Разработка и экспериментальная апробация систем анализа полиморфизма генов-кандидатов липидного обмена у крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Ларионова, Полина Валентиновна

• Ларионова, Полина Валентиновна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ларионова, Полина Валентиновна

КРАТКИЙ СЛОВАРЬ.

ВВЕДЕНИЕ.

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ.

Цель и задачи исследований.

Научная новизна.

Практическая значимость работы.

Основные положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Структура и объем работы.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Маркерная селекция.

1.2. Взаимосвязь мраморности и содержания внутримышечного жира в мясе крупного рогатого скота.

1.3. Стандарты оценки мраморности мяса крупного рогатого скота.

1.3.1. Выбор стандарта "мраморности"мяса.

1.4. Гены-кандидаты, влияющие на липидный обмен и мраморносгь мяса крупного рогатого скота.

1.4.1. Тиреоглобулин (TG5).

1.4.2. Диацилглицерол 0-ацилтрансфераза1 (DGAT1).

1.4.3. Лептин (LEP).

1.5. Методы диагностики аллельных вариантов маркерных генов.

1.5.1. ПЦР-ПДРФ.

1.5.2. Пиросеквенирование.

1.6. Кластерный анализ.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Материалы.

2.1.1. Животные.

2.1.2. Оборудование.

2.1.3. Реактивы.

2.2. Методика исследований.

2.2.1. ПЦР-ПДРФ анализ гена тиреоглобулина.

2.2.2. ПЦР-ПДРФ анализ гена диацилглицерол О-ацилтрансферазы!.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Обновление банка ДНК крупного рогатого скота различных пород.

3.2. Выбор спектра ДНК-маркеров липидного обмена крупного рогатого скота.

3.3. Разработка аналитических моделей генотипирования животных по генам TG5, DGAT1 и LEP.

3.3.1. Разработка системы анализа полиморфизма гена тиреоглобулина (TG5).

3.3.2. Разработка системы анализа полиморфизма гена диацилглицерол О-ацилтрансферазы

DGAT1).

3.3.3. Разработка системы анализа полиморфизма гена геналептина.

3.4. ПОПУЛЯЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА РАЗЛИЧНЫХ ПОРОД ПО ВАРИАНТАМ ГЕНОВ TG5, DGAT1 и LEP.

3.4.1. Генотипирование крупного рогатого скота холмогорской породы по генам TG5, DGA Т1 и LEP.

3.4.2. Генотипирование крупного рогатого скота черно-пестрой, голштинской черно-пестрой и красно-пестрой пород по генам TG5, DGA Т1 и LEP.

3.4.3. Генотипирование крупного рогатого скота бурой швицкой, айрширской и красной горбатовской пород по генам TG5, DGA Т1 и LEP.

3.4.4. Генотипирование крупного рогатого скота симментальской породы по генам TG5, DGAT1 и LEP.

3.4.5. Генотипирование чистопородного и помесного скота ярославской, сычевской, костромской, бестужевской, холмогорской пород по генам TG5, DGA Т1 и LEP.

3.4.6. Комплексный анализ крупного рогатого скота исследуемых пород по генам TG5 DGA TI и LEP.

3.5. Влияние полиморфизма геновTG5, DGAT1 и LEP на показатели молочной продуктивности коров.

3.5.1. Изучение влияния генотипов гена TG5 на показатели молочной продуктивности коров.

3.5.2. Изучение влияния генотипов гена DGAT1 на показатели молочной продуктивности коров.

3.5.3. Изучение влияния генотипов гена LEPua показатели молочной продуктивности коров.

3.5.4. Изучение влияния комплексных генотипов генов TG5, DGA Т1 и LEP на показатели молочной продуктивности коров.

4. ОБСУЖДЕНИЕ.

5. ВЫВОДЫ.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и экспериментальная апробация систем анализа полиморфизма генов-кандидатов липидного обмена у крупного рогатого скота»

Актуальность проблемы.

В настоящее время специализированное мясное скотоводство в России только начинает создаваться, в то время как в мире эта отрасль развивается уже давно. Так, численность скота мясных пород в России составляет около 450 тыс. голов, что составляет менее 2% от всего поголовья крупного рогатого по сравнению с 60-80% в США, Канаде, Австралии и 25-35% - в европейских странах [Легошин Г.П. и др., 2005]. Получение говядины в нашей стране осуществляется в основном за счет откорма бычков и убоя выбракованных коров молочных и комбинированных пород. Даже при образцовой организации молочного скотоводства и откорма сверхремонтного молодняка (и выбракованных взрослых животных) молочные фермы не в состоянии дать необходимое количество говядины и обеспечить соответствующее качество продукции [Амерханов X., 2003].

Существенное влияние на качественные характеристики животноводческой продукции оказывают особенности жирового обмена животных, направление и интенсивность липидного метаболизма. Селекционно-значимыми показателями , характеризующими жировой обмен, являются мраморность мяса и жирность молока [Жарова Т.В., 2005].

Мясо - один из наиболее ценных продуктов питания, важнейший поставщик белка. Соотношение в его составе мышечной, соединительной и жировой ткани определяют качество этого продукта, которое зависит от вида и породы животных, пола, возраста, части туши и упитанности животного. Мраморность мяса обуславливается содержанием внутримышечного жира (IMF - сумма внутриклеточных, межклеточных и межволоконных жировых компонентов), и характеризует, прежде всего, его вкусовые качества. Многочисленными исследованиями выявлено невысокое значение этого параметра у европейских мясных пород, чаще всего около 2,5 %. Сообщается о корреляции IMF с такими признаками, как степень мраморности (+0,81) и постность мяса (-0,47) [Fries R., Ruvinsky А., 1999]. Различная степень мраморности определяется по системе USDA или AUS-МЕАТ в порядке увеличения содержания мраморности, соответственно: легкая, небольшая, умеренная, средняя, слегка избыточная и умеренно-избыточная. Так как коэффициент наследования содержания внутримышечного жира достаточно невысок (38-55% - у мясных пород европейского скота) в совокупности с низкой вариабельностью этого признака, использование традиционных методов селекции не позволяет добиться значительных успехов [Thaller и др., 2003].

