Продуценты цитринина и охратоксина А в составе микобиоты кормов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат ветеринарных наук Васильев, Дмитрий Александрович

• Васильев, Дмитрий Александрович
• кандидат ветеринарных наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Васильев, Дмитрий Александрович

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1 Нефротоксины - цитринин и охратоксин А

1.1 Токсикологические свойства, встречаемость в кормах

1.2 Продуцирующие микромицеты

1.3 Методология поиска токсигенных культур 24 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2 Объекты и методы исследований

3 Микробиометод для оценки токсинообразования грибов

3.1 Оптимизация условий пробоподготовки и анализа

3.2 Метрологические характеристики

4 Токсигенный потенциал у представителей микобиоты кормов

4.1 Грибы рода Penicillium

4.1.1 Доминирующие виды

4.1.2 Сопутствующие виды

4.1.3 Редко встречающиеся виды

4.2 Грибы рода Aspergillus

4.2.1 Распространенные виды

4.2.2 Сопутствующие виды

5 Продуценты нефротоксинов в контаминированных кормах

5.1 Активные штаммы Penicillium granulatum

5.2 Характеристика моноконидиальных культур

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Продуценты цитринина и охратоксина А в составе микобиоты кормов»

Диссертационная работа выполнена в период с 2006 по 2009 гг. в лаборатории микотоксикологии ВНИИВСГЭ в соответствии с Фундаментальной НТП 08.05.03.07 «Изучить токсигенный потенциал санитарно-показательных микромицетов и распространенность наиболее опасных микотоксинов с целью совершенствования приемов микотоксикологической оценки безопасности кормов».

Актуальность темы.

Изучение токсинообразования у грибов, поражающих корма, имеет важное значение для профилактики и устранения последствий микотоксикозов животных. Огромный экономический ущерб, наносимый микроскопическими грибами и их токсичными метаболитами, складывается из затрат на лечебные и профилактические мероприятия, а также на выбраковку и перерасход кормов в связи с резким снижением их питательной ценности. В результате использования кормов, контаминированных микотоксинами, снижается продуктивность и сохранность животных, нарушается их воспроизводство.

По данным отечественных и зарубежных исследователей основной вклад в пораженность кормов вносят микроскопические грибы, относящиеся к родам Aspergillus, Penicillium, Rhizopus, Mucor и Fusarium [16, 17, 26]. Грибы-космополиты из родов Aspergillus и Penicillium успешно развиваются на разных субстратах в широких диапазонах температур и влажности [23] и при этом способны к биосинтезу широкого спектра токсичных метаболитов [26, 60]. Клинические признаки отравлений животных в большинстве случаев характеризуются нарушением функций нервной системы, печени и почек [1,28].

В последние годы в мире все большее внимание уделяется разносторонним исследованиям токсинов нефропатического действия -охратоксину А и цитринину, что связано с выявлением иммунодепрессивной, канцерогенной, мутагенной, тератогенной активности и эффекта синергизма у этих токсинов [124], а также с частыми случаями их совместной встречаемости в продовольствии и кормах [37, 97, 109, 167]. Несмотря на многолетние усилия, источники попадания охратоксина А и цитринина в агропродукдию, а также причины, приводящие к высоким уровням их накопления, до сих пор остаются не выясненными.

Цель и задачи диссертации.

Целью данной работы явилось изучение способности к образованию цитринина и охратоксина А у популяций грибов родов Penicillium и Aspergillus, представленных в кормах, и проведение направленного поиска штаммов-продуцентов нефротоксинов с высокой биосинтетической активностью.

Для достижения этой цели были определены следующие задачи:

- разработать методику для оценки способности к биосинтезу цитринина и охратоксина А у санитарно-показательных микромицетов на основе хроматографического и иммуноферментного анализа;

- изучить способность к образованию нефротоксинов у видов Penicillium и Aspergillus, представленных в кормах; провести поиск активно продуцирующих штаммов среди представителей микобиоты в неблагополучных кормах с высокими уровнями загрязненности нефротоксинами;

- изучить характер изменчивости культуральных признаков и интенсивности биосинтеза нефротоксинов у моноконидиальных культур, полученных из перспективных штаммов-продуцентов;

- провести паспортизацию активных продуцентов цитринина и охратоксина А и осуществить их депонирование в специализированной коллекции в соответствии с установленными правилами.

Объекты и методы исследования.

Работа выполнена на совокупности природных штаммов микроскопических грибов родов Penicillium и Aspergillus из состава микобиоты кормов, принадлежащих исследовательской коллекции культур лаборатории микотоксикологии ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (г. Москва), с использованием классических методов микологического исследования (подготовка инокулюма грибов для посевов, выделение моноконидиальных культур, выращивание грибов на жидких, агаризованных питательных средах и зерновом субстрате), инструментальных физико-химических методов анализа спектрофотометрия, флуориметрия), тонкослойной хроматографии и твердофазного конкурентного иммуноферментного анализа.

Научные положения, выносимые на защиту.

- микробиометод на основе хроматографического и иммуноферментного анализа для поиска грибов, продуцирующих нефротоксины;

- способность к биосинтезу охратоксина А и цитринина у основных видов грибов родов Penicillium и Aspergillus, представленных в микобиоте кормов;

- высокая продуцирующая активность у представителей видов Penicillium granulatum Bainier и Aspergillus alliaceus Thorn & Church, выделенных из кормов/

- характер изменчивости интенсивности биосинтеза цитринина и охратоксина А у моноконидиальных культур токсигенных штаммов.

