Совершенствование двухстадийной методики хроматомасс-спектрометрического определения свободных и этерифицированных жирных кислот в биологических образцах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат наук Орлова Татьяна Игоревна

• Орлова Татьяна Игоревна
• кандидат наук
• 2016

Оглавление диссертации кандидат наук Орлова Татьяна Игоревна

1 Обзор литературы

1.1. Структура, состав и свойства жирных кислот

1.2 Биологическая роль жирных кислот и их значение в медицине и токсикологии

1.2.1 Химические классы липидов плазмы крови

1.2.2 Биологическая роль жирных кислот

1.2.3 Исследование профилей жирных кислот в медицине и токсикологии

1.3. Инструментальные методы определения свободных и

этерифицированных жирных кислот

1.3.1 Определение жирных кислот методами газовой хроматографии

1.3.2 Определение жирных кислот методом жидкостной хроматографии

1.3.3. Определение жирных кислот методом капиллярного электрофореза

1.3.4. Методы экстракции жирных кислот из биологических образцов

1.3.5. Предварительное хранение и транспортировка биологических проб

1.4. Характеристика объектов исследования: химические соединения,

потенциально влияющие на метаболизм липидов в организме

1.4.1 Фосфорорганические соединения

1.4.2 Мельдоний

1.4.3 Фторацетат

2 Экспериментальная часть

2.1 Методика определения свободных жирных кислот

2.2 Методика совместного определения свободных и этерифицированных

жирных кислот

2.3 Определение оптимальных условий хранения и транспортировки

биологических образцов

2.4 Исследование влияния фосфорорганических соединений на профили

жирных кислот плазмы крови крыс

2.5 Исследование влияния мельдония на профили жирных кислот плазмы крови практически здоровых добровольцев

2.5 Исследование влияния фторацетата на профили жирных кислот плазмы

крови крыс

2.6 Исследование влияния алифатических углеводородов на профили

жирных кислот плазмы крови и тканей печени и головного мозга крыс

2.7 Статистическая обработка полученных результатов

3 Результаты и их обсуждение

3.1 Хроматографическое разделение

3.2 Подготовка проб к анализу

3.3 Построение градуировочных зависимостей

3.4 Определение свободных и этерифицированных жирных кислот в плазме крови методом газовой хроматоматографии с масс-селективным детектированием

3.5 Оптимизация условий хранения образцов плазмы крови для определения

жирных кислот методом газовой хроматомасс-спектрометрии

3.6 Изменения профилей жирных кислот плазмы крови крыс при введении сублетальных количеств зарина, зомана и вещества типа Vx,

с применением антидотной терапии

3.7. Влияние мельдония на метаболизм жирных кислот

3.8 Исследование энергетического метаболизма крыс при действии фторацетата

3.9. Изменения профилей жирных кислот тканей печени и головного мозга крыс при

хроническом ингаляционном воздействии малых доз алифатических углеводородов

Заключение

Выводы

Список литературы

ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ АЛК - альфа линоленовая кислота АЛТ - аланинтрансаминаза АСТ - аспартаттрансаминаза АХЭ - ацетилхолинэстераза

ВЭЖХ-МС - жидкостная хроматография-масс-спектрометрия

ГХ-МС - газовая хроматография-масс-спектрометрия

ДН - диабетическая нефропатия

ДГ - диглицериды

ЖК - жирные кислоты

ЖХ - жидкостная хроматография

КАТ - каталаза

КЭ - капиллярный электрофорез

ЛК - линолевая кислота

ЛПВП - липопротеины высокой плотности

ЛПНП - липопротеины низкой плотности

ЛПВП-Х - холестерол ЛПВП

МДА - малоновый диальдегид

МНЖК - мононенасыщенные жирные кислоты

ОХ - общий холестерол

ПНЖК - полиненасыщенные жирные кислоты

СЖК - свободные (неэтерифицированные) жирные кислоты

СОД - супероксиддисмутаза

ТБАГ - гидроксид тетрабутиламмония

ТГ - триглицериды

ТФМЭ - твердофазная микроэкстракция

УВ - углеводороды

ФА -фторацетат

ФИ - фосфатидилинозитол

ФК - фосфатидная кислота

ФЛ - фосфолипиды

ФОС - фосфорорганические соединения ФС - Фосфатидилсерин ФХ - фосфатидилхолин (лецитин) ФЦ - фторцитрат

ФЭА - фосфатидилэтаноламин (кефалин) ЭЖК - этерифицированные жирные кислоты

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование двухстадийной методики хроматомасс-спектрометрического определения свободных и этерифицированных жирных кислот в биологических образцах»

ВВЕДЕНИЕ

Хроматомасс-спектрометрические методы исследования профилей низкомолекулярных соединений - метаболитов крови и других биологических образцов приобретают все большее значение в современной токсикологии и фармакологии. Исследование метаболических профилей вносит значительный вклад в развитие лабораторно-клинической диагностики, например, исследования маркеров обмена жирных кислот (ЖК) являются одним из ключевых направлений в ранней диагностике сердечно-сосудистых рисков и метаболического синдрома.

Для достоверной диагностики кризисных состояний организма необходимо определение ЖК в биологических образцах в свободной (СЖК) и этерифицированной (ЭЖК) формах. Изменения концентраций СЖК и ЭЖК являются следствием метаболической саморегуляции, а также маркерами поражения или дисфункции органов.

Разработка надежной процедуры определения большого числа ЖК в свободной и этерифицированной формах позволит усовершенствовать методы диагностики метаболического синдрома, наследственных и онкологических заболеваний, а также осуществить раннее (доклиническое) выявление отклонений у лиц, находящихся в зоне риска.

Основной метод определения ЖК в сыворотке или плазме крови - это жидкость-жидкостная экстракция и газовая хроматография (ГХ) с пламенно-ионизационным детектированием. Сочетание метода ГХ с масс-спектрометрией имеет ряд неоспоримых преимуществ как в части надежности идентификации аналитов, так и чувствительности, и селективности их определения. К недостаткам метода ГХ при любом варианте детектирования стоит отнести необходимость предварительной дериватизации аналитов, т.к. жесткие условия дерива-тизации могут спровоцировать неблагоприятные побочные реакции: изомеризацию непредельных ЖК и их окисление, причем скорость окисления возрастает с повышением степени непредельности. Таким образом, для повышения правильности и точности определения ЖК методом ГХ-МС, необходима разработка мягких методов дериватизации.

В качестве способа извлечения и дериватизации СЖК нами выбрано экстрактивное алкилирование иодистым метилом. Прототипом послужила процедура, описанная в работе [1]. Возможности метода были нами впоследствии расширены за счет оптимизации анализа других видов биологических образцов, помимо плазмы крови: мочи и гомогенатов органов; список определяемых соединений расширен с 5 до 32 (включая важнейшие маркеры сердечно-сосудистых заболеваний - полиненасыщенные ЖК) [2], однако главным преимуществом стала возможность определения ЖК в этерифицированной форме [3]. Селективное одновременное определение СЖК и ЭЖК позволяет значительно сократить объем плазмы крови, требуемый для проведения анализа.

Практика применения разработанной методики при выполнении медико-биологических исследований в НИИ ГПЭЧ показала, что результаты анализа зависят от условий хранения образцов плазмы крови [4]. К условиям хранения можно отнести следующие параметры: продолжительность хранения, температура и количество циклов замораживания и размораживания (циклов з/р). Большой объем отобранных образцов приводит к большей продолжительности хранения, а создание лабораторного "банка" образцов и применение различных методов анализа неизбежно приводят к увеличению количества циклов з/р. Исследования влияния количества таких циклов на концентрации эндогенных соединений в образце стали особенно актуальными в связи с формированием крупных "банков" биологических образцов. Соблюдение надлежащих условий хранения и транспортировки биологических образцов позволяет значительно снизить вариации в результатах анализа. Количественная характеристика влияния условий хранения биологических образцов позволит значительно повысить надежность и достоверность определения ЖК.

Настоящая работа посвящена совершенствованию методики количественного хро-матомасс-спектрометрического определения ЖК в биологических образцах с целью установления механизмов воздействия токсичных химических соединений на организм, что позволит внести значительный вклад в практику лабораторно-клинической диагностики, а также гигиенического регламентирования вредных химических веществ.

Для разработки метода совместного хроматомасс-спектрометрического определения ЖК в плазме крови необходимо было решить следующие задачи: разработать подходы к совместному определению свободных и этерифицированных ЖК плазмы крови людей и лабораторных животных и произвести оценку метрологических характеристик методики. Оптимизировать методику для количественного определения ЖК в образцах гомогенатов органов и тканей. Обосновать условия хранения биологических образцов с момента отбора до подготовки проб к анализу. Апробировать разработанный подход при оценке влияния сублетальных доз фторацетата, зарина, зомана и российского вещества Ух, а также средств антидотной терапии на качественный и количественный состав СЖК и ЭЖК плазмы крови экспериментальных животных. Провести апробацию методики при оценке влияния лекарственных препаратов на качественный и количественный состав СЖК и ЭЖК плазмы крови здоровых добровольцев-испытуемых (на примере мельдония).

В результате выполнения работы создана аналитическая методика, позволяющая проводить профилирование жирнокислотного состава различных биологических объектов. Результаты работы позволили получить новые сведения о влиянии токсичных химических соединений на метаболизм липидов и повысить уровень оценки рисков, связанных с воздействием различных токсичных химических соединений. Разработанный метод позволил

6

усовершенствовать методологическую основу доклинических и клинических исследований в ФГУП «НИИ ГПЭЧ» ФМБА России, а также гигиенического регламентирования вредных химических веществ. Метод может быть использован в центрах профпатологии, медико-биологических НИИ, центрах Роспотребнадзора и токсикологических лабораториях.

1 Обзор литературы

1.1. Структура, состав и свойства жирных кислот

Жирные кислоты представляют собой алифатические одноосновные карбоновые кислоты с открытой цепью, содержащиеся в основном в этерифицированной форме в жирах, маслах и восках растительного и животного происхождения [5]. Основные ЖК в организме человека имеют чётное число атомов углерода, что связано с особенностями их биосинтеза, при котором к углеводородному радикалу ЖК последовательно добавляются двухуглеродные фрагменты [6] (см. рисунок 2).

Жирные кислоты являются структурными компонентами различных липидов. В составе триацилглицеридов они выполняют функцию депонирования энергии, так как их радикалы содержат богатые энергией СН2-группы [7]. Благодаря своей структуре, при окислении связей С-Н ЖК дают в два раза больше энергии, по сравнению с полисахаридами, что делает жир наиболее эффективной формой для хранения избыточной энергии у живых организмов. Поскольку увеличение клеточной концентрации СЖК является токсичным, они хранятся в основном в виде триглицеридов во внутриклеточных нейтральных липид-ных каплях, которые функционируют и как резервуары энергии, и как запас ЖК и стеринов, необходимый для синтеза мембран [8]. Жиры и фосфолипиды организма при нормальной температуре тела имеют жидкую консистенцию, так как количество ненасыщенных ЖК преобладает над насыщенными. В фосфолипидах мембран ненасыщенных кислот может быть до 80-85%, а в составе жиров подкожного жира - до 60% [5].

