Скрининг гена лейкоцитарной адгезии (BLAD-синдром) у животных черно-пестрого корня крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат биологических наук Игнатьев, Владимир Михайлович

• Игнатьев, Владимир Михайлович
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Игнатьев, Владимир Михайлович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1» Обзор литературы

1.1.Молекулы клеточной адгезии человека и животных

1.2.Суперсемейство ееяектинов

1.3. Суперсемейство иммуноглобулинов

1.4.Суперсемейство кадхеринов

1.5. Суперсемейство интегринов

1.5.1. /^-семейство

1.5.2. Дг-семейство

1.5.3. ßz- семейство

1.5.4. Лиганды интегриновых молекул

1.5.5. Регуляция экспрессии интегриновых молекул

1.5.6. Сигнальные функции интегринов

1.6.Дефицит лейкоцитарной адгезии у человека (LAD- 21 синдром), собак, мышей

1.7.Дефицит лейкоцитарной адгезии (BLAD-синдром) у черно- 25 пестрого корня крупного рогатого скота

1.8. Наследование гена В LAD и краткая характеристика его 30 распространения

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований

ГЛАВА 3, Результаты собственных исследований

3.1 .Реактивы для выделения ДНК и проведения ГЕЦР

3.2. При боры и материалы

3.3. Буферы и растворители

3.4.Методы выделения ДНК

3.4.1.Фенольно-хлороформовый метод

3.4.2,Метод солевой экстракции

3.4.3,Метод Кавасаки

3.4.4.Метод выделения ДНК из спермы

3.5. Анализ методов выделения ДНК

3.6. Определение концентрации ДНК

3.7. ПЦР-анализ с различимый тинами праймеров для диагностики гена ВЬ АО-синдрома у черно-пестрого корня крупного рогатого скота

3.7.1 .Применение ПЦР-анализ а для выявления гена ВЬАВ-синдрома с использованием праймеров 1уан2 и 1уапЗ

3.7.2.Применение ПЦР-анализа для выявления гена ВЬАХ)-синдрома с использованием праймеров 12.4 и 12.

3.8. Миграция и поток гена ВЬАБ в популяциях черно-пестрого корня крупного рогатого скота в различных странах 53 мира

3.9.Анализ родословных быков-производителей носителей гена ВЬ А»-синдром 58 ЗЛО. Характеристика продуктивности дочерей быков-произво- 69 дителей, носителей гена ВЬАО

ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Скрининг гена лейкоцитарной адгезии (BLAD-синдром) у животных черно-пестрого корня крупного рогатого скота»

Актуальность темы- У различных видов и пород крупного рогатого скота описано более 200 наследственных заболеваний (Lidauer, 1992). Быстрота и точность диагностики многих из них значительно повысилась благодаря достижениям молекулярной генетики, развитию молекулярно-генетических методов регистрации полиморфных локусов ДНК и мутационных изменений;, созданию эффективных ДНК-диагностических процедур (Евграфов О,В., 1992; Горбунова В.Н.» Баранов В,С,, 1997),

В литературе отражена большая группа молекул клеточной адгезии. вызывающих морфологические изменения в раннем эмбриогенезе и в орган о - к гистогенезе (Боценовский В.А., Барышников А,Ю,, 1994). Их принято делить на. 4 супереемейства: ее-лектины, иммуноглобулины,, кадхерины и интегрины. Особую роль играют интегрины - поверхностные клеточные белки, запускающие адгезию клеток путём взаимодействия с различными белками матрнкса, Они обеспечивают интеграцию между внутриклеточным цитоскелетоном и экстрацеллюляряым матриксом. Интегрины лейкоцитов» как и другие молекулы адгезии» играют ведущую роль в осуществлении важнейших функций лейкоцитов (Bauer-Sic, 1963). Прежде всего, это миграция лейкоцитов из крови в ткани. Интегрины участвуют в агрегации тромбоцитов, иммунологических процессах, восстановление тканей при ранениях, в ряде процессов дкфференцировки, пре- и поотнатальном развитии .

