Резистентность опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.02, кандидат биологических наук Фадеев, Роман Сергеевич

• Фадеев, Роман Сергеевич
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Фадеев, Роман Сергеевич

ВВЕДЕНИЕ.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Цитокин Apo2L/TRAIL.

1.1.1 Apo2L/TRAIL лиганд.

1.1.2 Рецепторы к TRAIL/Apo2L.

1.1.3 Основной сигнальный путь TRAIL.

1.1.4 Альтернативный сигнальный путь TRAIL.

1.1.4.1 Активация NF-kB сигнального пути.

1.1.4.2 Активация PI3K-Akt сигнального пути.

1.1.4.3 Активация МАРК сигнального пути.

1.1.5 Резистентность опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу.

1.1.5.1 Сигнальные пути, принимающие участие в подавлении TRAIL-индуцированного апоптоза.

1.1.5.1.1 NF-kB сигнальный путь.

1.1.5.1.2 Akt/PKB сигнальный путь.

1.1.5.1.3 МАРК сигнальный путь.

1.1.5.1.4 mTOR сигнальный путь.

1.1.5.1.5 c-FLIPHIAPS.

1.1.5.1.6 GSK3a-GSK3(3 сигнальный путь.

1.1.6 Цитокин TRAIL как терапевтический препарат.

1.2 Приобретенная резистентность опухолевых клеток.

1.2.1 Резистентность опухолевых клеток в конфлюентных культурах

1.2.2 Резистентность опухолевых клеток в многоклеточных агрегатах. 39 1.2.2.1 Механизмы резистентности опухолевых клеток в многоклеточных агрегатах.

1.2.2.1.1 Механизмы опосредованные контактными взаимодействиями клеток.

1.2.2.1.2 Механизмы опосредованные ограничениями транспорта веществ в многоклеточных агрегатах.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Материалы.

2.2 Получение рекомбинантного белка izTRAIL.

2.3 Культура клеток.

2.4 Получение культуры нормальных диплоидных фибробластов человека

2.5 Оценка цитотоксичности.

2.6 Морфологический флуоресцентный анализ апоптоза.

2.7 Анализ митотической активности.

2.8 Ki67p-GFP репортерная система.

2.9 Трансфекция клеток.

2.10 Проточная цитофлуориметрия.

2.11 Анализ содержания кислорода в среде культивирования клеток.

2.12 Статистический анализ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ.

3.1 Избирательность апоптоз-индуцирующего действия рекомбинантного белка izTRAIL на опухолевые клетки.

3.2 Повышение резистентности опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах.

3.3 Выяснение связи TRAIL- резистентности опухолевых клеток в конфлюентных культурах с пролиферацией клеток.

3.4 Роль адгезии опухолевых клеток и околоклеточного микроокружения в формировании резистентности к TRAIL-индуцированному апоптозу.

3.5 Роль внутриклеточных сигнальных путей в формировании TRAIL-резистентности опухолевых клеток в конфлюентных культурах.

3.6 Подавление конфлюентной резистентности опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу мультикиназным ингибитором сорафенибом и ингибитором гистондиацетилазы SAHA.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Резистентность опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах»

Онкологические заболевания занимают второе место в мире по смертности после сердечно-сосудистых патологий. Недостаточная эффективность лечения онкологических заболеваний обусловлена в первую очередь отсутствием избирательного действия существующих противоопухолевых препаратов, недостаточно эффективным проникновением противоопухолевых субстанций в опухолевую ткань и возникновением при определенных условиях резистентности опухолевых клеток к повреждающим воздействиям. Возникновение резистентности опухолевых клеток к действию химиотерапевтических препаратов связывают, в первую очередь, с внутриклеточными механизмами активации и/или повышенной экспрессии белков-транспортеров суперсемейства ABC (Р-гликопротеина (Pgp), MRP1-MRP-5, BCRP и LPR), осуществляющих выведение ксенобиотиков различного происхождения из клетки (Gottesman et al., 2002). С другой стороны, известно повышение резистентности опухолевых клеток к различным повреждающим воздействиям в двумерных (конфлюентные культуры распластанных клеток) и трехмерных (сфероиды) многоклеточных образованиях в условиях in vitro, отражающее резистентность клеток в опухолевой паренхиме к действию химиотерапевтических препаратов (Chitcholtan et al., 2012), окислительного стресса (Акатов и др., 2003), гипертермии (Olive et al., 1985), радиации (Dertinger et al., 1975). Это говорит об общности механизмов повышения резистентности опухолевых клеток к различным повреждающим воздействиям в плотных многоклеточных образованиях. Механизм такой резистентности до сих пор остается не выясненным. В настоящее время одним из наиболее перспективных подходов противоопухолевой терапии является потенциальное применение рекомбинантных белков, созданных на основе цитокина TRAIL (TNF alpha Related Apoptisis Inducing Ligand).

Цитокин TRAIL является интегральным мембранным белком, относящихся к семейству фактора некроза опухолей, который обнаруживается у NK-клеток, а также у части дендритных клеток (Ashkenazi A. et al., 2008). Уникальной особенностью цитокина TRAIL является его способность избирательно индуцировать апоптоз в опухолевых клетках, связываясь со специфическими рецепторами клеточной гибели (DR4, DR5) на внешней поверхности цитоплазматической мембраны, и при этом не повреждать нормальные клетки организма (Gonzalvez F. et al., 2010). В то же время известно, что не все опухолевые клетки чувствительны к TRAIL-индуцированному апоптозу. В литературе указывается, что около 50% исследованных линий опухолевых клеток обладают конститутивной резистентностью к действию цитокина TRAIL, подобно нормальным клеткам. Это связывают как с изменением структуры рецепторов DR4, DR5, так и с повышенной экспрессией рецепторов ловушек (DcRl и DcR2), либо с конститутивной активностью внутриклеточных сигнальных путей, ответственных за выживание клеток (Johnstone et al., 2008). Однако, до сих пор, остается неизвестно, способны ли чувствительные к действию TRAIL опухолевые клетки приобретать резистентность к TRAIL-индуцированному апоптозу в зависимости от условий околоклеточного микроокружения, в частности, в плотных многоклеточных структурах, таких как конфлюэнтные культуры. Ответ на этот вопрос имеет большое теоретическое значение для биологии клетки, а также принципиально важен для создания на основе рекомбинантных белков TRAIL эффективных препаратов для противоопухолевой терапии.

