Сравнительная оценка биологической дозиметрии на основе анализа стабильных и нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Шепель, Наталья Николаевна

• Шепель, Наталья Николаевна
• кандидат биологических наук
• 0

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шепель, Наталья Николаевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о биодозиметрии

1.2 Биологическая дозиметрия по частоте нестабильных аберраций 13 хромосом в лимфоцитах периферической крови человека

1.2.1 Спонтанный уровень аберраций хромосом в лимфоцитах 16 периферической крови

1.2.2 Сравнение выходов аберраций хромосом в лимфоцитах при 23 облучении in vitro и in vivo

1.2.3 Элиминация хромосомных аберраций после облучения in vivo

1.3 Другие методы биологической дозиметрии

1.3.1 ЭПР-спектроскопия эмали зубов

1.3.2 Гематологический метод

1.4 Калибровочные кривые

1.5 Практическое применение биодозиметрии в аварийных ситуациях

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 37 2.1 Характеристики обследованных групп 37 2.2Типы аберраций хромосом

2.3 Методика культивирования лимфоцитов крови и приготовление 41 препаратов для анализа нестабильных аберраций хромосом

2.4 Метод флуоресцентной in situ гибридизации клеток (FISH)

2.5 Критерии учета и анализ аберраций

2.6 Метод Qdr

2.7 Статистическая обработка результатов.

Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 46 3.1 Исследование нестабильных и стабильных аберраций in vitro.

3.1.1 Результаты анализа нестабильных аберраций хромосом

3.1.2 Оценка калибровочной зависимости для метода Qdr

3.1.3 Результаты анализа аберраций хромосом методом FISH.

3.2 Исследование частоты нестабильных и стабильных аберраций 57 хромосом у лиц с ОЛБ с целью последующей оценки индивидуальных Доз.

3.2.1 Анализ выхода нестабильных аберраций в исследуемой группе 57 лиц.

3.2.2 Анализ стабильных аберраций хромосом методом FISH у 60 обследованных лиц.

3.2.3 Оценка индивидуальных доз у обследованных лиц. 69 3.2.4. Анализ соотношения степени тяжести ОЛБ и цитогенетических 71 нарушений у обследованных лиц.

4.2 Повышенный уровень радиационных маркеров как индикатор 74 радиационного воздействия

4.3 Роль цитогенетического метода биодозиметрии в уточнении 76 диагноза острой лучевой болезни

4.4 Перспективы и проблемы использования стабильных аберраций 80 (транслокаций) для ретроспективной биологической дозиметрии

Глава 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1 Спонтанный уровень хромосомных аберраций

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительная оценка биологической дозиметрии на основе анализа стабильных и нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови человека»

Актуальность проблемы.

На протяжении всей истории существования нашей планеты, все живое на Земле, включая и человечество, находилось под постоянным воздействием

1 I I различных ионизирующих излучений природного и космического происхождения. Однако стремительный научно-технический прогресс позволил людям самим создавать и использовать источники ионизирующих излучений в различных целях: для получения энергии, в медицинских, исследовательских, военных целях и др. В связи с этим, уже в начале XX в. имели место случаи неконтролируемого облучения человека. К концу 50-х годов было известно около 500 таких случаев, а к концу XX века счет пострадавших от ионизирующих излучений уже шел на миллионы. Очевидно, что для оценки медицинских последствий облучения необходимо иметь подробную дозиметрическую информацию о величине и мощности дозы, о длительности облучения, о расстоянии от источников облучения до пострадавших и др. Как показывает практика, в большинстве случаев неконтролируемого аварийного облучения такая информация отсутствует. Поэтому единственными источниками получения необходимых данных становятся методы биологической дозиметрии.

Одним из наиболее разработанных и широко используемых методов биодозиметрии является метод, основанный на анализе частоты нестабильных хромосомных аберраций. Известный с 1960-х годов, этот метод уже достаточно хорошо исследован. Как показал опыт ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС, практически единственным и достаточно надежным методом оценки аварийных доз облучения у пострадавших оказался метод биологической дозиметрии на основе анализа хромосомных аберраций (дицентриков и центрических колец) в лимфоцитах периферической крови или пунктатах клеток костного мозга. В настоящее время данный метод дозиметрии широко и успешно используется во всем мире и является международно признанным методом биологической дозиметрии в случаях острого (аварийного), чаще всего неконтролируемого облучения. Однако, данный метод биодозиметрии успешно применяется в сроки, не превышающие 3-4 месяца после облучения. Для более длительных сроков он не подходит из-за резкого снижения его точности вследствие постепенной элиминации аберрантных клеток из периферического кровяного русла. Так, перед исследователями встала проблема поиска новых методов, позволяющих проводить реконструкцию полученных доз спустя длительное время после облучения.