Мутации генов интегринов лежат в основе заболеваний у животных. Дефицит лейкоцитарной адгезии (Bovine Leucocyte Adhesion Deficiency), или BLAD-синдром крупного рогатого скота - наследственная аутосомная болезнь рецессивного типа, обусловленная точковой мутацией в гене, кодирующем CD 18 (бета-субъединица бета-два иитегрииа), что приводит к замене асларагкковой кислоты на глицин в 128 положении (D128G аллель), Данное заболевание ранее было установлено как синдром грану-лоцитопатии крупного рогатого скота и получило название болезнь Такахаши - Хагемозера (Hagemoser et al., 1983; Takahashi et al., 1987).

Болезнь - аналог LAD-синдрома человека (Crowley et al., 1980), Данная мутация обуславливает резкое снижение устойчивости телят к бактериальным инфекциям. Впервые это заболевание обнаружили у прямых потомков знаменитых американских быков - родоначальников голштинской породы (Kehrli et al., 1990; Grobet et al., 1992). В США носителями данного аллеля являются 15% быков-производителей и 6*Л маточного поголовья скота. Ежегодный экономический ущерб от этого заболевания в США определяют в пределах 5 млн. долларов (Sinister et al., 1992).

В большинстве развитых стран Европы и Америки созданы специальные программы по снижению частоты встречаемости ал-леля BLAD-синдрома в популяциях скота черно-пестрой породы (Kehrli et al., 1990; Sinister et al., 1992; Agerholm et al., 1993; Tamrnen, 1994). Выдающихся быков и ремонтный молодняк проверяют на носительства мутантного гена, а результаты регулярно публикуют в каталогах по племенным быкам (Bierma et а1.„ 1992),

Цель и задачи исследований. Целью данной работы является определение гена BLAD-синдрома у чёрно-пёстрого корня крупного рогатого скота, установление частоты его встречаемости > оценка генеалогий различных быков-производителей носителей данного гена, определение продуктивности дочерей быков-носитедей BLAD.

Для решения поставленных задач было необходимо:

1. Разработать оптимальный режим выделения ДНК для последующего выполнения ПЦР на BLAD.

2. Провести характеристику чёрно-пёстрого корня крупного рогатого скота по частотам встречаемости мутантного аллеля D128G и генотипов в локусе р2 интегрина,

3. Дать характеристику родословных быков-производителей носителей рецессивного гена BLAD.

4. Выполнить статистические расчеты с целью оценки быков-производителей носителей BLAD по молочной продуктивности дочерей, связи с индексом племенной ценности.

Научная новизна н практическая значимость работы.

Впервые в условиях Российской Федерации выявлено носитель-ство мутантного гена BLAD-синдрома. Носителями оказались быки-производители, поступившие в нашу страну из Германии, Канады и США, а также одна корова отечественной селекции. Носителями гена BLAD оказались быки-производители, прямые потомки одного из лидеров голштинской породы быка Осборндэйл Айвенго 1189879.

Положения, выносимые на защиту. Разработка режима ПЦР для выявления гена BLAD-синдрома. Анализ родословных выдающихся быков-производителей носителей гена BLAD и продуктивности их дочерей.

Публикация материалов. По материалам диссертации опубликовано 2 научные работы.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы обсуждались при рассмотрении годовых отчетов на заседаниях отдела сертификации и зколого-генетических исследований, Ученого Совета ВНИИ животноводства в 1996-1998гг., а также на конференции аспирантов и молодых ученых ВНИИЖ, 1998г. Часть полученных материалов диссертации были представлены на научно-практической юбилейной конференции, посвященной 40-летию образования Молдавского НИИ животноводства и ветеринарии. Кишинев. 1997.

Объем работы. Диссертационная работа состоит из ©ведения, трех глав, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы. Материал изложен на 96 страницах машинописного текста, содержит 7 таблиц, 13 рисунков, 3 диаграммы. Список литературы включает 155 источников, в том числе Î31 на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов», Игнатьев, Владимир Михайлович

выводы

1. Впервые в условиях Российской Федерации выявлено носи-тельство мутантного гена ВЬАО-синдрома. Носителями оказались быки-производители, прямые потомки бык а-л и дера голштинской породы Осборндзйл Айвенго 1189870, родившегося в Голландии 26 апреля 1952 года, и поступившие в нашу страну из Германии, Канады и США.

2. Аттестация 176 голов черно-пестрого корня методом ПЦР-анализа на носительство гена ВЬ АО-синдрома показала его наличие у 9 быков- производителей и одной коровы или у 5,7% от числа животных в исследованной группе.