Научная новизна.

Научная новизна работы состоит в следующем:

- разработан новый микробиометод, обеспечивающий возможность поиска продуцентов цитринина и охратоксина А среди санитарно-показательных видов на основе сочетания хроматографического и иммуноферментного анализов;

- впервые получены обобщенные сведения о потенциале образования нефротоксинов у видов грибов Penicillium и Aspergillus, поражающих корма;

- у природных штаммов Penicillium granulatum, выделенных из кормов, установлена способность к интенсивному биосинтезу цитринина и образованию охратоксина А;

- депонированы штаммов грибов, активно продуцирующие цитринин и охратоксин А.

Практическая ценность результатов.

Разработанные «Методические рекомендации по определению цитринина и охратоксина А в культурах санитарно-показательных микромицетов», утвержденные Отделением ветеринарной медицины РАСХН 04.02.2010 г., рекомендованы к использованию в научно-исследовательских и производственных лабораториях при необходимости углубленной микотоксикологической оценки состояния кормов для повышения эффективности приемов диагностики и профилактики микотоксикозов животных. Доступность коллекционных штаммов грибов, активно продуцирующих нефротоксины, обеспечивает возможность проведения токсикологических экспериментов, направленных на совершенствование правил регламентации микотоксинов в кормах и нормирования их остаточного содержания в продукции животноводства.

Область применения результатов.

Результаты работы предназначены для совершенствования ветеринарно-санитарного контроля безопасности кормов и продукции животноводства в нашей стране, для разработки биотехнологических приемов получения физиологически активных веществ, а также для выполнения фундаментальных исследований в области биохимии, таксономии и генетики грибов.

Апробация и внедрение результатов.

Материалы диссертации доложены: на 2 съезде микологов России (Москва, 2008), на заседаниях ученого совета ВНИИВСГЭ (2008, 2009 гг.), на межлабораторном совещании научных сотрудников ВНИИВСГЭ 25 февраля 2010 г.

Список публикаций.

1. Васильев Д.А., Пирязева Е.А., Соболева Н.А. Высокоактивный продуцент охратоксина А из фуражного зерна // Ветеринарная патология. 2009. №3. С. 72-75.

2. Васильев Д.А., Пирязева Е.А. Поиск грибов-продуцентов цитринина в кормах // Российский журнал «Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии». 2009. № 1. С. 32-35.

3. Пирязева Е.А., Васильев Д.А. Распространенность в кормах и токсинообразование гриба Penicillium urticae II Ветеринария и кормление. 2009. № 6. С. 34-35.

4. Васильев Д.А. Продуценты цитринина: опыт изучения моноконидиальных культур // Современная микология в России. Т. 2. Материалы 2-го Съезда микологов России. М.: Национальная академия микологии, 2008. С. 246.

Структура и объем диссертации.

Работа изложена на 116 страницах машинописного текста, содержит 31 таблицу и 12 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), результатов собственных исследований (главы 2 - 5), их обсуждения, выводов, списка литературы, включающего 172 источника (отечественных авторов - 28 и зарубежных - 144), и двух приложений.

Заключение диссертации по теме «Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов», Васильев, Дмитрий Александрович

ВЫВОДЫ

1. Микробиометод, состоящий из хроматографического и иммуноферментного анализа экстрактов 7-суточных культур грибов, полученных в стандартизированных условиях, обеспечивает определение цитринина и охратоксина А в широком диапазоне концентраций (от единиц до 106 нг/мл) и является эффективным приемом поиска и дифференциации продуцентов по интенсивности токсинообразования.

2. Применение микробиометода показало, что интенсивно поражающие корма виды рода Penicillium - P.urticae, P.cyclopium, P.palitans и P.martensii не участвуют в контаминации их нефротоксинами, поскольку доля продуцентов среди изученных штаммов невелика и уровни токсинообразования не превышают 50 нг/мл.

3. Вид Penicillium granulatum является источником наиболее часто выявляемой в кормах сочетанной контаминации нефротоксинами - для 6 высокоактивных штаммов-продуцентов цитринина с уровнями его накопления от 23 до 200 мкг/мл установлена способность к одновременному биосинтезу охратоксина А, хотя и в меньших количествах.

4. Потенциально токсигенные виды рода Aspergillus, характерные для микобиоты кормов, не образуют цитринин и только часть из них обнаруживают редкое и слабое продуцирование охратоксина А.

5. Обнаружение у природного штамма A.alliaceus № 115 высокого потенциала биосинтеза охратоксина А, свидетельствует о необходимости дальнейшего изучения возможной роли этого вида в контаминации зернопродукции.

6. При подготовке перспективных токсигенных штаммов грибов для размещения в коллекциях необходимо учитывать неоднородность интенсивности биосинтеза нефротоксинов моноконидиальными культурами -у 5 штаммов P.granulatum различия в уровнях накопления цитринина варьировали в разной степени от 5 до 76 мкг/мл.

7. Для расширенной оценки биосинтетической способности грибов разработаны модификации микробиометода, что позволило установить высокий потенциал биосинтеза патулина у доминирующего в кормах вида P. urticae и возможность активного образования циклопиазоновой кислоты у отдельных представителей распространенных видов P.urticae, P.martensii, P.palitans и P.cyclopium.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Васильев, Дмитрий Александрович, 2010 год

1. Боднарчук А.И., Каспрус И.М. Охратоксикоз утят // Ветеринария. 1984. № 2. С. 67-68.

