Разработка новых подходов к оценке функциональной активности иммуноглобулина G сыворотки крови человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Климова, Светлана Валентиновна

• Климова, Светлана Валентиновна
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Климова, Светлана Валентиновна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Физико-химические свойства иммуноглобулинов человека.

1.1.1. Характеристика строения и особенностей основных классов иммуноглобулинов

1.1.2. Антигеннезависимые функции иммуноглобулинов

1.1.3. Антигензависимые функции иммуноглобулинов

1.1.4. Свойства продуктов частичного протеолиза иммуноглобулинов

1.2. Некоторые методы оценки аффинности антител

1.2.1. Определение констант равновесия

1.2.2. Методы определения динамических констант.

1.2.3. Методы оценки относительной аффинности антител

1.3. Гликозилирование антител

1.3.1. Общие представления о гликопротеинах животного происхождения

1.3.2. Расположение и функции углеводного компонента в составе иммуноглобулинов

1.3.3. Строение олигосахаридного фрагмента ^О человека.

1.3.4. Биосинтез М-гликанов

1.3 .5. Влияние уровня гликозилирования иммуноглобулинов на их биологические функции . 35 1.3.6. Лектины как детекторы углеводного компонента гликопротеинов.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Характеристика обследованных групп населения

2.2. Реактивы и расходные материалы

2.3. Оборудование

2.4. Получение антигенных препаратов

2.5. Определение основных показателей гуморального иммунитета

2.5.1. Определение иммуноглобулинов О, А, М сыворотки крови

2.5.2. Определение субклассов иммуноглобулина в

2.6. Определение константы диссоциации.

2.6.1. Выделение анти-ГМДП-антител из исследуемых сывороток.

2.6.2. Контроль специфичности элюции

2.6.3. Проведение ингибиторного анализа

2.6.4. Расчет константы диссоциации

2.7. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ . 56 3.1. Разработка методов определения функциональной активности иммуноглобулина G человека

3.1.1. Оценка относительной аффинности IgG-антител

3.1.1.1. Методика оценки относительной аффинности антител.

3.1.1.2. Отработка условий оценки относительной аффинности

3.1.1.3. Определение константы диссоциации анти-ГМДП-антител

3.1.1.4. Сравнение показателей аффинности антител, полученных разными методами

3.1.2. Методика оценки уровня гликозилирования IgG сыворотки крови человека

3.1.2.1. Проверка лектинов на неспецифическое связывание с другими компонентами системы

3.1.2.2. Проверка связывания лектинов с IgG человека

3.1.2.3. Определение оптимальных рабочих концентраций лектинов

3.1.2.4. Проверка лектинов на взаимодействие с очищенным IgG человека и с IgG сыворотки крови доноров, связанным с белком A St. aureus

3.1.2.5. Применение нейраминидазы для десиалирования углеводного компонента IgG и определение ее оптимальной концентрации

3.1.2.6. Контроль специфичности взаимодействия некоторых лектинов с соответствующими углеводными остатками методом конкурентного ингибирования.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка новых подходов к оценке функциональной активности иммуноглобулина G сыворотки крови человека»

Актуальность темы диссертации.

Оценка иммунного статуса человека является одной из главных задач клинической иммунологии, которая заключается в определении основных компонентов иммунной системы: фагоцитоза, гуморального и клеточного иммунитета [15, 21]. Количественное определение основных классов иммуноглобулинов - ^А и IgM - является одним из основных методов оценки гуморального иммунитета. Иммуноглобулины выполняют важные функции по защите организма от чужеродных веществ антигенной природы [7, 32, 64]. Выполнение этих функций в значительной степени зависит от аффинности антител и степени их гликозилирования.

Определение аффинности (и авидности) антител имеет большое диагностическое и прогностическое значение. В эксперименте отмечено снижение аффинности антител с возрастом [113]. Важную роль играет аффинность антител при аутоиммунных нарушениях [38, 49, 88]. Уровень авидности антител свидетельствует о давности инфицирования: при первичном иммунном ответе вырабатываются специфические антитела низкой авидности, при повторном инфицировании и при длительном стаже заболевания -высокоавидные антитела [58, 71, 87].

Оценка уровня гликозилирования антител также представляет собой важную проблему. Углеводный компонент в комплексе с тяжелыми цепями иммуноглобулина обеспечивает такие антигеннезависимые функции молекулы, как связывание с Рс-рецепторами фагоцитов и активацию системы комплемента, антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность, скорость выведения комплексов антиген-антитело из кровотока [43, 44, 55, 59, 68, 69, 79]. Особое внимание к проблеме гликозилирования появилось после того, как были обнаружены дефекты гликозилирования при целом ряде заболеваний: ревматоидном артрите, системной красной волчанке, туберкулезе, болезни Крона, реакции «трансплантат против хозяина» [3,93].