3. Результаты проведенных исследований выглядели следующим образом: 166 животных оказались гомозиготами по 0128 гену (иеносители), а 10 особей - гетерозиготами (носителями) и имели генотип 0128/01280. Частота встречаемости гена ВЪАГ) по исследованной популяции составила 0,0284. Гомозиготные особи по гену 01280 у исследованной популяции отсутствовали, что, возможно связано с анализом только взрослых животных, а гомозиготы по рецессивному гену погибают как известно почти полностью в молодом возрасте.

4. Распространение гена ВЬАО происходит в равной степени как по материнской так и по отцовской линии. Бык Код 189 получил этот ген через свою мать, Эден Дейри Гламорас Айви 8696068, которая была дочерью Осборндейл Айвенго. Бык Жест 750 унаследовал этот ген через мать Никол 3265711, которая являлась дочерью Пенстейт Айвенго Стар 1441440.

5. Анализ трех методов выделения ДНК из крови показал, что метод солевой экстракции ДНК не требует использования вредного для здоровья реактива фенола, Применение метода солевой экстракции позволяет добиться выделения высокомолекулярной ДНК (20-50кЪ) и высокой степени ее очистки. Недостатком метода Кавасаки является то, что им невозможно выделение фрагментов ДНК длиной более 20 пн.

6. Сравнительный анализ по использованию двух типов прай-меров показал, что применение праймеров типа II дает лучшие результаты в двух случаях. Во-первых, получаемые фрагменты более крупные, а следовательно, более чёткие и хорошо видны на реакционном поле. Во-вторых, большая величина фрагментов способствует ускоренному завершению электрофореза.

7. В исследованиях установлено, что из всех быков-производителей носителей мутантного гена ВЬАО по индексу племенной ценности 4 были категории Аь два других соответственно А2 и А3 т.е. улучшателями по молочной продуктивности, тогда как 7-й - улучшателем по жируСБ}).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании статьи 19 Федерального закона «О племенном животноводстве» от 1995 года рекомендуем проводить сертификацию элитных быков-производителей, быкопроизводящих коров и племенного молодняка крупного рогатого скота черно-пестрого корня на носительство гена ВЬАО-синдрома с помощью ПЦР, во избежание широкого распространения дефектного алле-ля.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Игнатьев, Владимир Михайлович, 1998 год

1. Баранов B.C. О некоторых успехах и перспективах молекулярной диагностики наиболее распространенных наследственных заболеваний /У Цитология и генетика. -1992, -N.4. С.64-72.

2. V 2. Боценовский В. А.,Барышников А.Ю. Молекулы клеточной адгезии человека // Успехи современной биологии. 1994. -Т.114.- Вып.б.- С.741-753.

3. Вартапетян А.Б. Полимеразная цепная реакция /7 Молекулярная биология. -1991.- Т. 25. N 4. - С.926-936.

4. Глазко В.И.ДНК-технологии животных. Киев,-1997.- 173с.

5. Винничук Д.Т., Созинов A.A. Ген «BLAD» в наследственности голштинского скота /у В1сник аграрной науки. -1994. -N6. -С.44-46.

6. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярну») диагностику и генотерапию наследственных заболеваний. Санкт-Петербург. Изд-во «Специальная литература», -1997. 286с.

7. Жигачёв А., Богачёва Т., Фогель С. Система контроля за вредными мутациями // Молочное и мясное скотоводство -1998. -N6-7. С.18-21.

8. Ю.Зиновьева H.A., Попов А.Н., Эрнст Л.К., Марзанов Н.С., Боч-карёв В.В., Стрекозов H.H., Брем Г. Методические рекомендации по использованию метода лолимеразной цепной реакции в животноводстве. -1998 47с.

9. П.Зиновьева H.A. Молекулярно-генетические аспекты в решении задач современного животноводства // Автореф.дисс. докт. биол. наук. Дубровицы. -1998.

10. Коствцкий И.Е., Кириленко С.Д., Глазко В.И. Диагностика BLAD у КРС, Тез, Межд, конф. по биотехнол. «М ол екулярно-генетические маркеры животных». Киев. -1997. С. 14.

