Взаимосвязь физиологических функций и биохимических свойств спермы хряков тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, доктор биологических наук Антонюк, Виталий Степанович

• Антонюк, Виталий Степанович
• доктор биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации доктор биологических наук Антонюк, Виталий Степанович

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ДЛЯ ОБОСНОВАНИЯ ТЕМ ИССЛЕДОВАНИЙ.

1.1. Биохимическая характеристика спермы сельскохозяйственных животных.

1.1.1. Окислительные ферменты спермы и факторы, влияющие на процессы энергообразования.

1.1.2. Лизосомы: ферментный состав и биологические функции ; гидролитические ферменты спермы.

1.1.3. Фосфолипиды, гликолипиды, жирные кислоты: структура и биологические функции ; липиды спермы.

1.2. Влияние внешних факторов, возраста и породных особенностей на спермопродукцию производителей.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Активность гидролитических ферментов спермы хряков.

3.1.1. Активность кислых гидролаз спермы хряков в зависимости от технологических приемов обработки ее для длительного хранения.

3.1.2. Связь активности гидролитических ферментов с подвижностью и холодостойкостью спермиев.

3.1.3. Активность гидролитических ферментов при разных условиях хранения спермы хряков.

3.2. Активность окислительных ферментов в сперме хряков.

3.3. Липиды спермы хряков.

3.3.1. Определение фракций фосфолипидов в сперме хряков.

3.3.2. Определение гликолипидов в сперме хряков.

3.3.3. Жирнокислотный состав спермы хряков.

3.4. Исследование связей между спермопродукцией хряков и биохимическими показателями спермы.

3.5. СЬермопродукция, биохимический состав и оплодотворяющая способность спермы хряков в зависимости от внешних факторов.

3.5.1. Изменение спермопродукции и физиологических функций спермиев хряков по сезонам года в условиях свиноводческих комплексов.

3.5.2. Изменение биохимических показателей спермы хряков по сезонам года.

3.6. Биохимический состав спермы хряков в зависимости от возраста, породной принадлежности и индивидуальных особенностей.

4. РАЗРАБОТКА СПОСОБОВ СОХРАНЕНИЯ ВЫСОКОГО КАЧЕСТВА И ОПЛОДОТВОРЯЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ СПЕРМИЕВ ХРЯКОВ НА ОСНОВЕ ИССЛЕДОВАНИЙ БИОХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ ПОЛОВЫХ КЛЕТОК.

4.1. Новый способ объективной оценки качества спермиев и прогнозирования оплодотворяющей способности по активности сукцинатдегидрогеназы.

4.2. Новый способ повышения оплодотворяемости свиноматок на основе применения гидролитических ферментов.

4.3. Способ применения гидролитических ферментов для повышения эффективности использования эякуля

4.4. Устройство для искусственного осеменения свиней.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Взаимосвязь физиологических функций и биохимических свойств спермы хряков»

Актуальность проблемы. Современный этап развития свиноводства характеризуется концентрацией и специализацией производства, строительством новых комплексов и реконструкцией старых ферм, применением интенсивных способов и приемов ведения отрасли, позволяющих получать максимум высококачественной продукции.

Одной из главных проблем освоения передовых технологий производства свинины является четкая организация размножения поголовья, ритмичное получение приплода с желательными признаками. Как показывает опыт эксплуатации крупных комплексов, решение этой задачи крайне необходимо для достижения проектной мощности предприятий и, в конечном итоге, увеличения производства мяса, улучшения его качества, снижения трудовых и материальных затрат.

Важным фактором успешного решения проблемы воспроизводства является эффективное использование метода искусственного осеменения свиней, получение от лучших хряков-производителей высококачественной спермопродукции. Широко применяя высококлассных производителей, можно ускорить преобразующий процесс селекции, добиться осеменения свиноматок только хряками, проверенными по собственной продуктивности и качеству потомства.

Рациональное использование спермопродукции хряков способствует экономии денежных и материальных средств на содержание отцовского стада при одновременном увеличении производства и улучшении качества свинины.

Следует отметить, что без применения искусственного осеменения трудно перевести свиноводство на промышленную технологию и обеспечить непрерывный процесс воспроизводства. Наряду с использованием достижений эццокринологии, искусственное осеменение дает возможность планомерно управлять процессом разведения, добиться стабильных показателей по воспроизводству животных, улучшить организацию и условия труда обслуживающего персонала.

Без искусственного осеменения невозможно в полном объеме результативно и в срок внедрить прогрессивные системы и методы разведения свиней, предусматривающие производство мяса в спецхозах и на промышленных комплексах на межпородной и межлинейной гибридной основе, а также ввести элементы индустриального производства на фермах с традиционной технологией, повысить производительность и эффективность труда. Указанный метод позволяет повысить концентрацию и углубить специализацию свиноводческой отрасли путем создания станций искусственного осеменения, разделения труда со всеми вытекающими отсюда выгодами.

Вместе с тем, потенциальные возможности искусственного осеменения свиней реализуются далеко не в полной мере. Объясняется это недостаточной изученностью биохимических основ жизнедеятельности спермиев, внутренних и внешних факторов, влияющих на спермопродук-цию, несовершенством методов оценки качества спермы, технологических приемов ее обработки для глубокого замораживания и длительного хранения. Трудности в практической реализации метода глубокого замораживания спермы связаны со спецификой метаболизма половых клеток хряков (В.К.Милованов, 1962; И.И.Соколовская 1962; Н.П.Шергин, 1967 ; И.Кёниг, 1980 и др.).

Отсюда следует, что научное обоснование и практические приемы хранения спермы хряков могут быть разработаны только на основе углубленных исследований физиологии и биохимического состава спермы, а также происходящих в ней изменений в процессе технологической обработки и хранения вне организма.

Однако к началу наших исследований сведения о биохимических механизмах, лежащих в основе компенсаторно-приспособительных процессов, обеспечивающих жизнедеятельность и физиологические функции спермиев после воздействия экстремальных факторов, в частности, низких температур, были чрезвычайно скудны.

В большой степени это сопряжено с недостаточностью знаний о биохимическом составе спермы хряков. Проблема взаимосвязи свойств и функций спермиев хряков с важнейшими метаболическими процессами, обеспечивающими жизнеспособность и деятельность клеток в физиологических условиях, оставалась нерешенной. Понятно, что особую остроту приобретают эти вопросы при искусственном осеменении с учетом действия на спермин, с одной стороны, многообразных и сильных факторов внешней среды, а с другой - влияния возрастных, породных и индивидуальных особенностей производителей.

Следовательно, биохимический аспект решения проблемы искусственного осеменения имеет не только теоретическое значение, но и представляется наиболее перспективным направлением в разработках объективных критериев оценки качества эякулятов, полноценности и жизнеспособности спермиев, оптимальных вариантов использования спермопродукции хряков, хранения и консервации спермы, прогнозирования и сохранения высокой оплодотворяющей способности спермиев, а также увеличения многоплодия свиноматок«

Известна исключительная роль энергообразующих процессов в обеспечении жизнеспособности спермиев. Исследованы механизмы образования макроэргов (прежде всего аденозинтрифосфорной кислоты -АТФ) в сперме сельскохозяйственных животных ; изучены роль АТФ в указанных явлениях, связь с подвижностью мужских половых клеток, влияние глубокого замораживания на активность гликолитических и дыхательных ферментов (И.И.Иванов, К.И.Каныгина, 1945; Н.П.Шергин,

1945 ; С.А.Бурнашева, 1947 ; В.А.Энгельгавдт, 1959 ; В.Г.Семаков, 1961; Е.М.Платов, 1973; Г.В.Зверева, 1980 и др.). В то же время, указанные работы касались прет^ущественно энергообразования в сперме быков, баранов, жеребцов. Сперма хряка в данном направлении изучалась мало, но и эти немногочисленные исследования свидетельствуют о своеобразии реакций анаэробного и аэробного гликолиза, протекающих в ней. В доступной литературе не удалось обнаружить сведений о функциях ключевых ферментов цикла трикарбоновых кислот (таких как сукцинатдегидрогеназа) и терминального окисления (например, иитохромоксидазы) в сперме хряка во взаимосвязи с общими биофизическими показателями спермопродукции, а также в зависимости от различных внешних факторов, породных, возрастных и индивидуальных особенностей производителей.

Актуальным, но недостаточно освещенным в литературе является вопрос о значении кислых гидролитических ферментов в процессах воспроизведения, в частности, оплодотворения. Отдельными исследованиями установлена определенная связь ферментов лизосом с процессами сперматогенеза и овогенеза. Наиболее изученным ферментом из класса гидролаз, участвующим в процессе взаимодействия спер-миев с яйцеклеткой, является гиалуронщаза, которая содержится в акросоме головки спермия. Предполагается, что роль гиалурони-дазы заключается в облегчении контакта между мужской и женской гаметами путем разжижения вязкого желатинообразного вещества, связывающего фолликулярные клетки вокруг свежеовулированного яйца (И.И.Соколовская, 1950; А.с.дивоп, 1967, 1970; Т.Мапп, 1973). ^ —

Значение других кислых гидролитических (лизосомных) ферментов в физиологии и патологии оплодотворения менее известно. Между тем, набор их, с учетом сложного биохимического состава оболочек, окружающих яйцеклетку, должен быть значительно разнообразнее. Поэтому исследование кислых гидролаз в сперме хряка, действующих на различные по химической природе субстраты, позволит расширить представление об основной функции акросомных гидролитических ферментов в обеспечении оплодотворения. фактически не исследован такой важный аспект проблемы искусственного осеменения свиней, как взаимосвязь физико-химических факторов при технологической обработке спермы с особенностями функционального состояния лизосомного аппарата спермиев. Отсутствует информация о зависимости активности гидролитических ферментов лизосом от сезонных факторов года, породных, возрастных и ин-диввдуальных особенностей производителей. Решение данных вопросов открывает возможность правильно подходить к задаче устойчивого и равномерного получения качественной спермопродукции от производителей.

В настоящее время не вызывает сомнения огромное значение липи-дов, в том числе фосфорилированных, как в организации ультраструктуры, так в обеспечении и регуляции основных жизненных функций клеток. Являясь важнейшими структурными компонентами биологических мембран, участвуя в интеграции внутриклеточных метаболических процессов, фосфолипиды непосредственно влияют на многие ферментные реакции, в частности, анаэробного и аэробного гликолиза, окислительного фосфорилирования, связанных с образованием макроэргов. Входя в состав кофакторов ферментов или выступая в качестве их необходимого физиологического активатора, они обуславливают активность ферментов разнообразнейшего спектра действия, влияют на синтез белков и гормонов, на водно-минеральный, углеводный обмены и т.д. Известна роль фосфолипидов в многообразных физиологических процессах: клеточном делении, регенерации ткани, фагоцитозе, реакциях возбуждения, торможения и т.д. В организме липиды используются в качестве запасного материала для энергопродукции.

В свете изложенного понятен пристальный интерес специалистов по биологии размножения ко всем аспектам липидного обмена в сперме сельскохозяйственных животных. В литературе представлены данные об идентификации, содержании и локализации некоторых липид-ных соединений в сперме, их составе, структуре, взаимосвязи с физиологическими свойствами спермиев в нормальных и экстремальных условиях. Так, была показана зависимость продолжительности жизни спермиев, их устойчивость к ряду повреждающих воздействий от состава липоидного (липопротеидного) покрова клеток, от содержания в сперме липидов и липоидного фосфора (О.А.Селиванова, 1934; В.К.Милованов, 1934, 1962 ; Б.А.Матукайте, П.И.Пакенас, 1956 ; В.Е.Шавкун, 1963 ; Г.В.Зверева, 1964; Е.Д.Ким, 1966 ; В.П.Кононов, 1969 ; И.В.Смирнов, А.З.йаец, 1971; Т.П.Ильинская, В.С.Антонюк, 1975 и др.).

Вместе с тем, необходимо отметить отсутствие глубокого комплексного исследования состава липидов спермы хряков. Рассмотренные выше работы выполнялись, в основном, на биологическом материале производителей жвачных животных и в большинстве своем были посвящены изучению общего количества липидов, фосфолипидов и липопротеидов, а не их индивидуальных фракций.

Требует уточнения биологическая роль фосфолипидов в сперме хряка. Фракционный состав фосфолипидов в ней вообще не известен. Целесообразность проведения экспериментальных работ в этом направлении диктуется тем обстоятельством, что в последние годы существенно расширяются знания о специфических свойствах и биологической роли индивидуальных представителей этого класса веществ.

В современной сперматологии лишь единичные работы посвящены исследованию важнейших представителей сложных липидо содержащих соединений - гликолипидов (Н.Р.Мввеп et аЗ., 1978). Между тем, указанные полимеры, наряду с фосфолипидами и холестерином, составляют основной липидный структурный остов оболочек любых клеток, а не только нервных, как полагали ранее. Состав и свойства гликолипидов поверхности плазматических мембран определяют митотическую активность клеток и фазы клеточного деления. Показана их исключительная роль в межклеточных взаимодействиях: в явлениях "узнавания" клеток друг другом, адгезии, дифференциации, роста, пролиферации, контактного ингибирования роста и др. Сообщают об их иммунологических, детоксикационных свойствах, способности расслаблять гладкую мускулатуру и так далее.

В то же время биологическое значение гликолипвдов далеко не выяснено. Сведений о гликолипидах спермы хряка вообще нет. Можно с уверенностью полагать безусловную связь этих интереснейших липидов полимеров со многими сторонами биологии воспроизводства. Однако эта проблема не изучалась должным образом и требует экспериментальной проработки во всех аспектах.

Жирнокислотный состав липидов, как известно, тесно связан с особенностями их строения и биологической функцией. Жидко-кристаллическое состояние биологических мембран, проницаемость, плотность и другие свойства зависят от состава и соотношения находящихся в них жирных кислот. Сбалансированность между содержанием насыщенных и ненасыщенных свободных жирных кислот влияет не только на все многообразие метаболических превращений различных липидов, но оказывает действие на такие процессы, как синтез простагландинов, образование перекисных соединений в организме и др. Есть немногочисленные сообщения о жирнокислотном составе спермы сельскохозяйственных и других животных, о токсическом влиянии избытка перекисей липидов на спермии ( R.Joneв, I.Mann, 1973 ; Е.М.Платов, 1978 ; И.И. Соколовская, 1981; В.К.Ми-лованов и др., 1981).

Подобные исследования не касались спермы хряка. Жирнокислот-ный состав спермы хряка, его роль в физиологии и патологии оплодотворения оставались неизвестными.

Выяснение важнейших особенностей биохимического состава спермы хряка во взаимосвязи с показателями спермопродукции, факторами внешней и внутренней среды, технологическими приемами обработки спермы в целях искусственного осеменения дают представление о тонких механизмах, лежащих в основе интегральных компенсаторно-приспособительных реакций спермы в ответ на внешнее воздействие, и открывают возможность управления этими процессами путем изыскания специфических протекторов или разработок направленной коррекции обнаруженных расстройств метаболических систем.

Подобные исследования важны для уточнения взаимодействия спермии - яйцеклетка, результаты которых могут дать правильное направление при разработке искусственной регуляции численности спермиев для эффективного оплодотворения, с одной стороны, а с другой - повышения результативности оплодотворения.

Требует дальнейшего уточнения степень влияния метеорологических факторов на спермопродукцию хряков, поскольку не были проведены комплексные, системные и глубокие исследования в этом направлении. Знание взаимосвязи и влияния условий внешней среды, возраста, породы и индивидуальных особенностей производителей на биохимический состав спермы, качество и оплодотворяющую способность спермиев имеет большое значение для организации ритмичного и эффективного воспроизводства, особенно на крупных фермах и комплексах, для разработки методов длительного хранения спермы, приемов улучшения качества эякулятов по сезонам года, способов повышения оплодотворяющей способности спермиев (Ю.Д.Клинский, 1970 ; С.И.Сердюк, 1977 ; В.М.Прокопцев, 1981 и др.).

