Биологические и иммуногенные свойства сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге столетней давности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Шереметьева, Юлия Владимировна

• Шереметьева, Юлия Владимировна
• кандидат ветеринарных наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Шереметьева, Юлия Владимировна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1.Современное представление о возбудителе сибирской язвы.

Влияние физико-химических факторов на биологические свойства возбудителя сибирской язвы.

1.3. Изменчивость морфологических и культуральных свойств Bacillus anthracis.

1.4. Вакцинные штаммы возбудителя сибирской язвы для приготовления биопрепаратов.

2. Собственные исследования.

2.1. Материалы и методы исследований.

2.2. Изучение культурально-морфологических свойств вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 бациллы антракса после длительного хранения

2.3. Биохимические свойства штаммов Ланге 1 и 2.

2.4. Фагочувствительность сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге 1 и 2.

2.5. Антибиотикочувствительность вакцинных штаммов

Ланге 1 и 2.

2.6. Вирулентные свойства вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 бациллы антракса после длительного хранения.

2.7. Антигенные свойства штаммов Ланге 1 и 2.

2.8. Показатели неспецифической резистентности при иммунизации животных различными вакцинными штаммами бациллы антракса.

2.9. Показатели специфических факторы защиты животных при иммунизации сибиреязвенными вакцинными штаммами Ланге 1 и 2.

2.10. Иммуногенные свойства вакцинных штаммов Ланге 1 и 2.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологические и иммуногенные свойства сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге столетней давности»

Актуальность темы. Сибирская язва, являясь особо опасной болезнью, до сих пор наносит ощутимый ущерб народному хозяйству и представляет серьезную угрозу для людей.

Сибиреязвенная бацилла при неблагоприятных условиях существования способна формировать типичные споры. Биологическая роль спор прежде всего заключается в том, что они являются формой защиты споро-образующих бактерий от вредных воздействий окружающей среды и, таким образом, выполняют функцию сохранения вида. Споры способны долго сохранять материальный субстрат генетической информации исходных клеток (геном) и обеспечивать передачу основных свойств потомству в последующих генерациях.

Многие исследователи отмечают, что бацилла антракса изменяет свои свойства, находясь в организме животного и во внешней среде.

Ипатенко В.А. и др. (1987), изучая диссоциацию 176 штаммов, полученных за ряд лет из различных лимфатических узлов и органов убитых свиней, и 10 штаммов от крупного рогатого скота установили, что возбудитель сибирской язвы, выделенный от животных с хроническим течением болезни, по культурально - морфологическим и вирулентным свойствам имеет определенные отличия от типичных штаммов возбудителя. Основной особенностью его является обилие разных форм колоний.

Экспериментально выяснено, что возбудители, выделяемые из пораженных тканей свиней, заметно отличаются и от исходного типа по своей вирулентности и некоторым серологическим свойствам.

Длительное пребывание и вегетирование бацилл антракса в почвах приводит к постоянным изменениям его культурально-морфологических, антигенных и других свойств, а также к утрате вирулентности.

Одной из нерешенных актуальных проблем современной микробиологии возбудителя сибирской язвы является познание условий пребывания и жизнедеятельности бациллы антракса во внешней среде и изучение ее экологических связей с другими представителями биоценоза.

Кроме того, знание о длительности выживания возбудителя сибирской язвы в споровом состоянии имеет научное и практическое значение для выяснения эпизоотической ситуации, а также для хранения культур в микробиологических музеях.

Пастер Л. ( 1861 ) и Л.С. Ценковский ( 1883 ) впервые получили живые вакцины против сибирской язвы. В начале 1890 года И.Н. Ланге по методике Л. Пастера также приступил к созданию сибиреязвенной вакцины. Это была вторая вакцина, созданная в России, представляющая собой живой капсулообразующий вариант бациллы антракса и имеющая две степени ослабления: Ланге 1 и Ланге 2.

Культивирование возбудителя было проведено при температуре 42,5° в течение 12 суток для получения 1-й вакцины и 6 суток - 2-й вакцины. Для закрепления полученных свойств бациллярную форму вакцинных штаммов микробов И.Н. Ланге перевел в споровую путем культивирования их при температуре 35° в течение шести суток. Эти вакцины успешно предохраняли животных от сибирской язвы.

Цель и задачи исследований. Целью исследований явилось изучение биологических и иммуногенных свойств сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге 1 и 2, хранившихся 100 лет.

Согласно цели исследований были поставлены задачи изучить:

1. Морфологические и культуральные свойства штаммов Ланге 1 и

Ланге 2 бациллы антракса после длительного хранения.

2. Вирулентные свойства штаммов Ланге 1 и 2.

3. Биохимические свойства штаммов Ланге 1 и 2.

4. Антигенные свойства штаммов Ланге 1 и 2.

5. Неспецифические факторы защиты при иммунизации животных различными штаммами бациллы антракса.

6. Специфические факторы защиты при иммунизации животных различными штаммами бациллы антракса.

Научная новизна. Впервые изучена в сравнительном аспекте возможность сохранения морфологии и реактивации жизнеспособности спор до 100 лет хранения вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 бациллы антракса в растворе глицерина в условиях комнатной температуры.

При культивировании на искусственных питательных средах штаммы Ланге 1 и 2 обладали типичными для возбудителя сибирской язвы культу-ральными свойствами. Они сохранили вирулентность для белых мышей и морских свинок и биохимические свойства штаммов. Указанные штаммы обладали антигенными и иммуногенными свойствами.

Введение штаммов Ланге 1 и 2 лабораторным животным вызывало активизацию неспецифических и специфических факторов защиты организма животных при сибирской язве.

Практическая значимость работы. Полученные результаты по изучению выживаемости сибиреязвенных спор в течение 100 лет имеет научное и практическое значение как в плане выяснения эпизоотической ситуации в хозяйствах при сибирской язве, так и при хранении этого возбудителя в микробиологических музеях. На основании полученных данных оформлено рационализаторское предложение (№ 143-01 от 20.06.01).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Сохранение морфологических и культурально-биохимических свойств сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 в течение 100 лет.

2. Вирулентные, антигенные и иммуногенные свойства сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 после длительного хранения.

3. Показатели неспецифических и специфических факторов защиты при иммунизации животных вакцинными штаммами Ланге 1 и 2.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на заседаниях Ученого совета и на научно - практических конференциях Казанской государственной академии ветеринарной медицина им. Н.Э. Баумана ( 1991-1994 гг). и 2001 г. 8

Публикация результатов исследований. Основное положения диссертации изложены в 6 печатных работах.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 98 страницах печатного текста и включает разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения. Список литературы включает 196 источников, в том числе 160 отечественных и 36 иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Шереметьева, Юлия Владимировна

4. ВЫВОДЫ

1. Вакцины штаммы Ланге 1 и Ланге 2 бациллы антракса образцов 1900, 1905, 1917 и 1927 годов сохраняют свои морфологические и культуральные свойства, жизнеспособность на искусственных питательных средах и в организме животных, а также капсулообразующую способность.

2. После реактивации на искусственных питательных средах и через организм животных вакцинные штаммы Ланге 1 и Ланге 2 восстанавливают свои вирулентные свойства: ЛД5о штамма Ланге 1 на белых мышах составляют 0,2x108'62, а штамма Ланге 2 - 0,2х107,33.