Целью работы является изучение резистентности опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучение резистентности опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в зависимости от плотности клеточных культур;

2. Исследование резистентности опухолевых клеток к Т11А1Ь-индуцированному апоптозу в зависимости от пролиферативной активности клеток;

3. Изучение резистентности опухолевых клеток к Т11А1Ь-индуцированному апоптозу в зависимости от адгезии клеток и параметров околоклеточной среды;

4. Выяснение механизма резистентности опухолевых клеток к Т11А1Ь-индуцированному апоптозу и оценка возможности ее подавления.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Фадеев, Роман Сергеевич

выводы

1. Опухолевые клетки человека эпителиального и мезенхимального происхождения способны приобретать резистентность к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах. Клетки лейкоза человека способны приобретать резистентность к TRAIL-индуцированному апоптозу в многоклеточных агрегатах.

2. Резистентность опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах возникает на фоне подавления пролиферативной активности, и при этом значительная часть резистентных клеток может оставаться в клеточном цикле.

3. Полученные результаты указывают на то, что причиной резистентности опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах являются межклеточные контакты.

4. Механизмы резистентности опухолевых клеток разного происхождения к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах могут значительно отличаться и включать активацию рецепторов ростовых факторов и протеинкиназ внутриклеточных сигнальных путей, таких как PI3K, Akt (РКВ), Raf, РКА.

5. Резистентность опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу в конфлюентных культурах может подавляться путем нетоксичного воздействия на внутриклеточные молекулярные мишени.

ФИНАНСОВАЯ ПОДДЕРЖКА РАБОТЫ

Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы» (Госконтракт № 16.512.11.2261) и ВП «Развитие научного потенциала высшей школы» 2012-2014 гг. (Проект № 4.3887.2011) с использованием приборов ЦКП ИТЭБ РАН и ЦКП ИБК РАН.

БЛАГОДАРНОСТИ

Считаю приятным долгом выразить огромную благодарность своему научному руководителю д.ф.-м.н. профессору Владимиру Семеновичу Акатову за диссертационное руководство, неоценимую помощь в науке и жизни, постоянную поддержку, терпение и бесценную помощь в кристаллизации научных идей.

Выражаю глубокую благодарность научному руководителю работы к.б.н. Алексею Владимировичу Чеканову за внимание к работе, ценные указания и активное содействие в проведении исследований, а также сотрудникам лаборатории Ирине Сергеевне Фадеевой и Надежде Владимировне Долгих за искреннюю помощь, непрерывное содействие и постоянное внимание к работе.

Автор с глубокой признательностью выражает персональную благодарность Андрею Александровичу Кудрявцеву, Надежде Федоровне Даниной и Тамаре Николаевне Буданцевой за неоценимую поддержку на всех этапах работы, а также сотрудникам ИБП РАН Сергею Евгеньевичу и Евгению Анатольевичу Пермяковым, Екатерине Юрьевне Князевой и Валерию Мефодьевичу Грищенко, сотрудникам ИБК РАН Валерию Александровичу Яшину, Олегу Сергеевичу Моренкову, Веронике Валерьевне Врублевской, Станиславу Сергеевичу Колесникову за активное содействие и помощь при проведении исследований.

Автор также выражает признательность коллегам Марине Евгеньевне и Валерию Владимировичу Соловьевым, Ирине Денисовне Пшикиной, Юрию Викторовичу Шаталину, Виктории Сергеевне Шубиной, Алексею Георгиевичу Круглову, Анне Борисовне Никифоровой, Вере Викторовне. Тепловой, Валентине Петровне Лавровской, Анне Дмитриевне Окуневой,

Сергею Геннадьевичу Левину и Александру Геннадьевичу Бобылеву за плодотворное сотрудничество и дружеское участие при проведении работы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные результаты указывают на общность явления конфлюентной резистентности клеток к различным повреждающим воздействиям, включая не только ксенобиотики (химиотерапевтические препараты), окислительный стресс, о чем свидетельствуют данные литературы, но и обнаруженную в ходе выполнения работы конфлюентную резистентность к TRAIL-индуцированному апоптозу. Резистентность опухолевых клеток к инициации апоптоза через рецепторы лиганда TRAIL указывает на то, что такая резистентность связана не с белками, выводящими ксенобиотики из клеток (белки множественной лекарственной устойчивости Pgp, MRP1-MRP5 и др.), а с внутриклеточными сигнальными путями, ответственными за выживаемость клеток. Существенным моментом является также то, что TRAIL-резистентность могут приобретать и клетки лейкоза человека в многоклеточных агрегатах. Эти результаты представляют интерес не только с научной точки зрения для понимания молекулярных механизмов резистентного состояния клеток в патологии, но и для лечения злокачественных заболеваний.

В настоящее время нет ясного понимания причины возникновения резистентности опухолевых клеток в конфлюентных культурах. Основными предположениями можно назвать участие межклеточных контактов, либо специфических факторов околоклеточного микроокружения, таких как ацидоз и гипоксия, возникающих непосредственно около клеток вследствие диффузионного ограничения массопереноса в конфлюентных культурах. В ответ на эти факторы можно ожидать адаптивное неспецифическое повышение резистентности опухолевых клеток. Однако в наших исследованиях было установлено, что конфлюентная TRAIL-резистентность может возникать в условиях благоприятной для роста клеток околоклеточной среды. Совокупность полученных в работе результатов указывает, что

85 причиной резистентности опухолевых клеток к TRAIL-индуцированному апоптозу являются межклеточные контакты. Вопрос о том, какие межклеточные контакты индуцируют резистентность опухолевых клеток к повреждающим воздействиям, и каким образом это осуществляется, остается открытым и требует дальнейших исследований.

Другой важный вопрос, рассмотренный в диссертации, состоит в том, связана ли конфлюентная резистентность опухолевых клеток с подавлением клеточной пролиферации. Представленные в работе результаты указывают на связь конфлюентной TRAIL-резистентности с угнетением пролиферации клеток. Однако, согласно полученным данным, опухолевые клетки могут приобретать резистентность, оставаясь в клеточном цикле, в частности в S и Gl фазах. Вопрос о том, что это за состояние опухолевых клеток, при котором митотическая активность подавлена, а клетки пребывают в клеточном цикле, остается открытым, и для ответа на него требуются дополнительные исследования.

