Стабильные и нестабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах крови человека, индуцируемые излучениями с разными ЛПЭ тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Репин, Михаил Васильевич

• Репин, Михаил Васильевич
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Репин, Михаил Васильевич

Список условных сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

Глава 2. Биологические материалы и методы исследования.

2.1. Получение лимфоцитов крови человека.

2.2. Физические характеристики излучений и условия облучения.

2.2.1. Гамма-облучение.

2.2.2. Облучение ускоренными ионами азота 14N.

2.2.3. Облучение протонами с энергией 1 ГэВ.

2.3. Культивирование лимфоцитов после облучения. Приготовление препаратов клеток для цитогенетического анализа.

2.4. Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH-метод).

2.5. Анализ лимфоцитов метафазным и FISH-методами.

Глава 3. Результаты исследования.

3.1. Клетки с хромосомными аберрациями.

3.2. Общее число хромосомных аберраций.

3.3. Типы хромосомных аберраций.

3.3.1. Стабильные аберрации хромосом: транслокации и инсерции.

3.3.2. Анализ нестабильных хромосомных аберраций стандартным метафазным и FISH-методами.

3.3.3. ОБЭ протонов и ионов азота 14N.

3.3.4. Математические подходы для сопоставления частот хромосомных аберраций, выявляемых FISH- и стандартным метафазным методами.

3.4. Калибровочные кривые для оценки доз по тесту "стабильные аберрации хромосом".

Глава 4. Обсуждение результатов.

Выводы.

Список условных сокращений

ДНК — Дезоксирибонуклеиновая кислота

ЛПЭ — Линейная передача энергии

ОБЭ — Относительная биологическая эффективность

РНК — Рибонуклеиновая кислота

DAPI — 4',6-диамидино-2-фенилиндол

FISH — Fluorescence in situ hybridization

FITC — Fluoresceinisothiocyanate

MFISH— Multiple fluorescence in situ hybridization

PAINT — Protocol for Aberration Identification and Nomenclature

Terminology PBS — Фосфатно-солевой буфер PI — Пропидиум иодид SSC — Стандартный раствор цитрата натрия

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Стабильные и нестабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах крови человека, индуцируемые излучениями с разными ЛПЭ»

Актуальность проблемы. Проблема биологического действия ионизирующих излучений с разными физическими характеристиками является весьма актуальной в радиобиологии. Это обусловлено необходимостью решения многих задач: радиоэкологических проблем, вопросов нормирования лучевых нагрузок у лиц, работающих в смешанных полях ионизирующих излучений, проблем радиационной безопасности длительных космических полетов человека, использования различных источников ионизирующих излучений для лучевой терапии онкологических заболеваний и др.

Наименее изученным является мутагенное действие плотноионизирующих излучений. Прежде всего, это касается исследования закономерностей и механизмов индукции мутаций у клеток высших эукариот — клеток млекопитающих и человека. Практически не изучены закономерности образования стабильных хромосомных мутаций при действии излучений разного качества. Исследование закономерностей и механизмов такого типа повреждений генетических структур представляется весьма важным, поскольку стабильные аберрации способны длительно сохраняться в популяциях облученных клеток и с ними связывается инициация ряда онкологических заболеваний. Так, в настоящее время установлена корреляция между возникновением хронической миелоид-ной лейкемии, острой миелоидной лейкемии, промиелотической лейкемии, лимфомы Беркитта и наличием транслокаций между различными хромосомами: <9; 22), 1(21; 8), 1(17; 15), <8; 14), соответственно.

Реализация программ длительных космических полетов человека ставит задачу детального изучения биологического действия протонов релятивистских энергий, составляющих значительную часть спектра космических излучений. В этой связи крайне важно определить биологическую эффективность таких излучений на основе различных показателей и, прежде всего, на основе учета индукции стабильных хромосомных аберраций. Количественный учет стабильных хромосомных нарушений в клетках организма может рассматриваться и как один из надежных способов для разработки и применения методов биологической дозиметрии, особенно в отдаленные сроки после лучевого воздействия на человека при случайных неконтролируемых облучениях организма.

Широко известные классические цитогенетические методы, применяемые для целей биологической дозиметрии, основаны на учете таких аберраций, как дицентрики и кольца (Moorhead P.S. et al, 1960; Hungerford D.А., 1965). Измерив частоту таких аберраций в клетках облученного организма или ткани и сравнив с калибровочной кривой, полученной для соответствующих клеток и вида излучения, можно определить дозу, полученную организмом в результате облучения. Однако возможность оценки поглощенной дозы при этом ограничивается острым периодом после лучевого воздействия, поскольку анализируемые хромосомные аберрации являются нестабильными и со временем быстро элиминируют из популяции облученных клеток.

Большим достижением явилась разработка в последние годы техники флуоресцентной гибридизации in situ (fluorescence in situ hybridization) — FISH-метода (Pinkel D. et al., 1986, 1988; Viscidi R.P. et al, 1986; Cremer T. et al, 1988). Он дает возможность выявлять отдельные хромосомы человека посредством их "окрашивания" с использованием специфических проб с уникальными нуклеотидными последовательностями ДНК этих хромосом (Collins С. étal., 1991; Krumlauf R. et al., 1982; Van Dilla M.A. étal, 1986). FISH-метод позволяет выявлять стабильные аберрации исследуемых хромосом в облученных и необлученных клетках. С его помощью рядом авторов (Léonard A. et al., 1998; Lindholm С. étal., 1998; Lucas J.N. et al, 1992; SalassidisK. et al, 1995) было показано, что стабильные хромосомные аберрации в клетках человека сохраняются даже спустя несколько десятков лет после облучения. Это привлекло к ним внимание, так как появилась возможность ретроспективной оценки дозы лучевого воздействия на человека.

В настоящее время во многих научных лабораториях проводятся исследования стабильных и нестабильных аберраций хромосом в клетках человека с использованием FISH-метода при действии рентгеновских и у-лучей. В последние годы появляются единичные работы по исследованию стабильных хромосомных аберраций, возникающих в клетках человека при действии плотноио-низирующих излучений: a-частиц (Griffin С.S. et al., 1995) и ускоренных тяжелых частиц (Durante M. et al., 1997; FüsselK. et al., 1997; Testará I. et al., 1997; Yang T.C. et al., 1997; Wu H. et al., 1997).

В связи с изложенным, учитывая актуальность, научную и практическую важность исследований генетического действия ионизирующих излучений разного качества, а также отсутствие достаточно полных сведений в этой области, нами было проведено исследование закономерностей формирования стабильных и нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах человека при действии излучений с разными ЛПЭ.

