Получение и стандартизация биологически активных водорастворимых сополимеров на основе N-оксидов пиридина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Ворфоломеева, Елена Викторовна

• Ворфоломеева, Елена Викторовна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Ворфоломеева, Елена Викторовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Классификация современных адъювантов

1.2. Получение Ы-оксидов пиридина

1.3. Применение Ы-оксидов пиридина 40 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 1 42 ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.1.1. Действующее вещество

2.1.2. Исходные и вспомогательные вещества

2.2. Методы исследования

2.2.1. Физико-химические методы анализа Ы-оксида сополимера

2.2.2. Методы контроля качества субстанции Ы-оксида сополимера

2.2.3. Биологические методы

2.2.4. Статистическая обработка данных, валидация аналитических 58 методик

ГЛАВА 3. СИНТЕЗ СОПОЛИМЕРА Ы-ВИНИЛПИРРОЛИДОНА С 2- 59 МЕТИЛ-5-ВИНИЛПИРИДИНОМ И 2-МЕТИЛ-5-ВИНИЛПИРИДИН-Ы-ОКСИДОМ

3.1. Синтез исходного соединения - сополимера Ы-винилпирролидона с 59 2-метил-5-винилпиридином

3.2. Получение Ы-оксида сополимера

3.2.1. Метод контроля степени превращения реакции Ы- 60 оксидирования пиридиновых звеньев

3.2.2. Проведение реакции в уксусной кислоте

3.2.3. Проведение реакции в буферных растворах

3.2.4. Оценка влияния температуры на протекание реакции Ы- 64 оксидирования

3.2.5. Оптимальные условия получения субстанции 69 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 3 72 ГЛАВА 4. СВЯЗЬ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ОТ СТЕПЕНИ 73 ОКСИДИРОВАНИЯ СОПОЛИМЕРА Ы-ВИНИЛПИРРОЛИДОНА И 2-МЕТИЛ-5-ВИНИЛПИРИДИНА

4.1. Изучение антигенной активности

4.2. Определение иммуногенной активности 75 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 4

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА 81 А-ОКСИДА СОПОЛИМЕРА 2 -МЕТИЛ-5 -ВИНИЛПИРИДИНА И А-ВИНИЛПИРРОЛИДОНА

5.1. Специфические методы анализа субстанции

5.1.1. Содержание доли звеньев А-оксида

5.1.2. Содержание доли звеньев 2-метил-5-винилпиридина

5.1.3. Определение молекулярно-массовых характеристик 84 субстанции сополимера А-оксида

5.2. Общие методы анализа субстанции

5.2.1. Показатель подлинность

5.2.2. Родственные примеси 85 5.2.2.1 Ацетаты

5.2.2.2. Перекисные соединения

5.2.2.3. а-пирролидон и А-винилпирролидон

5.2.3. Остаточные органические растворители

5.2.3.1. Бутилацетат и циклогекс ан

5.2.3.2. Четыреххлористый углерод и хлороформ

5.2.4. Количественное определение

5.3. Стабильность субстанции сополимера

5.4. Проект спецификации 107 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 5 111 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 112 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 114 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 115 ПРИЛОЖЕНИЯ 133 Приложение 1. Акт внедрения «Московский технологический 134 университет»

Приложение 2. Акт внедрения ЗАО «Институт фармацевтических 136 технологий»

Приложение 3. Евразийский патент №027934

Приложение 4. Евразийский патент №027979

Приложение 5. Проект НД на субстанцию «Викодон - оксид»

Приложение 6. Протоколы валидации

Приложение 7. Лабораторный регламент на субстанцию 148 Приложение 8. Отчеты по изучению иммуностимулирующего действия 149 и антигенной активности субстанции

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение и стандартизация биологически активных водорастворимых сополимеров на основе N-оксидов пиридина»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность

По данным Роспотребнадзора за 2017 год около 20 % заболеваний, приводящих к летальному исходу, являются инфекционными. В качестве профилактики данной группы заболеваний можно отметить искоренение очага инфекции, введение карантина, повышение сопротивляемости организма и вакцинирование [36].

Вакцинация - создания специфической невосприимчивости к инфекционным заболеваниям путем моделирования естественного инфекционного процесса с благоприятным исходом. В некоторых случаях входящие в состав вакцины, ослабленные или убитые микроорганизмы, обладают слабой иммуногенностью. С целью усиления иммунного ответа со стороны иммунной системы человека в состав современных вакцин вводят различные иммуноадъюванты. Их применение позволяет снизить себестоимость вакцины и свести к минимуму побочные эффекты.

В последнее время получили широкое распространение полимерные иммуноадъюванты: сополимер Ы-оксида 1,4-этиленпиперазина и (Ы-карбоксиметил)-1,4-этиленпиперазиний бромида и сополимер Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина, позволяющие вызвать ранний иммунный ответ, уменьшить токсичность и увеличить антигенную активность вакцины. В качестве иммуноадъюванта в составе гриппозной вакцины хорошо себя зарекомендовал сополимер Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина [26]. Технология получения вакцин ограничивает возможный диапазон рН показателями от 7.0 до 7.6, соответствующий значению рН физиологических жидкостей. В этой области значений рН для сополимера 2-метил-5-винилпиридина и Ы-винилпирролидона (МПВ и Ы-ВП) с высоким значением пиридиновых звеньев наблюдается разделение фаз, что затрудняет стадию фильтрования в технологическом процессе. В работах Кедика С.А. и сотрудников показано, что с ростом числа пиридиновых звеньев в макромолекулах сополимера его иммуноадъювантная активность возрастает, при этом растворимость сополимера в воде уменьшается [13-15]. В литературе описаны

пути увеличения растворимости подобных соединений, одним из которых является модификация сополимеров А-оксидированием пиридиновых звеньев [12]. Таким образом, поиск, получение и стандартизация новых биологически активных иммуноадъювантов с улучшенными технологическими свойствами является актуальной задачей.

Степень разработанности темы

Методики синтеза и химические свойства А-оксидов описаны в монографии Катрицкого А.Р. «Химия гетероциклических А-оксидов» (1971). В работах Нижника Я.П. (2004) и Митянова В.С. (2014) большое внимание уделено методам получения А-оксидов и изучению реакций комплексообразования А-оксидов с различными соединениями. В работе Кацнельсон Б.А. и Алексеева О.Г. (1995) описаны результаты применения А-оксидов пиридина для лечения пневмокониозов.

В работе Кедика С.А. и сотрудников (2012) показана биологическая активность сополимера А-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина, поэтому предполагалось, что А-оксид данного сополимера, сохранит высокую биологическую активность, при улучшенных показателях растворимости. Также в указанных работах отсутствуют какие-либо данные о стандартизации полученных веществ, что не позволяет использовать полученные А-оксиды для фармацевтической промышленности.

Целью работы является синтез растворимых в воде сополимеров А-винилпирролидона с 2-метил-5-винилпиридином, А-оксидированных по пиридиновым звеньям, и исследование их иммуноадъювантной активности.

Для реализации поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

• Выбрать А-оксидирующий агент, позволяющий провести направленный синтез сополимеров.

• Изучить влияние рН и температуры на кинетику реакции А-оксидирования пиридиновых звеньев сополимеров А-винилпирролидона с 2-метил-5-винилпиридином.

• Разработать метод контроля степени превращения реакции Ы-оксидирования пиридиновых звеньев.

• Выбрать оптимальную степень Ы-оксидирования пиридиновых звеньев сополимеров Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина с помощью биологической модели и анализа растворимости полученных производных.

• Разработать методы контроля качества для выбранного сополимера Ы-оксида 2-метил-5-винилпиридина с Ы-винилпирролидоном и провести их валидацию.

• Подготовить проект нормативной документации для субстанции сополимера Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридин-Ы-оксида.

Научная новизна работы

В ходе работы изучена реакция Ы-оксидирования пиридиновых звеньев сополимера Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина. Из литературных и экспериментальных данных выбран оптимальный Ы-оксидирующий агент. Исследовано влияние температуры и рН среды на скорость и полноту протекания реакции. Разработан спектрофотометрический метод контроля полноты протекания реакции, основанный на гипсохромном смещении максимума полосы поглощения. Показано, что данные спектрофотометрического метода хорошо коррелируют с данными, полученными методом 13С ЯМР спектроскопии. Установлена корреляция между степенью Ы-оксидирования пиридиновых звеньев сополимера Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина с иммуноадъювантной активностью и растворимостью. Разработаны методы контроля качества сополимера Ы-винилпирролидона с 2-метил-5-винилпиридин-Ы-оксидом. Проведена сравнительная оценка иммуностимулирующего действия сополимера Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридин-Ы-оксида по величине изменения средне-эффективной иммунизирующей дозы (ЕД50). Теоретическая и практическая значимость • Получена оригинальная субстанция сополимера Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина, Ы-оксидированного по пиридиновым звеньям (Евразийский патент №027934, №027979).

