Селекция производственно-перспективных штаммов бифидобактерий, выделенных от детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.03, кандидат биологических наук Жиленкова, Ольга Геннадьевна

• Жиленкова, Ольга Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Жиленкова, Ольга Геннадьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. ХАРАКТЕРИСТИКА БИФИДОБАКТЕРИЙ

1.1. Анатомо-морфологические свойства бифидобактерий 12 1-.2. Цикл развития бифидобактерий

1.3. Культуральные свойства бифидобактерий

1.4. Ферментативные свойства

1.5. Экологические ниши обитания бифидобактерий,

1.6. Антибиотикочувствительность бифидобактерий

ГЛАВА 2. СОСТОЯНИЕ БИФИДОФЛОРЫ ДЕТЕЙ И ЭТАПЫ ЕЁ ФОРМИРОВАНИЯ 30 2.1 .Характеристика микрофлоры желудочно-кишечного тракта

2.2. Физиологические функции бифидобактерий

2.3. Формирование бифидофлоры в организме ребенка

ГЛАВА 3. ОТБОР ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ 45 БИФИДОБАКТЕРИЙ 50 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

4.1. МАТЕРИАЛЫ 50 4.1.1.Объекты исследования

4.1.2. Штаммы микроорганизмов

4.1.3. Синбиотик

4.1.4. Животные

4.1.5. Питательные среды - - ------------------------------—

4.1.6. Антибиотики

4.1.7. Биохимические микротест-системы

4.1.8. Реактивы

4.1.9. Приборы и оборудование

4.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

4.2.1. Отбор и транспортировка материала

4.2.2. Выделение и культивирование бифидобактерий

4.2.3. Изучение культуральных свойств бифидобактерий

4.2.4. Определение содержания жизнеспособных бифидобактерий. 4.2.5: Сохранение чистых культур бифидобактерий!

4.2.6. Активизация лиофилизированных культур бифидобактерий

4.2.7. Изучение динамики^накопления бактериальной'массы бифидобактерий

4.2:8. Определение активной кислотности 4:2.9. Определение титруемой кислотности ^

4.2.10. Определение сквашивающей-активнослгштаммов

4.2.11. Приготовление бактериальной суспензии

4.2.12. Определение сахаролитической-активности

4.2.13. Определение каталазной активности

4.2.14. Определение продукции желатиназы

4.2.15. Генотипирование бифидобактерий'

4.2.16. Определение антибиотикорезистентности бифидобактерий методом двойных серийных разведений

4.2.17. Определение антибиотикорезистентности бифидобактерий диско-диффузионным методом

4.2.18. Определение антагонистической активности

4.2.19. Определение безвредности штаммов бифидобактерий для лабораторных животных

4.2.20. Определение устойчивости бифидобактерий к солям-желчи

4.2.21. Контроль культуры бифидобактерий на наличие посторонней микрофлоры

4.2.22. Контроль активности и стерильности питательных сред

4.2.23. Статистическая обработка полученных данных ——

Глава 5. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЯ 5.1 ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БИФИДОБАКТЕРИЙ 5.1.1 Морфологические характеристики референсных штаммов бифидобактерий

5.1.2.Морфологические характеристики культур бифидобактерий, выделенных от детей

5.1.3. Ферментативная активность бифидобактерий

56 56 56*

62 62

5.2. ГЕНОТИПИРОВАНИЕ БИФИДОБАКТЕРИИ

5.3. СРАВНЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ГЕНОТИПИРОВАНШШ ИДЕНТИФИКАЦИИ БИФИДОБАКТЕРИЙ ПО ФЕРМЕНТАТИВНЫМ ПРИЗНАКАМ

5.4.ИЗУЧЕНИЕ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТИ,

БИФИДОБАКТЕРИЙ

5.4.1. Метод микроразведений в полужидкой питательной^среде

5.4.2. Диско-диффузионный метод определения антибиотикорезистентности бифидобактерий

5.5. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА БИФИДОБАКТЕРИЙ

5.5.1. Показатели культивирования бифидобактерий, выделенных от детей

5.5.2. Сравнение показателейкультивированияпроизводственных и производственно перспективных штаммов бифидобактерий

5.6. ИЗУЧЕНИЕ БЕЗВРЕДНОСТИШТАММОВБИФИДОБАКТЕРИЙ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ДЕТЕЙ

5.7. ИССЛЕДОВАНИЕ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ШТАММОВ БИФИДОБАКТЕРИЙ

5.8. ИССЛЕДОВАНИЕ УСТОЙЧИВ ОСТИ. ШТАММОВ

БИФИДОБАКТЕРИЙ К СОЛЯМЖЕЛЧИ

5.9. ИЗУЧЕНИЕ ШТАММОВ БИФИДОБАКТЕРИЙ ПРИ СОВМЕСТНОМКУЛЬТИВИРОВАНИИ

5.9.1. Оценка длительности хранения штаммов бифидобактерий в бульонной культуре

5.9.2. Проявлениесинергидногоэффекта совместного культивирования на физиологическую активность штаммов - - --------- - - —1435.9:3. Исследование консорциумов производственных и производственно перспективных штаммов бифидобактерий

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Селекция производственно-перспективных штаммов бифидобактерий, выделенных от детей»

Бифидобактерии являются важнейшими симбионтами желудочно-кишечного тракта человека. У детей к 3-х месячному возрасту их доля в микробиоме составляет более 99%, что свидетельствует о ведущей роли этой группы бактерий в становлении и развитии систем гомеостаза детского организма. Они обладают морфокинетическим действием, образуют ферменты, участвующие в метаболизме белков, углеводов, липидов и нуклеиновых кислот, продуцируют биологически активные соединения, в частности, витамины группы В, выполняют иммуногенную и антимутагенную функции, а также участвуют в детоксикации экзо- и эндогенных токсических агентов [177, 45, 96, 131, 193, 188]. В современных условиях массированного антропогенного воздействия на биосферу страдает не только природа, но и сам человек, в частности, негативные изменения в онтогенезе происходят и на уровне его микроэкологии, нарушая ход её развития.

