Биотехнологические и микробиологические аспекты совершенствования фагодиагностики сибирской язвы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Головинская, Татьяна Михайловна

• Головинская, Татьяна Михайловна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Головинская, Татьяна Михайловна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биологические особенности возбудителя сибирской язвы

1.2 Сибиреязвенные бактериофаги и их биологические

свойства

1.3 Практическое применение сибиреязвенных бактериофагов

1.3.1 Возможность использования бактериофагов для дезинфекции почвенных очагов и лечения сибирской язвы

1.3.2 Использование бактериофагов в тестах индикации

Bacillus anthracis

1.3.3 Идентификационные тесты с применением сибиреязвенных бактериофагов

1.4 Способы производства препаратов бактериофага

1.5 Механизмы фагочувствительности и фагорезистентности

штаммов Bacillus anthracis

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Материалы

2.1.1 Бактериофаги

2.1.2 Штаммы возбудителя сибирской язвы и близкородственных представителей рода Bacillus

2.1.3 Питательные среды

2.1.4 Химические реактивы

2.1.5 Аппаратура

2.2 Методы исследования

2.2.1 Методы изучения фенотипических свойств сибирской язвы

2.2.1.1 Тест на обнаружение капсулы in vitro

2.2.1.2 Метод выращивания спор В.anthracis на среде Гладстона-Филдса

2.2.1.3 Приготовление взвесей В. anthracis

2.2.1.4 Определение концентрации жизнеспособных спор сибиреязвенного микроба

2.2.2 Методы размножения и изучения свойств сибиреязвенных бактериофагов

2.2.2.1 Метод получения (размножения) бактериофага сибиреязвенного Гамма А-26

2.2.2.2 Метод определения концентрации фаговых частиц

2.2.2.3 Определение чувствительности культур к специфическим бактериофагам

2.2.2.4 Методы оценки специфической активности бактериофагов

2.2.2.5 Метод определения нарастания титра бактериофага (РНФ)

2.2.3 Методы статистической обработки результатов

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА БИОТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА ПРЕПАРАТА БАКТЕРИОФАГА ДИАГНОСТИЧЕСКОГО СИБИРЕЯЗВЕННОГО ГАММА А-26 ЖИДКОГО

3.1 Подбор штамма В. anthracis для размножения сибиреязвенного бактериофага

3.2 Разработка оптимальных параметров репродукции бактериофага сибиреязвенного Гамма А-26

3.3 Сравнительная характеристика экспериментально-производственных серий бактериофага диагностического сибиреязвенного Гамма А-26 жидкого

ГЛАВА 4. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ СИБИРЕЯЗВЕННЫХ

БАКТЕРИОФАГОВ

4.1 Сравнительная оценка свойств сибиреязвенных бактериофагов, определяющих их пригодность для промышленного производства

4.2 Определение спектра специфической литической активности сибиреязвенных бактериофагов

4.3 Изучение специфичности диагностических бактериофагов

Bacillus anthracis

ГЛАВА 5. ОПТИМИЗАЦИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ РАЗЛИЧНЫХ СИБИРЕЯЗВЕННЫХ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

5.1 Изучение возможности использования видоспецифического сибиреязвенного бактериофага R/D-Ph-6 для индикации

возбудителя В. anthracis в РНФ

5.1.1 Изучение динамики изменения концентрации В. anthracis и

сибиреязвенного бактериофага R/D-Ph-6 при культивировании

в бульонной культуре

5.1.2 Подбор оптимальных условий для получения высоких концентраций бактериофага R/D-Ph-6 при размножении на

чистых культурах В. anthracis

5.1.3 Испытание специфической активности бактериофага R/D-Ph-6 в РНФ на различных штаммах сибиреязвенного

микроба

5.1.4 Изучение специфичности бактериофага R/D-Ph-6 в РНФ на различных штаммах сапрофитных представителей рода

Bacillus

5.1.5 Изучение специфической активности бактериофага

R/D-Ph-6 в РНФ в смешанных культурах

5.1.6 Изучение специфической активности бактериофага

R/D-Ph-6 в РНФ на пробах из объектов окружающей среды

5.2 Изучение возможности повышения эффективности фагодиагно-стики сибирской язвы при комплексном использовании бактериофагов с различным литическим спектром

5.2.1 Выделение фагорезистентных сибиреязвенных культур и определение их чувствительности к различным

бактериофагам

5.2.2 Разработка оптимальной схемы комплексного применения сибиреязвенных бактериофагов с различным спектром специфической активности для идентификации и

фаготипирования штаммов В. anthracis

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК сокращений и условных обозначений

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биотехнологические и микробиологические аспекты совершенствования фагодиагностики сибирской язвы»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. В Российской Федерации практически ежегодно регистрируется заболеваемость людей и животных сибирской язвой, которая так же как во всем мире не имеет тенденции к снижению [Бургасов П.Н. с соавт., 1970; Бургасов П.Н., Рожков Г.И., 1984; Маринин Л.И. с соавт., 1999; Рязанова А.Г. с соавт., 2011; 2012; Онищенко Г.Г. с соавт. 1999, 2012; Куличенко А.Н. с соавт., 2012; Антюганов С.Н. с соавт., 2012, 2012а; Еременко Е.И. с соавт., 2010, 2013].

Опасность сибирской язвы в первую очередь связана с тяжестью течения заболевания людей и животных, высокой летальностью, значительностью экономических затрат на лечение больных и проведение противоэпидемических и про-тивоэпизоотических мероприятий. Другим аспектом этой проблемы является длительная выживаемость В. аШкгасш в споровой форме в окружающей среде, что приводит к формированию стойких почвенных очагов.

Составленный «Кадастр стационарно неблагополучных по сибирской язве пунктов Российской Федерации» содержит сведения о местонахождении 36091 стационарно неблагополучных пунктов с почвенными очагами сибирской язвы [Кадастр...М., 2005, Маринин Л.И., 2008], значительная часть которых находится на юге РФ [Хотько Н.И., 1994; Киреев Ю.Г. с соавт., 1996, Еременко Е.И. с соавт., 1996; Агапов В.А. с соавт., 1997; Петров С.П. с соавт., 1997; Петрюк В.А. с соавт., 1997; Куличенко А.Н. с соавт., 2010; Буравцева Н.П. с соавт., 2011, 2011а,2012; Мезенцев В.М. с соавт., 2012; Антюганов С.Н. с соавт., 2012].

Степень разработанности темы исследования. В настоящее время для проведения теста на фагочувствительность при идентификации культур В. аЫкга-си, в Российской Федерации производится бактериофаг сибиреязвенный ЫЛЭ-РЬ-б в виде фаг-тест-набора «Оболенск Ю» для медицинского применения (ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», г. Оболенск) и бактериофаг сибиреязвенный ГаЬ-ВНИИВВиМ - для ветеринарно-

го применения (ГНУ Всероссийский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук, г. Покров).

Бактериофаги, применяющиеся для идентификации культур В. anthracis, обладают различным спектром специфической литической активности и неодинаковой специфичностью [Левина E.H., Архипова В.Р., 1967; Ипатенко с соавт., 1989; Васильев П.Г. с соавт., 1999; Цыганкова О.И., 2007; Саяпина Л.В., с соавт., 2011]. В связи с этим идет постоянный поиск новых бактериофагов, оптимальных по указанным свойствам.

Производство бактериофагов требует максимальной оптимизации технологического процесса с учетом их индивидуальных биологических особенностей, как для обеспечения эффективной репродукции бактериофага, так и для контроля специфической активности и специфичности. Кроме этого, усовершенствование технологии производства преследует цели повышения качества готовой продукции и срока годности препарата, а также уменьшения количества манипуляций в биотехнологической производственной схеме, снижение затрат времени и средств.

Ранее был предложен препарат бактериофага сибиреязвенного Гамма А-26 [Солодовников Б.В. с соавт.,1997, 1997а], однако, техническая документация на его производство не была разработана и утверждена. Отсутствие регистрационного удостоверения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения не позволяло регламентировать его применение для диагностики сибирской язвы.

Фаготипирование широко используется как метод изучения индивидуальных особенностей штаммов микроорганизмов [Гремякова Т.А. с соавт., 1999; Сидоренко C.B. с соавт., 2003; Митрохина E.H., 2006; Скородумова Д.И., 2007 и др.], но до сих пор этот подход не был разработан для изучения штаммов В. anthracis.

Таким образом, очевидна необходимость разработки биотехнологии получения и внедрения в производство сибиреязвенного бактериофага, оптимизации схем анализа для совершенствования фагодиагностики сибирской язвы.

Цель исследования — совершенствование фагодиагностики сибирской язвы путем разработки биотехнологии производства препарата «Бактериофаг диагно-

стический сибиреязвенный Гамма А-26 жидкий» и схемы комплексного применения сибиреязвенных бактериофагов, обеспечивающей максимальную чувствительность и специфичность анализа.

Задачи исследования:

1. Разработать производственную биотехнологию препарата «Бактериофаг диагностический сибиреязвенный Гамма А-26 жидкий» с широким спектром специфической активности.

2. Осуществить подбор штаммов В. anthracis с различной чувствительностью к литическому действию сибиреязвенных бактериофагов для производственного контроля специфической активности и штаммов сапрофитов рода Bacillus для подтверждения специфичности препарата «Бактериофаг диагностический сибиреязвенный Гамма А-26 жидкий».

