Разработка методов лабораторной диагностики цирковирусной инфекции свиней тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Тимина, Анна Михайловна

• Тимина, Анна Михайловна
• кандидат ветеринарных наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Тимина, Анна Михайловна

ВВЕДЕНИЕ.

1-ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Классификация цирковирусов.

1.2. Структурно-функциональная организация цирковирусов свиней.

1.3. Патогенность цирковирусов свиней.

1.3.1.Патогенность ЦВС-1.

1.3.2. Патогенность ЦВС-2.

1.3.2.1. Синдром мультисистемного истощения отъёмышей.

1.3.2.1.1. Эпизоотология.

1.3.2.1.2. Клинические признаки.

1.3.2.1.3. Патологоанатомические изменения.

1.3.2.1.4. Патогенез СМИО.

1.3.2.1.5. Экспериментальная инфекция СМИО.

1.3.2.2 Дерматит и синдром нефропатии поросят.

1.3.2.3 Инфекционные врождённые треморы.

1.3.2.4 Пролиферативная некротизирующая пневмония.

1.3.2.5 Комплекс респираторной патологии.

1.3.2.6 Репродуктивные нарушения и перинатальный миокардит.

1.4. Распространение цирковирусов свиней.

1.5. Диагностика цирковирусной инфекции свиней.

1.5.1. Обнаружение вируса или вирусного антигена.

1.5.2. Обнаружение антител к ЦВС-1 и ЦВС-2.

1.5.3. Дифференциальный диагноз.

1.6. Меры борьбы с цирковирусной инфекцией свиней.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методов лабораторной диагностики цирковирусной инфекции свиней»

Актуальность темы. Эмерджентные болезни являются одной из наиболее актуальных проблем современного животноводства. В инфекционной патологии свиней важная роль принадлежит недавно получившим широкое распространение болезням, ассоциированным с цирковирусами.

У свиней идентифицированы два вида цирковирусов. Цирковирус свиней типа 1 (ЦВС-1) был обнаружен в 1974 году как нецитопатогенный контаминант перевиваемой культуры клеток почек поросят РК-15 (199) и считается непатогенным вирусом, так как не вызывает каких-либо клинических признаков у инфицированных животных. Цирковирус свиней типа 2 (ЦВС-2) был впервые выделен от больных поросят в Канаде в 1998г. (116, 117, 145) и является первичным этиологическим агентом синдрома мультисистемного истощения поросят-отъёмышей (СМИО). Кроме того, этот вирус ассоциирован с синдромом нефропатии и дерматитов поросят, а также вовлечён в респираторную и репродуктивную патологию свиней. ЦВС-2 распространён во всех странах с развитым свиноводством, причём встречается практически в 100% стад. Чрезвычайно широкое распространение ЦВС-2 и многообразие клинических проявлений инфекции делают его одним из наиболее значимых для современного свиноводства инфекционных агентов (36). По современным оценкам заболевания, связанные с ЦВС-2, особенно СМИО, обходятся Европейским производителям в 600 млн. евро в год (168).

В России ЦВС-2 был впервые обнаружен в 2000 году (14). Цирковирусная инфекция была установлена у свиней во многих из обследованных хозяйств РФ. В то же время неизученным оставался широкий круг проблем, связанных с этой инфекцией: степень распространения цирковирусов среди домашних свиней и диких кабанов, генетическое разнообразие вируса, циркулирующего на территории России, вовлечённость ЦВС-2 в различные формы инфекционной патологии свиней. Обусловлено это было тем, что отсутствовали, либо были несовершенны, методы диагностики цирковирусной инфекции.

Цели и задачи исследования. Основная цель данной работы состояла в разработке методов диагностики цирковирусной инфекции свиней и применении разработанных методов для изучения распространения и клинического проявления этой инфекции на территории РФ.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- разработать метод обнаружения и типирования цирковирусов свиней, основанный на мультиплексной ПЦР;

- применить разработанный метод в диагностических исследованиях и изучить связь между различными формами инфекционной патологии свиней и наличием ЦВС;

- провести филогенетический анализ изолятов ЦВС-2, циркулирующих в свиноводческих хозяйствах и дикой фауне РФ; исследовать на наличие цирковирусов клеточные культуры, применяющиеся в ФГУ ВНИИЗЖ для вирусологических исследований и производства вакцин;

- получить рекомбинантный капсидный белок ЦВС-2 и разработать на его основе иммуноферментную тест-систему для выявления антител к вирусу в сыворотках крови свиней;

- применить разработанную иммуноферментную тест-систему для изучения распространения ЦВС-2 в хозяйствах РФ.

Научная новизна исследований.

Разработан метод обнаружения и типирования цирковирусов свиней, основанный на мультиплексной ПЦР.

Изучены особенности клинического проявления цирковирусной инфекции свиней в хозяйствах РФ.

Проведен филогенетический анализ российских изолятов ЦВС-2, показано большое генетическое разнообразие вируса, циркулирующего в свиноводческих хозяйствах и дикой фауне РФ.

Получен рекомбинантный капсидный белок цирковируса свиней типа 2 и на его основе разработана иммуноферментная тест-система для выявления антител к ЦВС-2.

Проведён мониторинг цирковирусной инфекции свиней и показано чрезвычайно широкое распространение ЦВС-2 в свиноводческих хозяйствах РФ и среди диких кабанов.

Практическая значимость исследований. В результате проведённых исследований разработаны следующие методики:

Методика обнаружения и типирования цирковирусов свиней с использованием мультиплексной полимеразной цепной реакции», одобренная учёным советом и утверждённая директором ФГУ ВНИИЗЖ 02.06.2005г.;

Методика обнаружения антител к цирковирусу свиней типа 2 в непрямом варианте иммуноферментного анализа», одобренная учёным советом и утверждённая директором ФГУ ВНИИЗЖ 29.09.2005г.

Разработанные методики используются в диагностике цирковирусной инфекции свиней.

Публикации научных исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и опубликованы на 5-й всероссийской научно-практической конференции «Генодиагностика инфекционных болезней» (Москва, 19-21 октября 2004г.), на 3-й международной научно-практической конференции «Ветеринарне забеспечення свинарства: сучасний стран i шляхи розвитку» (Харьков, 2005г.), «International Conference on Animal Circoviruses and Associated Diseases» - Queen's University, (Belfast, Northern Ireland, UK, 1 lth-13th September 2005), на заседаниях учёного совета ФГУ ВНИИЗЖ в 2004-2006 гг.

Основные положения, выносимые на защиту:

Метод обнаружения и типирования цирковирусов свиней, основанный на мультиплексной ПЦР.

Результаты изучения клинических проявлений цирковирусной инфекции свиней в хозяйствах РФ.

Результаты филогенетического анализа российских изолятов ЦВС-2.

Рекомбинантный капсидный белок ЦВС-2 и разработанная на его основе иммуноферментная тест-система для выявления антител к вирусу.

Результаты использования разработанной иммуноферментной тест-системы в серологическом мониторинге цирковирусной инфекции.