3. Вакцинные штаммы Ланге 1 и Ланге 2 обладают гликолитическими, протео-летическими свойствами и лецитиназной активностью, а гемолитическая способность отсутствует.

4. Сибиреязвенные вакцинные штаммы Ланге 1 и Ланге 2 с 1900 года хранения обладают антибиотико- и фагочувствительностью.

5. У морских свинок, белых мышей и крыс, иммунизированных различными вакцинными штаммами бациллы антракса, повышаются неспецифические факторы защиты организма: фагоцитарная активность, активность лизоцима и [3 -лизинов, содержание белка, гамма-глобулина в сыворотках крови.

6. Иммунизация животных вакцинными штаммами Ланге 1 и Ланге 2 бациллы антракса повышает у них показатели специфических гуморальных и клеточных факторов в виде увеличения Т и В-лимфоцитов и специфических антител в сыворотках крови, выявленных в реакциях преципитации, непрямой гемагглютинации и иммуноферментным методом.

78

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

1. Рационализаторское предложение. "Иммунобиологические свойства возбудителя сибирской язвы, хранившегося сто лет". Утверждено Ректором КГАВМ 20.06.2001 г. (удостоверение №413-01 от 2001 г.).

2. Полученные результаты исследований рекомендуются использовать: а) при проведении противоэпизоотических мероприятий при сибирской язве; б) при проведении научно-исследовательских работ; в) в учебном процессе по микробиологии и эпизоотологии.

3. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Сибирская язва является одной из остропротекающих опасных инфекционных болезней. В прошлом она наносила огромный ущерб животноводству и вызывала массовые заболевания людей из-за отсутствия эффективных мер борьбы с этой болезнью. Следует отметить, что после открытия возбудителя стали интенсивно разрабатываться вопросы микробиологии, эпизоотологии, и диагностики сибирской язвы. Учёные их успешно решили в конце XIX и в первой половине XX столетия.

Большую роль в борьбе с инфекцией играла разработка сибиреязвенных вакцин, благодаря которым появилась возможность профилактировать болезнь. Сибиреязвенные вакцины были предложены Л. Пастером (1881), Л.С. Ценковским (1883), И.Н. Ланге (1890) и др. Одновременно учёными изучался иммунитет и разрабатывались способы дезинфекции при сибирской язве.

К настоящему времени многие вопросы сибирской язвы в значительной степени изучены. Одной из нерешённых актуальных проблем современной микробиологии сибирской язвы является познание условий пребывания и жизнеспособности бациллы антракса во внешней среде. Без решения указанной проблемы одна массовая вакцинация животных не обеспечит полной ликвидации болезни, так как постоянно будет возникать угроза появления сибирской язвы среди невакцинированных животных.

Иследованиями отечественных и зарубежных учёных установлено, что споры и вегетативные формы возбудителя сибирской язвы, занесённые в почву с трупами или выделениями больных животных, при оптимальных условиях могут сохраняться в ней, не теряя патогенности десятки лет. К оптимальным условиям, позволяющим сибиреязвенному микробу многократно совершать цикл развития, т.е. спорам прорастать в вегетативной форме, последним после некоторого периода размножения снова переходить в споровое состояние и т.д., относятся наличие органических веществ, влажность почвы, рН (близкий к нейтральному) и удовлетворительная аэрация.

Н.Г. Ипатенко и др. (1987) установлено сохранение культу-рально-морфологичеоких, биохимических и патогенных свойств бациллы антракса, выделенных из почвы скотомогильников 30-50-летней давности.

Далее живые споровые сибиреязвенные вакцины СТИ и ГНКИ готовят из бескапсульных микробов эталонных штаммов, которые хранятся в 30%-ном растворе глицерина или в сухом виде под вакуумом. Вопросам поддержания и проверки эталонных штаммов сибиреязвенных вакцин в стабильном состоянии уделяется большое внимание, так как от этого зависит качество указанных вакцин. При поддержании эталонных штаммов нужно помнить, что частые исследовательские посевы их на питательные среды нежелательны (нужно 1 раз в 2 года), так как в результате этого они могут изменить свои культуральиые свойства. Так, например, получилось с эталонным штаммом вакцины СТИ, подвергшимся последовательным пассажам на питательных средах при изготовлении его очередных серий. В итоге пришлось проводить работу по выделению популяции из сухого эталонного штамма вакцины СТИ, изготовленного в 1944г. Н.Н. Гинсбургом. Данная работа проведена Л.П. Руденко в 1964-67г.г.

Выделенный через 20 лет сибиреязвенный вакцинный штамм СТИ изучали на культуральиые и реактогенные свойства и на иммуногенную активность на лабораторных и крупных животных. В результате было установлено, что по культуральным, реактогенным и иммуногенным свойствам он соответствует существующим требованиям.

Таким образам, чтобы сохранить эталонные штаммы сибиреязвенных вакцин СТИ и ГНКИ в стабильном состоянии используются исходные образцы ранее изготовленных эталонных штаммов, хранящихся в сухом виде под вакуумом или в 30%-ном растворе глицерина при температуре плюс 2-4° (С.Г.Колесов и др., 1976).

Нами изучена продолжительность сохранения жизнеспособности спор сибиреязвенной бациллы в растворе глицерина при хранении в течение 100 лет в условиях комнатной температуры.

Профессор Казанского ветеринарного института И.Н. Ланге в 1890 году разработал вакцину для профилактики сибирской язвы. Эта была вторая вакцина, созданная в России. Она представляет собой живой капсулообразующий вариант бациллы антракса, ослабленной по методу Пастера. На кафедре хранятся образцы этой вакцины в виде спор в 40-%-ном растворе глицерина в сейфе, изготовленные И.Н. Ланге в 1891, 1897, 1900, 1905, 1918 и 1927 годах во флаконах Ценковского, флаконах с притертой пробкой и в пастеровских пипетках, запаянных с обоих концов.

Для проведения исследований в начале проводили подсчет спор в изучаемых образцах, используя камеру Горяева. Исследованиями установлено, что в образцах вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 во флаконах Ценковского с доступом кислорода споры не обнаружены. Наибольшее количество спор обнаружено во флаконах с притертой пробкой, начиная с 1900 года хранения, а в пастеровских пипетках - меньшее количество спор. Проведенные опыты показали сохранность морфологии спор с 1900 года без доступа кислорода. Эти результаты согласуются с данными С.И. Пригоды (1970), который также указывает, что под действием кислорода споры разрушаются.

В дальнейшем в изучаемых образцах сибиреязвенных вакцинных штаммов определяли наличие живых спор методом микробиологической рефрактометрии (Б.А. Фихман, 1967), окрашивания и посевом на искусственные питательные среды, сравнительно со штаммами СТИ и 55.

Методами микробиологической рефрактометрии, окрашивания и посевом на искусственные питательные среды установлено наличие живых спор в исследуемых образцах с 1900 года хранения. При посеве образцов спор на питательные среды установлены следующие результаты. В МПБ рост и развитие культур происходит через 36 часов с образованием на дне пробирки рыхлого белого осадка, надосадочная жидкость оставалась прозрачной, при встряхивании бульон не мутнеет, осадок разбивается на мелкие хлопья. В среде ГКИ происходило образование обильного хлопьевидного осадка с синтезом капсул с 4 час. после посева, максимум капсулооб-разующих клеток обнаружен через 12 часов.