Цель и задачи исследований. В связи с изложенным, целью наших исследований явилось изучение спермопродукции, физиологии и биохимии спермиев хряков (активность окислительных и гидролитических ферментов, метаболизм липидов) во взаимосвязи с факторами внешней среды, возрастными, породными и индивидуальными особенностями производителей, приемами обработки эякулятов для искусственного осеменения, направленное на углубление научно-теоретических основ и практическую разработку новых приемов эффективного использования спермопродукции, способов объективной оценки качества спермы, повышение оплодотворяющей способности спермиев и многоплодия свиноматок.

Дня достижения указанной цели ставились следующие задачи:

1. Исследовать активность ключевых окислительных ферментов -сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы в сперме хряков, связь их активности с биофизическими и физиологическими показателями спермиев, факторами внешней среды, породной, возрастной и индивидуальной особенностями производителей.

2. Изучить активность кислых гидролитических (лизосомных) ферментов - гиалуронидазы, кислых катепсинов, кислой фосфатазы, бета- £ -глюкозидазы, бета- Р -галактозидазы - в сперме хряков, установить зависимость их активности от возраста, породной принадлежности хряков, сезона года, а также действия физико-химических факторов при технологической обработке спермы.

3. Определить содержание липидов (фосфолипидов и их фракций, гликолипидов - ганглиозидов и цереброзидов, насыщенных и ненасыщенных жирных кислот) как в цельной сперме, так и в ее фракциях: половых клетках, плазме. Установить степень влияния различных манипуляций со спермой в процессе ее подготовки для длительного хранения, действие метеорологических факторов на метаболические превращения липидосодержащих веществ.

4. Выяснить влияние сезонных факторов (продолжительность светового дня, температура и относительная влажность) на воспроизводительную функцию хряков в условиях свиноводческих комплексов с целью разработки методов, предупреждающих снижение количества и качества спермопродукции, оплодотворяющей способности половых клеток.

5. На основании комплексной оценки спермопродукции результатов физиологических и биохимических исследований разработать методы объективной оценки качества эякулятов, полноценности и жизнеспособности спермиев, способы прогнозирования их оплодотворяющей способности.

6. Учитывая роль лизосомных ферментов в оплодотворении, разработать способы повышения эффективности использования эякулятов хряков, оплодотворяющей способности спермиев, увеличения многоплодия свиноматок путем экзогенного введения гидролитических ферментов.

7. Изыскать технические приемы сохранения высокой оплодотворяющей способности спермиев, увеличения многоплодия свиноматок и повышения производительности труда операторов путем разработки устройства для искусственного осеменения.

Научная новизна. Впервые в длительных экспериментах определена активность и выявлена роль окислительных и гидролитических ферментов в жизнеобеспечении спермиев и их оплодотворяющей способности.

В сперме хряков установлено наличие трех фракций фосфолипидов (сфингомиелина, кефалина, лецитина), двух типов гликолипидов (ганглиозидов и цереброзидов), изучен спектр и уровень жирных кислот.

Определена зависимость биохимического состава спермы от сезона года, породных, возрастных и индивидуальных особенностей производителей, физико-химических факторов и технологических приемов обработки эякулятов для длительного хранения.

Проведенные исследования развивают новое направление и подходы в разработке эффективного метода длительной консервации спермы хряка, основывающиеся на изучении и использовании тонких биохимических механизмов жизнедеятельности половых клеток.

Впервые обнаружена взаимосвязь активности окислительных и гидролитических ферментов, содержания фосфолипидов, гликолипидов, насыщенных и ненасыщенных жирных кислот с холодостойкостью спермиев хряков. Определены биохимические тесты оценки воздействия различных факторов на спермии для контроля их качества при разработке практически приемлемого метода длительной консервации спермы хряков.

На основе теоретических обобщений результатов исследования физиологических, биофизических и биохимических свойств спермы хряка разработаны: способ определения оплодотворяющей способности спермы хряков (авторское свидетельство № 622466 от 15 мая 1978 г.), способ искусственного осеменения животных (авторское свидетельство № 904691 от 14 октября 1981 г.), способ повышения эффективности использования эякулятов хряков, устройство для искусственного осеменения свиней. Предлагаемые способы сравнительно просты в исполнении, доступны для широкого использования, легко воспроизводимы и информативны.

Практическая ценность и реализация результатов. Существенно расширены знания в области биохимии спермы хряка. Дано обоснование новому направлению в биологии размножения, которое основывается на использовании показателей активности окислительных ферментов спермы для определения и прогнозирования оплодотворяющей способности спермиев, а также на применении экзогенных гидролитических ферментов с целью повышения оплодотворяемости и многоплодия свиноматок.

Применение разработанных способов, технических и технологических решений повышает эффективность искусственного осеменения в условиях свиноводческих комплексов, позволяет более рационально использовать хряков-производителей и в конечном итоге обеспечивает увеличение производства свинины.

Предложенные способ определения оплодотворяющей способности спермы хряков, способ искусственного осеменения животных, способ повышения эффективности использования эякулятов хряков, устройство для искусственного осеменения свиней прошли производственную проверку, утверждены научно-техническим советом МСХ БССР и внедрены на свиноводческом комплексе по откорму 108 тыс. голов свиней совхоза-комбината им. 60-летия БССР, свиноводческом комплексе по производству 11,8 тыс. голов племенного молодняка селекционного центра республики по животноводству, на Барано-вичском областном госплемпредприятии. Ряд перечисленных способов и методов оценки жизнеспособности спермиев нашли применение в научно-исследовательской работе БелНИИЖа, областных государственных опытных станций БССР.

За выполнение ряда исследований по совершенствованию методов воспроизводства и искусственного осеменения свиней в комплексной работе по разработке и внедрению в Белорусской ССР эффективной системы племенной работы в свиноводстве, созданию белорусского внутрипородного типа свиней крупной белой породы и белорусской черно-пестрой породы автору диссертации постановлением Совета Министров СССР от 30 марта 1981 года № 309 присуждена Премия Совета Министров СССР за 1980 год (диплом лауреата Премии Совета Министров СССР № 10261). За участие в разработке и внедрении в сельскохозяйственное производство технологий воспроизводства скота и свиней на промышленных комплексах Советом Выставки достижений народного хозяйства Белорусской ССР награжден Дипломом I степени.

Апробация. Основные положения диссертации доложены на 7 республиканских, региональных, союзных научно-теоретических и практических конференциях, симпозиумах и съездах, на заседаниях координационного совета по воспроизводству и искусственному осеменению животных при ВИЖе (1974-1981 гг.), ученых советах БелНИШа, Министерства сельского хозяйства БССР (1974-1982 гг.), а также на Международном совещании стран СЭВ "Применение и развитие способа глубокого замораживания спермы хряков и баранов" (Москва -Дубровицы, 1975 г.), УШ Международном конгрессе по воспроизведению и искусственному осеменению животных (Краков, 1976 г.), I Международном симпозиуме по структуре и функциям лизосом (Москва, 1976 г.), советско-шведском симпозиуме по свиноводству (Упсала, 1979 г.).

Публикация результатов исследований. Материалы диссертации опубликованы в 32 научных работах,изданных в СССР и за рубежом, монографии "Биология и техника искусственного размножения свиней",

Минск: "Ураджай", 1978, 176 с. 9,51 п.л., и в трех рекомендациях.

Объем работы. Диссертация состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов и практических предложений для производства. Работа изложена на 341 странице машинописи, из них содержит 296 страниц текста, 53 таблицы и рисунка, списка литературы, включающего 447 источников.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Антонюк, Виталий Степанович

290 ВЫВОДЫ

1. Биохимические показатели спермы хряков находятся во взаимосвязи с физиологическими характеристиками эякулята и могут быть использованы для объективной оценки спермопродукции, полноценности и жизнеспособности спермиев, а также для прогнозирования и повышения их оплодотворяющей способности.

2. Впервые в сперме хряков установлено наличие значительного количества липидосодержащих веществ: гликолипидов (ганглиозиды, цереброзиды), фосфолипидов (сфингомиелин, кефалин, лецитин), насыщенных и ненасыщенных жирных кислот. Углублены знания о гидролитическом аппарате спермиев (выявлена активность гиалуронидазы, кислых катепсинов, кислой фосфатазы, бета- Б -глюкозидазы, бета-б -галактозидазы), определена активность окислительных ферментов (сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы).

3. Сперма хряков характеризуется высокой активностью окислительных ферментов - сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы. Активность сукцинатдегидрогеназы имеет достоверную корреляцию с концентрацией спермиев ( г = 0,55 ; Р< 0,001), подвижностью половых клеток ( г= 0,43; Р< 0,001), общим количеством подвижных спермиев в эякуляте (г= 0,62 ; Р<0,001) и оплодотворяющей способностью. При активности фермента до 5 мин, определяемой по времени появления розовой окраски смеси, оплодотворяющая способность спермиев в среднем составляет 79$, свыше 10 мин - 57,1$.

4. Активность гидролитических лизосомных ферментов (гиалуро-нидазы, кислых катепсинов, кислой фосфатазы, бета-Б-глюкозидазы, бета- б-галактозидазы) в сперме хряков, отдельно в-спермиях и плазме"зависит от породы, возраста животных и сезона года,, а также от приемов обработки эякулята для глубокого замораживания.

Действие физико-химических факторов (разбавление, замораживание, оттаивание) на спермии хряков приводят к значительному нарушению функционального состояния их гидролитического аппарата, возможно, вследствие изменения проницаемости мембран лизосомных (акросомных) структур. Об этом свидетельствует изменение активности исследованных кислых гидролаз. В свою очередь, расстройство функций лизосомных ферментов в определенной мере обуславливает нарушение физиологических функций спермиев.

5. Оценка активности гидролитических ферментов в сперме является надежным тестом при разработке приемов и методов ее длительной консервации. Исследование активности кислых гидролаз дает возможность определять оптимальные режимы обработки спермы и указывает на необходимость применения протекторов перед глубоким замораживанием спермиев. Выдержка спермы перед замораживанием предупреждает отрицательное действие низкой температуры на мембраны спермиев.

6. В сперме хряков установлены следующие фракции фосфолипидов: сфингомиелин, кефалин, лецитин. В цельной свежеполученной сперме в среднем содержится 3,07 мкг/мг белка сфингомиелина, 3,31 мкг/мг белка кефалина, 1,99 мкг/мг белка лецитина ; в спер-миях-соответственно 4,09 ; 3,70 и 5,20 мкг/мг белка ; в плазме-0,40; 0,45 и 0,36 мкг/мг белка.

7. Впервые в сперме хряков обнаружено содержание гликолипидов - ганглиозидов и цереброзидов. Цельная свежеполученная сперма содержит ганглиозидов в среднем 0,38 мкг/мг белка, спермии - 1,01 и плазма - 0,13 мкг/мг белка ; цереброзидов соответственно 122,5; 313,3 и 59,5 мкг/мг белка.

8. В цельной сперме, спермиях и плазме хряков впервые определен спектр насыщенных и ненасыщенных жирных кислот. Установлено содержание насыщенных жирных кислот: пальмитиновой и стеариновой. Ненасыщенные жирные кислоты представлены пальмитоолеиновой, олеиновой, линолевой, линоленовой, двумя неидентифицированными ^16*2 и ^16*3^ и ЭД^ИД0*1000^ кислотами. Ненасыщенных жирных кислот в сперме в общей сложности содержится 67,2$, насыщенных

38,4$.

9. Обработка спермы при подготовке к длительному хранению (разбавление, замораживание, оттаивание) приводит к серьезным нарушениям метаболизма липидов: в спермиях меняется содержание гликолипидов (цереброзидов, ганглиозидов), фосфолипидов (сфингомиелина, кефалина, лецитина)и жирных кислот. Замораживание-оттаивание повышает содержание ганглиозидов в 3 раза (Р<0,001), цереброзидов - в 2,2 (Р<£0,001), кефалина - 2,1 раза (Р <0,01) и лецитина - на 4С$ (Р«с0,05).

Изучение содержания фосфолипидов, гликолипидов, жирных кислот предоставляет возможность осуществлять контроль за качеством спермопродукции, воздействием различных факторов на физиологические функции спермиев при разработке разбавителей, технологических режимов и приемов длительного хранения спермы хряков.

10. Установлена корреляция между количеством подвижных спермиев в эякуляте и активностью окислительных, гидролитических ферментов, содержанием фракций фосфолипидов и гликолипидов в цельной сперме, спермиях и плазме. В частности, количество подвижных спермиев коррелирует с активностью гиалуронидазы г = 0,53), количеством сфингомиелина (г= 0,41), кефалина (г = 0,43), ганглиозидов (г= 0,47) в спермиях. Выявлена весьма тесная связь между активностью окислительных, гидролитических ферментов и липидосодержащими веществами.

Подвижность спермиев как свежеполученных, так и замороженных-оттаянных не связана с активностью гидролитических ферментов.

11. Важная роль биохимического состава спермиев в их жизнедеятельности и функциональной способности может служить достаточно надежным основанием для использования активности окислительных и гидролитических ферментов, количественных изменений отдельных фракций липидосодержащих биополимеров при оценке качества эякулята, полноценности, физиологических функций половых клеток, а также для разработки практически приемлемого эффективного метода длительного хранения спермы хряка с высокой оплодотворяющей способностью.

Применение биохимических тестов открывает возможность разработки способов коррекции метаболических сдвигов, возникающих в результате глубокого замораживания и обуславливающих нарушение свойств и функций спермиев, прежде всего, путем применения протекторов мембран и использования антиоксидантов.

12. На воспроизводительную функцию хряков в условиях ферм и комплексов оказывают непосредственное влияние такие метеорологические факторы, как продолжительность светового дня, температура и относительная влажность воздуха. Установлены сезонные колебания показателей спермопродукции, и значительные, а по ряду изученных биохимических показателей взаимосвязанные изменения в активности сукцинатдегидрогеназы, цитохромоксидазы, гиалуронидазы, кислых катепсинов, кислой фосфатазы, содержании сфингомие-лина, кефалина, лецитина, ганглиозидов, цереброзидов и жирных кислот. Эти изменения необходимо учитывать при- организации искусственного осеменения и для накопления спермы.

13. Обнаружены значительные возрастные, породные и индивидуальные различия между хряками по количеству фракций фосфолипидов, гликолипидов, отдельных жирных кислот и активности окислительных, гидролитических ферментов в сперме и ее фракциях. Изменения активности изученных ферментов и содержания фосфолипидов, гликолипидов жирных кислот в результате замораживания-оттаивания дают основание считать, что спермии хряков-аналогов по происхождению, живой массе и возрасту имеют различную устойчивость к глубокому замораживанию. При оценке производителей по спермопродукции следует учитывать холодостойкость спермиев каждого индивидуума.

14. Оплодотворяющую способность и эффективность искусственного осеменения в целом можно повысить:

- введением в половые пути свиноматки за I час до осеменения по 25 мл 0,05-0,15$-ного раствора гиалуронидазы и трипсина (50150 мг ферментов на 100 мл разбавителя), приготовленного на ГХЦС среде (оплодотворяемость повышается на 10-12$) ;

- введением в половые пути свиноматок за I ч до осеменения по 25 мл гидролитических ферментов: 50-150 мг гиалуронидазы и 50-150 мг трипсина (достигается высокая эффективность осеменения дозой, содержащей I млрд подвижных спермиев, увеличивается результативность использования эякулятов минимум в 3 раза по сравнению с принятыми нормами), повышается оплодотворяемость на 5-1 (У/о

15. Разработанное устройство для искусственного осеменения свиней позволяет уменьшить стрессовые явления, вызываемые температурным фактором, обеспечить введение спермы в краниальные участки рогов матки и в итоге повысить оплодотворяемость на 69J% и сократить затраты труда на проведение искусственного осеменения на 26%,

16. Результаты исследований физиологических функций биохимического состава спермы хряков, позволившие установить их взаимосвязь с приемами технологической обработки эякулятов, факторами внешней среды, возрастом, породными и индивидуальными особенностями производителей, разработать способы оценки и рационального использования спермы, повышения оплодотворяющей способности и многоплодия свиноматок, определяют перспективное направление дальнейшего углубления научно-теоретических основ повышения эффективности искусственного осеменения и в целом воспроизводства животных.