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 130 страницах и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований и их обсуждение, заключение, выводы, практические предложения и приложения. Список используемой литературы включает 207 источников, из которых 192 иностранных. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 15 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Тимина, Анна Михайловна

4. ВЫВОДЫ

1. Разработан метод диагностики цирковирусной инфекции свиней, основанный на мультиплексной ПЦР и позволяющий в одной реакции обнаруживать и дифференцировать ЦВС-1 и ЦВС-2.

2. С использованием разработанного метода изучены особенности клинического проявления цирковирусной инфекции в хозяйствах РФ. Установлено, что ЦВС-2 ассоциирован в российских хозяйствах, главным образом, с респираторными болезнями поросят и СМИО. Определены другие инфекционные агенты, участвующие в развитии этих заболеваний. Показано, что роль ЦВС в репродуктивной и нервной патологиях свиней в российских хозяйствах незначительна.

3. Установлено, что ЦВС-2 распространён в российской популяции диких кабанов, и эти животные могут являться природным резервуаром вируса.

4. На наличие цирковирусов свиней исследованы культуры клеток, используемые в ФГУ ВНИИЗЖ. Определены образцы культур клеток СПЭВ и РК-15, контаминированые цирковирусом свиней типа 1. Показано, что все исследованные культуры клеток свободны от ЦВС-2.

5. Методом нуклеотидного секвенирования определена первичная структура гена ОРС2 18 российских изолятов ЦВС-2, выделенных от домашних свиней и диких кабанов. Филогенетический анализ установленных последовательностей выявил большое генетическое разнообразие вируса, циркулирующего на территории РФ. Не выявлено зависимости клинических проявлений болезни от первичной структуры генома вируса.

6. Проведено молекулярное клонирование и экспрессия в Е. соИ гена ОРС2, получен рекомбинантный капсидный белок цирковируса свиней типа 2.

7. На основе рекомбинантного антигена разработан непрямой вариант ИФА для выявления антител к ЦВС-2 в сыворотках крови свиней. Установлена хорошая согласованность (к=0,72) результатов, полученных в разработанной тест-ситеме и коммерческом наборе "1п§ег1ш агсоу^иБ 1§С/1§М" (1п§епаза, Испания).

8. Результаты применения разработанной иммуноферментной тест-системы в серомониторинге цирковирусной инфекции свиней свидетельствуют об очень широком распространении ЦВС-2 в свиноводческих хозяйствах и дикой фауне России.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для практического использования предлагаются:

Методика обнаружения и типирования цирковирусов свиней с использованием мультиплексной полимеразной цепной реакции»;

Методика обнаружения антител к цирковирусу свиней типа 2 в непрямом варианте иммуноферментного анализа».

Методики комиссионно испытаны, одобрены Учёным советом, утверждены директором ФГУ ВНИИЗЖ и используются для диагностики цирковирусной инфекции свиней.

3. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Цирковирусы свиней - сравнительно недавно открытые патогены, широко распространены во всех странах с развитым свиноводством. Несмотря на то, что в России ЦВС были открыты еще в 2000 году, неизученным оставался широкий круг вопросов: степень распространения цирковирусов среди домашних свиней и диких кабанов, генетическое разнообразие вируса, циркулирующего на территории России, вовлечённость цирковирусов в различные формы инфекционной патологии свиней. Для решения этих задач необходимо иметь в распоряжении надёжные методы диагностики.

В результате проведённых исследований нами был разработан метод мультиплексной ПЦР, позволяющий в одной реакции выявлять цирковирусы свиней и одновременно определять их тип. Метод основан на использовании трех праймеров, один из которых является универсальным для обоих типов вируса, а два других - видоспецифичными для ЦВС-1 и ЦВС-2. Специфичность метода была проверена на других видах вирусов и патогенных бактерий, часто встречаемых при инфекционной патологии у свиней. Со всеми гетерологичными инфекционными агентами были получены отрицательные результаты.

С помощью разработанного метода мультиплексной ПЦР в период с 2000 по 2005 годы исследовали более 500 проб патологического материала от свиней, поступавшего из хозяйств различных регионов РФ. На наличие ЦВС исследовали органы и ткани от свиней с респираторной патологией и СМИО, от мертворожденных поросят и свиноматок с нарушением воспроизводительной функции или агалактией, свиней с дерматитами, признаками нефропатии, патологией нервной системы и другие.

При исследованиях материала от свиней с респираторной патологией разных возрастных групп оказалось, что наибольшее количество положительных в отношении ЦВС-2 проб (78,3%) приходится на возраст 2-4 месяца (период доращивания). У этой возрастной группы респираторные заболевания часто сопровождались истощением. В период откорма количество ЦВС-2 положительных животных также было велико и составляло 72,7%. У больных животных других возрастных групп ЦВС-2 выявляли значительно реже. Таким образом, наши исследования подтвердили данные литературы (181, 35, 96), что респираторные заболевания, ассоциированные с ЦВС-2, присущи, главным образом, поросятам послеотъёмного периода.

При анализе в ПЦР различных органов и тканей поросят с респираторной патологией и СМИО оказалось, что вирус успешно выявляется во всех тестировавшихся образцах за исключением мозга и сыворотки крови. Наличие вируса в столь широком спектре органов свидетельствует о мультисистемном характере заболевания.

У животных с респираторными заболеваниями и признаками истощения наряду с ЦВС-2 обнаруживали другие виды вирусов и патогенных бактерий. Это подтверждает данные литературы (6, 21, 195) о значении "дополнительных факторов" в развитии полной клинической картины заболевания.

При других формах инфекционной патологии свиней ЦВС-2 был обнаружен лишь в единичных случаях: в одном случае из 99 при абортах у свиноматок и по одному случаю при дерматитах и поражении почек. У свиней с нарушением функции центральной нервной системы не было ни одного случая выявления ЦВС. Обнаружение ЦВС-2 в нескольких пробах кишечника у поросят с диарейным синдромом нельзя однозначно объяснить участием вируса в кишечной патологии, поскольку в пробах кишечника были одновременно выявлены патогенные бактерии. При исследовании методом пез1ес1-ПЦР 85 образцов спермы от клинически здоровых хряков цирковирусы не были выявлены. В то же время ЦВС-2 обнаруживали в других тканях племенных животных.

Таким образом, в результате проведённых нами исследований было установлено, что в российских свиноводческих хозяйствах ЦВС-2 ассоциирован, главным образом, с респираторной патологией и синдромом истощения поросят-отъёмышей. Роль этого вируса в других формах инфекционной патологии свиней в хозяйствах РФ, по-видимому, незначительна.

Что касается цирковируса свиней первого типа, то при проведении диагностических исследований этот вирус выявили лишь в одном случае, причем одновременно с ЦВС-2. Эти результаты свидетельствуют о том, что ЦВС-1 не играет сколь-либо важной роли в инфекционной патологии свиней.