Цель и основные задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось сравнительное изучение количественных и качественных закономерностей образования стабильных и нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах крови человека с использованием FISH-техники и стандартного мета-фазного метода анализа при действии излучений, различающихся по ЛПЭ в широком диапазоне: у-лучей, протонов с энергией 1 ГэВ (ЛПЭ —0,218 кэВ/мкм), ускоренных ионов азота 14N (ЛПЭ -77 кэВ/мкм).

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи: изучить дозовые зависимости частоты стабильных аберраций хромосом в лимфоцитах крови человека, детектируемых FISH-методом, при у-облучении и действии ускоренных протонов и ионов азота 14N, изучить дозовые зависимости частоты разных видов нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах человека, детектируемых стандартным мета-фазным и FISH-методами, при действии у-лучей, протонов и ионов азота 14N, провести сравнительный анализ выявленных закономерностей индукции стабильных и нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах человека при действии исследованных видов ионизирующих излучений, провести оценку ОБЭ протонов с энергией 1 ГэВ и ускоренных ионов азота 14И по цитогенетическим показателям, оценить возможность использования теста "стабильных аберраций хромосом" для целей биологической дозиметрии.

Научная новизна. В работе впервые: исследованы И8Н-методом закономерности образования стабильных и нестабильных аберраций хромосом-1 и -2 при облучении лимфоцитов крови человека разными дозами ускоренных протонов с энергией 1 ГэВ, исследованы И8Н-методом закономерности образования стабильных и нестабильных аберраций хромосом-1 и -2 при облучении лимфоцитов крови человека разными дозами ускоренных ионов азота 14Ы (Е=50 МэВ/нуклон), исследованы стандартным метафазным методом нестабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах крови человека при облучении разными дозами протонов с энергией 1 ГэВ, исследованы стандартным метафазным методом нестабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах крови человека при облучении разными дозами ускоренных ионов азота 14И (Е=50 МэВ/нуклон),

- предложена модифицированная методика пересчета уровней аберраций отдельных хромосом (транслокации, дицентрики, фрагменты), детектируемых ИБН-методом, на суммарные геномные частоты хромосомных аберраций, применимая для разных геномов и случаев использования нескольких флуоро-хромов одновременно. Она была применена для расчета суммарных геномных частот аберраций в лимфоцитах крови человека, облученных ускоренными ионами азота и протонами с энергией 1 ГэВ, на основе данных ИЗН-анализа аберраций хромосом-1 и -2.

Научно-практическая значимость работы. Исследования стабильных хромосомных аберраций после воздействия ионизирующими излучениями разного качества имеют фундаментальное значение для установления количественных и качественных закономерностей их формирования в клетках человека. 9

Результаты работы могут быть использованы для радиобиологического обоснования применения разных видов ионизирующих излучений в лучевой терапии новообразований, для научного обоснования предельно допустимых уровней облучения человека при воздействии излучений с разными значениями ЛПЭ, при разработке и применении методов непосредственной и ретроспективной биодозиметрии.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Репин, Михаил Васильевич

Выводы

1. Исследованы классическим метафазным и БКИ-методами закономерности образования нестабильных и стабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови человека при облучении ионизирующими излучениями с разными физическими характеристиками: у-лучами в дозах 1-7 Гр, ускоренными протонами с энергией 1 ГэВ (ЛПЭ -0,218 кэВ/мкм) в дозах 0,15-3,6 Гр и ионами азота с энергией 50 МэВ/нуклон (ЛПЭ ~77 кэВ/мкм) в диапазоне доз 0,5-3,0 Гр. Выявлены количественные и качественные особенности их действия по цитогенетическим показателям.

2. Установлена с использованием Р18Н-метода высокая частота стабильных аберраций хромосом-1 и -2 (транслокации и инсерции) при действии ионизирующих излучений разного качества. Основная часть стабильных аберраций представлена транслокациями хромосом. Данный тип нарушений составляет значительную часть от общего числа хромосомных аберраций: при у-облучении и действии протонов их вклад достигает -40-45%, при облучении ионами азота на их долю приходится ~25%.

3. В экспериментах с использованием Б^Н-метода выявлен линейно-квадратичный характер дозовых зависимостей для общего числа хромосомных аберраций, частоты дицентриков и транслокаций хромосом-1 и -2 и линейный характер дозовых зависимостей для числа клеток с аберрациями и частоты фрагментов при действии редкоионизирующих излучений. Аналогичный характер дозовых зависимостей получен при анализе хромосомных аберраций классическим метафазным методом.

4. Облучение ускоренными ионами азота характеризуется линейным характером дозовых зависимостей по разным цитогенетическим показателям при оценке классическим метафазным и ИЗН-методами. По тесту частоты образования аберрантных клеток и дицентриков хромосом при дозах >2 Гр отмечено отклонение от линейности величин радиационно-индуцированных эффектов.

5. Установлено отсутствие различий между хромосомой-1 и хромосомой-2 по частотам повреждений при действии излучений, различающихся по ЛПЭ в широком диапазоне (протоны и ионы азота).

6. Показано, что частота образования транслокаций, выявленных FISH-методом, превышает частоту возникновения дицентриков хромосом-1 и -2 в 4,3; 1,4 и 3,5 раз при действии у-лучей, протонов и ионов азота, соответственно.

7. Выявлена методом FISH высокая частота образования фрагментов хромосом» 1 и -2 (до 50% от общего числа хромосомных аберраций) при облучении клеток ионами азота. При действии у-лучей и протонов доля фрагментов составляет -25%.

8. Проведена оценка относительной биологической эффективности протонов с энергией 1 ГэВ и ионов азота с энергией 50 МэВ/нуклон. Коэффициенты ОБЭ протонов и ионов азота по выходу транслокаций соответственно составляют 1,1 и 3,1. По другим цитогенетическим показателям коэффициенты ОБЭ протонов близки к единице, а коэффициенты ОБЭ ускоренных ионов азота находятся в пределах 2,0-2,6 при стандартом метафазном методе и 3,1-6,0 при FISH-методе анализа хромосом.

9. Разработан математический метод пересчета на полный геном частот транслокаций, дицентриков и фрагментов, выявляемых FISH-методом для случаев "окрашивания" разными флуоресцентными красителями одной или нескольких пар хромосом. Анализ результатов пересчета экспериментальных данных свидетельствует о более высокой радиочувствительности хромосом-1 и -2 среди других хромосом генома человека.