Содержание жира является одной из важнейших качественных характеристик молока коров. Проводимая селекция крупного рогатого скота, в большинстве случаев, направлена на повышение содержания жира в молоке. Коэффициент наследования содержания жира в молоке характеризуется значительной вариабельностью (17-70%), что может существенно влиять на эффективность методов традиционной селекции [Петухов В.Л., 1989].

В зависимости от направления использования животноводческой продукции существует устойчивый спрос, как на мясо с высокой степенью мраморности, так и на постное. Следует также отметить селекционную приоритетность показателя жирности молока. Таким образом, существует потребность в методах оценки склонности животных, в частности крупного рогатого скота, к образованию характерной мраморности мяса и повышенному содержанию жира в молоке [Barendse W.J., 1999, Pat. W09923248J.

Одним из эффективных подходов оценки направления и интенсивности липидного обмена животных и, как следствие, проведения отбора животных по данным признакам является использование ДНК-маркеров [Зиновьева Н.А., 2004]. Поиск генов-кандидатов липидного обмена животных, разработка тест-систем их анализа и изучение влияния полиморфных вариантов таких генов на показатели липидного обмена животных является актуальной задачей современной животноводческой науки.

Цель и задачи исследований.

Целью настоящей работы явилась разработка систем молекулярно-генетического анализа полиморфизма генов-кандидатов, влияющих на липидный обмен, и их экспериментальная апробация для генотипирования крупного рогатого скота различных пород.

Для достижения цели работы были поставлены следующие задачи:

1. Выполнить анализ спектра генов, влияющих на показатели липидного обмена, в частности, на мраморность мяса и жирность молока у крупного рогатого скота.

2. С использованием технологии пиросеквенирования разработать методики определения полиморфизма генов тиреоглобулина, диацилглицерол 0-ацилтрансферазы1 и лептина, потенциально влияющих на показатели липидного обмена крупного рогатого скота.

3. Провести генотипирование крупного рогатого скота различных пород по изучаемым генам.

4. Выполнить анализ генетической структуры популяций крупного рогатого скота различных пород по генам тиреоглобулина, диацилглицерол 0-ацилтрансферазы1 и лептина.

5. Изучить влияние генотипов исследуемых генов на показатели молочной продуктивности коров.

Научная новизна.

С использованием разработанных в ходе выполнения диссертационной работы тест-систем изучен полиморфизм генов-кандидатов мраморности мяса и липидного обмена тиреоглобулина (TG5), диацилглицерол О-ацилтрансферазьй (DGAT1) и лептина (LEP) у крупного рогатого скота различных пород, разводимых на территории России. Выполнен анализ иерархических связей между исследуемыми группами крупного рогатого скота различных пород, используя в качестве критерия частоты встречаемости генотипов исследуемых генов. Изучена молочная продуктивность коров различных пород в зависимости от генотипов по генам TG5, DGAT1 и LEP.

Практическая значимость работы.

Разработаны тест-системы определения полиморфизма генов TG5, DGAT1 и LEP как потенциальных маркеров липидного обмена и мраморности мяса крупного рогатого скота. Проведена апробация систем при определении частот встречаемости вариантов этих генов в 28 группах крупного рогатого скота пород: холмогорская, красно-пестрая, черно-пестрая, ярославская, симментальская, красная горбатовская, бестужевская, сычевская, костромская, айрширская, голштинская черно-пестрая и бурая швицкая.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Молекулярно-генетические системы анализа полиморфизма генов тиреоглобулина, диацилглицерол 0-ацилтрансферазы1 и лептина.

2. Характеристика генетической структуры популяций крупного рогатого скота различных пород по исследуемым генам.

3. Оценка генетических различий между исследуемыми группами скота различных пород с использованием в качестве критерия полиморфизма по генам тиреоглобулина, диацилглицерол 0-ацилтрансферазы1 и лептина.

4. Влияние полиморфизма изучаемых генов на признаки молочной продуктивности коров различных пород. Характеристика генетической структуры популяций крупного рогатого скота по генам TG5, DGAT1 и LEP.

Апробация работы.

Результаты исследований были доложены:

• на III международной научно-практической конференции «Современные технологические и селекционные аспекты развития животноводства России», ВИЖ, 2005 г.;

• на международной научной конференции «Новые методы генодиагностики и генотерапии: современное состояние и перспективы использования в сохранении генофонда сельскохозяйственных животных», ВИЖ, 2005;

• на международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения акад. М.Н. Лущихина «Биотехнология в мире животных и растений», Бишкек, Киргизия, 2005;

• на школе-практикуме «Методы исследований в биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ, 2005.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ.

Структура и объем работы.

Диссертационная работа написана на 127 страницах, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы. Работа включает 53 таблицы и 29 рисунков. Список литературы включает 175 источников, в том числе 115 источников на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Ларионова, Полина Валентиновна

5. ВЫВОДЫ

1. С использованием новой технологии пиросеквенирования разработаны тест-системы определения полиморфизма генов-кандидатов липидного обмена и мраморности мяса крупного рогатого скота, позволяющие диагностировать аллели С и Т гена тиреоглобулина (TG5), А и К гена диацилглицерол 0-ацилтрансферазы1 (DGATl), R и С (С73Т), С и Т (С528Т) и С и G (C1759G) гена лептина (LEP). Разработанные системы генотипирования отличаются высокой достоверностью результатов и могут быть с успехом применены для тестирования крупного рогатого скота по указанным генам.

