Разработка способов длительного хранения спермы петухов и их использование при воспроизводстве птицы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.01, доктор сельскохозяйственных наук в форме науч. докл. Нарубина, Лидия Евгеньевна

• Нарубина, Лидия Евгеньевна
• доктор сельскохозяйственных наук в форме науч. докл.
• 1998

Заключение диссертации по теме «Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных», Нарубина, Лидия Евгеньевна

4. ВЫВОДЫ

1. Установлено, что наиболее благоприятными условиями хранения спермы (до I часа ) является хранение в закрытом флаконе при 2 - 4 °С. Для более длительного хранения спермы необходимо использование разбавителя.

2. При хорошем уровне кормления петухи обладают большим резервом в спер-мопродукции. В работе по искусственному осеменению кур можно получать от петухов по 2-3 эякулята в день, 2-й эякулят спермы петухов, полученный через 2 часа после первого , обладает такой же криоустойчтвостью ( оплодотворенность яиц от I -го эякулята - У1,3 %. от 2 -го - 87,9 % ) •

3. Разработаны синтетические среды, обеспечивающие высокие показатели рплодотворенности яиц после осеменения кур спермой петухов, храненной при плюсовой и минусовой температурах:

- разбавитель "К" (а. с. № 553973) - обеспечивает сохранение разбавленной спермы до 48-50' часов при плюсовой температуре, оплодотворенность яиц 77,8% ,[1ри хранении до одного часа - 93,8;

- разбавитель "В" (а.с. № 586908) - обеспечивает сохранение разбавленной спермы до 48-50 часов при плюсовой температуре, оплодотворенность яиц 69,1%, при хранении до ! часа - 98,2%; . ч . ■

- разбавитель "Ю" (а.с. № 1298974) - обеспечивает сохранение разбавленной спермы до 28 - 30 часов при плюсовой температуре, оплодотворенность яиц 95,3%, при хранении до 1 часа - 94,4%, после замораживания спермы - 82,7%;

- разбавитель "ЛКС -Г' (а, с. № 1130339) наиболее эффективен при криоконсер-вации спермы птиц - оплодотворенность яиц после осеменеиия деконсервировав-ной спермой в среднем была ; кур ричных -. 88,6%; мясных - (И,8%; гусей - 82,3%; уток-83,7%. ' "' ; г

4. Разработано оборудование для криокочсервации спермы птиц: ' г электронная установка для замораживания сперму в гранулах;

- криостат для замораживания биологических объектов (а. с. № 994874):

- щелевой оттаиватель гранул спермы;

- водяной оттаиватель гранул спермы.

5. Разработан способ отмывания криопротекторов из оттаянной спермы. Установлено, что постепенное отмывание криопротекторов лучше, чем одномоментное, однако, в случае использования криопротектора ДМА оплодотворенность яиц была высокой в обоих вариантах - 81,44 и 88,88%.

6. Экспериментально доказано проявление токсического действия криопротектора КЫ- диметилацетамида при взаимодействии со'спермой после оттаивания в течение I часа. ,

7. Оплодотворенность яиц кур, осемененных оттаянной спермой без удаления криопротектора и храненной 1 час, составила 56,44%, после удаления криопротектора при том же сроке хранения оплодотворенность бьша равна 80,0%.

8. Разработан способ замораживания и оттаивания спермы во флаконах с использованием криостата, оплодотворенность яиц кур (а. с. № 65662)). осемененные замороже>!.но-оттаянной спермой составила в 14 повторностях опытов от 80,0 до 94,9%. . "

9. Впервые в криобиологии экспериментально доказана возможность погружения спермы в жидкий азот с плюсовой температуры наиболее высокая активность и оплодотворяющая способность спермы наблюдалась в диапазоне температур от 5 до -5 °С (89,4 и 84,8% соответственно). Экспериментально установлены темпера

1 турные и временные режимы охлаждения спермы и взаимодействия с криопротектором ДМ А, обеспечивающие высокие показатели оплодотворенноети яиц на уровне 85,5%. *