С целью изучения распространения ЦВС-инфекции в дикой фауне исследовали материал от диких кабанов, павших или отстрелянных с диагностической целью во Владимирской, Московской и Тверской областях. В семи из четырнадцати охотохозяйств у кабанов был обнаружен ЦВС-2, то есть оказалось, что кабаны являются природным резервуаром цирковирусной инфекции свиней.

Поскольку цирковирусы свиней способны инфицировать различные типы клеточных культур, образцы культур клеток, используемых в ФГУ ВНИИЗЖ, исследовали в мультиплексной ПЦР на наличие контаминации цирковирусами свиней. Оказалось, что некоторые образцы клеточных культур РК-15 и СПЭВ контаминированы цирковирусом свиней типа 1. ЦВС-2 в исследованных образцах культур клеток обнаружен не был. Таким образом была показана возможность применения мПЦР для технологического контроля вакцинных препаратов.

Методом нуклеотидного секвенирования была определена первичная структура ОРС2 одиннадцати российских изолятов ЦВС-2 от свиней и семи изолятов от кабанов. Филогенетический анализ установленных последовательностей показал, что ЦВС-2 отличается большим генетическим разнообразием, а все российские изоляты от домашних свиней близки в филогенетическом отношении к изолятам, выделенным на территории Западной Европы, Канады, Тайваня и Таиланда. Оказалось, что не существует зависимости между географическим происхождением изолятов и их принадлежностью к тому или иному кластеру. Родство российских и зарубежных представителей, вероятно, объясняется тем, что в Россию завозятся племенные животные из разных стран мира. Было показано, что в течение 3-5 лет в некоторых хозяйствах произошла смена циркулирующих в них штаммов ЦВС-2.

Филогенетический анализ показал также, что в российской популяции диких кабанов циркулируют цирковирусы различного происхождения: некоторые варианты, вероятно, характерны именно для дикой фауны, тогда как другие могли быть привнесены в нее от домашних свиней.

С целью разработки иммуноферментной тест-системы для выявления антител к цирковирусу свиней типа 2 экспрессией в Е. coli был получен рекомбинантный капсидный белок цирковируса свиней типа 2. В непрямом ИФА с контрольными сыворотками была показана его высокая антигенная активность и специфичность.

На основе рекомбинантного антигена разработали непрямой вариант ИФА для выявления антител к ЦВС-2 в сыворотках крови свиней. В ходе разработки метода определили рабочее разведение антигена и сывороток, оптимальные режимы постановки реакции. Также установили позитивно-негативный порог реакции, допустимые значения оптической плотности контрольных сывороток и коэффициент вариации.

Установлено, что результаты, получаемые в непрямом ИФА, хорошо согласуются с результатами, получаемыми при использовании коммерческого набора «Ingezim circovirus IgG / IgM» (Ingenasa, Испания). Согласованность двух тест-систем, определили по методу капа статистики. Значение k-критерия было равно 0,72.

С использованием разработанной иммуноферментной тест-системы исследовали более 2000 проб сывороток крови от свиней из 60 хозяйств. Во всех хозяйствах, за исключением двух, в крови у животных обнаружили антитела к ЦВС-2. Максимальное количество серопозитивных свиней приходилось на возраст 4-6 месяцев и ремонтный молодняк, что хорошо согласуется с результатами ПЦР по обнаружению вируса. При исследовании сывороток крови племенных свиней, ввезённых из-за рубежа, антитела к ЦВС-2 выявили у 38% животных, что подтверждает широкое распространение ЦВС-2 в странах, экспортирующих племенных свиней.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Тимина, Анна Михайловна, 2006 год

1. Диагностические подходы к цирковирусной инфекции свиней / А. М. Коваленко, С. А. Гузь, 3. Пейсак и др. // Практик. 2005. - №5-6. -С.46-50.

2. Дудников, С .А. Количественная эпизоотология: основы прикладной эпидемиологии и биостатистики / С. А. Дудников //. Владимир: Демиург,-2005.-460 с.

3. Использование аэросила А-300 и фильтров GF/F (GF/C) для очистки фрагментов ДНК, ДНК-плазмид и РНК / Грибанов О. Г., Щербаков А.

4. B., Перевозчикова Н. А. и др. // Биохимия. 1996. - Т. 21, № 6.1. C. 1064-1070.

5. Каныиина, А. В. Разработка методов иммуноферментного анализа для выявления антител к вирусу репродуктивно-респираторного синдрома свиней: дис.канд.вет.наук. / А. В. Каныиина. Владимир, 2004. - 123 с.

6. Орлянкин, Б. Г. Современные представления о цирковирусах свиней. Обзор / Б. Г. Орлянкин, Т. И. Алипер, Е. А. Непоклонов // С.-х. биология. 2002. - №6. - С. 29-37.

7. Поляков, И. О. Практическое пособие по медицинской статистике / И. О. Поляков. Л.: Медицина, 1975. - 150 с.

8. Ресурсы основных видов охотничьих животных и охотничьи угодья России (1991-1995гг.) / И. К. Ломанов, Б. П. Борисов, О. А. Володина и др.. М.:ЦНИЛ Охотдепартамента Минсельхозпрода России, 1996. -226 с.

9. Ю.Сатина, Т. А. Цирковирусные инфекции свиней. Обзор литературы / Т. А. Сатина. Владимир, 2003. 101 с.

10. Теория и практика иммуноферментного анализа / под ред. Егорова А. М., Осипова А. П., Дзантиева Д. Д. и др. М.: Высшая школа, 1991. -288 с.

11. Ханаан, Д. Методы трансформации. // Клонирование ДНК / под ред. Гловера Д. М., 1988. - С. 140- 173.

12. Холодилов, Н. Г. Выделение плазмидной ДНК методом щелочного лизиса. Методы молекулярной генетики и генной инженерии / Н. Г. Холодилов; под ред. Мазина А. В., Кузнеделова К. Д., Краева А. С. и др. Новосибирск: Наука, 1990.

13. Этиологическая структура инфекционных болезней свиней в животноводческих хозяйствах России / А. В. Щербаков, В. Ф. Ковалишин, А. С. Яковлева, Е. В. Шабаева // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных. Владимир, 2003. - С. 146-150.

14. Яковлева, А. С. Экспрессия в E.coli рекомбинантных белков ЗА, ЗВ и ЗАВ вируса ящура / А. С. Яковлева, А. В. Каньшина, А. В. Щербаков // Тр. Федерального центра охраны здоровья животных. Владимир, 2005.-Т. 3-С. 105-114.

15. Absence of evidence for porcine circovirus type 2 in cattle and humans, and lack of seroconversion or lessions in experimentally infected sheep / G. M. Allah, F. McNeilly, I. McNair et al. // Arch. Virol. 2000. - V. 145. -P.853-857.

16. A comparison of in situ hybridization and immunohistochemistry for the detection of a new porcine circovirus in formalin-fixed tissues from pigs with post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) / F. McNeilly,

17. S. Kennedy, D. Moffett et al. // J. Virol. Methods. 1999. - V. 80, №2. -P.123-128.

18. Activation of the immune system is the pivotal event in the production of wasting disease in pigs infected with porcine circovirus-2 (PCV-2) / S. Krakowka, J. A. Ellis, F. McNeilly et al. // Vet. Pathol. 2001. - V. 38. -P.31-42.