2. Выполненная экспериментальная апробация разработанных тест-систем для диагностики генотипов по генам TG5, DGAT1 и LEP 28 групп скота 12 пород: черно-пестрая, голштинская черно-пестрая, симментальская, красно-пестрая, красная горбатовская, айширская, костромская, холмогорская, ярославская, бестужевская, бурая швицкая, сычевская (всего 2064 образцов) - показала высокую эффективность разработанных систем генотипирования.

3. Анализ генетической структуры популяций крупного рогатого скота изучаемых пород по гену TG5 показал, что все исследуемые группы скота были полиморфны по данному гену. Частота встречаемости презумптивно желательного генотипа ТТ во всех исследованных группах скота была относительно низкой и варьировала от 0% у животных черно-пестрой, костромской, бурой швицкой, айрширской и нескольких групп холмогорской, симментальской, а также красно-пестрой породы до 12% у помесной группы сычевской породы. Доля аллеля Т составляла от 0,06% в группе чистопородного скота костромской породы до 26,1% в группе чистопородного скота сычевской породы. Анализ молочной продуктивности коров, проведенный в 7-и группах скота сычевской, бурой швицкой, ярославской и холмогорской пород, не выявил достоверного влияния генотипов гена TG5 на показатели продуктивности. Показана тенденция повышенного содержания жира и белка в молоке у коров бурой швицкой породы немецкой селекции (СОСТ, на 33 кг и 8% соответственно) и белка в молоке у коров Михайловского типа ярославской породы (СОСТ, на 7%), несущих генотип СС гена TG5, по сравнению с животными с генотипом СТ.

4. Анализ генотипов крупного рогатого скота по гену DAGT1 показал полиморфность данного гена во всех исследуемых группах за исключением группы швицкого скота немецкой селекции, в которой был диагностирован только аллель А и, соответственно генотип АА. Частота встречаемости презумптивно желательного генотипа КК варьировала от 0% у коров сычевской, бурой швицкой и некоторых групп бестужевской, симментальской и черно-пестрой пород до 18,31% в одной из групп животных симментальской породы. На долю аллеля К приходилось от 0% в группе швицкого скота немецкой селекции до 41,1% в группе чистопородного костромского скота. Анализ молочной продуктивности коров, проведенный в шести группах скота пород: сычевская, бурая швицкая, ярославская и холмогорская, показал достоверное влияние генотипов гена DGAT1 в группе коров Михайловского типа ярославской породы по удою КК>АА, +890 кг (Р<0,05), содержанию жира в молоке АК>АА, +0,58% (Р<0,001) и КК>АА, +0,68% (Р<0,001), содержанию белка в молоке АК>АА, +0,11%, (Р<0,05), а также в группе чистопородного холмогорского скота по удою АК>АА, +384 кг (Р<0,05).

5. Установлен полиморфизм гена LEP С73Т во всех исследованных группах скота. На долю животных с презумптивно желательным генотипом СС приходилось от 0% в группе чистопородного сычевского скота до 38,89% в группе швицкого скота немецкой селекции. Частота аллеля С варьировала от 6,9% у черно-пестрого скота до 61,1% у швицкого скота. Анализ молочной продуктивности коров, проведенный в 9-и группах скота сычевской, бурой швицкой, ярославской, холмогорской и симментальской пород, показал достоверное влияние генотипов гена LEP по удою в группах коров бурой швицкой породы отечественной селекции: CORR, +507 кг (Р<0,05) и симментальской породы (2-я лактация, CORC, +958 кг, Р<0,05; 3-я лактация, CORC, +1084 кг, Р<0,05) и по содержанию молочного жира в группе коров симментальской породы: RR>CC, +0,17% (Р<0,05).

6. Проведенный анализ влияния комплексных генотипов на показатели молочной продуктивности в трех группах скота симментальской и холмогорской пород показал, что в группе холмогорского скота наблюдались достоверные различия по содержанию жира в молоке в среднем за две лактации: CCAAROCCAARR, +0,06, Td=2,01; CCAKRR>CCAARR, +0,09, Td=2,66; CTAARR>CCAARR, +0,10, Td=2,74. В качестве тенденции следует также отметить приближающиеся к достоверным различия по удою в среднем за две лактации CTAARR>CCAARR, +506 кг, Td=1.63, а также по содержанию жира в молоке CCAKROCCAARR, +0,06%, Td=l,60 за первую лактацию и +0,06%, Td=l,66 в среднем за две лактации. Проведенный анализ различий в показателях молочной продуктивности между группами коров симментальской породы 1-й (ЗАО «Шестаковское») и 3-й групп (ГПЗ «17 партсъезд») с различными комплексными генотипами не выявил достоверных разницы ни по одному из показателей. В качестве тенденции следует отметить приближающиеся к достоверным различия по удою CCAARR>CCAKRR, +378 кг, Td=l,55 и содержанию жира CCAARR>CTAARR, +0,17%, Td=l,98, CCAARR>CTAARC, +0,13%, Td=l,84, CCAARR>CCAARC, +0,15 кг, Td=l,59 у симментальского скота ЗАО «Шестаковское», а также по содержанию белка в молоке CCAARC >CCAARR, +0,04%, Td=l,79; CTAARC > CCAARR, +0,08%, Td=l,79 у симментальского скота ГПЗ «17 партсъезд».

