Роль иммунобиологических факторов в репродукции животных и разработка асептического метода трансплантации эмбрионов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, доктор биологических наук Дибиров, Магомед

• Дибиров, Магомед
• доктор биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации доктор биологических наук Дибиров, Магомед

Содержание

Список использованных сокращений

Введение.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ Раздел 1. Роль липидных веществ в иммунологических реакциях.

1.1 Литературный обзор.

1.2 Материал и методика исследований.

1.3 Результаты исследований.

Раздел 2. Иммунобиологические свойства гамет и оплодотворяемость самок.

2.1 Литературный обзор.

2.2 Материал и методика исследований.

2.3 Результаты исследований.

Раздел 3. Физиологические и технологические условия трансплантации эмбрионов.

3.1 Литературный обзор.

3.2 Материал и методика исследований.

3.3 Результаты исследований.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль иммунобиологических факторов в репродукции животных и разработка асептического метода трансплантации эмбрионов»

В последние годы особое внимание уделяется расширению теоретических и экспериментальных исследований в области молекулярной биологии, которые позволяют ускорить решение вопросов повышения продуктивности животноводства и растениеводства, использовать биологические процессы в разработке новых технологий и техники и, наконец, приблизить решение проблем, касающихся охраны окружающей среды и здоровья населения.

Одним из достижений в области неинфекционной иммунологии является открытие резус-антигенов в крови млекопитающих, а также установление их роли в патогенезе гемолитического "синдрома" животных (поросят, жеребят), который по характеру и типу протекания во многом имеет сходство с таковым у человека.

Многоплановое и всестороннее изучение этой проблемы позволило значительно расширить представление об иммунологических отношениях в системе "мать-плацента-плод", глубже понять патогенез иммунологического "конфликта", наметить новые патогенетические пути профилактики и терапии, возникшей при этом патологии.

Известно, что ведущим звеном в патогенезе гемолитического "синдрома" является разрушение эритроцитов, но механизм гемолиза, особенно роль в этом процессе клеточных мембран, изучены недостаточно. Установлено, что мембранный аппарат является одной из самых неустойчивых систем в клетке. С другой стороны, известно, что многие физико-химические параметры мембран клетки определяются липидным составом и жирнокислотным спектром, которые в основном определяют резистентность клетки к повреждающим факторам, в том числе иммунологическим. Однако, процессы, ведущие к нарушению структурно-функциональной организации клеточных мембран и роль их в генезе различных форм клеточной патологии остаются недостаточно выясненными. Вместе с тем, известно, что в качестве цитопротектора в рецептуре синтетических сред для криоконсервации спермы млекопитающих успешно используется яичный желток или его липидные аналоги, обеспечивающие протективное действие, ведущее к укреплению мембран и возрастанию устойчивости клеток к внешним воздействиям. Исследования, направленные на раскрытие механизма цитопротективного действия липидных веществ, позволяют не только глубже понять важные биологические процессы, протекающие в клетке, но и дают возможность направленно изменять свойства клеточных мембран, изыскать эффективные технологические средства для реализации этой проблемы.

На стыке ряда наук определилось новое научное направление - иммунология воспроизведения. За истекшие годы в этой области добыты заметные результаты в изучении роли иммунологических факторов в процессе размножения, установлена роль иммунологических факторов в нарушениях процессов репродукции, приводящих, к бесплодию млекопитающих. Углубленно изучается также роль иммунологических механизмов в нормально протекающих процессах оплодотворения и имплантации. Доказано, что процесс оплодотворения сам по себе в какой-то мере сравним с реакцией "антиген-антитело", в основе которого лежат механизмы взаимного распознавания поверхностных детерминант на яйцеклетке и спермиях. В последнее время допускается даже определенный параллелизм между системами распознавания спермия и яйцеклетки и реакциями между гистонесовместимыми клетками. Мужские и женские гаметы млекопитающих содержат сильные антигены -мембранные и внутриклеточные, способные вызывать у животных образование широкого спектра антител. Для организма самки и самца гаметы, будучи с одной стороны как бы "своими", а с другой "чужеродными" клетками, при парентеральном введении или при нарушении технологии осеменения могут вызывать продукцию ауто-изоантител, что впоследствии приводит к снижению фертильности, или как считают в последнее время - бесплодию невыясненной этиологии или иммунному бесплодию.

Следует отметить, что в современной литературе данные об иммунном бесплодии животных не отражают в полной мере все его механизмы и зачастую носят противоречивый характер, что осложняет понимание патогенеза этого процесса. Недостаточная изученность и противоречивость данных о роли иммунной системы в процессе воспроизведения, низкая информативность отдельных методов иммунологических исследований затрудняет разработку надежных методов в диагностике иммунного бесплодия.

Кроме того, до сих пор остается невыясненным вопрос о физиологической роли антител против мужских и женских гамет в организме животных и доля их участия в процессах размножения. Неизвестно также, являются ли эти иммунные тела нормальными антителами, т.е. изоантителами или гетероанти-телами бактериального происхождения. В связи с выше изложенным, в настоящее время весьма перспективной следует признать разработку методов диагностики, профилактики и терапии иммунного бесплодия животных и человека с целью восстановления и регуляции фертильности, поиска иммунологических способов повышения оплодотворяемости, исследования толерантности и реактивности при трансплантации эмбрионов, а также роли иммунных факторов в генезе стерильных эндометритов и маститов. Одной из сложных проблем в современном промышленном скотоводстве является сложившаяся тенденция широкого распространения бесплодия. Важная роль в ее решении принадлежит (биотехнологии воспроизведения), таким ее аспектам, как трансплантация эмбрионов, регуляция и стимуляция функции воспроизведения, дающая возможность эффективно использовать резервы повышения продуктивности животных и ускоренного их размножения.

В связи с этим, изучение иммунофизиологических процессов воспроизведения представляет большой интерес как в теоретическом, так и в практическом плане и перспективна для получения научно-практических данных, которые наряду с другими методами вполне могут быть широко использованы для регуляции и коррекции воспроизведения сельскохозяйственных животных.

Цель и задачи исследований.

Цель исследования: обосновать цитопротективное действие липидных веществ на мембрану клетки, изучить их влияние на протекание иммунологических реакций, установить функциональное значение и роль иммунобиологических свойств гамет в сенсибилизации организма самки и определить физиологическую роль гуморальных и клеточных факторов иммунитета в процессе размножения животных: разработать асептический метод извлечения и хранения эмбрионов, пред-назначеных для криоконсервации, цитоинженерных целей и трансплантации. Для этого были поставлены следующие задачи:

1.1. Изучить цитопротективное действие липидных веществ - на протекание реакции агглютинации и гемолиза in vitro и in vivo.

1.2. Определить влияние липидных веществ при парэнтеральном введении на макроорганизм и оплодотворяемость самок.

2.1. Изучить топографическую структуру антигенов спермиев, яйцеклеток и их функциональное значение.

2.2. Установить влияние факторов гуморального и клеточного иммунитета на оплодотворяемость самок и специфичность антител против гамет.

2.3. Выяснить: - влияние иммунных факторов на соотношение пола потомства; - возможность применения антисперминов для регуляции фертильности; -влияние антигонадотропной сыворотки на суперовуляционный ответ коров; -эффективность использования кортикостероидных гормонов (гидрокортизон, кортизон) как средств патогенетической терапии при спермиоиммунитете и наличие антител против гонадотропных гормонов; - влияние гонадотропных препаратов и биологически активных веществ на суперовуляционный ответ коров-доноров и сосудистую реакцию гинеталий; - логическую активность гамет и роль гуморальных факторов в овуляции.

3.1. Разработать и физиологически и технологически обосновать применение новых инструментов, оборудования и биопрепаратов, предназначенных для реализации метода трансплантации эмбрионов.

Положения, выносимые на защиту.

• Обоснование цитопротективного действия липидных веществ на клеточную мембрану и на характер иммунологических реакций - агглютинации и реакции гемолиза in vitro и in vivo.

• Обработка гамет (шокированием, синтетической желточной средой, иммунной сывороткой) изменяет их иммунобиологические свойства.

• Иммунизация организма самок гаметами снижает их оплодотворяемость и активизирует гуморальные и клеточные факторы иммунитета.

• Искусственно индуцируемый спермиоиммунитет может быть использован для половой стерилизации самцов.

• Иммунные сыворотки, приготовленные против спермиев, гонадотропных гормонов могут быть использованы для регуляции пола потомства и коррекции фол-ликулогенеза.

• Применение кортикостероидных гормонов в качестве иммуносупрессоров при наличии антител против гамет и гонадотропных гормонов, снижает уровень антител и повышает оплодотворяемость и эмбриопродукцию коров.

• Эмбрион как биологический раздражитель индуцирует пролиферативные процессы в эндометрии.

• Премедикация коров-доноров нейротропными препаратами позволяет улучшить процесс фолликулогенеза.

• Разработана технология "Асептического извлечения эмбрионов, хранения и трансплантации эмбрионов", позволяющая исключить микробный фактор и повысить их приживляемость.

Научная новизна и теоретическое значение работы Впервые формулируется и обосновывается механизм протективного действия липидных веществ на клеточную мембрану в процессе иммунологических реакций - агглютинации и гемолиза. Показано, что суть механизма протективного действия липидных веществ при иммунологических реакциях заключается в адсорбции этих веществ на поверхности клеточной мембраны, которая происходит не сплошным слоем, а лишь на липофильных участках, являющихся антигенными детерминантами, ответственными за протекание реакции гемолиза, что делает их недоступными для участия в реакции. При этом остаются открытыми гидрофильные, белковые участки мембраны - антигенные детерминанты, ответственные за протекание реакции агглютинации. Такая точка зрения согласуется с классической теорией строения клеточной мембраны и является одним из основополагающих концепций для обоснования теории их фортификации. Антигены спермиев расположены на различных структурных частях (головке, шейке и хвостовой части), а антигены яйцеклетки сосредоточены главным образом на «Zona pellucida» (ZP).

Топография антигенов гамет на различных структурных участках определяет иммунологическую гетерогенность поверхности половых клеток, что может быть связано с обеспечением ими различных функций: движения, капацитация, слияние гамет и оплодотворение. При технологической обработке спермиев происходят определенные изменения их антигенной структуры. Гаметы разных видов млекопитающих (бык, кролик, баран, хряк) имеют общие компоненты антигенной структуры. При экспериментально индуцированном иммунитете против гамет снижается оплодотворяемость самок. Выраженной закономерности снижения оплодотворяе-мости животных в зависимости от титра антител против спермиев при искусственном осеменении не установлено. Дана характеристика уровней естественных антител против гамет в организме животных и условий, приводящих к повышению их титров.

При определении антител против гамет необходимо учитывать их специфичность и возможные перекрестные реакции с другими антигенами. Введение спермы в гинеталий за "биологический барьер" приводит к реактогенным и пролифера-тивным процессам их формированию локального иммунитета.

Иммунное бесплодие формируется на фоне функциональных и органических изменений, гинеталий животных путем сенсибилизации продуктами оплодотворения. Это процесс является вторичным и обратимым.

Установлена возможность использования сексспецифического антигена "НУ" для регуляции пола потомства.

Установлена возможность индуцирования азооспермии сельскохозяйственных животных путем мобилизации эндогенной способности организма блокировать биологическую активность ткани, образующей спермии. Эмбрион как биологический раздражитель индуцирует пролиферативные процессы в эндометрии. Промывочная жидкость из матки коров-доноров может служить источником антигенного материала для определения ранней диагностики беременности, а также имплементором сред для хранения гамет и зигот.

Премедикация коров-доноров нейротропными препаратами перед индукцией суперовуляции вызывает изменение трофической функции органов размножения через сосудистые реакции и улучшает фолликулогенез.

Показано что овуляция в организме самок протекает по типу воспалительной реакции, установлена роль гуморальных факторов в разрыве стенки фолликула. Научно обоснованы и практически определены технологические приемы асептического получения и хранения биоматериала, предназначенного для криоконсер-вации, цитоинженерных работ и трансплантации зигот в организм реципиента.

Результаты защищены 10 авторскими свидетельствами и патентами СССР и Украины.

Практическая значимость и реализация результатов исследования

Разработан способ предотвращения гемолитических процессов животных, определено лекарственное средство, создана методика его лечебного применения -липосомотерапия.

Полученные данные могут быть использованы в ветеринарии, медицине, биологии для изучения закономерностей взаимодействия клеточной мембраны с окружающей средой, факторами иммунологической и химической природы. А также в исследованиях механизма иммунной несовместимости клеток и тканей при трансплантации, для органического синтеза и приготовления цитопротектантов с заданными свойствами.

Разработан способ подготовки самцов пробников путем сенсибилизации организма гуморальными и клеточными факторами спермиоиммунитета (авторское свидетельство СССР №1713577). Данный способ позволяет регулировать состояние полового стереотипа у животных, сохраняя комплекс совокупительного акта, а также обеспечивает повышение воспроизводительной функции самок и достоверность происхождения, приплода. Применение этого метода в овцеводстве дало возможность повысить оплодотворяемость маток и выход ягнят на 2,4%.

При применение кортикостероидных гормонов (гидрокортизон, кортизон) в качестве патогенетической терапии (при наличии антител против гамет и гонадо-тропных гормонов в организме животных) снижает титр антител в 7-8 раз&и способствуй». повышению оплодотворяемости животных на 20,9-26,2%, увеличению о количества эмбрионов на донора на 1,4, в том числе полноценных на 1,6.

Разработана технология асептического извлечения, хранения и трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных, предназначенных для криокон-сервации, цитоинженерных целей.

Для реализации этого метода разработаны и внедрены в практику инструменты, оборудование, буферные растворы и среды, всего 10 наименований.

Технология и отдельные технологические приемы внедрены в 21 племпред-приятиях России и Украины, что является составной частью работы племенных хозяйств по размножению высокоценных животных.

Получены сотни телят-трансплантатов. Данная технология демонстрировалась на ВДНХ СССР (серебряная медаль, 1991 г.) и межведомственной комиссией Минсельхозпрода Украины от 10.04.1994 г. рекомендована для широкого внедрения в производство. Технология «Асептическое извлечение, хранение и трансплантация эмбрионов» патентночистая, конкурентноспособная разработака и отвечает мировому стандарту, защищена 10 авторскими свидетельствами (см.приложение).

Изложенные в диссертационной работе материалы могут быть рекомендованы для включения в справочные, учебные руководства и в практику преподавания физиологии, биотехнологии и иммунологии сельскохозяйственных животных, в ВУЗах соответствующих профилей и научных учреждениях при разработке вопросов, связанных с изучением иммунологии репродукции млекопитающих.

