Изучение стабильных и нестабильных хромосомных аберраций у лиц, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС, в отдаленный пострадиационный период тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Богомазова, Александра Никитична

• Богомазова, Александра Никитична
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Богомазова, Александра Никитична

0 ВВЕДЕНИЕ.

1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1 Характеристика сценариев облучения у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС.

1.2 ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛИКВИДАТОРОВ РУТИННЫМ МЕТОДОМ В РАННИЙ И ОТДАЛЕННЫЙ ПЕРИОДЫ ПОСЛЕ РАБОТЫ НА ЧАЭС.

1.3 ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛИЦ, ЭВАКУИРОВАННЫХ ПОСЛЕ АВАРИИ НА ЧАЭС, И ЛИЦ, ПРОЖИВАЮЩИХ НА ЗАГРЯЗНЕННЫХ РАДИОНУКЛИДАМИ ТЕРРИТОРИЯХ.

1.4 ОБНАРУЖЕННЫЕ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ПРИ МАЛЫХ ДОЗАХ ОБЛУЧЕНИЯ ВСЛЕДСТВИЕ АВАРИИ НА ЧАЭС.

1.5 мультиаберрантные клетки у населения, пострадавшего от аварии на ЧАЭС.

1.6 ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОСТРАДАВШИХ В РЕЗУЛЬТАТЕ АВАРИИ НА ЧАЭС С ПОМОЩЬЮ FISH МЕТОДА.

1.7 использование метода FISH в целях биологической дозиметрии.

1.7.1 Исследование дозовой зависимости частоты стабильных аберраций в лимфоцитах периферической крови человека, облученных in vitro.

1.7.2 Динамика частоты транслокаций, индуцированных облучением in vivo.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ГРУПП ЛЮДЕЙ.

2.2 получение препаратов метафазных хромосом лимфоцитов и FPG окраска.

2.3 ПОЛУЧЕНИЕ БИОТИНИЛИРОВАННЫХ ДНК ЗОНДОВ, СПЕЦИФИЧНЫХ К ХРОМОСОМАМ ЧЕЛОВЕКА, И ПАНЦЕНТРОМЕРНЫХ ПРОБ, МЕЧЕННЫХ ДИГОКСИГЕНИНОМ.

2.4 Окраска препаратов метафазных хромосом методом флуоресцентной гибридизации in situ

2.5 Статистическая обработка результатов.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1 Результаты рутинного цитогенетического анализа в экспонированных группах.

3.1.1 Ликвидаторы последствий аварии на ЧАЭС.

3.1.2 Лица, эвакуированные из зон радиоактивного загрязнения.

3.2 Результаты цитогенетического анализа с применением FISH метода в экспонированных группах.

3.2.1 Факторы, влияющие на частоту транслокаций.

3.2.2 Оценка групповых и индивидуальных доз по частоте транслокаций, обнаруженных FISH методом.

3.2.3 Участие хромосом 1, 4 и 12 в транслокациях.

3.2.4 Разрешающая способность FISH метода по отношению к различным хромосомным аберрациям.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение стабильных и нестабильных хромосомных аберраций у лиц, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС, в отдаленный пострадиационный период»

Актуальность проблемы. Использование ядерной энергии в различных отраслях экономики привело к появлению обширной когорты людей, облученных в небольших дозах, не вызывающих появления специфических радиационных клинических синдромов. Основные проблемы, стоящие перед этими людьми, обществом и, прежде всего, медиками, заключаются в оценке эффектов, которые вызваны и/или которые появятся в отдаленное время в результате этого дополнительного облучения, а также в определении связи между облучением и регистрируемыми соматическими расстройствами, не являющимися специфичными для радиационного воздействия. Поскольку физические оценки дозы облучения часто отсутствуют или страдают значительной неопределенностью, частью решения данных проблем является поиск различных биологических маркеров облучения, используемых для выявления биологических последствий облучения, а также в качестве биологических «дозиметров». Из всего спектра дозозависимых биологических показателей одну из ведущих ролей отводят мутациям в соматических клетках, частота которых может служить не только количественной мерой радиационного воздействия, но и основанием для формирования групп канцерогенного риска.