• Подобраны условия синтеза для осуществления контролируемого процесса А-оксидирования и возможного выбора степени превращения вещества.

• При помощи методов 13С ЯМР спектроскопии и УФ-спектрофотометрии проведен анализ структуры сополимеров А-винилпирролидона с 2-метил-5-винилпиридин-А-оксидом.

• Разработаны методы контроля качества субстанции сополимера N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридин-А-оксида (проект нормативной документации (НД), апробированный ЗАО «ИФТ» 23.11.2017) для дальнейшего использования ее в качестве лекарственного средства иммуномодулирующего действия.

• Основные положения диссертации внедрены в учебный процесс кафедры биотехнологии и промышленной фармации ФГБОУ ВО «Московский технологический университет» Министерства образования и науки Российской Федерации (акт внедрения от 12.01.2018).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в рамках НИР кафедры биотехнологии и промышленной фармации ФГБОУ ВО «Московский технологический университет» Министерства образования и науки Российской Федерации (НИР от 09.01.2017 г. № А - 29).

Содержание диссертационной работы соответствует паспорту специальности 14.04.02 - «Фармацевтическая химия, фармакогнозия». Результаты проведённых исследований соответствуют пунктам 1, 2 и 3 паспорта специальности «Фармацевтическая химия, фармакогнозия».

Методология и методы исследования

Методологической основой диссертационного исследования выступали литературные данные, как отечественных, так и зарубежных авторов, позволившие определить оптимальную модель экспериментов и выбрать А-оксидирующий агент. Использованы методы ЯМР-спектроскопия, УФ-спектрофотометрия, рефрактометрия. Математическая и статистическая (Р=95%) обработка данных проводилась в программе Microsoft Excel 365.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Способ модификации сополимеров 2-метил-5-винилпиридина и Ы-винилпирролидона путем Ы-оксидирования.

2. Влияние рН, температуры и концентрации субстанции на реакцию Ы-оксидирования сополимеров 2-метил-5-винилпиридина и Ы-винилпирролидона.

3. Оценка степени превращения реакции Ы-оксидирования сополимеров Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина.

4. Разработка и валидация методов контроля качества сополимера Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридин-Ы-оксида.

5. Корреляция степени превращения сополимеров Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина с его растворимостью в воде и иммуноадъювантной активностью.

Степень достоверности результатов исследования

Достоверность научных положений и выводов определяется достаточными по своему объему данными, современными методами исследования и статистической достоверностью полученных результатов. В работе применено построение математических моделей, использованы методы математического планирования эксперимента. Результаты, полученные при проведении исследований, статистически обработаны и представлены в формулах, таблицах, на рисунках, которые приведены в тексте диссертации.

Апробация работы

Основные положения диссертации обсуждались на II Международной Интернет-конференции «На стыке наук. Физико-химическая серия» (Казань, 2014); VIII международной научно-практической конференции «Современные концепции научных исследований» (Москва, 2014); XI международной научно-практической конференции «Научные перспективы XXI века. Достижения и перспективы нового столетия» (Новосибирск, 2015); X Международной научно-практической конференция «Отечественная наука в эпоху изменений: постулаты прошлого и теории нового времени» (Екатеринбург, 2015); Всероссийской научно -практической конференции «Актуальные вопросы теории и практики современной

биотехнологии» (Луга, 2015); Юбилейных научных чтениях, посвященных 120-летию со дня рождения проф. Н.А. Преображенского (Москва, 2016); VI Всероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы химической науки и фармации» (Чебоксары, 2017).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 1 2 работ, в том числе 5 статей в научных изданиях, рекомендованных ВАК, 2 Евразийских патента, 7 тезисов докладов.

Личный вклад автора

Все экспериментальные результаты, приведенные в диссертации, получены самим автором. Автором разработаны методики количественного определения А-оксида сополимера А-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина и определения посторонних примесей в субстанции. Выявлена корреляция данных, полученных двумя различными методами (13С ЯМР спектроскопия и УФ-спектрофотометрия). Исследования биологической активности А-оксида сополимера А-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина проведены на базе филиала ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава РФ в г. Уфа «Иммунопрепарат» и на базе ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии. Автор разрабатывал и выносил на обсуждение основные идеи диссертационной работы, а также анализировал экспериментальные результаты и их статистически обрабатывал. Самостоятельно проведен обзор и анализ литературы. Автор является основным исполнителем написания публикаций по теме диссертации и разработке проекта нормативной документации.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 152 страницах машинописного текста, содержит 20 таблиц и 73 рисунка. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, экспериментальных исследований, выводов, библиографического списка. Список литературы включает 176 источников, из них 135 работы зарубежных авторов.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Классификация современных адъювантов

Вакцины, по мнению многих исследователей, являются одними из наиболее успешных медицинских мер, направленных против инфекционных заболеваний [101] Разработка новых вакцин, улучшение неоптимальных вакцин и быстрое реагирование на недавно сформировавшиеся патогенны имеет важное прикладное значение, направленное на решение основных проблем клинической практики [112]. При проектировании эффективных вакцин необходимы несколько ключевых элементов. Во-первых, необходим антиген, против которого направлена память иммунного ответа. Особенно важным является его выбор (в тех случаях, когда выбор осуществляется среди множества антигенов, например, для бактериальных патогенов) и презентация (например, когда необходимо сохранить третичную структуру или для индукции конформационно специфичных функциональных антител) [81]. Во-вторых, стимуляция иммунной системы, как известно, играет важную роль в эволюции адаптивного иммунного ответа [103]. Таким образом, включение иммунных усилителей (также называемых адъювантами), которые вызывают ранние врожденные иммунные ответы, способные помочь в генерации надежных и долговечных адаптивных иммунных реакций, имеет решающее значение для эффективности вакцины. Наконец, системы доставки вакцины (как антигена, так и иммунных усилителей) в соответствующие клетки иммунной системы будут гарантировать ее оптимальную стимуляцию [134].

Адъюванты, широко используемые в настоящее время, как для человека, так и для животных по большей части были разработаны эмпирически, без четкого понимания их клеточных и молекулярных механизмов действия [39]. Тем не менее, последние данные показывают, что практически все адъюванты повышают Т- и В-клеточные ответы путем привлечения компонентов иммунной системы, а не путем прямого воздействия на сами лимфоциты [128,129,133].

Адъюванты традиционно используются для увеличения величины адаптивного ответа на вакцины, основанной на титре антител или способности предотвращать инфекцию, но вторая роль адъювантов также становится все более

важной: направление типа адаптационной реакции для получения наиболее эффективной формы иммунитета для каждого конкретного возбудителя. Таким образом, существуют две различные причины включения адъювантов в вакцину.

Первая причина использования адъювантов в клинике:

• увеличение отклика на вакцину в общей популяции с помощью увеличения среднего титра антител и/или доли субъектов, которые становятся иммунизированными;

• увеличение сероконверсии в популяциях с уменьшенной ответной реакцией из-за возраста (как детей, так и пожилых людей), болезней или терапевтических вмешательств, а при использовании адъюванта МР59 для повышения ответа пожилых пациентов на вакцины против гриппа [53, 138];

• содействие использованию небольших доз антигена, так как способность адъюванта вызывать сопоставимые ответы с существенно меньшими количествами антигена, что может быть важно в условиях, когда широкомасштабная вакцинация является срочной и ограниченной по производственной мощности, например, в случае появления пандемического штамма вируса гриппа [18, 52];

• иммунизация с меньшим количеством доз вакцины. Многократные инъекции требуют большого количества вакцины, вызывает в большинстве стран мира значительные логистические проблемы. Адъюванты могут уменьшить число доз, необходимых для достижения защиты [55, 144].

Вторая причина для включения адъюванта в вакцину - достижение качественного изменения иммунного ответа. Для вакцин, находящихся в разработке в настоящее время, адъюванты все чаще применяются для поддержания тех видов иммунитета, которые неэффективно вызваны неадъювантными антигенами [80, 132]. Например, адъюванты используются в доклинических и клинических исследованиях, чтобы:

• обеспечить функционально подходящие типы иммунного ответа, например, клетки Т-хелперы 1 (^1) по сравнению с клетками ^2, Т-клетки CD8+ по сравнению с CD4+, специфические изотипы антител [62];

• увеличить выработку Т-клеточной памяти [82, 123];

• увеличить скорость начальной реакции, которая может иметь решающее значение в вспышках пандемической инфекции [83, 166];

• изменять широту, специфичность или сродство иммунного ответа [104, 111,

126].