Апробация работы:

Основные положения диссертации представлены на Ученом Совете Института животноводства УААН; на международных конференциях: 4-ом симпозиуме иммунологии репродукции (Варна, Болгария, 1979); 9-ом Международном конгрессе по воспроизведению и искусственному осеменению животных (Мадрид, Испания, 1980); 10-ом Международном конгрессе по воспроизведению и искусственному осеменению животных (Иллонойс, США; 1984); 11-ом Международном конгрессе по воспроизведению и искусственному осеменению животных (Дублин, Ирландия, 1988); на Всесоюзных конференциях и симпозиумах по иммунологии репродукции и съездах акушеров-гинекологов (Москва - 1980, Кишинев - 1983, Харьков - 1984, Тарту - 1986, Киев - 1987); на Республиканских конференциях по биотехнологии, генетике и разведению (Львов, 1987; Харьков, 1992; Киев, 1995, 1996); 7-ом съезде акушеров-гинекологов Украины (Донецк, 1981; Воронеж, 1994); на пленуме заседания Московского общества испытателей природы, 1981.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ Раздел 1

РОЛЬ ЛИПИДНЫХ ВЕЩЕСТВ В ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ

Заключение диссертации по теме «Другие cпециальности», Дибиров, Магомед

ВЫВОДЫ

1. Механизм цитопротективного действия липидных веществ (желток куриного яйца, липосомальный препарат) на клетки*спермии, эритроциты, лимфоциты обусловлен структурными особенностями их адсорбции на поверхности клеточной мембраны, которая происходит при определенных условиях преимущественно на липофильных ее участках, оставляя свободными гидрофильные участки, что приводит к упрочению мембраны и угнетает возможность протекание иммуно-5иологических реакций.

Это согласуется с классической теорией строения клеточной мембраны и тляштся одними из основополагающих концепций для обоснования теории их фортификации.

2. Длительное парентеральное введение в организм млекопитающих липид-1ых веществ (компоненты яичного желтка, липосомальный препарат) не вызывает слинико-физиологических, морфофункциональных, иммунологических^ токсиче-:ких, канцерогенных, тератогенных изменений и не оказывает влияние на фер-ильность самок.

3.Поверхность мужских половых клеток иммунологически гетерогенна и ¡одержит собственные антигенные детерминанты, распределенные на различных гчастках: головке, шейке и в хвостовой части. Топографические особенности рас-[ределения антигенных детерминант на различных структурных участках спер-шев, обеспечивает осуществление ими функции движения, капацитации, слияния амет и распознавания рецепторов на яйцеклетке.

Антигены яйцеклетки сосредоточены, главным образом, на «Zona pellu-cida» в виде одного общего антигенного комплекса.

4. Иммунизация самок мужскими гаметами приводит к снижению оплодо-творяемости на 50 и более процентов по сравнению с контролем. Иммунизация свинок яйцеклетками этого вида животных в опыте привела к снижению как оп-лодотворяемости, так и выхода приплода.

Уровень оплодотворяемости коров независит от титра спермиоантител в их крови. Титр спермиоантител в организме самок повышается при возрастании кратности осеменения и концентрации спермиев в дозе и зависит также от глубины введения спермы в гениталий. Введение спермы в половые пути глубиной 4 и более сантиметра за «биологический барьер» приводит к реактогенным и проли-феративным процессам, индуцирующим механизмы локального иммунитета.

5. Многократные (4 и более раз) осеменения животных приводят к сенсибилизации организма самки продуктами оплодотворения. При этом активизируются факторы гуморального и клеточного иммунитета, что особенно выражено у жи-зотных, оставшихся не оплодотворенными, в организме которых увеличивается удержание антигенреактивных клеток и возрастает индекс трансформации -тамфоцитов.

6. При идентификации антител против гамет необходимо учитывать физио-югическое состояние животных и тщательно дифференцировать истинные спер-лиоантитела от ложных, а также возможные перекрестные реакции с тканевыми и )рганными антигенами.

Иммунное бесплодие формируется на фоне функциональных и органических изменений в гениталиях животных. Этот процесс является вторичным и об->атимым, наслаивающимся на первичные нарушения и затрудняющим воспроиз-(едение.

7. Осеменение коров и телок, спермой инкубированной в иммунной сыворотке против секс специфического антигена «Н-У» и иммунизация мышей указанным антигенным материалом вызывает некоторое увеличение в потомстве особей женского пола (Р>0.05).

8. Многократное экзогенное введение гонадотропных препаратов (ГСЖК, ФСГ) коровам-донорам вызывает образование гормоноантител и иммунных комплексов, фиксирующихся на органах мишенях. Применение же антигонадотроп-ной сыворотки сенсибилизированным животным способствует стабилизации овуляции.

9. Использование кортикостероидных гормонов (гидрокортизон, кортизон) з качестве иммунодепресантов при наличии высокой сенсибилизации против галет и гонадотропных гормонов обеспечивает снижение уровня антител против -амет в 7-8 раза и способствует повышению оплодотворяемости на 20,9-26,2% по сравнению с контрольными животными. Применение этих препаратов коровам-|,онорам при наличии гормоноантител повышает количество полученных эмбрио-юв в 1,4 на донора, в том числе полноценных в 1,6.

10. Развивающийся эмбрион, как биологический раздражитель индуцирует шзиологические и пролиферативные процессы в эндометрии. промывочной жидкости, полученной на 7 сутки у коров-доноров, давших 4 и олее полноценных эмбриона происходит увеличение содержания белка (Р(0,05) о сравнению с коровами-донорами, имевшими дегенерированные эмбрионы, [репаративный электрофоретический анализ белков промывочной жидкости, поученной на 7 день извлечения эмбрионов позволил выяснить наличие 3-х фрак-ий, а в промывочном растворе на 12 сутки появилась четвертая фракция.

11 .Комплементарная активность фолликулярной жидкости коров и свиней шисела от стадии полового цикла в период эструса она в 3,6-6,0 раза выше чем в иэструсе. Наибольшей комплементарной активностью обладала сперма быковдоноров, полученная от второй садки и была прямо пропорциональна концентрации спермиев в эякуляте.

12.Физиологические и биологические параметры (рН, осмомолярность, токсичность) предлагаемого малокомпонентного буферного раствора для извлечения эмбрионов находятся на уровне стандартных фабричных многокомпонентных растворов.

Разработанная на основе этого раствора среда с внесением вместо феталь-ной сыворотки экстракта эмбриона повышает выживаемость эмбрионов при культивировании in vitro на 8-16%.

13. Премедикация коров-доноров перед индукцией суперовуляции нейротропными препаратами (карбохолин и прозерин) и синтетическим аналогом гонам дотропин-релизинг гормона 7/дирегастран показала преимущество неиротропных препаратов. Это выразилось стабилизацией процесса фолликулогенеза и в увеличении количества полноценных эмбрионов в 1,6 на донора. 14.Физиологическое обоснование разработанных устройств, инструментов, оборудования, растворов и сред для извлечения и манипуляции с эмбрионами позволило разработать «Харьковская технология асептического извлечения, хранения и трансплантации эмбрионов». Этот метод обеспечивает высокий санитарный уровень извлечения, манипуляции и трансплантации эмбрионов, стабильность сохранения получаемого биопродукта и культуру производства, независимо от места извлечения эмбрионов, что упрощает работу лаборатории воспроизводства.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1."Способ предотвращения или устранения гемолиза ", который может использоваться в ветеринарии, медицине, биологии для предотвращения гемолитического процесса при различных заболеваниях и токсикозах. Для реализации способа предотвращения или устранения гемолитического процесса предлагается лекарственное средство для защиты клеток от цитолиза (гемолиза), в качестве липо-сомотерапии".

Метод и препарат для предохранения клеток от лизиса одобрен фармакологическим Советом СССР.

2. Иммунологический метод половой стерилизации самцов млекопитающих, основанный на паллиативном способе разрушения паренхимы семенников путем иньекции препарата адьювантного действия с полной потерей самцами воспроизводительной функции и сохранением всех половых рефлексов. Для реализации этого метода в практических условиях предложен препарат "адьювантного действия". (Авторское свидетельство № 1713577, СССР.)

3. Метод и средство для метафилаксии и реабилитации животных, имеющих высокий уровень антител в организме против гамет и гонадотропных препаратов путем использования в качестве иммуннодепресантов глюкокортикоидных гормонов (гидрокортизон, кортизон), которые способствуют повышению оплодотво-ряемости на 20,9-26,2% и эмбриопродукцию коров-доноров на 1,4 эмбриона и в том числе полноценных на 1,6.

4. Технология асептического извлечения и хранения эмбрионов сельскохозяйственных животных, предназначенных для трансплантации зигот в организм реципиента, а также криоконсервации и цитоинженерных целей. Для реализации технологии в практических условиях разработаны и предлагаются инструменты, оборудование и биопрепараты (авторские свидетельства СССР №№ 1713529,

285

1711366, 1713577, 1799345, 1680144, 1482691, 1343586, 1359936). Технология обеспечивает высокий санитарный уровень и стабильность сохранения получаемого биопродукта и культуру производства, независимо от места извлечения эмбрионов. Технология защищена 10 авторскими свидетельствами СССР, и решением межведомственной комиссии Минсельхозпрода Украины от 10.04.1992 г рекомендована для широкого внедрения производству.

5. Изложенные в диссертационной работе материалы могут быть рекомендованы для включения в справочные, учебные руководства и в практике преподавания физиологии, биотехнологии и иммунологии сельскохозяйственных животных в ВУЗах, соответствующих профилей и в научных учреждениях при разработке вопросов, связанных с изучением иммунологии репродукции млекопитающих.

Отдельные материалы диссертации включены в книгу Ф. И. Осташко «Биотехнология воспроизведения крупного рогатого скота» Киев, Аграрна Наука 1995.

РАЗДЕЛ 4 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате иследований установлено, что при постановке реакции гемолиза с использованием в качестве антигена эритроцитов инкубированных в яичном желтке, гемолиз отсутствует. При использовании интактных клеток наблюдался гемолиз. Аналогичные данные были получены при постановке этой реакции с использованием в качестве реагента резус-негативной сыворотки и эритроцитов плода, полученных от иммуноконфликтной беременности. В то же время при постановке реакции агглютинации, после обработки желтком, способность клеток склеиваться, т.е. агглютинироваться сохранилась.

Аналогичные данные были получены при использовании в качестве объекта исследований спермиев и лимфоцитов. Видимо, этот процесс носит закономерный характер. Однако при использовании в качестве протекторов одиночных ли-пидных препаратов, холестерина, лецитина, кефалина, экстракта яичного желтка этот эффект отсутствовал как in vitro так и in vivo.

При внутривенном введении этих препаратов (кролики и бараны) и затем гемолитическую сыворотку и комплемент все опытные и контрольные животные погибли. Животные, которым был введен 20% раствор яичного желтка выживали.

Изучение изменений качественного состава липидов мембран клеток после инкубации в яичном желтке показало, что в мембранах эритроцитов увеличивалось количество сфингомиелина и кефалина, а в спермиях холестерина и лецитина.

В дальнейшем наши исследования были направлены на изыскание эффективных и фармакологически приемлемых средств для практического использования установленных свойств липидных веществ.

Был разработан липосомальный препарат следующего состава: кефалин, сфингомиелин, лецитин, холестерин.

Наиболее оптимальным оказался 3% раствор этого препарата, который задерживал гемолиз in vitro или 30-45 мг на кг/массы при внутривенном введении.

Испытание этого препарата на трех видах животных (крысы, кролики, бараны) показало, что при экспериментально индуцированном гемолитическом синдроме все животные, получавшие предварительно этот препарат остались живы. Гематологические показатели у них были в пределах нормы в течение первых суток. Контрольные животные погибли со всеми признаками гемолитического синдрома.

При изучении влияния этого препарата в кратковременных и длительных опытах на крысах, кроликах, баранах не установлено, что он не оказывал токсического, тератогенного действия.

Клинико-гематологические и гистоморфологические показатели этих животных были в пределах нормы, а оплодотворяемость (крыс, кроликов) в опыте и контроле была 100%.

Следовательно, липидные вещества (желток куриного яйца, липосомальный препарат) обладают протективными свойствами в отношении клеточной мембраны и обеспечивают им устойчивость к повреждающим факторам в данном случае иммунологической природы.

По материалам исследований заявлено в Госкомитет СССР по делам изобретений и открытий «Способ предотвращения или устранения гемолиза» (11 января 1978 года); «Лекарственное средство для защиты эритроцитов от гемолиза» (13 апреля 1987 года).

Механизм действия липидных веществ на клеточную мембрану заключается в том, что при взаимодействии с липидными препаратами на поверхности клетки путем адсорбции образуется дополнительный неоднородный слой, покрывающий только липофильные участки клеточной мембраны, делая их прочными и изолируя от специфических иммунных тел, что было установлено путем постановки реакции гемолиза и агглютинации. Адсорбция липидных компонентов на поверхности мембран клеток видимо, происходит за счет ионных и полярных взаимодействий. Этому способствует общая структура строения молекул липидов клеточной мембраны и компонентов яичного желтка, а также разработанного нами липосомального препарата.

Предложенный механизм взаимодействия липидов с клеточной мембраной полностью согласуется с классической теорией строения клеточной мембраны и является одним из основополагающих для теоретического обоснования теории фортификации клеточной мембраны.

Полученные данные исследований могут быть использованы: -для изучения закономерностей взаимодействия структурных элементов клеточной мембраны с компонентами химической, иммунологической природы;

-для изучения проницаемости клеток;

-прикладной ветеринарии и медицине в качестве липосомотерапии;

-для установления механизмов иммунной несовместимости клеток и тканей при трансплантации; -для создания и синтеза протектантов с заданными свойствами. Антигенная структура клеток зависит от морфологической целостности и биохимической структуры клеточной мембраны и в процессе технологической обработки могут существенно изменяться.

Изучение структуры локализации антигенов бычьих спермиев показало, что антигенные детерминанты этих клеток расположены на различных структурных частях клеточной мембраны - головке, шейке и хвостовой части. В спермиях, подвергнутых технологической обработке, изменяется и характер агглютинации.

Иммунная сыворотка против бычьих спермиев агглютинировала спермин кролика, барана и хряка, что свидетельствует об антигенном сходстве спермиев разных видов животных.

Изучение топографической структуры антигенов яйцеклетки показало наличие одного общего антигена, сосредоточенного на «Zona pellucida». Надо полагать, что поверхность «Zona pellucida» не ограничивается одним антигенным детерминантом.

Иммунная гетерогенность поверхности «Zona pellucida» обусловлена наличием разных рецепторных участков для прикрепления спермиев и структур, ответственных за видовую специфичность оплодотворения. Иммунная сыворотка против яйцеклеток свиней проявляла активность и в отношении антигена, приготовленного против яйцеклетки коровы и наоборот.

Значит поверхность гамет иммунологически гетерогенна и гаметы разных видов животных имеют общие антигенные компоненты.

Топографические особенности локализации антигенных детерминант гамет свидетельствует об иммунологической гетерогенности поверхности мембран половых клеток, что связано с осуществлением или определенной функции - движение, капацитация, слияния гамет и оплодотворение.