С 80-х годов прошлого века и по настоящее время исследователи отмечают дефицит бифидофлоры и снижение ее видового разнообразия у детей раннего возраста, признанных клинически здоровыми. Изменение видового состава бифидофлоры также стало характерным явлением последних двух десятилетий [147, 148, 45, 199, 201, 136, 137].

Период первичного становления микробиоценоза можно без преувеличения назвать базисом здоровья человека в будущем. Вместе с тем, целый ряд факторов может стать причиной возникновения дисбиотических нарушений, и их коррекция требует применения, таких пробиотических средств, которые учитывали бы особенности бифидофлоры^ современных, детей. Так, рациональный подход к конструированию и применению новых средств коррекции микрофлоры должен принимать во внимание такое явление, как аутогенная сукцессия - последовательность смены биоценозов в определенной экологической нише [18, 109]. В ходе этого процесса в видовом сообществе происходит последовательное вытеснение одних видов другими вследствие их биоэкологических преимуществ в определенных условиях. В микрофлоре желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) человеческого организма данная закономерность прослеживается, в смене видового» состава бифидофлоры в процессе онтогенеза.

Важно отметить при* этом, что вмешательство- неблагоприятных факторов, таких как отсутствие грудного вскармливания, эндогенные инфекции, неблагоприятная экология и прочее могут нарушить,естественный, ход развития^микробиоценоза ребенка [117, 62, 63, 133, 193].

В-связи* с изменениями в микроэкологии. ЖКТ ребенка первостепенное значение приобретает необходимость всестороннего изучения видового спектра и фенотипических особенностей бифидобактерий; которые являются* физиологичными для детей, и селекции штаммов, наиболее перспективных для,производства пробиотических перапаратов:

Изучение выделенных культур должно основываться, на комплексной-методологии,, включающей изучение* их антибиотикорезистентности, культуральных, антагонистических, морфологических, физиолого-биохимических свойств и молекулярно-генетической идентификации с последующей селекцией штаммов, наиболее перспективных для конструирования пробиотических препаратов для' детей': Это позволит проводить коррекцию микроэкологических нарушений более" эффективно и безопасно.

Цель исследования - селекция производственно перспективных штаммов бифидобактерий, как резерва для конструирования пробиотических препаратов для детей.

Задачи исследования

1. Разработать метод выделения бифидобактерий из содержимого ЖКТ. (фекалий) детейЫ8 месяцев и 3-5 лет.

2. Произвести выделение культур бифидобактерий, изучить их морфологические и культуральные свойства.

3. Провести сравнительное изучение рекомендованных нормативными документами коммерческих биохимических микротест-систем применительно к изучению - сахаролитических свойств бифидобактерий и возможности их видовой идентификации.

4. С помощью молекулярно-генетического типирования определить видовую принадлежность выделенных бифидобактерий и оценить видовое разнообразие бифидофлоры исследуемых групп детей.

5. Адаптировать методы определения антибиотикорезистентности, применяемые для- патогенных микроорганизмов, к бифидобактериям, и изучить отношение выделенных культур к антибактериальным веществам.

6. По совокупности фено- и генотипических признаков »провести отбор наиболее перспективных штаммов, как основы для пробиотических препаратов.

7. Сконструировать консорциумы.из референсных производственных и выделенных штаммов бифидобактерий, проанализировать их пробиотические и технологические свойства.

Научная новизна

Разработана новая технология* селекции бифидобактерий с целью совершенствования^ пробиотических препаратов для детей младшего возраста, которая основана на выделении бифидобактерий, всестороннем изучении их фенотипических свойств и видовой идентификации с помощью молекулярно-генетического анализа на основе секвенирования фрагментов* генов lóS rDNA и трансальдолазы {tal). Данная технология дает возможность проводить комплексный^ скрининговый анализ пула выделенных культур с целью селекции штаммов по заданным критериям, применима к практике работы с коллекционными штаммами и для использования в производстве пробиотических препаратов.

Получены новые данные о видовом разнообразии бифидофлоры здоровых детей, относящихся к двум возрастным группам: 1-18 месяцев и 3-5 - лет. Установлено более- широкое^ видовое разнообразие^.бифидобактерий детей раннего возраста, по сравнению с бифидофлорой детей старшей возрастной группы. Биоразнообразие видов в младшей группе компенсирует незрелость ферментативной системы в данный возрастной период. В старшей группе детей выделение 3-х видов, отличающихся, высокой биохимической активностью, коррелирует с большей зрелостью ЖКТ и сменой видов в процессе сукцессии в силу их экологического преимущества.

Отобрано семь штаммов бифидобактерий, перспективных для; конструирования пробиотических препаратов для детей младшего возраста. На них получены патенты РФ.

Практическаягзначимость.

Разработаны и апробированы на большом количестве штаммов» новые методы определения антибиотикорезистентности бифидобактерий: Для» практики изучения коллекционных культур отобраны, 36 антимикробных веществ, относящихся; к 17 группам антибиотиков. Впервые разработана панель из 15 антимикробных препаратов, значимых для штаммовой идентификации микроорганизмов'рода Bifidobacterium, которые относятся к 8 группам: пенициллинам; цефалоспоринам 1-го и 3-го поколения; аминогликозидам 1, 2 и 3-го поколения; тетрациклинам, фторхинолонам и макролидам.

Государственная* коллекция <микроорганизмов*нормальной микрофлоры (ГКНМ) ФГУН' МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора пополнена 287 культурами бифидобактерий, представляющими материал для углубленного изучения биологических свойств бифидобактерий, выделенных от современных детей. Из них 37 штаммов бифидобактерий паспортизированы и депонированы в коллекции. Для проведения скрининговых исследований биохимической активности культур бифидобактерий предложена коммерческая микротест-система ANAEROtest-23 (Pliva Lachema Diagnostica, Чешская Республика).

Последовательности фрагментов генов 37 штаммов бифидобактерий были аннотированы и зарегистрированы в GenBank. На основе результатов, полученных при морфологическом изучении выделенных культур, референсных и типовых штаммов« бифидобактерий, создана фототека колоний и микропрепаратов клеток, предназначенная для коллекционной работы.

Внедрение результатов*работы»в практику

Разработанные методические подходы для изучения фено- и генотипических свойств бифидобактерий вошли в МУК 2.3.2.2789-10 «Методические указания по санитарно-эпидемиологической оценке безопасности и функционального потенциала пробиотических микроорганизмов, используемых для производства пищевых продуктов». Новая технология селекции и изучения бифидобактерий используется в научной-и практической работе лабораторий и ГКНМ ФРУН МНИИЭМ им. F.H. Габричевского Роспотребнадзора и внедряется в» работу других научно-практических и производственных лабораторий РФ:

Основные положения; выносимые на защиту

1. Разработана новая технология выделения« и изучения фенотипических свойств бифидобактерий, их видовой идентификации, основанная на усовершенствованных и стандартизованных приемах проведения исследований, которая перспективна для» селекции новых штаммов и ведения- коллекционных и производственных культур бифидобактерий.

2. G использованием генотипирования на основе секвенирования фрагментов двух генов 16S rDNA и tal изучен видовой состав бифидобактерий, выделенных от современных клинически здоровых детей двух возрастных групп: 1-1 ^месяцев и 3-5 лет.

3. На основе анализа данных, полученных при фенотипическом и молекулярно-генетическом изучении выделенных штаммов бифидобактерий, отобраны наиболее перспективные штаммы для использования-при конструировании пробиотических препаратов для детей.

4. Устойчивые* консорциумы, сочетающие референсные и вновь выделенные штаммы бифидобактерий, проявляют синергидный эффект.

Апробация работы

Диссертация апробирована- -на заседании -секции- «Медицинская— биотехнология» Ученого совета ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора, протокол № 2 от 19.10.2010 г.

Результаты диссертационной работы были представлены на Международном конгрессе «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Фундаментальные и клинические аспекты» (Санкт-Петербург, 2007 г.); Международном междисциплинарном симпозиуме «От экспериментальной биологии к превентивной и интегративной медицине» (Судак, Украина, 2008 г.); 2-м Международном конгрессе «Санкт-Петербург-Пробиотики-2009 г.»; Международной научной конференции «Пробиотики и Пребиотики» (Кошице, Словакия, 2010 г.).

Связь темы исследования с планом научной работы учреждения

Диссертационная работа проведена в рамках НИР (рег. № 01.2.006.08847) и темы «Паспортизация пробиотических штаммов для ЗПВ, оценка их безопасности и функциональной эффективности» в рамках Государственного контракта № 02.522.12.2009 от 26.06.2008 г.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 37 научных работ, в том числе, 6 - в журналах, рекомендованных ВАК Российской Федерации; 6 - в сборниках научных трудов; 17 - в материалах конференций; 7 патентов на изобретение РФ; 1 - методические рекомендации.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 154 страницах основного текста и состоит из введения, обзора литературы, 9 глав собственных исследований, заключения и выводов. Список литературы включает 201 источник, в том числе, 141 отечественных и 60 иностранных авторов. Диссертация содержит 39 таблиц и 20 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Жиленкова, Ольга Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. Разработана новая комплексная технология выделения и изучения фенотипических свойств бифидобактерий и их молекулярно-генетической идентификации, что явилось основой для селекции штаммов, перспективных для- конструирования» пробиотических препаратов, а также для- ведения коллекционных и производственных культур.

2. Определен видовой состав бифидофлоры детей с использованием метода генотипирования на основе секвенирования фрагментов- двух генов: 16S rDNA и tal. Показано большее разнообразие видов в- младшей группе детей, у которых выделены бифидобактерии видов: B.angulatum (3%), B.pseudocatenulatum (17%), B.longum/pseudocatenulatum (10%), B.longum (3%), B.breve (10%), B.bifidum (20%), B.adolescentis (14%), B.ruminantium (23%). У старшей группы идентифицировано только- три вида: B.longum (72 %), B.animalis (14 %), В. catenulatum (14%), что коррелируют с состоянием ферментативной системы разных возрастны групп. Биоразнообразие видов в младшей группе компенсирует незрелость ферментативной системы в данный возрастной период. В старшей группе детей выделение 3-х видов, отличающихся высокой биохимической активностью, коррелирует с большей зрелостью ЖКТ и сменой видов в процессе сукцессии в силу их экологического преимущества.

3. Выявление оптимальной сахаролитической активности штаммов бифидобактерий возможно при использовании системы ANAEROtest-23 (PLIVA-Lachema Diagnostica s.r.o., Чешская Республика). Весь цикл селекции и изучения штаммов бифидобактерий необходимо проводить на стандартизованной среде для культивирования и выделения бифидобактерий (ГНЦ НИИ прикладной микробиологии, г. Оболенск), в наибольшей степени учитывающей метаболические потребности бактерий этого рода.

4. На основании изучения- антибиотикорезистентности бифидобактерий для дифференциации штаммов впервые предложена панель из 15* противомикробных препаратов: пенициллины — оксациллин, ампициллин; г{ефалоспорины 1 поколения —цефазолин; цефалоспорины 3 поколения — цефтазидим; аминогликозиды 1 поколения — стрептомицин, неомицин, канамицин; аминогликозид 2 поколения — гентамицин; аминогликозид 3-го поколения• - амикацин; тетрациклины — тетрациклин, доксициклин; макролиды - азитромицин и фторхинолоны — ципрофлоксацин, пефлоксацин и ломефлоксацин. Антибиотикорезистентность является- дополнительным признаком дифференциации штаммов. 1

5. Изучение видового разнообразия бифидофлоры детей раннего возраста позволило отобрать 7 штаммов- (B.angulatum> OV15, В. pseudocatenulatum OV17, B.pseudocatenulatum OV2, B.longum (3V20, B.breve OV12, B.bifidum OV7, B.bifidum OV19) с определенными5 физиолого-биохимическими свойствами, наиболее физиологичными для ЖКТ детей этого возраста, обладающих высокой антагонистической активностью, антибиотикорезистентностью, безопасностью и перспективных для конструирования пробиотических препаратов. На отобранные штаммы получены патенты РФ.

6. На основе референсных и вновь отобранных^ штаммов-сконструированы консорциумы по принципу синбиоза. В консорциумах показано проявление синергидного эффекта в накоплении биомассы, повышении^ устойчивости к кислотам и активации, биохимических показателей всех включенных в них штаммов.