В последнее время в стране сложилась крайне острая проблема, связанная с необходимостью оценки доз облучения у значительной части населения. Это, прежде всего, касается ликвидаторов аварии на Чернобыльской АЭС, наибольшей когорте людей, подвергшихся облучению в сравнительно высоких дозах. После снятия грифа «секретности» к ним присоединилась многочисленная когорта «переоблучившихся» лиц, часть из которых перенесла острую или хроническую лучевую болезнь. Это работники ядерно-химических предприятий (ПО «Маяк» - Челябинск, радиохимический комбинат - Томск и др.), участники испытания ядерного оружия на Семипалатинском полигоне и Новой Земле, уволенные с военной службы участники ликвидации аварий на корабельных ядерных установках и других ядерных объектах и т.д.

Кроме нестабильных аберраций при радиационном воздействии в геноме клеток индуцируются и долгоживущие повреждения, которые могут служить маркерами облучения в отдаленный пострадиационный период. До недавнего времени количественно оценить их практически не представлялось возможным. Появление метода многоцветной флуоресцентной окраски хромосом (FISH-метод) позволяет идентифицировать данный тип аберраций.

Многочисленные цитогенетические исследования подтвердили, что транслокации действительно являются долгоживущими биомаркерами радиационного воздействия при облучении человека. Авария на Чернобыльской АЭС, а также внештатные ситуации на промышленных и исследовательских ядерных установках и другие случайные переоблучения людей показывают, что существует острая проблема ретроспективной оценки полученных доз, принявшая в последние годы социальный характер. Появившаяся возможность определения радиационно-индуцированных транслокаций в лимфоцитах периферической крови человека через много лет после облучения позволяет в определенной степени справиться с этой задачей, используя цитогенетический метод для ретроспективной оценки доз.

Связь работы с научными программами и темами НИР.

Данное исследование выполнено в рамках следующих НИР ГУ-МРНЦ РАМН: НИР «Изучение частоты генных и структурных мутаций в соматических клетках больных с различными формами гемобластозов и больных ОЛБ в отдаленный период», № Гос. per. 01.9.60 000 665, (1996-1999 гг.); НИР «Изучение структурных соматических мутаций у населения, проживающего на радиоактивно-загрязненных территориях Калужской области и подвергшихся внутриутробному облучению во время аварии на Чернобыльской АЭС» (20032005 гг.) . № Гос. per. 01.20.03 03632; «Анализ результатов долговременного медицинского и цитогенетического обследования группы лиц с диагнозом ОЛБ различной степени тяжести в отдаленный период после острого облучения с целью выявления закономерностей выхода стабильных и нестабильных аберраций хромосом» № Гос. per. 0120.0 602189 (2006-2010 ), а также в рамках международного проекта INTAS 97-1152 «А long-term follow up study of cohort of highly irradiated victims of the Chernobyl accident to improve dose assessment for past exposures by analyzing changes in the yields of stable and unstable chromosomal aberrations», 1999-2001. Аннотация диссертации рассмотрена и утверждена Ученым Советом ГУ-МРНЦ РАМН (протокол № 5 от 19.05.2000 г).

Цель исследования

Целью данной работы является сравнительная оценка использования стабильных и нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах крови лиц, подвергшихся аварийному облучению, для определения поглощенных доз в отдаленный период после облучения.

Задачи исследования

Для достижения поставленной цели были поставлены следующие конкретные задачи:

1. Выполнить экспериментальное исследование с облучением in vitro донорской крови у-источником б0Со для построения калибровочной дозовой зависимости выхода стабильных и нестабильных радиационно-индуцированных хромосомных аберраций.

2. Сформировать группу лиц с острым аварийным облучением и известными индивидуальными дозами, осуществить забор крови для культивирования лимфоцитов и последующего цитогенетического анализа в течение отдаленного периода (от 5 до 30 лет после облучения).

3. Провести статистический анализ динамики частоты нестабильных аберраций в течение отдаленного периода.

4. Рассчитать индивидуальные дозы облучения для лиц из сформированной группы на основе анализа частоты нестабильных хромосомных аберраций, наблюдаемых в лимфоцитах крови вскоре после облучения, а также в отдаленный период после облучения.

5. Сопоставить расчеты величин доз, полученных по ранним и поздним цитогенетическим данным с целью уточнения границ применимости метода ретроспективной биологической дозиметрии, основанного на анализе частоты стабильных аберраций (транслокаций), определяемых методом FISH.

6. Провести оценку возможности ретроспективной биологической дозиметрии на основе анализа выявляемых аберраций (нестабильных и стабильных), с учетом полученных данных, в наблюдаемой группе аварийно облученных лиц.

Научная новизна

Впервые были получены данные о динамике частот нестабильных и стабильных аберраций хромосом у людей, подвергшихся аварийному облучению в больших дозах и проходящих ежегодное клинико-цитогенетическое обследование за период наблюдения более 30 лет.

