Разработка иммунохимических методов определения гербицидов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат химических наук Язынина, Елена Валентиновна

• Язынина, Елена Валентиновна
• кандидат химических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат химических наук Язынина, Елена Валентиновна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Экологический мониторинг гербицидов.

1.2. Характеристика объектов исследования.

1.2.1. Производные симм-1,3,5-триазина.

1.2.2. Производные сульфонилмочевины.

1.2.3. Иммунохимические методы определения триазиновых и сульфонилмочевинных гербицидов.

1.3. Молекулярные основы иммунного распознавания.

1.4. Основные этапы разработки систем иммуноанализа.

1.4.1. Выбор гаптена и метода его конъюгации.

1.4.2. Получение и характеристика антител.

1.4.3. Иммуноферментные методы анализа: основные форматы, аналитические характеристики.

1.4.4. Поляризационный флуоресцентный иммуноанализ.

1.5. Влияние органических растворителей на основные компоненты иммуноферментных систем.

1.6. Полимерные носители как эффективное средство разделения иммунореагентов.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы.

2.2. Методы исследования.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Получение и характеристика иммунореагентов.

3.2. Количественные закономерности гомогенного иммуноанализа атразина и хлорсульфурона.

3.3. Твердофазный иммуноферментный анализ гербицидов: кинетические закономерности и аналитические характеристики.

3.4. Изучение влияния органических растворителей на иммунореагенты.

3.4.1. Изучение влияния органических растворителей на активность ферментов.

3.4.2. Изучение влияния органических растворителей на иммунореагенты в системе твердофазного иммуноферментного анализа.

3.5. Твердофазный иммуноферментный анализ на основе полиэлектролитов.

3.5.1. Выбор поликатиона для иммобилизации в твердофазном иммуноанализе

3.5.2. Изучение кинетики иммунохимических реакций с использованием полиэлектролитов.

3.5.3. Оптимизация твердофазного полиэлектролитного иммуноанализа триазиновых гербицидов.

3.6. Мембранный иммунофильтрационный анализ.

3.7. Применение полученных иммунореагентов для определения гербицидов с помощью электрохимических иммуносенсоров.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка иммунохимических методов определения гербицидов»

Устойчивый рост применения средств химической защиты растений стал одной из причин необходимости создания систем контроля уровня загрязнения ими природных объектов и сельскохозяйственной продукции. Опасность гербицидов обусловлена их высокой токсичностью, стабильностью, способностью аккумулироваться в окружающей среде. В сельском хозяйстве многих стран широко используются гербициды, относящиеся к классам триазинов (атразин, симазин и др.) и сульфонилмочевин (хлорсульфурон и его структурные аналоги). В связи с этим актуальной является задача разработки высокоспецифичных, чувствительных и быстрых методов определения данных соединений.

В настоящее время для определения гербицидов применяют как традиционные физико-химические, так и иммунохимические методы (ИХМ) анализа. К достоинствам ИХМ, основанных на связывании анализируемых соединений с антителами, относятся высокая чувствительность и специфичность, возможность автоматизации и проведения измерений как в лабораторных, так и в полевых условиях.

Аналитические характеристики любого ИХМ определяются физико-химическими свойствами иммунореагентов и количественными параметрами реакций между ними. Поэтому изучение взаимодействия антител с гербицидами в различных аналитических системах является неотъемлемой основой разработки ИХМ, представляющих значительный интерес для современной практики экологического мониторинга. Возможности и диапазон применения этих методов расширяются при сокращении продолжительности анализа, поэтому в рамках данной работы основное внимание уделялось созданию экспрессных иммунохимических систем определения гербицидов.

Широкое практическое применение получили твердофазные иммуноферментные методы анализа (ИФА), основанные на сорбционной или ковалентной иммобилизации антител на носителе, последующем взаимодействии иммобилизованных антител с анализируемым антигеном и выявлении иммунных комплексов с помощью меченных ферментами компонентов. Однако, несмотря на достоинства, существующие методы твердофазного ИФА не лишены недостатков, таких как значительная продолжительность, которая обусловлена диффузионными ограничениями при формировании иммунного комплекса на твердой фазе. Один из подходов, позволяющий повысить экспрессность анализа, заключается в использовании линейных водорастворимых полиэлектролитов, которые обеспечивают быстрое разделение образовавшихся специфических иммунных комплексов от других компонентов реакционной смеси. Кроме ускорения анализа, применение полиэлектролитов позволяет реализовать на базе иммунореагентов для ИФА новые форматы иммуноанализа и подходы, эффективные для создания иммуносенсоров.

Вышеизложенные соображения обуславливают актуальность данной работы, целью которой явилось изучение кинетических и концентрационных закономерностей взаимодействия антител с низкомолекулярными антигенами и разработка на основании этих результатов новых экспрессных методов иммунохимического определения гербицидов, эффективных для анализа реальных объектов.

Достижение поставленной цели связано с решением следующих задач:

1) синтез и характеристика иммунохимических реагентов;

2) получение и характеристика препаратов антител против атразина, симазина, хлорсульфурона;

3) изучение кинетики взаимодействия антигенов со специфическими антителами в различных схемах ИФА гербицидов;

4) изучение влияния состава водно-органических смесей на компоненты иммуноферментных систем и чувствительность ИФА гербицидов;

5) исследование кинетики иммунных взаимодействий в присутствии водорастворимых полиэлектролитов;

6) разработка новых иммуноаналитических систем определения гербицидов.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Язынина, Елена Валентиновна

выводы

1. Получены и охарактеризованы реагенты - антитела, конъюгаты гаптенов с белками, ферментами и флуорохромами - для проведения иммунохимического определения гербицидов атразина, симазина и хлорсульфурона.

2. На основе изучения взаимодействия исследованных гербицидов со специфическими антителами в равновесном и кинетическом режимах определены оптимальные условия применения полученных реагентов в различных схемах иммуноанализа.

3. Изучено влияние состава водно-органических смесей на реагенты, используемые для иммунодетекции гербицидов (антитела, ферменты и их конъюгаты с гербицидами). Предложены оптимальные условия определения атразина в водно-органических средах иммуноферменгным методом.

4. Исследованы кинетические зависимости взаимодействия гербицид-антитело в присутствии водорастворимых полиэлектролитов. Предложены пути применения иммобилизованных полиэлекгролитов в аналитических целях, обеспечивающие значительное сокращение продолжительности анализа при сохранении высокой чувствительности.

