Ресурсосберегающая малоотходная технология биосинтеза антибиотика тобрамицина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Махортов, Владимир Леонидович

• Махортов, Владимир Леонидович
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Махортов, Владимир Леонидович

ВВЕДЕНИЕ

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1 Ресурсосберегающие малоотходные технологии в производстве антибиотиков - актуальная задача биотехнологии.

1.1 Основные направления разработки малоотходных технологий биосинтеза аминогликозидных антибиотиков.

1.2 Анализ применяемых способов утилизации твердых отходов микробиологических производств.

1.2.1 Использование твердых отходов для технических целей.

1.2.2 Применение твердых отходов в сельском хозяйстве в качестве кормовых добавок.

1.2.3 Переработка и утилизация твердых отходов методом биотермического обезвреживания (компостирования).

1.2.4 Использование твердых отходов и продуктов их переработки в качестве компонентов питательных сред при культивировании микроорганизмов.

II СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2 Материалы и методы.

2.1 Характеристика штамма-продуцента.

2.2 Питательные среды и растворы.

2.3 Методы.

3 Разработка ресурсосберегающей малоотходной технологии биосинтеза тобрамицина.

3.1 Изучение возможности использования гидролизатов мицелиальных отходов в качестве компонентов питательных сред.

3.1.1 Получение гидролизатов мицелиальных отходов и приготовление на их основе питательных сред.

3.1.2 Изучение влияния питательных сред, содержащих гидролизаты мицелиальных отходов, на способность Streptomyces cremeus subsp. tobramycini (штамм 9871) синтезировать небрамициновый комплекс.

3.2 Разработка лабораторной технологии биосинтеза тобрамицина с использованием ферментативных гидролизатов мицелиальных отходов.

3.3 Разработка ресурсосберегающей малоотходной технологии биосинтеза тобрамицина в ферментерах.

3.4 Наработка экспериментальных образцов и оценка воспроизводимости разработанной малоотходной технологии биосинтеза тобрамицина.

3.5 Экономическая эффективность разработанной технологии.

III ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

IV ВЫВОДЫ.

V СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

VI РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ресурсосберегающая малоотходная технология биосинтеза антибиотика тобрамицина»

В обеспечении эффективного лечения населения от инфекционных заболеваний, в том числе от опасных и особо опасных инфекций, важное место занимают антибиотические средства. Роль их значительно повышается при осложнении санитарно-эпидемической обстановки и ликвидации вспышек инфекционных заболеваний. Особое значение в расширении номенклатуры про-тивомикробных лекарственных средств имеет дальнейшее развитие производства антибиотиков, основанного на отечественных технологиях, сырье и обору; довании [3, 84].

Значительное место в борьбе с инфекционными заболеваниями отводится препаратам, относящимся к классу аминогликозидов. Данная группа антибиотиков обладает широким спектром антибактериального действия в отношении основных представителей грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Сходство структуры аминогликозидов определяет близкие свойства препаратов: антимикробное действие, фармакокинетические и токсические признаки. В терапевтических концентрациях они подавляют рост Е. coli, Salmonella, Shigella, Brucella, Versinia, Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Serratic, Staphylococcus и др. Наибольшее практическое значение среди современные биосинтетических аминогликозидов имеют тобрамицин, гентамицин и сизоми-цин. Установлена высокая эффективность аминогликозидов при лечении гнойно-воспалительных процессов различной локализации: перитонита, сепсиса, послеоперационных нагноений, гнойных процессов мягких тканей, заболеваний органов дыхания [6,19,56,114].

Из всего ряда аминогликозидов в бывшем СССР был организован промышленный выпуск стрептомицина, канамицина, гентамицина, неомицина и сизомицина, тогда как производство тобрамицина не налажено и в настоящее время. Кроме того, общий уровень производства аминогликозидов за последние 8 лет снизился в России более чем в четыре раза [27,76,93]. При этом основная масса лекарственных препаратов выпускается из импортных субстанций.