Таким образом, при оценке способности антител выполнять свои эффекторные функции важно определять уровень их аффинности и гликозилирования. Поэтому целью работы явилась разработка методов оценки аффинности и гликозилирования, возможных для применения в практике лабораторий клинической иммунологии.

Задачи исследования.

1. Разработать методику определения аффинности антител на основе иммуноферментного анализа.

2. Создать метод оценки степени гликозилирования сыворотки крови человека с применением фермент-меченых лектинов.

3. Апробировать методики на больных, страдающих различными заболеваниями, сопровождающимися недостаточностью гуморального звена иммунной системы.

Научная новизна.

Впервые модифицирована и адаптирована методика, позволяющая оценивать относительную аффинность ^О-антител сыворотки крови и цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) человека с использованием химической элюции.

Впервые предложен метод оценки уровня гликозилирования 1дО, основанный на последовательном связывании 1дО сыворотки крови с белком А стафилококка и фермент-мечеными лектинами. Разработанный метод не требует предварительного выделения

Показано, что у больных, страдающих частыми респираторно-вирусными инфекциями, и у ВИЧ-инфицированных лиц снижена относительная аффинность естественных антител к пептидогликану стафилококка (ПГ).

Обнаружено, что при фурункулезе показатель относительной аффинности анти-ПГ антител высоко коррелирует с содержанием антител в сыворотке крови.

Показано, что при ВИЧ-инфекции снижается количество доступных остатков (5-галактозы и И-ацетилглюкозамина на поверхности углеводного фрагмента ^О-антител.

Практическая значимость работы.

Определение относительной аффинности антител к бактериальным антигенам позволит оценивать давность инфицирования, зрелость иммунного ответа к этиологическому агенту. Оценка аффинности аутоантител может помочь в прогнозировании тяжести развития заболевания.

Разработанная методика определения уровня гликозилирования 1§0-антител сыворотки крови человека с использованием меченых лектинов позволяет оценивать конформационные изменения в структуре углеводного фрагмента молекулы ^О без предварительной очистки иммуноглобулина. Применение методики в клинической практике может помочь в понимании механизмов нарушения гуморального иммунного ответа при различных патологических состояниях.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Климова, Светлана Валентиновна

выводи

1. Разработана методика определения относительной аффинности антител с помощью иммуноферментного анализа, основанная на разрушении комплекса антиген-антитело при использовании различных молярных концентраций тиоцианата натрия.

2. Создана лектино-ферментная методика определения уровня гликозилирования IgG сыворотки крови человека, основанная на последовательном связывании IgG сыворотки крови человека с белком А Staphylococcus aureus, сорбированном на твердой фазе, и фермент-мечеными лектинами, взаимодействующими с различными углеводными остатками. С помощью ингибиторного анализа доказана специфичность взаимодействия лектинов с соответствующими сахарами, входящими в состав углеводного фрагмента IgG.

3. Выявлено достоверное снижение относительной аффинности естественных IgG-антител к пептидогликану Staphylococcus aureus на фоне выраженного понижения уровня антител к этому антигену у людей, страдающих частыми респираторно-вирусными инфекциями. Обнаружена отчетливая тенденция к снижению показателя аффинности у ВИЧ-инфицированных пациентов.

4. У людей, страдающих фурункулезом, аффинность антител к пептидогликану Staphylococcus aureus высоко коррелировала с уровнем антител к этому антигену (г = 0,87, р < 0,05), что свидетельствует о созревании иммунного ответа к этиологическому фактору при данной патологии.

5. При развитии ВИЧ-инфекции и в преСПИД-состоянии обнаружено достоверное повышение уровня связывания СопА на молекулу IgG, что говорит о повышенной доступности для этого лектина маннозных остатков на поверхности углеводного фрагмента IgG и может быть результатом конформационных изменений молекулы IgG при этой патологии.

6. При прогрессировании ВИЧ-инфекции выявлено достоверное снижение относительного показателя связывания лектина Erythrina cristagalli, что свидетельствует о недостаточности количества Р-галактозы на поверхности углеводного фрагмента молекулы IgG.

7. Относительный показатель связывания лектина Phytolacca americana достоверно снижался уже в начальной стадии ВИЧ-инфекции, что говорит об уменьшении количества досягаемого N-ацетилглюкозамина на поверхности IgG.

