Роль иммунокомпетентных клеток и противовирусных антител в патогенезе экспериментального полиомиелита (типа 2) у мышей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, кандидат биологических наук Гришина, Карина Гургеновна

• Гришина, Карина Гургеновна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гришина, Карина Гургеновна

Введение. Обзор литературы.

Глава I. Современные представления о патогенезе полиомиелита.

Глава И. Основные закономерности развития противовирусного иммунного ответа и роль реакций клеточного иммунитета в патогенезе экспериментальных вирусных инфекций.

Собственные исследования.

Глава III. Материалы и методы.

Глава IV. Изучение течения экспериментальной полиовирусной инфекции и иммунологического статуса у иммунокомпетентных и обработанных ЦФН мышей.

Глава V. Роль специфически сенсибилизированных Т- и В-лимфоцитов, макрофагов и ПВА в обеспечении резистентности мышей к вирусу полиомиелита (типа 2).

Глава VI. Повреждающее действие противовирусных антител и предотвращение его развития макрофагами при экспериментальной полиовирусной инфекции у мышей.

Глава VII. Зависимое от комплемента или макрофагов цитотокси-ческое действие специфических ПВА при полиовирусной инфекции in vitro.

Глава VIII Обсуждение полученных результатов. Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль иммунокомпетентных клеток и противовирусных антител в патогенезе экспериментального полиомиелита (типа 2) у мышей»

Полиомиелит — острое инфекционное заболевание, проявляющееся в разнообразных клинических формах, начиная от абортивных до паралитических, с фекально-оральным механизмом передачи. Многолетние исследования полио-вирусной инфекции в эксперименте и клинических условиях, создание эффективных противополиомиелитных вакцин, позволили в 1988 г. Всемирной Организации Здравоохранения принять Программу глобальной ликвидации полиомиелита. За время прошедшее с момента принятия этой инициативы, достигнут существенный прогресс, позволивший рассматривать решение проблемы полиомиелита, как один из примеров успешной вакцинопрофилактики вирусной инфекции. С 1988 по 2000 г. число эндемичных по полиомиелиту стран сократилось со 125 до 20, число регистрируемых случаев острого полиомиелита с 350000 до 2000. Циркуляция дикого полиовируса в настоящее время ограничена несколькими очагами, оставшимися в Южной Азии и Африке (ВОЗ, 2004).

Однако, проблема полиомиелита продолжает быть актуальной в связи с сохраняющейся циркуляцией дикого полиовируса в экономически неблагополучных регионах и в так называемых горячих точках планеты в связи с нарушением программ вакцинации. В различных регионах регистрируются вакци-но-ассоциированные случаи полиомиелита. Наблюдается циркуляция полиови-русных штаммов, имеющих вакцинное происхождение и дериватов, выделяемых из организма привитых против полиомиелита с различными нарушениями иммунного ответа (Cherkasova Е.А., Korotkova Е.А. et al. 2002; Georgopoulou A. Markoulatos P. 2001; Caceres V.H., Sutter R.W. 2001). В последнее время значительно увеличилась частота выявления такой нозологической формы заболевания человека, как постполиомиелитный синдром (1111С) (Rasch G., Schreier Е, 2001).

Согласно сложившимся представлениям, патогенез вирусных инфекций рассматривается как процесс, в котором иммунные реакции играют зачастую ведущую роль. Причем при различных вирусных заболеваниях роль отдельных компонентов иммунного ответа может быть весьма неоднозначной. Как показано на примере ряда инфекций (JIXM, клещевой энцефалит, грипп), различные субпопуляции иммунокомпетентных клеток и противовирусные антитела, в результате различных кооперативных взаимодействий, могут оказывать не только защитный эффект, но и вызывать отягощение течения инфекции и приводить к гибели организма. Реализация защитного или повреждающего действия иммунного ответа, определяющая исход инфекции, зависит от многих факторов, среди которых одно из ведущих мест занимает характер взаимодействия макро и микро организма (Хозинский В.В. 1986; Rott R., Herzoog S., Richt J 1988; Turner SJ, Cross R., Xie W., Doherty P.C. 2001; Belz G.T., Doherty P.C., 2001). Полиомиелит, впрочем как и другие энтеровирусы, с этой точки зрения остается малоизученным.

В настоящее время, в качестве основного механизма элиминации полио-вируса из организма рассматривается взаимодействие возбудителя инфекции с нейтрализующими антителами. Существенным шагом в изучении патогенеза полиовируса в экспериментальных условиях, явились проведенные в последние годы исследования с использованием трансгенных мышей, несущих человеческий PVR ген и описание интимных механизмов взаимодействия полиовируса с клеткой в контексте процессов, связанных с апоптозом (Ida-Hosonuma М., Iwasaki Т. et al. 2002; Iwasaki A., Welker R. et al. 2002; Tolskaya E.A, Romanova L.I, Kolesnikova M.S. et. al., 1995). Однако, остающиеся неизученными иммунологические аспекты патогенеза полиомиелита, диктуют необходимость детального исследования механизмов клеточного иммунитета в целом и определения роли его отдельных компонентов в защите организма против полиовируса или развитии иммунопатологических реакций при этой инфекции.

Актуальность

В результате длительных исследований полиовирусной инфекции достаточно подробно изучена роль и показано большое значение гуморального иммунитета в обеспечении резистентности организма к вирусу полиомиелита.

Однако, многие вопросы связанные с ролью клеточного иммунного ответа в патогенезе этой инфекции остаются малоизученными.

К моменту начала настоящей работы, имелось весьма ограниченное количество работ, где изучалось состояние Т-системы иммунитета при острой и бессимптомной экспериментальной полиовирусной инфекции (Jubelt В., et al., 1984). Описаны различия в динамике нарастания количества Т-лимфоцитов, а также сенсибилизации Т-клеток в зависимости от формы инфекции (Katrak К., Mahon В.P., et. al, 1992). Показана активация цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ) (Kutubuddin М., Simons J., et. al., 1992). Изучение реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) при экспериментальной полиовирусной инфекции позволило выявить межтиповые антигены трех типов вируса полиомиелита (Wang К., Sun L., et. al, 1989). Исследовалось иммунодепрессивное действие полиовируса (Васильева И.Г. и др. 1978). Тем не менее, многие основные вопросы состояния клеточного иммунитета в целом и роли отдельных компонентов иммунного ответа в защите организма против вируса полиомиелита остаются неизученными. Более полное исследование патогенетических процессов и роли иммунных реакций, обеспечивающих защиту зараженного организма, необходимо для создания наиболее эффективных путей терапии и профилактики полиовирусной инфекции, а также предотвращения развития поздних осложнений полиомиелита, связываемых с иммунопатологическими процессами в организме людей, перенесших острый полиомиелит.

Исходя из вышеизложенного, сформулированы представленные ниже цель и задачи настоящего исследования.

Цель и задачи исследования

Основной целью исследований было изучение некоторых, неизвестных ранее, механизмов иммунного ответа при экспериментальной инфекции, вызванной вирусом полиомиелита (типа 2), у мышей, определить наиболее эффективные механизмы, обеспечивающие резистенстность организма к вирусу и развитие иммунопатологических реакций. При этом были поставлены следующие задачи:

1. Разработать экспериментальную модель для изучения защитного и повреждающего действия клеточного и гуморального иммунитета.

2. Определить соотносительную роль отдельных эффекторов иммунного ответа и противовирусных антител в становлении резистентности мышей к по-лиовирусу (типа 2).

3. Экспериментально проверить гипотезу о возможной роли иммунопатологических реакций в патогенезе полиомиелита. Определить конкретные иммунологические механизмы, лежащие в основе развития этих реакций.

4. Определить роль иммунопатологических механизмов в развитии пато-морфологических изменений центральной нервной системы при экспериментальной полиовирусной инфекции.

5. Отработать условия определения зависимого от комплемента и имму-нокомпетентных клеток цитотоксического действия специфических противовирусных антител на зараженную полиовирусом культуру клеток. Изучить некоторые механизмы реализации иммунного цитолиза с участием противовирусных антител, в инфицированных полиовирусом культурах клеток

Научная новизна работы и положения, которые выносятся на защиту

Впервые продемонстрировано, что иммунокомпетентные клетки (ИК) при их совместном введении со специфическими противовирусными антителами на ранних этапах инфекции, вызванной полиовирусом (типа 2) у мышей, значительно усиливают протективный эффект антител. Это явление реализуется за счет взаимодействия противовирусных антител с макрофагами. Специфичность зависимого от антител защитного действия макрофагов (ЗАЗДМ) определяется противовирусными антителами. По сравнению с ЗАЗДМ, противовирусные антитела, специфически сенсибилизированные к вирусу спленоциты или макрофаги были существенно менее эффективны в защите зараженных животных.

Впервые показано, что введение специфических противовирусных антител зараженным, на фоне подавленного иммунитета, мышам в конце инкубационного периода заболевания, сопровождается более ранним проявлением у них симптомов заболевания (парезов, параличей) и сокращением средней продолжительности жизни (СПЖ). Введение зараженным реципиентам в аналогичных условиях макрофагов и специфически сенсибилизированных к вирусу Т- и В-лимфоцитов не сопровождалось усилением патологических симптомов.

Впервые установлено, что вызываемое введением противовирусных антител сокращение СПЖ инфицированных реципиентов связано с развитием у них тяжелых патоморфологических изменений в центральной нервной системе (ЦНС). Введение противовирусных антител индуцировало развитие выраженной воспалительной реакции в головном мозге и массированную гибель нейронов во всех исследованных отделах ЦНС (головной и спинной мозг). Введение контрольных сывороток, макрофагов или специфически сенсибилизированных Т- и В-лимфоцитов развитием иммунопатологической реакции не сопровождалось.

Впервые показано, что макрофаги предотвращают развитие иммунопатологической реакции, индуцируемой противовирусными антителами в конце инкубационного периода экспериментальной полиовирусной инфекции у мышей. Совместное введение специфических противовирусных антител и макрофагов зараженным, на фоне подавленного иммунного ответа, реципиентам, не сопровождалось сокращением их СПЖ, а инициировало выраженный защитный эффект. Патоморфологические исследования тканей таких животных показали, что взаимодействие иммунокомпетентных клеток с ПВА предотвращает гибель нейронов во всех отделах ЦНС.

Впервые описаны вирусиндуцированные антигенспецифические Т-супрессоры, угнетающие активность специфических Т-лимфоцитов, опосредующих развитие реакции ГЗТ при экспериментальной полиовирусной инфекции у мышей. Установлено, что Т-лимфоциты, участвующие в реализации реакции ГЗТ, не играют определяющей роли в обеспечении резистентности организма к полиовирусу и развитии иммунопатологической реакции.

Впервые отработаны условия определения зависимого от комплемента и ИК цитотоксического действия специфических ПВА на зараженную полиови-русом культуру клеток in vitro. Установлено, что основной популяцией ИК, осуществляющей цитолиз инфицированных клеток при взаимодействии с ПВА in vitro, являются макрофаги. По сравнению с комплемент-зависимым цитоток-сическим действием ПВА и стандартным тестом определения вируснейтрали-зующих антител по подавлению цитопатического действия полиовируса в культуре клеток, для реализации иммунного цитолиза инфицированных клеток противовирусными антителами и макрофагами требовалось в 150 и в 8 раз меньшая концентрация ПВА соответственно.

Предложена гипотеза, согласно которой в патогенезе полиомиелита существуют два иммунологических механизма. Один из них - комплемент-зависимое цитотоксическое действие специфических ПВА, определяющий развитие иммунопатологической реакции и гибель организма. Другой, зависимое от антител цитотоксическое действие макрофагов, обеспечивающий выздоровление. Превалирование, по тем или иным причинам, действия одного из этих механизмов является решающим фактором, определяющим исход инфекции.

Теоретическая и практическая значимость работы

Получены новые факты, расшифровывающие неизвестные ранее механизмы защитного и повреждающего действия иммунного ответа при экспериментальном полиомиелите. Показано, что противовирусные антитела при адоптивном переносе зараженным полиовирусом иммуносупрессированным животным в конце инкубационного периода заболевания оказывают повреждающее действие. Разработанная экспериментальная модель может быть использована как при изучении вакциноассоциированных случаев полиомиелита, возникающих при введении аттенуированных штаммов вируса полиомиелита (типа 2), так и для изучения иммунопатологических реакций в экспериментах с различными представителями рода Enterovirus.

Выявленное защитное действие макрофагов при адоптивном переносе совместно с противовирусными антителами, выражающееся в предотвращении иммунопатологического ПВА на поздних стадиях инфекции, может быть свидетельством взаимодействия двух звеньев иммунной системы - врожденного иммунитета (макрофаги незараженных доноров) и эффекторов приобретенного иммунитета (специфические антитела). Прямых доказательств такого взаимодействия ранее получено не было.

Исследования, в экспериментах in vitro, комплемент зависимого цитоток-сического действия ПВА на зараженную полиовирусом культуру клеток и реакции зависимого от антител цитотоксического действия макрофагов (ЗАЦЦМ), показавшие существенно более высокую чувствительность реакции ЗАЦЦМ, по сравнению с комплемент зависимым цитолизом (в 150 раз), позволяют использовать ЗАЦЦМ для серологической диагностики проб крови от здоровых лиц и в случаях острого полиомиелита, а также при изучении поствакцинального иммунитета.

Полученные данные о ведущей роли ПВА и макрофагов в патогенезе полиомиелита, способствуют не только углубленному пониманию течение инфекционного процесса, но и разработке научно-обоснованных методов имму-нокоррекции и терапии этого заболевания.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ГЛАВА I

Современные представления о патогенезе полиомиелита

Полиовирус, являющийся одним из наиболее хорошо изученных вирусов человека, относится к роду Enterovirus семейства Picornaviridae. Известно 3 се-ротипа вируса. Вирион состоит из одно-цепочечной РНК положительной полярности, заключенной в икосаэдрический капсид диаметром 27 нм, состоящий из 60 субъединиц. Каждая субъединица содержит 4 структурных белка VP1, VP 2, VP 3, VP 4. Первые три полипептида образуют основные антигенные детерминанты, принимающие участие в нейтрализации инфекционности вируса, четвертый белок, связанный с вирусной РНК, принимает участие во встраивании ее в капсид зрелого вириона (Minor P.D. 1990.; ВОЗ, 1998).

Инфицирование клеток человека и приматов полиовирусом осуществляется после взаимодействия вириона с клеточным поверхностным рецептором. Это так называемый полиовирусный рецептор (PVR), является одним из представителей класса иммуноглобулинов (Koike S. et. al., 1990; Mendelsohn С. L., et. a/l, 1989). Цикл репродукции полиовируса составляет 6 часов (Melnick G.L., 1989).

Резервуаром полиовируса служит человек - больной или здоровый виру-соноситель, а передача возбудителя, в основном, осуществляется алиментарным путем. Значительно меньшее значение имеет воздушно - капельный путь передачи инфекции с содержимым носоглотки (Melnick G.L., 1989).

В зависимости от клинических проявлений заболевания различают четыре основные формы полиовирусной инфекции у людей: 1. Инапарантная, бессимптомная инфекция; 2. «Малая болезнь» или абортивный полиомиелит; 3. Асептический менингит; 4. Паралитический полиомиелит (Sabin А.В. 1956, 1957; Bodian D., 1954; 1961; Horstmann D., et. al., 1954; Horstmann D., 1957, 1964; Робинзон И.А., 1958).

При инапарантной форме полиомиелита, инфицирующий вирус размножается в миндалинах и пейеровых бляшках без развития виремии и проникновения в ткани ЦНС. Она является одной из наиболее распространенных, составляет 90 - 95% всех случаев полиомиелита и сопровождается кишечным ви-русоносительством и образованием антител при отсутствии клинических признаков заболевания.

Абортивная форма заболевания или «малая болезнь», составляющая 4 -8% всех случаев, сопровождается развитием общелихорадочных проявлений болезни. Для этой формы заболевания характерны такие симптомы как катаральные явления в зеве, боль в горле, головная боль, рвота,боли в животе, лихорадка, связанные с циркуляторными нарушениями без повреждения нейронов. На стадии «малой болезни» развитие инфекции может закончится, однако, в случае проникновения вируса в ЦНС, инфекция переходит в невральную стадию развития.

Непаралитический полиомиелит или асептический менингит развивается в случае, ограниченного размножения вируса в ЦНС. Для этой формы полиомиелита характерны общие неврологические симптомы: сильная головная боль, рвота, менингеальные симптомы, расстройства сна, изменение сознания. Заболевание длится 2-10 дней и заканчивается полным выздоровлением.