Анализ технологических схем получения аминогликозидных антибиотиков, и в частности тобрамицина [63,74,109], позволяет выделить следующие основные особенности их производства:

- многостадийность процесса биосинтеза; высокие затраты сырьевых ресурсов, причем наибольшая доля расходуемого сырья приходится на стадию ферментации, поскольку выращивание продуцентов осуществляется с применением питательных сред, содержащих до 20-25 % сухих веществ [20];

- использование в качестве инградиентов питательных сред в значительном количестве органических продуктов, в частности пищевых, таких как глюкоза, крахмал, соевая мука и жиры;

- получаемые в результате ферментации культуральные жидкости, содержащие целевые продукты - антибиотики в концентрации, как правило, не более 1,5-2,0 %, представляют собой сложные многофазные системы, включающие наряду с клетками микроорганизмов непотребленные компоненты питательных сред, а также продукты метаболизма выращиваемых продуцентов; выделение и очистка готового продукта из культуральной жидкости, сопровождающаяся образованием большого количества как жидких, так и твердых отходов производства, в том числе и мицелиальных.

В 1992 году было издано распоряжение Правительство РФ № 1463-р " О создании на базе Центра ВТП БЗ производственных мощностей по выпуску антибиотиков аминогликозидного ряда". Планируемый промышленный выпуск аминогликозидных антибиотиков влечет за собой образование большого количества твердых мицелиальных отходов. В этой связи представляется необходимым выбор экономически выгодных и экологически целесообразных способов их утилизации.

Применяемые методы утилизации твердых отходов не всегда соответствуют требованиям как по технико-экономическим, так и по экологическим показателям. С экономической точки зрения, уничтожение твердых отходов микробиологических производств, являющихся богатейшим потенциальным источником белковых веществ (до 75 %), углеводов (до 50 %), липидов (до 20 %), а также свободных аминокислот и нуклеиновых кислот, является неоправданным [28,34].

Сложность осуществления переработки твердых отходов заключается чаще всего в технико-экономической нецелесообразности - дорогостоящее аппаратурное оформление - или в санитарных ограничениях. Так, например, в настоящее время для переработки твердых отходов, в том числе и мицелиальных, получил широкое распространение за рубежом способ компостирования, который начинает распространяться и в России [80]. Однако ограничением для распространения данного способа утилизации является необходимость достаточно большого пространства для приготовления буртов или приобретения специально предназначенных ферментеров с искусственно создаваемыми условиями.

Другим возможным направлением утилизации твердых отходов является их использование в сельском хозяйстве. Так, проведенные в 80-90-е годы прошлого века исследования подтверждают эффективность использования биомассы продуцентов гризеофульвина, олеандомицина, пенициллина, рибоксина, гентамицина в качестве корма, пищевых добавок, стимуляторов роста для пушных зверей [75,77], а также мицелиальных отходов производства тетрациклина и хлортетрациклина в промышленном птицеводстве. Мицелий продуцента тетрациклина, применяемый при выращивании цыплят, повышал сохранность и продуктивность бройлеров, что явилось основанием для рекомендации его использования в ветеринарной практике [29,30].

Однако одним из факторов, сдерживающих применение мицелиальных отходов при приготовлении кормов для сельскохозяйственных животных, является их низкая усвояемость, а также остаточное содержание антибиотиков медицинского назначения [75].

Более перспективным представляется использование твердых отходов в качестве компонентов питательных сред, применяемых при микробиологическом синтезе [5,16,62,96,103]. Так, сотрудниками ВНИИА проводились исследования по использованию мицелиальных отходов производства различных антибиотиков в составе ферментационных питательных сред для биосинтеза антибиотиков [58]. Авторы пришли к выводу, что по химическому составу мице-лиальные отходы являются полноценными источниками азота и вполне сравнимы с соевой мукой и кукурузным экстрактом. Показана возможность использования отработанного мицелия в составе ферментационных питательных сред для биосинтеза пенициллина, стрептомицина, тетрациклина и линкомицина.

Коллективом авторов Санкт-Петербурского государственного технологического института (Технического университета) разработана новая питательная среда для культивирования продуцента тетрациклина, содержащая в качестве источника азота ферментативный гидролизат мицелиальных отходов производства тетрациклина. Использование такой среды для биосинтеза тетрациклина позволило полностью исключить из состава среды кукурузный экстракт, увеличить выход тетрациклина, эффективно утилизировать отработанные мицели-альные отходы, значительно сократить их выбросы в окружающую среду [52].