Установлено, что, несмотря на длительный период времени после радиационного воздействия, в лимфоцитах крови присутствуют нестабильные аберрации хромосом в форме дицентриков и центрических колец, частота которых существенно превышает спонтанный уровень, что позволяет использовать эти показатели для ретроспективной биоиндикации радиационного воздействия в период до 30 лет после облучения.

Показано, что в лимфоцитах периферической крови облученных лиц в отдаленный пострадиационный период наблюдается высокая частота стабильных аберраций (транслокаций), уровень которых значительно превышает уровень наблюдаемых нестабильных аберраций. Повышенная частота стабильных аберраций (транслокаций) в обследованной группе однозначно коррелирует со степенью тяжести перенесенного радиационного поражения и исходными дозами, что позволяет использовать данный тип аберраций для ретроспективной биологической дозиметрии. Полученные данные по частоте транслокаций позволили провести корректировку в зависимости от времени после облучения и уточнение дозовой зависимости выхода транслокаций при облучении in vivo.

Впервые на представительной группе лиц показано, что стабильные аберрации (транслокации), наблюдаемые в отдаленный период после облучения, являются достоверными радиационными маркерами, а их сравнительно высокий уровень позволяет использовать их для ретроспективной биологической дозиметрии острого облучения в диапазоне доз от 1 до 10 Гр.

Принимая во внимание определяющую роль транслокаций в онкогенезе, в частности, в развитии гемобластозов, наблюдаемый у обследованных лиц повышенный их уровень позволяет с определенной вероятностью оценивать риски развития онкологических заболеваний в отдаленный пострадиационный период. В целом, полученные новые данные послужат уточнению разрабатываемого метода ретроспективной биологической дозиметрии, а также выявлению лиц с повышенным уровнем стабильных аберраций и на их основе выделению групп повышенного канцерогенного риска, в частности, гемобластозов.

Практическая значимость

В результате проведенных исследований уточнена область применимости использования различных типов аберраций хромосом (стабильных и нестабильных) для биологической дозиметрии; оценена возможность надежной ретроспективной оценки доз по таким цитогенетическим показателям, как дицентрики и транслокации в отдаленные сроки после облучения. На примере обследованной группы лиц апробированы методы биодозиметрии, позволяющие определить полученные индивидуальные дозы облучения.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Частота нестабильных аберраций хромосом (дицентриков и центрических колец) в лимфоцитах периферической крови лиц, облучившихся в диапазоне доз 0,5-10 Гр с высокой мощностью дозы, сохраняется в течение длительного времени (до 30 лет в нашем случае) на уровне, значительно превышающем спонтанный, что позволяет использовать их для ретроспективной биоиндикации радиационного воздействия.

2. При этом частота стабильных аберраций (транслокаций) превышает не только спонтанный уровень, но и наблюдаемый уровень нестабильных аберраций, и по истечении 5-8 лет после облучения не зависит от времени, но зависит от начальной дозы, что позволяет использовать ее для индивидуальной ретроспективной биологической дозиметрии.

3. Дозовая зависимость стабильных аберраций (транслокаций), полученная в опытах in vitro, существенно отличается от наблюдаемой аналогичной зависимости в группе облученных лиц (in vivo), что исключает использование данных при облучении in vitro в качестве калибровочной кривой.

Апробация результатов диссертации

Предварительная защита диссертации состоялась на научной конференции экспериментального радиологического сектора ГУ МРНЦ РАМН. Основные результаты диссертационной работы были представлены и докладывались на научно-практической конференции «Наследие Чернобыля», (Калуга 2001), Международной конференции «Проблемы радиационной генетики на рубеже веков» (Москва, 2005), Международной конференции «Чернобыльские чтения 2008» (Гомель, 2008), Международной конференции «Медико-биологические проблемы токсикологии и радиологии», (Санкт-Петербург, 2008 г.).

Опубликование результатов

Основные положения диссертации отражены в 8 публикациях: 3 статьях, 5 тезисах докладов.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Шепель, Наталья Николаевна

ВЫВОДЫ

1. У лиц, подвергшихся острому аварийному облучению в диапазоне доз 0,510 Гр. и перенесших острую лучевую болезнь различной степени тяжести (1-1V степень) частота радиационных хромосомных маркеров (дицентриков и центрических колец) в лимфоцитах периферическом крови сохраняется в пострадиационный период на повышенном уровне в течение длительного времени, что может быть использовано для ретроспективной биоиндикации радиационного воздействия.

2. Динамика снижения частоты нестбильных аберраций (дицешриков) с течением времени после острого облучения имеет двухфазный характер и зависит от величины дозы. Чем больше доза, тем более резким являеюя начальный спад частоты дицентриков, при этом быстрая фаза спада характеризуеiся параметром 1-4 года, медленная - 20-40 лет.