10. Получены калибровочные кривые по частоте стабильных аберраций (транслокаций) хромосомы-1 для целей биологической дозиметрии в случаях неконтролируемого облучения человека у-лучами, высокоэнергетичными протонами, а также тяжелыми ионами с ЛПЭ в пределах 70-80 кэВ/мкм. Точность оценки дозы в исследованных диапазонах составляет 7-20%.

83

Заключение

Настоящее исследование является результатом работы, выполненной в Отделении радиационных и радиобиологических исследований Объединенного института ядерных исследований и в Лаборатории высокоточной цитометрии Института биофизики Академии наук Чешской республики (г. Брно). Оно стало возможным благодаря использованию пучков высокоэнергетичных заряженных частиц, генерируемых на базовых установках ОИЯИ — протонов релятивистских энергий на синхрофазотроне Лаборатории высоких энергий, ускоренных тяжелых ионов азота 14N на ускорителе У-400М Лаборатории ядерных реакций имени акад. Г.Н. Флерова, у-лучей на терапевтической установке "Рокус" Лаборатории ядерных проблем. Выражаю глубокую благодарность начальнику Отдела радиационных исследований ОРРИ ОИЯИ, кандидату физико-математических наук В.Е. Алейникову, кандидату физико-математических наук Г.Н. Тимошенко, В.П. Бамблевскому, А.П. Череватенко, В.П. Зорину, обеспечившим дозиметрию на этих пучках при облучении образцов с лимфоцитами крови человека. Приношу глубокую благодарность руководителю Лаборатории высокоточной цитометрии Института биофизики АН 4P доктору С. Козубеку, научным сотрудникам доктору Е. Лукашовой, А. Лишковой и всему коллективу сотрудников за предоставленную возможность выполнения работы по проведению FISH-анализа, помощь в овладении FISH-методикой, постоянное внимание и поддержку в ходе проведения работы по FISH. Самую искреннюю признательность и благодарность выражаю моим научным руководителям начальнику ОРРИ ОИЯИ доктору биологических наук, профессору Е.А. Красавину и кандидату биологических наук Р.Д. Говорун, которые своим содействием, постоянным вниманием и помощью, личным участием в этой работе сделали возможным ее выполнение.

В представленной работе излагаются результаты проведенных исследований по изучению количественных закономерностей выхода стабильных аберраций хромосом с использованием FISH-техники при воздействии излучений в широком диапазоне ЛПЭ и разных видов нестабильных аберраций хромосом при их анализе стандартным метафазным и FISH-методами; проведен сравнительный анализ полученных этими методами закономерностей индукции этих типов аберраций хромосом в лимфоцитах крови человека; проведена оценка ОБЭ ускоренных протонов с энергией 1 ГэВ (ЛПЭ -0,218 кэВ/мкм) и тяжелых ионов азота 14N (ЛПЭ -77 кэВ/мкм) по разным цитогенетическим показателям; предпринята попытка оценки возможности использования теста "стабильных аберраций хромосом (транслокаций)" для целей биологической дозиметрии при воздействии ионизирующих излучений, различающихся по ЛПЭ. Использование FISH-техники позволило получить качественно новую информацию о воздействии различающихся по ЛПЭ ионизирующих излучений на клетки человека.

Диссертационная работа изложена на 105 страницах машинописного текста, состоит из введения, четырехглав и выводов, содержит 8 таблиц, 19 рисунков. Список литературы включает 148 названий, из которых 14 на русском и 1

134 на английском языках.

По теме диссертации опубликованы следующие работы:

1. LukasovaE., RepinM.V., GovorunR.D., Krasavin E.A., HorneckG.,

Kozubek S., 1995, Human lymphocytes chromosome-1-aberrations induced by y-rays identified by fluorescence in situ hybridization. In: "Radiation Biology and its Application in Space Research. Mutation Induction by Ionizing Radiation." Eds. S. Kozubek, G. Horneck. Proc. of the Symp., 1012.11.1994, Nedvedice, Czech Republic. Kiramo, 1995, pp. 250-255.

2. Репин M.B., Говорун Р.Д., Лукашова E., Красавин E.A. и Козубек С., 1996,

Стабильные и нестабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах крови человека in vitro после у-облучения. // Радиац. биология и радиоэкология. Т. 36. Вып. 6. С. 848-851.

3. Репин М.В., Говорун Р.Д., ЛукашоваЕ., КозубекС. и Красавин Е.А.,

1997а, FISH-анализ стабильных и нестабильных аберраций хромосомы-1, индуцируемых у-лучами и ускоренными ионами азота в лимфоцитах крови человека. // Тез. Межд. симп. "Проблемы биохимии, радиационной и космической биологии", 22-25 января 1997, Москва, Дубна. С. 54.

4. Репин М.В., Говорун Р.Д., Красавин Е.А., Лукашова Е. и Козубек С.,

19976, FISH-анализ стабильных и нестабильных аберраций хромосомы-1, индуцируемых у-лучами и ускоренными ионами азота в лимфоцитах крови человека. —Тр. Межд. симп. "Проблемы биохимии, радиационной и космической биологии", 1997, Дубна. Том 2. С. 49-56.

5. LukasovaE., KozubekS., GovorunR.D., KozubekM., Kroha V., RyznarL. and RepinM.V., 1997, Aberrations induced by three different kinds of radiation in chromosomes 1, 2 and Y human lymphocytes. // Abstr. NATO-Advanced Research Workshop: "Fundamentals for the Assessment of Risks from Environmental Radiation". 6-10 October, 1997, Brno, Czech Republic, p. 48.

6. Krasavin E.A., Govorun R.D., Fedorenko B.S., Petrov V.M., Kozubek S.,

LukasovaE., RepinM.V. and Druzhinin S.V., 1997, Cytogenetic effects of heavy ions in human lymphocytes. JINR, El9-97-170, Dubna, 1997, 14 pp.

7. Govorun R.D., Lukasova E., Kozubek S., Repin M.V., Krasavin E.A. and

Kroha V., 1988, Induction of aberrations in human lymphocytes by y-rays and fast heavy ions. // JINR. E-19-98-31. Dubna, 1997, 19 pp.

8. Krasavin E., Govorun R., Repin M., Tymoshenko G., Lukashova M. and

Kozubek S., 1999, Chromosomal aberrations in human lymphocytes induced by 1 GeV protons in vitro. In: 10th Annual Space Radiation Health Investigators' workshop, BNL, NASA, USRA. 13-16 June, Upton, N.Y., USA., 1999, p. 38.