Выполненный в работе анализ роли в конфлюентной TRAIL-резистентности опухолевых клеток основных ответственных за выживание протеинкиназ внутриклеточных сигнальных путей показал, что механизмы резистентности клеток разного происхождения могут быть различными, что может отражать специфику трансформации клеток в опухолях. Например, в клетках карциномы гортани человека механизм конфлюентной TRAIL-резистентности реализуется с участием тирозинкиназных рецепторов, внутриклеточных протеинкиназ PI3K, Akt, Raf, РКА (Рисунок 32), которые указывают на реализацию механизма через ингибирование Bad, супрессора антиапоптотических белков Вс1-2 и Bcl-xL, и проапоптотического белка Вах, олигомеризация которого в комплексе с рядом других белков во внешней мембране митохондрий обеспечивает выход в цитозоль проапоптотических белков SMAC, CytC и др., что необходимо для активации эффекторных каспаз 3, 6, 7 и запуска апоптоза. оосссбосеооооссса »ееееееоосееоосессе хооссссссссосососса оооосооеееооооош хсооосессоое * хоосеооооеос

Рисунок 32 - Роль протеинкиназ в механизме конфлюентной Т11А1Ь-резистентности опухолевых клеток НЕр2 Зеленые фигуры - проапоптотические белки, синие - антиапоптотические белки, маленькие круги на синих фигурах - использованные в работе ингибиторы, стрелки -активация, Т - линии ингибирование, красные Т-линии - сигнальные пути, активированные при конфлюентной Т11А1Ь-резистентности клеток НЕр-2

В то же время в работе обнаружено, что в клетках карциномы кожи человека, линия А431, механизм конфлюентной ТКА1Ь-резистентности не связан с указанными протеинкиназами. Это показывает необходимость учитывать специфику опухолей при разработке методов подавления конфлюентной резистентности опухолевых клеток.

Подавление конфлюентной резистентности опухолевых клеток НЕр-2 к ТБ1А1Ь-индуцированному апоптозу путем применения ингибиторов внутриклеточных сигнальных киназ в нетоксичных концентрациях, свидетельствует о возможности создания комплексных субстанций, которые способны подавлять резистентность опухолевых клеток и избирательно вызывать их гибель, не оказывая токсичного действия на клетки здоровых тканей.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Фадеев, Роман Сергеевич, 2012 год

1. Акатов B.C., Соловьева М.Е., Лещенко В.В., Теплова В.В. Окислительный стресс в клетках карциномы гортани человека НЕР-2 в результате действия сочетания витаминов В12Ь и С // Бюлл. эксп. биол. мед. 2003, Т. 136, №9, с. 318-321.

2. Akatov V.S., Lezhnev E.I., Vexler A.M., Kublik L.N. Low pH value of pericellular medium as a factor limiting cell proliferation in dense cultures // Exp Cell Res., 1985, V. 160(2), p. 412-8.

3. Almasan A., Ashkenazi A. Apo2L/TRAIL: apoptosis signaling, biology, and potential for cancer therapy // Cytokine Growth Factor Rev., 2003, V. 14(3-4), p. 337-348.

4. Anderson M., Warr J.R. Expression of verapamil hypersensitivity in multidrug-resistant cells grown as multicellular spheroids // Cancer Chemother Pharmacol., 1990, V. 26, p. 151-154.

5. Almasan A., Ashkenazi A. Apo2L/TRAIL: apoptosis signaling, biology, and potential for cancer therapy // Cytokine Growth Factor Rev., 2003, V.14, p. 337-348.

6. Aza-Blanc P., Cooper C. L., Wagner K., Batalov S., Deveraux Q. L., Cooke M. P. Identification of modulators of TRAIL-induced apoptosis via RNAi-based phenotypic screening // Mol. Cell., 2003, V. 12, p. 627-637.

7. Baader E., Toloczko A. et al. Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand-mediated proliferation of tumor cells with receptor-proximal apoptosis defects // Cancer Res., 2005, V. 65(17), p. 7888-7895.

8. Bates R.C., Lincz L.F., Burns G.F. Involvement of integrins in cell survival // Cancer Metastasis Rev., 1995, V. 14, p. 191-203.

9. Bates R.C., Buret A., van Helden D.F. et al. Apoptosis induced byinhibition of intercellular contact // J. Cell Biol., 1994, V. 125, p. 403-15.94

10. Begg A.C., Shrieve D.C., Smith K.A. et al. Effects of hypoxia, pH, and growth stage on cell killing in Chinese hamster V79 cells in vitro by activated cyclophosphamide // Cancer Res., 1985, V. 45, p. 3454-9.

11. Bichay T.J., Inch W.R. Resistance of V79 multicell spheroids to mitoxantrone: drug uptake and cytotoxicity // Cancer Drug Deliv., 1987, V. 4, p. 201-11.

12. Bockbrader K.M., Tan M., Sun Y. A small molecule Smac-mimic compound induces apoptosis and sensitizes TRAIL- and etoposide-induced apoptosis in breast cancer cells // Oncogene. 2005, V. 24, p. 7381-7388.

13. Bodmer J.L., Meier P. et al. Cysteine 230 is essential for the structure and activity of the cytotoxic ligand TRAIL // J. Biol. Chem., 2000, V. 275(27), p. 20632-20637.

14. Calatozzolo C., Gelati M., Ciusani E., Sciacca F.L., Polio B., Cajola L., Marras C., Silvani A., Vitellaro, Zuccarello L., Croci D., Boiardi A., Salmaggi

15. A. 2005. Expression of drug resistance proteins Pgp, MRP1, MRP3, MRP5 and GSTpi in human glioma // J. Neurooncol., V. 74, p. 113-121.

16. Carlsson J., Daniel-Szolgay E., Frykholm G. et al. Homogeneous penetration but heterogeneous binding of antibodies to carcinoembryonic antigen in human colon carcinoma HT-29 spheroids // Cancer Immunol. Immunother., 1989, V. 30, p. 269-76.

17. Cha S.S., Kim M.S. et al. A resolution crystal structure of human TRAIL, a cytokine with selective antitumor activity // Immunity, 1999, V. 11(2), p. 253-261.

18. Chaudhary P.M., Eby M., Jasmin A., Bookwalter A., Murray J., Hood L. Death receptor 5, a new member of the TNFR family, and DR4 induce FADD-dependent apoptosis and activate the NF-kappaB pathway // Immunity. 1997, V. 7, p. 821-830.

19. Chen X., Kandasamy K., Srivastava R. K. Differential roles of RelA (p65) and c-Rel subunits of nuclear factor kappa B in tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand signaling // Cancer Res., 2003, V. 63, p. 1059— 1066.