3. Частота стабильных аберрации (транслокаций) у обследованных лиц существенно превышает спонтанный уровень в пострадиационный период и по истечении 5-8 лет после облучения практически не зависит от времени, но зависит от начальной дозы, что позволяет использовать ее для индивидуальной ретроспективной биологической дозиметрии.

4. Частоты нестабильных аберрации (дицентриков) в ранний период и стабильных аберраций (транслокаций) в лимфоцитах периферической крови в отдаленный пострадиационный период количественно соответствует степени тяжести острой лучевой болезни, что позволяет использовать частоту транслокаций для ретро-спекшвного уточнения степени тяжести острой лучевой болезни.

5. Дозовая зависимость стабильных аберраций (транслокаций), полученная в опытах in vitro, существенно отличается от наблюдаемой аналогичной зависимости в группе облученных лиц (in vivo), что исключает использование зависимостей in vitro в качестве калибровочных для целей биодозиметрии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шепель, Наталья Николаевна, 0 год

1. Бейли Н. Статистические методы в биологии. М: Мир, 1964. — 260 с.

2. Баранов А. Е. Оценка дозы и прогнозирование динамики количества нейтрофилов периферической крови по гематологическим показателям у-облучения человека // Мед. Радиология.-1981. Т. 19, № 10. С.46-50.

3. Биологическая индикация радиационного воздействия на организм человека с использованием цитогенетических методов // Снигирева. М.: 2007. 28 с.

4. Бочков Н.П. Хромосомы человека и облучение. // М.: Атомиздат. — 1971. 168 с.

5. Бочков Н.П., Журков B.C., Яковенко К.Н., Кулешов Н.П. Культура лимфоцитов как тест-объект для изучения генетических последствий у лиц, контактирующих с мутагенами // Докл. АН СССР. 1974. Т. 218. №2. - С. 463-465.

6. Бочков Н.П., Чеботарев А.Н., Катосова Л.Д., Платонова В.И. База данных для анализа количественных характеристик частоты хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 2001. Т.37. №4. С. 549-557.

7. Воробцова И.Е., Михельсон В.М., Воробьева М.В. и др. Результаты цитогенетического обследования ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, проведенного в разные годы // Радиац. Биология. Радиоэкология. 1994. Т.34. №6.-С. 798-803.

8. Воробцова И.Е., Такер Дж.Д., Тимофеева Н.М. и др. Влияние возраста и облучения на частоту транслокаций и дицентриков, определяемых методом

9. FISH, в лимфоцитах человека // Радиационная биология. Радиоэкология. -2000. Т.40. № 2. С. 142 - 148.

10. Дубинина Л.Г. Культура лейкоцитов человека как тесг-система при анализе мутагенности факторов среды //Генетические последствия загрязнения окружающей среды. М.: Наука, 1977. - С. 89-95.

11. Захаров А. Ф., Бенюш В. А., Кулешов Н. П., Барановская Л. И. Хромосомы человека (атлас) // АМН СССР. М.: Медицина, 1982. - 264 с.

12. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1980. 292 с.

13. Любимова Н. Е., Воробцова И. Е. Влияние возраста и низкодозового облучения на частоту хромосомных аберраций в лимфоцитах человека // Радиационная биология и радиоэкология. 2007. Т.47. №1. — С.80-85.

14. Моссэ И. Б. Современные проблемы биодозиметрии // Радиационная биология и радиоэкология. 2002. Т.42. №6. - С.661-664.

15. Нугис В. Ю. Цитогенетические критерии оценки дозы равномерности острого внешнего гамма-облучения организма человека по результатам исследования культивируемых лимфоцитов. Диссер. д-ра биол. наук, Том 1, Москва, 2002 , 303 с.

16. Нугис В. Ю. Дудочкина Н. Е. Закономерности элиминации аберраций хромосом у людей после острого облучения по данным культивированиялимфоцитов периферической крови в отдаленные сроки // Радиационная биология. Радиоэкология. 2007. Т.46. №1. - С.5-15.

17. Нугис В. Ю. Дудочкина Н. Е. Цито генетические показатели в отдаленные сроки после острого облучения людей. Компьютерный метод ретроспективной оценки дозы. // Радиационная биолошя. Радиоэкология. -2007. Т.47. №1. С.74-79.

18. Пилинская M.J1., Дыбский С.С. Частота хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови детей, проживающих в районах с различной радиоэкологической обстановкой // Цитология и Генетика. 1992. Т. 26. №2.-С. 11-17.

19. Пяткин Е. К., Баранов А. Е. Биологическая индикация дозы с помощью анализа аберраций хромосом и количества клеток в периферической крови // Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР. Сер. Радиационная биология, 1980, Т.З. С.103-179.

20. Е. К. Пяткин, В. Ю. Нугис. Зависимость выхода аберраций хромосом от дозы при облучении лимфоцитов человека in vitro и in vivo // Медицинская радиология. -1986. № 9.-С. 30-35.