На поверхности МПА образовались серовато-беловатые колонии с серебристым оттенком как R, RS и S формы, при этом RS-формы колонии преобладали.

Следует отметить, что результаты окрашивания и посева на питательные среды исследуемых культур совпадали.

Таким образом, проведенные исследования показали сохранение культурально-морфологических свойств бациллы антракса после длительного (100 лет) хранения в виде спор в условиях комнатной температуры в 40%-ном растворе глицерина. Следует отметить, что в литературе (Колесов С.Г., 1976) имеется сообщение о сохранении культурально-морфологических свойств вакцинного штамма бациллы антракса 55-летней давности.

Необходимо отметить, что многие отечественные и зарубежные исследователи изучали изменчивость бациллы антракса по морфологическим и культуральным свойствам. При этом изменения у выделенных штаммов обнаружены при выращивании на питательных средах с добавлением хлористого лития (Ф.А. Терентьев, 1969), желчи, сыворотки крови барана и др., а также при длительном пребывании в почве (JI.H. Юд-вик и др., 1983; N.A. Logan, 1994; А.И. Калиновский и др., 1986) и при выделении возбудителя из организма животных (Ю.Ф. Василяускас, 1982).

Далее исследования были посвящены изучению биохимических свойств образцов вакцинного штамма Ланге с 1900 года хранения. Изучение сахаролитических свойств сибиреязвенной культуры показало, что бацилла ферментирует с образованием кислоты без газа: глюкозу, сахарозу, фруктозу, мальтозу, галактозу, ксилозу и слабо - дестрозу, не ферментирует маннозу, рафинозу, рамнозу, крахмал, инсулин, сорбит и ман-нит. На 3-е сутки разжижает желатину в слабой степени в виде перевернутой елочки, не свертывает молоко, на 5%-ном кровяном агаре образует серо-темные колонии без зоны гемолиза, обладает лецитиназной активностью. Полученные данные свидетельствуют, что вакцинные штаммы бациллы антракса 100-летней давности, как и штаммы Ценковского, СТИ, 55 обладают сахаролитической, лецитиназной активностью и сла-бопротеолитическим свойством и не обладают гемолитической активностью.

Результаты наших исследований по изучению биохимических свойств согласуются с данными других исследователей при изучении типичных культур бациллы антракса (Н.Н. Гинсбург, 1969)

При изучении биологических свойств бациллы антракса одной из задач являлось определение фагочувствительности культур. Исследования проведены с использованием индикаторных сибиреязвенных фагов "К" ВИЭВ и "Гамма" МВА. Как показали исследования И.П. Павловой (1973), наиболее широким специфическим литическим спектром обладает фаг "К" ВИЭВ. Наши исследования показали сохранение чувствительности сибиреязвенных культур из штаммов Ланге, Ценковского, СТИ и 55 как к фагу "К" ВИЭВ, так и к фагу "Гамма" МВА.

Одной из задач наших исследований являлось изучение чувствительности к антибиотикам вакцинного штамма бациллы антракса после длительного хранения. Следует отметить, что в литературе нет единого мнения об эффективности антибиотиков при сибирской язве. Результаты исследований показали, что вакцинные штаммы Ланге оказались чувствительными к тетрациклину и стрептомицину, умеренно чувствительны к левомецитину и мономицину, не чувствительны к полимиксину. Таким образом, изучаемые культуры бациллы высоко чувствительны к тетрациклину и стрептомицину. Эти данные согласуются с данными литературы ( Л.И. Кузнецова, 1969).

Дальнейшие исследования были посвящены изучению патогенных и вирулентных свойств вакцинных штаммов Ланге после пассажей на питательных средах и в организме лабораторных животных.

В литературе имеются данные об изменении патогенности возбудителя сибирской язвы в зависимости от условий нахождения. Так, например, из 35-ти сибиреязвенных культур, выделенных из скотомогильника 40-летней давности, только 12 вызывали гибель мышей (М.В. Рево, Ш.Х. Харисов, 1940), длительное хранение на питательных средах приводит к ослаблению вирулентности (С.Г. Колесов, 1975)

Наши исследования по определению ЛД50 на белых мышах показали, что вирулентность штамма Ланге 2 была выше, чем у штамма Ланге 1 независимо от срока хранения и соответственно составляла 0,2 х 107'77 и 0,2 х 109 ЛД50.

На примере штамма Ланге 1 образца 1900 года были проведены исследования по выяснению влияния пассажей на вирулентность культуры бациллы антракса. В результате 5-ти пассажей на белых мышах штаммов Ланге существенные изменения вирулентности не происходят.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о сохранении патогенных свойств вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 после длительного хранения.

Большой интерес представлял сохранение антигенных свойств вакцинных штаммов после длительного хранения. Для этого были приготовлены антигены из штаммов Ланге 1 и 2 различного срока хранения по методике изготовления стандартного сибиреязвенного антигена. Для сравнения были приготовлены антигены из высоковирулентного капсулооб-раэующего штамма ЗБК2, а также из штаммов 2 Ценковскего, СТИ, 55. Результаты исследований показали отсутствие принципиальной разницы между опытными и контрольными антигенами в реакциях преципитации, микропреципитациии, диффузионной преципитации. Все штаммы обладали высокой антигенной активностью, образовали кольцо преципитации в течение 55 секунд. Следует указать, что не выявлено достоверной разницы в скорости образования преципитационного кольца у штаммов различного срока хранения и разного способа реактивации. Все это свидетельствует о сохранении антигенных свойств изучаемых культур.

Изготовленный антиген по активности и специфичности не уступает полученному из трех вакцинных штаммов (СТИ, 55, 2 Ценковского) и вирулентного штамма ЗБК2, что обусловлено наличием у вакцинных и вирулентных штаммов возбудителей сибирской язвы идентичного термостабильного преципитирующего антигена, на котором основана реакция преципитации.

Изготовление антигена на основе вакцинного штамма возбудителя сибирской язвы позволит решить важные социальные, экологические и экономические вопросы, связанные с исключением опасности заболевания сибирской язвой работников производства, обсеменения окружающей среды микробами возбудителя, повышением эффективности производства указанного препарата (А.А. Маничев, 1996).

Следующей задачей наших исследований являлось изучение имму-ногенных свойств сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 сравнительно с существующими вакцинными штаммами.

В начале проводили исследования по изучению показателей неспецифических факторов защиты организма при иммунизации животных различными вакцинными штаммами бациллы антракса.

Опыты по изучению показателей неспецифической резистентности проведены на морских свинках, иммунизированных вышеуказанными вакцинными штаммами возбудителя сибирской язвы после длительного хранения в дозе 0,5x104 спор. При этом определяли фагоцитарную активность крови и активность бета-лизина и лизоцима в сыворотке общепринятыми методами.

В результате исследований установлена общая закономерность изменений показателей неспецифической резистентности. Фагоцитарная активность на 3 и 7 дни после иммунизации повысилась и составила 6,0±1,2 и 5,0±1,7 соответственно, на 14 м 21 сутки снизилась до исходной величины - 2,0±0,4 %.