В связи с вышеизложенным представляются актуальными исследования, направленные на разработку ресурсосберегающих малоотходных технологий производства аминогликозидных антибиотиков.

Цель и задачи работы. Целью настоящих исследований является разработка ресурсосберегающей малоотходной технологии биосинтеза антибиотика тобрамицина.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- анализ применяемых способов утилизации твердых отходов микробиологических производств;

- изучение возможности использования гидролизатов мицелиальных отходов в качестве компонентов питательных сред при производстве тобрамицина;

- разработка лабораторной технологии биосинтеза тобрамицина с использованием ферментативных гидролизатов мицелиальных отходов

- разработка ресурсосберегающей малоотходной технологии биосинтеза тобрамицина в ферментерах;

- наработка экспериментальных образцов и оценка воспроизводимости разработанной малоотходной технологии биосинтеза тобрамицина;

- оценка экономической эффективности разработанной технологии.

Научная новизна работы заключается в том, что на основе экспериментальных исследований впервые в отечественной практике показана возможность использования различных видов гидролизатов мицелиальных отходов производства тобрамицина в качестве компонентов питательных сред при культивировании. Streptomyces cremeus subsp. tobramicyni - продуцента небрамици-нового комплекса, подобраны оптимальные условия получения гидролизатов и составы питательных сред.

Практическая ценность работы заключается в том, что разработанная ресурсосберегающая малоотходная технология биосинтеза тобрамицина позволяет получать культуральную жидкость с антибиотической активностью не менее 1000 мкг см"3 с преобладанием карбамоилтобрамицина, полностью утилизировать мицелиальные отходы со стадии выделения, а также использовать побочный продукт биосинтеза - апрамицин в ветеринарной практике.

Рекомендации и разработки по данной проблеме предполагается использовать в практической работе по созданию промышленного производства антибиотика тобрамицина.

Реализация работы. По результатам исследований разработан комплект нормативной документации, необходимой для лабораторного производства и оценки качества субстанции тобрамицина основания:

1. Лабораторный регламент на производство субстанции тобрамицина основания ЛР 42-08179493-082-00, инв. № Д-461, 2000 г.

2. Лабораторный регламент на производство тобрамицина сульфата для инъекций 0,08 г ЛР 42-08179493-089-01, инв. № Д-524, 2001 г.

3. Сборник методик по контролю процесса производства и оценке качества субстанции тобрамицина основания СТП-ОА-209 - 227-00, инв. № 148 / И-М. 2000 г.

Научные положения, выносимые на защиту:

Разработанная ресурсосберегающая малоотходная технология биосинтеза тобрамицина позволяет воспроизводимо получать культуральную жидкость с антибиотической активностью не ниже регламентной и полностью утилизировать мицелиальные отходы.

Полученные по разработанной технологии экспериментальные образцы субстанции тобрамицина и апрамицина сульфата полностью отвечают требованиям нормативных документов.

Диссертация изложена на 121 странице машинописного текста, иллюстрирована 12 рисунками, 28 таблицами, состоит из перечня обозначений и сокращений, введения, обзора литературы, собственных исследований с включением материалов и методов исследований и экономической эффективности разработанной технологии, обсуждения результатов, выводов, практических предложений и рекомендаций по использованию научных выводов. Библиографический список содержит 119 источников, включая работы отечественных и зарубежных авторов.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Махортов, Владимир Леонидович

ВЫВОДОВ

1. При разработке промышленной технологии получения субстанции тобрамицина рекомендуется осуществлять биосинтез антибиотика культурой Streptomyces cremeus subsp. tobramicyni (штамм 9871) с использованием питательных сред на основе ферментативного гидролизата мицелиальных отходов собственного производства.

2. Субстанцию тобрамицина, получаемую по разработанной технологии, рекомендуется использовать для приготовления готовых лекарственных форм.

