Состояние иммунной системы, интерфероногенез и продукция цитокинов у часто болеющих детей и детей с бронхиальной астмой в разные периоды заболевания тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Рамазанова, Зарема Керимовна

• Рамазанова, Зарема Керимовна
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Рамазанова, Зарема Керимовна

Список сокращений

Введение

Глава 1 Обзор литературы

1.1 Иммунный статус у детей с бронхиальной астмой

1.2 Состояние иммунной системы у ЧБД; роль повторяющихся респираторных инфекций в формировании БА и ее обострений

1.3 Патогенетическая роль цитокинов в формировании БА

1.4 Методические аспекты исследования цитокинового профиля при БА

1.5 Значение повторяющихся респираторных инфекций в формировании цитокинового статуса, характерного для БА

1.6 Изменение интерферонового статуса у больных БА

1.7 Патогенетическая терапия БА

Глава 2 Материалы и методы

2.1 Материалы исследования

2.2 Методы исследования

2.2.1 Взятие и хранение крови

2.2.2 Определение интерферонового статуса

2.2.3 Определение абсолютного количества лейкоцитов и лимфоцитов в крови больных

2.2.4 Выделение фракции лимфоцитов для изучения их субпопуляционного состава

2.2.5 Получение сыворотки крови

2.2.6 Определение численности CD3+, CD4+, CD8+,

CD 19+, СО!6+лимфоцитов методом непрямой иммунофлюоресценции с моноклональными антителами

2.2.7 Определение фагоцитарной активности нейтрофилов

2.2.8 Определение концентрации иммуноглобулинов ос- 63 новных классов в сыворотке крови

2.2.9 Серологическая диагностика микоплазменной и хла- 64 мидийной инфекции

2.2.10 Определение цитокинов ФНОа, ИЛ-4 и ИФНу в су- 64 пернатантах культуры клеток цельной крови и сыворотке крови

2.2.11 Статистическая обработка результатов исследования

Глава 3 Результаты собственных исследований

3.1 Иммунный статус у детей с бронхиальной астмой в 65 различные периоды заболевания

3.1.1 Численность субпопуляций лимфоцитов у детей с 65 бронхиальной астмой в приступном периоде

3.1.2 Численность субпопуляций лимфоцитов у детей с 67 бронхиальной астмой в разные этапы послеприступного периода

3.1.3 Сопоставление состояния иммунного статуса у часто 68 болеющих детей и детей с бронхиальной астмой

3.1.4 Численность субпопуляций лимфоцитов у детей с 72 бронхиальной астмой и у часто болеющих детей в зависимости от инфицированности Chlamydia pneumoniae и (или) Mycoplasma pneumoniae

3.1.5 Содержание иммуноглобулинов у детей с бронхиаль- 75 ной астмой в различные периоды заболевания

3.1.6 Фагоцитарная активность нейтрофилов у детей с 76 бронхиальной астмой

3.2 Интерфероновый статус у детей с бронхиальной аст- 79 мой в различные периоды заболевания

3.2.1 Интерфероновый статус у детей с бронхиальной аст- 79 мой в приступном периоде

3.2.2 Интерфероновый статус у детей с бронхиальной аст- 80 мой и часто болеющих детей в зависимости от заболевания ОРЗ

3.2.3 Интерфероновый статус у детей с бронхиальной аст- 82 мой в разные этапы послеприступного периода

3.2.4 Сравнение состояния интерферонового статуса у де- 85 тей с бронхиальной астмой и у часто болеющих детей в зависимости от инфицированности их Chlamydia pneumoniae и (или) Mycoplasma pneumoniae

3.3 Цитокиновый статус часто болеющих детей и детей с 86 бронхиальной астмой в различные периоды заболевания

3.4 Влияние различных схем терапии приступа бронхи- 100 альной астмы на состояние иммунного и интерферонового статуса

3.4.1 Влияние различных схем лечения на иммунный ста- 100 туе детей с бронхиальной астмой

3.4.2 Влияние различных схем лечения на интерфероновый 104 статус детей с бронхиальной астмой

Обсуждение результатов

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Состояние иммунной системы, интерфероногенез и продукция цитокинов у часто болеющих детей и детей с бронхиальной астмой в разные периоды заболевания»

Актуальность проблемы.

Бронхиальная астма - одно из серьезнейших заболеваний, которое, начинаясь у детей, продолжается в зрелом возрасте и часто приводит к инвалидности и преждевременной смерти [3, 53].

Согласно современным представлениям морфологической основой бронхиальной астмы является хроническое воспаление бронхиальной стенки с повышением количества активных эозинофилов, тучных клеток, Т-лимфоцитов в слизистой оболочке бронхов; это воспаление впоследствии приводит к гиперреактивности бронхов и к бронхообструктивному синдрому. Изучение патогенеза бронхиальной астмы дало возможность установить ряд факторов риска её возникновения у детей, из которых наиболее важными являются следующие: наследственная предрасположенность к атопии, воздействие неблагоприятных условий среды на организм матери в периоде беременности, нерациональное питание беременной и ребенка, респираторные инфекции у детей [4, 25, 73]. 4

Современная теория бронхиальной астмы исходит из того, что среди СБ4+-лимфоцитов активность Т-хелперов 2 типа (Тх2) преобладает над функциональной активностью Т-хелперов 1 типа (Txl) [21, 38, 129]. Нарушения нормального баланса между Т-хелперами 1 и 2 типа регистрируют по продуктам секреции этих клеток [4, 66, 141]. Txl продуцируют ИЛ-2, ИФНу, ФНОа (провоспалительные цитокины), тогда как Тх2 - ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-13 (противовоспалительные цитокины) [55].

Дети, страдающие бронхиальной астмой, нередко относятся к группе детей часто и длительно болеющих респираторными инфекциями, которые часто сопровождаются появлением у них внутриклеточных патогенов - ми-коплазм и хламидий [32, 44]. Проводимые исследования иммунной системы у часто болеющих детей (ЧБД) и сравнение этих данных с данными детей, страдающих бронхиальной астмой, возможно, выявят определенные законог мерности и покажут причины перехода ребенка из статуса часто болеющего в статус больного бронхиальной астмой.

В связи с вышесказанным представляется актуальным изучение состояния иммунной системы, продукции цитокинов, инфицированности внутриклеточными патогенами у детей с бронхиальной астмой и сравнение этих показателей с аналогичными показателями часто болеющих детей.

Цель настоящего исследования

Целью настоящей работы было сравнение иммунного статуса, интер-фероногенеза и продукции цитокинов у детей с бронхиальной астмой в различные периоды заболевания и у часто болеющих детей.

Задачи исследования

1. Исследование изменений в состоянии иммунной системы, интерфе-роногенеза и продукции цитокинов у детей с бронхиальной астмой в разные периоды заболевания.

2. Сравнение состояния показателей иммунной системы и интерферо-ногенеза у часто болеющих детей и детей с бронхиальной астмой в разные периоды заболевания.

3. Сравнение содержания в сыворотке крови и индуцированной продукции ИФНу и ИЛ-4 у детей с бронхиальной астмой и часто болеющих детей.

4. Исследование влияния инфицированности внутриклеточными микроорганизмами на состояние иммунной системы, интерфероногенез и продукцию цитокинов у детей с бронхиальной астмой и часто болеющих детей.

5. Изучение влияния иммуномодулятора Виферон на иммунный и интерфероновый статус детей, страдающих бронхиальной астмой.

Научная новизна

В работе впервые комплексно проанализировано в динамике по многим иммунологическим параметрам (иммунный статус, интерфероновый статус, продукция цитокинов, фагоцитарная активность нейтрофилов) состояние детей, страдающих бронхиальной астмой, в разные периоды заболевания и детей, часто и длительно болеющих респираторными инфекциями.