В изучении последствий радиационного воздействия на организм человека цитогенетический анализ лимфоцитов периферической крови человека занимает одно из первых мест среди используемых в настоящее время тест-систем. Это обусловлено уникальным сочетанием свойств лимфоцитов периферической крови человека: доступность материала, возможность использования микрометода, сравнительно простая техника культивирования, синхронизированность клеточного цикла популяции лимфоцитов, сравнительно высокая радиочувствительность генетического аппарата лимфоцитов (Дубинина, 1977). Кроме того, удобство использования цитогенетического метода в радиобиологии обусловлено существованием специфичных для радиационного воздействия хромосомных перестроек, а именно, дицентрических и кольцевых хромосом. Дицентрические и кольцевые хромосомы, выявляемые при так называемой рутинной окраске, являются одним из наиболее специфических маркеров облучения, дозовая зависимость частоты которого для большинства видов ионизирующих излучений хорошо изучена. Для этих обменных хромосомных аберраций характерен низкий спонтанный уровень, что позволяет фиксировать достоверные изменения частоты дицентриков и колец в лимфоцитах периферической крови при относительно невысоких дозовых нагрузках (10 сГр в случае гамма излучения или 5 сГр в случае облучения нейтронами деления) (Bauchinger, 1995). Эти свойства позволили Международному Агентству по использованию атомной энергии в 1986 году рекомендовать использовать дицентрики и кольца в качестве биологического индикатора для оценки тяжести радиационного поражения в случае аварийного переоблучения (IAEA, 1986). При использовании дицентриков и колец в качестве маркеров радиационного воздействия в некоторых ситуациях возможна не только детекция факта облучения, но и оценка равномерности облучения, а также биологическая оценка поглощенной дозы, т.е. биологическая дозиметрия. Недостатком дицентриков и колец, как биологического маркера облучения, является то, что клетки, несущие такие аберрации, образуют при делении генетически несбалансированные клетки, что в дальнейшем приводит к их элиминации. Нестабильность клеток с дицентриками и кольцами приводит к тому, что использование этих аберраций в качестве биодозиметра в случае хронического облучения, особенно при малых дозах, является практически невозможным. При ретроспективной оценке эффекта радиационного воздействия на основе частоты дицентриков и колец необходимо применение различных математических моделей, учитывающих либо процесс элиминации подобных клеток из кровотока, либо особенности распределения радиоиндуцированных аберраций по клеткам. С увеличением периода между радиационным воздействием и проводимым цитогенетическим анализом неопределенность оценок дозы, полученных на основании данных по частоте нестабильных обменных аберраций, значительно увеличивается.

В конце 80-х годов была разработана модификация цитогенетического метода на основе флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) с использованием ДНК зондов, специфичных к отдельным хромосомам человека. Цитогенетический анализ с использованием FISH метода позволяет обнаруживать транслокации, обменные хромосомные перестройки, не приводящие к дисбалансу генома клеток. Клетки, несущие такого рода повреждения, теоретически не должны элиминироваться в процессе митотических делений, и, следовательно, частота транслокаций может служить хорошим индикатором облучения в случае хронического облучения, а также при ретроспективных исследованиях последствий облучения. Поскольку возникновение радиационно-индуцированного рака связывают, в первую очередь, именно с этим типом хромосомных перестроек, их частота может служить важнейшим показателем при выделении групп канцерогенного риска. Следует отметить также, что закономерности образования хромосомных аберраций тесно связаны с молекулярной организацией хромосом и с нормальной последовательностью событий клеточного цикла, и вследствие этого частота структурных мутаций может служить не только индикатором радиационного воздействия, но и мерой общей дестабилизации генома (Гераськин и Севанькаев, 1999).

Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение в отдаленный пострадиационный период стабильных и нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах людей, пострадавших вследствие аварии на ЧАЭС двумя цитогенетическими методами: рутинным и FISH.

Данная цель предопределила постановку следующих задач:

1. Оценить частоту и спектр хромосомных аберраций, выявляемых рутинным методом у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС и у лиц, эвакуированных с загрязненных радионуклидами территорий.

2. Сопоставить частоты нестабильных обменных аберраций, обнаруживаемых у ликвидаторов спустя 4 - 10 лет после облучения, с данными индивидуальной физической дозиметрии.

3. Проследить временную динамику частоты дицентриков и колец у ликвидаторов и лиц, эвакуированных с загрязненных радионуклидами территорий.

4. Провести анализ стабильных хромосомных аберраций методом FISH у тех же экспонированных групп.

5. Оценить влияние на частоту транслокаций таких факторов как возраст и курение с целью более корректного использования частоты транслокаций при ретроспективной биологической дозиметрии.

Научная новизна и практическая значимость работы. В рамках одного исследования у одних и тех же групп людей, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС, изучены нестабильные хромосомные аберрации, определяемые рутинным методом, и стабильные хромосомные аберрации, выявляемые методом FISH, и показана их повышенная частота в отдаленный пострадиационный период. Охарактеризована временная динамика частот различных хромосомных аберраций, выявляемых рутинным методом. Установленное в работе влияние на частоту стабильных хромосомных аберраций таких факторов как возраст и курение делает необходимым учет этих факторов при ретроспективной дозиметрии, основанной на частоте транслокаций. Осуществлен расчет групповой дозы по частоте транслокаций на примере лиц, эвакуированных из Припяти, составившей 4.2 сГр. При FISH анализе хромосомных аберраций выявлены различия чувствительности хромосом 1, 4 и 12 к облучению и факторам, связанных с возрастом. Опыт, полученный при работе над данным исследованием, позволил автору участвовать в написании методических указаний «Организация цитогенетического обследования для оценки уровня облучения пострадавших в результате радиационных аварий»

Положения, выносимые на защиту.

1. У лиц, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС, наблюдается долговременное повышение частоты нестабильных хромосомных аберраций как тех, которые являются специфичными маркерами радиационного воздействия, так и неспецифичных для радиации хромосомных нарушений.

2. Частота транслокаций, определяемая методом FISH спустя 6-10 лет после аварии у группы детей, эвакуированных из Припяти, достоверно повышена по сравнению с контролем, что свидетельствует о длительном сохранении этих хромосомных аберраций.

3. Как показал многофакторный регрессионный анализ, на частоту транслокаций в лимфоцитах периферической крови оказывают достоверное влияние такие факторы, как облучение в результате аварии на ЧАЭС, возраст и курение.