Свободные ЖК в организме природного происхождения, образованы посредством ферментативного гидролиза триацилглицеридов (ТГ). В свободном, неэтерифицированном состоянии ЖК в организме содержатся в небольшом количестве, например, в крови, где они транспортируются в комплексе с белком альбумином [9].

Жирные кислоты, как правило, содержат неразветвленную цепь из атомов углерода (С4-С24, включая углерод карбоксильной группы) и могут быть как насыщенными, так и ненасыщенными [10]. По степени ненасыщенности ЖК подразделяют на насыщенные, в которых двойные связи С=С отсутствуют, мононенасыщенные содержащие одну кратную связь, и полиненасыщенные, в структуре которых содержится более одной кратной связи [11]. По длине углеродной цепи ЖК подразделяют на короткоцепочечные (от С4 до С6),

7

среднецепочечные (от С7 до С12) и длинноцепочечные (более С13). Короткоцепочечные ЖК зачастую представляют собой промежуточные продукты синтеза или деградации более длинных ЖК, в отличие от которых не являются основными компонентами биологических мембран. В состав большинства мембран в организме входят липиды с ацильными группами, содержащими 14, 16, 18, 20, 22 или 24 атомов углерода [12].

Многие ЖК еще до полного установления их строения имели тривиальные названия, и эти названия настолько прочно утвердились в литературе, что их трудно исключить из употребления [13], поэтому правилами ИЮПАК для номенклатуры ЖК допускается использование их тривиальных названий [14].

В соответствии с систематической номенклатурой, количество и положение двойных связей в ненасыщенных ЖК часто обозначают с помощью цифровых символов: например, олеиновую кислоту как 18:1;9, линолевую кислоту как 18:2;9,12, где первая цифра -число углеродных атомов, вторая - число двойных связей, а следующие цифры - номера ближайших к карбоксилу углеродных атомов, вовлеченных в образование двойной связи [15]. Также позицию двойной связи обозначают знаком А, после которого указывают номер атома углерода, ближайшего к карбоксилу, у которого находится двойная связь. Например, С18:1А9 означает, что ЖК содержит 18 атомов углерода и одну двойную связь у 9-го атома углерода, считая от углеродного атома карбоксильной группы [6]. В настоящее время также применяется собственная номенклатура ненасыщенных ЖК (т.н. «омега-номенклатура»), предложенная Холманом в 1964 году [16]. Эта классификация позволяет учитывать путь образования ЖК в организме. В ней концевой атом углерода, независимо от длины цепи, обозначается символом ю. Отсчет положения двойных связей производится не как обычно от карбоксильной группы, а от терминальной метильной группы [14]. Структура любой ненасыщенной кислоты может быть выражена тремя цифрами: числом углеродных атомов в цепи, количеством двойных связей и количеством углеродных атомов между двойной связью и метильной группой (ш-углеродом) Так, линоленовая кислота обозначается как 18:3 ю-3 (омега-3) [17], а, например, линолевая кислота может быть обозначена как С18:2А9,12 или С18:2ю-6 [6]:

ш 1 2 3 4

18 17 16 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 /О СН3СН2 СН2 СН2 СН2 -СН=СН - СН2 - СН=СН - СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 - С ^

ОН

ш конец

Линолевая кислота или 18:2 ш 6 (октадекадиеновая кислота)

Таблица 1 - Наиболее распространённые насыщенные ЖК

Тривиальное название Систематическое название (ШРАС) Брутто формула Рациональная полуразвернутая формула Т.пл.

Пропионовая кислота Пропановая кислота C2H5COOH CH3(CH2)COOH -21 °С

Масляная кислота Бутановая кислота C3H7COOH CH3(CH2)2COOH -8 °С

Валериановая кислота Пентановая кислота C4H9COOH CH3(CH2)3COOH -34,5 °С

Капроновая кислота Гексановая кислота C5H11COOH CH3(CH2)4COOH -4 °С

Энантовая кислота Гептановая кислота C6H13COOH CH3(CH2)5COOH -7,5 °С

Каприловая кислота Октановая кислота C7H15COOH CH3(CH2)6COOH 17 °С

Пеларгоновая кислота Нонановая кислота C8H17COOH CH3(CH2)7COOH 12,5 °С

Каприновая кислота Декановая кислота C9H19COOH CH3(CH2)8COOH 31 °С

Ундециловая кислота Ундекановая кислота C10H21COOH CH3(CH2)9COOH 28.6 °С

Лауриновая кислота Додекановая кислота С11Н23СООН CH3(CH2)10COOH 43,2 °С

Тридециловая кислота Тридекановая кислота С12Н25СООН CH3(CH2)11COOH 41 °С

Миристиновая кислота Тетрадекановая кислота С13Н27СООН CH3(CH2)12COOH 53,9 °С

Пентадециловая кислота Пентадекановая кислота С14Н29СООН CH3(CH2)13COOH 52 °С

Пальмитиновая кислота Гексадекановая кислота С15Н31СООН CH3(CH2)14COOH 62,8 °С

Маргариновая кислота Гептадекановая кислота С16Н33СООН CH3(CH2)15COOH 61,3 °С

Стеариновая кислота Октадекановая кислота С17Н35СООН CH3(CH2)16COOH 69,4 °С

Нонадециловая кислота Нонадекановая кислота С18Н37СООН CH3(CH2)17COOH 68,2 °С

Арахиновая кислота Эйкозановая кислота С19Н39СООН CH3(CH2)18COOH 76,2 °С

Генэйкоциловая кислота Генэйкозановая кислота С20Н41СООН CH3(CH2)19COOH 75,2 °С

Бегеновая кислота Докозановая кислота С21Н43СООН CH3(CH2)20COOH 80 °С

Трикоциловая кислота Трикозановая кислота С22Н45СООН CH3(CH2)21COOH 78,779,1 °С

Лигноцериновая кислота Тетракозановая кислота С23Н47СООН CH3(CH2)22COOH

Пентакоциловая кислота Пентакозановая кислота С24Н49СООН CH3(CH2)23COOH 7783,5 °С

Церотиновая кислота Гексакозановая кислота С25Н51СООН CH3(CH2)24COOH 87,4 °С

Гептакоциловая кислота Гептакозановая кислота С26Н53СООН CH3(CH2)25COOH 87,5 °С

Монтановая кислота Октакозановая кислота С27Н55СООН CH3(CH2)26COOH 90,9 °С

Нонакоциловая кислота Нонакозановая кислота С28Н57СООН CH3(CH2)27COOH

Мелиссовая кислота Триаконтановая кислота С29Н59СООН CH3(CH2)28COOH 92-94 °С

Гентриаконтиловая кислота Гентриаконтановая кислота С30Н61СООН CH3(CH2)29COOH

Лацериновая кислота Дотриаконтановая кислота С31Н63СООН CH3(CH2)30COOH

Псилластеариновая кислота Тритриаконтановая кислота С32Н65СООН CH3(CH2)31COOH

Геддовая (геддинновая) кислота Тетратриаконтановая кислота С33Н67СООН CH3(CH2)32COOH

Церопластовая кислота Пентатриаконтановая кислота С34Н69СООН CH3(CH2)33COOH

Гексатриаконтиловая кислота Гексатриаконтановая кислота С35Н71СООН CH3(CH2)34COOH

Насыщенные ЖК, в отличие от ненасыщенных весьма устойчивы к окислению. Тем-

пературы плавления ЖК возрастают с увеличением длины цепи, а их растворимость в воде

уменьшается. В таблице 1 представлены некоторые насыщенные ЖК и их основные свойства [18].

Следует отметить, что при физиологической температуре (37°С) ЖК с количеством атомов углерода 10 и меньше являются жидкостями, а С12 и более - твердые вещества. Ко-роткоцепочечные ЖК С2-С4 полностью смешиваются с водой, а длинноцепочечные, начиная с С20, - практически нерастворимы.

По количеству двойных связей в молекуле жирные кислоты классифицируются следующим образом: ЖК с одной двойной связью относятся к моноеновым или мононенасыщенным. Если в составе молекулы имеется более одной двойной связи, такие ЖК относятся к классу полиеновых или полиненасыщенных.

Двойные связи в ЖК в организме человека имеют цис-конфигурацию. Цис-конфи-гурация двойной связи делает алифатическую цепь молекулы изогнутой, что нарушает упорядоченное расположение насыщенных радикалов ЖК в фосфолипидах мембран, как наглядно показано на рисунке 1, и снижает тем самым температуру плавления. Чем больше двойных связей в ЖК липидов, тем ниже температура их плавления. ЖК с транс-конфигурацией двойной связи могут поступать в организм с пищей, например, в составе маргарина. В этих кислотах отсутствует излом, характерный для цис-связи, поэтому жиры, содержащие такие ненасыщенные кислоты, имеют более высокую температуру плавления, т.е. более твёрдые по консистенции [6].

А - цис-конфигурация радикала ЖК; Б - нарушение упорядоченного расположения радикалов насыщенных ЖК в гидрофобном слое мембран ненасыщенной кислотой с цис-кон-

фигурацией двойной связи. Рисунок 1 - Конфигурации радикалов ЖК. В таблице 2 и 3 указаны основные мононенасыщенные и полиненасыщенные ЖК [18;19].

Полиненасыщенные ЖК, необходимые животным и человеку, но которые образуются в ходе биосинтеза в их организмах, называют незаменимыми. Поступление незаменимых ЖК в организм возможно только с пищей. К незаменимым ПНЖК относятся 18-атом-

ные кислоты семейств п-6 и п-3 (омега-6 и омега-3): линолевая кислота (ЛК) с двумя двой-

ными связями (18:2п-6) и альфа-линоленовая кислота (АЛК) с тремя двойными связями (18:3п-3) [20].

Таблица 2 - Наиболее распространённые мононенасыщенные ЖК_

Тривиальное название Систематическое название ш1 Д2

Акриловая 2-пропеновая кислота 3:1ш1 3:1Д2

Метакриловая 2-метил-2-пропеноваякислота 4:1ш1 3:1Д2

Кротоновая 2-бутеновая кислота 4:1ш2 4:1Д2

Винилуксусная 3-бутеновая кислота 4:1ш1 4:1Д3

Лауроолеиновая цис-9-додеценоваякислота 12 1ш3 12 1Д9

Миристолеиновая цис-9-тетрадеценоваякислота 14 1ш5 14 1Д9

Пальмитолеиновая цис-9-гексадеценоваякислота 16 1ш7 16 1Д9

Петроселиновая цис-6-октадеценоваякислота 18 1ш12 18 1Д6

Олеиновая цис-9-октадеценоваякислота 18 1ш9 18 1Д9

Элаидиновая транс-9-октадеценоваякислота 18 1ш9 18 1Д9

Дис-вакценовая цис-11-октадеценоваякислота 18 1ш7 18 1Д11

Транс-вакценовая транс-11-октадеценоваякислота 18 1ш7 18 1Д11

Гадолеиновая цис-9-эйкозеноваякислота 20 1ш11 19 1Д9

Гондоиновая цис-11-эйкозеноваякислота 20 1ш9 20 1Д11

Эруковая цис-9-доказеноваякислота 22 1ш13 22 1Д9

Нервоновая цис-15 -тетракозеноваякислота 24 1ш9 23 1Д15

Примечание: 1 - т - номенлатура, нумерация атомов углерода с СН¡-конца; 2 - А - номенлатура, нумерация атомов углерода с СООН-конца.