21. Рубанович А. В., Г. П. Снигирева, В. А. Шевченко и др. Теория и практика построения калибровочных кривых в биодозиметрии // Радиационная биология и радиоэкология. 2006. Т.46. №4. - С.447-456.

22. Севанькаев А. В., Жербин Е. А., Лучник Н. В., Обатуров Г. М., Козлов В. М., Тятте Э. Г., Капчигашев С. П. Цитогенетические эффекты, индуцируемые нейтронами в лимфоцитах периферической крови человека in vitro // Генетика.-1979. Т.15. №6.-С.1046-1060.

23. Севанькаев А.В., Козлов В.М., Гузеев Г.Г., Измайлова Н. Н. Частота спонтанных хромосомных аберраций в культуре лейкоцитов человека // Генетика. 1974. Т. 10. № 6. - С. 114-120.

24. Севанькаев А. В., Лучник Н. В. Влияние гамма-облучения на хромосомы человека. Сообщение VIII. Цитогенетический эффект низких доз при облучении in vitro // Генетика.-1977. Т.8. №3. С. 524-531.

25. Севанькаев А.В. Некоторые итоги цитогенетических исследований в связи с оценкой последствий Чернобыльской аварии // Радиационная биология. Радиоэкология. 2000. Т.40. №5. - С.589-595.

26. Севанькаев А.В. Радиочувствительность хромосом лимфоцитов человека в митотическом цикле. М: Энергоатомиздат: 1987. - 160 с.

27. Севанькаев А. В., Насонов А. П. Биологическая дозиметрия по хромосомным аберрациям в культуре лимфоцитов человека.// Методические рекомендации Обнинск: 1979. - 15 с.

28. Урбах Ю.В. Биометрические методы. Статистическая обработка опытных данных в биологии, сельском хозяйстве, медицине. М: Наука, 1963. -415 с.

29. Цыб А. Ф., Будагов Р. С., Замулаева И. А. и др. Радиация и патология // М.: Высшая школа, 2005. 341 с.

30. Чеботарев А.Н., Бочков Н.П., Катосова Л.Д., Платонова В.И. Временные колебания спонтанного уровня хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 2001. Т.37. №6. — С. 848-853.

31. Anderson R.M., Marsden S.J., Wright E.G. et al. Complex chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes as a potential biomarker of exposure to high-LET a-particles//Int. J. Radiat. Biol. 2002. Vol.76. №1. - P.31-42.

32. Andersson H.C. The spontaneous frequency of chromosomal aberrations and sister-chromatid exchanges in cultured peripheral lymphocytes of a single blood donor sampled more than 200 times // Mutat. Res. 1993. Vol.286. №2. - P. 281292.

33. Awa A. A., Nakano M., Ohtaki K., Kodama Y. et all. Factors that determine the in vivo dose-response relationship for stable chromosome aberrations in A-bomb survivors // J. Radiat. Res.-1992. V. 33: supplement, P. 206-214.

34. Awa A. A., Sofimi Т., Honda Т., Itoh M. Neriishi M., Otake M. Relationship between the radiation dose and chromosome aberrations in atomic bomb survivors of Hiroshima and Nagasaki //Radiation Research. 1978. Vol.19. - P. 126-140.

35. Bauchinger M., Schmidt E., Dresp J. Calculation of the dose rate dependents of the dicentric yield after 60Co y-irradiation of human lymphocytes // IJRB- 1979. V.35- P.229-233.

36. Bender M.A., Preston R.J., Leonard R.C. et al. Chromosomal aberration and sister-chromatid exchange frequencies in peripheral blood lymphocytes of a large human population sample // Mutat. Res. 1988. Vol. 204. - P. 421-433.

37. Bender M.A., Preston R.J., Leonard R.C. et al. Chromosomal aberration and sister-chromatid exchange frequencies in peripheral blood lymphocytes of a large human population sample, II. Extension of age range // Mutat. Res. 1989. Vol. 212. - P. 149-154.

38. Bender M. A., Awa A. A., Brooks A. L., Evans H. J. et al. Current status of cytogenetic procedures to detect and quantify previous exposures to radiation // Mutation Research. 1988. Vol.196. - P. 103-159.

39. Bogen К. T. Reassessment of human peripheral T-lymphocyte lifespan dedused from cytogenetic and cytotoxic effects of radiation. // Int. J. Radiat. Biol. -1993. V. 64. №2. P. 195-204.

40. Brady J.M., Aarestad N. О., Swartz H. M. In vivo dosimetry by electron spin resonance spectroscopy // Health Phisics 1968. V. 15. - P. 43 - 47.

41. Brandom W.F. Chromosome aberrations yields in somatic cells of plutonium workers//Health Phys. 1982. Vol. 43. №1. - P.l 11-115.