4. Уровень стабильных хромосомных аберраций может быть использован для индикации лучевого воздействия и групповой дозиметрии при учете факторов возраста и курения.

Апробация работы. Предварительная защита диссертации состоялась на заседании проблемной комиссии отдела клинической радиобиологии ЦНИРРИ МЗ РФ. Основные положения диссертации доложены на II международной конференции «Радиобиологические последствия ядерных катастроф» (Москва, 1994), на Международном совещании по определению доз облучения критических групп населения СНГ после Чернобыльской аварии (Германия Мюнхен/Нойерберг, 1994), на 27 съезде

10

Европейского общества радиобиологов (Франция, Монпелье, 1996), на Третьем съезде по радиационным исследованиям (Москва, 1997).

Публикации. Основные положения диссертации отражены в 11 публикациях: 6 статьях, 4 тезисах докладов и 1 методическом указании.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения и литературного обзора, методической части, результатов исследования и обсуждения, выводов, приложения и списка цитированной литературы. Диссертация изложена на 128 страницах машинописного текста, в число которых входит 26 таблиц и 1 рисунок. Список цитированной литературы включает 156 источников.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Богомазова, Александра Никитична

5 Выводы.

1. У всех обследованных групп населения, пострадавшего от аварии на ЧАЭС (ликвидаторы, взрослые и дети, эвакуированные из зон, загрязненных радионуклидами) общая частота нестабильных хромосомных аберраций, оцененная через 4-10 лет после аварии, превышает контрольный уровень.

2. Повышенный уровень частоты хромосомных аберраций в экспонированных группах обусловлен, в основном, аберрациями хроматидного типа.

3. Частота дицентриков и колец у населения, подвергнувшегося воздействию ионизирующего излучения в результате аварии на ЧАЭС, в отдаленный период не снизилась до контрольного уровня, а в некоторых группах (ликвидаторы с дозами выше 20 сГр, эвакуированные дети) частота дицентриков и колец достоверно превышает контрольные значения.

4. Как показал многофакторный регрессионный анализ на частоту транслокаций в лимфоцитах периферической крови у лиц, эвакуированных из Припяти, оказывают

106 достоверное влияние такие факторы, как облучение в результате аварии на ЧАЭС, возраст и курение.

5. Уровень стабильных хромосомных аберраций может быть использован для индикации лучевого воздействия и групповой дозиметрии при учете факторов возраста и курения.

6. Анализ частоты транслокаций с участием хромосом 1, 4 и 12 в контрольной и экспонированной группах указывает на повышенную чувствительность хромосомы 1 к действию факторов, связанных с возрастом, и хромосомы 4 - к действию радиации.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Богомазова, Александра Никитична, 2000 год

1. Бычковская И.Б. Проблема отдаленной радиационной клеточной гибели. М: Энергоатомиздат. 1986. - 160 с.

2. Воробцова И.Е. Влияние облучения родителей на физиологическую полноценность и риск канцерогенеза у потомства первого поколения организмов разных видов. Дисс. на соискание уч.степени доктора биологических наук. Ленинград. 1988.

3. Воробцова И.Е., Михельсон В.М., Воробьева М.В., е1 а1 Результаты цитогенетического обследования ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, проведенного в разные годы. // Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. - Т.34, Н. 6. - С. 798 - 803.

4. Воробцова И.Е., Воробьева М.В., Богомазова А.Н., Пюкконен А.Ю. Цитогенетическое обследование детей Санкт-Петербургского региона, пострадавших от аварии на ЧАЭС. // Радиационная биология и радиоэкология. 1995. - Т. 34. - Н. 5. - С. 630 - 635.

5. Воробьева М.В. Исследование радиочувствительности хромосом детей облученных родителей. 1995. Дисс. На соискание ученой степени кандидата биологических наук. Санкт-Петербург. 1995.

6. Ганина К.П., Полищук Л.З., Бухинская Л.Г., ^ а/ Цитогенетическое исследование жителей некоторых районов Украины, подвергавшихся радиационному воздействию. // Цитология и генетика. 1994. - В. 28, Н. 3. - С. 32 - 37

7. Гераськин С.А., Севанькаев А.В. Универсальный характер закономерностей индукции цитогенетических повреждений низкодозовым облучением и проблема оценкигенетического риска. // Радиационная биология. Радиоэкология. 1999. - Т.39, Н. 1. - С. 35 - 40.

8. Домрачева Е.В., Бриллиант М.Д., Воробьев А.И., Гулина Г.П. К проблеме радиационного лейкогенеза. // Гематология. Трансфузиология. 1990. - Т. 35.-С.3-9.

9. Домрачева Е.В., Кузнецов С.А., Шкловский-Корди Н.Е., Воробьев А.И. Клетки с многочисленными хромосомными аберрациями, обнаруженные у жителей чернобыльского региона. // Гематология и трансфузиология. 1991. - Т. 11. - С. 36 - 37.

10. Дубинина Л.Г. Культура лейкоцитов человека как тест-система при анализе мутугенности факторов среды. В кн. Генетические последствия загрязнения окружающей среды. М.: Наука. 1977. - С. 89 - 95

11. Ильичев С.ВА., Кочетков O.A., Крючков В.П., et al. Ретроспективная дозиметрия участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС. Под редакцией Крючкова В.П., Носовского A.B. К.: «Седа-стиль», 1996. - С. 256.