5. Разработаны новые методы иммуноанализа гербицидов, позволяющие проводить их определение в воде и продуктах питания. Пределы обнаружения гербицидов данными методами находятся в интервале 0,05-10 нг/мл.

6. Показана эффективность определения гербицидов в трех типах электрохимических иммуносенсоров. Полученные иммунореагенты позволяют определять до 10 пг/мл гербицида в течение 15 мин.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Язынина, Елена Валентиновна, 2003 год

1. Aspelin A.L., Grube A.H. Pesticides industry sales and usage 1996 and 1997 Market Estimates. //Report. Washington. 1999. P. 10.

2. Рекомендации no региональному применению гербицидов в Российской Федерации. Ред. Захаренко В.А., Спиридонов Ю.Я. // M: РАСХН. 1998. 143 сс.

3. Спиридонов Ю.А. Проблема засоренности посевов и борьбы с ней в условиях современного состояния сельского хозяйства России. II Агрохимия. 1996. N 10. С. 75-83.

4. Спиридонов Ю.А., Шестаков В.Г. Федосенков М.А. Эффективность и уровень остаточных количеств имазетапира в почвах ряда регионов России. II Агрохимия. 1998. N2. С. 65-70.

5. Спиридонов Ю.А., Раскин М.С., Кольцов Н.С., Галактионов Г.В. Осеннее применение гербицидов. //ArpoXXI. 1999. Т. 8. С. 16—17.

6. Спиридонов Ю.А., Ларина Г.Е. Вопросы мониторинга пестицидов в окружающей среде. II Агрохимия. 1999. N 11. С. 64-71.

7. Уэр Дж. Проблемы загрязнения окружающей среды и токсикологии. // М.: Мир. 1993. С. 146-180.

8. Fielding M. Pesticides in ground and drinking water. П Water pollution research report. 1992. P. 27.

9. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде: Справочник. Сост. Клисенко М.А., Калинина А.А., Новикова К.Ф. и др. // М.: Колос. 1992. (2 тома).

10. Monitoring of priority pesticides and other organic pollutants in river water from142

11. Portugal by gas chromatography-mass spectrometry and liquid chromatography-atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry. II J. Chromatogr. A. 2000. V. 879. N 1,P. 13-26.

12. Natangelo M., Tavazzi S., Benfenati E. Analysis of some pesticides in water samples using solid-phase microextraction-gas chromatography with different mass spectrometric techniques. II J. Chromatogr. A. 1999. V. 859. N 2, P. 193-201.

13. Tijssen P. Practice and Theory of Enzyme Immunoassay. II New York: Elsevier Sci. Publ. 1985. P. 549.

14. Gosling J.P. A decade of development in immunoassay methodology. II Clin. Chem. 1990. V. 36 (8 Pt 1). P. 1408-1427.

15. Immunoassay Handbook. II Ed. Wild D. London: Groves Dictionaries Inc. 2000. P. 243-864.

16. Knopp D. Application of immunological methods for the determination of environmental pollutants in human biomonitoring. A review. II Anal. Chim. Acta. 1995. V. 311. N3. P. 383-392.

17. Mallat Е., Barcelo D., Barzen С., Gauglitz G., Abuknesha R. Immunosensors for pesticide determination in natural waters. Il Trends in Anal. Chem. 2001. V. 20. N3.P 124-132.

18. Hock В. Antibodies for immunosensors. A review. H Anal. Chim. Acta. 1997. V. 347. N 1-2. P. 177-186.

19. Raman S.C., Raje M., Varshney G.C. Immunosensors for pesticide analysis: antibody production and sensor development. II Crit. Rev. Biotechnol. 2002. V. 22. N 1. P. 15-32.

20. Wortberg M., Middendorf C., Katerkamp A. Flow-injection immunosensor for triazine herbicides using Eu (III) chelate label fluorescence detection. II Anal. Chim. Acta. 1994. V. 289. N 2. P. 177-186.

21. Guilbault G.G., Hock В., Schmid R. A piezoelectric immunobiosensor for atrazine in drinking water. Il Biosens. Bioelectron. 1992. V. 7. N 6. P. 411-419.

22. Graymore M., Stâgnitti F., Allinson G. Impacts of atrazine in aquatic ecosystems. II Environ. International. 2001. V. 26. P. 483-495.

23. Barcelo D. Occurrence, handling and chromatographic determination of pesticides in the aquatic environment. A review. II Analyst. 1991. V. 116. N 7. P. 681-689.

24. Каспаров В.А., Промоненков В.К. Применение пестицидов за рубежом. II М.: Агропромиздат. 1990. 224 сс.

25. Мельников Н.Н. Химия и технология пестицидов. II М.: Химия. 1974. 675-679.

26. Мельников Н.Н., Новожилов К.В., Белан С.Р. Пестициды и регуляторы роста растений. II М.: Химия. 1995. 576 сс.

27. Мельников Н.Н., Белан С.П. Сравнительная опасность загрязнения почвы гербицидами производными симм-триазинов и некоторых других шестичленных гетероциклических соединений. II Агрохимия. 1997. N 2. С. 6667.

28. Гольдфельд М.Г., Карапетян Н.В. Физико-химические основы действия гербицидов. И Итоги науки и техники. 1989. Т. 30. С. 1-144.

29. Мельников Н.Н. Химия пестицидов. // М.: Химия. 1968. 465 сс.

30. The University of Minnesota Biocatalysis/Biodegradation Database. // http://umbbd.ahc.umn.edu/

31. Garmouma M., Blanchoud H., Teil M.J., Blanchard M., Chevreuil M. Triazines in the Marne and the Seine rivers (France): Longutudinal evolution and flows. // Water Air and Soil Pollution. 2001. V. 132. N 1-2. P. 1-17.

32. Ларина Г.Е., Бондарева T.A., Андриевский Е.И., Горбатов B.C. Определение остаточных количеств атразина и металохлора в объектах окружающей среды хроматографическими методами. II Агрохимия. 1997. N 6. С. 71-76.

33. Ларина Г.Е. Комплексная оценка действия гербицидов на компоненты агроценоза. II Агрохимия. 2002. N 4. С. 54-64.41. http://www.ecocom.ru/arhiv/ecocom/Ecocontrol/NM-04.htm

34. Ferrer I., Barcelo D. Determination and stability of pesticides in freezed-dried water samples by automated on-line solid-phase extraction followed by liquid chromatography with diode-array detection. II J. Chromatogr. A. 1996. V. 737. N 1. P. 93-99.