Заключение.

Нами были выявлены отличия уровня связывания некоторых лектинов растительного происхождения с углеводным компонентом сыворотки крови человека, сорбированного на белке А стафилококка. Исходя из того, что изменение уровня взаимодействия того или иного лектина с углеводным фрагментом свидетельствуют о соответствующем изменении доступности углеводного остатка, к которому специфичен этот лектин, можно отметить следующие отклонения в уровне гликозилирования у обследованных групп населения.

У больных с ЧРВИ достоверно повышается доступность маннозных остатков на одну молекулу и снижается доступность ]М-ацетилглюкозамина. То же относится и к больным группы ЧДБ в целом. У людей, страдающих ЧТиБ, аналогичные изменения носят менее выраженный характер. При развитии ВИЧ-инфекции прослеживается повышение доступности маннозных остатков в составе углеводного компонента на стадиях ВИЧ-2 и преСПИД. Уровень доступных остатков галактозы уменьшается, и это изменение носит достоверный характер на поздних стадиях развития ВИЧ-инфекции. Однако изменения относительно контроля в группе преСПИД менее выраженные, чем при ВИЧ-2, что может свидетельствовать о включении компенсаторных процессов на этом этапе заболевания. В группе ВИЧ-1 обнаружено достоверное снижение доступных остатков М-ацетилглюкозамина в составе олигосахаридной цепи У людей, страдающих фурункулезом, и у лиц преклонного возраста не было отмечено выраженных изменений в уровне гликозилирования

Однако отличия в уровне взаимодействия лектинов с углеводным компонентом не обязательно свидетельствуют о количественных изменениях в составе олигосахаридной цепи. В этом можно убедиться по возрастанию уровня связывания лектинов с 1§0 после десиалирования (как в различных группах больных, так и среди лиц контрольной группы). Интенсивность взаимодействия после отщепления терминальных остатков нейраминовой кислоты возрастает в 5-10 раз, при этом данные биохимического анализа [102, 103] свидетельствуют о том, что лишь менее 20% цепей углеводного компонента сыворотки крови здоровых доноров несут на себе остатки сиаловой кислоты. Следовательно, уровень взаимодействия лектинов с зависит не только от содержания тех или иных углеводных остатков в составе углеводного компонента молекулы, но и от их конформационного положения. А поскольку именно пространственная структура узнаётся Рс-рецептором фагоцита, то изменения уровня связывания лектинов с олигосахаридной цепью 1§0 могут помочь объяснить возникновение патологических процессов, связанных с нарушением реализации иммунологических функций антител.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Климова, Светлана Валентиновна, 1999 год

1. Берзофски Дж.А., Берковер А.Дж. Взаимодействие антиген-антитело./В кн. «Иммунология» под ред. У.Пола в 3-х т., т.З. М., «Мир», 1989. - с.5-88.

2. Гриневич A.C., Андреев И.В., Мартынов А.И.: Структурно-функциональные особенности углеводов иммуноглобулинов в норме и при патологии./УИммунология. 1994. - 3. - с. 10-15.

3. Гриневич A.C., Батудаева Т.И., Насонов В.В. и др. Исследование собенностей протекания ревматоидного артрита с использованием новой лектинсвязывающей ферментной реакции.//Клинич. ревматол. 1997. - 2. -с.34-41.

4. Джеске Д.Дж., Кепра Дж.Д. Иммуноглобулины: строение и функции./В кн. «Иммунология» под ред. У.Пола в 3-х т., т.1. -М., «Мир», 1987. с.204-254.

5. Евнин Д.Н. Продукты катаболизма иммуноглобулинов как неспецифические регуляторы иммунного ответа.//Автореф. .докт. мед. наук. М., 1980.

6. Иммуноглобулины. Под ред. Г.Литмана и Р.Гуда М., Изд. "Мир" - 1981. -с. 124.

7. Климова C.B., Пинегин Б.В., Кулаков A.B., Комарова И.А.: Особенности гуморального иммунитета у часто и длительно болеющих людей //Иммунология. 1997. - 4. - с.52-56.

8. Кульберг А.Я. Молекулярная иммунология. М., Высш. шк. - 1985. - 278 е., ил.

9. Лахтин В.М. Молекулярная организация лектинов.//Мол. биология. 1994. -т.28. - вып.2. - с.245-273.

10. Лахтин В.М.: Лектины в исследовании углеводной части гликопротеинов и других природных гликоконъюгатов.//Биохимия 1995 - Т.60 - вып.2 -с. 187-217.