12. Мазник H.A., Винников В.А. Динамика цитогенетических эффектов в лимфоцитах периферической крови у участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС. // Цитология и генетика. 1997. - Т. 31. - Н. 6. - С.41 - 47.

13. Моисеенко В.В. Применение методов биофизического моделирования для ретроспективной оценки доз по хромосомным аберрациям в различные сроки после облучения. // Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. -Обнинск, 1993.

14. Неронова Е.Г. Цитогенетические показатели нестабильности генома у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС в отдаленном периоде. // Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Санкт-Петербург, 1997.

15. Семов А.Б., Иофа Э.Л., Шевченко В.А. Дозовая зависимость выхода хромосомных аберраций у ликвидаторов Чернобыльской аварии. // Радиационная Биология. Радиоэкология. 1994. - Т. 34. - Н. 6. - С. 865 - 871.

16. Снигирева Г.П., Любченко П.Н., Шевченко В.А., et al. Результаты цитогенетического обследования участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС через 5 лет. // Гематология и трансфузиология. 1994. - Т.39. - Н. 3. - С. 19-21.

17. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Бондарь А.Ю., Дыбский С.С. Цитогенетические эффекты в соматических клетках лиц, облученных в результате аварии на ЧАЭС. // Вестник Академии наук СССР. 1991. - Т. 8. - С.40 - 43.

18. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Дыбский С.С., et al. Цитогенетические эффекты в лимфоцитах периферической крови населения как показатель влияния факторов чернобыльской аварии. // Радиобиология. 1992. - Т. 32. - Н. 5. - С. 632 - 639.

19. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Дыбский С.С., et al. Цитогенетический мониторинг лиц, пострадавших от аварии на Чернобыльской АЭС. // Цитология и генетика. 1994. -Т. 28., Н. 3. - С. 18-24.

20. Погосян А.С., Оганесян Н.М., Даллакян A.M. Мультиаберрантные клетки в облученных популяциях человека. //Тезисы докладов третьего съезда по радиационным исследованиям, Москва, 14-17 октября 1997 г., Пущино. - 1997. -С. 80 - 81.

21. Пяткин Е.К., Нугис В.Ю., Чирков А.А. Оценка поглощенной дозы по результатам цитогенетических исследований культур лимфоцитов у пострадавших при аварии на Чернобыльской АЭС. // Медицинская радиология. 1989. - Т.34, Н. 6. - С. 52 - 57.

22. Ривкинд Н.Б., Царицина Л.П., Скворцова Г.В. Мультиаберрантные клетки у участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС. // Гематология и трансфузиология. 1996. -Т. 68, В. 7.-С. 77-79.

23. Ривкинд Н.Б. Хромосомные аберрации в ФГА-стимулируемых клетках крови ликвидаторов и жителей территорий, загрязненных после аварии на ЧАЭС. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. Москва. 1998.

24. Хандогина Е.К., Зверева С.В., Агейкин В.А., et al. Частота аберраций хромосом в лимфоцитах детей с заболеваниями щитовидной железы, проживающих в Брянской области. // Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. - Т. 35, Н. 5. - С. 626 - 630.

25. Шевченко В.А., Семов А.В., Акаева Е.А., et al. Цитогенетические эффекты у лиц, пострадавших в результате аварии на Чернобыльской АЭС. // Радиационная Биология. Радиоэкология. 1995. - Т. 35. - Н. 5. - С. 646 - 654.

26. Ярмоненко С.П. Проблемы радиобиологии в конце 20 века. // Радиационная Биология. Радиоэкология. 1997. - Т. 37. - Н. 4. - С. 488 - 493.

27. Awa А.А., Nakano М., Ohtaki К., et al. Factors that determine the in vivo dose-response relationship for stable chromosome aberrations in A-bomb survivors. // J. Radiat. Res. (Tokyo). -1992. V. 33 Suppl. - P. 206 - 214.

28. Bauchinger M., Schmid E., Braselmann H., et al. Time-effect relationship of chromosome aberrations in peripheral lymphocytes after radiation therapy for seminoma. // Mutation Research. 1989. - V. 211. - P. 265 - 272.

29. Bauchinger M. Cytogenetic researches after accidental radiation exposure. // Stem Cells. -1995.-V. 13, Suppl. l.-P. 182-190.

30. Bauchinger M, Salassidis K., Braselmann H., et al. FISH-based analysis of stable translocations in a Techa River population. // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V. 73, N. 6. - P. 605 -612.

31. Beer J.Z. Heritable lesions affecting proliferation of irradiated mammalian cells. // Adv. Radiat. Biol. 1979. - V. 8. - P. 363 - 417.

32. Bochkov N.P., Katosova L.D. Analysis of multiaberrant cells in lymphocytes of person living in different ecological regions. // Mutation Research. 1994. - V. 323. - P. 7 - 10.

33. Boei J.J., Balajee A.S., de Boer P., et al. Construction of mouse chromosome-specific DNA libraries and their use for the detection of X-ray-induced aberrations. // Int. J. Radiat. Biol. 1994. -V. 65,N. 5.-P. 583-590.

