Получение и применение моноклональных антител для изучения белков вирусов Марбург и Эбола тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, кандидат биологических наук Казачинская, Елена Ивановна

• Казачинская, Елена Ивановна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Казачинская, Елена Ивановна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ.11

1.1. Вирусы Марбург и Эбола. Характеристика возбудителей и вызываемых ими геморрагических лихорадок.

1.1.1. Средства для профилактики и лечения филовирусных геморрагических лихорадок.

1.1.2. Репродукция филовирусов в культурах клеток.

1.1.3. Патогенность филовирусов для лабораторных животных.

1.1.4. Морфология и структура вирионов, классификация филовирусов.

1.1.5. Организация генома, структура и функции белков.

1.1.6. Иммунитет при филовирусных инфекциях.

1.1.7. Иммунодиагностика филовирусных заболеваний.

1.1.8. Современные подходы к созданию вакцинных препаратов против филовирусов.

1.2. Моноклональные антитела (МКА) и их применение в изучении и выявлении вирусных антигенов.

1.2.1. Использование МКА в иммунодиагностике вирусных инфекций.

1.2.2. Исследование и картирование антигенных детерминант на вирусных белках с помощью МКА.

1.2.3. МКА к филовирусам: получение, свойства и применение.

1.3. Использование рекомбинантных белков в иммунодиагностике заболеваний и изучении антигенных детерминант на вирусных белках.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение и применение моноклональных антител для изучения белков вирусов Марбург и Эбола»

Актуальность проблемы.

Согласно международной классификации, вирусы Марбург (ВМ) и Эбола (ВЭ) относятся к семейству Рйоушске порядока Мопопе§ау1га1ез. Они являются типичными представителями неожиданно появляющихся патогенов, не поддающихся прогнозированию. Эти вирусы, вызывающие у людей быстротечные геморрагические лихорадки, впечатляют стремительностью развития заболевания и высокой смертностью - до 90 % для вируса Эбола. Развитие международной торговли и туризма, импорт обезьян для проведения биомедицинских исследований, неизвестный природный резервуар, высокая патогенность, неясный способ трансмиссии - создают реальную угрозу контакта человека с этими возбудителями. В связи с этим, вирусы Марбург и Эбола - предмет значительного общественного беспокойства и научного интереса. Исследование этих вирусов затруднено необходимостью проведения работ в лабораториях со сложной биологической защитой.

В настоящее время в научной литературе нет данных по антигенной структуре белков филовирусов и их роли в формировании иммунного ответа организма в течение заболевания. Отсутствие таких данных препятствует процессу создания эффективных вакцин и средств профилактики. В работах по исследованию сывороток людей, переболевших лихорадками Марбург и Эбола и обезьян из возможного ареала распространения филовирусов, показано участие в формировании иммунного ответа организма не только белка оболочки вириона - гликопротеина (ОР), но и нуклеокапсидных белков: нуклеопротеина (ЫР) и кофактора вирусной полимеразы (УР35), а также матриксного белка (УР40). Поэтому мы предлагаем изучить антигенный «портрет» структурных белков филовирусов, используя 2 специфических инструмента исследования: МКА к антигенным детерминантам филовирусов и рекомбинантные аналоги вирусных белков.

Изучение взаимодействия МКА с вирусными белками в системах, а также с их рекомбинантными аналогами поможет идентифицировать наиболее важные структурные домены вирусных белков, выявить особенности строения вирионов, получить новую информацию о механизмах формирования противовирусного иммунитета.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящей работы является:

1. Исследование структурных белков NP, VP40 и VP35 филовирусов с помощью гибридомных моноклональных антител;

2. Определение возможности практического использования рекомбинантных белков для разработки методов иммунодиагностики филовирусных заболеваний.

Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Получить и исследовать иммунобиологические свойства моноклональных антител (МКА) к белкам цельных инактивированных вирусных антигенов Марбург и Эбола.

2. Сравнить антигенные и иммуногенные свойства филовирусных белков - NP, VP40, VP35, GP и их рекомбинантных аналогов, синтезированных в прокариотической системе экспрессии.

3. Исследовать возможность использования рекомбинантных антигенов в ИФА для выявления специфических противовирусных антител в сыворотках иммунизированных животных и человека, переболевшего лихорадкой Марбург.

В представляемой диссертационной работе на защиту выносятся следующие положения:

1. Создание оригинальной коллекции гибридом, секретирующих моноклональные антитела к белкам NP, VP40 и VP35 вируса Марбург и к белкам NP и VP35 вируса Эбола.

2. Анализ пространственной структуры сайтов и эпитопов антигенов филовирусов с использованием полученной панели МКА. Построение карты антигенной структуры внутренних белков вируса Марбург.

3. Результаты сравнительного изучения антигенных и иммуногенных свойств природных и рекомбинантных белков GP, NP, VP40 и VP35 филовирусов.

4. Возможность использования рекомбинантных антигенов - аналогов природным, при конструировании тест-систем для иммунодиагностики филовирусов Марбург и Эбола.

Научная новизна работы.

В результате проведенных исследований, получена и исследована оригинальная панель МКА к структурным белкам NP, VP40 и VP35 филовирусов Марбург и Эбола. Показано, что иммунизация животных инактивированными препаратами данных вирусов вызывает иммунный ответ организма на внутренние нуклеокапсидные белки. Выявлена взаимная перекрестная реактивность филовирусных белков, это белки NP и YP35 ВМ для поликлональных антител к ВЭ и белок NP ВМ для одного вида МКА, специфичных к ВЭ.

Показано сходство антигенных структур рекомбинантных белков - NP, VP40 и VP35 вируса Марбург и белков VP35 вируса Эбола с природными, формирующими иммунный ответ организма.

Проведено топологическое картирование эпитопов белков NP, VP40 и VP35 вируса Марбург. По полученным данным можно предположить, что сайты и эпитопы белков NP, VP40 и VP35 ВМ пространственно перекрываясь, формируют сложные конформационные антигенные детерминанты. Идентифицирован один сайт, присутствующий на антигенной структуре природных и рекомбинантных белков YP35 вируса Эбола. Оценена возможность использования рекомбинантных белков - GP, NP, VP40 и VP35 вируса Марбург в качестве антигенов в ИФА для выявления специфических противовирусных антител в сыворотках иммунизированных животных и человека, переболевшего лихорадкой Марбург.

Практическая ценность работы.

Сформирована коллекция гибридом и получены препараты МКА к структурным белкам NP, VP40 и VP35 вируса Марбург и к белкам NP и VP35 вируса Эбола. Получены поликлональные антитела к рекомбинантным вирусным белкам. На основе рекомбинантных белков разработана экспериментальная система твердофазного ИФА для выявления специфических антител к вирусу Марбург.

Апробация работы.

Фрагменты диссертационной работы были представлены или доложены на следующих конференциях:

1. Xth International Congress of Virology, Jerusalem 1996.

2. Russian-german colloquium on filoviruses: the modem state of problem. Koltsovo, Novosibirsk region, Russia. 1997.

3. 6th Biological Medical Defence Conference. München 1999.

4. Inauguration of the Swedish Containment Laboratories. Stocgolm 2000.

5. IX Международная конференция: новые информационные технологии в медицине и экологии. Крым, Гурзуф 2001.

6. VI Международная конференция РФФИ. Результаты фундаментальных исследований для инвистиций. Московская обл., г.Пущино 2001.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 8 тезисов, 7 статей, получен патент на изобретение:

1. I.A.Razumov, E.F. Belanov, A.A. Bukreev, E.I. Kazachinskaia & N.I. Bormotov. Properties and protective capacity of monoclonal antibodies to Marburg virus. / Xth international congress of virology, Jerusalem, Israel, 1996. PW60-45, p.260.

2. I.A. Razumov, E.I Kazachinskaia, E.F. Belanov, A.A. Chepurnov. Mabs to filoviruses: properties, antigenic specificity, and their utility in detecting filoviral antigens. / Russian -German colloquium on filoviruses: the modern state of problem. Koltsovo, Novosibirsk region, Russia. 1997. P.13.

3. I.A. Razumov, E.I Kazachinskaia, E.F. Belanov, A.V. Kachko, A.V. Sorokin. Monoclonal antibodies against Filoviruses. / 6th Biological Medical Defence Conference, München 1999;

4. I.A. Razumov, E.I Kazachinskaia, E.F. Belanov, A.V. Kachko, A.V. Sorokin. Monoclonal antibodies against Filoviruses: Characterization of viral and recombinant proteins. / Inauguration of the Swedish Containment Laboratories, Stocgolm 2000.

5. Разумов И.А., Казачинская Е.И., Беланов Е.Ф., Качко A.B., Сорокин A.B. Использование моноклональных антител и рекомбинантных белков для создания новых систем для выявления вируса Марбург. / Крым, Гурзуф 2001. С. 130.

6. Казачинская Е.И., Терновой В.А., Перебоев A.B., Разумов И.А. Моноклональные антитела к вирусу Эбола: свойства и использование для выявления вирусных антигенов. / Крым, Гурзуф 2001. С 133.

7. И.А. Разумов, Е.И. Казачинская, Е.Ф. Беланов, A.B. Качко. Использование моноклональных антител и рекомбинантных белков для выявления вируса Марбург. / г.Пущино 2001, тезисы докладов, с. 142.

8. A.B. Качко, A.B. Сорокин, Е.И. Казачинская, A.B. Иванова, Е.Ф. Беланов, И.А. Разумов, A.A. Букреев, P. Collins, Нетесов С.В. / г.Пущино 2001, тезисы докладов, с. 140.

9. И.А. Разумов, Е.Ф. Беланов, A.A. Букреев, Е.И. Казачинская. Моноклональные антитела к белкам вируса Марбург и их иммунохимическая характеризация. / Вопросы вирусологии N6.1998, с.274-279.

10. A.B. Сорокин, Е.И. Казачинская, A.B. Качко, A.B. Иванова, A.A. Букреев, И.А. Разумов. Сравнительное исследование антигенных и иммуногенных свойств природного и рекомбинантного белков VP35 вируса Марбург. / Вопросы вирусологии N5. 1999, с.206-213.

11. A.B. Сорокин, И.А. Разумов, Е.И. Казачинская, A.B. Качко, A.B. Иванова, В.П. Мишин, A.A. Букреев, В.Б. Локтев, С.В. Нетесов. Рекомбинантная плазмидная ДНК pQf35M, кодирующая гибридный полипептид f35M, обладающий антигенными и иммуногенными свойсвами белка VP35 вируса Марбург, способ ее получения, и штамм бактерий Esherichia coli сверхпродуцент рекомбинантного полипептида f35M. / Патент N 21445665, зарегистрирован в Государственном реестре изобретений Российской федерации. Москва, 2000г.

12. Казачинская Е.И., Перебоев A.B., Чепурнов A.A., Беланов Е.Ф., Разумов И.А. Моноклональные антитела к вирусу Эбола: получение, характеризация и изучение перекрестной реактивности с вирусом Марбург. / Вопросы вирусологии N3. 2000г, с.40-44.

13. И.А. Разумов, Е.Ф. Беланов, Н.И. Бормотов, Е.И. Казачинская. Выявление противовирусной активности моноклональных антител, специфичных к белкам вируса Марбург. / Вопросы вирусологии N 1. (2001), с.33-37.

14. Е.И. Казачинская, В.А. Терновой, Т.Н. Рудзевич, C.B. Нетесов, A.A. Чепурнов, И.А Разумов. Исследование антигенной структуры белка VP35 вируса Эбола. / Вопросы вирусологии N 5 (2001), том 46. С.25-31.

15. A.B. Качко, Т.Б. Чеусова, A.B. Сорокин, Е.И. Казачинская, И.О. Чешенко, Е.Ф. Беланов, A.A. Букреев, А.В.Иванова, И.А Разумов, Е.И. Рябчикова, С.В Нетесов. «Сравнительное изучение морфологии и антигенных свойств рекомбинантных аналогов нуклеопротеина вируса Марбург». / Молекулярная биология, Том 35, N3 (2001), с. 1-8.

16. A.V. Sorokin, E.I. Kazachinskaiy, A.V. Ivanova, A.V. Kachko, S.V. Netesov, A.A, Bukreev, V.B. Loktev, and I.A. Razumov*. Mapping of two dominant sites of the VP35 protein of Marburg virus. Viral Immunology, 2002. Vol.15.

Экспериментальные данные, представленные в диссертации, получены лично диссертантом и в соавторстве с к.б.н. Разумовым И.А., к.б.н. Перебоевым A.B., к.б.н. Терновым В.А., д.б.н. Чепурновым A.A., к.б.н. Белановым Е.Ф., Сорокиным A.B., Качко A.B., Ивановой A.B.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Казачинская, Елена Ивановна

выводы.

1. Созданы оригинальные коллекции гибридом, секретирующих высокоаффинные моноклональные антитела (MICA) к вирусам Марбург (штамм Popp) и Эбола-Заир (штамм Mayinga), состоящие из 21 и 13 мышиных клеточных линий, соответственно. Коллекции депонированы в банк гибридом ГНЦ ВБ «Вектор».

2. Исследование иммунобиологических свойств гибридомных МКА показало, что они взаимодействуют с эпитопами белков NP,VP40,VP35 вируса Марбург и белков NP,VP35 вируса Эбола.

3. Установлено, что 7 МКА, специфичных к нуклеокапсидным (NP и УР35) и матриксному (VP40) белкам вируса Марбург обладают антивирусной активностью -вызывают специфический лизис инфицированных клеток в присутствии комплемента.

4. С использованием метода конкурентного анализа взаимодействия МКА с вирусом Марбург построены топологические карты антигенной структуры трех белков: на нуклеопротеине определено 2 сайта, включающих 4 эпитопа; на VP35 - 2 сайта (4 эпитопа); на VP40 - 2 сайта (7 эпитопов). Показано, что 7 эпитопов этих трех структурных белков, взаимно перекрываясь, образуют антигенный домен, индуцирующий комплемент-зависимый лизис инфицированных клеток.

5. Впервые показано, что поликлональные антитела против ВЭ перекрестно реагируют с белками NP и VP35 вируса Марбург, а МКА 6G8, специфичные к NP ВЭ, выявляют NP ВМ в иммуноблоте. Обнаруженная перекрестная реактивность показывает наличие подобных антигенных детерминант на этих белках.

6. С помощью панели поликлональных, моноклональных антител и референс-сывороток обнаружено подобие антигенной структуры рекомбинантных аналогов с вирусными белками NP, VP40, VP35 вируса Марбург и VP35 вируса Эбола.

7. Показано, что использование в качестве антигена смеси рекомбинантных белков вируса Марбург - GP, NP, VP35 и VP40 - повышает чувствительность и специфичность системы иммуноферментного анализа для выявления специфических антивирусных антител по сравнению с применением в качестве антигена отдельных рекомбинантных белков или инактивированного вируса Марбург.

Заключение.

Основной целью данного исследования явилось изучение белков филовирусов с помощью моноклональных антител.

На первом этапе работы был сформирован набор поликлональных позитивных сывороток иммунизированных лабораторных животных и выбран оптимальный способ инактивации вируса Марбург, при котором сохранялась исходная антигенная структура вирусных белков. Исследованы препараты инактивированных вирусов Марбург (ВМ-3) и Эбола (ВЭ-ДСН), которые мы использовали для иммунизации животных-доноров спленоцитов и тестирования полученных далее гибридом.

В результате гибридизации и отбора нами получена и охарактеризована коллекция из 34 различных гибридом, секретирующих МКА к структурным белкам вирусов Марбург и Эбола. Исследованы биологические свойства МКА к нуклеопротеину (NP), матриксному белку (VP40) и кофактору полимеразы (VP35): определены субклассы иммуноглобулинов и вирусные белки, к которым они специфичны; титры специфического взаимодействия данных антител с вирусными антигенами; количественный уровень синтеза гибридомных МКА в организме мышей BALB/c; константы аффинности.

С помощью поликлональных антител позитивных сывороток и МКА, было обнаружено, что при инфицировании или иммунизации животных инактивированными препаратами вирусов формируется иммунный ответ прежде всего на внутренние нуклеокапсидные белки (NP, VP35 и матриксный VP40), нежели на белок оболочки (что первоначально ожидалось).

Выявлена перекрестная активность белков NP и VP35 ВМ-3 для поликлональных антител сыворотки мыши, иммунизированной ВЭ-ДСН и белка NP ВМ-3 для одного вида МКА, специфичных к нуклеопротеину вируса Эбола.

Антивирусная активность МКА при взаимодействии с белками NP, VP35 и VP40 ВМ была исследована in vitro в A3K0JIK и реакции нейтрализации вируса. МКА, специфичные к нуклеокапсидным белкам, не обладали свойством нейтрализации вируса Марбург. Но A3KOJIK было показано, что 2 вида МКА к нуклеопротеину (NP), 3 вида МКА к матриксному белку (VP40) и 2 вида МКА к VP35 были способны в присутствии комплемента вызывать лизис клеток, инфицированных вирусом Марбург.

С помощью МКА проведено топологическое картирование эпитопов белков NP, VP40 и VP35 ВМ-3 и белка VP35 ВЭ-ДСН. Полученные данные позволяют предположить, что эпитопы на белках - NP, VP40 и VP35 ВМ, вызывающие синтез МКА, при формировании вириона пространственно перекрываются и формируют сложные конформационные антигенные детерминанты. Сравнение перекрывания семи эпитопов, присутствующих на трех белках - ИР, УР35 и УР40 для МКА, участвующих в АЗКОЛК, показало, что данные эпитопы формируют общий домен, биологическая функция которого, видимо, важна для формирования защитного иммунитета при филовирусных инфекциях.

На втором этапе работы нами были исследованы антигенные и иммуногенные свойства рекомбинантных белков - ЫР, УР35, УР40 и ОР вируса Марбург и белка УР35 вируса Эбола, полученные в результате экспрессии полноразмерных кДНК генов в Е.соН.

Анализ взаимной конкуренции взаимодействия антител с антигеном ВЭ-ДСН или его рекомбинантном аналогом, позволил выявить один линейный антигенный сайт, в состав которого входят два эпитопа, распознаваемые поликлональными и МКА как на белке УР35 ВЭ-ДСН, так и на рек.УР35. Эти данные предполагают подобие антигенной структуры исследуемых белков. Дальнейшие исследования показали, что сайт, выделеный на белках рек.УР35 и УР35 ВЭ-ДСН, присутствует и на структуре белка УР35 в препарате вируса Эбола до инактивации.

Таким же образом, с помощью гибридомных МКА и специфических сывороток, выявлено соответствие антигенных структур рекомбинантных - ОР, УР40, УР35 и природных белков вируса Марбург, определяющих иммунный ответ организма при иммунизации животных и в процессе инфекции у человека. Показано, что семь эпитопов на белках УР35, УР40 и ЫР, вызывающих синтез МКА, участвующих в АЗКОЛК, присутствуют на антигенной структуре рекомбинантных аналогов.

Кроме того, сравнительное изучение антигенных и иммуногенных свойств белков -вР, ИР, УР35, УР40 ВМ, белка УР35 ВЭ и их рекомбинантных аналогов, позволило сделать вывод о перспективности применения рекомбинантных антигенов в создании иммунодиагностических тест-систем для выявления специфических 1^0 в сыворотках животных и человека.

Таким образом, с помощью панели гибридомных МКА, в процессе изучения их иммунобиологических свойств, было проведено комплексное исследование антигенных и иммуногенных свойств белков ЫР, УР40 и УР35 филовирусов и их рекомбинантных аналогов с использованием современных методов.

Представленные в данной работе экспериментальные данные открывают в перспективе возможность создания тест-систем для эффективного выявления специфических и маркеров филовирусов в биологических образцах.

Кроме того, создание панели МКА позволяет расширить сферу исследования вирусных белков и их рекомбинантных аналогов с целью создания новых средств профилактики, в том числе вакцинных препаратов, для снижения опастности контакта с чрезвычайно опасными для человека заболеваниями.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Казачинская, Елена Ивановна, 2002 год

1. Hass R, Maass G. Experimental infection of monkeys with the Marburg virus. In Martini GA, Siegert R (eds) Marburg virus disease. // Springer (1971), Berlin Heidelberg New York. P.136-43.

2. Smith DH, Johnson ВК, Isaacson М, Swanapoel R, Johnson KM, Killey M, Bagshawe A, Siongok T, Keruga WK Marburg virus disease in Kenya. // Lancet(1982) 1:816-820.

3. Kiley MP, Cox NJ, Elliot LH, Sanchez A, Defries R, Buchmeier MJ, Richman DD, McCormick JB. Physicochemical properties of Marburg virus: evidence for three virus strains and their relationship to Ebola virus. // J Gen Virol (1988) 69:1557-1567.

4. Bukreyev A. Characteristics of Filoviridae: Marburg and Ebola Viruses. // Naturwissenschaften (1999) 86, 8-17.

5. Никифоров B.B., Туровской Ю.И, Калинин П.П. и др. Случай лабораторного заражения лихорадкой Марбург. // Журнал « Микробиология» N 3 (1994), с.104-110.

6. Jean-J Muyembe-Tamfum, М Borchet, R Swanepoel, DG Bausch, FK Tshioko, P Campbell at all. Marburg hemorrhagic fever in Watsa/Durba (DRC): an endemoepidemic phenomenon. // Simposium on Marburg and Ebola viruses (2000). Abstract. P.24.

7. Bowen ET, Lloyd G, Harris WJ, Piatt GS, Baskerville, Vella EE Viral haemorrhagic Fever in southern Sudan and northern Zaire. Preliminary studies on the aetiological agent. // Lancet (1977) 1:571-573.

8. Johnson KM, Lange JV, Webb PA, Murphy FA Isolation and partial characterisation of a new virus causing acute haemorrhagic fever in Zaire. // Lancet (1977) 1:569-571.

9. World Health Organization / International Commission to Sudan. Ebola hemorrhagic fever in Sudan. // Bull WHO (1978); 56:247-270.

10. World Health Organization / International Commission to Sudan. Ebola hemorrhagic fever in Sudan. // Bull WHO (1978); 56:271-293.

11. Dietrich M, Schumacher HH, Peters D, Knobloch J. Human pathology of Ebola virus infection in the Sudan. // In: Pattyn SR (ed) