Разработка противоопухолевых препаратов направленного действия на основе фотосенсибилизаторов и антибиотиков антрациклинового ряда с использованием белковых векторов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Гукасова, Надежда Вадимовна

• Гукасова, Надежда Вадимовна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гукасова, Надежда Вадимовна

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Фотодинамическая терапия - новое направление в лечении онкологических заболеваний

1.1.1 История становления метода

1.1.2 Агенты для фотодинамической терапии: фотосенсибилизаторы первого и второго поколений

1.1.3 Механизмы действия фото динамической терапии

1.1.4 Опыт клинического применения фотодинамической терапии и возможные пути повышения ее эффективности

1.2 Химиотерапия онкологических заболеваний с использованием антрациклиновых антибиотиков

1.2.1 Основные свойства антрациклиновых антибиотиков

1.2.2 Проблемы в области химиотерапии злокачественных новообразований

1.2.3 Применение полимерных носителей и векторных молекул для повышения селективности действия антрациклиновых антибиотиков в отношении опухоли

1.3 Возможности использования альфа-фетопротеина (АФП), эпидермального фактора роста (ЭФР) и его рецепторсвязывающего фрагмента (ЭФРфр) в качестве векторных молекул

1.3.1 Рецепторы АФП и ЭФР как мишени для химиотерапевтических воздействий

1.3.2 Основные свойства АФП, ЭФР и ЭФРфр

1.3.3 Возможные подходы для создания конструкций векторпротивоопухолевый агент

Глава 2. Материалы и методы

2.1 Выделение и очистка АФП

2.2 Выделение и очистка ЭФР

2.3 Синтез и очистка ЭФРфр

2.4 Оценка ростстимулирующей активности ЭФР и ЭФРфр в отношении культуры клеток фибробластов

2.5 Синтез и очистка конъюгатов

2.5.1 Синтез и очистка конъюгатов АФП и ЭФР с фотогемом и хлоринами

2.5.2 Синтез и очистка конъюгатов АФП и ЭФР с фталоцианинами

2.5.3 Синтез и очистка конъюгатов ЭФР и ЭФРфр с доксорубицином

2.6 Культивирование клеток

2.7 Определение цитотоксической активности препаратов in vitro

2.8 Определение противоопухолевой активности препаратов in vivo

2.9 Статистическая обработка результатов

Глава 3. Результаты и обсуждение

3.1 Получение конъюгатов фотогема, хлоринов, фталоцианинов и доксорубицина с АФП, ЭФР и ЭФРфр

3.2 Цитотоксическая активность конъюгатов фотогема, хлоринов и фталоцианинов с АФП и ЭФР

3.3 Сравнительный анализ цитотоксической активности конъюгатов ЭФР-ДРкд и ЭФР-ДРГА

3.4 Использование ЭФРфр в качестве векторной молекулы

3.4.1 Биологическая активность ЭФРфр

3.4.2 Цитотоксическая активность конъюгата ЭФРфр-ДР

3.4.3 Противоопухолевая активность конъюгата ЭФРфр-ДР in vivo 86 Выводы 89 Список литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АФП - альфа-фетопротеин

ЭФР - эпидермальный фактор роста

ЭФРфр - рецепторсвязывающий фрагмент молекулы ЭФР

ФДТ - фотодинамическая терапия

ПГП - производное гематопорфирина

ФС - фотосенсибилизатор

ФГ - фотогем

ХЛеб - хлорин еб

ХЛрб - хлорин рб фХЛрб - З-дезвинил-З-формилхлорин рб аХЛрб - 3 -дезвинил-3 -ацетилхлорин р

ФЦ(А1) - дисульфохлорид фталоцианин алюминия

ФЦ(Со) - дисульфохлорид фталоцианин кобальта

ТФ - окта-4, 5-карбоксифталоцианин кобальта (терафтал) т-ТНРС - мета-тетра(гидроксифенил)-хлорин

ПР - полная регрессия опухоли

АА - антрациклиновый антибиотик

ДР - доксорубицин

ДМ - дауномицин

КМ - карминомицин топо II - ДНК-топоизомераза II

МЛУ - множественная лекарственная устойчивость

МАТ - моноклональные антитела

РАФП - рецептор альфа-фетопротеина

РЭФР - рецептор эпидермального фактора роста

ПКС - протеинкиназа С

МАПК - митогенактивируемая протеинкиназа ФЛС - фосфолипаза С Р1 - фосфатидилинозитол ДАГ - диацилглицерол

ОФ ВЭЖХ - обратнофазовая высокоэффективная жидкостная хроматография

ЦТА - цитотоксическая активность

ОУ ЦТА - относительное увеличение ЦТА

ОРО - относительный размер опухоли

СПЖ - средняя продолжительность жизни животных

УСПЖ - увеличение СПЖ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка противоопухолевых препаратов направленного действия на основе фотосенсибилизаторов и антибиотиков антрациклинового ряда с использованием белковых векторов»

Несмотря на высокие возможности основных методов лечения злокачественных новообразований результаты терапии онкологических больных до сих пор далеки от желаемых. В течение долгого времени в клинике доминировали хирургическое и лучевое лечение онкологических заболеваний, однако сфера применения этих методов весьма ограничена. Применение химиотерапии позволило добиться значительных успехов в лечении ряда злокачественных опухолей, хотя проблема повышения эффективности действия химиопрепаратов, по-прежнему остается крайне актуальной. Известно, что для классических противоопухолевых химиопрепаратов, в том числе и для широко используемых в клинике антрациклиновых антибиотиков, повышение дозовой интенсивности является главной детерминантой эффективности лечения, однако увеличению терапевтических доз препятствуют серьезные побочные эффекты, а также феномен множественной лекарственной устойчивости опухолей. В связи с этим представляется актуальным поиск новых эффективных подходов и методов противоопухолевых воздействий.