34. Boei J.J.W.A., Vermeulen S., Natarajan A.T. Different involvement of chromosomes 1 and 4 in the formation of chromosomal aberrations in human lymphocytes after X-irradiation. // Int. J. Radiat. Biol. 1997. - V. 72. - N. 2. - P. 139 - 145.

35. Boei J.J., Natarajan A.T. Combined use of chromosome painting and telomere detection to analyse radiation-induced chromosomal aberrations in mouse splenocytes. // Int. J. Radiat. Biol. -1998. V. 73, N. 2. - P. 125 - 133.

36. Braselmann H., Schmid E., Bauchinger M. Chromosome analysis in population living in an area of Germany with highest fallout deposition from Chernobyl accident. // Mutation Research. 1992. - Y. 283. - P. 221 - 225.

37. Braselmann H., Schmid E., Bauchinger M. Chromosome aberrations in nuclear power plant workers: the influence of dose accumulation and lymphocyte life-time. // Mutation Research.1994.-V. 306.-P. 197-202.

38. Buckton K.E., Brown W.M.C., Smith P.G. Lymphocyte survival in Men treated with X-rays for ancylosing spondylitis. // Nature. 1967. - V. 214, N. 87 - P. 470 - 473.

39. Buckton K.E., Hamilton G.E., Paton L., Langlands. Chromosome aberrations in irradiated ankylosing spondylitis patients. // in Mutagen-induced chromosome damage in Man, ed. , 1988.-P.142- 150.

40. Collins C., Kuo W.L., Segraves R., et al. Construction and characterisation of plasmid libraries enriched in sequences from single human chromosomes. // Genomics. 1991. - V. 11, N. 4. P. 997-1006.

41. Cremer T., Popp S., Emmerich P., et al. Rapid metaphase and interphase detection of radiation-induced chromosome aberrations in human lymphocytes by chromosomal suppression in situ hybridisation.// Cytometry. 1990. - V. 11, N. 1. P. 110-118.

42. Cristaldi M., Ieradi L.A., Mascanzoni D., Mattei T. Environmental impact of the Chernobyl accident: mutagenesis in bank voles from Sweden. // Int. J. Radiat. Biol. 1991. - V.59. - P. 31 -40.

43. Dominguez I., Boei J.J., Balajee A.S., Natarajan A.T. Analysis of radiation-induced chromosome aberrations in Chinese hamster cells by FISH using chromosome-specific DNA libraries. // Int. J. Radiat. Biol. 1996 - V. 70 - N. 2 - P. 199 - 208.

44. Duell T, Lengfelder E, Fink R et al. Effect of activated oxygen species in human lymphocytes. // Mutat. Res. 1995. - V. 336, N. 1. - P. 29 - 38.

45. Durante M., George K., Yang T.C. Biodosimetry of ionising radiation by selective painting of prematurely condensed chromosomes in human lymphocytes. // Radiat. Res. 1997. - V. 148, N. 5 Suppl. - P. S45 - S50.

46. Edwards A.A. The use of chromosomal aberrations in human lymphocytes for biological dosimetry. // Radiat. Res. 1997. -V. 148, Suppl. 5. - P. S39 - S44.

47. Emerit I., Levy A., Cernjavski L., et al. Transferable clastogenic activity in plasma from persons exposed as salvage personnel of the Chernobyl reactor. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. -1994.-V. 120.-N. 9.-P. 558 561.

48. Emerit I., Arutyunyan R., Oganesian N., et al. Radiation-induced clastogenic factors: anticlastogenic effect of Ginkgo biloba extract. // Free Radic. Bio. Med. 1995. - V. 18. - N. 6 -P. 985 -991.

49. Emerit I. Superoxide-mediated clastogenesis and anticlastogenic effects of exogenous superoxide dismutase. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V. 93, N.23. - P. 12799 -12804.

50. Fernandez J.L., Campos A., Goyanes V., et al. X-ray biological dosimetry performed by selective painting of human chromosomes 1 and 2. //Int. J. Radiat. Biol. 1995. - V. 67, N. 3. -P. 295 - 302.

51. Finnon P., Llozd D.C., Edwards A.A. Fluorescence in situ hybridisation detection of chromosomal aberrations in human lymphocytes and applicability to biological dosimetry. // Int. J. Radiat. Biol. 1995. - V. 68. - P.429 - 435.

52. Granath F Grigoreva M., Natarajan A.T. DNA content proportionality and persistence of radiation-induced chromosomal aberrations studied by FISH. // Mutat. Res. 1996a. - V. 366. -N. 2.-P. 145 - 152.

53. Granath F., Darroudi F., Auvinen A., et al. Retrospective dose estimates in Estonian Chernobyl clean-up workers by means of FISH. // Mutat. Res. 1996b. - V. 369. - N. (1-2). -P. 7-12.

54. Holmberg K., Fait S., Johansson A., Lambert B. Clonal chromosome aberrations and genomic instability in X-irradiated human T lymphocyte cultures. // Mutat. Res. 1993. - V. 286, N. 2. -P. 321 -330.

55. Holmberg K., Meijer A.E., Auer G., Lambert B.O. Delayed chromosomal instability in human T-lymphocyte clones exposed to ionising radiation. // Int. J. Radiat. Biol. 1995. - V. 68, N. 3. -P. 245-255.