86

9. Lukâsovâ E., Kozubek S., Govorun R.D., Repin M.V., Ryznar L., Krasavin E., KozubekM. and Kroha V., 1999, Aberration induced in chromosomes 1, 2 and Y of human lymphocytes by three types of different LET value as detected by FISH. In: NATO Science Series 2: Environmental Security, Vol.55. Eds.: Baumstark-Khan C., Kozubek S. and HoraeckG., Kluwer Academic Publishers, 1999, pp. 195-202.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Репин, Михаил Васильевич, 2000 год

1. Воробцова И.Е. и Богомазова А.Н., 1995, Стабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах периферической крови лиц, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС. Радиационная биология. Радиоэкология. Т. 35. Вып. 5, 636-639.

2. Герасименко В.Н., Говорун Р.Д. и Рыжов Н.И., 1980, Действие ускоренных ионов бора, углерода и неона на хромосомы лимфоцитов человека in vitro. Радиобиология. Т. XX. Вып. 2, 206-211.

3. Говорун Р.Д., Рыжов Н.И., Смирнова O.A., ПортманА.И., ЭрцгреберГ. и

4. Айхорн К., 1982а, Действие тяжелых ионов на клетки млекопитающих. Сообщение 1. Цитогенетические эффекты при облучении клеток китайского хомячка ускоренными ионами гелия, углерода и неона. Радиобиология. Т. XXII. Вып. 5, 648-653.

5. Говорун Р.Д., Смирнова O.A. и Рыжов Н.И., 19826, Действие тяжелых ионов на клетки млекопитающих. Сообщение 2. Оценка ОБЭ ускоренных ионов гелия, углерода и неона по цитогенетическим показателям. Радиобиология. Т. XXII. Вып. 6, 791-795.

6. ГольдманИ.Л. и Левина JI.Я., 1964, Анализ хромосом человека в лейкоцитах периферической крови. Бюлл. эксперим. биол. и мед. Т. 58, N 11, 103-107.

7. Лобачевский П.Н. и Фоминутых Е.В., 1991, Учет радиационноиндуцированной задержки деления клеток при исследовании индукции хромосомных аберраций (теоретические и экспериментальные основы подхода). Радиобиология. Т. 31. Вып. 1. 59-63.

8. Обухова Т.Н. и Домрачева Е.В., 1998, Регистрация стабильных аберрацийв лимфоцитах периферической крови методами G-дифференциального окрашивания хромосом и флюоресцентной in situ гибридизации. Радиационная цитогенетика. Т. 38. Вып. 6. 793-799.

9. Севанькаев A.B., 1987, Радиочувствительность хромосом лимфоцитовкрови человека в митотическом цикле. М., Энергоатомиздат. 159 с.

10. Севанькаев A.B. и Бочков Н.П., 1968, Влияние гамма-облучения на хромосомы человека. Сообщение 1. Зависимость частоты хромосомных аберраций от дозы при облучении in vitro. Генетика. Т. IV, N5, 130— 137.

11. Севанькаев A.B. и Козлов В.М., 1974, Митотическая активность лимфоцитов человека при облучении в различных стадиях клеточного цикла. Радиобиология. Т. 14, N 1, 117-119.

12. Севанькаев A.B. и Насонов А.П., 1978, Калибровочные дозовые кривыехромосомных аберраций лимфоцитов человека. Мед. Радиология. Т. 23, N6, 26-33.

13. Снигирева Г.П., Шевченко В.А. и Новицкая H.H., 1995, Использование

14. FISH-метода для реконструкции поглощенных доз, полученных участниками ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС. Радиационная биология. Радиоэкология. Т. 35. Вып. 5, 654-660.

15. Череватенко А.П., 1986, Физико-дозиметрический комплекс Геном дляобеспечения радиобиологических исследований на пучках тяжелых ионов ОИЯИ. Материалы V Всесоюзного совещания по микродозиметрии. Т. 1. Под ред. Н.Г. Волкова. —М.: Изд. МИФИ, 1986.

16. AwaA.A., NakanoM., Ohtaki К., KodamaY., Lucas J. and Gray J, 1992,

17. Factors that determine the in vivo dose-response relationship for stable chromosome aberrations in A-bomb survivors. J. Radiat. Res. (Tokyo), 33 (suppl.), 206-214.

18. Awa A.A., SofuniT., Honda T., ItohM., Neriishi S. and OtakeM., 1978,

19. Relationship between the radiation dose and chromosome aberrations in atomic bomb survivors of Hiroshima and Nagasaki. J. Radial Res., 19, 126-140.

20. BajerskaA. and LinieckiJ., 1975, The yield of chromosomal aberrations inrabbit leukocytes after irradiation in vitro and in vivo. Mutat. Res., 27, 271— 281.

21. Barquinero J.F., KnehrS., Braselmann H., FigelM. and Bauchinger M., 1998,

22. DNA-proportional distribution of radiation-induced chromosome aberrations analysed by fluorescence in situ hybridization painting of all chromosomes of a human female karyotype. Int. J. Radiat. Biol., 74, 315— 323.

23. Bauchinger M. and Götz G., 1979, Distribution of radiation induced lesions inhuman chromosomes and dose-effect relation analysed with G-banding. Radiation and Environmental Biophysics, 16, 355—366.

24. Bauchinger M., Salassidis K., Braselmann H., Vozilova A., Pressl S.,

25. Stephan G., Snigiryova G., Kozheurov V.P. and AkleyevA., 1998, FISH-based analysis of stable translocations in a Techa River population. Int. J. Radiat. Biol., 73, 605-612.

26. Bender M.A., Awa A.A., Brooks A.L., Evans H.J., Groer P.G., Littlefield L.G.,

27. PereiraC., Preston R.J. and Wachholz B.W., 1988, Current status of cytogenetic procedures to detect and quantify previous exposures to radiation. Mutat. Res., 196, 103-159.

28. Bender M.A. and GoochP.C., 1963, Persistent chromosome abrrations inirradiated human subjects. II. Three and one-half year investigation. Radiat. Res., 18, 389-396.

29. Boei J.J.W.A., Vermeulen S. and Natarajan A.T., 1996, Detection ofchromosomal aberrations by fluorescence in situ hybridization in the first three postirradiation divisions of human lymphocytes. Mutat. Res., 349, 127-135.

30. Brewen J.G. and GengozianN., 1971, Radiation-induced human chromosomeaberrations. II. Human in vitro irradiation compared to in vitro and in vivo irradiation of marmoset leukocytes. Mutat. Res., 13, 383-391.

31. BucktonK.E., 1976, Identification with G- and R-banding of the position ofbreakage points induced in human chromosomes by in vitro X-irradiation. Int. J. Radiat. Res., 29, 475-488.