11. Кузнецов В.М. Статистический анализ родословных // Зоотехния. 1998. -N2. - С.5-8.

12. Логинов Ж.Г. Быки-лидеры голштинской породы в США и Канаде // Зоотехния. =1989. -=N4. -С.75-78.

13. Марзанов Н.С. Иммунология и иммуногенетика овец и коз. Кишинев: Штиинца. 1991.- 237 с.

14. Марзанов Н.С,, Попов А.Н,, Зиновьева H.A., Полежаева В,А.» Игнатьев В.М., Брем Г. Скрининг гена BLAD-синдрома у животных чёрно-пёстрого корня // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. -1997. -№4.-С.59-61.

15. Меркурьева Е.К., Абрамова З.В., Б акай A.B., Кочнш И.И. Генетика. ВО «Агропромиздат». М -1991. -446 с.

16. Плохинский H.A. Математические методы в биологии. М.:МГУ.-1978.-265с.

17. Погребняк В.А. Селекционные аспекты повышения потенциала молочной продуктивности черно-пестрой породы Я Дисс. докт. с.-х. наук. Дубровицы. -1998.

18. Прудов А.И. Оценка генетических и селекционных признаков импортного немецкого чёрно-пёстрого скота // Методы повышення продуктивности повышения с.-х скота, -Саранск, 1982, -С. 17-23.

19. Прудов А,И. Дунин И.М. Использование голштинской породы для интенсификации молочного скота. -М.: «Нива России» « 1992, -191с.

20. Усенбеков Е.С. Генотипирование крупного рогатого скота по локусам каппа-казеина, бета-лактоглобулина и мутации BLAD // Автореф.дисс. канд. биол. наук. Санкт-Петербург-Пушкин.-1995.

21. Эрнст Л.К., Жигачёв А.И., Григорьев Ю.М. Крупномасштабная селекция и инбридинг // Сельскохозяйственная биология1992. N.4. - С.3-9.

22. Agerholm J.S.,Houe Н., Jorgensen С.В., Basse A, Bovine leukocyte adhesion deficiency in danish holstein-friesian cattle. II. Patho-anatomical description of affected calves //Acta vet.scand.1993.- Y.34.- P. 237-243.

23. Ackermarm M. R., Kehrli M. E., Morfitt D. C. Ventral dermatitis and vasculitis in a calf with bovine leukocyte adhesion deficiency // J. Am. Vet. Med. Ass. -1993. -V. 202. -P.413 415.

24. Altieri D. C,, Bader R., M annuo ci P, M,, Edgington T, S. Oligospecificity of the cellular adhesion receptor MAC-1 encompasses an inducible recognition specificity for fibrinogen // J, Cell. Biol. -1988. -V.107.- P.1893- 1900.

25. Altieri D, Q„ Edgington T. S, The saturable high affinity association of factor X to ADP-stimulated monucytes defines anovel function of the MAC-1 receptor // J, Biol, Chem, -1988b, -V, 263.- P.7007-7015.

26. Anderson D, C., Springer T. A. Leukocyte adhesion deficiency; an inherited defect in ine Mac-1, LFA-1 and pl50,95 glycoproteins // Ann. Rev. Med -1987. -V.38. P.175 - 194.

27. Anon. Erbfehler- Was ist Blad? /7 Hann. Land. Forstwirtsch. Ztg. 1991. 11.5.91,

28. Anon. VDS-Beschluß zu BLAD. Ostfr. Landvolk. -1992 -V. -107. P.28.

29. Anon. Was ist BLAD // Weser Ems Zeitung -1992.-V. 1.-S.5.

30. Argenbright L. W., Barton R. W. Interactions of leukocyte integrins with intercellular adhesion molecule 1 in the production of inflammatory vascular injury in vivo it J. Clin. Invesl. -1992.= V. 89.-P.259 272.

31. Arnaout M. A., Pitt J., Cohen H. J., Melamed J., Rosen F. S., Col ten H. R. Deficiency of a granulocyte-membrane glycoprotein (gpl50) in a boy with recurrent bacterial infections. -1982.«V.306. P.693-699.