Среди таких подходов, интенсивно разрабатываемых в последние годы, наиболее перспективными являются фотодинамическая терапия (ФДТ), биотерапия, а также применение технологии направленного транспорта различных противоопухолевых агентов к тканям-мишеням. ФДТ онкологических заболеваний основана на использовании фотосенсибилизаторов, активируемых при облучении светом соответствующей длины волны. Будущее ФДТ связывают с применением хлоринов и фталоцианинов, а также с появлением метода темновой (каталитической) терапии, в которой используется терафтал - противоопухолевый препарат фталоцианинового ряда, не требующий для своей активации светового облучения.

Терапевтические свойства противоопухолевых химиопрепаратов, а также фотосенсибилизаторов могут быть в значительной мере улучшены за счет их адресного транспорта к опухолевым клеткам с помощью векторных молекул. Одними из наиболее перспективных векторов являются альфа-фетопротеин (АФП) и эпидермальный фактор роста (ЭФР), которые характеризуются высоким сродством к соответствующим рецепторам, гиперэкспрессированным на поверхности клеток широкого спектра опухолей. Важной особенностью АФП и ЭФР является возможность их химической модификации путем связывания с цитотоксическими препаратами без потери биологических свойств. Эффективным вектором может оказаться также рецепторсвязывающий фрагмент молекулы ЭФР (ЭФРфр) в силу его высокой стабильности и доступности в препаративных количествах. В связи с этим актуальной задачей является разработка подходов к осуществлению синтеза биологически активных конъюгатов антрациклиновых антибиотиков, фотосенсибилизаторов и терафтала с ЭФР, АФП и ЭФРфр, а также исследование цитотоксической противоопухолевой активности полученных конъюгатов в экспериментах in vitro и in vivo.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Гукасова, Надежда Вадимовна

Выводы

1. На основе разработанных схем синтезированы и очищены конъюгаты фотосенсибилизаторов, терафтала и доксорубицина с векторными молекулами - АФП, ЭФР и ЭФРфр, проявляющие противоопухолевую ЦТА либо близкую, либо превышающую активность свободных препаратов.

2. Показано, что рецепторсвязывающий фрагмент молекулы ЭФР может быть использован в качестве эффективного вектора для доставки цитотоксических агентов в опухолевые клетки.

3. Продемонстрирована высокая противоопухолевая цитотоксическая активность конъюгатов фталоцианинов с АФП и ЭФР. При этом данные конъюгаты могут быть использованы для проведения как фотодинамической, так и темновой (каталитической) терапии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гукасова, Надежда Вадимовна, 2000 год

1. Kessel D. Photodynamic therapy and neoplastic disease // Oncology Research. -1992. 4. - P. 219-225.

2. Pass. H.I. Photodynamic therapy in oncology: mechanisms and clinical use // J. Natl. Cancer Inst.- 1993,- 6,- P. 443-456.

3. Raab O. Uber die wirkung fluoreszierenden stoffen // Infuzoria Z Biol.-1900,-Vol. 39,-P. 524-529.

4. Hausman W. Die sensibilisierende wikung des hematoporphyrins // Biocem. Z.- 1911.- Vol. 30,-P. 276-280.

5. Lipson R.L., Baldes E.J. The use of a derivative of hematoporphyrin in tumor detection // J. Natl. Cancer Inst.- 1961,- Vol. 26,- P. 1-8.

6. Lipson R.L., Grey M.J., Baldes E.J. Hematoporphyrin derivative for detection and management of cancer // Proc. 9th International Cancer Congress, Tokyo, Japan.- 1966.- P. 393.

7. Dougherty T.J., Kaufman J.E., Goldfarb A, et al. Photoradiation therapy for the treatment of malignant tumors // Cancer Res.- 1978,- Vol. 38 P. 2628-2635.

8. Spikes J.D., Jori G. Photodynamic therapy of tumors and others disease using porphyrins // Lasers Med. Sci.- 1986,- 2,- P. 3-15.

9. Лукьянец E.A. Новые сенсибилизаторы для фото динамической терапии // Российский химический журнал,- 1998,- 5,- С. 9-16.

10. Ю.Миронов А.Ф. Фотосенсибилизаторы на основе порфиринов и родственных соединений для проведения фотодинамической терапии рака // Итоги науки и техники: Современные проблемы лазерной физики.- 1990,- Т. 3.- С. 5-62.

11. Moan J. Properties for optimal photodynamic therapy sensitizers // Journal of Photochem. And Photobiol.- 1990,- 5,- P. 521-524.

12. Филоненко Е.В. Эндоскопическая фото динамическая терапия начальных форм рака бронхов, пищевода и желудеа с использованием фотосенсибилизатора фотогем: Дисс. . канд. мед. наук. -М.- 1997.