Таблица 3 - Наиболее распространенные полиненасыщенные ЖК (П ПНЖК)

Тривиальное название Систематическое название ш1 Д2

Сорбиновая транс,транс-2,4-гексадиеновая кислота 6:2ш3 6:2Д2,4

Линолевая цис,цис-9,12-октадекадиеноваякислота 18:2ш6 18:2Д9,12

Линоленовая цис, цис, цис-6,9,12-октадекатриеноваякислота 18:3ш6 18:3Д6,9,12

Линоленовая цис,цис,цис-9,12,15-октадекатриеноваякислота 18:3ш3 18:3Д9,12,15

Арахидоновая цис-5,8,11,14-эйкозотетраеноваякислота 20:4ш6 20:4Д5,8,11,14

Дигомо-у-линоленовая 8,11,14-эйкозатриеновая кислота 20:3ш6 20:3Д8,11,14

- 4,7,10,13,16- докозапентаеноваякислота 20:5ш4 20:5Д4,7,10,13,16

Тимнодоновая 5,8,11,14,17- эйкозапентаеноваякислота 20:5ш3 20:5Д5,8,11,14,17

Цервоновая 4,7,10,13,16,19-докозагексаеноваякислота 22:6ш3 22:3Д4,7,10,13,16,19

- 5,8,11-эйкозатриеновая кислота 20:3ш9 20:3Д5,8,11

Примечание: 1 - т - номенлатура, нумерация атомов углерода с СН ¡-конца; 2 - А - номенлатура, нумерация атомов углерода с СООН-конца.

Основная роль ЛК и АЛК в организме животных и человека состоит в том, что они могут являться биохимическими предшественниками физиологически значимых длинно-цепочечных ПНЖК с 20-22 атомами углерода. К длинноцепочечным ПНЖК, называемым частично незаменимыми, относятся арахидоновая (эйкозатетраеновая) кислота (20:4п-6, АРК), эйкозапентаеновая кислота (20:5 п-3, ЭПК) и докозагексаеновая кислота (22:6п-3, ДГК). Как это видно из условных обозначений, АРК относится к семейству омега-6, а ЭПК

и ДГК - к семейству омега-3. Только растения имеют десатуразы Д15 и Д12 и могут синтезировать исходные ПНЖК семейства омега-6 и омега 3, т. е. линолевую и альфа-линолено-вую кислоты. Животные, получив ЛК и АЛК с пищей, способны синтезировать из них длин-ноцепочечные ПНЖК омега-6 (АРК) и омега-3 (ЭПК, ДГК). В синтезе участвуют ферменты, удлиняющие углеродную цепь (элонгазы), а также десатуразы Д5 и Д6. Следует отметить, что эффективность синтеза длинноцепочечных ПНЖК у животных и человека невелика, хотя именно эти кислоты играют важнейшую роль в функционировании организма.

Жирные кислот, двойные связи которых имеют транс-конфигурацию, в мембранах клеток встречаются очень редко. Продуктами ферментативного дегидрирования под воздействием десатураз являются цис-изомеры поэтому абсолютное большинство двойных связей в ацильных группах структурных липидов биологических мембран имеет цис-кон-фигурацию [21]. Транс-ЖК попадают в организм посредством питания, через молочные продукты, мясо, гидрированные растительные масла. Наиболее распространенной транскислотой является элаидиновая кислота.

Большое количество транс-ЖК образуется как побочные продукты частичного гидрирования растительных жиров, используемых в производстве пищевой продукции. Возрастание случаев сердечных болезней, связанных с возросшим употреблением гидрированных растительных жиров, привело к запрету транс-жиров в некоторых странах [12]. Остается открытым вопрос, почему цис-ЖК имеют важное значение для здоровья человека, а транс-ЖК наносят вред организму. Ключ к ответу может находиться в разности температур плавления. Транс-ЖК имеют гораздо более высокую температуру плавления, чем соответствующий гомологический ряд цис-ЖК. Например, мононенасыщенная транс-кислота -элаидиновая - обладает температурой плавления 43,7 °С, а соответствующий ей цис-изомер олеиновая кислота - температуру плавления 16,2 °С. Для сравнения, насыщенная стеариновая кислота с тем же количеством атомов углерода (С18) обладает температурой плавления 69,6°С. Можно сделать вывод, что из двух ненасыщенных кислот, содержащих 18 углеродных атомов, и двойную связь у 9 углеродного атома, элаидиновая по свойствам более схожа с насыщенной жирной кислотой. Элаидиновая кислота является одной из распространённых транс-ЖК, применяемых в процессе приготовления продуктов. Было установлено, что она ингибирует активность десатураз, из-за чего ухудшается конвертация линолеиновой кислоты в арахидоновую. Также транс-ЖК являются причиной воспалений и кальцинации артериальных клеток, которые увеличивают риск инфаркта миокарда [22].

1.2 Биологическая роль жирных кислот и их значение в медицине и токсикологии 1.2.1 Химические классы липидов плазмы крови

В крови человека ЖК присутствуют либо в свободном виде, либо в виде ацильных функциональных групп в т.н. липидах, представленных тремя основными классами соединений: холестерин и его эфиры, триглицериды и фосфолипиды.

О

К^О

К

о

Л

о

о

-ОТКз

о

Глицеролипиды

О

ОН ОН Эйкозаноиды

-О. / Р.

О

К^О

О НО

Глицерофосфолипиды

О"Х

I!

О

А

К ОН Жирные кислоты

I

О

л

^ БОоД Ацетил-КоА

ОО

м и

О ОН

ОН ОН

Изопентенилпиро фосфат

Сфинголипиды

Стеролы

О

ОН ОХ

О^МН К

Пренолы

Рисунок 2 - Разнообразие липидов плазмы крови. Взаимосвязи между основными категориями липидов показаны начиная с ацетил-КоА, который является строительным блоком

в биосинтезе ЖК [23].

Из всех видов биологических соединений в организме, липиды выделяются значительным химическим разнообразием (см. рисунок 2). Липиды представляют собой большую группу природных гидрофобных соединений с разнообразной структурой и биологическими функциями, объединяемые в единую категорию по следующим трем признакам:

1) Плохую растворимость в воде и хорошую в неполярных растворителях;

2) Нахождение в природе в виде настоящих или потенциальных сложных эфиров высших ЖК;

3) Присутствие во всех живых организмах.

Биологические функции липидов: структурная, энергетическая, защитная и регуля-торная. Количество и состав резервных липидов непостоянны и зависят от режима питания

п

и физического состояния организма. Количество и состав структурных липидов в организме строго постоянны, генетически обусловлены и в норме, как правило, не зависят от режима питания и функционального состояния организма [24].

Наибольшим химических разнообразием обладает класс сфинголипидов, а стеролы, представляющие собой эфиры холестерола, являются основными липидными компонентами плазмы крови по молярному содержанию.

Жирные кислоты

Свободные ЖК представляют собой лишь небольшую фракцию от общего содержания ЖК плазмы крови, но, тем не менее, они являются высокоактивным классом липидов. Основным источником СЖК, качественный состав которых сильно зависит от диеты, является жировая ткань [25].

В нормальных условиях высвобождение ЖК из жировой ткани жестко регулируется в соответствии с энергетическими потребностями тканей. Однако, в результате некоторых метаболических расстройств, этот гомеостаз может быть нарушен, и тогда сдвиги в сторону повышения липолиза приводят к высвобождению избыточных колчиеств СЖК по отношению к потребностям тканей.

Основной пул всех свободных ЖК в циркулирующей крови составляют три ЖК: олеиновая кислота (18:1) является основным компонентом, пальмитиновая кислота (16:0) и стеариновая (18:0). Вместе эти три ЖК составляют около 78% от общего количества СЖК в крови. Линолевая кислота (18:2) и арахидоновая кислоты (20:4) являются основными ПНЖК (около 8% от общего числа); а-линоленовая кислота (18:ш-3), эйкозапентаеновая кислота (20:5), и докозагексаеновая кислоты (22: 6), также присутствуют в значимых концентрациях. Вместе они составляют около 1% всех свободных ЖК.

Важным классом метаболитов ЖК являются т.н. эйкозаноиды которые представляют собой класс биологически активных медиаторов, образующиеся при метаболизме арахидо-новой кислоты или некоторых других ПНЖК [26]. Многие эйкозаноиды обладают воспалительным или противовоспалительным действием. Основные классы липидов плазмы крови представлены в таблице 4.

Глицеролипид ы

Глицеролипиды представляют собой сложные эфиры трёхатомного спирта глице-рола и ЖК. Глицерол может быть связан с одной, двумя или тремя жирными кислотами, соответственно образуя моно-, ди- или триацилглицериды [6].

Количество Суммарная концентра- Суммарная

Химический класс представит елей класса ция в плазме крови, нмоль/мл концентрация, мг/дл

Жирные кислоты

ЖК 31 214 5,82

Эйкозаноиды 76 0,071 0,002

Глицеролипиды

Триацилглицериды 18 1058 90,60

1,2-диацилглицериды 28 39 2,36

1,3 -диацилглицериды 27 13 0,81

Глицерофосфолипиды

Глицерофосфоэтаноламины 38 435 32,70

Лизофосфатидилэтаноламины 7 36,6 1,78

Глицерофосфохолины 31 1974 157,00

Лизофосфатидилхолины 12 103 5,25

Глицерофосфосерины 20 7 0,56

Глицерофосфоглицериды 16 6,12 0,48

Глицерофосфаты 15 2,5 0,17

Глицерофосфоинозитолы 19 31,5 2,74

К-ацилглицерофосфосерины 2 0,013 0,00

Сфинголипиды

Сфингомиелины 101 303 22,80

Моногексозилсерамиды 56 2,3 0,18

Церамиды 41 11,6 0,73

Сфингоиды 6 0,6 0,02

Стеролы

Свободные стеролы 14 826 31,80

Этерифицированные стеролы 22 2954 114,00

Пренолы

Долихолы 6 0,025 0,00

Коэнзим^ 2 4,59 0,39

Моно- и диацилглицериды образуются на промежуточных этапах распада и синтеза триацилглицеридов. Заместители атомах углерода в глицерине имеют различную пространственную конфигурацию, вследствие чего можно наблюдать стереоселективность ферментативного ацилирования.

О

I д

О 1 3 О

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Орлова Татьяна Игоревна, 2016 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Крылов А.И., Хлебникова Н.С., Полуяктова С.К. // Журн анал хим. - 1991. - Т. 46. - №12. - С. 2428-2435

2. Уколов А.И., Орлова Т.И., Савельева Е.И., Радилов А.С. Хроматомасс-спектрометрическое определение свободных жирных кислот в плазме крови и моче с использованием экстрактивного алкилирования // Журнал аналитической химии, 2015, Т. 70, № 9, С. 968-975.