Выявлено, что у детей в приступном периоде бронхиальной астмы (БА) наблюдается дефицит клеточного иммунитета и нарушение интерфероноге-неза. В послеприступном периоде эти показатели приходят к норме примерно через три месяца.

Впервые показано, что у ЧБД имеются более выраженные нарушения в клеточном звене иммунитета, чем у детей с приступом бронхиальной астмы. Так, у ЧБД отмечалось статистически достоверное снижение процента и абсолютного количества CD3+, CD4+, С019+клеток по сравнению с нормой и показателями детей с БА.

Было выявлено, что при бронхиальной астме дети, серопозитивные по Chlamydia pneumoniae и Mycoplasma pneumoniae (C.pneum. и M.pneum.), встречаются в 2 раза чаще, чем в группе часто болеющих детей.

Предложена оригинальная совокупная оценка продукции цитокинов ИЛ-4 и ИФНу для каждого индивидуума, которая дала возможность выявить, что у часто болеющих детей, не страдающих БА, высокая продукция ИЛ-4 сопровождается высокой продукцией ИФНу, а у детей в приступном периоде БА при высокой продукции ИЛ-4 продукция ИФНу снижена.

У детей, находящихся в приступном периоде БА, дисбаланс соотношения Тх1 и Тх2 более выражен, чем у часто болеющих детей, страдающих бронхиальной астмой и находящихся в периоде ремиссии, т.е. в межприступ-ном периоде.

Новыми являются данные о том, что иммуномодулятор Виферон способствует увеличению сниженной численности субпопуляций лимфоцитов и нормализации интерферонового статуса у детей в приступном периоде БА. п

Практическая значимость работы связана с обоснованием необходимости нормализации показателей иммунного статуса, интерфероногенеза и продукции цитокинов у часто болеющих детей, что, вероятно, позволит снизить риск возникновения у них бронхиальной астмы.

Внедрение результатов работы

Материалы диссертации включены в курс практических занятий кафедры иммунологии РГМУ и вошли в медицинскую технологию «Использование иммуномодуляторов для коррекции показателей иммунной и цитоки-новой систем при оздоровлении детей, часто болеющих острыми респираторными и вирусными заболеваниями верхних дыхательных путей».

Положения, выносимые на защиту

1. Изменения в состоянии иммунной системы детей с бронхиальной астмой и часто болеющих детей имеют одну направленность, но разную выраженность - численность субпопуляций лимфоцитов изменена более значительно у ЧБД, продукция интерферонов снижена у обеих групп детей, но у ЧБД в большей степени подавлена продукция ИФНа.

2. Инфицированность внутриклеточными патогенами детей с бронхиальной астмой и ЧБД мало влияет на численность субпопуляций лимфоцитов, но приводит к подавлению продукции ИФНа.

3. Активность Тх1 и Тх2 у часто болеющих детей и больных с приступом БА различна. У часто болеющих детей, не страдавших бронхиальной астмой, высокая продукция ИЛ-4 в культуре клеток крови сопровождается высокой продукцией ИФНу, а у детей в приступном периоде бронхиальной астмы при высокой продукции ИЛ-4 продукция ИФНу снижена. т

Апробация материалов диссертации

Результаты работы доложены и обсуждены на международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы » (Москва, июнь 2004г.), на Всероссийском научном симпозиуме «Цитокины. Стволовая клетка. Иммунитет» (Новосибирск, июль 2005г.), на конгрессе «Дни Иммунологии в Санкт-Петербурге 2006».

Апробация диссертационной работы проведена на заседании Секции Ученого Совета ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского "Общая и прикладная иммунология "10 апреля 2006 г.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 134 страницах и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы», главы «Результаты собственных исследований», обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 10 рисунками и 17 таблицами. В список литературы вошли 156 работ отечественных и зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Рамазанова, Зарема Керимовна

ВЫВОДЫ.

1. В приступном периоде бронхиальной астмы у детей снижено содержание лимфоцитов, CD3+, CD4+-mieTOK и способность к продукции IgG. По выходе в ремиссию бронхиальной астмы приближение показателей к норме происходит не сразу, а в течение как минимум трех месяцев.

2. Численность субпопуляций лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD 19+) у часто и длительно болеющих детей ничем на момент обследования не болевших, была снижена сильнее, чем у детей с приступом бронхиальной астмы. У ЧБД, страдающих бронхиальной астмой и находящихся в ремиссии, все показатели несколько ниже, чем у ЧБД, не имеющих этого заболевания.

3. У детей в приступном периоде бронхиальной астмы и у ЧБД снижена способность лейкоцитов к индуцированной продукции как ИФНа, так и ИФНу. Способность к продукции ИФНа восстанавливается уже через 3 недели после приступа бронхиальной астмы, а способность к продукции ИФНу приходит к возрастной норме лишь через 3 месяца.

4. У ЧБД, не страдающих бронхиальной астмой, высокая продукция ИЛ-4 сопровождается высокой продукцией ИФНу, а у детей в приступном периоде БА наблюдается высокая продукция ИЛ-4, но отсутствует высокая продукция ИФНу. У детей, обследованных в приступном периоде бронхиальной астмы, дисбаланс между Txl и Тх2 выражен существенно сильнее, чем у часто болеющих детей с Б А в периоде ремиссии.

5. Среди детей с БА было в 2 раза больше инфицированных С. pneum. и М. pneum., чем среди ЧБД. Инфицированность детей этими внутриклеточными патогенами подавляла у них а-интерфероногенез.

6. Применение Виферона при терапии приступа БА способствует увеличению сниженной численности субпопуляций лимфоцитов и нормализации интерферонового статуса.

Заключение

Исходя из полученных данных, можно сказать, что включение имму-номодулятора Виферона в базисную терапию детей с бронхиальной астмой положительно влияет на численность субпопуляции лимфоцитов и способность лейкоцитов к продукции интерферонов.

Обсуждение результатов

Бронхиальная астма, одно из серьезнейших заболеваний, которое, начинаясь у детей, продолжается в зрелом возрасте, и часто приводит к инвалидности и преждевременной смерти [3, 53]. Это заболевание имеет ряд патогенетических причин возникновения, общепринятой из которых является нарушение аллергического равновесия организма. Такое нарушение может быть спровоцировано разными факторами - пищевыми, бытовыми или растительными аллергенами и др. В настоящее время острые респираторные вирусные инфекции являются настоящим бичом педиатрии, а аллергия на вирусы совсем не редкое явление. Понятие часто и длительно болеющий респираторными заболеваниями ребенок широко распространено. Все это позволяет считать актуальным параллельное обследование детей уже больных бронхиальной астмой и часто болеющих детей в плане изучения иммунопатологических механизмов возникновения бронхиальной астмы у часто болеющих детей.

В настоящем исследовании показано, что в приступном периоде бронхиальной астмы имеются выраженные нарушения в численности субпопуляций лимфоцитов и продукции интерферонов. Эти нарушения несколько исправляются по мере удаления по срокам от приступного периода - через три недели после приступа восстанавливается продукция ИФНа, а продукция ИФНу приходит к норме лишь через три месяца после приступа бронхиальной астмы. У часто и длительно болеющих детей все эти показатели выглядят хуже, чем в приступном периоде бронхиальной астмы, что, вероятно, связано с истощением всех систем защиты воспалительными процессами. Особенно выраженные нарушения выявлены у детей с бронхиальной астмой и у часто болеющих детей, инфицированных внутриклеточными патогенами.

Интересные данные получены при исследовании продукции некоторых цитокинов у больных бронхиальной астмой и часто болеющих детей.