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Лабораториям, занимающимся ДНК-диагностикой, для определения генотипов крупного рогатого скота по генам-кандидатам липидного обмена крупного рогатого скота рекомендуем использовать разработанные нами тест-системы анализа полиморфизма генов тиреоглобулина, диацилглицерол 0-ацилтрансферазы1 и лептина.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ларионова, Полина Валентиновна, 2006 год

1. Амерханов X. // Молоч.и мясн.скотоводство. 2003. N 6. - С. 3-10.

2. Арзуманян Е.А. Скотоводство. / Арзуманян Е.А., Бегучев А.П., Соловьев А.А., Фандеев Б.В. М.: Колос. - 1978. -399 с.

3. Бердичевский Н.С. Генетический анализ популяций крупного рогатого скота зоны западных областей УССР по полиморфным белковым системам в связи с селекцией: Автореф. дис. канд. биол. наук // АН СССР. Ин-т общей генетики. М. - 1980. - 25 с.

4. Берк К. Анализ данных с помощью Microsoft Excel / Берк К., Кэйри П.; ^ пер. с англ. М.: изд. дом Вильяме, 2005. - 560 с.

5. Бессонова Л.П. Системный подход при разработке электронных версий стандартов на говядину и свинину / Бессонова Л.П., Антипова Л.В. // Мясная индустрия. 2004. - N 4. - С. 50-52.

6. Большаков О.В. Разработка стандартов Европейской Экономической Комиссии ООН Стандарты на говядину, свинину, баранину и мясо птицы. / Большаков О.В., Татулов Ю.В., Дибирасулаев М.А. // Мясная индустрия. 2001. - N 10. - С. 43-45

7. Борисенко Е.Я. Разведение сельскохозяйственных животных / Борисенко I Е.Я. 4-е изд. - М.: Колос, 1967. - 463с.

8. Боровиков В.П. Программа STATISTICA для студентов и инженеров / Боровиков В.П. 2-е изд. -М.: КомпьютерПресс, 2001. - 301с.

9. Вартапетян А.Б. Полимеразная цепная реакция / Вартапетян А.Б. // Молекулярная биология.-М.: 1991.-Том 25.-№4.-С.926-936.

10. Волщуков П.Н. Популяционно-генетический анализ результатов племенной работы и пути повышения эффективности селекции симментальского скота: Автореф. дис. канд. с.-х. наук / ВНИИ разведения и генетики с.-х. животных. Ленинград-Пушкин. - 1986. - 21 с.

11. Георгиевский В.И. Физиология сельскохозяйственных животных // Георгиевский В.И. М.: Агропромиздат.-1990.-510 с.

12. Голиков А.Н. Физиология сельскохозяйственных животных / Голиков А.Н. Баранова Н.У., Кожебеков З.К. М.: Агропромиздат.-1991.-432 с.

13. Инге-Вечтомов С.Г. Генетика с основами селекции: учебник / Инге-Вечтомов С.Г. М.: Высш.шк., 1989. - 591с.

14. Калашников В. Мясное скотоводство в России / Калашников В. Левахин

15. B. // Молоч.и мясн.скотоводство. 2003. - N 6. - С. 11-18

16. Калашников В. Мясное скотоводство и пути его развития в России / Калашников В., Левахин В. // Молоч.и мясн.скотоводство. 2004. - N 6.1. C. 2-4.

17. Калашников В. Состояние и перспективы производства говядины в России / Калашников В. Амерханов X. // Молоч.и мясн.скотоводство. -2005.-N6.-С. 3-7

18. Калашников В.В. Перспективы развития отрасли мясного скотоводства в России / Калашников В.В. // Вестн.мясн.скотоводства, 2002. Вып.55. - С. 19-24.

19. Качество говядины будет гарантировать генетическое тестирование Электронный ресурс. // Режим доступа к ресурсу: http://www.genoterra.ru/news/view/16/953. 2006. - свободный.

20. Клейменова И.В. Популяционно-генетический анализ распространения недостатков экстерьера у черно-пестрого скота Московской области: Автореф. дис.канд. с.-х. наук // Дубровицы, ВИЖ. -1998. 22 с.

21. Костюнина О.В. Молекулярная диагностика генетического полиморфизма основных молочных белков и их связь с технологическими свойствами молока: Автореферат дисс. канд. биол. наук / Костюнина О.В. // Дубровицы, ВИЖ. 2004. - 22с.

22. Кулаичев А.П. Методы и средства комплексного анализа данных / Кулаичев А.П. 4-е изд. - М.: ФОРУМ: ИНФРА-М, 2006. - 512с.

23. Куликов J1.B. Математическое обеспечение эксперимента в животноводстве: учебное пособие / Куликов J1.B., Никишов А.А. М.: Изд-во РУДН, 1994.-131с.

24. Легошин Г.П. Мясное скотоводство России: состояние, проблемы, перспективы развития и меры государственной поддержки // Легошин Г.П., Половинко Л.М., Сиденко И.И. ВИЖ. - 2005. - в.63. - т.1. - С. 42-46.

25. Мазуровский Л.З. Племенная база мясного скотоводства России и пути ее развития / Мазуровский Л.З. // Вест. мясн. скотоводства 2003. Вып. 56. -С. 359-363.

26. Машуров А. Микрофилогенез популяций крупного рогатого скота черно-пестрой породы / Машуров А., Сухова Н., Горбачев А., Лазарева Ф., Сагитдинов Ф., Деева В., Царев Р. // Сиб.вестн.с.-х.науки. 2002. - N 1-2. -С. 77-81

27. Машуров A.M. Генетические маркеры в селекции животных: Автореф. дис. д-ра биол. наук / ВНИИ разведения и генетики с.-х. животных Л. -1985.-44 с.