В пользу этой точки зрения свидетельствует и тот факт, что процесс слияния гамет происходит по типу иммунной рецепции антигенных детерминант спермии с макромолекулами «Zp», внешне проявляющееся как феномен «антиген и антитело».

Антигены спермиев, видимо, не ограничиваются одними собственными антигенами, хотя бы взять и секспецифический антиген «Н-У», ответственный за формирование пола потомства. Спермии по мере продвижения по половым путям самца и разбавления секретами половых желез приобретают дополнительный антиген - спермиообвалакивающий, который обеспечивает защитную функцию и формирует антигенную мимикрию спермиев при миграции спермиев в гениталиях самки.

Гаметы, спермин, яйцеклетки несут на поверхности мембраны несколько антигенов. При введении в гениталий самки или парантерально они активизируют весь комплекс иммунофизиологических и иммунорегуляторных механизмов, начиная с фагоцитоза и заканчивая образованием антител, которые могут служить причиной нарушения функций размножения и проявляться в различной клинической форме, временной не диагностируемой инфертильности животных эмбриональной смертности.

Имеющиеся сведения об иммуногенном бесплодии не отражают в полной мере многообразия этого явления, что осложняет понимание генеза, как целостного биологического явления и затрудняет осуществление эффективной патогенетической терапии.

Изучение влияния антител против спермиев на оплодотворяемость самок при экспериментально индуцированном спермиоиммунитете показало, что в опытных группах она была равна у крольчих 35%, телок 37,5%, а у контрольных животных составляла 80 и 70%, соответственно.

Иммунизация свиней антигенным материалом против «Ъру> привела к снижению оплодотворяемость. Заметная разница наблюдалась по количеству полученного приплода - в опытной группе было получено в 2 раза меньше приплода, чем в контроле.

Изучение влияния спермиоантител на оплодотворяемость коров показало, что титр спермиоантител после осеменения достоверно повышается. Однако строгой зависимости оплодотворяемости животных от уровня спермиоантител отмечено не было. При этом оплодотворились животные с высоким титром 1:1024 и не оплодотворились с низким титром 1:32-1:64. Остается не ясным, какие же условия являются стандартными для достижения полного блокирования оплодотворения и какой уровень спермноиммунитета необходим для полной половой стерильности самок.

Нами было обнаружено, что в популяции спермиев, подвергавшихся агглютинации, часть их остается свободными, не вступившими в реакцию антиген-антитело, которые способны мигрировать в гениталиях самки и оплодотворять их.

Этим и объясняется значительное снижение оплодотворяемости самок при экспериментальной иммунизации, но не полное ее блокирование. Что касается яйцеклетки, при контакте ее с антителами происходит образование преципитаци-онного слоя, который препятствует пенетрации спермиев в яйцеклетку, это явление было подтверждено нами в опытах при инкубации яйцеклетки в иммунной сыворотке.

Установлена взаимосвязь титра спермиоантител в организме коров и телок с их клинико-гинекологическим статусом. Титр спермиоантител в крови у интакт-ных телок не превышал 1:16, а уровень антител, реагирующих с антигеном <^р», не превышал в среднем 1:18, а у свиней он зависел от возрастных групп и колебался от 11,7+4,3 до 77,8±25,9. Самый высокий уровень спермиоантител был обнаружен у животных многократно осемененных коров, особенно с патологией в гениталиях, где он колебался от 1:355,5 до 1:413,8 (1:64-1:1024).

Все животные, имевшие высокие титры антител против гамет, были подвергнуты гинекологическому обследованию. При этом были выявлены различные функциональные и органические изменения в гениталиях и яичниках. Титр спермиоантител зависит не только от кратности осеменения коров, а так же и от концентрации спермиев в дозе и места введения спермы в гениталии. Опыты, проведенные с использованием в качестве биологической модели индейки, показало, что осеменение их дозой 0,2 мл два раза в неделю на различную глубину (2,4,8 см) приводило к реактогенным изменениям слизистой оболочки и сосудистых образований всех отделов гениталий.

Следовательно сперма, введенная в половые органы за «биологический барьер», вызывает развитие воспалительной реакции и создает условия для формирования локального иммунитета.

По нашим данным антитела против гамет проявляют перекрестные реакции с тканевыми, органными и даже микробными антигенами. В связи, с этим при обнаружении антител против гамет необходимо дифференцировать истинные антитела от ложных.

Изучение роли факторов клеточного иммунитета при сенсибилизации организма самки антигенами гамет показало, что у интактных телок в период половой охоты количество популяции Т-лимфоцитов составляло 42-49%, а количество ро-зеткообразующих клеток - 16%.

После осеменения на 14 сутки цикла эти показатели у неоплод отворившихся животных были выше в 2 раза по сравнению с оплодотворившимися животными.

Наиболее существенный показатель клеточного иммунитета - индекс бласт-трансформации после осеменения до 14 дня был высоким 55,3 имп/мин и затем снижался, а у животных не оплодотворившихся он на 14 и 21 сутки был высоким и составлял 61 имп/мин.

При сенсибилизации организма самки антигенами гамет активизируются факторы гуморального и клеточного иммунитета, хотя их роль в генезе бесплодия животных до конца не ясна.

Из этого следует, что было бы неправомерно ставить диагноз иммунное бесплодие самок на основании лишь выявления антител против гамет в крови животных, поскольку, такие антитела обнаруживаются как в крови здоровых, так и больных животных без симптомов бесплодия.

Данные проведенных нами исследований дают основание полагать, что функциональные и органические изменения в гениталиях самок, нарушение технологии осеменения, при частых контактах со спермой вызывают сенсибилизацию организма самки против гамет, что осложняет процесс воспроизведения. Что касается иммуногенного бесплодия или бесплодия не установленного генеза, то оно формируется на фоне первичных нарушений гениталий под действием антител против гамет, которые усложняют процесс воспроизведения наслаиваясь на первичные процессы.

Как было указано выше, поверхность спермиев и яйцеклетки не ограничивается одними собственными антигенами. Они имеют антигены гистосовмести-мости и в, частности, специфический антиген «Н-У».

В последнее время появились исследования, которые указывают на возможность использования этого антигена для регуляции пола. В наших исследованиях осеменения коров и телок спермой предварительно инкубированной в иммунной сыворотке против сексспецифического антигена «Н-У» было получено несколько больше самок, чем в контроле. Однако эти различия были не достоверны.

Аналогические результаты были получены при иммунизации крыс гомога-метной спермой.

По сложившемуся мнению, процесс овуляции является многофакторным и роль цитолитических и иммунобиологических факторов в этом физиологическом процессе остается не ясной.

Изучение комплементарной активности половых продуктов мужских и женских индивидуумов (сперма, фолликулярная жидкость) показало, что наиболее высокой цйтолитической активностью обладает сперма быков, полученная от второй садки (56,2±20,6 ЕД) и эта активность была пропорциональна концентрации спермиев в ней.

Цитолитическая активность фолликулярной жидкости коров и свиней в период эструса была выше в 3,6-6,0 раз, чем в диэструсе.

Эти данные могут служить для обоснования одной из теорий оплодотворения и объяснения механизма пенетрации спермиев в яйцеклетку, а также роли гуморальных факторов в процессе овуляции и разрыва фолликулярной оболочки.

При гормональной индукции фолликулогенеза, особенно суперовуляции, основным условием является применение гонадотропных гормонов. Однако повторные их инъекции оказывают отрицательное влияние на фолликулогенез, Исследование сывороток крови коров-доноров, подвергнутых суперовуляции 2 и более раз, показали наличие в них антител против гонадотропной сыворотки жеребых кобыл и фолликулостимулирующего гормона, титр которых составлял 11,8±8,0 - 5,1+1,5, а у контрольных животных отсутствовал.

При повторных инъекциях этих препаратов имеет место образования иммунных комплексов, циркулирующих в крови и способных откладываться в органах мишенях и индуцировать острые воспалительные процессы.

Это было подтверждено в модельных опытах на лабораторных животных.

Проведенные исследования показывают, что как при нормально протекающем процессе воспроизведения, так и при нарушениях его по различной этиологии, происходит сенсибилизация организма самки к антигенам спермиев, яйцеклетки, гормонов, сопровождающиеся различными клиническими проявлениями (многократные половые циклы, эмбриональная смертность, снижение качества получаемого биопродукта - спермы, эмбрионов).

В биологической науке давно ведутся поиски эффективных методов регуляции фертильности на основе иммунобиологических методов, а также приемов десенсибилизации организма при наличии в организме лейкоцитарных и других антител.

В связи с этим возникает вопрос нельзя ли использовать антитела против спермиев для регуляции фертильности животных и в качестве патогенетической терапии при сенсибилизации организма антигенами гамет и гонадотропных гормонов - кортикостероидные гормоны, гидрокортизон и кортизон.

Испытание этих препаратов на двух группах животных (118 коров), имевших высокий уровень спермиоантител показало, что при 4-х кратной инъекции гидрокортизона титр антител снижался в 7,3 раза, а в контрольной группе он оставался высоким. Оплодотворяемость в опытной группе животных была после такой обработки на 20,9% выше чем у контрольных животных.

Аналогичные данные были получены и во второй группе животных, которым был иньекцирован кортизон.

Важным моментом в работе по воспроизводству животных является выборка животных в охоте.

Для выявления охоты и стимуляции полового цикла рекомендуется использовать самцов-пробников. В принципе этот технологический прием эффективен. Однако он имеет и негативные стороны, Так как пробник может оплодотворить самку. Нами разработан паллеативный способ нарушения паренхимы семенников путем формирования локального спермиоиммунитета, инъекцией препарата адь-ювантного действия, вызывающего полную потерю самцов воспроизводительной функции при сохранении половых рефлексов.

Этот иммунологический метод стерилизации легко выполняем, достаточно надежен и его можно использовать на всех видах животных (собак, кошек, хряков, быков), авторское свидетельство СССР № 1713577 .

Научно-производственное испытание этого метода в овцеводстве дало возможность повысить оплодотворяемость маток на 2,5%, увеличить выход ягнят на 4% по сравнению с контрольным методом.

Достижения в области физиологии женских гамет и эмбрионов связано с развитием становлением метода трансплантации эмбрионов.

Главным условием для практической реализации этого метода является строгое соблюдение мер асептики от момента извлечения эмбрионов до введения их в организм реципиента.

До сих пор ни один из применяемых методических подходов не обеспечивал эти условия. Как известно, некачественная биологическая продукция (сперма, эмбрионы) в санитарно-гигиеническом отношении является источником специфической не специфической микрофлоры. При введении в гениталий она может вызвать образование неспецифических реакций или воспалительные процессы, которые приводят к снижению оплодотворяемости и приживляемости эмбрионов.

Другим необходимым условием является разработка физиологически и фармакологических адекватных растворов и сред для повышения жизнеспособности и развития эмбрионов и коррекции фолликулогенеза.

Для обеспечения этих условий нами были разработаны: устройство Х-2К, которое обеспечивает 100% извлечение промывочного раствора из матки с минимальной травматизацией слизистой оболочки гениталий. Для стерильной подачи раствора при извлечении эмбрионов и ее сбора разработана закрытая система разового использования, получившая название комплект «Эмбрион». Приемная емкость комплекта «Эмбрион» служит эмбриоприемником для седиментации, транспортировки и кратковременного хранения эмбрионов (Авторское свидетельство СССР № 1343586).

Для отпаивания эмбриоприемника без контакта с внешней средой разработаны термоножницы (Авторское свидетельство СССР №1799345).

Раствор для извлечения эмбрионов должен подаваться при температуре тела животного во избежании спазматических явлений гениталий. Для этого разработано устройство со стабилизатором температуры и приспособлением для подачи и збора промывочной жидкости. Устройство позволяет работать как в условиях стационара, так и на скотном дворе (Авторское свидетельство СССР №1680144).

Нами разработано устройство для пересадки эмбрионов, который позволяет вводить в половые органы самки свежие и замороженные эмбрионы, а также сперму (Авторское свидетельство СССР № 1711366 ). Санитарно-гигиенические параметры операций по асептическому извлечению были подтверждены экспертной проверкой (акт экспертизы №1145 от 11.04.1990, г. Харьков).

При извлечении и манипуляциях с эмбрионами необходимым условием является применение различных буферных растворов и питательных, которые по физико-химическим свойствам должны соответствовать условиям роста и развития эмбрионов в утробе матери. Для этой цели используют в основном многокомпонентные сложные растворы и среды, которые применяют для выращивания культур тканей.

В связи с этим, нами были разработана рецептура растворов, сред, биопрепаратов, необходимых для извлечения, манипуляции, культивирования эмбрионов, которые исключают многокомпонентность, но сохраняют требуемые физиологические параметры (рН, осмомолярность, токсичность).

Параметры разработанного раствора для извлечения эмбрионов составляют рН-7,0; Моем - 298,0.

Рабочей гипотезой для обоснования состава этого «забуференного физиологического раствора» являлось следующее положение. Эмбрион до поздней бла-;тоцисты обладает потенциальной возможностью развития без внесения дополнительных компонентов, имплементоров. Это свойство сохраняется и в промывоч-яом растворе из матки. Растворы, используемые для извлечения эмбрионов в процессе вымывания, обогащаются средой матки, содержащей полный комплекс эиоорганических веществ, что обеспечивает в течение определенного времени дальнейшее их развитие.

Этот раствор необязательно делать щелочным (рН более 7,1), так как среда матки щелочная, а также нет необходимости дополнительно вносит в него такие компоненты как антибиотики и фетальная сыворотка (Авторское свидетельство СССР № 1713529).

При извлечении и манипуляции с эмбрионами все технологические приемы должны быть направлены на асептику, а не на санацию. Изучение физико-химических свойств промывочных растворов показали, что имеется определенная связь с количеством и качеством полученных эмбрионов.

При извлечении 4-х и более эмбрионов рН промывочного раствора имела в опыте и контроле тенденцию к повышению. Содержание белка было больше в тех промывочных растворах, где было получено больше полноценных эмбрионов, чем в растворах, где получены дегенерированные эмбрионы. Концентрация белка в промывочных растворах, полученных на 7, 12, 17 дни извлечения эмбрионов была равна соответственно, 41 ±93,280 мг/%. Препаративный электрофоретиче-ский анализ белков промывочной жидкости, полученной на 7 день извлечения эмбрионов позволили выяснить наличие 3-х фракций, а в промывочном растворе на 12 сутки появилась еще одна фракция - четвертая. Это позволяет сделать заключение, что в развитии пролиферативных процессов в эндометрии, не малую роль играет развивающийся эмбрион, как биологический раздражитель.

Данные литературных источников и собственных исследований свидетельствуют, что ряд веществ, входящих в состав сред для выращивания эмбрионов вне организма могут быть без ущерба исключены.