3. Разработать техническую документацию на препарат «Бактериофаг диагностический сибиреязвенный Гамма А-26 жидкий» и внедрить его в практику.

4. Провести сравнительную оценку специфической активности и специфичности сибиреязвенных бактериофагов Гамма А-26, ВА-9, К ВИЭВ, R/D-RH-6, Fah-ВНИИВВиМ, Саратов, 186.

5. Экспериментально обосновать выбор сибиреязвенных бактериофагов для идентификации штаммов возбудителя сибирской язвы, для индикации в материале из объектов окружающей среды, а также для комплексного проведения идентификации и фаготипирования штаммов В. anthracis.

6. Оптимизировать параметры проведения теста реакции нарастания титра фага (РНФ) с использованием бактериофага R/D-Ph-6. Оценить специфичность теста при использовании смешанных культур В. anthracis и близкородственных сапрофитов и материала, имитирующего пробы окружающей среды.

7. Разработать схему комплексного применения сибиреязвенных бактериофагов с различным спектром специфической активности для совершенствования лабораторной диагностики В. anthracis.

8. Разработать схему фаготипирования штаммов сибиреязвенного микроба и оценить ее эффективность.

Научная новизна исследования. На представительной выборке штаммов В. anthracis (114) и близкородственных представителях рода Bacillus (75) получены новые данные о специфической активности и специфичности сибиреязвенных бактериофагов Fah-ВНИИВВиМ, R/D-Ph-6, Гамма А-26, ВА-9, К ВИЭВ, Саратов и 186.

Впервые изучены биологические и диагностические свойства бактериофага 186, не применявшегося ранее для дифференциации В. anthracis от близкородственных сапрофитов, что позволило рекомендовать его использование для комплексного фаготипирования штаммов возбудителя сибирской язвы.

Научно обоснован выбор бактериофагов для наиболее достоверной идентификации (100 %) штаммов В. anthracis, в тесте РНФ с целью индикации возбудителя сибирской язвы и для комплексного проведения идентификации и фаготипирования.

Определен комплекс бактериофагов, обеспечивающих 100 % чувствительность и специфичность фагодиагностики сибирской язвы.

На основе анализа чувствительности к отдельным бактериофагам штаммов В. anthracis и выделенных из их популяции фагорезистентных вариантов впервые разработана схема фаготипирования с применением бактериофагов Гамма А-26 и 186, позволяющая определять фаготип.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований отражены в следующих технических и методических документах, нашедших применение в научно-исследовательской и практической деятельности учреждения.

1. Нормативная документация на препарат «Бактериофаг диагностический сибиреязвенный Гамма А-26 жидкий»: технические условия (ТУ) 9386-01301897080-2009, пусковой регламент (ПУР) № 01897080-03-09, инструкция по применению. Получено регистрационное удостоверение от Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения № ФСР 2011/10451.

2. Методические рекомендации «Комплексное применение сибиреязвенных бактериофагов Гамма А-26 и 186 для идентификации и фаготипирования штаммов Bacillus anthracis», утвержденные директором ФКУЗ Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора, 3 сентября 2013 г., протокол заседания Ученого совета № 8.

Налажено производство препарата «Бактериофаг диагностический сибиреязвенный Гамма А-26 жидкий»

Результаты исследований используются для чтения лекций и проведения семинарских занятий на курсах повышения квалификации в ФКУЗ Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора.

Методология и методы исследования. При подготовке и реализации программы исследования использована методология, базирующаяся на традиционных, адаптированных к специфике поставленных задач, методах. В исследованиях использовали методы: биотехнологические и микробиологические, с последующей современной компьютерной статистической обработкой и научным анализом полученных данных.

Положения, выносимые на защиту.

1. Разработанная биотехнология производства бактериофага сибиреязвенного Гамма А-26 позволяет получать препарат, отвечающий регламентированным требованиям, обеспечивающий идентификацию штаммов сибиреязвенного микроба, различающихся по фенотипическим и генетическим свойствам, и стабильно сохраняющий диагностические свойства в течение гарантийного срока годности.

2. Штаммы возбудителя сибирской язвы различаются по чувствительности к специфическим бактериофагам: 99,1 % исследованных штаммов чувствительны к бактериофагам Гамма А-26, ВА-9, R/D-Ph-6, и только 58,7-65,7 % чув-

ч _______

ствительны к бактериофагам Fah-ВНИИВВиМ, 186, Саратов, К ВИЭВ.

3. Применение бактериофага R/D-Ph-6 с широким спектром специфической активности в тесте РНФ с оптимизированными параметрами обеспечивает

точность анализа при тестировании смешанных культур и материала, имитирующего пробы окружающей среды в тесте индикации В. аЫкгаш.

4. Разработанная схема комплексного применения бактериофагов Гамма А-26 и КЯ)-РЬ-6 или бактериофага 186, в совокупности лизирующих весь спектр изученных сибиреязвенных штаммов, различающихся по фенотипическим и генетическим свойствам, обеспечивает 100 % чувствительности и 100 % специфичности фагодиагностики сибирской язвы.

5. По чувствительности к бактериофагам Гамма А-26 и 186 штаммы сибиреязвенного микроба разделяются на 3 фаготипа.

Степень достоверности и апробация результатов. Результаты исследований получены с использованием современного поверенного оборудования с привлечением статистических методов обработки данных.

Материалы диссертации доложены на итоговых научно-практических конференциях ФКУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора (Ставрополь, 2012, 2013 гг.).

Материалы диссертации были представлены на Всероссийской научной конференции «Проблемы современной эпидемиологии. Перспективные средства и методы лабораторной диагностики и профилактики актуальных инфекций» (Санкт-Петербург, 2009); научно-практической конференции молодых ученых и специалистов научно-исследовательских организаций Роспотребнадзора «Современные технологии обеспечения биологической безопасности» (Оболенск, 2010); X Межгосударственной научно-практической конференции государств — участников СНГ «Актуальные проблемы предупреждения и ликвидации последствий чрезвычайных ситуаций в области санитарно-эпидемиологического благополучия населения государств-участников СНГ в современных условиях», (Ставрополь, 2010); Юбилейной Всероссийской научной конференции, посвященной 75-летию кафедры общей и военной эпидемиологии и 90-летию со дня рождения академика В.Д. Белякова «Отечественная эпидемиология в XXI веке: приоритетные направления развития и новые технологии в диагностике и профилактике болезней человека» (Санкт-Петербург, 2012); Всероссийской научно-практической конферен-

и

ции с международным участием «Актуальные проблемы болезней общих для человека и животных» (Ставрополь, 2012); XI Межгосударственной научно-практической конференции «Современные технологии в совершенствовании мер предупреждения и ответных действий на чрезвычайные ситуации в области санитарно-эпидемиологического благополучия населения» (Саратов, 2012); Региональной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия в Причерноморском регионе» (Ставрополь, 2013).

Публикации. Основное содержание диссертации отражено в 13 опубликованных работах. Из них: в ведущих рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК - 3 статьи, депонировано - 1 работа, в сборниках научных трудов, материалах научных и научно-практических конференций - 9 статей.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 146 страницах компьютерного текста, содержит 33 таблицы и 9 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, включающих описание материалов и методов исследований и экспериментальную часть; заключения; выводов. Список литературы включает 147 источников, из них: 98 - отечественных и 49 - зарубежных.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биологические особенности возбудителя сибирской язвы

Сибирская язва — острое инфекционное заболевание животных и человека, вызываемое Bacillus anthracis.

Потенциал инфекции поддерживается существованием множества почвенных очагов, которые проявляют себя в течение многих лет периодическими вспышками сибирской язвы у сельскохозяйственных животных и сопутствующими им заболеваниями людей.

Ежегодно в мире регистрируется более 20000 случаев сибирской язвы [Caksen Н. et al., 2000].

Применение спор В. anthracis в качестве бактериологического оружия обусловлено легкостью получения, возможностью скрытного применения, высокой эффективностью [Седов A.B. с соавт., 2002].

Возбудитель сибирской язвы В. anthracis, или сибиреязвенный микроб, по данным определителя бактерий Берги [Holt J.G., 1980], относится к классу Schiz-omycetes, порядку Eubacteriales, семейству Bacillaceae, роду и подроду Bacillus.

В связи с тем, что В. anthracis, В. cereus, В. thuringiensis, В. mycoides, В. pseudomycoides, В. weichenstephanensis имеют ряд сходных морфологических и культуральных свойств, а также генетическое родство, их относят к группе Bacillus cereus [Priest F.G.et al., 1988; Turnbull P.C.B., Kramer J.M., 1991; Nakamura L.K., 1998; Lechner S. et al., 1998].

Все представители группы В. cereus являются почвенными спорообразую-щими микроорганизмами, но вызывать острую инфекцию у человека и животных способен только В. anthracis. Наиболее близкий к бацилле сибирской язвы вид В. cereus синтезирует энтеротоксин и способен вызывать у людей и животных пищевые токсикоинфекции, кроме того, описаны поражения тканей целого ряда

органов, вызванные этим микроорганизмом [Руководство по мед. микроб., 2010; Helgason E.et al., 2000; Willey T.L., Ellar D.J., 2003; O'Donoqhue К., Ellar D.J., 2003].