13. Лукьянец Е.А. Разработка сенсибилизаторов второго поколения на основе природных хлорофиллов // Российский химический журнал,- 1998.- 5.- С. 9-16.

14. Чиссов В.И., Казачкина Н.И., Фомина Г.И., Шитова JI.A. и др. Хлорин рб и его производные как новые фотосенсибилизаторы для фотодинамической терапии рака // Российский онкологический журнал,- 1999.- 5.- С. 22-25.

15. Rosental I. Phtalocianines as photodinamic sensitizers. Photochem. Photobiol.- 1991,- 53,- P. 859-870.

16. Novodarova G.N., Belkov V.M., Volpin M.E., Shaharova Z.A. The activation of dioxygen and homogeneous catalytic oxidation // 6th Intern. Symposium 1996,-Noordwijkerhout.-P. 215-216.

17. Peng Q., Moan J., Farrants G.W. et al. Location of P-II and A1PC34 in human tumor LOX in vitro and in vivo by means of computerencanced video fluorescence microscopy // Cancer lett.- 1991.- 58,- P. 37-47.

18. Berns M.V., Dahlman A., Johnsen F.M. et al. In vitro cellular effects of heamatoporphyrin derivative // Cancer Res.- 1982,- 42,- P. 2325-2329.

19. Peng Q., Farrants G.W., Madslien K. et al. Subcellular localisation, redistribution and photobleaching of sulfonated aiuminium phtalocyanines in a human melanoma cells line // Int. J. Cancer.- 1991.49.- P. 290-295.

20. Якубовская P.И., Казачкина Н.И., Кармакова Т.А. и др. Скрининг и медико-биологическое изучение отечественныхфотосенсибилизаторов // Российский химический журнал.- 1998.5,- С. 17-23.

21. Bellnier D.A., Но Y-K, Pandey R.K. et al. Distribution and elimination of photophrin II in mice // Photochem. Photobiol- 1989,- '50.- P. 221228.

22. Peng Q., Moan J., Farrants G.W. et al. Localization of patent photosentizers in human tumors LOX by means of laser sanning microscope // Cancer lett.- 1991.- 58,- P. 17-27.

23. Сыркин А.Б., Жукова О.С., Кикоть Б.С. и др. Терафтал новый препарат для бинарной каталитической терапии злокачественных опухолей // Российский химический журнал.- 1998.- 5,- С. 140-146.

24. Barel A., Jori G., Perin A. et al. Role of high-, low- and very lowdensity lipoproteins in the transport and tumor-delivery of hematoporphyrin in vivo // Cancer lett.- 1986.- 32,- P. 145-150.

25. Henderson B.W., Dougherty T.J. How does photodynamic therapy work? // Photochem. Photobiol.- 1992,- 55,- P. 145-157.

26. Foote C.S., Mechanisms of photooxigenation. In porphyrin localisation and teatment of tumors (Doiron D.R., Gomer С ,J. eds). New York: Alan R. Liss.- 1984.- P. 4.

27. Van Hillegersberg R., Kort W.J., Wilson J.M. Current status of photodynamic therapy in oncology // Drugs.- 1994,- 48,- P. 510-527.

28. Moan J., Berg K. Photochemotherapy of cancer: experimental reasearch. //Photochem. Photobiol.- 1992,- 55,-P. 931-948.

29. ЗО.Зенькевич Э.И., Сагун Е.И., Кнюкшто В.Н. и др. Дезактивация S1-и Т1-состояний порфиринов и хлоринов при их взаимодействии с молеулярным кислородом в растворах // Журнал прикладной спектроскопии.- 1996.-4.-С. 599-612.

30. Pass H.I., Evans S., Matthews W.A. et al. Photodynamic therapy of oncogene-transformed cells // J. Thorac. Cardiovasc. Surg.- 1991.- 101.-P. 795-799.

31. Фотокаталитическая генерация активных форм кислорода в биологических средах в методе фотодинамической терапии // Российский химический журнал.- 1998,- 5,- С. 36-49.

32. Коган Е.А., Невольских А.А., Жаркова Н.Н., Лощенов В.Б. Морфо-и патогенез повреждений злокачественных опухолей при фотодинамической терапии // Архив патологии.- 1993.- 6,- С. 73-76.

33. Valenzeno D. Photomodification of biological membranes with emphasis on singlet oxygen mechanisms // Photochem. Photobiol.- 1987.- 46,- P. 146-160.

34. Hilf R., Murant R.S., Narayanan U. Et al. Relationsip of mitochondrial function and cellular adenosinetriphosphate levels to hematoporphyrin derivative-induced photosensitization in R3230AC mammary tumors // Cancer Res.- 1986,- 46,- P. 211-217.

35. Jin H., Whitacre C.M., Xue L. et al. Protease activation and cleavage of Poly(ADP-ribose) polymerase: an integral part of apoptosis in response to photodynamic treatment // Cancer Res.- 1998.- 58 P. 940-946.

36. Кард Т.И., Пятибрат Л.В., Календо Г.С. Фотосенсибилизированная инактивация опухолевых клеток HeLa фталоцианинами // Радиобиология,- 1989,- Т. 29,- 3,- С. 353-358.

37. Gomer C.J. Preclinical examination of first and second generation photosensitizers used in photodynamic therapy // Photochem. Photobiol.-1991,-54,-P. 1093-1107.