296

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

На основании результатов проведенных исследований предлагаются для использования в практике:

1. Способ определения оплодотворяющей способности спермы хряков (а.с. № 622466) по активности сукцинатдегидрогеназы, позволяющий повысить объективность и точность оценки качества эякулята, прогнозировать оплодотворяющую способность спермиев на пунктах и станциях искусственного осеменения.

2. Способ искусственного осеменения животных (а.с. № 904691) основанный на введении экзогенной гиалуронидазы и трипсина по 25 мл в виде 0,05-0,1Е%-ного раствора (50-150 мг ферментов на 100 мл разбавителя), приготовленного на ГХЦС среде, в половые пути свиноматки за I ч до осеменения и позволяющий повысить опло-дотворяемость маток на 10-13$.

3. Способ эффективного использования эякулятов, основанный на осеменении свиноматок дозой спермы, содержащей I млрд подвижных спермиев, при предварительном за I ч до осеменения введении в половые пути матки ферментов гиалуронидазы и трипсина в виде 0,05-0,15%-ного раствора в ГХЦС среде в количестве 25 мл на одно животное.

4. Устройство для искусственного осеменения свиней, позволяющее снизить затраты труда операторов по искусственному осеменению на 28% и повысить оплодотворяемость маток.

5. Для научно-исследовательских лабораторий, разрабатывающих методы длительного хранения спермы, рекомендуется использовать приемы оценки качества эякулятов, полноценности, жизнеспособности и функциональной деятельности спермиев по активности гидролитических ферментов, содержанию индивидуальных фракций гликолипидов, фосфолипидов и жирных кислот.

297

6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На основе анализа результатов проведенных исследований можно сделать следующее заключение.

Важнейшие физиологические функции спермиев - подвижность, оплодотворяющая способность - находятся в прямой зависимости от активности ферментов, участвующих в процессах гликолиза и дыхания, которые обеспечивают половые клетки энергией для движения и жизнедеятельности.

Установленная в исследованиях высокая активность ферментов аэробного гликолиза и терминального окисления - сукцинатдегидрогеназы и питохромоксидазы - свидетельствует о важном, определяющем значении окислительного фосфорилирования как основного механизма энергообразования в спермиях хряков.

Анализ полученных экспериментальных данных выявил тесную связь изученных окислительных ферментов с количеством и качеством спермопродукции хряков. Так, активность сукцинатдегидрогеназы имела высокодостоверную корреляцию (Р <0,001) с концентрацией спермиев (г = 0,55), концентрацией подвижных спермиев (г = 0,57) и общим числом подвижных спермиев в эякуляте (г = 0,62). Подвижность спермиев свежеполученных эякулятов связана с активностью сукцинатдегидрогеназы (г = 0,43 ; ?<0,001). Полученные данные о взаимосвязи активности сукцинатдегидрогеназы с показателями спермопродукции открывают возможность более точно и объективно оценивать качество эякулятов, что весьма ценно как для организации искусственного осеменения на фермах и комплексах, так и для отбора спермы, предназначенной для длительного хранения.

Наряду с тесной корреляцией активности сукцинатдегидрогеназы с качественными характеристиками спермы выявлена зависимость оплодотворяющей способности спермиев от активности указанного окислительного фермента в них. При времени появления розовой окраски смеси до 5 мин (по которому судили об активности сукии-натдегидрогеназы) оплодотворяющая способность спермиев в среднем составила 79$, от 5 до 10 мин - 76%, свыше 10 мин - 57,1$. Следовательно, по активности сукцинатдегидрогеназы можно не только оценивать биологическую полноценность спермы, но и прогнозировать ее оплодотворяющую способность. Подтверждением этому служит разработанный нами способ определения оплодотворяющей способности спермы, позволяющий повысить точность оценки спермопродукции, прогнозировать результаты осеменения.

Исследованиями существенно расширено представление о составе кислых гидролаз в сперме хряка. Наряду с активностью гиалуронидазы в цельной сперме, спермиях и плазме выявлена активность кислой фосфатазы, кислых катепсинов, бета- Ъ-глюкозидазы, бета-С-галактозидазы. Наибольшая активность гиалуронидазы, кислой фосфатазы и кислых катепсинов установлена в цельной сперме, в плазме - меньше соответственно в 2,3, 1,3 и в 3,7 раза. Активность гиалуронидазы и кислых катепсинов в спермиях была в 1,8 и 2,6 раза выше, чем в плазме ; активность кислой фосфатазы, напротив, в половых клетках в 1,3 раза ниже, чем в плазме спермы.

Оказалось, что применяемые в настоящее время технологические приемы для замораживания спермы вызывают значительные изменения активности кислых гидролаз. Разбавление спермиев ГХЦС средой приводит к появлению внеклеточной активности гидролитических ферментов, а замораживание - оттаивание вызывает достоверное повышение активности гиалуронидазы в спермиях соответственно на 35% и 42% (Р<0,05) по сравнению со свежеполученными и разбавленными половыми клетками. Температурное воздействие на половые клетки ведет к появлению высокой внеклеточной активности гиалуронидазы и кислых катепсинов. Гидролитические ферменты спермы располагаются преимущественно в лизосомах спермиев, т.е. е акро-соме. Установленная активность гиалуронидазы, кислых катепсинов, кислой фосфатазы, бета-D-глюкозидазы и бета- D-галактозидазы в плазме свидетельствует, с одной стороны, о наличие в сперме патологических, разрушенных половых клеток, с другой - о возможной локализации гидролитических ферментов в наружной цитоплазмати-ческой оболочке спермиев. Учитывая способность лизосомных ферментов расщеплять полисахариды, белки, нуклеиновые кислоть: и другие биополимеры, вполне допустимо предположить активную роль гидролитических ферментов спермы хряка в расщеплении подобных биохимических комплексов в процессе продвижения спермиев в псловых путях и при взаимодействии мужских половых клеток с яйцеклеткой.

Доказательством участия гидролитических ферментов в оплодотворении является разработанный нами способ искусственного осеменения животных, повышающий эффективность осеменения. Предварительное (за I ч до осеменения) введение экзогенной гиалуронидазы и трипсина (50-150 мг) в половые пути самок обеспечивает увеличение оплодотворяемости на 10-13%.

Об обязательном присутствии необходимого количества активных гидролитических ферментов для успешного осеменения свиноматок свидетельствует предложенный нами способ эффективного использования эякулятов, основанный на осеменении свиноматок дозой спермы, содержащей I млрд подвижных спермиев при предварительном (за I ч до осеменения) введении в половые пути самок ферментов гиалуронидазы и трипсина в виде 0,05-0,15% раствора в ГХЦС среде по 25 мл на одно животное.

Изменение активности гидролитических ферментов под действием физико-химических факторов указывает на различную устойчивость лизосомных (акросомных) ферментов к экстремальным воздействиям, на предохраняющую роль отдельных компонентов разбавителя, что, в свою очередь, может служить критерием для оценки различных по составу сред и технологических приемов при поиске более эффективных разбавителей (прежде всего, стабилизующих мембрану лизосом) и при разработке методов консервации спермы.

Применяемые режимы обработки спермы хряков перед замораживанием и сам процесс замораживания-оттаивания являются экстремальными по отношению к спермиям хряка. Об этом свидетельствует снижение активности изучаемых гидролитических ферментов при предварительном хранении спермы в течение 6-7 ч по сравнению с замороженной без предварительной выдержки. Появление внеклеточной активности гиалуронидазы, кислых катепсинов и кислой фосфатазы после разбавления может быть объяснено утечкой ферментов из спермиев вследствие деструктивных процессов, нарушением мембран акросом и их разрушением. Активизация гиалуронидазы и кислых катепсинов в половых клетках в результате замораживания и оттаивания отражает, по-видимому, усиление аутофагических реакций. В то же время, снижение активности кислой фосфатазы в спермиях и отсутствие ее во внеклеточной среде связано, очевидно, с разрушающим влиянием температуры на данный фермент.

В свете полученных данных для разработки эффективного способа консервации спермы методом глубокого замораживания явно недостаточно основываться только на подвижности половых клеток, чтобы судить о их жизнестойкости и функциональной активности, так как действие низких и высоких температур приводит к нарушению целостности акросом и в итоге к потере спермиями оплодотворяющей способности. Подтверждается это не только возрастанием активности гидролитических ферментов в спермиях и появлением внеклеточной активности, но и результатами опытов по изучению взаимосвязи между люминесцентной характеристикой спермиев и их оплодотворяющей способностью. Разница между традиционной оценкой жизнестойкости и функциональной способности половых клеток по подвижности спермиев и оценкой методом люминесцентной микроскопии составляет около 5С%. При осеменении свиноматок замороженной спермой с подвижностью половых клеток 2 балла, содержащей 2С$ половых клеток с ярко-красными акросомами, оплодотворились только ЗС% использованного поголовья ; осеменение же спермиями с подвижностью 4-15 баллов, но без характерного красного свечения акросом, привело к прохолос-ту всех свиноматок. В качестве критерия оценки биологической полноценности и оплодотворяющей способности спермиев предлагается использовать активность гидролитических ферментов.

Нашими исследованиями подтверждена многогранная структурная и функциональная роль липидосодержащих комплексов в клетке. Впервые установленное наличие ганглиозидов и цереброзидов, сфин-гомиелина, лецитина, кефалина, спектра насыщенных и ненасыщенных жирных кислот в сперме хряков значительно расширяет знания о биохимическом составе спермы и половых клеток, раздвигает границы сведений о тонких механизмах изменения метаболизма липидов спермы под действием физико-химических факторов.

В спермиях хряков на I мг белка содержится соответственно в 7 и 5,3 раза больше ганглиозидов и цереброзидов, чем в плазме. Подобное распределение связано с тем, что гликолипиды локализуются в клеточных и субклеточных мембранах половых клеток. Появление их в плазме объясняется, скорее всего, наличием в сперме определенного количества разрушенных спермиев, "освобождением" гликолипидов из мембранных структур во внеклеточную среду в результате деструктивных действий гидролитических ферментов. Об этом свидетельствует, в частности, высокая связь между количеством ганглиозидов, цереброзидов и активностью гиалуронидазы в цельной сперме (соответственно г = 0,77 и г = 0,31).

Преобладающее содержание цереброзидов по сравнению с ганглио-зидами в спермиях хряков отражает, на наш взгляд,особенности структурной организации мембран, которая в свою очередь определяет специфику связанных с ними обменных реакций.

Физико-химические факторы оказывают различное влияние на состав фракций гликолипидов. Разбавление спермы ГХЦС средой приводит к появлению значительного количества ганглиозидов и несколько меньшего количества цереброзидов во внеклеточной среде. Вследствие замораживания-оттаивания половых клеток достоверно (Р <¿0,001) повышается содержание цереброзидов и ганглиозидов в половых клетках как по сравнению со свежеполученными, так и разбавленными. Внеклеточное содержание обеих фракций гликолипидов значительно выше после температурного воздействия, чем после разбавления. Заметное увеличение количества цереброзидов и ганглиозидов во внеклеточной среде после замораживания-оттаизания спермиев объясняется, по-видимому, глубоким разрушающим действием температуры на плазматические и субклеточные мембраны спермиев. 0 повышенной проницаемости мембран свидетельствует усиленный выход из клеток некоторых гидролитических ферментов (например, гиалуронидазы).

Содержание в сперме хряков фракций фосфолипидов - сфингомиелина, кефалина, лецитина - и отсутствие лизолецитина свидетельствует о своеобразии липидного состава спермы хряков. Поэтому требуется индивидуальный подход при разработке сред для разбавления и определении технологических режимов обработки спермы для длительного хранения. Наибольшее количество исследуемых фракций фосфолипидов содержится в спермиях, что вполне понятно, так как фосфосодержащие липиды являются обязательными структурными компонентами клеточных мембран. В разбавленных спермиях количество сфингомиелина незначительно снизилось, а содержание кефалина и лецитина уменьшилось соответственно на 40,6$ (Р<0,01) и в 2,1 раза (Р-сО,001). После разбавления во внеклеточной среде обнаружены все исследуемые фракции фосфолипидов.

Замораживание-оттаивание спермиев не привело к достоверному изменению в них содержания сфингомиелина. Однако количестЕО кефалина увеличилось на 49$ по сравнению со свежеполученными: и в 2 раза - с разбавленными. Уровень лецитина в оттаянных спермиях снизился на 51,6$ (Р^0,05) по отношению к свежеполученным. По сравнению с разбавленными половыми клетками выход сфингомиелина во внеклеточную среду увеличился на 0,148 мкг/мг белка (Р<0,01), а выход кефалина снизился на 0,162 мкг/мг белка (Р<0,01).

Рост содержания кефалина в спермиях при одновременном уменьшении количества лецитина следует рассматривать как неблагоприятное явление, так как лецитин является биологически более ценным соединением для обеспечения резистентности клеток при неблагоприятных внешних условиях. Значительный выход сфингомиелина из половых клеток под действием температуры скорее всего свидетельствует о глубокой степени деструкции мембранных образований.

Огромная структурная и функциональная роль гликолипидое и фосфолипидов, значительное изменение содержания их фракций в процессе обработки спермы (разбавление, замораживание-оттаивание) делает обязательным определение содержания ганглиозидов, цереброзидов, сфингомиелина, кефалина, лецитина при изучении полноценности и жизнеспособности половых клеток для разработки технологии длительного хранения спермы, методов ее более рационального использования, а также повышения оплодотворяющей способности.

В решении этих задач достойное место должен занять контроль за биологической полноценностью спермиев на всех этапах их обработки, основанный на содержании насыщенных и ненасыщенных жирных кислот. Нами впервые установлен широкий спектр жирных кислот в цельной сперме, спермиях и плазме. Количество насыщенных (стеариновая, пальмитиновая) жирных кислот в спермиях составляет 43%, в плазме - 29,9% и в цельной (не разбавленной) сперме - 38,4%. Преобладание ненасыщенных жирных кислот над насыщенными характерно не только для спермы хряков, но и для других органов и тканей млекопитающих.

Под действием замораживания-оттаивания спермиев происходит значительное снижение линолевой (ненасыщенной), в меньшей степени - олеиновой (ненасыщенной) кислоты, т.е. обнаружилась тенденция к снижению количества ненасыщенных кислот. Диспропорциональные изменения жирнокислотного состава спермиев под влиянием глубокого замораживания свидетельствует о существенном расстройстве обмена липидов в них, следствием чего может быть накопление продуктов перекисного окисления липидов, снижение устойчивости и даже повреждение мембран. Отсюда вполне очевидна необходимость поисков средств, в частности, стабилизирующих веществ и анти-оксидантов, предупреждающих отрицательное влияние экстремальных условий на спермии хряков.

Всестороннее изучение влияния условий внешней среды на количество и качество спермы хряков необходимо для разработки эффективных способов поддержания оплодотворяющей способности половых клеток, а также при организации строго ритмичного воспроизводства свиней на фермах и комплексах.

Проведенные биохимические исследования спермы хряков позволили впервые установить взаимосвязь и взаимообусловленность активности окислительных и гидролитических ферментов, индивидуальных фракций фосфолипидов и гликолипидов, жирнокислотного состава с сезоном и общепринятыми характеристиками спермопродукции.

