus anthracis, периодический контроль титра антител в сыворотке крови вакцинированных животных в РНГА и в тесте пассивной защиты на белых мышах, сравнительная оценка безвредности вакцин против сибирской язвы из штамма 55-ВНИИВВиМ на кроликах, овцах и козах, сбор и анализ полученных результатов, оформление выносимых на защиту основных положений, заключений и выводов; подготовка к публикациям результатов исследований были выполнены непосредственно автором диссертационной работы при участии в выполнении ряда исследований к.вет.н., доцента Цатурян Л. Г., д.вет.н. Склярова О.Д., к.вет.н. Борового В.Н. В выполнении отдельных фрагментов работы принимали участие сотрудники ФГБОУ ВПО «Московского государственного университета пищевых производств» к.б.н., доцент Нитяга И.М, «Российского университета дружбы народов» к.б.н., доцент Хоменец Н.Г. Их участие отражено в совместных публикациях. Всем соавторам выражаю глубокую благодарность за неоценимую консультативную и техническую помощь при выполнении отдельных элементов работы.

Объем и структура диссертационной работы. Материалы

диссертационной работы изложены на 164 страницах машинописного текста

и включает разделы: введение, аналитический обзор литературы, собственные

исследования (материалы и методы, результаты собственных исследований),

обсуждение полученных результатов, заключение, сведения о практическом

использовании результатов научных исследований, рекомендации по

10

использованию научных выводов, список использованной литературы, список сокращений и приложения. Библиографический список включает в себя 221 источник научной литературы, из которых 105 иностранных. Работа содержит 4 таблицы и 23 рисунка.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- Анализ поствакцинальных осложнений у вакцинированных против сибирской язвы коз на территории Российской Федерации.

- Оценка качества вакцин против сибирской язвы отечественных производителей в соответствии с ГОСТ Р 52616-2006 «Вакцина против сибирской язвы животных из штамма 55-ВНИИВВиМ живая».

- Сравнительное изучение свойств культур сибиреязвенных вакцинных штаммов и изготовление мини серий образцов стандартных культур для иммунизации коз.

- Определение чувствительности коз разных пород к сибиреязвенным вакцинам и культурам вакцинных штаммов Bacillus anthracis.

- Определение оптимальной иммунизирующей дозы сибиреязвенных вакцинных штаммов Bacillus anthracis 55-ВНИИВВиМ, 34F2, СТИ-1 для коз. Разработка схемы иммунизации коз с периодическим контролем титра антител в сыворотке крови животных в РНГА и в тесте пассивной защиты на мышах.

- Сравнительная оценка безвредности вакцин против сибирской язвы из штамма 55-ВНИИВВиМ на кроликах, овцах и козах.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ ГЛАВА I. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о сибирской язве

Общие сведения. Как зоонозное заболевание сибирская язва остается актуальной проблемой как в ветеринарии, так и для медицины в мировом масштабе. Случаи сибирской язвы ежегодно регистрируются среди людей и животных [7, 64, 68, 96, 120, 166, 167, 168, 199, 219, 220]. По данным Б.Л. Черкасского, сибирская язва не представляет серьезной социально-экономической проблемой для Российской Федерации [110], но не смотря на это эпизоотическая ситуация по сибирской язве на территории РФ в последнее десятилетие остается без существенных изменений, что подтверждается статистикой регистрации неблагополучных пунктов в 2013, 2014, 2015, 2016, 2017, 2018, 2019, 2020, 2021 гг., количество которых составляет соответственно 3, 3, 2, 6, 0, 2, 2, 1, 1. [115, 113, 14, 21, 69, 77, 74, 81, 92].

Последние отчеты Международного Эпизоотического Бюро показывают, что это заболевание все еще является энзоотическим в большинстве стран Африки и Азии, ряде европейских стран и спорадически встречается во многих других странах мира [219, 220]. Причиной такого обстоятельства могут быть социальные, биологические и генетические факторы, за счет которых появляются измененные варианты возбудителя сибирской язвы. Стационарное неблагополучие, по мнению ряд авторов, обусловлено, за счет наличия почвенных очагов возбудителя инфекции, несовершенства учета животных и неполного охвата их поголовья вакцинацией [15, 23, 47, 50, 51, 62, 75,104].

Периодически, после вакцинации преимущественно у коз и реже у

лошадей наблюдается повышение температуры тела и развитие в месте

инъекции отека, распространяющегося в области подгрудка, подчелюстного

пространства и головы, увеличение регионарных лимфатических узлов и

ухудшение общего состоянии, вплоть до летального исхода, что указано в

12

инструкции по применению вакцины против сибирской язвы животных из штамма 55-ВНИИВВиМ живой сухой, ФКП Орловской биофабрики.

Поствакцинальные осложнения при применении сибиреязвенных вакцин характерны не только для нашей страны. О тяжелых поствакцинальных осложнениях у коз и лам сообщается в Рекомендациях МЭБ по диагностическим тестам и вакцинам наземных животных [121, 198].

В Российской Федерации животных с выраженными поствакцинальными реакциями подвергают незамедлительному лечению с использованием сибиреязвенного иммуноглобулина, антибиотиков и симптоматических средств, что исключает формирование у них поствакцинального иммунитета. В итоге, в хозяйствах остаются не иммунные животные, восприимчивые к заражению возбудителем сибирской язвы.

Рисунок 1 - Глобулин и сыворотка противосибиреязвенная.

Анализ эпидемиологических данных сибирской язвы показывает:

- примерно 85 % случаев заболевания людей сибирской язвой обусловлены заражением от крупного, и в два раза меньше от мелкого рогатого скота;

- распространение сибирской язвы среди людей связано с применением инфицированных продуктов животноводства;

- частота заражения людей увеличивается во время разделки туш вынужденно забитых, больных сибирской язвой животных или переработки сырья животного происхождения, контаминированного спорами Bacillus anthracis;

- преимущественное поражение животных в личных хозяйствах сельских жителей [97].

Анализ сведений о неблагополучных пунктах по сибирской язве в течении нескольких десятилетий позволяет утверждать, что эпизоотическая обстановка стабилизировалась. Но смотря на это, не следует игнорировать факт, что низкий уровень заболеваемости может привести к ослаблению внимания к сибирской язве, учитывая еще постоянную угрозу биотерроризма. С учетом вышеизложенного, постоянное совершенствование качества специфических иммунобиологических лекарственных препаратов, а также при вакцинации полный охват восприимчивого поголовья животных являются актуальной проблемой мирового уровня [97].

1.2 Этиология сибирской язвы

Возбудитель сибирской язвы принадлежит (по-Берджи, 1986) к классу Schizomycetes; отряду Eubacteriales; семейству Bacillaceae; роду и подроду Bacillus; типовому виду Bacillus anthracis [11]. Бациллу впервые обнаружил Ф. Поллендер в 1849г, но официальной датой открытия бациллы считается 1863 год (К. Давен) [94]. Bacillus anthracis представляет собой грамположительную, аэробную или факультативно анаэробную эндоспоровую палочковидную бактерию. Как правило в мазках, приготовленных из патологического материала палочки образуют цепочки, имеющие длину от двух до несколько клеток, в мазках, полученных из культур in vivo, они образуют длинные цепочки, чем и обусловлено липкость колоний, образующихся на твердых питательных средах и хлопьевидный осадок на дне бульонной культуры без помутнения питательной среды. Характерны также резко обрубленные концы

бактериальных клеток обращенные друг к другу и слегка закругленные свободные концы [10, 67, 93, 134, 135]. Размер клеток, а также частичная потеря грамположительности через 24-48 часов инкубации на питательном агаре также варьируется от штамма к штамму [121]. Тем не менее они довольно крупные и достигают от 1-1,3 до 3-10 мкм.

При неблагоприятных условиях сибиреязвенная бацилла формирует споры. В спорангии образуется только одна спора, располагающаяся центрально или субтерминально [94, 95, 210].

Биологическая роль спорообразования - сохранения вида. Споры способны долго сохранять генетический материал исходных клеток и обеспечивать передачу основных свойств потомству в последующих генерациях [93, 148].

N. Оге1е1 (1952, 1957), Б. Вау1еБ (1960) и другие авторы считают, что спорообразованию сибиреязвенных бацилл способствует достаточный доступ кислорода, температура от 26°С до 30°С, дефицит питательных веществ, определенная влажность. Также согласно представленным данным К.М. Синяк с соавт. (1983, 1988), спорообразованию способствует нейтральная или слабощелочная реакция среды [11, 98, 148].

Рисунок 2 - Возбудитель сибирской язвы.

PiCHQplabt (spore-«IГ f)

tnuspui ¡um

^notCpH^sC пинт iiri«-

Рисунок 3 - Строение споры Bacillus anthracis.

Выше 42°С и ниже 12°С, а также в условиях анаэробиоза возбудитель не образует споры [10, 11].

G. Knays (1960) и К.Ф. Робинаи (1957) установили, что спорообразование начинается с формирования составного ядра, которое образуется из первичных ядер цитоплазмы. Основное вещество, составляющее первичные ядра называется нуклеоплазмой и состоит из комплекса РНК и метафосфата. Оно превращается в проспору, а в дальнейшем по мере образования клеточной стенки - в спору. Происходит поглощение Са2+, затем синтез дипиколиновой кислоты (ДПК).

При недостатке Са2+количество ДПК в спорах уменьшается. Такие споры слабо преломляют свет и неустойчивы при хранении. Внесение в среду ионов Са2+ на ранних стадиях спорообразования образуются нормальные светопреломляющие и устойчивые при хранении споры.

По данным J. Powell, R. Strang (1956), ДПК найдена у аэробных и анаэробных спор. Она составляет 6-12% от сухой массы спор и полностью отсутствует в вегетативных клетках. По мнению авторов ДПК образует тесную связь с Са2+ и белком как комплекс ДПК - Са2+-белок, от которого зависит степень устойчивости бактериальных спор.

Согласно исследованиям I. Lewis (1960) комплекс ДПК - Са2+ - белок обусловливает сжатие клеточной стенки споры, подцеживая ее в безводном

состоянии, чем объясняется высокая степень устойчивости спор к неблагоприятным воздействиям окружающей среды [10, 97].

П.Н. Бургасов и Г. И. Рожков (1984) процесс спорообразования разделяют на 4 основные стадии: подготовительную, образование проспор, готовых спор и зрелых спор.

В подготовительной стадии в бациллах появляется слабо заметная зернистость в результате концентрации цитоплазмы. Далее, объем клеток уменьшается, в многоклеточных нитях отмечаются признаки дифференциации бацилл.

В стадии образования проспор в центре бациллы появляются мелкие светопреломляющие точки, которые, постепенно увеличиваются и принимают округлую форму.

При образовании готовых спор многоклеточные нити распадаются на более короткие с одновременным распадом спорангий (вегетативные клетки, в которых находятся споры). Происходит освобождение спор от вегетативных клеток (Рис. 4).

Рисунок 4 - Цикл вегетативного роста, спорообразования и прорастания спор.

Образования зрелых спор характеризуется уплотнением клеточных стенок и цитоплазмы. Остатки спорангия полностью распадаются и лизируются [11, 12, 19].