Активность лизоцима сыворотки крови на 3 сутки составляла 18,0±2,5 , на 7 - 18,0±2,0 а через 14 и 21 сутки произошло снижение до 6,0±0,2 и 4,0±0,3 мкг/мл соответственно. Уровень бета-лизина у животных был выше исходного (16,0±2,0 ) во все дни исследований: на 3 день -34,0±3,2 , на 7 - 44,0±1,1 , на 14 - 32,0±5,1 , на 21 день - 21,0±3,2 %.

Анализ полученных данных показал, что иммунизация морских свинок спорами возбудителя сибирской язвы приводит к активизации у них факторов неспецифической резистентности. При этом выявлено достоверное отличие показателей в зависимости от иммунизирующего штамма. Наиболее выраженное изменение были при иммунизации штаммами СТИ и 55. Среднее положение занимали штаммы Ценковского 2, а также Ланге 1 и 2 , реактивированные в организме восприимчивых животных. Следует отметить, что штаммы Ланге 1 и 2, реактивированные на питательных средах, обладали низкой иммунизирующей способностью. Полученные результаты по изучению показателей неспецифических факторов защиты организма белых мышей и белых крыс коррелировали с таковыми показателями морских свинок. Таким образом, после введения в организм вакцинных штаммов бациллы антракса происходит повышение неспецифических факторов защиты организма.

Изучение содержания белка и соотношения белковых фракций сыворотки крови у иммунизированных животных сибиреязвенными вакцинными штаммами Ланге 1 и 2 показали следующее: 1) к 14 дню после иммунизации происходит повышение содержания белка в сыворотке крови, а с 21 дня постепенное уменьшение; 2) изменение содержания альбуминов и альфа-глобулина не обнаружено; 3) установлено незначительное изменение содержания бета-глобулина; 4) выявлено, что к 14 дню после иммунизации происходит значительное повышение содержания гамма-глобулина.

Иммунизация животных вакцинными штаммами Ланге 1 и 2 бациллы антракса повышает у них показатели специфических гуморальных клеточных факторов в виде увеличения Т- и В- лимфоцитов и специфических антител в сыворотках крови, выявленных в реакциях преципитации, непрямой гемагглютинации и иммуноферментным методом.

Для изучения иммуногенных свойств сибиреязвенных штаммов Ланге 1 и 2 морских свинок иммунизировали изучаемыми вакцинными штаммами подкожно в дозе 0,5-104 спор. На 21 день их заражали вирулентным штаммом бациллы антракса в дозе 200 ЛД50. Результаты опытов показали, что иммунизированные животные после заражения остались живыми, а контрольные (интактные) пали. Таким образом, вакцинные штаммы Ланге 1 и 2 с 1900 года хранения после реактивации обладали иммуногенными

76 свойствами.

Результаты проведенных нами исследований показали, что споры вакцинных штаммов Ланге 1 и 2 возбудителя сибирской язвы 100 летней давности сохраняли жизнеспособность при культивировании на искусственных питательных средах и в организме животных, а также свои типичные культурально-морфологические, биохимические, вирулентные, антигенные и иммуногениые свойства.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Шереметьева, Юлия Владимировна, 2001 год

1. Абдуллин X. X. Материалы по изучению изменчивости Bacillus anthcis. // Кандидатская диссертация. Казань, 1939.

2. Абдуллин X. X. О переходе сибиреязвенного мироорганизма в ложносиби-реязвенный. // Ученые записки КГВИ т. 59, 1952. с.23-30.

3. Абдуллин Х.Х., Капарович Т.В. Изучение противомикробного действия ли-зоцимов молока на вегетативную и споровую форму сибиреязвенной бациллы. //Актуальные вопросы профилактики сибирской язвы в СССР. М., 1971, с.145-148.

4. Абалакин В.А., Черкасский Б.Л. Использование твердофазного иммунофер-ментного метода (ТИФА) для изучения специфической антигенемии при сибирской яэве. //Актуальные вопросы иммунодиагностики опасных инфекций. Ставрополь, 1986, Вып.1. с. 5-7.

5. Авакян А.А., Кац Л.Н., Павлова И.Б. //Атлас анатомии бактерий, патогенных для человека и животных. М.: Медицина, 1972, с.183.

6. Адамчук Л.В. и др. Метод выделения лимфоцитов крови в градиенте плотности смеси поливиниловой спиртверографии //Лабораторное дело, 1982, -№ 5, с. 305-306.

7. Аксенов С.И. О предельной продолжительности анабиоза у микроорганизмов. //Ж. Микробиология, 1982. т.51, №5, с. 877-880.

8. Андреев П.Н. К истории происхождения вакцин сибирской язвы бактериологической станции Харьковского ветеринарного института // Вет. обозрение, 1904, № 9.

9. Аркадьева З.А. Методы хранения микроорганизмов. //Метаболизм микроорганизмов. М.: МГУ, 1986, с.57.

10. Ю.Аркадьева З.А. Факторы, влияющие на жизнеспособность и свойства микроорганизмов при различных местах хранения.// Биологические науки, 1983, №4, с.93-105.

11. П.Аркадьева З.А., Ольсинская Н.Л., Алексеева М.А. Хранение пропионово-кислых бактерий. //Прикладная биохимия и микробиология, t.XXIV, 1988,1. Вып.6, с. 839-844.

12. Ахметзянов Ю.А., Найманов П.И., Сорокин Ю.И. Сравнительный анализ плазмидного состава вакцинных штаммов сибиреязвенного микроба и почвенных бацилл. // Тезисы докладов к научно-практической конференции. (11-13 июня 1986 г.) Хабаровск, 1986. с.70-72.

13. З.Бабичев А., Евсеенко П. Сибирская язва. // Гражданская защита, 1996, № 10, с. 81.

14. Бациллы.// Генетика и биотехнология. Под ред. Харвуда К.И: Мир, 1992 -с.531.

15. Бакулов И.А., Гаврилов В.А., Косяченко Н.С. Современные воззрения на безопасность живых сибиреязвенных вакцин. //Ветеринария, 1993, № 2, с. 22-25.

16. Бакулов И.А. Эпизоотология с микробиологией. Наследственность и изменчивость микроорганизмов. //М. Колос, 1981, с. 27-33.

17. Бахматова И.В., Чюрлис Т.К., Жарикова Г. Г. Естественная изменчивость бактерий. //М., 1981, Деп. в ВИНИТИ 16.03.81, № 1593.

18. Беккер М.Е., Дамберг В.Э., Рапопорт А.И. Анабиоз микроорганизмов. // Рига: Зинатне, 1981.

19. Беляков В.Д., Ряпис JI.A., Каминский. Типирование возбудителей инфекционных болезней на современном этапе.// Журнал микробиологии, эпидемо-логии и иммунологии. 1990. №3. с. 98-103.

20. Березкина Г.П., Касавченко В.П., Брянская A.M., Погребняк Л.И. Материалы по бактериологической характеристике почв скотомогильников. // В сб.: Вопросы эффективности противосибиреязвенных мероприятий. М., 1974.