32. Arnaout M. A., Colten H. R. Complement C3 receptors structure and function // Mol/'Immunol. -1984= -V.2L -PJ191 1199=

33. Arnaout M. A. Leukocyte adhesion molecules deficiency: its structural basis, pathophysiology and implications for modulating the inflammatory response if Immunol. Rev. -1990 .-V. 114. P. 145 - 180.

34. Arnaout M. A. Structure and function of the leukocyte adhesion molecules CD11/CD 18 // Blood. -1990.-V. 75.- P.1037- 1050.

35. Back A. L,4 Kwok W, W., Hickstein D. D. Identification of two molecular defects in a child with leukocyte adherence deficiency // J. Biol. Chiem. 1992.-V. 267. - P.5482 - 5487.

36. Bainton D. F., Kishimoto Т. K., Springer T. A. Leukocyte adhesion receptors are stored in peroxidase-negative granules of human neutrophils if Exp. Med. -1987. -V.166. -P. 1641 1653.

37. Bartholmes A. Zur Ätiologie der Nabelentzundung des neugeborenen Kalbes. Hannover. Tierarztl. Hochsch. Vet.-Med. -1994.

38. Beller D. I., Springer Т. A., Schreiber R. D. Anti-Mac-1 selectively inhibits the mouse and human type three complenent receptor // J. Exp. Med. -1982. -V. 156. -P. 1000 1009.

39. Bierma J. BLAD-Bulls in Europe // Euroworld. -1992.-V.807.-S.l 11.

40. Blin N., Stafford D.W. A general method for isolation of high molecular weight DNA from eucaryotes .// Nucleic. Asids Res.1976/- V,3.- P; 2303-2308.

41. Boichard £>., Ajmigues Y. Investigation on possible linkage beitwechti the ÖLAD gene and a QTL for production or type traits in Holstein cattle if 46th Annual Meeting of the European Association for Anmai Production. Prague. 1995. - P.4-7

42. Bowen T., Ochs H. D., Altman L. C., Price T. H., Van Epps D. E. et al. Severe recurrent bacterial infections assoeitied with defective adherence and chemiotaxis // J. Pediatr. 1982. V. 101. P. 932 940.

43. Boxer L. A., Hedley-Whyte E. T., Stossel T. P. Neutrophil actin dysfunction and abnormal neutrophil behaviour /7 N. Engl. J. Med. -1974. -V.291. -P.1093 1099.

44. Brem G. Neu Wege zur Tiergesundheit-Stand der Biotechnik // Zucht ungskunde.-1992. -V.6. -S.411-422.

45. Buescher» E. S., Gaither T., Nath J.v Callin J. I. Abnormal adherence-related functions of neutrophils, monocytes, and EPSTEIN-BARR virus -trans forme d B cells in a patient with C3bi receptor deficiency if Blood. -1985. -V.65. -P. 1382- 1390.

46. Bullock W, E.h Wright S. D. Role of the adherence-promoting receptors, CR3, LFA-1 and pl50,95 in binding of Histoplasma Capsutum by human macrophages II J. Exp. Med. -1987. -V. 165. -P.195 210.

47. Buther E.G. Cellular and molecular mechanism that direct leucocyte traffic if Am.J.Pathol. -1990. -V.136. -P. 3-11.

48. Cabanas C., Hogg N. Lymphocyte-fibroblast adhesion: a useful model for analysis of the interaction of the leucocyte integrin LFA-1 with ICAM-1 // Fed. Eur. Bioch. Societ. -1991. -V.292. -P.284 -288.

49. Chat.ila A.T, A., Geha R. S., Arnaout M. A. Constitutive and stimulus-induced phosphorylation of CD 11 /CD 18 leukocyte adhesion molecules /7 J.Cell Biol. -1989. -Y.I09. -P.3435 3444.

50. Cox E.„ Kuczka A., Tammen 1., Schwengel" B. Leukocytenadhesiedtficientie bij rund en hond: een erfelijke stoomis van het immuunstelsel // Viaams. Diergeneeskd, Tijdschr. -1993. -V.62. -P.71 79.

51. Crowley C. A.» Cumutte J.T., Rosin R.E. et al. An inlierited abnormality of neutrophil adhesion: its genetic transmission and its associations with a missing protein // N. Eng. J. Med. -1980. -V.3G2. «P.1163-1168.