20. Chitcholtan K., Sykes P.H., Evans J.J. The resistance of intracellular mediators to doxorubicin and cisplatin are distinct in 3D and 2D endometrial cancer // J. Transl. Med., 2012, V. 10, p. 38.

21. Chun M.H. Plasmin induces the formation of multicellular spheroids of breast cancer cells // Cancer Lett., 1997, V. 117, p. 51-6.

22. Daniel P.T., Wieder T. et al. The kiss of death: promises and failures of death receptors and ligands in cancer therapy // Leukemia, 2001, V. 15(7), p. 1022-1032.

23. D'Arpa P., Beardmore C. and Liu L.F. Involvement of nucleic acid synthesis in cell killing mechanisms of topoisomerase poisons // Cancer Res., 1990, V. 50, p. 6919-6924.

24. Degli-Esposti M.A., Dougall W.C. et al. The novel receptor TRAIL-R4 induces NF-kappaB and protects against TRAIL-mediated apoptosis, yet retains an incomplete death domain // Immunity, 1997, V. 7(6), p. 813-820.

25. Degli-Esposti M.A., Smolak P.J. et al. Cloning and characterization of TRAIL-R3, a novel member of the emerging TRAIL receptor family // J. Exp. Med., 1997, V. 186(7), p. 1165-1170.

26. Dertinger H., Lucke H.C. A comparative study of post-irradiation growth kinetics of spheroids and monolayers // Int. J. Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys. Chem. Med., 1975, V. 28, p. 255-65.

27. Dimanche-Boitrel M.T., Micheau O., Hammann A. et al. Contribution of the cyclin-dependent kinase inhibitor p27KIPl to the confluence-dependent resistance of HT29 human colon carcinoma cells // Int. J. Cancer, 1998, V. 77, p. 796-802.

28. Dimanche-Boitrel M.T., Garrido C., Chauffert B. Kinetic resistance to anticancer agents // Cytotechnology, 1993, V. 12, p. 347-56.

29. Du C., Fang M., Li Y., Li L., Wang X. Smac, a mitochondrial protein that promotes cytochrome c-dependent caspase activation by eliminating IAP inhibition // Cell. 2000, V. 102, p. 33-42.

30. Durand R E., Sutherland R.M. Effects of intercellular contact on repair of radiation damage // Exp. Cell Res., 1972, V. 71 p.75-80.

31. Durand R.E. Radioprotection by WR-2721 in vitro at low oxygen tensions: implications for its mechanisms of action // Br. J. Cancer, 1983, V. 47, p. 387-92.

32. Durand R.E. Cellular oxygen utilization and radiation response of V79 spheroids // Adv. Exp. Med. Biol., 1983, V. 159, p. 419-34.

33. Durand R.E. Synergism of cisplatin and mitomycin C in sensitive and resistant cell subpopulations of a tumor model // Int. J. Cancer., 1989, V. 44, p. 911-7.

34. Durand R.E. Chemosensitivity testing in V79 spheroids: drug delivery and cellular microenvironment // J. Natl. Cancer Inst., 1986, V. 77, p. 247-52.

35. Durand R.E. Distribution and activity of antineoplastic drugs in a tumor model // J. Natl. Cancer Inst., 1989, V. 81, p. 146-52.

36. Ehrhardt H., Fulda S., Schmid I., Hiscott J., Debatin K. M., Jeremias I. TRAIL induced survival and proliferation in cancer cells resistant towards TRAIL-induced apoptosis mediated by NF-kappaB // Oncogene. 2003, V. 22, p. 3842-3852.

37. Ehrlich P.H., Moustafa Z.A., Archinal-Mattheis A.E. et al. The reversal of multidrug resistance in multicellular tumor spheroids by SDZ PSC 833 //Anticancer. Res., 1997, V. 17, p. 129-33.

38. El-Zawahry A., McKillop J., Voelkel-Johnson C. Doxorubicin increases the effectiveness of Apo2L/TRAIL for tumor growth inhibition of prostate cancer xenografts // BMC Cancer., 2005, V. 5, p. 2.

39. Erlichman C., Wu A. Resistance of MGH-U1 bladder cancer spheroids to vincristine // Anticancer. Res., 1992, V. 12, p. 1233-6.

40. Erlichman C., Vidgen D., Wu A. Cytotoxicity of cisplatin and cisdiammine-l,l-cyclobutane dicarboxylate in MGH-U1 cells grown as monolayers, spheroids, and xenografts // J. Natl. Cancer Inst., 1985, V. 75, p. 499505.

41. Emery J. G., McDonnell P. et al. Osteoprotegerin is a receptor for the cytotoxic ligand TRAIL // J. Biol. Chem., 1998, V. 273(23), p. 14363-14367.

42. Fisher M. J., Virmani A. K. et al. Nucleotide substitution in the ectodomain of trail receptor DR4 is associated with lung cancer and head and neck cancer// Clin. Cancer Res., 2001, V. 7(6), p. 1688-1697.

43. Falschlehner C., Emmerich C. H., Gerlach B., Walczak H. TRAIL signalling: decisions between life and death // Int. J. Biochem. Cell Biol., 2007, V. 39, p. 1462-1475.

44. Frank C., Weber K.J., Fritz P. et al. Increased dose-rate effect in V79-multicellular aggregates (spheroids). Relation to initial DNA lesions and repair // Radiother. Oncol., 1993, V. 26, p. 264-70.

45. Frankel A., Buckman R., Kerbel R.S. Abrogation of taxol-induced G2-M arrest and apoptosis in human ovarian cancer cells grown as multicellular tumor spheroids // Cancer Res., 1997, V. 57, p. 2388-93.

46. Frese S., Pirnia F., Miescher D., Krajewski S., Borner M. M., Reed J. C., Schmid R. A. PG490-mediated sensitization of lung cancer cells to Apo2L/TRAIL-induced apoptosis requires activation of ERK2 // Oncogene, 2003, V. 22, p. 5427-5435.

47. Fujita N., Kataoka S., Naito M. et al. Suppression of Tlymphoma cell apoptosis by monoclonal antibodies raised against cell surface adhesion molecules // Cancer Res., 1993, V. 53, p. 5022-7.

48. Ganten T.M., Koschny R., Haas T.L., Sykora J., Li-Weber M., Herzer K., Walczak H. Proteasome inhibition sensitizes hepatocellular carcinoma cells, but not human hepatocytes, to TRAIL // Hepatology, 2005, V. 42, p. 588-597.