7. Отработаны критерии дифференцирования различных штаммов* в консорциуме и их количественного учета, основанные на-морфологических различиях колоний бифидобактерий при-совместном культивировании. Это решает вопрос производственного контроля состава консорциума.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Разработанные в настоящем исследовании подходы к определению биохимической активности и спектра антибиотикорезистентности бифидобактерий в комплексе с молекулярно-генетическим типированием на основе секвенирования фрагментов двух генов могут быть рекомендованы к использованию при идентификации вновь выделенных штаммов и ведении коллекционных и производственных культур бифидобактерий.

2. Для дифференциации штаммов бифидобактерий внутри вида предложена сокращенная панель из 15 антибиотиков, относящихся к 8 группам антимикробных препаратов.

3. Последовательности фрагментов генов 37 штаммов бифидобактерий, зарегистрированные в GenBank, существенно пополнили имеющуюся базу данных по исследуемым мишеням.

4. Запатентованные производственно-значимые штаммы OV2, OV7, OY 12, OY 15, OY 17, OV19, OV20.

158

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Жиленкова, Ольга Геннадьевна, 2011 год

1. Авдеев В.Г. Пробиотики и- пребиотики в лечении заболеваний желудочно-кишечного тракта // Клинич. фармакология и терапия:- 2006.- № 15(1).-С.36-40.

2. Авдеева JI.B., Полишук Е.И., Покас Е.В. Методические подходы к определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам // Лабор. диагностика-2005.-№ 3(33).-С. 35-40.

3. Агаджанян H.A., Труханов А.И., Шендеров Б;А. // Этюды об адаптации и путях сохранения здоровья.-М.- Сирин.-2002.-156 с.

4. Александрова Х.М. Изучение* эффективности антагонистических препаратов в комплексной терапии кишечных инфекций у детей // Автореф.дис. .канд. мед.наук.-Москва.-1972.- 15 с.

5. Александрович Н.Ж, Пирогова З.И. Нарушение микробного^ пейзажа человека и пути их коррекции // Клиническое питание.-2005.-№ 2.- С.43-46:

6. Амерханова A.M. Научно-произвосдтсвенная разработка новых перпаратов-синбиотиков и клинико-лабораторная оценка их эффективности.// Автореф.дис. .д-ра биол.наук.- М.-2009.- 48 с.

7. Анкирская A.C. Влияние эубиотиков на. состав микробиоценоза влагалища у беременных, страдающих истрико-цервикальнойнедостаточностью // Медицинские аспекты микробной экологии: Сб.-научн. тр: МНИИЭМ им. Г.Н! Габричевского.-М.-1991.- С.204-209.

8. Анкирская А. Е. Бактериальный вагиноз.7/ Акуш. и гинек. -1995;-№ 6-С. 13-16.

9. Анохин В4.А., Тюрин Ю.А. Роль.основных представителей анаэробной«-кишечной микрофлоры в норме и патологии* // Казанский» медицинский журнал. -2001.- Т.82.- №2.- С.149-151.

10. Ардатская М.Д., Минушкин О.Н: и др. Способ определения: микрофлоры влагалища и способ лечения заболеваний; сопровождающихся нарушениями* микрофлоры влагалища // Патент РФ.- № 227-447.- приоритет от 09.07.2004.

11. Бандоян А.К. и др.- Состав регуляторов, автолиза- бактерий //Микробиология.- 1984*.-Т.53.- №6.-С. 942-946.

12. Бархатова Т.В. Создание технологий синбиотических- продуктов на основе растительных олигосахаридов // Автореф. дис.д-ра~ технич.наук.-Ставрополь.-2003 .-48 с.

13. Белобородова Н:В. Селективная деконтаминация в профилактике и лечении хирургической инфекции у новорожденных //Автореф. ди.канд.мед.наук.-М.-1983.-24 с.

14. Белова^И.В. Конструирование.нового' многокомпонентного пробиотика и, использование его в комплексной терапии хеликобактерассоциированных заболеваний // Автореф.дис. .канд.мед.наук.-Н:Новгород.- 2005.-24 с.

15. Бельмер С. В. Антибиотикоассоциированный дисбактериоз кишечника // Рос. мед. журн. 2004.-Т. 12. № 3.- С. 148

16. Блинкова Л.П. Бактериоцины: критерии, классификация; методы выявления. // Журн.микробиол.-2003:-№3.-С.109-113.160= '

17. Бондаренко В.М., Воробьев* А.А. Дисбиозы и препараты с • пробйотагаескоШфунюдаей///. Жда

18. Бондаренко В;М:, ЧупрининаР.П., АладышеваЖ.И.,Мацулевич ТВ. Пробиотики и механизмы их лечебного действия // Эксперим. и клиническая гастроэнтерология;-2004.- T.3W С: 83-87.

19. Бондаренко В.М., Мацулевич Т.В. Дисбактериоз кишечника как клинико-лабораторный синдром: современное состояние проблемы // М'ЮОТАР: М- 2007.- 3 89 с.

20. Бондаренко/ В: М:, Грачева Н. М., Мацулевич Т. В. Дисбактериозы кишечникау взрослых.г М:-2003:-224 с.

21. Бондаренко В. М:, Грачева Н: М. Препараты пробйотики, пребиотики и синбиотики в терапии- и профилактике кишечных дисбактериозов // Фарматека. -2003. 7. С. 56-63.

22. Бондаренко5 В.М; Роль, транслокации кишечной; бактериальной аутофлоры и ее токсических биомолекул в патологии человека //Эксперимен. клин.гастроэнтерология.-2007.-М5 .-(2.86-93.

23. Воеводин Д.А., Розанова Г.Н., Стенина М.А., Чередеев А.Н. Роль дисбактериоза в фомировании хронической инфекционной патологии у детей // Журнал Микробиол.-200Г.-№6.-С.88-93.

24. Воробьев A.A., 'Абрамов H.A., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А. Дисбактериозы актуальная проблема, медицины // Вестник Российской АМН.-1997.-№3 .-С.4-7.

25. Воробьев A.A., Бондаренко В.М., Лыкова Е.А. и др. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция*бифидосодержащими пробиотиками // Вестник Российской. АМН.- 2004.2:-С.13-17.