52. Dana N., Styrt B., Griffin J. D.„ Todd III R. F., Klempner M. S. Arnaout M. A. Two functional domains in the phagocyte membrane glycoprotein Mol identified with monoclonal antibodies // Immunol. -1986. »V. 137. -P.3259 3263.

53. Davignon D.„ Reynolds M E. T., Kurz Inger K.> Springer T. A. Lymphocyte function associated antigen-1 (LFA-1): A surface antigen distinct from Lyt-2,3 participates In T lymphocyte-mediated killing // Proc. Natl. Acad. Sei. -1981 .-V.78. -P.4535 4539.

54. Defilippes F, M. Decontaminat ing the polymerase chain reaction. Biotechniques. -1991.-¥.10. » P.26 30.

55. Deragon J.-M., Sinne« D., Mitchell 0., Potier M. D. Labuda Use of y-irradiation to eliminate DNA contamination for PCR if Nucleic Acids Res. »1990. -V.18. -P.6149.

56. Dimanche-Boit re 1 M.-T.» Giiyot A., De Saint-Basile G., Fischer A., Grisell C. Heterogenicy in the molecular defect leading in the leukocyte adhesion deficiency // Eur. Immunol. -1988.-V. 18. -P.1575- 1579.

57. Dwyer D.E., Saksena N. Failure of ultra-violet irradiation and autociacing to eliminate PCR contamination // Mol. Cell. Probes. -1992.-V. 6. -P.87 88.

58. Engelhardt I. Inzucht, bedeutende Ahnen und Warscheinlichkeit fur BLAD-Merkmalstrager in der Deutschen Schwarzbunt zucht // Dissertation. -1996. -S. 155.

59. Forster M. Von Gendiagnostische Erbfehleranalyse zur Verbesserung der Tiergesundheit // Zuchtungskunde. -1992. -V.64. -S.405-410.

60. Funk D. BLAD, three years later if Holstein World. -1994. -Marz,-V.96. -P.96-106.

61. Gilbert R.O., Rebhun W.C., Kim C.A., Kehrli M.E., Shuster D.E., Ackerman M R. Clinical manifestations of leucocyte adhesion in cattle; 14 cases (1977-1991) // J. Am. Vet. Med, Assoc. -1993. -V. 202(3). -P.445-449.

62. Giger U., Golub E.E., Abrains W.R. et al. Deficiency of leucocyte surface glycoproteins Mol, LFA-1, and LEU M5 in a dog with re-currant bacterial infections; an animal model // Blood. -1987. -V.69. P. 1622-1630.

63. SO.Grobet L,,Charlier C.,Hanset R.Diagnostic genomigue de la BLAD (Bovine Leucocyte Adhesion Deficiency) if Ann. Med.Vet. -1993. -V. 137. -P 27-31.

64. Gustafson S., Proper I.A., Bowie E.J. W., Sommer S.S. Parameters affekting the yield of DNA from human blood // Anal. Biochem. -1987. -V. 165. -P.294-296.

65. Hagemoser W.A., Roth J.A., Lofstedt J,, Fagerland J. A. Granulocytopathy in a Holstein heifer if J. A. Vet. Med. Assoc. -19S3. -V183. -P.1093-1094.

66. Hamming U. Hoe kan er omgegaan worden met BLAD if Veeteelt -1992. -N.2. -P. 151.

67. Hemler M.E. VLA proteins in the integrin family: structures, functions and their role on leucocytes // Annu. Rev. Immunol. -1990. -V.8. P. 365-400.

68. Healy P.J. Bovine leucocyte adhesion deficiency (BLAD) another genetic defect of Holsiem/Friesians //Aust.Vet. J. -1992. -V. 69. N8. -P. 190.

69. Hradil R, Application of molecular genetic methods to the BLAD and PSS testing in bovine and pigs in Czech Republic. Proceedings of the XXVI International Conference on Animal Genetigs, Prague.1. P.83.

70. Hynes R.O. Integrins: a family of cell surface receptors // Cell. -1987. -V. 48. -P. 549-554.

71. Jorgensen C.B., Agerholm J.S., Pedersen J., Thorns en P.D. Bovine leukocyte adhesion deficiency in danish holstein-friesian cattle // Acta vet.scand.-1993.-V.34. -P.231 -236.