Значительная межиндивидуальная вариабельность, характерная для параметров цитокинового статуса, делает малоинформативным представление результатов в виде средних показателей. Тот факт, что различные исследовательские группы используют тест-системы разных фирм-производителей, создает дополнительные сложности в трактовке полученных результатов. Видимо, по причине использования разных тест-систем авторы расходятся во мнениях о том, имеется ли связь между тяжестью БА и содержанием ИЛ-4 в сыворотке крови [52, 72, 79, 104].

Использование реагентов одного и того же производителя также не исключает разнобоя данных, доступных в научной литературе. Так, на тест-системах фирмы «Протеиновый контур» в сыворотках здоровых людей Кузнецов В.Ф. с соавт.[29] получали среднюю концентрацию ИЛ-4 в сыворотке 27 пг/мл, Лихванцева Г.В. с соавт. - 110 пг/мл [36], а Абаджиди М.А. с соавт. [1] такую концентрацию (109 пг/мл) выявляли в сыворотках больных астмой.

Часть авторов не указывает характеристик, использованных ими ИФА-тест-систем [24,39,57], хотя по косвенным данным можно предположить, что эти тест-системы выявляют не только свободные цитокины, но и связанные с белками. Подобные тест-системы делают возможным выявлять различия в сывороточной концентрации ИЛ-4 у больных в остром периоде и в ремиссии [133], при тяжелом течении астмы и состоянии средней тяжести [6].

Использованные нами ИФА-тест-системы (ООО «Вектор-Бест») не выявляли ИЛ-4, связанного с белками сыворотки крови, а количество свободного ИЛ-4 у большинства больных БА регистрировалось на уровне 0-5 пг/мл (ниже порога чувствительности для данных реагентов). Подобные значения сывороточной концентрации ИЛ-4 более характерны для здоровых людей [5, 7 , 104].

По нашим данным при приступе средней тяжести только у 40% больных концентрация ИЛ-4 в крови была 6-40 пг/мл (через 3 недели после обострения БА - у 20%). Граница в 5 пг/мл и была выбрана нами для разделения больных на группы с нормальной и повышенной активностью Тх2. Единственное заключение, которое мы смогли сделать, исследовав сывороточную концентрацию цитокинов следующее - при обострении БА, связанном с ОРЗ, в сыворотке крови выявляется ИЛ-4, а после ОРЗ у детей, не страдающих астмой - нет. Но для решения задач нашей работы констатации этого факта было недостаточно, поскольку повышенная концентрация ИФНу, являющегося антагонистом ИЛ-4, с одинаковой частотой обнаруживалась в сыворотке крови у тех и у других.

В научной литературе, особенно иностранной, данные довольно часто представляются графически в виде индивидуальных концентраций цитокина в сыворотках или культуральных супернатантах больных и медианы этого распределения [90, 129].

Кроме того, данные о концентрации того или иного цитокина дополняются его соотношением с другими цитокинами. Наиболее часто используются отношения ИЛ-4/ ИФНу, ИЛ-10/ИФНу [90, 106], также представляемые графически в виде индивидуальных значений и медианы этого распределения.

Корреляция между отдельными показателями цитокинового статуса [90] или между ними и другими лабораторными показателями тоже представляется графически [129].

В своей работе мы также отдали предпочтение графическому представлению результатов как наиболее информативному способу анализа полученных данных.

Значения концентраций ИЛ-4, наблюдаемые нами в супернатантах клеточных культур (6 - 40 пг/мл), совпадали с теми, которые другие авторы получали при стимуляции мононуклеаров митогенами: 4,3 пг/мл [100], 7,9 пг /мл [39] у здоровых лиц, а также у больных БА: 10,8 пг/мл, - [149]. Концентрацию 5 пг/мл мы использовали как границу между нормальной и повышенной продукцией ИЛ-4. В то же время, по данным Калининой Н.М. [24] лейкоциты крови здоровых людей продуцируют ИЛ-4 на уровне 185 пг/мл.

Мы сделали выбор пограничной концентрации ИЛ-4 на основании собственных данных и данных большинства зарубежных авторов.

Граница в 1000 пг/мл была взята для оценки продукции ИФНу в культуре клеток цельной крови на основании наших данных о том, что у ЧБД, лейкоциты которых продуцируют ИФНу ниже этого уровня, повышен риск заболевания ОРЗ [54]. Вообще стимулированная митогенами продукция ИФНу в культуре клеток крови здоровых людей по данным разных авторов колеблется от 100 пг/мл [139], 300 пг/мл [134] до 1250 пг/ мл [24], 5516 пг/мл [130].

После выбора указанных граничных значений способность клеток от больных на разных этапах БА к продукции ИЛ-4 и ИФНу оказалась очевидно различной. У больных с приступом БА, спровоцированном ОРЗ, способность лейкоцитов к продукции ИФНу была гораздо ниже, чем у ЧБД, также перенесших ОРЗ. Мы предположили, что именно низкий резерв активности Txl, мерой которой является индуцированная продукция ИФНу, создает риск перехода от частых ОРЗ к такому хроническому заболеванию легких как БА.

Параметры цитокинового статуса больных БА позволяют делать такое предположение. Низкая индуцированная продукция ИФНу в культуре клеток цельной крови наблюдалась у них при условиях, оптимальных для оценки этого показателя: стимуляция 104 лимфоцитов 10 мг ФГА в течение 72 часов.

В этих условиях продукция ИЛ-4, максимум которой по данным литературы приходится не на 72, а на 48 часов, должна быть существенно угнетена, т.к. Txl и Тх2 взаимно подавляют активность друг друга. Однако у больных БА наблюдалась именно недостаточность функционирования Txl даже в оптимальных условиях культивирования, что выявлялось как по сниженному количеству ИФНу, определяемому в ИФА, так и по снижению его биологической активности. Это является наиболее вероятной причиной нарушения баланса между Txl и Тх2. Продукция ИЛ-4, маркера активности Тх2, даже через 72 часов культивирования у больных БА повышена.

Сравнение индивидуальных показателей, наблюдаемых у больных БА и у ЧБД через одинаковый срок после перенесенного ОРЗ, выявляет разницу между этими двумя группами больных. Если у ЧБД обнаруживалась ФГА-индуцированная продукция ИЛ-4 выше 5 пг/мл, то она всегда сопровождалась продукцией ИФНу выше 1000 пг/мл. У больных БА увеличение продукции ИЛ-4 выше 5 пг/мл не сопровождалось увеличением способности к продукции ИФНу, напротив, она была ниже ЮООпг/ мл. У значительного количества больных БА продукция обоих указанных цитокинов происходила ниже уровня указанных границ.

Подтверждением того, что именно недостаточный резерв активности Тх1 (насколько можно судить по их способности продуцировать ИФНу) играет решающую роль в обострении БА при очередном ОРЗ, является также анализ разницы между обследованными нами группами при пересчете концентрации ИФНу на 1 продуцент. При этом становится ясно, что не недостаточное количество клеток-продуцентов является причиной низкого у-интерфероногенеза, а их низкая удельная активность. Серологические признаки инфицирования С. или М. pneum. также имеют значение.

Количество ИФНу, продуцируемое 104 клеток

У ЧБД у детей, больных БА инфиц. неинфиц. инфиц. неин< >иц.

- БА, ремиссия при обострении через 3 недели при обострении через 3 недели м 460 490 150 140 320 365 п 13 12 18 18 12 10 tm 165 150 85 85 110 365

Получается, что для инфицированных детей, госпитализированных с приступом БА после ОРЗ, характерен значимый дефицит у-интерфероногенеза не только по сравнению с ЧБД, переболевших ОРЗ, но и с неинфицированной подгруппой, имевшей приступ БА. Этот дефицит, судя по удельной продукции ИФНу, сохранялся и после лечения.

Наши данные о том, что сниженная активность Тх1 стабильно выявляется у больных с БА подтверждается и данными литературы.