32. BucktonK.E., 1983, Chromosome aberrations in patients treated with Xirradiation for ankylosing spondylitis patients. In: Radiation-Induced Chromosome Damage in Man, edited by T. Ishihara and M.S. Sasaki. (New York, A.R. Liss), 491-511.

33. BucktonK.E., Hamilton G.E., PatonL. and Langlands A.G., 1978,

34. Chromosome aberrations in irradiated ankylosing spondylitis patients. In: Mutagen-Induced Chromosome Damage in Man, edited by H. Evans and D. Lloyd. (Edinburgh University Press), 142-150.

35. BucktonK.E., Langlands A.G., Smith P.G. Woodcock G.E. and Looby P.C.,1971, Further studies on chromosome aberrations: Production after whole-body irradiation in man. Int. J. Radiat. Biol., 19, 369-378.

36. CeledaD., AldingerK., HaarF.-M., HausmannM., DurmM., LudwigH. and

37. CremerC., 1994, Rapid fluorescene in situ hybridization with repetitive DNA probes: Quantification by digital image analysis. Cytometry, 17, 1325.

38. CeledaD., Bettag U., Cremer C., 1992, PCR amplification and simultaneousdigoxigenin incorporation of long DNA probes for fluorescence in situ hybridization. Biotechniques, 12, 98-102.

39. Chen A.M., Lucas J.N., Hill F.S., Brenner D.J. and Sachs R.K., 1996, Proximityeffects for chromosome aberrations measured by FISH. Int. J. Radiat. Biol., 69,411-420.

40. Collins C., Kuo W.L., Segraves R., Fuscoe J., Pinkel D. and Gray J.W., 1991,

41. Construction and characterization of plasmid libraries enriched in sequences from single human chromosomes. Genomics, 11, 997-1006.

42. Cremer C., Münkel Ch., Granzow M., Jauch A., Dietzel S., Eils R., Guan X.-Y.,

43. Meitzer P.S., Trent J.M., Langowski J, and CremerT., 1996, Nuclear architecture and the induction of chromosomal aberrations. Mutat. Res., 366,97-116.

44. CremerC., RemmB., BischoffA. and Vollweiler T., 1992, Automateddetection of radiation-induced chromosome aberrations following fluorescence in situ hybridization. J. Radiat. Res., 33 (Suppl.), 189-205.

45. Cremer T., Lichter P., Borden J., Ward D.C. and Manuelidis L., 1988, Detectionof chromosome aberrations in metaphase and interphase tumor cells by in situ hybridization using chromosome specific library probes. Hum. Genet., 80, 235-246.

46. CremerT., Popp S., Emmerich P., Lichter P. and CremerC., 1990, Rapidmetaphase and interphase detection of radiation-induced chromosome aberrations in human lymphocytes by chromosomal suppression in situ hybridization. Cytometry, 11, 110-118.

47. DarroudiF., FominaJ., Meijers M. and Natarajan A.T., 1998, Kinetics of theformation of chromosome aberrations in X-irradiated human lymphocytes using PCC and FISH. Mutat. Res., 404, 55-65.

48. Dewey W.C., Humphrey R.M. and Jones B.A., 1964, Relationship betweenradiation-induced mitotic delay and doubling-time of cells. Int. J. Radiat. Biol., 8, 605-607.

49. DuManoirS., Speicher M.R., Joos S., Schröck E., Popp S., DöhnerH.,

50. Kovacs G., Robert-Nicoud M., Lichter P. and Cremer T., 1993, Detection of complete and partial chromosome gains and losses by comparative genomic in situ hybridization. Hum. Genet., 90, 590-610.

51. Durante M., Cella L., Furusawa Y., George K., Gialanella G., Greco O.,

52. Durante M., Furusawa Y., George K., Gialanella G., Greco O., Grossi G.,

53. Matsufuji N., Pugliese M. and Yang T.C., 1998, Rejoining and misrejoining of radiation-induced chromatin breaks. IV. Charged particles. Rad. Res., 149, 446-454.

54. DuranteM., GeorgeK. and YangT.C., 1996, Biological dosimetry byinterphase chromosome painting. Radiat. Res., 145, 53-60.

55. Edwards A.A., 1997, The use of chromosomal aberrations in humanlymphocytes for biological dosimetry. Radiat. Res., 148, 39-44.

56. Edwards A.A., Lloyd D.C. and ProsserJ.S., 1985, The induction ofchromosome aberrations in human lymphocytes by accelerated charged particles. Radiat. Prot. Dosimetry, 13, 205-209.

57. EilsR., Uhrig S., SaracogluK., SátzlerK., BolzerA., Petersen I.,

58. Chassery J.-M., GanserM. and SpeicherM., 1998, An optimized, fully automated system for fast and accurate identification of chromosomal rearrangements by multiplex-FISH (M-FISH). Cytogenetics and Cell Genetics, 82, 160-171.

59. Evans H.J., BucktonK.E., Hamilton G.E. and Carothers A., 1979, Radiationinduced chromosome aberrations in nuclear-dockyard workers. Nature (London), 277, 531-534.

60. Fernández J.L., Campos A., Goyanes V., Losada C., Veiras C. and

61. Edwards A.A., 1995, X-ray biological dosimetry performed by selective painting of human chromosomes 1 and 2. Int. J. Radiat. Biol., 67, 295-302.

62. Fernández J.L., Goyanes V., Losada L., Losada G. and Veiras C., 1994,

63. Cytogenetic dosimetry of ionizing radiations. Standardized calibration curves for X- and gamma-rays. Biomedical Letters, 49, 21-27.

64. FinnonP., Lloyd D.C. and Edwards A.A., 1995, Fluorescence in situhybridization detection of chromosomal aberrations in human lymphocytes: applicability to biological dosimetry. Int. J. Radiat. Biol., 68,429-435.

65. Galloway S.M., Berry P.K., Nichols W.W., Wolman S.R., SoperK.A.,

66. StolleyP.D. and Archer P., 1986, Chromosome aberrations in individuals occupationally exposed to ethylene oxide and in a large control population. Mutat. Res., 170, 55-74.

67. Gebhart E., Neubauer S., Schmitt G., Birkenhake S. and Dunst J., 1996, Use ofthree-color chromosome in situ suppression technique for the detection of past radiation exposure. Radiat. Res., 145, 47-52.

68. Gray J.W., Lucas J.N., PinkelD. and AwaA., 1992, Structural chromosomeanalysis by whole chromosome painting for assessment of radiation-induced genetic damage. J. Radiat. Res., 33 (Suppl.), 80-86.