72. Kahle Kennzeichung des BLAD-Status weiblicher Tiere II Rind in Bild. -1994. N.2. -P.20.

73. Kawasaki E. 8. Sample preparation from blood, cell and other fluids. PCR protocols, a guide to methods and applications // Academic Press. San Diego. N.Y. -1990. -P.146-152.

74. Kehrli M.E.Jr., Smalsteig F.C., Anderson D.C.et al. Molekular defenition of the bovine granulocytopathy syndrome: Identification of deficiency of the Mac-1 (CDl lb/CD 18) glycoprotein II Am. J. Vet.Res.-1990.-V.51.-P. 1826-1836.

75. Kehrli M.E., Sinister D.E., Ackermann M.R. Leukocyte adhesion deficiency among holstein cattle//Cornell vet.-1992.-V.82.-P. 103109.

76. Keizer G.D., Tevelde A.A. Schwarting R., Figdor G., De Vries J.E. Role of pi50,50 in adhesion, migration, Chemotaxis and phagocytosis of human monocytes II Eur. J. Immunol. -1987. -V. 17. -P. 1317-1322.

77. Kishimoto T.K., Larson R S., Corbi A.L.,Dustin N.L. et al. The leukocyte integrins.// Adv.Immunol. -1989,-V.46. -P, 149-182,

78. Kornfeld R., Koinield S. Assembly of asparagino-linked uligosae-carides II Annu, Rev. Biochem. -1985. V, 54. -P.631-664,

79. Lidauer M. Bedeutung der Erbfehler fur die österreichische Braunviehzucht if Österreichisches Braunvieh. -1992. -N69. -S. 1618.

80. Linz U., Delling U. Systematic Studies on Parameter the Per-fomance of the Polimerase Chain Reaction // J. Clin. Chem. Clin. Biochem. -1990.-V.28. -P.5-13.

81. Linz U., Degenliardt H. Die Polymerase-Kettenreaktion if Naturwissenschaften. -1990.-V.77. -S.515-530.

82. Matsuura S., Kislii F., Tsukahara M. et al., Leucocyte adhesion deficiency: Identification of nofel mutations in two Japanese patients with a severe form // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1992. -V. 184 (3). -P. 1460-1467.

83. Matz-Rensing K., Rothe A., Kaup F.-J. Vorkommen und Bedeutung verschiedener Adhasiortmolekule Ubexsichtsreferat /7 Berl. Munch. Tierarzt!. Wschr.-1995. -V.108. -P. 294-298,

84. I.Miller L.E., Bainton D.F., Borregaard N., Springer T.A. Stimulated mobilization of monozyte Mac-1 and p 150,95 adhesion proteins from an intracellular vesicular compartment to the cell surface // J. Clin, Invest. -1987. -V.80, -P. 535-544.

85. Miller S.A., Dykes D.D., Polesky H.F. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells /7 Nucleis Acids Res. -1988. »V 16. -N.3. -P.1215.

86. Muller K., Bernadina W.E., Kaisbeek H.C. et al., BLAD: bovine leucocyte adhesion deficiency if Tijdschr. Diergeneeskd. -1993. -V. 118. -P.183-184.

87. MuIler K.E., Hoek A. Ahtigen-specific immune responses in Cattle with inherited ß2integrin deficiency. // Veter. Immunol. Immuno-pathol.-1997 -V.58.-N.1 -P.39-53.

88. Nagahata H., Hatakeyama K., Nöda H., Nochi H., Tamoto K. Two cases of Holstein calfes with bovine leukocyte adhesion deficiency if Dtsch. tierarztl. Wochenschrift -1994. V.101. -P.53-56

89. Nelson C,5 Rabb H.v Amaout M.A. Genetic cause of the leucocyte adhesion molecule deficiency // J. Biol. Chem. -1992. -V.265. N.5. -P. 3351-3357.

90. Rhenshaw H.W., Chatburn C., Brayn GM., Bartsch R.C. et al. Canine granulocytopathy syndrome: neutrophil dysfunction in a dog with recurrant infections // J. Am. Vet. Med. Assoc. -1975. -V. 166. -P. 443-447.

91. Rhens haw H. W. Davies W.C. Canine granulocytopathy syndrome: an inherited disorder of leukocyte function // Am, J. Pathol. -1979. -V95. -P.731-744.