У больных БА выявляли дисфункцию в системе интерфероногенеза, проявляющуюся снижением выработки ИФНа и ИФНу. Показатели были сходны при всех формах БА, но отличались от показателей, наблюдаемых в стадии ремиссии. Устойчивый характер угнетения у-интерфероногенеза данные авторы связывают с активацией Тх2 клеток [19].

Самсыгина Г.А. с соавт. обнаружили, что концентрация ИФНу в сыворотке снижена у детей с бронхиальной астмой вне зависимости от тяжести течения болезни, а содержание ФНОа растет, и тем сильнее, чем тяжелее течение БА [133].

На ведущую роль недостаточности интерфероногенеза в формировании БА указывает и тот факт, что здоровые люди и больные БА не различаются по количеству ИЛ-4-продуцентов среди Т-лимфоцитов крови (0.72 и 0.79% соответственно), тогда как процент ИФНу - продуцентов достоверно различался (23.5 против 5.7%, Р < 0.001) - [147]. Латышева Т. В. с соавт. обнаружили у больных БА увеличение количества ИЛ-4-продуцентов среди Т-лимфоцитов крови [35], но Nagano Y. с соавт. указывают, что в крови таких больных повышено не только количество Тх2, но и количество Txl [117].

По наблюдениям Jyonouchi Н. с соавт. [103] ни у одного из пациентов, у которых продукция ИФНу происходила на уровне не ниже 800 пг на 106 лейкоцитов, не происходило обострения аллергического ринита, тогда как при продукции менее 500 пг на 106 лейкоцитов - у 75% обострение развивалось.

Несмотря на то, что дефицит интерфероногенеза сопровождает многие инфекционные заболевания, особенно хронические, вклад различных инфекций в формирование и обострение БА изучен в различной степени. Наибольшее количество информации относится к роли вирусов в этом процессе [13,87,93,154].

Балаболкин И.И. и соавт. установили, что повторные ОРВИ чаще способствуют развитию респираторных форм аллергии: обострение бронхиальной астмы при присоединении ОРВИ происходило в 88,4% случаев, атопиче-ского дерматита - в 78,6% [3].

Эти авторы подчеркивают, что, чем чаще ребенок с бронхиальной астмой и атопическим дерматитом болеет ОРВИ, тем в большей степени у него имеется персистенция различных вирусов, но одновременно длительная и массивная персистенция различных вирусов в организме ребенка определяет частоту заболеваемости острыми респираторными инфекциями - более 6 раз в течение года. Все это сказывается на цитокиновом статусе ЧБД с аллергическими заболеваниями: недостаточность эндогенного ИФНу у обследованных детей сопровождается увеличением медиаторов фагоцитарных реакций (ФНОа и, частично, ИЛ-8). Однако в отличие от здоровых детей интенсивность продукции и, соответственно, функционирования этих цитокинов у детей с аллергическими болезнями нельзя признать достаточно полноценной.

По нашим данным способность лейкоцитов к продукции ИЛ-4, ИФНу и ФНОа у неинфицированных детей, регистрировалась на несколько более высоком уровне, чем у инфицированных С. или М. pneum., как до, так и после лечения в клинике и была одинаково высока у ЧБД в ремиссии БА независимо от инфицированности. Вероятно, это говорит о снижении резерва активности лейкоцитов при персистенции С. или М. pneum., которое, однако, редко выявляется при текущем ОРЗ, но часто при таком остром состоянии как приступный период БА.

Шелудько Я.С. с соавт [73] определяли уровень сывороточных ИЛ-4, ИФНу и ФНОа у детей с атопической БА, где триггерами обострения были вирусная и бактериальная инфекция. Они показали, что при присоединении к атопическому процессу острого воспаления уменьшается гиперпродукция ИЛ-4. Одновременно на фоне инфекционного процесса отмечалось снижение сывороточной концентрации ИФНу по сравнению с БА, неосложненной инфекциями. По содержанию ФНОа в сыворотке крови группы не различались. Наибольший дефицит ИФНу отмечали при осложнении БА пневмонией.

В то же время, показано, что если РСВ инфекция развивается у больных БА, то уровень ИФНу в сыворотке выше, чем у больных БА, не пораженных этой инфекцией [102].

В ряде работ указывается, что хламидийная и микоплазменная инфекции чрезвычайно часто выявляются при обострении БА и что это сочетается с нарушением интерфероногенеза у больных [32, 51]. Однако этот вопрос изучен гораздо хуже, чем механизмы влияния вирусов на развитие БА. Исследования цитокинового профиля у таких больных проводится еще реже [92].

Следует отметить, что практически не изучены особенности продукции цитокинов при вирусных инфекциях у больных БА и при хламидийной инфекции. Львиная доля клинико-иммунологических наблюдений за больными БА сделана на основании соотношения сывороточных концентраций ИФНу и ИЛ-4.

Таким образом, наша работа, включающая исследование баланса Txl и Тх2 на основании не только сывороточного содержания ИФНу и ИЛ-4, ФНОа, но и резервной способности лейкоцитов к их продукции, позволила получить новую информацию, характеризующую сущность изменений в ци-токиновом балансе при приступе БА, спровоцированном ОРЗ, и их отличие от изменений при ОРЗ, не вызывающем приступ БА у детей, которые ранее имели такие приступы.

Вообще среди ЧБД, не страдающих БА, индуцированная активность клеток-продуцентов ИЛ-4 сравнима с таковой при обострении БА. В сочетании с крайне низкой концентрацией ИЛ-4 в крови это обстоятельство, по-видимому, является положительной характеристикой цитокинового статуса: смещения баланса в сторону Тх2 не наблюдается, а потенциальные возможности для Тх2-ответа при его необходимости имеются.

С другой стороны, если на фоне ОРЗ развивается приступ БА, то активность Тх2 повышается, что находит отражение в повышении их способности продуцировать ИЛ-4, наблюдаемом в культуре клеток. Повышения активности Txl не происходит. Иммунный ответ на ОРЗ, спровоцировавшее приступ, отходит на второй план, и иммунопатологические механизмы, обеспечивающие развитие БА, преобладают в общей картине цитокинового статуса.

Установление факта, что нарушение у-интерфероногенеза менее выражено у больных БА, неинфицированных С. или М. pneum., имеет большое практическое значение. У этих детей через 3 недели после приступа БА, показатели интерферонового статуса улучшаются, тогда как дефицит продукции ИФНу у детей инфицированных хламидиями или микоплазмами, длительно сохраняется, по крайней мере, по данным иммуноферментного анализа культуральных супернатантов. Именно для этой последней группы больных особенно показано лечение препаратами интерферона и интерфероноге-нами.

В связи с вышесказанным полученные результаты о положительном влиянии лечения приступа бронхиальной астмы препаратом Виферон в плане его влияния на численность субпопуляций и продукцию интерферонов актуальны и позволяют надеяться на то, что своевременно проведенная иммуно-модулирующая терапия у часто и длительно болеющих ОРЗ детей позволит предотвратить возникновение у них бронхиальной астмы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Рамазанова, Зарема Керимовна, 2007 год

1. Абаджиди М.А., Лукушкина Е.Ф., Маянская И.В., Толкачёва Н.И., Ашкинази В.И. Уровень цитокинов в секрете ротовой полости у детей с бронхиальной астмой //Цитокины и воспаление 2002 - № 3 - с.9-14

2. Архипов С.Н. Нарушения в иммунном и интерфероновом статусе и влияние на них некоторых иммуномодуляторов при заболеваниях уро-генитальной и бронхолегочной систем //Дисс. к.б.н.,- М.,- 200 с.

3. Балаболкин И. И., Сенцова Т. Б., Булгакова В. А., Рылеева И. В. Влияние вирусных инфекций на состояние гуморального и клеточного иммунитета у детей с аллергическими заболеваниями// Иммунология 2005, №1с.21-26

4. Балаболкин И.И. Атопические заболевания у детей: современная концепция патогенеза и терапии // Вестн. Рос. АМН. 2003. - №8. -с.30-34.