49. Garrido C., Ottavi P., Fromentin A., Hammann A., Arrigo A.P., Chauffert B. and Mehlen P. HSP27 as a mediator of confluence-dependent resistance to cell death induced by anticancer drugs // Cancer Res., 1997, V. 57, p. 2661-2667.

50. Garrido C., Chauffert B., Pinard D. et al. Circumvention of confluence-dependent resistance in a human multi-drug-resistant colon-cancer cell line // Int. J. Cancer., 1995, V. 61, p. 873-9.

51. Chen C., Wei Y., Hummel M., Hoffmann T.K., Gross M., Kaufmann A.M., Albers A.E. Evidence for epithelial-mesenchymal transition in cancer stem cells of head and neck squamous cell carcinoma // PLoS One, 2011, V. 6(1), el6466.

52. Glimelius B., Norling B., Nederman T. et al. Extracellular matrices in multicellular spheroids of human glioma origin: increased incorporation of proteoglycans and fibronectin as compared to monolayer cultures // APMIS, 1988, V. 96, p. 433-44.

53. Goldwasser F., Shimizu T., Jackman J., Hoki Y., O'Connor P.M., Kohn K.W. and Pommier Y. Correlations between S and G2 arrest and the cytotoxicity of camptothecin in human colon cancer cells // Cancer Res., 1996, V. 56, p. 4430-4437.

54. Gonzalvez F., Ashkenazi A. New insights into apoptosis signaling by Apo2L/TRAIL // Oncogene, 2010, V. 29(34), p. 4752-4765.

55. Haji-Karim M, Carlsson J. Proliferation and viability in cellular spheroids of human origin. Cancer Res 1978;38:1457-64.

56. Hambek M, Werner C, Baghi M, Gstottner W, Knecht R. Prestimulation of head and neck cancer cells with growth factors enhances treatment efficacy // Anticancer Res., 2006, V. 26(2A), p. 1091-1095.

57. Hauptmann S, Denkert C, Lohrke H, et al. Integrin expression on colorectal tumor cells growing as monolayers, as multicellular tumor spheroids, or in nude mice // Int. J. Cancer, 1995, V. 61, p. 819-25.

58. Huot J., Gaetan R., Lambert H., Chretien P. and Landry J. Increased survival after treatments with anticancer agents of Chinese hamster cells expressing the human Mr 27,000 heat shock protein // Cancer Res., 1991, V. 51, p. 5245-5252.

59. Hymowitz S.G., O'Connell M. P. et al. A unique zinc-binding site revealed by a high-resolution X-ray structure of homotrimeric Apo2L/TRAIL // Biochemistry, 2000, V. 39(4), p. 633-640.

60. Hymowitz S.G., Christinger H.W., Fuh G., Ultsch M., O'Connell M., Kelley R. F., Ashkenazi A., de Vos A. M. Triggering cell death: the crystal structure of Apo2L/TRAIL in a complex with death receptor 5 // Mol. Cell., 1999, V. 4, p. 563-571.

61. Inch W.R., McCredie J.A., Sutherland R.M. Growth of nodular carcinomas in rodents compared with multi-cell spheroids in tissue culture // Growth, 1970, V. 34, p. 271-82.

62. Irmler M., Thome M., Hahne M., Schneider P., Hofmann K., Steiner V., Bodmer J. L., Schroter M., Burns K., Mattmann C., Rimoldi D., French L. E., Tschopp J. Inhibition of death receptor signals by cellular FLIP // Nature, 1997, V. 388, p. 190-195.

63. Ishimura N., Isomoto H., Bronk S. F., Gores G. J. Trail induces cell migration and invasion in apoptosis-resistant cholangiocarcinoma cells // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol., 2006, V. 290, p. 129-136.

64. Johnstone R.W., Frew A.J. et al. The TRAIL apoptotic pathway in cancer onset, progression and therapy // Nat. Rev. Cancer, 2008, V. 8(10), p. 782798.

65. Kaaijk P., Troost D., de Boer O.J. et al. Daunorubicin and doxorubicin but not BCNU have deleterious effects on organotypic multicellular spheroids of gliomas // Br. J. Cancer, 1996, V. 74, p. 187-93.

66. Kataoka S., Naito M., Fujita N. et al. Control of apoptosis and growth of malignant T lymphoma cells by lymph node stromal cells // Exp. Cell Res., 1993, V. 207, p. 271-6.

67. Kayagaki N., Yamaguchi N. et al. Expression and function of TNF-related apoptosis-inducing ligand on murine activated NK cells // J. Immunol., 1999, V. 163(4), p. 1906-1913.

68. Kerr DJ, Wheldon TE, Kerr AM, et al. In vitro chemosensitivity testing using the multicellular tumor spheroid model // Cancer Drug Deliv., 1987, V. 4, p. 63-74.

69. Kerr D.J., Wheldon T.E., Hydns S. et al. Cytotoxic drug penetration studies in multicellular tumour spheroids // Xenobiotica, 1988, V. 18, p. 641-8.

70. Kim K.M., Lee Y.J. Amiloride augments TRAIL-induced apoptotic death by inhibiting phosphorylation of kinases and phosphatases associated with the P13K-Akt pathway // Oncogene, 2005, V. 24, p. 355-366.

71. Kim S.H., Kim K. et al. Death induction by recombinant native TRAIL and its prevention by a caspase 9 inhibitor in primary human esophageal epithelial cells // J. Biol. Chem., 2004, V. 279(38), p. 40044-40052.

72. Kim K., Fisher M. J. et al. Molecular determinants of response to TRAIL in killing of normal and cancer cells // Clin. Cancer Res., 2000, V. 6(2), p. 335-346.

73. Kim J.W., Ho W.J., Wu B.M. The role of the 3D environment in hypoxia-induced drug and apoptosis resistance // Anticancer Res., 2011, V. 31, p. 3237-3245

74. Khanbolooki S., Nawrocki S. T. et al. Nuclear factor-kappaB maintains TRAIL resistance in human pancreatic cancer cells // Mol. Cancer Ther., 2006, V. 5(9), p. 2251-2260.

75. Kobayashi H., Man S., Kapitain S.J., Teicher B.A. and Kerbel R.S. Acquired multicellular resistance to alkylating agents in cancer // Proc. Natl. Acad. Sei. USA, V. 199390, p. 3294-3298

76. Lagneaux L., Gillet N., Stamatopoulos B., Delforge A., Dejeneffe M.,

77. Lawrence D., Shahrokh Z., et al. Differential hepatocyte toxicity of recombinant Apo2L/TRAIL versions // Nat. Med., 2001, V. 7(4), p. 383-385.