38. Вольпин M.E., Крайнова Н.Ю., Левитин И.Я. и др. Механизмы окисления аскорбиновой кислоты и проблемы каталитической (темновой) терапии рака // Российский химический журнал.- 1998.-5,-С. 111-115.

39. Dougherty T.J. Photoradiation therapy // Urol. Suppl.- 1984,- 23.- P. 6171.

40. Соколов B.B., Странадако Е.Ф., Жаркова H.H. и др. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей основных локализаций с препаратами фотогем и фотосенс (результаты 3-летних наблюдений) // Вопросы онкологии,- 1995.- 2,- С. 134-138.

41. Ris Н.В., Altermatt H.J., Stewart С.М. et al. Photodynamic therapy with m-tetra-hydroxyphenylchlorin in vivo: optimization of the therapeutic index// Intern. Journal of cancer.- 1993,- 55.- P. 245-249.

42. Блознелите JI., Пономарев И.В. Эффективность фотодинамической терапии опухолей разной гистологической структуры // Российский онкологический журнал.- 1997.- 4.- С. 18-21.

43. Чиссов В.И., Соколов В.В., Филоненко Е.В. Фото динамическая терапия злокачественных опухолей // Российский химический журнал,- 1998.- 5,- С. 5-9.

44. Jiang F., Lilg L., Grenier J. et al. Photodynamic therapy of U87 human glioma in nude rat using liposome-delivered photofiin // Lasers in surgery and medicine.- 1998,- 22.- P. 74-80.

45. Ris H., Hof V., Stewart C. et al. Endobronchial photodynamic therapy: comparison of mTHPC and polyethylene glycol-derived mTHPC onhuman tumor xenografts and tumor-free bronchi of minipigs // Lasers in surgery and medicine.- 1998,- 23,- P. 25-32.

46. Блохин H.H., Переводчикова Н.И. Химиотерапия опухолевых заболеваний // М.: Медицина, 1984.

47. Гаузе Г.Ф., Дудник Ю.В. Противоопухолевые антибиотики // М.: Медицина, 1987.

48. Arcamone F. Doxorubicin, Anticancer antibiotics // New York: Acad. Press.- 1981 -369 p.

49. De Vita, Hellman S., Rosenberg S. // in Principles and practice of oncology, Eds. Lippincott J.B.- Philadelphia, PA, 1985.

50. Schwartz H. S. Mechanism of selective cytotoxisity of adriamycin, daunomycin, and related antracyclines // In: Molecular aspects of anticancer drug action, Eds. S. Neidle, M. J. Waring. London: Mac MillanPress.- 1983,-P. 93-125.

51. Potmesil M., Israel M., Silber R. Two mechanisms of adriamycin-DNA interaction in L1210 cells // Biochem. Pharmacol.- 1984,- Vol. 33.-20.-P. 3137-3142.

52. Kanter P.M., Schwartz H. S. Effects of N-trifluoroacetyladriamycin-14-valerat and related agents on DNA strand damage and thymidine incorporation in CCRF-CEM cells // Cancer Res.- 1979.- Vol. 39.-2,- P. 448-451.

53. Liu L. F. DNA-topoisomerase poison as antitumor drugs // Ann Rev. Biochem.- 1989,- 58,- P. 351-375.

54. Tewey К. M., Rowe T. C, Yang L. at all. Adriamycin-induced DNA damage mediated by mammalian topoisomerase II. // Scence.- 1984,-Vol. 226.- P. 466-469.

55. Pommier Y. DNA topoisomerases and their inhibition by anthraciclines // In: Antracicline antibiotics, American Chemical Society.- 1994,- P. 182199.

56. Capranico G., Jaxel C., Roberge M. et al. Nucleosome positioning as a critical determinant DNA topoisomerase II in reconstituted simian virus 40 chromatin. //Nucleic Acid Res.-1990,- Vol. 18,- P. 4553-4559.

57. Miyashita Т., Reed J.C. Bcl-2 oncoprotein blocks chemotherapy induced apoptosis ina human leukemia cell line // Blood.- 1995,- 8,- P. 151-157.

58. Эммануэль H.M., Богданов Г.Н., Орлов B.C. Свободнорадикальные механизмы в цитотоксическом действии противоопухолевых антибиотиков // Успехи химии,- 1984,- Т. 53,- №12,- С. 1929-1958.

59. Bachur N.R., Gordon S.L., Gee M.V. et al. NADFH cytochrome P-450 reductase activation of quinone anticancer agents to free radicals // PNAS USA.- 1979,- Vol. 76(2).- P. 954-957.

60. Тараховский A.M., Жмарева E.H., Ромоданов C.A. Роль системы образования и детоксикации супероксидных радикалов в механизме противоопухолевого эффекта адриамицина // Бюллетень, экспер. биол.- 1983,- Т. 96.- №11,- С. 86-88.

61. Eliot Н., Gianni L., Myers С. Oxidative destrruction of DNA by the adriamycin-iron complex // Biochemistry.- 1984.- Vol. 23.-5,- P. 928936.

62. Myers C.E., Gianni L., Simone C.B. et al. Oxidative destruction of erythrocyte ghost membranes cataiyzed by the doxorubicine-iron complex // Biochemistry.- 1982.- Vol. 21.-8,- P. 1707-1713.