3. Орлова Т.И., Уколов А.И., Савельева Е.И., Радилов А.С. Определение свободных и этерифицированных жирных кислот в плазме крови методом газовой хроматоматографии с масс-селективным детектированием // Аналитика и контроль, 2015, Т. 19, № 2, С. 183-188.

4. Уколов А.И., Орлова Т.И., Радилов А.С. Влияние биологической матрицы и условий хранения на определение жирных кислот плазмы крови методом ГХ-МС // Вестн. Санкт-Петерб. гос. ун-та. 2015. Сер. 4. В печати.

5. Электронный ресурс http://lipidlibrary.aocs.org/lipids/fa branc/file.pdf от 04.07.2015

6. Электронный ресурс http://biochemistry.ru/biohimija_severina/B5873Part58-371.

7. Электронный ресурс http://intranet.tdmu.edu.ua/data/kafedra/internal/chemistry/clas-ses_stud/ru/sto-

mat/ptn/1/биоорганическая%20химия/03.%20классификация%20липидов.%20фосфолипид bi.htm

8. Bicalha B., David F., Rumplel K., Kindtd E., Pat Sandra. Creating a fatty acid methyl ester database for lipid profiling in a single drop of human blood using high resolution capillary gas chromatography and mass spectrometry //J of Chromatogr A. - 2008. - V. 1211 - P. 120-128.

9. Ashraf-Khorassani M., Isaac G., Rainville P., Fountain K., et al. Study of UltraHigh Performance Supercritical Fluid Chromatography to Measure Free Fatty Acids With Out Fatty Acid Ester Preparation // J of Chromatogr. - 2015. - V.997. - P. 45-55.

10. Электронный ресурс http://dic.academic.ru/dic.nsf/ruwiki/80433 от 04.07.2015

11. Van Meer G, Voelker DR, Feigenson GW. Membrance lipids: where they are and how they behave// Nat Rev Mol Cell Biol. - 2008. - V.9(2). - P. 112-24.

12. Stillwell W. An Introduction to Biological Membranes. 2013. Chapter 4 - Membrane Lipids: Fatty Acids. P. 43-56

13.Электронный ресурс http://chem21.info/info/1350323/ от 04.07.2015

14. Тюкавкина Н. А., Бауков Ю. И., Зурабян С.Э. Биоорганическая химия. - 2010. - 416 с.

15. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. 1998 г.

16. Holman RT. Nutritional and metabolic interrelationships between fatty acids// Fed Proc. -1964. - V. 23. -P. 1062-1067

17. Электронный ресурс http://nenuda.ru/ионизирующего-излучения-на-процессы-перекисного-окисления. html

18. электронный ресурс от 04.07.2015 https://ru.wikipe-dia.org/wiki/%C6%E8%F0%ED%FB%E5 %EA%E8%F 1%EB%EE%F2%FB

19. IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (CBN) The Nomenclature of Lipids Recommendations, 1976 Eur. J. Biochem. 79, 11-21(1977)

20. Гладышев М.И. Незаменимые полиненасыщенные ЖК и их пищевые источники для человека. //Journal of Siberian Federal University. Biology. - 2012. - В. 4. - P. 352-386.

21. Боровик Т.Э., Грибакин С.Г., Звонкова Н.Г., Скворцова В.А., Степанова Т.Н., Шмакова С.Г.. Питание и развитие мозга: роль длинноцепочечных полиненасыщенных ЖК ФГБУ. // Научный центр здоровья детей РАМН, 2ГОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Росздрава. Москва. Питание здорового и больного ребенка.

22. Kummerow F. A. The negative effects of hydrogenated trans fats and what to do about them.// Atherosclerosis. - 2012. - V. 205(2). - P. 458-465

23. Quehenberger O. et al. Lipidomics reveals a remarkable diversity of lipids in human plasma. // Journal of Lipid Research. - 2010. - V. 51. - P. 3299-3305.

24. Кольман Я., К.- Г. Рем Наглядная БИОХИМИЯ Перевод с немецкого профессора, д-ра биол. наук Л. В. Козлова, канд. биол. наук Е. С. Левиной и канд. хим. наук П. Д. Решетова под редакцией канд. хим. наук П. Д. Решетова и канд. хим. наук Т. И. Соркиной Москва "Мир" 2000

25. Hertzel A. V., Thompson B.R., Wiczer B.M., Bernlohr D.A. Lipid metabolism in adipose tissue./ In Biochemistry of Lipids, Lipoproteins and Membranes. D. E. Vance and J. E. Vance. Amsterdam. - 2008. - P. 277-304.

26. Funk C. D. Prostaglandins and leukotrienes: advances in eicosanoid biology. //Science. - 2001. - V. 294. - P. 1871 - 1875.

27. Электронный ресурс от 10.07.2015http://biokhimija.ru/lekcii-po-biohimii/24-stroenie-obmen-lipidov/133 -fosfolipidy.html

28. Электронный ресурс от 10.07.201 5http://www.xumuk.ru/biologhim/076.html

29. Электронный ресурс http://lipidlibrary.aocs.org/Lipids/whatlip/file.pdf

30. Электронный ресурс http://themedicalbiochemistrypage.org/lipids.php

31. Dowhan W., Bogdanov M., Mileykovskaya E. Lipoproteins and Membranes (Fifth Edition) //Biochemistry of Lipids. - 2008. - P. 1-37.

32. Электронный ресурс https://en.wikipedia.org/wiki/Sphingolipid от 10.07.2015

33. Северин Е С. Биохимия. /Изд. ГЭОТАР-МЕД. 2003.

34. Гладышев М.И. Незаменимые полиненасыщенные ЖК и их пищевые источники для человека. //Journal of Siberian Federal University. Biology 4. - 2012. - V. 5 - P. 352-386.

35. Warensjo E., Sundstrom J., Vessby B., Cederholm T., Riserus U. Markers of dietary fat quality and fatty acid desaturation as predictors of total and cardiovascular mortality: a population-based prospective study1-3. 2008. - V. 88. - P. 203-209.

36. Jeyakumar S.M, Lopamudra P., Padmini S., Balakrishna N. et al. Fatty acid desaturation index correlates with body mass and adiposity indices of obesity in Wistar NIN obese mutant rat strains WNIN/Ob and WNIN/GR-Ob Nutrition. // Metabolism Nutrition & Metabolism. - 2009. - V. 6:27

37. Боровик Т.Э., Грибакин С.Г., Звонкова Н.Г., Скворцова В.А. и др. Питание и развитие мозга: роль длинноцепочечных полиненасыщенных ЖК ФГБУ Научный центр здоровья детей РАМН, 2ГОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Росздрава, Москва. 2012.

38. Simopoulos AP. The importance of the omega-6/omega-3 fatty acid ratio in cardiovascular disease and other chronic diseases.//Exp Biol Med (Maywood). - 2008. - V. 233. - P. 674-688.

39. Harris W.S., Mozaffarian D., Rimm E. et al. Circulation. Omega-6 fatty acids and risk for cardiovascular disease: a science advisory from the American Heart Association Nutrition Subcommittee of the Council on Nutrition, Physical Activity, and Metabolism; Council on Cardiovascular Nursing; and Council on Epidemiology and Prevention.//Circulation. - 2009. - V. 119. - P. 902-907.

40. Williams C.D., Whitley B.M., Hoyo C. et al. A high ratio of dietary n-6/n-3 polyunsaturated fatty acids is associated with increased risk of prostate cancer.// Nutr Res. - 2011. - V. 31(1) - P.1-8.

41. Richard J. Deckelbaum. n-6 and n-3 Fatty acids and atherosclerosis: ratios or amounts?// Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. - 2010. - V.30 - P. 2325-2326.

42. Chang C.L., Seo T., Matsuzaki M. et al. n-3 fatty acids reduce arterial LDL-cholesterol delivery and arterial lipoprotein lipase levels and lipase distribution.//Arterioscler Thromb Vasc Biol. -2009. - V. 29. - P. 555-561.

43. Seo T., Qi K., Chang C. et al. Saturated fat-rich diet enhances selective uptake of LDL choles-teryl esters in the arterial wall.// J Clin Invest. - 2005. - V. 115. - P. 2214-2222.

44. Hegele R.A. Plasma lipoproteins: genetic influences and clinical implications.// Nat. Rev. Genet. - 2009. - V. 10. - P.109-121.

45 Xua Y., Hoa W., Xud F., Wene T. Exploratory investigation reveals parallel alteration of plasma fatty acids and eicosanoids in coronary ^te^ disease patients.// Prostaglandins & Other Lipid Mediators. - 2013. - V.106. -P. 29-36

46. Munir R., Usman H., Hasnain S., Smans K. , Kalbacher H. et al. Atypical plasma lipid profile in cancer patients: Cause or consequence?// Biochimie. - 2014. -V.X. - P. 1-10

47. Rysman E., Brusselmans K., Scheys K., Timmermans L. et al. De novo lipogenesis protects cancer cells from free radicals and chemotherapeutics by promoting membrane lipid saturation. // Cancer Res. - 2010. - V. 70. - P. 8117-8126

48. Ventura R., Mordec K., Waszczuk J., Wang Z. et al. Inhibition of de novo Palmitate Synthesis by Fatty Acid Synthase Induces Apoptosis in Tumor Cells by Remodeling Cell Membranes, Inhibiting Signaling Pathways, and Reprogramming Gene Expression. // EBioMedicine. 2015. -V.2. - №8. - P.808-824.

49. Mocelina M., Camargoa C.Q. et al. A systematic review and meta-analysis of the n-3 polyunsaturated fatty acids effects on inflammatory markers in colorectal cancer.// Clinical Nutrition. Available online 29 April 2015

50. Caia F., Sorg O., Grancia V., Lecumberria E. et al. Interaction of ro-3 polyunsaturated fatty acids with radiation therapy in two different colorectal cancer cell lines.// Clinical Nutrition. -2014.- V. 33. - P. 164-170.

51. Sawada N., Inoue M., Iwasaki M., Sasazuki S. et al. Consumption of n-3 Fatty Acids and Fish Reduces Risk of Hepatocellular Carcinoma. //Japan Public Health Center-Based Prospective Study Group Gastroenterology. - 2012. - V. 142. - №, 7. - P. 1468-1475.

52. Campa D., Husing A., Chang-Claude J., Dostal L., et al. Genetic variability of the fatty acid synthase pathway is not associated with prostate cancer risk in the European Prospective Investigation on Cancer. //European Journal Of Cancer. - 2011. - V. 47. - P. 420 - 427

53. Jurczyszyna A., Czepielb J., Gdula-Argasinskac J., Paskod P. et al. Plasma fatty acid profile in multiple myeloma patients. // Leukemia Research. -2015. - V.39. - P. 400-405

54 Wuwen L., Tongshu Yang, Identification of possible biomarkers for breast cancer from free fatty acid profiles determined by GC-MS and multivariate statistical analysis. //Clinical Biochemistry. - 2012. - V. 45. - P. 127-133

55. Shannona J., O'Malleya J., Moria M., Garzotto M. et al. Erythrocyte fatty acids and prostate cancer risk: A comparison of methods.// Prostaglandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids. - 2010. - V.183. - P. 161-169

56. Sosnowski R., Zawistowski J. Plasma Phospholipid Fatty Acids and Prostate Cancer Risk in the SELECT Trial. // European Urology. - 2014. - V.65. - P. 1012-1020.