28. Меркурьева Е.К. Биометрия в селекции и генетике сельскохозяйственных животных / Меркурьева Е.К. М.: Колос, 1970. - 426с.

29. Меркурьева Е.К. Генетика. / Меркурьева Е.К., Абрамова З.В., Бакай А.В., Кочиш И.И. М.: Агропромиздат. -1991.-444с.

30. Мясное скотоводство / Под. ред. Зелепухина А.Г., Левахина В.И. -Оренбург.: Изд-во ОГУ. 2000. - 350с.

31. Натыров А.К. Мясное скотоводство Калмыкии / Натыров А.К., Басангов А.П. Элиста.: Джангар. - 1999. 132с.

32. Петухов В.Л. Генетические основы селекции животных: учебник / Петухов В.Л., Эрнст Л.К., Гудилин И.И. и др.; ред. Петухова В.Л. и Гудилина И.И. М.: Агропромиздат, 1989. -448с.

33. Плохинский Н.А. Биометрия. / Плохинский Н.А. - М.: Издательство Московского университета. -1970. -366 с.

34. Попов Н.А. Генетические особенности скота холмогорской породы племенных хозяйств Кировской области / Попов Н.А., Еремина М.А., Марзанова JI.K., Попов А.Н., Червяков Н.А., Смирнова Г.Г. // ВИЖ, Дубровицы. 2005. - Вып. 63. т. 1. - С. 148-151.

35. Сергеев И.И. Резервы селекционного повышения экономической устойчивости молочного скотоводства // Сергеев И.И. ВИЖ. - 2005. -в.63. - т.1. - С. 90-93.

36. Сингер М., Берг П. Гены и геномы / В 2-х томах // М.: Мир.-1998. -794 с.

37. Сороковой П.Ф. Генетическая изменчивость черно-пестрого и айрширского скота Подмосковья Сороковой П.Ф., Попов Н.А., Васина А.П. // Зоотехния. 1990. Т. 12. - с. 14-17

38. Татулов Ю.В. О международных стандартах на говядину и свинину / Татулов Ю.В., Миттелыптейн Т.М. // Мясн.пром-сть. 1995. - N 2. - С. 2021.

39. Черекаев А. Увеличение производства говядины в молочном скотоводстве / Черекаев А. // Животновод для всех. 2002. - N 4. - С. 6-8.

40. Шахин А.В. Оценка и моделирование отбора черно-пестрого скота по зоотехническим и иммуногенетическим показателям: Автореф. дис.канд. биол. наук / Шахин А.В. // Дубровицы, ВИЖ. 2000. - 18 с.

41. Эрнст JI.K. Зоотехническая наука и прогресс животноводства / Эрнст J1.K. // Науч. тр. ВИЖа, Дубровицы. 2005. - Вып. 63. - т. 1. - С. 9-14

42. Albrecht E. A New Technique for Objective Evaluation of Marbling in Beef / Albrecht E., Wegner J., Ender K. // Fleischwirtschafi Frankfurt/M. - 1996. -Vol. 76 (11).-S. 1145-1148

43. Barendse W. The leptin C73T missense mutation is not associated with marbling and fatness traits in a large gene mapping experiment in Australian cattle / Barendse W., Bunch R.J., & Harrison B.E. // Animal Genetics. 2005. -Vol. 36.-P. 86-88.

44. Barendse W. DNA markers for meat tenderness. Patent publication number W002064820 Электронный ресурс. / Barendse, W. 2001. Электрон, текстовые дан. - Режим доступа: http://ep.espacenet.- com/. Accessed Feb. 9, 2004. - свободный.

45. Barendse W. Genetic map of DNA loci on bovine chromosome 1 / Barendse, W., Armitage, S.M., Ryan, A.M., Moore, S.S., Clayton, D., Georges, M., Womack, J.E., Hetzel, J. // Genomics. 1993. - Vol. 18. - P. 602—608.

46. Barendse W. TG5 DNA marker test for marbling capacity in Australian feedlot cattle / Barendse, W., R. Bunch, M. Thomas, S. Armitage, S. Baud, N. Donaldson. // Proc. Beef Quality CRC Marbling Symp. 2001. -P. 52-57.

47. Bauck S. Igenity-L™ : Genotyping of the obese (leptin) gene for traits of economic significance / Электронный ресурс. / Bauck S 2002. - Электрон, текстовые дан. - Режим доступа: www.geneticsolutions.com.au, свободный.

48. Biagini D. Carcass dissection and commercial meat yield in Piemontese and Belgian Blue double-muscled young bulls / Biagini D., Lazzaroni C. // Livestock Production Science. 2005. - Vol. 98 (3). - P. 199-204

49. Braga F., Martin L., Paguaga R. How would you like your steak Study reveals consumer buying preferences / Braga F., Martin L., Paguaga R. // Highlights agr. Res. in Ontario. 1989. -T. 12. - N 4, - P. 26-29.

50. Buchanan F.C. Association of a missense mutation in the bovine leptin gene with carcass fat content and leptin mRNA levels / Buchanan FC, Fitzsimmons CJ, Van Kessel AG с соавторами // Genetics Selection Evolution. 2002. N. 34 (1). -P.105.

51. Buchanan F.C. Hot topic: an association between a leptin single nucleotide polymorphism and milk and protein yield / Buchanan F.C., Van Kessel AG, Waldner С с соавторами // J Dairy Sci. 2003. - Vol. 86 (10). - P. 3164

52. Bunger L. Leptin levels in lines of mice developed by long-term divergent selection on fat content / Bunger, L., Nicolson, M., Hill, W. G. // Genet. Res. -1999.-Vol. 73.-P. 37-44.