69. Griffin C.S., Marsden S J., Stevens D.L., Simpson P. and Savage J.R.K., 1995,

70. Frequencies of complex chromosome exchange aberrations induced by Pu a-particles and detected by fluorescence in situ hybridization using single chromosome-specific probes, Int. J. Radiat. Biol., 67, 431-439.

71. HolmergM. and JonassonR., 1973, Preferential location of X-ray inducedchromosome breakage in the R-bands of human chromosomes. Hereditas, 74, 57-68.

72. Hsu T.C., Dewey W.C. and Humphrey R.M., 1962, Radiosensitivity of cells of

73. Chinese hamster in vitro in relation to the cell cycle. Exp. Cell Res., 27, 441-452.

74. Hungerford D.A., 1965, Leukocytes cultured from small inocula of wholeblood and the preparation of metaphase chromosomes by treatment with hypotonic KC1. Stain Technol., 40, 333-338.

75. IAEA (International Atomic Energy Agency, Vienna), 1986. Biologicaldosimetry: chromosomal aberration analysis for dose assessment. Technical Report Series. 260.

76. Kallioniemi A., Kallioniemi O.-P., Sudar D., Rutovitz D., Gray J.W., Walman F.and Pinkel D., 1992, Comparative genomic hybridization for molecular cytogenetic analysis of solid tumors. Science, 258, 818-821.

77. KandaR. and Hayata I., 1996, Technical note: Comparison of the yields oftranslocations and dicentrics measured using conventional Giemsa staining and chromosome painting. Int. J. Radiat. Biol., 69, 701-705.

78. Kano Y. and Little J.B., 1986, Site-specific chromosomal rearrangementsinduced in human dipliod cells by X-irradiation. Cytogenetics and Cell Genetics, 41, 22-29.

79. Klever M., Grond-Ginsbach C., Scherthan H. and Schroeder-Kurth T.M., 1990,

80. Chromosomal in situ suppression hybridization after Giemsa banding. Hum. Genet., 86, 484-486.

81. KnehrS., Zitzelsberger H. and Bauchinger M., 1998, FISH-based analysis ofradiation-induced chromosomal aberrations using different nomenclature systems. Int. J. Radait. Biol., 73, 135-141.

82. KodamaY., NakanoM., OhtakiK., DongchampR., AwaA.A. and

83. NakamuraN., 1997, Estimation of minimal size of translocated chromosome segments detectable by fluorescence in situ hybridization. Int. J. Radiat. Biol., 71, 35-39.

84. KozubekS., LukasovaE., RyznarL., KozubekM., LiskovaA., GovorunR.D.,

85. Krasavin E.A. and Horneck G., 1997, Distribution of ABL and BCR genes in cell nuclei of normal and irradiated lymphocytes. Blood, 89, 4537-4545.

86. KrumlaufR., JeanpierreM. and Young B.D., 1982, Construction andcharacterization of genomic libraries from specific human chromosomes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 79, 2971-2975.

87. LeaD.E., 1946, Actions of Radiations on Living Cells, University Press,1. Cambridge.

88. LeeC.L.Y. and Karma O.P., 1981, The pattern of radiation-inducedtransmissible aberrations in human cell culture. Human Genetics, 57, 380384.

89. Léonard A., DeknudtC. and Léonard E.D., 1988, Persistence of chromosomeaberrations in an accidentally irradiated subject. Radiat. Prot. Dosim., 22, 55-57.

90. LichterP., CremerT., Borden J., ManuelidisL. and WardD.C., 1988,

91. Delineation of individual human chromosomes in metaphase and interphase cells by in situ suppression hybridization using recombinant DNA libraries. Hum. Genet., 80, 224-234.

92. Lindholm C., TekkelM., VeidebaumT., IlusT. and SalomaaS., 1998,

93. Persistance of translocations after accidental exposure to ionizing radiation. Int. J. Radiat. Biol., 74, 656-571.

94. Littlefield L.G., McFee A.F., SalomaaS.I., Tucker J.D., InskipP.D.,

95. Lloyd D.C., Moquet J.E., OramS., Edwards A.A. and Lucas J.N., 1998,

96. Accidental intake of tritiated water: a cytogenetic follow-up case on translocation stability and dose reconstruction. Int. J. Radiat. Biol., 73, 543547.

97. Lloyd D.C. and PurrottR.J., 1981, Chromosome aberration analysis inradiobiological protection dosimetry. Radiat. Prot. Dosimetry, 1, 19-27.

98. Lloyd D.C., PurrottRJ., Dolphin G.W., Bolton D., Edwards A.A. and

99. Corp MJ., 1975, The relationship between chromosome aberrations and low-LET radiation dose to lymphocytes. Int. J. Radiat. Biol., 28, 75-90.

100. Lloyd D.C., Purrott R.J., Dolphin G.W. and Edwards A.A., 1976, Chromosomeaberrations induced in human lymphocytes by neutron irradiation. Int. J. Radiat. Biol., 29, 169-182.

101. Lucas J.N., Awa A., Straume T., Poggensee M., Kodama Y., Nakano M.,

102. OhtakiK., Weier H.-U., PinkelD., Gray J. and Littlefield G., 1992, Rapid translocation frequency analysis in humans decades after exposure to ionizing radiation. Int. J. Radiat. Biol., 62, 53-63.

103. Lucas J.N., Chen A.M. and Sachs R.K., 1996a, Theoretical predictions on theequality of radiation-produced dicentrics and translocations detected by chromosome painting. Int. J. Radiat. Biol., 69, 145-153.

104. Lucas J.N., Hill F.S., Burk C.E., Cox A.B. and Straume T., 19966, Stability ofthe translocation frequency following whole-body irradiation measured in rhesus monkeys. Int. J. Raidat. Biol., 70, 309-318.

105. Lucas J.N., HillF., BurkC., Fester T. and Straume T., 1995, Dose-responsecurve for chromosome translocations measured in human lymphocytes exposed to 60Co gamma rays. Health Physics, 68, 761-765.

106. Lucas J.N., Tenjin T., Straume T., Pinkel D., Moore D.C. 2d, Litt M. and

107. Gray J.W., 1989, Rapid human chromosome aberration analysis using fluorescence in situ hybridization. Letter to the editor. Int. J. Radiat. Biol., 56,201.

108. Lukasova E., Kozubek S., Kozubek M., Kjeronska J., Ryznar L., Horakova J.,

109. KrahulcovaE. and HorneckG., 1997, Localisation and distance between ABL and BCR genes in interphase nuclei of bone marrow cells of control donors and patients with chronic myeloid leukaemia. Hum. Genet., 100, 525-535.