Средний объем эякулятов и количества подвижных спермиев были лучшими в осенний и зимний периоды. Высшая концентрация спермиев отмечена в весенний и летний сезоны. Активность сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы имела тесную связь с концентрацией спермиев: она повышалась весной и летом. Эти сезоны характеризовались низкой активностью гиалуронидазы в половых клетках и в плазме. Весной и летом активность кислых катепсинов и кислой фосфатазы значительно снижалась. Выявлено уменьшение количества сфингомиелина, кефалина, лецитина в летний период.

Сезонные колебания в содержании фракций фосфолипидов, гликолипидов, отдельных жирных кислот свидетельствуют о глубоких (на клеточном уровне) изменениях в организме животных, отражают приспособляемость половых клеток к меняющимся условиям внешней среды, что следует учитывать в практической и научно-исследовательской работе.

Возрастание в спермиях количества фосфолипидов весной по сравнению с зимним сезоном наводит на мысль о благоприятном действии плюсовой температуры воздуха, более длительной инсоляции на физиологические функции организма. В то же время, снижение содержания сфингомиелина, кефалина, лецитина летом говорит об отрицательном действии высокой температуры и влажности на сперматогенез и качество спермы.

Сезонные метеорологические факторы оказывают значительное влияние как на количество и качество спермопродукции хряков, содержащихся в обычных условиях и на комплексах с регулируемым микроклиматом, так и на биохимический состав спермиев, их физиологическое состояние и оплодотворяющую способность.

Разработанное нами устройство для искусственного осеменения свиней позволяет снизить неблагоприятное воздействие сезона и внешних факторов на результаты воспроизводства, обеспечить ритмичность в работе крупных свиноводческих ферм и комплексов, в целом повысить эффективность искусственного осеменения.

Известно, что масштабное использование ценных в селекционном отношении производителей позволяет в короткое время добиться улучшения хозяйственно-полезных признаков у большого поголовья животных, а следовательно, увеличения производства свинины. Значительно повышается племенной и экономический эффект при применении искусственного осеменения свиноматок, особенно глубокоза-мороженной спермой. В силу этого, углубленная оценка эякулятов производителей по биохимическому составу, их высокое качество приобретает большое значение, особенно в том случае, если производителей используют на пунктах и станциях по искусственному осеменению.

Согласно нашим данным, имеются породные, возрастные и индивидуальные различия хряков по основным показателям спермопродукции. Существенные внутривидовые отличия подчеркиваются проведенными биохимическими исследованиями.

Нами установлена значительная разница в активности гиалуронидазы, кислых катепсинов, кислой фосфатазы в половых клетках и плазме свежеполученной спермы между хряками различных пород. По активности указанных гидролитических ферментов спермии хряков белорусской черно-пестрой породы превосходили производителей крупной белой породы соответственно на 31,Ж, в 2 раза и на 39,6$.

Выявлено отличие в активности кислых гидролаз у хряков разного возраста одной и той же породы. С увеличением возраста в спермиях достоверно возрасла активность гиалуронидазы, кислой фосфатазы, снижалась активность бета-и -глюкозидазы и практически не менялась активность кислых катепсинов и бета-Б -галактози-дазы. Определена достоверная разница в активности гидролитических ферментов в цельной свежеполученной сперме между хряками-одногодками одного и того же происхождения.

Следует отметить менее четкое различие между хряками разных пород по активности исследованных гидролитических ферментов в замороженной и оттаянной сперме. В спермиях хряков активность гиалуронидазы, кислых катепсинов, бета-1) -галактозидазы не различалась между производителями крупной белой и белорусской черно-пестрой пород. Однако активность кислой фосфатазы в половых клетках была заметно выше (Р<0,01) у хряков крупной белой породы, а бета- X» -глюкозидазы, напротив, в 2 раза больше у производителей белорусской черно-пестрой породы.

Определены индивидуальные различия в биохимических показателях спермы каждого отдельно взятого хряка после воздействия на половые клетки физико-химических факторов. Так, действие разбавления, замораживания-оттаивания на спермии привело к значительным индивидуальным колебаниям в содержании ганглиозидов и цереброзидов, сфингомиелина, кефалина, лепитина, активности гидролитических ферментов у хряков одного и того же возраста и происхождения. Своеобразие активности гидролитических ферментов, количества липидосодержащих веществ у хряков-аналогов свидетельствует о разной по степени аутолитической и деструктивной деятельности кислых гидролаз, в целом устойчивости плазматических и субклеточных мембран половых клеток под действием химических и температурных факторов. Следовательно, при оценке производителей по спермопродукции необходимо учитывать индивидуальную резистентность спермиев хряков к глубокому замораживанию.

Таким образом, проведенные исследования биохимического состава спермы хряков значительно расширяют наше представление о взаимосвязи свойств и функций половых клеток с важнейшими метаболическими процессами, обеспечивающими жизнеспособность и функциональную деятельность спермиев.

Ценность полученных результатов возрастает в связи с изученным влиянием факторов внешней среды, возрастных, породных и индивидуальных особенностей производителей, а также различных технологических приемов обработки спермы на метаболизм липидов, энергообразующие процессы, активность гидролитических ферментов.

Новые данные о биохимической характеристике спермы хряков углубляют теоретические основы физиологии половых клеток, открывают перспективное направление в разработке объективных: критериев оценки эякулятов, биологической полноценности спермиев, оптимальных вариантов использования спермопродукции, ее консервации, прогнозирования и повышения оплодотворяющей способности спермиев, увеличения многоплодия свиноматок и повышения эффективности искусственного осеменения в целом.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Антонюк, Виталий Степанович, 1984 год

1. Алимова Е.К., Астваиатурьян А.Т. и др. О роли липидов и жирных кислот в патогенезе инфекционного процесса. В кн.: Структура, биосинтез и превращение липидов в организме жизотных и человека. Л., 1972, с. 9-10.

2. Алимова Е.К. Биосинтез глицеридов в различных тканях животного организма. В кн.: Липиды, структура, биосинтез, превращения и функции. М.: Наука, 1977, с. 5-15.

3. Аллисон А. Лизосомы и болезни. В кн.: Молекулы и клетки. М., 1969, вып. 4, с. 196-213.

4. Анисько Е.П. 0 половой активности хряков. Свиноводство, 1970, № 7, с. 10.

5. Антонюк B.C. Спермопродукция и некоторые биохимические показатели спермы быков при различной половой нагрузке: Дисс. канд.биол.наук. Минск, 1969. - 160 с.

6. Антонюк В. С. и др. Обязательные зооветеринарные требования к воспроизводству сельскохозяйственных животных: Рекомендации Минск: Ураджай, 1976. - 88 с.

7. Антонюк B.C. Биология и техника искусственного размножения свиней. Минск: Ураджай, 1978. - 176 с.

8. Антонюк B.C., Плященко С.И. и др. Влияние микроклимата на физиологическое состояние и репродуктивные качества хряков-производителей. В кн.: Научные основы развития животноводства в БССР Шнек: Ураджай, 1983, вып. 13, с. 160-164.

9. Архиповец А.И. Спермопродукция хряков крупной белой породы в зависимости от возраста. В кн.: Физиология и биохимия сельскохозяйственных животных. Респ.межвед.тематический научн.сб. Киев, 1970, вып. 12, с. 32-37.

10. Архиповец А.И. Спермопродукция хряков разного возраста.- Вестник сельскохозяйственной науки, 1965, № I, с. 75-78.

11. Астапенко П.Д. Некоторые вопросы биометеорологии. Л.: Гидрометеоролог, 1967. - 137 с.

12. Балашов Н.Г. Физиологическая резистентность спермы производителей. В кн.: Тр. Науч.-контрольного ин-та ветпрепаратов, 1968, т. 15, с. 316-319.

13. Белоус A.M., Бондаренко В.А., Бондаренко Т.П. Влияние замораживания-оттаивания на липидный состав митохондрий. Биохимия, 1978, т. 43, вып. 12, с. 2175-2182.

14. Белоус A.M. и др. Структурно-функциональные изменения мембран клеток при действии низких температур. В кн.: Сб. работ ин-та иитол. АН СССР, 1977, вып. 17, с. 133.

15. Бернштейн А.Д., Соколова Л.С. О липоидной капсуле сперматозоидов. Проблемы животноводства, 1935, № 6, с. I06-IC7.

16. Бочаров И.А., Поспелов А.И., Соколова З.А. К вопросу о причинах ухудшения качества спермы у быков в зимне-весенний период. В кн.: Труды Ленинградского вет. ин-та, 1964, вып. 26, с. 150.

17. Буриханова С.И. Сезонные изменения химической терморегуляции. В кн.: Науч.тр. Ташкентского университета, 1966, вып. 26 с. 38-41.

18. Бурнашева С.А. Роль фосфорных соединений в двигательной функции. В кн.: Рефераты н.-и.работ АН СССР. М., 1947, с. 4145.

19. Бурнашева С.А., Федорова Л.Г., Любимова М.Н. Структурная организация и биохимические основы движения ресничек и жгутиков.- Успехи современной биологии, 1963, т. 56, № 3, с. 365-380.

20. Бурлак 3. и др. Возрастные особенности качества спермопродукции хряков-производителей сибирской северной породы. В кн.: Совершенствование существующих и создание новых пород сельскохозяйственных животных в Сибири. 1980, с. 38-40.

21. Варакса П.А. Сезонные колебания спермопродукции быков и пути их устранения. Животноводство, 1967, № 4, с. 76-78.

22. Виха И.В., Приваленко М.Е., Хорлин А.Я. Определение активности гиалуронидазы в сыворотке крови при совместном присутствии гиалуронидазы, бета-глюкуронидазы и бета-ацетилглюкозамини-дазы. Вопросы медицинской химии, 1973, т. 19, в. I, с. 90-96.

23. Волоскова А. Г1. Липоидный состав спермы домашних животных. Вестник сельскохозяйственной науки. Ветеринария, 1940, вып. 3, с. 51-94.

24. Георгиев Г. Исследование фосфолипидов в сперме быков-производителей. П. Фосфолипиды в живчиках и семенной плазме. -Ветеринарно-медицинские науки (София), 1967, № 8, с. 73-76.

25. Гжицкий С.3., Скороход В.И., Янович В.Г. Данные о путях повышения эффективности использования протеина корма у крупного рогатого скота и свиней путем нормирования липидно-протеииового соотношения. Доклады ВАСХНИЛ, 1972, № 5, с. 29-32.

26. Гильман З.Д. Повышение мясных качеств свиней. Минск: Ураджай, 1977. - 190 с.

27. Голышев Н.А., Кононов В.П., Хачапуридзе Э.Л. Действие замороженного семени на эмбриональную выживаемость у свиней. -Вестник сельскохозяйственной науки, 1977, № 2, с. 96-98.

28. Дингл Д?к. Лизосомы. Методы исследования. М.: Мир, 1980. - 342 с.

29. Дмитриев В.Б. Изменения качества спермы быков-проивводителей в течение года. В кн.: Научн.труды Пушкинской н.-и.лаборатории разведения с.-х. животных. JI., 1965, вып. II, с. 170-174.

30. Де Дюв К. Структурные комплементы клетки. В кн.: Структура и функция клетки. М.: Мир, 1962, с. 128.

31. Живков В., Калев Г. Содержание кислоторастворимой липид-ной фракции в сперматозоидах быка, барана, хряка и жеребца. -Ветеринарно-медицинские науки (София), 1965, № 4, с. 333-337.

32. Зверева Г.В., Чухрий Б.Н. Резистентность спермы и липоид-ный фосфор. Молочное и мясное скотоводство, 1962, № 12, с. 3840.

33. Зверева Г.В. Электронно-микроскопические и биологические исследования сохраненного семени быка. В кн.: Доклады советских ученых к 5-му Международному конгрессу по биологии воспроизведения и искусственному осеменению животных. М., 1964, с. 20-21.

34. Зверева Г.В. и др. Микробная загрязненность спермы быков при разных методах хранения. В кн.: Молочно-мясное скотоводство 1966, вып. 7, с. 14-16.

35. Зверева Г.В. и др. Взаимосвязь активности окислительных ферментов в сперме быков с физиологическими показателями спермиев. Доклады ВАСЗШИЛ, 1978, № 4, с. 24-26.

36. Зверева Г.В., Чухрий Б.Н., Клевец Л.А. Активность окислительных ферментов в разбавленной и сохраняемой сперме быков. -Доклады ВАСХНИЛ, 1980, № 10, с. 26-28.

37. Зотиков Л.А., Пинчук В.Г. Некоторые аспекты проблемы лизо-сом. Цитология, 1969, т. 9, № 10, с. 1205-1220.

38. Иванов И.И. 0 значении неуглеводного обмена (окисление неуглеводов) для движения сперматозоидов млекопитающих. Биохимия, 1936, т. I, вып. 2, с. 245-254.

39. Иванов И.И. О возможности сохранения подвижности сперматозоидов в анаэробных условиях в присутствии различных акцепторов водорода. Бюл.эксперим.биологии и медицины, 1940, т. 9, вып. 4, с. 243-246.

40. Иванов И.И., Бурнашева С.А. 0 физиологическом значении некоторых парциальных реакций гликолиза. Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1943, с. 16-19.

41. Иванов И.И., Бурнашева С.А., Каныгина К.И., Инютина 3.П., Рабкина JI.E. 0 физиологическом значении отдельных оксидоредукцийв цепи дыхательных катализаторов. Биохимия, 1945, т. 10, вып. 3, с. 205-215.

42. Иванов И.И., Каныгина К.И. Аденозинтрифосфат в спермиях млекопитающих. Доклады АН СССР, 1945, с. 50.

43. Иванов И.И., Касавина B.C., Фоменко Л.Д. Аденозинтрифосфат в сперматозоидах млекопитающих и его действие на актомиозин. -Биохимия, 1947, т. 12, вып. 6, с. 497-508.

44. Иванов И.И. Химическая динамика мышц и подвижных клеток. М., 1950. - 87 с.

45. Иида Кун Обмен веществ сперматозоидов у домашних животных. Тикусан-но кэнкю, 1959, б, 8, 9.

46. Ильинская Т.П. Роль липидов и липоидного фосфора в семени быков-производителей. В кн.: Тезисы докладов П биохимического съезда Прибалтийских республик и Белоруссии, 1965, с. 258-259.

47. Ильинская Т.П., Казанцева Г.М. Биохимические показатели замороженной спермы. Свиноводство, 1971, № 5, с. 24-25.

48. Ильинская Т.П., Осипова Н.В. Изменение биохимического состава спермы быков в процессе хранения. В кн.: Тр. БелНИИЖ. Минск, 197I, т. 12, с. 13-17.

49. Ильинская Т.П., Осипова Н.В. Качество спермы быков в разлив ные сезоны года. В кн.: Научные основы развития животноводствав БССР. Межвед. сборник. Минск, 1972, вып. 2, с. 5-7.

50. Ильинская Т, П., Безлюдников JI. Г. Биохимические показатели спермы хряков при различном использовании. В кн.: Зоотехническая наука Белоруссии. Минск, 1974, т. 15, с. 87-90.

51. Ильинская Т.П., Антонюк B.C. Физиологические основы рационального использования производителей сельскохозяйственных животных. Мн.: Ураджай, 1975. - 112 с.

52. Ильинская Т. П., Антонюк В. С., Безлюдников JI. Г. Искусственное осеменение свиней. Минск: Ураджай, 1976. - 48 с.

53. Ильинская Т.П., Антонюк B.C. и др. Разработка и внедрение методов повышения воспроизводительной способности сельскохозяйственных животных. В кн.: Зоотехническая наука Белоруссии. Минск, 1976, т. 17, с. 9-15.

54. Исанин H.A., Яковлев А.Ю. Участие лизосомного аппарата клеток в регуляции клеточной пролиферации. Цитология, 1977, т. 19, № б, с. 575-584.

55. Казанцева Г.М. Биохимические показатели спермы хряков в различные сезоны года. В кн.: Научн.тр. БелНИИЖ. Минск, 1971, т. 12, с. I37-141.