63. Tritton T. R. Cell surface actions of adriamycin. // Pharmac.Ther.- 1991.-Vol. 49.- P. 293-309.

64. Tritton T. R., Yee G. The anticancer agent adriamycin can be actively cytotoxic without entering cells // Science.- 1982,- Vol. 217.- P. 248250.

65. Mehta R., Burke T.G. Membrane biophisical parametrs influencing anthracycline action // In: Antracicline antibiotics, American Chemical Society.- 1994,- P. 223-240.

66. Богуш T.A., Шубина И.Ж., Смирнова Г.Б., Сыркин А.Б., Богуш Е.А. Прижизненная количественная оценка внутриклеточного распределения доксорубицина в опухолевых клетках. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины,- 1995,- №11.- С. 518521.

67. Ferrans V. Overview of cardiac pathology in relation ro anthracycline cardiotoxity // Cancer Treat. Rep.- 1978.- Vol. 62,- P. 995-961.

68. Doroshow J. H. Effect of anthracycline antibiotics on oxygen radical formation in rat heart // Cancer Res.- 1983,- Vol. 43.-2.- P. 460-472.

69. Семиглазов В.Ф. Предупреждение кардиотосического действия антрациклинов с помощью кардиоскана // Вопросы онкологии,-1997,- Т. 43,-6,-С. 569-574.

70. Roninson I.B. Molecular and cellular biology of multidrug resistance in tumor cells. 1991,- New York, Plenum Press.

71. Сергеева H.C., Стороженко И.В., Маршутина H.B. Множественная лекарственная устойчивость как один из возможных механизмов клинической химиорезистентности опухолей человека // Российский онкологический журнал,- 1996,- 3,- С. 51-55.

72. Ставровская A.A. Клеточные механизмы множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток // Биохимия,-2000,- Т. 65,- 1,- С. 112-126.

73. Dalton W.S., Miller Т.Р. // In: Principles and practice of oncology, Ed. Lippincott J.B.- Philadelphia, PA.-1991,- Vol. 5,- P. 1-13.

74. Cole S.P., Bhardwaj G., Gerlach J.H. et al. Overexspression of a transporter gene in a multidrug-resistant human lung cancer cell line // Science.- 1992,- Vol. 258,-P. 1650-1654.

75. Beck W.T., Danks MX, Wolverton J.S., Kirn R., Chen M. Drug resistance associated with altered DNA topoisomerase II // Adv. Enzyme Regul.- 1993,-33,-P. 113-127.

76. De Jong S., Zilstra J. Mulder N. Reduced DNA-topoisomerase II activity and drug-induced DNA cleavage activity in adriamycin resistant human small cell lung carcinoma cell line // Cancer Res.- 1990,- 50,- P. 304309.

77. Schneider E., Horton S., Yang C. et al. Multidrug-resistance associated protein and reduced drug sensivity of topoisomerase II in human breast carcinoma MCF-7 cells // Cancer Res.- 1994,- 54.-P. 158-165.

78. Danks M.K., Yalowich J.C., Beck W.T. Atypical multipal drug resistance in human leukemic cell line selected for resistance to teniposide // Cancer Res.- 1987,- 47.- P. 1297-1301.

79. Владимирская Е.Б., Кисляк H.C., Румянцев А.Г. Причины и пути преодоления лекарственной резистентности при лейкозах и лимфомах у детей // Гематол. и трансфузиол.- 1998,- Т. 43,- 6,- С. 37.

80. Lowe S.W., Ruley Н.Е., Jacks Т., Housman D.E. p53 Dependent apoptosis modulates the cytotoxicity of anticancer agents // Cell.- 1993,-74.-P. 957-967.

81. Hickman J.A., Potten C., Merritt J., Fisherr T. Apoptosis and cancer chemotherapy // Phil. Trans. R. Soc.- 1994.- 345,- P. 319-325.

82. Zijistra J.G., De Vries E.G.E., Mulder N.H. Multifactorial drug resistance in an Adriamycin-resistant human small cell lung carcinoma cell line // Cancer Res.- 1987,- 47,- P. 1780-1784.

83. Perez-Soler R., Sugarman S., Zou Y., Priebe W. // In: Antracicline antibiotics, American Chemical Society.- 1994,- P. 300-319.

84. Duncan R., Seymour L.W., O Hare K.B. et al. Preclinical evaluation of polymer-bound doxorubicin // J. Controlled Release.- 1992,- Vol. 19,- P. 331-346.

85. Danhauser-Reidl S., Hausmann E., Schick H.D. et al. Phase I clinical and pharmacokinetic trial of dextrane conjugated doxorubicin // Investigational New Drugs.- 1993,- 11.-P. 187-195.

86. Todorova N., Krysteva M., Maneva K., Todorov D. Carminomycin-chitosan: a conjugated antitumor antibiotic // J. Bioactive and compatible polymers.- 1999,- Vol. 14,-P. 178-184.

87. Goldberg J.A., Wïllmott N., Kerr D.J. et al. An in vivo assessment of adriamycin-loaded albumin microspheres // Br. J. Cancer.- 1992,- Vol. 65.-P. 393-395.

88. Gupta P.K., Hung C.T., Rao N.S. Ultrastructural disposition of adriamycin-associated magnetic albumin microspheres in rats // J. Pharm. Sci.- 1989,- Vol. 78,- P. 290-294.