57. Chan J.M., Gann P.H., Giovannucci E.L. Role of diet in prostate cancer development and progression. //J. Clin Oncol. - 2005. - V. 23. - P. 8152-8160.

58. Xua Y., Hoa W.E., Xud F., Wene T. et al. Exploratory investigation reveals parallel alteration of plasma fatty acids and eicosanoids in coronary artery disease patients.// Prostaglandins & Other Lipid Mediators. - 2013. - V.106. - P. 29-36

59. Lichtenstein A.H. Trans fatty acids and blood lipid levels, parameters of cholesterol metabolism, and hemostatic factors.// Nutritional Biochemistry. - 1998. - V.9. - №5. - P. 244-248

60. Havmoeller R., Reinier K., Teodorescu C., Ahmadi N. et al. Elevated plasma free fatty acids are associated with sudden death: A prospective community-based evaluation at the time of cardiac arrest. // Heart Rhythm. - 2014. - V.11. - P. 691-696

61. Oliver M.F., Opie L.H. Effects of glucose and fatty acids on myocardial ischaemia and arrhythmias.// Lancet. - 1994. - V. 343. - P.155-158

62. Song T. , Changa Y., Shin M., Heo J. et al. Low levels of plasma omega 3-polyunsaturated fatty acids are associated with cerebral small vessel diseases in acute ischemic stroke patients. // Nutrition Research. - 2015. - V.35. - №5. - P. 368-374

63. Forouhi N., Koulman A., Sharp S.J. et al. Differences in the prospective association between individual plasma phospholipid saturated fatty acids and incident type 2 diabetes: the EPIC-InterAct case-cohort study . //The Lancet Diabetes & Endocrinology. - 2014. - V.2. - P. 810-818

64. Noorshahi N., Sotoudeh G., Djalalia M., Reza M. APOA II genotypes frequency and their interaction with saturated fatty acids consumption on lipid profile of patients with type 2 diabetes.// Clinical Nutrition. - 2015. - in press

65. Уколов А.И., Орлова Т.И., Мигаловская Е.Д., Войтенко Н.Г., Гончаров Н.В. Метаболомика: на пути интеграции биохимии, аналитической химии, информатики // Успехи современной биологии, 2015, Т. 135, № 1, С. 3-17.

66. Weinberg J.M. Lipotoxicity.// Kidney Int. - 2006. - V. 70. - P. 1560-1566

67 Charles M.A., Eschwege E., Thibult N., Claude J.R. et al. The role of non-esterified fatty acids in the deterioration of glucose tolerance in Caucasian subjects: results of the Paris Prospective Study. //Diabetologia. - 1997. - V. 40. - № 9. - P. 1101-1106.

68. Itoh Y., Kawamata Y., Harada M., Kobayashi M. et al. Free fatty acids regulate insulin secretion from pancreatic beta cells through GPR40.// Nature. - 2003. - V. 422. - № 6928. - P. 173176.

69. Listenberger L.L., Schaffer J.E. Mechanisms of lipoapoptosis: implications for human heart disease. //Trends Cardiovasc. Med. - 2002. - V. 12. - P. 134-138.

70. Carpentier A.C. Postprandial fatty acid metabolism in the development of lipotoxicity and type 2 diabetes. //Diabetes Metab. - 2008. - V. 34. - P. 97-107.

71. Han L.D., Xia J.F., Liang Q.L., Wang Y. et al. Plasma esterified and non-esterified fatty acids metabolic profiling using gas chromatography-mass spectrometry and its application in the study of diabetic mellitus and diabetic nephropathy.// Anal. Chim. Acta. - 2011. - V. 689. - P. 85-91.

72. Poitout V., Hagman D., Stein R., Artner I. et al. Regulation of the insulin gene by glucose and fatty acids.// J. Nutr. - 2006. - V. 136. - P. 873-876.

73. Radin N. Killing tumours by ceramide-induced apoptosis: a critique of available drugs.// Bio-chem. J. - 2003. - V. 371. - P. 243-256.

74. Suzuki K., Babazono T., Murata H., Iwamoto Y. Clinical significance of urinary liver-type fatty acid-binding protein in patients with diabetic nephropathy. //Diabetes Care. - 2005. - V. 28.

- P. 2038-2039.

75. Dabla P.K. Renal function in diabetic nephropathy.// World J. Diabetes. - 2010. - V.1. - P. 48-56

76. Neuromuscular Disorders of Infancy, Childhood, and Adolescence (Second Edition) A Clinician's Approach, Chapter 40 - Lipid Storage Myopathies Due to Fatty Acid Oxidation Defects Ingrid Tein. Edited by Darras B.T., Jones H. R., Ryan M M. and De Viv D C. - 2015. - P. 761795.

77. Zhang H., Wang Z, Oscar Liu. Note to users Development and validation of a GC-FID method for quantitative analysis of oleic acid and related fatty acids// Journal of Pharmaceutical Analysis.

- 2015. - In Press

78. Wei G., Zeng E.Y. Gas chromatography-mass spectrometry and high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry in quantifying fatty acids.// Trends in Analytical Chemistry. - 2011. - V. 30. - No. 9. - P. 60-68.

79. Shantha N.C., Napolitano. Gas chromatography of fatty acids// Journal of Chromatography. -1992. - V.624. - P. 37-51

80. Shi W., Li J., He B., Yan F. et al. Biodiesel production from waste chicken fat with low free fatty acids by an integrated catalytic process of composite membrane and sodium Methoxide // Bioresource Technology. - 2013. - V. 139. - P. 316-322.

81. Morrison W.R., Smith L.M. Preparation of fatty acid methyl esters ^ dimethylacetals from lipids with boron fluoride-methanol.//J.LipidRes. - 1964. - V5. - P600-608.

82. Lands W., Libelt B., Morris A., Kramer N.C. Maintenance of lower proportions of ( n - 6) eicosanoid precursors in phospholipids of human plasma in response to added dietary (n - 3) fatty acids. //.Biochimica et Biophysica Acta. - 1992. - V.1180. - P.147-162.

83. Vognild E., Elvevoll E.O., Brox J., Olsen R.L. et al. Effects of dietary marine oils and olive oil on fatty acid composition, platelet membrane fluidity, platelet responses, and serum lipids in healthy humans.// Lipids. - 1998. - V. 33. - P. 427-436.

84. Ostermann A. I., Müller M.,Willenberg I. , HelgeScheb N. Determining the fatty acid composition in plasma and tissues as fatty acid methyl esters using gas chromatography - a comparison of different derivatization and extraction procedures. //Prostaglandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids . - 2014. - V. 91. - P. 235-241.

85. Eder K. Gas chromatographic analysis of fatty acid methyl esters //Journal of Chromatography B. - 1995. - V.671.- P. 113-131.

86. Lepage G., Roy C.C. Direct transesterification of all classes of lipids in a one-step reaction.// G. Lipid Res. - 1986. - V.27. - P. 114-120.

87. Bicalha B., David F., Rumplel K., Kindtd E. et al. Creating a fatty acid methyl ester database for lipid profiling in a single drop of human blood using high resolution capillary gas chromatography and mass spectrometry // //J of Chromatogr A. - 2008. - V. 1211. - P. 120-128.

88. Yi L., He J., Liang Y., Yuan D. et al. Simultaneously quantitative measurement of comprehensive profiles of esterified and non-esterified fatty acid in plasma of type 2 diabetic patients // Chemistry and Physics of Lipids. - 2007. - V. 150. - P. 204-216.

89. Dai L., Gon9alves C.M, Lin Z., Huang J. et al. Exploring metabolic syndrome serum free fatty acid profiles based on GC-SIM-MS combined with random forests and canonical correlation analysis // Talanta. - 2015. - V. 135. - P. 108-114.

90. Wu H., Xue R., Dong L., Liu T. et al. Metabolomic profiling of human urine in hepatocellular carcinoma patients using gas chromatography/mass spectrometry // Analytica Chimica Acta. -2009. - V. 648. - P. 98-104.

91. Kelley R.I. Quantification of 3-methylglutaconic acid in urine, plasma, and amniotic fluid by is tu dilution gas hromatography~mass spectrometry//Ciinica Chirnica Acta. - 1993. - V. 220. - P. 3S7-164.

92. Yang Y.J., Choi M.H., Paik M., Yoon H. et al. Gas chromatographic-mass spectrometric determination of plasma saturated fatty acids using pentafluorophenyldimethylsilyl derivatization. // J Chromatogr B. - 2000. - V. 742. - P. 37-46

93. Kortza L., Dorowa J., Beckera S., Thierya J. et al. Fast liquid chromatography-quadrupole linear ion trap-mass spectrometry analysis of polyunsaturated fatty acids and eicosanoids in human plasma// //J of Chromatogr B. - 2013. - V. 927. - P. 209-213.

94. Amet Y., Adas F., Berthou F. High performance liquid chromatography of fatty acid metabolites Improvement of sensitivity by radiometric, fluorimetric and mass spectrometric methods.// Analytica Chimica Acta. - 2002. - V. 465. - P.193-198.

95. Levison B.S., Zhang R., Wang Z., Fu X. et al. Quantification of fatty acid oxidation products

using online high performance liquid chromatography tandem massspectrometry.// Free Radical

108

Biology and Medicine. - 2013. - V. 59. - P. 2-13.

96. Pettinella C., Lee S., Cipollone F., Blair I.A. Targeted quantitative analysis of fatty acids in atherosclerotic plaques by high sensitivity liquid chromatography/tandem mass spectrometry.// J of Chromatogr B. - 2007. - V. 850. - P. 168-176.

97. Porto B.L., Faria I.D., de Oliveira Mendes T., de Oliveira M. A.L. Fast screening method for the analysis of trans fatty acids in processed food by CZE-UV with direct detection //Food Control. - 2015. - V. 55. - P. 230-235.

98. Otieno A.C., Mwongela S.M. Capillary electrophoresis-based methods for the determination of lipids. //A review analytica chimica acta. -2008. - V. 624. - P. 163-174.

99. Oliveira M.A.L., Solis V.E.S., Gioielli L.A., Polakiewicz B. et al. Method development for the analysis of trans-fatty acids in hydrogenated oils by capillary electrophoresis. //Electrophoresis. -2003.- V. 24. - P. 1641-1647.

100. Castro Barra P., Barra M.M., Azevedo M.S., Fett R. et al. A rapid method for monitoring total trans fatty acids (TTFA) during industrial manufacturing of Brazilian spreadable processed cheese by capillary zone electrophoresis.// Food Control. -2012. - V. 23. - P. 456-461.