Зрелые споры отличаются хорошей светопреломляемостью. Клетки с незавершенным спорогенезом меняют форму, укорачиваются и относительно быстро отмирают и подвергаются лизису. Продолжительность спорогенеза зависит от состава питательной среды, условий культивирования и качества посевного материала. По данным авторов, величина зрелых спор с агаризованой среды составляет в среднем 1,5х1 мкм, а из бульонных культур - 1,2х0,7 мкм.

Высокая устойчивость зрелых спор к различным воздействиям связана с наличием плотной многослойной оболочки (Рис. 3), низким содержанием в ней воды и присутствием кальциевой соли ДПК. В 1967 г. P.Gerchardt установил, что вегетативная клетка содержит 76,6% воды, прорастающая спора - 73%, а покоящаяся спора - 64,8%.

Продолжительность жизнеспособности спор зависит не только от состава питательной среды, а также условий культивирования и хранения. Например, споры, образовавшиеся при температуре 18-20°С, более резистентны, чем споры, сформировавшиеся при 35-38°С [10,11].

Споры вакцинного штамма СТИ, полученные с плотных питательных сред, обладают большей устойчивостью при хранении по сравнению с аналогичными спорами, полученными в жидких питательных средах. Результаты исследования многочисленных авторов показывают, что это объясняется более низким содержанием в последних (примерно на 30-40%) дипиколината кальция по сравнению со спорами с агаризованных сред.

П.И. Бургасов и Г.И. Рожков (1984) считают, что споры вакцинного штамма СТИ на плотной среде сохраняются в 30% растворе глицерина и дистиллированной воде при температуре 0-4 0С без снижения жизнеспособности в течение 30 лет наблюдения [90, 98].

Причиной гибели спор, по мнению H. Halworson (1959) и других авторов, является их переход в предвегетативное состояние, которое характеризуется набуханием клеточной стенки и цитоплазмы, активацией энзиматических процессов и выходом из клеток дипиколината кальция. Аналогичные данные представляют H. Halworson (1959) и L. Rode, J. Foster (1963). Они считают, что сначала нарушается клеточная стенка, водопроницаемостью, а позже после проникновения воды растворяются соли дипиколиновой кислоты и активируются энзиматические реакции, побуждающие споры к жизни и прорастанию.

Некоторые исследователи на основании морфологических изменений в процессе споруляции выделяют не четыре, а семь стадий [97].

С целью выявления зрелых спор существуют разные способы окраски. Установлено, что традиционно применяемый метод Пешкова не дает возможность оценить состояние оболочки спор, отличить погибшие или проростающие споры от покоящихся. Результаты длительных опытов разных исследователей, показали, что лучше всего использовать метод Циля-Нильсена. При этом данные К.Н. Шерстобаева (1956) и других исследователей показывали, что споры окрашиваются не одинаково, а в зависимости от их физиологического состояния. По этому принципу их можно поделить на несколько тинкториальных типов:

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Федюшин Дмитрий Владимирович, 2022 год

ГЛАВА 5. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абалакин, В. А. Влияние летального сибиреязвенного токсина на функциональную активность перитонеальных мононуклеарных фагоцитов и полиморфноядерных нейтрофилов / В. А. Абалакин, Н. П. Буравцева, Б. Л. Черкасский. - Текст : непосредственный // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1990. - №2. - С.62-67.

2. Абалкин, В. А. Влияние протективного антигена на формирование иммунитета под действием сибиреязвенных живых вакцин / В. А. Абалкин, Н. П. Буравцева, Б. Л. Черкасский. - Текст : непосредственный // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1990. - № 5. - С. 72-75.

3. Абалакин, В. А. Оценка антитоксического противосибиреязвенного иммунитета / В. А. Абалакин. - Текст : непосредственный // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1990. - №12. - С.78-82.

4. Агбарян, А. Г. Возможности использования некоторых праймеров в ПЦР для индикации и сибиреязвенного микроба / А. Г. Агбарян, Е. И. Еременко, Н. В. Саркисова. - Текст : непосредственный // Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 70-летию НИИ микробиологи МО РФ - Киров : Изд-во: Научно-исследовательский институт микробиологии МО РФ, 1998. - С. 40.

5. Аксенов М. Ю. Диагностика инфекционных заболеваний с помощью метода полимеразной цепной реакции / М. Ю. Аксенов, А. Л. Гинцбург. - Текст : непосредственный // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. - 1993. - №4. - С. 3-8.

6. Атипичные случаи сибирской язвы у животных / Н. Г. Ипатенко, Н. Т. Татаринцев, А. А. Маничев [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1988. - № 8. - С. 32-34.

7. Ашаханов, Г. М. Сибирская язва животных в республиках Северного Кавказа / Г. М. Ашаханов, К. Р. Ургуев. - Текст : непосредственный // Актуальные вопросы диагностики, профилактики борьбы с болезнями

сельскохозяйственных животных: материалы Международной научно-практической конференции. - Ставрополь, 1999. - С. 40-42.

8. Бакулов, И.А. Сибирская язва сельскохозяйственных и диких животных и меры профилактики в России / И.А. Бакулов. - Текст : непосредственный // Вопросы микробиологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы: Сборник научных работ. - Ульяновск. - 1998. - С. 1020.

9. Бакулов И. А. Новые формы сибиреязвенных вакцин из штамма 55-ВНИИВВиМ и способ их внутрикожного применения с помощью безыгольного инъектора / И. А. Бакулов, В. А. Гаврилов, Ю. В. Числов. - Текст : непосредственный // Диагностика профилактика и меры борьбы с особо опасными экзотическими болезнями животных : материалы международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ВНИИВВиМ. -Покров. - 1998. - С. 306-308.

10. Бакулов, И. А. Сибирская язва (антракс). Новые страницы в изучении «старой» болезни / И. А. Бакулов, В. А. Гаврилов, В. В. Селиверстов. - Текст : непосредственный. - Владимир: Изд-во «Посад». - 2000. - 284 с.

11. Бакулов, И.А. Сибирская язва (антракс): новые страницы к изучению старой» болезни / М.А. Бакулов, В.А. Гаврилов, В.В. Селиверстов. -Текст : непосредственный. - Владимир: Изд-во «Посад». - 2001. - 281с.

12. Белоконов, И.И. Электронно-микроскопические исследования сибиреязвенной бациллы в процессе образования и прорастания спор: специальность 03.00.07 «Микробиология» : автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Белоконов И. И.; Харьковский зооветеринарный институт. - Харьков, 1970. - 18 с. - Библиогр.: с. 16-18. - Место защиты: Харьковский зооветеринарный институт. - Текст :

непосредственный.

13. Биологические микрочипы, содержащие иммобилизованные в гидрогеле нуклеиновые кислоты, белки и другие соединения: свойства и

приложения в геноме / В. Е. Барский, А. М. Колинский, Ю. П. Лысов [и др.]. -

93

Текст : непосредственный // Молекулярная биология. - 2002. - Т. 36. - № 4. -С. 563-584.

14. Богданов, В. Д. Сибирская язва на Ямале: экологический взгляд на традиционное оленеводство / В. Д. Богданов, М. Г. Головатин - Текст : непосредственный // Экология. - 2017. - № 2. - С. 77-82.

15. Бургасов, П. Н. Метод оценки противосибиреязвенного иммунитета по превентивным свойствам сыворотки / П. H. Бургасов, Г. И. Рожков. - Текст : непосредственный // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1972. - № 6. - с. 10-15.

16. Вакцинопрофилактика сибирской язвы / В. В. Селиверстов, И. А. Бакулов, В. А. Гаврилов. [и др.]. - Текст : непосредственный // 100 лет Курской биофабрике и агробиологической промышленности России : тезисы докладов научно-производственной конференции, Курск, 27-30 августа 1996 г.). - Курск, 1996. - С. 261-265.

17. Выделение поверхностного антигена вегетативных клеток Bacillus antracis СТИ-1 и изучение его протективных свойств / М. В. Безносов, Г. А. Петров, Ю. И. Соркин [и др.]. - Текст : непосредственный // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1997. - № 1. - С. 9-13.

18. Выделение ДНК Сибиреязвенных штаммов методом полимеразной цепной реакции / Д. В. Колбасов, Л. Я. Цибанова, А. П. Конвисарев [и др.]. - Текст : непосредственный // Научные основы производства ветеринарно-биологических препаратов: тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30-летию ВНИИТиБП //Щелково, 2000. - С. 244-246.

19. Гаврилов, В. А. Совершенствование способа выделения и очистки хромосомной ДНК из клеток возбудителя сибирской язвы и аэробных спорообразующих бацилл / В. А. Гаврилов, Г. Ф. Архипова, П. Ю. Зубаирова. - Текст : непосредственный // Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных: материалы

международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ВНИИВВиМ. - Покров, 1998. - С. 311-313.

20. Гаврилов, В. А. Сибирская язва - вечная проблема землян : монография / В. А. Гаврилов, Т. Н. Грязнева, В. В. Селиверстов. - М.: МГАВМиБ, 2014. - С. 268-269. - Текст : непосредственный.

21. Галиуллин, А. К. Оценка Сибиреязвенного иммунитета у животных через разные сроки после вакцинации / А. К. Галиуллин. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1994. - №8. - С. 30-32.

22. Галиулин, А. К. Мониторинг сибирский язвы в современных условиях / А. К. Галиулин, И. М. Хисамиев // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э. Баумана. - 2015. - № 224. - С. 27-29. - Текст : непосредственный.

23. ГОСТ Р 52616-2006. Вакцина против сибирской язвы животных из штамма 55-ВНИИВВиМ живая = Live vaccine against anthrax of animals from strain 55-VNIIW & M. Specifications : издание официальное : утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 декабря 2006 г. N 329-ст: дата введения 2008-01-01. - Москва : Стандартинформ, 2006. - 18 с. - Текст : непосредственный.

24. Дальнейшее совершенствование системы мероприятий по профилактике и борьбе с сибирской язвой животных / И. А. Бакулов, В. А. Ведерников, А. А. Харкевич [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария - 1997. - №5 - С. 7-11.

25. Диагностическая значимость серологических реакций при сибирской язве / В. М. Котляров, Э. Л. Бударкова, Л. Ф. Николайчук [и др.]. -Текст : непосредственный // Диагностика профилактика н меры борьбы с особо опасными экзотическими болезнями животных : материалы международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ВНИИВВиМ // Покров, 1998. - С. 325-327.

26. Дифференциация Вас. anthracis от спорообразующих почвенных бацилл / Н. Г. Ипатенко, А. А. Маничев, Б. И. Шморгун [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1995. - № 7. - С. 19-22.

27. Дифференциация вакцинных штаммов сибирской язвы с помощью ПЦР / Л. Я. Цыбанова, Ю. О. Селянинов, А. Б. Колбасов [и др.]. - Текст : непосредственный // Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных : материалы международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ВНИИВВиМ. -Покров, 1998. - С. 313-314.

28. Иванова, С. В. получение эритроцитарного сибиреязвенного антигена / С. В. Иванова, Л. А. Мельникова, Х. Н. Макаев, А. П. Родионов. -Текст : непосредственный // Ветеринарный врач. - 2019. - №2. - С. 22-25.

29. Иванова, М. К. Клинико-эпидемиологическая характеристика сибирской язвы по материалам клиники инфекционных болезней : Отчет Казахского государственного медицинского института им. В.М Молотова за последнее 18 лет (1939-1956. г.г.) / М. К. Иванова. Текст : непосредственный // Научные известия / Казахский государственный медицинский институт. -Алма-Ата, 1958. - В.15. - С. 202-208.

30. Идентификация возбудителя сибирской язвы иммуиоферментным методом / Л. Ф. Николайчук, И. Ф. Вишияков, В. А. Гаврилов [и др.]. - Текст : непосредственный // Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных : материалы международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ВНИИВВиМ. -Покров. - 1998. - С. 329-330.

31. Идентификация возбудителя сибирской язвы с помощью полимеразной цепной реакции / С.Ж. Цыбанов [и др.]. - Текст : непосредственный // Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии : материалы научной конференции РАСХН. -М. - 1996. - С. 87.

32. Инструкция на «Набор определения антител в сыворотке крови животных, вакцинированных против сибирской язвы, в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)».

33. Изучение биологических свойств вакцинных штаммов Bac.anthracis и вируса оспы овец в процессе хранения экспериментальной ассоциированной вакцины / А. Н. Никулин, И. А. Бакулов, Н. С. Косяченко [и др.]. - Текст : непосредственный // Научные основы производства ветеринарных и биологических препаратов : тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30-летию ВНИиТИБП. -Щелково, 2000. - С. 168-170.

34. Изучение действий токсических фракций сибиреязвенного микроба на энергетический обмен тканей животных : отчет НИР (заключит.) / Иркутский НИПЧИ Сибири и Дальнего Востока ; руководители Е. П. Голубинский, Г. И. Барсук. - Инв. №02850085345. - Иркутск, 1985. - 76 с.

35. Изучение активности и специфичности тест системы для выявления ДНК В. anthracis методом полимеразной цепной реакции / Л. В. Саяпина, Т. И. Анисимова, А. Н. Куличенко Косяченко [и др.]. - Текст : непосредственный // Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 70-летию НИИ микробиологии МО РФ. - Киров, 1998. - С.213-214.

36. Икоников, И. П. Разработка технологии получения усовершенствованной сибиреязвенной вакцины СТИ-ПР-3 / И. П. Икоников, Е. М. Бечина, И. А. Дунайцев. - Текст : непосредственный // Новые технологии и биосистемы : тезисы докладов XIV научно-практической конференции ВНИИПМ. - Оболенск, 1991. - С. 60-61.

37. Икоников, И. П. Глубинное культивирование вакцинных штаммов возбудителя сибирской язвы / И. П. Икоников, Е. М. Бечина, И. А. Дунайцев. - Текст : непосредственный // Передовой производственный опыт в медицинской промышленности, рекомендуемый для внедрения. - М.: ВНИИСЭНТИ, 1991. - №1. - С. 5-9.

38. Иммуногенность сибиреязвенной вакцины СТИ при разных способах иммунизации: Отчет НИР (заключит.) / Бурятский сельскохозяйственный институт : руководитель В.Ц. Цыдыпов.- Инв. № ГР01870043278. - Улан-Удэ, 1989. - 36 с. - Текст : непосредственный.

39. Индикация и идентификация возбудителей инфекций в продукции животного происхождения на основе биочиповой технологии с биотиновой меткой и колориметрическим детектированием / А. В. Локорев, Н. М. Нитяга, Д. В. Федюшин [и др.]. - Текст : электронный // Вестник российского университета дружбы народов. Серия: агрономия и животноводство. - 2016. -№ 3. - С. 72-78. МрБ://www.elibrary.ru/item.asp?id=26637140 (дата обращения: 02.02.2022). - Режим доступа: Научная электронная библиотека eLIBRARY.RU.

40. Индикация спор возбудителя сибирской язвы в объектах внешней среды и кормах иммуноферментным методом / Л. Ф.Николайчук, И. Ф. Вишняков, И. А. Бакулов [и др.]. - Текст : непосредственный // Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных : материалы международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ВНИИВВиМ. - Покров. - 1998. - С. 327-329.

41. Инструкция и методические указания по лабораторной, клинической диагностике, профилактике и лечению сибирской язвы у людей. М., 1982. - 61 с. - Текст : непосредственный.

42. Инструкция по применению глобулина противосибиреязвенного лошадиного жидкого. - М. - 1988. - 4 с. - Текст : непосредственный.

43. Иоакимис, К.Д. Диагностика и лечение сибирской язвы / К. Д. Иоакимис. - Текст : непосредственный // Журнал Советское здравоохранение Киргизии. - 1941. - №5-6. - С. 12-14.

44. Ипатенко, Н.Г. Особенности развития сибиреязвенного процесса / Н. Г. Ипатенко, Ю. В. Федоров, Н. В. Филиппов. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 2000. - №2. - С. 22-25.

45. Ипатенко, Н. Г. Испытание сибиреязвенных бактериофагов / Н. Г. Ипатенко. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 2000. - № 6. - С. 2223.

46. Ипатенко, Н. Г. Испытание живой ассоциированной вакцины против сибирской язвы и эмкара из штаммов 55-ВНИИВВиМ и 2/14 ВГНКИ / Н. Г. Ипатенко, Л. В. Кириллов, Л. И. Сторожев. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1999. - № 6. - С. 10-11.

47. Ипатенко, Н. Г. Компоненты для реакции преципитации при сибирской язве / Н. Г. Ипатенко, Б. И. Шморгун, Л. С. Саленко - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1999. - №10. - С. 15-17.

48. Ипатенко, Н. Г. Изучение культурально-морфологических особенностей и вирулентных свойств Bacillus anthracis, выделенных из почвы, от больных и павших животных / Н. Г. Ипатенко. - Текст : непосредственный // Гигиена и ветеринарно-санитарные требования к промышленным животноводческим комплексам. - М. - 1979. - С. 100-105.

49. Ипатенко, Н. Г. Почва - основной резервуар возбудителя сибирской язвы / Н. Г. Ипатенко, В. Н. Гущин, А. И. Щенев. - Текст : непосредственный // Ж. Ветеринария. - 1991. - № 12. - С. 23-26.

50. Ипатенко, Н. Г. Значение экологических факторов в сохранении возбудителя сибирской язвы в почве / Н. Г. Ипатенко, Н. Т. Татаринцев, А. А. Маничев. - Текст : непосредственный // Проблемы экологии в ветеринарной медицине : тезисы докладов всесоюзной научно-технической конференции, Воронеж, 25-27 октября 1989 г. - Воронеж, 1989. - С. 64-65.

51. Ипатенко, Н. Г. Профилактика сибирской язвы / Н. Г. Ипатенко, Н. Т. Татаринцев, А. А. Маничев, В. Н. Гущин. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1989. - №5. - С. 41-42.

52. Ипатенко, Н. Г. Эпизоотология сибирской язвы / Н. Г. Ипатенко, Н. Т. Татаринцев, В. А. Седов, В. Н. Гущин // Ветеринария. - 1987. - № 9. - С. 35-37.

53. Исангалин, Ф.Ш. Изучение нового бактериофага Bacillus thuringiensis с широким спектром действия, с целью разработки профилактического препарата для очагов сибирской язвы / Ф. Ш. Исангалин, Е. Л. Жилетков, Л. И. Маринин // Проблемы биологической и экономической безопасности : матер. Международной научной конференции. - Оболенск, 2000. - С. 43-46.

54. Использование метода геномной дактилоскопии для дифференциации сибиреязвенных штаммов / П. Ю. Зугбарова, Л. Я. Цыбанова, В. А. Гаврилов [и др.]. - Текст : непосредственный // Современное состояние и перспективы интеграции ветеринарной науки и практики условиях реформирования с-х. производства Прикаспийского региона : Тезисы докладов международной конференции. - Махачкала, 1997. - С. 70-72.

55. Исраилов, В. К. Изменчивость Bacillus anthracis в природных условиях / В. К. Исраилов. - Текст : непосредственный // В сб.: Профилактика инфекционных болезней животных в Узбекистане. - Ташкент, 1984. - С. 12-17.

56. История создания отечественных и зарубежных противосибиреязвенных вакцин / Н. Г. Ипатенко, Н. Т. Татаринцев, А. А. Маничев. [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1989. - №3. - С. 71-72.

57. Исупов, И. В. К вопросу о морфологических критериях оценки безвредности сибиреязвенных вакцин штаммов / И. В. Исупов, Р. А. Белобородов, Т. И. Аниссимов, Л. Н. Котурга. - Текст : непосредственный // Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций: тезисы докладов к Всесоюзной научной конференции специалистов противочумных учреждений. Часть 3. - Иркутск, 1984. - С. 13-14.

58. Исхаков, О. В. Мероприятия по профилактике болезней, возбудители которых длительно сохраняются во внешней среде. Профилактика сибирской язвы / О. В. Исхаков, Л. З. Соломонник, М. Г. Таршис. - Текст : непосредственный // Краевая эпизоотология Нечерноземной зоны РСФСР. - М. : Колос, 1980. - С. 180-181.

59. Кагроманова, К. А. Сравнительная характеристика методов определения активности лизоцима / К. А. Кагроманова, З. В. Ермолова. - Текст : непосредственный // Антибиотики. - 1966. - Т. 2 - № 10. - С. 917-919.

60. Калиновский, А.И. Найманов, П.И., Сорокин, Ю.И. Атипичные штаммы возбудителя сибирской язвы / А. И. Калиновский, П. И. Найманов, Ю. И. Сорокин. - Текст : непосредственный // Вопросы санитарной охраны территории профилактики природно-очаговой инфекции : тезисы докладов научно-практической конференции. - Хабаровск, 1986. - С. 73-75.

61. Калугин, В.И. Вакцины Л.С. Ценковского против сибирской язвы / В. И. Калугин. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1983. - № 9. - С. 78-79.

62. Калюжная, Л. Д. Изучение антагонистического действия актиномицетов на бациллы сибирской язвы / Л. Д. Калюжная, А. М. Брянская,

A. С. Коротич, В. П. Касавченко. - Текст : непосредственный // Ветеринария. -1975. - № 7. - С. 617-623.

63. Касимов, М. С. К эпидемиологии сибирской язвы Азербайджанской республики / М. С. Касимов. - Текст : непосредственный // Материалы межрегионального Рабочего совещания ВОЗ/ФАО по сибирской язве ; под ред. Б. Л. Черкасского. - Алматы, Казахстан, 1997. - С. 21-22.

64. Касьян, И. А. Применение ПЦР для Индикации организмов 1 -2 групп патогенности / И. А. Касьян, С. Б. Гаранина, Н. В. Майоров. - Текст : непосредственный // Проблемы особо опасных инфекций. - Саратов, 1998. - С. 82-84.

65. Касьяненко, А. М. Характеристика современной эпидемиологии сибирской язвы в Украинской ССР / А. М. Касьяненко, А. М. Меренкова, А.

B. Моисеева. - Текст : непосредственный // Достижения и перспективы борьбы с сибирской язвой в СССР : тезисы докладов X пленарного заседания Между ведомствами Научно-методической комиссии по борьбе с сибирской язвой, Баку, 28-29 сентября 1978 г. - М., 1978. - С. 15-16.

66. Концепция применения и производства сибиреязвенных вакцин / В. А. Гаврилов, И. А. Бакулов, В. В. Селиверстов [и др.]. - Текст : непосредственный // Материалы межрегионального рабочего совещания ВОЗ/ФАО по сибирской язве, Алматы, Казахстан, 5-6 октября 1997 г. - С. 4143.