42. Buckton K.E., Hamilton G.E., Paton L. and Langlands A.O. Chromosome aberrations in irradiated ankylosing spondylitis patients // Eds. Evans H.J., Lloyd D.S. Mutagen-Induced Chromosome Damage in Man. Edinburgh: University Press. -1978.-P. 142-150.

43. Buckton K.E. Chromosome aberrations in patients treated with X irradiation for ankylosing spondylitis // Eds. Ishihara T. and Sasaki M.S. Radiation-induced chromosome damage in man. New York: Alan R Liss Inc. - 1983. - P. 491-511.

44. Carbonell E., Peris F. et al. Chromosomal aberration analysis in 85 control individuals // Mutat. Res. 1996. V. 370. - P. 29-37.

45. Cigarran S., Barrios L., Barquinero J.F. et al. Relationship between the DNA content of human chromosomes and their involvement in radiation-induced structural aberrations, analysed by painting // Int. J. Radiat. Biol. 1998. V. 74. №4. p. 449-455.

46. Cigarran S., Barquinero J.F. Barrios L.,et al. Cytogenetic analysis by fluorescence in sity hybridization (FISH) in hospital workers occupationally exposed to low levels of ionizing radiation // Radiation Research. 2000. V.155. — P. 417-423.

47. Dolphin G.W. The biological problem in the radiological protection of workers exposed to 239Pu//Health Phys., 1971. V.20. - P. 549-557.

48. Dolphin G.W., Lloyd D.C., Purrott R.J. Chromosome aberration analysis as a dosimetric technique in radiological protection // Health Phys., 1973. V.25. — P. 7-15.

49. Dosemetric and medical aspects of the radiological accident in Goiania in 1987. Biological dosimetry chromosomal aberration analisis for dose assessment // Int. Atomic Energy Agency. Viena. - 1998. - P. 57-69.

50. Edwards A. A. The use of chromosomal aberrations in human lymphocytes for biological dosimetry. // Rad Res.- 1997. V148, Soppl.5- P. 39-44.

51. Edwards A.A., Lindholm C., Darroudi F et al. Review of translocations detected by FISH for retrospective biological dosimetry applications // Radiat. Protect. Dosim. 2005. Vol. 113. No.4. - P. 396 - 402.

52. Fabry L., Lemaire M. Dose response relationships for radiation induced chromosome aberration in human lymphocytes in vivo and in vitro II Strahlenther. and Onkol. 1986. Vol.162. №1. - P. 63-67.

53. Finnon P., Moquet J.E., Edwards A.A., Lloyd D.C. The 60Co gamma ray dose-response for chromosomal aberrations in human lymphocytes analysed by FISH; applicability to biological dosimetry // Int. J. Radiat. Biol. 1999. Vol.75.-P.1215-1222.

54. Ganguly B.B. Cell division, chromosomal damage and micronucleus formation in peripheral lymphocytes of healthy donors: relation to donor's age // Mutat. Res. 1993. Vol.295. - P. 135-148.

55. Granath F., Grigoreva M., Natarajan A. T. DNA content proportionality and persisrcnce of radiation-induced chromosomal aberrations studied by FISH // Mutation Research 1996. Vol.336. - P. 145-152.

56. Hayata I. Biological dosimetry by chromosome analysis // «Радиация и риск». 1996, вып. 7. - стр. 72-75.

57. IAEA, Vienna, 1986, Technical Report Series No 260, Biological dosimetry: Chromosomal aberration analysis for dose assessment. 68 p.

58. Kadhim M.A., Lorimore S.A., Townsend K.M. et al. Radiation-induced genomic instability: delayed cytogenetic aberrations and apoptosis in primary human bone marrow cells // Int. J. Radiat. Biol. 1995. V.67. № 3. - P. 287-293.

59. Kasuba V., Sentija K., Garaj-Vrhovac V., Fucic A. Chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from control individuals // Mutat. Res. 1995. V. 346. №4.-P. 187-193.

60. Landi S., Frenzilli G., Milillo P.C., Cocchi L., Sbrana I., Scapoli C., Barale R. Spontaneous sister chromatid exchange and chromosome aberration frequency in humans: the familial effect // Mutat Res. 1999. V.444. ls.2. - P. 337-345.

61. Leonard A., Rueff J., Gerber G.B., Leonard E.D. Usefulness and limits of biological dosimetry based on cytogenetic methods // Radiat. Protect. Dosimetry. -2005. V. 115.N. 4. P. 448-454.

62. Lloyd D.C., Purrott R.J., Dolphin G. W. et al. The relationship between chromosome aberrations and low LET radiation dose to human lymphocytes // Int. J. Radiat. Biol. 1975. V.28. № 1. - P. 75-90.