3. Апрамицина сульфат, выделяемый в качестве побочного продукта в виде водорастворимого порошка, рекомендуется использовать в ветеринарной практике для лечения желудочно-кишечных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных и птицы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Махортов, Владимир Леонидович, 2004 год

1. А.С. № 1476898А2 СССР от 3 января 1989 г. Штамм актиномицета Streptomyces cremeus subsp. tobramycini продуцент антибиотиков не-брамицинового комплекса / Преображенская Т.П., Лапчинская О.А., Синягина О.П. и др.

2. Агрохимические методы исследования почв. М.: Наука., 1975.

3. Алазов А.Н. Ситуация на российском рынке лекарств / Алазов А.Н. // Медицинский курьер. 1997. - № 2 (3). - С. 24-25.

4. Ашмарин И.Г. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.Г. Ашмарин, H.JI Воробьев. Л., 1962.

5. Баранова И.П. Применение ферментных гидролизатов биомассы микроорганизмов в средах для культивирования Str. Lactis, продуцента низина / Баранова И.П., Егоров Н.С., Головкина Г.П., Григорян А.Н. // Антибиотики. 1980. - № 10. - С. 735-738.

6. Бережинская В.В. Экспериментальные и клинические данные об ото-токсических свойствах антибиотиков аминогликозидов (аминоцик-литолов) / Бережинская В.В., Долгова Г.В., Эйромаджанц А.А. и др. // Антибиотики. - 1983. - № 3. - С. 58-67.

7. Васильев П.С. Современные кровозаменители / Васильев П.С., Сузда-лева В.В., Неклюдов А.Д. и др. М., 1980. - С. 28-43.

8. Великая Е.И. Лабораторный практикум по курсу общей технологии бродильных производств (общие методы контроля) / Великая Е.И., Суходол В.Ф. М., 1983.

9. Влияние макро- и микроэлементов на биосинтез тобрамицина на синтетической среде / М.О. Моткова, Т.Н. Дробышева, Е.Г. Гладких // Антибиотики. 1982. - №10. - С. 24-28.

10. Временная фармакопейная статья 42-2011-90. Тобрамицин. Введ. 25.10.1990.

11. Гиляров М.С. Зоологические методы компостирования органических отходов / Гиляров М.С.// Весник АН СССР. 1982. - № 9. - С. 80-83.

12. Государственная фармакопея СССР. XI изд.- М., 1989. Вып. 1. - 1990. - Вып. 2.

13. Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа. XI изд,-М., 1987. - Вып. 1.

14. Государственная фармакопея СССР. Общие методы исследований. Лекарственное растительное сырье XI изд.- М., 1990. - Вып. 2.

15. Григорян А.Н. Биотехнология и биоинженерия / Григорян А.Н., Голе вина Г.П // Сб. науч. ст. Рига, 1978. - № 2. - С. 56-57.

16. Добжицкий Я. Химический анализ в сахарном производстве / Я. Доб-жицкий М., 1985.

17. Евтушенко Н.С. Современное состояние анализа и стандартизация аминогликозидных антибиотиков / Евтушенко Н.С., Кудрявцева М.П // Фармация. 1988. - № 5. - С. 79-82.

18. Егоров Н.С. Учение об антибиотиках / Н.С. Егоров. М., 1994.

19. Жуковская С.А. Определение фильтрационных характеристик культу-ральных жидкостей продуцентов антибиотиков / Жуковская С.А., Линькова О.С. // Антибиотики. 1975. - № 3. - С. 217-221.

20. Забокрицкий А.Н. Хранение продуцента тобрамицина в лиофилизиро-ванном состоянии / Забокрицкий А.Н., Сапожникова О.Н., Махортов В.Л. и др. // Вестник уральской медицинской академической науки. -2003.-№ 1.-С. 63-65.

21. Замена кукурузного экстракта мицелием при ферментации пенициллина / Орлов И.А, Березовская А.И., Соколовская А.Е. и др. // Антибиотики. 1970. - № 12. - С. 1067.

22. Иванов И.А. Утилизация некоторых отходов антибиотиков в бетоне и железобетонных конструкциях / Иванов И.А., Калашников В.И., Григорьев А.В. // Хим.-фарм. журнал. 1983. - № 6. - С. 1031-1033.