26. Воробьев A.A., Несвижский Ю.В., Богданова Е.А. и др. Анализ штаммовой общности пристеночных биотопов желудочно-кишечного тракта // Вестник Российской АМН.- 2004:- № 6.- С. 15-18.

27. Воробьев A.A., Несвижский Ю.В., Богданова Е.А., Корнеев М:Л. Особенности микробиоценоза пристеночного муцина желудочно-кишечного тракта крыс // Журн. микробиол.-2005.- №6.- С.3-7.

28. Ганина В.И. Научные и практические основы биотехнологии ' кисломолочных продуктов и препаратов с пробиотическими свойствами //г Автореф.дис. . .д-ра технич.наук.-М.- 2001.- 48 с.

29. Ганина В:И., Большакова Е. В. Действие пробиотических продуктов на возбудителей кишечных инфекций // Мол. пром. 2001. - №11. - С. 47-48.

30. Ганина В .И.Современный взгляд на пробиотические продукты // Всё о молоке: 2001. - №3. - С. 56-64.

31. Гриневич В.Г.и др. Пребиотики в лечении; заболеваний внутренних органов // Российский медицинский журнал.- 2003.-№ 5.- С.53-56.

32. Гончарова Г.И. . Изучение бифидобактерий, разработка препарата-«сухой бифидумбактерин» и его эффективность при кишечных заболеваниях детей первого года жизни // Автореф: дисс. канд.биол.наук.- М. -1970.- 15 с.

33. Гончарова Г.И* Бифидофлора человека, ее защитная роль в организме*и обоснование сфер применения препарата бифидумбактерин // Автореф.дис. .д-ра биол.наук.- М:- 1982.-48 с.

34. Гончарова Г.И., Лянная А.М., Козлова Э.П., Семенова Л.П. Роль бифидофлоры в повышении устойчивости организма к инфекции // В сб. материалов международной конференции «Гнотобиология в теоретич. и практической медицине».- М.- 1986,- С.62.

35. Гончарова Г.И., Селянова Л.П. и др. Количественный уровень бифидофлоры в кишечнике н его коррелятивная связь,с состоянием здоровья человека // Антибиотики и микроэкология человека и животных. М,- 1988.-С. 118-124.

36. ГОСТ 26670-91 Продукты пищевые. Методы культивирования микроорганизмов. М., Комитет стандартизации и метрологии СССР- 1992. -С.8-11.

37. ГОСТ 4233-77 Изотонический (физиологический) 0,85% раствор хлористого натрия, стерильный.

38. ГОСТ 4328-77 (с изм 1,2) Раствор гидроокиси натрия для нейтрализации.

39. Государственная Фармакопея ССС. Изд. XI, вып. 1,2. М.- 1998.- С. 182-183.

40. Грачева Н.М. Дисбактериозы и суперинфекции, причины их возникновения, диагностика, лечение// Лечащий врач.- 1991.- № 1.- С. 18-21.

41. Гриневич В. Б., Захаренко> С. М., Осипов Г.А. Принципы коррекции дисбиозов кишечника. // Лечащий Врач. 2008. -№ 6. - С. 6-9.

42. Дещекина М.Ф., Коршунов В.М., Демин В.Ф. и др. Изучение формирования микрофлоры кишечника у новорожденных детей при совместном-и. раздельном пребывании с матерью // Педиатрия:-1990.'-№1.-G.13-17.

43. Доронин А.Ф., Шендеров Б.А. Функциональное питание.// М.- Грант,-2002. 296 с.

44. Ермоленко^ Е.И., Суворов' А.Н., Воейкова A.B. Определение антагонистической, активности« лактобактерий // Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы: Сб. материалов конф. М.-2004.- С.25-26.

45. Ефимов-Б.А., Кафарская Л.И., Коршунов В.М. Современные методы оценки качественных и, количественных показателей микрофлоры кишечника и влагалища//Журн. Микробиол.- 2002.- №4.- С.72-78.

46. Ефимов- Б.А. Микроэкология кишечника человека, коррекция микрофлоры при дисбиотических состояниях // Автореф.дис. .д-ра медиц.наук. -М.- 2005.- 48 с.

47. Иванов В.П., Бойцов A.F., Коваленко А.Д., Ластовка О.Н., Нилова Е.А. Совершенствование методов диагностики дисбактериоза толстого кишечника // Информационное письмо кафедры микробиологии СПБГМА им. И.И.Мечникова, Санкт-Петербург.- 2002.- 56с.

48. Ильина Т.С., Романова А.Л., Гинцбург А.Л. Биопленки как способ существования, бактерий в окружающей среде и организме хозяина: феномен, генетический контроль и системы регуляции их развития // Генетика.-2004.-№40(11).- С.1-12.

49. Калмыкова А.И., Селятинская В.Г., Пальчикова H.A., Богатова Н.П. Клеточные и системные механизмы действия пробиотиков. // Новосибирск.-2007.-279 с.

50. Кафарская Л.И, Володин Н.Н, Афанасьев C.G., Шкопоров А.Н., Ефимов Б.А. Особенности микробной| колонизации кишечника новорожденных и недоношенных детей в отделении- реанимации и интенсивной терапии // Вестник Российской АМН.- 2006.- №1- С. 10-15.

51. Кафарская Л.И., Постникова Е.А., Донских Е.Д:, Ефимов Б.А. Особенности становления микрофлорьъу детей раннего * возраста // Детские инфекции.- 2006.- Т.5.- №1'.- С. 6-11.

52. Козлова Э.П. Микрофлора кишечника новорожденных в норме и патологии и восстановление ее бифидумбактерином // Автореф. дис. . .канд. мед.наук.-М.- 1978.-25 с.

53. Конь И.Я. Пробиотики w кисломолочные продукты в питании детей раннего возраста// Лечащий врач.-2007.- №1.- С.32-36:

54. Коршунов В.М., Володин Б.А., Ефимов Б.А. Дисбактериозы кишечника. // Детская больница. М. -2000.- №1.- С. 66-74.

55. Коршунов В.М., Ефимов Б.А., Пикина А.П. Характеристика биологических препаратов и пищевых добавок для функционального' питания, и коррекции микрофлоры кишечника.// Журн. микробиол.- М,-2000:-№3.-С. 86-91.

56. Костюкевич О. И. Современные представления о микробиоценозе кишечника: Дисбактериоз и его коррекция»// Рос. мед. журн. 2007.- С. 2176.

57. Красильников А.П. Основы клинической микробиологии // Мед. и микробиология, вирусология и иммунология.- М.~ 1994.- С.483-496.'

58. Куваева И.Б., Ладодо К.С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей // М.¡Медицина,-1991.-С. 240.

59. Лизько H.H., Шилов В'.М. Современная концепция состава кишечной микрофлоры у здоровых взрослых людей // Журнал Микробиол.- 1979.-№2.-С. 36-41.

60. Лыкова Е.А., Бондаренко В.М., Парфенов: А.И. и др: Синдром избыточного бактериального роста в тонкой- кишке: патогенез, клиническое значение и тактика терапии // Эксперим. Клин.гастроэнтерол.-М. 2005.-№ 6.- С.51-57.

61. Лянная А.М;, Гончарова Г.И., Высоцкий В.В. Морфология бифидобактерий на. светооптическом- и электронно-микроскопическом уровне и их биологические свойства // Журн. микробиол. 1979. - №6. - С.54-58.

62. Лянная. A.M. Видовой состав коллекции бифидобактерий и их биологические свойства// Автореф. дис. .канд. биол.наук.-М.- 1981.- 24 с.

63. Маев И. В. и др. Антибиотикоассоциированная диарея, // Гастроэнтерол. -2007. № 1. С. 45-49. (Прил. к журн. Cons. Med.)

64. Мазанкова Л.Н., Лыкова Е.А. Пробиотики: Характеристика препаратов и выбор в педиатрической практике // Детские инфекции.-2004.-№1.-С.18-23.

65. Малкоч В:, Бельмер С.В., Ардатская М.Д., Минушкин О.Н. Значение пребиотиков для функционирования кишечной микрофлоры // Вопросы детской»диетологии.-2006.-Т 4. -№1,- С.9-12.

66. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование.- М.-Мир.-1984.- С. 333-334.82., Мечников И.И. Этюды оптимиста (1907). М.:Наука.- 1988.- 97с.

67. Мечников И.И. Молочные микробы и, их значение для здоровья , // Вестник знания.-1911.-№3:г С; 231-240.

68. МУК 4.2.577- 96.Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов:.Методические указания?- М:: Минздрав России, 1988. С. 32-34.

69. МУК 4.2.999-00. Определение количества бифидобактерий В; кисломолочных продуктах: Методические указания- — М.:Федеральный центр? Госсанэпиднадзора Минздрава-России, 2000. — С. 12-13.

70. МУК 4.2.1890-04 .«Определение чувствительности микроорганизмов^ к антибактериальным препаратам» // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия.-2004. -т.6.- № 4- С. 306-359:

71. Нетребко O.K. Пробиотики и пребиотики в питании детей грудного возраста // Педиатрия.-2007.-Т.86.-№1.- С. 80-87.

72. Новик Г.И., Высоцкиш В.В., Богдановская Ж.Н. Ультраструктура клеток некоторых видов рода Bifidobacterium // Микробиология.-1994.-Т.63.-В.З.- С. 515-521.

73. Новик Г.И., Высоцкий В.В. Архитектоника популяций бифидобактерий: субмикроскопический' аспект когезии клеток Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium bifidum // Микробиология,-1996.-Т.65.- №1,- С.60-66.

74. Новик Г.И., Высоцкий В В. Репродукция и дифференциация клеток в цикле развития популяций Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium bifidum// Микробиология.-1996.- Т.65.- №3.- С. 357-364.

75. Новик Г.И. Исследование структурно-функциональной организации» бифидобактерий //Микробиология.- 1998.- Т.67.- № 3.- С.376-383.

76. Новик Г.И., Самарцев А.А., Астапович Н.И. и др. Биологическая активность микроорганизмов-пробиотиков // Прикладная биохимия и микробиология.-2006.- Т.42.-№2.- С. 187-194.

77. Осипова И.Г. Экспериментально-клиническое изучение споровых пробиотиков // Дисс. . .докт. биол.наук.-М.- 2006.- 285 с.

78. Осипов Г.А., Демина A.M. Хромато-масс-спектрометрическое обнаружение микроорганизмов в анаэробных процессах. // Вест. Российс. АМН.- Т.13.-№2.-С.52-59.

79. Отраслевой стандарт 91.500.11.0004-2003 // «Протокол ведения больных. Дисбактериозом кишечника» 2003.- 70 с.

80. Парфенов А. И., Ручкина С. В., Осипов Г. А. Нормальная микрофлора кишечника и дисбактериоз // Cons, provis. -2004. № 2. - С. 22—49.

81. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры-для организма человека IIМ.- Медгиз.-1955.- 435 с.

82. Пинегин Б.В., Мальцев В.Н., Коршунов В.М. Дисбактериоз кишечника //М.-1984.-144 с.

83. Преображенская Ю.В., Михалюк А.Щ Миклаш У. А., Каврус. Mi А. Методы, определения количества КОЕ в лечебно- профилактических препаратах бифидобактерий на< основе мясного бульона. // Вестник ГрДУ -Серия 2 № 1 - 2004: - С. 110- 113.

84. Поспелова В. В., Грачева Н.М. и др. Эубиотики эффективные средства' нормализации микрофлоры,— и вклад МНИИЭМ в их разработку // Врач.-1997.-№4.- С.30-31.

85. Рациональная антимикробная фармакотерапия: Руководство ' для практикующих врачей / Под общ. ред. В. П. Яковлева, С. В. Яковлева.- М. -2003.- 1008 с

86. Рыбальченко О.В. , Бондаренко В.П., Добрица В.П. Атлас ультраструктуры микробиоты кишечника человека // СПб. ИИЦ BMA.- 2008. 103 с.

87. Руководство по лечебному питанию детей // Под редакцией Лододо К.С.- М.:Медицина. 2000.-384 с.

88. Селиванов Е.В., Звягинцев E.H. Методическое пособие Правила взятия материала для лабораторных исследований» М.- 2005.- 50 с.

89. Семенова Л.П., Гончарова Г.И., Козлова Э.П. Применение сухого бифидумбактерина в комплексном лечение недоношенных и доношенных новорожденных детей // Методические рекомендации.- М.-1976.-12 с.