5. Белан Э.Б. Th-фенотип иммунного ответа как фактор риска развития бронхиальной астмы у детей раннего возраста. //Цитокины и воспале- 1 ние. 2002. - Том 3. - № 4. - с.50-52

6. Белова О.И. Клинико-патогенетическое значение некоторых цитокинов (интерлейкина-4, у-интерферон) при бронхиальной астме.// Ав-тореф. дис. к.м.н. Москва 2003г. 32с

7. Бениова С.Н., Маркелова Е.В. Иммунокоррекция рецидивирующего течения псевдотуберкулеза у детей // Цитокины и воспаление 2003, №3, с. 13-17

8. Богорад А.Е. Роль генетических факторов в развитии бронхиальной астмы у детей //Пульмонология, 220, №1, с 17-21

9. Борхсениус С.Н., Чернова О.Л., Чернов Н. Микоплазмы. Молекулярная и клеточная биология, взаимодействие с иммунной системой, патогенность, диагностика, 2002, М., Наука, 319 с

10. Ботвиньева В.В., Антонова С.С., Киселев В.П. Иммунологическая характеристика детей раннего возраста с острой обструкцией дыхательных путей при ОРВИ // Клин. лаб. диагн., 2000, №9,с. 43 -44

11. Брегвадзе. Д., Немсадзе К, Кавлашвили Н., Авалишвили Т., Херхе-улидзе М. и др. Роль респираторной вирусной инфекции в развитии аллергических заболеваний у детей //Аллергология и иммунология .2000, Том 1, №2, стр.37-38 .

12. Бронхиальная астма у детей: диагностика, лечение, профилактика (научно-практическая программа Союза педиатров России), М, 2004, 46 с.

13. Гервазиева В.Б., Сверановская В.В., Штерншис Ю.А., Семёнов Б.Ф. Роль респираторных вирусов в развитии аллергии. //Цитокины и воспаление. 2003. - Том 2. - № 3. - с.3-8

14. Гланц С. Медико-биологическая статистика: Пер. анг./ под ред. Н.Е. Бузикашвили и Д.В. Самойлова. -М.: Практика,- 1999.-460с.

15. Григорян С. С., Иванова А.М, Прицкер А.Д. Определение интерферонового статуса в цельной крови у людей при массовых обследованиях // Москва 1989.

16. Гущина Я.С., Маркелова Е.В., Суровенко Т.Н. Динамика уровня INFa у детей с атопической бронхиальной астмой на фоне иммунокор-рекции. // Медицинская иммунология. 2003. - Том 5. - № 3 - 4. - 450 с.

17. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. М.: Медицина. - 1996. - 240с.

18. Зайцева О.В. Малиновская В.В. Кольцов В.Д. Роль интерферонового гомеостаза в патогенезе бронхиальной астмы у де-тей.//Иммунология, 2002- 7, №1.-с.144-150.

19. Зайцева О.В., Лаврентьев А.В., Зайцева С.В., Самсыгина С.В. Ин-терлейкин-1 альфа, фактор некроза опухолей-альфа и интерферон-гамма в сыворотке крови детей, больных бронхиальной астмой// Аллергология, 2000, №3 электронная версия журнала.

20. Зайцева О.В., Малиновская В.В. Роль интерферона у в генезе бронхиальной астмы у детей// Астма, 2001- 2 №2 - с. 15-23.

21. Заплатников А.Л, Коровина Н.А. Острые респираторные инфекции у детей: современные возможности этиотропной терапии //Русский Медицинский Журнал, 2002, т. 10, №3,)

22. Иммунологические методы: Пер. нем./ под ред. X Фримеля. М.: Мир. - 1979. - с.49-55.

23. Калинина Н.М. Нарушения иммунитета при рецидивирующем фуру нкулезе//Цитокины и воспаление 2003 №1 - с.41-44

24. Кирдей Е.Г., Кирдей Л.Е, Скворцова Р.Г., Шинкарева В.М. Особенности иммунного статуса и иммунокоррекции у детей, больных бронхиальной астмой // Астма. 2003. - №1 - с. 19-24.

25. Климов Э.В. Дифференцированная иммунотерапия длительно и часто болеющих детей различных возрастных групп и нозологических подгрупп М. - 2001 - Дисс. д.м.н.

26. Кузнецов В.П. Интерфероны в каскаде цитокинов: исторический и современный аспекты.//Антибиотики и химиотерапия, 1998-№43;5-с.28-39

27. Кузнецова Н. И. Особенности бронхиальной астмы при бактериальной сенсибилизации детей: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 2004. 34 с.

28. Кузник Б.И., Гаймоленко И.Н., Цыбенова Б.Ц. Влияние Вилона на иммунитет у детей с хроническими заболеваниями лёгких. //Цитокины и воспаление. 2003. - Том 2. - № 4. - с.21-26

29. Кузьменко Л.Г., Соколов Л.А., Капустин И.В., Алешкин В.А., Бляхер М.С. и др. Инфицированность детей с бронхиальной астмой цитомегаловирусом и возбудителями микоплазмоза, пневмоцистоза, хламидиоза.//Педиатрия 1999 -№1- с 15-20

30. Курманова Г.М., Рамазанова Ш.Х., Мажитова З.Х. Опыт применения ронколейкина у детей, больных бронхиальной астмой в приступ-ный период. //Медицинская иммунология-2003 -Том 5 -№ 3-4. с. 233

31. Латышева Т. В., Варфоломеева М. И., Удалова В. А., Никонова М. Ф., Ярилин А. А. Взаимосвязь дисбаланса Thl- и Th2- лимфоцитов и формы бронхиальной астмы // Иммунология №3 2005, 164-167

32. Лихванцева Г.В. Роль цитокинов в патогенезе и прогнозе увеаль-ной меланомы //Цитокины и воспаление 2002 - №4 - с.27 - 33)

33. Лопатина Т.К. Архипов С.Н. Назаренко Н.М. Сравнение продукции интерферонов у детей с бронхиальной астмой в остром периоде заболевания и в периоде реконвалесценции.//Клиническая лабораторная диагностика,2000-№ 10.—42с.

34. Мамонтова Т.В., Кайдашев И.П. Новые аспекты апоптоза моно-нуклеарных клеток в патогенезе атопической бронхиальной астмы// Аллергология, 2005, № 4

35. Маркелова Е.В., Гущина С .Я., Костинов М.П., Журавлева Н.В. Клинико-имму но логический эффект вакцинации «пневмо23» детей с атопической бронхиальной астмой.// Ж.микробиологии. 2005, №2-с.83-85

36. Маркова Т.П.,. Чувиров Д.Г Длительно и часто болеющие дети //РМЖ, Том 10 № 3, 2002

37. Маршалкина Т.В. Ормантаев К.С. Беляев Н.Н. Уровень IL-2 и IL-4 у детей с хроническими обструктивными заболеваниями легких. //Медицинская иммунология,2002—4,№2.-179с.

38. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск. - 1989. - 254с.

39. Медуницын Н.В., Хаитов М.Н., Гервазиева И.Б., Краскина Н.А. Порядок и методы контроля безопасности вакцин: общие методические принципы: РД 42-28-10-90. Москва. - 1989. - 49с.

40. Меркулова В.Ю. Интерлейкин-4 и интерферон-у у детей с бронхиальной астмой, инфицированных Mycoplasma pneumoniae, Mycoplasma hominis и микробами семейства Chlamydiaceae // Дисс.к.м.н., М.,-2005.- 110 с.

41. Мусалимова Г.Г., Саперова В.Н., Карзакова JI.M. Микоплазменные и хламидийные пневмонии (этиопатогенез, клинико-иммунологические особенности, диагностика, лечение и иммунотерапия Ронколейкином)// Методические рекомендации. Чебоксары, 2003, 52 с.