Виды адъювантов

Минеральные соли

Соли алюминия, главным образом, гидроксид алюминия или фосфат, были наиболее широко применяемыми в качестве адъювантов для человека [43, 85, 143]. К сожалению, квасцы относительно слабые адъюванты, особенно для активации клеточного иммунного ответа [58, 163, 168].

Механизм, по которому действуют соли алюминия, остается неизвестным, хотя существует предложение, что они работают, образуя депо антигена на месте прививки. Другие возможные механизмы действия могут включать активацию комплемента или эозинофилов, или активацию макрофагов [95, 153].

Когда квасцы вводят подкожно или интрадермально, а не внутримышечно, появляются гранулемы. Другие побочные эффекты квасцов - увеличение количества ^Е, аллергенность и потенциальная нейротоксичность. Обычно алюминий выводится почками, хотя при определенных условиях, таких как пониженная функция почек, алюминий накапливается в организме и может стать токсичным [51].

Высокие уровни алюминия в организме влияют преимущественно на мозг и костные ткани, вызывая фатальный неврологический синдром и диализ-деменцию. Интоксикация алюминием также потенциально связана с боковым амиотрофическим склерозом и болезнью Альцгеймера [54, 86].

Также соли кальция, железа и циркония были использованы для адсорбции антигенов. В частности, фосфат кальция был использован в вакцине от коклюша [59, 96].

Тензоактивные соединения

Quil А является сапонином, полученным из водного экстракта коры Quillaja Saponaria. Фракции, выделенные из этого экстракта с помощью обращено фазовой хроматографии, такие как QS-21, имеют способность индуцировать сильные клеточные ответы против ВИЧ-1 и других патогенпроизводных антигенов [108, 156].

Quil А - натуральный продукт, состоящий из более чем 23 различных сапонинов и является слишком токсичным для человека. В дополнение к тяжелым местным реакциям и гранулемам, токсичность включает тяжелый гемолиз [109, 141].

Производный сапонин QS-21 менее токсичен, чем Quil А, но имеет те же недостатки, что делает его непригодным для активного применения, кроме вакцин от рака, где может быть приемлема высокая токсичность. Однако в относительно низких дозах QS-21 может быть включен в состав вакцин [110].

Адъюванты, производные микроорганизмов

Учитывая сильное иммуностимулирующее действие, бактериальные или грибковые вещества являются продуктивным источником потенциальных адъювантов. Пептидогликан клеточной стенки бактерии или липополисахариды усиливают иммунную реакцию, в то время как сами по себе не являются высоко иммуногенными [49]. Эта адъювантная активность проявляется через возбуждение Toll-подобных рецепторов (TLRs), которые задействуют сигналы опасности, активирующие системы иммунной защиты [50, 160].

Различные виды бактерий используются в качестве источников адъювантов: Neisseria meningitidis, Corynebacterium parvum, Mycobacterium spp., Bordetella pertussis, и C. Granulosum. В целом убитые микроорганизмы слишком токсичны для использования в качестве адъювантов для человека. Однако, по-видимому, основная адъювантная активность этих бактерий возникает из-за входящего в их состав N-ацетил-мурамил L-аланил-D-изоглутамина, также называемого мурамиловым дипептидом (MDP) [100, 121].

В физиологическом растворе MDP усиливает основной гуморальный иммунитет, при включении в липосомы или в смеси с глицерином он вызывает сильный клеточный иммунитет. Соединения с адъювантной активностью, полученные из MDP, включают треонил -MDP [161].

Другой важной группой соединений, полученных из клеточной стенки грамотрицательных бактерий, являются липополисахариды (ЛПС). Основным структурным элементом ЛПС, ответственным за их адъювантный эффект, является липид А. В условиях низкой кислотности, липид А можно гидролизовать с получением монофосфориллипида А (MPL), соединения, которое сохраняет адъювантную активностью липида А с пониженной токсичностью [135]. Другой экстракт из бактериальных стенок - трегалозодимиколят (TDM), адъювант, который стимулирует как гуморальный, так и клеточный ответ. Тот факт, что ДНК микобактерий обладает адъювантной активностью, привел к открытию, что адъювантная активность коррелирует с повышенным содержанием CpG мотивов, присутствующих в бактериальных нуклеиновых кислотах. ДНК, содержащая CpG мотивы, является одним из самых мощных клеточных адъювантов и действует с помощью активации пути Toll-рецептора [122, 170].

Эмульсии

Этот класс включает эмульсии типа вода в масле или масло в воде, например, Montanide, неполный адъювант Фрейнда (FIA), Адъювант 65, или Lipovant. Механизм действия адъювантной эмульсии включает в себя формирование депо в месте инъекции, что обеспечивает медленное высвобождение антигена и стимуляцию клеток плазмы, производящих антитела [102, 151, 158].

В общем, эти адъюванты слишком токсичны для повседневного использования в качестве человеческой профилактической вакцины, хотя они могут быть пригодны для использования в таких случаях, как рак, где сохраняется большая толерантность к побочным эффектам [169, 172].

Частые побочные эффекты эмульсий - воспалительные реакции, гранулемы и язвы в месте инъекции. Разные типы эмульсий были использованы с различными

натуральными маслами, для того, чтобы найти более стабильные, мощные и менее токсичных препараты. Разработаны различные эмульсии, такие как масло в воде и вода в масле в воде, причем последняя, запатентованная как FIA, более стабильная, менее вязкая, ей легче управлять с меньшим образованием гранулем. Montanide -семейство на основе масляных адъювантов, которые были использованы в пробных вакцинах против ВИЧ, малярии и рака молочной железы [105, 113].

Системы доставки крупнодисперсных антигенов

Вместе с эффектом депо существует определенные свойства, которые определяют будет ли система доставки антигена успешной в индукции иммунного ответа. Если это первое требование выполнено, химический состав вакцины определяет, какой тип иммунного ответа будет развиваться, например, какой изотип антител будут продуцировать В-клетки и какие цитокины секретируют Т-клетки [72]. Несколько из наиболее изученных адъювантов могут быть включены в категорию "системы доставки крупнодисперсных антигенов": липосомы, полимерные микросферы, наночастицы, иммуностимулирующие комплексы (ISCOMS), вирусоподобные частицы (VLPs), как наиболее важные из систем доставки антигенов. Эти адъюванты широко используются в качестве носителей субъединиц белка и ДНК-вакцин. Существует обширное понимание их биологических взаимодействий и механизмов действия, связанное с их размерами и химической природой [56, 152].

Липосомы

Липосомы - синтетические сферы, состоящие из липидного бислоя, которые могут инкапсулировать антигены и действовать как в качестве механизма доставки вакцины, так и в качестве адъюванта [44, 147].

Активность липосом напрямую связана с количеством электрического заряда, липидных слоев, способа, с помощью которого они созданы и их состава. Недавние результаты показали, что соединенные с поверхностью липосомальные антигены могут быть применимы для разработки противоопухолевых вакцин для

доставки опухолевых антигенов до антиген-презентирующих клеток (АРС) и индукции противоопухолевой реакции [99, 165, 167].

Хотя липосомы являются одной из наиболее изученных систем доставки антигенов, они по-прежнему являются источником новых результатов по активизации стратегии. Синергетический эффект липосом совместно с ДНК и белком превышает известные адъювантные эффекты плазмидной ДНК. Этот новый подход к вакцинации был назван "ко-доставка" ("codelivery"). Тем не менее, стабильность, производство и обеспечение качества являются основными факторами, препятствующими использованию липосом в качестве адъювантов для человека [120, 157].

Полимерные микросферы

Среди полимерных систем, микросферы на основе сополимера молочной и гликолевой кислот (PLGA) широко изучены. Эти биологически совместимые и деградируемые микросферы размером от 1 до 1000 нм способны включать различные антигены. Одним из их преимуществ является способность манипулировать кинетикой деградации за счет изменения относительной концентрации их компонентов, тем самым управляя временем выпуска антигена [75,76].

Недавно было показано, что альтернативный подход с участием заряженных микрочастиц на основе PLGA с поверхностно адсорбированными антигенами также может быть использован для доставки антигена к APC. Приготовление катионных и анионных микрочастиц PLGA, которые были использованы для адсорбции различных веществ, в том числе плазмидной ДНК, рекомбинантных белков и иммуностимулирующих олигонуклеотидов, приводит к индукции существенно улучшенных иммунных реакций по сравнению с квасцами. Поверхность с адсорбированными препаратами микрочастиц делает возможным альтернативный и оригинальный способ доставки антигенов в вакцинных препаратах [150].

Наночастицы

Твердые инертные частицы с поверхностно-адсорбированным антигеном ранее использовались для стимулирования CD8+ T- клеточных ответов, с оптимальным диаметром 1 мкм. В последнее время использование твердых инертных шариков нанометрового размера (0,04-0,05 мкм), является очень перспективной стратегией для достижения эффективной доставки антигена до антиген-презентирующих клеток (APC), создавая мощный и комбинированный гуморальный и CD8 + Т- клеточный иммунитет [78,79].