35. Barcelo D., Hennion M.C. Sampling ofpolar pesticides from water matrices. //Anal. Chim. Acta. 1997. V. 338. N 1-2. P. 3-18.

36. Delauney N., Pichon V., Hennion M.-C. Immunoaffinity solid-phase extraction for the trace-analysis of low-molecular-mass analytes in complex sample matrices. II J. Chromatrogr. B. 2000. V. 745. N 1. P. 15-37.

37. Zhao M., He X., Xiong G., Zhang Z., Tang B. Comparison of microwave-assisted extraction of triazines from soils using water and organic solvents as the extractants. II Talanta. 1999. V. 48. N 2. P. 333-339.

38. Любинская Л.А., Повякель Л.И. Токсикологическая характеристика производных сулъфонилмочевины. // Современные проблемы токсикологии. 2000. N 2. С. 35-42.

39. Strek H.J. Chlor sulfur on. II In: Methabolic pathways of agrochemicals. Ed. Roberts T. Cambridge: Royal Society of chemistry. 1998. P. 494-498.

40. Choumory P., Dureja P. Studies of photodegradation of chlorimuron-ethyl in soil. //Pestic. Sci. 1997. V. 51. N2. P. 201-205.

41. Ларина Т.Е., Спиридонов Ю.А., Шестаков В.Г. Экологические аспекты сельскохозяйственного применения сульфонилмочевинных гербицидов. II Агрохимия. 2002. N 1. С. 53-67.

42. Макеева-Гурьянова Л.Т., Спиридонов Ю.Я., Шестаков В.Г. Сулъфонилмочевины — новые перспективные гербициды. // Агрохимия. 1987. N2. С. 115-128.

43. Повякель Л.И., Любинская Л.А. Структура пестицидная активность — токсичность производных сулъфоЩллмочевин. II Актуальные вопросы токсикологии, гигиены применения пестицидов и полимерных материалов в народном хозяйстве. Киев. 1991. С. 40.

44. Dost К., Jones D.C., Auerbach R., Davidson G. Determination of pesticides in soil samples by supercritical fluid chromatography-atmospheric pressure146chemical ionisation mass spectrometric detection. // Analyst. 2000. V. 125. N 10. P. 1751-1755.

45. Long A.R., Hsieh L.C., Malbrough M.S., Short C.R., Barker S.A. Isolation and chromatographic determination of chlorsulfuron in milk. II J. Assoc. Off. Anal. Chem. Int. 1989. V. 72. N 5. P. 813-815.

46. Sarmah A.K., Kookana R.S. Simultaneous analysis of triasulfuron, metsulfuron-methyl and chlorsulfuron in water and alkaline soilsby highperformance liquid chromatography. II J. Environ. Sci. Health. B. 1999. V. 34. N 3. P. 363-380.

47. Bernal J.L., Jimenez J.J., Herguedas A., Atienza J. Determination of chlorsulfuron and tribenuron-methyl residues in agricultural soils. II J. Chromatogr. A. 1997. V. 778. N 2. P. 119-125.

48. Krynitsky A. J., Swineford D.M. Determination of sulfonylurea herbicides in grains by capillary electrophoresis. II J. Assoc. Off. Anal. Chem. Int. 1995. V. 78. N4. P. 1091-1096.

49. Mosiello L., Cremisini C., Segre L., Chiavarini S., Spano M. Dipstick immunoassay format for atrazine and terbuthylazine analysis in water samples. // J. Agric. Food Chem. 1998. V. 46. N 9. P. 3847-3851.

50. Franek M., Kolar V., Eremin S.A. Enzyme immunoassays for s-triazine herbicides and their application in environmental and food analysis. II Anal. Chim. Acta. 1995. V. 311. N 3. P. 349-356.

51. Дзантиев Б.Б., Жердев А.В., Романенко О.Г., Титова Н.А., Трубачева Ж.Н., Чередникова Т.В., Еремин С.А. Твердофазные методыиммуноферментного определения гербицидов симазина и атразина. II Прикл. биохимия и микробиология. 1995. Т. 31. N 1. С. 120-125.

52. Eremin S.A., Samsonova J.V. Development of polarization fluoroimmunoassay for the detection of s-triazine herbicides. // Anal. Letters. 1994. V. 27.N 15. P. 3013-3025.

53. Матвеева Е.Г., Самсонова Ж.В., Еремин С.А. Поляризационный флуороиммуноанализ пропазина в обращенных мицеллах аэрозоля ОТ в октане. // Биоорг. хим. 1996. Т. 22. N 12. С. 931-937.

54. Самсонова Ж.В., Егоров A.M., Еремин С.А. Разработка поляризационного флуороиммуноанализа хлорсодержащих гербицидов класса сим-1,3,5-триазинов. //Агрохимия. 1994. N 1. С. 95-100.

55. Kelley М.М., Zahnow E.W., Petersen W.C., Toy S.T. Chlorsulfuron determination in soil extracts by enzyme immunoassay. II J. Agric. Food Chem. 1985. T. 33. N 5. C. 962-965.

56. Чигрин A.B., Умнов A.M., Соколова Г.Д., Хохлов П.С., Чкаников Д.И. Разработка количественного иммуноферментного анализа хлорсулъфурона. II Агрохимия. 1989. N 8. С. 119-123.

57. Schlaeppi J.M.-M., Meyer W., Ramsteiner K.A. Developmen of a magnetic particle-based automated chemiluminescent immunoassay for triasulfuron. II J. Agric. Food Chem. 1994. V. 42. P. 1914-1919.

58. Вершигора A.E. Общая иммунология. II К.: Выща шк. 1989. С. 101.

59. Галактионов В.Г. Иммунология. II М.: Нива России. 2000. С. 48-74.

60. Feinstein A., Rove A.J. Molecular mechanism of formation of an antigen-antibody complex. //Nature. 1965. V. 4967. P. 147-149.

61. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова E.M. Теория и практика иммуноферментного анализа. //М.: Высш. шк. 1991. С. 20-25.

62. Killard A.J., Deasy В., O'Kennedy R., Smith M.R. Antibodies: Production, functions and applications in biosensors. II Trends in Anal. Chem. 1995. V. 14. N 6. P. 257- 266.

63. Roux K.H., Strelets L., Michaelsen Т.Е. Flexibility of human IgG subclasses. И J. Immunol. 1997. V. 159. N 7. P. 3372-3382.