Вместе с тем нет единого мнения о значении фетальной сыворотки, используемой в качестве имплементора культуральных средах.

Одни исследователи [3] считают, что эта сыворотка в культуральной среде служит источником неидентифицированных факторов, другие [225] этот компонент считают источником низко и высоко молекулярных соединений.

Мы полагаем, что роль фетальной сыворотки и других соединений, заменяющих этот компонент при культивировании клеток и эмбрионов должно быть не столько трофической, сколько ростстимулирующей.

В связи с этим, на основе малокомпонентного забуференного физиологического раствора для извлечения эмбрионов была разработана среда для хранения и культивирования эмбрионов вне организма, в которой вместо фетальной сыворотки был использован экстракт эмбриона, а вместо антибиотиков раствор сульфацил натрия (заявлено Госкомитет изобретений Украины, 12.10.1999 г.). Физиологические параметры этой среды характеризуются такими показателями рН-7,05-7,4 и осмомолярность 298-300 Моем. При культивировании эмбрионов в такой среде выживаемость была выше на 8-16% чем в контрольной. Биохимические показатели этих сред были практически одинаковы. Одним из условий осуществления трансплантации эмбрионов является индукция суперовуляции самок млекопитающих, которая зачастую не дает стабильного результата и ее не возможно прогнозировать в физиологических условиях.

В результате исследований нами установлено, что эффективность применения гонадотропных препаратов зависит от первоначальной активности и их дозы.

Использование для индукции полиовуляции сочетания фолликулостимули-рующих и лютеоинизирующих препаратов усугублял процесс фолликулогенеза.

Использование приема премедикации биологически активными веществами для индукции суперовуляции показало, что применение нейротропных препаратов (карбохолин, прозерин) способствует повышению количества эмбрионов в 1,4 на одного донора и в том числе в 1,6 полноценных эмбрионов.

Значительно уступает этим препаратам премедикация, проведенная с использованием препаратов, содержащих релизинг факторы. На основании проведенных исследований, научно-производственных испытаний был разработан «Асептический метод извлечения, манипуляции и трансплантации эмбрионов».

279

Для реализации этого метода в практических условиях разработаны инструменты, оборудование, буферные растворы и среды, всего 10 наименований.

Организован мелкосерийный опытно-промышленный выпуск этих инструментов, оборудования и биопрепаратов.

Метод и отдельные технологические приемы внедрены в 21 племпредприя-тиях России и Украины демонстрировалась на ВДНХ СССР.

Межведомственной комиссией Минсельхозпрода Украины от 10.04.1994 г. рекомендована для широкого внедрения в производство.

Метод «Асептическое извлечение, хранение и трансплантации эмбрионов» патентно-чистая, конкурентоспособная разработка, отвечает мировому стандарту, защищен 10 авторскими свидетельствами и патентами.

Проведенные исследования по изучению закономерностей физиологических механизмов размножения млекопитающих позволили внести определенный вклад в теорию репродукции млекопитающих.

Конкретизирована роль иммунобиологических факторов и процессов гуморального и клеточного характера на различных этапах воспроизведения сельскохозяйственных животных, позволяющая установить значимость отдельных иммунных реакций в нарушениях воспроизводительной функции, а также обосновать, разработать и предложить ряд технологических приемов и методов контроля и регуляции фертильности, коррекции гаметогенеза и регулирования пола.

РАЗДЕЛ 5

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Дибиров, Магомед, 2000 год

1. Авратинский О.И. Структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов у здоровых новорожденных в первые дни жизни //Акушерство и гинекология. 1986. - №3. - с.33-34.

2. Антонов В.Ф., Князев Ю.А., Машковский Ю.Ш. и др. Перспективы использования лйпосом в медицине. Липосомы и их взаимодействие с клетками И тканями: Материалы Всесоюзного симпозиума "Липосомы". Взаимодействия с клетками и тканями. М.: Наука, 1981. с.3-9.

3. Антонюк B.C. Взаимосвязь физиологических функций и биохимических свойств спермы хряков: Автореф.- дис. доктора биолог, наук. Харьков, 1984.-46с.

4. Аршавский И.А. Физиология кровообращения в внутриутробный период. -М., 1980-21.

5. Атаулааханов Ф.И. Регулирование внутриклеточных процессов в эритроцитах //Физика живого. -1985. №10. - с. 12.

6. Ахрем A.A., Кузнецова А.И. Тонкослойная хроматография. М., 1963.-174с.

7. Балашов Н.Г. Ветеринарно-санитарный контроль при международном обмене спермой // XIX Всемирный ветеринарный конгресс. Мексика, 1971. С.201-202.

8. Балашов Н.Г. О ветеринарно-санитарной оценке спермы // Ветеринария. -1965.-№8. с.84-87.

9. Балашов Н.Г. Нужно ли применять антибиотики в средах для разбавления и хранения спермы //Молочное и мясное скотоводство. 1969.- №9. - с.36-38.

10. Бахитов К.И. Эндокринный контроль полиовуляции у крупного рогатого скота // Нейроэндокринная регуляция воспроизводства и продуктивности сельскохозяйственных животных / ВНИИФиБ сельскохозяйственных животных. Боровск, 1983. -1.21. - с. 12-20.

11. Безбородое Н.В. Устройство для нехирургического извлечения зигот у животных //АС №1015890. М.: Госкомизобретений, 1982.

12. Безруков Н.И. Мамлиев P.C. Фолликулогенез, овуляция и созревание яйцеклеток у сельскохозяйственных животных //Вестник сельскохозяйственных наук Казахстана. 1989. - №12. -с.62-69.

13. Белевич В.П. Устройство для извлечения эмбрионов из рогов матки животных // АС № 8586782: М.: Госкомизобретений , 1981.

14. Белоус A.M., Бондаренко В.А., Бондаренко Т.П. Молекулярные механизмы криоповреждений мембран // Итоги науки и техники. 1978. - №9. - с.80113.

15. Белозеров Е.С., Макарова Т.А. Преципитационный метод исследования иммунных комплексов у больных вирусным гепатитом // Лабораторное дело. 1982. - №12. - с.37-39.

16. Вернет Ф. Клеточная иммунология. М.: Мир, 1971. 542 с.

17. Бергельсон Л.Д. Мембраны, молекулы, клетки. М.: Наука, 1982. -.183с.

18. Боймлер 3. Нарушение метаболизма эритроцитов и гемолитическая анемия.-М., 1981.- 180 с.

19. Бойд У. Основы иммунитета. М.: Мир, 1969. - 647 с.

20. Богач П.Г., Курский М.Д., Кучеренко Н.Е., Рыбальченко В.Г. Структура и функция биологических мембран. К.: Вища школа, 1981. 335с.

21. Борисова Г.З. Активность малатдегидрогеназы в плазме и эритроцитах при гемолитической болезни новорожденных //Вопросы охраны материнства и детства. 1970. - №1.- Т.15. - с.17-19.

22. Бородин А.Б. Клинические значения нарушения функций мембран эритроцитов при бронхо-легочных заболеваниях детей: Авторефер. диссерт. кандидата медицинских наук.М. 1984. 22с.

23. Браше Ж. Биохимическая эмбриология. М.: Иностр. лит-ра, 1961,- с.63-64.

24. Бригер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. М.: Медицина. 1973. - с. 120-140.

25. Бронская A.B. Антигенные свойства структур яичника коров // Иммунология размножения. Тр. III Международн. симпозиума, София. 1978. - с.735-741.

26. Бугров А.Д, Невинный H.A. Трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота в опытном хозяйстве "Кутузовка" Харьковской области // Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных: Сб. научн.трудов. М.:, 1988.-c.62.

27. Бугров А.Д., Величко И.М. Микробная контаминация при трансплантации эмбрионов // Трансплантация эмбрионов у крупного рогатого скота: Тез. докл. симпозиума. Тарту 22 октября 1986,- Таллин, 1986. с.38.

28. Бурков И.А. Иммунофизиологические особенности репродуктивной функции свиноматок: Автореф.дис. докт. наук.- Боровск, 1989. 45с.

29. Бычкова Н.Г., Казмирчук В.Е. Усовершенствование методики розеткообра-зования // Педиатрия, акушерство, гинекология. 1981.- №5.- с.23-24 / укр.яз./.

30. Вагнер Г.Ф. Калориметрическое определение комплементарной энергии крови // Лабораторное дело. 1963. - №1. с.44-46.

31. Варновский А.Н., Варновская В.А. Окислительно восстановительный режим при замораживании семени баранов // Вестн. с.-х. науки. - 1978. - №9. -с.76-80.

32. Вейсман И.Л., Худ Л.Е., Вуд У.Б. Введение в иммунологию. М.: Высшая школа, 1983. - 160 с.

33. Вельтищев Ю.Е., Юрьева Э.А. Фосфолипиды человека в норме и паталогии // Вопросы медицинской химии. -1981. №4. - с.441.

34. Вербицкий М.Ш. Иммунология репродукции // Прикладная иммунология. К.; Здоровье. 1984.- с.51-76.

35. Вербицкий М.Ш., Ген Р.И. Изоантигены лейкоцитов и иммунологические взаимоотношения между организмом матери и плода // Акушерство и гинекология. 1970. - № 1. - с.9-12.

36. X. Вербицкий М.Ш. Изоантигенная несовместимость организмов матери и плода. Минск, 1979. 207 с.

37. Вершигора А.Е. Общая иммунология: К.: вища школа, 1989.-736 с.

38. Веселов В.И. Значение иммунобиологической совместимости спариваемых животных в процессе воспроизведения у крупного рогатого скота: Авторе-фер. дисс. канд. наук. Кострома, 1968. 23с.

39. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 252с.

40. Владимиров Ю.А. Биологические мембраны и патология клеток. Общее знамя РСФСР, 1979. 248с.

41. Волосков П.А. Профилактика половых инфекций животных. М.: Колос, 1965.223с.

42. Гачинская Е.Р. О классификации типов оогенеза // Онтогенез. 1975.- №6. -с.539-545.

43. Генин Д.И. О взаимодействии между живчиками и тканями животного организма // Общая биология. T.XIV.- 1953. - №6. - с.441-451.

44. Говалло В.И. Иммунология репродукции. М.: Медицина, 1987. - 304 с. Гоиенко В.А. Влияние экстрактов, фракций и некоторых индивидуальных веществ природного происхождения на скорость гемолиза: Автореф. дисс. канд. биол. наук. - Владивосток, 1975. 24с.

45. Гончаренко М.С., Бродская О.М. Холестериновые модификации функциональной активности эритроцитов // Тез. IV Всесоюзн. симп. по биохимии липидов. К., 1983. - с.36-37.

46. Гордиенко Е.А., Гордиенко О.И. О механизме осмотического лизиса эритроцитов // Криобиология. 1986. - №2. - с.23-25.

47. Готца Т.А. Клиника и некоторые показатели липидного обмена при стафил-лококовом сепсисе новорожденных: Авторефер.дисс. канд. мед. наук.- Тби-лисси, 1984. 21с.

48. Гриневич Ю.А., Альферов А.Н. Определение иммунных комплексов в крови онкологических больных // Лабораторное дело. -1981. №8. - с.493-495.

49. Дахно Ф.В. Значение антител к антигенам прозрачной зоны в воспроизведении // Тез.докл. Всесоюзн. симпозиум по иммунологии воспроизведения. -М., 1980.-c.133.

50. Джон Пол. Культура клеток и тканей. Медиз., 1963. - 346с. Дибиров М.К. Зависимость титра спермиоагглютининов в сыворотке крови коров от физиологического состояния // НТБ №18 / НИИЖ JI и П УССР. -г.Харьков, 1977. - с.71-76.

51. Дранник Г.Н. Иммунонефрология. К.: Здоровье, 1989.- с.84. Дронин А.П., Смирнов А.О., Павлов Н.Г. Сравнение двух способов гормонального вызывания суперовуляции у коров-доноров //Бюлл. научн. работ / ВИЖ. Дубровицы, 1988. - №89. - с.21.

52. Зверева Г.В. Электронно-микроскопические и биологические исследования сохранения семени быка // Докл. сов. ученых к V Международному конгрессу по биологии размножения и искусственного осеменения животных. -М., 1964. -с.20-21.

53. Зверева Г.В., Яблонский В.А. Видовые особенности электрофоретической картины спермы быка, барана и хряка // Докл. ВАСХНИЛ.-1971. №3.с.30-32.

54. Зверева Г.В., Чухрий Б.Н., Челецкий М.М. Эффективность сочетания про-стагланди-нов F2a с эстрагенами при персистентном желтом теле // Докл.ВАСХНИЛ. 1987.- №7. - с.22-24.

55. Згнаташвили Т.Ш. Влияние сенсибилизации организма беременной на содержание белково-углеводных соединений и нуклеиновых кислот у плода и потомства: Авторефер. дисс. канд. мед. наук. Тбилисси, 1984, 37с.

56. Ибрагимов Ю. Сравнительное изучение действия ФСГ и фоллитропина при вызывании суперовуляции у коров // Тез. II Респуб. научно-производст. конференц. Львов, 1988. - с.48.

57. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Динамическая структура липидного бислоя. -М.: Наука, 1981.- 304с.

58. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран. -М.: Наука, 1982. 193 с.

59. Извекова В.А. Липиды мембран и функции иммунокомпонентных клеток в норме и патологии // Успехи современной биологии. М.: Наука, 1991. -Т.Ш. - Вып.4. - с.577-590.

60. Ильинский Е.В., Сальников Г.С. Роль иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота // Ветеринария.- 1970. -№11.- с.97-99.

61. Ильинский Е.В. Экспериментальные исследования иммунных факторов, влияющих на воспроизведение крупного рогатого скота // Тр.II Международного симпозиума по иммунологии размножения. София, 1973. - с. 160165.

62. Инструкция по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. Москва, 1987. 91с.

63. Калашник И.А. Стимулирующая терапия в ветеринарии // К.: Урожай, 1990. 130с.

64. Квасницкий A.B. Опыт межпородной пересадки яйцеклеток //Сов. зоотехния.- 1951. №19. - с.224-226.

65. Квасницкий A.B. Методика и результаты межпородной пересадки зигот у сельскохозяйственных животных // Тр.НИИ свиноводства. 1953. - №19. -с.114-128.

66. Кейтс М. Техника липидологии. М.: Мир, 1975. 322с.

67. Клинский Ю.Д. Проблемы эндокринологии воспроизведения сельскохозяйственных животных // Физиология воспроизведения сельскохозяйственных животных. Харьков, 1977. - с.73-79.

68. Козлов М.М., Маркин B.C. Мембранный скелет эритроцита: теоретическая модель //Биологические мембраны. М., 1986. -№4. С 64-69.

69. Козлюк A.C., Анисимова JI.A., Шройт И.Г. Иммунологические методы в гигиенических исследованиях //Кишинев: Штиенца, 1987. 116 с.