53. Casas E. Effects of calpastatin and ц-calpain markers in beef cattle on tenderness traits / Casas E., White S.N., Wheeler T.L. с соавторами // Journal of Animal Science. 2006. - Vol. 84 (3). - P. 520.

54. Casas E. Identification of quantitative trait loci for growth and carcass composition in cattle / Casas, E., Keele, J. W., Shackelford, S. D., Koohmaraie M., Stone R. T // Animal Genetics. 2003. - Vol. 35. P. 2-6.

55. Cases S. Identification of a gene encoding an acyl CoA:diacylglycerol acyltransferase, a key enzyme in triacylglycerol synthesis / Cases S., Smith S.J., Zheng Y.W. с соавторами // Proc Natl Acad Sci USA.- 1998. -Vol. 95 (22). -P. 13018.

56. Cohen P. Selective deletion of leptin receptor in neurons leads to obesity / Cohen P., Zhao C., Cai X., Montez J.M., Rohani S.C., Feinstein P., Mombaerts P., Friedman J.M. // J Clin. Invest. 2001. - Vol. 108. - P. 1113-21.

57. Dekkers J.C.M. Commercial application of marker- and gene-assisted selection in livestock: Strategies and lessons / Dekkers J. С. M. // J. Anim. Sci. 2004. -Vol. 82(E. Suppl.). -P.313-328.

58. Delavaud С. Plasma leptin concentration in adult cattle: effects of breed, adiposity, feeding level, and meal intake / Delavaud, C., Farley, A., Faulconnier, Y., Bocquier, F., Kann, G., Chilliard, Y. // J. Anim. Sci. 2002 -Vol. 80.-P. 1317-1328.

59. Flier J.S. Clinical review 94: what's in a name? In search of leptin's physiologic role / Flier JS. // J Clin. Endocrinol. Metab. 1998. - Vol. 83. - P. 1407-13.

60. Friedman J.M. Leptin and the regulation of body weight in mammals / Friedman J.M., Halaas J.L. // Nature. 1998. - Vol. 395. - P. 763-770.

61. Geary T.W. Leptin as a predictor of carcass composition in beef cattle / Geary T.W., McFadin E.L., MacNeil M.D. с соавторами // Journal of Animal Science.-2003.-Vol. 81 (l).-P. 1.

62. Goddard M.E. The Genetics of Cattle / Goddard, M E.; Wiggans, G R. Fries R, Ruvinsky A., editors. Wallingford, U.K.: CABI. - 1999. - P. 511-537.

63. Gotoh T. Japan Growth- Related Changes in Muscle Development and Fat Accumulation of European and Wagyu (Japaese Black) Cattle / Gotoh, Т.,

64. Kawabata, К., Sakashita, К., Iwamoto, H., Teuscher, F., EnderK., Wegner J. // 101st Japanese Society of Animal Science Congress.- 2003.

65. Haegeman A. New mutation in exon 2 of the bovine leptin gene / Haegeman A., Van Zeveren A., Peelman L.J. // Animal Genetics. 2000. - Vol. 31 (1). -P. 79.

66. Hassen A. Repeatability of ultrasound-predicted percentage of intramuscular fat in feedlot cattle / Hassen, A., Wilson, D. E., Amin, V. R., Rouse, G. H. // J. Anim. Sci. 1999. - Vol. 77. - P. 1335-1340.

67. Hetzel J. Genestar Markers Delivering Productivity Improvement to the Beef Industry Электронный ресурс. / Hetzel J. - 2002. - Электрон, текстовые дан. - Режим доступа: www.geneticsolutions.com.au, свободный.

68. Hornstein I. Sensory characteristics of meat. Part 2-Chemistry of meat flavor / Hornstein, I., A. Wasserman // The Science of Meat and Meat Products. 1987. -P. 329-347.

69. Hossner K.L. Cellular, molecular and physiological aspects of leptin: Potential application in animal production / Hossner, K.L. // Can. J. Anim. Sci. 1998.-Vol. 78, P. 463-472.

70. Houseknecht K.L. Leptin and its receptors: regulators of whole-body energy homeostasis / Houseknecht K.L., Portocarrero C.P. // Domest. Anim. Endocrinol. 1998. - Vol. 15. - 457-75.

71. Iritani N. Nutritional and insulin regulation of leptin gene expression / Iritani N. // Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. 2000. - Vol. 3. - P. 275-9.

72. Jones S.D.M. Marbling standards for beef and pork carcasses / Jones S.D.M., Robertson W.M., Talbot S. // Ottawa(Ont.). 1992. - P - 9 c.

73. Jones S.D.M. A survey of marbling fat in Canadian beef carcasses / Jones, S. D. M., Tong, A. K. W., Talbot, S. // Canadian journal of animal science. -1991.-Vol. 71.-P. 987-991.

74. Kashi Y. Marker assisted selection of candidate bulls for progeny testing programmes / Kashi, Y., E. Hallerman, M. Soller. //Anim. Prod. 1990. - Vol. 51.-P. 63-74.

75. Kauffman R.G. Marbling: its use in predicting beef carcass composition / Kauffman, R. G., Van Ess, M. E., Long, R. A., Schaefer, D. M. // Journal of animal science. 1975. - Vol. 40. - P. 235-241.

76. Kim H. Differential response of obese gene expression from fasting in bovine adipose tissues / Kim H., Chi Y., Chung K., Kim K., Choi Y., Baik M. // Biosci. Biotechnol. Biochem. 2000. - Vol. 64. - P. 2240-2.