19. Allan, G. M. Experimental reproduction of severe wasting disease by co-infection of pigs with porcine circovirus and porcine parvovirus / G. M. Allan, S.Kennedy//J. Comp. Pathol. 1999.-V. 121.-P. 1-11.

20. Allan, G. M., Porcine circovirus: Epidemiology and pathogenesis / G. M. Allan // Pig. J. 1996. - V. 37. - P. 14-19.

21. Allan, G. M. Porcine circovirus: a review / G. M. Allan, J. A. Ellis // J. Vet. Diagn. Invest. 2000. - V. 12. - P. 3-14.

22. Analysis of transcription and replication of porcine circovirus PCV / A. Mankertz, G. Blaess, J. Mankertz et al. // 9th Int. Congr. Virol. 1993. -P.76.

23. An experimental model for post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) in growing piglets / E. Albina, C. Truong, E. Hutet et al. // J. Comp. Pathol. 2001. - V. 125. - P. 292-303.

24. An ORF2 protein-based ELISA for porcine circovirus type 2 antibodies in post-weaning multisistemic wasting syndrome / P. Blanchard, D. Mahe, R. Cariolet et al. // Vet. Microbiol. 2003. -V. 94. - P. 183-194.

25. Antigenic analisis of the recombinant capsid protein of porcine circovirus type 2 / S. B. Shang, J. Y. Zhou, J. X. Wu et al. // Wei Sheng Wu Xue Bao. -2005. V. 45, №3. - P. 377-381.

26. Association of lymphopenia with porcine circovirus type 2 induced postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) / J. Nielsen, I. E. Vincent, A. Botner et al. // Vet. Immunol. Immunopathol. 2003. - V .92. -P. 97-111.

27. A very small porcine virus with circular single-stranded DNA / I. Tischer, H. Gelderblom, W. Vettermann, M. A. Koch // Nature. 1982. - V. 295. -P.64-66.

28. Bacterial expression of an immunologically reactive PCV2 ORF2 fusion protein / Q. Liu, P. Willson, S. Attoh-Poku et al. // Protein Expr. Purif. -2001. V. 21, №1. - P. 115-120.

29. Boevink, P. Sequence of subterranean clover stunt virus DNA: affinities with the geminiviruses / P. Boevink, P. W. G. Chu, P. Keese // Virology. -1995.-V. 207.-P.354-361.

30. Buhk, H. J. Replication of negative strand DNA of the single-stranded porcine circovirus genome / H. J. Bunk, I. Blab, I. Tischer // Abstr. Joint Meeting of Section Virol, and Virus Group of Coc Gen. Microbiol. 1988. -P. 54.

31. Cellular localization of porcine circovirus in postweaning pigs with chronic wasting disease / M. Kiupel, G. W. Stevenson, C. L. Kanitz et al. // Eur. J. Vet. Pathol. 1999. - V. 5. - P. 77-82.

32. Chae, C. A review of porcine circovirus 2-associated syndromes and diseases / C. Chae // Vet. J. 2005. - V. 169. - P. 326-336.

33. Chae, C. Postweaning multisystemic wasting syndrome: a review of aetiology, diagnosis and pathology / C. Chae // Vet. J. 2004. - V. 169. -P.41-49

34. Change of porcine circovirus 2 target cells in pigs during development from fetal to early postnatal life / R. E. Sanchez, P. Mee rts, H. J. Nauwynck, M.B. Pensaert // Vet. Microbiol. 2003. - V. 95. - P. 15-25.

35. Changes in periferal blood leukocyte populations in pigs with natural postweaning multisistemic wasting syndrome (PMWS) / J. Segales, F. Alonso, C. Rosel et al. // Vet. Immunol. Immunopathol. 2001. - V. 81.-P.37-44.

36. Characterization of novel circovirus DNAs associated with wasting syndromes in pigs / B. Meehan, F. McNeilly, D. Todd et al. // J. Gen. Virol. 1998. - V. 79. - P. 2171-2179.

37. Characterization of PCV-2 isolates from Spain, Germany and France / A. Mankertz, M. Domingo, J. M. Folch et al. // Virus. Res. 2000. V. 66. -P.65-77.

38. Characterization of the recombinant proteins of porcine circovirus type 2 field isolate expressed in the baculovirus system / Y. Kim, J. Kim, K. Kang, Y. S. Lyoo // J. Vet. Sci. 2002. - V. 3, № 1. - P. 19-23.

39. Choi, C. In situ hybridization for the detection of porcine circovirus in pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome / C. Choi, C. Chae // J. Comp. Pathol. 1999. - V. 3.-P. 265-270.

40. Circoviridae / D. Todd, M. McNulty, A. Mankertz et al. //Seventh Report Int. Committee on Taxonomy of Viruses. San Diego Acad. Press. - 2000. -P.299-303.

41. Clark, E. G. Patology of post-weaning multisystemic wasting syndrome of pigs / E. G. Clark // Proc. West. Can. Assoc. Swine Pract. 1996. - P. 22-25.

42. Clark, E. G. Post-weaning multisystemic wasting syndrome / E. G. Clark // Proc. Am. Assoc. Swine Pract. 1997. - P. 499-501.

43. Clinical and patological observations on pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome / J. Quintana, J. Segales, C. Rosell et al. // Vet. Rec. 2001. - V. 149. - P. 357-361.

44. Cloning and sequencing of columbid circovirus (CoCV), a new circovirus from pigeons / A. Mancertz, K. Hattermann, B. Ehlers, D. Soike // Arch. Virol. 2000. - V. 145. - P. 2469-2480.

45. Coinfection by porcine circoviruses and porcine parvovirus in pigs with naturally acquired postweaning multisystemic wasting syndrome / J. A. Ellis, A. Bratanich, E. G. Clare et al. // J. Vet. Diagn. Invest. 2000. - V. 12.-P. 21-27.

46. Comparative genetic characterization of porcine circovirus type 2 samples from German wild boar populations / S. Knell, H. Willems, B. Hertrampf, G. Reiner//Vet. Microbiol. 2005. - V. 109.-P. 169-177.

47. Comparison of three animal viruses with circular singlestranded DNA genomes / D. Todd, F.D. Niagro, Ritchie B.W. et al. // Arch. Virol. 1991. -V. 117, №1-2.-P. 129-135.

48. Cutaneous and systemic necrotizing vasculitis in swine / S. Trhibault, R. Drolet, M. C. Germain et al. // Vet. Pathol. 1998. - V. 35. - P. 108-116.

49. Cytokine mRNA expression profiles in lymphoid tissues of pigs naturally affected by postweaning multisystemic wasting syndrome / L. Darwich, S. Pie, A. Rovira et al. // J. Gen. Virol. 2003. - V. 84. - P. 2117-2125.