70. Королев В.Н. Изменение липидов яйцеклеток при оплодотворении у млекопитающих //Цитология и генетика. 1973. - Т.VII.- №4.- с.314-316.

71. Косиченко С.Г. Особенности липидного обмена у детей с гемолитической болезнью новорожденных // Педиатрия. 1979. - №5. - с.20.

72. Костьков М.П., Гервазиева В.Б., Балаболкин И.И. Циркулирующие иммунные комплексы при коревом вакциональном процессе у детей с аллергическими заболеваниями // Иммунология. 1989. - №5.- с.31-38.

73. Краинская-Игнатьева В.Н. О групповых свойствах спермы // Врачебное дело. 1929.

74. Крепе Е.М., Атмарин И.П. Липиды мембран как информационные молекулы // Нейрохимия. 1982.- №1. - с.11-19.

75. Крепе Е.М. Липиды клеточных мембран. М.: Наука, 1981. 340 с.

76. А. Крылов В.М., Петрушина А.Д. Фосфолипиды плазмы крови эритроцитов и ß-липопротеиды у детей при нагрузке жиром // Педиатрия. 1977. - №9. -с.37-40.

77. Кузник Б.И., Васильев Н.В., Цыбиков H.H. Иммуногенез, гомеостаз и неспецифическая резистентность организма. М.Медицина, 1989. - 320 с.

78. Куликова В.Н. К биологии об антибиотических свойствах эякулятов млекопитающих и человека // Бюлл. эксперимент, биологии и медицины. -1957.-№2. С. 89-91.6 а.Кубыца Ю.Ф. Иммунофлюоресценция. Москва. 1967. 108с.

79. Кульберг А.Я. Молекулярная иммунология. М.: Высшая школа, 1985. -с.287.

80. Купер М.Д., Керни Д., Шер И. Клетки иммунной системы. Иммунология пер. с англ ./под ред. У Поля М.Мира, 1987. Т.1. с.74-92.

81. Купер М.Д., Керни Д., Шер И. Клетки иммунной системы // Иммунология. -М.: Мир, 1987. Т.1. с.121-125.

82. Лаврова И.Г.Изучение возможности постановки реакции бласттрансформа-ции лимфоцитов с цельной кровью крупного рогатого скота // Проблемывирусологии, молекулярной биологии и гистологии сельскохозяйственных животных. М., 1983. - с.6-9.

83. Лебедев В.И., Ибрагимов Ю., Шейкин М.В. Гормональное вызывание суперовуляции у коров-доноров разными препаратами // Трансплантация эм-брионов.Тез. докл. научно-методического совещания. Жодино, 1989. -с.69-70.

84. Логвинов Д.Д. О чувствительности микрофлоры к антибиотикам // Молочное и мясное скотоводство. 1968. - №11. С. 26-27.

85. Логвинов Д.Д. Профилактика микробного и грибкового загрязнения спермы быков // Труды Харьковского зооветеринарного института. 1970. - Т.У. с. 83-87.

86. Л. Лондон. Е.С. К учению о спермиолизинах // Архив биологических наук. -с 1901.

87. Лопухин Ю.М., Аргаков А.И., Владимиров Ю.А., Коган Э.М. Четыре основных механизма нарушения барьерной функции биологических мембран в патологии холестериноз.-М.: Медицина, 1983. с.352.

88. Лопухин Ю.М., Аргаков А.И., Владимиров Ю.А., Коган Э.М. Холестери-ноз. М.: Медицина, 1983. - 352 с.

89. Лопырин Л.И., Логинова Н.В., Карпов П.Л. Опыт международной пересадки зародышей у овец // Сов.зоотехния.- 1950. -№8.- с.50-52.

90. Лукьяненко В.М. Иммунобиологическое состояние и морфологические показатели полового аппарата бесплодных коров: Авторефер. дисс. канд. биол. наук. Львов, 1973. 24с.

91. Лукшис Л.П., Бражюнене Б.А., Дабкявичус В.Б. Иммунологическая характеристика лимфолейкоза крупного рогатого скота: Сб. трудов АН Литовской ССР. 1985.- №3/91/.- с.92-100.

92. Лунец Е.Ф., Кугуро С.В., Костюк В.А. Влияние перекисного окисления липидов на активность М-АТ фазы мозга и печени // Вопросы медицин, химии. 1986. - №4. - с.32.

93. Мадиссон В.В., Мадиссон JI.B. Трансплантация эмбрионов в практике разведения молочного скота. -М.: Агропромиздат, 1988.- с. 12-17.

94. Майский Й.Н. Роль эстрогенов в изменении антигенных свойств матки мышей в период постнатального развития. Иммунология размножения // Тр.Ш Международного симпоз. София, 1978.- с.820-826.

95. Максимов В.И., Зиновьева Е.А. Применение простагландина F2a при задержании последа у коров // Сб. научн. трудов Донского СХИ. Персиановка, 1985. - с. 16.

96. Малиновский И.Ф. Роль спермиоагглютининов в этиологии бесплодия крупного рогатого скота: Авторефер. дисс. канд. биолог, наук. Минск, 1974. 26с.

97. Манько В.М., Хаитов P.M. Иммуннокомпетентные клетки . Итоги науки и техники / ВИНИТИ. 1987.- Т. 18.- с.240.

98. Масс A.A. Пролонгация фолликулостимулирующих гормонов // Новые методы селекции и биотехнологии в животноводстве: Часть II.- К., 1991.- №8. с.67-69.

99. Мартыненко H.A. Эмбриональная смертность сельскохозяйственных животных и ее предупреждения. К.: Урожай, 1971.- 274 с.

100. Маурер Г. Диск электрофорез. - М., 1971.- 248 с.

101. Махарадзе Я.М., Зикарадзе А.Н., Кинтария П.Я. Роль гидроперекисей липи-дов в развитии гепатоцеребральной патологии плода // Акушерство и гинекология.- 1988. №1. - с.22-26.

102. Мендж А. Бесплодие телок, вызванное изоиммунизацией семенем м семенниками // Сельское хозяйство за рубежом. 1968. - №2. - с.44.

103. Метальников С. Учение о спермотоксинах. Париж, 1900.

104. Мечников И.И. Об иммунитете // Русский архив патологии и клинической медицины и бактериологии. 1900. - №10. т. 53-54, вып. 1-12

105. Милованов В.К. Биология воспроизведения и искусственного осеменения животных // М.: Сельхозгиз, 1962. 696 с.

106. Милованов В.К., Кононов В.П., Азизова А.О. Физические свойства мембранных липидов и устойчивость живчиков при глубоком охлаждении // Вестник сельскохозяйственных наук. -1984.- №2. -с.93-100.

107. Милованов В.К., Голубь B.C., Жилцов Н.З. Лизофосфатиды и их значение в технологии хранения спермы //Доклады ВАСХНИЛ. 1975. - №1. - с.24.

108. Милованов В.К., Голубь B.C. Влияние специального кормления баранов на липидный состав спермы и на результаты осеменения //Сб. научн. трудов / ВИЖ. 1974. - вып. 1.-С.20-24.

109. Милованов В.К., Кононов В.П., Азизова O.A. Физические свойства мембранных липидов и устойчивость живчиков при глубоком охлаждении //Вестник сельскохозяйственной науки.- 1964. -№2. с.93-100.

110. Милованов В.К. Теория холодового удара живчиков млекопитающих //Доклады ВАСХНИЛ. 1959. - №8.

111. Михайлов H.H. Профилактика бесплодия и малоплодия свиноматок. М.: Колос, 1967.

112. Мороз Л.Г., Шапиев И.Ш., Корбан Н.В. Исследование механизмов не одинаковой устойчивости спермы хряков к замораживанию //Сб. научн.трудов: Криоконсервация гамет и эмбрионов сельскохозяйственных животных. Л.,1983.-с,48-54.

113. Мотавкина Н.С. Микрометоды в иммунологии. Владивосток, 1987. - 184 с.

114. Мюйрсеппи И.Я., Хинт Р.Я. Влияние препаратов для вызывания суперовуляции на количество и качество эмбрионов // Сб. научн. трудов. Таллин, 1988.- №60.- с.16.

115. Мюйрсеппи И .Я. Биотехнология воспроизводства крупного рогатого скота //Животноводство. 1984. -№11. - с. 13-14.

116. Наук В.А. Устойчивость белково-холестериновых комплексов производителей сельскохозяйственных животных при ультранизких температурах. Изв. АН МССР, сер. биол. хим. наук, 1980, №1, с.61-66.

117. Наук В.А., Лянсберг С., Шейкин В.Н. Криогенные изменения живчиков барана //Овцеводство. 1970. - №10. - с.35-40.

118. Новиков Д.К., Новикова В.И. Клеточные методы иммуннодиагностики. -Минск: Беларусь, 1979. 223 с.

119. Нюпиева К. А. Изменения в липидах при повреждении растений заморозками // Всесоюзная конференция криобиологии и криомедицины. Харьков, 1984.-Т.2.-с.105.

120. Овчинников A.B., Смыслова Н.И. Уровень суперовуляции и качество эмбрионов при применении ФСГ-п, ГСЖК маротропина, фоллигона //Трансплантация эмбрионов в молочном скотоводстве и овцеводстве / ВИЖ. Дубровицы. 1985. -с. 16-18.

121. Овчинников A.B., Букаров Н.Г., Графанау П. Использование фолликотро-пина для стимуляции полиовуляции у коров-доноров //Животноводство. -1987.-№12.-с.31-33.

122. Осетров A.A., Марчук А.Г. Некоторые аспекты иммунногенного бесплодия коров // Мат.конф. / Северо-Кавказск. зон. НИИЖ. Новочеркаск, 1974.-с.47-50.

123. Осетров A.A., Марчук А.Г. Иммуннобиологическое состояние организма бесплодных коров // Ветеринария.- 1969. №10. с.75-77.

124. Осташко Ф.И., Павленко М.П., Кузнецов Г.Н. Методические рекомендации по Харьковской технологии асептического получения и криоконсервации спермы производителей для госплемстанций и племпредприятий. Харьков, 1978. - 34с.

125. Осташко Ф.И., Бугров А.Д., Передера К.Б. Устройство для извлечения эмбрионов у животных: А.С.№378106. М.: Госкомизобретений, 1985.

126. Осташко Ф.И., Исаченко В.В. и др. Устройство для извлечения эмбрионов: А,С.№4058211. М.: Госкомизобретений, 1988.

127. Осташко Ф.И., Сушко А.Б. Устройство для извлечения эмбрионов у животных: Патент №1812978. М.: Госкомизобретений, 1992.

128. Осташко Ф.И. О природе холодового удара живчиков // Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных: Сб.работ/ НИИЖ JI и П УССР. -Харьков, 1963. с.23-25.

129. Осташко Ф.И. Разработка вопросов теории и практики глубокого охлаждения и длительного хранения спермы производителей: Авторефер. дисс. докт. биол. наук.- Харьков, 1968.

130. Осташко Ф.И., Марющенко A.B. Влияние различных видов излучений на спермии, обработанные желтком куриного яйца // НТБ №35/ НИИЖ ЛиП УССР. Харьков, 1982. - с.48-53.

131. Осташко Ф.И., Дибиров М.К. Антигенная структура и проницаемость цито-плазматической мембраны// НТБ №28/ НИИЖ ЛиП УССР.- Харьков, 1980.-с.67-73.

132. Осташко Ф.И. Глубокое замораживание и длительное хранение спермы производителей. К.: Урожай, 1979. - 246 с.

133. Павленко М.П. Усовершенствование и разработка технологии криоконсервации и использования спермы быков-производителей // Авторефер. дисс. канд. биол. наук. Харьков, 1981. - 24 с.

134. Павличенко В.П., Дорожилова А.Е., Сираждинов P.C. Спермиоагглютини-ны в сыворотке крови коров в норме и при патологии органов размножения // 2-й международн. симпозиум по иммунологии размножения.- Варна, 1316 сентября 1971.- София, 1973.

135. Павлов В.А. Физиология воспроизводства крупного рогатого скота. М.: Россельхозиздат, 1984. - 203 с.

136. Панасенко-О.М., Шалина Р.И. Изменение структуры мембран эритроцитов при нефропатии // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1985. - №4. - С.434.

137. Персианинов JI.C., Сидельникова В.М., Елизаров И.П. Гемолитическая болезнь плода и новорожденного. М.: Медицина, 1981. - 219 с.

138. Передерий В.Г., Бычкова Н.Г. Популярная иммунология. Киев.: Наукова думка, 1990.-208 с.

139. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика. М.: Медицина, 1976. - 336 с.

140. Петров Р.В., Чередеев А.Н. Т и В лимфоциты // Успехи современной биологии. 1974. - Т.77. - №1. - с.90-105.

141. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина, 1983. 368 с.к Пешкус Ю.К., Жилайтис В.И., Томашкжас В.И. Иммунные комплексы сыворотки крови крупного рогатого скота при лейкозе // Проблема ветеринаркой иммунологии: Сб. научн. трудов. Труд. - М.: 1985. - с.67-70.

142. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Естественная резистентность организма животных. Л.: колос, 1979. - 184 с.

143. Полянцев Н.Н., Максимов В.И., Цыганков П.В. Применение гормонов в борьбе с бесплодием коров //Животноводство. 1984.- №11.- с.58-60.

144. Полянцев Н.Н. Практические советы по борьбе с яловостью коров. М.: Россельхозиздат, 1986. - 174 с.

145. Попов В.К. К вопросу о значении иммунологической совместимости животных при осеменении // Труды Азербайджанского СХИ. Кировобад,1974. -Вып.1. с.17-19.

146. Прокофьев М.И. Проблемы оплодотворения сельскохозяйственных животных //М.: Советская наука, 1957. 314 с.

147. Пухова Л.И. Механизм и природа гемолиза в норме и экстремальных воздействиях // Успехи физиологических наук. 1980.- Т.П. - №2.- с.84-101.

148. Пучковская H.A. 50 лет тканевой терапии по В.П.Филатову // Тканевая терапия: Тез. республиканской научной конференции. Одесса, 1983. - Т.1. -с .3-6.

149. Райцина С.С. Травмы семенника и аутоиммунитет. М.: Медицина, 1970.

150. Резникова Л.С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях. -М.: Медицина, 1967. с.54-65.

151. Решетникова Н.М. Влияние энзопроста на процесс воспроизведения высокопродуктивных коров // Совершенствование методов воспроизведения и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных: Сб. научно-производственных статей. М., 1983.- с. 113-121.

152. Решетникова Н.М. Оплодотворение и эмбриональное развитие в связи с изменением матки и иммуннологическими факторами: Авторефер. дисс.канд. наук. Дубровицы, Московской обл., 1970.

153. Робертсон Д. Молекулярная биология. М.: Иностран. литерат., 1963. - с.32.