110. MatsumotoK., Ramsey M.J., Nelson D.O., Tucker J.D., 1998, Persistence ofradiation-induced tranlocations in human peripheral blood determined by chromosome painting. Radiat. Res., 149, 602-613.

111. Mayall B.H., CarranoA.V., Moore D.H. 2d, Ashworth L.K., BennetD.E. and

112. Mendelsohn M.L., 1984, The DNA-based human karyotype. Cytometry, 5, 376-385.

113. Moorhead P.S., No well P. C., Mellmann W.J., BattipsD.M., Hungerford D.A.,1960, Chromosome preparations of leukocytes cultured from peripheral blood. Exptl. Cell Res., 20, 613-616.

114. Morton N.E., 1991, Parameters of the human genome. Proc. Natl. Acad. Sci.1. USA, 88, 7474-7476.

115. NakanoM., NakashimaE., PawelD.J., KodamaY. and AwaA., 1993,

116. Frequency of reciprocal translications and dicentrics induced in human blood lymphocytes by X-irradiation as determined by fluorescence in situ hybridization. Int. J. Radiat. Biol., 64, 565-569.

117. Natarajan A.T., Ballajee A.S., Boei J.J.W.A., Chatterjee S., Darroudi F.,

118. GrigorovaM., NoditiM., OhH.J., SliepcevicP. and Vermeulen S., 1994, Recent development in the assessment of chromosomal damage. Int. J. Radiat. Biol., 66, 615-623.

119. Natarajan A.T., Santos S.J., Darroudi F., Hadjidikova V., Vermeulen S.,

120. Natarajan A.T., Vyas R.C, Darroudi F. and Vermeulen S., 1992, Frequencies of

121. X-ray-induced chromosome translocations in human peripheral lymphocytes as detected by in situ hybridization using chromosome-specific DNA libraries. Int. J. Radiat. Biol, 61, 199-203.

122. Natarajan A.T., VyasRC, WiegantJ., CuradoM.O., 1991, A cytogeneticfollow-up study of the victims of a radiation accident in Goiania (Brasil). Mutat. Res., 247, 103-111.

123. Nederlof P.M., van der Flier S., Wiegant J., Raap A.K., Tanke H.J., Ploem L.S.and van der Ploeg M., 1990, Multiple fluorescence in situ hybridization. Cytometry, 11, 126-131.

124. Norman A., Sasaki M.S., Ottomana R.E. and Fingerhut A.G., 1966, Eliminationof chromosome aberrations from human lymphocytes. Blood, 27, 706-714.

125. Pandita T.K., GregoireV., DhingraK. and Hittelman W.N., 1994, Effect ofchromosome size on aberration levels caused by gamma radiation as detected by fluorescence in situ hybridization. Cytogenetic and Cell Genetics, 67,94-101.

126. PinkelD., LandegentJ., Collins C., Fuscoe J., SegravesR., Lucas J. and

127. Gray J., 1988, Fluorescence in situ hybridization with human chromosome-specific libraries: Detection of trisomy 21 and translocations of chromosome 4. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85, 9138-9142.

128. PinkelD., StraumeT. and Gray J. W., 1986, Cytogenetic analysis usingquantitative, high-sensitivity, fluorescence hybridization. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 2934-2938.

129. Popp S. and CremerT., 1992, Development of a biological dosimeter fortranslocation scoring based on two-color fluorescence in situ hybridization of chromosome subsets. J. Radial Res., 33 (Suppl.), 61-70.

130. Popp S., RemmB., HausmannM., LiihrsH., vanKaickG., CremerT. and

131. CremerC., 1990, Towards a cumulative biological dosimeter based on chromosome painting and digital image analysis. Kerntechnik, 55, 204-210.

132. Pressl S., Edwards A. and StephanG, 1999, The influence of age, sex andsmoking habits on the background level of FISH-detected translocations. Mutat. Res., 442, 89-95.

133. RamalhoA.T., CuradoM.P. and Natarajan A.T., 1995, Lifespan of humanlymphocytes estimated during a six year cytogenetic follow-up of individuals accidentally exposed in the 1987 radiological accident in Brazil. Mutat. Res., 331, 47-54.

134. RiedT., Baldini A., RandT.C. and WardD.C., 1992, Simultaneousvisualization of seven different DNA probes by in situ hybridization using combinatorial fluorescence and digital imaging microscopy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89, 1388-1392.

135. RitterS., NasonovaE., Kraft-Weyrather and Kraft G., 1994, Influence ofradiation quality on the expression of chromosomal damage. Int. J. Radiat. Biol., 66, 625-628.

136. RitterS., NasonovaE., Kraft-Weyrather and KraftG., 1996, Comparison ofchromosomal damage induced by X-rays and Ar ions with an LET of 1840 keV/mji in Grphase V79 cells. Int. J. Radiat. Biol., 69, 155-166.

137. Salassidis K., Braselmann H., Okladnikova N.D., Presll S., StephanG.,

138. SnigiryovaG. and Bauchinger M., 1998, Analysis of symmetrical translocations for retrospective biodosimetry in radiation workers of the Mayak nuclear-industrial complex (Southern Urals) using FISH-chromosome painting. Int. J. Radiat. Biol., 74, 431-439.

139. Salassidis K., Georgiadou-Schumacher V., Braselmann H., MullerP.,

140. Savage J.R.K, and Simpson R, 19946, FISH 'painting' patterns resulting fromcomplex exchanges. Mutat. Res., 312, 51-60.

141. ScarpatoR., LoriA., Panasiuk G. and BaraleR., 1997, FISH analysis oftranslocations in lymphocytes of children exposed to the Chernobyl fallout: preferential involvement of chromosome 10. Cytogenet. Cell Genet. 79, 153-156.

142. SchmidE., Bauchinger M., Bunde E., FerbertH.F. and LievenH.V., 1974,

143. Comparison of the chromosome damage and its dose response after medical whole-body exposures to 60Co y-rays and irradiation of blood in vitro. Int. J. Radiat. Biol., 26, 31-37.

144. SchmidE., BraselmannH. and NahrstedtU., 1995, Comparison of y-rayinduced dicentric yields in human lymphocytes measured by conventional analysis and FISH. Mutat. Res., 348, 125-130.

145. Scholz M., Ritter S. and Kraft G., 1998, Analysis of chromosome damagebased in the time course of aberrations. Int. J. Radiat. Biol., 74, 325-331.