23. Инструкция по приготовлению питательной среды / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. 1986. - Арх. ЦВТП БЗ. - Инв. № Д-154.

24. Использование мицелиальных отходов в качестве добавки при производстве гранулированных активных углей / Якубова А.Р., Лагунов

25. B.М., Файнгольд З.Л. и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1995. -Т. 40. -№5.-С. 35-37.

26. Использование мицелиальных отходов производства медицинских препаратов / Пономарева Л.В., Янкевич М.И., Яковлев В.И. и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1990. - Т. 35. - № 2. - С. 43-45.

27. Карпухин В.Ф. Биотехнология / В.Ф. Карпухин- М., 1985.

28. Карпухин В.Ф. Разработка и утилизация мицелиальных отходов / Карпухин В.Ф., Крымский М.В., Линькова О.С. // Успехи в области изучения и производства антибиотиков: Труды ВНИИА. М., 1982. - Вып. XI.-С. 85-91.

29. Кейлер В.А. Экономика предприятия / В.А Кейлер. М., 2001.

30. Коржова Л.П. Динамика реакции и свойства мелоноидов, образующихся при взаимодействии глицеринового альдегида с глицином / Коржова Л.П., Романов Ю.А // Прикладная биохимия и микробиология. 1979. - Т. 15, № 4. - С. 585-588.

31. Крестьянинова И. Н. Ферментные препараты для изучения белковых гидролизатов и смесей аминокислот, не содержащих пептидов / Крестьянинова И. Н., Васильева Л.И., Денякина Е.К. и др. // Прикл. био-хим. и микробиол. 1985. - Т. 21, вып. 1. - С. 48-57.

32. Крымский М.Б. Малоотходная технология и охрана окружающей среды на предприятиях Медпрома / Крымский М.Б., Карпухин В.Ф. // Тез. докл. Всесоюз. симп. М., 1981. - С. 53-54.

33. Кудрявцев P.M., Страшненко Е.С., Волков Е.Н. // Труды ВНИИ консервной и овощной промышленности. М., 1972. - № 16. - С. 38-41.36. .Кучеренко Н.Е. Биохимия: Практикум / Н.Е. Кучеренко Ю.Д., Бабе-нюк., А.Н. Васильев и др. Киев, 1988.

34. Кушманова О.Д. Руководство к практическим занятиям по биологической химии / О.Д. Кушманова, Г.М. Ивченко М., 1974.

35. Лабораторный регламент на получение апрамицина сульфата / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2001. - Архив ЦВТП БЗ. - Инв. № Д-520.

36. Лабораторный регламент на производство субстанции тобрамицина основания / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2000 г. - Архив ЦВТП БЗ.-Инв.№ Д-461.

37. Лабораторный регламент на производство тобрамицина сульфата для инъекций 0,08 г / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ, 2001,- Архив ЦВТП БЗ. 7 Инв.№ Д-524.

38. Мадер X. Апралан антибиотик нового поколения / Мадер X. // Ветеринария. - 1994. - №6. - С. 31-32.

39. Матвеев В.Е. Изучение кинетики гидролиза дрожжей БВК / Матвее" В.Е., Роговер B.C., Зайцев З.М., Молчков B.C. // Хим. фарм. журн. -1984. - Т. 18, № 12. - С. 1499-1503.

40. Матвеев В.Е. Разрушение аминокислот в растворе при нагревании / Матвеев В.Е., Скворцов Г.Е., Куян Н.Б.// Биотехнология. 1986. - № 1. - С.53-55.

41. Махортов B.JI. Современное состояние и перспективы производства новых антибиотиков в Российской Федерации / Махортов B.JL, Литу-сов Н.В., Михайлов В.А. и др. // Медицина Урала. 2003. - В печати.

42. Михайлов В.А. Разработка технологии выделения и очистки гентами-цина из культуральной жидкости: Дис. . канд. Техн. наук: 02.00.03 / В.А. Михайлов; Уральский гос. Ун-т. Екатеринбург, 1996. - 180 с.