154. Рюмина И.И., Пуховская Н.В. Перекисное окисление липидов и патогенетическое обоснование антиоксидатной терапии при гнойно-септических заболеваниях у недоношенных детей // Вопросы охраны материнства и детства. 1985. - №5. - с. 17.

155. Рябых В.П. Эндокринологические аспекты регулирования процессов фол-ликулогенеза и суперовуляции у крупного рогатого скота // Трансплантация крупного рогатого скота. Жодино, 1989.

156. Рябых В.П.Синтез in vitro спермиоантител тканями репродуктивных лим-фоидных органов свиней в связи с естественными осеменениями // Бюлл.

157. ВНИИ физиологии и биохимии и питания сельскохозяйственных животных. Вып. 4/30/. - 1973. - с.74-77.

158. Савицкий И.В. Влияние тканевых препаратов на биологические процессы организма // Применение тканевых препаратов в животноводстве и ветеринарии: Матер. II научн. производ. конферен. К., 1966. - с.31-41.

159. Садовская.А.Г. Некоторые показатели обменных процессов при гемолитической болезни новорожденных: Авторефер. дисс. канд. мед. наук. К., 1963.

160. Сборник нормативных документов НПС "Эмбрион", Харьков, 1989. 74 с.

161. Сергеев Н.И., Мадиссон В. Использование метода трансплантации в животноводстве // Международный сельскохозяйственный журнал.- 1985. с. 16.

162. Сергеев Н.И., Шихов И.Я., Горбунов В. Воспроизводительная способность коров-доноров зигот в животноводстве // 1981. №6. - с.57-59.

163. Сергеев A.B., Собко Ю.А. Культура клеток в ветеринарии и биотехнологии. -К.: Урожай, 1990. 151 с.

164. Сердюк Г.Н. Изучение этиологии и патогенеза гемолитической болезни поросят // Ветеринария. 1973. - №11. - с.71-73.

165. Сираждинов P.C. Агглютинация живчиков в сыворотке крови коров в связи с подбором пар, эффективностью осемененияи послеродовыми осложнениями // Животноводство. 1972. №6. - с.74-75.

166. Сираждинов P.C., Дорожилов А.Е. Спермиоагглютинины в сыворотке крови слизистых оболочках полового тракта // Материалы III конференции молодых ученых по генетике и разведению сельскохозяйственных животных. Ленинград, 1973. - с. 174-175.

167. Система комплимента. А.Уйт, Ф.Хендлер, Э.Смит. Основы биохимии. М.: Мир, 1981.-с.1211-1217.

168. Скородумов И.И. Определение бактерицидной активности методом фото-нефлометрии //Ж. Микроб, эпидим. и инфек., 1966. №4. - с.8-11.

169. Смирнова JI.A. Липиды тканей плаценты при гемолитической болезни новорожденных // Тез. 3-научн. конференции: Актуальные вопросы патологической физиологии. Каунас, 1976. - с. 150-151.

170. Смирнова Л.А. Резус ингибирующая активность фосфолипидов и фосфоли-пазы плаценты человека при гемолитической болезни новорожденных: Авторефер. дисс. канд. мед. наук. М., 1977. - 21 с.

171. Смирнова Л.А. Фосфолипиды, связывающие резус антитела // Вопросы лабораторной диагностики: Тез. докл. Минск, 1975.- с.65-67.

172. Советкин C.B. и др. Стимуляция суперовуляции у коров-доноров // Зоотехния. 1989. - №4. с.64-65.

173. Соколовская И.И. Серологические исследования при отдаленной гибридизации // Известия АН СССР. М., 1938. - с.945-955.

174. Соколовская И.И., Бутаков А.К., Кононов В.П. Иммунологические реакции организма самок на живчики //Тр.2-го международного симпозиума по иммунологии размножения. 13-16 сентября, Варна, 1971- София, 1973.с.160-165.

175. Соколовская И.И., Милованов В.К. Иммунология воспроизведения животных. М.: Колос, 1981. - 163 с.

176. Соколовская И.И., Горбунов В.И., Субботин А.Д. Эндометрий коров как важнейшая структура гематогенитального барьера // Направление и новые результаты исследования по биологии воспроизведения животных. 4.2. -Вып.З. - Дубровицы, 1977. -с.83-85.

177. Солодовников В.Л. Выявление и подсчет Т и В лимфоцитов крови крупного рогатого скота //Бюлл. ВИЭВ. -1979. Вып. 35. - с.9-13.

178. Соттаев М.Х. Электрофоретическая и иммунноэлектрофоретическая характеристика спермы быков в зависимости от их физиологического состояния и сезона года: Авторефер. дисс. канд. наук. Ставрополь, 1979. - с.

179. Стегнятко B.C., Проскупова В.М., Жилайтес В.И. Вызывание суперовуляции с использованием различных гонадотропинов. //Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных. М., 1988. - с.40-42.

180. Стрельников И.Д. Известия научного института им.Лестгафта. 1923.

181. Субботин А.Д. Особенности изменения половых органов после отела коров //Животноводство.- 1974. № 1. - с.50-51.

182. Сысоев A.A., Рязанский М.П., Динамика комплементсвязывающей активности сыворотки крови. Физиологические особенности воспроизводительной функции коров. М., 1971. - с.59-60.3 а.Талвар Д.П. Иммунология контрацепции. М., Медицина, 1983.- 189 с.

183. Тарадайник Т.Е. Применение трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота в опытном хозяйстве "Шапово" Московской области // Состояние и перспективы развития биотехнологии в животноводстве. Харьков, 1988. -с. 105-106.

184. Терсков И. А. Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. -М.: Наука, 1961. -с.З 10.

185. Тихонов В.Н. Использование групп крови при селекции животных. М.: Колос, 1967.1 а.Тихомирова М.М. Детерминация и дифференциация пола у млекопитающих. //Успехи современной генетики. Москва, Наука, 1985. №13. - с. 173201.

186. Торнев А. Антигенная общность между половыми продуктами быка и некоторых других видов производителей // Тр.Международного симпозиума. -Варна. Болгария, 27-29 сентября, 1967. - София, 1969. - с.65-69.

187. Трошко Е.В., Гулина И.И., Андреева JI.E. Способ изготовления питательной среды для вымывания и культивирования эмбрионов млекопитающих // Сельскохозяйственная биология. 1985. - №8. - с. 110-115.

188. Тушнов М.П. Проблемы спермотоксинов и лизатов // Сб. научн. трудов. -М.: Сельхозгиз. 1938.

189. Тушнов М.П. К учению о спермотоксинах / биологическая роль спермотоксинов при оплодотворении/. Казань, 1911.

190. У орд А.М.Цингер Д.Т. Система комплемент-иммунохимия в клинической лабораторной практике. М.: Медицина, 1981. - с.154-168.

191. У.Пол, А.Сильверстайн, М.Купер и др. Иммунология. М.: Мир, 1987. - Т.1. - с 476.

192. Фронталлин Л.Н., Певецкий A.A. Иммунологическая толерантность. М.: Медицина, 1978. -310 с.

193. Фуксман И.П., Родионов B.C. Расщепление фосфолипидов и изменение ультраструктуры клеток хвои сосны обыкновенной при воздействии температуры 196°С // II Всесоюзная конференция "Криобиология и криомедици-на". Харьков, 1984. - Т.2. - c.l 11.

194. Фукс Б.Б., Малайцев В.В. Поверхность лимфоцита // Архив патологии. -1981. т.43. - №8. - с.3-81.

195. Черемисинов Г.А., Нежданов А.Г., Карамышев В.А. Изучение лютеолити-ческой активности эстуфалана // Синтез и исследование простагландинов: Тезисы докладов. Персиановка.- 1985. с.206.

196. Чередеев A.M., Грунов JI.B., Ковальчук J1.B. Значение теста спонтанного розеткообразования с эритроцитами мышей в комплексном количественном анализе B-лимфоцитов человека // Бюлл. экспер. биолог, и мед. 1980.1. Т.90. №7. - с.70-73.

197. Чомаев A.M. Применение эстрофана для синхронизации и стимулирования половых рефлексов у телок //Животноводство.- 1984. №11. - с.13-14.

198. Чухрий Б.Н. Фосфатазная активность спермы быков и ее влияние на оплодотворяющую способность спермиев: Авторефер. дисс. канд. наук. Львов, 1964.24с.

199. Чухрий Б.Н. Ферментативная активность спермы качества и оплодотворяющая способность половых клеток быков: Авторефер. дисс. докт. наук. -Львов, 1972. 36с.

200. Шакалов И.К. Патогенетическая терапия. Ленинград: Сельхозиздат, 1961. -491с.

201. Шашкин A.B., Терсков И.А. Некоторые особенности разрушения эритроцитов в патологии и при воздействии на организм. Продукция и деструкция эритроцитов в организме. Новосибирск: Наука, 1986. с. 14-17.

202. К Шилов Е.М., Тареева И.Е. Механизм образования и патогенетическая роль иммунных комплексов // Иммунология. 1983. - №5. - с.5-13.

203. Эрнст Л.К., Голубев А.К. Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных. М.:ВО "Агропромиздат", 1989. - с.5.13.

204. Юрков Ю.А., Сафонова Т.Я., Яцык Г.В., Волкова Л.Д. Свободно-радикальное окисление липидов устойчивости к гемолизу эритроцитов здоровых и больных детей // Вопросы медицинской химии. 1974. - Т.30. -с. 101.

205. Яблонский В.А., Кот Е.П. Синхронизация половой охоты у телок //Животноводство. 1983. - №9. - с.59-60.

206. Adinolt М.,' Gardner В., Wood С. В. Ontogenesis of two components of human complement: B.E. and B.C1A globulins // J. Nature (London).- 1968.- V.219.-N.189.- P.168.

207. Aitken R., Richardson D. Immunization against zona pelucida antigens // Immunological Aspects of Reproduction and Fertility Control. Ed. J. Hearth. Lancaster.-1980.-P. 173 182.

208. Anderson R. E., Garret R. В., Blank M. F. The quantitative production of aldehydes from 1-alkyl-l-alkyl glycerol // Lipids.- 1969.- N.4.- P.327 330.

209. Alhuwalia B. A., Holmann R. T. The fatty acid composition of lipids of boar rabbits and human semen // J. Repr. Fert.- 1969.- V. 18.- P.431 -437.

210. Armstrong D. Т., Corinwich D. L. Blockade of spontaneous and LH-induced ovulation in rats by indomethacin an inhibitor of prostaglandin biosynthesis // Prostaglandins.- 1972.- N.l. P. 21 - 28.

211. Baird D. Т., Mc Neilly Gonadotrophic control of follicular development and function during the oestrous cycle of the ewe // J. Reprod. Fertil.- 1981. Suppl. N.30.-P.119- 133.

212. Barta O., Barta N., Haemolytic assay of bovine serum compliment // Immunological methods.- 1972.- V.I.- P.363 374.

213. S3. Betteridge К. J., Techniques and results in cattle superovulation // Monogr. Can. Dept. Agr.- 1977.- N. 16.- P. 1 9.

214. Berke G., Clark W. How cytotoxic T-lymphocytes lyse target cells // Mech. Lymphocyte Activ. Proc. 14 Int. Leukocyte Conf., Amsterdam. -1981.- P.439 -441.

215. Beer A. E., Billignam R. E. Immunobiology of mammalian reproduction. Engl-wood Cliffs, New York: Prentice Hall.- 1976, - 240 p.

216. Betz M., Hansh G. M. Release of arachidonic acid, a new function of the late complement components // Immunology.- 1984.- N.4 5.- P. 473 - 483.

217. Behns R. M. Sheep erythrocyte rosettes in pig, sheep, cattle, and goats demonstrated in presence of dextran // J. Immunol. Meth.- 1978.- V.21.- N.3 4.- P. 197 -210.

218. Bicher A. et al. Определение концентрации пальметиновой кислоты в ам-ниотической жидкости с целью оценки степени зрелости легких плода // Биологическая химия. 1977. - 13.

219. Bilaspury G. S., Guraya S. S. Seasonal variations in the lipid composition of ram testis //Proc. Ind. Acad. Sci. / Anim. Sci.-1981.- V.90.- N.3.- P.357 363.

220. Boyii K. P., Siddigi F. A., Tien H. T. Antigen-antibody complement reaction studies on microbilayer lipids membranes // Immunolog. Commun.- 1984.-V.13.-N.2.- P.85 103.

221. Brand A., Trounson D., Aarts M., Laayer D. Superovulation and non-surgical embryo recovery in the lactating dairy cow // J. Anim. Prod.- 1978.- V.26.- N.I.-P.55 60.

222. Braun J. Receptor cytoskeleton interaction in the lymphocyte // Lymphocytes today.- Amsterdam New York - London: Elsevier Biomedical Press.- 1982.- P.80 - 84.

223. Briles W. E. Induced hemolytic disease in chicks // Genetics.- 1948.- V.33.- P.96.

224. Brener К. V., Gran E. Physiologische Bedeutung und Wirkung der Prosta-glandine bei Fortpflanzungsvorgangen landwirtschaftelicher Nutztiere // M. H. Veter. Med.- 1976.-V.31.-N.17.-P.666 672.

225. Bright S., Munro A. S., Lawson G. A. An indirect antiimmunoglobulin rosetting reaction to detect alloantibodies to human lymphocytes // J. Immun. Meth.-1977.-V.18.-N.1 -2.-P.55 -62.

226. Bratanov K. Problems and perspectives of reproductive immunology // Proc. Inter. Symp.- 1982.- P.118- 119.

227. Братанов К., Геров К., Тодоров Г. Върх обоазуването на спермоантитела в организме домашните животни // Годинник на сельско стопансата академия "Георги Димитров".- 1949 1950.-Т.26.- с.321 - 324.

228. Братанов К., Диков В. Исследоване ролята на спермоизоаглутинините при опложданеию на кравите // Доклады БАН.- I960.- Т. 13.- с.599 602.

229. Братанов К., Диков В., Попова Ю. Върху иммуната реактивности на кравите и биците спермонякои свставки на сперморазредителите // Ветеренарноме-дицински науки.- 1968.- 7.- с.683 689.

230. Братанов К., Диков В. Проблемы на размножаването при животните // Известия БАН, София.- 1966.- с.5.

231. Братанов К., Диков В. Върху некой иммунобиологични факторы при опло-ждането на сельскостопанските животни // Научн. тр. на зоотехн. факультете при ВВСИ "Г. Димитров", София/ТХИ.- 1962.- с.31 40.

232. Buxton Y. С., Brooksbank N. Н. Haemolytic disease of newborn pigs caused by isoimunization of pregnancy // Nature.- 1953.- V.172.- P.355.

233. Chondary J. В., Gier H. Т., Maricon G. B. Cystic changes in bovine vesicular follicles // J. Anim. Sci.- 1968.- У.27.- N.2.- P.468 471.