56. Карагезян К.Г. Фосфолипиды и их роль в жизнедеятельности организма. Ереван: Анастан, 1972. - 267 с.

57. Квасницкий A.B. Физиологические основы и техника искусственного осеменения свиней. В1сник с.-г. науки, I960, № 2, с. 36-42.

58. Квасницкий A.B., Конюхова В.А., Конюхова Л.А. Искусственное осеменение свиней. Киев: УАСХН, 1961. - 227 с.

59. Кёниг. И. Искусственное осеменение свиней. Биология, техника, организация. М.: Колос, 1980. - 175 с.

60. Ким Е.Д. Содержание фосфолипидов в сперме быков. Молочно-мясное скотоводство. Киев, 1966, вып. 7, с. 27-30.

61. Ким Е.Д. Фосфолипиды семени сельскохозяйственных животных: Автореф. Дис. Киев, 1966. - 24 с.

62. Клинский Ю.Д. Синхронизация охоты у сельскохозяйственных животньк гормональными препаратами. Животноводство, 1970, № 3, с. 77-79.

63. Коваленко В.Ф. Достижения науки. Свиноводство, 1982, № 3, с. 24-25.

64. Козумплик Я., Кудлач Э. Воспроизводство свиней на комплексах. Минск: Ураджай, 1983. - 208 с.

65. Комиссарчик Я.Ю. Структура и химический состав клеточных мембран. В кн.: Структурная и функциональная организация клеточных мембран. М.: Наука, 1975, с. 8-25.

66. Кононов В. П. Дезоюирибонуклеиновая кислота и липиды живчиков в связи с хранением семени вне организма: Автореф. Дис:. канд.биол.наук. ВИЖ, 1969. - 24 с.

67. Кононов В.П. Значение слабодиссоциирующих катионов при охлаждении семени. Доклады ВАСХНИЛ, 1977, № 5, с. 25-26.

68. Кононов В. П., Голышев H.A., Нарижный А. Г. Выход трансами-наз из живчиков хряков при охлаждении как показатель оплодотворяющей способности. Сельскохозяйственная биология, 1978, т. ХШ, FI, с. 104-108.

69. Кононов В.П., Нарижный А.Г., Черных В.Я. Биохимические причины низкой устойчивости живчиков хряка и меры ее усиления. -Вестник сельскохозяйственной науки, 1979, № 8, с. 78-82.

70. Коротков А.И. Влияние окислительно-восстановительных процессов в семени барана на оплодотворяемость и качество приплода.- В кн.: Тр. Молдавского НИИ животноводства и ветеринарии. 1965, т. 2, с. II3-I2I.

71. Кочетков Н.К., Жукова И.Г., Глуходед И. С. Тонкослойная хроматография переброзидов. Доклады АН СССР, 1961, т. 139, в. 3, с. 608.

72. Кругляк А. П. Актуальные вопросы искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. Сельское хозяйство за рубежом, 1983, № II, с. 51-56.

73. Курбатов А. Д., Воронина М. С., Богомолов В. В. Биологические свойства спермы петухов различных пород и возраста в зависимости от осмотического давления, содержания ионов натрия и калия.- Сельскохозяйственная биология, I960, т. 15, № 2, с. 307-310.

74. Курило Ю. Г. Активность глюкозофосфатизомеразы в свежей и сохраненной сперме хряка. В кн.: Свиноводство. Киев, 1969, вып. 8, с. 82-87.

75. Курило Ю. Г. Активность щелочной и кислой фосфатаз в свежей и сохраненной сперме хряка. В кн.: Свиноводство. Киев, 1970, вып. II, с. 84-89.

76. Курило Ю.Г. Определение активности фосфофруктозы в сперме.- Ветеринария, 1979, № 7, с. 51-52.

77. Лопатко М.И. Концентрация водородных ионов важный показатель качества спермы. - Овцеводство, 1966, № 8, с. 27-28.

78. Лопырин А.И., Донская В.И. Повышение оплодотворяемости овец при весенне-летней случке. Овцеводство, 1959, № 6,с. 18-22.

79. Луговой В.И. Влияние глубокого замораживания на изолированные лизосомы печени крыс. Цитология, 1977, т. 19, № II, с. I288-I29I.

80. Лычиньски А. Замораживание семени хряков. Сельское хозяйство за рубежом. Животноводство, 1971, № 8, с. 23-25.

81. Любимова М.Н., Энгельгардт В. А. Дденозинтрифосфатаза и миозин мышцы. Биохимия, 1939, № 4, с. 37-39.

82. Максимов Ю.Д. Биохимические и зоотехнические основы рационального использования племенных производителей: Дис. доктора биол. наук. М., 1966. - 321 с.

83. Максимов Ю.Л. Биологические и зоотехнические основы рационального использования быков. Белгород, 1972. - 88 с.

84. Манн Т. Проблемы исследований в области физиологии воспроизведения животных. Сельское хозяйство за рубежом. Животноводство, 1972, № Ю, с. 29-30.

85. Маслов Н. <5. Погода влияет на спермопродукцию быка. Молочное и мясное скотоводство, 1962, № 3, с. 23-24.

86. Матукайте Б.А., Пакенас П.И. 0 фосфорном обмене в сперматозоидах и секрете придаточных половых желез у самцов сельскохозяйственных животных. В кн.: Тр. АН Литовской ССР, 1956., сер. 3. с. 119-121.

87. Микитас А.Н. Изменение показателей спермы хряков по сезонам года. Свиноводство, 1969, № 3, с. 18-19.

88. Милованов В.К., Хабибулин Х.Х. Анабиоз сперматозоидов и его использование в социалистическом животноводстве. Проблемы животноводства, 1933, № 5, с. 83-90.

89. Милованов В. К. Окислительно-восстановительный режим при сохранении сперматозоидов сельскохозяйственных животных вне организма. В кн.: Тр. по искусственому осеменению животных, 1940,т. I, с. 180-207.

90. Милованов B.K., Коротков А.И. Новый метод определения резистентности семени сельскохозяйственных животных. Доклады ВАСХНШ1, 1951, № 8, с. 39-43.

91. Милованов В.К., Соколовская И.И. Синтетические среды для разбавления семени хряка и методы его хранения. Животноводство, 1957, № 2, с. 44^50.

92. Милованов В.К., Соколовская И.И. Теория холодового удара живчиков млекопитающих. Доклады ВАСХНИЛ, 1959, № 7, с. 3-8.

93. Милованов В.К., Соколовская И.И. Техника искусственного осеменения. Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. М., i960. - 157 с.

94. Милованов В.К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. М.: Сельхозгиз, 1962. - 696 с.

95. Милованов В.К., Соколовская И.И. Уровень и перспективы научных исследований. Животноводство, 1980, № 10, с. 48-50.

96. Милованов В.К., Соколовская И.И. Длительное хранение семени барана и новые возможности крупномасштабной селекции в овцеводстве. Вестник сельскохозяйственной науки, 1980, № 12,с. 122-132,

97. Милованов В.К., Кононов В.П., Азизова O.A., Максина А.Г. Исследование криогенных повреждений живчиков с помощью электрон-но-парамагнитнорезонансной спектроскопии спиновых зондов б мембранах. Доклады ВАСХНИЛ, 1981, № 10, с. 27-29.

98. Милованов В., Кольцова Е и др. Химическая природа анти-оксидантов и их действие при замораживании семени барана. Животноводство, 1981, № 9, с. 45-46.

99. Минин В.И. Изменение количественных и качественных показателей семени хряков в зависимости от сезона года. В кн.: Науч.тр.Николаевской гос. с.-х. опытной станции за 1957-1967 гг. Одесса, 1967, с. 92-94.

100. Михневич С.И. Влияние света на качество спермы баранов-производителей. Овцеводство, 1966, № 8, с. 29-30.

101. Мороз Л.Г. и др. Физиологические и биохимические изменения сперматозоидов хряка при замораживании. Сельскохозяйственная биология, 1976, т. XI, 6, с. 850-856.

102. Мороз Л.Г., Корбан Н.В., Шапиев И.Ш., Белкина Л.А. К вопросу прогнозирования оплодотворяющей способности замороженной спермы хряков. Бюлл. ВНИИРГЗК, Л., 1979, вып. 39, с. 23-26.

103. Мохов Б. Влияние внешней среды и наследственных факторов на половую активность бычков. В кн.: Биохимические и технологические основы повышения продуктивности животных и кормовых культур. 1978, с. 72-78.

104. Мхеян Э.Е. Оцвиги в содержании цереброзидов и муколипи-дов в мозгу белых крыс при односторонней экстирпации верхнего шейного симпатического узла. В кн.: Материалы 3-й Всесоюзн. конф. по биологии нервной системы. Ереван, 1963, с. 409-417.

105. Мхеян Э.Е., Соцкий О.П. Влияние различных фрагментов ган глиозидов на интенсивность дыхания и окислительное фосфорилиро-вание митохондрий мозга белых крыс. В кн.: Вопросы биохимии мозга, Ереван: изд. АН Арм. ССР, 1970, № 6, с. 219-223.

106. Нагорный Е.П., Смирнов И.В. 0 методике определения резистентности спермы. Доклады ВАСХНШ1, 1939, вып. 19, с. 34-41.

107. Нарижный А.Г. 0 возможности накопления перекисей липи-дов в семени хряков. Бол. науч. раб от ВШа, 1978, вып. 55,с. 27-28.

108. Нарижный А.Г. Действие антиоксидантов. Свиноводство, 1979, № II, с. 23.

109. Насонов Д.Н., Александров В.Я. Реакция живого вещества на внешние воздействия. М.-Л., 1940. - 77 с.

110. Наук В.А. Влияние технологической обработки семени на проницаемость мембран сперматозоидов и устойчивость их белково-липидных комплексов. Овцеводство, 1972, № 10, с. 31-33.

111. Несмеянова Т.Н. Роль липоидных веществ в жизнедеятельности сперматозоидов. Доклады ВАСХНИЛ, 1939, вып. 9, с. 45-48.

112. Осташко Ф.И. О природе холодового удара живчиков. В кн.: Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. Харьков, 1963, с. 22-40.

113. Осташко Ф.И., Строна В.И., Кузнецов Г.Н. Влияние глюкуро-нидазы на качественные показатели спермы производителей. Животноводство, 1974, № 4, с. 53-54.

114. Осташко Ф.И., Скорняков Б.А. Нарушение ультраструктуры спермиев при низкотемпературной консервации. В кн.: Криобиология и криомедицина, 1975, № I, с. II0-II4.

115. Осташко Ф.И. Глубокое замораживание и длительное хранение спермы производителей. Киев: Урожай, 1978. - 173 с.

116. Осташко Ф.И. Достижения и перспективы развития искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. Науч.-техн. бюл. НИИ животноводства Лесостепи и Полесья УССР, 1979, № 24/25, с. 76-82.

117. Павличенко И.Н. Спермопродукция быков в различное время года. Молочное и мясное скотоводство, 1965, № 7, с. 18.

118. Пакенас П. И. Влияние различного режима использования быков на длительность сперматогенеза и качество семени. В кн.: Труды Литовского НИИ животноводства, 1961, (1962), т. 5, с. 169180.

119. Пакенас П.И. Изменение в семенниках быков. Животноводство, 1966, № 6, с. 68-70.

120. Питкянен И. Г. Новое в оплодотворении и повышении плодовитости свиней. М.: Сельхозгиз, 1961. - 185 с.

121. Платов Е.М. Нарушение синтеза АТФ основное отрицательное последствие холодового удара. - Овцеводство, 1969, № 9,с. 32-34.

122. Платов Е.М. Теоретические и практические основы замораживания семени производителей сельскохозяйственных животных: Автореф. Дис. канд.биол. наук. Дубровицы М., 1973, с. 3-18.

123. Платов Е.М., Фомина Е.Л., Мирошникова К.И. Содержание легкогидролизуемого, неорганического и липоидного фосфора в семени жеребца после замораживания. Сельскохозяйственная биология, 1975, т. 10, № 5 , с. 775-777.

124. Платов Е.М. Некоторые теоретические аспекты замораживания спермы. Животноводство, 1978, № 10, с. 64-67.

125. Плишко Н.Т. Способ продления жизни и оплодотворяющей способности половых клеток хряка. Свиноводство, 1965, № 6,с. 37-41.

126. Плященко С.И., Хохлова И.И. Микроклимат и продуктивность животных. Л.: Колос, 1976. - 207 с.

127. Покровский А.А., ТУтельян В. А. Современные представления о лизосомах. Успехи современной биологии, 1969, т. 68, вып. 3 (6), с. 318-339 .

128. Покровский A.A., Коровников К.А. К вопросу о внутриклеточной локализации и функции изозимов лактатдегидрогеназы, -Вопросы медицинской химии, 1969, т. 15, № 4, с. 382-385.

129. Покровский A.A., Конь И.Я., Соловьев В.Н. О роли фосфо-липидов в проявлении активности ферментов лизосом. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1974, т. 77, № 3,с. 49-52.

130. Покровский A.A., Тутельян В.А. Лизосомы. М.: Наука, 1976. - 382 с.

131. Попова Г.М. К вопросу о цереброзидах нейроглии. В кн.: Материалы Ш Всесоюз.конфер. по биохимии нервной системы. Ереван, 1962, с. 403.

132. Поцелуйко Н. и др. Содержание хряков на промышленных комплексах. Свиноводство, 1978, № 7, с. 32.

133. Прокопцев В., Станчева И., ГУревич Л. Сезонные изменения качества спермы хряков в условиях промышленных комплексов. -Бюлл. ВНИИ разведения и генет. с.-х. животных, Л., 1979, вып. 39, с. 5-6.

134. Прокопцев В.М. Технология искусственного осеменения свиней. Л.: Колос, 1981. - 160 с.

135. Прохорова М.И., Туликова З.Н. Большой практикум по углеводному и липидному обмену. Л., 1965. - 220 с.

136. Прохорова М.И., Романова Л.С., Туманова С.Ю. Характеристика гетерогенности ганглиозидов и цереброзидов головного мозга. В кн.: Биохимия и функции нервной системы. 1965, с. 148-158.

137. Рошкован Г. Прогнозирование воспроизводительных качеств по ферментным тестам. В кн.: Технология животноводства в промышленных комплексах. Кишинев, 1978, с. 93-96.

138. Самойло Г.А. Сезоны года и спермопродукция быков. Молочное и мясное скотоводство, 1968, № 6, с. 22-23.

139. Свенсон К., Уэбстер П. Клетка. М.: Мир, 1980. - 207 с.

140. Сеглинып А., Брутганс Я. Влияние плазмы хряка, окситоци-на и карбахолина на оплодотворение. Свиноводство, 1980, № 8, с. 21-22.

141. Селиванова О.А. Стойкость сперматозоидов сельскохозяйственных животных. Биологический журнал, 1934, т. 3, вып. 4, с. 630-637.

142. Семаков В.Г. Физиологические и биохимические свойства семени быков, связанные с его способностью сохраняться при -79°. В кн.: Сб.аспирантских работ ВИЖ, 1961, вып. I, с. 181-191.

143. Семаков В.Г. Влияние дегидрогеназной и цитохромоксидаз-ной ферментных систем на жизнедеятельность сперматозоидов. -Биохимия, 1967, т. 26, вып. 4, с. 630-634.

144. Семаков В.Г., Рыжков Г. Ф. Проницаемость цитоплазматичес-ких мембран сперматозоидов быка и хряка для натрия, калия, кальция и фосфора под влиянием низких температур. Сельскохозяйственная биология, 1976, т. II, № 2, с. 200-204.

145. Семаков В.Г. Совершенствование методов замораживания спермы быков. М., ВНИИТЭИСХ, 1977. - 51 с.

146. Сергеев Н.И. Изучение физиологической моторики матки свиньи в связи с усовершенствованием приемов искусственного осеменения. Дис. канд.биол.наук. - 1963. - 127 с.