77. King D.A. Carcass merit between and among family groups of Bos indicus crossbred steers and heifers / King D.A., Morgan W.W., Miller R.K., Sanders J.O., Lunt D.K., Taylor J.F., Gill C.A., Savell J.W. // Meat Science. 2006. -Vol. 72 (3).-P. 496-502

78. Kuhn C. Evidence for multiple alleles at the DGAT1 locus better explains a ^ quantitative tip trait locus with major effect on milk fat content in cattle / Kuhn

79. C., Thaller G., Winter А. с соавторами // Genetics. 2004. -Vol. 167 (4). - P. 1873.

80. Kuhn C.H. Detection of QTL for milk production traits in cattle by application of a specifically developed marker map of BTA6 / Kuhn, C.H., Freyer, G., Weikard, R., Goldammer, Т., Schwerin, M. // Anim. Genet. 1999. -Vol. 30.-P. 333-340.

81. Kulig H. Associations between leptin gene polymorphism and some milk performance traits of cattle / Kulig H. // J.anim.Feed Sc., 2005. T. 14, N 2. - P.1. Щ 235-244

82. Lagonigro R. A new mutation in the coding region of the bovine leptin gene associated with feed intake / Lagonigro R., Wiener P., Pilla F. с соавторами // Animal Genetics. 2003. - Vol. 34 (5). - P. 371.

83. Lande R. Efficiency of marker-assisted selection in the improvement of quantitative traits / Lande, R., Thompson R. // Genetics. 1990. - Vol. 124. -P. 743-756.

84. Lander E.S. Mapping mendelian factors underlying quantitative traits using RFLP linkage maps / Lander, E.S., Botstein, D. // Genetics. 1989. - Vol. 1211..-P. 185-199

85. Lee Y.J. Untersuchungen tiber die Abhangigkeit der Zartheit von Rindermuskeln / Lee, Y. J. Schoen L. // Fleischwirtschaft Frankfurt/M. -1986.-Vol. 66.-S. 600-603

86. Marbling scores and quality grades in the United States and Canada / Canadian Marbling Standards AUS-MEAT Marbling Reference Standards. -2002.

87. STAT5A gene / McCracken, J.Y., Molenaar, A.J., Snell, R.J., Davey, H.W., Wilkins, R.J. // Anim. Genet. 1997. - Vol. 28. - P. 453-464

88. Mears G.J. Effect of Wagyu genetics on marbling, backfat and circulating hormones in cattle / Mears, G.J., Mir, P.S., Bailey, D.R.C. Jones, S.D.M. // Canadian Journal of Animal Science. 2001. - Vol. 81. - P. 65-73.

89. Minton J.E. Serum leptin is associated with carcass traits in finishing cattle / Minton, J. E., Bindel, D. J., Drouillard, J. S., Titgemeyer, E. C., Grieger, D. M., Hill, С. M. // J. Anim. Sci. 1998. - Vol. 76 (Suppl. 1). - P. 231.

90. Muir P.D. Variability in marbling in Angus steers and an evaluation of subjective marbling assessment / Muir, P. D., Smith, D. R., Smith, N. В., Wallace, G. J. // New Zealand Journal of Agricultural Research. 1998. - Vol. 4. P. 335-346.

91. Nishimura T. Structural changes in intramuscular connective tissue during the fattening of Japanese black cattle: effect of marbling on beef tenderization / Nishimura, Т., Hattori, A., Takahashi, K. // J. Anim. Sci. 1999. - Vol. 77. - P. 93.

92. Oldigs B. EinfluB endogener Faktoren auf die Fleischbeschaffenheit beim Rind. 2. Fleischbeschaffenheitsfaktoren / Oldigs, В., Langholz H.-J., Groenewold J. P. // Fleischwirtschaft. 1990. - Vol. 68. - S. 1130 -1138

93. Pfister-Genskow M. The leptin receptor (LEPR) gene maps to bovine chromosome 3q33 / Pfister-Genskow M., Hayes H., Eggen A., Bishop M.D. // Mamm. Genome. 1997. - Vol. 8. - P. 227.

94. Pyrosequencing Электронный ресурс. Электрон, текстовые дан. -Режим доступа: - http://www.pyrosequencing.com/ - свободный.

95. Pomp D. Rapid communication: Mapping of leptin to bovine chromosome 4 by linkage analysis of a PCR-based polymorphism / Pomp D., Zou Т., Clutter A.C. с соавторами // Journal of Animal Science. 1997. - Vol. 75 (5). - P. 1427.

96. Robert C. Backfat thickness in pigs is positively associated with leptin mRNA levels / Robert, C., Palin, M. F., Coulombe, N., Roberge, C.,

97. Silversides, F. G., Benkel, B. F., McKay, R. M., Pelletier, G. // Can. J. Anim. Sci. 1998. Vol. 78. - P. 473-482.

98. Sabour M.P. Association between milk protein variants and genetic values of Canadian Holstein bulls for milk yield traits / Sabour, M.P., Lin, C.Y., Lee, A.J., McAllister, A.J. // J. Dairy Sci. 1996. - N. 79. - P. 1050-1056

99. Saici R.K. Primer-directed enzymanic amplification of with a thermostable DNA polymerase / Saici R.K., Gelfand D.,et. al. //Science.- 1988.-P.487-491.

100. Savell J. W. Percentage ether extractable fat and moisture content of beef longissimus muscle as related to USDA marbling score / Savell, J. W.; Cross, H. R.; Smith, G. C. // Journal of food science. 1986. - Vol. 51. - P. 838-840.