63. Lloyd D.C., Edwards A. A., Prosser J.S. et al. A collaborative exercise on cytogenetic dosimetry for simulated whole and partial body accidental irradiation // Mutat Res. 1987. V. 179. - P. 197-208.

64. Lloyd D.C., Purrott R.J., Reeder E.J. The incidence of unstable chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from unirradiated and occupation ally exposed people // Mutat. Res. 1980. V. 72. - P. 523-532.

65. Lloyd D.C., Edwards A. A.,Leonard A. et al. Chromosomal aberrations in human lymphosytes induced in vitro by very low doses of X-rays // Int. J. Radiat. Biol. 1992. V.61. № 3. - P. 335-343.

66. Lucas J.N. Chromosome translocations: a biomarker for retrospective biodosimetry // Environmental Health Perspectives. 1997. V.105. Suppl 6.- P. 1433-1436.

67. Lucas J.N., Awa A.A., Straume T. et al. Rapid translocation frequency analysis in human decades after exposure to ionizing radiation // Int. J. Radiat. Biol.- 1992. V. 62. P. 53-63.

68. Lucas J.N., Poggensec M., Straume T. The persistence of chromosome translocations in a radiation worker accidentally exposed to tritium // Cytogenet. Cell Genet. 1992. N 60. - P. 255-256.

69. Lucas J.N., Hill F., Burk C., Fester T. and Straume T. Dose-response curve for chromosome translocations measured in human lymphocytes exposed to 60Co gamma rays // Heals Physics. -1995. V.68. P. 761-765.

70. Moorchead P.S., Nowell P.C., Mellman W.J. et al. Chromosome preparation of leukocytes cultured from human peripheral blood // Exptl. Cell. Res. 1960. V.20. №3. - P. 613-616.

71. Nakano M., Kodama Y., Ohtaki K. et al. Detection of stable chromosome aberrations by FISH in A-bomb survivors: comparison with previous solid Giemsa staining data on the same 230 individuals // Int. J. Radiat. Biol. 2001. V. 77. №9. -P. 971-977.

72. Nugis V. Yu., Filushkin I. V., Chistopolskij A. S. Retrospective dose estimation using the dicentric distribution in human peripheral lymphocytes // Appl.Radiation and Isotopes. 2000. V. 52. - P. 1139 - 1144.

73. Padovani L., Caporossi D., Tedeschi B. et al. Cytogenetic study in lymphocytes from children exposed to ionising radiation after Chernobyl accident // Mutat. Res. 1993. V. 319. - P. 55-60.

74. Popp S., Remm В., Hausmann M. et al. Towards a cumulative biological dosimeter based on chromosome painting and digital image analysis // Kerntechnik.- 1990. V. 55. №4. P. 53-63.

75. Ramalho А. Т., Nascimento С. N. The fate of chromosomal aberrations in 137Cs-exposed individuals in the Goiania radiation accident // Health Physics -1991. V. 60. No l.-P. 67-70.

76. Ramsey M.J., Moore D.H. 2nd, Briner J.F., Lee D.A., Olsen L., Senft J.R., Tucker J.D. The effects of age and lifestyle factors on the accumulation of cytogenetic damage as measured by chromosome painting // Mutat. Res. 1995. V. 338. № 1-6.-P. 95-106.

77. Rodriguez P., Montro A., Barquinero J. F. et al. Analysisi of translocations in stable cells and their implications in retrospective biological dosimetry. // J. Radiat. Res.-2004. V. 162.-P. 31-38.

78. Rossner P, Sram R.J., Bavorova H., Ocadlikova D., Cerna M., Svandova E. Spontaneous level of chromosomal aberrations in peripheral blood lymphocytes of control individuals of the Czech Republic population // Toxicol. Lett. 1998. V. 96-97.-P. 137-142.

79. Rossner P., Bavorova H., Ocadlikova D., Svandova E., Sram R.J. Chromosomal aberrations in peripheral lymphocytes of children as biomarkers of environmental exposure and life style // Toxicol. Lett. 2002. V.134. Issue 1-3. - P. 79-85.

80. Salomaa S., Sevan"lcaev A.V., Zhloba A.A. et al Unstable and stable chromosome aberrations in lymphocytes of people exposed to Chernobyl fallout in Bryansk. Russia // Int. J. Radiat. Biol. 1997. V. 71. - P. 51-59.

81. Scarpato R., Lori A., Panasiuk G., Barale R. FISH analysis of translocations in lymphocytes of children exposed to the Chernobyl fallout: preferential involvement of chromosome 10 // Cytogenet. Cell Genet. 1997. V. 79. № 1-2. - P. 153-156.

82. Schmid E., H. Braselemann, U. Nahrstedt. Comparison of y-ray indused dicentric yields in human lymphocytes measured by conventional analysis and FISH //Mutat. Res. 1995. V.348. P125-130.