90. Соколова Соловьева И.В. // Дисбактериозы: теория и практика:-Н;Новгород.- 1999.- 198 с,

91. Суворов А.Н. Дисбактериоз* с позиций современной медицинской микробиологии // Актуальные проблемы дисбактериозов // Тез.докл.к конф.-Барнаул.-1997.- С. 3-81

92. Тец В:В:Микроорганизмы и антибиотики. Инфекции кожи, мягких тканей, костей и суставов: — СПб. 2006. — 128 с.120: ТУ10-02-02-789-192-95. Среды питательные сухие для выращивания бифидобактерий и пропионовокислых бактерий.

93. Украинцев С.Е., Нетребко O.K. Пищевые волокна и прсбиотики // Вопросы детской диетотерапии.-2006.- Т.4.г№5:- С.26-30;

94. Хавкин А.И. Мйкробйоценоз кишечника и иммунитет,// РМЖ.-2003.-№11(3).- С. 122-125.

95. Шабалов Н.П., Корниенко: Е.П. Микробиоценоз кишечника новорожденных в,нормеги патологии?// Метод, рекомендации. — СПб.- 1994. -С. 9. •

96. Шевелева С.А. Анализ, микробиологического риска как основа^ для совершенствования; системы оценки; безопасности; и контроля: пищевых продуктов // Автореф. дис. . .д-rpa мед.наук.- М.- 2007.- 46 с.

97. Шендеров Б .А. //, Медицинская. микробная экология и функциональное питании: В^З-х т.„-М1:«Грантъ» 1998 - 2001.-Т. 1-3;

98. Шендеров. Б.А. Базовые механизмы регуляции гомеостаза и их модуляцияшутриентамш//Клиническое питание;- 2004.- №3.- С. 14-19г133; Шендеров Б.А. Функциональное питание и его роль. в. профилактике метаболического синдрома//М.:ДеЛи принт,-2008; 317 с.

99. Шендеров Б.А, Молекулярный язык пробиотических микроорганизмов? //Пищевые ингредиенты,-2009;-№1,-С48-49.

100. Шкоропов А.Н., Кафарская Л.И., Афанасьев С.С. и др Молекулярно -генетический анализ видового и штаммового разнообразия; бифидобактерий у детей раннего возраста// Вестн. РАМН. 2005. - №1. - С. 45-51.

101. Шкопоров А.Н., Ефимов Б.А., Володин Н.Н., Кафарская- Л.И. Бифидобактерии: традиционный взгляд и современные генетические исследования// Вопросы практической педиатрии.*- 2007-2 (5):С. 76-79.

102. Шунько Е.Е., Янковский Д:С., Дымент F.C., Краснова Ю.Ю. Проблемные вопросы микроэкологии и антибактериальной- терапии новорожденных с перинатальной патологией // Пробиотики в современной* медицине. Здоровье женщины,- 2004.-№ 4 -176 с

103. Юнкерова В: И., Григорьева С. Г. Метематико-статистическая» обработка данных медицинских исследований. СПб.- 2002.- 266 с.

104. Яцык Г.В., Скворцова В.А., Боровик Т.Э., Лододо К.С. Функциональное состояние ЖКТ у новорожденных // Педиатрия.- 2001.-№3.-С.89-92.

105. Adrews J.M. В SAC standardized* disc susceptibility testing method // J. Antimicrob. Chemother.,- 2001 .48 (SI).- P.5-16.

106. Backhed F., Ding H., Wang T. ey al. The gut microbiota as an environmental factor that regulates fat storage // Proc. Nat. Acad. Scienses. -2004.-Vol. 101 .-No 11.- P.15718-15723.

107. Bailey M. The mucosal immune system: Recent developments and future directions in the pig // Dev Comp Immunol. 2009.-Vol.33 (3).-P.375-83.

108. Begley, M., Hill, C., Gahan, C. G. M. Bile salt hydrolase activity in probiotics // Appl. Environ. Microbioh-2006.- Vol.72.-P.1729-1738.

109. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology /9th edition'. Baltimore; London - 1984- №1:- 964 p.

110. Bengmark S. Immunonutrition: role of biosurfactants, fiber and probiotic bacteria. //Nitrition.-1998. -14 (7-8).- P.585-594.

111. Benno Y., Sawada K., Mitsuoka T. The intestinal microflora of infants: composition of fecal flora in breast-fed and bottle-fed infants // Microbiol. Immunol.- 1984.- 28.- P. 975-986.

112. Benno J., Mitsuoka T. Bifidobacteria and microflora, // Development of intestinal?microflora inhuman^andfanimals. 1986:- Vol:5.- N-1.- P;13-25;., 149; Berg The indigenous-gastrointestinal; microflora // Trends Microbiol*: -1996.-№4.-P.430-435.

113. Camp H.J.M., Orden, Oosterhof A., Veerkamp J. // Biochem.J.- 1985. -Vol. 228. № 3. - P. 683 - 688.15 5 ; Cawan S ; and Steel: K. Manual for the Identification of Medical Bacteria.// Gambrige:University Press -1966;-P: 19; 27-28 -116* and 1-56.

114. Collins M.D., Gibson G.R: Probiotics, prebiotics, and synbiotics: approaches fon modulating the microbial ; ecology of the gut:// Am; J; Glim-Nutr.-1999: -69 (5) -P.1052-1057.

115. D'Aimmo M. R:, Modesto M., Biavati B. Antibiotic resistance of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp. Isolated from dairy and pharmaceutical products // Int. J. Food Microbiol:- 2006.- №12. P. 232-238.

116. Dauer A.W., Kirby W.M.M:, Sherris J.C., Turck M. Antibiotic susceptibility testing by a standardized, singl disk method // Amer J4 Clin Pathol.- 1966. 45. -Pf493-496.

117. Deutshes Institut1 fur Normung Medical Microbiology // Susceptibility Testing of Pathogens to Antimicrobial Agents. Berlin DIN - 1999*.- S. 404-589:

118. Eggerth A.M. The gram-positive nonsporebearing anaerobic bacilli of human feces // J. Bacteriol. 1975. Vol. 30. - P. 277 - 299.