64. Rose D.R., Strong R.K., Margolies M.N., Gefter M.L., Petsko G.A. Crystal structure of the antigen-binding fragment of the murine anti-arsonate monoclonal antibody 36-71 at 2.9-A resolution. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. V. 87. N 1. P. 338-342.

65. Biochemistry. II Stryer L (ed.). N.Y.: Freeman and Co. 1995. P. 119.

66. Mason S.A., Bentley G.A., Mclntyre G.J. Deuterium exchange in lysozyme at 1.4-A resolution. II Basic Life Sci. 1984. V. 27. P. 323-334.

67. Colman P.M., Laver W.G., Varghese J.N., Baker A.T., Tulloch P.A., Air G.M., Webster R.G. Three-dimensional structure of a complex of antibody with influenza virus neuraminidase. II Nature. 1987. V. 326. N 6111. P. 358-363.

68. Murata T., Fushinobu S., Nakajima M., Asami O., Sassa T., Wakagi T., Yamaguchi I. Crystal structure of the liganded anti-gibberellin A(4) antibody 4-B8(8)/E9 Fab fragment. II Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. V. 293. N 1. P. 4894-96.

69. Arevalo J.H., Stura E.A., Taussig M.J., Wilson I.A. Three-dimensional structure of an anti-steroid Fab' and progesterone-Fab' complex. II J. Mol. Biol.1993. V. 231. N 1. P. 103-118.

70. Poljak R.J., Amzel L.M., Chen B.L., Phizackerley R.P., Saul F. The three-dimensional structure of the Fab' fragment of a human myeloma immunoglobulin at 2.0-angstrom resolution. II Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1974. V. 71. N 9. P. 3440-3444.

71. Kilar F., Simon I., Lakatos S., Yonderviszt F., Medgyesi G.A., Zavodszky P. Conformation of human IgG subclasses in solution. Small-angle X-ray scattering and hydrodynamic studies. II Eur. J. Biochem. 1985. V. 147. N 1. P. 17-25.

72. Varga J.M., Lande S., Richard F.F. Immunoglobulins with multiple binding functions. II. The use of nylon-polyserine whisker discs in screening myeloma immunoglobulins for binding activity. II J. Immunol. 1974. V. 112. N 4. P. 15651570.

73. Padlan E.A., Segal D.M., Spande T.F., Davies D.R., Rudikoff S., Potter M. Structure at 4.5 A resolution of a phosphorylcholine-binding Fab. II Nat. New Biol. 1973. V. 245. N 145. P. 165-167.

74. Amzel L.M. Poljak R.J., Saul F., Varga J.M., Richards F.F. The three dimensional structure of a combining region-ligand complex of immunoglobulin NEW at 3.5-A resolution. II Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1974. V. 71. N 4. P. 14271430.

75. Евстигнеева Р.Е., Палькеева М.Е. Методы поиска антигенных детерминант для белков с известной первичной структурой. II Биоорг. хим. 2000. Т. 26. N 4. С. 243-262.

76. Marco M.-P., Gee S., Hammock B.D. Immunochemical techniques for environmental analysis II. Antibody production and immunoassay development. II

77. Trends in Anal. Chem. 1995. V. 14. N 8. P. 415-425.

78. Коростылева E.A., Мельниченко О.А., Туманов A.A., Иммунохимии ее кие методы определения пестицидов при экологическом контроле. //Журн. анал. хим. 1991. Т. 46. N 12. С. 2314-2321.

79. Goodrow М.Н., Hammock B.D., Hapten design for compound-selective antibodies: ELISAs for environmentally deleterious small molecules. II Anal. Chim. Acta. 1998. V. 376. P. 83-91.

80. Winklmair M., Weller M.G., Mangier J., Schlosshauer В., Niessner R. Development of a highly sensitive enzyme-immunoassay for the determination of triazine herbicide. II Fresenius J. Anal. Chem. 1997. V. 358. N 5. P. 614-622.

81. Lee N., McAdam D.P., Skerritt J.H. Development of immunoassays for type II synthetic pyrethroids. 1. Hapten design and application to heterologous and homologous assays. II J. Agric. Food Chem. 1998. V. 46. N 2. P. 520-534.

82. Tessier D.M., Clark J.M. Hapten design in the development of competitive enzyme linked immunosorbent assays for genotoxic metabolites of alachlor. II J. Agric. Food Chem. 1999. V. 47. N 9. P. 3925-3933.

83. Smith D.S., Hassan M., Nargessi R.D. Principles and practice of fluoroimmunoassay procedures. II In: Modern Fluorescence Spectroscopy. Ed. E.L. Wehry. New York: Plenum Press. 1981. V. 3. P. 143-191.

84. Goodrow M.H., Harrison R.O., Hammock B.D. Hapten synthesis antibody development and competitive inhibition enzyme immunoassay for s-triasine herbicides. II J. Agric. Food Chem. 1990. V. 38. N 4. P. 990-996.

85. Lee J.K., Ahn K.C., Park O.S., Ко Y.K., Kim D.W. Development of an immunoassay for the residues of the herbicide bensulfuron-methyl. 11 J. Agric. Food Chem. 2002. V. 50. N 7. P. 1791-803.

86. Katmeh M.F., Frost G.W., Stevenson D. Competitive enzyme-linked immunosorbent assay for the determinationof the phenylurea herbicide chlortoluron in water and biological fluids. II Analyst. 1996. V. 121. N 11. P. 1699-1703.

87. Franek M., Pouzar V., Kolar V. Enzyme-immunoassays for polychlorinated biphenyls: structural aspects of hapten-antibody binding. II Anal. Chim. Acta. 1997. Y. 347. N 1-2. P. 163-176.

88. Hermanson G.T. Bioconjugate techniques. II Academic Press. San Diego, New York, Boston, London, Sydney, Tokyo, Toronto. 1996. P. 419-455.

89. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова E.M. Теория и практика имму но ферментного анализа. //М.: Высш. шк. 1991. С. 176-200.

90. Bauminger S., Wilchek М. The use of carbodiimides in the preparation of immunizing conjugates. II Meth. Enzymol. 1980. V. 70 A. P. 151-159.152

91. Erlanger B.F. The preparation of antigenic hapten-carrier conjugates: a survey. II Meth. Enzymol. 1980. V.70 A. P. 85-104.

92. Queffelec A.-L., Nodet P., Haelters J.-P., Thouvenot D., Corbel B. Hapten synthesis for a monoclonal antibody based ELISA for deltamethrin. II J. Agric. Food Chem. 1998. V. 46. N 4. P. 1670-1676.

93. Holland G.P., Steward M.W. The influence of epitope density on the estimation of the affinity of antibody for complex antigens. II J. Immunol. Meth. 1991. V. 138. N2. P. 245-255.

94. Giersch Т., Hock B. Production of monoclonal antibodies for the determination of s-triazines with enzyme immunoassays. // Food Agricul. Immunol. 1990. Y. 2. P. 85-97.

95. Giersch Т., Kramer K., Hock B. Optimization of a monoclonal antibody-based enzyme immunoassay for the detection of terbutilazine. II Sci. Total Envir. 1993. V. 132. N 2-3. P. 435-448.

96. Huber S.J. Improved solid-phase enzyme immunoassay systems in the ppt range for atrazine in fresh water. II Chemosphere. 1985. V. 14. P. 1795-1803.

97. Huber S.J., Hock B.A. A Solid-phase enzyme immunoassay for quantitative determination of the herbicide terbutryn. II J. Plant Dis. Prot. 1985. V. 92. P. 147156.

98. Еремин С.А., Самсонова Ж.В., Егоров A.M. Иммунохимии ее кие методы анализа гербицидов группы сим-1,3,5-триазинов. II Успехи химии. 1994. Т. 63. N 7. С. 638-649.

99. Чигрин А.В., Умнов A.M., Чкаников Д.И., Устименко Н.В. Определение хлорсулъфурона в растительном материале методом ИФА. // Агрохимия. 1990. N 5. С. 127-129.

100. Schlaeppi J.-M., Meyer W., Ramsteiner K.A. Determination of triasulfuron in soil by monoclonal antibody-based enzyme immunoassay. II J. Agric. Food Chem. 1992. V. 40. N 6. P. 1093-1098.

101. Simon E., Knopp D., Carrasco P.B., Niessner R. Development of an enzyme immunoassay for metsulfuron-methyl. // Food Agric. Immunol. 1998. V. 10. P. 105-120.

102. Brady J.F., Turner J.L., Skinner D.H. Application of a triasulfuron enzyme immunoassay to the analysis of incurred residues in soil and water samples. II J. Agric. Food Chem. 1995. V. 43. N 9. P. 2542-2547.

103. Hollaway K.L., Kookana R.S., McQuinn D.J., Moerkerk M.R., Noy D.M., Smal M.A. Comparison of sulfonylurea herbicide residue detection in soil by bioassay, ensyme-linked immunosorbent assay andHPLC. II Weed Research. 1999. V. 39. P. 383-397.

104. Sieden P., Bossi R., Streibig J.S. Applicability of ELISA for determination of metsulfuron-methyl in soil samples. II Pest. Manag. Sci. 2000. V. 56. P. 637-643.

105. Chard T. An Introduction to Radioimmunoassay and Related Techniques. II In: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology. Amsterdam. 1982. Part 2. P. 5.

106. Erlanger B.F. Principles and methods for the preparation of drug protein conjugates for immunological studies. //Pharmacol. Rev. 1973.Y. 25. P. 271-280.

107. Wortberg M., Goodrow M.H., Gee S.J., Hammock B.D. Immunoassay for simazine and atrazine with low cross-reactivity for propazine. II J. Agric. Food Chem. 1996. V. 44. P. 2210-2219.

108. Антитела. Ред. Кэтти Д. // М.: Мир. 1991. Т. 1. С. 39, 66-67.

109. Wittmann С., Hock В. Development of an ELISA for analysis of atrazine metabolites deethylatrazine and deisopropylatrazine. II J. Agric. Food Chem. 1991. Y. 39. N 6. P. 1194-1200.

110. Katmeh M.F., Frost G., Aherne W., Stevenson D. Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for isoproturon in water. II Analyst. 1994. V. 119. P. 431-435.

111. Franchimont P., Hendrick J.C., Reuter A.M. In: Principles of Competitive Protein-Binding Assays. II Ed. Odell W.W.D. N.-Y.: Franchimont P. 1983. P. 3353.

112. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова E.M. Теория и практика иммуноферментного анализа. II М.: Высш. шк. 1991. С. 157-159.

113. Friguet В., Chaffotte A.F., Djavadi-Ohaniance L., Goldberg M.E. Measurements of the true affinity constant in solution of antigen-antibodycomplexes by enzyme-linked immunosorbent assay. II J. Immunol. Methods. 1985. V. 77. N2. P. 305-319.

114. Schoneberg Т., Erhard M.H., Kellner J., Kuhn S.O., Losch U. The specificity and affinity of polyclonal antibodies raised in rabbits against a hapten conjugated to rabbit serum albumin. II J. Immunoassay. 1995. V. 16. N 1. P. 17-35.

115. Popelka S.R., Miller D.M., Holen J.T., Kelso D.M. Fluorescence polarisation immunoassay. Analyser for rapid, precise measurement of fluorescence polarisation with the use of disposable cuvettes. II Clin. Chem. 1981. V. 27. N7. P. 1198-1201.

116. Keuchel C., Weil L., Niessner R. Enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of 2,4,6-trinitrotoluene and related nitroaromatic compounds. II Anal. Sci. 1992. V. 8. P. 9-12.

117. Дзантиев Б.Б., Осипов А.П. Классификация и характеристика методов иммуноферментного анализа. II Итоги науки и техники. Серия. Биол. хим. 1987, Т. 3, С. 56-116.

118. Immunoassays. И Ed. Edwards R. Chichester: John Wiley&Sons Ltd. 1996. P. 2-4.

119. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. //М.: Высш. шк. 1991. С. 77-99.

120. Hennion М.-С., Barcelo D. Strengths and limitations of immunoassays for effective and efficient use for pesticide analysis in water samples: A review. II Anal. Chim. Acta. 1998. V. 362. N 1. P. 3-34.

121. Sittampalam G.S., Smith W.C., Miyakawa T.W., Smith D.R., McMorris C. Application of experimental design techniques to optimize a competitive ELISA. // J. Immunol. Meth. 1996. V. 190. N2. P. 151-161.

122. Gabaldon J.A., Maquieira A., Puchades R. Current trends in immunoassay-based kits for pesticide analysis. II Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 1999. V. 39. N 6. P. 519-538.

123. Kaufman B.M., Clower M.Jr. Immunoassay of pesticides: an update. II J. Assoc. Off. Anal. Chem. Int. 1995. V. 78. N4. P. 1079-1090.

124. Bushway R.J., Hurst H.L., Perkins В., Tian L., Cabanillas C.G., Young B.E.S., Ferguson B.S., Jennings H.S. Atrazine, alachlor and carbofuran contamination of well water in central maine. II Bull. Environ. Contam. Toxicol. 1992. V. 49. N l.P. 1-9.

125. Davies B.J., Kishore R., Sinou M.-N., Helmerson K., Phillips W.D., Weetall H.H. Optical tweezers-based immunosensor. II Conference on Lasers and Electro-Optics Europe Technical Digest. 1998. Book of Abstracts. P. 204.

126. Sittampalam G.S., Smith W.C., Miyakawa T.W, Smith D.R., McMorris C. Application of experimental design techniques to optimize a competitive ELISA. 11 J. Immunol. Meth. 1996. V. 190. N2. P. 151-161.

127. Gutierrez M.C., Gomez-Hens A., Perez-Bendito D. Immunoassay methods based on fluorescence polarization. II Talanta. 1989. V. 12. P. 1187-1201.

128. Nasir M.S., Jolleu M.E. Fluorescence polarization: an analytical tool for immunoassay and drug discovery. H J. Revolutionize Drug Discovery, Combinat. Chem. and Throughput Screening. 1999. V. 2. N 4. P. 177-190.

129. Eremin S.A. Fluorescence polarisation immunoassays for determination of pesticides and biologically active compounds in food safety and environmental monitoring. II Food Technol. Biotechnol. 1998. V. 36. N 3. P. 235-243.

130. Еремин C.A., Крикунова B.C., Краснова А.И., Попова В.А., Оннерфиорд П. Разработка метода экспрессного определения пестицида 2,4,5-Т, предшественника диоксинов. II Агрохимия. 1998. N 6. С. 80-85.

131. Бочкарева А.Е., Попова В.А., Еремин С.А. Разработка метода экспрессного определения хлорорганического пестицида (ДДТ). И Агрохимия.2001. N 11. С. 69-74.

132. Мельниченко О.А., Еремин С.А. Поляризационный флуороиммуноанализ гербицида изопротурона. II Агрохимия. 1994. N 10. С. 126-130.

133. Еремин С.А., Мельниченко О.А., Крейсиг С., Хок Б. Экспрессный иммунохимический метод определения гербицида метабензтиазурона. II Журн. анал. хим. 1995. Т. 50. N 9. С. 971-978.

134. Choi M.J., Choi J., Yoon D.Y., Park J., Eremin S.A. Fluorescence polarization immunoassay of progesterone. // Biol. Pharm. Bull. 1997. V. 20. N 4. P. 309-314.

135. Huisman A.M., Van Everdingen A.A., Wenting M.J., Siewertsz Van Reesema D.R., Lafeber F.P., Jacobs J.W., Bijlsma J.W. Glucocorticoid receptor downregulation in early diagnosed rheumatoid arthritis. II Ann. N. Y. Acad. Sci.2002. V. 966. P. 64-67.

136. Franek M., Zeravik J., Eremin S.A., Yakovleva J., Badea M., Danet A., Nistor C., Ocio N., Emneus J. Antibody-based methods for surfactant screening. II Fresenius J. Anal. Chem. 2001. V. 371. N 4. P. 456-466.

137. Gallacher G., Ruth E., Coxon R.E., Landon J., Rae C. Design of the immunogen and label for use in a fluoroimmunoassay for paracetamol. II Ann. Clin. Biochem. 1988. V. 25. N 1. P. 42-48.

138. Еремин С.А. Иммунохимический анализ лекарств и органических соединений. // Журн. Всес. хим. общ. им. Д.И.Менделеева. 1989. Т. 34. N 1. С. 46-51.

139. Sendra В., Panadero S., Eremin S., Gomez-Hens A. Kinetic determination of atrazine in foods based on stopped-flow fluorescence polarization immunoassay. II Talanta. 1998. V. 47. N 1. P. 153-160.

140. Colbert D.L., Eremin S.A., Landon J. The effect offluorescein labels on the affinity of antisera to small haptens. II J. Immunol. Meth. 1991. V. 140. N 2. P. 227-233.

141. Onnerfjord P., Eremin S., Emneus J., Marko-Varga G. Fluorescence polarisation for immunoreagent characterization. II J. Immunol. Meth. 1998. V. 213. N 1. P. 31-39.

142. Еремин С.А., Лунская И.М., Егоров A.M. Влияние структуры трейсера на чувствительность и специфичность поляризационного флуороиммуно-анализа 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты. II Биоорг. хим. 1993. Т. 19. N 8. С.836-843.

143. Franks N.P., Lieb W.R. Do general anaesthetics act by competitive binding to specific receptors? //Nature. 1984. V. 310. P. 599-601.

144. Albert J.S., Hamilton A.D. Stabilization of helical domains in short peptides using hydrophobic interactions. II Biochemistry. 1995. V. 34. N 3. P. 984-990.

145. Avdulov N.A., Chochina S.Y., Daragan V.A., Schroeder F., Mayo K.H., Wood W.G. Direct binding of ethanol to bovine serum albumin: a fluorescent and 13C NMR multiplet relaxation study. И Biochemistry. 1996. V. 35. N 1. P. 340347.

146. Tarns J.W., Welmder K.G. Unfolding and refolding of Coprinus cinereus peroxidase at high pH, in urea, and at high temperature. Effect of organic and ionic additives on these processes. II Biochemistry. 1996. V. 35. N 23. P. 75737579.

147. Avbelj F., Moult J. Role of electrostatic screening in determining protein main chain conformational preferences. // Biochemistry. 1995. V. 34. N 3. P. 755764.

148. Carra J.H., Privalov P.I. Thermodynamics of denaturation of staphylococcal nuclease mutants: an intermediate state in protein folding. Review. II FASEB J. 1996. V. 10. N 1. P. 67-74.

149. Kibanov A.M. Improving enzymes by using them in organic solvents. Review. // Nature. 2001. V. 409. N 6817. P. 241-246.

150. Kim M.G., Lee S.B. Enhanced catalytic efficiency of enzymes in organic media with the solid support: effect of silica gel on reaction rates and enzyme agglomeration. 111. Mol. Catalysis B: Enzymatic. 1996. V. 2. N2-3. P. 127-140.

151. Sergeeva M.V., Mozhaev V.V., Rich J.O., Khmelnitsky Y.L. Lipase-catalyzed trans amidation of non-activated amides in organic solvent. II Biotechnol. Lett. 2000. V. 22. N 17. P. 1419-1422.

152. Guo Y., Clark D.S. Activation of enzyme for nonaqueous biocatalysis by denaturing concentrations of urea. II Biochim. Biophys. Acta: Prot. Struct, and Mol. Enzymol. 2001. V. 1546. N 2. P. 406-411.

153. Ruiz A.I., Malave A.J., Felby C., Griebenow K. Improved activity and stability of an immobilized recombinant laccase in organic solvent. II Biotechnol. Lett. 2000. V. 22. P. 229-233.

154. Sato K., Hasumi H., Tsukidate A., Sacurada J., Nakamura S., Hosoya T. Effect of mixed solvent on three elementary steps in the reaction of horseradish peroxidase and lactoperoxidase. II Biochim. Biophys. Acta. 1995. V. 1253. P. 94102.

155. Tams J.W., Welinder K.G. Unfolding and refolding of Corpinus cinereus peroxidase high pH, in urea, and high temperature. Effect of organic and ionic additives on these processes. //Biochemistry. 1996. V. 35. P. 7573-7579.

156. Khmelnitsky Yu.L., Mozhaev V.V., Belova A.B., Sergeeva M.V., Martinek K. Denaturation capacity: a new quantitative criterion for selection of organic solvents as reaction media in biocatalysis. II Eur. J. Biochem. 1991. V. 198. N 1. P. 31-41.

157. Song J.K., Rhee J.S. Enhancement of stability and activity of phospholipase A1 in organic solvents by directed evolution. II Biochim. Biophys. Acta, Prot. Struct, and Mol. Enzymol. 2001. V. 1547. N 2. P. 370-378.

158. Чен K.-K., Жанг P.-K., Ксуе К.-Ж., Янг П.-Ж., Чен С.-Л., Жоу Х.-М. Влияние метанола на активность и конформацию кислой фосфатазы из креветки (Penaeus penicillatus). И Биохимия. 2000. Т. 65. N 4. С. 535-539.

159. Azedevo A.M., Prazeres D.F.M., Cabral J.M.S., Fonseca L.P. Stability of free and immobilized peroxidase in aqueous-organic solvents mixtures. 11 J. Mol. Catalysis B: Enzymatic. 2001. V. 15. P. 147-153.

160. Гладилин А.К. Принципы конструирования биокаталитических систем на основе полиэлектролитов в среде органических растворителей. П Автореф. дисс. д.х.н. М.: МГУ. 1999. 49 сс.

161. Guo Y., Clark D.S. Activation of enzymes for nonaqueous biocatalysis by denaturing concentrations of urea. II Biochim. Biophys. Acta: Prot. Struct, and Mol. Enzymol. 2001. Y. 1546. N 2. P. 406-411.

162. Ryu K., Kim Y. Activation by organic solvents of an alkaline thermostable peroxidase partially purified from rice hulls. II Biotechnol. Lett. 1997. V. 19. N 10. P. 1019-1022.

163. Torres C., Otero C. Influence of the organic solvents on the activity in water and the conformation of Candida rugosa lipase: description of a lipase-activating pretreatment. II Enzyme Microb. Technol. 1996. V. 19. P. 594-600.

164. Гладилин А.К., Левашов А.В. Стабильность ферментов в системах с органическими растворителями. И Биохимия. 1998. Т.63. N 3. С. 408-421.

165. Sakurai Н., Shinohara К., and Hisabori Т. Enhancement of adenosine triphosphatase activity of purified chloroplast coupling factor 1 in aqueous organic solvent. II J. Biochem. (Tokyo). 1981. V. 90. N 1. P. 95-102.

166. Stocklein W.F.M., Warsinke A., Micheel В., Kempter G., Hohne W., Scheller F.W. Diphenylurea hapten sensing with a monoclonal antibody and its Fab fragment: Kinetic and thermodynamic investigations. II Anal. Chim. Acta. 1998. V. 362. N l.P. 101-111.

167. Wasacz F.M., Olinger J.M., Jakobsen R.J. Fourier transform infrared studies of proteins using nonaqueous solvents effects of methanol and ethylene glycol on albumin and immunoglobulin G. II Biochemistry. 1987. V. 26. N 5. P. 1464-1470.

168. Мельникова Я.И., Одинцов С.Г., Кравчук З.И., Марцев С.П. Антигенсвязывающая активность моноклональных антител после инкубации с органическими растворителями. // Биохимия. 2000. Т. 65. N 11. С. 14881499.

169. Dooley Н., Grant S.D., Harris W.J., Porter A.J. Stabilization of antibody fragments in adverse environments. II Biotechnol. Appl. Biochem. 1998. V. 28. Pt 1. P. 77-83.

170. Skladal P. Effect methanol on the interaction of monoclonal antibody with free and immobilized atrazine studied using the resonant mirror-based biosensor. II Biosens. Bioelectron. 1999. V. 14. N 3. P. 257-263.

171. Katagiri M., Kadoya Т., Miyake K., Ishibashi F., Ohkawa H. Effect of methanol and temperature on enzyme immunoassay with monoclonal antibodies specific to the insecticide etofenprox. II Biosci. Biotechnol. Biochem. 1999. V. 63. N 11. P. 1988-1990.

172. Lu В., Iwuoha E.I., Smith M.R., O'Kennedy R. Effects of acetonitrile on horseradish peroxidase (HRP)-anti HRP antibody interaction. II Biosens. Bioelectron. 1997. V. 12. N 7. P. 619-625.

173. Дзантиев Б.Б., Неустроева Н.А., Ананьев Н.В., Дорошенко Н.В., Изумрудов В.А. Взаимодействие поверхностного антигена вируса гепатита В с антителами, иммобилизованными на синтетическом водорастворимом полианионе. // Вопр. вирусол. 1989. Т. 3. С. 28-31.

174. Дзантиев Б.Б., Блинцов А.Н., Бобкова А.Ф., Атабеков И.Г., Изумрудов В.А., Зезин А.В., Кабанов В.А. Комплексы вирусов с синтетическими полиэлектролитами и их взаимодействие с антителами. II Докл. АН СССР. 1990. Т. 311. N6. С. 1482-1486.