2. Буркин А.А., Кононенко Г.П. Цитринин: первые оценки риска загрязнения кормов в Российской федерации (2003-2005) // Успехи медицинской микологии. М.: Национальная Академия Микологии, 2006. Т. 7. С. 97-98.

3. Буркин А.А., Кононенко Г.П., Кислякова О.С. Актуальность изучения проблемы охратоксикоза в России // Успехи медицинской микологии. М.: Национальная Академия Микологии, 2003. Т. 1. С. 122124.

4. Буркин А.А., Кононенко Г.П., Соболева Н.А. Контаминация зерновых кормов охратоксином А // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2005. № 2. С. 47-49.

5. Дерффель К. Статистика в аналитической химии. М.: Мир, 1994. 268 с.

6. Ерошкин А.А., Пинегина Н.В. Сравнительное изучение токсинообразования вида Aspergillus ochraceus на твердых и жидких питательных средах // Проблемы ветеринарной санитарии и экологии. Сборник научных трудов. 2000. Т. 108. С. 61-68.

7. Ерошкин А.А., Соболева Н.А., Буркин А.А., Кононенко Г.П. Грибы-продуценты охратоксина А в зерновых кормах // Проблемы ветеринарной санитарии и экологии. Сборник научных трудов. 2000. Т. 109. С. 134-144.

8. Кислякова О.С. Изучение патулинобразующей способности культур гриба Byssochlamys nivea Westl., выделенных из проб силоса //

9. Проблемы ветеринарной санитарии и экологии. Сборник научных трудов. 2000. Т. 108. С. 68-72.

10. Кононенко Г.П., Буркин А. А. Иммуноферментный метод определения цитринина // Журнал аналитической химии. 2007. Т. 62. № 7. С. 769-774.

11. Кононенко Г.П., Буркин А.А. Токсинообразующая способность грибов рода Aspergillus и оценка загрязненности циклопиазоновой кислотой кормовой продукции // Микология и фитопатология. 2008. Т. 42. вып. 2. С. 178-184.

12. Кононенко Г.П., Буркин А.А., Зотова Е.В., Соболева Н.А. Охратоксин А: исследование контаминации зерна // Прикладная биохимия и микробиология. 2000. Т. 36. № 2. С. 209-213.

13. Кононенко Г.П., Соболева Н.А. Совершенствование методов определения охратоксина А в кормах на основе иммуноферментного анализа // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2004. №3. С. 38-41.

14. Львова Л.С., Орлова Н.Ю., Омельченко В.Д. Грибы рода Penicillium продуценты охратоксина А в зерне // Прикладная биохимия и микробиология. 1992. Т. 28. вып. 6. С. 889-893.

15. Малиновская Л.С. Распространенность в зерне кукурузы грибов -потенциальных продуцентов микотоксинов // Труды ВНИИВС. 1983. Т. 76. С. 88-97.

16. Малиновская Л.С., Овчинникова Л.П. Распространенность в комбикормах грибов потенциальных продуцентов микотоксинов // Труды ВНИИВС. 1989. Т. 90. С. 122-127.

17. Мирчинк Т.Г., Благовещенский B.C., Федоров В.А. Идентификация токсина, образуемого Penicillium citrinum № 19 и изучение его гербицидных свойств // Микробиология. 1967. Т. XXXVI. вып. 6. С. 1036-1040.

18. Ображей А.Ф. Патулин выделение, идентификация, обнаружение в кормах и токсическое действие на свиней. Автореф. канд. дис. Киев, 1986.

19. Рухляда В.В., Андрийчук А.В. Aspergillus niger продуцент охратоксина А на кормах Украины // Современная микология в России. Т.

20. Материалы 2-го Съезда микологов России. М.: Национальная академия микологии, 2008. С. 261-262.

21. Сизова Т.П. Некоторые закономерности распространения почвенных грибов // Микология и фитопатология. 1977. Т. 11. № 5. С. 377-381.

22. Спесивцева Н.А. Микозы и микотоксикозы. М.: Колос, 1964. 551 с.

23. Тутельян В.А., Кравченко JI.B. Микотоксины (медицинские и биологические аспекты). М.: Медицина, 1985. 319 с.

24. Хмелевский Б.Н., Пилипец З.И., Малиновская Л.С., Костин В.В., Комарницкая Н.П., Иванов В.Г. Профилактика микотоксикозов животных. М.: Агропромиздат, 1985. 271 с.

25. Abarca M.L., Accensi F., Bragulat M.R., Cabanes FJ. Current importance of ochratoxin A-producing Aspergillus spp. // Journal of Food Protection. 2001. Vol. 64. № 6. P. 903-906.

26. Abarca M.L., Bragulat M.R., Castella G., Cabanes F.J. Ochratoxin A production by strains of Aspergillus niger var. niger II Applied and Environmental Microbiology. 1994. Vol. 60. P. 2650-2652.

27. Abarca M.L., Bragulat M.R., Castella G., Accensi F., Cabanes F.J. New ochratoxigenic species in the Aspergillus genus // Journal of Food Protection. 1997. Vol. 60. № 12. P. 1580-1582.

28. Abdelhamid A.M. Occurrence of some mycotoxins (aflatoxin, ochratoxin A, citrinin, zearalenone and vomitoxin) in various Egyptian feeds // Archives of Animal Nutrition. 1990. Vol. 40. № 7. p. 647-664.