146. Schröck E., du ManoirS., VeldmanT., Schoell B., Wienberg J., Ferguson

147. Smith M., Ning M.A., Ledbetter D.H., Bar-Am, I., Soenksen D., Garini Y. and Ried T., 1996, Multicolor spectral kariotyping of human chromosomes. Science, 273, 494-497.

148. Seabright M., 1973, High resolution studies in the pattern of induced exchangesin the human karyotype. Chromosoma, 40, 333-346.

149. Selleri L., Hermanson G.G., Enbanks J.H. and Evans G.A., 1991, Chromosomalin situ hybridization using yeast artificial chromosomes. Genet. Anal. Technol. Appl., 8, 59-66.

150. Sevan'kaev A.V., Lloyd D.C., Potetnya O.I., ZhlobaA.A., Moiseenko V.V. and

151. Edwards A.A., 1995, Chromosomal aberrations in lymphocytes of residents of areas contiminated by radioactive discharges from the Chernobyl accident. Radiat. Protection Dosimetry, 58, 247-254.

152. Simpson P.J. and Savage J.R.K., 1995, Estimating the true frequency of X-rayinduced complex chromosome exchanges using fluorescence in situ hybridization. Int. J. Radiat. Biol., 67, 37-45.

153. Sinha A.K., Linscombe V.A., Gollapudi B.B., Jersey G.C., Flake R.E. and

154. ParkC.N., 1986, Cytogenetic variability of lymphocytes from phenotypically normal men: influence of age, smoking, season and sample . storage. J. Toxicol. Environ. Health, 17, 327-345.

155. SliepcevicP. and Natarajan A.T., 1994, Distribution of X-rays induced G2chromatid damage among Chinese hamster chromosomes: Influence of chromatin configuration. Mutat. Res., 323, 113-119.

156. Snigiryova G., Braselmann H., Salassidis K., ShevchenkoV. and

157. Bauchinger M., 1997, Retrospective biodosimetry or Chernobyl clean-up workers using chromosome painting and conventional chromosome analysis. Int. J. Radiat. Biol., 71, 119-127.

158. Spiecher M.R., Ballard S.G. and WardD.C., 1996, Karyotyping humanchromosomes by combinatorial multi-fluor FISH. Nature Genet., 12, 368375.

159. StraumeT., Langlois R.G., Lucas J., Jensen R.H., Bigbee W.L., RamalhoA.T.and Brandao-Mello C.E., 1991, Novel biodosimetry methods applied to victims of Goiania accident. Health Physics, 60, 71-76.

160. Straume T. and Lucas J.N., 1993, A comparison of the yields of translocationsand dicentrics measured using fluorescence in situ hybridization. Int. J. Radiat. Biol, 64, 185-187.

161. Straume T., Lucas J.N., Tucker J.D., BigbeeW.L. and Langlois R.G., 1992,

162. Biodosimetry for a radiation worker using multiple accays. Health Physics, 62, 122-130.

163. TestardL, DitrillauxB. and SabatierL., 1997, Chromosomal aberrationsinduced in human lymphocytes by high-LET irradiation. Int. J. Radiat. Biol., 72, 27-37.

164. Timoschenko G.N., Bamblevski V.R and Krylov A.R., 1999, The technique ofmeasuring of relativistic proton absorbed dose in thin biological samples. Preprint of the Joint Institute for Nuclear Research. Dubna, 1999.

165. TonomuraA., KishK. and SaitoF., 1983, Types and frequencies ofchromosome aberrations in peripheral lymphocytes of general populations, in: T. Ishihara and M.S. Sasaki (Eds.), Radiation Induced Chromosome Damage in Man, Liss, New York, pp. 605-615.

166. Tucker J.D., Breneman J.W., BrinerJ.F., EvekethG.G., Langlois R.G. and

167. Moore D.H. 2d, 1997, Persistence of radiation-induced translocations in rat peripheral blood determined by chromosome painting. Environ. Mol. Mutagen., 30, 264-272.

168. Tucker J.D., LeeD.A. and Moore D.H., 1995a, Validation of chromosomepainting. II. A detailed analysis of aberrations following high doses of ionizing radiation in vitro. Int. J. Radiat. Biol., 67, 19-28.

169. Tucker J.D., Morgan W.F., Awa A.A., Bauchinger M., BlakeyD.,

170. Cornforth M.N., Littlefield L.G., Natarajan A.T. and Shasserre C., 19956, A proposed system for scoring structural aberrations detected by chromosome painting. Cytogenet. Cell Genet., 68, 211-221.

171. Tucker J.D., Ramsey M.J., LeeD.A. and MinklerJ.L., 1993, Validation ofchromosome painting as a biodosimeter in human peripheral lymphocytes following acute exposure to ionizing radiation in vitro. Int. J. Radiat. Biol., 64, 27-37.

172. Tucker J.D. and Senft J.R., 1994, Analysis of naturally occurring and radiationinduced breakpoint locations in human chromosomes 1, 2 and 4. Radiat. Res., 140,31-36.

173. Van Dilla M.A., DeavenL.L., Albright K.L., Allen N.A., AubuchonM.,

174. Vijayalaxmi and Evans H.J., 1982, In vivo and in vitro effects of cigarettesmoke on chromosomal damage and sister-chromatid exchange in human peripheral blood lymphocytes. Mutat. Res., 92, 321-332.

175. Viscidi R.P., Connelly C.J. and YolkenR.H., 1986, Novel chemical method forthe preparation of nucleic acids for non-isotopic hybridization. J. Clinic. Microbiol, 23, 311-317.

176. VyasR.X., DarraudiF., Natarajan A.T., 1991, Radiation induced chromosomalbreakage and rejoining interphase-metaphase chromosomes of human lymphocytes. Mutat. Res., 249, 29-35.

177. WojcikA. and StrefferC., 1998, Comparison of radiation-induced aberrationfrequencies in chromosomes 1 and 2 of two human donors. Int. J. Radiat. Biol., 74, 573-581.

178. Wu H., Durante M., George K. and Yang T.C., 1997, Induction of chromosomeaberrations in human cells by charged particles. Radiat. Res., 148, 102-107.

179. Yang T.C., Wu H., George K.A., Durante M. and Craise L.M., 1997, Lethal andcytogenetic effects of iron particle. Abstracts of Eight Annual Space Radiation Health Investigators' Workshop (April 29-May 3, 1997), 20.

180. Yu C.K. and Sinclair W.K., 1967, Mitotic delay and chromosomal aberrationsinduced by X-rays in synchronized Chinese hamster cells in vitro. J. Nat. Cancer Inst., 39, 619-632.