50. Darwich, L. Patogénesis of postweaning multisistemic wasting syndrome caused by Porcine circovirus 2: an immune riddle / L. Darwich, J. Segales, E. Mateu // Arch. Virol. 2004. - V. 149. - P. 857-874.

51. Detection of a novel strain of porcine circovirus in pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome /1. Morozov, T. Sirinarumitr, S. D. Sorderi et al. // J. Clin. Microbiol. 1998. - V. 36. - P. 2535-2541.

52. Detection of porcine circovirus type 1 in commercial pig vaccines using polimerase chain reaction / J. Quintana, J. Segales, M. Calsamiglia, M. Domingo //Vet. J. 2006. - V. 171, 3. - P. 570-573.

53. Detection of porcine circovirus type 2 and porcine parvovirus in boar semen and tonsillar scrapings / F. Schmol, T. Voglmayr, B. Exei et al. // 4lh Int. Symp. on Emerging and Re-emerging Pig Diseases. Rome, 2003. - P. 235.

54. Development and application of a competitive enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of serum antibodies to porcine circovirus type 2 /1. W. Walker, C. A. Konoby, V. A. Jewhurst et al. // J. Vet. Diagn. Invest. 2000. - V. 12. - P. 400-405.

55. Development of an ELISA based on the baculovirus-expressed capsid protein of porcine circovirus type 2 as antigen / C. Liu, T. Ihara, T. Nunoya, S. Ueda // J. Vet Med Sci. 2004. - V. 66, №3. - P. 237-242.

56. Differentiation of porcine circovirus (PCV)-l and PCV-2 in boar semen using a multiplex nested polimerase chain reaction / J. Kim, D. U. Han, C. Choi, C. Chae // J. Virol. Methods. 2001. - V. 98, № 1. - P. 25-31.

57. Differential recognition of ORF2 protein from type 1 and type 2 porcine circoviruses and identification of immunorelevant epitopes / D. Mahe, P. Blanchard, C. Truong et al. //J. Gen. Virol. 2000. - V. 81, №7. - P. 18151824.

58. Distribution of antibodies to porcine circovirus in swine populations of different breeding farms / I. Tischer, H. Geldglom, W. Vettermann, M. A. Hoch // Arch. Virol. 1995. - V. 140. - P. 737-743.

59. Edwards, S. Evidence of circovirus infection in British pigs / S. Edwards, J. J. Sands // Vet. Rec. 1994. - V. 134, №26. - P. 680-681.

60. Eich, K.-O. Handbuch Schweinekrankheiten K.-O. Eich.-Frankfurt (Main): / U. Schmidt Verlags Union Agrar, 1998. P. 151-152.

61. Ellis, J. A. The natural history of porcine circoviruses / J. A. Ellis, G. M. Allan // MER1AL PMWS Symposium. - Melbourne, 2000. - P. 3-19.

62. Epidemiological study on porcine circovirus type 2 (PCV2) infection in the European wild boar (sus scrofa) / J. Vicente, J. Segales, U. Hofle et al. // Vet. Res. 2004. - V. 35. - P. 243-253.

63. Evidence for circovirus in cattle with respiratory disease and from aborted bovine fetuses / G. P. S. Nayar, A. L.Hamel, L. L. Lin et al. // Can. Vet. J. 1999.-V. 40.-P. 227-278.

64. Evidence of HIV-1 adaptation to HLA-restricted immune responses at a population level / C. B. Moore, M. John, I. R. James et al. // Science. -2002.-V. 296.-P. 1439-1443.

65. Experimental inoculation of conventional pigs with porcine reproductive and respiratory syndrome virus and porcine circovirus 2 / A. Rovira, M. Balash, J. Segales et al. // J. Virol. 2002. - V. 76. - P. 3232-3239.

66. Experimental inoculation of conventional pigs with tissue homogenates from pigs with post-weaning multisystemic wasting syndrome / M. Balasch, J. Segales, C. Rosel et al. // J. Comp. Pathol. 1999. - V. 121, №2.-P. 139148.

67. Experimental transmission of porcine circovirus type 2 (PCV2) in weaned pigs: a sequential study / R. Magar, R. Larochelle, S. Thibault, L. Lamontagne // J. Comp. Pathol. 2000. - V. 123. - P. 258-269.

68. First report of post-weaning multisystemic wasting syndrome in pigs in Spain / J. Segales, M. Sitjar, M. Domingo et al. // Vet. Rec. 1997. -V.141, №23. - P. 600-601.

69. Geminiviridae / E. P. Rybicki, R. W. Briddon, J. K. Brown et al. // Seventh Report Int. Committee on Taxonomy of Viruses. San Diego, Acad. Press, 2000. - P. 299-303.

70. Gene organisation of chicken anaemia virus / A. Kato, M. Fujino, T. Nakamura et al. // Virology. 1995. - V. 209. - P. 480-488.

71. Genome sequence analysis of 10 Dutch porcine circovirus type 2 (PCV-2) isolates from a PMWS case-control study / S. S. Grierson, D. P. King, G. J. Wellenberg, M. Banks // Res. Vet. Sci. 2004. - V. 77. - P. 265-268.

72. Genome sequence determinations and analyses of novel circoviruses from goose and pigeon / D. Todd, J. H. Weston, D. Soike, J. Smyth // Virology. -2001.-V. 286.-P. 354-62.

73. Gibbs, M.J. Evidence that a plant virus switched hosts to infect a vertebrate and then recombined with a vertebrate-infecting virus / M. J. Gibbs, G. F. Weiller // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - V. 96, № 14. - P. 80228027.

74. Girard, C. Experimentally induced porcine proliferative and necrotizing pneumonia / C. Girard, M. Morin, Y. Elazhary // Vet. Rec. 1992. - V. 130.-P. 206-207.

75. Haematological parameters and leukocyte populations in pigs naturally infected with porcine circovirus type 2 / P. Martelli, P. Borghetti, E. De Angelis et al. // Saint-Malo 2001. ZOOPOLE Development (ISPAIA), France. P. 98.

76. Haematological parameters in postweaning multisystemic wasting syndrome affected pigs / J. Segales, J. Pastor, R. Cuenca et al. // Vet. Rec. 2000. -V.146. - P. 675-676.

77. Halbur, P. G. Porcine respiratory disease / P. G. Halbur // Proc. 15 Int. Pig Vet. Society Congress. 1998. - P. 1-10.

78. Hamel, A. L. Nucleotide sequence of porcine circovirus associated with postweaning multisystemic wasting syndrome in pigs / A. L. Hamel, L. L. Lin, G. P. Nayar//J. Virol. 1998. - V. 72, №6. - P. 5262-5267.

79. Harding, J. C. S. Post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS): preliminary epidemiology and clinical presentation / J. C. S. Harding // Proc. West. Can. Assoc. Swine Pract. 1996. - P. 21.

80. Harding, J. C. S. The clinical expression and emergence of porcine circovirus 2 / J. C. S. Harding // Vet. Microbiol. 2004. - V. 98. - P. 131135.