29. Abramson D., Mills J.T., Sinha R.N. Mycotoxin production in amber durum wheat stored at 15 and 19% moisture content // Food Additives and Contaminants. 1990. Vol. 7. P. 617-627.

30. Abramson D., Sinha R.N., Mills J.T. Mycotoxin and odor formation in barley stored at 16 and 20% moisture in Manitoba // Cereal Chemistry. 1983. Vol. 60. P. 350-355.

31. Abramson D., Usleber E., Martlbauer E. An indirect enzyme immunoassay for the mycotoxin citrinin // Applied and Environmental Microbiology. 1995. Vol. 61. № 5. P. 2007-2009.

32. Accensi F., Abarca M.L., Cabanes F.J. Occurrence of Aspergillus species in mixed feeds and component raw materials and their ability to produce ochratoxin A // Food Microbiology. 2004. Vol. 21. № 5. P. 623-627.

33. Ahmad D.B., Vairamuthu S. Occurrence of citrinin mycotoxin in compounded feeds and various feed ingredients of poultry ration in Namakkal area (Tamil Nadu) // Indian Journal of Environment and Toxicology. 2000. Vol. 10. №2. P. 84-86.

34. Aran N., Eke D. Mould mycoflora of Kasar cheese at the stage ofУconsumption//Food Microbiology. 1987. Vol. 4. P. 101-104.

35. В ay man P., Baker J.L., Doster M.A., Michailides T.J., Mahoney N.E. Ochratoxin production by the Aspergillus ochraceus group and Aspergillus alliaceus II Applied and Environmental Microbiology. 2002.Vol. 68. № 5. P. 2326-2329.

36. Bennett J.W., Klich M. Mycotoxins // Clinical Microbiology Reviews. 2003. Vol. 16. № 3. P. 497-516.

37. Betina V. Citrinin and related substances // In: Mycotoxins -Production, Isolation, Separation and Purification (V.Betina, ed.), Amsterdam.: Elsevier, 1984. P. 217-236.

38. Betina V., Nemec P., Kutkova M. Izolacia citrinin z Penicillium notatum Westling. // Chemical Papers (Chemicke Zvesti). 1964. - Vol. 18. P.128-139.

39. Bilai V.I. Antibiotic Producing Fungi. Elsevier, 1963. P. 21-23.

40. Blanc P. Red pigments of Monascus //Biofiitur. 1999. № 185. P. 34-36.

41. Blanc P.J., Loret M.O., Goma G. Production of citrinin by various species of Monascus //Biotechnology Letters. 1995. Vol. 17. № 3. P. 291-294.

42. Boley A., Muller H.-M. Production of ochratoxin A, citrinin, and ergosterl by Penicillium viridicatum in autoclaved and non-autoclaved wheat at low temperature // Mycotoxin Research. 1986. Vol. 2. №1. P. 99-103.

43. Bragulat MlR., Abarca M.L., Cabanes F.L. An easy screening method for fungi producing ochratoxin A in pure culture // International Journal of Food Microbiology. 2001. Vol. 71. P. 139-144.

44. Braunberg R.C., Barton C.N., Gantt O.O., Friedman L. Interaction of citrinin and ochratoxin A//Natural Toxins. 1994. Vol.2. №3. P. 124-131.

45. Burkin A.A., Kononenko G.P., Soboleva N.A. Ochratoxin A: enzyme immunoassay for residues in hens // Baltic Journal of Laboratory Animal Science. 2001. Vol. 11. №4. C. 160-167.

46. Chu F.S. Note on solid state fluorescence emission of ochratoxins A and В on silica gel // Journal of the AO AC. 1970. Vol. 53. № 4. P. 696-697.

47. Chu F.S., ButzM.E. Spectrophotofluorodensitometric measurement of ochratoxin A in cereal products // Journal of the AOAC. 1970. Vol. 53. № 6. P. 1253-1257.

48. Chu F.S. Studies in ochratoxins // CRC Critical Review in Toxicology. 1974. Vol. 2. № 4. P. 499-524.

49. Ciegler A. Bioproduction of ochratoxin A and penicillic acid by members of the Aspergillus ochraceus group // Canadian Journal of Microbiology. 1972. Vol. 18. № 5. P. 631-636.

50. Ciegler A., Hou C.T. Isolation of viridicatin from Penicillium palitans // Archives of Microbiology. 1970. Vol. 73. P. 261-267.

51. Ciegler A., Fennel D.J., Mintzlaff H.J., Leistner L. Ochratoxin synthesis by Penicillium species // Naturwissenschaften. 1972. Vol. 59. № 8. P. 365-366.

52. Ciegler A., Pitt J.I. Survey of the genus Penicillium for tremorgenic toxin production // Mycopathologia et Mycologia applicata. 1970. Vol. 42. № 12. P. 119-124.

53. Ciegler A., Vesonder R.F., Jackson L.K. Production and biological activity of patulin and citrinin from Penicillium expansum И Applied and Environmental Microbiology. 1977. Vol. 33. № 4. p. 1004-1006.

54. Cole R.J., Cox R.H. Handbook of Toxic Fungal Metabolites. New York-London-Toronto-Sydney-San Francisco: Academic Press, 1981. 937 p.

55. Curtui V., Usleber E., Dietrich R., Lepschy J., Martlbauer E. A survey on the occurrence of mycotoxins in wheat and maize from western Romania // Mycopathologia. 1998. Vol. 143. № 2. P. 97-103.