Наночастицы, в отличие от квасцов, индуцирует существенный клеточный ответ наряду с умеренным гуморальным ответом в ходе масштабных испытаний на животных. Таким образом, данные адъюванты потенциально полезны для внутриклеточных патогенов в организме человека и животных в лечебных и профилактических целях [142, 154].

Адъюванты ISCOMs® и ISCOMATRIX®

ISCOMs® - крупные частицы размером 40 нм, составленные из сапонинов (Quil А), липидов, холестерина и антигена, удерживаемых вместе гидрофобными взаимодействиями между первыми тремя компонентами. Холестерин является лигандом, который связывается с сапонином, формируя кольца с диаметром 12 нм. Эти кольца скреплены вместе с помощью липидов с образованием сферических наночастиц. Гидрофобные или амфипатические антигены могут быть включены в этот комплекс. Они являются универсальными и гибкими системами доставки с повышенной эффективностью презентации антигена к B - клеткам и поглощения антиген-презентирующих клеток (APC) [69, 136].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Ворфоломеева, Елена Викторовна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авдеева, Ж.И. Вакцины с адъювантами. Доклинические исследования / Ж.И.Авдеева, Н.А.Алпатова, В.П.Бондарев // Биопрепараты. - 2015. №1. - С.15-20.

2. Беленький, Б.Г. Хроматография полимеров / Б.Г.Беленький, Л.З.Виленчик.

- М.: Химия, 1978. - 344 с.

3. Береговых, В.В. Валидация аналитических методик для производителей лекарств / В.В.Береговых. - М.: Литтерра, 2008. - 132 с.

4. Березин, И.В. Инженерная энзимология / И.В. Березин, А.А. Клесов. - М.: Высш. шк., 1987. - 143 с.

5. Богданская, Н. И. Профилактическое действие поливинилпиридин-М-оксида разных молекулярных весов на экспериментальный силикоз / Н.И.Богданская, М.С.Толгская // Гигиена и санитария. - 1973. - №. 4. - С. 102-104.

6. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений, часть 1 «Основные положения и определения».

- М.: Госстандарт России, 2002.

7. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений, часть 2 «Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений». - М.: Госстандарт России, 2002.

8. Государственная фармакопея Российской Федерации. Ч.1. / РФ. - 13-е изд.

- М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2015. - 1470 с.

9. Иоффе, Б.В. Рефрактометрические методы химии / Б.В. Иоффе. - Л.: Химия - 1983. - С. 8 - 10.

10. И 42-2-82. Инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре. - М.: Минздрав РФ, 1982. - 13 с.

11 . Калистратов, Г. В. Противолучевые и другие биологические свойства сополимера 2-метил-5-винил-пиридина и М-винилпирролидона / Г.В. Калистратов, С.А. Кедик, В.И. Свергун // Мед. Радиология. - 1993. - №. 10. - С. 21-25.

12. Катрицкий, А. Химия гетероциклических соединений. / А.Катрицкий, Дж.Лаговская пер. с англ. В. С. Володиной. - М.: Издатинлит, 1963. - 288 с.

13. Кедик, С.А. Количественное определение соотношения мономерных звеньев в сополимерах Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина методом спектрофотометрии / С.А.Кедик, Д.В.Еремин, Ю.В.Кочкина // Вестник МИТХТ. -2014. - № 9. - С. 64-67.

14. Кедик, С.А. Синтез и молекулярно-массовые характеристики сополимеров Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина / С.А.Кедик, А.В.Панов, И.В.Сакаева // Химико-фармацевтический журнал. - 2012. - №8. -С.110-113.

15. Кедик, С.А. Количественное определение в водных растворах физиологически активных сополимеров Ы-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина / С.А.Кедик, А.В.Панов, И.В.Сакаева // Химико-фармацевтический журнал. - 2013. - №10. - С.54-56.

16. Кирш, Ю.Э. Поли-Ы-винилпирролидон и другие поли-Ы-виниламиды: синтез и физико-химические свойства / Ю.Э.Кирш. - М.: Наука, 1988. - 252 с.

17. Краснюк, И. И. Фармацевтическая технология: Технология лекарственных форм: учеб. для студ. высш. учеб. заведений / И. И. Краснюк, С. А. Валевко, Г. В. Михайлова; под ред. И. И. Краснюка, Г. В. Михайловой. — М.: Издательский центр «Академия», 2006. - 592 с.

18. Лусс, Л.В. Роль полиоксидония как иммуномодулятора и иммуноадъюванта при профилактике гриппа / Л.В.Лусс // Москва медицинский совет. - 2013. - №8. - С. 50 - 54.

19. Мертвецов, Н.П. Современные подходы к конструированию молекулярных вакцин / Н.П. Мертвецов, А.Б Беклемишев, И.М. Савич. -Новосибирск.: Наука Сиб, 1987. - 208 с.

20. Миронов, А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / А.Н. Миронов, Н.Д. Бунатян. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

21. Манабу, С. Полимеры медицинского назначения / С.Манабу - М.: Медицина, 1981. - 248 с.

22. Основы аналитической химии. В 2 т. Т. 1: учеб. для студ. учреждений высш. проф. образования / Т.А.Большова и др; под ред. Ю.А.Золотова. - 5-е изд., стер. - М.: Издательский центр «Академия», 2012. - 384 с.

23. Патент РФ на изобретение № 2000004. Сополимеры 2-метил-5-винилпиридина и М-винилпирролидона, обладающие иммуностимулирующим действием / С. А. Кедик, Е. К. Федоров, В. И. Свергун, В. А. Гаврилов, М. М. Зубаитов // заявка от 16.07.1992, опубл. 15.02.1993. - Бюлл. № 6.

24. Патент РФ на изобретение № 2268067. Вирусные вакцины / А. В. Некрасов, Н. Г. Пучкова, А. С. Иванова, Р. В. Петров, Р. М. Хаитов // заявка от 09.06.2003, опубл. 10.12.2004. - Бюлл. № 15.

25. Патент РФ на изобретение № 2430932. Сополимеры 2-метил-5-винилпиридина и М-винилпирролидона, активирующие продуцирование интерлейкина-1, и их применение в качестве противораковых агентов / С. А. Кедик, А. В. Панов, М. А. Зайцев, Ю. В. Черта // заявка от 29.10.2010, опубл. 10.10.2011. -Бюлл. № 28.

26. Патент РФ на изобретение № 2446824. Вакцина против гриппа и способ ее получения / М.М.Алсынбаев, Н.В.Загидуллин, С.А.Кедик // заявка от 20.07.2014, опубл. 10.04.2012. - Бюлл. № 10.

27. Патент РФ на полезную модель №110743. Установка для получения сополимеров на основе М-винилпирролидона / С. А. Кедик, А. В. Панов, Ю. В. Черта, Д. В. Еремин, И. В. Сакаева, Ю. А. Котова // заявка от 08.07.2011, опубл. 27.11.2011. - Бюлл. № 33.

28. Патент СССР на изобретение № 927803. М-оксиды амидов полиметакриловой кислоты, обладающие способностью ингибировать цитоксическое и фиброгенное действие свободной двуокиси кремния / С.Н.Бородулина, И.Я.Постовский, Г.В.Аронова // заявка от 11.02.1980, опубл.15.05.1982. - Бюлл. № 18.

29. Платэ, Н.А. Физиологически активные полимеры / Н.А.Платэ, А.Е.Васильев. - М.: Химия, 1986. - 296 с.

30. Пожарский, А.Ф. Теоретические основы химии гетероциклов / А.Ф.Пожарский. - М.: Химия, 1985. — 279 с.

31 . Правила организации производства и контроля качества лекарственных средств. Приказ от 14.06.2013 г. № 916 Министерства промышленности и торговли Российской Федерации.

32. Рудаков, О.Б. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии / О.Б.Рудаков, И.А.Востров, С.В.Федоров. - Воронеж: Водолей, 2004. - 528 с.

33. Сидельковская, Ф.П. Химия Ы-винилпирролидона и его полимеров / Ф.П.Сидельковская. - М.: Наука, 1970. - 150 с.

34. Сергеев, В.А. Вирусы и вирусные вакцины / В.А. Сергеев, Е.А. Непоклонов, Т.И. Алипер. - Сергеев М.: Библионика, 2007. - 524 с.

35. Толстиков, Г.А. Реакции гидроперекисного окисления / Г.А.Толстиков. -М.: Наука, 1976. - 200 с.

36. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека РОСПОТРЕБНАДЗОР http://rospotrebnadzor.ru/activities/statistical-materials/statictic_details.php? ЕЬЕМЕОТ_ГО = 9055

37. Федоров, Е.К. Радикальная сополимеризация Ы-винилпирролидона с винилпиридинами при их постоянном соотношении в реакционной массе / Е.К.Федоров, О.Е.Лобанов, Л.Ф.Мосалова // Высокомолекулярные соединения А.