10. Разработан способ' криоконс.ервации спермы птиц путем прямого накапыва-ння в жидкий азот в виде гранул, не имеющий аналогов в мире (а. с. № 1343587, а.с. № 15)5443). Наиболее высокая активность спермы после оттаивания (8-9 баллов) наблюдалась при разбавлении спермы средой "ЛКС-1", экспонировании в течение 40 мин. при 2-4 °С, или 15-30 мин. при -7.-12 °С, добавлении крионротек-тора ДМА 6-8% перед замораживанием и температуре в объекте перед погружением в жидкий азот от 0 до 12 "С.

11. Разработан способ опаивания гранул, обеспечивающий стекание спермы по мер* таяния с использованием оттаивателей Нашей конструкции, выявлены оптимальные температурные режимы оттаивания - от 30 до 70 °С. Впервые в криобиологии и сельскохозяйственной науке были получены самые высокие показатели оплодотворенноети яиц кур после осеменения декоисервированной спермой петухов на уровне 84,8 - 97,6 %. 6

12. Впервые в мировой практике птицеводства была осуществлена транспортировка криоконсервированной способом прямого накалывания в жидкий азот в виде гранул спермы петухов племенного ядра кросса "Заславский -I" и "Заславский - 2" в количестве 250000 спермодоз, объемом около 50 лвдров, россыпью в сосудах Дьюара на птицефабрику "Степная". Оплодотворенность 59312 яиц при температуре в птичнике 30-34 "С. составила 71,3%, а при инкубации 33554 яиц и температуре в птичнике 18-20 °С - была 87,0.

13. Экспериментально доказана возможность длительного хранения спермы в жидком азоте до 2 - х лет без снижения оплодотворяющей способности : оплодотворенность яиц была на уровне 88,4 - 93,7 %. 14. Экспериментально доказана эффективность использования криоконсервированной спермы а воспроизводстве кур. Воспроизводительные и продуктивные качества потомства, полученного от криоконсервированной спермы были на высоком уровне, оплодотворенность яиц 91,2 - 96,8 %, сохранность кур 88,56 - 97,9%, яйценоскость была выше иа 2 %.

15. Экспериментально доказана эффективность использования криоконсервированной спермы генетически ценных петухов в селекции, для сохранения генофонда и получения гибридных цыплят в производственных условиях.

5. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Для эффективного использования петухов при искусственном осеменении курв племеной сезон можно получать сперму по 1 эякуляту ежедневно или через день по 2 - 3 эякулята с интервалом 1 - 2 часа.

2. Для криоконсервации спермы можно использовать 2 - й эякулят.

3. Хранить сперму при плюсовой температуре ( 2 -4 °С ) необходимо в закрытых емкостях без разбавителя не более 1 часа, с разбавителем более длительные сроки ( в зависимости от применяемого разбавителя).

4. Для длительного хранения спермы при плюсовой температуре до 48 - 50 часов необходимо использовать молочные разбавители "К" ( а.с.Ма 559973 ) или " В" ( а.с. № 586908 ) , для хранения спермы в течение 3-5 часов можно использовать разбавитель "Ю" ( а.с. № 1298974 ) или "ЛКС - Г ( а.с.№ 1130339 ).

5. Для криоконсервации спермы кур яичного и мясного направления продуктивности надо применять разбавитель "ЛКС -1", для спермы уток -' разбавитель "Ю". '

6. Замораживают сперму во флаконах с использованием криостата ( а.с.№ 994874, а.с.МЬ 65662! ), в случае отсутствия криостата или другого программного оборудования сперму можно замораживать во флаконах ручным методом наслаивания и погружения в жидкий азот.

7. Для замораживания индивидуальных эякулятов или большого количества смешанной спермы необходимо применять способ криоконсервации прямым накалыванием в жидкий азот в виде мелких гранул ( а.с.№ 1343587, а.с.№ 1515443).