101. Schmutz S.M. DNA marker-assisted selection of the polled condition in Charolais cattle / Schmutz, S. M., Marquess F. L. S., Berryere T. G., Moker J. S. // Mamm. Genome. 1995. - Vol. 6. - P. 710-713.

102. Smith S.B. Intramuscular fat deposition: the physiological process and the potential for its manipulation / Smith, S. В., Lunt, D. K., Zembayashi, M. // Plains Nutr. Council Spring Conf. 2000. - P. 1-12.

103. Sorensen B. Acyl-CoAs of Conjugated Linoleic Acid as Substrates for Bovine Mammary Gland Microsomal Diacylglycerol Acyltransferase / Sorensen В., Okine E., Kennelly J., Wegner J., Weselake R. // CAOCS in Halifax.-2004.

104. Sorensen В. Diacylglycerol acyltransferase activity in the muscle tissue of two metabolically different breeds of cattle / Sorensen В., Wegner J., Weselake R. // Archiv fuer Tierzucht. 2003. - Vol. 46. (SUPP). - P. 178

105. Spelman R.J. Characterization of the DGAT1 gene in the New Zealand dairy population / Spelman R.J., Ford C.A., McElhinney P. с соавторами // J Dairy Sci. 2002. - Vol. 85 (12). - P. 3514.

106. Spelman R.J. Genetic and economic responses for within-family markers-assisted selection in dairy cattle breeding schemes / Spelman, R. J., Garrick D. J. // J. Dairy Sci. 1998. - Vol. 81. - P. 2942-2950.

107. Temisan V. Qualitatsrindfleisch Definition, Standardisierung, Wege zur Erzeugung / Temisan, V., Augustini, Chr. // Fleischwirtschaft Frankfurt/M. -1989.-Vol. 69.-S. 31-37

108. Thaller G. DGAT1, a new positional and functional candidate gene for intramuscular fat deposition in cattle / Thaller G., Kuhn C., Winter А. с соавторами // Anim Genet. 2003. - Vol. 34 (5). P. - 354-357.

109. Thaller G. Effects of DGAT1 variants on milk production traits in German cattle breeds / Thaller G., Kramer W., Winter А. с соавторами // Journal of Animal Science.-2003.-Vol. 81 (8).-P. 1911.

110. Thaller G. Einfluss der Kandidatengene DGAT1 und Thyroglobulin auf den intramuskularen Fettgehalt beim Rind Электронный ресурс. / Thaller G., Fries R. 2004. Электрон, текстовые дан. - Режим доступа: http://www.lfl.bayern.de/ - свободный.

111. Thornton R.E. Marbling in feedlot cattle / Thornton, R. E., Shaw, F. D., Hood, R. L. // Australian journal of experimental agriculture. 1974. - Vol. 14. -P. 281-285.

112. United States Standards for Grades of Carcass Beef // Department of Agriculture. 1997.

113. USDA. Official United States Standards for grades of carcass beef. Washington, DC, Agricultural Marketing Service, United States Department of Agriculture. -1980.

114. Van Eenennaam A.L. DNA-Based Biotechnologies / Van Eenennaam, A. L. // National Beef Cattle Evaluation Consortium Beef Sire Selection Manual. -2006. P. 66-73.

115. Van Tassell C.P. Characterization of DGAT1 Allelic Effects in a Sample of North American Holstein and Jersey Cattle / Van Tassell C.P., Sonstegard T.S., Thallman R.M. с соавторами // J Dairy Sci. 2005. - Vol. 88 (3). - P. 12081213.

116. Villanueva B. Marker assisted selection with optimised contributions of candidates for selection. Villanueva, В., Pong-Wong, R., Woolliams J. A. // Genetics Selection Evolution. 2002. - Vol. 34. - P. 679-703.

117. Wegner J. Zellulares Wachstum von Muskelfasern und Fettzellen und die Fleischqualitat von Hereford-Ochsen unter extensiven Haltungsbedingungen / Wegner J., Matthes H.-D. // Arch. Tierz. 1990. - N. 6. - S. 599-604

118. Wegner J. Mikrostrukturelle Grundlagen des Wachstums von Muskel- und Fettgewebe und die Beziehung zu Fleischansatz und Fleischbeschaffenheit / Wegner J., Ender K. // Fleischwirtschaft Frankfurt/M. - 1990. - Vol. 70 (3) -S. 337-340

119. Wegner J. Muscle fiber and adipocytes in relation to meat quality in cattle and pigs / Wegner J. // 1st International Symposium, Chungnam National University. 2003.

120. Wegner J. Morphologische Aspekte des subkutanen und intramuskularen Fettzellwachstums beim Rind / Wegner, J., Albrecht E., Ender K. // Arch. Tierz. -1998.-Vol. 41 (4).-P. 313-320

121. Wegner J. Relationship of plasma leptin concentration to intramuscular fat content in beef from crossbred Wagyu cattle / Wegner, J., Huffl, P.,. Xiel, C.

122. P., Schneider, F., Teuscher, F., Mir, P. S., Mir, Z., Kazala, E. C., Weselake, R. J., Ender, K. // Canadian. Journal of Animal Science. 2001. - Vol. 81. - P. 451-457

123. Weller J. Population-wide analysis of a QTL affecting milk-fat production in the Israeli Holstein population / Weller J., Golik M., Seroussi E. с соавторами // J Dairy Sci. 2003. Vol. 86 (6). - P. 2219.

124. Zembayashi M. Genetic and nutritional effects on the fatty acid composition of subcutaneous and intramuscular lipids of steers / Zembayashi, M., Nishimura, K. // Meat Sci. 1996. - Vol. 43. - P. 83-92.