Принятая у нас в стране схема исследования материала на наличие возбудителя сибирской язвы предусматривает выделение культуры и её идентификацию на основании результатов целого комплекса тестов, в число которых входит и чувствительность к сибиреязвенным бактериофагам.

Однако иногда выделяют штаммы B.anthracis, которые по одному или нескольким тестам отличаются от типичных описаний свойств этого микроорганизма. Некоторые штаммы сибиреязвенного микроба отличаются от типичных по морфологии, характеру роста на питательных средах, способности формировать капсулу в специальных условиях, степени вирулентности и некоторым биохимическим свойствам (резистентные к действию сибиреязвенных бактериофагов, устойчивые к антибиотикам, изменена способность продукции протеаз, гемолитических продуктов, щелочной фосфатазы и образование спор). Все это делает идентификацию В. anthracis затруднительной даже при использовании современных бактериологических, биохимических и молекулярно-генетических методов исследования [Обносова Н.В., Шуляк В.П., 1978; Гулый A.A., 1982; Буравцева Н.П. с соавт., 1997; Неляпин Н.М. с соавт., 1986; Еременко Е.И. с соавт., 1992; Цыганкова О.И., 1998; Васильев П.Г. с соавт., 1998; Рязанова А.Г., 2006; Doganay М., Aydin N.,1991; Bradaris N., Punda-Polis V., 1992; Turnbull P.C.B, et al., 2004; Papaparaskevas J. et al., 2004; Okinaka R. et al., 2006].

Поэтому исследование выделенных штаммов В. anthracis может быть только комплексным, что значительно повышает эффективность идентификации.

1.2 Сибиреязвенные бактериофаги и их биологические свойства

Бактериофаги — относящиеся к различным таксономическим группам вирусы, являются внутриклеточными паразитами бактерий, проявляющими значи-

тельную видоспецифичность к бактериям-репродуцентам, что и лежит в основе практического интереса к ним со стороны медицинской микробиологии.

При исследовании более 160 штаммов В. anthracis из окружающей среды и от больных животных со всего мира более 20 % штаммов оказались устойчиво инфицированными множеством различных индуцибельных профагов [Buck С.А. et al., 1963; Vera Т. et al., 1968; Inal J.H., Karunakaran K.V., 1996; Redmond C. et al., 1996].

Свободные фаги, способные заражать В. anthracis, также обнаруживали во многих видах окружающей среды, включая сточные воды, шерсть животных, почву и воду вокруг сибиреязвенных трупов или неподалеку от них, а также — почву из неэндемичных районов [Колесов С.Г., 1976; Ипатенко Н.Г. с соавт., 1987; Маринин Л.И. с соавт., 2009; Buck С.А. et al., 1963; Vera Т. et al., 1968; Nagy E. et al., 1976; Odendaal M. et al., 1991; Inal J.H., Karunakaran K.V., 1996; Redmond C. et al., 1996; Walter M.N., Baker D.D., 2003].

Сибиреязвенные бактериофаги изучались многими исследователями.

E.W. McCloy [1951] выделила фаг Wp из штамма В. cereus W (АТСС 11950) и установила, что он довольно специфичен для В. anthracis, хотя и инфицирует несколько штаммов В. cereus.

Фаг Гамма (у) был выделен E.R. Brown и W.B. Cherry [1955] как вариант фага W, образовавшийся после повторного инфицирования штамма В. cereus W ли-затом фага W. Он обладал уникальной способностью лизировать как капсульные, так и бескапсульные штаммы, а также лизогенные по фагу W штаммы В. anthracis, но не лизировал культуры В. cereus.

Другой фаг В. anthracis, названный фагом Cherry использовался для идентификации сибиреязвенного микроба, хотя и реже, однако его родство с фагом Гамма оставалось неизвестным. Определение нуклеотидных последовательностей этих фагов позволило установить их общее происхождение. Геномы фагов оказались идентичными, за исключением трех вариабельных локусов, которые были гетерогенными у фагов Cherry, W, Fah, а так же у индивидуальных препаратов фагов [Fouts D.E. et al., 2006].

В 1961 году Е.В. Груз выделила из почвы г. Кишинева высокоспецифичный бактериофаг ВА-9. Сравнительные испытания сибиреязвенных бактериофагов Е, L7,Wh ВА-9 в отношении 52 штаммов возбудителя сибирской язвы и 43 близкородственных спорообразующих сапрофитов, показали их полную идентичность, что позволило автору рекомендовать их для лабораторной диагностики сибирской язвы.

В 1962 году А .Я. Мещеряковым был выделен сибиреязвенный фаг К ВИЭВ [Маринин Л.И. с соавт., 2009].

Н.Г. Ипатенко с соавт. [1989] исследовали литическую активность сибиреязвенных бактериофагов К ВИЭВ и Гамма МВА на 244 штаммах В. anthracis и 23 штаммах спорообразующих сапрофитов. Специфическая активность бактериофагов составила 95 %,специфичность - 100 %. Исследования показали, что сибиреязвенные бактериофаги К ВИЭВ и Гамма МВА являются высокоспецифичными препаратами.

B.C. Ларина и Л.С. Петрова в 1964 сообщили о выделении специфического фага «Саратов». Изучению биологических свойств бактериофага «Саратов» посвящено исследование И.Н. Земцовой [1965, 1965а].

Диапазон литического действия и специфичность сибиреязвенного бактериофага «Саратов» были проверены на 58 штаммах сибиреязвенного микроба и 94 штаммах почвенных аэробных спорообразующих сапрофитов. Бактериофаг вызывал лизис всех испытанных сибиреязвенных культур, а из 94 штаммов сапрофитов оказался чувствительным к фагу только один штамм В. cereus, лизис которого проявлялся слабо и непостоянно. При анализе клеточного состава популяции данного штамма выявлено, что отдельные клетки его обладали резистентностью к действию фага. Препарат сибиреязвенного бактериофага «Саратов» был выпущен только в экспериментальных сериях.

В 1967 г. при изучении музейных сибиреязвенных культур, на Туркменской противочумной станции, был изолирован сибиреязвенный бактериофаг, обозначенный 186, что соответствовало порядковому номеру культуры. Штамм 186, выделенный Марыйским противочумным отделением из пыли на шерстомойной

фабрике в 1963 г., обладал свойствами антракоида. Диагностические характеристики этого бактериофага были изучены недостаточно полно. В результате опытов установлено, что фаг оказывал литическое действие на преобладающее большинство (91,5 %) испытанных 46 музейных штаммов возбудителя сибирской язвы и вакцинный штамм В. anthracis СТИ. Антракоиды не лизировал [Жеглова Д.В., 1972].

Наиболее детально сибиреязвенные фаги исследовали E.H. Левина и В.Р. Архипова [1967]. С целью испытания литических свойств бактериофагов ВА-9, Саратов, у, аС, ß и Ь7были использованы 50 сибиреязвенных штаммов различной вирулентности, выделенных из разных источников, а также 83 штамма спорообразующих аэробов. Наиболее широким спектром литического действия обладали фаги у и ВА-9. Остальные бактериофаги не лизировали от 14 до 22 % сибиреязвенных штаммов. Вместе с тем эти фаги не обусловливали неспецифического лизиса штаммов из группы спорообразующих аэробов, в то время как под влиянием фагов у и ВА-9 наблюдалось неспецифических реакций 5 % и 3-8 % соответственно.

По результатам изучения специфической активности шести сибиреязвенных бактериофагов (у, аС, ВА-9, Ь7, Саратов, К ВИЭВ) И.И. Павлова [1971] пришла к выводу о наиболее широком спектре литической активности бактериофага К ВИЭВ.

Более широкое применение для идентификации штаммов В. anthracis нашли сибиреязвенные бактериофаги К ВИЭВ, Гамма МВА, ВА-9, Fah-ВНИИВВиМ, ВА-104, 3-БК2, Саратов, W и другие [Земцова И.Н., 1965; Преснов И.Н., 1966; Коротич А., Погребняк Л.И., 1976; Brown E.R., Cherry W.B., 1955].

В 1996 г. был выделен новый бактериофаг из культуры В. thuringiensis vor. Kurstaki (ВТ Нз). Предварительные исследования показали, что он лизирует вирулентные и вакцинные штаммы В. anthracis, а также штаммы большинства сероти-пов В. thuringiensis [Исангалин Ф.Ш. с соавт., 2000]. Вследствие того, что данный

бактериофаг лизирует штаммы близкородственных сапрофитов, он является непригодным для идентификации штаммов возбудителя сибирской язвы.

Предложенный бактериофаг Fah-ВНИИВВиМ, разработанный во Всесоюзном научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии, по данным авторов, лизировал не менее 98 % исследованных сибиреязвенных штаммов и не взаимодействовал с другими видами бацилл [Бакулов И.Ф. с соавт., 2001]. В настоящее время, бактериофаг Fah-ВНИИВВиМ производится во ГНУ «Всероссийский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии» Российской академии сельскохозяйственных наук для индикации и идентификации возбудителя сибирской язвы.

Специфичный для сибиреязвенного микроба бактериофаг АР50 был выделен из почвы с использованием штамма репродуцента В. anthracis Sterne [Nagy Е., 1974; Nagy Е., Pragai В., Ivanovics G., 1976; Ackermann H.-W. et al., 1978].