234. Chia D. E., Bernett V., Gamagata J. Quantitation and characterisation of soluble immune complex precipitated from sera by polyethylene glycol // Clyn. Exp. Immunology.- 1979.- V.37.- N.3.- P.399 407.

235. Clegg E. D., Forte R. H. Phospholipid composition of bovine sperm fractions seminal plasma and cytoplasmic droplets // J. Repr. Fert.- 1973.- N.34.- P.379 -383.

236. Cohen A. M., Shinitzky M. Modulation of complement lysis of human erythrocytes by the membrane lipid viscosity // Vox Sang.- 1982.- V.43.- N. 1.- P.23 . 27.

237. Coombs R. R., Feinstein A. Immunoglobulin determination on the surface of human lymphocytes // Lancet.- 1969.- N.2.- P.l 157 1160.

238. Crister J. K., Cunsett F. C., Winch R. P., Eits C. L., Factors affecting ova transfer in Limousine, Maine Anjou and Simmental cattle // Theriogenology.- 1979.-V.4.-N.1.-P.95.

239. Darrin Bennet A., Pouls A., White J. C. The effect of cold shock and freeze-thawing on release of phospholipids by ram, bull, and boar spermatozoa // Alestr. J. Biol. Sci.- 1973. - V.26.- N.6.- P. 1409- 1420.

240. Darrin Bennet A., Pouls A., White J. C. The fatty acids and aldehydes on spermatozoa phospholipids // Proc. Aust. Bioch. Soc.- 1973.- V.6.- P.29.

241. Darrin Bennet A., Pouls A., White J. C. Influence of cholesterol content of mammalian spermatozoa on susceptibility of cold shock // Cryobiol.- 1977.-V.14.- P.466 - 470.

242. Dawson К. M. C., Scott T. W. Phospholipids composition of epididymal spermatozoa prepared by density gradient centrifugation // Nature.- 1964.- V.202.-P.292.

243. Dierich M. P., Schiez Th. Physiological and pathological effects of activated compliment//Heamotologia.- 1984.-V. 17.-N.- 1.- P.3 16.

244. Dietz P., Pickett B. W., Komabeck R. J., et al. fatty acid composition of bovine spermatozoa and seminal plasma // J. Dairy Sei.- 1963.- V.46.- P.468.

245. Donaldson L. E. effect of age of donor cows on embryo production // Therioge-nology.- 1984.- V.21.- N. 16.- P.963 967.

246. Dunbar B. S., Rayonor B. D. Characterization of porcine zona pellucida antigens //Biol. Reprod.- 1980.- V.22.- P. 941 954.

247. Du Messnie du Buisson F., Renard J. P. Factors influencing the quality of ova and embryos // Monogr. Can. Dep. Agr.- 1977.- N. 16.- P.24 26.

248. Dufour J., Whitmore H. L., Ginter O. J., Casida L. E. Identification of the ovulating follicle by its size on different days of the estrous cycle in heifers // J. Anim. Sei.- 1972.- V.34.- P.85 87.

249. Duncombe W. G. Gas lipid chromatography of cell membranes // Biochem. J.-1962.-V.35.-P.6.

250. Elliasser R. Cholesterol in human semen // Biochem. J.- 1966.- V.98.- P.242. Elsden R. D., Hasler J. N., Seidel G. Non-surgical recovery of bovine eggs // Theriogenology.- 1976.- V.6.- N.5.- P.523 532.

251. Emelyanenko P. A., Grislowa 0. N. Haemolitic relationship of complement in mother-foetal system // International Meeting on Diseases of Cattle. London. -1972.-P.163.

252. Eng L. F., Lee V. L., Nayman R. B., Gerste B. Separation and isolation of methyl ether and dimethylacetals formed from brain lipids // J. Lip. Res.- 1964.- V.5.-P.128 130.

253. Espey L. L. Ovarian proteolytic enzymes and ovulation // Biol. Reprod.- 1974.-V.10.-P. 216- 235.

254. Espey L. L. The distribution of collagenous connective tissue in rat ovarian follicle // Biol. Reprod.- 1976.- V.14.- P. 502 506.

255. Evans P. W., Setchell B. P. Lipid changes in boar spermatozoa during epididymal maturation with some observation on the flow and composition of boar rate testes fluid//J. R. F.- 1979.-N.1.-P. 189- 196.

256. Evans E. A., Mohandas N., Laung A. Static and dynamic rigidities of normal and sickle erythrocytes. Major influence of cell haemoglobin concentration // J. Clin. Invest.- 1984.- V.73.- N.2.- P.477 488.

257. Fountain M. W., Schultz R. D. Effect of mitogen and liposome phospholipid concentration on the plastogenic response of bovine lymphocytes to phytohe-magglutinin // Immunology. 1982.- V.161.- N.5. - P.409 - 414.

258. Folch J., Loes M., Sloens Stanly J. A simple method for the isolation and purification of total lipid from animal tissues. Biochem. - 1957,- V.226.- N.I.- P.497 - 509.

259. Foulkes J. A. The separation of lipoprotein from egg's yolk and their effect on the motility and integrity of bovine spermatozoa // J. Repr. Fert. 1977.- N.48.-P.277 - 284.

260. Ginsburg J., Tsai Ch., Wrenn S. Phospholipids inhibit cytotoxic effects of Acti-nobacillus aebinomycetemcomatans leukotoxin on human polymorphonuclear leukocytes // Inflammation.- 1982.- V.6.- N.4.- P.365 370.

261. Goel V., Soni B., Bhalla R. Fertilization in female goats hyperimmunized with semen antigens // Brit. Vet. J.- 1969.- V.125.- N.8.- P.403 409.

262. Gordon J. Problems and prospects in cattle egg transfer // J. Irish. Vet.- 1975.-V.29.-P.21 -30,39-62.

263. Grewal A. S., Babuick L. A. Bovine lymphocytes are an improved technique of E-rosette formation // J. Immunol. Meth. 1978.- V.24.- P.355 - 361.

264. Grogan D., Myer D., Sikes J. Quantitative difference in phospholipids of ejaculated spermatozoa and spermatozoa from three levels of the epididymus of the boar//J. Repr. Fert.- 1966.- V.12.- P.431.

265. Greve T., Lehn-Jensen. Non-surgical embryo transplantation in larger dairy herd // XII Nord Vet. Congr. Abo.- 1978.

266. Hansen G. M., Shin M. L. A possible repair mechanism of complement attached cells//Immunobiology.- 1982.-V.162.-N.4 P.-P.356.

267. Heape W. Preliminary note on the transplantation and growth of mammalian ova within a uterine foster mother // Proc. Roy. Soc. Brit.- 1981.- V.48.- P.457 458.

268. Henle W., Henle G. The specificity of some mammalian spermatozoa // J. Immunol.- 1938.-V.34.-P.325.

269. Herman G. Analyse immunoelectrophoretique //Ed. P. Grabar and P. Burtin, Nas-son, Paris.- I960.- P.271.

270. Howarth B. D., Torregrossa D., Britten W. M. The phospholipid content of ejaculated fowl and turkey spermatozoa // Poultry Sci.- 1977.- V. 56.- P. 1265 -1268.

271. Howarth B. D., Brickett J. K. The phospholipid profile of cock spermatozoa before and after in vitro incubation for 24 hours at 41°C // Poultry Sci.- 1981 .-V.60.-N.7.- P.1516 1519.

272. Hunter A. G., Hafs H. D. Differentiation of sperm protein from that of the seminal plasma in rabbits // Fed. Proc. Fed. Socs. Exp. Biol.- 1965.- V.248.- P.2700.

273. Jain V., Anand S. P. The lipids of buffalo spermatozoa and seminal plasma // J. Repr. Fert.- 1976.- V.47.- N.2.- P.255 260.

274. Johnes R. S., Stewart P. L. The effects of cooling to 5°C and freezing and thawing on the ultrastructure of bull spermatozoa // J. Reprod. Fert. 1979.- V.56.-P.233 - 238.

275. Johnson L. A., Pursell V. C., Gerrits R. J. Total phospholipids and phospholipids fatty acids of ejaculated and epididymal semen and seminal plasma of boars // J. Anim. Sci.- 1972.- P.398 403.

276. Johnson L. A., Gerrits J., Young E. P. Phospholipids composition of boar spermatozoa and semen plasma // J. Anim. Sci.- 1967.- V.26.- P.946.

277. Kiddy C. A., Stone W. H., Casida L. E. Immunological studies on fertility and sterility. 2. Effects of treatment of semen with antibodies on fertility in rabbits // J. Immunology.- 1959.-V.82.-P. 125.

278. Kinosita K., Tsong T. Y. Hemolysis of human erythrocyte by a transient electric feed // Proc. Nat. Acad. Sci.- 1977.- V.74.- P. 1923 1927.

279. Komarec K. J., Rickett B. W., Gibson E. K., Jensen R. G. Lipids of porcine spermatozoa seminal plasma and gel // J. Repr. Fert. 1965.- V.9.- P. 131.

280. Komarec K. J., Rickett B. W., Lanz R. N., Jensen R. G. Lipid composition of bovine spermatozoa and seminal plasma// J. Dairy Sci.- 1964.- V.47.- P.531.

281. Kruv J., Lepock J. P., Rein A. D. The effect of fluidity of membrane lipids on freeze-thaw survival of yeast // Cryobiol.- 1978.- V. 15.- P. 1.

282. Kupferschmeid H. Untersuchungen uber die postparteil Pastzeit beim Rind // Sweiz. Arch. Tierzucht.- 1975.- V.l 17.- N.5.- S. 243 254.

283. Landsteiner-K. // Centrall. J. Bacht.- 1899.- V.25.- P.546.

284. Landsteiner K., Weiner A. B. //Proc. Soc. Exp. Biol.- 1940.- V.45.- N.I.- P.223.

285. Lardy H. A., Phillips P. H. Phospholipids as a source of energy formation of bull spermatozoa // Amer. J. Physiol.- 1941,- V.133.- P.602.

286. Lampeter W. Practice of non-surgical collection of bovine embryos // J. Zuch-thyg.- 1977.-N.12.-P.8-13.

287. Lowry О. H., Rosenbrogh H. Y. Protein measurement with the folin phonol reagent // J. Biol. Chem. 1951.- V.193.- P.265 - 275.

288. Looney C. R., Bontte B. W., Archbald L. F. Comparison of once-daily and twice daily FSH injections for superovulation of beef cattle // Theriogenology. 1981.-V.15.- N.I.- P.13 -22.

289. Maracek J., Eleko J., Choma S. Follikularny sicte v jaechikov krav po synchroni-zach ruje luteolytickym posobenum cloprostenolu // Vet. Med. CSSR. -1983.-V 28.- N.12.- P.706 716.

290. Mamousek J. Antigenic characteristics of spermatozoa from bulls, rams, and boars // J. Repr. Fert.- 1964.

291. S. ManiHoycKi I. Ф., 1ваноу A.T. Уплыу ¡муинныхрэакций на опладнение буй-нов рагатой жнвелы // Весци Академн наук БССР. Серия "Сельскогосподарцих наук".- 1973.- .4.- с.90 93.

292. Martemicci G., Tateda F., Manchisi A. Effecto luteolitico nella pecora di un analogo PGF2a in realisone alio stadio dei ciclo secsuall // Zootech. Nutr. Anim. 1986.-V.12. - N.6.-P.487 - 492.

293. McLaren A. Immunological control of fertility in female mice // Nature. 1964.-V.201.- P.282 285.

294. Menge A. G. Fertility of rabbits isoimmunized with seminal testicular and con-ceptus materials // Труды международного симпозиума по иммунологии сперматозоидов и оплодотворения.-София.- 1969.- с.329 331.

295. Mitchell G. Е., Miller J. R. Thymus and antigen reactive cells // Transplant Rev.-1969.-V.1.-P.3 -42.

296. Narsapurkar К. V., Hukeri V. B. A study of cholesterol cells in seminal plasma and diluted semen in exodes bulls // Ind. Vet. J.- 1978.- V.55. N.3.- P.239 - 241.

297. Neil A., Masters C. Observation of plasmogen content and aldehyde composition of the phosphoglycerides of ovine and porcine testis // Сотр. Bioch. Physiol. -1975.- V.5Í.-N.1.-P.99- 101.

298. Neil A., Masters C. Metabolism of fatty acids by ovine spermatozoa // J. Repr. Fert.- 1973.- V.34.- P. 279 287.

299. Nudegger u. E. A place for soluble immune complex in clinical immunology 11 Immunology Today. 1985.- V.6.- N.3.- P.80 - 82.

300. Petrov A. C., Mitorm D. Defects in lipid bilayers and their influence on membrane fusion // Bioph.- 1982.- V.90.- P.223 226.

301. Perez Т., Cullarcarrasco L. Autoimmunizacion espermatica en semen tales bovinos como causa de subfertilidad // 5th Congr. Intenaz. Riproduz. Anim. e. Re-condaz. Artific. Torrento.- 1964.- V.5.- Casciado S. A.- 247 252.

302. Picker R., Robertson R., et al. Безопасный метод амниоцентоза с помощью ультразвука для определения соотношения лецитин/сфингомиена на поздних сроках беременности //Obstet. Gynecol. 1976.- V.47.- N.6.- Р.722 - 724.

303. Pickett В. W., Komarek К. J. Evidence for less lipids from bovine spermatozoa due to freezing // J. Dairy Sci.- 1964.- V.47.- P.905.

304. Plapp-Fred et al. The role of membrane phospholipids in expressing erythrocyte eho (D) antigen activity // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1980.- N.4.- P. 561 568.

305. Pouls A., Darin A., White J.G. The phospholipids of mammalian sperm //Proc. Austr. Biochem. Sci.- 1972.- V.5. P.28.

306. Pouls A., Volgmayr J. K., White J.G. The phospholipid changes in spermatozoa during passage through genital tract of the bull // BBA.- 1973.- V.46.- N.38.-P.541 549.

307. Pouls A., White J.G. The phospholipid composition of human spermatozoa and seminal plasma // J. Repr. Fert. 1973.- V.35. - P.265 - 272.

308. Popivanov A., Viechanov V. N. Identity and differences in the behaviour of species. Antigens in man's spermatozoa and embryo cites //C. R. Academ. Bulgar. Science.- 1961.- V.14.- P. 223 226.

309. Pratt H. P. M. Uterine proteins and the activation of embryos from mice during relayed implantation // J. Repr. Fert.- 1977.- V.90. N.I.- P.l - 8.

310. Pursell V. G., Graeham E. F. Phsopholipids of bovine spermatozoa and seminal plasma // J.Repr. Fert.- !967.- V. 14.- P. 203 211.

311. Quinn R. J., White J. G. Chemical and ultrastructural changes in ram spermatozoa after washing, cold shock and freezing // J. Repr. Fert.- 1968.- V.l 8.- P.209.