81. Harms, P. A. Post-weaning multisystemic wasting syndrome-case investigations / P. A. Harms // Proc. Seventh Annual Swine Disease Conference of Swine Practitioners. Ames Iowa, 1999. - P. 43-47.

82. Hines, R. K. Porcine circovirus as a cause of congenital tremors in newborn pigs / R. K. Hines, P. D. Lukert // Proc. Amer. Assoc. Swine Pract., 1994. -P. 344-345.

83. Hinrichs, U. Klinische und pathomorphologische Erscheinungsformen des porzinen Dermatitis-Nephropathie Syndroms / U. Hinrichs // Amtstierarztlicher Dienst. 2000. - Bd.l. - P. 553-555.

84. Huedepohl, B. Porcine circovirus: a review / B. Huedepohl, B. Thacker // Iowa State Univ. Vet. 1998. - V. 60, №2. - P. 92-97.

85. Identification and incidence of porcine circovirus in routine field cases in Quebec as determined by PCR / R. Larochelle, M. Morin, M. Antaya et al. // Vet. Ree. 1999. - V. 145, №5. - P. 140-142.

86. Identification of an immunorelevant ORF2 epitope from porcine circovirus type 2 as a serological marker for experimental and natural infection / C. Truong, D. Mahe, P. Blanchard et al. // Arch. Virol. 2001. -V. 146, №6.-P. 1197-1211.

87. Identification of a protein essential for replication of porcine circovirus / A. Mankertz, J. Mankertz, K. Wolf et al. // J. Gen. Virol. -1998.-V. 79, №2. -P. 381-384.

88. Identification of porcine circovirus in tissues of pigs with porcine dermatitis and nephropathy syndrome / C. Rosell, J. Segales, J. A. Folch et al. // Vet. Ree. 2000. - V. 146. - P. 40-43.

89. Immunohistochemical characterization of the lymph node reaction in pig post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) / G. Sarli, L.

90. Mandrioli, M. Laurenti et al. // Vet. Immunol. Immunopathol. 2001. -V.83. - P. 53-67.

91. Immunologic features of porcine circovirus type 2 infection / S. Krakowka, J. A. Ellis, F. McNeilly et al. // Virol. Immunol. 2002. - V. 15.- P. 567-582.

92. Immunostimulation, PCV-2 and PMIS / G. M. Allan, F. McNeilly, S. Kennedy et al. // Vet. Rec. 2000. - V. 147. - P. 170-171.

93. Infection of leucocyte cell cultures derived from different species with pig circovirus / G. M. Allan, F. McNeilly, J. C. Foster, B. M. Adair // Vet. Microbiol. 1994. - V. 41, №3. - P. 267-279.

94. In planta expression of a protein encoded by the extrachromosomal DNA of a phytoplasma and related to geminivirus replication proteins / H. Nishigawa, S. Miyata, K. Sawayanagi et al. // Microbiology. 2001. -V.147 (Part 2). - P. 507-513.

95. Interstitial pneumonia and lymphadenopathy associated with circoviral infection in a six-week-old pig / B. Daft, R. W. Nordhausen, K. S. Latimer et al. // 39th Meeting of the Am. Assoc. Vet. Lab. Diagn. 1996. -P.32-39.

96. Intestinal chlamydial infection concurrent with post weaning multisystemic wasting syndrome in pigs / L. Carrasco, J. Segales, M. Bautista et al. // Vet. Rec. 2000. - V. 146, №1. - P. 21-23.

97. Investigation of the transfection capability of cloned tandemly-repeated chicken anaemia virus DNA fragments // Arch. Virol. 1996. -V.141.-P. 1523-1534.

98. In vitro studies on the infection and replication of porcine circovirus type 2 in cells of the porcine immune system / D. F. Gilpin, K. McCullough, B. M. Meehan et al. // Vet. Immunol Immunopathol. 2003. - V. 94. -P. 149-161.

99. Isolation and characterisation of circoviruses from pigs with wasting syndromes in Spain, Denmark and Northern Ireland / G. M. Allan, F.

100. McNeilly, B. M. Meehan et al. // Vet. Microbiol. 1999. - V. 66. - P. 115123.

101. Isolation and characterization of porcine circovirus type 2 from pigs showing sings of post-weaning multisystemic wasting syndrome in the Netherlands / G.J. Wellenberg, S. Pesch, F. W. Berndsen et al. // Vet. Q. -2000. V. 22, №3. - P. 167-172.

102. Isolation of circovirus from lesions of pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome / J. Ellis, L. Hassard, E. Clare et al. // Can. Vet. J. 1998. - V. 39. - P. 44-51.

103. Isolation of porcine circovirus-like viruses from pigs with a wasting disease in the USA and Europe / G. M. Allan, F. McNeilly, S. Kennedy et al. //J. Vet. Diagn. Invest. 1998. - V. 10, №1. - P. 3-10.

104. Jolie, R. Post-weaning multisystemic wasting syndrome in a group of caesarian derived colostrum deprived pigs / R. Jolie, P. Runnels, D. McGavin //Proc. 16 Int. Pig Vet. Society Congress. 2000. P. 74-76.

105. Katul, L. Sequence analysis of a faba bean necrotic yellows virus DNA component containing a putative replicase gene / L. Katul, E. Maiss, H. J. Vetten // J. Gen. Virol. 1995. - V. 76. - P. 475-479.

106. Kim, J. Association of porcine circovirus 2 with porcine respiratory disease complex / J. Kim, H.-K. Chung, C. Chae // Vet. J. 2003. - V. 166. -P.251-256.

107. Kim, J. Differentiation of porcine circovirus 1 and 2 in formalinfixed, paraffin-wax-embedded tissues from pigs with postweaning multisistemic wasting syndrome by in situ hybridization / J. Kim, C. Chae // Res. Vet. Sci.- 2001.-V. 70.-P. 265-269.

108. Kim, J. Simultaneous detection of porcine circovirus 2 and porcine parvovirus in naturally and experimentally coinfected pigs by double in situ hybridization / J. Kim, C.Chae // J. Vet. Diagn. Invest. 2002. - V. 14. -P.236-240.

109. Koonin, E. V. Computer-assisted dissection of rolling circle DNA replication. / E. V. Koonin, T. V. Ilyna//Biosystems -1993 V. 30. - P. 241268.

110. Landis J. R. The measurement of observer agreement for categorial data / J. R. Landis, G. G. Koch // Biometrics. 1977. - V. 33. - P. 159-174.

111. Larochelle, R. Genetic characterization and phylogenetic analysis of porcine circovirus type 2 (PCV2) strains from cases presenting various clinical conditions / R. Larochelle, R. Magar, S. D'Allaire // Virus Res. -2002.-V. 90.-P. 101-112.

112. Larochelle, R. Comparative serologic and virologic study of commercial swine herds with and without postweaning multisystemic wasting syndrome / R. Larochelle, R. Magar, S. D'Allaire // Canadian J. Vet. Res. 2003. - V. 67. - 114-120.