147. Сердюк С.И. Среда для спермы хряков. В кн.: Доклады советских ученых к У1 Международному конгрессу по размножению и искусственному осеменению животных. М., 1968, с. 138-141.

148. Сердюк С.И. 0 разных количествах активных сперматозоидоб. Свиноводство, 1970, № I, с. 17-18.

149. Сердюк С. И. Основные вопросы теории и практики искусственного осеменения свиней. Дис. доктора вет.наук. -1970. - 330 с.

150. Сердюк С. И. Искусственное осеменение в промышленном свиноводстве. М.: Колос, 1977. - 161 с.

151. Сердюк С.И., Маковецкий Т.С., Беликов А.А. Сезонные изменения качества спермы хряков. Свиноводство, 1977, № 5„ с. 26.

152. Сердюк С.И., Дяченко Н. Сроки и кратность осеменения маток. Свиноводство, 1978, № 5, с. 16-17.

153. Сердюк С.И., Зверева А.П., Россоха JI.B. Влияние адаптации спермы хряков при комнатной температуре на жизнеспособность спермиев после глубокого замораживания. В кн.: Научно-тежни-ческий бюллетень, Харьков, 1980, № 28, с. 82-85.

154. Смирнов И.В., Емец А.З. Осмотическое явление в сперме животных. Животноводство, 1971, № 5, с. 80-83.

155. Смирнов И.В. К теории глубокого охлаждения спермы. Животноводство, 1974, № II, с. 42-44.

156. Соколовская И.И. Действие семени на муцины животного организма. Доклады ВАСХНИЛ, 1950, вып. I, с. 12-15.

157. Соколовская И.И. Проблемы оплодотворения сельскохозяйственных животных. М.: Советская наука, 1957. -315 с.

158. Соколовская И.И. Искусственное осеменение свиней. М.: Сельхозиздат, 1962. - 214 с.

159. Соколовская И.И. и др. Антигенность гиалуронидазы и оплодотворение. В кн.: Сб.науч.трудов ВИЖ, Дубровицы, 1977, ч. 2, вып. 3, с. 37-42, 75-113.

160. Соколовская И.И., Ойвадис Р. и др. 0 значении акросомы воценке семени самцов. Животноводство, 1981, № 9, с. 46-47.

161. Соколова Г.П., Золотова Л.А. Жирные кислоты ганглиозидов головного мозга. В кн.: Нервная система. ЛГУ, 1968, вып. 9,с. 35-40.

162. Соколова Г.П., Золотова Л.А., Шульга Л.Н. Изучение биосинтеза глицеролипидов и их жирных кислот в головном мозге при кратковременной экспозиции с радиоактивным предшественником. -Вестник ЛГУ, 1980, № 15, с. 79-84.

163. Соттаев М.Х. Электрофоретическая и иммуноэлектрофорети-ческая характеристика спермы быков в зависимости от их физиологического состояния и сезона года: Дис. канд.биол.наук. Ставрополь, 1979. - 189 с.

164. Оубботин А.Д., Соколовская И.И. Иммунобиофизические свойства прозрачной зоны овоцитов млекопитающих в связи с оплодотворением. Доклады ВАСХНИЛ, 1981, № I, с. 24-26.

165. Таранова Н.П. Метод выделения цереброзидов и определение их удельной активности. В кн.: Нервная система. ЛГУ, 1962, вып. 3, с. 21.

166. Туманова С.Ю. Участие ганглиозидов в деятельности нервной системы. В кн.: Нервная система. ЛГУ, 1973, вып. 13,с. 41-62.

167. Туманова С.Ю. Роль гликопротеинов и гликолипидов в межклеточных взаимодействиях. Биохимия, 1978, т. 43, вып. 3,с. 387-398.

168. Тюпич М.М. Физиологическая характеристика семени быков по резистентности. Бюллетень научно-технической информации ВИЖ, 1959, с. 19-21.

169. Фердман Д., Файншмидт 0. Превращения аденозинтрифосфатнойкислоты в мышцах. Биохимия, 1936, т. I, вып. 2, с. 347-352.

170. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. М.: Мир, 1980. - 432 с.

171. Хачатрян Г.С. Новые данные по обмену углеводов и глико-липидов мозга при его различных функциональных состояниях. В кн.: Труды Ш Всесоюзн.конф.по биохимии нервной системы. Ереван, 1963, с. 431-446.

172. Чаудхари Л.Р. Исследование влияния витамина А на активность фосфолипазы А и некоторых ферментов лизосом в семенниках крыс: Дис. кацц.биол.наук. М., 1977. - 141 с.

173. Шавкун В.Е. Некоторые вопросы обмена белков в спермиях хряка. В кн.: Материалы П Всесоюзной конференции по физиологическим и биохимическим основам повышения продуктивности с.-х. животных. Боровск, 1963, с. 199.

174. Шавкун В.Е., Скварук А.Г., Зинченко Л.Г., Лесив М. М. Влияние биологически активных веществ в составе заполнителя на состояние эндометрия рогов матки свинок. Науч.-техн.бюл. Укр. НИИ физиологии и биохимии с.-х. животных. Львов, 1979, вып. 3, с. 65-67.

175. Шавкун В.Е., Хавинзон А.Г., Шаловилс С.Г., Жминка В.Я. Влияние биологически активных веществ на воспроизводительные функции производителей. Животноводство, 1979, № II, с. 60-62.

176. Шергин Н.П. Дыхание в сперме сельскохозяйственных животных. Доклады ВАСХНИЛ, 1939, вып. 2-3, с. 60-64.

177. Шергин Н.П., Несмеянова П.Н., Кузнецов М.П. Реакция среды, анабиоз и сохранение жизнеспособности сперматозоидов сельскохозяйственных животных. Доклады ВАСХНИЛ, 1941,вып.2, с. 34г-37.

178. Шергин Н.П. Способ оценки качества спермы без микроскопа. Совхозное производство, 1942, № 9, с. 31-32.

179. Шергин H.П. 0 влиянии аэробиоза и анаэробиоза сперматозоидов на качество потомства. В кн.: Тр. лаборатории искусственного осеменения животных ВИЖа. 1945, т. 2, с. 179-188.

180. Шергин Н. П. Физиологические и биохимические основы сохранения при 0° семени барана и быка. В кн.: Новое в биологии размножения сельскохозяйственных животных. М., Сельхозгиз, 1951,с. 71-73.

181. Шергин Н.П. Биохимия и технология семени сельскохозяйственных животных. В кн.: Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. M., 1956, с. 160.

182. Шергин Н.П. Биохимия, физиология и технология семени сельскохозяйственных животных. В кн.: Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. М. : Сельхозгиз, 1959, с. 12-28.

183. Шергин Н.П. Биохимия сперматозоидов сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1967. - 240 с.

184. Шредер В.Н. Физико-химический анализ физиологии сперматозоидов млекопитающих. Известия АН СССР, 1940, № 3, с. II—14.

185. Штрауб Ф.Б. Энергетический режим организма. Биохимия, 1963, с. 139-199.

186. Шубин A.A. Дервикальное введение окситоцина коровам повышает их оплодотворяемость. Свиноводство, 1980, № I, с. 43-45.!

187. Энгельгардт В.А. О локализации белка спермозина в семенных клетках. Биохимия, 1957, вып. 3, № 22, с. 554^-560.

188. Энгельгардт В.А. Некоторые проблемы современной биохимии. M., 1959. - 267 с.

189. Янопольская Н.Д., Деборин Г. А. Исследование проницаемости модельной липидной мембраны для некоторых ферментов. Биохимия, 1978, вып. 43, № I, с. I03-II0.

190. Abdulla A., El-Guindi M.M., Mostafa M.A. Alkaline and acid phosphatase activities in buffalo semen. Zbl.VeterinSrmed. 1973, A 20, H.7, S.56 7-570.

191. Abrahams H.F., Robinson D.^-D-glucosidase and related enzymic activities in pig kidney. Biochem.J., 1969, v.111, P.749.

192. Acher A.J., Kanfer A method for fractionation of ce-rebrosides into classes with different fatty acid compositions.-J.Lipid.Res.,1972, v.13, No.1, p.139-142.

193. Ackerman D.R. Glycerol metabolism in untreated, cold-shocked and frozen human spermatozoa. Cryobiology, 1970, v.7, p.145-147.

194. Aketa K. Physiological studies on the sperm surface component responsible for sperm-egs binding protein on the fertilization.I. Effect of sperm-binding protein on the fertilisation capacity of sperm. Exp.Cell Res .,1973, v.80, No.2, p.439-441.

195. Alfin-Slater Roslyn B. Pats, essential fatty acids and ascorbic acid. J.Amer.Liet Assoc., 1974, No.2, p.168-170.

196. Ansell G.B., Hawthorne J.N. The Phospholipids. Elsevier Publ.Co. Amsterdam, 1964.

197. Ansell G.B., Dawson R.M.C., Hawthorne J.N. Porm end Function of Phospholipids . Elsevier Publ.Co. Amsterdam, 1973, 385P*

198. Anson M.L. The estimation of catepsin with hemoglobin and "the partial purification of catepsin. J.Gen.Physiol., 1974, v.20, p.565-574.

199. Aogagi T., Suzuki J., Nerome K., Nishizawa R., Takoushi T Omohawa H. Sialic acid residues exposed on mammalian cell surface the effect of absorption on denatured virus particles. Biochem. Biophys.Res.Commun., 1974, v.57, No.1, p.271-278.

200. Ashwall G., Morell A.G. The role of surface carbohydrates in the hepatic recognition and transport of circulating glycoproteins. Advances in Enzym., 1974, v.41, p.99-123.

201. Badonoch-Gones P., Barin H. Putlier evidence for the hetero geneity of liver lysosomes. PEBS Letters, 1974, v.43, p.227-230

202. Bailey V.M., Howard B.V., Dunbar L.M., Uman S.P. Control of lipid metabolism in cultured cells. Lipids, 1972, v.7, Wo.2, P.125-134. .

203. Baldassare J«J., Rhinehart R.B., Silbert D.P. Modification of membrane lipid: physical properties in relation to fatty acid structure. Biochem., 1976, v.15, p.2986-2994.

204. Barrett A.J. Lysosomal enzymes. In: Lysosomes. A Laboratory Handbook. Ed.J.I.Dingle. Worth Holland, Amsterdam and .jondon,1972, p.46-135.

205. Beaulaton J., Perron-Waldemer C. Localisation ultrastructurale d'une activité phosphatasique acide dans les spermatides ei les spermatozoides de Drosophila melanogaster. C,r,Acad„Sci.,1973, D-276, N. 15, p.2277-2280.

206. Bell A.W. Lipid metabo.lism in liver and selected tissues and in the whole body of ruminant animals. Progr.Pipid Res«, 1979, v.18, No.3, p.117-164.

207. Beutler E., Kuhl W. Biochemical and electrophoretic studies of¿x-galactosidase in normal man and in patients with Fabry'i disease. Mer.J.Hum.Genet., 1972, v.24, p.237-249.

208. Billimoria J.D. »Irani ' V. J. »Maclagon 'N.F. Phospholipid fractionation and blood clotting. Atheroscler.Res., 1965,, v.5, No.1, p.90-101.

209. Block'R., Haberich F.J. Acidi grassi a catena media rias-sorbimento, metabolisme ed importanza clinica. Minerva Med., 1973, v.64, U.58, p.3028-3036.

210. Bioj B., Morero R.D., Farias R.N., Irucco R.F. Membrane lipid fatty acids and regulation of membrane-bound enzymes. -Bio chim.Biophys•Act a, 1973, v.311, p.67-69.

211. Bogoch F.S., Bogoch B.S.Effect of brain ganglioside on the "heart of the clam. Nature, 1959, v. 183, lfo.4653, p.53-54.

212. Bonadonna T. Osservazioni sul distacco del'area acrosomicE dei nemaspermi. Glin.Veter., 1978, v.101, N.6, p.315-323.

213. Booth D.A. The isolation and assay of gangliosides and their interactions with basic proteins. J.Neurochem., 1962, v.9, p.265.

214. Boursnell J.et al. Effect of egg yolk and other reagents upon the zinc of cold-shocked boar spermatoaoa. J.Reprod.and Pert., 1978, v. 52, Wo.2, p.327-332.

215. Brady R.O". Immunochemical properties of glycolipids. -J.Amer.Oil Chem.Soc., 1966, v.43, Uo.1, p.67-69.

216. Breckenridge J.C., Morgan J.C., Zanetta J.P., Vincendon Adult' rat brain synaptic vesicles.XI. Lipid composition. Bio-chim.et Biophys.Acta, 1973, v.320, p.681-686.

217. Brenner R.R. Biosyntheisisof unsaturated fatty acids. -Acta "Physiol.Latinoaraer., 1966, v. 16, Suppl.2, p.68-82.

218. Brot J.E., Glaser J.H., Roozen K.J., 'Sly W.S. 'In vitro c rection of deficient human fibroblasts by A-glucuronidase from d ferent human sources. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1974, v.57, p.1-7.

219. Brown CiR. Distribution of hyaluronidase in the ram sper matozoa. J.Reprod.and Fertil.,1975, v.45, N0.3, p.533-539.

220. Bryan J.M. Capacitation of the mouse: the response of murine acrosomes to the environment of the female reproductive tra< Biol.Reprod., 1974, v. 10, Ho.4, p.414-421.

221. Buongiorao-Nardelli M., Bertolini B. Subcellular localization of some acid hydrolases in 'Iriturus cristalus spermatozoa Histochemie, 1967, H.8, S.34.

222. Burton R.M., Balfour Y.M., Gibbons J.M. Gangliosides and cerebrosides turnover rates in rat brain. Ped.Proc.,1964, v.23, Ho.2, Part I, p.236 (774).

223. Bushway A., Clegg E.D., Keenan I.W. Composition and synl sis of gangliosides in bovine testis, sperm and seminal plasma. -Biol.Reprod.,1977, v.17, N0.3, p.432-442.

224. Butler Iff.J., Roberts T.K. Effect's of some phosphatydil compounds on boar spermatozoa following cold shock. J.Reprod. and Fert.,1975, v.43, Ho.£, p.183-187.

225. Cato-Soler J. et ¿1- Inadequacy of myelin phospholipids for restoration of succinoxidase activity in lipid deleted mitochondria. J.Bioenerg., 1971, v.2, Ho.2, p.129-134.

226. Capella P., Galli C., Pumagalli R. Hydroxy fatty acids f; cerebrosides of the central nervous system: CLC determination an< mass spectrometric identification. Lipids, 1968, v.3, Wo.5,p.431-438.

227. Carter H.E. Biochemistry of the sphyngolipids.VII. Struc ture of the cerebrosides. J.Biol.Chem., 1952, v.199, No.1,p. 283-288.240." Cerovsky J. Morfologie spemii u neplodnych kancu. Zdvo' cisna vyroba, 1977, c.22, No.4, s.275-283.

228. Cerovslcy J. Srovnani vyshyti moriologickich abnormalit k ci di spermii ejaculatech infertilnich kancu a v ejaculatech kanci s neporusenou fertilitou. Zivocisna vyroba, 1978, c.23, N.4, s 291-296.

229. Cerovsky J. Morfologicke zmeny spermii plemennych kancu ■ letnini obdobi. Zivocisna vyroba, 1978, c.23, N. 10, s.715-723.

230. Clark E. Heat stress.'- Feedstuffs, 1978, v.50, No.33, p. 13.

231. Clegg F.D., Poote R.H. Phospholipid composition of bovim sperm fractions, seminal plasma and cytoplasmic droplets. -J#Reprod.and Pert.,1973, v.34, No.2, p.379-383.

232. Coles E., Poote J.L. A thin-layer chromatographic separation of cerebrosides and related compounds. J.Chromatogr., 196 v.39,No.2, p.229-231.