43. Михайлов В.А. Разработка усовершенствованной технологии получения субстанции тобрамицина / Михайлов В.А., Садовой Н.В., Махортов В.Л. // Сб. науч. тр. / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2000. - 178 с.

44. Мицелиальные отходы производства пенициллина как компонента клея /. Кадималиев Д.А,. Ревин В.В,. Ватолин А.К. и др. // Антибиотики и химиотерапия. 2002. - Т. 47. - № 12. - С. 3-5.

45. Мицелиальные отходы производства тетрациклина как компонент питательной среды / Пономарева JI.B.,. Яковлев В.И., Цветкова Н.П. и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1999. - С. 11-13.

46. Моткова М.О. Оптимизация состава питательной среды для биосинтеза антибиотика тобрамицина с помощью математического метода планирования эксперимента / Моткова М.О., Коробкова Т.Д., Гладких Е.Г // Антибиотики. 1981,- № 9. - С. 651-654.

47. Навашин С.М. Справочник по антибиотикотерапии. / Навашин С.М. -М., 1984.

48. Навашин С.М. Экологические аспекты в производстве антибиотиков и химико-фармацевтических препаратов / Навашин С.М., Карпухин В.Ф. // Тез. Докл. Пенза, 1989. - С. 3-4.

49. Навашин С.М. Антибиотики группы аминогликозидов / С.М. Навашин, И.П. Фомина, Ю.О. Сазыкин М., 1977.

50. Неклюдов А.Д. Получение белковых гидролизатов с заданными свойствами / Неклюдов А.Д., Навашин С.М. // Прикладная биохимия и микробиология. 1986. - Т. 21, вып. 1. - С 3-17.

51. Новикова JI.M. Использование мицелиальных отходов производства антибиотиков в составе ферментационных сред для биосинтеза антибиотиков / Новикова JI.M. // Новые источники сырья для производства антибиотиков: Тез. докл. Всесоюз. совещ. М., 1981. - С.23.

52. Новые источники сырья: Сб. науч. тр. М., 1981.

53. О влиянии углеводов на возможность утилизации отходов производства антибиотиков в строительной индустрии / Тараканов О.В., Калашников В.И., Крымский М.В. и др. // Антибиотики и химиотерапия. -1989. Т. 34. - № 8. - С. 606-609.

54. Об использовании мицелиального жира Penicillium nigricans в качестве источника углеродного питания при биосинтезе антибиотиков / Иофина Э.И., Козлова Г.В., Кузнецова О.С. и др. // Антибиотики. -1968.-№1.-С. 37-40.

55. Опытно-промышленный регламент на получение антибиотика тобрамицина основания / ОХЗ. Омутнинск, 1989. - Архив ЦВТП БЗ. - Инв. №№2-200,2-201,2-205.

56. Опытно-промышленный регламент на получение тобрамицина сульфата для инъекций 0,08 г / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ, 1996,-Арх. ЦВТП Б3.-Инв.№ Д-110.

57. Опытно-промышленный регламент на получение тобрамицина сульфата для инъекций 0,08 г / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ, 1996,-Арх. ЦВТП Б3.-Инв.№ Д-110.

58. Оценка возможности утилизации мицелия нетрадиционным методом. Отчет о НИР / Руководитель М.Д. Гурьев. 1993. - Арх. ЦВТП БЗ. -Инв. № Д-109.

59. Пат. 2462597 США, НКИ/К. 260-529.

60. Перелыгин В.М. Гигиена почвы и санитарная очистка населенных мест / В.М. Перелыгин, В.В. Разнощик М., Медицина, 1987.

61. Першин С.А. Методы экспериментальной химиотерапии / С.А. Пер-шин-М. 1984.

62. Полюдов С.А. Разработка технологии утилизации мицелиальных отходов производства антибиотиков аминогликозидного ряда: Дис. . канд. биол. наук: 03.00.23 / С.А. Полюдов; Москов. гос. академ. вет. мед. и биотехн. -М, 2002.-115 с.

63. Поминальник Г.А. Накопление и сбраживание мицелия в водоемах / Поминальник Г.А. // Проблемы утилизации мицелиальных масс при микробиологическом синтезе лекарственных средств: Тез. докл. Все-союз. Симп.-М., 1981.-С. 17.