113. Liu, Q. Nuclear localization of the ORF2 protein encoded by porcine circovirus type 2 / Q. Liu, S. K. Tikoo, L. A. Babiuk // Virology. 2001. -V.285, №1. - P. 91-99.

114. Lukert, P. D. Porcine circovirus / P. D. Lukert, G. M. Allan // Diseases of Swine. 8th ed. - Ames, Iowa USA, 1999. - P. 119-124.

115. Magar, R. Retrospective serological survey of antibodies to porcine circovirus type 1 and type 2 // R. Magar, P. Muller, R. Larochelle // Can. J. Vet. Res. 2000. - V. 64. - P. 184-186.

116. Mankertz, A. Porcine circoviruses: molecular biology and diseaseiLaspects / A. Mankertz // 6 Int. Congress of Vet. Virology. France, 2003. -P. 40-41.

117. Mankertz, A. Analyses of transcription of porcine circovirus type 1 / A. Mankertz, B. Hillenbrand //J.Gen Virol. 2002. - V. 83. - P. 2743-2751.

118. Mapping and characterization of the origing of DNA replication of porcine circovirus / J. Mankertz, F. Persson, J. Mankertz et al. // J. Virol. -1997. V. 71, №3. - P. 2562-2566.

119. Molekular basis of the attenuation exhibited by molecularly cloned hightly passaged chicken anemia virus isolates / D. Todd, A. N. Scott, N. W. Ball et al. // J. Virol. 2002. - V. 76. - P. 8472-8474.

120. Molecular characterization of porcine circovirus type 2 isolates from post-weaning multisystemic wasting syndrome-affected and non-affected pigs / C. Boisseson, V. Beven, L. Bigarre et al. // J. Gen. Virol. 2004. -V.85. - P. 293-304.

121. Multiplex PCR for detection and typing of porcine circoviruses / M. Ouardani, L. Wilson, R. Jette et al. // J. Clin. Microbiol. 1999. - V. 37, №12.-P. 3917-3924.

122. Nanoviridae / J. W. Randies, P. W. G. Chu, J. L. Dale et al. // Seventh Rep. Int. Committee on Taxonomy of Viruses. San Diego: Acad. Press. - 2000. - P. 299-303.

123. Nayar, G. P. Detection and characterization of porcine circovirus associated with postweaning multisistemic wasting syndrome in pigs / A. Hamel, L. Lin // Can Vet J. 1997. - V. 38. - P. 385-386.

124. New pig disease in Hungary: postweaning multisystemic wasting syndrome caused by circovirus (short communication) / I. Kiss, S. Kecskemeti, T. Tuboly et al. // Acta Vet. Hung. 2000. - V. 48, №4. -P.469-475.

125. Novel porcine circovirus from pigs with wasting syndromes / G. M. Allan, B. Meehan, D. Todd et al. // Vet. Rec. 1998. - V. 142. - P. 467468.

126. Nucleotide sequence-based identification of novel circovirus of canaries / D. Todd, J. Weston, N. W. Ball et al. // Avian Pathology. 2001. -V. 30.-P. 321-325.

127. Nucleotide sequens of a circular single-stranded DNA associated with coconut foliar decay virus / W. Rohde, J. W. Randies, P. Langridge et al. // Virology. 1990. - V. 176. - P. 648-651.

128. Nucleotide sequence of one component of the banana bunchy top virus genome contains a putative replicase gene / R. M. Harding, T. M. Burns, G. Hafner et al. //J. Gen. Virol. 1993. - V. 74. - P. 323-328.

129. Ohlinger, V. F. Studies on pathogenic aspects of the post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) / V. F. Ohlinger, U. Schmidt, S. Pesch // Proceedings 16lh Int. Pig Vet. Society Congress. 2000. - P. 98-101.

130. Open reading frame 2 of porcine circovirus type 2 encodes a maior capsid protein / P. Nawagitgul, I. Morozov, S. R. Bolin et al. // J. Gen. Virol. 2000. - V. 81. - P. 2281-2287.

131. Palmer, K. E. The molecular biology of mastreviruses / K. E. Palmer, E. P. Rybicki//Adv. Virus. Res. 1998. - V. 50. - P. 183-234.

132. Patogénesis of porcine circovirus; experimental infections of colostrum deprived piglets and examination of pig foetal material / G. M. Allan, F. McNeilly, J. P.Cassidy et al. // Vet. Microbiol. 1995. - V. 44. -P. 49-64.

133. Patological, immunohistochemical, and in-situ hybridisation studies of natural cases of Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome (PMWS) in pigs / C. Rosell, J. Segales, J. Plana-Duran et al. // J. Comp. Patol. 1999. -V. 120. - P. 59-78.

134. PCR detection and characterization of type-2 porcine circovirus / A. L.Hamel, L. L. Lin, C. Sachvie et al. // Can. J. Vet. Res. 2000. - V. 64. -P.44-52.

135. PCR detection and evidence of shedding of porcine circovirus type 2 in boar semen / R. Larochelle, A. Bielanski, P. Muller, R. Magar // J. Clin. Microbiol. 2000. - V. 38. - P. 4629-4632.

136. Piglet wasting disease / P. LeCann, E. Albina, F. Madec et al. // Vet. Rec. 1997. - V. 141, №25. - P. 660.

137. Porcine circovirus-2 and concurrent infections in the field / J. Ellis, E. Clare, D. Haines et al. // Vet. Microbiol. 2004. - V. 98. - P. 159-163.

138. Porcine circovirus induces B lymphocyte depletion in pigs with wasting disease syndrome / T. Shibahara, K. Sato, Y. Ishikawa, K. Kadota // J. Vet. Med. Sci. 2000. - V. 62. - P. 1125-1131.

139. Porcine reproductive and respiratory sindrome / D. A. Benfield, J. E.xL

140. Collins, A. L. Jenny, T. J. Loula // Disease of swine. 7 ed. - Ames, Iowa, 1992.-P. 756-762.

141. Post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS): epidemiology and clinical presentation / J. C. Harding, E. G. Clare, J. H. Strokappe et al. // Swine Health Prod. 1998. - №6. - P. 249-254.

142. Premiers résultats du CNEVA sur le deperissement fatal du porcelet en fion de post-sevrage / E. Albina, R. Cariolet, E. Eveno et al. // Suppl. Sem. Vet. 1996. - V. 834. - P. 1-2.

143. Production, characterisation and applications of monoclonal antibodies to porcine circovirus 2 / F. McNeilly, I. Mcnair, D. P. Mackie et al. // Arch. Virol. 2001. - V. 146, №5. - P. 909-922.

144. Production, preliminary characterisation and applicstions of monoclonal antibodies to porcine circovirus / G. M. Allan, D. P. Mackie, I. McNair et al. // Vet. Immunopathol. 1994. - V. 43, №4. - P. 357-371.

145. Protection contrôle la maladie d'amaigrissement du porcelet (MAP) par vaccins a ADN et proteines recombinantes / P. Blanchard, D. Mahe, R. Cariolet et al. // J. Recherche Porcine. 2004. - V. 36. - P. 345-352.