Паралитическая форма полиомиелита или «большая болезнь» сопровождается деструкцией нервных клеток в различных отделах ЦНС, вызванной интенсивным размножением полиовируса. «Большая болезнь» встречается только у 1-2 % инфицированных и характеризуется проявлением вялых параличей поперечнополосатых мышц. Заболевание может начинаться внезапно или развивается на фоне предшествующей «малой болезни» или асептического менингита. Максимальное вовлечение мышц обычно наблюдается в течение нескольких первых дней после начала паралитической фазы. Восстановительный период длительный, как правило, сохраняются калечащие остаточные явления.

Одним из основных звеньев патогенеза полиомиелита является размножение вируса в экстраневральных тканях, с последующим развитием виремии и проникновением вируса в ЦНС. (Bodian D., 1957).

Вирусологическими исследованиями установлено, что как при естественной инфекции человека, так и при экспериментальном заражении обезьян, по-лиовирус выделяется не только из ЦНС, но и из других органов: лимфатических узлов, слизистой оболочки тонкого кишечника, сердечной мышцы, селезенки, надпочечников, коричневого жира (Рогова В.М., 1965, Horstmann D., 1947 Bodian D., 1955).

В пределах ЦНС полиовирус распространяется от клетки к клетке путем аксонального транспорта.

Многочисленные исследования секционного материала людей, погибших от полиомиелита и результаты изучения экспериментальной инфекции, воспроизводимой у обезьян, дают четкую картину патоморфологических изменений ЦНС и детально описаны в обзорах (Робинзон И.А., 1958; Bodian D, 1949; 1952, Faber Н., 1955, Samuel В. U. et al, 1993).

Полиомиелит - заболевание, при котором поражение нервных клеток наступает в ранней стадии инфекционного процесса и играет решающую роль в его развитии. Изучение экспериментального полиомиелита обезьян показало, что в препаралитический период (111111) морфологические изменения в ЦНС уже ясно выражены. Вирус, исчезнув к этому времени из крови, появляется в нервной системе, достигая максимальной концентрации за 1 - 2 дня предшествующие развитию параличей. В 111111 изменения нейронов имеют диффузное распространение и наблюдаются во всех отделах спинного и головного мозга. Особенно выделяется преимущественное поражение крупных соматохромных клеток передних рогов спинного мозга, сетчатого вещества двигательной области коры, вестибулярных ядер и ядер мозжечка. В зависимости от локализации поражений ЦНС, у людей выделяют 4 формы паралитического полиомиелита: спинальную, бульбарную, понтинную и энцефалитическую. Чаще встречаются смешанные формы (Л.М.Попова, 1964).

Наиболее ранним проявлением реакции нейронов на инфекцию является набухание клеточного тела и отростков и тигролиз. Уже в это время выявляется различная степень поражения нервных клеток. В одних- более легкая степень тигролиза при сохранности или незначительном изменении ядра: крупные глыбки тигроида становятся неразличимыми, распадаются на более мелкие, слабее обычного воспринимающие основные краски. В других - тифоид становится пылевидным, окончательно утрачивает свои базофильные свойства. По мере растворения тигроида протоплазма становится гомогенной (Л.М.Попова, 1964).

Изменения нервных клеток в этой стадии носят еще обратимый характер. Часть нервных клеток по видимому, сохраняет способность к восстановлению за счет регенерации тигроида. Необратимого характера, поражение нервных клеток начинает развиваться в конце 111111 (последние 1-2 дня). Бурное развитие некроза нервных клеток, вероятно, обусловлено быстрым размножением в них вируса. Изменения нервных клеток в ППП происходят вне зависимости от воспалительных изменений, которые, в известной мере, являются реакцией на поражение нервной клетки. В 111111 ясно выражены изменения сосудов, связанные с повышением проницаемости сосудистой стенки. В результате нарушения гемодинамики и ликвородинамики возникает отек мозговой ткани.

В начальной стадии полиомиелита, отмечаемая диффузная реакция микроглии, является ответом на внедрение вируса в нервную клетку и не находится в прямой зависимости от поражения нейронов. Однако, в дальнейшем, реакция микроглии является ответом на развивающуюся деструкцию нейронов (Робинзон И. А, 1958).

Клетки микроглии в передних рогах спинного мозга и ствола приближаются к пораженным нейронам, окружают их и иногда даже внедряются в их тела (нейронофагия). В последние 1-2 дня ППП в отдельных клеточных группах спинного мозга и ствола встречаются тяжело измененные нервные клетки, подвергшиеся некрозу. Глубокое поражение нервных клеток вызывает вторичную воспалительную реакцию. В это время формируются типичные для полиомиелита мелкие воспалительные фокусы, преимущественно в очагах гибели нейронов, развиваются экссудативные явления, происходит миграция в мозговую ткань нейтрофилов, участвующих в образовании нейронофагических узелков, формируются сосудистые инфильтраты. В это же время усиливается диффузная, очаговая реакция микроглии. Воспалительные изменения в мягкой мозговой оболочке в 111111 складываются из сосудистых нарушений и инфильтрации ткани клеточными элементами. Особенностью менингиальной реакции в ППП является ее широкая распространенность на разные отделы мозга и вместе с тем очаговость. В целом воспалительные изменения в этой стадии болезни выражены слабо.

На основании данных гистопатологии экспериментального полиомиелита обезьян можно предположить, что уже в ППП болезни у человека также имеются морфологические изменения в ЦНС. Деструкция нейронов, развиваясь на фоне повышенной проницаемости сосудов, предшествует воспалительной реакции сосудисто - мезенхимных элементов мозга. В то же время, в этом периоде происходит реакция клеток микроглии и имеются воспалительные явления в мягкой мозговой оболочке, не связанные с поражением паренхимы мозга.

Описанные выше характерные для полиомиелита морфологические изменения достигают большей выраженности за 1-2 дня до появления параличей (развитие воспалительной реакции, преимущественная локализация патологического процесса в передних рогах спинного мозга, в покрышке продолговатого мозга, варолиевого моста и среднего мозга, в ядрах мозжечка, гипоталамиче-ской области и в двигательной коре) продолжают развиваться в течение первых 2-4 дней после наступления параличей. Таким образом, параличи обнаруживаются только тогда, когда уже возникшие морфологические изменения достигают значительной выраженности. На протяжении первых трёх дней паралитического периода у человека и обезьян деструкция нейронов, начавшаяся в ППП, достигает наибольшей выраженности, тяжелые некротические изменения в пострадавших отделах мозга распространяются на новые нейроны. В менее пораженных участках мозга наряду с выпадением клеток отмечается наличие хорошо сохранившихся (легкие, восстановимые дистрофические изменения) и пораженных нейронов. Так же как и в 111111 встречаются клетки в состоянии тиг-ролиза, с отчетливо выраженными внутриклеточным фибриллярным аппаратом и гипертрофией ядрышка без глубоких изменений ядра. В других клетках развиваются более глубокие изменения. Тигроид полностью исчезает, цитоплазма окрашена очень бледно, гомогенна, в дальнейшем подвергается расплавлению. Ядра этих клеток подвергаются тяжелым изменениям - цитолизу или рексису. Ядрышко также теряет свои четкие контуры, уменьшено в размере. После распада ядрышка наступает расплавление цитоплазмы и гибель клетки. На месте погибших клеток образуются нейронофагические узелки. Однако, некоторые нейроны, расположенные в очагах выпадения нервных клеток, остаются неразрушенными. Эти клетки или сохраняют нормальное состояние, или обнаруживают незначительное нарушение структуры в виде слабо выраженного тигроли-за, чаще на периферии клеточного тела.

Начавшиеся уже с последних дней 111111 выраженные воспалительные явления в паралитическом периоде (1111) быстро усиливаются. В это время особенно ясно выражена сосудисто - мезенхимная, экссудативная и пролифератив-ная реакция, формируются сосудистые инфильтраты, усиливается миграция нейтрофильных лейкоцитов в мозговую ткань. Среди клеток сосудистого инфильтрата встречается некоторое количество моноцитарных элементов, поли-бластов и плазматических клеток, проникающих из сосудистого русла в стенки сосудов.

В целом, воспалительные изменения в мягкой мозговой оболочке при полиомиелите выражены очень умеренно. Они представлены значительно слабее, чем при ряде других нейроинфекций (Bodian D., 1952; Робинзон И.А, 1958).

Обычно с 4 - 5 дня ПП начинается восстановление целостности нарушенных структур, регенерация сохранившихся, хотя структурно и измененных нервных клеток, восстановление анатомической целостности аппаратов меж-неврональных связей. Имеет значение и ликвидация последствий, вызванных воспалительными изменениями - отеком, распадом мозговой ткани. В восстановительном периоде значительную роль играют макрофагальные элементы, осуществляющие резорбтивную функцию. Показано, что начиная с 6-8 дня болезни, на протяжении 1-1,5 месяцев может происходить восстановление тиг-роида сначала на периферии нервной клетки, а затем во всем клеточном теле. В результате регенерации тигроида, обусловленной ресинтезом РНК, восстанавливается целостность нейронов. В некоторых случаях на протяжении восстановительного периода происходит постепенное нарастание дистрофических изменений ряда нервных клеток, повидимому обусловленное вторичными нарушениями, связанными с нарушением метаболизма этих клеток еще в начале патологического процесса под воздействием вируса (Робинзон И.А, 1958).

Несмотря на то, что гибель моторных нейронов ЦНС, являющаяся основным фактором проявления симтомокомплекса паралитического полиомиелита, рассматривается большинством специалистов как результат размножения в них вируса (Faber Н., 1955; Samuel B.U., et. al., 1993), интимные механизмы развития этого процесса во многом остаются неизученными. Непонятно, почему в зонах массированного разрушения нейронов обнаруживаются незатронутые инфекцией клетки. Неясными остаются причины, определяющие обратимость или необратимость поражения нервных клеток и, в конечном счете, исход заболевания.

Существенным моментом в изучении полиовирусной инфекции явилось открытие поверхностных структур клеточной мембраны, функционирующих в качестве рецептора для полиовируса (Mendelsohn C.L. et al. 1989, Koike S. et al., 1990). Как известно, полиовирус характеризуется строгой видоспецифичностью и патогенен только для человека и приматов (Bodian D., 1955; 1972). Исключением долгое время являлся полиовирус типа 2, успешно адаптированный путем серийных пассажей через головной мозг хлопковых крыс и мышей Армстронгом в 1937 г. При заражении в головной мозг грызунов, полученный штамм инициировал развитие острого заболевания, описанного как полиоэнцефалит, с последующей гибелью животных. Развитие парезов и параличей, характер морфологических изменений в головном мозге хлопковых крыс и мышей по ряду основных признаков - некроз нейронов, нейронофагия, экссудация поли-морфноядерными лейкоцитами, васкулярный эндотелиоз, был сходен с реакцией, наблюдаемой при полиовирусной инфекции в ЦНС человека и обезьян. (Armstrong С., 1939 а, Ъ).

Методом флуоресцирующих антител установлено, что наиболее интенсивно полиовирусный антиген экспрессируется в мотонейронах передних рогов спинного мозга мышей (Jubelt В. et al, 1980). При гибридизации in situ присутствие вирусной РНК выявляли как в клетках задних рогов спинного мозга, так и в белом веществе (Conderc Т., et al, 1989).

В дальнейшем структурный элемент, обеспечивающий нейровирулент-ность полиовируса типа 2 штамма Лансинг для мышей, был картирован в кап-сидной области (La Monica N. et al., 1986). Достаточным для проявления этого эффекта является сегмент в ВС - петле VP 1. Авирулентный для мышей полио-вирус типа 1 штамм Mahoney, после транспозиции ВС - петли штамма Лансинг, приобретал нейропатогенность для мышей. ВС - петля представляет собой поверхностный выступ из 10 аминокислот, локализованный на верхушке полио-вириона, функционирующий как антигенный нейтрализующий сайт.

Инфицирование клеток полиовирусом осуществляется только после его взаимодействия со специфическим полиовирусным рецептором на поверхностной клеточной мембране. С наличием этого рецептора на клетках человека и приматов и отсутствием его у других видов животных связывают строгий видовой тропизм полиовируса (Ida-Hosonuma М, Iwasaki Т., et al., 2002).

Молекулярно - генетический анализ геномной и комплементарной ДНК для человеческого полиовирусного рецептора (PVR) выявил, что он является мембранным гликопротеином, принадлежащим к классу иммуноглобулинов. Установлено, что ген PVR идентичен гену полиовирусной чувствительности, локализованному в 19 хромосоме человека (Koike S. et al, 1990; Wimmer E. et al, 1993). По крайней мере 4 изоформы m РНК, возникшие в результате альтернативного сплайсинга, дают начало 4-м различным рецепторным молекулам

Wimmer E.et al, 1994). h PVR - а (альфа) и h PVR — P (бета) являются интегрированными мембранными белками, в то время как секреторные формы h PVR -гамма и h PVR - сигма не имеют определенного трансмембранного домена (Koike S>.\et al, 1990). Роль последних в патогенезе полиомиелита остается неизвестной. Экспрессия PVR - гена в культуре клеток неприматов обеспечивает пермиссивные условия для полиовируса (Wimmer E.et al, 1994). Это наблюдение привело к идее о возможности создания линий трансгенных мышей, экс-прессирующих человеческий PVR ген, который мог сделать их чувствительными к полиовирусной инфекции (Bernhardt Gje/ al, 1994; Moss E. G. et al, 1991; Koike S. et al, 1990; 1991). После введения полиовируса различными путями, а именно: интрацеребрально, интраспинально, интраперитонеально, интравеноз-но и интрамускулярно у трансгенных мышей развивались вялые параличи конечностей, которые клинически напоминали полиомиелит у человека (Ren R. et al, 1990). Более того, полиовирусный антиген или РНК были обнаружены только в нейронах ЦНС инфицированных трансгенных мышей, а повреждения нейронов в спинном мозге и стволе головного мозга этих животных напоминали таковые у приматов (Koike S. et. al, 1991; Ren R. and Racaniello, 1992; Horie H., 1994; Koike S. et. al, 1994; Abe S., 1995; Ohka S., Nomoto A., 2001).

Изучение нейровирулентности некоторых полиовирусных штаммов на модели трансгенных мышей, таких как вирулентный для обезьян штамм полиовируса типа 1 Mahoney, вакцинный штамм Sabin 1 и рекомбинантов между ними показало, что нейровирулентность каждого штамма для трансгенных мышей и обезьян была идентичной (Ren R.et al, 1990; Koike S. et al, 1994; Iwa-saki A, Welker R, 2002).

Эти данные позволяют рассматривать трансгенных мышей в качестве перспективной экспериментальной модели для изучения молекулярных механизмов нейротропизма, нейровирулентности, аттенуации и других аспектов патогенеза полиовирусной инфекции (Ren R. et al, 1990, Nagata N, Iwasaki Т., et al, 2001).

Линия трансгенных мышей cPVR экспрессирует PVR в различных тканях (тонкий кишечник, головной и спинной мозг, мышцы, печень, кровь) и является чувствительной к различным способам заражения, включая интрапеританиаль-ный, интрамускулярный и интраназальный, что может быть моделью бульбар-ных параличей. Мыши линии cPVR могут быть первой моделью для заражения полиомиелитом через слизистую оболочку (Crotty S, Hix L., et al., 2002).

Ведущая роль полиовирусного рецептора в осуществлении процесса инфицирования клеток несомненна. Однако это не исключает участия других клеточных структур, как в процессе инфицирования, так и в исходе взаимодействия полиовируса с клеткой. Об этом свидетельствуют результаты опытов с антителами против рецептора CD 44 и данные, полученные при изучении влияния полиовируса на процессы развития апоптоза. Оказалось, что анти - CD 44 мо-ноклональные антитела препятствуют связыванию полиовируса с клетками линии HeLa (Shepley N.P. et al, 1994). Сам по себе CD 44 рецептор, как и моно-клональные антитела (МА) против него, не взаимодействовали с вирусом. Авторы предполагают, что эффект трансформации клеток HeLa из пермиссивной для полиовируса (iht.PV 2 w2) системы в непермиссивную, обусловлен взаимодействием рецептора для полиовируса с CD 44 рецептором через цитоскелет или путем трансдукции информационного сигнала. CD 44 рецептор может являться регулятором интенсивности размножения вируса в организме. Не менее значимым фактором патогенеза полиовирусной инфекции, определяющим исход заболевания, может являться способность полиовируса запускать механизм развития «естественной гибели» клетки или ингибировать его становление. Этот факт был установлен при инфицировании клеток линии HeLa - S 3 в не-пермиссивных условиях гуанидин-зависимыми, в отсутствии гуанидина, или температуро-чувствительными мутантами полиовируса типа 1, при рестрикти-рующей температуре. В этих условиях наблюдали характерные для апоптоза изменения в цитоплазме клеток и дегенерацию клеточной ДНК. Как известно, аналогичные изменения в клетках происходят после обработки их некоторыми ингибиторами метаболизма. Оказалось, что предварительное инфицирование полиовирусом культуры клеток HeLa - В предотвращает развитие апоптоза после внесения в систему циклогексимида или актиномицина Д. В опытах с последним эффект воспроизводился и при одновременном инфицировании и внесении антибиотика (Tolskay Е.А. et.al., 1995).