56. Holmberg K., Meijer A.E., Harms-Ringdahl M., Lambert B. Chromosomal instability in human lymphocytes after low dose rate gamma-irradiation and delayed mitogen stimulation. // Int. J. Radial Biol. 1998. - V. 73, N. 1. - P. 21 - 34.

57. IAEA, Vienna, 1986, Technical Report Series NO 260, Biological dosimetry: Chromosomal aberration analysis for dose assessment. 68 p.

58. Johnson K. L., Tucker J. D., Nath J. Frequency, distribution and clonality of chromosome damage in human lymphocytes by multi-color FISH. //Mutagenesis. 1998. - V. 13. - P. 217 -227.

59. Kadhim M.A., Macdonald D.A., Goodhead D.T., et al. Transmission of chromosomal instability after plutonium alpha-particle irradiation. // Nature. 1992. - V. 355, N. 6362. - P. 738 - 740.

60. Kanda R., Jiang T., Hayata I., Kobayashi S. Effects of colcemid concentration on chromosome aberration analysis in human lymphocytes. // J. Radiat. Res. (Tokyo) 1994. - V. 35, N. IP. 41 -47.

61. Kanda R., Hayata I. Comparison of the yields of translocations and dicentrics measured using conventional Giemsa staining and chromosome painting. // Int. J. Radiat. Biol. 1996. - V. 69, N. 6.-P. 701 -705

62. Knehr S., Zitzelsberger H., Bauchinger M. FISH-based analysis of radiation induced chromosomal aberrations using different nomenclature systems // Int. J. Radiat. Biol. 1998. -V. 73.-N. 2.-P. 135-141.

63. Kodama Y., Nakano M., Ohtaki K., et al. Estimation of minimal size of translocated chromosome segments detectable by fluorescence in situ hybridisation. // Int. J. Radiat. Biol. -1997. -V. 71,N. 1. -P.35 -39.

64. Kulka U., Huber R., Muller P., et al. Combined FISH painting and harlequin staining for cell cycle-controlled chromosome analysis in human lymphocytes. // Int. J. Radiat. Biol. 1995. -V. 68, N. l.-P. 25-27.

65. Lazutka JR, Dedonyte V Increased frequency of sister chromatid exchanges in lymphocytes of Chernobyl clean-up workers. // Int. J. Radiat. Biol. 1995. - V.67. - N.6. - P.671 -676

66. Lazutka J.R. Chromosome aberrations and roque cells in lymphocytes of Chernobyl clean-up workers. // Mutation Research. 1996. - V. 350. - P. 315 - 329.

67. Likhtarev I.A., Chumack V.V., Repin V.S. Retrospective reconstruction of individual and collective external gamma doses of population evacuated after the Chernobyl accident. // Health Phys. 1994. - V. 66, N. 6. - P. 643 - 652

68. Ljasko L.,Souchkevitch g., Djakova A .et al. Lipoperoxide homeostasis of Chernobyl accident recovery workers. // Physical, Chemical and Biological Medicine. 1995. - V. 2. - P. 151 -156.

69. Lloyd D.C., Edwards A.A., Leonard A., et al. Chromosomal aberrations in human lymphocytes induced in vivo by very low doses of X-rays. // Int. J. Radiat. Biol. 1992. -V. 61, N. 3.-P. 335-343.

70. Lloyd D.C., Sevan'kaev A.V. Biological dosimetry for persons irradiated by the Chernobyl accident. Experimental collaboration project N6. Ed. Luxembourg: Office for Official Publications of the European Communities, 1996

71. Lindholm C., Salomaa S., Tekkel M., et al. Biodosimetry after accidental radiation exposure by conventional chromosome analysis and FISH. // Int. J. Radiat. Biol. 1996. - V. 70, N. 6. - P. 647 - 656.

72. Lindholm C., Luomahaara S., Koivistonen A., et al. Comparison of dose-response curves for chromosomal aberrations established by chromosome painting and conventional analysis. // Int. J. Radiat. Biol. 1998a. - V. 74. - N. 1. - P. 27 - 34.

73. Lindholm C., Tekkel M., Veidebaum T., Ilus T., Salomaa S. Persistence of translocations after accidental exposure to ionising radiation. // Int. J. Radiat. Biol. 1998b. - V. 74, N. 5. - P. 565 -571.

74. Littlefield L.G., Joiner E.E., Hubner K.F. // Medical management of radiation accidents/ Eds. Mettler F.A., Kelsey Chh.A., Risks R.C. Florida:CRC Press, 1988. P. 109 124.

75. Lorimore S.A., Kadhim M.A., Pocock D.A., et al. Chromosomal instability in the descendants of unirradiated surviving cells after alpha-particle irradiation.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - V.12,N. 10.-P. 5730-5733.

76. Lucas J.N., Tenjin T., Straume T., et al. Rapid human chromosome aberration analysis using fluorescence in situ hybridisation. // Int. J. Radiat. Biol. 1989. - V. 56, N. 1. - P. 35 - 44.

77. Lucas J.N., Awa A., Straume T., Poggensee M., Kodama Y., Nakano M., Ohtaki K., Weier

78. H.U., Pinkel D., Gray J., et al Rapid translocation frequency analysis in humans decades after exposure to ionising radiation. // Int. J. Radiat. Biol. 1992. - V. 62, N. 1. P. 53 - 63.