- 1994. - №9. - С. 1446 - 1451.

38. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У.Хабриев. - М.: Медицина, 2005.

- 832 с.

39. Хаитов, Р.М. Вакцины нового поколения и проблемы биобезопасности / Р.М.Хаитов // Журнал Цитокины и воспаление. - 2005. - №. 3. - С 70-75.

40. Царев, Н.И. Практическая газовая хроматография: учебно-методическое пособие для студентов химического факультета по спецкурсу «Газохроматографические методы анализа» / Н.И.Царев, В.И.Царев, И.Б.Катраков.

- Барнаул: Издательство Алтайского государственного университета, 2000. - 84 с.

41. Эндерфильд, Р. Гетероциклические соединения, том 1 / Р.Эндерфильд, перевод с англ. под ред. Ю. К. Юрьева. - Москва: Изд-во иностранной литературы, 1953. - 556 с.

42. Abramovitch, R.A. Pyridine and Its Derivatives, part two / R.A.Abramovitch.

- New York: John Wiley & Sons, Inc., 1974. — 661 p.

43. Allison, A.C. Immunological adjuvants: desirable properties and side effects / A.C. Allison, N.E. Byars // Mol Immunol - 1991. - V. 28. - P. 279- 284.

44. Allison, A.C. Liposomes as immunological adjuvants / A.C. Allison, G.Gregoriadis // Nature - 1974. - V. 252. - P. 252-258.

45. Aguilar, J.C. Development of a nasal vaccine for chronic hepatitis B infection that uses the ability of hepatitis B core antigen to stimulate a strong Th1 response against hepatitis B surface antigen / J.C. Aguilar, Y. Lobaina, V. Muzio, D Garcia, E Penton, E Iglesias // Immunol Cell Biol - 2004. - V. 82. - P. 539-546.

46. Anders, H.J. A toll for lupus / H.J Anders // Lupus - 2005. - V. 14. - P. 417422.

47. Anders, H.J. Activation of toll-like receptor-9 induces progression of renal disease in MRL-Fas (lpr) mice / H.J.Anders, V.Vielhauer, V.Eis // FASEB J - 2004. - V. 18. - P. 534-536.

48. Antonis, A.F. A novel recombinant virus-like particle vaccine for prevention of porcine parvovirus-induced reproductive failure / A.F.Antonis, C.J.Bruschke, P.Rueda, L.Maranga, J.I.Casal, C. Vela // Vaccine - 2006. - V. 24. - P. 5481-5490.

49. Audibert, F. Distinctive adjuvanticity of synthetic analogs of mycobacterialwater-soluble components / F.Audibert, L.Chedid, P.Lefrancier, J.Choay // Cell Immunol. - 1976. - V. 21. - P. 243-245.

50. Audibert, F. Muramyl peptides as immunopharmacological response modifiers. Biological response moodifiers. Newapproaches to disease prevention / F.Audibert, C.Leclerc, L.Chedid; In editor: P.F.Torrence. - Orlando: Academic Press, 1985. - 307p.

51. Audibert F. Adjuvants: current status, clinical perspectives and future prospects / F.Audibert, L.D.Lise // Immunol Today. - 1993. - V. 14. - P. 281-284.

52. Banzhoff, A. MF59-adjuvanted H5N1 vaccine induces immunologic memory and heterotypic antibody responses in non-elderly and elderly adults/ A. Banzhoff, R. Gasparini, F. Laghi-Pasini, T. Staniscia, P. Durando, E. Montomoli, P.L.Capecchi, P.di Giovanni, L. Sticchi, C. Gentile // PLoS ONE - 2009. - V. 4. - P.4384.

53. Beran, J. Safety and immunogenicity of a new hepatitis B vaccine for the protection of patients with renal insufficiency including pre-haemodialysis and haemodialysis patients/ J. Beran //Expert Opin. Biol. Ther. - 2008. - V. 8. - P.235-247.

54. Bomford, R.H.R. The differential adjuvant activity of Al(OH)3 and saponin / R.H.R. Bomford // Immunopharmacology of infectious diseases: vaccine adjuvants and modulators of non-specific resistance - 1987. - V. 1. - P. 65- 70.

55. Boyle, J. The utility of ISCOMATRIX adjuvant for dose reduction of antigen for vaccines requiring antibody responses / J. Boyle, D. Eastman, C. Millar, S. Camuglia, J. Cox, M. Pearse, J. Good, D. Drane // Vaccine - 2007. - V. 25. - P. 2541-2544.

56. Bramwell, V.W. Particulate delivery systems for vaccines / V.W.Bramwell, Y.Perrie // Crit Rev Ther Drug Carrier Syst - 2005. - V. 22. - P. 151-214.

57. Bradney, C.P. Cytokines as adjuvants for the induction of anti-human immunodeficiency virus peptide immunoglobulin G (IgG) and IgA antibodies in serum and mucosal secretions after nasal immunization / C.P.Bradney, G.D.Sempowski, H.X.Liao, B.F.Haynes, H.F.Staats // J Virol - 2002. - V. 76. - P. 517-524.

58. Brewer, J.M. In interleukin-4-deficient mice, alum not only generates T helper 1 responses equivalent to Freund's complete adjuvant, but continues to induce T helper 2 cytokine production / J.M. Brewer, M. Conacher, A. Satoskar, H. Bluethmann, J. Alexander // Eur J Immunol - 1996. - V. 26. - P. 2062-2066.

59. Butler, N.R. Advantages of aluminum hydroxide adsorbed diphtheria, tetanus and pertussis vaccines for the immunization of infants / N.R.Butler, M.A.Voyce, W.L. Burland, M.L. Hilton // Br Med J - 1969. - V. 1. - P. 663-666.

60. Chunli, L. Synthesis of 2-substituted pyridines from pyridine M-oxides / L.Chunli, L.Jiang, X.Lingli // Arkivoc. - 2013. - V. i. P. 154-155.

61. Colonna, M. Aromatic M-oxides. Action of organomagnesium derivatives / M.Colonna // Gazz. Chim. Ital. - 1953. - V.83. P.58 - 61.

62. Coffman, R.L. Vaccine adjuvants: putting innate immunity to work / R.L. Coffman, A. Sher, R. A. Seder // Immunity. - 2010. - V. 29. - P. 492-503.

63. Cooper, P.D. Vaccine adjuvants based on gamma inulin / P.D.Cooper; In: M.F.Powell, M.J.Newman editors. Vaccine design: the subunit and adjuvant approach. New York: Plenum Press, 1995. - p. 559-580.

64. Cooper, P.D. Vaccine adjuvants based on gamma inulin / P.D.Cooper // Pharm Biotechnol. - 1995. - V.6. - P. 559-580.

65. Cooper, P.D. The adjuvanticity of algammulin, a new vaccine adjuvant / P.D.Cooper, C.McComb, E.J.Steele // Vaccine. - 1991. - V. 9. - P. 408-415.

66. Cooper, P.D. Algammulin: a new vaccine adjuvant comprising gamma inulin particles containing alum, preparation and in vitro properties / P.D.Cooper, E.J.Steele // Vaccine. - 1991. - V.9. - P. 351-357.

67. Cornelie, S. Direct evidence that toll-like receptor 9 (TLR9) functionally binds plasmid DNA by specific cytosine-phosphate-guanine motif recognition / S.Cornelie, J.Hoebeke, A.M.Schacht, B.Bertin, J.Vicogne, M.Capron // J Biol Chem. - 2004. - V. 279. - P. 15124-15129.

68. Cornelie, S. Methylated CpG-containing plasmid activates the immune system / S.Cornelie, O.Poulain-Godefroy, C.Lund, C.Vendeville, E.Ban, M.Capron // Scand J Immunol. 2004. - V.59. - P.143-151.

69. Cox, E. Adjuvants modulating mucosal immune responses or directing systemic responses towards the mucosa / E.Cox, F.Verdonck, D.Vanrompay, B.Goddeeris // Vet Res. - 2006. - V. 37. - P. 511-539.

70. Davies, I.W. General Annulation Strategy for the Preparation of Pyridine NOxides / I.W.Davies, J.Marcoux, P.Reider // American Chemical Society. Org. Lett. 3. 2001. - V. 2. - P.209-211.

71. Datta, S.K. Antigenimmunostimulatory oligonucleotide conjugates: mechanisms and applications / S.K.Datta, H.J. Cho, K.Takabayashi, A.A.Horner, E.Raz // Immunol Rev. - 2004. - V.199. - P. 217-226.

72. Dalsgaard, K. Adjuvants / K.Dalsgaard // Vet Immunol Immunopathol - 1987.

- V. 17. - P.145 - 153.