233. Coulter G.H., Foote R.H. Lipid deficient extender for bovine spermatozoa: its development and use in measuring freezir induced lipid loss. J.Dairy Sci.,1975, v.58, No.1.

234. Cullis P.R., De Kruijff B. Lipid polymorphism: the funct onal role of lipids ih biological membranes. Biochim.et Biophy Acta, 1979, v.559, No.4, p.399-420.

235. Dacheux J.L., O'Shea I. Effects of osmolality and buffer on the metabolism and motility of testicular, epididymal and eja culated spermatozoa. J^Reprod.and Pert., 1979, v.55, No.2, p. 287-296.

236. Darin-Bennett A. et al* She effect of cold shock and fre zing-thawing on release of phospholipids by ram, bull and boar spermatozoa. Austral.J.Biol.Sci., 1975, v.26, p.1409-1420.

237. Darin-Bennett A., White J.C., Hoskins D.D. "Phospholipids and phospholipid-bound fatty acids and aldehydes of spermatozoa and seminal plasma of rhesus monkeys. J.Reprod.and Pert., 1977 v.49, No.1, p.119-122.

238. Dawson R.M.C." The exchange of phospholipids between cell membranes. Sub-cell Biochem., 1973, v.2, No.1, p.69-89.

239. De Duve C. The Lysosome Concept. "Giba Foundation Symposi um on Lysosomes. Little, Brown and Co., Boston, 1963, P.1-35.255". De Duve C., Wattiaux R. Functions of lysosomes. Amer. Rev ."Physiol., 1966 j v.28, p.435.

240. Desai J.D. Regulation of lysosomal enzymes. I. Adaptive changes in enzyme activities during starvation and refeeding. -Canad.J.Biochem., 1969, v.47, p.785-790.

241. Dod B.J.,'Gray G.M. The lipid composition of rat liver plasma membranes. Biochim.et Biophys.Acta, 1968, v.150,, N0.3, p.397-404.

242. Dott H.M., Dingle J.T.Distribution of lysosomal enzymes in the spermatozoa and cytoplasmic droplets of bull and ram. -Exp.Cell Res., 1968, v.52, p.523.

243. Duponêy P. Ilole of the cerebrosides and a galactodiglyce de in'thé antigenic cross-reaction between nerve tissue and trep nema. J.Immunol.,1972, v.109, No.1, p.146-153.

244. Egbunike G.^" Dêde I. The influence of short-term exposur to tropical sunlight on boar seminal characteristics. Intern.J Biometeorol., 1980, v.24, No.2, p.129-135.

245. Paillage L.A., Bogoch S. Quantitative separation of humai brain glycolipids: isolation of an aminoglycolipid. Biochem.J., 1962, v.82, N0.3, p.527.

246. Pex Gô'ran. Phospholipid metabolism during regeneration oJ rat liver. Biochem.J., 1970, v.119, N0.4, p.743-747.

247. Fishman P.R., Brady R.O. Biosynthesis and function of gar gliosides. Science, 1976, v.194, p.906-915.

248. Flowers "H.M. Phosphorus lipids. Analytical Chemistry Phosphorus Compounds, 1972, v.24, p.659-701.

249. Folch J., Lees'M.Stanley G.H.S. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. -J.Biol.Chem., 1957, v.226, No.1, p.497.

250. Foulkes J., Wat'son P. Hyaluronidase activity in seminal plasma as a method of assessing bull sperm integrity. J.Reprod; and Fertil., 1975, v.43, No.2, p.349-353.

251. Foulkes J. The separation of lipoproteins from egg yolk and "their effect on the motility and integrity of bovine spermatozoa. J.Reprod.and Fert.,1977, v.49, No.2, p.277-284.

252. Gammack D.B. Physicochemical properties of ox-brain gang-liosides. Biochem.J., 1963, v.88, N0.3, p.373-383.

253. Ganguli N. Behaviour of buffalo spermatozoa on rehabilita tion. — Indian Dairyman, 1979, v.31, No.7, p.491-496.

254. Ganguli N., Kakar'S. Status of acrosomal hyaluronidase in cattle semen during preservation. Zbl.VeterinSrmed., Reihe A, 1980, B-27, H.3, S.221-227.

255. Georgie G.C.' Cliand D., Rasdan M.N. Seasonal changes in plasma cholesterol and serum"alkaline phosphatases and transaminase activities in crossbred cattle. Indian J.Exp.Biol.,1973» v.11, No.5, P.448-450.

256. Gershbein L.L., Singh E.J. Hepatic lipid changes during : ver regeneration in the rat. Acta Hepato-Splenol., 1970, v.17, No.5, p.307-323.

257. Gilbert G#, Almquist S. Effects of processing procedures on post thaw acrosomal retention and motility of bovine spermatozoa packeged in 0.3 ml straws at room temperature. J.Ariim.Sci., 1978, v.46, lio.1, p.225-231.

258. Glander H.-J.", Dettmer D. Monosaccharide transport across membranes of human spermatozoa.I.Development of radiochemical method of measuring monosaccharide uptake by. spermatozoa. Andr< logia, 1978, v.10, No.1, p.69-73.

259. Glander H.-J., Dettmer D. Monosaccharide transport across membranes of human spermatozoa.il. Basic properties of D-fructos< and D-glucose uptake. Andrologia, 1978, v.10, No*4, p.273-277.

260. Goldstone A., Szabo P., Koenig H. Isolation and character zation of lipoprotein in renal and hepatic lysosomes. Life Sci,1970, v.9, Part II, p.607-613.

261. Goldstone A., Koneciiy P., Koenig H. Lysosomal hydrolases: conversion of acidic to basic forms by neuraminidase. PEBS Let« ters, 1971, v.13, p.68-72.

262. Heath E.G. Complex of polysaccharides. -Ann.Rev.Biochem.:1971, v.40, p.29-56.

263. Hegner D., Platt D. Effect of essential phospholipids on the properties of ATP-ases of isolated rat liver plasma membranes of young and old animals. Mech.of Ageing and Developm.,1975,v.4, No.>4, p. 191-200.

264. Herak MT et "al. Utjecaj dubokog smrazavanja sperme na promjene kolicine ukupnih lipida, fosfolipids i^-lipotroteida u spermijima bika. Veterinarski archiv, 1978, t.48, s.15-17«

265. Herman H. How long can you keep frozen semen? Hoard's Dairyman,1977, v.122, No.8, p.550-551.

266. Hess H.H., Thalheimer C. Microassay of biochemical structural compounds in nervous tissues. I.Extraction and partition of lipids and assay of nucleic acids. J.Neurochem.,1965, v.12, No. 3, P.193-204.

267. Holzman A. et al. Korrelation zwischen spermatologischen Beflinden und Hyaluronidase-Aktivität im liersamen. Zuchthygiene 1978, Bd.13, H.3, S.121-126.

268. Hönning R., Plattrier H., Stoffal W. Nature and localization o*f acidic enzymes on lysosomal membranes. Biochim.et Bio-phys.Acta, 1973, v.330, p.61-75.

269. Hood R.D., Poley C.W., Martin T.G. Effects of cold shock, dilution, glycerol and dimethyl sulfoxide on cation concentration in porcine spermatozoa. J.Anim.Sci.,1970, v.30, No.1, p.90-94»

270. Horst C.et al. Determination of phenylalanine-oc-ketoglu-taräte transaminase in boar semen as criterion of dilution without loose of fertilizing capacity. Nether.J.Veter.Sei.,1972, v.5, No.1, p.3-10.

271. JainY.C., Anand S.R. The lipids of buffalo spermatozoa and seminal plasma. J.Reprod.and Pert., 1976, v.47, No.2, p.255' 260.

272. Jain Y.C., Anand S.R. Patty acids and fatty aldehydes of buffalo seminal plasma and sperm lipids. J.Reprod.and Pert., 1976, v.47, No.2, p.261-267.

273. Jones R.", Marin T. Lipid peroxidation in spermatozoa.-Proc.Roy.Soc.London, 1973,"v. 184, No. 1074, p.103-107.

274. Jones'R., Manri T. Lipid peroxidases in spermatozoa: formation, role of plasmalogen, and physiological significaB.ce. -Proc.Roy.Soc. London, B 1976, v. 193, No.1113, p.317-333.

275. Jones R., Mann T. Damage to ram spermatozoa by peroxidation of endogenous phospholipids. J.Reprod.and Pert.,1977, v.50, No.2, p.261-268.

276. Jones R., Stewart D. The effects of colling to 5°G and freezing and thawing on the ultrastructure of bull spermatozoa.-J.Reprod.and Pert.,1979, v.56, No.1, p.233-238.

277. Johnson L.A., Pursel V.G., Gerrits R.J. Total phospholipids and phospholipid fatty acids of ejaculated and epididymal semen and seminal vesicle fluids of boars. J.Anim.Sci.,1972, v.35, No.2, p.398-403.

278. Kakar S.-S., Ganculi N.C. Inhibition of proteolytic enzymes by buffalo and cattle seminal plasma. Indian J.Exp.Biol., 1978, v. 16, No. 10, p. 1079-1080

279. Kaker M. et al. Lactate and succinate dehydrogenase activities of semen from young crossbred bulls. -Indian J.Exp.Biol.,1976, v. 14, No.4, p.483-485.

280. Kann M., Roze С. Etude statistique ses alterations infra-structurales observées après congélation du sperraatozoide de taureau: relation avec le pouvoir fécondant. Elevage-Insém.,1975, V.T46, p. 14-25.

281. Kâur'S.P., Chaudhry P.S., Anand S.R. Acrosomal hydrolases in buffalo spermatozoa. Experientia, 1976, v.32, N0.4, p.436-43

282. Kawabata K., Kijima H.,Shiraishi A., Mazita H. <X-glucosi dase isozymes and the labelled sugar receptor of the blowfly. -J.Insect.Physiol.,1973, v.19, p.337-347.

283. Kishimoto Y., Redin N.S. Determination of brain gangliosi des by determination of ganglioside stearic acid. J.Lipid.Res., 1966, v.7, No.1, p.141.

284. Kleinig H. Nuclear membranes and plasma membranes from hen ¿rythrocytes.II.Lipid composition. J.Biol.Chem.,1971, v.246 No.9, p.2996-3ООО.

285. Klenk E., Gielen W. Untersuchungen über die Konstitution der Gangliosides aus Menschengehim-und die'Trennung des Gemisph-es in die Komponenten. Hopper-Seyler1 s &.Jfiijsiol.Chemo j 1961,1. Bd.326, H.2-4, S.144-145.

286. Klénk E., Hendricks U., Gielen W. (b -d-Galactosido-( 1-3)--R-acétyl-D-galactosamin, ein kristallisiertes Disaccharid aus menschlichen Gehirngangliosiden. Hoppe-Seyler1 s Z.Physiol. Chem 1962, Bd.ЗЗО, H. 1-3, p. 140-144.

287. Klenk E.i Doss 1. Uber das Vorkommen von Estercerebrosi-den im Gehirn. Höppe-Seyler1 a Z.Physiol.Chem., 1966, Bd.346,1. H.3-6, s.236-238.

288. Klenk E., Lutz G. Uber zwei weitere Komponenten des Gemisches der Gehirngangliosidê. Hoppe-Seyler's Z.Physiol.Chem.,1967, Bd.343, H.10, S.1261.

289. Klenk E. Brain garïgliosides. J.Sci.and Industr.Res., 1969, v.27, No.2, p.78-82.

290. Klenk E.', Huang R.T.C. Uber die Zusammensetzung des Gera-midgémisches aus Gehirngangliosiden. Hoppe-Seyler• s Z.Physiol. Cheia., 1970, Bd.351, H.3, S.337-341.

291. Koenig H. "Lysosomes in thé nervous system. In: Lyeosomes in Biology and Pathology. Eds.Dingle J.T., Pell H.B.,1969, Part II, p.111-162.

292. Koh et al. Fertility of liquid boar semen as influence by breed and season. J.Anim.Sci, ,1976, v.42, No.1, p.133-144.

293. Kozumplik J. Velikost pelet a individualni vlastnosti semerie kancu ve vztahu k poctu pohyblivych spermii po rozmrazenu. Veter.Med., 1978, t.23, N;8, s.476-483.

294. Kuhn R., Wiegandt H. Die Konstitution der Ganglio-R-totrhose und des Gangliosides Gi. Chemie (Berl.), 1963, N;3, S.866".

295. Kupferschmied H., Gaillard C. Long term fertility results of biill semen frozen with and without beta-glucuronidase. -Therio genology, 1978, v. 10, No.1, p.3-11i

296. Langford B., Howarth B. À trypsin-like enzyme in acrosomal extract,s of chicken, turkey and quail sprrmatozoa. Poultry Sci.,1974, v.53, N0.2, p.834-837.

297. Lardy H., Phillips P. Acetate utilization for maintenance of motility of bull spermatozoa. Nature, 1944, v.153, p.168.

298. Larsson K., Einarsson S., Nicander L. Influence of thawing diluënts on vitality, aerosome morphology, ultrastructure and enzyme release of deep frozen boar spermatozoa. -Acta Veter. Scand., 1976, v.17, No.1, p.83-100.

299. Larsson K. Current research on the deep freezing of boar sperm. World Rev.Anim.Prod., 1978, v. 14, No.4, p.59-64.

300. Lenaz G. The role of lipids in"the structure and function of membranes. Sub-cellular Biochemistry,1979, v.9» p.233-243.

301. Lessley B.A., Brown K.J. Activity of eight enzymes of chicken seminal plasma in the eluent from agarose gel chromatography. Poultry Sci.,1975, v.54, No.1, p.23-35.

302. Levis D. Summer breeding management. Nebraska Swine Report, 1980, No.80-219, p.9-10.

303. Lindahl T. A "B-gluconidase from Escherichia coli t.hafc rele eses from uracyl from TAA containing deaminated cytosine residues. Proc.Nat.Acad.Sci. U.SA, 1974, v.71, p.3649-3653.

304. Lucy J.A. Lipids and membranes. PEBS Letters, 1974, v.40, Suppi.1, p. 105-111.

305. Lundblad G. Proteolytic activity in sea urchin gametes. IV. Purther investigations of the proteolytic enzymes of the egg.-Ark.Kemi, 1954, v.7, No.17.

306. Lyczynski A. Dlugotrwala konserwacja nasienia knurow. -Przegl.Hodowl.,1979, N.12, s.22-23. .

307. Maclouf'J., Sors'H., Rigaud M. Recent aspects of prostaglandin biosynthesis. A review. Biomedecine,1977, v.26, N0.6, P.362-375.

308. Mann T. Studies on the metabolism of semen. Biochem.J., 1945, v.39, p.458.

309. Mann T. The Biochemistry of Semen. London, 1954, p.87.

310. Mann I., Lutwak-Mann C. Bio chejnical changes 'inderlying the phenomenon of cold-shock in spermatozoa. Arch.Sci.Bio}., 1955, v.39, p.578-588.

311. Marin Т. The Biochemistry of Semen and of the Male Reproductive Tract. Ed.John Wiley, New York, 1964, p.126.

312. Mann Т., Karagishnidis A., Martin A.W. ,Jr." Glycosidases in the spermatiophores of the giant octopus, Octopus dofloini martini. Comp.Biochem. and Physiol., 1973» v.44, p.1377-1386.

313. Mann T. Progress in biology of the gametes.I.Problems in the male. Plenary Papers. Proc.VIIIth intern.Congr. on Anim. Reprod. and Art.Insem., Krakow, 1976, v.11, p.39-45.

314. Masaki J., Hartree E.G. Distribution of metabolic activity, phospholipid and hyaluronidase between the heads and tailsof bull spermatozoa. Biochem.J.,1962, v.84, P.347.

315. Masek N.et al. Aktivita alkalicke fosfatazy (AF-E„C.3#1. 3.1.) a cholinesterazy (CHE-E.C.3.1.1.7.) v ejakulatech kancu pri chladovem stresu. Acta Uni v. Agr. Рак. Agr on. Br no, 1978, C.26, N. 1, s. 53-57. .