8. Перевозить замороженную сперму птиц необходимо в сосудах 'Дьюара, заполненных спермой не более, чем на 1/3, следить за-наличием жидкого азота в сосудах:

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Нарубина Л.Е. Влияние режима использования петухов в течение суток на пол й другие качества потомства //Сб.раб. молод, уч.- М.- 1%6.-Вып. 8,- C.3I-37.

2.Нарубина Л.Е. , Курбатов А.Д. Влияние условий хранения спермы петухов на переживаемость спермотозоидов и результаты искусственного осеменения кур //Сб.науч. тр. ВНИИГРЖ.- Л. - Пушкин.- !970.-Вып. 16.- С. 84 -89.

3. Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е. Рекомендации по искусственному осеменению кур// В кн. : "Вопросы искусственного осеменения кур "- JI. - Пушкин.- 1970,-Вьш. 16.-С. 84-89.

4. Нарубина Л.Е., Иванов Б.И. Влияние некоторых протекторов на переживаемость и оплодотворяющую способность сперматозоидов петухов // Материалы 2 конф. мол. уч. по генетике и разведению е.- х. животных. "- Л. - Пушкин.- 1971.-т.З.-С. 113-114.

5. Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Иванов Б.И. Испытание некоторых криопро-текторов при замораживании спермы петухов // Сб.науч.тр. "Новое в разведении и генетике е.- х. животных" - Л. - 1973,-Вьш. 19.- С. 198-202.

6. Нарубина Л.Е. , Курбатов А.Д. Интраперитонеальное осеменение кур спермой петухов, замороженной в гранулах // Сб.науч.тр. " Методические указания по исследованию физиологии и биохимии спермы " - Д. - 1974.- С. 102-104.

7. Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Бубляева Г.Б., Иванов Б.И. Опыт замораживания спермы петухов /I Птицеводство.-1975,- № 2.- С. 20-21.

8. Нарубина Л.Е. . Курбатов А.Д. , Бубляева Г.Б., Иванов Б.И. Замораживание спермы при селекционной работе // Птицеводство,- 1975.- Л"в 8 .- С. 18-19. Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Иванов Б.И., Бубляева Г.Б. Воронина М.С. Некоторые показатели качества спермы петухов и ее способность переносить глубокое охлаждение И Экспресс - информ. ВНИТЙП. - M.- 1975.- № 4,- С. 26 - 27. 10. Иванов Б.И., Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е. Испытание некоторых крио-протекторов при хранении спермы петухов в жидком азоте // Экспресс - информ. ВНИТИП.-М.-|975.-№4.-С. 27-28.

11. Нарубина Л.Е.', Курбатов А.Д. , Бубляева Г.Б. Изучение защитных свойств глицнрина при замораживании спермы петухов // Бюл. ВНИИГРЖ.- Л.- 1975.-Вып. 9.-С. 41 - 43.

12. Нарубина Л.Е. Оценка показателей качества спермы // В кн. : "Воспроизведение и искусственное осеменение птицы ",-М.- 1975.- С. 76 - 91.

13. Kurbatov A.D., Narubinft L.E., Ivanov B.i. Freezing of rooster sperm in liquid nitrogen И VIII international congress of animal reproduction and artificial insemination.-Krakow.-1976.-P. 314-315.

14. A.c. Ms 553973 СССР/ Разбавитель спермы птиц (Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Иванов Б.И., Бубляева Г.Б.).-1976.

15. Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е'., Иванов Б.И., Царенко Р.Г. , Бубляева Г.Б. Замораживание спермы гусаков в жидком азоте // Птицеводство,- 1977.- № 2 .- С. 19-20.

16. A.c. Jtë 586903 СССР/ Среда для замораживания спермы птиц (Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Иванов Б.И., Бубляева Г.Б., Царенко Р.Г.).- 1977.

17. A.c. № 656621 СССРС Способ замораживания спермы (Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е,, Иванов Б.И., Бубляева Г.Б. ).- 1978. .

18. Курбатов А.Д., Нарубинп Л.Е., Иванов Б.И., Бубляева Г.Б. Совершенствование молочной среды для длительного хранения спермы петухов // Бюл. ВНИИГРЖ.-Л.- 1978.-Вып. 32,-С. 3 - 7.