56. Damodaran C., Ramadoss S.S., Shanmugasundaram E.R.B. A rapid procedure for the isolation, identification and estimation of citrinin // Analytical Biochemistry. 1973. Vol. 52. P. 482-488.

57. Dietrich R., Usleber E., Martlbauer E., Gareis M. Detection of the nephrotoxic mycotoxin citrinin in foods and food colorants derived from Monascus spp. // Archiv fur Lebensmittelhygiene. 1999. Vol. 50. № 1. P. 17-21.

58. El-Kady I.A. Mycotoxin-production potential of Aspergilli and Penicilli of cereal grains and wheat straw // Naturalia Monspeliensia. 1986. № 50. P. 119-126.

59. El-Kady I.A., Abdel-Mallek A.Y., El-Maraghy S.S.M., Hassan H.A.H. Toxigenic moulds in pesticide treated liquid medium // Cryptogamie, Mycologie. 1994. Vol. 15. № 2. P. 75-81.

60. Eroshkin A.A., Kononenko G.P., Burkin A.A. Ochratoxin A transmission in kidneys and urine of rats under subtoxic dose intake // Baltic Journal of Laboratory Animal Science. 2000. Vol. 10. № 2. C. 79-85.

61. Frank H.K. Citrinin // Zeitschrift fur Ernahrungswissenschaft. 1992. Vol. 31. №3. P. 164-177.

62. Friis P., Hasselager E., Krogh P. Isolation of citrinin and oxalic acid from Penicillium viridicatum Westling and their nephrotoxicity in rats and pigs. // Acta Pathologica, Microbiologica et Immunologica Scandinavica. 1969. Vol. 77. № 4. P. 559-560.

63. Frisvad J.C. Physiological criteria and mycotoxin production as aids in identification of common asymmetric Penicillia II Applied and Environmental Microbiology. 1981. Vol. 41. № 3. P. 568-579.

64. Frisvad J.C. In Stored grain ecosystems (D.Jayas, N.White, W.Muir, eds). New York: Marcel Dekker, 1995, pp. 251-288.

65. Frisvad J.C., Filtenborg O. Classification of terverticillate Penicillia based on profiles of mycotoxins and other secondary metabolites // Applied and Environmental Microbiology. 1983. Vol. 46. № 6. P. 1301-1310.

66. Giridhar P., Reddy S.M. Incidence of mycotoxigenic fungy on raisins // Advances in Plant Sciences. 2001. Vol. 14. № 1. P. 291-294.

67. Hajjaj H., Blanc P.J., Groussac E., Goma G. Improvement of red pigment citrinin production ratio as a function of environmental conditions by Monascus ruber // Biotechnology and Bioengineering. 1999. Vol. 64. № 4. P. 497-501.

68. Hajjaj H., Klaebe A., Goma G., Blanc P.J., Barbier E., Francois J. Medium-chain fatty acids affect citrinin production in the filamentous fungus

69. Monascus ruber II Applied and Environmental Microbiology. 2000. Vol. 66. №3. P. 1120-1125.

70. Hajjaj H., Klaebe A., Loret M.O., Goma G., Blanc P.J. Biosynthetic pathway of citrinin in the filamentous fungus Monascus ruber as revealed by l3C nuclear magnetic resonance // Applied and Environmental Microbiology. 1999. Vol. 65. №1. P. 311-314.

71. Hald В., Krogh P. Analysis and chemical confirmation of citrinin in barley // Journal of the AOAC. 1973. Vol. 56. № 6. P. 1440-1443.

72. Hald В., Christensen D.H., Krogh P. Natural occurrence of the mycotoxin viomellein in barley and the associated quinone-producing Penicillia 11 Applied and Environmental Microbiology. 1983. Vol. 46. № 6. P. 1311-1317.

73. Harwig J., Chen Y.-K. Some conditions favoring production of ochratoxin A and citrinin by Penicillium viridicatum in wheat and barley // Canadian Journal of Plant Science. 1974. Vol. 54. P. 17-22.

74. Heenan C.N., Shaw K.J., Pitt J.I. Ochratoxin A production by Aspergillus carbonarius and A.niger isolates and detection using coconut cream agar // Journal of Food Mycology. 1998. Vol. 1. P. 67-72.

75. Hesseltine C.W., Vandegraft E.E., Fennell D.I., Smith M.L., Showell O.L. Aspergilli as ochratoxin producers //Mycologia. 1972. Vol. 64. P. 539-550.

76. Heussner A.H., Dietrich D.R., O'Brien E. In vitro investigation of individual and combined cytotoxic effects of ochratoxin A and other selected mycotoxins on renal cells // Toxicology in Vitro. 2006. Vol. 20. № 3. P. 332-341.

77. Holzapfel C.W. The isolation and structure of cyclopiazonic acid, a toxic metabolite of Penicillium cyclopium Westling // Tetrahedron. 1968. Vol. 24. P. 2101- 2119.

78. Holzapfel C.W., Wilkins D.C. On the biosynthesis of cyclopiazonic acid//Phytochemistry. 1971. Vol. 10. P. 351-358.

79. IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans. Some naturally occurring substances: food items and constituents, heterocyclic aromatic amines and mycotoxins. Vol.56. Lyon: IARC, 1993.

80. Jabar A., Rachim A. Citrinin from Penicillium steckii Zaleski // Journal of Pharmaceutical Sciences. 1962. Vol. 51. P. 595-596.