67. Кутырев, В. В. Генодиагностика и молекулярное типирование возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы / В. В. Кутырев, Н. И. Смирнова.

- Текст : непосредственный // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. - 2003. - №1. - С. 6-4.

68. Лабораторная диагностика сибирской язвы у животных и людей. обнаружение возбудителя в сырье животного происхождения и объектах внешней среды (методические указания). - 1989. - М.: «Агропромиздат». - С. 1-31. - Текст : непосредственный.

69. Логвин, Ф. В. Сибирская язва в мире, странах СНГ и Российской Федерации (обзор литературы) / Ф. В. Логвин, Т. А. Кондратенко, С. Ю. Водяницкая. - Текст : непосредственный // Медицинский вестник Юга России.

- 2017. - № 8 (3). - С. 17-22.

70. Макаров, В. В. Сибирская язва в начале нового века / В. В. Макаров. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 2017. - № 1. - С. 3-8.

71. Методические рекомендации по дифференциации и Вас. anthracis от близкородственных бацилл, основанные на их различиях в питательных потребностях. - Иркутск, 1965. - 35 с.

72. Методы изучения биологических свойств возбудителя сибирской язвы : учебно-методическое пособие / Л. И. Маринин, И. А. Дятлова, А. Н. Мокриевич, [и др.] ; под ред. Л. И. Маринина и И. А. Дятлова. -пос. Оболенск, Московская обл. : ЗАО МП «ГИГИЕНА», 2009. - 304 с. -(Профессиональное образование). - Текст : непосредственный.

73. Микшис, Н. И. Корреляция вирулентности Bacillus anthracis с экспрессией признаков, кодируемых хромосомными генами молекул / Н. И.

Микшис, С. А. Еремин, М. Ф. Болотникова. Текст : непосредственный // Генетика, микробиология и вирусология, 1999. - № 4. - С. 25-29.

74. Митин, С. С. Изучение влияния глицерина на иммуногенность противосибиреязвенной вакцины из штамма 55-ВННИВВиМ / С. С. Митин, В.

B. Селиверстов. - Текст : непосредственный // 100 лет Курской биофабрике и агробиологической промышленности России : тезисы докладов научно-производственной конференции, Курск, 27-30 августа 1996 г. - Курск, 1996. -

C. 212-214.

75. Опыт ликвидации вспышки сибирской язвы на Ямале в 2016 году ; под ред. А. Ю. Поповой, А. Н. Куличенко. - Ижевск : ООО «Принт-2», 2017. - 313 с. Текст : непосредственный.

76. Опыт профилактики сибирской язвы сельскохозяйственных животных в России / Н. Г Ипатенко, В. А. Гаврилов, А. А. Маничев [и др.]. -Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1995. - № 5. - С. 27-30.

77. Оценка иммуногенности и безвредности экспериментальной ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец / А. Н. Никулин, И. А. Бакулов, В. М. Балышев [и др.]. - Текст : непосредственный // Научные основы производства ветеринарных и биологических препаратов : тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30-летию ВНИиТИБП. - Щелково, 2000. - С. 170-172.

78. Оценка эпидемиологической и эпизоотологической обстановки по сибирской язве в 2016 г., прогноз на 2017 г. / А. Г. Рязанова, Е. И. Еременко, Л. Ю. Аксенова [и др.]. - Текст : непосредственный // Проблемы особо опасных инфекций - 2017. - № 1. - С. 21-23.

79. Оценка возможности использования сухих основ питательных сред, полученных методом распылительной сушки, для культивирования сибиреязвенного микроба / И. Н. Седельников, Е. А. Дремин, А. 3. Рогожин [и др.]. - Текст : непосредственный // Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 70-летию НИИ микробиологии МО РФ. - Киров, 1998. - С. 334-335.

80. Перспективы создания сибиреязвенных вакцин нового поколения / Н. Т. Васильев, Е. В. Пименов, В. В. Кожухов [и др.]. - Текст : непосредственный // Иммунология. - 1999. - № 3. - С. 5-8.

81. Применение иммуномикрочиповой технологии для контроля безопасности качества пищевых продуктов / В. С. Бабунова, Д. А. Онищенко, О. А. Ярова [и др.]. - Текст : непосредственный // Проблемы ветеринарной санитарии гигиены и экологии : сборник ГНУ ВНИИВСГЭ. - М., 2011. - № 1(5). - С. 12-17.

82. Попова, А.Ю. Опыт ликвидации вспышки сибирской язвы на Ямале в 2016 году / А.Ю. Попова, А. Н. Куличенко. - Текст : непосредственный. - Ижевск : ООО «Принт-2». - 2017. - 313 с.

83. Разработка питательной среды на основе панкреатического гидролизата казеина для глубинного культивирования клеток сибиреязвенного вакцинного штамма СТИ-1 / Г. В. Комоско, А. В. Комиссаров, Е. В. Белова. [и др.]. - Текст : непосредственный // Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 70-летию НИИ микробиологии МО РФ. - Киров. - 1998. - С. 305.

84. Разработка эритроцитарного диагностикума для обнаружения и идентификации возбудителя сибирской язвы / Д. А. Кутаев, В. А. Пятков, Г. Д. Елагин, П. Г. Васильев. - Текст : непосредственный // Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 70-летию НИИ микробиологии МО РФ. - Киров. - 1998. - С. 134-135.

85. Разработка способа детекции спор сибиреязвенного микроба с использованием полимеразной цепной реакции / И. В. Тучков, А. И. Куличенко, О. В. Норкина. [и др.]. - Текст : непосредственный // Генетика и биохимия вирулентности возбудителей особо опасных инфекций: материалы Российской научной конференции, Волгоград, 21-22 октября, 1992. -Волгоград. - 1992. - С. 171.

86. Разработка ассоциированной вакцины против сибирской язвы и клостридиоза овец / К. П. Ургуев, И. А. Бакулов, М. А. Нажалов [и др.]. - Текст : непосредственный // Доклады РАСХН. - 1999. - №4. - С. 40-43.

87. Результаты применения вакцины против сибирской язвы из штамма 55 / Н. Г. Ипатенко, Н. Т. Татаринцев, А. А. Маничев. [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1989. - № 8. - С.7-10.

88. Роль российских и советских ученых в разработке сибиреязвенных вакцин / М. В. Супотницкий, И. В. Борисевич, В. И. Климов [и др.]. - Текст : непосредственный // Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. -2015. - 2 (54). - С. 46-52.

89. Романов, Г.И., Маничев, А.А., Лукъянченко, А.В. Вакцина СТИ-1 живая против сибирской язвы животных // ГОСТ. - Госкомстандарт, 1986. - 21 с.

90. Руководство по диагностики тестам и вакцинам для наземных животных. Часть 3. Раздел 3.1., глава 3.1.1. Сибирская язва. - 2018. - Текст : непосредственный.

91. Салтыков, Р. А. Характеристика Сибиреязвенного вакцинного штамма СТИ-1, хранившегося 30 лет в виде лиофилизированных спор / Р. А. Салтыков, И. А. Бакулов, В. А. Гаврилов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1976. - №6. - С. 62-65.

92. Селиверстов, В. В. Оценка эффективности применения противосибиреязвенной вакцины из штамма 55-ВНИИВВнМ в Российской Федерации // Материалы межрегионального рабочего совещания ВОЗ/ФАО по сибирской язве. - Алматы, Казахстан, 1997. - С. 43-44.

93. Сибирская язва на Ямале: причины возникновения и проблемы диагностики / Ю. О. Селянинов, И. Ю. Егорова, Д. В. Колбасов [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 2016. - 10. - С. 3-7.

94. Сибирская язва / С. Г. Колесов, Г. И. Романов, Г. В. Дунаев [и др.].; Под ред. С. Г. Колесова. - Москва : Колос, 1976. - 287 с. - Текст : непосредственный.

95. Сибирская язва / Н. Г. Ипатенко, В. А. Гаврилов, В. С. Зелепукин [и др.]. // М.: изд-во «Колос», 1996. - 335 С. - Текст : непосредственный.

96. Сибирская язва ; Под ред. Г. Г. Онищенко и В. В. Кожухова. - М. : «Медицина». - 2010. - 424 с.

97. Сибирская язва в Российской Федерации и за рубежом / С. Н. Антюганов, А. Г. Рязанова, Е. И. Еременко [и др.]. - Текст : непосредственный // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2012. - № 5. - С. 4-8.

98. Сибирская язва человека: эпидемиология, профилактика, диагностика, лечение / Л. И. Маринин [и др.]. - Оболенск, Московская обл. ; Москва : Гигиена, 2008. - 408 с.

99. Синяк, К. М. Вегетация и спорообразование у возбудится сибирской язвы (вакцинный штамм СТИ) при различных значениях рН среды культивирования / К. М. Синяк, О. М. Вернер. - Текст : непосредственный // Известия АН СССР. Серия биология, 1983. - № 5. - С. 686-692.

100. Смирнов, Н.Н. Биохимические реакторы : учебное пособие для ПТУ / Н. Н. Смирнов. - Л.: изд-во «Химия», 1987. - 72 с. - Текст : непосредственный.

101. Собакин, А. С. Испытание экспериментальных образцов ассоциированной вакцины против сибирской язвы и ящура / А. С. Собакин. -Текст : непосредственный //Ветеринария. - 1993. - № 12. - С. 20-23.

102. Генотипирование хромосомной ДНК вакцинных штаммов сибирской язвы с помощью ПЦР / Л. Я. Цыбанова, И. Ф. Вишняков, А. П Конвисарев // Современное состояние и перспективы интеграции ветеринарной науки н практики в условиях современного с. -х. производства Прикаспийского региона : тезисы докладов международной конференции / Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии РАСХН. - Покров, 1997. - С. 32-33.

103. Солохин, Е. В. Клеточные механизмы противосибиреязвенного иммунитета / Е. В. Солохин, К. К. Федорцов. - Текст : непосредственный // ЖМЖ, 1995. - №5. - С. 72-77.

104. Тимошин, В. Б. Видоспецифический ДНК-зонд для идентификации токсигенных штаммов возбудителя сибирской язвы / В. Б. Тимошин, В. С. Замараев, В. А. Антонов, А. В. Липницкий. - Текст : непосредственный // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. -1994. - № 1- С. 30-33.

105. Ургуев, К. П. Эпизоотологическая обстановка, по сибирской язве животных в Дагестане / К. П. Ургуев, М. А. Нажалов, З. М. Джамбулатов. -Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1999. - №2. - С. 22-25.

106. Фазитов, Т. Х. Геноидентификация Bac. апШгашБ / Т. Х. Фазитов. -Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1995. - № 5. - С. 30-31.

107. Характеристика вакцинных штаммов Bacillus anthracis / Л. Г. Цатурян, О. Д. Скляров, А. А. Иваненко [и др.]. - Текст : электронный // Ветеринария. - 2020. - № 12. - С. 22-26. https://www.elibrary.ru/item.asp?id=44330670 (дата обращения: 09.08.2020). -Режим доступа: Научная электронная библиотека eLIBRARY.RU.

108. Цатурян, Л. Г. Получение противосибиреязвенного внеклеточного антигена и определение его иммуногенной активности : специальность 16.00.03 «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» : автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Цатурян Л. Г. ; Ереванский зоотехнико-ветеринарный институт. - Ереван, 2003. - 23 с. - Библиогр.: с. 12-19. - Место защиты: Ереванский зоотехнико-ветеринарный институт. - Текст : непосредственный.