11. Лепешева Г.И, Марцев С.П. Модификация дисульфида шарнирной области IgG кролика и исследование взаимодействия с поливалентным антигеном ферритином, белком А и анти-^ОУ/Биохимия. 1992. - вып.7. - с. 10891100.

12. Маргулис Г.У., Бартова Л.М., Елистратова И.А., Кульберг А.Я. Усиление in vitro первичного иммунного ответа под влиянием Fab-фрагмента нормального гомологичного IgG кролика.//Иммунология. 1984. - 5. - с.37.

13. Падюков Л.Н., Кешикбаева A.A. Тарасова Н.Л. с соавт. Определение антител к пневмококку у детей с острыми пневмониями и плевритами с помощью ИФА//ЖМЭИ. 1986. - 7. - с.79-82.

14. Падюков Л.Н., Ершов И.В., Цветкова Н.В.: Определение антитетел к пневмококку у детей с плевритами.//ЖМЭИ. 1985. - 1. - с.40-45

15. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В.: Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии.//Иммунология. 1994. - 5. - с. 1-12

16. Пинегин Б.В., Кулаков A.B., Макаров Е.А.: Определение естественных антител к 1М-ацетилглюкозаминил-1М-ацетилмурамил дипептиду в сыворотке крови здоровых людей.//Иммунология. 1995. - 1. - с.42-45.

17. Pap В.А., . Макаров Е.А., Юровский В.Ю. и др. Синтетические иммуногенные комплексы на основе пептида поверхностного белка вируса ящура.//Биоорганическая химия. 1990. - т. 16. -7. - с.904-915.

18. Ройт А. Основы иммунологии. Пер. с англ. М.: Мир - 1991. - 328 е., ил.

19. Уланова М.А, Падюков Л.Н, Катосова Л.К., Толмачев A.M. Определение антитпел к пневмококку в слизи детей, страдающих острой пневмонией.//ЖМЭИ -1987 9 - с. 112-115

20. Фримель Г. Иммунологические методы. М., Медицина. - 1987

21. Хаитов P.M., Б.В.Пинегин, Х.И.Истамов. Экологическая иммунология. Изд. ВНИРО. -М. 1995. -с.15-17

22. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А. СЕИД. М., Народная академия культуры и общечеловеческих ценностей. - 1992 - с. 125-156.

23. Хьюз Р. Гликопротеины. Пер. с англ. М.: Мир - 1985. - 140с., ил.

24. Чекнев С.Б., Ашманова Я.Г., Бабаева Е.Е. и др. Бласттрансформация лимфоцитов и активность естественных киллеров в присутствии у-глобулина in vitro.//Бюлл. эксперим. биол. и медицины. 1994. - т. CXVTII. -N.12. -с.625-630.

25. Черноусова Л.Н., Тарханова И.А., Кульберг АЛ. Clq-компонент комплемента как фактор, блокирующий антигенсвязывающие структуры иммунных лимфоцитов.//Иммунология. 1981. -N4. - с.65-66.

26. Alzari P.M., Lascombe М., Poljak R.J. Three dimentional structure of antibodies//Ann. Rev. Immunol. 1988. -v.6. - p.555-580.

27. Ambrosino D.M., DT Umetsu. GR Siber et al.: Selective defect in the antibody response to Haemophilus influenzae type b in children with recurrent infections and normal serum IgG subclass levels.//! Allergy.Clin.Immunol. 1988. - 81. -p.1175-1179.

28. Amzel L.M., Poljak R.J. Three dimentional structure of immunoglobulins.//Ann. Rev. Biochem. 1979. - v.48. - p.961.

29. Anderson C.L., Looney A S. Human leukocyte IgG Fc-receptors.//Immunol. Today. 1986. - v. 7(9). - p.264-266.

30. Baenziger J.U; Fiete D. Galactose and N-acetylgalactosamine-specific endocytosis of glycopeptides by isolated rat hepatocytes.//Cell 1980 - v22 - N2 (Pt 2) - p.611-620.

31. BergerE.G.; Mandel T.; Schilt U.J. Immunohistochemical localization of galactosyltransferase in human fibroblasts and HeLa cells.//HistochemCytochem- 1981 v29 N3 - p.364-370.

32. Boyden S.V. Natural antibodies and the immune response.//Adv.Immunol. -1966.- 5. p. 1-28.

33. Burton D.R. The conformation of antibodies./In Metzger H. (ed.): Fc receptor and the action of antibodies, 1st edn. Washington, D.C., Raven Press. 1990. -p.3154.