Вышеприведенные материалы свидетельствуют о том, что уже на уровне взаимодействия полиовируса с клеткой функционирует ряд механизмов, как способствующих, так и предотвращающих ее инфицирование или способных оказывать влияние на ее жизнеспособность. Исследования в этом направлении проведены преимущественно in vitro. Теоретически можно предполагать, что реализация регуляции взаимодействия вирус - клетка на уровне рецептора для полиовируса и (или) его взаимодействия с другими мембранными рецепторами ,запуск или ингибиция вирусом механизмов развития «естественной смерти» клеток может играть существенную роль в патогенезе полиомиелита.

На модели смешанной культуры нервных клеток новорожденных трансгенных мышей, содержащей три основные типа нервных клеток: нейроны, аст-роциты и олигодендроциты показана чувствительность этих клеток к полиовирусной инфекции и вирусной репликации в культуре, приводящей к фрагментации ДНК характерной для апоптоза. Использование этой модели позволило изучать молекулярные механизмы полиовирусного поражения нейронов ЦНС в результате апоптоза (Couderc Т., Guivel-Benhassine F., et al., 2002).

За почти вековую историю изучения полиомиелита сложились устойчивые представления о ведущей роли в защите организма при этой инфекции противовирусных нейтрализующих антител (ПВНА). Во многом это было «предопределено» результатами опытов, демонстрирующими защитную роль ПВНА при пассивной иммунизации животных, успешным применением профилактической вакцинации при этой инфекции и использованием в качестве показателя наличия иммунной прослойки вируснейтрализующих антител. Многочисленные исследования по этому вопросу представлены в ряде статей, обзоров и монографий (Bodian D, 1952, 1957; Nathanson N., Bodian D., 1962; Sabin A.B., 1962, Graham S., et al, 1993, Usherwood E.J., et al, 1995).

Антитела к вирусу появляются в крови заболевших полиомиелитом людей в конце препаралитического периода и к 1-2 дню после начала параличей титр антител в крови достигает высокого уровня. Первоначально, основная часть гуморального ответа представлена иммуноглобулинами класса М, количество которых на первой неделе заболевания в 2-4 раза превышает содержание Ig G. Постепенно количество Ig М уменьшается и ко второму месяцу после инфицирования превалируют Ig G антитела (Ogra P.L. et al, 1968). В процессе полиовирусной инфекции образуются специфические вируснейтрализующие, комплементсвязывающие и преципитирующие антитела. После естественной инфекции вируснейтрализующие антитела могут обнаруживаться пожизненно, в то время как комплементсвязывающие исчезают в течение 1 - 5 лет (Ogra P.L, Karson D.T., 1971).

Перекрестная защита против полиовируса типа 1 осуществляется антителами к полиовирусу типа 2 и наоборот. Между полиовирусами 1 и 3 типа отмечен минимальный уровень кросс - реактивности антител (Mahon В.P. et al, 1992). В настоящее время при помощи моноклональных антител описаны основные сероспецифические и кросс - реактивные эпитопы полиовируса (Graham S.et al, 1993, Usherwood E.J., et al, 1995).

Имеющиеся данные позволяют полагать, что нейтрализация полиовируса ПВНА может осуществляться и в очагах поражения - в ЦНС. Еще в 1947 J.M.Morgan показала, что суспензии тканей ЦНС обезьян с параличами, развившимися после заражения в головной мозг шт. Лансинг, обладают способностью нейтрализовывать инфекционность полиовируса (шт. Лансинг). Вирус-нейтрализующая активность таких суспензий была специфична, и не влияла на активность вируса западного энцефаломиелита лошадей или герпеса. Нейтрализующей активностью в отношении полиовируса обладали суспензии участков головного и спинного мозга, в которых отмечали наиболее интенсивную репликацию вируса: в передние рога спинного мозга и мозжечок. Автор высказала гипотезу о возможном местном синтезе ПВНА в ЦНС (Morgan J.M., 1947). Позже в ЦНС обезьян и людей были обнаружены ПВНА и В - лимфоциты (Ogra

P.L., et al ,1973). По мнению авторов, наличие ПВНА в очагах поражения ЦНС связано с инфильтрацией этих очагов лимфоидными клетками, среди которых присутствуют и антителопродуценты. В экспериментах с вирусом гриппа также было показано, что циркулирующие в крови гомологичные и гетерологичные ПВНА могут преодолевать гематоэнцефалический барьер и проникать в ЦНС (Doherty Р.С., 1981).

Наряду с образованием гуморальных противовирусных антител в результате естественной инфекции полиовирусом или иммунизации живой вакциной против полиомиелита в носоглотке и кишечнике вырабатываются секреторные антитела класса А, которые обеспечивают местный иммунитет (Sabin А.В., et al ,1963; Ogra P.L, 1970; Onorato I.M. et al, 1991; ВОЗ 1998). Появление этих антител обычно происходит в течение двух недель после инфицирования или вакцинации и прослеживается в течение 1,5 месяцев (Ogra P.L, 1970). В настоящее время противовирусным Ig А антителам отводится важная роль в обеспечении коллективного иммунитета при проведении массовой вакцинации живой вакциной (Gendon J.,1995; ВОЗ, 1998, Minor D., 2002). По видимому, они также играют определенную роль в защите невакцинированных людей при инфицировании. Об этом свидетельствуют данные о повышенной частоте развития паралитического полиомиелита у детей после тонзилэктомии, которая сопровождается резким снижением концентрации Ig А в носоглотке (Ogra P.L., 1971).

Как указывалось выше, роль специфических вируснейтрализующих антител в защите организма при полиовирусной инфекции общепризнана. За исключением ситуаций с индуцированным или врожденным дефектом Т- лимфоцитов, о которых речь пойдет ниже, протективное действие иммунного ответа ассоциируется с наличием ПВНА. Содержание ПВНА в крови, коррелирующее со степенью защиты от паралитического полиомиелита, рассматривается в качестве основного механизма пресечения распространения вируса из кишечника в ЦНС человека (Nathanson N., Bodian D., 1962).

Об этом же свидетельствуют результаты, полученные при проведении пассивной иммунизации зараженных полиовирусом животных. Анализ этих данных позволяет заключить, что сывороточные ПВНА при полиовирусной инфекции являются эффективным средством защиты организма от инфекции, но протективный эффект реализуется только на ранних этапах заболевания, по видимому до массированного проникновения вируса в ЦНС. Так Morgan с сотр. в 1947 (Morgan J.M., et. al. 1947) показала, что наличие в крови обезьян ПВНА не обеспечивает полной защиты после введения полиовируса в головной мозг. Однако, даже присутствие незначительного количества специфических антител в крови достаточно для предотвращения развития или ограничения виремии и поражения ЦНС. Относительно высокое содержание сывороточных ПВНА ограничивает распространение вируса из носоглотки и кишечника и предупреждает развитие паралитического полиомиелита. В то же время, если предварительно зараженным внутримышечно обезьянам вводили ПВНА в высоких дозах через 24 или 48 часов после вируса, у большинства обезьян, зараженных внутримышечно, развивался паралитический полиомиелит с летальным исходом (Bodian D., 1955). Аналогичные результаты были получены и при работе с мышами. Защитное действие введенных антител реализовывалось преимущественно при одновременном введении их с вирусом. Пассивная иммунизация, проведенная в последующие дни после инфицирования, не оказывала существенного влияния на течение заболевания (Mahon В.Р. et al, 1995).

Очевидно, временной разрыв между попаданием вируса в организм и введением специфических ПВНА, явился основной причиной низкой эффективности серотерапии полиомиелита в условиях клиники (Л.М.Попова, 1964). Как и в опытах с животными, профилактическая пассивная иммунизация имела определенный успех (Л.М.Попова, 1964.; Welliver R.C., 1983). Но если ПВНА вводили пациентам в препаралитической стадии инфекции или в паралитическом периоде заболевания, терапевтического эффекта не наблюдали. У первой из вышеперечисленных категорий больных парезы и параличи появлялись с той же частотой, что и у контингентов, не подвергшихся серотерапии, и последующее течение инфекции было сходным. У второй категории больных, дальнейшее развитие параличей и других симптомов заболевания также не имело существенных отличий от пациентов, не получавших ПВНА. (JL М. Попова, 1964.; Welliver R.C., 1983).

Таким образом, в организме нейтрализация полиовируса антителами осуществляется на 3 - х уровнях:

1) у входных ворот инфекции - носоглотка, кишечник;

2) в крови и, вероятно, в местах первичной репликации вируса;

3) в тканях центральной нервной системы.

Детальные исследования этих процессов in vitro показали, что циркулирующие нейтрализующие антитела обладают способностью предотвращать развитие инфекции (нейтрализовывать активность инфекционного вируса), воздействуя как на свободные, так и на сорбированные на поверхностной мембране чувствительных клеток вирионы или на инфицированные клетки. При исследовании нейтрализации свободных вирионов специфическими антителами описано 3 механизма взаимодействия полиовирус - ПВНА, приводящих к обратимой или необратимой утрате патогеном инфекционности для пермиссивной культуры клеток. Результаты опытов, как правило, оценивали по снижению числа инфекционных центров в культуре клеток после соответствующего контакта вируса с ПВНА. Один из этих механизмов - агрегация вирионов под воздействием ПВНА без существенного повреждения их целостности (Thomas А.А. et. al,. 1994). Реакция агрегации может быть обратимой. При низких значениях рН происходит диссоциация комплекса вирус - ПВНА (Mandel В., 1967). Подавляющее число моноклональных антител против полиовируса типа 1 обладают способностью вызывать агрегацию вирионов (Vrijsen R., et al; 1983).

Другой механизм - деструктивная нейтрализация полиовирусов, сопровождающаяся разрушением капсида вирионов с освобождением РНК, является необратимой реакцией (Delaet L., et al, 1993).

Некоторые моноклональные антитела (в зависимости от условий экспериментов) обладали способностью нейтрализовывать полиовирус (тип 1) двумя механизмами. При нормальном ионном напряжении при 37 °С МАЬ: 35 - 1 f4 нейтрализовали вирус агрегацией вирионов, однако при низком ионном напряжении преобладала необратимая деструкция (Delaet L., et al, 1993; Thomas A.A., et al, 1985; Vrijsen R. et al, 1993).

Последняя также развивалась при нормальном ионном напряжении по мере увеличения температуры реакции с 37° до 39 °С. Авторы предполагают, что описанный in vitro феномен повышения интенсивности необратимой нейтрализации полиовируса (тип 1) с повышением температуры может развиваться и в организме при лихорадочной реакции и является существенным компонентом защиты от инфекции (Delaet L., et. al1993). Косвенно, в пользу этого предположения свидетельствуют имеющиеся данные о более легком течении полиомиелита у обезьян и мышей, подвергнутых гипертермии (Lwoff A., et al, 1959).

Третий механизм нейтрализации инфекционности свободных частиц полиовируса связан с образованием стабильных иммунных комплексов вирус -ПВНА без агрегации вирионов. ПВНА, покрывающие поверхность вирионов, препятствуют их взаимодействию с рецепторами клеточных поверхностных мембран и таким образом ограничивают развитие инфекции (Vrijsen R., et al, 1983).

В 60-х годах B.Mandel описал явление, получившее название «пост адсорбционная нейтрализация полиовируса» (Mandel В., 1967). Автором было показано, что добавление ПВНА к культуре клеток, предварительно инкубированной в течение 1 часа при 4 °С с вирусом, резко снижает число выявляемых инфекционных центров. В дальнейшем, в опытах с моноклональными Ig G антителами, было показано, что ПВНА препятствуют конверсии 160 S вирионов в 135 S и 80 S частицы при 37 0С.';и что часть моноклональных антител, обладающая способностью нейтрализовать свободные вирионы полиовируса (тип 1), эффективна в реализации описываемого явления (Vrijsen R, et al, 1993). Несколько модифицировав условия вышеприведенных экспериментов, Е.А.Тольская, Т.А.Иванникова с соавт. показали, что нейтрализующие полио-вирус (тип 1) антитела также эффективно защищают инфицированную культуру клеток нейробластомы человека на ранних этапах инфекции (Tolskaya Е.А,

Ivannikova Т.A. et al, 1992). Через 2 часа после заражения культуры клеток по-лиовирусом (типа 1) при 37 °С в систему вносили поликлональные или моно-клональные антитела. Внесение в исследуемую систему ПВНА не препятствовало образованию инфекционного вируса в клетках через 6 часов от момента заражения. В 80-90 % опытных (с ПВНА) и контрольных (без ПВНА) клетках обнаруживали МФА антигены полиовируса и инфекционный вирус в одинаковых количествах. Однако, через 24 - 48 часов подавляющее большинство клеток контрольной культуры погибало под воздействием вируса, в то время как в опытной - часть клеток выживала. Эти клетки содержали вирусные антигены, были способны делиться и были резистентны к суперинфицированию гомологичным вирусом. При дальнейшем культивировании в присутствии ПВНА клетки полностью утрачивали вирусные антигены и становились чувствительными к суперинфицированию. В отсутствии ПВНА наблюдали персистенцию полиовируса. Механизм развития описанного явления остается неизвестным. По мнению авторов, он может быть связан с гипотетической возможностью проникновения ПВНА в клетки на относительно поздних этапах инфекционного цикла, их взаимодействием с субвирусными частицами и подавлением неизвестной реакции, ответственной за необратимую гибель клеток.

В последнее десятилетие появился цикл работ, характеризующих некоторые этапы иммуногенеза и протективную роль Т - лимфоцитов в патогенезе полиовирусной инфекции. В. Jubelt, G. Gallez - Hawkins с соавт. (1980) описали течение полиовирусной инфекции у мышей после интрацеребрального введения штамма Лансинг на фоне подавления циклофосфамидом (ЦФД) иммунного ответа. Введение иммуномодулятора сопровождалось сокращением инкубационного периода инфекции и более ранним развитием параличей по сравнению с иммунокомпетентными животными. У обработанных ЦФД мышей параличи развивались на 4,5 суток раньше по сравнению с контрольной группой. При гистологическом исследовании ЦНС у иммунокомпетентных мышей уже на 3 сутки опыта в головном и продолговатом мозге выявляли воспалительную реакцию и дегенерацию нейронов. Интенсивность и распределение этих повреждений были одинаковы у парализованных и непарализованных животных. Воспалительная реакция наблюдалась до 18 дня инфекции и затем исчезала. Воспалительные изменения характеризовались периваскулярной реакцией, инфильтрацией паренхимы и умеренной менингиальной реакцией. Основу воспалительной реакции составляли мононуклеарные клетки с небольшой примесью полиморфонуклеарных лейкоцитов. В паренхиме отмечали микроглиальную реакцию. Воспалительная реакция в коре носила точечный характер во фронтальной и темпоральной частях с минимальным вовлечением затылочной зоны. В этих же зонах коры обнаруживали дегенерацию нейронов и очаги нейроно-фагии. Наиболее тяжелые диффузные повреждения отмечены в таламусе и гипоталамусе, реже в базальном ядре. В отличие от головного мозга, тяжесть и распределение повреждений в стволе и спинном мозге коррелировала с проявлением симптомов заболевания. У парализованных животных воспалительные изменения и дегенерация нейронов в стволовой части мозга и спинном мозге были более выражены по сравнению с непарализованными. В спинном мозге воспалительные и дегенеративные изменения локализовались в передних рогах. В стволе мозга в процесс были вовлечены моторные и сенсорные ядра. Наиболее тяжело поражались: ретикулярная формация, ядра тройничного нерва и вестибулярные ядра. Кора мозжечка в процесс не вовлекалась, но были поражены глубокие ядра. У зараженных и обработанных ЦФД мышей отмечали полное подавление воспалительной реакции до 8 - 11 дня опыта с незначительными ее проявлениями только к 14 дню. При иммунофлюоресцентном исследовании более 90% клеток ЦНС, содержащие вирусные антигены, были нейроны. Антигены выявляли только в цитоплазме таких нейронов. Нейроны коры головного и продолговатого мозга содержали вирусные антигены уже на 3 сутки инфекции. Распределение и интенсивность специфического свечения у парализованных и непарализованных животных были идентичными. Антигены обнаруживали в нейронах ствола мозга и спинного мозга. В моторных нейронах передних рогов спинного мозга выявляли наибольшее содержание антигенов вируса полиомиелита. В целом развитие параличей и воспаления в ЦНС соответствовало степени нарушения целостности инфицированных нейронов (Jubelt, В., et. al, 1980).

У обработанных ЦФД и зараженных вирусом полиомиелита (штамм Лансинг) мышей не обнаруживали вируснейтрализующих антител в крови. Доза ЦФД 200 мг/кг массы тела, введенная на 1, 7 дни опыта, и 75 мг/кг - на 14 день инфекции, полностью подавляла продукцию гемагглютинирующих антител к эритроцитам барана и развитие воспалительной реакции в головном мозге мышей после интрацеребрального введения вируса Синдбис. Эти данные позволили авторам предположить, что описанный эффект обусловлен подавлением ЦФД клеточного иммунитета. На возможное участие эффекторных Т - лимфоцитов в обеспечении резистентности мышей к полиовирусу указывают опыты с антитимоцитарной сывороткой (АТС). Введение АТС мышам, зараженным в головной мозг аттенуированным штаммом W-2 (полиовирус тип 2), сопровождалось двукратным повышением летальности животных по сравнению с контрольной группой (Jubelt В., et al, 1984). Инокуляция АТС не сопровождалась подавлением гуморального ответа, но значительно снижала пролиферативный ответ Т - лимфоцитов к полиовирусу и Сох A in vitro. У заболевших животных, получавших АТС, морфологические проявления инфекции в ЦНС отличались от контрольной группы только степенью выраженности, но не качественно. Воспалительные и деструктивные изменения, характерные для полиомиелита, на фоне введения АТС были менее выражены по сравнению с таковыми в контрольной группе.

Активность эффекторов ГЗТ исследовали у мышей, вакцинированных инактивированным ультрафиолетовыми лучами полиовирусом различных типов. (Wang К., Sun L., et al, 1989). Реакцию оценивали по размеру отека тканей в области уха после инокуляции разрешающей дозы антигена.

Katrak К, Mahon В.Р. с соавт. (1991) провели сравнительные исследования кросс-реактивности Т - помощников (по пролиферативной активности и продукции К2/124) и ПВНА у мышей после введения вакцинных штаммов полиовируса 1, 2 или 3 типа. В отличие от ПВНА, Т - клетки помощники характеризовались высокой межтиповой кросс-реактивностью. Эти результаты объясняют тот факт, что при вторичной иммунизации одним серотипом ответ ПВНА значительно повышается и у мышей, первично иммунизированных другим серотипом.

Дальнейший анализ показал, что CD4 + Т - клетки мышей распознают детерминанты на поверхности капсидных белков VP1, VP2 и VP3, а также внутреннем капсидном белке VP4 . Эпитопы на VP 4 были общими для серотипов полиовируса и обеспечивали межтиповую кроссреактивность, в то время как эпитопы на VP 1 или VP3 были серотипоспецифичны (Mahon В.Р. , Katrak К. et al, 1992). Эпитопы для Т- клеток на VP1 полиовируса 3 типа были описаны также при работе с клетками людей (Graham S., Wang Е., et al, 1993). Специфически сенсибилизированные к полиовирусу CD4+ Т — хелперы были выявлены в крови вакцинированных живой вакциной против полиомиелита. Клетки распознавали все структурные белки полиовируса (Simons J., Kutubuddin М., et al, 1993).

В экспериментах с инфекционным полиовирусом типа 1 и VP1 капсид-ным белком, вводимым инбредным мышам продемонстрирована активация ви-русспецифических цитотоксических Т- лимфоцитов (ЦТЛ) с фенотипом CD8+ (Kutubuddin М., Simons J., et al, 1992). Показано, что капсидный белок полиовируса VP1 содержит 2 эпитопа для ЦТЛ, связывающихся с Kd областью главного комплекса гистосовместимости (МНС). В опытах с трансгенными мышами была продемонстрирована защитная роль вирусспецифических CD4+ клонов Т лимфоцитов. Эти лимфоциты обладали активностью клеток помощников (сек-ретировали ИЛ - 2 и гамма-интерферон) и ЦТЛ, рестриктированных по антигенам МНС II класса. При адоптивном переносе, исследуемые Т - клетки защищали зараженных в вену полиовирусом типа 3 облученных мышей при совместном введении с В - лимфоцитами. Защитный эффект наблюдали в том случае, если разрешающую дозу вируса вводили через 7 дней после введения клеток, но не одновременно с ними, что указывает скорее на участие в защите Т-клеток помощников, но не ЦТЛ. Введение популяции только В или Т- клеток не сопровождалось защитой реципиентов. Интересно отметить, что клоны Т - клеток, иммунные к внутреннему капсидному белку (VP4) полиовируса, обеспечивали выработку антител против поверхностных капсидных белков (Mahon В.Р., KatrakK., et al, 1995).

Паралитическая форма полиомиелита развивается только у 1-2% инфицированных. В остальных случаях развитие инфекции не сопровождается значительным поражением ЦНС и гибелью нейронов, которая, по мнению большинства специалистов, связана с непосредственным воздействием вируса на нервные клетки (Sabin А.В., 1957).

Для объяснения этого явления был предложен ряд гипотез, позволяющих заключить, что резистентность организма к вирусу или развитие той или иной формы заболевания определяется как состоянием макроорганизма, так и свойствами самого вируса. Еще исследованиями 40-50-х годов было отмечено провоцирующее влияние травм, тонзилэктомии, аденоэктомии, удаления зубов, внутримышечных инъекций. Клинические данные получили подтверждение в экспериментах на обезьянах (Bodian D., 1953; 1954; 1955).

Известен феномен связи возраста людей в момент инфицирования с тяжестью течения и исходом у них паралитического полиомиелита. У детей до 14 лет в 2 - 3 раза чаще наблюдаются случаи полного выздоровления и в 2 - 3 раза реже выздоровление сопровождается остаточными явлениями, по сравнению с возрастной группой от 20 лет и старше. В старшей группе также чаще отмечается развитие наиболее тяжелой бульбарной и бульбарноспинальной формы заболевания и число летальных исходов инфекции (Боцман И.Е., 1962). Сходное явление описано при заражении мышей. У взрослых животных, зараженных в головной мозг полиовирусом типа 2 наблюдали более быстрое развитие параличей и более высокую летальность по сравнению с новорожденными особями. Тяжесть течения инфекции у взрослых мышей не была связана с иммунопатологическими механизмами. Введение ЦФН не задерживало, а усиливало проявление симптомов заболевания и сопровождалось сокращением сроков жизни животных (Jubelt В., et al, 1984). По видимому, развитие рассматриваемого феномена связано с изменением способности аксонального транспорта, который, как известно, с возрастом увеличивается и способствует более быстрому распространению полиовируса в пределах нервной системы. Эта гипотеза базируется на результатах экспериментов с хордэктомией, проведение которой предотвращало распространение вируса и наблюдениями за характером распространения вируса в ЦНС после его интраспинальной инокуляции (Jubelt В., et al., 1980).

Большое значение для развития инфекции и проявления параличей имеет состояние иммунной системы организма. В настоящее время установлено, что первичные и вторичные иммунодефицитные состояния могут приводить к развитию паралитической формы заболевания (Wyatt H.V., 1973, Buttinelli G; Do-nati V., et. al., 2003). Лица с врожденной гипоглобулинемией и ВИЧ инфицированные больные обладают повышенной чувствительностью к полиовирусу. Кроме этого, такие лица могут экскретировать вирус длительное время (до 15 лет), что создает существенный риск для окружающих (Minor Р., 2001). Известно, что пассирование вакцинных штаммов полиовируса в организме неиммунных лиц может приводить к реверсии их нейровирулентности. Как показано при обследовании 1.030 доноров в Москве антитела к полиовирусу 1, 2 и 3 типов выявлены у 47,3%; 45,5% и 76,4% обследованных соответственно. Неиммунная популяция взрослых, особенно матерей вакцинированных и ревакцини-рованных детей, может быть подходящей средой для циркуляции вакцинных дериватов и появления нейровирулентных реверсий (Сейбиль В.Б., Малышкина Л.П. и др., 2002).

Определенную роль в возникновении паралитического полиомиелита могут играть интеркурентные бессимптомные инфекции, вызванные различными представителями энтеровирусов. В экспериментальных условиях было показано, что некоторые из них (Сох А7, А9, ВЗ, энтеровирус 71) могут в значительной мере подавлять клеточный (ГЗТ) и гуморальный иммунный ответ к полиовирусу (тип 1) при совместном введении мышам (Васильева И.Г. и др., 1978, Семенова И.Б., Васильева И.Г., 2001). ской реакции. Автор предполагает, что инфицирование вирусом клеток сопровождается высвобождением секвестрированных «своих» антигенов, в ответ на которые сенсибилизируются антителопродуценты и эффекторные лимфоциты. Появляющиеся в результате этого процесса гипотетические аутоантитела и ау-тореактивные клетки являются причиной развития обширных поражений ЦНС и гибели нейронов (Wyatt H.V., 1975, 1990).

Результаты многолетних исследований полиовирусной инфекции позволяют заключить, что не меньшую роль в развитии той или иной формы полиовирусной инфекции играют особенности штамма:

1) способность размножаться в пищеварительном тракте;

2) способность проникать и размножаться в экстраневральных тканях;

3) способность проникать в ЦНС и размножаться в нервных клетках, вызывая в них обширные морфологические изменения, приводящие к развитию параличей (SabinA.B., 1956, 1993).

Для штаммов полиовируса, даже в пределах одного серотипа, характерна различная выраженность этих свойств или различные их сочетания. Так, например, штамм mv - Флекснера не способен размножаться ни в алиментарном тракте, ни в экстраневральных тканях. Этот штамм размножается лишь при непосредственном введении в ЦНС, что является проявлением крайнего нейро-тропизма (Sabin А.В., 1956). Штамм Вольф вызывал продолжительную вире-мию у обезьян при внутримышечном заражении, но не проникал в ЦНС, зараженных животных (Балаян М.С. с соавт., 1965). Аттенуированные штаммы полиовируса способны к размножению в алиментарном тракте и лишь в редких случаях дают небольшую виремию. Не вирулентные штаммы, выделенные Сэ-биным более пяти десятилетий назад, эффективно используются в качестве живых полиовирусных вакцин (Sabin А.В., 1993). Являясь наиболее безопасными среди живых вакцин, они тем не менее, в достаточно редких случаях, могут быть причиной возникновения вакциноассоциированного паралитического полиомиелита, как среди вакцинированных, так и среди контактировавших с ними лиц (Lipskaya G.Y., et. al., 1987) . К возникновению генетических изменений лиомиелита, как среди вакцинированных, так и среди контактировавших с ними лиц (Lipskaya G.Y., et. al., 1987) . К возникновению генетических изменений аттенуированных штаммов могут приводить как мутации и высокий уровень ошибок в ходе репликации вирусной РНК, так и генетическая рекомбинация. Последняя, возможна как между вакцинными, так и вакцинными и дикими штаммами полиовируса. Об этом свидетельствуют результаты, полученные с помощью метода олигонуклеотидного картирования генома вирусов, выделенных в различных регионах от заболевших полиомиелитом. В настоящее время показано, что длительная циркуляция (до двух лет) дериватов вакцинных штаммов полиовируса связана с возрастанием их нейровирулентности и спо-стобности вызывать паралитический полиомиелит (Lipskaya G.Y., et. al., 1987; Cherkasova E.A., Korotkova E.A., et al, 2002; Caceres V.M., Sutter R.W. 2001; Yoneyama Т., Yoshida H. et al., 2001).

Сегодня насчитывается около 1.600.000 людей перенесших острый полиомиелит в детстве и юности. У некоторых из них определяется особый тип нейромышечных нарушений, рассматриваемый как постполиомиелитный синдром. Для постполиомиелитного синдрома характерно наличие мышечной слабости, повышенной утомляемости и мышечных болей.

В развитии постполиомиелитного синдрома предполагается возможная роль воспалительных реакций. Показана хроническая экспрессия воспалительных цитокинов TNF-альфа, IFN-gamma, ИЛ-4 и ИЛ-10, сравнимая с уровнем экспрессии таких цитокинов при известном нейровоспалительном заболевании - рассеянном склерозе (Gonzalez Н., Khademi М. et al., 2002).

Высказываются предположения о том, что проявление постполиомиелитного синдрома может быть связано с персистенцией полиовируса в ЦНС. Показано что в ЦНС зараженных мышей полиовирус может персисти-ровать около года (Girard S., Gosselin A.S., 2002).

Заключение

Полиовирус, вызывающий острое инфекционное заболевание человека-полиомиелит, относится к роду Enterovirus, семейства Picornaviridae. Резервуаром полиовируса служит человек-больной или здоровый вирусоноситель, а передача возбудителя, в основном осуществляется алиментарным путем.

Строгий видовой тропизм полиовируса связан с наличием специфического полиовирусного рецептора (PVR), являющегося представителем класса иммуноглобулинов, на поверхностных мембранах клеток человека и приматов и отсутствием его у других видов животных. Исключением долгое время являлся полиовирус типа 2, патогенный для грызунов.

Многочисленные исследования секционного материала людей, погибших от полиомиелита и результаты изучения экспериментальной инфекции, воспроизводимой у обезьян, позволили подробно изучить картину патоморфологиче-ских измененений ЦНС при полиомиелите.

Создание линий трансгенных мышей, экспрессирующих человеческий PVR ген, который сделал их чувствительными к полиовирусной инфекции, позволило использовать таких животных в качестве перспективной экспериментальной модели для изучения молекулярных механизмов нейротропизма, ней-ровирулентности, аттенуации и других аспектов патогенеза полиовирусной инфекции.

Одним из существенных факторов патогенеза полиовирусной инфекции, определяющим исход заболевания,является способность полиовируса запускать механизм развития апоптоза или ингибировать его становление.

В процессе полиовирусной инфекции образуются специфические противовирусные антитела, которые являются эффективным средством защиты организма. Наряду с образованием гуморальных противовирусных антител против полиомиелита, в носоглотке и кишечнике вырабатываются секреторные антитела класса А, которые обеспечивают местный иммунитет. Содержание противовирусных нейтрализующих антител (ПВНА) в крови, коррелирующее со степенью защиты от паралитического полиомиелита, рассматривается в качестве

Однако, при пассивной иммунизации зараженных животных показано, что сывороточные ПВНА при полиовирусной инфекции являются эффективным средством защиты организма только на ранних этапах заболевания, до массированного проникновения вируса в ЦНС. Введение высоких доз ПВНА через 24 или 48 часов после заражения животных не оказывало влияния на течение заболевания. Временной разрыв, между попаданием вируса в организм и введением специфических ПВНА, явился основной причиной низкой эффективности серотерапии полиомиелита в условиях клиники.

Существенную роль в развитии той или иной формы полиовирусной инфекции играют особенности штамма. Аттенуированные штаммы полиовируса способны размножаться в алиментарном тракте и лишь в редких случаях дают небольшую виремию, являясь наиболее безопасными среди живых вакцин, они тем не менее могут быть причиной возникновения вакциноассоциированного паралитического полиомиелита, как среди вакцинированных, так и среди контактировавших с ними лиц. Генетические изменения аттенуированных штаммов могут возникать как в результате мутаций и высокого уровня ошибок в ходе репликации вирусной РНК, так и вследствии генетической рекомбинации, как между вакцинными, так и вакцинными и дикими штаммами полиовируса.

Изучение роли клеточного иммунитета при экспериментальном полиомиелите ограничено изучением состояния Т-системы иммунитета. Описаны различия в динамике нарастания количества Т-лимфоцитов, а также сенсибилизации Т-клеток в зависимости от формы инфекции. Показана активация ЦТЛ. Изучение реакции ГЗТ при экспериментальной полиовирусной инфекции позволило выявить межтиповые антигены трех типов вируса полиомиелита, т.к. спленоци-ты мышей, инфицированных вирусом полиомиелита, были сенсибилизированы не только к антигенам гомологичного штамма, но и одновременно к антигенам всех трех типов вируса полиомиелита. Исследовалось также иммунодепрессив-ное действие энтеровирусов.

Тем не менее, многие основные вопросы состояния клеточного иммунитета в целом и роли отдельных компонентов иммунного ответа в защите животных против вируса полиомиелита остаются неизученными.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Гришина, Карина Гургеновна

Выводы

1 .На ранних этапах развития инфекции, вызванной вирусом полиомиелита (типа 2) у мышей, иммунокомпетентные клетки при совместном введении со специфическими антителами играют ведущую роль в обеспечении резистентности организма к вирусу. Описанный эффект реализуется за счет взаимодействия противовирусных антител с макрофагами. Специфически сенсибилизированные к вирусу Т- и В- лимфоциты, макрофаги или противовирусные антитела при адоптивном переносе в аналогичных условиях были неэффективными.