312. Quinn R. J., White J. G. Phospholipid and cholesterol contents of epididimal and ejaculated ram spermatozoa and seminal plasma in relation to cold shock // Austr. J. Biol. Sci.- 1967.- V.205.- P.1205 1215.

313. Rashbech N. O. Non-surgical recovery and transfer of bovine embryos under farm conditions // 27th Ann. Meeting Eur. Assn. Anim. Prod. Zurich.- 1976.- 3.

314. Rajanoski E. Ovarian follicular system in sexually mature heifers with special reference to the seasonal cyclical and left to right variations // Acta. Endocr.-1960.-V.34.-N.52.-P.l.

315. Rajaniemi H., Vanha-Prttula T. Special receptor for LH in the ovary: evidence by cytoradiography and tissue fractionation // Endocrinology.- 1972.- V.90.- P.l 9.

316. Rumke P., Hellinga G. Autoantibodies against spermatozoa in sterile men // American J. Clin. Pathology.- 1968.- V.32. P.357.

317. Rowson L. E. A. Egg transfer in domestic animals // J. Nature. -1971. N.223. -P.378 - 388.

318. Sacco A. G., Palm V. S. Heteroimmunization with isolated pig zonae pellucidae //J. Reprod. and Fert.- 1977. V.51.-N.I.-P. 105.

319. Saari J. T., Beek J. S. Hypotonic hemolysis of human red blood cells, a two-phase process // J. Membr. Biol. 1975.- V.23. - N.2.- P.213 - 226.

320. Sanmande J. Changes in the plasma concentrations of free and conjugated eas-trogens in heifers after treatment to induce superovulation and the relationship with number of ovulations // J. Repr. Fert. 1982. - V.66. - N.2. - P.411-416.

321. Schulman S. Antibodies, autoantibodies, and the prostate glands // Bullet. Millard Fillmore Hosp.- 1967.- V.13. P.77 - 97.

322. Scott T. W., Volgmayr J., Setchell B. P. Lipid composition and metabolism in testicular and ejaculated ram spermatozoa // Biochem. J. 1967. - V.102.- P.456.

323. Scott T. W., Dawson M. C. Metabolism of phospholipids by spermatozoa and seminal plasma//Biochem J.- 1968.-V. 108. P. 457.

324. Schams D., Menser C. Some studies on endocrine responses after application for superovulation in the cattle // EEC Seminar. Control of Reproduction in the Cow. Galway.- 1977. P.27 - 39.

325. Stnelton J. H. Bovine embryo transfer techniques and applications in research // Austral. Adv. Vet. Sci., Tawnsville. 1979.- P. 13 - 19.

326. Sinclair N. R. Immunoregulation by antibody and antigens-antibody complex // Transplantation.- 1978.- V.10. N.2.- P.349 - 353.

327. Singer S. J., Nicolson G. L. The fluid mosaic model of the structure of cell membrane // Science. 1972.- V. 175.- N.4032.- P.720 - 731.

328. Smith L., Sitton G. D., Vincent C. K., Limited injections of follicle stimulating hormone for multiple births in beef cattle // J. Anim. Sci.- 1973.- V.37.- P.523 -527.

329. Snider R. K., Cleegg E. D. Alteration of phospholipids of porcine spermatozoa during in vivo uterus and incubation // J. Amer. Sci.- 1975.- V. 40.- N.2.- P.263 -274.

330. Sreenan J. M., Bechan D. Egg transfer in the cow; pregnancy rate and egg survival // J. Repr. Fert.- 1974. V.41.- N.2.- P.497 - 499. . Stobo J. D. Surface markers for lymphocyte subpopulation // J. Labor. Clin.

331. Traill К. N., Wick G. Lipids and lymphocyte function // Immunol. Today.- 1984.-V 5.- N.3.- P.70 76.

332. Vierula M., Rajanieme H. Effect of seminal plasma and calcium on the stabilization of the surface protein composition of ejaculated bull spermatozoa // Androl-ogy. 1983.-V.15.-N.5.-P.436 - 445.

333. Weismann W. G. Effect of corticosteroids on the stability and function of membranes // Physiology, immunopharmacology and treatment. N. Y., London.1975.-P.221 -230.

334. Weismann W. G. Corticosteroids and membrane stabilization // Circulation.1976.-V. 53. N.3. - P.171 - 172.323

335. Weill A., Roberts G. Fertility of female rabbits after isoimunization with seminal plasma//Fertility and Sterility.- 1965.- V.16.- P.356.

336. White J. G., Wales R. G. The susceptability of spermatozoa to cold shock // Int. J. Fert. I960.- V.5.- P.195.

337. Yang T. Identification of bovine T- and B-limphocyte subpopulations by immunofluorescence surface marker analysis // Amer. J. Veter. Res.- 1981.- V.42.-P.755 757.

338. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГОСУДАРСТВЕННОМ КОМИТЕТЕ СССР ПО НАУКЕ И ТЕХНИКЕ (Г0СК0МИ30БРЕТЕНИЙ)0Л/о

339. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР, Госкомизобретенкй выдал настоящее авторское свидетельство на изобретение:

340. Устройство для введения биологического материала в лотовые органы самки"

341. Автор (авторы): д^р^ Магомед 1фрамагомедович и Иващенко Владимир Николаевичнотно^юсвдоттшьсшй ИНСТИТУТ Заявитель: ЖИВОТНОВОДСТВА ЛЕСОСТЕПИ И ПОЛЕСЬЯ УССР1. Заявка №4807163 Приоритет изобретения 31 января 1990г.

342. Зарегистрировано в Государственном реестре * изобретений СССР8 октября 1991г. Действие авторского свидетельства распространяется на всю территоршр^С^юза ССР.1. Председатель Комитета1. Начальник отдела

343. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГОСУДАРСТВЕННОМ КОМИТЕТЕ СССР ПО НАУКЕ И ТЕХНИКЕ (Г0СК0МИ30БРЕТЕНИЙ)

344. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР,

345. Госкомизобретенкй выдал настоящее авторское свидетельствона изобретение: "Раствор для извлечения эмбрионов"

346. Автор (авторы); дИ(^Ир0В Магомед Курмагомедович и другие,указанные в описании

347. НАТЧНО-ИСаВДОБАТЕШЬСКИЙ ИНСТИТУТ ■ з ЖИВОТНОВОДСТВА ЛЕСОСТЕПИ И ПОЛЕСЬЯ УССР1. Заявитель:1. Заявка №4786215 Приоритет изобретения Бдекабря 198эт

348. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений СССР22 октября 1991г.

349. Действие авторского свидетельства распространяется на всю территощйоСЙкоза ССР.1. Председатель Комитета1. Начальник отдела

350. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГОСУДАРСТВЕННОМ КОМИТЕТЕ СССР ПО НАУКЕ И ТЕХНИКЕ (ГОСКОМИЗОБРЕТЕНИЙ)

351. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР, Госкомизобретений выдал настоящее авторское свидетельствона изобретение:

352. Способ подготовки баранов-пробников"1. Автор (авторы):$1б1фов Магомед Курамагомедович и другие, указанные в описании

353. НАУЧНО-ИССШЕЩОБАТЕЛЪСКИЙ ИНСТИ1УТ Заявитель: ЖИВОТНОВОДСТВА ЛЕСОСТЕПИ й ПОЛЕСМ УССР1. Заявка №4863777 Приоритет изобретения 5 ишд т0г

354. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений СССР22 октября 1991г.

355. Действие авторского свидетельства распространяется на всю территорию С<ж>за ССР.1. Председатель Комитета1. Начальник отделатол^г.гш-"-;союз советских

356. СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИКаи,.,» 1799345 АЗ51.5 В 65 В 51/10

357. ХУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ЕДОМСТВО СССР ОСПАТЕНТ СССР)1. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ1. ПАТЕНТУ11.4890435/132.31.08.906. 28.02.93. Бюл. N2 8

358. Авторское свидетельство СССР £ 961989, кл. В 29 С 27/06, 1980.

359. УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЗАПЕЧАТЫВАНИЯ УПАКОВОК С БИОЛОГИЧЕСКИМ МАТЕРИАЛОМ

360. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

361. ПРИ ГОСУДАРСТВЕННОМ КОМИТЕТЕ СССР ПО НАУКЕ И ТЕХНИКЕ (Г0СК0МИ30БРЕТЕНИЙ)

362. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР, Госкомизобретений выдал настоящее авторское свидетельство на изобретение:

363. Устройство для извлечения эмбрионов"

364. Автор (авторы). дизир0в Магомед Курмагомедович и другие, указанные в описании

365. МОСКОВСКОЕ НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБЪЕДИНЕНИЕ чЯЯшггрП*. "ТЕМИ" И НАУЧНО-ИССЯЕДОВАТЕЛЬСРИИ ИНСТИТУТ заявитель. ЖИВОТНОВОДСТВА ЛЕСОСТЕПИ И ПОЛЕСЬЯ УССР1. Заявка №4386352 Приоритет изобретения 29февраля 19 88Г

366. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений СССР1.июня 1991г. Действие авторского свидетельства распространяется на всю территоршб"Сс5^)за ССР.1. Председатель Комитета1. Начальник отдела

367. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК

368. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙе/У?

369. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР,

370. Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытийвыдал настоящее авторское свидетельство на изобретение: "Устройство дяя получения эмбрионов"

371. Автор (авторы): Осташко Федор Иванович Дибиров Магомед Курамагомедович и Иващенко Влад)шир Николаевич

372. Заявитель: НАЛНО-ИСОТДОВАТБЖЯСШ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА Ж0Ш1 И ПОЛЕСЬЯ УССР

373. Заявка № 4198788 Приоритет изобретения 24$евраля 1987|г

374. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений СССР1 февраля 1989г.

375. Действие авторского свидетельства распространяется на всю территорию Союза ССР.

376. Председатель Комитета * -— "'"1. Начальник отдела

377. МПФ Гознака. 1979. Зак. 79-3083.

378. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК

379. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

380. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР,

381. Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытийвыдал настоящее авторское свидетельство„на изобретение: "Устройство для получения зародышей*

382. Автор (авторы): Осташко Федор Иванович, Дибиров Магомед Курамагомедович, ХЗмельков Вячеслав Николаевич, Безуглнй Николай Дмитриевич и Бандура Алексей Иванович

383. Заявитель: НАУЧГО-ЙСОЩРВАТЕЛЪСКИЙ ШСТИТУТ ШЮТНОВОДСТВА ЛЕСОСТЕПИ И ПОЛЕСЬЯ УССР1. Заявка №38524301. Приоритет изобретения4февраля 1985 с

384. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений СССР8 июля 1987г.

385. Действие авторского свидетельства распространяется на всю территорию Союза ССР.1. Председатель Комитета1. Начальник отдела

386. МПФ Гознака. 1979. Зак. 79-3083.

387. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК

388. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙеМо М1359936

389. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР, Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий выдал настоящее авторское свидетельство на изобретение:

390. Устройство для пересадки эмбрионов"

391. Автор (авторы). Осташк0 фед0р Иванович," Дибщюв Магомед, Хмельков Вячеслав Николаевич и Песоцкий Владимир Викторович

392. Заявитель: НАУЧНО-ИССЛВДОВАТЕШКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА ЛЕСОСТЕПИ И ПОЛЕСЬЯ УССР3946555 Приоритет изобретения 19августа 1985г

393. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений СССР15 августа 198 Я?.

394. Действие авторского свидетельства распространяется на всю территорию Союза ССР,.1. Председатель Комитета1. Начальник отделаЖ1. УДОСТОВЕРЕНИЕна рационализаторское предложение1007.92дата подачи)

395. В соответствии с пунктом № 75 Положения об открытиях, изобретениях и рационализаторских предложениях, утвержденного постановлением Совета Ми* нистров СССР, от 21 августа 1973 г. № 584.настоящее удостоверение выдано

396. ИЧ, ветеринарного.фельдшера Л.Ю.ЯГОТИНЩ и ведущего ветврача НПСбрион" А.А.КИРЬЯНЧУКи ,,' Раствор для извлечения эмбрионов (ЗБФР)теккичаской•ненной по теме I раздел 2 НИ И Ж Лесостепи и По несь« УССР' по кого.

397. N г.,;.3р-оТ;25 " декабря 1989 г „ согласно й-ака&а . Задании Южно.делвния ВАСХНИЛ '1. ОЙ' с той и ость в

398. ТйОО; цифрами и прописью ):выполнешш г начало . . . г» ,, окончание . ■г »аковяла следующее ь3 в лаборатории.трансплантации эмбрио

399. ВИЧ, ветеринарного.фельдшера Л.Ю.ЯГОТЙНЩ, ведущего.ветеринарноговрача.ЧПС"Эмбрионо" А.А.КИРЬЯНЧУКА1. Усдайй^ }ШФёрмоножншщ,,£

400. НПО "Эмбрион", АДЛШРЬЯНЧУКА

401. Для извлечения ¡эмбрионов использовали комплекты " Эмбрион " ,предло .енные отделок биологии размножения НИИЖ Лесостепи и Полесья УССР „ Получено 17 .¡эмбрионов, из ник полноценных .9„- депенерированных .6» яйцеклеток -2 штуки „

402. Произведено пересадок 9 Эмбрионов . 2 реципиента.находятся под контролем со сроком стельности больше 3 месяцев .

403. А/. А „ С „ У с С! .к ь ц е в1. К „Б,. Передера1. . Н«К .• Дибиров

404. Для извлечения.эмбрионов использовано У Раствор для извлечения Эмбр> онов ", предложенный отделом биологии ' .размножения НИИЖ Лесостепи и Полесья УЛ.CP »

405. Получено 17 эмбрионов, из них полноценных -9, дегенерированных --6,, si пеклеток -2 штуки,

406. Произведено пересадок Эмбрионов. 9. 2 реципиента находятся под контре лек со сроком стельности больше 3 мееяпев

407. А„о„ jсольцег К.Б» Передера1. Н . К . Дибировентября колхоз "Коммунар"заведующего лабораторией трансплантации Ф.Н.КОВРИНО-, ве.теринарного фельдшера Л.Ю.ЯГОТИНЕЦ, ведущего ветеринарного врача ЙПС "Эмбрион" А.А.1ШРЬЯНЧУ1{А

408. Ф.Н.КОБРШОВИЧ ^ г^ЛЛЗ.ЯГОТИНЩ ; А.А.КЙРЬЯНЧЛС1. АКТио производственном испытания комплекта "Омбршя"

409. Зав .лзбооатс траноплайтаз1. Гл. ветврачлаборатория1. Гл.технолог1. А.-В. Сырмо лотово производственном испытании комплекта "Эмбрион*N

410. Произведено пересадок эмбрионов 20, получено телят-трансплантантов 6, Два рещшента находятся в контроле выше трёх месяцев сроком стельности.

411. Кугелев Й.М. Зезюля И.Н. Кугелева В.Б.0 чем и составлен настоящий акт.1. Подписи:^ . ч .