19. Курбатов А.Д., Иванов Б.И., Нарубина Л.Е.,Бублясва Г.Б. Применение калиевой соли гиалуроновой кислоты в составе защитной среды для замораживания спермы петухов//Бюл. ВНИИГРЖ,-Л.- 1978,-Вып. 32-С. 7 - 16.

20. Бубляева Г.Б., Курбатов А.Д., Иванов Б.И., Нарубина Л.Е., Опыт длительного хранения замороженного семени петухов //Сб.науч. тр. Bii ИИГРЖ,- Л. -Пушкин.- 1978.-Вьш. 24,-С. 155-157.

21. Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Бубляева. Г.Б., Москаленко Л.И.Иванов Б.И. Влияние этиленгликоля на спермиии петухов при плюсовых и минусовых температурах // Бюл. ВНИИГРЖ.- Л.- 1980,- Вып. 43,- С. 15 - 20.

22. Нарубина Л.Е., Курбатов А.Д., Бубляева Г.Б., Москаленко Л.И. Применение протамина - салмина и протамина - сульфата, как компонентов среды для замораживания спермы петухов И Бюл. ВНИИГРЖ,- Л.- 1980.- Вып. 43.- С, 20 - 22.

23. Kurbatov A.D., Narubina L.E.,Tsarenlco R.G., Davtyan A.D., Piraenov B.V., Zabolotsky V.M., Sharf I.I. improvement and use of artificial insemination poultry production in the USSR II 6 1,1 European Poultry Conference .- Hamburg. - 1980,- V. IV P. 315-322.

24. A.c. № 9948874 СССР/ Криостат (Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Забелло А.В., Бубляева Г.Б.).- 1983.

25. Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Целютин K.B., Бубляева Г.Б., М"вродина Т.Г. Новые данные по низкотемпературной консервации спермы гусаков и петухов // Научн. конф. по птицеводству ВНАП .- Самарканд.- 1983,- С. 90 - 92.

26. A.c. № 1130339 СССР / Среда для низкотемпературной консервации спермы птиц (Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Бубляева Г.Б., Целютин К.В., Мавродина Т.Г., Москаленко Л.И. ).-1984.

27. Kurbatov A.D., Narubina L.E., Ivanov B.I., Popov I.I. Tsarenko R.G., Mavrodina T.G., Bublayeva G.B., Tselutin K.V. Low temperature conservation of cock and gander semen H Proceedings and Abstract XVII World Poultry Congress and Exebition .- World Poultry Science Association.- Helsinki/- Finland.- 1984.- P. 732733. (

28. Курбатов А.Д., Нарубина Л.E., Бубляева Г.Б. Целютин К.В. Замораживание спермы петухов//Птицеводство.- 1984.-№ 11.-С. 28-29.

29. Давыдов С.Н., Кустаров В.Н., Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е., Цывотин К.В. Искусственное осеменение криоконсервированной спермой // Акушерство и гинекология .-1985,- №2.- С. 50-51. . ^

30. Мацкова Л.И., Романова B.C., Нарубина Л.Е. Эффективность разбавителей при замораживании спермы//Птицеводство.- 1986,-№'4 .-С. 34-36.

31. Нарубина Л.Е., Иванова Н.Б.-, Бубляева Г.Б., Кравец Г.И. Осеменение мясных кур криокоисервированой спермой II Птицеводство.- 1986.- № И .-С. 18-19.

32. Kurbatov A.D., Narubina L.E., Bublayeva G.B., Tselutin K.V., Mavrodina T.G., Tur B.K., Kosianenko S.G. Cryopreservation of fowl semen // 7 th European Poultry Conference.- Paris.- 1986.-P. 998 -1001.

33. A.c. №1298974 СССР I Разбавитель спермы птиц (Нарубина Л.E., Курбатов А.Д,, Бубляева Г.Б., Целютин К.В.).- 1986.

34. А.с. № 1343587 СССР / Способ криоконсервации спермы петухов в виде гранул (Нарубина Л.Е., Курбатов А-Д., Бубляева Г,Б., Целютин К.В. ).- 1987.