79. Lucas J.N., Hill F., Burk C., et al. Dose-response curve for chromosome translocations measured in human lymphocytes exposed to 60Co gamma rays. // Health Phys. 1995. - V. 68, N. 6.-P. 761 -765.

80. Lucas J.N., Hill F.S., Burk C.E., et al. Stability of the translocation frequency following whole-body irradiation measured in rhesus monkeys. // Int. J. Radiat. Biol. 1996. - V. 70, N. 3. -P. 309-318.

81. Lucas J.N. Cytogenetic signature for ionising radiation. // Int. J. Radiat. Biol. 1998 - V. 73, N.1. P. 150- 152.

82. Matsumoto K., Ramsey M.J., Nelson D.O., Tucker J.D. Persistence of radiation-induced translocations in human peripheral blood determined by chromosome painting. // Radiat. Res. -1998. V. 149, N. 6. - P. 602 - 613.

83. Matsuoka A., Tucker J.D., Hazashi M., et al. Chromosome painting analysis of X-ray induced aberrations in human lymphocytes in vitro. II Mutagenesis. 1994. - V. 9. - P. 151 -155.

84. Mendelsohn M.L., Mayall B.H., Bogart E., et al. DNA content and DNA-based centromeric index of 24 human chromosomes. // Science. 1973 - V. 179, N. 78. - P. 1126-1129.

85. Moore DH 2nd, Tucker JD, Jones IM, et al. A study of the effects of exposure on cleanup workers at the Chernobyl nuclear reactor accident using multiple end points. // Radiat Res. -1997. V.148., N.5. - 463 - 475.

86. Moorhead P.S., Nowell P.C., Mellman W.J., et al. Chromosome preperations of leukocytes cultured from human peripheral blood. // Exp. Cell Res. 1960. - V. 20. - P. 613 - 616.

87. Natarajan A.T., Vyas R.C., Wiegant J., Curado M.P. A cytogenetic follow-up study of the victims of a radiation accident in Goiania (Brazil). // Mutat Res. 1991. - V. 247, N. 1. - P. 103 - 111.

88. Natarajan A.T., Balajee A.S., Boei J.J.W.A., et al. Recent development in the assessment of chromosomal damage. // Int. J. Radiat. Biol. 1994. - V. 66. - P.615 - 623.

89. Natarajan A. T., Darroudi F. Biological dosimetric studies in the Goiania radiation accident. // Proceedings of the MAB-CESN International Meeting, Radiation Biology & Ecology, 1994. -Special issue. - P. 53 - 56.

90. Natarajan A.T., Balajee A.S., Boei J.J.W.A., et al. Mechanisms of induction of chromosomal aberrations and their detection by fluorescence in situ hybridisation. // Mutat. Res. 1996. - V. 372. - P. 247 - 258.

91. Nomura T. X-ray induced germ-line mutation leading to tumours : its manifestation in mice given urethane postnatally. // Mutation Research. 1983. - V. 121. - P. 59 - 65.

92. Pampfer S., Streffer C. Increased chromosome aberration levels in cells from mouse fetuses after zygote X-irradiation. // Int. J. Radiat. Biol. 1989. - V. 55, N. 1. - P. 85 - 92.

93. Padovani L., Caporossi D., Tedeschi B., et al. Cytogenetic study in lymphocytes from children exposed to ionising radiation after Chernobyl accident. // Mutation Research. 1993. - V. 319. - P. 55 - 60.

94. Pinkel D., Straume T., Gray J.W. Cytogenetic analysis using quantitative, high-sensitivity, fluorescence hybridisation. // Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1986. -V. 83, N. 9. - P. 2934 - 2938.

95. Pohl-Ruhling J.O., Haas A., Brogger G., et al. The effect on lymphocyte chromosomes of additional radiation burden due to fallout in Salzburg (Austria) from the Chernobyl accident. // Mutation Res. -1991. V. 262. - P. 209 - 217.

96. Ponnaiya B., Limoli C.L., Corcoran J., et al. The evolution of chromosomal instability in Chinese hamster cells: a changing picture? // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V. 74, N. 6. - P. 765 -770.

97. Ramsey M.J., Moore II D.H., Briner J.F., et al. The effects of age and lifestyle factors on the accumulation of cytogenetic damage as measured by chromosome painting. // Mutat. Res. -1995. V. 338. - N. (1-6). - P. 95 - 106.

98. Salomaa S., Sevan'kaev A.V., Zhloba A.A., et al. Unstable and stable chromosomal aberrations in lymphocytes of people exposed to Chernobyl fallout in Bryansk, Russia. // Int. J. Radiat. Biol. 1997. - V. 71. - N. 1. - P. 51 - 59.

99. Salomaa S., Holmberg K., Lindholm C., et al. Chromosomal instability in in vitro radiation exposed subjects. // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V. 74, N. 6. - P. 771 - 779.

100. Sasaki M.S., Miyata H. Biological dosimetry in atomic bomb survivors. // Nature. V. 220, N. 173.-P. 1189- 1193.

101. Savage J.R., Simpson P. On the scoring of FISH-"painted" chromosome-type exchange aberrations. // Mutat. Res. 1994. -V. 307, P. 1. - P. 345 - 353.