92. Sanchez-Madrid F., Nagy J. A., Robbing E.3 Simon P. Springer. T. A. A human leukocyte differentiation antigen family with distinct a-subunits and a common ß-subunit // J. Exp. Med. -1983. -V. 158. -P. 1785 1803.

93. Sanger F,> Nicklen S,, Coulson A. R, DNA-sequencing with chain termination inhibitors if Proc. Natl. Acad. Sei. LISA -1977. -V.74. -P.5463 5467.

94. Sarkar G., Sommer S. S. Shedding light on PCR contamination. Nature (London). 1990. V.343. P.27.

95. Sastre L., Kishimoto T. K., Gee C., Roberts T. Springer T. A. The mouse leukocyte adhesion proteins Mac-1 and LFA-I: Studios on mRNA translation an protein glycosylation with emphasis on

96. Mac4 II Immunol.-1986.-V, 137, -P.1060 1065.

97. Schellander K., Peki J., Taka T. A., Kopp E. Diagnosis of bovine free mart inism by the polymerase chain reaction method // Anim. Genet.-1992. -V.23. -P.549 551.

98. Schwenger B., Tammen I.» Kuczka A. BLAD im Griff II Tiergesundheit 1993.-N.l. P. 32-35.

99. Springer T.A. Adhesion receptors of the immune system II Nature. -1990. -V. 346. P. 425-434.

100. Tammen I. Weiterentwicklung des DNA-Tests auf BLAD (Bovine Leukozyten Adliasions defizienz) fur den Einsatz in Rinderzucht und klinischer Diagnostik. Hannover. -1994. -128s.

101. Thornton C. G.„ Hartley J. L.» Rashtchian A. Utilizing uracil DNA glycosylase to control carryover contamination in PCR: Characterization of residual UDG activity following thermal cycling. Biotechniques -1992. -V.13. -P.80 184.

102. Tindall K. R., Kunkel T. A. Fidelity of DNA synthesis by the Thennus aquatic us DNA polymerase. Biochemistry -1988. -V.27.-P.6008 6013,

103. Treviranus A. Klinische Befunde und Abstammung von Jungrindern mit Boviner Leukozyten-Adhasions-Defizienz (BLAD), Hannover. Tierarzt. Hochsch. -1993.-152s.

104. Trowald-Wigh G., Hakans son L,, Johannis son A., N orrgran L. Leucocyte adhesion protein deficiency in Irish setter dogs //Vet.1.munol. Immunopathol. -1992. -V.3. -P.261 280,

105. Vogclsloin BGillespie D. Prcpcralivo and analytical purification of DNA from agarose // Proc, Natl. Acad, Sci. USA, -1979. -V.76. -P.615-619.

106. Wages J= M., Fowler A. K, Amplification of low copy number sequences // Amplifications. -1993. -VI1. -P. 1-3.

107. Wardlaw A, J.» Hibbs M. L., Stacker S, A., Springer T, A. Distinct mutations in two patients with leukocyte adhesion deficiency and their functional correlates. J, Exp. Med. -1990. -V. 172. -P.335 345.

108. Watson R. The formation of primer artifacts in polymerase chain reaction// Amplifications. -1989. -V.2.- P.5-6.

109. Weisman J. S., Berkow R. L=, Plaut G,> Torres M,, Mcguire W. A., Coates T. D., Haak R. A., Floyd A., Jersild R., Baehner R. L. Glycoprotein-180 deficiency: genetics and abnormal neutrophilactivation// Blood -1985. -V.65. -P.696 704.

110. Weitzmann J. B,, Wells C. E,» Wright A. H,, Clark P. A. Law S. K. The gene Organisation of the human p2-integrin subunit (CD 18) ii FEBS Lett. -1991. -V. 294. -P.97 103.

111. White M. B., Carvalhio M.» Derse D., O'brien S. J., Dean M. Detecting single base substitutions as heteroduplex polymorphisms // Genomics-1992. -V.12. -P.301 306.

112. CD 18-mutant mouse for study of inflammation // J, Immunol, -1993. -¥.151. -P. 1571 1578.

113. Womack I.E. Molecular genetics arrives on the farm // Nature. -1992. -V.36Ö. -P.108-109.15 5. Zucht Wertschätzung, -1998.N.2. 208s.