83. Schmid E., Bauchinger M., Bunde E. et al. Comparison of the chromosome damage and its dose response after medical whole-body exposure to 60Co y-rays and irradiation of blood in vitro // Int. J. radiat. Biol. 1974.V. 26. N 1. - P. 31-37.

84. Schmid E., Schlegel D., Guldbakke S., Kapsch R.-P., Regulla D. RBE of nearly monoenergetic neutrons at energies of 36 keV-14,6 MeV for induction of diccntrics in human lymphosytes // Radiat. Environ. Biophys. 2003. V. 42. — P. 87-94.

85. Sevankaev A.V., Tsyb A.F., Lloyd D.C., Zhloba A.A., Moiseenko V.V., Skryabin A.M., Climov V.M. "Rogue" cells observed in children exposed to radiation from the Chernobyl accident // Int J. Radiat. Biol. 1993. V. 63. № 3. - P. 361-367.

86. Sevan'kaev A. V., Lloyd D. C., Edwards A. A., Moiseenko V. V. High exposure to radiation received by workers inside the Chernobyl sarcophagus // Rad. Protect. Dosimetry. 1995. V. 59. № 2. - P. 85-91.

87. Sevan'kaev A. V., Lloyd D. C., Edwards A. A. et al. A survey of chromosomal aberrations in lymphosytes of Chernobyl liquidators // Rad. Protect. Dosimetry. -1995. V. 58. № 2 P. 85-91.

88. Sevan'kaev A. V., Lloyd D. C., Edwards A. A., Nugis V. Yu., Mikhailova G. F. et al. Protracted overexposure to a 137Cs source: 1. Dose reconstruction // Rad. Protect. Dosimetry. -1999. V. 81. № 2 P. 85-90.

89. Sevan'kaev A., Lloyd D. C., Edwards A. A., Khvostunov I., Shepel N. et all. A cytogenetic follow-up of some highly irradiated victims of the Cernobyl accident.// Rad. Protect. Dosimetry. 2005. V. 113. № 2. - P. 152-161.

90. Sorokine-Durm I., Whitehouse C., Edvards A. The variability of translokation yields amongst control populations // Rad. Protect. Dosimetry. 2000. V. 88. № 1. -P. 92-99.

91. Stephan G., Pressl S., Koshpessova G., Gusev B.I. Analysis of FISH-painted chromosomes in individuals living near the Semipalatinsk nuclear test site //Radiation Research. 2001. V. 155. - P. 796-800.

92. Straume Т., Lucas J. A comparison of the yields of translocations and dicentrics measured using fluorescence in situ hybridization // Int. J. Radiat. Biol.1993. V. 64. P.185-187.

93. Tanaka K., Popp S., Fischer C. et al. Chromosome aberration analysis in atomic bomb survivors and Thorotrast patients using two- and three-colour chromosome painting of chromosomal subsets // Int. J. Radiat. Biol. 1996. - V.70. -P. 95-108.

94. Tawn E.J., Cartmel C.L., Pyta E.M.T. Cells with multiple chromosome aberrations in control individuals // Mutat. Res. 1985. - V. 144. - P. 247-250.

95. Thierens H., De Ruyclc K, Vral A., de Gelder V., Whitehouse C. A., Tawn E. J., Boesman I. Cytogenetic biodosimetry of an accidental exposure of a radiological worker using multiple assays// Rad. Protect. Dosimetry. 2005. V. 113(4). - P. 408414.

96. Tucker J.D., Lee D.A., Ramsey M.J. et al. On the frequency of chromosome exchanges in a control population measured by chromosome painting// Mutat. Res.1994. V. 313.-P. 193-202.

97. Tucker J.D., Morgan W.F., Awa A.A. et al. PAINT: a proposed nomenclature for structural aberrations detected by whole chromosome painting//Mutat. Res.1995. V. 347.-P. 21-24.

98. Tucker J.D., Ramsey M.J., Lee D.A. et al. Validation of chromosome painting as biodosimeter in human peripheral lymphocytes following acute exposure to ionizing radiation in vitro II Int. J. Radiat. Biol. 1993. V.64. - P. 27-37.

99. Venkatachalam P., Solomon F.D., Prabhu В. K. Estimation of dose in cancer patients treated with fractionated radiotherapy using translocation, dicentrics andmicronuclei frequency in peripheral blood lymphocytes. // Mutat. Res. 1999. - V. 429.-P. 1-12

100. P. Voisin, R. G. Assael, A. Heidary, R. Varzegar, F. Zakeri, V. Durand and 1. Sorokine-Durm. Mathematical methods in biological dosimetry: the 1996 Iranian accident // Int. J. Radiat. Biol. 2000. V. 76. - P. 1545-1554.

101. Whitehouse C. A., Edwards A. A., Tawn E. J. et al. Translocation yields in peripheral blood lymphocytes from control populations // Int. J. Radiat. Biol. -2005. V. 81. N2.-P. 139-145.