78. Levine A.J. p53, the cellular gatekeeper for growth and division // Cell, 1997, V. 88, p. 323-331.

79. Ley R., Ewings K.E., Hadfield K., Cook S.J. Regulatory phosphorylation of Bim: sorting out the ERK from the JNK // Cell Death Differ., 2005, V. 12(8), p. 1008-14.

80. Li L., Thomas R. M., Suzuki H., De Brabander J. K., Wang X., Harran P. G. A small molecule Smac mimic potentiates TRAIL- and TNFalpha-mediated cell death // Science, 2004, V. 305, p. 1471-1474.

81. Luo J.L., Maeda S., Hsu L. C., Yagita H., Karin M. Inhibition of NF-kappaB in cancer cells converts inflammation- induced tumor growth mediated by TNFalpha to TRAIL-mediated tumor regression // Cancer Cell., 2004, V. 6, p. 297-305.

82. Luo C., MacPhail S.H., Dougherty G.J. et al. Radiation response of connexin43-transfected cells in relation to the 'contact effect' // Exp. Cell Res., 1997, V. 234, p. 225-32.

83. MacFarlane M., Inoue S., Kohlhaas S. L., Majid A., Harper N., Kennedy D. B., Dyer M. J., Cohen G. M. Chronic lymphocytic leukemic cells exhibit apoptotic signaling via TRAIL-R1 // Cell Death Differ., 2005, V. 12, p. 773-782.

84. Manning B.D., Cantley L.C. AKT/PKB signaling: navigating downstream // Cell. 2007, V. 129, p. 1261-1274.

85. Mattern J., Kallinowski F., Herfarth C. et al. Association of resistance-related protein expression with poor vascularization and low levels of oxygen in human rectal cancer // Int. J. Cancer., 1996, V. 67, p. 20-23.

86. Morales J.C., Ruiz-Magana M.J., Ruiz-Ruiz C. Regulation of the resistance to TRAIL-induced apoptosis in human primary T lymphocytes: role of NF-kappaB inhibition // Mol Immunol., 2007, V. 44, p. 2587-2597.

87. Morgan D.O. Principles of CDK regulation // Nature, 1995, p. 374, p. 131-134.

88. Morales J.C., Ruiz-Magana M.J. et al. Regulation of the resistance to TRAIL-induced apoptosis in human primary T lymphocytes: role of NF-kappaB inhibition // Mol. Immunol., 2007, V. 44(10), p. 2587-2597.

89. Murphy B.J., Laderoute K.R., Chin R.J. et al. Metallothionein IIA is up-regulated by hypoxia in human A431 squamous carcinoma cells // Cancer Res., 1994, V. 54, p. 5808-10.

90. Nakayama K. Mice lacking p27(Kipl) display increased body size, multiple organ hyperplasia, retinal dysplasia and pituitary tumors // Cell, 1996, V. 85, p. 707-720.

91. Nederman T., Carlsson J. Penetration and binding of vinblastine and 5-fluorouracil in cellular spheroids // Cancer Chemother. Pharmacol., 1984, V. 13, p. 131-135.

92. Nederman T., Carlsson J., Kuoppa K. Penetration of substances into tumour tissue. Model studies using saccharides, thymidine and thymidine-5%-triphosphate in cellular spheroids // Cancer Chemother. Pharmacol., 1988, V. 22, p. 21-25.

93. Nederman T., Carlsson J., Malmqvist M. Penetration of substances into tumor tissue a methodological study on cellular spheroids // In Vitro, 1981, V. 17, p. 290-298.

94. Nederman T. Effects of vinblastine and 5-fluorouracil on human glioma and thyroid cancer cell monolayers and spheroids // Cancer Res., 1984, V. 44, p. 254-258.

95. Nicolai H., Steinbach P., Knuechel-Clarke R. et al. Proliferation of tumor spheroids after shock-wave treatment // J. Cancer. Res. Clin. Oncol., 1994, V. 120, p. 438-41.

96. Ohtsuka T., Buchsbaum D., Oliver P., Makhija S., Kimberly R., Zhou T. Synergistic induction of tumor cell apoptosis by death receptor antibody and chemotherapy agent through JNK/p38 and mitochondrial death pathway // Oncogene, 2003, V.22, p.2034-2044.

97. Olive P.L., Banath J.P. Multicell spheroid response to drugs predicted with the comet assay // Cancer Res., 1997, V. 57, p. 5528-33.

98. Olive P.L., Banath J.P., Evans H.H. Cell killing and DNA damage by etoposide in Chinese hamster V79 monolayers and spheroids: influence of growth kinetics, growth environment and DNA packaging // Br. J. Cancer, 1993, V. 67, p. 522-30.

99. Olive P.L., Durand R.E., Banath J.P. et al. Etoposide sensitivity and topoisomerase II activity in Chinese hamster V79 monolayers and small spheroids // Int. J. Radiat. Biol., 1991, V. 60, p. 453-66.

100. Olive P.L., Durand R.E. Drug and radiation resistance in spheroids: cell contact and kinetics // Cancer Metastasis Rev., 1994, V. 13, p. 121-38.

101. Omura M., Torigoe S., Kubota N. SN-38, a metabolite of the camptothecin derivative CPT-11, potentiates the cytotoxic effect of radiation in human colon adenocarcinoma cells grown as spheroids // Radiother. Oncol., 1997, V. 43, p. 197-201.

102. Ovcharenko D., Kelnar K., Johnson C., Leng N., Brown D. Genome-scale microRNA and small interfering RNA screens identify small RNA modulators of TRAIL-induced apoptosis pathway // Cancer Res., 2007, V. 67, p. 10782-10788.

103. Ozoren N., Fisher M. J., et al. Homozygous deletion of the death receptor DR4 gene in a nasopharyngeal cancer cell line is associated with TRAIL resistance // Int. J. Oncol., 2000, V. 16(5), p. 917-925.

104. Pai S.I., Wu G.S. et al. Rare loss-of-function mutation of a death receptor gene in head and neck cancer // Cancer Res., 1998, V. 58(16), p. 35133518.