42. Намазова Л. С. Патогенетические основы дифференцированного лечения бронхиальной астмы у детей: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 2000., 40 с.

43. Нестерова И.В., Сепиашвили Р.И. Иммунотропные препараты и современная иммунотерапия в клинической иммунологии и медицине. //Аллергология и иммунология. 2000. - Том 1. - № 3. - с. 18-28.

44. Нестерова Н.В. Коваленко С.В. Виферон в программной иммуно-реабилитации часто и длительно болеющих детей. // Кремлевская медицина. Клинический вестник 2002 - №2 - с. 65 - 69

45. Окороков А.Н. Диагностика болезней органов дыхания. — М., 2002, т 3, 547 с.

46. Отчет о результатах клинического изучения лечебной эффективности препарата "АЛЬГИРЕМ" у детей с гриппом и ОРВИ// ГУ Всесоюзный научно-исследовательский институт гриппа, Санкт-Петербург, 2004 г.

47. Просекова Е.В. Гельцер Б.И. Деркач В.В. Шестовская Т.Н. Динамика сывороточных IL-1, IL-6 и IFNy при бронхиальной астме у детей с различной базисной терапией.//Медицинская иммунология,2002-4,№2.-181с.

48. Пыцкий В.И. Обоснование классификации форм бронхиальной астмы и анализ их патогенеза. // Астма 2000-1-№ 1-е. 14-26

49. Рамазанова З.К., Бляхер М.С., Капустин И.В., Архипов С.Н., Скирда Т.А Состояние иммунной системы и продукция цитокинов у часто болеющих детей и у детей с бронхиальной астмой // Медицинская иммунология, 2005, т.7, № 2-3, С. 135

50. Ройт А., Бростофф Д., Мейл Д. Иммунология. // Пер. с англ.-М.: Мир, 2000.-582с.

51. Салмаси Ж.М. Механизмы нарушений регуляторного звена иммунной системы при бронхиальной астмы и принципы их коррекции// Дисс. д.м.н., 1998, М.

52. Самсыгина Г.А., Лаврентьев А.В., Зайцева О.В. Содержание ИЛ-1а, ФНО-а, и ИФН-у в сыворотке крови у детей, больных бронхиальной астмой, в приступном периоде различной степени тяжести// Астма 1- № 1-е.36-43

53. Сапунова Т.А., Борткевич Л.Г., Суковатых Т.Н., Бадыгина Н.А., Пашкова О.Л. Иммуноглобулиновый и цитокиновый статус детей в зависимости от формы аллергического заболевания. //Медицинская иммунология. 2003. - Том 5. - № 3 - 4. - с.237

54. Сенников С.В., Силков А.Н. Методы определения цитокинов. //Цитокины и воспаление. 2005. - Том 4. - № 1. — с.22-27

55. Соколов Е.И., Зыков А.А., Пухальский А.Л., Цыпленкова В.Г., Шевелев В.И. Ингаляция ультрамалых доз алкилирующих препаратов в лечении бронхиальной астмы // Пульмонология 2002 - т. 12 - №3 -с.82 -88

56. Суздальцева Т.В., Макарова Т.В., Выканова Н.Н. NK-клетки и уровень IgE в периферической крови при аспирин-индуцированной и аллергической бронхиальной астме.// Russian Journal of immunology.2002-№3-c23-26

57. Титов Л.П. Кирильчик Е.Ю. Особенности иммунного статуса у часто и длительно болеющих детей с сопутствующей аллергической патологией. //Иммунология, 2000-№3.-с.29-33

58. Туев А.В., Мишланов В.Ю. Бронхиальная астма// Пермь, 2001.-220с.

59. Федоров И.А., Теплова С.Н., Жаков Я.И., Степанов О.Г. Характер микрофлоры респираторного тракта и показатели иммунитета при тяжелой форме бронхиальной астмы у детей.// Ж.микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1999- №3-с.58-61 10.

60. Филянская Е. Г., Ботвиньева В.В. Т112-иммунный ответ и цитокины в патогенезе бронхиальной астмы у детей//Российский педиатрический журнал. 2003 . N 5. с.39-42

61. Хаитов М.Р., Трофимов Д.Ю., Петрова Т.В., Яковлева К.П., Ярцев М.Н. Риновирусная инфекция при атопической бронхиальной астме у детей.// Российский аллергологический журнал.,2004-№1-с.30-36

62. Хопкин Ю.М. Причины атопии// Аллергология, 1999, № 2 электронная версия журнала.

63. Червонский А.В., Суслов А.П., Щитин А.Г. и др. Изучение диффе-ренцировочных антигенов Т-супрессоров мышей с помощью моно-клональных антител.// Иммунол. аспекты биологии развития. 1984. -Москва. - 51с.

64. Чернохвостова Е.В., Герман Г.П. Иммунохимическая диагностика гаммапатий./ Методические рекомендации. 1984. - Москва. - с.80-85.

65. Шапорова H.JL, Трофимов В.И., Шири Зиад Али, Сесь Т.П. Мониторинг цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой: влияние глюкокортикоидной терапии// Медицинская иммунология. 200l.-Том 3 .-№ 1.-с.69-76

66. Шелудько Я.С., Маркелова Е.В., Суровенко Т.Н. IL-4 в оценке воспалительного процесса у детей с атопическими заболеваниями дыхательной системы. //Медицинская иммунология. 2002. - Том 4. - № 2.-С.187

67. Юлдашева И.А. Изменение иммунного статуса и перекисного окисления липидов у больных бронхиальной астмой.//Иммунология 2002-№2 -с. 107-109.

68. Ярилин А.А. Основы иммунологии.- М.: Медицина, 1999. 608с.

69. Akdis М, Blaser К, Akdis СА.Т regulatory cells in allergy: novel concepts in the pathogenesis, prevention, and treatment of allergic diseases.// J Allergy Clin Immunol. 2005-vl 16-p 961-968

70. Baric.R-B.Z., Verona E., Sabioncello A., Svoboda-Beusun Z.T-cell subsets in asthmatic children.// Acta Med. Croatica 1993 v. 47- №3- PI 19-122.

71. Bastida SDL, Lopez VB, Castrejon VMI, Galicia TJ, Cano AS, Miranda FAJ Allergic asthma and interleukins 2, 4, 5, 6 and 12 and gamma interferon levels // Rev. Alerg. Мех., 2004, v. 51, p.7-15.

72. Biller H, Bade B, Matthys H, Luttmann W, Virchow JC. Interferon-gamma secretion of peripheral blood CD8+ T lymphocytes in patients with bronchial asthma: in vitro stimulus determines cytokine production// Clin Exp Immunol 2001 vl26-p 199-205

73. Boyum A. Separation of leucocytes from blood and bone marrow.// Scand.J.Clin.Lab. Invest.,1968, v.21, Suppl.97, p.28-33.

74. Branden E, Koyi H, Gnarpe J, Gnarpe H, Tornling G Chronic Chlamydia pneumoniae infection is a risk factor for the development of COPD// Respir Med. 2005 v/99-p20-26.

75. Brown V., Warke T.J., Shiedels M.D., Ennis M. T-cell cytokine profile in childhood asthma // Thorax, 2003, v58, р.311-316

76. Bufe A, Gehlhar K, Grage-Griebenow E, Ernst M. Atopic phenotype in children is associated with decreased virus-induced interferon-alpha release // Int. Arch. Allergy Immunol., 2002, v. 127, p. 82-88

77. Buttner C, Lun A, Splettstoesser T, Kunkel G, Renz H. Monoclonal an-ti-interleukin-5 treatment suppresses eosinophil but not T-cell functions //Eur.Respir.J, 2003, v.21, p.799-803

78. Chinen J, Shearer WT. Advances in asthma, allergy and immunology series 2004: basic and clinical immunology // J Allergy Clin Immunol. 2004 vll4-p.398-405.