Изучение литических свойств бактериофага АР50С выявило, что из 115 штаммов сибиреязвенного микроба бактериофаг АР50С лизировал Шштаммов В .anthracis (97 %) и ни одного из 100 штаммов В. cereus. Сравнительное исследование литических свойств бактериофагов АР50С и у показало, что только 4 из 115 были устойчивы к АР50С, когда 10 из 115 устойчивы к у. Девять из 10 штаммов резистентных к инфекции фагом у, были чувствительны к лизирующему действию бактериофага АР50С, а три из 4 штаммов устойчивые к АР50С, были чувствительны к у и только один штамм оказался устойчив к обоим фагам [Priest F.G.et al., 2004].

Был выделен вариант бактериофага Гамма А-26, обладающий специфической активностью к более широкому набор штаммов и культурально-морфологических вариантов штаммов В. anthracis - 100% [Цыганкова О.И. с соавт., 1995; Солодовников Б.В., Пат. РФ № 2171842, опубл. 10.08.2001, Бюл. № 22). Позднее к ним добавились и другие бактериофаги - ФПГ, ФЮИ, BJIA3 [Васильев П.Г. с соавт., 1999]..

Сравнительные испытания сибиреязвенных бактериофагов продемонстрировали, что фаги ФПГ, ФЮИ и BJIA3 обладали более широким спектром литиче-ской активности по сравнению с коммерческими диагностическими фагами Гамма MB А и К ВИЭВ. Бактериофаги ФПГ и В ЛАЗ лизировали более 90 % из 632 изученных штаммов В. anthracis, выделенных от больных сибирской язвой людей и их трупов, крупного и мелкого рогатого скота, лошадей и свиней, тогда как Гамма MB А, К ВИЭВ, ВА-9, ФЮИ - менее 88 %. При этом фаги ФПГ и ВЛАЗ не лизировали 62 штамма близкородственных бацилл, в то время как другие фаги были способны лизировать культуры отдельных штаммов близкородственных бацилл. На основании проведенных исследований фаги ФПГ и ВЛАЗ были рекомендованы для широкого использования в практике идентификации В. anthracis [Маринин Л.И. с соавт., 2009] Однако, надо отметить, что их производство не налажено, вследствие чего они не находят применения в практике лабораторной диагностики сибирской язвы.

В ГНЦ МПБ, Поповой В.М. получен новый сибиреязвенный бактериофаг R/D-Ph-б, отличающийся высокой специфической литической активностью и ви-доспецифичностью, лизирующий культуры только сибиреязвенных штаммов [Маринин с соавт., 2009; Дятлов И.А., Пат. РФ № 2351650, опубл. 10.04.2009. Бюл. № 10 (III ч.)]. Спектр литического действия: лизирует 99 % изученных сибиреязвенных штаммов и не проявляет литической активности к 160 штаммам близкородственных бацилл. Бактериофаг не инактивируется при температуре 55 °С в течение 45 мин. Литическая активность фага не изменяется в пределах рН 5,7-8,0.

Таким образом, к настоящему времени выделены в достаточном количестве и изучены различные сибиреязвенные бактериофаги. Детально изучена морфология фаговых частиц, чувствительность к различным агентам физической и химической природы, антигенные свойства различных бактериофагов, кинетика их взаимодействия с микробной клеткой. Существующие бактериофаги различаются по широте спектра лизируемых ими штаммов возбудителя сибирской язвы, а также по специфичности их действия. Следует отметить, что литературные данные о полноте спектра лизируемых культур В. anthracis и специфичности наиболее из-

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Головинская, Татьяна Михайловна, 2014 год

СПИСОК

атм АХ БОЕ ВИЭВ

ВНИИВВиМ

г/л

ДРТ

КОЕ

МУК

мл

мм

мкм

ОСО ФГБУ

«НЦЭСМП»

Минздрава России

об/мин

ПР

РНФ

рН

рХ01

рХ02

Сар" ТУ

Тох"

Тгр+

ч

И-форма Б-форма

вМ-форма

сокращений и условных обозначений

атмосфера агар Хоттингера бляшкообразующая единица Всесоюзный институт экспериментальной ветеринарии

Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии грамм/литр

диагностический рабочий титр

колониеобразующая единица

методические указания

миллилитр

миллиметр

микрометр

отраслевой стандарт оптической мутности ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России оборотов в минуту пусковой регламент реакция нарастания титра фага отрицательный логарифм концентрации водородных ионов

плазмида сибиреязвенного микроба, несущая гены экзотоксинов

плазмида сибиреязвенного микроба, несущая гены капсулы

штамм, не продуцирующий капсулу технические условия

штамм, не продуцирующий токсин

независимость от триптофана

час

шероховатые колонии гладкие колонии

гладкие слизистые колонии

Список литературы

1. Агапов В.А. Современная ситуация по зооантропонозным инфекциям в Читинской области / В.А. Агапов, З.П. Вахрушева, JI.A. Мизитова, В.Н. Парфенов, Н.Т. Лесников, Н.М. Вершинин // Мат. науч.-практ. конф., посвящ. 100-летию образования противочумной службы России. - Саратов, 1997. - т. 1. - С. 7.

2. Антюганов С.Н. Сибирская язва в Российской Федерации и за рубежом / С.Н. Антюганов, А.Г. Рязанова, Е.И. Еременко, А.Н. Куличенко // Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы, 2012. — № 5. - С 10-11.

3. Антюганов С.Н. Сибирская язва в Ставропольском крае / С.Н. Антюганов, Н.П. Буравцева, А.Г. Рязанова, Е.И. Еременко, Е.А. Цыганкова, О.И. Цыганкова, В.М. Мезенцев, Л.Ю. Аксенова, Е.В. Лысогора, Г.А. Джаилиди // Медицинский вестник Северного Кавказа. - Старополь, 2012а. - № 4 (28). - С. 67-70.

4. Буланцев A.A. Получение и характеристика фагорезистентных клонов возбудителя сибирской язвы / A.A. Буланцев, A.M. Барков, A.B. Липницкий // Генетика и биохимия вирулентности возбудителей особо опасных инфекций: Тез. докл. Российской науч. конф. - Волгоград, 1992. - С. 12.

5. Бакулов И.А., Гаврилов В.А. Селиверстов В.В. Сибирская язва (Антракс): Новые страницы в изучении «старой» болезни. - Владимир, 2001. - 284 с.

6. Буравцева Н.П. Выделение из почвы атипичных штаммов сибиреязвенного микроба / Н.П. Буравцева, Н.М. Неляпин, Е.И. Ерёменко, A.M. Ищерякова, Е.Л Ракитина // Профилактика природно-очаговых инфекций: тез. докл. Всесоюз. науч. конф. - Ставрополь, 1983. - С. 16-17.

7. Буравцева Н.П., Ерёменко Е.И., Цыганкова О.И. Роль атипичных штаммов сибиреязвенного микроба в эпизотологии и эпидемиологии сибирской язвы / Н.П.Буравцева, Е.И. Ерёменко, О.И. Цыганкова // Матер, межрегион, рабочего со-вещ. ВОЗ/ФАО по сибирской язве. - Алма-Ата, 1997. - С. 38-39.

8. Буравцева Н.П., Эпизоотолого-эпидемиологическая обстановкка по сибирской язве в Ставропольском крае / Н.П. Буравцева, С.Н. Антюганов, А.Г. Рязано-

ва, Е.А.Цыганкова, Л.Ю. Аксенова // Мат. науч.-практич. конф. «Здоровье населения и среда обитания» 15-я ежегодная Неделя медицины Ставрополья. — Ставрополь, 2011.-С. 96-101. .

9. Буравцева Н.П. Эпизотологическая и эпидемиологическая обстановка по сибирской язве в Чеченской республике и республике Ингушетия / Н.П. Буравцева, Ш.Ш. Мицаев, А.Г. Рязанова, Е.И. Еременко, А.Н. Куличенко // Эпидемиология и инфекционные болезни. - М., 2011а. - № 3. - С. 10-15.

10. Буравцева Н.П. Ретроспективный анализ заболеваемости сибирской язвой людей и животных на административных территориях Северо-Кавказского Федерального Округа / Н.П. Буравцева, А.Г. Рязанова, С.Н. Антюганов, Л.Ю. Аксенова, Г.К. Газиева, К.Х. Хацуков, К.Х. Болатчиев, Б.А. Хапаев, С.В. Бескакотов // Современные аспекты природной очаговости болезней: мат. Всероссийской науч.-практич. конф. с междун. участием, повящ. 90-летию ФГУН «Омский научно-исследовательский институт природно-очаговых инфекций» Роспотребнадзора (г. Омск, 1-2 ноября 2011). - ООО Издательский центр «Омский научный вестник», 2011.-С. 49-51.

11. Буравцева Н.П. Эпизоотолого-эпидемическая обстановка по сибирской язве в Республике Адыгея / Н.П. Буравцева, В.М. Мезенцев, Е.И. Еременко, А.Г. Рязанова, А.Х. Агиров, Л.А. Долева, Н.В. Маслова // Современные технологии в совершенствовании мер предупреждения и ответных действий на чрезвычайные ситуации в области общественного здравоохранения сан.-эпид. характера: матер. XI межгосуд. науч.-практич. конф. (Саратов, 16-17 октября 2012 г.). - Саратов, 2012. -С. 46-47.