34. CarsonDD; Lennarz WJ. Relationship of dolichol synthesis to glycoprotein synthesis during embryonic development.//J.Biol.Chem. 1981 - v256 - N9 -p.4679-4686.

35. Chiang H.C., Koshland M.E. Antigen-induced conformational changes in IgM antibody. I. The role of the antigenic determinant.//!. Biol. Chem. 1979. - v.254.- N8. p.2736-2741.

36. Chiang H.C., Koshland M.E. Antigen-induced conformational changes in IgM antibody. II.-The role of the carrier.//J Biol Chem. 1979. - v.254. - N.8. -p.2742-2747.

37. Czarnocka B., Janota-Bzowski M., Mcintosh R.S.et al. Immunoglobulin G kappa antithyroid peroxidase antibodies in Hashimoto's thyroiditis: epitope-mapping analysis.//J. Clin. Endocrinol. Metab. 1997. - 82 (8). - p.2639-2644.

38. Davies D.R., Metzger H. Structural basis of antibody function.//Ann. Rev. Immunol. 1983. -v.l. -p.87-117.

39. Davies D.R., Padian E.A., Sheriff S. Antigen:antibody complexes.// Ann. Rev. Biochem. 1990. - v.59. - p.439-473.

40. Day J.F., Thorburg R.W., Thorpe SR., Bayenes J.W. Carbohydrate mediated clearance of antibody-antigen complexes from the circulation. - J. Biolog. Chemistry. - 1980. - 255(6). - p.2360-2365.

41. Dolhofer-Bliesener R., Gerbitz K.D. Effect of nonenzymatic glycation on the structure of immunoglobulin G.//Biol. Chem. Hoppe. Seyler. 1990. - 371(8). -p.693-697.

42. Donadel G., Calabro A., Sigounas G. et al. Human polyreactive and monoreactive antibodies: effect of glycosylation on antigen binding.//Glycobiology. 1994. -4(4). -p.491-496.

43. Dwek R.A., Lellouch A.C., Wormald M.R. Glycobiology: the function of sugar in the IgG molecule.//! Anat. 187. - p.279-292.

44. Edelman G.M., Cunningham B.A., Gall W.E. et al. The covalent structure of an entire gamma G immunoglobulin molecule.// Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1969. -v. 63 - p.78-85.

45. Endo T., Wright A., Morrison S.L., Kobata A. Glycosylation of the variable region of IgG sitespecific maturation of the sugar chains. - Molecular Immunology. - 1995. - 32(12). - p.931-940.

46. Fagerstam L.G., Frostell A., Karlsson R. et al. Detection of antigen-antibody interactions by surface plasmon resonance. Application to epitope mapping.// J Mol. Recognit. 1990 - 3(5-6) -p.208-214.

47. Fagerstam L.G., Frostell-Karlsson A., Karlsson R. et al. Biospecific interaction analysis using surface plasmon resonance detection applied to kinetic, binding site and concentration analysis.//! Chromatogr. 1992 - 0597(1-2) - p.397-410.

48. Fazekas G, Rosenwirth B, Dukor P. et al. Kinetics and isotype profile of rheumatoid factor production during viral infection: organ distribution of antibody secreting cells.//Scand. J. Immunol. 1996. - 44(3). -p.273-284.

49. Fehr K., LoSpalluto J., Ziff M. Degradation of immunoglobulin G by lysosomal acid proteases.//J Immunol 1970 - v. 105 - 4 - p.973-983.

50. Fischetti V.A., Bessen D. Effect of mucosal antibodies to M protein in colonization by group A streptococci./In Switalski L., Hook M., Beachery E. (eds.):Molecular mechanisms of microbal adhesion. New York, Springer, 1989. -p. 128-142.

51. Franciotta D., Zardini E., Bono G. et al. Antigen-specific oligoclonal IgG in AIDS-related cytomegalovirus and toxoplasma encephalitis.//Acta Neurol. Scand. 1996-94(3)-p.215-218.

52. Friguet B, ChafFotte AF, Djavadi-Ohaniance L et al.: Measurements of the true affinity constant in solution of antigen-antibody complexes by enzyme-linked immunosorbent assay.//J. Immunol. Meth. 1985. - 77. - p.305-319.

53. Fujii S., Nishiura T., Nishicawa A. et al. Structural heterogeneity of sugar chains in immunoglobulin G. Conformation of immunoglobulin G molecule and substrate specificaties of glycosyltransferases.//J.Biolog.Chemistry. -1990. -265(11). -p.6009-6018.

54. Furukawa K., Kobata A. IgG galactosylation its biological significance and pathology. - Molecular Immunology. - 1991. -28. -N. 12. - p. 1333-1340.