175. Marshall D.L. Soluble insoluble polymers in enzymeimmunoassay. II Патент США. 1985. N4530900.

176. Auditore-Hargreaves К., Houghton R.L., Monji N., Priest J.H., Hoffman A.S., Novinski R.C. Phase-separation immunoassays. //Clin. Chem. 1987. V. 33. P. 1509-1516.

177. Nowinski R.C., Hoffman A.S. Polymerization-induced separation immunoassays. II Патент США. 1987. N 4711840.

178. Nowinski R.C., Hoffman A.S. Polymerization-induced separation immunoassays. II Патент США. 1989. N 4843010.

179. Thomas E.K., Schwartz D.E., Priest J.H., Nowinski R.C., Hoffman A.S. Polymerization-induced separation assay using recognition pairs. II Патент США. 1988. N 4749647.

180. Izumrudov V.A., Zezin A.B., Kabanov V.A. Equilibria in interpolyelectrolyte reactions and the phenomenon of molecular "recognition " in solutions of interpolyelectrolyte complexes. // Russian Chemical Reviews. 1991. V. 60. P. 792-806.

181. Izumrudov V.A. Poly complexes for bioseparation and bioprocessing II In: Smart Polymers for Bioseparation and Bioprocessing. (Eds. I.Yu. Galaev & Bo Mattiasson). London New York: Taylor & Francis Books Ltd. 2002. P. 198-121.

182. Papisov I.M., Litmanovich A.D. Molecular recognition in interpolymer interactions and matrix polyreactions. II Adv. Polym. Sci. 1989. V. 90. P. 139-179.162

183. Kabanov V.A., Zezin A.B. Soluble interpolymeric complexes as a new class of synthetic polyelectrolytes. II Pure Appl. Chem. 1984. V. 56. P. 343-354.

184. Pergushov D.V., Izumrudov V.A., Zezin A.B., Kabanov V.A. Stability of interpolyelectrolyte complexes in aqueous saline solutions. II Polymer Sei. 1995, V. 37 A. P. 1081-1087.

185. Tsuchida E., Osada Y., Sanada K. Interaction of poly(styrene sulfonate) with polycations carrying charges in the chain backbone. II J. Polym. Sei. 1972. V. 10. P. 3397-3403.

186. Tsuchida E., Abe K. Polyelectrolyte complexes. H In: Developments in Ionic Polymers. Ed. A.D. Wilson. New York: Elsevier Sei. Publ. 1986. P. 191-266.

187. Дзантиев Б.Б., Блинцов А.Н., Бобкова А.Ф., Изумрудов В.А., Зезин А.Б. Новые методы иммуноферментного анализа, основанные на использовании интерполиэлекролитных реакций. // Докл. АН СССР. 1995. Т. 342 N 4. С. 549552.

188. Блинцов А.Н., Дзантиев Б.Б., Бобкова А.Ф., Изумрудов В.А., Зезин A.B., Атабеков И.Г. Новый метод иммуноферментного анализа растительных вирусов, основанный на интерполиэлектролитных реакциях. П Докл. АН СССР. 1995. Т. 345. N 2. С. 175-178.

189. Dzantiev В.В., Zherdev A.V., Romanenko O.G., Trubaceva J.N. Development of various enzyme immunotechniques for pesticides detection. II Amer. Chem. Soc. Symp. Ser. 1997. V. 657. P. 87-96.

190. Dzantiev B.B., Choi M.J., Park J., Choi J., Romanenko O.G., Zherdev A.V., Eremin S.A., Izumrudov V.A. A new visual enzyme immunoassay ofmethamphe famine using linear water-soluble poly electrolytes. // Immunol. Lett. 1994. V. 41. N2-3. P. 205-211.

191. Monji N., Hoffman A.S. A novel immunoassay system and bioseparation process based on thermal phase separating polymers. II Appl. Biochem. Biotechnol. 1987. V. 14. P. 107-120.

192. Monji N., Hoffman A.S., Priest J.H., Houghton R.L. Thermally induced phase separation immunoassay. И Патент США. 1988. N 4780409.

193. Monji N., Cole C.A. Rapid membrane affinity concentration assays. // Патент США. 1993. N 5206136.

194. Monji N., Cole C.A. Membrane affinity concentration immunoassay. // Патент США. 1993. N 5206178.

195. Monji N., Cole C.A., Hoffman A.S. Activated, N-substituted acrylamide polymers for antibody coupling: Application to a novel membrane-based immunoassay. //J. Biomater. Sci. Polym. 1994. V. 5. P. 407-420.

196. Dzantiev B.B., Zherdev A.V., Romanenko O.G., Sapegova L.A. Development and comparative study of different immunoenzyme techniques for pesticides detection. II Int. J. Environ. Anal. Chem. 1996. V. 65. N 1-4. P. 95-111.

197. Habeeb A.F.S.A., Determination of free amino groups in proteins by trinitrobenzensulfonic acid. II Anal. Biochem. 1966. V. 14. N 2. P. 328-333.

198. Ishikawa E., Imagawa M., Hashida S.,Yoshitaki S.,Hamaguchi Y., Ueno Т., Enzyme-labeling of antibodies and their fragments for enzyme immunoassay and immunohistochemical staining. 11 J. Immunoassay. 1983. V. 4. N 3. P. 209-327.

199. Blais B.W., Yamazaki H. A simple and inexpensive glucose oxidase substrate system for enzyme immunoassay. //Immunol. Invest. 1992. V. 21. N 6. P. 581-588.

200. Романенко О.Г. Влияние состава конъюгатое гаптенов с белками на количественные закономерности их взаимодействия с антителами. II Дисс. канд. биол. наук. М.: Ин-т биохимии им. А.Н. Баха РАН. 1995. 148 сс.164

201. Дзантиев Б.Б., Юрьев Д.К. Некоторые закономерности иммунохимического анализа. Метод последовательного насыщения. // Прикл. биохимия и микробиология. 1988. Т. 24. N 6. С. 830-838.

202. Кэрстак Э. Успехи в разработке иммуноферментных методов: получение реагентов, планирование экспериментальных исследований и интекпретация результатов. II Бюлл. ВОЗ. 1985. Т. 4. С. 118-139.

203. Keay R.W., McNeil C.J. Separation-free electrochemical immunosensor for rapid determination of atrazine. И Biosens. Bioelectron. 1998. V. 13. N 9. P. 963970.