21. Буравцева Н.П., Неляпин Н.М., Еременко Е.И. Выделение из почвы атипичных штаммов сибиреязвенного микроба.// Тезисы докладов научнопрактической конференции. Ставрополь, 1983, С.16-17.

22. Бургасов П.Н., Черкасский Б.Л., Марчук Л.И., Жербак Ю.Ф. Сибирская язва. //М. Медицина, 1970, с. 128.

23. Бусыгин К.Ф. Оценка реакции " ожерелья " для идентификации возбудителя сибирской язвы // Ученые записки Казанского вет. института. т.84, 1962, с. 10-13.

24. Василяускас Ю.Ф., Стачинская Э.С., Стукалин Г.С. Морфологическая изменчивость штаммов Bacillus subtilis продуцентов -аминазы //IV съезд всесоюзного общества генетиков и селекционеров: Тезисы докладов. Кишинев, 1982. с. 292.

25. Ветеринарные препараты. Под ред. Осидзе Д.Ф. //М.: Колос, 1981, с. 448

26. Владимиров А.А. К биологии сибиреязвенного микроба в почве. //Архив биологических наук, 1936, т. 43, № 2-3.

27. Владимиров А.А. Байтин И.А. //Сибирская язва. Работы XI пленума ветеринарной секции ВАСХНИЛ, М. 1940. с. 20-38.

28. Временные методические указания по обнаружению возбудителя сибирской язвы в почве. // М., 1970, с. 15.

29. Вранан З.Э. Средства для дезинфекции животноводческих помещений и клеток для содержания пушных зверей при сибирской язве.// Дезинфекция в промышленном животноводстве. Тр. ВНИВС. М., 1980, с. 79-82.

30. Гаврилов З.А., Киселев Ю.Т., Маничев А.А. и др. Результаты испытания живой ассоциированной вакцины против сибирской язвы из штаммов 55 и 2/14 // 8 сб. Актуал. вопр. профил. сиб.язвы.- М., 1990, с. 110-112.

31. Гаврилов В.А. Сравнительное изучение биологических свойств вакцинных и эпизоотических штаммов Bacillus antrhacis, выделенных на территории СССР. // Автореферат диссертации, Покров, 1977.

32. Гайдамака Т.В. Об изменчивости сибиреязвенного вакцинного штамма СТИ. // Автореферат. Киев, 1959, 15 с.

33. Гинсбург Н.Н. О стабильности биологических свойств у сибиреязвенной вакцины СТЙ. //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии,1964, №9, с. 104-107.

34. Гинсбург Н.Н. Современная характеристика возбудителя сибирской язвы. //М.: Медицина, 1975.

35. Гинсбург Н.Н. //Живые вакцины, 1969. с. 336.

36. Гладус М.А., Николаенко Ю.П., Лазарева Е.С. и др. Стандартизация посевного материала при производстве живой сибиреязвенной вакцины. //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1978, №9, с. 42-46.

37. Глотов В.В. Исследование иммуногенных свойств матрикса №18 первой вакцина Ценковского и антигенных свойств сибиреязвенных вакцин.// Автореферат кандидатской диссертации. М. 1954.

38. Горбань А.Н., Садовский М.Г., Школьник Е.М. Динамическая теория клеточного цикла //Биофизика микробных популяций. Красноярск: СО АН СССР, 1987, с. 169

39. Григорян Г.М. Антагонистическое действие почвенных микроорганизмов на Bacillus anthracis // Тр. Туркменского сельскохозяйственного института. -t.VIII, 1956.

40. Груз Е.З. Диагностическая ценность некоторых морфологических, культу-ральных и биохимических признаков палочки антракса // Антракс.-Кишинев, 1964.

41. Гуревич Ю.Л. Устойчивость и регуляция размножения в микробных популяциях. Генетика бактерий // М.: Мир, 1984.

42. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нецелометрическим методом // Лабораторное дело, 1968 № 1 -с. 28

43. Грязнова М.Н., Коновалова Е.Ю., Эль-Регистан Т.И. Характеристика анабиотических клеток микроорганизмов. // Тезисы докладов конференции молодых ученых, Рига, 1987, с. 110.

44. Дудге В.И. Особенности патологии спорообразующих бактерий. //Успехи микробиологии, 1982, В.17, с. 87-117.

45. Езенчук Ю.Р. Функциональнее критерии патогенности.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1988, №5, с. 113-116.

46. Елистратова З.А. Биологические свойства штаммов сибиреязвенного микроба, выделенного из скотомогильника 40-летней давности. //Труды Центрального НИИ дезинфекции, 1959.

47. Захаров Д.Г., Маничев А.А., Романов Г.И. и др. Активность противосибире-язвенной сыворотки, полученной разными методами //Науч. тр. /ВГНКИ.-1987.-С.19-23.

48. Иванов В.Н., Угадчиков Г.А. Клеточный цикл микроорганизмов и гетерогенность их популяции. //Киев: Наук., думка, 1984, с. 280.

49. Иванов М.М., Доцевич П.И. Определение живых и мертвых спор сибирской язвы. //Труды ГНКИ вет. препаратов, 1964, т.2, с. 171-173.

50. Иванович Л. Влияние лизогении на вирулентность Bacillus anthracis // Генетика микроорганизмов. -М., 1963, с.316-323.

51. Иннис У., Ингрем Д. Жизнь микроорганизмов при низких температурах:

52. Механизмы и молекулярные аспекты. // В кн.: Жизнь микробов в экстремальных условиях. Под редакцией Д. Кашнера, М.: Мир, 1981.

53. Инструкция по изготовлению и контролю противосибиреязвенной живой вакцины СТИ для людей, 1954.

54. Ипатенко Н.Г., Татаринцев Н.Т., Маничев А.А. и др. Атипичные случаи сибирской язвы у животных //Ветеринария.-1988, № 8, с. 32-34.

55. Ипатенко Н. Г., Антибиотики при сибирской язве. //Ветеринария, 1989, №7.

56. Ипатенко Н. Г. Изучение культурально-морфологических и вирулентных свойств Bacillus anthracis // Ветеринария. 1967, № 3.

57. Ипатенко Н.Г. Значение естественных защитных свойств сывортки крови домашних животных и человека в патогенезе сибирской язвы // Тр. ВГНКИ, т. 19, 1973.

58. Ипатенко Н.Г., Зелепухин B.C. Сибирская язва крупного рогатого скота // Инфекционные болезни крупного рогатого скота. М.: Колос, 1974.

59. Ипатенко Н.Т. Диагностика атипичных форм сибирской язвы у морских свинок. // Ветеринария, № 1, 1991, с.38-41.

60. Ипатенко Н.Г., Гущин В.Н., Маничев А.А., Щенев А.И., Сайиткулов Б.С. Профилактика сибирской язвы.// Ветеринария, 1992. № 2, с. 31-32.

61. Ипатенко Н.Г. Лабораторные методы исследования при сибирской язве // Ветеринария, 1983, № 7.

62. Ипатенко Н.Г., Маничев А.А., Шморгун Б.И. и др. Дифференциация Bacillus anthracis от спорообразующих почвенных бацилл // Ветеринария. 1995, № 7, с. 19-22.

63. Ипатенко Н.Г., Татаринцев Н.Т., Маничев А.А., и др. Активность противосибиреязвенной сыворотки, полученной разными методами //Науч. тр.ВГНКИ.-1987.-с. 19-23.