2. Введение специфических противовирусных антител зараженным, на фоне подавленного иммунитета, мышам в конце инкубационного периода заболевания, приводит к отягощению течения вирусного инфекционного процесса и сокращения сроков жизни адоптивно иммунизированных реципиентов. Введение зараженным реципиентам в аналогичных условиях макрофагов или специфически сенсибилизированных к вирусу Т- и В- лимфоцитов не оказавало влияния на течение инфекционного процесса.

3. Отягощение течения экспериментального полиомиелита, на фоне введения противовирусных антител мышам в конце инкубационного периода, сопровождается выраженной воспалительной реакцией в ЦНС и массированной гибелью нейронов как в головном, так и в спинном мозге реципиентов.

4. Совместное введение макрофагов и специфических противовирусных антител в конце инкубационного периода заболевания инфицированным мышам, на фоне подавленного иммунного ответа, не только предотвращает развитие у реципиентов иммунопатологической реакции, вызываемой противовирусными антителами, но и инициирует выраженный защитный эффект.

5. Активность антигенспецифических Т - лимфоцитов, опосредующих развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа при экспериментальном полиомиелите ограничивается вирусиндуцированными антигенспеци-фическими Т- супрессорами. Т - лимфоциты, участвующие в реализации реакции гиперчувствительности замедленного типа не играют определяющей роли в обеспечении резистентности организма к полиовирусу и развитии иммунопатологической реакции.

6. В опытах in vitro установлено, что в присутствии комплемента специфические противовирусные антитела индуцируют иммунный цитолиз культуры клеток, инфицированной полиовирусом. Показано, что в отсутствии комплемента, макрофаги при взаимодействии со специфическими антителами осуществляют иммунный лизис зараженной полиовирусом культуры клеток. Для реализации иммунного лизиса инфицированных клеток противовирусными антителами и макрофагами требуется значительно (в 150 раз) меньшая концентрация противовирусных антител, чем для комплемент-зависимого иммунного цитолиза.

7. Предложена гипотеза, согласно которой в патогенезе экспериментального полиомиелита существуют два иммунологических механизма, определяющих исход инфекционного процесса. Один из них - комплемент зависимое цитотоксическое действие специфических противовирусных антител, определяет развитие иммунопатологической реакции и гибель организма, инфицированного вирусом. Другой, зависимое от антител защитное действие макрофагов, обеспечивает выздоровление. Превалирование, действия одного из этих механизмов является одним из факторов, определяющих исход инфекции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гришина, Карина Гургеновна, 2005 год

1. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. //Медицина, Ленинград. - 1962. - С. 173.

2. Балаян М.С., Ворошилова М.К., Тольская Е.А. //В книге «Полиомиелит и другие энтеровирусные инфекции», Москва. 1965. - С. 80-96.

3. Боцман И.Е. К вопросу о патогенезе полиомиелита. IIВ книге «Полиомиелит». вып. 2., Киев. - 1962.-С. 51-58.

4. Варгин В.В. Антигенспецифическая модуляция иммунного ответа в патогенезе некоторых вирусных инфекций. //Автореферат диссертации д.м.н., Москва.- 1992.

5. Ворошилова М.К. В книге «Экспериментальный полиомиелит у обезьян. Теоретические и практические вопросы медицины и биологии в экспериментах на обезьянах. //Москва. 1956. - С. 165-178.

6. Ворошилова М.К., Робинзон И.А., Королева Г.А., Лаврова И.К. и др. Изучение полиомиелита в опытах на обезьянах. //В книге «Биология и патология обезьян, изучение болезней человека в экспериментах на обезьянах». Тбилиси. 1966.-С. 32-36.

7. Ворошилова М.К., Жевандрова В.И., Балаян М.С. Методы лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций. //Москва. 1964.

8. Грачева Л.А. Цитокины в онкогематологии. // «Алтус». — Москва. 1996. -С. 168.

9. Ю.Горшунова Л.П. Экспериментальный полиомиелит у мелких грызунов при различных способах их заражения. //ЖМЭИ № 10. 1954. - С. 59-61.

10. П.Горшунова Л.П., Максимова-Теодорова В.А., Ванаг Н.А. О персистенции аттенуированного вируса полиомиелита в органах вакцинированных животных. //Вопросы вирусологии № 3. 1980. — С. 338-341.

11. Дубровина Т.Я., Леонтиева Г.С., Мещерякова И.Л. Особенности взаимодействия вирусов гриппа и макрофагов в реакции иммунного ответа. //Бюлл. Экспер. Биол. № 8. С. 192-194.

12. Испопова А.В., Шварцман А. Взаимодействие различных типов клеток в продукции противовирусных антител: сообщ. III. Кооперация В- и Т- лимфоцитов в продукции антител к вирусу гриппа. IIЭИМЭИ № 8. — С. 38-42.

13. Кармышева В.Я., Фарутина Л.М., Иванникова Т.А. и др. Иммунный лизис клеток, зараженных вирусом Синдбис. //Вопросы вирусологии № 2. 1974. — С. 194-196.

14. Косяков П.Н., Берденских М., Киселева А.С. Фагоцитоз в иммунитете к вирусам. //Иммунология № 1. 1983. — С. 34-38.

15. Курстак Э., Тинсен П., Курстак К. Применение иммунологических методов в диагностике вирусных инфекций. //Бюллетень ВОЗ № 3. 1986. - С. 110-124.

16. Медуницын Н.В. Вакцинология. //Москва. Триада. — X. 1999.

17. Носик Н.Н. Цитокины при вирусных инфекциях. //Вопр. вирусол. — 2000. -№ 1.-С. 6-12.

18. Попова JI.M. Острый эпидемический полиомиелит. //В книге «Руководство по патологической анатомии». Москва. 1964. - С. 107-121.

19. Пилле Э.Р., Колянова И.С. Вопросы патогенеза экспериментального полиомиелита. //В книге «Вирусные инфекции и противовирусные препараты. Москва. 1961.-т. 2.-С. 65-69.

20. Пшеничное В.А., Семенов Б.Ф., Зазеров Е.Г. Стандартизация методов вирусологических исследований. //Медицина. Москва. 1974. - С. 168.

21. Робинзон И.А. Сравнительное изучение морфологии экспериментального полиомиелита обезтьян и полиомиетита людей. //Аннот. научн. работ АМН СССР. Москва. 1955. - С. 388-390.

22. Рогова В.М., Ральф Н.М. Изучение экстраневрального распределения вируса и вирусемии у обезьян, зараженных штаммами вируса полиомиелита аттен-нуированных А. Сэбиным. //Материалы XIII сессии ИПВЭ АМН СССР, Москва. 1967.-С. 52-54.

23. Сейбиль В.Б., Малышкина Л.П. и др. Состояние коллективного иммунитета к полиомиелиту у доноров в Москве. //ЖМЭИ № 6. 2002. - С. 43-47.

24. Семенов Б.Ф., Баландин М.Л., Каулен Т.Р. Клеточные и молекулярные основы противовирусного иммунитета. //Медицина. Москва. — 1982. С. 239.

25. Семенов Б.Ф., Гаврилов В.И. Иммунопатология при вирусных инфекциях. //Медицина. Москва. 1976. - С. 173.

26. Семенов Б.Ф., Хозинский В.В. Демонстрация ин виво зависимого от антител защитного действия неиммунных силеноцитов мышей при экспериментальной инфекции вирусом Лангат и клещевого энцефалита. //Иммунология № 2. -1981.-С. 33-36.

27. Семенова И.Б., Васильева И.Г., Акатов А.Г. Коррекция иммунного ответа с использованием очищенного стафилококового токсида и липомида при вторичном иммунодефиците вызванном Сох ВЗ вирусом. //ЖМИ. — 2001. — 5. — 42-45.

28. Смородинцев А.А., Лузенина Г.Я., Смородинцев Л.А. Основы противовирусного иммунитета. //Медицина, Ленинград. — 1975. — С. 283.

29. Хозинский В.В. Иммунная регуляция в патогенезе экспериментального клещевого энцефалита и исх. дз. Вирусных инспециях. //Автореферат дисс. д.м.н., Москва. -1986.

30. Широбоков В.П., Гюллинг Э.В., Корнюшенко О.Н., Негребецкая Э.Н., Ро-зенфельд О.Л. Индуцированная полиовирусом иммуносупрессия у мышей и возможности ее коррекции. //Журнал «Микробиология № 1». — 1986. т. 48. -С. 86-90.

31. Широбоков В.П., Корнюшенко О.Н., Негребецкая Э.Н. Влияние генетических вар-тов ВН на факторы клеточного и гуморального иммунитета у мышей. //Журнал «Микробиология № 2». 1986. - т. 48. - С. 63-68.

32. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология. //Медицина. — Москва. 2002. - С. 536с.

33. Ярилин А. А. Основы иммунологии. //Медицина. Москва. — 1999. — С. 608.

34. Ahmed R., Buther D. T4+ T helper cell function in vivo differential requirement for induction of antiviral eytotoxic T-cell and antibody responses. //J. Virol 62 -1988.-P. 2102-2106.

35. Allan E., Doherty P.C. Natural killer cell contribute to inflamation but to not appear to be essential for the induction of clinical lymphocyte chorionmeningitis. //J. Immunnol. -1986. 1. - P. 153-162.

36. Ahmed R., Butler D. T4 T helper cell function in vivo differential requirement for induction of antiviral cytotoxic T-cell and antibody responses. //J. Virol. 1988. -62.-P. 2102-2106.

37. Allan E., Doherty P.C. Natural killer cell contribute to inflamation but do not appear to be essential for the induction of clinical lymphocyte chorionmeningitis. Scand. //J. Immunol. 1986. - 24. - 1. - P. 153-162.

38. Allison F.C. Immunity and immunopathology in virus infection. //Ann. Inst. Pasteur № 4. 1972. - v. 123.-P. 585-608.

39. Anders E.M., Katz J.M., Jackson D.C. In vitro antibody response to influenza virus. //J. Immun. 1981. - 124. - 5. - P. 2436-2441.

40. Armstrong C. The experimental transmission of poliomyelitis to the eastern cotton rat. //Publ. Hlth. Rep. v. 54. - 1939. - P. 1719-1721.

41. Armstrong C. Cotton rat and white mice in poliomyelitis research. //Am J. Publ. Hlth. v. 31. - 1941. - P. 228-232.

42. Armstrong C. Successful trans for of the Lansing strain of poliomyelitis virus from the cotton rat to the white mouse. //Publ. Hlth. Rep. 1939. - v. 54. - P.230-05.

43. Arneborn P., Biberfeld G. T-lymphocyte subpopulations in relation to immunosuppression in measles and varicella. //Immunol. Rev. 1983. - 39. - 1. - P.799-811.

44. Basten A., Warner N.L., Mandel T. A receptor for antibody on a lymphocyte. 11. //J. Exp. Med. 1972. - 135. - 3. - P. 627-642.

45. Belch C.M., Ades E.W., Loker M.R. Human "Null" cells mediating antibody-dependent cellular cytotoxity express T-lymphocyte differentiation antigenes. //J. Immunol. 1980.- 124.-4.-P. 1851-1854.

46. Belz G.T, Doherty P.C. Virus-specific and bystander CD8+ T-cell proliferation in the acute and persistent phases of a gammaherpesvirus infection. //J. Virol. -2001.-77.-P. 4435-4438.

47. Bennink J.R., Yewdel J.W. Recombinant vaccina viruses as vectors for studying T-lymphocyte specificity and function /Review/. //Curr. Top. Microbiol. Immunol, 1990. - 163.-P. 153-184.

48. Bendelac A., Matzinger P., Seder R.A., Paul W.E. and Schwartz, R.H. Activation events during thymic selection. //The Journal of Experimental Medicine. 1992. -175.-March.-P. 731-742.

49. Berger M.L., Blandon R.V. The T lymphocyte in infectioust athology. //Path. Res. Pract. 1981. - 171. - 1. - P. 128-141.

50. Bernhardt G, Bibb JA, Bradley J, Wimmer E. Molecular characterization of the cellular receptor for poliovirus. //Virology. 1994. - 199. - P. 105-13.

51. Betz M. and Fox B.S. Regulation and development of cytochrome с specific IL-4 producing T cells. //J. Immunol. 1990. - 145. - P. 1046.

52. Bianchi A.T., Hoijkaas H., Benner R. Clones of helper T-cells-mediated antigen-specific Н-2-restricted DTH. //Nature. 1981. - 290. - 5814. - P. 62-63.

53. Birkeland M.L., Johnson P., Trowbridge I.S. and Pure E. Changes in CD45 iso-form expression accompany antigen-induced murine T cell activation. //Proc. Natl. Acad. Sci. 1989. - 86. - P. 6734.

54. Blaunden R.V. T-cell-mediated immune response to ectromelia virus infection. //Cell Immunol. 1976. - 22. - 1. - P. 271 -296.

55. Bodian D. Pathogenesis of poliomyelitis in normal and possively immunized primates after virus feeding. //Fed. Proc. 1952. - v. 11. - P. 462.

56. Bodian D. Mechanisms of infection with polioviruses. //Cellular Biology, Nucleie Acids and viruses. № 4. Academy of Seience. 1957. - v. 5. - P. 57-52.

57. Bodian D. Viremia, invasiveness and the influence of injections. //Ann. № 4. Acad. Science. 1955. - v. 61. - P. 877-82.

58. Boom W.H., Liano D. and Abbas A.K. Heterogeneity of helper/inducer T lymphocytes 11. Effects of interleukin-4 and nterleukin-2 producing T cell clones on resting В lymphocytes. //Jour. Exp. Med. 1988. - 167. - P. 1350.

59. Boot H.J., Kasteel D.T. et al. Excretion of wild-type and vaccine-derived poliovirus in the feces of poliovirus receptor transgenic mice. //J. Virol 2003. - Jun. -77(11).-P. 6541-6545.

60. Braakman E., Rotteveel F.T.M., van Bleek G., van Sevener G.A., Lucas C.J. Are MHC class 11-restricted cytotoxic T lymphocytes important. //Immunol. Today. 8.- 1988.-P. 265-269.

61. Braciale T.J., Morrison L.A., Sweetser M.T., Sambrook Т., Getting M.J., Braciale V.L. Antigen presentation pathways to class 1 and class 11 МНС-restricted T lymphocytes. //Immunology. 1987. - 98. - P. 95-114.

62. Bukowski J.F., Welsh R.M. Interferon inhances the suspectibility of virus infected fibroblasts to cytotoxic T-cells. //J. Exp. Med. 1985. - 161. - 1. - P. 257-262.

63. Bucowski J.F., Wuruer J.F., Dennert G. Adoptive transfer studies demonstrations the antiviral effect of Natural Killer cells in vivo. //J. Exp. Med. 1985. - 161. -l.-P. 40-52.

64. Burns W.H., Billups B.C., Notkins A.L. Thymus dependence of viral antigens. //Nature. 1975. - 256. - 5519. - P. 654-656.

65. Burstin S.J., Braudriss M.W., Schlesinger J.J. Infection of a macrophage-like cell line P388D. //J. Immunology. 1983. - 130. - 6. - P. 2915-2919.

66. Butterfield K., Fathman C.G. and Budd R.C. A subset of memory CD4 helper T lymphocytes identified by expression of Pgp-1. //J. Exp. Med. 1989. - 169. — P. 1461.

67. Buttinell G., Donati V. et al. J. Gen. //Virol. 2003. - May. - 84 (Pt 5). - P. 12151221.

68. Cannon J.L, Burkhardt J.K. The regulation of actin remodeling during T-cell APC conjugate formation. //Immunol. Rev. 2002. - Aug. - 186. - P. 90-99.

69. Caceres V.H., Sutter R.W. Sabin monovalent oral polio vaccines: review of past experiences and their potential use after polio eradication. //Clin. Infect. Dis. -2001.-Aug. 15.-33 (4). P. 531-541.

70. Cardosa M.J., Porterfield J.S., Gordon S. Complement receptor mediates enhanced flavivirus replication in macrophages. //J. Exp. Med. 1983. - 158. - 1. -P. 258-263.

71. Chan W-L., Ziltener H.J., Lieoc F.Y. Interleukin-3 protects mice from acute herpes simplex virus infection. //Immunology. Nov. 71(1). 1990. - P. 358-363.