81. Jelinek C.F., Pohland A.E., Wood G.E. Worldwide occurrence of mycotoxins in foods and feeds an update // Journal of the AO AC. 1989. Vol. 72. P. 223-228.

82. Jimenez M., Sanehis V., Mateo R., Hernandez E. Penicillium in pre-harvest corn in Valencia (Spain): II. Study of the enzymatic and toxigenic capacities of the species // Mycopathologia. 1986. Vol. 96. № 1. P. 13-18.

83. Jonsyn F.E. Seedborne fungi of sesame (Sesamum indicum L.) in,. Sierra Leone and their potencial aflatoxin/mycotoxin production // Mycopathologia. 1988. Vol. 104. №2. P. 123-127.

84. Kikuchi Y., Ichinoe M. Use of competitive enzyme-linked-immunosorbent assay the aflatoxin production of Aspergillus flavus and Aparasiticus 11 Proceedings of the Japanese Association of Mycotoxicology. 1992. №36. P. 25-30.

85. Kokkonen M., Jestoi M., Rizzo A. The effect of substrate on mycotoxin production of selected Penicillium strains // International Journal of Food Microbiology. 2005. Vol. 99. P. 207-214.

86. Kononenko G.P., Burkin A.A. A survey on the occurrence of citrinin in feeds and their ingredients in Russia // Mycotoxin Research. 2008. Vol. 24. № 1. P. 3-6.

87. Krogh P. Epidemiology of mycotoxic porcine nephropathy // Nordisk Veterinaermedicin. 1976. Vol. 28. P. 452-458.

88. Krogh P., Hald В., Pedersen E.J. Occurrence of ochratoxin A and citrinin associated with mycotoxic porcine nephropathy // Acta Pathologica Microbiologica Scandinavica, Section B. 1973. Vol. 81. P. 689-695.

89. Kuiper-Goodman T. Risk assessment of ochratoxin A: an update // Food Additives and Contaminants. 1996. Vol. 13. P. 53-57.

90. Larsen Т.О., Svedsen A., Smedsgaard J. Biochemical characterization of ochratoxin A producing strains of the genus Penicillium H Applied and Environmental Microbiology. 2001. Vol. 67. № 8. P. 3630-3635.

91. Lillehoj E.B., Goransson B. Occurrence of ochratoxin- and citrinin-producing fungi on developing Danish barley grain // Acta Pathologica et Microbiologica Scandinavica (B). 1980. Vol.88. №3. P.133-137.

92. Lin Y.C., Ayres J.С., Koehler P.E. Effect of temperature cycling on the production of patulin and citrinin // Journal of Food Science. 1981. Vol. 46. P. 974-975.

93. Lugauskas A., Repeckiene J., Levinskaite L., Mackinaite R., Kacergius A., Raudoniene V. Micromycetes as toxin producers detected on raw material of plant origin grown under various conditions in Lithuania // Ekologija. 2006. № 1. P. 1-13.

94. Malir F., Ostry V., Grosse Y., Roubal Т., Skarkova J., Ruprich J. Monitoring the mycotoxins in food and their biomarkers in the Czech Republic // Molecular Nutrition & Food Research. 2006. Vol. 50. № 6. P. 513-518.

95. Marquardt R.R., Frohlich A.A. A review of recent advances in understanding ochratoxicosis // Journal of Animal Science. 1992. Vol. 70. P. 3968-3988.

96. Meister U. Detection of citrinin in ochratoxin A-containing products by a new HPLC method // Mycotoxin Research. 2003. Vol. 19. -№ 1. P. 27-30.

97. Mills J.Т., Abramson D., Frohlich A.A., Marquardt R.R. Citrinin and ochratoxin A production by Penicillium spp. from stored durum wheat // Canadian Journal of Plant Pathology. 1989. Vol. 11. № 4. P. 357-360.

98. Mintzlaff H.-J., Ciegler A., Leistner L. Potential mycotoxin problems in mould-fermented sausage // European Food Research and Technology. 1972. Vol. 150. P. 133-137.

99. Molinie A., Pfohl-Leszkowicz A. Toxic effects of cocontamination of ochratoxin A and citrinin // Drug Metabolism Reviews. 2003. Vol. 35. № 1. P. 77-81.

100. Neely W.C., Ellis S.P., Davis N.D., Diener U.L. Spectroanalytical parameters of fungal metabolites. I. Citrinin // Journal of the AOAC. 1972. Vol.55. №5. P. 1122-1127.

101. Nelson T.S., Beasley J.N., Kirby L.K., Johnson Z.B., Ballam G.C. Isolation and identification of citrinin produced by Penicillium lanosum // Poultry Science. 1980. Vol. 59. № 9. P. 2055 -2059.

102. Nesheim S. Isolation and purification of ochratoxin A and В and preparation of their methyl and ethyl esters // Journal of the AOAC. 1969. Vol. 52. №5. P. 975-979.

103. Neway J., Gaucher G.M. Intrinsic limitations on the continued production of the antibiotic patulin by Penicillium urticae // Canadian Journal of Microbiology. 1981. Vol. 27. P. 206-215.

104. Nishijima M. Survey for mycotoxins in commercial foods// In: Toxigenic Fungi (H.Kurata, Y.Ueno, eds.). Amsterdam: Elsevier, 1984. P. 172-181.