119. Edlund C., Nord C. E. Effect on the human normal microflora of oral antibiotics for treatment of urinary tract infection // J. Anthimicrob. Chemother. -2000.- Vol: 46. Suppl. 1.- P: 41-44

120. Eckburg P.B. et al. Diversity of the human intestinal microbial flora. // Science .- 2005.-Vol.308.- P.1635-1638:

121. Fotiadis CI, Stoidis GN, Spyropoulos BG, ZografosED; Role of probiotics, prebiotics and synbiotics in chemoprevention for colorectal cancer //World J Gastroenterol.- 2008.- №14.-Vol. 14(42).- P. 6453- 6457.

122. Gellenberg H. The development of straight rool type of Lactobac. bifidus // J. Gen. Microbiol. 1955. - Vol. 13. - P. 394 - 397.

123. Gellenberg H Specific contaminants-in cultures of bifid bacteria // Acta. Pathol. Microbiol-Scand. 1958. - Vol. 44. -P. 293-298.

124. Gibson G.R., Probert H.M., Van Loo J.A. E., Roberfroid M.B. Dietary odulation of the human colonic microbiota: Updating the concept of prebiotics // Nutr.Res Rev.-2004-№17-P. 257-259

125. Hayword A.G., HaleC.M.F., Bisset K.N. The morphology and relationship of Lactobac. bifidus // J. Gen. Microbiol. 1955. - Vol. 13. - P. 292 - 294.

126. Heinel H, Bendig J Microecology and Therapy- 1980 Vol. 10.- P.41 -87

127. Matsuki, T. Distribution of Bifidobacterial species in« human intenstinal microflora examined with 16SrRNA-genetargeted species-specific primers / T. Matsuki, K.Watanabe, R. Tanaka et al. // Appl.Environ.Microbiol.- 1999.-№65(10).-P. 4506-4512.

128. Mevissen-Verhage E.A.E., Marcelis J. H., De Vos M. N. et al. Bifidobacterium, Bacteroides and Clostridium spp. in fecal samples from breast fed and bottle-fed infants with and without iron supplement. J. Clin. Microbiol. 1987.-Vol.25. -P.285-289.

129. Mitsuoka T., Hayakawa K., Kimura N. The fecal' flora of man. II. Communication: the composition of bifidobacterium flora of different age groups// Zentralbl. Bakteriol. Mikrobiol. Hyg. 1 Abt. Orig. A 1974.-Vol.226.- P.469-478.

130. Mitsuoka T. Intestinal Flora and Host // Asian.Med.J.-1989-Vol.31.-№7.-P.400-409.

131. NCCLS. Metods for dilution Susceptibility Test for Bacteria That Grow Aerobically, Approved standard- 6 th Edition. NCCLS document M-7-A6. NCCLS Wayne, PA. - USA - 2003.

132. NCCLS. Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Test, Approved,standard 8th Edition. NCCLS document M2-A8.NCCLS Wayne, PA -USA-2003.

133. Novik G.I.,Astapovich N.I., Bagdanovskaya Zh.N.,Ryabaya N.E. // Appl. Biochem. Vicrobiol. 2000. - №*1.-P. 90-93.

134. Rambaud. J.-C. Gut microflora1. Digesstive physiology and pathology//Paris: John Libbey Eurotext.-2006. -250 p.

135. Regurna T., Burton J., Matsuki T. et al. Identification,and enumeration of human Bifidobacterium species by PCR targeting the transaldolase gene // App. Environ. Microbiol.- 2002,- .№5.- P. 2420-2427.

136. Reuter G. Vergleichende Untersuchungen über die Bifidus-Flora im Sfuglings- und Erwachsenensthul. Zentralbl. l-14//Bakt.Mikrob. Hyg. 1 Abt. Orig.-1963.- №191.- P.486-507.

137. Reuter G. The Lactobacillus and Bifidobacterium microflora of the human intestine: Composition, and succession//Current Issues in Intestinal Microbiol.-2001.- Vol.2(2).-P.43-53.

138. Roberfroid M. Prebiotics: The Concept Revisited// J. Nutr. 2007- 137 (3).-P.830 -837.

139. Sanders M.E., Gibson G.,Gill H.S. et al. Probiotics: Their Potential to Impact Human Health //CAST Issue Paper.- October 2010.-№ 36 20p.

140. Sanders M.E., How Do We Know When Something Called «Probiotic» Is Really a probiotic. // A Gudeline for Consumers and Health Care professionals. Functional Food Reviews -2009 -1 (1) (Spring): P.3-12.

141. Satokari R.M., Vaughan E.E., et al. Bifidobacterial diversity in human feces detected by genus-specific PCR and denaturing gradient gel electrophoresis // App. Environ. Microbiol.- 2001.-2.- P. 504-513.

142. Simmering R., Blaut M. Pro- and prebiotics— the tasty guardian angles // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001- № 55- P. 19-28 .

143. Scardovi, V., Trovatelli, L. D., Crociani, F. andSgorbati, B., Bifidobacteria in bovine rumen. New species of the genus Bifidobacterium: B. globosum n. sp. and B. ruminale n. sp. // Arch. Microbiol., 1969 - №68 - P.278-294.

144. Scardovi, V., The Genus,Bifidobacterium. In The Prokaryotes: A Handbook on*Habitats,.Isolation;änd>Iäenti^^^ .Mi- P;, Stolp; Hi and*

145. Truper, H: G;); Springer Verlag, Berlin; - 1981 - Volt 2 - 1951p:. 1-93'i Smehilova M:, -Vilkovä;E.,.Nevoral Gomparisomofiintestinalvmicroflora in healthy infants^ and! infants with? allergic: colitis. Folia* Microbiöll -Praha: r2008-53(3).-P.255-258.

146. Stackebrand, E., and Goebel, B. M;Taxonomic note: A place for DNA-DNA reassociation and 16S rRNA sequence analysis in the present species definition in bacteriology. Int. J. Syst. Bacterioli- 1994.-№ 44.- P.846-849.

147. Werner H., Seeliger H.P.R., Die: Diagnostic der Bifidusbacterien und ihre? Abgrenzung gegen morphologisch ahnliche Keim // Das Arztliche Laboratorium.-1963 S.357-368