73. Dell, K. Intranasal immunization with human papillomavirus type 16 capsomeres in the presence of non-toxic cholera toxin-based adjuvants elicits increased vaginal immunoglobulin levels / K.Dell, R.Koesters, M.Linnebacher, C.Klein, L.Gissmann // Vaccine. - 2006. - V. 24. - P. 2238-2247.

74. Egan, M.A. The use of cytokines and chemokines as genetic adjuvants for plasmid DNA vaccines / M.A.Egan, Z.R.Israel // Clin Appl Immunol Rev. - 2002. V. 2.

- P. 255-287.

75. Eldrige, J.H. Biodegradable and biocompatible poly (dl-lactide-co-glycolide) microspheres as an adjuvant for Staphylococcal enterotoxin B toxoid which enhances the level of toxin-neutralizing antibodies / J.H.Eldrige, J.K.Staas, J.A.Meulbroek // Infect Immun. - 1991. - V. 59. - P. 2978-2983.

76. Eldrige, J.H. Biodegradable microspheres as a vaccine delivery system / J.H. Eldrige, J.K.Staas, J.A.Meulbroek // Mol Immunol. - 1991. V. 28. - P. 287-290.

77. European pharmacopoeia 7.5 Index, 2011.

78. Falo, Jr L.D. Targeting antigen into the phagocytic pathway in vivo induces protective tumour immunity / Jr L.D.Falo, M. Kovacsovics-Bankowski, K.Thompson, K.L.Rock // Nat Med. - 1995. - V.1. - P. 649-653.

79. Fifis, T. Size-dependent immunogenicity: therapeutic and protective properties of nano-vaccines against tumors / T.Fifis, A.Gamvrellis, B.Crimeen-Irwin, G.A.Pietersz, J.Li, P.L.Mottram // J Immunol. - 2004. - V. 173. - 3148-3154.

80. Freestone, D.S. Antibody responses and resistance to challenge in volunteers vaccinated with live attenuaded detergent split and oil adjuvant A2/Hong Kong/68

(H3N2) influenza vaccines / D.S.Freestone, S.Hamilton-Smith, G.C.Schild, R.Buckland, S.Chinn, D.A.J.Tyrrel // J Hyg (Camb). - 1972. - V. 70. - P. 351-355.

81. Freund, J. The mode of action immunological adjuvants / J.Freund // Adv Tuberc Res. - 1956. - V. 7. - 50-55.

82. Galli, G. Adjuvanted H5N1 vaccine induces early CD4+ T cell response that predicts long-term persistence of protective antibody levels / G.Galli, D.Medini, E.Borgogni, L.Zedda, M.Bardelli, C.Malzone, S.Nuti, S.Tavarini, C.Sammicheli, A.K.Hilbert // Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 2009. - V. 106. - P. 3877- 3882.

83. Galli, G. Fast rise of broadly cross-reactive antibodies after boosting long-lived human memory B cells primed by an MF59 adjuvanted prepandemic vaccine / G.Galli, K.Hancock, K.Hoschler, J.DeVos, M.Praus, M.Bardelli, C.Malzone, F.Castellino, C.Gentile, T.McNally // Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 2009. - V. 106. - P. 7962- 7967.

84. Giannini, S.L. Enhanced humoral and memory B cellular immunity using HPV16/18 L1 VLP vaccine formulated with the MPL/aluminium salt combination (AS04) compared to aluminium salt only / S.L.Giannini, E.Hanon, P.Moris, M.van Mechelen, S.Morel, F.Dessy // Vaccine. - 2006. - V. 24. - P. 5937-5949.

85. Glenny, A.T. The antigenic value of toxoid precipitated by potassium-alum / A.T.Glenny, C.G.Pope, H.Waddington, V.Wallace // J Path Bact. - 1926. - V. 29. - P. 38- 45.

86. Goto, N. Studies on the toxicities of aluminium hydroxide and calcium phosphate as immunological adjuvants for vaccines / N.Goto, H.Kato, J-I.Maeyama // Vaccine. - 1993. V. 11. - P.914-918.

87. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.10 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Pergamon, 1998. - 360p.

88. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.11 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Pergamon, 1999. - 358p.

89. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.12 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Pergamon, 2000. - 376p.

90. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.13 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Pergamon, 2001. - 400p.

91. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.14 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Pergamon, 2002. - 376p.

92. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.15 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Pergamon, 2003. - 385p.

93. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.21 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Elsevier, 2010. - 411p.

94. Gribble, G.W. Progress in Heterocyclic Chemistry vol.23 / G.W.Gribble, T.L.Gilchrist (eds.). - London, N.Y: Elsevier, 2011. - 387p.

95. Gupta, R.K. Adjuvant properties of aluminium and calcium compounds. Vaccine design: the subunit and adjuvant approach / R.K.Gupta M.F. Powell, M.J. Newman, B.E. Rost, E. Relyveld, G.R.Siber // NewYork: Plenum Press - 1995. -P. 229

- 248.

96. Gupta, R.K. Adjuvant fot human vaccines-current status, problems and future prospects / R.K. Gupta, G.R. Siber // Vaccine. - 1995. V. 13. - P. 1263-1270.

97. Gursel, I. Repetitive elements in mammalian telomeres suppress bacterial DNA induced immune activation / I.Gursel, M.Gursel, H.Yamada, K.J.Ishii, F.Takeshita, D.M.Klinman // J Immunol. - 2003. - V. 171. - P. 1393-1400.

98. Harper, D.M. Efficacy of a bivalent L1 virus-like particle vaccine in prevention of infection with human papillomavirus types 16 and 18 in young women: a randomised controlled trial / D.M.Harper, E.L.Franco, C.Wheeler, D.G.Ferris, D.Jenkins, A.Schuind // Lancet. - 2004. - V. 364. - 1757-1765.

99. Heath, T.D. The adjuvant properties of liposomes / T.D.Heath, D.C.Edwards, B.E.Ryman // Biochem Soc Trans. - 1976. - V. 4. - P. 49-52.

100. Heufler, C. Granulocyte/macrophage colonystimulating factor and interleukin 1 mediate the maturation of murine epidermal Langerhans cells into potent immunostimulatory dendritic cells / C.Heufler, F.Koch, G.Schuler // J Exp Med. - 1988.

- V.167. - P. 700-705.

101. Hilleman, M.R. Vaccines in historic evolution and perspective: a narrative of vaccine discoveries / M.R. Hilleman// Vaccine. - 2000. - V.18. - P. 1436-1447.

102. Hilleman, M.R. Studies for safety of adjuvant 65 / M.R.Hilleman, A.F.Woodhour, A.Friedman, A.H.Phelps // Ann Allergy. - 1972. -V. 30. - P. 477-480.

103. Hoebe, K. The interface between innate and adaptive immunity / K.Hoebe, E.Janssen, B.Beutler // Nat. Immunol. - 2004. - V.5. - P. 971-974.

104. Huleatt, J.W. Vaccination with recombinant fusion proteins incorporating Toll-like receptor ligands induces rapid cellular and humoral immunity / J.W.Huleatt, A.R.Jacobs, J.Tang, P.Desai, E.B.Kopp, Y.Huang, L.Song, V.Nakaar, T.J.Powell // Vaccine. - 2007. - V. 25. - P. 763- 775.

105. Jones, G.L. Peptide vaccine derived from a malarial surface antigen: effect of dose and adjuvant on immunogenicity / G.L.Jones // Immunol Lett. - 1990. - V. 24. P. 253-260.

106. Katritzky, A.R. Six-membered Rings with One Heteroatom / A.R.Katritzky // Heterocyclic Chemistry III. - 2008. - V. 7. P. - .

107. Katritzky, A.R. Chemistry of the Heterocyclic M-oxides / A.R.Katritzky, J.M.Lagowski. — London, N.Y.: Acad. Press, 1971. - 587p.

108. Kensil, C.R. Saponins as vaccine adjuvants / C.R. Kensil // Crit Rev Ther Drug Carrier Syst - 1996. - V. 13. - P. 1- 55.

109. Kensil, C.R. Separation and characterization of saponins with adjuvant activity from Quillaja saponaria Molina cortex / C.R. Kensil, U. Patel, M. Lennick, D. Marciani // J Immunol. -1991. - V. 146. - P. 431-437.

110. Kensil, C.R. Structural and immunological characterization of the vaccine adjuvant QS-21 / J-Y. Wu, S. Soltysik, Vaccine design: the subunit and adjuvant approach. - New York: Plenum Press, 1995. C. 525-541.