105. Norstadt F.A., McCalla T.M. Patulin production by Penicillium urticae Bainier in batch culture // Applied Microbiology. 1969. Vol. 17. № 2. P. 193-196.

106. Norstadt F.A., McCalla T.M. Growth and patulin formation by Penicillium urticae Bainier in pure and mixed cultures // Plant and Soil. 1971. Vol. 34. P. 97-108.

107. Ono H., Kataoka A., Koakutsu M., Tanaka K., kawasugi S., Wakazawa M., Ueno Y., Manabe M. Ochratoxin A producibility by strains of

108. Aspergillus niger group stored in IFO culture collection // Mycotoxins. 1995. №41. P. 47-51.

109. Pande N., Saxena J., Pandey H. Natural occurrence of mycotoxins in some cereals // Mycoses. 1990. Vol. 33. P. 126-128.

110. Pastrana L., Loret M.O., Blanc P.J., Goma G. Production of citrinin by Monascus ruber submerged culture in chemically defined media // Acta Biotechnologica. 1996. Vol. 16. № 4. P. 315-319.

111. Pfohl-Leszkowicz A., Manderville R.A. Ochratoxin A: An overview on toxicity and carcinogenicity in animals and humans // Molecular Nutrition & Food Research. 2007. Vol. 51. № 1. P. 61-99.

112. Pitt J.I. Penicillium viridicatum, Penicillium verrucosum, and production of ochratoxin A // Applied and Environmental Microbiology. 1987. Vol. 53. №2. P. 266-269.

113. Plestina R. Some features of Balkan endemic nephropathy // Food and Chemical Toxicology. 1992. Vol. 30. P. 177-181.

114. Pohland A.E., Schuller P.L., Steyn P.S. Physicochemical data for some selected mycotoxins // Pure and Applied Chemistry. 1982. Vol. 54. № 11. P. 2219-2284.

115. Pohland A.E., Nesheim S., Friedman L. Ochratoxin A: a review (technical report) // Pure and Applied Chemistry. 1992. Vol. 64. P. 10291046.

116. Pollock A.V. Production of citrinin by five species of Penicillium II Nature (London). 1947. Vol. 160. № 4062. P. 331-332.

117. Poupko R., Luz Z., Destro R. Carbon-13 NMR of citrinin in the solid state and in solutions // Journal of Physical Chemistry A. 1997. Vol. 101. № 28. P. 5097-5102.

118. Pravinda C.M., Girisham S., Reddy S.M. Influence of different seed-borne fungi of rice {Oryza sativa L.) on the production of citrinin by

119. Penicillium citrinum II Journal of Food Technology. India. 1986. Vol. 23. P. 160-162.

120. Raistrick H., Smith G. LXXI. Studies in the Biochemistry of Microorganisms. XLII. The metabolic products of Aspergillus terreus Thorn. A new mould metabolic product terrein. // Biochemical Journal. 1935. Vol. 29. № 3. P. 606-611.

121. Raper K.B., Fennel D.J. The genus Aspergillus. Baltimore: Williams & Wilkins Company, 1965. 686 p.

122. Raper K.B., Thom C.A. A Manual of the Penicillia. Baltimore: Williams & Wilkins Company, 1949. 875 p.

123. Reinhard H., Zimmerli B. Reversed-phase liquid chromatographic behavior of the mycotoxins citrinin and ochratoxin A // Journal of Chromatography A. 1999. № 862. P. 147-159.

124. Reiss J. Studies on the ability of mycotoxins to diffuse in bread. XV. Mycotoxins in foodstuffs // European Journal of Applied Microbiology and Biotechnology. 1981. Vol. 12. № 4. P. 239-241.

125. Rizzo A., Eskola M., Atroshi F. Ochratoxin A in cereals, foodstuffs and human plasma // European Journal of Plant Pathology. 2002. Vol. 108. № 7. P: 631-637.

126. Sabater-Vilar M., Maas R.F.M., Fink-Gremmels J. Mutogenicity of commercial Monascus fermentation products and the role of citrinin contamination II Mutation Research, Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis. 1999. Vol. 444. № 1. P. 7-16.

127. Sansing G.A., Lillehoj E.B., Detroy R.W., Miller M.A. Synergistic toxic effects of citrinin, ochratoxin A and penicillic acid in mice // Toxicology. 1976. Vol. 14. № 2. P. 213-220.

128. Santos I.M., Abrunhosa L., Venancio A,, Lima N. The effect of culture preservation techniques on patulin and citrinin production by Penicillium expansum Link // Letters in Applied Microbiology. 2002. Vol. 35. P. 272-275.

129. Scott P.M., Lawrence J.W., Van Walbeek W. Detection of mycotoxins by thin-layer chromatography: application to screening of fungal extracts // Applied and Environmental Microbiology. 1970. Vol. 20. № 5. P. 839-842.

130. Scott P.M., Van Walbeek W., Kennedy В., Anyeti D. Mycotoxins (ochratoxin A, citrinin and sterigmatocystin) and toxigenic fungi in grains and other agricultural products // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 1972. Vol. 20. №6. P. 1103-1109.

131. Scudamore K.A., Clarke J.H., Hetmanski M.T. Isolation of Penicillium strains producing ochratoxin A, citrinin, xanthomegnin, viomellein and vioxanthin from stored cereal grains // Letters in Applied Microbiology. 1993. Vol. 17. P. 82-87.

132. Sinha B.K., Ranjan K.S., Pandey T.N. Mycotoxins, mycotoxigenic fungy and the biochemical changes in makhana {Euryale ferox Salisb) puffs on North Bihar // Journal of Food Science and Technology (Mysore). 2002. Vol. 39. № 1. P. 38-41.

133. Smedsgaard J. Micro-scale extraction procedure for standardized screening of fungal metabolite production in cultures // Journal Chromatography. 1997. Vol. A760. P. 264-270.

134. Szebiotko K., Chelkowski J., Dopierala G., Godlewska В., Radomyska W. Mycotoxins in cereal grain. I. Ochratoxin, citrinin, sterigmatocystin, penicillic acid and toxigenic fungi in cereal grain // Nahrung. 1981. Vol. 25. P. 415-421.

135. Tandan R.N., Nigam S.S., Agarwal P.N. Biosinthesis of «citrinin» by the fungus Aspergillus candidus Link. // Labdev Journal of Science and Technology. 1969. Ser. B. Vol. 7. P. 263-265.

136. Teren J., Varga J., Hamari Z., Rinyu E., Kevei E. Immunochemical detection of ochratoxin A in black Aspergillus species // Mycopathologia. Vol. 134. P. 171-176.

137. Timonin M.L., Rouatt J.W. Production of citrinin by Aspergillus sp. of the candidus group. // Canadian Journal of Public Health. 1944. Vol. 35. № 2. P. 80-88.

138. Torres M., Canela R., Riba M., Sanchis V. Production of patulin andgriseofulvin by a strain of Penicillium griseofulvum in three different media // Mycopathologia. 1987. Vol. 99. № 2. P. 85-89.

139. Tozlovanu M., Faucet-Marquis V., Molinie A., Castegnaro M. et al., Citrinin enhances the toxic and genotoxic effects of ochratoxin A in vitro and in vivo II Collegium Antropologicum. 2006. Vol. 30. P. 18.

140. Trivedi A.B. Hirota M., Doi E., Kitabataki N. Formation of a new toxic compound , citrinin HI, from citrinin on mild heating in water // Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions. 1993. P. 2167-2171.

141. Trung T.S., Bailly J.D., Querin A., Bars P., Guerre P. Fungal contamination of rice from south Vietnam, mycotoxinogenesis of selected strains and residues in rice // Revue of Medicine Veterinary. 2001. Vol. 152. № 7. P. 555-560.

142. Van der Merwe K.J., Steyn P.S., Fourie L. Mycotoxins. Part II. The constitution of ochratoxins А, В and C, metabolites of Aspergillus ochraceus Wilh. // Journal of the Chemical Society. 1965. P. 7083-7088.

143. Van der Merwe K.J., Steyn P.S., Fourie L., Scott D.B., Theron J.J. Ochratoxin A, a toxic metabolite produced by Aspergillus ochraceus Wilh. // Nature. 1965. Vol. 205. № 4976. P. 1112-1113.

144. Van Walbeek W., Scott P.M., Thatcher F.S. Mycotoxins from food-borne fungi // Canadian Journal of Microbiology. 1968. Vol. 14. P. 131-137.

145. Van Walbeek W., Scott P.M., Harwig J., Lawrence J.W. Penicillium viridicatum Westling: a new source of ochratoxin A // Canadian Journal of Microbiology. 1969. Vol. 15. P. 1281-1285.

146. Varga J., Kevei E., Rinyu E., Teren J., Kozakiewicz Z. Ochratoxin production by Aspergillus species// Applied and Environmental Microbiology. 1996. Vol. 62. № 12. P. 4461-4464.

147. Varga J., Rigo K., Lamper C., Teren J., Szabo G. Kinetics of ochratoxin A production in different Aspergillus species // Acta Biologica Hungarica. 2002. Vol. 53. № 3. P. 381-388.

148. Varga J., Rigo K., Teren J., Mesterhazy A. Recent advances in ochratoxin research I. Production, detection and occurrence of ochratoxins // Cereal Research Communications. 2001. Vol. 29. № 1. P. 85-92.

149. Varga J., Rigo K., Teren J., Mesterhazy A. Recent advances in ochratoxin research II. Biosynthesis, mode of action and control of ochratoxins // Cereal Research Communications. 2001. Vol. 29. № 1. P. 93-100.

150. Vesela D., Vesely D., Jelinek R. Toxic effects of ochratoxin A and citrinin, alone and in combination, on chicken embryos // Applied and Environmental Microbiology. 1983. Vol. 45. № 1. P. 91-93.

151. WHO Food Additives Series. Ochratoxin A, Toxicological evaluation of certain food additives and contaminants. Vol.35. Geneva: WHO, 1996. P. 363-376.

152. Wilson D.M. Citrinin: analysis and occurrence. In: Biodeterioration Research, ed. by G.C.Llewellyn et al., Plenum Press, New York, 1994, P. 65-73.

153. Weidenborner M. Encyclopedia of Food Mycotoxins. Berlin-Heidelberg-New-York: Springer, 2001, 295 p.

154. Yamazaki M., Maebayshi Y., Miyaki K. Production of ochratoxin A by Aspergillus ochraceus isolated in Japan from mouldy rice // Applied Microbiology. 1970. Vol. 20. P. 452-454.

155. Zimmerli В., Dick R., Baumann U. High-performance liquid chromatographic determination of citrinin in cereals using an acid-buffered silica gel column // Journal of Chromatography A. 1989. N 462. P. 406-410.