89. Kattan J., Droz J.-P., Couvreur P. et al. Phase I clinical trial and pharmacokinetic evaluation of doxorubicin carried by polyisohexylcyanoacrylate nanoparticles // Investigational New Drugs.-1992,- 10,-P. 191-199.

90. Mayer L.D., Tai L.C., Ko D.S.K. et al. Influence of vesicle size, lipid composition, and drug-tolipid ratio on the biological activity of liposomal doxorubicin in mice // Cancer Res.- 1989,- Vol. 49,- P. 5922-5930.

91. Rahman A., Treat J., Roh J.-K. et al. A phase I clinical trial and pharmacokinetic evaluation of liposome-encapsulated doxorubicin // J. Clin. Oncol.- 1990,- Vol. 8,- P. 1093-1100.

92. Gabison A.A. Selective tumor localization and impruved therapeutic index of anthracyclines encapsulated in long-circulating liposomes // Cancer Res.- Vol. 52.-P. 891-896.

93. Vasey P.A., Kaye S.B., Morrison R. et al. Phase I clinical and pharmacokinetic study of Pkl first member of a new class of chemotherapeutic agents drug-polymer conjugates // Clin. Cancer Res.-1999,-Vol. 5,-P. 83-94.

94. Ю7.Гуляев A.E., Ермекбаева Б.А., Кивман Г.Я. и др. Наночастицы как вектор направленного транспорта антибиотиков // Химико-фармацевтический журнал,- 1998,- 2 С. 3-6.

95. Schwartz G. К., Casper E.S. A phase II trial doxorubicin HC1 liposome injection in patients with advanced pancreatic adenocarcinoma // Investigational New Drugs.- 1995,- 13,-P. 77-82.

96. Kawano K. Tissue distribution of adriamicin-encapsulated liposomes conjugated with monoclonal antibody // Drug Delivery System.- 1992.-Vol. 7.-P. 23-29.

97. Ю.Северин C.E., Катуков В.Ю., Муйжнек Е.Л., Северин Е.С. Проблемы избирательной регуляции клеточной активности: от фундаментальных основ к практическим результатам // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии,- 2,- С. 312.

98. Arnon R., Sela М. In vitro and in vivo efficacy of conjugates of daunomycin with antitumor antibodies. // Immunol. Rev.- 1982.- Vol. 62.- P. 5-27.

99. Belles-Isles M., Page M. In vitro activity of daunomicin-anti-alpha-fetoprotein conjugate on mouse hepatomas cells // Br. J. Cancer.- 1980,41.- P. 841-845.

100. Page M., Delorme F., Lafontaine F., Dumas L. Chemotherapy with daunorubicin-anti-CEA conjugates in human colon adenocarcinoma grafted in nude mice // Seminars in Oncology.- 1984.- Vol. 11.- 4,- P. 5658.

101. Stan A.C., Radu D.L., Casares S. et al. Antineoplastic efficacy of doxorubicin enzymatically assembled on galactose residues of a monoclonal-antibody specific for the carcinoembryonic antigen // Cancer Res.- 1999,-Vol. 59,-P. 115-121.

102. Thibeault D., Page M. Coupling daunorubicin to monoclonal antialphafoetoprotein with a new activated derivative // Int. J. Immunopharmac.- 1990,- Vol. 12,- 5,- P. 503-507.

103. Trail P.A., Willner D., Lasch S.J. Cure of xenografted human carcinomas by BR96-doxorubicin immunoconjugates // Science.- 1993.-Vol. 261.-P. 212-215.

104. Shih L.B., Goldenberg D.M., Xuan H. et al. Antracycline immunoconjugates prepared by a site-spesific linkage via an amino-dextran intermediate carrier // Cancer Res.- 1991,- Vol. 51.- P. 41924198.

105. Takahashi H., Adachi K., Yamaguchi F. et al. Experimental treatment of malignant gliomas with human monoclonal antibody-drug conjugates // Anticancer Res.- 1999,- Vol. 19,- P. 4151-4155.

106. Gallego J., Price M. R., Baldwin R. W. Preparation of four daunomycin monoclonal antibody 791T/36 conjugates with antitumor activity // Int. J. Cancer.- 1984,- Vol. 33.- P. 737-744.

107. Hatano T., Ohkawa K., Matsuda M. Cytotoxic effect of the protein-doxorubicin conjugates on the multidrug-resistant human myelogenous leukemia cell line, K562, in vitro // Tumor biol.- 1993,- 14,- P. 288-294.

108. Lemieux P., Page M. Sensitivity of multydrug-resistant MCF-7 cells to a transferrin-doxorubicin conjugate // Anticancer Res.- 1993,- 13.- P. 397-404.

109. Kratz F., Beyer U., Roth T. et al. Transferrin conjugates of doxorubicin // J. Pharm. Sei.- 1998.- Vol. 87.- 3,- P. 338-346.

110. Varga J.M., Asato N., Lande S., Lerner A.B. Melanotropin-daunomycin conjugates shows receptor-mediated cytotoxity in cultured murin melanoma cells // Nature.- 1997.- Vol. 261.- P. 56-58.

111. Schally A.V., Nagy A. Cancer chemotherapy based on targeting of cytotoxic peptide conjugates to their receptors on tumors // European Journal of endocrinology.- 1999,- Vol. 141.- l.-P. 1-14.