102. Sevan'kaev A.V., Tsyb A.F., Lloyd D.C., et al. Rogue' cells observed in children exposed to radiation from the Chernobyl accident. // Int. J. Radiat. Biol. 1993. - V.63, N. 3. - P. 361 - 367.

103. Sevan'kaev A.V., Lloyd D.C., Braselmann H., et al. A survey of chromosomal aberrations in lymphocytes of Chernobyl liquidators. // Radiation Protection Dosimetry. 1995a. - V. 58. -N. 2.-P. 85-91.

104. Simpson PJ, Savage JR Estimating the true frequency of X-ray-induced complex chromosome exchanges using fluorescence in situ hybridisation. // Int. J. Radiat. Biol. 1995. -V. 67, N. 1.-P. 37-45.

105. Simpson P.J., Savage J.R. Dose-response curves for simple and complex chromosome aberrations induced by X-rays and detected using fluorescence in situ hybridisation. // int. J. Radiat. Biol. 1996. - V. 69, N. 4. P. 429 - 436.

106. Slozina N, Neronova E, Kharchenko T, Nikiforov A. Increased level of chromosomal aberrations in lymphocytes of Chernobyl liquidators 6-10 years after the accident. // Mutat Res. -1997 V. 379. - N. 2 - P. 121-125.

107. Snigiryova G., Braselmann H., Salassidis K., et al. Retrospective biodosimetry of Chernobyl clean-up workers using chromosome painting and conventional analysis. // Int. J. Radiat. Biol. 1997.-V. 71.-N. 2.-P. 119-127.

108. Spruill M.D., Ramsey M.J., Swiger R.R., et al. The persistence of aberrations in mice induced by gamma radiation as measured by chromosome painting. // Mutat. Res. -1996. V. 356.-N. 2. - P.135-145.

109. Stephan G., Oestreicher U. Chromosome investigation of individuals living in areas of Southern Germany contaminated by fallout from the Chernobyl reactor accident. // Mutation. Res. 1993. - V.319. - P. 189 - 196.

110. Straume T., Lucas J.N. A comparison of the yields of translocations and dicentrics measured using fluorescence in situ hybridisation. // Int. J. Radiat. Biol. 1993.- V. 64, N. 2. - P. 185 - 187.

111. Suzuki K., Takahara R., Kodama S., Watanabe M. In situ detection of chromosome bridge formation and delayed reproductive death in normal human embryonic cells surviving X irradiation. // Radiat. Res. 1998. -V. 150, N. 4. - P. 375 - 381.

112. Tucker J.D., Morgan W.F., Awa A.A., et al. PAINT: a proposed nomenclature for structural aberrations detected by whole chromosome painting. // Mutat. Res. 1995a. - V. 347. - N. 1. -P. 21 - 24.

113. Tucker J.D., Morgan W.F., Awa A.A., et al. A proposed system for scoring structural aberrations detected by chromosome painting. // Cytogenet. Cell. Genet. 1995b. - V. 68. - N. (3-4).- P. 211 -221.

114. Tucker J.D. and Moore II D.H. The importance of age and smoking in evaluation adverse cytogenetic effects of exposure to environmental agents. // Environ. Health Perspectives. -1996. V. 104. - Suppl. 3. - N. 489 - 492.

115. Tucker J.D., Breneman J.W., Briner J.F., el al. Persistence of radiation-induced translocations in rat peripheral blood determined by chromosome painting. // Environ. Mol. Mutagen. 1997a. -V. 30,N.3.- P. 264-272.

116. Tucker J.D., Tawn E.J., Holdsworth D., et al. Biological dosimetry of radiation workers at the Sellafield nuclear facility. //Radiat. Res. 1997b. - V. 148, N. 3. - P. 216 - 226.

117. Verschaeve L., Domracheva E.V., Kuznetsov S.A., Nechai V.V. Chromosome aberrations in inhabitants of Byelorussia: consequence of the Chernobyl accident. // Mutation Research. -1993.-V. 287.-P. 253 -259.

118. Vorobtsova I.E., Kitaev E.M. Urethane-induced lung adenomas in the first-generation progeny of irradiated male mice. // Carcinogenesis. 1988. - V. 9., N. 11. - P. 1931 - 1934.

119. Vorobtsova I.E., Aliyakparova L.M., Anisimov V.N. Promotion of skin tumours by 12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate in two generations of descendants of male mice exposed to X-ray irradiation. // Mutat. Res. 1993. - V. 287, N. 2. - P.207 - 216.

120. Watson G.E., Lorimore S.A., Wright E.G. Long-term in vitro transmission of alpha-particle-induced chromosomal instability in murine haemopoietic cells, //int. J. Radiat. Biol. 1996. - V. 69,N. 2.-P. 75-82.

121. Watson G.E., Lorimore S.A., Clutton S.M., et al. Genetic factors influencing alpha-particle-induced chromosomal instability. // Int. J. Radiat. Biol. 1997. - V. 71, N. 5. - P. 497 - 503.

122. Wu H., Durante M., George K., Yang T.C. Induction of chromosome aberrations in human cells by charged particles. // Radiat. Res. 1997 V. 148, Suppl. 5. - P. SI02 - SI07.

123. Wu H., George K., Yang T.C. Estimate of true incomplete exchanges using fluorescence in situ hybridisation with telomere probes. // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V. 73, N. 5. - P. 521 -527.