12. Буравцева Н.П. Использование 0,05-0,1 % раствора твина-80, как разводящей жидкости, для определения концентрации спор сибиреязвенного микроба / Н.П. Буравцева, Е.Г. Чернявская // Методические рекомендации. - М., 1986. - 8 с.

13. Бактериофаги: биология и практическое применение / Под. ред. Э. Картер, А. Сулаквелидзе // Пер. с англ. коллектив переводчиков; науч. ред. A.B. Летаров. - М.: Научный мир, 2012. - 640 с.

14. Бургасов П.Н. Сибирская язва / П.Н. Бургасов, Б.Л.Черкасский, Л.М. Мар-чук, Ю.Ф. Щербак // - М.: Медицина, 1970. - 128 с.

15. Бургасов П.Н., Рожков Г.И. Сибиреязвенная инфекция. - М., 1984. - 212 с.

16. Бендас Л.Г. Ферментативные гидролизаты кормовых дрожжей - основа бактериологических питательных сред : автореф. дис. ... канд. биол. наук / Л.Г. Бендас.-М., 1971.-16 с.

17. Березкина Г.П. К характеристике культур Bacillus anthracis, выделенных из почвы // Достижения и перспективы борьбы с сибирской язвой в СССР: тез. докл. X пленарн. заседания межвед. науч.-метод. комис. по борьбе с сибирской язвой. -М., 1978.-С. 122-123.

18. Васильев П.Г. Чувствительность штаммов Bacillus anthracis выделенных из разных источников внешней среды, к видоспецифическим сибиреязвенным бактериофагам / П.Г. Васильев, Ю.И. Иванов, Н.С. Садыков, В.В. Кожухов, Р.Ш. Зи-ганшин, Л.М. Дербина, A.B. Сенькин // Диагн., лечение и проф. опасных инф. заболеваний. Биотехнология. Ветеринария: мат. юбилейной науч. конф. посвящ. 70-летию НИИ Микробиологии МО РФ. - Киров, 1998. - С. 64.

19. Васильев П.Г. Спектр литической активности видоспецифического сибиреязвенного бактериофага ФПГ / П.Г. Васильев, Л.И. Маринин, Р.Ш. Зиганшин, И.В Литусов, A.B. Стенькин, A.B. Степанов, А.Н. Шевцов, A.B. Маслов // Проблемы медицинской и экологической биотехнологии: сб. тезисов докл. юбилейной науч. конф., посвящ. 25-летию ГНЦ прикладной микробиологии 14-15 декабря 1999 г., г. Оболенск. - Оболенск, 1999. - С. 33.

20. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой / Биофайл, науч.-информ. журнал. - Режим доступа: http://www.biofile.ru/bio/76l.html. - Заглавие с экрана.

21. Гулый A.A. К характеристике авирулентных штаммов, выделенных из почв скотомогильников / A.A. Гулый // Эпидемиология, диагностика и профилактика инфекционных и инвазионных болезней. - Кишинев, 1982. - С. 106-107.

22. Груз Е.В. Испытание специфического бактериофага «ВА-9» для идентификации бацилл антракса / Е.В. Груз // Антракс. Вопросы иммунологии, клиники и лабораторной диагностики - Кишинев: Картя Молдовеняске, 1964. - С. 152-156.

23. Головинская Т.М. Изучение спектра литической активности и специфичности сибиреязвенных бактериофагов / Т.М. Головинская, Н.П. Буравцева, О.И. Цыганкова, Е.И. Еременко // Проблемы особо опасных инфекций. - Саратов, 2011. -№3(109).-С. 28-30.

24. Головинская Т.М. Совершенствование фагодиагностики сибирской язвы: оценка специфичности бактериофага «186» / Т.М. Головинская, О.И. Цыганкова,

A.Г. Рязанова, А.Н. Куличенко // Медицинский вестник Северного Кавказа. -Ставрополь, 2013. - Том 8. - № 1. - С. 68-69.

25. Габисония Т. Фаготипирование штаммов синегнойной палочки / Т. Габисо-ния // Птицеводство. - 2010. - № 8. - С. 45.

26. Гремякова Т.А. Изучение взаимодействия фагов и микроорганизмов с использованием методов флюориметрии и электроориентационной спектроскопии / Т.А. Гремякова, Е.А. Жиленков, И.А. Новиков, М.В. Оборотов, В.Э. Сазонов,

B.М. Фомченков // Вестник Российской Академии наук. - М., 1999. - № 2. -

C. 24-25.

27. Гольдфарб Д.М. Бактериофагия / Д.М. Гольдфарб // - М.: МЕДГИЗ, 1961. -298 с.

28. Дятлов И.А. Средства обеззараживания сибиреязвенных почвенных очагов / И.А. Дятлов, Л.И. Маринин, H.A. Шишкова и др. // Актуальные проблемы болезней общих для человека и животных: Всероссийская науч.-практич.конф. с международным участием, 23-24 мая 2012 г., г. Ставрополь - Ставрополь, 2012. -

С. 35-36.

29. Еременко Е.И., Цыганкова О.И., Буравцева Н.П. Изменение фенотипа и плазмидного спектра сибиреязвенного микроба с атипичным капсулообразовани-ем / Е.И. Еременко, О.И. Цыганкова, Н.П. Буравцева // Генетика и биохимия вирулентности возбудителей ООИ. Матер. Российской науч. конф. - Волгоград, 1992.-С. 38.

30. Еременко Е.И Потребности сибиреязвенного микроба в факторах роста и новые питательные среды для его культивирования.: дис. ...канд. мед. наук / Е. И. Еременко. - Ставрополь, 1986. - 181 с.

31. Еременко Е.И. Эпизоотологическая и эпидемиологическая характеристика сибирской язвы в Чеченской республике / Е.И. Еременко. В.А. Ярощук, В.А. Банных, Н.М. Неляпин и др. // ЖМЭИ, - 1996. - № 3. - С. 48-52.

32. Еременко Е.И. Сибирская язва в Российской Федерации в 2009 году: анализ и прогноз / Е.И. Еременко, А.Г. Рязанова, Н.П. Буравцева, А.Н.Куличенко // Информационный Бюллетень «Здоровье населения и среда обитания» (ЗНиСО). - № 5 (206). - Май, 2010. - С.38-40.

33. Еременко Е.И. Анализ эпидемиологической ситуации по сибирской язве в РФ в 2012 г., прогноз на 2013 г. / Е.И. Еременко, А.Г. Рязанова, Н.П. Буравцева, О.И. Цыганкова, Л.Ю. Аксенова, С.Н. Антюганов, Е.А. Цыганкова, Т.М. Головинская, В.В. Воропаев, А.Н. Куличенко // Проблемы особо опасных инфекций. — Саратов, 2013.-Вып. 1.-С. 18-20.

34. Жеглова Д.В. Характеристика бактериофагов, выделенных из музейных штаммов возбудителя сибирской язвы / Д.В. Жеглова // Проблемы особо опасных инфекций. - Саратов, 1972. - Вып. 1 (23). - С. 200-202.

35. Земцова И.Н. Характеристика сибиреязвенного бактериофага и его применение для лабораторной диагностики сибирской язвы / И.Н.Земцова // Авт. дис. ... канд. мед. наук. - Саратов, 1965. - 14 с.

36. Земцова И.Н. Отношение сибиреязвенного фага к действию некоторых физических и химических факторов / И.Н. Земцова // Вопросы микробиологиии лаб. диагностики ООИ. - Саратов, 1965а. - С 124-128.

37. Ипатенко Н.Г. Испытание сибиреязвенных бактериофагов К ВИЭВ и Гамма МВА / Н.Г. Ипатенко, A.A. Маничев, В.А. Седов, В.Н. Гущин // Ветеринария.-М., 1989. Вып. 10. - С. 58-59.

38. Ипатенко Н.Г. Сибирская язва сельскохозяйственных животных / Н.Г. Ипатенко, В.А. Седов, B.C. Зелепукин, В.Н. Гущин. - М.: Агропромиздат,1987. -

256 с.

39. Ипатенко Н.Г. Лабораторные исследования при разных формах течения сибирской язвы / Н.Г. Ипатенко // Ветеринария. - 2000. - № 8. - С. 28-30.

40. Исангалин Ф.Ш. Изучение нового бактериофага Bacillus thuringiensis с широким спектром действия, с целью разработки профилактического препарата для очагов сибирской язвы / Ф.Ш. Исангалин, Е.В. Жиленков, Л.И. Маринин, B.C. Перечко // Проблемы биологической и экологической безопасности: сб. матер, междун. науч конф. 22-25 мая 2000 г., г. Оболенск. - Оболенск, 2000. - С.43-45.

41. Куличенко А.Н. Сибирская язва в XXI веке: эпидемиология и диагностика / А.Н. Куличенко, А.Г. Рязанова, О.И. Цыганкова, Е.А. Цыганкова, Н.П. Буравцева, Л.Ю. Аксенова, Т.М. Головинская, В.В. Воропаев, И.С. Тюменцева, Е.В. Жданова, В.М. Мезенцев, Е.И. Еременко // Мат. X съезда Всероссийской науч.-практич. общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов «Итоги и перспективы обеспечения эпидемиологического благополучия населения Российской Федерации», 12-13 апреля 2012 // Инфекция и иммунитет. - 2012. - Т. 2. - № 1-2. -

С. 161-162.

42. Куличенко А.Н. Диагностика сибирской язвы в Российской федерации // А.Н.Куличенко, Е.И.Еременко, Н.П. Буравцева, А.Г. Рязанова // ЖМЭИ. - М., 2010.-№5.-С. 62-66.

43. Колесов С.Г. Сибирская язва / С.Г. Колесов // - М., 1976. - 287 с.

44. Королев Н.И. Инструкция по применению фаготетразолового метода (ФТМ) индикации возбудителя сибирской язвы / Н.И. Королев// - М.,1970 - 5 с.

45. Коротич А., Погребняк Л.И. Сибирская язва / А. Коротич, Л.И. Погребняк // - Киев: Изд-во Урожай, 1976. - 159 с.

46. Киреев Ю.Г. Совершенствование методологии прогнозирования активности почвенных очагов сибирской язвы / Ю.Г. Киреев, Б.Л. Черкасский, В.И. Про-метной // Эпидемиол. и клинико-иммунол. аспекты профилактики важнейших инф. заболеваний. Матер, конф. - Астрахань, 1996. - С.22-23.

47. Крылова М.Д. Фаготипирование бактерий / М.Д. Крылова // М., 1963. -199 с.

48. Кересилидзе М. Чувствительность к антибиотикам и фаготипирование стафилококков / М. Кересилидзе // Птицеводство. - 2006. - № 3. - С. 32-33.

49. Кадастр стационарно неблагополучных по сибирской язве пунктов Российской Федерации: справочник / под ред. Б.Л. Черкасского. - М.: Интер-СЭН, 2005. -829 с.

50. Курилова A.A. Разработка питательных сред на основе сырья растительного происхождения для культивирования возбудителей чумы, холеры,сибирской язвы : автореф. дис.... канд. биол. наук / A.A. Курилова. - Ставрополь, 2009. — 19 с.

51. Ляпустина Л.В. Бруцеллезные бактериофаги. Оптимизация технологии производства и способов применения в лабораторной диагностике бруцеллеза: автореф. дис. ... д-ра. мед. наук / Л.В. Ляпустина. - Ставрополь, 2004. - 41 с.

52. Ларина B.C., Петрова Л.С. Выделение активного бактериофага из бацилл сибирской язвы, обнаруженных в почве / B.C. Ларина, Л.С. Петрова // Микробиология и иммунология ООИ: сб. науч. работ противочумных учрежд. страны. - Саратов, 1964. - С. 94-95.

53. Левина E.H., Архипова В.Р. Сравнительное изучение сибиреязвенных бактериофагов / E.H. Левина, В.Р. Архипова // ЖМЭИ. - М., 1967. - Вып.9. -

С. 24-28.

54. Ломов Ю.М. Методические рекомендации по применению реакции адсорбции фага (РАФ) для индикации возбудителя сибирской язвы / Ю.М. Ломов // -Ростов-на-Дону, 1972. - 6 с.

55. Лабораторная диагностика опасных инфекционных заболеваний. Практическое руководство / под ред. Г.Г. Онищенко, В.В. Кутырева. - М.: ОАО Изд-во «Медицина», изд-во «Шико», 2009. - 472 с.

56. Методические указания МУК 4.2.2413-08 «Лабораторная диагностика и обнаружение возбудителя сибирской язвы». - М., 2008. - 65 с.

57. Методические указания МУК 4.1/4.2.588-96 «Методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов, вводимых людям». - М., 1996. - 87 с.

58. Маринин Л.И Сибирская язва человека: эпидемиология, профилактика, диагностика, лечение / Л.И. Маринин, Г.Г. Онищенко,Т.Б. Кравченко, И.А. Дятлов, Е.А. Тюрин, A.B. Степанов, В.В. Никифоров. - М.: ЗАО МП «Гигиена», 2008. -416 с.

59. Методы изучения биологических свойств возбудителя сибирской язвы (Учебно-методическое пособие) / Л.И. Маринин, И.А. Дятлов, А.Н. Мокриевич, И.В. Бахтеева, Е.В. Белова, А.И. Борзилов [и др.]. - М.: ЗАО МП «Гигиена», 2009. -304 с.

60. Маринин Л.И. Микробиологическая диагностика сибирской язвы / Л.И. Маринин, Г.Г. Онищенко, A.B. Степанов [и др.]. - М.: ВУНМЦ МЗ РФ. - 1999. -224 с.

61. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: Учебник / Л.Б. Борисов, A.M. Смирнова, И.С. Фрейдлин и др. / под ред. Л.Б. Борисова и проф. А.М. Смирновой. -М.: Медицина, 1994. - 528 с.

62. Македонова Л.Д. Создание набора типирующих фагов и схемы фаготипи-рования чумного микроба / Л.Д. Македонова, Т.А. Кудрякова, Г.В. Качкина // Карантинные и зоонозные инфекции в Казахстане: матер, междун. науч.-практич. конф., посвящ. 10-летию суверенитета Республики Казахстан и 50-летию Талды-корганской противочум. станции, (г. Талдыкорган, 1-2 августа, 2001 г.). — Алматы, 2001.-С. 165-167.

63. Митрохина E.H. Выделение и идентификация бактерий рода Enterobacter / E.H. Митрохина // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - М., 2006. -№9.-С. 32-33.

64. Мезенцев В.М. Обстановка по сибирской язве в Краснодарском крае / В.М. Мезенцев, Н.П. Буравцева, А.Г. Рязанова, Е.И. Еременко, С.Н. Антюганов // Современные технологии в совершенствовании мер предупреждения и ответных действий на чрезвычайные ситуации в области общественного здравоохранения сан.-эпид. характера: матер. XI межгосуд науч.-практич. конф. (Саратов, 16-17 октября 2012 г.). - Саратов, 2012. - С. 156-158.

65. Неляпин Н.М. Характеристика сибиреязвенных штаммов, выделенных в Европейской части СССР / Н.М. Неляпин, В.А. Ярощук, В.А. Проскурина [и др.] // Актуальные вопросы профилактики сибирской язвы: тез. докл. XII пленар. за-сед. межведомственной научно-методической комиссии по борьбе с сибирской язвой (20-21 октября 1986 г., г. Воронеж). - М., 1986. - С. 27.

66. Обносова Н.В., Шуляк В.П. О патогенных свойствах возбудителя сибирской язвы в разных очагах / Н.В. Обносова, В.П. Шуляк // Достижения и перспективы борьбы с сибирской язвой в СССР: тез. докл. X пленар. засед. межведомственной научно-методической комиссии по борьбе с сибирской язвой (28-29 сентября 1978 г., г. Баку). - М., 1978. - С. 123.

67. Озеров М.Ю. Активация рецепторов прорастания спор В. anthracis / М.Ю. Озеров, В.Г. Попов, H.H. Каркищенко, Д.В. Попов, С.Ю. Пчелинцев, В.Н. Карки-щенко // Биомедицина. - М., 2011. - Вып. 2. - С. 18-23.

68. Онищенко Г.Г. Сибирская язва: актуальные аспекты микробиологии, эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики / Г.Г. Онищенко, Н.Т. Васильев, Н.В. Литусов, А.Т. Харечко, П.Г. Васильев, Н.В. Садовой, В.В. Кожухов. - М.: ВУНМЦ МЗ РФ. - 1999. - 447 с.

69. Онищенко Г.Г. Анализ вспышки сибирской язвы в Омской области в 2010 г. / Г.Г. Онищенко, А.Н. Куличенко, А.Г. Рязанова, Ю.Д. Демина, A.C. Крига, Е.И. Еременко, О.И. Цыганкова, Е.А. Цыганкова, Н.П. Буравцева, Л.Ю. Аксенова,,Т.М. Головинская // ЖМЭИ. - М., 2012. - № 5. - С. 33-36.

70. Павлова И.И. Изучение морфологических и биологических свойств фагов Вас. anthracis и Вас. cereus / И.И. Павлова // ЖМЭИ. - М., 1971. - Вып. 7. - С. 147.

71. Патент РФ № 2266963 Способ количественного определения резистентности популяционного состава штаммов Bacillus anthracis к сибиреязвенному бактериофагу / О.И. Цыганкова, Е.И. Еременко, А.Г Рязанова, Е.А. Цыганкова. -Опубл. 27.12.2007. -Бюл. № 36.. - С. 24.

72. Патент РФ № 2133273 Способ выращивания сибиреязвенного бактериофага Гамма / О.И. Цыганкова, Б.В Солодовников. - Опубл. 20.07.1999. Бюл. № 20.

73. Патент РФ № 2171842 Способ получения сибиреязвенного бактериофага Гамма А-26 / Б.В Солодовников, И.С. Тюменцева, E.H. Афанасьев. — Опубл. 10.08.2001. - Бюл. № 22. - С. 3.

74. Патент РФ № 2351650 Штамм бактериофага Bacillus anthracis R/D, используемый для получения препарата для диагностики сибиреязвенной инфекции, жидкий препарат для диагностики сибиреязвенной инфекции и препарат для диа-

гностики сибиреязвенной инфекции / И.А Дятлов, В.М Попова, А.М Баранов. -Опубл. 10.04.2009. - Бюл. № 10 (III ч.) - С. 735.