79. Chipps B. Respiratory Syncytial Virus Infection and Asthma Development.// American Academy of Allergy, Asthma and Immunology 56th Annual Meeting Day 1 March 4,2000.

80. Cho SH, Stanciu LA, Holgate ST, Johnston SL. Increased interleukin-4, interleukin-5, and interferon-gamma in airway CD4+ and CD8+ T cells in atopic asthma// Am J Respir. Crit .Care Med., 2005, v. 171, p.224-30

81. Costa С ВТ, Nagao AT, Arslanian C, Carneiro SMM, Naspitz CK, Sorensen RU, Leiva L, Sole D Immunological evaluation of allergic respiratory children with recurrent sinusitis.// Pediatr Allergy Immunol. 2005,vl6-p.534-538.

82. El-Mezzein R.E.H., Matsumoto Т., Nomiyama H., Miike T. Increased secretion of IL-18 in vitro by peripheral blood mononuclear cells of patients with bronchial asthma and atopic dermatitis.//Clin. and Exp. Immunol.,2001-126, №2.-193-198c.

83. Esposito S, Droghetti R, Bosis S, Claut L, Marchisio P, Principi N. Cytokine secretion in children with acute Mycoplasma pneumoniae infection and wheeze // Pediatr. Pulmonol., 2002, v.34, p. 122-127.

84. Folkerts G., Busse W.W., Nijkamp F.P., Sorkness R., Gern J.E. Virus-induced airway hyperresponsiveness and asthma // Am. J.Respir.Crit.CareMed., 1998, v/157-p. 1708 1720

85. Fonseca-Aten M, Rios AM, Mejias A, Chavez-Bueno S, Katz K, e.a Mycoplasma pneumoniae induces host-dependent pulmonary inflammation and airway obstruction in mice// Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol., 2005, v. 3, p. 201-210

86. Friedek D, Ekiel A, Szulakowski P, Romanik M. Antibodies seropreva-lence for mycoplasma pneumoniae antigens in patients with bronchial asthma // Wiad Lek. 2002-v.55-p. 158-63.

87. Gentile DA, Doyle WJ, Zeevi A, Howe-Adams J, Trecki J, Skoner DP. Association between TNF-alpha and TGF-beta genotypes in infants and parental history of allergic rhinitis and asthma // Hum. Immunol., 2004, v.65, p.347-51

88. Hagendorens MM, Ebo DG, Bridts CH, De Clerck LS, Stevens WJ Flow cytometrical determination of regulatory cytokines (IL-10, IL-12) and circulating dendritic cell cytokines in allergic asthmatic children // Cytokine, 2004,v.26, p.82-88

89. Huang JL, Kuo ML, Hung IJ, Wu CJ, Ou LH, Cheng JH. Lowered IL-4-producing T cells and decreased IL-4 secretion in peripheral blood from subjects with juvenile rheumatoid arthritis// Chang Gung Med J. 2001 v.24-p.77-83.

90. Ito Y, Tosh B, Togashi Y, Amagase K, Kishida T e.a. Absorption of interferon alpha from patches in rats // J Drug Target, 2005-V.13- p.383-390

91. Juntti H, Kokkonen J, Dunder T, Renko M, Karttunen R, Uhari M. Serum concentrations of interferon-gamma and intercellular adhesion molecule-1 eight years after an early respiratory syncytial virus infection // Clin Exp Allergy. 2005- v35-p.59-63.

92. Jyonouchi H, Sun S, Rimell FL. Cytokine production by sinus lavage, bronchial lavage, and blood mononuclear cells in chronic rhinosinusitis with or without atopy // Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 2000 v.l26-p522-528.

93. Katsunuma T, Kawahara H, Suda T, Ishii T, Ohya Y, Akasawa A, Saito H, Oshida T, Sugita Y Analysis of gene expressions of T cells from children with acute exacerbations of asthma // Int. Arch. Allergy Immunol., 2004, v.134, p.29-33

94. Kim CK, Kim SW, Park CS, Kim BI, Kang H, Koh YY Bronchoal-veolar lavage cytokine profiles in acute asthma and acute bronchiolitis // J. Allergy Clin. Immunol., 2003, v.l 12, p.64-71

95. Kim JH, Kim BS, Lee SY, Seo JH, Shim JY, Hong TJ, Hong SJ. Different IL-5 and IFN-gamma production from peripheral blood T-cell subsets in atopic and nonatopic asthmatic children// J. Asthma, 2004, v.41, p.869-876

96. Kimura M, Tsuruta S, Yoshida T. Differences in cytokine production by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) between patients with atopic dermatitis and bronchial asthma // Clin Exp Immunol. 1999 v. 118-p. 192-196

97. Kimura M, Tsuruta S, Yoshida T. IL-4 production by PBMCs on stimulation with mite allergen is correlated with the level of serum IgE antibody against mite in children with bronchial asthma // J Allergy Clin Immunol. 2000 -v.l05-p.327-32.

98. Kondo Y, Matsuse H, Machida I, Kawano T, Saeki S, Tomari S, Obase Y, Fukushima C, Kohno Effects of primary and secondary low-grade respiratory syncytial virus infections in a murine model of asthma // Clin Exp Allergy. 2004 -34-p. 1307-1313.

99. Kragsbjerg P., Vikterfors Т., Holmberg H. Cytokine responses with pneumonia caused by Chlamydia or Mycoplasma//Respiration, 1998, v.65, N4, p.299-303.

100. Kumar RK, Herbert C, Webb DC, Li L, Foster PS. Effects of anticy-tokine therapy in a mouse model of chronic asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2004, v.170, p.1043-1048

101. Lorente F, Laffond E, Moreno E, Davila I. Viral infection and asthma: immunologic mechanisms . Allergol Immunopathol (Madr) 2002 May-Jun; 29 (3): p. 126-133

102. Manchini G., Carbonara A., Heremans J., Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion.// Immunochemistry, 1965, v.2, N3, p.235-254

103. Martinez FD. Heterogeneity of the association between lower respiratory illness in infancy and subsequent asthma // Proc. Am. Thorac. Soc., 2005- v. 2- p.157-161

104. Nagano Y, Kondo M, Tamaoki J, Isono K, Nagai A. Peripheral blood Thl and Th2 profile in patients with moderate asthma: effect of inhaled corticosteroid // J. Asthma, 2002- v.39- p.247-253

105. Najam FI, Giasuddin AS, Shembesh AH. Immunoglobulin isotypes in childhood asthma. // Indian J Pediatr. 1999 -v.66-p.337-344.

106. Narovlyansky AN, Amchenkova AM, Mezentseva MV, Sanin AV, Ershov FI. Cell Interferon Sensitivity in Immunodeficiencies, Autoimmune and Allergic Diseases // Russ J Immunol. 2000 -v.5-p.l85-192

107. Nia F., Nystad W., Hetlevik O., Carlsen K.C.L., Carlsen K.-H. Airway infections in infancy and presence of allrgy and asthma in school age children// Arch.Dis. Child., 2003-v 88- p.566-569

108. Noma T, Sugawara Y, Ogawa N, Saeki T, Yamaguchi K, Kawano Y. Dermatophagoides-induced interleukin-10 production by peripheral blood lymphocytes from patients with asthma in remission // Pediatr. Allergy Immunol., 2004- v.15- p.459-468

109. Packard KA, Khan MM. Effects of histamine on Thl/Th2 cytokine balance // Int. Immunopharmacol.// 2003-V.7- p.909-920.