101. Gaoa F., Donga J., Li W., Wang T., et al. Separation of phospholipids by capillary zone electrophoresis with indirect ultraviolet detection. // J of Chromatogr A. -2006. - V. 1130. - P. 259-264.

102. Petersson M.A., Hulthe G., Fogelqvist E. New sheathless interface for coupling capillary electrophoresis to electrospray mass spectrometry evaluated by the analysis of fatty acids and prostaglandins. // J of Chromatogr A. - 1999. - V. 854. - P. 141-154.

103. Alexander L.R., Justice J.B. Fatty acid composition of human erythrocyte membranes by capillary gas chromatogrsphy mass-specrometry. // J of Chromatogr. - 1985. - V. 342. - P. 1-12.

104. Yi L., He J., Liang Y., Yuan D. Et al. Simultaneously quantitative measurement of comprehensive profiles of esterified and non-esterified fatty acid in plasma of type 2 diabetic patients. // Chemistry and Physics of Lipids. - 2007. - V. 150. - P. 204-216.

105. Zheng X., Shen J., Liu Q., Wang S. et al. Plasma fatty acids metabolic profiling analysis of coronary heart disease based on GC-MS and pattern recognition. // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2009. - V.49. - P. 481-486.

106. Jones P.M., Michael J. Clinical applications of 3-hydroxy fatty acid analysis by gas chromatography-mass spectrometry. //Biochimica et Biophysica Acta. - 2011. - V. 1811. - P. 657-662

107. Zhang J., Pearson T., Matharoo-Ball B., Ortori C.A. et al. Quantitative profiling of epoxye-icosatrienoic, hydroxyeicosatetraenoic, and dihydroxyeicosatetraenoic acids in human intrauterine tissues using liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry//Analyti-cal Biochemistry. - 2007. - V. 365. - P. 40-51

108.Электронные ресурсы http://dic.academic.ru/dic.nsf/enc_chemis-

try/2535/%D0%9C%D0%95%D0%96%D0%A4%D0%90%D0%97%D0%9D%D0%AB%D0%

99

109 Fiorini D., Pacetti D., Gabbianelli R., Gabrielli S. et al. A salting out system for improving the efficiency of the headspace solid-phase microextraction of short and medium chain free fatty acids. // J of Chromatogr A. - 2015. - in press.

110 Rincón A.A., Pino V., Ayala J.H., Afonso A.M. Multiple headspace solid-phase microextraction for quantifying volatile free fatty acids in cheeses.// Talanta. - 2014. - V.129. - P. 183190.

111 Bianchi F., Dall'Asta M., Del Rio D., Mangia A. et al. Development of a headspace solidphase microextraction gas chromatography-mass spectrometric method for the determination of short-chain fatty acids from intestinal fermentation.// Food Chemistry. - 2011. - V. 129. - P. 200205

112 Sankaranarayanan R., Wahrendorf J., Demaret E. International Agency for Research on Cancer. Directory of on-going research in cancer epidemiology. Lyon, France: International Agency for Research on Cancer. 1996. - P.789-803.

113 Multiple Risk Factor Intervention Trial Group. Multiple risk factor intervention trial: risk factor changes and mortality results. JAMA 1982;248:1465-1477

114 The ARIC Investigators. The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) Study: design and objectives. //Am J Epidemiol. - 1989. - V.129. - P. 687-702.

115. Pasikanti K.K., Ho P.C., Chan E C. // Rapid Commun Mass Spectrom.- 2008. - V. 22. - P. 2984-2990.

116. Want E.J., Cravatt B.F., Siuzdak G. The expanding role of mass spectrometry in metabolite profiling and characterization. // Chembiochem. - 2005. - V. 6. - P. 1941-1951.

117. Dunn W.B., Broadhurst D., Ellis D.I., Brown M., Halsall A., O'Hagan S. A GC-TOF-MS study of the stability of serum and urine metabolomes during the UK Biobank sample collection and preparation protocols.// Int J Epidemiol. - 2008. - V. 37. - № 1. - P.23-30.

118. Paltiel L., R0nningen K.S., Meltzer H.M., Baker S.V. et al. Evaluation of Freeze Thaw Cycles on stored plasma in the Biobank of the Norwegian Mother and Child Cohort Study.// Cell Preserv Technol. - 2008. - V.6. - P. 223-230.

119. Yi L., Heb J., Liang Y., Yuan D. et al. Simultaneously quantitative measurement of comprehensive profiles of esterified and non-esterified fatty acid in plasma of type 2 diabetic patients. // Chemistry and Physics of Lipids. - 2007. - V. 150. - P. 204-216.

120. Matthan N.R., Blanche I., Resteghini N., Ausman L. M. Long-term fatty acids stability in human serum cholesteryl ester, triglyceride and phospholipid fractions. // The Journal of Lipid Research. - 2010. - V. 51. - P. 2826-2832.

121. Hodson L., Skeaff C.M., Wallace A. J. Arribas G.L. Stability of plasma and erythrocyte fatty acid composition during cold storage. // Clinica Chimica Acta. -2002. - V.321. - P. 63-67.

122. Nurhasan M., Roos N., Aristizabal Henao J.J., Chamnan C.,.Stark K.D , Lauritzen L. Effect of storage temperature in a Cambodian field setting on the fatty acid composition in whole blood.// Prostaglandins, Leukotrienes and Essential FattyAcids. - 2015. - V. 96. - P. 57-61.

123. Metherel A.H., AristizabalHenao J.J., Stark K.D. EPA and DHA levels in whole blood decrease more rapidly when stored at -20C as compared with room temperature, 4 and -75C //Lipids. -2013. - V. 48. - P. 1079-1091.

124. Miller P.E., Van Elswyk M., Alexander D.D. Long-chain omega-3 fatty acids eicosapentae-noic acid and docosahexaenoic acid and blood pressure: a meta-analysis of randomized controlled trials.// Am J Hypertens. - 2014. - V. 27. - P. 885-896.

125.Cohen B.E., Garg S.K., Ali S., Harris W.S. et al. Red blood cell docosahexaenoic acid and eicosapentaenoic acid concentrations are positively associated with socioeconomic status in patients with established coronary artery disease: data from the Heart and Soul Study.//J Nutr. - 2008. - V. 138. - № 6 - P. 1135-1140.

126. Restuccia D., Spizzirri G., Bonesi M., Rosa T. et al. Evaluation of fatty acids and biogenic amines profiles in mullet and tuna roe during six months of storage at 4 C. //Journal of Food Composition and Analysis. - 2015. - V. 40. - P 52-60.

127. Huynh M.D., Kitts D.D., Hu C., Trites A.W . Comparison of fatty acid profiles of spawning and non-spawning Pacific herring, Clupea harengus pallasi. //Comparative Biochemistry and Physiology. Part B: Biochemistry and Molecular Biology. - 2007. - V. 146. - P.504-511.

128. Уколов А.И., Орлова Т.И., Савельева Е.И., Радилов А.С., Гончаров Н.В. Изменения профилей жирных кислот плазмы крови крыс при введении сублетальных количеств фосфорорганических отравляющих веществ // Токсикологический вестник, 2015, Т. 132, № 3,С. 2-11.

129. Casida J.E., Nomura D.K., Vose S.C., Fujioka K. Organophosphate-sensitive lipases modulate brain lysophospholipids, ether lipids and endocannabinoids // Chemico-Biological Interactions. - 2008. - V. 175. - P. 355-364.

130. Lotti M., Moretto A. Organophosphate-induced delayed polyneuropathy // Toxicol. Rev. -2005. - V. 24. - P. 37-49.

131. Androutsopoulos V. P., Hernandez A. F., Liesivuori J., Tsatsakis A. M. A mechanistic overview of health associated effects of low levels of organochlorine and organophosphorous pesticides // Toxicology. - 2013. - V. 307. - P. 89-94.

132. Suzuki H., Ito Y., Noro Y., Koketsu M., Kamijima M., Tomizawa M. Organophosphate agents induce plasma hypertriglyceridemia in mouse via single or dual inhibition of the endocannabinoidhydrolyzing enzyme(s) // Toxicology Letters. - 2014. - V. 225. - P. 153- 157.

133. Nakagawa M., Uchiyama M. Effect of organophosphate pesticides on lecithin-cholesterol acyltransferase in human plasma // Biochemical Pharmacology. - 1974. - V. 23. - P. 1641-1645.

134. Nomura D.K., Fuijioka K., Issa R.S., Ward A.M., Cravatt B.F., Casida J.E. Dual roles of brain serine hydrolase KIAA1363 in ether lipid metabolism and organophosphate detoxification // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 2008. - V. 228. - P. 42-48.

135. Lotti M. The pathogenesis of organophosphate neuropathy // Crit. Rev. Toxicol. - 1992. - V. 21. - P. 465-487.

136. Ray D.E. Organophosphorus esters: An evaluation of chronic neurotoxic effects // Leicester.

- 1998. - P. 62-70.

137. Шмурак В.И., Курдюков И.Д., Надеев А.Д., Войтенко Н.Г., Глашкина Л.М., Гончаров Н.В. Биохимические маркеры интоксикации фосфорорганическими отравляющими веществами // Токс. вестн. 2012. - № 4 - С. 30-34.

138. Galloway T., Handy R. Immunotoxicities of organophosphorus pesticides // Ecotoxicology.

- 2003.- V. 12. - P. 345-363.

139. Kamath V., Joshi A.K.R., Rajini P.S. Dimethoate induced biochemical perturbations in rat pancreas and its attenuation by cashew nut skin extract // Pest. Biochem. Physiol. - 2008. - V. 90.

- P. 58-65.

140. Kamath V., Rajini P.S. Altered glucose homeostasis and oxidative impairment in pancreas of rat subjected to dimethoate intoxication // Toxicology. - 2007. - V. 231. - P.137-146.

141. Karami-Mohajeri S., Abdollahi M. Toxic influence of organophosphate, carbamate and organochlorine pesticides on cellular metabolism of lipids, proteins and carbohydrates: a systematic review // Hum. Exp. Toxicol. - 2011. - V. 30. - P. 1119-1140.

142. Joshi A.K.R., Rajini P.S. Reversible hyperglycemia in rats following acute exposure to acephate, an organophosphorus insecticide: role of gluconeogenesis // Toxicology. - 2009. - V. 257; P. 40-45.

143. Amanvermez R., Baydin A., Yardan T., Basol N., Gunay M. Emerging laboratory abnormalities in suicidal patients with acute organophosphate poisoning // Turk. J. Biochem. -2010. - V. 35. - P. 29-34.

144. Nagi A.I, El-Gamal A.B. Effect of Diazinon, an Organophosphate Insecticide, on Plasma Lipid Constituents in Experimental Animals // J Biochem Mol Biol. 2003. V. 36 N. 5. P. 499-504.

145. Lasram M.M., Annabi A.B., Elj N.E., Selmi S., Kamoun A., El-Fazaa S., Gharbi N. Metabolic disorders of acute exposure to malathion in adult Wistar rats // J Hazardous Materials. - 2009. -V. 163. - P.1052-1055.