75. Патент РФ № 2412769 Способ нейтрализации спор и вегетативных клеток Bacillus anthracis / В.Г Попов, С.Ю. Пчелинцев, М.Ю Озеров, Д.В Попов. -Опубл. 27.02.2011. - Бюл. № 6 (II ч) - С. 425-426.

76. Патент РФ № 2413539 Биопрепарат для нейтрализации спор и вегетативных клеток Bacillus anthracis / В.Г. Попов, С.Ю Пчелинцев, М.Ю Озеров, Д.В. Попов. - Опубл. 10.03.2011. - Бюл. № j (ц ч) - С. 475.

77. Преснов И.Н. Изменчивость Вас. Anthracis в природных условиях / И.Н. Преснов // Ветеринария. - М., 1966. - Вып. 7. - С. 25-29.

78. Попов В.Г. Роль бактериофагов В. anthracis в противодействии биотерроризму / В.Г. Попов, В.Н. Каркищенко, С.Ю. Пчелинцев, Д.В. Попов, A.A. Стартов // Биомедицина. - М., 2006. - Вып. 2. - С. 24-32.

79. Петров С.П. Заболеваемость людей сибирской язвой в Апанасенковском районе Ставропольского края в 1996 году / С.П. Петров, Е.П. Забудская, М.М. Кохов // Матер, науч.-практич. конф. , посвящ. 75-летию санэпидслужбы России «Здоровье населения и среда обитания». - Ставрополь. 1997. - Сб. III. -

С. 188-189.

80. Петров С.П. Об эпиднадзоре за сибирской язвой в Ставропольском крае / С.П. Петров, П.П. Постовой, И.К. Михненко, Л.Л.Гурьев // Матер, науч.-практич. конф. , посвящ. 75-летию санэпидслужбы России «Здоровье населения и среда обитания». - Ставрополь. 1997. - Сб. III. - С. 191-193.

81. Петрюк В.А. О вспышке сибирской язвы в Карачаево-Черкесской республике / В.А. Петрюк, В.А. Проскурина, В.И. Ефременко, Т.Н. Фунтикова, Д.С. Агапитов, А.Е. Суворова // Ставрополь, 1997. - 9 с.

82. Рязанова А.Г. Характеристика биологических свойств атипичных штаммов сибиреязвенного микроба, усовершенствование методов их идентификации и дифференцирования от близкородственных бацилл: автореф. дис.... канд. мед. наук / А.Г. Рязанова. - Ростов-на-Дону, 2006. - 23 с.

83. Рязанова А.Г. Эпидемиологическая ситуация по сибирской язве в Российской Федерации: анализ заболеваемости в 2010 г., прогноз на 2011 г. / А.Г. Рязанова, Е.И. Еременко, Н.П. Буравцева, О.И. Цыганкова, Е.А. Цыганкова, Л.Ю. Аксенова, Т.М. Головинская, А.Н. Куличенко // Проблемы особо опасных инфекций. - Саратов, 2011. - Вып.1 (107). - С. 42-45.

84. Рязанова А.Г. Анализ заболеваемости сибирской язвой в 2011 г., прогноз на 2012 г. / А.Г. Рязанова, Е.И. Еременко, Е.А. Цыганкова, Л.Ю. Аксенова, О.И. Цыганкова, Н.П. Буравцева, Т.М. Головинская, А.Н.Куличенко // Проблемы особо опасных инфекций. - Саратов, 2012. - Вып.1 (111). — С. 37-38.

85. Руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций. Книга II / Колл. авторов / под ред. A.C. Лабинской, H.H. Костюковой, С.М. Ивановой. - М.: Изд-во БИНОМ, 2010.-1152 с.

86. Седов A.B. Защита человека в чрезвычайных ситуациях / A.B. Седов, С.Ф. Гончаров, Г.Г. Онищенко [и др.]. - М., 2002. - 502 с.

87. Солодовников Б.В. Совершенствование биотехнологии производства сибиреязвенного диагностического бактериофага: автореф. дис. ... канд. биол. наук/ Б.В. Солодовников. - Ставрополь, 2002. - 21 с.

88. Солодовников Б.В. Оптимизация условий культивирования сибиреязвенного бактериофага / Б.В. Солодовников, О.И.Цыганкова, И.С. Тюменцева, В.И. Еф-ременко // Мат. науч.-практич. конф., посвящ. Образованию противочумной службы России. - Саратов, 1997. - Т.2. - С. 237.

89. Солодовников Б.В. О технологии получения сибиреязвенного бактериофага / Б.В. Солодовников, О.И. Цыганкова, И.С. Тюменцева, В.И. Ефременко // Мат. науч.-практич. конф., посвящ. Образованию противочумной службы России. -Саратов, 1997а. - Т.2. - С. 237.

90. Саяпина Л.В. Характеристика нового бактериофага диагностического сибиреязвенного Гамма А-26 жидкого / Л.В. Саяпина, A.C. Абдрашитова, И.В. Ка-сина, А.Н. Малахаева, Л.И. Ращепкин, A.B. Осин, О.Ю. Ляшова, Т.В. Валова,

Ю.А. Попов, Н.И. Микшин, Н.П. Буравцева, Н.П. Миронова, О.А. Лобовикова, А.Н. Мокриевич, Н.Г. Гефан // Биопрепараты. - М., 2011 г. - № 1 (41). - С. 36-39.

91. Сидоренко С.В. Сравнительная эффективность типирования тремя коллекциями бактериофагов штаммов метициллинрезистентных staphylococcus aureus, выделенных в стационарах г. Москва /С.В. Сидоренко, В.Я. Прохоров, В.И. Ка-рабак, В.Г. Жуховицкий, Е.И. Васильева, О.А. Дмитренко. Н.Н. Тарасович, Р.В. Терехова // ЖМЭИ. 2003. - № 1. _ с. 3-9.

92. Скородумова Д.И. Лабораторная диагностика стафилококкозов / Д.И. Ско-родумова // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - М., 2007. - № 6. -

С. 27-32.

93. Тимаков В.Д., Гольдфарб Д.М. Реакция нарастания титра фага как метод диагностики инфекционных заболеваний и индикации / В.Д. Тимаков, Д.М. Гольдфарб // ЖМЭИ. - М., 1960. - Вып 1. - С. 5.

94. Хотько Н.И. К характеристике эпидемического процесса при сибирской язве в Среднем Поволжье / Н.И. Хотько // Актуал.пробл. профилактики особо опасных и природно-очаговых инф. болезней: тез. докл. науч. конф.. посвящ. 60-летию Иркутского противочум. Института. - Иркутск, 1994. — С. 168.

95. Цыганкова О.И. Фенотипические и генетические особенности культураль-но-морфологических вариантов В. anthracis / О.И. Цыганкова, Е.И. Еременко, Е.А. Цыганкова, Н.П. Буравцева, А.Г. Рязанова // ЖМЭИ. - М., 2008. - № 4. -

С. 6-11.

96. Цыганкова О.И. Фенотипическая и генетическая вариабельность штаммов сибиреязвенного микроба (теоретические и практические аспекты): автореф. дис. ... д-ра. мед. наук / О.И. Цыганкова. - Ростов-на-Дону, 2007. - 38 с.

97. Цыганкова О.И. Изучение популяционного состава сибиреязвенного штамма 1(СО) по чувствительности к сибиреязвенным фагам / О.И. Цыганкова // Ди-агн., лечение и проф. опасных инф. заболеваний. Биотехнология. Ветеринария: мат. юбилейной науч. конф. посвящ. 70-летию НИИ Микробиологии МО РФ. -Киров, 1998.-С. 258-259.

, J

98. Цыганкова О.И., Ярощук В.А., Буравцева Н.П. Выбор бактериофагов для идентификации сибиреязвенного микроба / О.И. Цыганкова, В.А. Ярощук, Н.П. Буравцева // Актуальные вопросы профилактики особо опасных и других инфекционных заболеваний: матер, науч. практ. конф. «60 летпротивочумной Службы Кавказа». - Ставрополь, 1995. - С.245-246.

99. Адаме М.Н. Бактериофаги / Пер. с англ. - М.: Иностраннаялитература, 1961. -528 с.

100. Anderson Т. Role of tryptophane in the adsorption of two bacterial viruses on their host E. coli. // J. cell. Сотр. Physiol. - 1945. - 25, 1, 17.

101. Ackermann H.-W., Roy R., Martin M., Murthy M. R., and Smirnoff W. A. Partial characterization of a cubic Bacillus phage // Can. J. Microbiol. - 1978. - 24:986-993.

102. Buck C.A., Anacker R.L., Newman F.S., and Eisenstark A. Phage isolated from lysogenic Bacillus anthracis //J. Bacteriol. - 1963. - Vol. 85. - P.1423-1430.

103. Bradaris N., Punda-Polis V. Cutaneous anthrax due to penicillinresistant Bacillus anthracis, transmitted by an insect bite // Lancet. - 1992. - Vol. 340. - P. 306-307.

104. Brown E.R., Cherry W.B. Specific identification of Bacillus anthracis by mens of a variant bacteriophage // J. Infect. Dis. - 1955. - Vol. 96. - P. 34-39.