72. Chapes S.K., Tomkins W. Cytotoxic macrophages induced in hamsters by vaccine virus.//J. Immun. 1979. - 123.- l.-P. 1-6.

73. Chatenoud L., Salomon B, Bluestone J.A. Suppressor T cells they're back and critical for regulation of autoimmunity Immunol Rev. - 2001. - 182. - P. 149-163.

74. Cher D.J. and Mosmarm T.R. Two types of murine T cell clones. 11 Delayed-type hypersensitivity is mediated by Th clones. //J. Immunology. 1987. - 138. - P. 3688.

75. Cherkasova E.A., Korotkova E.A. et al. Long-term circulation of vaccine-derived poliovirus that causes paralytic disease. //J. Virol. 2002. - vol 76 (13). - P. 6791-6799.

76. Christensen J.P, Doherty P.C, Branum K.C, Riberdy J.M. Profound protection against respiratory challenge with a lethal H7N7 influenza A virus by increasing the magnitude of CD8+ T-cell memory. //J. Virol. 2000. - 74. - P. 11690-11696.

77. Couderc Т., Girard S. et al. Inhibition of poliovirus RNA Synthesis as a molecular mechanism contributing to viral persistence in the mouse central nervous system. //Dev. Biol (Basel). 2001. - 105. - P. 225-230.

78. Couderc Т., Guivel-Benhassine F. et al. An ex vivo murine model to study polio-virus-induced apoptosis in nerve cells. //J. Gen. Virol. 2002. - Aug. - 83 (Pt 8). -P. 1925-30.

79. Crotty S., Hix L. et al. Poliovirus pathogenesis in a new poliovirus receptor transgenic mouse model: age-dependent paralysis and a mucosal rute of infection. //J. Gen. Virol. 2002. - Jul. - 83 (pT 7). - 1707-20.

80. Cohn M., Langman R.E. To be or not to be ridded? That is the question addressed by the Associative Antigen Recognition model Scand Immunol. //- 2002. -53.-P. 1-6.

81. Couderc Т., Guinguene В., Horaud F., Aubert-Combioscu A., Crainic R. Molecular pathogenesis of type 2 poliovirus in mice. //Eur J Epidemiol. 1989. - 5. -P. 270-3.

82. Dahourou G. et al. Genetic recombination in wild-type poliovirus. //J. Gen. Virol. 2002. - Dec. - 83 (Pt 12). - P. 3103-3110.

83. Dalakas M.C. Proinflammatory cytokines and motor neuron dysfunction: is there a connection in post-polio syndrome? //J. Neurol. Sei. 2002. - Dec. - 15. - 205 (l).-P. 5-8.

84. Den Haan J.M, Bevan M.J. Antigen presentation to CD8+ T cells; cross-priming in infectious diseases. //Curr Opin Immunol. 2001. - 13. - P. 437-441.

85. Delaet L., Boeye A. Monoclonal Antibodies That Disrupt Poliovirus Only at Fever Temperatures. //J. Virol. 1993. - v. 67. - № 6. - P. 5299-5302.

86. Dharakul Т., Rott L., Greenberg H.B. Recovery from chronic rotavirus infection in mice with severe combined immunodeficiency: Virus clearence mediated by adoptive transfer of immune CD8 T lymphocytes. //J. Virol. 1990. - 64. - 9. - P. 4375-4382.

87. Di Paolo R.J, Unanue E.R. Chemical dominance does not relate to immunodomi-nance: studies of the CD4+ T cell response to a model antigen. //J. Immunol. -2002. 169. - P. 1-4.

88. Doherty P.C, Gerhard W. Breakdown of the blood cerebrospinal fluid barrier to immunoglobulin in mice injected i/c with a neurotropic influenza A vims. //Neuroimmunal. - 1981. - 1. - P. 227-236.

89. Doherty P.C., Allan J.E., Ceredig R. Contributions of host and donor T cells to the inflammatory process in murine lymphocyte choriomeningitis. //Cell Immunol. -1988.-116.-2.-P. 475-481.

90. Doherty P.K., Zinkernagel R.M. Capacity of sesitized thymus-derived lymphocytes to induce fatal lymphocytic choriomeningitis is restricted by the H-2 gene complex. //J. Immunol. 1975. - 114. - 1. - P. 30-33.

91. Ehlers S. and Smith K.A. Differentiation of T cell lymphokine gene expression: The in vitro acquisition of T cell memory. //J. Exp. Med. 1991.- 173.-25.

92. Erlich S.S., Matsushima G.K., Stohlman S.A. Studies on mechanism of protection from acute viral encephalomyeliris ly deldyed-type hypersensitivity inducer T cell clones. //J. Neurol. Sci. 1989. - 90. - 2. - P. 203-216.

93. Ertl H., C, J. Adoptive transfer DTH to Sendai virus. //Cell. Immunol. 1981. -62. -1.-P. 38-49.

94. Espazza I., Gonsales J., Vinnela E. Effect of interferon-a, interferon-g and TNF, on African Swine Fever virus replication in monocytes and macrophages. //J. Gen. Virol. 1988. - 69. - 12. - P. 2973-2980.

95. Faber H. The pathogenesis of poliomyelitis Springfield Illinois, USA. //1955. -P. 157.

96. Finborg R., Benacerraff B. Induction, control and consequences of virus-specific cytotoxic T-cells. //Immun. Rev. 1981. - 58. - P. 157-180.

97. Finkelman F.D., Holmes. J., Kantona I.M., Urban J.F., Beckmann M.P., Schooley K.A., Coffman R.L., Mossman T.R. and Paul, W.E. Lymphokine control of in vivo immunoglobuline isotype selection. //Ann. Rev. Immunol. 1990. -8.-P. 303.

98. Fiorentino D.F., Bond M.W. and Mossman T.R. Two types of mouse T helper cell. 1M. Th clones secrete a factor that inhibits cytokine production by Th clones. //J. Exp. Med. 1989. - 170. - P. 2081

99. Firestein G.S., Roeder T.R., Laxer J.A., Townsend K.S., Weaver C.T., Horn J.T., Linton H.J., Torbett B.E. and Gldsebrook A.L. A new murine CD4 T cell subset with an unrestricted cytokine profile. //J. Immunol. 1989. - 143. -P. 518.

100. Flynn K.J, Belz G.T, Altman J.D, Ahmed R., Woodland D.L, Doherty P.C. Vi-rus-specifix CD8+ cells in primary and secondary influenza pneumonia. //Immunity. 1998. - 8. - P. 683-691.

101. Ford D. J., Ropka S.L. et al. The neuropathology observed in wild-type mice inoculated with human poliovirus mirrors human paralytic poliomyelitis. //Microb. Pathog. 2002. - Sep. 33 (3). - P. 97-107.

102. Forman J., Goodenow R.S., Hood L. Use of H-2L in controlling the cpecificity of anti-vesicurar stomatitis virus cytotoxic T-cells. //J. Exp. Med. 1983. - 157. -4.-P. 1261-1272.

103. Fowlkes B.J. and Pardol D.M. Molecular and cellular events of T cell development. //Adventure Immunology. 1989. - P. 44-207.

104. Friedl P, Brocker EB.TCR triggering on the move; divercity of T-cell interactions with antigen-presenting cells Immunol. //Rev. 2002. Aug. -186. - P.83-89.

105. Fujinami R.S., Oldstone M.B.A., Sissons J.G.P. Antigenic modulation: A mechamism of viral persistance. //Program in Brain Research. 1983. - 53. - 1. — P. 105-111.

106. Gallatin M., St. John, M.T.P., Siegelman M., Riechert R., Butcher E.C. and Wiessman I.L. //Lymphocyte homing receptors. Cell. 1986. - 44. - P. 673.

107. Georgopoulou A., Markoulatos P. Sabin type 2 polioviruses with intertypic vaccine/vaccine recombinant genomes.//Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2001. -Nov.-20 (11).-792-9.

108. Ghendon Y. Ed by Brown F, Lewis B.P. WHO Recommendation on Potential use of new poliomyelitis vaccines. //Develop, in Biological Stand., vol 78, Karger (Basel). 1993.-P. 133.

109. Girard S., Gosselin A.S. et al., Restriction of poliovirus RNA replication in persistently infected nerve cells. //J Gen Virol. 2002. - May. - 83 (Pt 5): 108793.

110. Gonzales H., Khademi M., Andersson M. et al. Prior poliomyelitis evidence of cytokine production in the central nervous system. //J. Neurol. Sei. - 2002. Dec. 15.-205 (l).-P. 9-13.

111. Graham S., E.C.Y. Wang., O. Jenkins and L. Borisiewicz. Analysis the T cell response to picornaviruses identification of T cell epitopes of poliovirus. //J. Virol. vol 67. - 1993. - P. - 1627-1637.

112. Hardt C., Rollinghoff H., Pkizenmaier K., et al. Lit 23 cyclophosphdmide-sensitive cells regulate the activity of an interleukin-2 inhibitor in vivo. //Journal of Exp. Med. 1981. - 154. - P. 262-274.

113. Hayakawa K. and Hardy R. Murine CD4 T-cell subsets. //Immunological Review. 1991. - 123. - P. 145-154.

114. Heinzel F.P., Sadick M.D., Holiday B.J., Coffman R.L and Locksley, R.M. Reciprocal expression of interferon-g or interleukin 4 during the resolution of progression of murine leishmaniasis. //J. Exp. Med. 1989. - 169. - P. 59.

115. Hendricks R.L., Tao M.S.P., Glorioso J.C. Alterations in the antigenic structure of two major HSV-1 glycoproteins, gC and gB, influence immune regulaiton and susceptibility to immune herpes reratitis. //J. Immunol. 1989. - 142. - 1. - P. 263-269.

116. Hennecke J., Wiley DC. T cell receptor-МНС interactions up close. //Cell. -2001.-104.-P. 1-4.

117. Hogle J. M, Chow M., Filman D.J. The three-dimensional structure of poliovirus at 2.9 A resolution. //Science. 1985. - 229. - P. 1358-65.

118. Horie H., Koike S., Kurata T. et al. Transgenic unice carrying the human poliovirus receptor; new animal model for the study of poliovirus neurovirulence.

119. Horstmann D.M, Melnick J.L, Ward R., et al. Suspeptibility of infant rhesus monkeys to poliomyelitis virus administered by month, a study of distribution of virus in tissue of orally infected animals. //J. Exp. Med., 1947. - v. 86. - P. 30923.

120. Horstmann D.M, McCollum R.W et al. Viremia in human poliomyelitis. //J. Exp. Med. 1954. - v. 99. - P. 355-369.

121. Horstman D.M. Poliomyelitis: problems in pathogenesis and immunization. //Yale J. Biol. Med. 1957. - v. 30. - P. 81-100.

122. Horstmann D.M, Opton E.M. et al. Viremia in infants vaccinated with oral poliovirus vaccine (Sabin). //Amer. J. Hyg. 1964. - v. 79. - P. 47-63.

123. Howard M. and Paul, W.E. Regulation of В cell growth and differentiation by soluble factors. //Annu. Rev. Immunol. 1. - P. 307-333.

124. Hull H.F. Progress towards global polio eradication. //Dev. Biol (Basel). -2001.- 105.-P. 37.

125. Hudson A.W, Ploegh H.L. The cell biology of antigen presentation. //Exp. Cell Res.-2002.-272.-P. 1-7.

126. Hursh M.S., Zisman В., Allison A.C. Macrophages and age-dependent resistance to herpes simplex virus in mice. //J. Immunol. 1970. -104. - 3. - P. 1160.

127. Ida-Hosonuma M., Iwasaki T. et al. Comparison of neuropathogenicity of poliovirus in two transgenic mouse strains expressing human poliovirus receptor with different distribution patterns. //J. Gen. Virol. 2002. May. - 83 (Pt5). - P. 1095-105.

128. Imur Т., Sacsela E., Makela O. Two types of antibody dependent cell-mediated cytotoxity, arming and sensitization. //J. Immunol. 1976. - 117. - 5. - P. 19381942.

129. Janeway C.A Jr. How the immune system works to protect the host from infection; a personal view. //Proc Natl Acad Sci USA. 2001. - 98. - P. 7461-7468.

130. Janeway CA Jr, Medzhitov R. Innate immune recognition. //Ann Rev Immunol. 2002. - 20. - P. 197-216.

131. Johnson R.T. The pathogenesis of herpes virus encephalitis. //J. Exp. Med. -1964.-120.-2.-P. 359-365.

132. Jubelt В., Gallez-Hawkins G., Narayan O., Johnson R.T. Pathogenesis of human polivirus infection in mice. I. Clinical and pathological studies. //J. Neuropa-thol Exp Neurol. 1980. - 39. - P. 138-49.

133. Jubelt В., Meagher J.B. Poliovirus infection of cyclophosphamide-treated mice results in persistence and late paralysis: I. Clinical, pathologic, and immunologic studies. //Neurology. 1984. - 34. - P. 486-93.

134. Kaplan D.R., Griffith R., Braciale V.L., Braciale T. Influentza virus-specific human cytotoxic T-cells clones: heterogeneity to antigen specificity and restriction by class 11 MHC produkts. //Cell immunol. 1984. - 88. - 1. - P. 1193-1206.

135. Kappler J.W., (Hunter) Marrack P.C., Jacobs D and Lord E. Functional heterogeneity among T-derived lymphocytes of a mouse. 1. Analysis by adult thymectomy. //J. Immunol. 1974. - 113. - P. 27.

136. K.E. Pollok, E.C. Snow. The proteolysis of membrane-associated protein kinase С as a possible component of the signaling pathway leading to c-myc induction in В lymphocytes. //Cellular Signaling. 1991. vol. 3. - № 5. - P. 435-452.

137. Katrak K., Mahon B.P, Minor P.D and K.H.G. Mills. Cellular and humoral responses to poliovirus in mice; a role for T cells in heterotypic immunity to poliovirus. //J. Gen. Virol. 1992. - vol 72. - P. 1093-1098.

138. Kaye J., Hsu M.-L, Sauron M.E., Jameson S.C., Gascoigne N.R. J. and Hedrick S.M. Selective development of Cd4 T cells in transgenic mice expressing a class 11 МНС-restricted antigen receptor. //Nature. 1989. - 341. - P. 746.

139. Kellermann S.A, Del C.L, Hunt S.W 3 rd, Shimizu Y. Genetic analysis of inte-grin activation in T-lymphocytes. //Immunol. Rew. 2002. Aug. - 186. - P. 172188.

140. Killar L., MacDonald G., West J., Woods A. and Bottomly K. Cloned Ia-restricted T cell that do not produce iterleukin4 /В cell stimulatory factor 1 fail to help antigen-specific В cells. //J. Immunol. 1987. - 138. - P. 1674.

141. Kim J.E., Kojima M., Houghten R., Pendleton C.D., Cornete J.L., DeLisi C., Berrofsky J.A. Characterization of a helper T cell epitop recognized by mice of a low responder MHC type. //Med. Immunology. -1990. Oct. 27(10). -P. 941-946.

142. Kodima-Nzuji M., Grainhead J.E. T-lymphocyte effects on murine cytomegalovirus pulmonary infection. Am. //J. Pathol. Oct. 1990. - 137 (4). - P. 907-912.

143. Kohl S., Moore C.M. Human antibody dependent cellular cytotoxity and natural killer cytotoxity to herpes simplex virus-infected autologous and allogeneic cells. //Immun. 1983. - 48. - 1. - P. 187-193.

144. Kohl S., Thomas J.W., Leo L.S. Deffective producyion of antiherpes simplex virus antibody by neonatal mice. Reconstitution with la macrophages and T helper lymphocytes from nonimmune adult syngenic mice. //J. Immun. 1986. - 136. - 8. -P. 3038-3044.

145. Koike S., Horie H., Ise I., Okitsu A., Yoshida M., Iizuka N., Takeuchi K., Takegami Т., Nomoto A. The poliovirus receptor protein is produced both as membrane-bound and secreted forms. //EMBO J. 1990. - 9. - P. 3217-24.

146. Koike S., Taya C., Kurata Т., Abe S., Ise I., Yonekawa H., Nomoto A. Transgenic mice susceptible to poliovirus. //Proc Natl Acad Sci USA. 1991. - 88. - P. 951-5.

147. Kopf M., Bachmann M.F. IL-4 and IL-10 antagonize IL-12-mediated protection against acute vaccinia virus infection. //In: Basel Institute for Immunology. Annual Report. 1999. - № 122. - P. 84-85.

148. Kopf M., Scmitz N. The role of type 1 and 2 cytokines during pulmonary influenza virus infection. //In: Basel Institute for Immunology. Annual Report. -1999. № 122.-P. 87-90.