109. Цатурян, Л. Г. Совершенствование методов контроля качества сибиреязвенных вакцин для животных // Актуальные проблемы болезней общих для человека и животных : сборник материалов III Всероссийской научно-практической конференции (Ставрополь, 24-25 апреля 2019 г.) / Л. Г. Цатурян, О. Д. Скляров, Д. В. Федюшин. - Ставрополь, 2019 - С. 292-293. -URL: https : //www.elibrary.ru/item.asp?id=45474399 (дата обращения:

27.06.2021). - Режим доступа: Научная электронная библиотека eLIBRARY.RU. - Текст : электронный.

110. Цыбанова, Л. Я. Разработка набора препаратов для выявления ДНК возбудителя сибирской язвы методом ПЦР / Л. Я. Цыбанова, Ю. О. Селялинов, А. П. Конвисарев. - Текст : непосредственный // Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных : материалы международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ВНИИВВиМ. - Покров, 1998. - С. 315-316.

111. Черкасский, Б. Л. Эпидемиология и профилактика сибирской язвы / Б. Л. Черкасский. - Текст : непосредственный. - М.: «ИНТЕРСЭН». - 2002. -384 с.

112. Числов, Ю. В. Концентрирование суспензий бактериальных спор вакцинного сибиреязвенного штамма 55-ВНННВВиМ / Ю. В. Числов. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1998. - № 10. - С. 19-21.

113. Шагинян, И. А. Геномный полиморфизм возбудителей бактериальных инфекций / И. А. Шагинян, А. Л. Гинцбург. - Текст : непосредственный // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. -1991. - № 2. - С. 3.

114. Шестакова, И. В. Сибирская язва ошибок не прощает: оценка информации после вспышки на Ямале летом 2016 года / И. В. Шестакова. -Текст : непосредственный // Журнал инфектологии. - 2016. - Т. 8. - № 3. - С. 3-27.

115. Экспериментально-клиническое изучение возможности проведения повторных вакцинаций против сибирской язвы аэрогенным методом не модели живой сухой аэрозольной сибиреязвенной вакцины / В. В. Квирикадзе, Э. Н. Шляхов, С. А. Шварц. - Текст : непосредственный // Достижения и перспективы борьбы с сибирской язвы в СССР.

116. Эпизоотическая ситуация по отдельным зооантропонозам в

Российской Федерации в 2016-2018 гг. / О. Н. Петрова, Е. Е. Таценко, А. К.

Караулов [и др.]. - Текст : непосредственный // Актуальные проблемы

108

болезней, общих для человека и животных : материалы III Всероссийской научно-практической конференции, Ставрополь, 24-25 апреля 2019 г. - С 56.

117. Allaa H. Immunisierende Wircung einer attenuierten «Sporen vaccine» mit Oladyuvans gegen Bacillus anthracis beim Schaf / H. Allaa // Zbl. Vet. Med. -1986. - Bd. 33. - S. 340-345.

118. G. L. Andersen Identification of a region of genetic variability among B. anthracis strain and related species / G. L. Andersen, J. M. Simchock, К. Н. Wilson // J. Bacteriol. - 1996. - V. 178. - №2. - P. 377-384.

119. Anthrax in humans and animals - 4th ed. WHO Library Cataloguing-in-Publication Data 2008, P. - 162-169, ISBN 978 92 4 154753 6.

120. Anthrax in Humans and Animals, 4th edition, Geneva: World Health Organization. - 2008.

121. Anthrax. ProMED. http://www.promedmail.org.

122. Anthrax in humans and animals - 4th ed., 2008. WHO Library Cataloguing-in Publication Data.

123. Anthrax vaccine. Is It Safe? Does It Work? / L. M. Joellenbeck, L. L. Zwanziger, J. S. Durch, B. L. Strom. - National Academy Press. - Washington, D.C., 2002. - 266 p.

124. Anthrax vaccine: increasing intervals between the first two doses enchances antibody response in human / P. R. Pittman, J. A. Mangiafico, C. A. Rossi [et al.] // Vaccine. - 2000. - V. 19 (2-3). - P.213-216.

125. Bacillus anthracis toxin-deficient strains // Infect. Immun. - 1995. - V. 63. - N 4. - P. 1369-1372.

126. Bacillus anthracis aerosols in Goat hair Processing Mills / С. М. Dahlgren, L. M. Buchanan, H. W. Decker [et al.] // Amer. J. Hyg.- 1960.-V. 72.-N1.-P. 24-32.

127. Baillie, L. W. J. Development of a Bacillus subtilis based system for the expression of the protective antigen of Bacillus anthracis / L. W. J. Baillie, P. Moore, R.J. Manchee // Proc. Intern. Bcrgey's Manual of Systematic Bacteriology, 1986. - V. 2.

128. Beall, F. A. Rapid lethal effect in rats of a third component found upon fractionating the toxin of Bacillus anthracis / F. A. Beall, M. J. Taylor, C. B. Thome // J. Bacterial. - 1962. - V. 83. - № 6.- P. 543-550.

129. Belton, F. C. A method for assaying anthrax immunising antigen and antibody / F. C. Belton, D. W. Henderson // Brit. J. Exp. Path. - 1956. - V. 37. - № 2. - P. 156-160.

130. Belton, F. C. Studies on a protective antigen, produced in vitro from Bacillus anthracis: medium and methods of production / F. C. Belton, R. E. Strange // Brit. J.EXD. Path. - 1954. - V. 35. - № 2. - P. 144-152.

131. Beyer, W. Anthrax in animals / W. Beyer, P. Turnbull // Mol. Aspects Med. - 2009. - 30. - P. 481-489. DOI: 10.1016/j.mam.2009.08.004.

132. Beyer, W. Polymerase chain reaction-ELISA to detect Bacillus anthracis from soil amples-limitations of present published primers / W. Beyer, S. Pocivalsek, R. Bohm // J. Appl. Microbiol. - 1999. - Vol. 87. - № 2. - P. 229-236.

133. Biological Safety: principles and practices / D. O. Fleming, D. L. Hunt. - Washngton // ASM Press, 2000. - 784 p.

134. Bohm, R. PCR-ELISA for detection of Bacillus anthracis in environmental samples / R. Bohm, S. Pocivalser, W. Beyer // Abstract Book. 3-th International Conference on anthrax. - 7-10 Sept. 1998. - P.11.

135. Brachman Ph: S.' Anthrax // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1970. - V. 174. - № 2. - P. 577-582.

136. Brachman Ph: S.' Anthrax// In: Infectious Disease / Hoeprich P.D. -New York. - 1977. - P. 807-812.

137. Carr, E.A. Recovery of Bacillus anthracis from the nose and throat of apparently healthy workers / E.A. Carr, R. R. Rew // J. Inf. Dis. - 1957. - V. 100. -N.2. - P. 169-171.

138. Cataldi, A. Construction and characterization of a protective antigen-deficient Bacillus anthracis strain / A. Cataldi, E. Labryere, M. Mock // Mol. Microbiol. - 1990. - V. 4. - N.7. - P. 1111-1117.

139. Cencev, I. Despre modificarile microorganismelor patogene / I. Cencev, V. Stoianov // Anuar. Inst. Ser, Vaccin. Pasteur (Bucuresti). - 1956. - N 1.

- P. 295-299.

140. Centers for Disease Control and Prevention. Update: Use of anthrax vaccine in the United States: recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP). MMWR (Morb. Mortal. Wkly Rep.). - 2000. - V. 49. - N RR-15. - P. 1-20.

141. Chu, N.P. Variation of Bacillus anthracis with special reference to noncapsulated avirulent variant / N. P. Chu // J. Hyg. - 1952. -V. 50. - P. 433-444.

142. Cromartie, W. J. Studies of infection with Bacillus anthracis. 2. The immunological and tissue damaging properties of extracts prepared from lesions of the Bacillus anthracis infections / W. J. Cromartie, D. W. Watson, W. L. Bloom, R. J. Heckley // J. Infect. Dis. - 1947. - V. 80. №.1. - P.14-27.

143. Cvetanov, V. On the problem of the antianthrax immunity characteristics / V. Cvetanov, V. Valchev, I. Mircheva, M. Siromashkova // Probl. Infect. and Parasit. Disease. - 1986. - V. 13. - P. 98-102.

144. Darlow, H. M. The use of anthrax antigen to immunise man and monkey / H. M. Darlow, F. C. Belton, D. W. Henderson // Lancet. - 1956. - V. 271.

- № 6941. - P. 476-479.

145. Darlow, H. M. Serological diagnosis of anthrax / H.M. Darlow, N. B. Price // Lancet. - 1969. - V. 2. - № 7617.- P. 430.

146. De Vos, V. The ecology of anthrax la the Kruger National Park, South Africa / V. De Vos // Salisbu ry Med. Bull. SuppI.,1990. - N68. - P. 1923. Proc. Int. Workshop on Anthrax, Winchester, England, Apr. 11-13. - 1989.

147. Deletion mutants of protective antigen that inhibit anthrax toxin both in vitro and in vivo / N. Ahuja, P. Kumar, S. Alam, M. Gupta, R. Bhatnagar // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2003. - V. 307. - N 3. - P. 446-450.

148. Dragon, D.C. Bison and anthrax in the northern Canada / D. C. Dragon, R. P. Rennie, C. C. Gates // Salisbury Med. Bul. : Proc. Int. Workshop on Anthrax,. Winchester, England. Sept. 19-2l. - 1996 - N 87. - P. 22.

149. Dragon, D. C. The ecology of anthrax spores: tough but not invisible / D. C. Dragon, R. P. Rennie // Can. Vet. J., 1995. - V. 36. - N 5. - P. 295-301.

150. Dragon, D. C. The ecology of anthrax spores: tough but not invincible / / D. C. Dragon, R. P. Rennie // Can. Vet. J. - 1995. - 36. - P. 295-301 (available at http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1686874/pdf/canvetj00342-0041.pdf).

151. Impairment of dendritic cells and adaptive immunity by anthrax lethal toxin / A. Agrawal, J. Lingappa, S. H. Leppla, L. Agrawal, A. Jabbar, C. Quinn, B. Pulendran // Nature. - 2003. - V. 424. - № 6946. - P. 329-334.

152. Ezzell, J. W. Immunoelectrophoretic analysis, toxicity, and kinetics of in vitro production of the protective antigen and lethal factor components of Bacillus anthracis toxin / J. W. Ezzell, B. E. Ivins, S. N. Leppla // Infect. Immun. - 1984. -V. 45. - № 3. - P. 761-767.

153. Ezzell, J. W. The genetic basis of Pasteur's attenuation of Bacillus anthracis cultures / J. W. Ezzell, P. Mikesell, B. E. Ivins, S. H. Leppla // World's Debt to Pasteur. - 1985. - Liss A.R. Inc. - P.107-116.

154. Efficacy of a human anthrax vaccine in guinea pigs, rabbits, and rhesus macaques against challenge by Bacillus anthracis isolates of diverse geographical origin / P.F. Fellows, M.K. Linscott, B.E. Ivins, M.L. Pitt, C. A. Rossi, P. H. Gibbs,

A. M. Friedlander // Vaccine. - 2001. - V.19. - P. 3241-3247.

155. Fish, D. Purification and properties of in vitroproduced anthrax toxin components / D. Fish, B. Mahlandt, R. Dobbs J. Lincoln // J. Bact. - 1968. - V. 95. -№.3. -P. 907-918.