111. Khurana, S. Vaccines with MF59 adjuvant expand the antibody repertoire to target protective sites of pandemic avian H5N1 influenza virus / S. Khurana, W. Chearwae, F. Castellino, J. Manischewitz, L.R. King, A. Honorkiewicz, M.T. Rock, K.M. Edwards, G. Del Giudice, R. Rappuoli, H. Golding // Sci. Transl. Med. - 2010. - V. 2. -P. 15-ra5.

112. Kieny, M.P. Research and development of new vaccines against infectious diseases / M.P. Kieny, J.L. Excler, M. Girard // Am J. Public Health. - 2004. - V.94. - P. 1931-1935.

113. Kimura, J. Studies on the adjuvant effect of water-in-oil-in-water emulsion in sesame oil. I. Enhanced and persistent antibody formation by antigen incorporated into the water-in-oil-in-water emulsion / J.Kimura, H.Nariuchi, T.Watanabe, T.Matuhasi, I.Okayasu, S.Hatakeyama // Jpn J Exp Med. - 1978. - V. 48. - P.149-152.

114. Klingsberg, E. Pyridine and Its Derivatives, part two. / E. Klingsberg. - New Jersey, 1961. - 583 p.

115. Klinman, D.M. Immunotherapeutic uses of CpG oligodeoxynucleotides / D.M. Klinman // Nat Rev Immunol. - 2004. - V. 4(4). - P.249-258.

116. Kotani, S. Immunoadjuvant activities of cells walls, their water-soluble fractions and peptidoglycan subunits, prepared from various gram-positive bacteria, and of synthetic A^acetylmuramyl peptides / S. Kotani, Y. Watanabe, T. Shimoto, T. Narita, K. Kato, D.E.S. Stewart-Tull // Z Immunitatsforsch. - 1975. - V.149S. - P. 302-305.

117. Krieg, A.M. CpG motifs in bacterial DNA and their immune effects / A.M. Krieg // Annu Rev Immunol. - 2002. - V. 20. - P.709-760.

118. Krieg, A.M. Sequence motifs in adenoviral DNA block immune activation by stimulatory CpG motifs / A.M.Krieg, T.Wu, R.Weeratna, S.M.Efler, L.Love-Homan, L.Yang // Proc Natl Acad Sci USA. - 1998. - V. 95(21). - P. 12631-12636.

119. Kundig, T.M. Der p 1 peptide on virus-like particles is safe and highly immunogenic in healthy adults / T.M.Kundig, G.Senti, G.Schnetzler, C.Wolf, B.M.Prinz Vavricka, A.Fulurija // J Allergy Clin Immunol. - 2006. - V. 117. - P. 1470-1476.

120. Laing, P. The 'co-delivery' approach to liposomal vaccines: application to the development of influenza-A and hepatitis-B vaccine candidates / P.Laing, A.Bacon, B.McCormack, G.Gregoriadis, B.Frisch, F.Schuber // J Liposome Res. - 2006. - V. 16. - P. 229-235.

121. Leclerc, C. Synthetic immunomodulators and synthetic vaccines / C.Leclerc, F.Vogel // CRC Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. - 1986. - V. 2. - P. 353-357.

122. Lemaire, G. Natural and synthetic trehalose diesters as immunomodulators / G.Lemaire, J.P.Tenu, J.F.Petit, E.Lederer // Med Res Rev. - 1986. - V.6. - P. 243.

123. Leroux-Roels, I. Priming with AS03 A-adjuvanted H5N1 influenza vaccine improves the kinetics, magnitude and durability of the immune response after a heterologous booster vaccination: An open non-randomised extension of a doubleblind randomised primary study / I.Leroux-Roels, F.Roman , S.Forgus, C.Maes, F.De Boever, M.Drame, P.Gillard, R.van der Most, M.Van Mechelen, E.Hanon, G.Leroux-Roels // Vaccine. - 2010. - V.28. - P. 849- 857.

124. Lobaina, Y. Immunological characterization of two hepatitis B core antigen variants and their immunoenhancing effect on co-delivered hepatitis B surface antigen / Y.Lobaina, D.Palenzuela, D.Pichardo, V.Muzio, G.Guillen, J.C.Aguilar // Mol Immunol. - 2005. - V. 42. - P. 289-294.

125. Lynch, J.M. Increased protection against pneumococcal disease by mucosal administration of conjugate vaccine plus interleukin-12 / J.M.Lynch, D.E.Briles, D.W.Metzger // Infect Immun. - 2003. - V. 71. - P. 4780-4788.

126. Malherbe, L. Vaccine adjuvants alter TCR-based selection thresholds / L.Malherbe, L.Mark, N.Fazilleau, L.J.McHeyzer-Williams, M.G.McHeyzerWilliams // Immunity. - 2008. - V. 28. - P. 698- 709.

127. Marshall, J.D. Superior activity of the type C class of ISS in vitro and in vivo across multiple species / J.D.Marshall, K.L.Fearon, D.Higgins, E.M.Hessel, H.Kanzler, C.Abbate // DNA Cell Biol. - 2005. - V. 24. - P. 63-72.

128. McCartney, S. Distinct and complementary functions of MDA5 and TLR3 in poly (I:C)-mediated activation of mouse NK cells/ S. McCartney, W. Vermi, S. Gilfillan // J. Exp. Med. - 2009. - V.206. - P.2967 - 2976.

129. McKee, A.S. How do adjuvants work? Important considerations for new generation adjuvants/ A.S. McKee, M.W. Munks, P. Marrack // Immunity. - 2007. -V.27. - P.687 - 690.

130. Nakamura, I. Copper-Catalyzed Tandem [2,3]-Rearrangement and 6n-3-Azatriene Electrocyclization in (E)-O-Propargylic a,P-Unsaturated Oximes / I.Nakamura // JASC. - 2010. - P.132

131. Ochiai, E. Recent Japanese Work on the Chemistry of Pyridine 1 -Oxide and Related Compounds / E.Ochiai - Tokyo. - 1952. P. 2-3.

132. O'Hagan, D. T. Vaccine Adjuvants. Preparation Methods and Research Protocols / T. O'Hagan Derek // New Jersey: Humana Press Totowa, 2000. - 353 p.

133. O'Hagan, D.T. The path to a successful vaccine adjuvant-«The long and winding road» / D.T. O'Hagan, E. De Gregorio. // Drug Discov. Today. - 2009. - V.14. - P. 541-551.

134. O'Hagan, D.T. Recent developments in vaccine delivery systems, in New Generation Vaccines 2nd edn / D.T. O'Hagan, M.M. Kaper, J.B. Rappuoli // Marcel Dekker. - 2004. - V.43. - P. 259-270.

135. Parant, M.A. Immunostimulant activities of a lipophilic muramyl dipeptide derivative and of a desmuramyl peptidolipid analogue / M.A.Parant, F.M.Audibert, L.A.Chedid, M.R.Level, P.L.Lefrancier, J.P.Choay // Infect Immun. - 1980. - V. 27. - P. 826-830.

136. Pearse, M.J. ISCOMATRIX adjuvant for antigen delivery / M.J.Pearse, D.Drane // Adv Drug Deliv Rev. - 2005. - V. 57. - P. 465-474.

137. Petrovsky, N. Novel human polysaccharide adjuvants with dual Th1 and Th2 potentiating activity / N.Petrovsky // Vaccine. - 2006. - V.24. - P. S2-26-S2-29.

138. Podda, A. The adjuvanted influenza vaccines with novel adjuvants: Experience with the MF59-adjuvanted vaccine / A. Podda // Vaccine. - 2001. - V. 19. -P. 2673-2680.

139. Robinson, H.L. New hope for an AIDS vaccine / H.L.Robinson // Nat Rev Immunol. - 2002. - V.2. - P. 239-250.

140. Rodriguez, E.G. Enhanced cellmediated IFN-g-secreting activity against the HIV-1IIIB V3 peptide of the TAB9 multiepitope after DNA vaccine backbone engineering / E.G.Rodriguez, D.M.Vazquez, A.M.Herrera, C.A.Duarte // Biochem Biophys Res Commun. - 2003. - V.308. - P. 713-718.

141. Ronnberg, B. Adjuvant activity of non-toxic Quillaja saponaria Molina components for use in iscom-matrix / B. Ronnberg, M. Fekadu, B. Morein // Vaccine. -1995. - V. 13. - P. 1375- 1382.

142. Scheerlinck, J.P Systemic immune responses in sheep, induced by a novel nano-bead adjuvant / J.P.Scheerlinck, S.Gloster, A.Gamvrellis, P.L.Mottram, M.Plebanski // Vaccine. - 2006. - V.24. - P. 1124-1131.

143. Schirmbeck, R. Antibody and cytotoxic T-cell responses to soluble hepatitis B virus (HBV) S antigen in mice: implications for the pathogenesis of HBV-induced hepatitis // R. Schirmbeck, K. Melber, T. Mertens, J. J. Reimann //Virol. - 1994. - V. 68.

- P. 1418- 1425.