64. Ипатенко Н.Г., Татаринцев Н.Т., Маничев А.А. Значение экологических факторов в сохранении возбудителя сибирской язвы в почве // В сб. Вопросы экологии в вет. медицине.- Воронеж., 1988.-е. 64-65.

65. Ипатенко Н.Г., Маничев А.А., Седов З.А., Гущин В.Н. Испытания сибиреязвенных бактериофагов // Ветеринария.- 1989.-№ 2.-C.58-59.

66. Ипатенко Н.Г., Татаринцев Н.Т., Маничев А.А. и др. История создания отечественных и зарубежных противосибиреязвенных вакцин // Ветеринария.-1989.-№ 3.-С.71-72.

67. Ипатенко Н.Г., Гаврилов В.А., Зелепукин B.C., Маничев А.А., Татаринцев Н.Т., Сайиткулов Б.С., Бахтаров С.И.- Сибирская язва.// М.: Колос.- 1995 .-с. 324.

68. Ипатенко Н.Г., Татаринцев Н.Т., Маничев А.А., Сайиткулов Б.С. Формирование иммунитета против сибирской язвы у сельскохозяйственных животных // Науч. тр./ ВГНКИ. 1991. -с. 65-70.

69. Ипатенко Н.Г., Маничев А.А., Саленко JI.C. и др. Иммуногенные свойства вакцин против сибирской язвы из штамма 55 //Ветеринария.- 1993.- № 3. С. 17-19.

70. Ипатенко Н.Т., Седов В.А., Зелепукин В. С., Гущин В.М. Сибирская язва сельскохозяйственных животных. -//М.: Агропромиздат, 1987. с. 256

71. Калакуцкий A.M., Седякина Т.М., Сокращение жизнеспособности микроорганизмов в природе и основные подходы консервации коллекционныхкультур. //Тезисы докладов 2-й Всесоюзной конференции по анабиозу. Рига, 16-18 октября, 1984, с. 19-20.

72. Калиновский A.M., Найманов К.И., Сорокин Ю.И. Атипичные штаммы возбудителя сибирской язвы .Вопросы санитарной охраны территории и профилактики природно-очаговых инфекций. //Тезисы докладов -Хабаровск, 1986, с. 73-75.

73. Калюжная Л.Д. и др. Изучение актиномицетов почв скотомогильников как возможных антагонистов возбудителя сибирской язвы // Вопросы эффективности противосибиреязвенных мероприятий -М., 1974. с. 156-157.

74. Карпуть И.М., Прудников B.C. Возрастные особенности кроветворения у свиней // Ветеринария 1970 - № 2

75. Кивалкина В.П. Зависимость между вирулентностью и энергией размножения у различных штаммов сибиреязвенной бациллы // Ученые записки КВИ, 1952. т.59, с. 33-45.

76. Колесов С.Г. Мёры борьбы с сибирской язвой животных и ликвидация этого заболевания //Труды ВГНКИ, т. XXII. М. №75, с. 160-164.'

77. Коротич А. С., Погребняк Л.И. Сибирская язва // Урожай, Киев. 1976. с.160.

78. Кузнецова Л.И., Курнова А.Н., Гуленко З.И. и др. Антибиотикоустойчивые варианты сибиреязвенного микроба. // Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1969, вып. 3. с. 138-140.

79. Кузьмин Н.А. К вопросу об антигенах оболочки Bacillus anthracis // Труды MBA. т. 61, 1972. с. 122-124.

80. Краткий определитель бактерий Берги. // М.: Мир, 1994.

81. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований.// М.: Медицина, 1973.

82. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции. //М.: Агропромиздат, 1986.

83. Ланге И.Н. Бактериологические данные для диагностики заразных болезней животных. //Ученые записки КВИ, т. X, 1893.

84. Левина Е.Н., Архипова З.Р. Изучение сибиреязвенных бактериофагов

85. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1967, №9.

86. Лемаковская В.М. О размножении микроба сибирской язва в почвах разных типов. //Сборник трудов Львовского зооветеринарного института, 1956, выпуск 8.

87. Малахов Ю.А., Ипатенко Н.Г., Татаринцев Н.Т., Маничев А.А., и др. Лабораторная диагностика сибирской язвы у животных и людей, обнаружение возбудителя в сырье животного происхождения и объектах внешней среды// М.: BOO Агропромиздат.- 1989.-32 с.

88. Маничев А.А. Получение капсульной фракции возбудителя сибирской язвы // Ветеринария, -1978.- №.5. -с. 46-48.

89. Маничев А.А., Романов Г.И., Саленко Л.С. и др. Сравнительное изучение вирулентных сибиреязвенных штаммов //Науч. тр. ВГНКИ.-1984. -с.56-59.

90. Маничев А.А. Метод дезинтеграции бацилл антракса //Науч.тр. ВГНКИ.-1985.-е. 126-127.

91. ЮО.Маничев А.А., Шморгун Б.И. Производство стандартного сибиреязвенного бактерийного антигена из вакцинных штаммов // Ветеринария.-1991.-№7.-с.30-31.

92. Маничев А.А., Шморгун Б.И. Усовершенствованный способ изготовления преципитирующей сибиреязвенной сыворотки // Ветеринария. 1995. -№ 1.-С. 30-34.

93. Мещеряков А .Я. Фаго диагностика сибирской язвы.//Сибирская язва в СССР и перспективы ее ликвидации. -М., 1968.

94. Методы общей бактериологии. // М.: Мир, 1984, т.1, -1983 536 с. Ю7.Милько Е.С., Аркадьева З.А., Пименова М.Н., Степанова Р.А., Егоров Н.С.

95. Влияние различных методов хранения на выживаемость и соотношение вариантов Вас. anthracis//Микробиология 1984. т.53. Вып.1. с. 113-116.

96. Морозов И.И. Метод определения числа жизнеспособных микроорганизмов- // Лабораторное дело, 1983, № 9, с. 60-62.

97. Обзор литературы по серотерапии и вакцинации. 1908, с. 126-130. Отчет бактериологической станции КВИ 1891, 1894, 1906, 1913, 1914.

98. Определение вирулентности сибиреязвенных культур. // Лабораторные исследования в ветеринарии. Под ред. Б.И. Антонова. М., Агропромиздат, 1986.

99. Ш.Петровская З.Г. Проблема вирулентности бактерий- // М.: Медицина, 1967.- 263 с.

100. Поляков А.А., Башковой Н.И., Бочаров Д.А., Гришаев И. Д., Закомырдин А.А., Любаков Н.П., Руководство по ветеринарной санитарии // М.: Агропромиздат, 1986-320 с. ПЗ.Прейс Г. О разновидностях ослабленной сибиреязвенной палочки .- //

101. Вестник общественной гигиены, 1909, №2. 114.Преснов И.Н. и др. Диссеминация и элиминация сибиреязвенных микробов у вакцинированных животных // Тр. ВГНКИ ветпрепаратов. т. П.- М., 1962.

102. Преснов И.Н. Изменчивость Вас. Anthracis в природных условиях // Ветеринария, 1966, № 7.