156. Gessler, F. Possible oral vaccination of wildlife against anthrax using

B. anthracis strain Sterne 34F2 spores / F. Gessler, J. Rendel, H. Bohnel // Salisbury Med. But. - 1996 - N 87. - P. 112. Proc. Int. Workshop on Anthrax, Winchester, England, Sept. 19-21, 1995.

157. Gladstone, G. P. Inter-relationships between amino-acid in the nutrition of Bacillus anthracis / G. P. Gladstone // Brit. J. Exp. Path., 1939. - V. 20, № 2. - P. 189-200.

158. Gladstone, G. P. Immunity to anthrax: protective antigen present in cellfree culture filtrates / G. P. Gladstone // Brit. J. Exp. Pathol. - 1946.- V. 27. - № 6. -P. 395-418.

159. Gladstone, G. P. Immunity to anthrax: Production of the cell-free protective antigen t cellophane sacs / G. P. Gladstone // Brit. J. Exp. Pathol. - 1948. - V. 29. - № 5. - P. 379-389.

160. Green, B. D. Demonstration of a capsule plasmid in Bacillus anthracis / B. D. Green et al. // Infect. Immun., 1985. -V. 49. - N2.

161. Green, B. D. Demonstration of a capsule plasmid in Bacillus anthracis / B. D. Green, L. Battisti, T. M. Koehler [et al.] // Infect. Immun. - 1985. - V. 49. -№ 2. - V 905. - P. 291-297.

162. Green B. D. Involvement of Tn 4430 in transfer of Bacillus anthracis plasmids mediated by Bacillus thuringiensis plasmid pX012 / B. D. Green, L. Battisti, C. B. Thorne // J. Bacteriol. 1989. - V. 171. - № 1. - P. 104-113.

163. Hambleton, P. Anthrax: the disease in relation to vaccines / P. Hambleton, J. A. Carman, J. Melling // Vaccine. - 1984.-V. 2. - P. 125-132.

164. Hanter, P. In response to recent events: update on Bacillus anthracis / P. Hanter // ESCMIU News. - 2001. - V.11. - №3. - P. 171-174.

165. Hardyoutomo, S. Protective efficacy of anthrax vaccine against parenteral challenge a quinea pig mode / S. Hardyoutomo, M. B. Poerwadikarta // Proc. Intern, Workshop on Anthrax Winchester England, Sept 19-21, 1995 -Salisbury Med. Bull. - Special Supplement. - 1996. - № 87. - P.111.

166. http://www.oie.int/standard-setting/terrestrial-code / Accessed 3 Dek

2018.

167. https://www.snipchi.ru/updoc/2021/EPID OBZOR SIB YAZVA 20 20 2021.

168. https://ria.ru/20210702/yazva-1739660193.html.

169. http://arka.am/ru/news/society/eshche 7 grazhdan v armenii dostavl eny v bolnitsu s simptomami sibirskoy yazvy/].

170. Hugh-Jones, M. E. Quality of reports - OIE World Animal Health Tn 1993 and the 1993 FAO-OIE-WHO Animal Health Yearbook / M. E. Hugh-Jones // Salisbury Med. Bul. / Proc. Int. Workshop on Anthrax, Winchester, England, Sept. 19-21, 1995. - 1996 - N87. - P. 3.

171. Hugh-Jones, M. The ecology of Bacillus anthracis / M. Hugh-Jones, J. Blackburn // Molecular Aspects Med. - 2009. - 30. - P. 356-67.

172. Immunization against anthrax with Bacillus — anthracis protective antigen combined witn adjuvants / B. E. Ivins, S.L. Welkos, S.F. Little [et al.] // Infec. Immunity, 1992. - V. 60, N 2.- P. 662.

173. Isopescu, L. Date asupra persistentei B. anthracis-tulpina 1190R in organismul cobailor. Decelarea prin marcarea cu izotopic radioactivi (P32) si prin metode bacteriologice / L. Isopescu, Gr. Grasoiu, O. Burducea // Lucrarile stiint. Inst. Seruri si vaccin. Pasteur. - Bucurestirl. - 1961. - V. 5. - P. 249-258.

174. Immunization studies with attenuated strains of Bacillus anthracis / B. E. Ivins, J. W. Ezzell, J. Jemski et al. // Infect. Immun. - 1986. - V. 52. - № 2. -P. 454-458.

175. Immunizing activity of alum-precipitated protective antigen of Bacillus anthracis in cattle, sheep and swine / Schlingman A.S [et al.] // American Journal of Veterinary Research, 1956. - №17. - P. 256-261.

176. Immunizing activity alum-precipitated protective antigen of Bacillus anthracis in cattle, sheep and swine / A. S. Schlingman, H. B. Davlin, G. G. Wright [et al.] // Amer. J. Veterinary Rev. - 1956. - V. 17. - N 63. - P. 256-261.

177. Ivins, B. E. Efficacy of a standart human anthrax vaccine against Bacillus anthracis spore challenge in Guinea pigs / B. E. Ivins, P. F. Fellows, G. O. Nelson // Vaccine. - 1994. - V. 12. - N 10. - P. 872-874.

178. Ivins, B. E. Immunization against anthrax with Bacillus anthracis protective antigen combined with adjuvans / B. E. Ivins, S. L. Welkos, S. F. Little et al. // Infeet. Immun. - 1992. - V. 60. - N 2. - P. 662-668.

179. Jackson, F. C. Immunization of cattle against experimental anthrax with alum-precipitated protective antigen of spore vaccine / F. C. Jackson, G. G. Wright, J. Armstrong // Amer. J. Vet. Res. 1957. - V. 18. - № 69. - P.771-778.

180. Johnson, A. D. Comparison of growth and toxin production in two vaccine strains of Bacillus anthracis / A. D. Johnson, L. Spero // Appl. Environ. Microbiol. - 1981. - V. 41.- № 6. - P. 1479-1481.

181. Johnson-Winegar, A. Comparizon of enzyme-linked immunosorbent and indirect hemagglutination assays for determining anthrax antibodies / A. Johnson-Winegar // J. Clin. Microbiol. - 1984. - V. 20. - № 3. - P. 357-361.

182. Kim, H. U. A sporulation medium for Bacillus anthracis / H.U. Kim, J.M. Goepfert // J. Appl. Bacteriol. - 1974. - V. 37. - N 2. - P. 265-267.

183. Klein, F. Immunological studies of anthrax. 3. Comparison of antibody titer and immunity index of there anthrax immunisatinn / F. Klein, B. W. Haines, B. G. Mahlandt, R. E. Lincoln // J. Immunol. - 1963. - V. 91. - N 4. - P.431-432.

184. Knisely, R. F. Differential media for the identification of Bacillus anthracis / R. F. Knisely // J. Bacteriol. - 1965. - V. 90. - N 6. - P. 1778-1783.

185. Knisely, R. F. Selective medium for Bacillus anthracis / R. F. Knisely // J. Bacteriol. - 1966. - V.92. - N 3. - P. 784-786.

186. Krishnanchettiar, S. Expression and purification of the Bacillus anthracis protective antigen domain 4 / S. Krishnanchettiar, J. Sen, M. Caffrey // Protein Expr. Purif. - 2003. - V. 27. - N 2. - P. 325-330.

187. Large-scale production of protective antigen of Bacillus anthracis in anaerobic cultures / M. Puziss, L. C. Manning, J. W. Lynch [et al.] // Appl. Microbiol. - 1963. - V. 11. - N 4. - P. 330-334.

188. Leppla, S. H. Development of an improved vaccine for anthrax / S. H. Leppla, J. B. Robbins, R. Schneerson, J. Shiloach // J. Clin. Invest. - 2002. - V. 110. - N 2. - P. 141-144.

189. Lincoln R. E. Homogeneity of response of mouse and guinea pig strains to virulence tests with Bacillus anthracis and Pasteurelle tularensis / R. E. Lincoln, I. A. De Armon // J. Bacteriol. 1959. - V. 79. - N 5. - P. 640-650.

190. Little, S. F. Comparative efficacy of Bacillus anthracis live spore vaccine and protective antigen vaccine against anthrax in the guinea pig / S. F. Little, G. B. Knudson // Infect. Immun. - 1986. - V. 52. - N 2. - P. 509-512.

191. Little, S. F. Immunizing activity of anthrax vaccines against abberant strains of B. anthracis / S. F. Little, G. B. Knudson, F. C. Neidhardt // ASM Washington. Abst. Ann. Meet. Amer. Soc. Microbiol. - 1984. - P. 46.

192. Madsen, L. Method for preparing IgG F(ab') fragment using small amount of serum / L. Madsen, S. A. Rodkey // J. Immunol. Meth. - 1976. - N. 9. - P. 355-361.

193. Makino, S. Clonmg and C02-dependent expression the genetic region for encapsulation from Bacillus anthracis / S. Makino, C. Sasakawa, I. Uchida, N. Terakado // J. Molec. Microbiol. - 1988. - V. 2. - N 3. - P. 371-376.

194. Moayeri, M. Bacillus anthracis lethal toxin indused TNF-alpha-independent hypoxia-mediated toxicity in mice / M. Moayeri, D. Haines, H. A. Young, S. H. Leppla // J. Clin. Invest.

195. Molecular evolution and diversity in Bacillus anthracis as detected by amplified fragment length polymorphism markers / P. Keim, A. Kalif, J. Schupp [et al.] // J. Bacteriol., 1997. - Fevr. - P. 818-824.

196. Molnar, D. M. Alterations in the biological activity of protective antigen of Bacillus anthracis toxin / D. M. Molnar, R. A. Altenbem // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. - 1963. - V. 114. - № 2. - P. 294-297.

197. Moriya, Y. J. Studies on the avirulent variant of Bacillus anthracis and its prophilactic use / Y. J. Moriya // Showa Med. J. - 1961. -V. 21. - N 2. - P. 98107.

198. Nagy, E. Electron microscopic and biological studies on a highly specific anthrax phage / E. Nagy // Acta Microbiol. Acad. Sci. Hung. - 1975. - V. 22. - N 3. - P. 348-351.

199. OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals http : //www.oie.int/international-standardsetting/terrestrial-

manual/accessonline/ Accessed 3 Dek 2018.

200. OIE World Animal Health Information Database (WAHID) Interface: http://www.oie.int/wahid-prod/public.php page=home.

201. Pearce, T. W. A selective medium for Bacillus anthracistl / T. W. Pearce, E. O. Powell // J. Gen. Microbiol. - 1951. - V. 5. - N 2. - P. 387-390.

202. Protection against anthrax lethal toxin challenge by genetic immunization with a plasmid encoding the lethal factor protein / B. M/ Price, A. L. Liner, S. Park [et al.] // Infect. Immun. - 2001. - V. 69. - N 7. - P. 4509-4515.

203. Protective immunity mduced by bacillus anthracis toxin-deficient strainst / Pezard C., Weber M., Sirard J. C. // Infect. Immun. ... Figure.

204. Purification of Bacillus anthracis protective antigen by immunosorbent chromatography / D. K. Larson, G. J. Tcalton, J. W. Burnett [et al.] // Enzyme. Microb. Technol. - 1988. - V. 10. - № 1. - P.14-18.