55. Goldblatt D, Scadding G.K., Lund V.J. et al.: Association of Gm-allotypes with the antibody response to outer membrane proteins of common upper respiratory tract organism, Moraxella catarrhalis.Hl. Immunol. 1994. - 153. - p.5316-5320.

56. Hanson D.C., Schumacher V.N. A model of formation and interconversion of protein A immunoglobulin G soluble complexes.//J. Immunol. - 1984. - v. 132. -N.3. - p. 1397-1409.

57. Hashido M, Inouye S, Kawana T. Differentiation of primary from nonprimary genital herpes infections by a herpes simplex virus-specific immunoglobulin G avidity assay.// J Clin Microbiol 1997 - 35(7) - pi766-1768

58. Hennessey P.J., Black C.T., Andrassy R.G.: Nonenzymatic glycosylation of immunoglobulin G impairs complement fixation.//J. Parenter. Enteral. Nutr. -1991. 15(1). -p.60-64.

59. HerczA; Katona E; Cutz E; Wilson JR; Barton M. alpha 1-Antitrypsin: the presence of excess mannose in the Z variant isolated from liver.//Science 1978. - v.201. - 4362. - p. 1229-1232.

60. Heymer B., Shleifer K.H., Read S. et al.: Detection of antibodies to bacterial cell wall peptidoglycan in human sera.//J.Immunol. 1976. - 117(1). - p.23-26.

61. Huber R., Deisenhofer J., Colman P.M., Matsushima M.: Crystallographic structure studies of an IgG-molecule and an Fc-fragment.//Nature. 1976. -264(5585). -p.415-420.

62. Janeway C.A., Travers P. Immunobiology. The immune system in health and disease./Current Biology Ltd. 1994.

63. Jeffries R., Kumaratne D.S. Selective IgG subclass deficiency: quantification and clinical revalence. Clin Exp Immunol. - 1990. - 81. - p.357-367.

64. Karakawa W.W., Sutton A., Schneerson R., Vann W.F. Capsular antibodies induce type-specific phagocytosis of capsulated Staphylococcus aureus by human polymorphonuclear leucocytes.//Infect. Immun. 1986. - v.56. - p. 1090-1095.

65. Karlsson R, Michaelsson A, Mattsson L. Kinetic analysis of monoclonal antibody-antigen interactions with a new biosensor based analytical system.//J. Immunol. Methods. 1991. - v.145. - 1-2. - p.229-240.

66. Kim B.B., Dikova E.B., Sheller U. et al.: Evaluation of dissociation constants of antigen-antibody complexes by ELISA.//J. Immunol. Meth. 1990. - 131. - p.213-222.

67. Kobata A., Mizuochi T., Endo T., Furukawa K. Function and pathology of the sugar chains of human immunoglobulin G.//Ciba. Found. Symp. 1989. - 145. -p.224-240.

68. Koide N., Nose M., Muramutsu T. Recognition of IgG by Fc-receptor and complement: effect of glycosidase digestion.//J. Biochem. Biophys. Res. Commun. -1977. 75(4). - p.838-844.

69. Kornfeld R., Keller J., Baenziger J., Kornfeld S.: The structure of the glycopeptide of human gamma G myeloma proteins.//J. Biological Chemistry. -1971. 246(10). - p.3259-3268.

70. Lee SO., Connoly G.M., Ramirez-Soto D., Poretz R.D. The polypeptide of immunoglobulin G influences its galactosylation in vivo.//J.Biolog.Chemistry. -1990. v.265(10). - p.5833-5839.

71. Longmore G.D., Schacter H. The structure of oligosaccharide chains of the myeloma IgG.//Carbohydr.Res. 1982. - 100. - p.365-392.

72. Luxton R.W., Thompson E.J. Affinity distributions of antigen-specific IgG in patients with multiple sclerosis and in patients with viral encephalitis.//J. Immun. Meth. 1990. - 131. -p.277-282.

73. Macdonald R.A., Hosking C.S., Jones C.L. The measurement of relative antibody affinity by ELISA using thiocyanate elution.//J. Imm. Meth. 1988. - v. 106. -p.191-194.

74. Malaise M.G., Franchimont P., Bonillene C. et al. Increased ConA-binding capacity of IgG purified from sera of patients with RA.//J. Clin, and Exper. Immunology. 1987. - 67(3). - p.543-551.

75. Mancini G., Vaerman J.-P., Carbonara AO., Heremans J.F. A single radialdiffusion method for the Immunological quntitation of protein.//Procidees of the biological fluids / Ed. N. Peters. Amsterdam, L.N.Y.: Elsevier. - 1964. -p.370-379.