103. Пригода С.И., Кутузов В.А., Прилепо А.З. Влияние концентрации кислорода на развитие культур сибиреязвенного штамма СТИ // Пробл. Особо опасных инфекций. Саратов, 1970, вып. 3 (13). с. 167-171.

104. Рахманова Х.У., Захаров В.Б., Сабирова Г.Ш.и др. Характеристика штаммов сибирской язвы, выделенных из почвы. // Медицинский журнал Узбекистана , 1982, № 3, с. 46-48.

105. Романов Г.И. Изучение вирулентных свойств сибиреязвенных штаммов по ЛД50 // Тр. ВГНКИ вет. препаратов, 1977 с. 186-191.

106. Романов Г.И. Получение и использование сибиреязвенной заражающей культуры в качестве стандартного препарата //Контроль качества биологических ветеринарных препаратов-М., Изд. ВГНКИ ветпрепаратов, 1987, с.13.

107. Романов Г.И., Маничев А.А., Кириллов Л.В. и др. Испытание РНГА для определения напряженности иммунитета против сибирской язвы // Науч. тр. ВГНКИ. 1984. - с. 79-83.

108. Романов Г.И., Маничев А.А. Лукъянченко А.В. Вакцина СТИ живая против сибирской язвы животных // ГОСТ. Госкомстандарт.- 1986. - 21 с.

109. Романов Г.И., Кириллов Л.В., Маничев А.А. и др. Изучение иммуногенных свойств живой ассоциированной вакцины против сибирской язвы и эмфизематозного карбункула в процессе хранения // В сб. Актуальные вопросы профил. сибирской язвы. М., 1986. с. 94-95

110. Романов Г.И., Маничев А.А., Захаров Д.Г. и др. Продолжительность иммунитета против сибирской язвы у кроликов, привитых противосибиреязвенной сывороткой // В сб. Актуальные вопросы профилактики сибирской язвы. М., 1986. - с. 100-101.

111. Романов Г.И., Маничев А.А., Саленко JI.C. и др. Способ изготовления сыворотки против сибирской язвы // Авторское свидетельство СССР. 1986. -№ 1347224.

112. Романов Г.И., Руденко Л.П. Достижения и перспективы борьбы с сибирской язвой в СССР. // М., 1978. с. 84-86.

113. Рубын Е.Л. Хранение культур микроорганизмов // Прикладная биохимия и микробиология, т. 25, вып. 3., АН.СССР, 1989, с. 291-299.

114. Русалеев B.C. Взаимодействие сибиреязвенного бактериофага 3-17 со штаммами Вас. anthracis // Ветеринария, 1991, №5, с. 26.

115. Рябков Ю.А., Чернецкий Ю.П., Желтов В.В., Опарин Ю.Г. Воздействие кислорода на выживаемость штаммов в сухих вакцинах // Контроль качестваiхимиотерапевтических препаратов. Сборник научных трудов ВГНКИ, Mo- ^ сква, 1987, с. 122

116. Салтыков Р.А. О стабильности биологических признаков вакцинных штаммов Bacillus anthracis //Кандидатская диссертация, Киров, 1947

117. Селиванов А.В., Кириллов Л.В., Борисович Ю.Ф. Современные требования к живым и инактивированным бактерийным вакцинам и анатоксинам. Контроль и стандартизация бактериальных ветеринарных препаратов.//Труды ВГНКИ, Москва, 1978, МСХ СССР ГУВ. С. 3-10.

118. Сибирская язва. Под ред. Колесова С.Г.//М.: Колос. 1976- 228 с.

119. Сидякина Т.М. Консервация микроорганизмов. //Сер. Консервация генетических ресурсов./ ПущиноЮНТИ НЦБИ АН СССР, 1985, с.63.

120. Синяк К.М., Вернер О.М. Вегетация и спорообразование у возбудителя сибирской язвы (вакцинный штамм СТИ) при различных значениях рН среды культивирования. //Известия АН СССР, серия биология, 1983, № 5, с. 686692.

121. Смирнов В.В., Резник С.Р., Василевская И.А. Аэробные спорообразующие бактерии- продуценты биоактивных веществ //Киев: Наукава Думка, 1982.280 с.

122. Сомов Т.П., Вырвашевич Т.Н. Влияние низкой температуры на вирулентность некоторых патогенных бактерий. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1992, № 4, с.62-67.

123. Сорокин Ю.И. Динамика размножения Вас. anthracis в каштановой почве Азербайджанской ССР.//В кн. Современные аспекты профилактики зоо-нозных инфекций. Тезисы докладов, Иркутск, 1984. с. 24-25.

124. Сорокин Ю.И., Родзиковский А. В., Жиров А,Я. Динамика популяции Вас. anthracis СТИ в естественных биоценозах горных лесных почв Приморского края. Тезисы докладов научно-практической конференции. Ставрополь, 1983. с. 16-17.

125. Степанов А.С. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. //М.: Медицина, 1989.

126. МЗ.Тафелыптейн Э.Е. Биологическая активность культуральных фильтратов Bacillus anthracis. //Иркутск, 1984. с. 28-29.

127. Терентьев Ф.А. Изменчивость бацилл сибирской язвы в организмеживотных. // Сибирская язва, М., 1940. с. 65-79.

128. Терентьев Ф.А. Сибирская язва// Эпизоотология. М., 1969. с. 71-77.

129. Тимофеев-Ресовский Н.Б., Яблоков А.В., Глотов Н.В. Очерк учения о популяции. //№, 1973.

130. Тилько Е.С., Егоров Н.С. О роли умеренного фага в диссоциации бактерий // Биологические науки. 1986, №4, с. 6-19.

131. Фатеева М.В. Коллекция микроорганизмов и методы длительного хранения культур. //Успехи микробиологии, 1983. №18. с. 193-215.

132. Фихман Б.А. Микробиологическая рефрактометрия // Издательство "Медицина" М., 1967. с. 36-161.

133. Хаитов P.M., Сулейманов С.Ф., Пучкова Н.Г., Некрасов А.В., Атауллаха-нов Р.И. Стимуляция иммунного ответа на белковый токсин Вас. Anthracis с помощью водорастворимых полиионов.// Иммунология, №3, 1993. с. 3134.

134. Цибиктапова Л.Д., Цыдыпов В.Ц. Иммунобиологические показатели организма телят, привитых вакциной СТИ // Болезни сельскохозяйственных животных и меры борьбы с ними в Забайкалье и на Дальнем Востоке / Сб. научных трудов.- Благовещенск, 1981.

135. Цион Р.А. Почва, её состав и физико-химические свойства как эпизоотический фактор стационарности и распространения сибирской язвы. // Вестник современной ветеринарии, 1930. №21.

136. Чекомасова А.В. Пассажи через организм животных. Как метод стабилизации свойств вакцинных штаммов чумного микроба. // Автореферат диссертации кандидатской. Ростов на Дону. 1973.

137. Черкасский Б.Л. Критерии оценки эпизоотической и эпидемиологической активности стационарно неблагополучных по сибирской язве пунктов.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1969 № 1.

138. Числов Ю.В. Концентрирование суспензий бактериальных спор сибиреязвенного штамма 55 ВНИИВВ //Ветеринария, 1998, №10, С. 19-21.