316. Masek N.et al. Genetycka analyza objemu filtrovaneho eja-kulatii a koncentrace spermii u kancu v inseminaci. -Zivocisna vyroba, 1979, c.24, N. 1, s.37-46.

317. Masoro E.'J. Lipids and lipid metabolism. Annual Rev. Physiol.,1977, v.39,"No.3, p.301-321.

318. Menkes J.B., Pilipart M'., Con cone M.C. Concentration and fatty acid composition of cerebrosides abd sulfatides in mature and immature human brain. J.Lipid Res., 1966, v.7,. N0.4, p. 479-487.

319. Mollenhauer'H.H., Morre B.J. Polyribosomes associated with formin aerosome membranes in guinea pig spermatids. -Science, 1978, v.200, No.4337, p.85-86.

320. Morton D.B. Acrosomal enzymes: immunochemical localization of acrosin and hyaluronidase in ram spermatozoa. J„Reprod. and Pert., 1975, v.45, No.2, p.375-378.

321. Mudra P., Conrad P. Ergebnisse zur Steigerung der Fruchtbarkeit sl ei stung bei KB-Ebern.- Akad.landw.Wissensch. DDR,, 1978, N.172, S. 177-182.

322. Müller E. Vergleichende Untersuchungen über die Motilität und die Gesamtdehydrogenaseaktivität von Frischsamen und aüfgelauten TGN-Samen. Deutsche tierSrztl.Wschr., 1976, Bd.83, N.9, S.393-398.

323. Murdock R., Jones R. The effects of glycerol on the metabolism and ultrastructure of boar spermatozoa. J.Reprod.,and Fert., 1978, V.54, N.2, S.419-422.

324. Mutdoch R.N.; Davis W.D. Effects of bicarbonate 011 the respiration and glycolytic activity of boar spermatozoa. Austr. J.Biol.Sci., 1978, v.31; N0.4, P.385-394.

325. Weill A.R., Masters G.J. Metabolism of fatty acids by ovine spermatozoa. J.Reprod. and Pert.,1973, v.34, No.2, p.279-287. '

326. Nelson C.J. The phospholipid composition of plasma in various mammalian species. Lipids, 1967, v.2, N0.4, p.323-328.

327. Neurath H., Walsh K.A., Gertler A. Initiation of physiological function by limited proteolysis. In: Metabolic Interconiser-sion of Enzymes. Ill Intern.Symposium, Seattle., June 1973. Springer Yerlag, 1974.

328. Nicol D.M., Logunof.f D. Differential uptake of human fo -glucuronidase isoenzymes from spleen by deficient fibroblasts. -Bi©chein.Biophys.Res.Commun., 1974, v.59, p.941-946.

329. Nissen H.F., Kreysel "H.W., Heinze L., Schirren C. Isolierung und Analytik vin Glykolipiden aus Humansperma. Andrologia, 1978, Bd.10, N.4, S.257-260.

330. Novikoff A.B., Novikoff P.M. Cytochemical conrributions to differentiating GERL from the Golgi apparatus. Histochem.J., 1977, v.9, NQ;5, p.525-552.

331. Ockerman P.A." Manriosidosis. Oligosaccharide storage material from brain. J.Pediat.,1969, v.75, P.36O-365.

332. Oeltman T.N., Heath P.C. Characterization of the catalytic subunit a capsular saccharide glycanohydrolase.- Carbohydr. Res., 1974, v.37, p.59-73.

333. O'Shea T., Dacheux J.-L., Paquignon M. Metabolism of boar spermatozoa before, during preparation for, and after storage in liquid nitrogen. J.Reprod. and Pert.,1979, v.55, No.2, p.277-285.

334. Panciroii G. Indirizzi per miglioràre la fertilita nel periodo estivo. Rivista, 1978, v.19, N.8, p.27-28.

335. Pavlova S.K. Studies on seminal plasma acid phosphatase. -Reports Bulgarian Acad.Sci.,1977, t.30, N.1, s.125-127.

336. Phillips P., Privett O.S. A simplified procédure for the quantitative extraction of lipids from brain tissues. Lipids, 1979, v.14, N0.6, p.590-595.

337. Podany J., Petrovsky E., Jirasek B. Polarograficke studium bilkovin semenne plazmy kancu. Acta Univ.Agr., Sborkik Vyso-ke Skoly Zemedelske, Brno, 1978, c.26, N.1, s.45-51.

338. Polakoski K.L., Williams W.L. Isolation of proteinase inhibitors from boar sperm aerosomes and boar seminal plasma and effect on fertilization. Bayer-Symp., V.Proteinase Inhibit., Berlin, 1974, S.156-163.

339. Poulos A., Darin-Bennett A., White J.C. The phospholipid-bound fatty acids and aldehydes of mammalian spermatozoa. Сотр. Biochem.et Biophys.,1973, B-46, No.3* p.541-549.

340. Poulos A., Vogmayr J.K., White J.G. Phospholipid changes in speematozoa during passage through the genital tract of the hull. Biochim.et Biophys.Acta, 1973, v.306, No.2, p.194-202.

341. Poulos A., White J.G. The "'"phospho lipid composition'of human spermatozoa and seminal plasma. J.Reprod.and Pert.,1973,v.35, No.2, p.265-272.

342. Radin li.S.,' Akahory Y. Patty acids of human brain cerebro-sides. J.Lipid Res.,1961, v.2, N0.4, p»335-341.

343. Rahmann H. Possible functional role of gan gliosides.-Exp.Med.Biol., 1976, v.71, p. 151-161.

344. Rapport M.M., Graf B., Ledeen R. Specificity of antiserum to brain ganglioside. Ped.Proc.,1968, v.27, No.2, p.463.

345. Reddy N., Raja C. Seasonal variations in fructose, citric acid and ascorbic acid contents of buffalo semen. Indian J.Vet., 1979, v.56, N0.8, p.660-662.

346. Riordan J.R., Mitchell L., Slavik M. The binding of sialo-glycoprotein to isolated Golgi apparatus. Biochel.Biophys.Res. Commun.,1974, v.59, p.1373-1379.

347. Robinson D., Stirling J.L. Localization of N-acetyl- /*>-glucosaminidase of rat liver membranes. Biochem.J.,1969, v.115, P.39.

348. Robinson D., Thorpe H. Affinity of chromatography of huma liver oc-L-fucosidase. PEBS Letters, 1974, v.45, p.191-193.

349. Rogers B.'J., Yanagimachi R. Release of hyaluronidase from guinea pig spermatozoa through an aerosome reaction initiated by calcium. J.Reprod.and Pert.,1975, v.44, No.1, p.135-138.

350. Rosenfeld R.L., Lukonskaya I.S., Popova I.A. Acid and neutral poly-and oligoglucosidases in animal tissues. Enzymolo-gia, 1966, v.301, p.1.

351. Roy Choudhury R., Sadhu D. Effect of season and temperature on the transaminase activity of sperm cells of Holstein, Jea sey and Sahiwal bulls. Indian J.Anim.Health, 1976, v. 15, No.2, P.133-136.

352. Roussel J.D., Stallcup O.T. Activity of lactic dehydrogenase and its isozymes in bovine semen. J.Dairy Sci.,1965a, v.48 p. 1506.

353. Sanford L.M., King G.J., Macpherson J.W. Influence of gly cerol concentration and freezing to -79°G on oxygen uptake and livability of boar and bull spermatozoa. Canad.J.Anim.Sci.,1972 v.52, No.1, p.65-72.

354. Schanbacher B., Lunstra D. Seasonal changes in sexual activity and serum levels öf LH and testosterone in Finnish Landrac and Suffolk rams. J.Anim.Sci.,1976, v.43, N0.3, p.644-650.

355. Schatten G., Mazia D. Ihé penetration of spermatozoa through the sea urchin egg surface and fertilization. Exp.Cell Res.,1976, v.98, p.325-337.

356. Schill W.-B. Der Einfluss der kryobiologischen Behandlung von Hiiinansperma auf die Aktivität der akrosomalen Protease Akrosii Andrologie,1973, Bd.5, N.4, S.3^3-337.

357. Schmidt M., Czajkowska B. Wolne kwasy tluszczowe, ich oz-naczanie i rola w ustroju. Przegl.lekarski, 1976, r.33» N.9, s.810-813.

358. Scholz H. Lecithin, ein wichtiges Phosphatid. Labor. Praxis, 1971, Bd.6, S.160-162.

359. Schongrund C.L., Jensen B.S., Rosenberg A. Localization of cialidase in the plasma membrane of rat cells. J.Biol.Chem., 1972, v.249, p.2742-2746.

360. Schwartz N., 'Bachelard H.S., McJwain H. The sodium stimulated adenosine-triphosphatase activity and other properties of ce rebral microsomal fractions and subfractions. Biochem.J.,1962, v.84, N0.3, p.626.

361. Schwertz T.B. Lipid Metabolism. The Year Book of Endocrino logy, 1977, p.229-235."

362. Sezillè "G. Variations quantitatives et qualitatives des acides gras non-estérifiées plasmatiques sous l'effet d'une surcharge lipidique administrée par voie orale chez l'homme normal. -Clin.chim.acta, 1971, v.35, N.1, p. 109-114.

363. Sharma D.P.Venkitasubramariian T. Buffalo semen lipids. -Indian J.Anim.Sci.,1975, v.45, No.11, p.812-816.

364. Sherwin A.L., Bovvden J.A., Wolfe L.S. The production of an tisera to gangliosides from human nervous tissue. Canad.J.Bioche 1964, v.42, No.11.

365. Siddiqui B., McCluer H.H. "Lipid components of sialosylgala tosylacramide of human brain. J.Lipid Res.,1968, v.9, N0.3,p.366-370.

366. Sidhu K.S., Guraya S.S. Effect of cold shock on enzyme release in buffalo (Bubalus bubalis) spermatozoa. Ann.biol.anim. bio chim .biophys., 1978, v.18, N.2A, p.283-286.

367. Siler S. ét al. Pénotypôva charakt'eristika nekterych znaku spermatu kancu. Zivocisna vyroba, 1977, c»22, N.9, s.687-696.

368. Soto E., Seminariode B.L., Carmen Calvino M.R. Chemical composition of myelin and other subcellular fractions isolated from bovine white matter. J.Neurochem.,1966, v.13, No.10, p.989-998.

369. Spence M., Wolfe L.S. Gangliosides in developing rat brain Isolation and composition of subcellular membranes enriched in gan gliosides. Canad.J.Biochem.,1967, v.45, No.5, p.671-688.

370. Spencer B. Hydrolytic enzymes of human bronchial epithelium, Biochem.J., 1959, v.71, No.3, p.500-507.

371. Sprecher H.W. Regulation of polyunsaturated; fatty acid biosythesis in the rat. Ped.Ecoc., 1972, v.31, No.5, p. 14511457.

372. Srivastava P.N., Munnell J.P., Yang C.H.,Poley C.W.

373. Sequantial release of acrosomal membranes and acrosomal enzymes of ram spermatozoa. J.Reprod.and Pert.,1974, v.36, No.2, P.363-372.

374. Stein 0., Stein Y. Lipid synthesis, intracellular transport and storage. J.Cell Biol.,1968, v.36, No.1, p.63-77.

375. Svermerholm L. On the isolation of gangliosides. Ped. Proc.,1956, v. 10, N0.6, p. 1048.413« Svennerholm L. Chromatographic separation of human brain gangliosides. J.Neurochem.,1963, v.10, No.9, p.613.

376. Svennerholm L., Söllberg-Stenliagen S. Changes in the fat' ty acid composition of cerebrosides and sulfatides of human nervous tissues with age. J.Idpid Res.,1968, v.9, No.2, p.215-225

377. Tamblyn T.M. Identification of actin in boar epidydimal spermatozoa. Biol.Reprod.,1980, v.22, No.3, p.727-734.

378. Tappel A.L., Sawant P.L., Shibko S. Lysosomes. London, 1963, P.78.

379. Tappel A.L. Lysosomal enzymes and other components. In: Lysosomes in Biology and Pathology. Eds.Dingle J.Т., Pall H.B. North Holland Publ.Co., Amsterdam London, 1969, Part II,p.207.

380. Touster 0. The characterization of lysosomal enzymes. Birth "defects. Orig.Artie.Ser., 1973, v.9, No.2, p.9-14.

381. Towns K., Luke R. Measurements of adenylate cyclase activity "in ram spermatozoa. J.Reprod.and Pert.,1976, v.47, No.2, P.355-357'

382. Trams E.G., Bauter G.J. On the isolation and characterize tion of gangliosides. Biochim.et Biophys.Acta, 1962, v.60, No.2 P.350.

383. Treu H. et al. Stand und Probleme der Tiergefrierkonser-vierüng von Ebersperraa. Tierzüchter, 1977, Bd.29, H.8, S.338-340.

384. Tyas M.J. A histochemical study of the effect of phenol on the mitochondria and lysosomes of cultured cells. Histochem. J.,1978, v.10, N0.3, P.333-343.

385. Vanha-Perttula 3?. Spermatogenesis of anhydrolytic enzymes. A review. Ann. bio 1. anim. Bio chira, bio phys., 1978, v.1Ei, N.2B, p.633-644.

386. Varute A.T., Sawant V.A. Multiplicity of ^-glucuronidase in insect development and astasorphosis. Indian J.Exp.Biol., 1971, v.9, p.333-337.

387. Warrén L. The thiobarbituric acid assay of sialic acids.-J.Biol.Chem.,1959, v.234, No.1, p.8.

388. Wendt'V., Leidl W., Pritz H. The influence of various proteinases inhibitors on the gelatinolytic effect of ejaculatedand uterine boar spermatozoa. Hoppe-Seyler's Z.physiolChem., 1975, Bd.356, N.6, S. 1073-1078.

389. Wettemann R.P., Wells M.E., Omtvedt I.I. Infleunce of elevated ambient temperature on reproductive performance of boars.-J.Anim.Sci.,1976, v.42, N0.3, p.664-669.

390. Wettemann R., "et al. Recovery of normal semen quality after heat stress of boars. Misc.Publ.(Oklahoma State Univ.Agr.

391. Exper.Stat.Stillwater), Okla.,1977, Wo.101, p.152-156.

392. Whitmer J.T., Idellwenger J.A., Rovetto MiJ. et al. Control of fatty acid metabolism in ischemic and hypoxic hearts.-J.Biol.Chem., 1978, v.253, No.12, p.4305-4309.

393. Wiegahdt H. Structure and specificity of gangliosides.-Exp .Med .and Biol., 1976, v.71, p.>14.

394. Wierzchos E., Wierztowski S. Gotowy rozcienczalnik nasie-nia w inseminacji loch. Przegl.Hodowl.,1977, r.45, N.15, s.17-1*

395. Winterburn P.J., Phelps C.P. The significance of glycosi-lated proteins. Nature, 1972, v.236, p.147-151.

396. Wolfe L.S., Lowden J.A. Studies on brain gangliosides.I. The isolation and composition of trisialoganglioside. Canad.J. Biochem.,1964, v.42, No.7, p.1041-1056.

397. Work T.S., 'Work E. Techniques of Lipidology. Isolation, Analysis and Identification of Lipids. North-Holland Publ.Co., Amsterdam, 1972, 6l0p.

398. Zahler Warren L., Doak Gordon A. Isolation of the outer acrosomal membrane from bull sperm. Biochim.et Biophys.Acta, 1975, v.406, N0.4, P.479-488.

399. Zittle G., Ziittin B. Amount and distribution of cytochrome oxidase in bull spermatozoa. J.Biol.Chem.,1942, v.144, No.9i

400. Zmaal R.P.A. Membrane and lipid involvment "in blood coagulation. Biochim.et Biophys.Acta, 1978, v.515, N0.24, p.163-205.