105. Pan G., O'Rourke K., et al. The receptor for the cytotoxic ligand TRAIL // Science, 1997, V. 276(5309), p. 111-113

106. Panner A., James C. D., Berger M. S., Pieper R. O. mTOR controls FLIPS translation and TRAIL sensitivity in glioblastoma multiforme cells // Mol. Cell Biol., 2005, V. 25, p. 8809-8823.

107. Paulovich A.G., Toczyski D.P. and Hartwell L.H. When checkpoints fail //Cell, 1997, V. 88, p. 315-321.

108. Pe'er J., Shweiki D., Itin A. et al. Hypoxia-induced expression of vascular endothelial growth factor by retinal cells is a common factor in neovascularizing ocular diseases // Lab. Invest., 1995, V. 72, p. 638-45.

109. Petersen S.L., Wang L., Yalcin-Chin A., Li L., Peyton M., Minna J., Harran P., Wang X. Autocrine TNFalpha signaling renders human cancer cells susceptible to Smac-mimetic-induced apoptosis // Cancer Cell, 2007, V. 12, p. 445-456.

110. Phillips R.M., de la Cruz A., Traver R.D. et al. Increased activity and expression of NAD(P)H:quinone acceptor oxidoreductase in confluent cell cultures and within multicellular spheroids // Cancer Res., 1994, V. 54, p. 3766-71.

111. Pitti R.M., Marsters S.A. et al. Induction of apoptosis by Apo-2 ligand, a new member of the tumor necrosis factor cytokine family // J. Biol. Chem., 1996, V. 271(22), p. 12687-12690.

112. Polyak K., Lee M.H., Erdjument-Bromage H., Koff A., Roberts J.M., Tempst P., Massague J. Cloning of p27Kipl, a cyclin-dependent kinase inhibitorand a potential mediator of extracellular antimitogenic signals // Cell, August 1994, V. 78(1), p. 59-66.

113. Raff M.C. Social controls on cell survival and cell death // Nature, 1992, V. 356, p. 397-400.

114. Ravi R., Bedi G. C., Engstrom L. W., Zeng Q., Mookerjee B., Gelinas

115. C., Fuchs E. J., Bedi A. Regulation of death receptor expression and TRAIL/Apo2L-induced apoptosis by NF-kappaB // Nat. Cell Biol., 2001, V. 3, p. 409-416.

116. Ray S., Almasan A. Apoptosis induction in prostate cancer cells and xenografts by combined treatment with Apo2 ligand/tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand and CPT-11 // Cancer Res., 2003, V. 63, p. 4713-4723.

117. Reddy N.M., Lange C.S. Serum, trypsin, and cell shape but not cell-to-cell contact influence the X-ray sensitivity of Chinese hamster V79 cells in monolayers and in spheroids // Radiat Res., 1991, V. 127, p. 30-35.

118. Ricci M.S., Jin Z., Dews M., Yu D., Thomas-Tikhonenko A., Dicker

119. D. T., El-Deiry W. S. Direct repression of FLIP expression by c-myc is a major determinant of TRAIL sensitivity // Mol. Cell Biol., 2004, V. 24, p. 8541-8555.

120. Richards E.H., Hickey E., Weber L. and Master J.R. Effect ofoverexpression of the small heat shock protein HSP27 on the heat and drugsensitivities of human testis tumor cells // Cancer Res., 1996, V. 56, p. 2446-2451.no

121. Rokhlin O.W., Taghiyev A.F., Guseva N.V., Glover R.A., Chumakov P.M., Kravchenko J.E., Cohen M.B. Androgen regulates apoptosis induced by TNFR family ligands via multiple signaling pathways in LNCaP // Oncogene, 2005? V. 24(45), p. 6773-6784.

122. Rosato R.R., Dai Y., Almenara J.A., Maggio S.C., Grant S. Potent antileukemic interactions between flavopiridol and TRAIL/Apo2L involve flavopiridol-mediated XIAP downregulation // Leukemia, 2004, V. 18, p. 17801788.

123. Rottmann S., Wang Y., Nasoff M., Deveraux Q. L., Quon K. C. A TRAIL receptor-dependent synthetic lethal relationship between MYC activation and GSK3beta/FBW7 loss of function // Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 2005, V. 102, p. 15195-15200.

124. Roue G., Perez-Galan P., Lopez-Guerra M., Villamor N., Campo E., Colomer D. Selective inhibition of IkappaB kinase sensitizes mantle cell lymphoma B cells to TRAIL by decreasing cellular FLIP level // J. Immunol., 2007, V. 178, p. 1923-1930.

125. Safa A.R., Day T.W., Wu C.H. Cellular FLICE-like inhibitory protein (C-FLIP): a novel target for cancer therapy // Curr. Cancer Drug Targets, 2008, V. 8, p. 37-46.

126. Sakata K., Kwok T.T., Murphy B.J. et al. Hypoxia-induced drug resistance: comparison to P-glycoprotein-associated drug resistance // Br. J. Cancer, 1991, V. 64, p. 809-14.

127. Saotome K., Morita H., Umeda M. Cytotoxicity test with simplified crystal violet staining method using microtitre plates and its application to injection drugs // Toxicol. In Vitro, 1989, V. 3, p. 317-321.

128. Schneider P., Thome M., Burns K., Bodmer J. L., Hofmann K., Kataoka T., Holler N., Tschopp J. TRAIL receptors 1 (DR4) and 2 (DR5) signal FADD-dependent apoptosis and activate NF-kappaB // Immunity, 1997, V. 7, p. 831-836.

129. Shankar S., Chen X., Srivastava R. K. Effects of sequential treatments with chemotherapeutic drugs followed by TRAIL on prostate cancer in vitro and in vivo // Prostate, 2005, V. 62, p. 165-186.

130. Sherr C.J. and Roberts J.M. Inhibitors of mammalians G1 cyclin-dependent kinases // Genes Dev., 1995, V. 9, p. 1149-1163.

131. Shin M.S., Kim H.S. et al. Mutations of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1 (TRAIL-R1) and receptor 2 (TRAIL-R2) genes in metastatic breast cancers // Cancer Res., 2001, V. 61(13), p. 4942-4946.

132. Shweiki D., Neeman M., Itin A. et al. Induction of vascular endothelial growth factor expression by hypoxia and by glucose deficiency in multicell spheroids: implications for tumor angiogenesis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995, V. 92, p. 768-72.

133. Siegmund D., Klose S., Zhou D., Baumann B., Roder C., Kalthoff H., Wajant H., Trauzold A. Role of caspases in CD95L- and TRAIL-induced non-apoptotic signalling in pancreatic tumour cells // Cell Signal., 2007, V. 19, p. 1172-1184.

134. Skladanowski A., Plisov S.Y., Konopa J. et al. Inhibition of DNA topoisomerase II by imidazoacridinones, new antineoplastic agents with strong activity against solid tumors // Mol. Pharmacol., 1996, Y. 49, p. 772-80.

135. Solovieva M.E., Solovyev V.V., Kudryavtsev A.A., Trizna Y.A., Akatov V.S. Vitamin B12b enhances the cytotoxicity of dithiothreitol // Free Radic. Biol. Med., 2008, V. 44(10), p. 1846-56.

136. Song J.J., Lee Y. J. Differential cleavage of Mstl by caspase-7/-3 is responsible for TRAIL-induced activation of the MAPK superfamily // Cell Signal., 2008, V. 20, p. 892-906.

137. St Croix B., Rak J.W., Kapitain S. et al. Reversal by hyaluronidase of adhesion-dependent multicellular drug resistance in mammary carcinoma cells // J. Natl. Cancer Inst., 1996, V. 88, p. 1285-96.

138. St Croix B., Kerbel R.S. Cell adhesion and drug resistance in cancer // Curr Opin. Oncol., 1997, V. 9, p. 549-56.

139. St Croix B.S., Florenes V.A., Rak J.W., Flanangan M., Bhattacharya N., Slingerland J.M. and Kerbel R.S. Impact of the cyclin-dependent kinase inhibitor p27Kipl on resistance of tumor cells to anticancer agents // Nature Med., 1996, V. 2, p. 1204-1210.

140. Sutherland R.M., Sordat B., Bamat J. et al. Oxygenation and differentiation in multicellular spheroids of human colon carcinoma // Cancer Res., 1986, V. 46, p. 5320-9.

141. Suzuki K., Hiroaki H., Kohda D., Tanaka T. An isoleucine zipper peptide forms a native-like triple stranded coiled coil in solution // Protein Eng., 1998, V. 11(11), p. 1051-1055.

142. Takeda K., Hayakawa Y., et al. Involvement of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand in surveillance of tumor metastasis by liver natural killer cells //Nat. Med., 2001, V. 7(1), p. 94-100.

143. Vanoosten R.L., Moore J.M., Ludwig A.T., Griffith T.S. Depsipeptide (FR901228) enhances the cytotoxic activity of TRAIL by redistributing TRAIL receptor to membrane lipid rafts // Mol. Ther., 2005, V. 11, p. 542-552.

144. Vaux D.L., Silke J. IAPs, RINGs and ubiquitylation // Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 2005, V. 6, p. 287-297.

145. Vogler M., Durr K., Jovanovic M., Debatin K. M., Fulda S. Regulation of TRAIL-induced apoptosis by XIAP in pancreatic carcinoma cells // Oncogene, 2007, V. 26, p. 248-257.

146. Vucic D., Fairbrother W.J. The inhibitor of apoptosis proteins as therapeutic targets in cancer // Clin. Cancer Res., 2007, V. 13, p. 5995-6000.

147. Wagner K.W., Punnoose E.A. et al. Death-receptor O-glycosylation controls tumor-cell sensitivity to the proapoptotic ligand Apo2L/TRAIL // Nat. Med., 2007, V. 13(9), p. 1070-1077.

148. Wajant H. Targeting the FLICE Inhibitory Protein (FLIP) in cancer therapy // Mol. Interv., 2003, V. 3, p. 124-127.

149. Walczak H., Degli-Esposti M. A. et al. TRAIL-R2: a novel apoptosis-mediating receptor for TRAIL // EMBO J., 1997, V. 16(17), p. 53865397.

150. Waleh N.S., Brody M.D., Knapp M.A. et al. Mapping of the vascular endothelial growth factor-producing hypoxic cells in multicellular tumor spheroids using a hypoxia-specific marker // Cancer Res., 1995, V. 55, p. 6222-6226.

151. Wang S. The promise of cancer therapeutics targeting the TNF-related apoptosis-inducing ligand and TRAIL receptor pathway // Oncogene, 2008, V. 27(48), p. 6207-6215.

152. Wang Y., Engels I.H., Knee D. A., Nasoff M., Deveraux Q. L., Quon K. C. Synthetic lethal targeting of MYC by activation of the DR5 death receptor pathway // Cancer Cell, 2004, V. 5, p. 501-512.

153. Watanabe M., Suzuki K., Kodama S. et al. Normal human cells at confluence get heat resistance by efficient accumulation of hsp72 in nucleus // Carcinogenesis, 1995, V. 16, p. 2373-80.

154. Weinberg R.A. E2F and cell proliferation: a world turned upside down Cell, 1996, V. 85, p. 457-459.

155. West C.M., Moore J.V. Flow cytometric analysis of intracellular hematoporphyrin derivative in human tumor cells and multicellular spheroids // Photochem. Photobiol., 1989, V. 50, p. 665-669.

156. Wigle J.C., Sutherland R.M. Increased thermoresistance developed during growth of small multicellular spheroids // J. Cell Physiol., 1985, V. 122, p. 281-9.

157. Wiley S.R., Schooley K. et al. Identification and characterization of a new member of the TNF family that induces apoptosis // Immunity, 1995, V. 3(6), p. 673-682.

158. Yuhas J.M., Li A.P., Martinez A.O. et al. A simplified method for production and growth of multicellular tumor spheroids // Cancer Res., 1977, V. 37, p. 3639-3643.

159. Zambon A.C. Use of the Ki67 promoter to label cell cycle entry in living cells // Cytometry A, 2010, V. 77, p. 564-70.

160. Zauli G., Sancilio S., Cataldi A., Sabatini N., Bosco D., Di Pietro R. PI-3K/Akt and NF-kappaB/IkappaBalpha pathways are activated in Jurkat T cells in response to TRAIL treatment // J. Cell Physiol., 2005, V. 202, p. 900-911.

161. Zhang H.G., Wang J., Yang X., Hsu H. C., Mountz J.D. Regulation of apoptosis proteins in cancer cells by ubiquitin // Oncogene, 2004, V. 23, p. 20092015.

162. Zhang X.D., Borrow J.M., Zhang X.Y., Nguyen T., Hersey P. Activation of ERK1/2 protects melanoma cells from TRAIL-induced apoptosis by inhibiting Smac/DIABLO release from mitochondria // Oncogene, 2003, V. 22, p. 2869-2881.