149. Kutubuddin M., J. Simons and Chow M. Poliovirus-specific major histocompatibility complex class I-restricted cytolytic T cell epitopes in mice laeelize' to neutralizing autigenic regions. //J. Virol. 1992. - vol 66. - P. 5967-5974.

150. Lagrauge P.H., Tsiang H., Hurtrel В., Ranisse P. Delayd type hypersensitivity to rabies virus in mice: assey of active or passive sensitization by the footpad test. //Inf. Immunity. 1978. - 21. - P. 931-939.

151. Lamon E.W., Whitten H.D., Skurzak H.M. IgM-antibody-dependent cyto-toxity in the Moloney sarcoma virus system. //J. Immunol. 1975. - 115. - 3. - P. 1288-1294.

152. LaMonica N., Meriam C., Racaniello V.R. Mapping of sequences required for mouse neurovirulence of poliovirus type 2 Lansing. //J. Virol. 1986. - 57. - P. 515-25.

153. Langman R.E, Cohn M. The Standard Model of T-cell receptor function: a critical reassessment. //Scand J Immunol. 1999. - 49. - P. 570-577.

154. Langman R.E. The specificity of immunological reactions. //Mol Immunol. -2000. -37.-P. 555-561.

155. Latek R.R. et al. Structural basis of peptide binding and presentation by the type 1 diabetes-associated MHC class II molecule of NOD mice. //Immunity. -2000.-12.-P. 699-710.

156. Lamontagne L., Decarie D., Dupuy J.M. Host cell resistance to mouse hepatitis virus type3 is expressed in vitro in macrophages and lymphocwtes. //Viral Immun. 1989.-2.- l.-P. 37-45.

157. Le Gros G., Ben-Sasson S.Z., Seder R., Finkelman F.D. and Paul W.E. Generation of IL-4-producing cells in vivo and in vitro: IL-2 and IL-4 are Required for in vitro generation of IL-4-producing cells. //J. Exp. Med. 1990. - 172. - P. 921.

158. Letvin N.L., Kauffman R.S., Finberg R. An adherent cell lyses virus-infected targets. //J. Immunol. 1982. - 129. - 6. - P. 2396-2401.

159. Leung K.N., Ada G.L. Generation of influenza virus- specific DTH of T-cells in vitro. Austr. //J. Exp. Med. 1980. - 58. - 2. - P. 457-469.

160. Leung K.N., Ada G.L. Two T-cell populations mediate DTH to murine influenza virus infection. Scand. //J. Immun. 1980. - 12. - 3. - P. 481-487.

161. Leung K.N., Ada G.L. Effect of helper T-cells on the primary in vitro production of DTH to influenza virus. //J. Exp. Med. 1981. - 153. - 5. - P. 1029-1043.

162. Leung K.N., Ada G.L. Different functions of subsets of effector cells in murine influenza virus infection. //Cell. Immun. 1982. - 67. - 1. - P. 312-324.

163. Liew F.Y., Russel S.M. Inhibition of pathogenic effect of effector T-cells by specific supressor T-cells during influenza virus infection in mice. //Nature. -1983.-304.-5926.-P. 541-543.

164. Lin Y.L., Askonas B.A. Biological properities of an influenza A virus-specific killer T-cell clone. //DTH. J. Exp. Med. 1981. - 154. - 1. - P. 225-234.

165. Lindsley M.D., Rodringer M. Characterisation of the inflammatory response in the central nervous system of mice suspectible or resistant to demyelination by Teiler's virus. //J. Immunol. 1989. - 142. - 8. - P. 2677-2685.

166. Linton P.-J., Decker D.J. and Klinman N.R. Primary antibody-forming cells and secondary В cells are generated from separate precursor cell subpopulations. //Cell.- 1989.-59.-P. 1049.

167. Lipskaya G.Y., Muzychenko A.R., Kutitova O.K., Maslova S.V. et al. Fre-quemt isolation of intertypic poliovirus recombinants with serotype-2 specifieity from vaccineassociated polio cases. //J. Med. Virol. 1991. - vol 35. - № 4. - P. 290-297.

168. Lipscomb M., Yakel-Houlihan D., Lyons C. Persistance of influenza as a im-munogen in pulmonary antigen-presenjigg cells. //Infect. Immunol. 1983. - 42. -3.-P. 965-977.

169. Lopes C., Dudes G. Replication of herpes simplex virus type 1 in macrophages from resistant susceptible mice. //Infect. Immunol. 1979. - 23. - 2. - P. 432-437.

170. Lwoff A., Toumer P., Carteand J. Sufluence de I'hypertermie experimentale sur la poliomyelite de la sontis. //C.r. Acad. Sci. 1959. - v. 248. - P. 1876-1878.

171. Macadam A., Arnold C. et al. Reversion of the attenuated and temperature sensitive phenotypes of Sabin type 3 Strain of poliovirus vaccines. //J. Virology. -1989.-v. 172. - P. 408-414.

172. Macfarlan R.J., Bums W.H., White D.O. Two cytotoxic cells in peritoneal cavity of virus-infected mice. //J. Immunol. 1977. - 119. - 5. - P. 1569-1574.

173. Macfarlan R.J., Dietzschold В., Wictor T.J., Kiel M., Houghten R., Lerner R.A., Sutcliffe T.G. and Koprowski H. T cell Responses to cleaved rabies virus glycoprotein and synthetic Peptides. //Journal of Immunology. 1984. - 133. - 5.

174. MacKay C.R., Marston W.L and Dudler L. Naive and memory T cell show distinct pathways of lymphocyte regulation. //J. Exp. Med. 1990. -171. -P. 801.

175. Mackenzie C.D., Taylor P.M., Askonas B.A. Rapid recovery of lung histology correlates with clearance of influenza virus by specific CD8 cytotoxic T cells. //Immunol. 1989. - 67. - 3. - P. 375-381.

176. Мак N.K., Leung K.N., Ada G.L. The generation of cytotoxic macrophages in mice during infection with influenza or Sendai virus. Scand. //J. Immunol. 1982. -15.-6.-P. 553-561.

177. Mandel B. The interaction of neutralazed poliovirus with HeLa cells. 1 Absrption// Virology 1967, vol 37 p. 238-247.

178. Marshall D.R. et al. Measuring the diaspora for virus-specific CD8+ T cells. //Proc Natl Acad USA. 2001. - 98. - P. 6313-6318.

179. Martin A., Wychowski C., Couders Т., Crainic R., Hogle J., Girard M. Engineering a poliovirus type 2 antigenic site on a type 1 capsid results in a chimaeric virus which is neurovirulent for mice. //EMBO J. 1988. - 7. - P. 2839-47.

180. Martin J., Samoilovich E. et al. Isolation of an intertypic poliovirus capsid recombinant from a child with vaccine-associated paralytic poliomyelitis. //J. Virol. -2002.-Nov.-76 (21).-P. 10921-8.

181. Mathur A., Rawat S., Chaturvedi U.C. Induction of supressor cells in Japanes encephalitis virus-infeited mice. Brith. //J. Exp. Pathol. 1983. -64. -3. - P. 336343.

182. Mc Cullough K.C., Parkinson D., Crouther I.R. Opsonisation-enhanced phagocytosis of boot and mouth desease virus. //Immunology. - 1988. - 65. - 2. - P. 187-191.

183. Mc George M.B., Morahan P.S. Comparison of variouse macrophage-inhibitory agents on vaginal and systemic herpes simplex virus type 2 infections. //Infect. Immun. 1978. - 22. - 3. - P. 623-626.

184. Mc Laren C., Pope B. Macrophage dependency of in vitro B-cell response to influenza vims antigens. //J. Immunol. 1980. - 125. - 6. - P. 2679-2684.

185. Melnick J.L. Enterovirus type 71 infections: a varied clinical pattern sometimes mimicking paralytic poliomyelitis. //Rev Infect Dis. 1984. - 6. - P. S387-90.

186. Mendelsohn C.L, Wimmer E., Racaniello V.R. Cellular receptor for poliovirus: Molecular cloning, nucleotide sequence, and expression of a new member of the immunoglobulin superfamily. //Cell. 1989. - 56. - P. 855-65.

187. Minor P.D. Antigenic structure of picornaviruses. //Curr Top Immunol Microbiol. 1990. - 161.-P. 121-54.

188. Minor P.D. Attenuation and reversion of the Sabin vaccine stranes of poliovirus. Ln.: Poliovirus attenuation Molecular mechanism and practical aspects. //Dev. Biol. Stand. Basel, Karger. 1993. - vol 78. - P. 17-26.

189. Minor P. Characteristics of poliovirus strains from long-term excretors with primary immunodeficiencies. //Dev. Biol (Basel). 2001. - 105. - P. 75-80.

190. Mizuochi Т., Hugin A.W., Morse H.C., Singer S., Buller R., Mark L. Role of lymphokine-secreting CD8 T cells in cytotoxic T lymphocyte responses against vaccina virus. //J. Immunol. 1989. - 142. -1. - P. 270- 274.

191. Mogenson S.C., Andersen H.K. Effect of silica on the pathogenic distiction between herpes simplex virus type 1 and 2 hepatitis in mice. //Infect. Immun. -1977.- 17.- 1.-P. 224-277.

192. Mogenson S.C., Andersen H.K. Role of activated macrophages in resistance of congenitaly athymic nude mice to hepatitis induced by herpes simplex vims type 2. //Infect. Immunol. 1978. - 19. - 3. - P. 792-798.

193. Mokophidis D.J., Lohler D.J., Grube F., Lehmann N. Lymphocytic chorion-meningitis (LCH) vims delayed-type hypersensitivity is mediated sequentially by CD8 and CD4 T-lymphocytes. //Bacteriol. Microbiol and Hys. A. 1988. - 269. -4. - P. 545.

194. Moller E. Contact-induced cytotoxity in lymphoid cells conteining foreign iso-antigens. //Science. 1965. - 147. - 3660. - P. 837-879.

195. Montoya M.C, Sancho D., et al. Cell adhesion and polarity during immune interactions. //Immunol. Rev. 2002. Aug. - 186. - P. 68-82.

196. Mori R. Cell-mediated mechanisms of resistance and pathogenesis in viral infections: Studies in athymic nude mice. In "Dengue Hemorrhagic Fever". //Proc. First ICMR Seminar, Japan: Kobe. 1980. - P. 137-147.

197. Morgan J.M. Diffirentiation of type of poliomielitis viruses. // Am. J. Hyg., 49 225,1949

198. Morris A.G., Lin Y.L., Askonas B.A. Immune infection release when a cloned cytotoxic T-cell line meets its correct influenza-infeited target cell. //Nature. — 1982. 295. - 5914. - P. 150-152.

199. Morrison L.A., Braciale V.L., Braciale T.J. Antigen form influence induktion and fragmemcy of influenza-specific cldss 1 and class 11 МНС-restricted cytolytic T-lymphocytes. //Journ. Immunol. 1988. - 141. - 2. - P. 363-368.

200. Mosley R.L., Styre D. and Klein J.R. Differentiation and functional maturation of bone marrow-derived intestinal epithelial T cell expressing membrane T cell receptor in athymic radiation chimeras. //J. Immunol. 1990. - 145. -P. 1360.

201. Mosman T.R., and Coffman R.L. Thl and Th2 cells: Different patterns of lym-phokine secretion lead to different functional properities. //Ann. Rev. Immunol. -1989.-7.-P. 145.

202. Moss E.G, Racaniello V.R. Host range determinants located on the interior of the poliovirus capsid. //EMBO J. 1991. - 10. - P. 1067-74.

203. Murakami I. Role of macrophage and thymus in anti-dengue antibody production in mice. //Kobe J. Med. Sci. 1982. - 28. - 1. - P. 33-46.

204. Nagata N., Iwasaki Т., Ami Y., Harashima A. et al. Comparison of neuropa-thogenicity of poliovirus type 3 in transgenic mice bearing the poliovirus receptor gene and cynomolgus monkeys vaccine. //Vaccine. — 2001. Apr. 30. - 19 (23-24).-P. 3201-3208.

205. Nash A.A., Gell P.G., Wildy P. Cellmediated immunuty in herpes simplex virus-infected mice. H-2 mapping DTH response. //J. Immunol. 1981. - 126. - 4. -P. 1260-1262.

206. Nash A.A., Gell P.G. The DTH of T-cell and its interaction with other T-cell. //Immun.Todey. 1981. - 2. - 4. - P. 162-165.

207. Nash A. A., Gell P.G. Membrane phenotype of murine effectors and supressor T-cells involved in DTH and protective immunity to herpes simplex. //Cell Immunol. 1983. - 75. - 2. - P. 348-355.

208. Nash A.A., Gell P.G., Wildy P. Tolerance and DTH in herpes simplex virus infection. //In: Abstr. Fifth Intern. Congr. Virol. France. 1981.- 127.

209. Nash A.A., Field H.J., Quartey-Papafic R. Cell-mediated immunity in herpes simplex virus-infected mice: Antiviral effects of DTH. //J. Gen.Virol. 1980. -48.- 1.-P. 351-357.

210. Nathanson N., Bodian D. Experimental poliomyelitis following intramuscular virus infection III Effect of passive antibody on poralysis and viremia. //Bull. Johns Hopkins Hosp. V.III. 1962. - P. 198-200.

211. Nicolas J.A., Rubino K.L. Levely M.A., Adams E.G., Collins P.L. Cytolytic T-lymphocyte responses to respiratory syncytial virus: effector cell phenotype and target proteins. //J. Virol. 1990. 64. - 9. - P. 4232-4241.

212. Ogra P.L. et al. Immunoglobulin in serum secretion after poliovaccine @ infection. //New Engl. J. Med. 1968. - v. 279. - P. 893-899.

213. Ogra P.L. Effect of tonsillectomy and adenoid ectomy of nasopharyngeal antibody response to poliovirus. //N. Eugl. J. Med. 1971. - 284. - P. 59-64.

214. Ogra P.L. @ Karzon D.T. Formation @ Function of Poliovirus antibody in different tissues. //Progr. Med. Virol, v. 13, Basel-New York, S. Karger. 1971. - P. 156-193.

215. Onka S., Nomoto A. The molecular basis of poliovirus neurovirulence. //Dev. Biol (Basel). 2001. - 105. - 51-8 (a).

216. Onorato I.M, Modlin J.F, McBean AM et al. Mucosal immunity induced by Enhanced-Potency inactivated and oral polio vaccines. //The J. of infect. Diseas. -1991. v. 163. - № 1. - P. 1-6.

217. Peiris J.S.M., Porterfield J.S. Antibody-mediated enhancement of flavivirus replication in macrophage-like cell lines. //Nature. 1979. -282. -5738. - P. 509511.

218. Perrin L.H., Reyholds D., Zinkernagel R. Generation of virus-specific cytolytic activity in humanperipheral lymphocytes after vaccination with vaccina virus and measles virus. //Immunology. 1978. - 166. - 1. - P. 71-79.

219. Perrin P., Joffret M.L., Lecterc C. et al. Interleukin 2 increases protection against experimental rabies.//Immunobiology.- 1988.- 177/2.-P. 199-209.

220. Perrin P., Rollin E.P. and Sureau P. A rapid rabies enzyme immunodiagnosis (PREID). //J. Biol. Stand. 1986. - 14. - P. 217-222.

221. Peterson D.A, Di Paolo R.J, Kanagawa O., Unanue E.R. Negative selection of immature thumocytes by a few peptide-МНС complexes: Differential sensitivity of immature and mature T cells. //J. Immunol. 1999. - 162. - P. 3117-3120.

222. Pu Z., Carrero J.A., Unanue E.R. Distinct recognition by two subsets of T cells of an MHC-class-II-peptide complex. //Proc Natl Acad Sci USA. 2002. - 99. -P. 8844-8849.

223. Puddington L., Bevan M.J., Rose J.K. & LeFrancois L. N protein is the predominant antigen recognized by vesicular stomatitis virus specific cytotoxic T cells. //Journal of Virology 60. 1986.- P. 708-717.

224. Quinnan G.V., Manichewitz J.E. The role of natural killer cells and anti-body-depevdent cell-mediated cytotoxity during murine cytomegalovirus unfec-tion. //J. Exp. Med. 1979. - 150. - 4. - P. 1549-1554.

225. Racaniello V.R. Early events in poliovirus infection virus-receptor interactions. //Proc. Nat. Acad. Sci USA. 1996. - 93. - № 21. - P. 11378-11381.

226. Rager-Zisman В., Allison A.C. The role of antibody and host cells in the resistance of mice against infection by Coxackie B-3 virus. //J. Gen. Virol. 1973. -19.-2.-P. 329-338.

227. Rager-Zisman В., Allison A.C. Mechanism of immunologic resistance to herpes simplex virus 1 (HSV-1) infeition. //J. Immun. 1976. - 116. - 1. - P. 35-40.