144. Schwarz, T.F. Single dose vaccination with AS03-adjuvanted H5N1 vaccines in a randomized trial induces strong and broad immune responsiveness to booster vaccination in adults. / T. Horacek, M. Knuf, H.G. Damman, F. Roman, M. Drame, P. Gillard, W. Jilg. // Vaccine. - 2009. - V. 27. - P. 6284- 6290.

145. Shaker, Y. Recent trends in the chemistry of pyridine M-oxides / Y.Shaker // Arkivoc. 2001. - V.i. P. 242-268.

146. Shaw, E.N. The Chemistry of Heterocyclic Compounds in Four Parts, Part Two. Pyridine and Its Derivatives / E.N Shaw. - New York, 1961 - P.

147. Shek, P.N. Comparison between multilamellar and unilamellar liposomes in enhancing antibody formation / P.N.Shek, B.Y.K.Yung, N.Z.Stanacev // Immunology. -1983. - V.49. - P.37-40.

148. Skene, C.D. Saponin-adjuvanted particulate vaccines for clinical use / C.D.Skene, P.Sutton // Methods. - 2006. - V. 40. - P. 53-59.

149. Silva, D.G. Inulin-derived adjuvants efficiently promote both Th1 and Th2 immune responses / D.G.Silva, P.D.Cooper, N.Petrovsky // Immunol Cell Biol. - 2004.

- V.82. - P.611-666.

150. Singh, M. Polylactide-co-glycolide microparticles with surface adsorbed antigens as vaccine delivery systems / M.Singh, J.Kazzaz, M.Ugozzoli, P.Malyala, J.Chesko, D.T.O'Hagan // Curr Drug Deliv. - 2006. - V.3. - P.115-120.

151. Smith, J.W.G. Response to influenza vaccine in adjuvant 65-4 / J. W.G.Smith, W.B.Fletcher, M.Peters, M.Westwood, F.T. Perkins // J Hyg (Camb). - 1975. - V.74. -P.251-255.

152. Storni, T. Immunity in response to particulate antigen-delivery systems / T.Storni, T.M.Kundig, G.Senti, P.Johansen // Adv Drug Deliv Rev. - 2005. - V.57. -P.333-355.

153. Straw, B.E. Comparison of tissue reactions produced by Haemophilus pleuropneumoniae vaccines made with six different adjuvants in swine / B.E.Straw, N.J. MacLachlan, W.T. Corbett, P.B. Carter, Schey H.M. // Can J Comp Med. - 1985. - V. 49. - P. 149- 151.

154. Sullivan, S.P. Dissolving polymer microneedle patches for influenza vaccination / S. P. Sullivan, D. G. Koutsonanos, M. del P. Martin, J. W. Lee, V. Zarnitsyn, S.Choi, N. Murthy, R.W. Compans, I. Skountzou, M. R. Prausnitz // Nature medicine. -2010. - V. 16. - №. 8. - p. 915-920.

155. Tafaghodi, M. Nasal immunization studies using liposomes loaded with tetanus toxoid and CpG-ODN / M.Tafaghodi, M.R.Jaafari, S.A.Sajadi-Tabassi // Eur J Pharm Biopharm. - 2006. - V.64. - 138-145.

156. Takahashi, H. Induction of CD8+ cytotoxic T cells by immunization with purified HIV-1 envelope protein in ISCOMs / H.Takahashi, T. Takeshita, B. Morein, S. Putney, R.N. Germain, J.A.Berzofsky // Nature. - 1990.- V. 344. - P.873 - 875.

157. Taneichi, M. Antigen chemically coupled to the surface of liposomes are crosspresented to CD8+ T cells and induce potent antitumor immunity / M.Taneichi, H.Ishida, K.Kajino, K.Ogasawara, Y.Tanaka, M.Kasai // J Immunol. - 2006. - V.177. -2324-2330.

158. Taylor, P.J. Antibody response and reactions to aqueous influenza vaccine, simple emulsion vaccine and multiple emulsion vaccine / P.J.Taylor, C.L.Miller, T.M.Pollock, F.T.Perkins, M.A.Westwood // J Hyg (Camb). - 1969. - V.67. - P.485-490.

159. Thomas, L. Gilchrist A new route to 3-alkoxypyridine 1-oxides / L.Thomas, M.George // J. Chem. Soc. Chem. Commun. - 1981. P. 696-698.

160. Tokunaga, T. Antitumor activity of deoxyribonucleic acid fraction from Mycobacterium bovis BCG. I. Isolation, physicochemical characterization, and antitumor

activity / T.Tokunaga, H.Yamamoto, S.Shimada, H.Abe, T.Fukuda, Y.Fujisawa // J Natl Cancer Inst. - 1984. - V.72. - P.955-962.

161. Tomai, M.A. T cell and interferon-gamma involvement in the adjuvant action of a detoxified endotoxin / M.A.Tomai, A.G.Johnson // J Biol Resp Modifiers. - 1989. -V. 8. - P.625-630.

162. Tong, N.K. Immunogenicity and safety of an adjuvanted hepatitis B vaccine in pre-hemodialysis and hemodialysis patients / N.K.Tong, J.Beran, S.A.Kee, J.L.Miguel, C.Sanchez, J.M.Bayas // Kidney Int. - 2005. - V. 68. - P.2298-2303.

163. Traquina, P. MF59 adjuvant enhances the antibody response to recombinant hepatitis B surface antigen vaccine in primates / P.Traquina, M. Morandi, M. Contorni, G.Van Nest // J Infect Dis. - 1996. - V. 174. - P. 1168 - 1175.

164. Turanek, J. Liposomal preparations of muramyl glycopeptides as immunomodulators and adjuvants / J.Turanek, M.Ledvina, A.Kasna, A.Vacek, V.Hribalova, J.Krejci // Vaccine. - 2006. - V. 24. - P. S2-90- S2-91.

165. Tyrrel, D.A. New aspects of liposomes / D.A.Tyrrel, T.D.Heath, C.M.Colley, B.E.Ryman // Biochim Biophys Acta. - 1976. - V.457. - P. 259 - 263.

166. Vandepapeliere, P. Vaccine adjuvant systems containing monophosphoryl lipid A and QS21 induce strong and persistent humoral and T cell responses against hepatitis B surface antigen in healthy adult volunteers. / P.Vandepapeliere, Y.Horsmans, P.Moris // Vaccine. - 2008. - V. 26. - P. 1375- 1386.

167. Van Rooijen, N. Use of liposomes as biodegradable and harmless adjuvants / N.van Rooijen, R.van Nieuwmegen // Methods Enzymol. - 1983. - V. 93. - P. 83- 85.

168. Walls, R.S. Eosinophil response to alum adjuvants: involvement of T cells in non-antigen-dependent mechanisms / R.S. Walls // Proc Soc Exp Biol Med. - 1977. - V. 156. - P. 431- 435.

169. Weibel, R.E. Ten-year follow-up study for safety of Adjuvant 65 influenza vaccine in man / R.E.Weibel, A.McLean, A.F.Woodhour, A.Friedman, M.R.Hilleman // Proc Soc Exp Biol Med. - 1973. -V. 143. - P. 1053 - 1056.

170. Weiner, G.J. Immunostimulatory oligodeoxynucletides containing the CpG motif are effective as immune adjuvants in tumor antigen immunization / G.J.Weiner,

L.Hsin-Ming, J.E.Wooldridge, C.E.Dahle, A.M.Krieg // Proc Natl Acad Sci USA. - 1997.

- V. 94. - P. 10833-10837.

171. Wikman, M. Achieving directed immunostimulating complexes incorporation / M.Wikman, M.Friedman, S.Pinitkiatisakul // Expert Rev Vaccines. - 2006. - V. 5. P. 395-403.

172. Woodard, L.F. Stable oil-in-water emulsions: preparation and use as vaccine vehicles for lipophilic adjuvants / L.F.Woodard, R.L.Jasman // Vaccine. - 1985. - V. 3.

- P. 57-61.

173. Weickgenannt, A. Pyridine A-Oxides / A.Weickgenannt // Baran Group Meeting. 2012. - V. 9.

174. Yeoma, H. Silver(I)-Catalyzed Direct Route to Isoquinoline-A-Oxides / H.Yeoma // Synlett. 2008. P. 924-928.

175. Young, S.L. Transcutaneous vaccination with virus-like particles / S.L.Young, M.Wilson, S.Wilson, K.W.Beagley, V.Ward, M.A. Baird // Vaccine. - 2006. - V. 24. -P. 5406-5412.

176. Zhao, X. Preparation of Peracetic Acid from Acetic Acid and Hydrogen Peroxide: Experimentation and Modeling / X.Zhao, T.Zhang, Y.Zhou // The Chinese Journal of Process Engineering. - 2008. -V. 8. - P. 35-41.