205. Sternbach, G. The history of anthrax / G. Sternbach // J. Emerg. Med. -2003. - № 24. - P. 463-467. [PubMed].

206. Shlyakhov, E. Anthraxin skin testing: an alternative method for Anthrax vaccine and post-vaccinal immunity assessment / E. Shlyakhov, E. Rubinstein // J. Vet. Med. - 1996. - V. 43. - P.483-488.

207. Singh, Y. A deleted variant of Bacillus anthracis protective antigen is non-toxic and blocks anthrax toxin action in vivo / Y. Singh, V. K. Chaudhary, S. H. Leppla // J. Biol. Chem. - 1989. - V. 264. - N 32. - P. 19103-19107.

208. Slein, M. W. Mechanism of action of the toxin of Bacillus anthracis. 1. Effeet in vivo on some blood seem components / M. W. Slein, G. F. Logan // J. Bacteriol. - 1960. -V. 80. - N 1. - P. 77-85.

209. Smith, H. The chemical basis of the vinilence of Bacillus anthracis. 5. The specific toxin produced by Bacillus anthracis in vivo / H. Smith, J. Keppie, J. L. Stanley // Brit. J. Exp. Pathol. - 1955. - V. 36. - N 4. - P. 460-472.

210. Smith, H. Anthrax toxic complex / H. Smith, H. B. Stoner // Fed. Proc. - 1967. - V. 26. - N 5. - P.1554-1557.

211. Spore germination and virulence of Bacillus anthracis (Abstract) / A. L. Femelius, F. Klein, I. A. DeArmon [et al.] // Bacteriol. Proc. Soc. Amer. Bacteriologists. - 1960. - T. 1. - P. 43-44.

212. Stepanov, A. S. Role of chromosomally-encoded factors in virulence of B, anthracis for mice and guinea pigs / A. S. Stepanov, N. I. Mikshis, M. F. Bolotnikova // Proc. Intern. Workshop on Anthrax. Winchester, England, Sept. 1921, 1995. - Salisbury Med. Bull. - Special Supplcment. - 1996. - N 87. - P. 86-87.

213. Stephen, J. Anthrax toxin / J. Stephen // Pharm.Ther. - 1981 -V. 12. -N 3. - P. 501-513.

214. Thome, C. B. An agar-diffusion method for titrating Bacillus anthracis immunizing antigen and its application to a study of antigen production / C. B. Thorne, F. C. Belton // J. Gen. Microbiol. - 1957. - V. 17. - N 2. - P. 505-516.

215. Thorne, C. B. Production of toxin in vitro by Bacillus anthracis and its seperation into two components / C. B. Thorne, D. M. Molnar, R. E. Strange // J. Bacterial. - 1960. - V. 79. - N 3. - P. 450-455.

216. Treaent of anthrax infection with combination of ciprofloxacin and antibodies to protective antigen of Bacillus anthracis / V. A. Karginov, T. M. Robinson, J. Riemenschneider [et al.] // FEMS Immunol. and Medical Microbiol. -2004. -V. 40. - № 1. - P. 71-74.

217. United States Department of Agriculture, Animal and Plant Health Inspection Service, Veterinary Services [USDA APHIS, VS]. Epizootiology and ecology of anthrax [online]. Available at: 128 http://www.aphis.usda.gov/vs/ceah/cei/taf/emerginganimalhealthissuesfiles/anthrax .pdf. Accessed 3 Dek 2018.

218. Whitford, H.W. Factore affecting the laboratory diagnosis of anthrax / H.W. Whitford // J. Amer. Vet. Med. Assoc. - 1978. - V. 173. - N 11.- P. 1467-1469.

219. Wilkie, M.H. Characterization of anthrax toxin / M. H. Wilkie, M. K. Ward // Feder. Proceed. - 1967. - V. 26. - N 5. - P. 1527-1531.

220. World Organization for Animal Health (OIE) http : //www.oie. int/.

221. World Organization for Animal Health [OIE]. Terrestrial Animal Health Code.

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ

РНГА - реакция непрямой гемагглютинации PA - протективный антиген LF - летальный фактор EF - отечный фактор мкм -микрометр

ПЦР - полимеразная цепная реакция

МПА - мясопептонный агар

МПБ - мясопептонный бульон

МППБ - мясопептонный печеночный бульон

КА - кровяной агар

ПЖА - полужидкий агар

МЭБ - Международное эпизоотическое бюро

FAO - Food and Agriculture Organization

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения

LD50 - médian lethal dose

СТО - стандарт организации

НД - нормативный документ

ИмД50 - средняя иммунизирующая доза

МРС - мелкий рогатый скот

ФГБУ «ВГНКИ» - Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов

ФГБНУ «ФЦТРБ» - Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности

ВНИИВВиМ - Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии

ПРИЛОЖЕНИЯ

I Наличие посторонней примеси, плесени, неразбивающихся хлопьев, трещин флаконовСампул1) 2 Не допускается в ресуспензирован ном виде 3 Визуально 4 Посторонние примеси, плесень, неразвивающиеся хлопья, трещины ампул отсутствуют. _5_

Время ресуспензирования, мин, не более 3,0 Визуально Время ресуспензирования 2,0 мин.

Микробиологическ ая чистота В посевах вакцины на питательных средах не должно быть роста посторонней бактериальной и грибной микрофлоры. Холодильник Атлант сер. номер 0303858551 Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Термостат суховоздушный ТСО 1/80 СПУ сер. номер 10066 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 Контаминация бактериальной и грибной микрофлорой не установлена.

Типичность роста культуры штамма 55-ВНИИВВиМ В посевах на питательные среды должен быть типичный рост культуры штамма 55-ВНИИВВиМ. На кровяном агаре через 24 ч инкубирования признаки гемолиза должны отсутствовать. Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 В посевах на питательные среды типичный рост культуры штамма 55-ВНИИВВиМ. На кровяном агаре через 24 часа инкубирования признаки гемолиза отсутствуют.

Массовая доля спор, % ?5,0±5,0 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220,120,04,3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 Массовая доля спор составляет 100%. ±5,0

Подвижность культуры штамма 55-ВНИИВВиМ Должны быть только неподвижные палочки и Цепочки Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 При микроскопии препарата «раздавленная капля» обнаружены неподвижные палочки и состоящие из них цепочки.

ние Должны быть только бескапсульные бациллы Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 В мазках из культуры штамма 55-ВНИИВВиМ, выросшая в среде «Казань» установлены только бескапсульных форм сибиреязвенного микроба. В контрольных пробах -капсульная форма штамма М-71.

Безвредность Вакцина должна быть безвредной Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Вакцина безвредная. Все кролики в течение 10 суток после введения вакцины остались живыми.

Остаточная вирулентность Вакцина должна быть слабовирулентной Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Вакцина слабовирулентная. Вакцина вызвала гибель 2 из 12 морских свинок и развитие отека в месте инъекции, а также гибель 5 белых мышей из 10

i 4ммуногенность 1 Вакцина должна эыть шмуногенной Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Вакцина иммуногенная. Через 10 суток после заражения 10 из 10 иммунизированных морских свинок остались живыми; а 10 из 10 неиммунизированных морских свинок (контрольных) погибли.

Лаборатория качества и стандартизации бактер

ииных лекарственных средств

ФГБУ «ВГНКИ»

ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ от 02.03.2020 г.

1. Наименование испытуемого образца:

Вакцина против сибирской язвы животных из штамма 55-ВНИИВВиМ живая сухая

2. Номер сепии - 1.45-03 от 04.2019г.

дата поступления дата проведения

на испытания 13.12.2019г. испытания 14.01.2020г -02.03.2020 г.

3. НД на продукцию НД № 13-5-2/1062 «Ветеринарные препараты. Показатели качества.

обозначение НД: ГОСТ, ОСТ, ТУ, спецификация изготовителя или др.

Требования и нормы» и ГОСТ Р 52616-2006

4. Методы испытаний ГОСТ Р 52616-2006

обозначение НД: ГОСТ, ОСТ, ТУ или др.

5. Дополнительные сведении - работа выполняется в рамках НИР по теме: «Совершенствование методов контроля безвредности и иммуногенной активности вакцины против сибирской язвы. Определение оптимальной иммунизирующей дозы сибиреязвенной вакцины для коз»

Испытательное Результаты Погреши

Контролируемые показатели оборудование, испытаний ость

наименования нормы по НД средства измерени

измерений я(±)

1 2 3 4 5

Внешний вид и Однородная Визуально Однородная пористая

цвет пористая масса масса серовато-белого

беловато-серого цвета.

цвета

продолжение на следующей странице

1 Наличие посторонней примеси, плесени, неразвивающихся хлопьев, трещин флаконов(ампул) 2 Не допускается в ресуспензирован ном виде 3 Визуально 4 Посторонние примеси, плесень, неразвивающиеся хлопья, трещины ампул отсутствуют. 5

Время ресуспензирования, мин, не более 3,0 Визуально Время ресуспензирования 1,0 мин.

Микробиологическ ая чистота В посевах вакцины на питательных средах не должно быть роста посторонней бактериальной и грибной микрофлоры. Холодильник Атлант сер. номер 0303858551 Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Термостат суховоздушный ТСО 1/80 СПУ сер. номер 10066 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 Контаминация бактериальной и грибной микрофлорой не установлена.

Типичность роста культуры штамма 55-ВНИИВВиМ В посевах на питательные среды должен быть типичный рост культуры штамма 55-ВНИИВВиМ. На кровяном агаре через 24 ч инкубирования признаки гемолиза должны этсутствовать. Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 В посевах на питательные среды типичный рост культуры штамма 55-ВНИИВВиМ. На кровяном агаре через 24 часа инкубирования признаки гемолиза отсутствуют.

Массовая доля спор, % 95,0±5,0 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220,120,04,3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 Массовая доля спор составляет 90 %. ¿5,0

Морфологические свойства В мазках из бульонных и агаровых культур, окрашенных по Граму, должны быть крупные (310) мкм грамположитель ные палочки, распаложенные поодиночке или соединенные в цепочки, а также свободно лежащие споры, представляющие собой блестящие овальные, иногда круглые образования, размером (1,21,5) х (0,8-1,0) мкм, в отдельных случаях споры, находящиеся в центре вегетативной клетки или вне ее. Инволюционные формы бактерий должны отсутствовать. Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 В окрашенных мазках -крупные, грамположительные палочки, короткие цепочки, состоящие из палочек, круглые или слегка овальные споры. Инволюционные формы бактерий отсутствуют.

f с Соличество живых пор, млн/см3, для 22,0±2,0 Холодильник Атлант сер. 20,0 млн/см3 ±2,0

подкожного применения номер 0303858551 Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981

Подвижность культуры штамма 55-ВНИИВВиМ Должны быть только неподвижные палочки и цепочки Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 При микроскопии препарата 1 «раздавленная капля» обнаружены неподвижные палочки и состоящие из них цепочки.

Капсулообразова-ние Должны быть только бескапсульные бациллы Термостат LIB Tech, сер. номер 2014102872 Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Микроскоп ЛОМО сер. номер 071940 В мазках из культуры штамма 55-ВНИИВВиМ, выросшая в среде «Казань» установлены только бескапсульных форм сибиреязвенного микроба. В контрольных пробах -капсульная форма штамма М-71.

Безвредность Вакцина должна быть безвредной Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Вакцина безвредная. Все кролики в течение 10 суток после введения вакцины остались живыми.

Эстаточная вирулентность Вакцина должна быть слабовирулентной Ламинарный шкаф «Ламинар-С-1,0», сер. номер 220.120.04.3981 Вакцина слабовирулентная. Вакцина вызвала гибель 1 из 12 морских свинок и развитие отека в месте инъекции, а также гибель 2 белых мышей из 10.

V Заведующему отделением качества и стандартизации иммунобиологических лекарственных средств Научно-производственной базы В.Н. Боровому

Паспорта штаммов

РОССЕЛЬХОЗНАДЗОР

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «ВСЕРОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ЦЕНТР КАЧЕСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ И КОРМОВ»

(ФГБУ «ВГНКИ»)

Паспорт штамма микроорганизма

1. Наименование рода, вида, подвида микроорганизма Bacillaceae, Бациллы, Bacillus anthracis

2. Наименование штамма Bacillus anthracis «Пастера»

3. Условное обозначение, присвоенное депозитором Bacillus anthracis «Пастера»

4. Учреждение-депозитор с указанием почтового адреса ФГБУ «ВГНКИ»

5. Автор (авторы) штамма: ФИО J1. Пастер

6. Источник выделения штамма: субстрат, географический пункт, дата выделения Получено путем длительной инкубации при 42 °С-43°С, 1954 г.

7. Из какого учреждения получен данный штамм -

8. Методы идентификации штамма, кем идентифицирован (фамилия, имя, отчество), ссылка на использованные определители Бактериологический и биологический методы идентификации. С помощью ПЦР-тест-системы «СИБ-ДИФ» подтверждена принадлежность штамма к виду Bacillus anthracis (рХ01-/РХ02+).

9. Основание для депонирования (практическая ценность культуры, антагонист, продуцент физиологически активных веществ и т.д.) Музейный

10. Культурально-морфологические свойства штамма и генетические особенности штамма Факультативный анаэроб. В посевах в МТТБ -характерный рост сибиреязвенной культуры с просветлением среды и образованием на дне пробирки рыхлого осадка, на МПА - типичный рост колоний «R» -формы с «шагреневой» поверхностью. Вегетативные формы имеют вид стройных грамположительных палочек и цепочек, споры - круглые и слегка овальной формы, неподвижны. Капсульные сибиреязвенные бациллы.

11. Физиолого-биохимические свойства штамма -

12. Условия культивирования: - наименования питательных сред. - рН среды. - температура и продолжительность выращивания. Срок хранения и периодичность пересева культуры штамма в нативной форме МПА, МПБ pH 7,2-7,6 35-37°С, 16-24ч Не более пяти пассажей на питательных средах.

13. Применяемый способ и условия хранения штамма в коллекции В лиофилизированном виде при температуре 2-8°С в холодильнике

14. Рекомендуемые способы и условия хранения (если известно). Лиофилизация: продолжительность выращивания на питательной среде (возраст культуры), состав защитной среды, титр клеточной суспензии, режим сублимационного высушивания, температура хранения, срок хранения. Криоконсервация: продолжительность выращивания на питательной среде (возраст культуры), состав защитной среды, титр клеточной суспензии, скорость замораживания (град/мин), температура хранения, срок хранения. В лиофилизированном виде при температуре 2-8°С в холодильнике

15. Диссоциация культуры в зависимости от метода хранения: описание морфологических типов колоний на конкретной среде и, более подробно, тип, сохраняющий полезный или диагностический признак Диссоциированные формы колоний составляют 2%.

16. Антигенные свойства ИмДзо - 0,05 млн.

17. Биологические свойства Культура штамма обладает чувствительностью к сибиреязвенным бактериофагам. Штамм безвреден для человека.

18. Пассажирован через животных -

19. На какой среде высылается штамм, количество и род упаковки В лиофилизированном виде в ампулах.

20. Дата изготовления 05.11.2019 г

21. Дополнительные сведения Количество живых спор в 1,0 см3 - 770 млн.

Зав. лабораторией качества и стандартизации бактерийных лекарственных средств

2019 г.

О.Д. Скляров

РОССЕЛЬХОЗНАДЗОР

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «ВСЕРОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ЦЕНТР КАЧЕСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ И КОРМОВ»

(ФГБУ «ВГНКИ»)

Паспорт штамма микроорганизма

1. Наименование рода, вида, подвида микроорганизма Bacillaceae, Бациллы, Bacillus anthracis

2. Наименование штамма Bacillus anthracis СТИ-1

3. Условное обозначение, присвоенное депозитором Bacillus anthracis СТИ-1

4. Учреждение-депозитор с указанием почтового адреса ФГБУ «ВГНКИ»

5. Автор (авторы) штамма: ФИО H.H. Гинсбург

6. Источник выделения штамма: субстрат, географический пункт, дата выделения Получено путем выращивании на чашки со свернувшейся нормальной лошадиной сывороткой из вирулентной культуры «Красная Нива», 1940 г.

7. Из какого учреждения получен данный штамм Санитарно-технический институт

8. Методы идентификации штамма, кем идентифицирован (фамилия, имя, отчество), ссылка на использованные определители Бактериологический и биологический методы идентификации. С помощью ПЦР-тест-системы «СИБ-ДИФ» подтверждена принадлежность штамма к виду Bacillus anthracis (рХ01+/РХ02-).

9. Основание для депонирования (практическая ценность культуры, антагонист, продуцент физиологически активных веществ и т.д.) Производственный

10. Культурально-морфологические свойства штамма и генетические особенности штамма Факультативный анаэроб. В посевах в МПБ — характерный рост сибиреязвенной культуры с просветлением среды и образованием на дне пробирки рыхлого осадка, на МПА -типичный рост колоний «R» - формы с «шагреневой» поверхностью. Вегетативные формы имеют вид стройных грамположительных палочек и цепочек, споры - круглые и слегка овальной формы, неподвижны. Бескапсульные сибиреязвенные бациллы.

11. Физиолого-биохимические свойства штамма -

12. Условия культивирования: - наименования питательных сред. - рН среды. - температура и продолжительность выращивания. Срок хранения и периодичность пересева культуры штамма в МПА, МПБ pH 7,2-7,6 35-3 7°С, 16-24ч Не более пяти пассажей на питательных средах.

нативной форме

13. Применяемый способ и условия хранения штамма в коллекции В лиофилизированном виде при температуре 2-8°С в холодильнике

14. Рекомендуемые способы и условия хранения (если известно). Лиофилизация: продолжительность выращивания на питательной среде (возраст культу ры), состав защитной среды, титр клеточной суспензии, режим сублимационного высушивания, температура хранения, срок хранения. Криоконсервация: продолжительность выращивания на питательной среде (возраст культуры), состав защитной среды, титр клеточной суспензии, скорость замораживания (град/мин), температура хранения, срок хранения. В лиофилизированном виде при температуре 2-8°С в холодильнике

15. Диссоциация культуры в зависимости от метода хранения: описание морфологических типов колоний на конкретной среде и, более подробно, тип, сохраняющий полезный или диагностический признак Диссоциированные формы колоний отсутствуют на МПА.

16. Антигенные свойства ИмД50 - 0,58 млн.

17. Биологические свойства Штамм безвреден для человека.

18. Пассажирован через животных -

19. На какой среде высылается штамм, количество и род упаковки В лиофилизированном виде в ампулах.

20. Дата изготовления 12.02.2020 г

21. Дополнительные сведения Количество живых спор в 1,0 см3 - 2 млрд.

Зав. лабораторией

РОССЕЛЬХОЗНАДЗОР

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «ВСЕРОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ЦЕНТР КАЧЕСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ И КОРМОВ» (ФГБУ «ВГНКИ»)

«_» _20 г.

Россия, 123022, Москва, Звенигородское шоссе д.5 тел., факс [phone],

E-mail: [e-mail]

ПАСПОРТ Название штамма: Bacillus anthracis М -71

1. Наименование семейства, рода, вида, подвида микроорганизма Bacillaceae, Бациллы, Bacillus anthracis

2. Номер штамма или условное обозначение, присвоенный депозитором Bacillus anthracis М-71

3. Номер штамма или условное обозначение в других коллекциях -

4. Учреждение-депозитор с указанием почтового адреса ГНУ «ВНИИВВиМ», 601120, г. Покров, Владимирской обл.

5. Автор (авторы) штамма: ФИО Сотрудники ГНУ ВНИИВВиМ

6. Источник выделения штамма: субстрат, географический пункт, дата выделения Выделен из трупа свиньи в 1973г.

7. Из какого учреждения получен данный штамм и дата его получения ГНУ «ВНИИВВиМ», 1992г.

8. Методы идентификации штамма, кем идентифицирован (фамилия, имя, отчество), ссылка на использованные определители

9. Основание для депонирования (практическая ценность культуры, антагонист, продуцент физиологически активных веществ и т.д.)

10. Культурально -морфологические свойства штамма и генетические особенности штамма Факультативный анаэроб. В посевах в МПБ - характерный рост сибиреязвенной культуры с просветлением среды и образованием на дне пробирки рыхлого осадка, на МПА -типичный рост культуры в виде серовато-беловатых мелкозернистых колоний с серебристым оттенком «R» - и «RO» форм. Вегетативные формы имеют вид стройных грамположительных палочек и цепочек, споры - круглые и слегка овальной формы, неподвижны. Капсульные сибиреязвенные бациллы.

11. Физиолого-биохимические свойства штамма -

12. Условия культивирования: - наименования питательных сред. МПА, МПБ

- рН среды. - температура и продолжительность выращивания. Срок хранения и периодичность пересева культуры штамма в нативной форме pH 7,2-7,6 35-37°С, 16-24ч.

13. Применяемый способ и условия хранения штамма в коллекции В лиофилизированном виде при температуре 2-8°С в холодильнике

14. Рекомендуемые способы и условия хранения (если известно). Лиофилизация: продолжительность выращивания на питательной среде (возраст культуры), состав защитной среды, титр клеточной суспензии, режим сублимационного высушивания, температура хранения, срок хранения Криоконсервация: продолжительность выращивания на питательной среде (возраст культуры), состав защитной среды, титр клеточной суспензии, скорость замораживания (град/мин), температура хранения, срок хранения. В лиофилизированном виде при температуре 2-8°С в холодильнике

15. Диссоциация культуры в зависимости от метода хранения: описание морфологических типов колоний на конкретной среде и, более подробно, тип, сохраняющий полезный или диагностический признак Диссоциированные формы колоний отсутствуют на МГ1А.

16. Антигенные свойства -

17. Биологические свойства Культура штамма обладает чувствительностью к сибиреязвенным бактериофагам. Подкожное введение культуры штамма М-71 в дозе 1,0 млн спор трём кроликам массой 2,0-2,5кг, не вызывает их гибели в течение десятидневного наблюдения. Подкожное введение культуры штамма М-71 в дозе 1,0 млн спор 10 морским свинкам массой 350-400г., вызывает их гибели в течение десятидневного наблюдения. Штамм безвреден для человека. С помощью ПЦР-тест-системы «СИБ-ДИФ» подтверждена принадлежность штамма к виду Bacillus anthracis (pXOl-/РХ02+).

18. Пассажирован через животных Пассажирован через организм морских свинок.

19. На какой среде высылается штамм, количество и род упаковки -

20. Дата выпуска (выработки) 02.11.2018г.

21. Дополнительные сведения Производственно - контрольный штамм. Количество живых спор в 1,0см3 культуры штамма М-71 - 545 млн.