146. Protection of swine against post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) by porcine circovirus type 2 (PCV2) proteins / P. Blanhard, D. Mahe, R. Cariolet et al. // Vaccine. 2003. - V. 21,31. -P.4565-4575.

147. Quantitative, competitive PCR analysis of porcine circovirus DNA in serum from pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome / Q. Liu, L. Wang, P. Willson, L. Babiuk // J. Clin. Microbiol. 2000. - V. 38, №9. - P. 3474-3477.

148. Replication of porcine circovirus: induction by glucosamine and cell cycle dependence / I. Tischer, D. Peters, R. Rasch, S. Pociuli // Arch. Virol. 1987.-V. 96.-P. 39-57.

149. Rozell, C. Hepatitis and staging of hepatic damage in pigs naturally infected with porcine circovirus type 2 / C. Rozell, J. Segales, M. Domingo // Vet. Pathol. 2000. - V. 37. - P. 687-692.

150. Rychlik, W. A computer programm for choosing optimal oligonucleotides for filter hybridization, sequencing and in vitro amplification of DNA / W. Rychlik, R. I. Rhoads // Nucleic Acids Res. -1989.-V. 17.-P. 8543-8551.

151. Sanger, F. DNA sequensing with chainterminating inhibitors / F. Sanger, S. Nicklen, A.R. Coulsen // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1977. -V. 74.-P. 5463-5467.

152. Segales, J. How we diagnose postweaning multisystemic wasting syndrome / J. Segales, M. Calsamiglia, M. Domingo // 4th Int. Symp. on Emerging and Re-emerging Pig Diseases. Rome, 2003. - P. 149-151.

153. Segales, J. Pathological findings associated with naturally acquired porcine circovirus type 2 associated disease / J. Segales, C. Rosel, M. Domingo // Vet. Microbiol. 2004. - V. 98. - P. 137-149.

154. Segales, J. Porcine circovirus diseases / J. Segales, G. M. Allan, M. Domingo //Anim. Health. Res. Rev. 2005.-V. 6.2. - P. 119-142.

155. Sequence of porcine circovirus DNA: affinities with plant circovirus / B. M. Meehan, J. L. Creelan, M. S. McNulty et al. // J. Gen. Virol. 1997.-V. 78, №1.- P. 221-227.

156. Seroprevalence of porcine circovirus types 1 and 2 in the Belgian pig population / A. P. Mesu, G. G. Labarque, H. J. Nauwynck et al. // Vet. Quart. 2000. - V. 22. - P. 234-236.

157. Seroprevalence of six reproductive pathogens in European wild boar (Sus scrofa) from Spain: The effect on wild boar female reproductive performance / F. Ruiz-Fons, J. Vicente, D. Vidal et al. // Theriogenology. -2006.-V. 65,4.-P. 731-743.

158. Serum antibodies to porcine circovirus type 1 and type 2 in pigs with and without PMWS / G. M. Rodrigues-Arrioja, J. Segales, M. Balasch et al. // Vet. Ree. 2000. - V. 146. - P. 762-764.

159. Shoukri, M. N. Statistical Methods for Health Sciences / M. N. Shoukri, V. L. Edge. N. Y.: CRC Press Inc., 1996.

160. Smith, W. J. Dermatitis / nephropathy syndrome of pigs / W. J. Smith, J. R. Thomson, S. Done // Vet. Ree. 1993. - V. 132. - P. 147.

161. Some biological and physicochemical properties of porcine circovirus / G. M. Allan, KV. Phenix, D. Todd, M. S. McNulty // J. Vet. Med. Ser. B. -1994.-V. 41, №1.- P. 17-26.

162. Studies on the pathogenicity of porcine circovirus / I. Tischer, W. Mields, D. Wolff et al. // Arch. Virol. 1986. - V. 91. - P. 271-276.

163. Steinfeldt, T. Rep and Rep' protein of porcine circovirus type 1 bind to the origin of replication in vitro / T. Steinfeldt, T. Finsterbusch, A. Mankertz // Virology. 2001. - V. 291. - P. 152-160.

164. Straub O. C. Circovirus Typ 2 ein neuer Krankheitserreger in Schweinebestanden / O. C. Straub // Tierarztl. Umschau. - 1999. - Bd. 54, №11. - P. 638-640.

165. Thacker, E. L. Porcine respiratory disease complex what is it and why does it remain a problem? / E. L. Thacker // Pig J. - 2001. - V. 48. -P.66-70.

166. The clinical scope of porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection has expanded since 1987: an alternative perspective / J. Ellis, S. Krakowka, G. Allan et al. // Vet. Pathol. 1999. - V. 36. - P. 262-265.

167. The effect of temperature and oligonucleotideprimer length on specifity and efficiency of amplification by the polymerase chain reaction / D. Y. Wu, W. Ugozzoli, B.K. Pal et al. // DNA Cell Biol. 1991. - V. 10-P. 374-376.

168. The influence of ovine MHC class II DRB1 alleles on immune response in bovine leukemia virus infection / S. Konnai, S. N. Takeshima, S. Tajima et al. // Microbiol. Immunol. 2003. - V. 47. - P. 223-232.

169. Thibault, S. Cutaneous and systemic necrotizing vasculitis in swine / S. Thibault, R. Magar, R. Larochelle // Vet. Pathol. 1998. - V. 35. - P. 108116.

170. Tischer, I. Characterization of papovavirus- and picornavirus- like particles in permanent pig kidney cell lines / I. Tischer, R. Rasch, Tochtermann // Zentralbl. Bakteriol., Mikrobiol. and Hygiene, Reine A.-1974.-Bd. 226.-P. 153-167.

171. Tischer, I. Occurrence and role of an early antigen and evidence for transforming ability of porcine circovirus / I. Tischer, D. Peters, S. Pociuli // Arch. Virol. 1995.-V. 140, №10.-P. 1799-1816.

172. Tissue distribution and genetic typing of porcine circoviruses in pigs with naturally occurring congenital tremors / G. W. Stevenson, M. Kiupel, S. K. Mittal et al. //J. Vet. Diagn. Invest. 2001. - V. 13. - P. 57-62.

173. Transcription analysis of porcine circovirus (PCV) / J. Mankertz, H. J. Buhk, G. Blaess et al. // Virus Genes. 1998. - V. 16, №3. - P. 267-276.

174. Typing of porcine circovirus in clinical specimens by multiplex PCR / R. Larochelle, M. Antaya, M. Morin et al. // J. Virol. Methods. 1999. -V.80,№l.-P. 69-75.

175. Ultrastructure of porcine circovirus in persistently infected PK-15 cells / Stevenson G. W., Kiupel M., Mittal S. K. et al. // Vet. Pathol. -1999.-V. 36, №5.-P. 368-378.

176. West, K. W. Myocarditis and abortion associated with intrauterine infection of sows with porcine circovirus-2 / K. W. West, J. Bystrom, C. Wojnarowicz // J. Vet. Diagn. Invest. 1999. - V. 11(6). - P. 530-532.