112. Himmelweit F. // The collection Paper of Paul Ehrlich.- New York.-1960,-Vol. 3,-P. 46.

113. Авдеев Г. Иммунотерапия опухолей // Итоги науки и техники. Серия онкология.- 1985,- С. 135-140.

114. Trouet A., Jolles G. Targeting of daunorubicin by association with DNA or proteins: a review // Seminars in oncology.- 1984,- Vol. 11.- 4, P. 6472.

115. Lai B.T., Gao J.P., Lanks K.W. Mechanism of action and spectrum of cell-lines sensitive to a doxorubicin-transferrin conjugate // Cancer chemotherapy and pharmacology.- 1998.- Vol. 41.- 2.- P. 155-160.

116. Mizejewski G.J. Alpha-fetoprotein binding proteins: implication for transmembrane passage and subcellular localization // Life Sciences.-1995,-Vol. 56,-l.-P. 1-9.

117. Villacampa M.J., Moro R., Naval J. et al. AFP receptor in a human breast cancer cell line // Bioch. Bioph. Res. Comm.- 1984,- 122.- P. 1322-1327.

118. TorresJ.M., Geuskens M., Uriel J. Receptor-mediated endocytosis and recycling of alpha-fetoprotein in human B-lymphoma and T-leukemia cells // Int. J. Cancer 1991,- 47 - P. 110-117.

119. Uriel J., Villacampa M.J., Moro R., Naval J., Failly-Crepin Ch. Uptake of radiolabeled alpha-fetoprotein by mouse mammary carcinoma's and itsusefulness in tumor scintigraphy // Cancer Res.- 1984,- 44.- P. 53145319.

120. Villcampa M.J., Lapreave F., Calvo M., Naval J., Pineiro A., Uriel J. Incorporation of radiolabeled AFP in the brain and other tissues of the developing rat // Dev. Brain Res.- 1984,- 12,- P. 77-82.

121. Moro R., Tamaoki Т., Wegmann T.G., Longenecker B.M., Laderoute M.P. Monoclonal antibodies directed against a widespread oncofetal antigen: the alpha-fetoprotein receptor // Tumor Biol.- 1993.- 14,- P. 116-130.

122. Modjtahedi H., Dean Ch. The receptor for EGF and its ligands: expression, prognostic value and target for therapy in cancer // Int. J. Oncol.- 1993,- 4,- P. 277-296.

123. Ennis B.W., Lippman М.Е., Dickson R.B. The EGF receptor system as a target for antitumor therapy // Cancer Investigation.-1991,- Vol. 9,- 5,-P. 553-562.

124. Wells A. EGF receptor // IJBCB.-1999.- 31.- P. 637-643.

125. Никольский Н.Н., Соркин А.Д., Сорокин А.Б. Эпидермальный фактор роста //- JI.: Наука.- 1987,- 200 с.

126. Neelam B., Richter A., Chamberlin S.G. et al. Structure-function studies of ligand-induced epidermal growth factor receptor dimerization // Biochemistry.- 1998.- Vol. 37,-14.- P. 4884-4891.

127. Cochet C., Filhol O., Payrastre B. et al. Interaction between the epidermal growth factor receptor and phosphoinositide kinase // J. biol. Chem.-1991,- Vol. 266.-P. 637-644.

128. Whitman M., Cantley L. Phosphoinositide metabolism and control of cell proliferation // Biochim. biophys. Acta.- 1988.- Vol. 948,- P. 327344.

129. Sasaoka N., Langlois W.J., Draznin B. et al. The signalling pathway coupling epidermal growth factor recepror to activation of p21ras // J. biol. Chem.- 1994.- Vol. 269,- P. 32621-32625.

130. Marais R., Marshall C.J. Control of the ERC MAP kinase cascade by Ras andRaf// Cancer Surv.- 1996,- Vol. 27,- P. 101-125.

131. Das R., Vouderhaar B.K. Tamoxifen inhibits prolactin signal transduction in ER-NOG-8 mammary epithelial cells // Cancer Lett.-1997,- Vol. 116,-P. 41-46.

132. Cotter F.E., Pocock C.F. In vivo modelling and antisense therapy in malignancy //UCLMol. Path. Ser.- 1996.- Vol. 3.-P. 161-189.

133. Gutowski M. C., Briggs S. L., Johnson D. A. Epidermal Growhth factor receptor-reactiv monoclonal antibodies: Xenograft antitumor activity alone and as drug immunoconjugates // Cancer Res.- 1991.- Vol. 51.- P.5471-5475.

134. Wei H., Barnes S., Wang Y. Inhibitory effect of genistein on a tumor promoterinduced c-fos and c-jun expression in mouse scin // Oncol. Rep.- 1996.- Vol. 3.-P. 125-128.

135. Liao C.W., Hseu T.H., Hwang J. A target-specific chimeric toxin composed of epidermal growth factor and Psedomonas exotoxin A with adeletion in its toxin-bindihg domain // Appl. Microbiol. Biotechnol.-1995.-Vol. 43.-P. 498-507.

136. Кушлинский H.E., Герштейн E.C. Клинические перспективы исследования рецептора эпидермального фактора роста в опухолях человека//Клин.лаб.д-ка.- 1996,-1,- С. 9-12.

137. Carpentier J.-L., White М. F., Orel L., Kahn R. С. Direct visualization of the phosphorylated epidermal growth factor receptor during its internalization in A431 cells // J. Cell Biol.- 1987.- Vol. 105,- P. 27512762.