146. Acker C.I., Nogueira C.W. Chlorpyrifos acute exposure induces hyperglycemia and hyperlipidemia in rats // Chemosphere. - 2012. - V. 89. - N. 5. - P. 602-608.

147. Feng Z., Sun X., Yang J., Hao D., Du L. Metabonomics analysis of urine and plasma from rats given long-term and low-dose dimethoate by ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry // Chemico-Biological Interactions. - 2012. - V. 199. - P. 143-153.

148. Ryhnen R., Herranen J., Korhonen K., Penttil I., Polvilampi M., Puhakainen E. Relationship between serum lipids, lipoproteins and pseudocholinesterase during organophos-phate poisoning in rabbits // Int. J. Biochem. - 1984. - V. 16 - P. 687-690.

149. Roszczenkoa A., Rogalska J., Moniuszko-Jakoniuk J., Brzoska M. The effect of exposure to chlorfenvinphos on lipid metabolism and apoptotic and necrotic cells death in the brain of rats // Experimental and Toxicologic Pathology. - 2013. - V. 65. - P. 531- 539.

150. Setin E., Kanbur M., Silici S., Eraslan G. Propetamphos-induced changes in haematological and biochemical parameters of female rats: protective role of propolis // Food Chem. Toxicol. -2010. - V.48. - P. 1806-1810.

151. Lasram M.M., Annabi A.B., Elj N.E., Selmi S., Kamoun A., El-Fazaa S., Gharbi N. Metabolic disorders of acute exposure to malathion in adult Wistar rats // J. Hazard. Mater. - 2009. - V. 163.

- P.1052-1055.

152. Quistad G.B., Barlow C., Winrow C.J., Sparks S.E., Casida J.E. Evidence that mouse brain neuropathy target esterase is a lysophospholipase // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 2003. - V. 100.

- P.7983-7987.

153. Sjakste N., Gutcaits A., Kalvinsh I. Mildronate: an antiischemic drug for neurological indi-cations.//CNS Drug Rev. - 2005. - V.11. - P. 151-168.

154. Afanas'ev V.V., Murashko N.K. Mildronat--treatment of cardio-neurologic pathology in ischemia and hypoxia.// Lik Sprava. - 2012. - V. 7. - P. 68-74. [Article in Russian]

155. Klusa V, Beitnere U, Pupure J et al. Mildronate and its neuroregulatory mechanisms: targeting the mitochondria, neuroinflammation, and protein expression//Medicina (Kaunas). - 2013. - V. 49. - P.301-309

156. Zhu Y., Zhang G., Zhao J. et al. Efficacy and safety of mildronate for acute ischemic stroke: a randomized, double-blind, active-controlled phase II multicenter trial. //Clin Drug Investig. -2013. - V.33. - P.755-760.

157. BRENDA [электронный ресурс].

158. Мурашко Н.К. Bозможности милдроната в кардионеврологической практике.// Меж-дунар. неврол. журн. - 2012.- № 4.- С. 111-120.

159. Tars K, Leitans J, Kazaks A et al. Targeting carnitine biosynthesis: discovery of new inhibitors against Y-butyrobetaine hydroxylase.// J Med Chem. - 2014. - V. 57. - P. 2213-2236.

160. Vilskersts R., Zharkova-Malkova O., Mezhapuke R. Elevated vascular Y-butyrobetaine levels attenuate the development of high glucose-induced endothelial dysfunction. //Clin Exp Pharmacol Physiol. - 2013. - V.40. - P. 518-524.

161. Makrecka M., Svalbe B., Volska K. Mildronate, the inhibitor of L-carnitine transport, induces brain mitochondrial uncoupling and protects against anoxia-reoxygenation. //Eur J Pharmacol. -2014. - V. 723. - P. 55-61.

162. Koliesnikova I.E., Nosar V.I., Bratus' L.V. Pharmacological correction of experimental mitochondrial dysfunction of brain stem neurons by rhytmocor and mildronate. //Fiziol Zh. - 2013. - V.59. - P. 58-64. [Article in Ukrainian]

163. Kukes V.G., Zhernakova N.I., Gorbach T.V. Efficiency of mildronate in rats of different age with experimental-induced myocardial ischemia. // Vestn Ross Akad Med Nauk. - 2013. - V.1. -P. 42-46. [Article in Russian]

164. Хлебодаров Ф.Е., Михин В.П. Перспективы применения милдроната у больных с сердечно- сосудистой патологией // Российский кардиологический журнал. — 2009. — № 5. -С. 1 -5

165. Goncharov N.V., Kuznetsov A.V., Radilov A.S. Modern approach to the toxicology of fluoro-acetate // Toksikologicheskij vestnik (Toxicological Review). - 2005. - V. 5. -P.31-44.

166. Goncharov N.V., Jenkins R.O., Radilov A.S. Toxicology of fluoroacetate: a review, with possible directions for therapy research. // J. Appl. Toxicol. - 2006. - V. 26. - P. 148-161.

167. Уколов А.И., Орлова Т.И., Гончаров Н.В., Войтенко Н.Г. Исследование энергетического метаболизма крыс при действии фторацетата // Вестник уральской медицинской академической науки, 2014, Т. 3, № 49, С. 64-66.

168 Yeh K.H., Cheng A.L. Acute confusion induced by a high-dose infusion of 5-fluorouracil and folinic acid. // J. Formos. Med. Assoc. - 1994. - V. 93. - P.721-723.

169 Tisdale M.J., Brennan R.A. Role of fluroacetate in the toxicity of 2-fluroethylnitrosoureas. // Biochem. Pharmacol. - 1985. - V. 34. - P.3323-3327.

170. Feldwick M.G., Noakes P.S., Prause U. et al. The biochemical toxicology of 1,3-difluoro-2-

propanol, the major ingredient of the pesticide gliftor: the potential of 4-methylpyrazole as an

antidote // J. Biochem. Mol. Toxicol. - 1998. - V. 12. - P.41-52.

114

171. Keller D.A., Roe D.C., Lieder P.H. Fluoroacetate-mediated toxicity of fluorinated ethanes. // Fundam. Appl. Toxicol. - 1996. -V. 30. - P. 213-219

172. Misustova J., Hosek B., Kautska J. Characterization of the protective effect of radioprotective substances by means of long-term changes in oxygen consumption. // Strahlentherapie.- 1980. -V. 156. - P.790-794.

173. Song P., Zhao Z.Q. The involvement of glial cells in the development of morphine tolerance // Neurosci Res. - 2001. - V. 39. - P. 281-286.

174. Anikin I.V., Goncharov N.V., Tyndyk M.L., Vojtenko N.G., Pliss G.B., Zabezhinskij M.A., Popovich I.G., Anisimov V.N. Effect of sodium fluoroacetate on Ehrlich solid tumor and autochthonous sarcoma growth in mice // Vopr. Onkol. - 2013. - V. 59. - P.777-780.

175. Schultz R.A., Coetzer J.A., Kellerman T.S., Naude T.W. Observations on the clinical, cardiac and histopathological effects of fluoroacetate in sheep // Onderstepoort. J. Vet. Res. - 1982. - V. 49. - P. 237-245.

176. Schultz R.A., Coetzer J.A., Kellerman T.S., Naude T.W. Observations on the clinical, cardiac and histopathological effects of fluoroacetate in sheep // Onderstepoort. J. Vet. Res.- 1982. - V. 49. - P.237-245.

177. Tsuji H., Shimizu H., Dote T., et al. Effects of sodium monofluoroacetate on glucose, amino-acid, and fatty-acid metabolism and risk assessment of glucose supplementation // Drug Chem. Toxicol. - 2009. - V. 32. - P.353-361

178. Cheng X., Wanga G., Ma Z., Chen Y. et al. Exposure to 2,5-hexanedione can induce neural malformations in chick embryos.//NeuroToxicology. - 2012. - V. 33. - P. 1239-1247.

179. Spencer P.S., Schaumburg H.H., Sabri M.I., Veronesi B. The enlarging view of hexacarbon neurotoxicity.// Crit. Rev. Toxicol. - 1980. - V. 7. - P. 279-356.

180. Huang C.C. Polyneuropathy induced by n-hexane intoxication in Taiwan.//Acta Neurol. Taiwan. - 2008. - V. 17. - P. 3-10.

181. Adedara I.A., Abolaji A.O., Odion B.E., Okwudi I.J., Omoloja A.A., Farombi E.O. Impairment of Hepatic and Renal Functions by 2,5-Hexanedione Is Accompanied by Oxidative Stress in Rats. //J. Toxicol. - 2014. - V. - P 1-9.

182. Pereira M.E., Bordignon A.M., Bürger C., Huang C.I., Rocha J.B. Long-term treatment with 2,5-hexanedione has no effect on the specific activity of some brain and liver glycolytic enzymes of adult rats.// Braz. J. Med. Biol. Res. - 1991. - V. 24. - N 7. - P. 735-740.

183. Goel S.K., Rao G.S., Pandya K.P. Hepatotoxic effects elicited by n-hexane or n-heptane.// J. Appl. Toxicol. - 1988. - V.8 - N2. - P. 81-84.

184. Pereira M.E., Gon9alves C.A., Rodnight R. Phosphorylation in vitro of glial fibrillary acidic protein is increased in rat hippocampus by administration of 2,5-hexanedione. // Brain Res. - 1994.

- V. 656. - P. 417-419.

185. Karlsson J.E., Wang S., Rosengren L.E., Haglid K.G. Quantitative alterations of S-100 protein and neuron specific enolase in the rat nervous system after chronic 2,5-hexanedione expo-sure//Neurochem. Res. - 1993. - V. 18. - P. 203-208.

186. Pereira M.E., Adams A.I.H., Silva N.S. 2,5-Hexanedione inhibits rat brain acetylcholinesterase activity in vitro.//Toxicol. Lett. - 2004. - V.146. - P. 269-274.

187. Seppalainen A.M., Raitta C., Huuskonen M.S. N-Hexane induced changes in visual evoked potentials and electroretinograms of industrial workers. // Electroen. Clin. Neuro. 1979. V. 47. P. 492-498.

188. Kim M.S., Sabri M.I., Miller V.H., Kayton R.J. et al. 1,2-diacetylbenzene, the neurotoxic metabolite of a chromogenic aromatic solvent, induces proximal axonopathy. // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 2001. - V. 177. - P. 121-131.

189. Spencer P.S., Schaumburg H.H. Ultrastructural studies of the dying-back process. III. The evolution of experimental peripheral giant axonal degeneration.// J. Neuropathol. Exp. Neurol. -1977. - V. 36. - P. 276-299.

190. Tshala-Katumbay D.D., Palmer V.S., Kayton R.J., Sabri M.I., Spencer P.S. A new murine model of giant proximal axonopathy.//Acta Neuropathol. - 2005. - V. 109. - P. 405-410.

191. Gillies P.J., Norton R.M., Baker T.S., Bus J.S. Altered lipid metabolism in 2,5-hexanedione-induced testicular atrophy and peripheral neuropathy in the rat.// Toxicol. Appl. Pharmacol. -1981. - V. 59. - P. 293-299.