139. Швец Н.В., Волошин А. Г., Брезгунов В.Н. Электрооптический методоценки жизнеспособности микроорганизмов после сублимационной сушки // Биотехнология, 1987, т.З, №4, с.528-532.

140. Шлегель Г. Общая микробиология // М.: Мир, 1987-.566 с.

141. Шушаев Б.Х. и др. Действие ризосферы растений на возбудителя сибирской язвы. // Вестник сельскохозяйственной науки, 1970, № 6.

142. Юзвик. JI.H., Нейманов П.И., Мусатов Ю.С. К биологической характеристике бацилл, выделенных в почвенных очагах сибирской язвы в Читинской области. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1983, № 11. с. 102-103.

143. Яковлев А.Т. Использование ИФА для ускоренной диагностики сибирской язвы, сапа и мелиоидоза // Автореферат диссертации кандидатской медицинских наук. Саратов, 1984, 119 с.

144. Anderson G.J., I.M.Simchock and K.N.Wilson. Identification of a region of genetic variability among Bacillus anthrax strains and related species.//J.Bacteriol, 1996, 178:377-384.

145. Anthrax vaccine.//Mod nett Drugs Ther, 1998, 40:52-53.

146. Battisty L., Green B.D., Thorne CB. Mating system for transfer of plasmids among Bacillus anthracis, B.cereus and B.thiringiensis. // Bacteriol, 1985, 162 2, 543-550.

147. Brachman P.S. Anthrax. // "Bact.Inf.Humans: Epidemiol and Coutr." New Yore; London, 1982, 63-64.

148. Burnard I.P., A/M.Friedlander. Vaccination agaist anthrax with attenuated strains of Bacikkus anthrax that produce protective antigen //Infect immun, 199, 67:562-567.

149. Cherkasskiy B.L. Anthrax in Russia. // Salisbury Medical Bulletin Special Supplement, 1996, 87, 6-7.

150. Chu H.P. The production of noncapsulated avirulent variants by Bacillus anthracis and its implication on taxonomy. // J.genMicrobiol, 1950, v.4, 3, pxiii of Proceedings.

151. De Vos V. The isolation of viable and pathogenic Bacillus anthracis organismsfrom 200+/-50 year old bones from the Kruger National Park: A preliminary report.// Sigma Press, Pretoria, 1998, pp.22-24.

152. Dragon D.C., Rennie. The ecology of anthrax spores: Tough but not invirible. // C.Veterinary Journal, 36, 295-301.

153. Dixon T.S., Meselson U., Gnilemin I., Hanna P.C. Anthrax. // N Engi., I.Med, 1999, 341:815-26.

154. Eremenko E.J et al.// Study of atypical strains of Bacillus anthracis, 1999.

155. Ezzell I.W., Abshire T.G. Immunobiological analysis of cell assotiated antigens of Bacillus anthracis. // Infec. And Immun/. 1988, 56, 2, p.349-356.

156. Forney K., Trome R. Sstabilisation of culture productivity. // Dev. Jnd. Microbiol., 1977, v.18., p.319-325.

157. Gren B.D., Batisti L., Koehler T.M., Thorne C.B., Yrins B.E. Demonstration of capsule plasmid in Bacillus anthracis.// Inf. And Immunity, 1985, v.49, 2, p.291-297.

158. Gordon R.R. The genus Bacillus. // Handb. Microbiol., Cleveland (Ohio)., 1973, vol.l, p.71-88.

159. Hoffmaster A.R and T.M.Koeher. Control of virulence gene expression in Bacillus anthrax. // I.Appl.Microdiol, 1999, 87:279-281.

160. Hutyra et al. В высушенных агаровых и желатиновых культурах споры остаются жизнеспособными и вирулентными в течение 55 дней. // Spezielle Patholofie und Terapie der Houstiere, B,I.,. Jena, 1959.

161. Inglesby T.V. Anthrax: a possibl cage history. // Emerg infect Dis., 1999, 5:55660.

162. Ivins B.E., J.W.Ezzell, Ir.I.Iemski, K.W.Hedlund, I.D.Ristroph, S.H.Leppla. Immunization studies with attennuated strains of Bacillus anthracis. // Infect. And Immun., 1986., v.52, 454-458.

163. Iones M.N. et al. Efficacy of the UK human anthrax vaccine in guinea pigs against spores of Bacillus anthracis. // Proceedings of the International Worc-Shop on Anthrax, 1999, pp. 123-124.

164. Lawrence Dean, Heitefuss Stefan, Seifert Horest S.H. Differentiation of

165. B.anthracis from B.cereus by gas chromatographic whole-cell fatty acid analysis. IJ J.Clin.Microbiol. 1991. -29., 7, p.1508-1515.

166. Leise Y., Carter C., Friedlander H. Et ak. Criteria for identification of Bacillus anthracis. // J.Bacteriol. 1959., v.77, 5., p.655-660.

167. Little S.F and G.B.Knudson. Comparative efficacy of Bacillus anthrax live spore vaccine and protective antigen vaccine aganst anthrax in the guinea pig. //Infect.Immun., 1986, 52, 509-512.

168. Long R. On bacterial disociation. // J.Theor.Biol., 1977, 64,4, p.761-764.

169. Logan N.A., Berkeley R.C.W. Identification of Bacillus strans using the API system. //J.Gen.Micribiol, 1984, 130, 7, 1871-1882.

170. Mikesell P., Ivins B.E., Ristijph J.D., Dreier T.M. Evidence for plasmid-mediated toxin production in Bacillus anthracis. // Infect and Immunity, 1983, v./39, 1, p.371-376.

171. O'Connor R.J., Halvorson Harlun O.L. Alanine degidrogenose: a mechanism controlling the specificity acidiinduced germinatijn of Bacillus cereus spores. // J.I.Bacteriol, 1961, 82, 5, 706-713.

172. Ri Chun Sik, Kim Ilsfm, Chang Do Sin. Исследование методов и эффективности хранения культур микроорганизмов. //Сэкмальхак.Вю^у, 1986, 3, р.29-32.

173. Shirin Shafazand M.D. et al. Inhalational Anthrax epidemiology, diagnosis and management.//Chest/116/5. November, 1999, 1369-1376.

174. Sterne M. Variation in Bacillus anthracis.// Onderstepoort/ / J/Vet.Sci., 1837, v.8., p.271-349.

175. Stepanov A.V. et al Development of novel vaccines against anthrax in man// Biotehnology, 1996, 44, 155-160.

176. Sussman A.S., Halvorson H.O. Spores. Their dormansy and germination/ // N.Y.: Harper and Row, 1966.

177. Turnbull P.C. Definitive indentification of Bacillus anthrax a revier. // J.Apll.Mecrobiol, 1999, 87:237-40.

178. Turnbull P.C. Anthrax vaccines: past, present and future. // Vaccine, 1992,969:533-539.

179. Unsworth В.A., Cross Т., Seaword M.R.D., Sims R.E. The longevity of thermo-actinomycete endespores in natural substrates. // J.Appl.Bacteriol., 12, 1977, 4552.

180. Velkos SL. And A.M.Friedlander. Comparative safety and efficacy against Bacillus anthrax of pronective antigen and live vaccines in mece. // Micrid.Pathol., 1988,5:127-139.