76. Mandel B. Neutralization of polio virus: a hypotesis to explain the mechanism and the one hit character of the neutralization reaction.//Virology. 1976. - v.69. -p.500-510.

77. Marshall RD The nature and metabolism of the carbohydrate-peptide linkages of glycoproteins.//Biochem. Soc. Symp. 1974. -v.40. -p. 17-26.

78. Miletic V.D., Frank M M. Complement-immunoglobulin interactions.//Curr. Opin. Immunol. 1995. - 7(1). - p.41-47.

79. Miller GW, Nussenzweig V. A new complement function: solubilization of antigen-antibody aggregates.//Proc Natl Acad Sci USA. 1975. - v.72. - 2. -p.418-422.

80. Mizuochi T„, Taniguchi T., Shimizu A., Kobata A.Structural and numerical variations of the carbohydrate moiety of immunoglobulin G.//J.Immunol. -1982. -129. -5. p.2016-2023.

81. Mullinax F.//Arthr. and Rheum. 1975. - Vol.18. - p.417-421.

82. Narita M., Yamada S., Matsuzono Y.et al. Immunoglobulin G avidity testing in serum and cerebrospinal fluid for analysis of measles virus infection.//Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1996. - 3(2). - p.211-215

83. Narula J., Petrov A., O'Donnell S.M. et al. Gamma imaging of atherosclerotic lesions: the role of antibody affinity in in vivo target localization.//!. Nucl. Cardiol. 1996. - 3(3). -p.231-241.

84. Natvig J.B., Kunkel H.G. Human immunoglobulin: Classes, subclasses, genetic variants, and idiotypes.//Adv. Immunol. 1973. - v. 16. - p. 1-59.

85. Neufeld E., Ashwell G. In: The biochemistry of glycoproteins and proteoglycans (Lennarz W.J., ed), Plenum Press, New York. 1980. - p.252-257.

86. Nose M., Wigzell H.: Biologycal significance of carbohydrate chains of monoclonal antiodies. Proc. of Natl. Academy of Sciences.USA. -1983. - 80(21). - p.6632-6636.

87. O'Shannessy DJ, Winzor DJ. Interpretation of deviations from pseudo-first-order kinetic behavior in the characterization of ligand binding by biosensor technology.// Anal. Biochem. 1996. - 236(2). - p.275-283.

88. Parekh R.B., Dwek R.A., Sutton B.J. et all. Assosiation of rheumatoid arthritis and primary osteoarthritis with changes in the glycosylation pattern of total serum IgG.//Nature. 1985. - 316. - p.452-457.

89. Parekh R.B., Roitt I M., Isenberg D.A. et al. Age related glycosylation of the N-linked oligosaccharides of human serum IgG.//J. Exp. Med. -1988. 167. -p.1731-1736.

90. Parker W., Bruno D., Holzknecht Z.E. et al. Characterization and affinity isolation of xenoreactive human natural antibodies.//J. Immunol. -1994. 153. - p.3791-3803.

91. Parkkinen J.: Aberrant lectin-hinding activity of IgG in serum from patients with RA.//J. Clin. Chemistry. 1989. - 35. - p. 1636-1641.

92. Peterson R.K., Wilkinson B.J., Kim G., Schmeling D. The key role of peptidoglycan in the opsonization of Staphylococcus aureus./'/J. Clin. Invest. -1978. -61. -p.597-609.

93. Pinegin B.V., Kulakov A.V., Makarov E.A. et al. The occurence of natural antibodies to minimal component of bacterial cell wall (N-acetylglucosaminyl-N-acetylmuramyl dipeptide) in sera from healthy humans. Immunol. Lett. - 1995. -47. - p.33-37.

94. Poljak R.J. X-ray diffraction studies of immunoglobulins.//Adv. Immunol. 1975. -v.21.-p.l-33.

95. Pullen G.R., Fitzgerald M.G., Hosking C.S. Antibody avidity determination by ELISA using thiocyanate elution.//J. Imm. Meth. 1986. - v. 86. - p.83-87.

96. Pumphrey R.S. Computer models of the human immunoglobulins.//Immunol. Today. 1986,- v.7. - p.206-211.

97. Rademacher T.W., Dwek R.A.//Prog. Immunol. 1983. - Vol.5. - p.35-40.

98. Rademacher T.W., Raymond A.D.//Brit. J. Rheum. 1989. - Vol. 28. -Suppl. 1. - p. 1-2.

99. Rawson A.J., Hollander J.L., Quismorio F.P., Abelson N.M. Experimental arthritis in man and rabbit dependent upon serum anti-immunoglobulin factors.//Ann. N. Y. Acad. Sci. 1969. - v. 168. - 1. - p. 188-194.