138. Miller K., Beardmore J. et al. Localization of the epidermal growth factor (EGF) receptor within the endosome of EGF-stimulated epidermoid carcinoma (A 431) cells // J. Cell Biol.- 1986.- Vol. 102,- P. 500-509.

139. Bellet D.H., Wands J.R., Isselbacher K.J., Bohuon С. Serum alpha fetoprotein levels in human disease: perspective from a highly specific monoclonal radioimmunoassay // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1985,81,- P. 3869-3873.

140. Deutch H.F. Chemistry and biology of alpha-fetoprotein // Cancer Res.-1991.- 56,-P. 252-267.

141. Mizejewski G.J. a-Fetoprotein as a biologic response modifier: relevance to domain and subdomain structure // J. Exp. Biol. Med.-1997.- 14.-P. 333-362.

142. Mizejewski G.J., Jacobson H.I. Alpha-fetoprotein is a dual regulator of growth in estrogen-responsive tissues // CRS Press, Boca Raton.- 1985.-Florida.-l.-P. 71-82.

143. Fedi P., Tronick S.R., Aaronson S.A. Growth factors // Cancer Medicine, 4-th Ed.- Eds J. Holland et al.- 1997,- P. 41-64.

144. Savage C. R., Cohen S. Epidermal growth factor and a new derivative: rapid isolation procedures and biological and chemical characterization // J. Biol. Chem.- 1972,- Vol. 247.- P. 7609-7611.

145. Hollenberg M. D., Gregory H. Epidermal growth factor-urogastrone: biological activity and receptor binding of derivatives // Mol. Pharmacol.-1980.- Vol. 17,-P. 314-320.

146. Иващенко Ю.Д, Быкорез А.И. Полипептидные факторы роста и канцерогенез // Киев, Наукова думка, 1990.- 191с.

147. Taylor J.M. et al. Epidermal growth factor. Physical and chemical properties // J. Biol. Chem.- 1972,- Vol. 247,- P. 5928-5934.

148. Mayo К. H. Epidermal growth factor from the mouse. Structural characterization by proton nuclear magnetic resonance and nuclear Overhauser experiments at 500 MHz // Biochemistry.- 1984,- Vol. 23,-P. 3960-3973.

149. Komoriya A., Hortsch M., Meyers C., Smith M., Kanety H., Schlessinger . Biologically active synthetic fragments of epidermal growth factor: localization of a major receptor-binding region // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1984.- Vol. 81.- P. 1351-1355.

150. Matrisian L. M., Larsen B. R., Finch J. S., Magun В. E. Further purification of epidermal growth factor by HPLC 7/ Anal. Biochem.-1982,-Vol. 125,-P. 339-351.

151. Лобанова В.В. Возможность получения эпидермального фактора роста в различных системах экспрессии генов // Биотехнология,-1997,-5.-С. 3-9.

152. Cawley D.B., Herschman H.R., Gilliand D.G., Collier R.G. Epidermal growth factor-toxin A chain conjugates // Cell.- 1980,- Vol. 22,- P. 563570.

153. Haigler И. Т., Wiley H. S., Moehring H., Moehring J. M. Altered degradation of epidermal growth factor in a diphtheria toxin-resistant clone of KB cells // J. Cell. Physiol.- 1985.- Vol. 124.- P. 322-330.

154. Hurwitz E., Levy, R., Mavon R. et al. The covalent binding of daunomycin and adriamycin to antibodies with retention of both drug and antibody activities // Cancer Res.- 1975,- Vol. 35.- P. 1175-1181.

155. Shen W. G., Ryser J. P. cis-Aconityl spacer between daunomycin and macromolecular carriers: A model of pH sensitive linkage releasing drug from a lisosomotropic conjugate // Biochem. Biophys. Res. Commun-1981,-Vol. 102.-P. 1048-1054.

156. Mueller В. M., Wrazidlo W. A., Reisfeld R. A. Antibody cojugates with morfolynodoxorubicin and acid cleavable linkers // Bioconj. Chem.-1990,-Vol. 1,-P. 325-330.

157. Severin S.E., Moskaleva E.Yu., Posypanova G.A. et al. In vivo antitumor activity of cytotoxic drugs conjugated with human a-fetoprotein // Tumor targeting.- 1996,- 2,- P. 299-306.

158. Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem.- 1951,- 193- P. 265-275

159. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature.- 1970,- 221.- P. 680-685.

160. Atherton Е.Е., Sheppard R.S. Solid phase peptide synthesis. A practical approach // IRL Press at Oxford University Press.- 1989.

161. Hash J.H. Liquid scintillation counting in micribiology // In: Methods in microbiology, 6B, J.R. Norris, D.W. Ribbons (eds.).- Academic Press, New York.- 1972,- Chap. 5.

162. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxity assays // J. Immunol. Meth.-1983,- 65,-P. 55-63.

163. Jinno H., Masakazu U., Ozawa S. et al. Epidermal growth factor receptor-dependent cytotoxic effect by an EGF-ribonuclease conjugate on human cancer cell lines // Cancer Chemother. Pharmacol.- 1996,- Vol. 38,- P. 303-308.

164. Arap W., Pasqualini R., Ruoslahti E. Cancer treatment by targeted drug delivery to tumor vasculature in a mouse model // Science.-1998,- Vol. 279.- 16,-P. 377-380.112