110. Park SJ, Lee YC, Rhee YK, Lee HB. Seroprevalence of Mycoplasma pneumoniae and Chlamydia pneumoniae in stable asthma and chronic obstructive pulmonary disease // J. Korean Med. Sci., 2005- v.20-p.225-228

111. Paul S. Tumour necrosis factor a: The role of this multifunctional cy-tokin in asthma.//Immunol. and Cell Biol.,2001-v.79-№2.-pl 32-140.

112. Perez-Machado MA, Ashwood P, Torrente F, Salvestrini C, Sim R . e.a. Spontaneous T(H)1 cytokine production by intraepithelial but not circulating T cells in infants with or without food allergies// Allergy. 2004- v. 59-p.346-353.

113. Prescott S.L., King В., Strong T.L., Holt P.G. The value of perinatal immune responses in predicting allergic diseases at 6 years old // Allergy, 2003-v.ll-p.l 187-1194

114. Ray A, Cohn L. Altering the Thl/Th2 balance as a therapeutic strategy in asthmatic diseases // Curr. Opin. Investig. Drugs, 2000-V.4- p.442-448.

115. Renzi P.M., Turgeom G.P., Marcotte J.E., Drblik S.P., Berube D., Gagnon M.F., Spier S Reduced interferon-y production in infants with bronchiolitis and asthma //Am J Respir Crit Care Med, 1999-V.159- p. 1417 -1422

116. Rigato O, Salomao R. Impaired production of interferon-gamma and tumor necrosis factor-alpha but not of interleukin 10 in whole blood of patients with sepsis// Shock. 2003 -v.l9-p.l 13-116.

117. Robinson DS, Larche M, Durham SR. Tregs and allergic disease// J. Clin. Invest., 2004- v.l 14- p.1389-1397.

118. Saeki S., Matsuse H., Kondo Y., Machida I., Kawano T. e.a. Effect of antiasthmatic agents on the function of peripheral blood monocyte-derived dendritic cells from atopic patients // J.Allergy Clin.Immunol., 2004- v.l 14-p 538-544

119. Samsigina G.A., Lavrentiev A.V., Zaitseva O.V. The serum level of some cytokines in children in the acute period of bronchial asthma// Int. J. Immunorehabilitlology. 2000-V.2- p.l 17

120. Sato M, Goto S, Kaneko R, Ito M, Sato S, Takeuchi S. Impaired production of Thl cytokines and increased frequency of Th2 subsets in PBMC from advanced cancer patients.

121. Schmidt SM, Muller CE, Bruns R, Wiersbitzky SK. Bronchial Chlamydia pneumoniae infection, markers of allergic inflammation and lung function in children. Pediatr Allergy Immunol. 2001- v. 12- p.257-265.

122. Shahid SK, Kharitonov SA, Wilson NM, Bush A, Barnes PJ. Increased interleukin-4 and decreased interferon-gamma in exhaled breathcondensate of children with asthma // Am. J. Respir. Crit .Care Med., 2002-v.165- p.l290-1293

123. Shao C, Suzuki Y, Kamada F, Kanno K, Tamari M, e.a. Linkage and association of childhood asthma with the chromosome 12 genes // J. Hum. Genet., 2004- v.49- p.l 15-122.

124. Shi Huan Zhong Eosinophils in asthma//Chin. Med. J., 2004-v.l 17-5-p. 792-794

125. Shin SH, Ponikau JU, Sherris DA, Congdon D, Frigas E, Homburger HA, Swanson MC, Gleich GJ, Kita H. Chronic rhinosinusitis: an enhanced immune response to ubiquitous airborne fungi// J Allergy Clin Immunol. 2004 -v.l 14-p. 1369-1375.

126. Shirai T, Suzuki K, Inui N, Suda T, Chida K, Nakamura H Thl/Th2 profile in peripheral blood in atopic cough and atopic asthma // Clin Exp Allergy, 2003- v.33- p.84-89

127. Simon HU, Seelbach H, Ehmann R, Schmitz M Clinical and immunological effects of low-dose IFN-alpha treatment in patients with corticos-teroid-resistant asthma // Allergy, 2003- v. 58- p. 1250-1255

128. Spinozzi F, Agea E, Russano A, Bistoni O, Minelli L, Bologni D, Bertotto A, de Benedictis FM CD4+IL13+ T lymphocytes at birth and the development of wheezing and/or asthma during the 1st year of life// Int Arch Allergy Immunol 2001 -v/124-p.497-501

129. Steinke J.W., Borish L. Th2 cytokines and asthma. IL-4: its role in the pathogenesis of asthma and targeting it for asthma treatment with IL-4 rece-por antagonist// Respir. Res., 2001-V.2- p.66-70

130. Szegedi A, Aleksza M, Gonda A, Irinyi B, Sipka S, Hunyadi J, Antal-Szalmas P. Elevated rate of Thelperl (T(H)l) lymphocytes and serum IFN-gamma levels in psoriatic patients // Immunol Lett. 2003 -v.86-p.277-280.

131. Taylor A, Verhagen J, Akdis С A, Akdis M. T regulatory cells in allergy and health: a question of allergen specificity and balance // Int Arch Allergy Immunol. Epub 2004 Aug 30 2004 -v.l35-p.73-82.

132. Teig N, Anders A, Schmidt C, Rieger C, Gatermann S. Chlamydo-philapneumoniae and Mycoplasma pneumoniae in respiratory specimens of children with chronic lung diseases // Thorax, 2005- v.60- p.962-966

133. Tilg H, Kaser A. Type I interferons and their therapeutic role in Th2-regulated inflammatory disorders// Expert Opin. Biol. Ther. 2004- v. 4-p.469-481.

134. Tsoumakidou M, Tzanakis N, Kyriakou D, Chrysofakis G, Siafakas NM. Inflammatory cell profiles and T-lymphocyte subsets in chronic obstructive pulmonary disease and severe persistent asthma // Clin Exp Allergy, 2004- v.34- p.234-240

135. Vargas MH, Bernal-Alcantara DA, Vaca MA, Franco-Marina F, Las-curain R. Effect of BCG vaccination in asthmatic schoolchildren// Pediatr Allergy Immunol. 2004 -v.l5-p.415-20.

136. Walsh GM. Novel therapies for asthma—advances and problems // Curr. Pharm. Des., 2005- v.23- p.3027-38

137. Wahlstrom J, Dahlen B, Ihre E, Wigzell H, Grunewald J, Eklund A. Selective CD8+ T cells accumulate in the lungs of patients with allergic asthma after allergen bronchoprovocation. Clin. Exp Immunol 1998 Apr. 112(1)- 1-9

138. Weinberger M. Respiratory infections and asthma: current treatment strategies // Drug Discov. Today, 2004- v. 19- p. 831-837

139. Wohlleben G, Muller J, Tatsch U, Hambrecht C, Herz U e.a. Influenza A virus infection inhibits the efficient recruitment of Th2 cells into the airways and the development of airway eosinophilia // Immunol., 2003- v. 170-p.4601-4611

140. Wong CK, Ho CY, Ко FW, Chan CH, Ho AS, Hui DS, Lam CW.Proinflammatory cytokines (IL-17, IL-6, IL-18 and IL-12) and Th cytokines (IFN-gamma, IL-4, IL-10 and IL-13) in patients with allergic asthma// Clin Exp Immunol. 2001 -v.l25-p.l77-83.

141. Woolard MD, Hodge LM, Jones HP, Schoeb TR, Simecka JWTThe upper and lower respiratory tracts differ in their requirement of IFN-gamma and IL-4 in controlling respiratory mycoplasma infection and disease // J. Immunol., 2004-V.172- p. 6875-6883

142. Yang J, Hooper WC, Phillips DJ, Talkington DF. Regulation of proinflammatory cytokines in human lung epithelial cells infected with Mycoplasma pneumoniae // Infect. Immun., 2002- v.70- p.3649-3655.