100. Rawson A.J., Quismorio F.P., Abelson N.M. The induction of synovitis in the normal rabbit with Fab. A possible experimental model of rheumatoid arthritis.//Am. J. Pathol. 1969. - v.54. - 1. - p.95-105.

101. Roitt I M., Parekh R.B., Isenberg D.A. et al. Age related glycosylation of the N-linked oligosaccharides of human serum IgG.//J.Exp.Med. 1988. - 167. -p.1731-1736.

102. Rook G.A.W. Clinical correlates of raised agalactosyl IgG in man and mause. //Brit. J. Rheum. 1989. - 28(1). - p.3-4.

103. Sandberg A.L., Oliveira B., Osier A.G. Two complement interaction sites in guinea pig immunoglobulins.//!. Immunol. 1971. - v. 106. - 1. - p.282-285.

104. Sandberg A.L., Osier A.G. Dual pathways of complement interaction with guinea pig immunoglobulins.//J. Immunol. 1971. - v. 107 - 5 - p. 1268-1273 .

105. Schlessinger J., Steinberg I.Z., Givol D., Hochman J. Subunit interaction in antibodies and antibody fragments studied by circular polarization of fluorescence.//FEBS Lett. 1975. - v.52. - 2. - p.231-235.

106. ShearesBT., Lau J.T., Carlson DM. Biosynthesis of galactosyl-beta 1,3-N-acetylglucosamine.//! Biol. Chem. 1982 - v.257 - 2 - p.599-602.

107. Silverton E.W., Navia M.A., Davies D.R.: Threedimensional structure of an intact human immunoglobulin.//Proc. Natl. Acad. Scienc. USA. 1977. - 74(11). -p.5140-5144.

108. Song H., Price P.W., Cerny J. Age-related changes in antibody repertoire: contribution from T cells.//Immunol. Rev. 1997. - 160. - p.55-62.

109. Spiro R.G., Spiro M.J., Bhoyroo V.D. Processing of carbohydrate units of glycoproteins. Characterization of a thyroid glucosidase.//J Biol Chem 1979 -v.254. - 16. -p.7659-7667.

110. Sumar N., Bodman K B., Rademacher T.W. et al. Analysis of glycosylation changes in IgG using lectins.//.!. Immunol. Meth. 1990. - 131. - p. 127-136.

111. Tabas I.; Kornfeld S. The synthesis of complex-type oligosaccharides. III. Identification of an alpha-D-mannosidase activity involved in a late stage of processing of complex-type oligosaccharides.//! biol. Chem. 1978. - v.253. - 21- p.7779-7786.

112. Tomana M., Schrohenloher R.E., Koopman W.J. et al. Abnormal glycosylation of serum IgG from patients with chronic inflammatory diseases. -Arthritis. Rheum. 1988. - 31(3). - p.333-338.

113. Torano A., Tsuzukida Y., Liu Y., Putnam F.W. Location and structural significance of the oligosaccharides in human IgAl and IgA2 immunoglobulins.//Proc. Natl. Acad. Sci., USA. 1977. - v.74. - p.2301-2305.

114. Valentine R.C., Green N.M. Electron microscopy of an antibody-hapten complex.//J. Mol. Biol. 1967. - v.27. - p.615-617.

115. Vaughan J.H., Jacox R.F., Gray B.A. Light and heavy chain components of gamma globulins in urines of normal persons and patients with agammaglobulinemia.//!. Clin. Invest. 1967. - v.46. -2. - p.266-279.

116. Warr GA. A macrophage receptor for (mannose/glucosamine)-glycoproteins of potential importance in phagocytic activity.//Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1980. v.93. - 3. - p.737-745.

117. Weitsman S., Portmore J. Immunoglobulin glycopeptides from an IgG2b-producing mouse myeloma cell lines and from variant cell lines.//J.Immunol. -1981. 127(5). - p.2095-2101.

118. Weitzhandler M., Hardy M., Co M.S., Avdalovic N. Analysis of carbohydrates on IgG preparations.//!. Pharm. Sci. 1994. - 83(12). - p. 16701675.

119. Yoshinaga M., Yamamoto S., Kiyota S., Hayashi H. The natural mediator for PMN emigration in inflammation. IV. In vitro production of a chemotactic factor by papain from immunoglobulin G.ll Immunology 1972. - v.22. - 3. - p.393-399.1. Благодарности.