105. Bishop-Lilly K.A. Whole genome sequencing of phage resistant Bacillus anthracis mutants reveals an essential role for cell surface anchoring protein CsaB in phage AP50c adsorption Sozhamannan / K.A. Bishop-Lilly, R.D. Plaut, P.E. Chen, A. Akmal, K.M. Willner, A. Butani, S. Dorse, V. Mokashi, A.J. Mateczun, C. Chapman, M. George, T. Luu, T.D. Read, R. Calendar, S. Stibitz, S. Sozhamannan // Virology Journal. - 2012. - 9:246.

106. Beumer-Jochmans M.-P., Dizkx J., Oleffe-Koopmansch S. Effect du calcium sur la penetration d'un phage dans certains bacteries sensible // Ann.Inst.Past. - 1959. - T. 96.-№6.-P. 771-780.

107. Caksen H., Arabaci F., Abuhandan M., Tuncer O., Cesur Y. Cutaneous anthrax in eastern Turkey // Cutis. - 2001 .- 67:488; 92.

108. Cieslak T.J., EitzenE.M. Gr. Clinical and Epidemiologic Principles of Anthrax // Emerg. Infect. Dis. - 1999. - 5:552; 5.

109. Coffey A. and Ross R.P. Bacteriophage-resistance systems in dairy starter strains: Molecular analysis to application IIAntonie Van Leeuwenhoek. — 2002. - 82: 303-32.

110. , Cohen S. Molecular bases of parasitism of some bacterial viruses // Science. -1956.-123,3199, 653.

111. Doganay M., Aydin N. Antimicrobal susceptibility of Bacillus anthracis II Scand. J. Infect. Dis. - 1991. - Vol. 23. - P.333-335.

112. Delbrück M. The growth of bacteriophage and lysisof the host // J. Gen. Physiol. - 1940. - No. 23 - P. 643-647.

113. Davison S. Identification of the Bacillus anthracis (gamma) phage receptor / S. Davison, E. Coutoure-Tosi, T. Candela et al. // J. Bacteriol. - 2005. - V. 187 - No. 10. -P. 6742-6749.

114. Fouet A. Bacillus anthracis S-layer / A. Fouet, S. Mesnage, E. Tosi-Counon et al. // 3-rd International Conference on Anthrax, 7-10-th Sept. 1998, Plymouth, England. -1998.-P. 16.

115. Fouts D.E., Rasko D.A., Cer R.Z., Jiang Lingxia et al. Sequencing Bacillus anthracis Typing Phages Gamma and Cherry Reveals a Common Ancestry // J. Bacteriol.- 2006. - Vol. 188 .- No. 9 - P. 3402-3408.

116. Fischetti V.A., Gotschlich E.C., Bernheimer A.W. Purification and physical properties of group C streptococcal phage-associated lysine // J. Exp. Med. - 1971. — 133: 1105-1117.

117. Fowler C., Cohen S. Chemical studies in host-virus interactions. A method of determining nutritional requirements for bacterial virus multiplications // J. Exp. Med. -1948. - Vol. 87. - No. 4. - P. 259.

118. Gratia A. Des relations numeriques entre bacteries lysogenes et particulers de bacteriophage // Ann. Inst. Pasteu. - 1936. - V. 57. - P. 652.

119. Holt J.G. The Shorter Bergey's Manual of Determinative Bacteriology // Baltimore.-1980.-495 p.

120. Helgason E., Okstad O.A., Caugant D.A. et al. Bacillus anthracis, Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis - one species on the basis of genetic avidence // Appl. Environ. Microbiol. - 2000. - V. 66 - No. 6. - P. 2627-2630.

121. Inal J.M., Karunakaran K.V. phi 20, a temperate bacteriophage isolated from Bacillus anthracis exists as a plasmidial prophage // Curr Microbiol. - 1996. - 32: 171175.

122. Imperial M.J., Casadevall A. 2011. Bioterrorism: lessons learned since the anthrax mailings. mBio 2 (6):e00232-l 1. Doi: 10. 1128/mBio. 00232-11.

123. Kikkawa H.S., Ueda T., Suzuki S., Yasuda J. Characterization of the catalytic activity of the gamma-phage lysin, PlyG, specific for Bacillus anthracis // FEMS Microbiol Lett. - 2008 . - 286(2). - P236-40.

124. Lechner S., Mayr R., Francis K.P. et al. Bacillus weihenstephanensis sp. nov. is species of the Bacillus cereus group // Int. J. Syst. Bacterid. - 1998. - Vol. 48. - P. 1373-1382.

125. Lenski R.E. Coevolution of bacteria and phage: Are there endless cycles of bacteria defenses and phage counterdefenses? // J. Theor. Biol. 108: 319-325, 1984.

126. Lanny Y. Invasion by bacteriophage T5. Dissociation of calcium dependent processes // Virology. - 1960. - Vol. 10 - No. 4 - P. 514.

127. McCloy E.W. Studies on a lysogenic Bacillusstrain. A bacteriophage specific for Bacillus anthracis!I J. Hyg. Camb. - 1951. - Vol. 49. - P. 114-125.

128. Moineau S. Applications of phage resistance in lactic acid bacteria // Antonie Van Leeuwenhoek. - 1999. - 76: 377-382.

129. Nagy E. A highly specific phage attacking Bacillus anthracis strain Sterne // Acta Microbiol. Acad. Sci. Hung. - 1974. - 21:257-263.

130. Nagy, E., Pragai B., Ivanovics G. Characteriation of phage AP50, an RNA phage containing phospholipids // J. Gen. Virol. - 1976. - V. 32. - P. 129-132.

131. Nakamura L.K. Bacillus pseudomycoides sp. nov. // Int. J. Syst. Bacteriol. -1998. - Vol. 48. - P. 1031-1035.

132. O'Donoqhe K., Ellar D.J. STM analysis of Bacillus cereus // 5th International Conference on Anthrax: Program and Abstract Book. Nice, France. - 2003.

133. Okinaka R., Pearson T, Keim P. Antrax, bat not Bacillus anthracis ? // PLoS Pathog. -2006. — 2(11): el 12.

134. Odendaal M., Pieterson P.M., de Vos V., Botha A.D. The biochemical, morphological and virulence profiles of Bacillus anthracis isolated in the Kruger National Park. Onderstepoort // J. Vet. Res. - 1991.-58: 21-26.

135. Priest F.G., Goodfellow M., Todd C. A numerical classification of the genus Bacillus II J. Gen. Microbiol. - 1988. - Vol. 134. - P. 1847-1882.

136. Priest F.G., Barker M., Baillie L.W., Holmes E.C., Maiden M.C. Population structure and evolution of the Bacillus cereus group // J. Bacteriol. - 2004. - 186: 79597970.

137. Papaparaskevas J., Houhoula D.P., Papadimitriou M. et al. Ruling out Bacillus anthracis II Emerg. Infect. Dis. - 2004. - Vol. 10. - № 4. - P. 732-735.

138. Redmond C., Henderson I., Turnbull P.C.B., Bowen J. Phage from different strains of Bacillus anthracis II Proceedings of the International Workshop on Anthrax -Winchester, England, September 19-21, 1995. Salisbury Medical Bulletin, Number 87, Special Supplement, June 1996. -P.60-63.

139. Reiman R.W. Indirect Detection Of Bacillus Anthracis (Anthrax) Using Amplified Gamma Phage-Based Assays //PhD Thesis, Colorado School of Mines, USA. -2007.-151 p.

140. Schuch R., Nelson D. and Fischetti V.A. A bacteriolytic agent that detects and kills Bacillus anthracis II Nature. - 2002. - 418:884-889.

141. Turnbull P.C.B., Kramer J.M. Bacillus // In: Balows A. et al. (ed.), Manual of Clinical Microbiology, 5th ed. - 1991. - P. 296-303.

142. Turnbull P.C.B., Sirianni N.M., LeBron C.L. et al. MICs of selected antibiotics for Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis and Bacillus mycoides from a range of clinical and environmental sources as determined by the Etest // J. Clin. Microbiol. - Aug. 2004 - Vol. 42. - No 8. - P. 3626-3634.

143. Vera T., Grumbles L.C., Franklin T.E., Jungerman P.F. Effect of lysogenicity on the virulence of Bacillus anthracis // Am. J. Vet. Res. - 1968. - 29: 1059-1066.

144. Willey T.L., Ellar D .J. Comparative analyses of Bacillus cereus clinical isolates // 5th International Conference on Anthrax: Program and Abstract Book. Nice, France. -2003.-P. 24.

145. Walter M.H., Baker D.D. Three Bacillus anthracis Bacteriophages from Topsoil // Current microbiology. - 2003. - Vol. 47 .- P. 55-58.

146. Watanabe T., Morimoto A. and Shiomi T. The fine structure and the protein composition of gamma phage of Bacillus anthracis II Can. J. Microbiol. - 1975. - 21: 1889-1892.

147. Yoong P., Schuch R., Nelson D. and Fischetti V.A. PlyPH, a Bacteriolytic Enzyme with a Broad pH Range of Activity and Lytic Action against Bacillus anthracis // J. Bacteriol. - 2006. - Vol. 188. - No. 7. - P. 2711-2714.