64. Попова В.А. Аминокислоты для сельского хозяйства, пищевой промышленности, здравоохранения, научных исследований / Попова В.А., Петрейкова М.М., Езерская М.Ф. // Сб. науч. ст. Фрунзе, 1981. -С. 43-44.

65. Проведение исследований по изучению кинетики процессов подготовки гидролизных сред и их биохимической переработки: Сб. науч. тр. / Ленинград. ВНИИ гидролиз. Л., 1984.

66. Производство антибиотиков / Под ред. С.М. Навашина. М., 1970.

67. Производство и применение антибиотиков в сельском хозяйстве за рубежом. ГУ микробиопром. Сер VI // Получение и применение микробиологических средств защиты растений, кормовых антибиотиков, бактериальных удобрений. М., 1982.

68. Рабкина Н. Сравнительный анализ производства и импорта медикаментов в 1996 и 1997гг. / Рабкина Н. // Фармацевтический вестник. -1997.-№19 (85).-С. 9.

69. Разработка и утверждение документации по утилизации отходов производства аминогликозидных антибиотиков (гентамицина): Отчет о НИР / АООТ НИТИАФ. Руководитель МБ. Моисеева. 1995. - Арх. ЦВТП БЗ. - Инв. № 734В.

70. Разработка опытно-промышленной технологии получения производства тобрамицина: Отчет / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Руководитель Н.В. Садовой. 1995. - Архив ЦВТП БЗ. - Инв. № Д-62.

71. Разработка технологии получения субстанции апрамицина сульфата и ее испытание в экспериментальной практике: Отчет / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2001. - Арх. ЦВТП БЗ. - Инв. № Д 521.

72. Разработка экспериментальной технологии утилизации твердых отходов производства антибиотиков аминогликозидного ряда: Отчет о НИР / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Руководитель Ю.Н. Орлов. 1997. - Арх. ЦВТП БЗ,-Инв. № 335.

73. Разработка экспериментальной технологии утилизации твердых отходов производства антибиотиков аминогликозидного ряда: Отчет / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 1998. - Арх. ЦВТП БЗ. -Инв. № 370.

74. Рассулин Ю.А. Изучение возможных путей усовершенствования промышленных гидролизатов / Рассулин Ю.А., Марданян М.М., Соковых В.Ц. и др. // Хим.-фарм. журн. 1983. - Т. 17, № 7. - С.850-855.

75. Регламент: ОПР-64-0482080 / НИИТИАФ. Арх. ЦВТП БЗ. - Инв. №0-201.

76. Россия теряет собственный рынок лекарств. Официальная хроника // Медицинский курьер. 1997. - № 2 (3). - С. 21.

77. Руководство по доклиническим методам исследования фармакологических веществ. М., 2000.

78. Сборник методик определения физико-химических показателей питательных сред / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2000. - Архип ЦВТП БЗ. - Инв. № 3/4.

79. Сборник методик по контролю качества тобрамицина / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2000. - Архив ЦВТП БЗ. - Инв. № 54 /И-М.

80. Сборник методик по контролю процесса производства и оценке качества апрамицина сульфата СТП-ОА-190-208-98 / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 1998. - Архив ЦВТП БЗ. - Инв. № Д-261.

81. Сборник методик по контролю процесса производства и оценке каче ства субстанции тобрамицина основания СТП-ОА-209-227-00 / ЦВТИ БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2000. - Архив ЦВТП БЗ. - Инв. № 148 /И-М.

82. Сборник технологических инструкций / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. -Екатеринбург, 1999. Архив ЦВТП БЗ. - Инв. № 63 /И-М.

83. Состояние производства и реализации медицинской продукции в Российской федерации в 1998 г. (ежегодный доклад Минэкономики России). М., 1999.

84. Степчков К.А. Проблемы парентерального питания / Степчков К.А. /У Сб. науч. ст. Рига, 1969. - С. 55-59.