192. Hadjiivanova N.B., Salovski P.Z., Groseva M.M., Charakchieva S.B., Nechev C.K. Early effects of n-hexane and irradiation on the lung surfactant system.//Acta Physiol. Pharmacol. -1987. - V. 13. - P. 25-29.

193. Schnoy N., Schmidt R., Altenkirch H., Wagner H.M. Ultrastructural alteration of the alveolar epithelium after exposure to organic solvents.// Respiration. - 1982. - V.43. - P. 221-231.

194. Lapadula D.M., Suwita E., Abou-Donia M.B. Evidence for multiple mechanisms responsible for 2,5-hexanedione-induced neuropathy.// Brain Research. - 1988. - V. 458. - P. 123-131.

195. Decaprio A.P. Molecular mechanisms of diketone neurotoxicity.// Chem.-Biol. Interactions.

- 1985. - V. 54. - P. 257-270.

196. Word S., Esbensen K., Geladi P. Principal Component Analysis. Chemometrics and Intelligent Laboratory Systems. 1987; 2: 37-52.

197. Duran M. Disorders of Mitochondrial Fatty Acid Oxidation and Ketone Body Handling. Eds: N.Blau, M.Duran, M.E.Blaskovics, K.M.Gibson. Springer Berlin HeidelbergIn: Physician's Guide to the Laboratory Diagnosis of Metabolic Diseases. 2 Ed., 2003., 731 pp. P.309-334

198. Sanchez-Avila N., Mata-Granadosa J.M., Ruiz-Jimenez J., Luque de Castroa M.D. Fast, sensitive and highly discriminant gas chromatography-mass spectrometry method for profiling analysis of fatty acids in serum // J Chromatogr. A. - 2009. - V. 1216. - P. 6864-6872.

199. Han L.D., Liang Q.L., Wang Y.M., Hu P. A new metabonomics method for simultaneous determination of EFAs and NEFAs in plasma using GC-MS and its application.// Chinese Chemical Letters. - 2009. - V. 20. - P. 1103-1106.

200. Yi L., He J., Liang Y., Yuan D., Gao H., Zhou H. Simultaneously quantitative measurement of comprehensive profiles of esterified and non-esterified fatty acid in plasma of type 2 diabetic patients // Chem. Phys. Lipids. - 2007. - V. 150. - P. 204-216.

201. Hoffmann G.F., P.Feyh. Organic Acid Analysis. In: Physician's Guide to the Laboratory Diagnosis of Metabolic Diseases. 2 Ed., 2003. Eds: N.Blau, M.Duran, M.E.Blaskovics, K.M.Gibson. Springer Berlin Heidelberg, 731pp. P.27-44.

202. Glaser C., Demmelmair H., Koletzko B. High-throughput analysis of total plasma fatty acid composition with direct in situ transesterification. //PLoS One. - 2010. - V.5. - N.8. - P.12045.

203. Han L.D., Liang Q.L., Wang Y.M., Hu P. A new metabonomics method for simultaneous determination of EFAs and NEFAs in plasma using GC-MS and its application.// Chinese Chemical Letters. - 2009. - V. 20. - P. 1103-1106

204. Flynn C.J., Wecker L. Concomitant Increases in the Levels of Choline and Free Fatty Acids in Rat Brain: Evidence Supporting the Seizure-Induced Hydrolysis of Phosphatidylcho-line // J. Neurochem. - 1987. - V. 48. - N. 4. - P.1178-1185.

205. Rihn L.L., Visioli F., de Turco E.B., Kreisman N.R., Bazan N.G. Free fatty acid and diacyl-glycerol levels are related to cerebral O2 during seizures // The role of neurotransmitters in brain injury. Ed.: M.Globus, W.D. Dietrich. Plenum Press. New York. 1992. P. 247-252.

206. Savolainen K.M., Nelson S.R., Samson F.E., Pazdernik T.L. Soman-induced Convulsions Affect the lnositol Lipid Signaling System: Potentiation by Lithium; Attenuation by Atropine and Diazepam // Tox Appl Pharm. - 1988. - V. 96. - P. 305-314.

207. Kuca K., Jun D., Cabal J., Hrabinova M., Bartosova L., Opletalova V. Russian VX: inhibition and reactivation of acetylcholinesterase compared with VX agent // Basic Clin Pharmacol Toxicol. - 2006. - V. 98. - N. 4. - P. 389-394.

208. Randle P.J., Garland P.B., Newsholme E.A., Hales C.N. The glucose fatty acidcycle in obesity and maturity onset diabetes mellitus // Ann. N Y. Acad. Sci. - 1965. - V. 131. - P. 324-333.

209. Roszczenkoa A., Rogalska J., Moniuszko-Jakoniuk J., Brzoska M. The effect of exposure to chlorfenvinphos on lipid metabolism and apoptotic and necrotic cells death in the brain of rats // Experimental and Toxicologic Pathology. - 2013. - V. 65. - P. 531- 539.

210. Kashemsant N., Bucurescu S., Fatehi-Hassanabad Z., Harper M.E., Chan C.B. Impairment of proinsulin processing in b-cells exposed to saturated free fattyacid is dependent on uncoupling protein-2 expression // Can. J. Diabetes. - 2012. - V. 36. - P. 228-236.

211. Krebs M., Roden M. Molecular mechanisms of lipid-induced insulin resistance in muscle, liver and vasculature // Diabetes Obes. Metab. - 2005. - V.7. - P. 621-632.

212. Fukushima T., Holo N., Isobe K., Shiwaku K., Yamane Y. Effects of organophosphorous compounds on fatty acid compositions and oxidative phosphorylation system in the brain of rats // Exp Toxic Pathology. - 1997. - V. 49. - N. 5. - P. 381-386.

213. Hughey R.P. et al. // Am. J. Physiol. (1980) 238:F199-F204;

214. Schrock H. et al. // Biochem. J. (1980) 188:557-560;

215. Brosnan J.T. et al. // Haussinger D. eds. pH Homeostasis-Mechanism and Control. NY. (1988). P.281-304;

216. Kuznetsov S.V. et al. // J. Appl. Toxicol. (2007) 27(6):561-572

217. Tshala-Katumbay D., Monterroso V., Kayton R., Lasarev M., Sabri M., Spencer P. (2009) Toxicol. Sci., 107 (2), 482-489. DOI: 10.1093/toxsci/kfn241.

218. Мигаловская Е.Д., Уколов А.И. Новые метаболические маркеры хронического воздействия низких концентраций алифатических углеводородов. Тезисы доклада на конференции: «II Всероссийская научная конференция молодых ученых «Медико-биологические аспекты химической безопасности», 1-2 октября 2015 года, г. Санкт-Петербург.

219. Folch. J., Stanley, G.H.S. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues.//J Biol Chem. - 1957. - V. 226. - P. 497-510.

220. Лохов Д.Л., Маслов Е.Е., Балашова О.П., Трифонова Н.В. и др. Масс-спектрометриче-ский анализ липидома плазмы крови, как способ диагностики заболеваний, оценки эффективности и оптимизации лекарственной терапии п.г.// Биомедицинская химия, 2015 том 61, вып. 1, с. 7-18.

221. Sud M., Fahy E., Cotter D., Brown A. LMSD: LIPID MAPS structure database. //Nucleic Acids Research. - 2007. - V. 35. - P. D527-D532.

222. Сетевой ресурс http://www.lipidmaps.org/

223. Taguchi R., Nishijima M., Shimizu T. Basic analytical systems for lipidomics by massspec-trometry in Japan. //Meth. Enzymol. - 2007. - ^ 432. - P. 185-211.

224. Сетевой ресурс http://lipidbank.jp/

225. Giacometti J., Milosevic A., Milin C. Gas chromatographic determination of fatty acids contained in different lipid classes after their separation by solid-phase extraction. //J of Chromatogr A. - 2002. - V. 976. - P. 47-54

226. Fukushima T., Holo N., Isobe A., Shiw Aku K. et al. Effects of organophosphorous compounds on fatty acid compositions and oxidative phosphorylation system in the brain of rats .//Exp Toxic Patho1. - 1997. - V. 49. - P. 381-389.

227. Надеев А.Д., Зинченко В.П., Авдонин П.В., Гончаров Н.В. Токсические и сигнальные свойства активных форм кислорода.// Токс. Вестн. - 2014. - т.2ю - С. 22-27.

228. Goncharov N.V., Avdonin P.V., Nadeev A.D., Zharkikh I.L., Jenkins R.O. Reactive oxygen species in pathogenesis of atherosclerosis.// Curr. Pharm. Des. 2015. V. 21. N. 9. P. 1134-1146.

229. Белова М.В., Ильяшенко К.К., Лужников Е.А. Окислительный стресс в неотложной токсикологии. // Общая реаниматология. - 2009. - т. 6. - С. 40-44.

230. Goel S.K., Rao G.S., Pandya K.P. Hepatotoxic effects elicited by n-hexane or n-heptane.// J. Appl. Toxicol. - 1988. - V. 8. - N. 2. - P. 81-84.

231 Dotan Y., Lichtenberg D., Pinchuk I. Lipid peroxidation cannot be used as a universal criterion of oxidative stress. //Prog Lipid Res. - 2004. - V. 43. - P. 200-227.

232. Niki E. Lipid peroxidation: physiological levels and dual biological effects. //Free Radic Biol Med. - 2009. - V. 47. - P.469-484.

233. KharroubiW, Dhibi M, Haouas Z et al Effects of sodium arsenate exposure on liver fatty acid profiles and oxidative stress in rats. //Environ Sci Pollut Res Int. - 2014. - V. 21. - P.1648-1657.

234. Taranova N. P. Intensity of acetate-2-14C incorporation into brain and spinal cord phospholipids and cholesterol of healthy guinea pigs and those poisoned with Tri-o-cresylphosphate Bull.// Exp. Biol. Med. - 1976. - V.85. - P. 427-429.

235. Gillies P. J., Norton R. M., Bus J. S. Inhibitionof sterologenesis but not glycolylsis in 2.5-hexanedione induced distal axonopathy in the rat.// Toxicol. Appl. Pharma-C. 981. V.9. P.287-292 236 Schook W. J., Norton W. T. Neurofilaments account for the lipid in myelin-free axons. //Brain Res. 1976. - V. 118. - P. 517-522.

237. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. Москва "Медицина" 1998. 704 с.

238. Bhatt A., Khan S., Pandya K. P. Effect of Hexacarbons on Selected Lipids in Developing Rat Brain and Peripheral Nerves//journal of applied toxicology. - 1988. - V. 8. - N.1. - P. 53-57.

239. Kharroubi W., Dhibi M., Mekni M., Haouas Z. et al.. Sodium arsenate induce changes in fatty acids profiles and oxidative damage in kidney of rats.// Environ Sci Pollut Res Int. - 2014. - V. 21. - P.12040-9.

240. Conquer J.A., Martin J.B., Tummon I., Wa^on L.T.F. Fatty acid analysis of blood serum, seminal plasma. //Lipids. - 1999. - V. 34. - P. 793-799.