228. Rager-Zisman В., Bloom B.R. Immunological destruction of herpes simplex virus 1-infected cells. //Nature. 1974. - 251. - 5346. - P. 592-594.

229. Randolph J. Noelle and E. Charles Snow. Cognate imteraction sbetween helper T cells and В cells. Reviews. //Elsevier Science Publishers. UK 0167-4919/90. -1990.-P. 361-368.

230. Randolph J. N., E.C. Snow. T helper cell dependent В cell activation. //The FASEB Journal. 1991. - vol 5. - October. - P. 2770-2776.

231. Reed L., Muench H. A simple method of estimating fifty percent and points. //Amer. J. Hyg. -1938. v. 27. - P. 493-497.

232. Reddehase M.J., Mutter W., Munch K., Buhring H.J., Koszinowski U.M. CD8 -positive T lymphocytes specific for murine cytomegalovirus immediate early antigens mediate protective immunity. //J. Virol. - 1987. -61. -10. - P.3102-3108.

233. Rekand Т., Langeland N. et al., Fc @ Receptor III A Polymorphism as a Risk Factor for Acute Poliomyelitis. //The J. of Inf. Dis. 2002. - 186. - P. 1840-1843.

234. Ren R., Costantini F., Gorgacz E.J, Lee J .J., Racaniello V.R. Transgenic mice expressing a human poliovirus receptor; a new model for poliomyelitis. //Cell -1990.-63.-P. 353-62.

235. Ren R., Racaniello V.R. Human Poliovirus Receptor Gene Expression and Poliovirus Tissue Propism in Transgenic Mice. //J. Virol. 1992.- vol 66. - № 1. - P. 296.

236. Racaniello V.R, Ren R., Boudiard M. Poliovirus Attenuation and Pathogenesis in a Transgenic Mouse Model for Poliomyelitis. Developments in Biolog. //Stand. 1993. - vol 78. Karger, Basel. - P. 117.

237. Risvi N., Chaturvedi U.C., Matkur A. Obligatory role of macrophages in dengue virus antigenpresentation to В lymphocytes. //Immunologw. 1989. - 67. - 1. -P. 38-43.

238. Roda S.J., White D.O. Cytotoxic macrophages: A rapid nonspecific response to viral infection. //J. Immun. 1976. - 117. - 6. - P. 2067-2972.

239. Rogentine G.N., Doherty C.M., Pincus S.H. Increase in titer of the naturaly oc-curing human antibody to neuraminidase-treated lymphocytes after influenza. //J. Immun. 1977.-119.-5.-P. 1652-1654.

240. Rosenberg J., Schulman J. Effects of macrophage depletion on immune responses to and pathogenesis of influenza virus infection in mice. //Fed. Proc. -1981.-38.-4.-P. 1466.

241. Rosenthal A.S, Barcinski M.A, Blake J.T. Determinant selection is a macrophage dependent immune response gene function. //Nature. 1997. - 267. - P. 156-158.

242. Rott R., Herzoog S., Richt J., Stitz L. Immunomediated pathogenesis of Born desease. //Bacteriol. Microbiol, and Hys. 1988. - 270. - 1-2. - P. 295-301.

243. Rouse B.T., Larsen H.S., Schmid D.S. Induction of cytotoxic T-lymphocytes against herpes simplex virus. In: Mech. Lymphocyte activ. //Proc. 14 Int. Conf. Amsterdam. - 1981. - P. 618-620.

244. Sabin A.B. Properties and pehavior of orally administered attenuated poliovirus vaccine. //J. A. M. A. 1957. - v. - 164. - P. 1216-1223.

245. Sabin AB. Present status of attenuated live virus poliomyelitis vaccine. //Bull. № 4. Acad. Med. 1957. - v. 33. - № 1. - P. 17-39.

246. Samuel B.U, Ponnuaraj E., Kajasingh J., John T.J. Experimental Poliomyelitis in Bonnet Monkey-Clinical Features, Virology and Pathology. //Developm. in Bi-olog. Stand. 1993. - vol 78. Karger (Basel). - P. 71.

247. Samuel R., Balraj V., John T.J. Persisting poliomyelitis after High Coverage with Oral Poliovaccine. //Lancet. 1993. - vol 341. - № 8849. - P. 903-904.

248. Schrier J., Rosenthal A.S. Funition of macrophages as antigen-presenting cells. Springer Semin. //Immunopathol. 1980. - 3. - 3. - P. 247-264.

249. Schrier R.D., Pizer R.J., Moorhead J.W. Tolerance and supression of immunity to herpes simplex virus. //Infect. Immunol. 1983. - 40. - 2. - P. 514-522.

250. Scott P., Pears E., Cheever A.W., Coffman R.L. and Sher A. Role of cytokines and CD4 T-cell subsets in regulation of parasite immunity and desease. //Immunol. Rev.-1989.- 112.-P. 161.

251. Shepley M.P, Racaniello V.R. A Monoclonal Antibody That Blocks Poliovirus Attachement Recognizes the Lymphocyte Hominy Receptor CD 44. //J. Virol. -1994. v. 68. - № 3. - P. 1301-1308.

252. Shevach E.M., McHugh R.S., Piccirillo C.A., Thornton A.M. Control of T-cell activation by CD4+ CD25+ suppressor T cells. //Immunol Rev. 2001. - 182. - P. 58-67.

253. Shore S.L., Black C.M., Melevicz P.M. Antibody-dependent cell-mediated cytotoxity to target cells infected with type 1 and type 2 herpes simplex virus. //J. Immun. 1976.- 116. - l.-P. 194-201.

254. Shore S.L., Cromeans T.L., Norrild B. 1979. Early demage of herpes-infected cells by antibody-dependet cellular cytotoxity. //J. Immunol. 123. - 5. - P. 22392344.

255. Sigal L.J., Crotty S., Andino R., Rock R.L. Cytotoxic T-cell immunity to virus-infected non-haematopoietic cells requires presentation of exogenous antigen. //Nature. 1999. - 398. - P. 77-80.

256. Simons J., Kutubuddin M., Chow M. Characterization of Poliovirus-Specific T lymphocytes in the peripheral Blooc of Sabin-vaccinated Humans. //J. Virolo. -1993. v. 67. № 3. - P. 1262-1268.

257. Sims T.N. Dustin M.L. The requlation of actin remodeling curing T-cell-APC conjugate formation. //Immunol. Rev. 2002. - Aug. - 186. - P. 100-117.

258. Stevens T.L., Bossie A., Sanders V.M., Fernandez-Bortran R., Coffman R.L., Mosman T.R. and Vitetta E.A. Regulation of antibody isotype secretion by subsets of antigen-specific helper T sells. //Nature. 1988. - 334. - P. 255.

259. Stevenson PG, Belz GT, Altman JD, Doherty PC. Changing patterns of dominance in the CD8+ T cell response during acute and persistent murine gamma-herpesvirus infection. //Eur J. Immunol. 1999. - 29. - P. 1059-1067.

260. Stitz L., Huang R.T.C., Hengartner H., Rott R. & Zinkernagel R.M. Cytotoxic T cell lysis of target cells fused with liposomes containing influenza virus hemagglutination and neuraminidase. //Journal of General Virology 66. 1985. - P. 1333-1339.

261. Stohlman S.A., Matsushima G.K., Casteel N. and Weiner L.P. In vivo effects of corona virus-specific T-cell clones: DTH inducer cells prevent a lethal infectin but do not inhibit virus replication. //J. Immunol. 1986. - 136/8. - P. 3052-3056.

262. Storni T, et al. Critical role for activation of antigen-presenting cells in priming of cytotoxic T cell responses after vaccination with virus-like particles. //J. Immunol. 2002. - 168. - P. 2880-2886.

263. Sussman M.A., Fleming J.O., Allen H., Stohlman S.A. Immune mediated clearence of JHM virus from the ientral nervouse system. //Adv. Exp. Med. Biol. 1987.-218.-P. 399-410.

264. Sussman M.A., Shubin R.A., Kiuwas S., Stohlman S.A. T-cell mediated clearence of mouse hepatitis virus strain JHM from the central nervouse system. //J. Virol. 1989. - 63. - 7. ~ P. 3051 -3056.

265. Swain S.L. Regulation of the development is distinct subsets of CD4 T cells. //35th Forum of Immunology. 1991a. - P. 8-12.

266. Taylor P.M. & Askonas B.A. Influenza nucleoprotein-specific cytotoxic T-cell clones are protective in vivo. //Journal of Immunology. 1986. -58. - P. 417-420.

267. Thomas AK. The evidence in favour of immunization A world without smallpox - A world without polio. //Med. J. Aust. - 1994. -vol 161. № 5. - p. 340.

268. Thomsen A.R., Marker O. The complementary roles of cellular and humoral immunity in resistance to reinfection with LCM virus. //Immunology. -1988. -65. -l.-P. 9-15.

269. Tolskaya E.A, Ivannikova T.A, Kolesnikova M.S et al. Postifection treatment with Antiviral Serum Results in Survival of Neural Cells Productively Infected with virulent Poliovirus. //J. of Virology, Aug. 1992. - v. 66. - № 8. - P. 51525156.

270. Tolskaya E.A, Romanova L.I, Kolesnikova M.S. et al. Apoptosis-Inducing and Apoptosis-Preventing Functions of Poliovirus. //J. of Virology. Feb. 1995. -v.69. - № 2. - P. 1181-1189.

271. Tompsen A.R., Volkort M. Studies on the role of mononuclear phagocytes in resistance to acute LHM virus infection. Scand. //J. Immunol. -1983. 18. - 4. -P. 271-277.

272. Townsend A.R. & Skehel J.J. The influenza virus nucleoprotein gene controls the induction of both subtype-specific and cross-reactive T cells. //Journal of Experimental Medicine. 1984. - 160. - P. 552-563.

273. Turk J.L. and Parker D. The effect of cyclophosphamide on the immune re-spoonse. //Journal of Immunopharmacology. 1979. - 1(2). - P. 127-137.

274. Turner S.J, Cross R., Xie W., Doherty P.C. Concurrent naive and memory CD8+ T cell responses to an influenza A virus. //J. Immunol. 2001. - 167. - P. 2753-2758.

275. Usherwood E.J, Nash A.A. Lymphocyte recognition of picornaviruses. //J. of Gen Virology. 1995. - 76. - P. 499-508.

276. Unanue E.R. Perspective on antigen processing and presentation. //Immunol. Rev. 2002. - Jul. - 185. - P. 86-102.

277. Van Boxel I.A., I.Green W.E.Paul. Antibody-dependent lymphoid cell-mediated cytotoxicity: role of complement. //J. Immun. 1974. - 112. - 2. - P. 398-403.

278. Van Kooyk Y., Geij'tenbeek T.B. A novel adhesion pathway that regulates dendritic cell trafficking and T-cell interactions. //Immunol. Rew. 2002. - Aug. -186.-P. 47-56.

279. Varupiah G., Blanden R.V., Ranshow A. Interferon g is involved in the recovery of athimic nude mice from recombinant vaccina virus/interleukin 2 infection. //J. Exp. Med. 1990. - 172 (5).- 1 Nov.-P. 1495-1503.

280. Velazquez C., Vidavsky I., van der Drift K., Gross M.L, Unanue E.R. Chemical identification of a low abundant lysozyme peptide family bound to I-Ak histocompatibility molecules. //J Biol Chem. 2002. in press.

281. Virelizier J.L. Cell-mediated host defence mechanisms against virus infections.- In: Abstr. 4th intern. Congr. Virol. Hague, North Holland. 1978. - P. 56-59.

282. Vrijsen R, Mosser A and Boeye A. Posadsorption Neutralization of Poliovirus. //J. of Virology. 1993. - v. 67. - № 6. - P. 3126-3133.

283. Wand K., Sun L. et al. Cell Mediated Immune Responses to Poliovirus. //Cellular Immunol. 1989. - 119. - P. 252-262.

284. Weaver C.T., Hawrylowicz C.M. and Unanue E.R. Thelper cell subsets require the expression of distinct costimulatory signals by antigen-presenting cell. //Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1988. - 85. - P. 8181.

285. Weigle K.A., Sumaya C.V., Montiel M.M. Changes in T-lymphocyte subsets during childhood. Epstein-Barr virus infectious mononucleosis. //J.Clin. Immunol.- 1983.-3.-2.-P. 151-155.

286. Welsh R.M.Jr., Haspel M.V., Parker D.C., Holmes K.K. Natural cytotoxity against mouse hepatitis virus-infected cells. 11. A cytotoxic effektor cell with a В lymphocyte phenotype. //J. Immunol. 1986. - 136. - 4. - P. 1454-1460.

287. Weinberg A.D., Swain S.L. and English M. Distinct regulation of lymphokine produktion is found in fresh versus in vitro primed murine helper T cells. //Journal of Immunology. 1990. - 144. - P. 1800.

288. Weiner H.L., M.I. Greene, B.H. Fields. DTH in mice infected with reovirus. 1. Identification of host and viral gene products responsible for the immune response. //J. Immunol. 1980. - 125.- 1. 278-282.

289. Welliver R.C., Drucker M.M, Ogra P.L. Immunology of enteroviruses. //Immunol. Hum. I fee. Pt2. New York, London. 1983. - P. 185-203.

290. Weninger W., Manjunath N., von Andrian U.H. Migration and D. Fenntiation of CD8+ T cells. //Immunol. Rev. 2002. - Aug. - 186. - P. 221-233.

291. Williamson J.S.P., Stohlman S.A. Effective clearence of mouse hepatitis virus from the central nervouse system requires both CD4 and CD8 T cell. //J. Virol. -1990. 64. - 9. - P. 4589-4592.

292. Wimmer E., Harber J.J, Bibb J.A, Gromeier M., Lu H.H, Bernhardt G. The poliovirus receptors. In: Wimmer E, ed. //Cellular Receptors for Animal Viruses. Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Press. 1994, in press.

293. Wimmer E., Hellen CUT, Cao X.M. Genetics of Poliovirus. //Ann Rev Genet. -1993.-27.-P. 353-436.

294. Wraith D.C.,Vessey A.E. & Askonas B.A. Purified influenza virus nucleo-protein protects mice from lethal infection. //Journal of General Virology. 1987. -68.-P. 433-440.

295. Wyatt H.V. Is polio a model for consumer research? //«Nature». 1973. - 241.- № 5387. P. 247-249 (англ.).

296. Wyatt H.V. Is poliomyelitis a geneticaly-determinated diseases? //I A genetic model. Med. Hypotheses. 1975. - v. 1. - P. 35-42.

297. Wyatt H.W. Genetic suspectibility to wild and vaccine poliovirus genotypes and their feequency. Abst. Meet. Europ. Group. Rapid Labor. //Viral Diagnosis Amsterdam. 1977. - P. 99.

298. Yamaguchi J., Shingawa Y., Pollard R.B. Relationship between the produc-tionof murine cytomegalovirus and interferon in macrophages. //J. Gen. Virol. -1988. 69. - 12. - P. 2961-2971.

299. Yokoyama A., Evavold В., Dunn D.E. and Quintans J. Production of IL-2 and IFN by T 2 clones. //Immunol. Lett. 1989. - 21. - P. 119.

300. Yoneyama Т., Yoshida H., Shimizu H., Yoshii K., Nagata N., Kew O., Miya-mura T. Neurovirulence of Sabin 1-derived poiloviruses isolated from an immu-nodeficient patient with prolonged viral excretion. //Dev Biol (Basel). 2001. -105:93-8.

301. Zighelboim J., Bonavida В., Fahey J.L.* Evidence for several cell populations active in antibody-dependent cellular cytotoxity. //J. Immunol. 1973. - 111.-5. -P. 1737-1742.

302. Zinkernagel R.M. Immunology taught by viruses. //Science. 1996. - 271. - P. 173-178.

303. Zinkernagel R.M. Maternal antibodies, childhood infections and autoimmune diseases. //N Engl J Med. 2001. - 345. - P. 1331-1335.

304. Zisman В., Hirsch M.S., Allison A.C. Selective effects of anti-macrophage serum silica and anti-lymphocyte serum on pathogenesis of herpes virus infection of young adult mice. //J. Immunol. 1970. - 104. - 4. - P. 1155-1161.

305. Zisman В., Wheelock E.F., Allison A.C. Role of macrophage abd antibody in resistance of mice against yellow fever virus. //J. Immunol. 1971. - 107. - 1. -P. 236-243.1. Благодарности.

306. Выражаю сердечную благодарность лаборантам Степановой Л.В., Вагановой Т.Д., Родионовой В.Е. за квалифицированную техническую помощь при проведении научных экспериментов.