35. Курбатов А.Д,, Нарубина Л.Е., Богомолов В.В., Бесулин В.И., Давтян А.Д. Искусственное осеменение птицы Н М.- Агропромиздат, 1987.- 127 с. 36. Методические рекомендации по биоогическим основам повышения продуктивности с. -х. птиц // Раздел : Низкотемпературная консервация спермы петухов (Курбатов А.Д., Нарубина Л.Е.,)-Ереван.- 1987,-С. 29 - 31.

37. Рекомендации по искусственному осеменению с. -х. птиц // Разделы : Оценка качества спермы. Разбавление спермы)- (Курбатов А.Д., Нарубина Л.Б.,').- Загорск,- 1988.-С. 14-18. 38. Нарубина Л.Ё., Курбатов А.Д., Бубляева Г.Б., Целютин К.В'., Ерашевич B.C. Замораживание спермы петухов // Бюл. ВНИИГРЖ.- Л.-1988 - Вып. I06.-C. 21 - 25.

39. Нарубина Л.Е., Бубляева Г.Б., Дарьин А.И. Эффективность использования криоконсервированной спермы петухов породы корниш в селекции кросса " Бройлер - 6 i " //Экспресс - инф. - Загорск,- 1989;- ЛЬ 1,- С. 5- 8,

40. A.c. № 1515443 СССР / Способ криоконсервации спермы петухов в виде гранул (Курбатов А .Д.,Нарубина Л.Е., Целютин К.В., Бубляева Г.К.).- 1989.

41. Целютин К.В., Нарубина Л.Е., Бубляева Г.Б., Забелло A.B. Оттаивание спермы петухов, замороженной в виде гранул // Бюл, ВНИИГРЖ.- JI.-1989-- Вып. Пб.-С. 22- 23.

42. Нарубина Л.Б., Бубляева Г.Б., Целютин К.В., Смоленский В.П, К вопросу о рациональном использовании оттаянной спермы пегухов // Бюл. ВНИИГРЖ.- Л.-1990,- Вып. 119.-С. 3-5.

43. Нарубина Л.Е. Криоконсервация спермы птиц // Информ. листок .- Л.- 1990.-№742. .

44. Методические рекомендации по криоконсервации Ьпермы е.- х. птиц II Раз-работ. Нарубина Л.Б.- С. - Пб.- 1991.- С. 1-36.

45. Нарубина Л.Е., Смоленский В.Ф., Целютин К.В.,Бубляева Г.Б.,Ерашевич B.C. Рационаьное использование криоконсервация спермы петухов, храненной в течение 2 -х лет в условиях п/ф " Степная" II Тез. докл.конф. по птицеводству ВНАН .-С. - Пб - Ломоносов,- 1993,-С. 98 - 99.

46. Нарубина Л.Е., Мавродина Т.Г. Новый способ искусственного осеменения птиц // Информ. листок .- С.- Пб.- 1995.- № 323.

47. Tselutin K.V., Narubina L.E., Mavrodina T.G., Tur B.K: Cryopreservation of poultry semen H British PoultryScience.- 1995.- V.36.-P. 805 - 811.

48. Целютин K.B., Нарубина Л.Е., Бубляева Г.Б. Криоконсервация спермы петухов //Сб.науч. тр. ВНИИГРЖ,- С.-Пб,- 1996.- С. 165-169.

49. Курбатов А.Д., Давтян А.Д., Бесулнн В.И., Далин В.Н., Нарубина Л.Е., Воронина М.С., Тур Б.К., Рубальский Н.Б.,Шпекторов В.Ю.,Эльберг Г.К. Премия Совета Министров СССР ." Разработка и внедрение экономически эффективной комплексной технологии искусственного осеменения птиц Агропром СССР Москва .- 1990,- С. I - 28.

РТП. Тип. ВИР. Зах. 73. Тир. 100. 20.04,98 г.