85. Суздалева В.В. Улучшенные препараты гидролиза казеина для парентерального белкового питания / Суздалева В.В., Малахова Г.М., Васильев П.С. и др. // Пробл. гематол. и перелив, крови. 1974. - Т. 19, -С. 30-32.

86. Танькова И.Л. Возможные пути использования фугата культуральной жидкости Lactobacterium pentoaceticum для получения продуктов микробного синтеза / Танькова И.Л. Гернет М.В. Соколова И.А. // Биотехнология. 1987. - Т. 3, № 1. С. 66-68.

87. Технические условия на апрамицина сульфат (водорастворимый порошок) / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2003. - Архив ЦВТП БЗ. - Инв. № 208 /И-М.

88. Тривен М. Иммобилизованные ферменты. / Пер. с англ. В.Г. Майзеля; Под. ред. И.В. Березина. М., 1983.

89. ТУ 9296-001-00482080-93. Мицелий гентамицина сухой для пушного звероводства. Введ. 06.06.1994.

90. Утилизация мицелиальных отходов производства антибиотиков в технологии обжиговых строительных материалов / Карпухин В.Ф., Крымский М.В., Иванов И.А и др. // Антибиотики. 1981. - № 1. - С. 32-36.

91. Утилизация модифицированных отходов производства антибиотиков для получения строительных материалов / Калашников В.И., Карпухин В.Ф., Крымский М.В. и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1988. -Т. 33,-№5.-С. 339-342.

92. Утилизация отходов предприятий микробиологической промышленности методом вермикомпостирования / Жариков Г.А., Фортуков С.В., Туманский И.М. и др. // Биотехнология. 1993. - № 1. - С. 21-23.

93. Ферментативный гидролиз мицелиальных отходов производства тетрациклина / Пономарева Л.В., Пешкова И.П., Цветкова Н.П. и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1990. - № 4. - С. 42-45.

94. Физико-химические методы контроля ингредиентов, питательных сред и биопрепаратов (методическое пособие для биофабрик и ветеринарных лабораторий).- М. 1970.

95. Экспериментально-производственный регламент на биоспорин / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. 1995. - Арх. ЦВТП БЗ. - Инв. № Д-66.

96. Экспериментально-производственный регламент на получение субстанции тобрамицина основания / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. 1997. -Арх. ЦВТП БЗ. - Инв. № Д-199.

97. Экспериментально производственный регламент. Вакцина сибиреязвенная живая сухая для подкожного и скарификационного применения / ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. - 2000. - Арх. ЦВТП БЗ. - Инв. № Д-296.

98. Якубова А.Р. Исследования возможности получения сорбентов из мицелиальных отходов производства антибиотиков / Якубова А.Р., Лагунов В.М., Файнгольд З.Л. // Антибиотики и химиотерапия. 1995. -Т. 41. -№6. - С. 7-9.

99. Apralan 75 Premix // YAHOO: //www. elanco.com /products /apralan /pdf/apralan7 5 .pdf.

100. Apralan soluble powder // YAHOO: www.elanco.com/products/msds / msdsapralansolublepowder.html.

101. Dee Т.Н. Gentamicini and tobramycini penetration into synovial fluid / Dec; Т.Н., Kozin F. // Antimicrob. Ag. Chemother. 1972. - № 12. - P. 548.

102. Goedinakers A. Ecological perspectives of changing agricultural land use in the European Community / Goedinakers A. // Agr. Ecosystem Environm. 1989. Vol. 27. № 1-4. P. 99-106.

103. O. Graff Bodenzoologische Untersuchungen mit besonderer Berucksichti-gung der terrikolen Oligochaen. 1963. - bd. - 61. - S. 72-77.

104. Huhta V. Biological succession in artifical soil made of sewage sludge and crushed bark. / Huhta V., Sundman V. Washington. - 1980. - P. 119-120.

105. Gould M. Sourse separation and composting of organic municipal solid waste / Gould M., Garrison R., Foster S. // Reour. Recucl. 1992. - № l i, № 17. - P. 38, 40-45.

106. Tratamiento aprovechamiento de residuos solidos urbanos Baguero Franco Sose // Agricultura. 1992. -№ 717. - P. 310, 313-317.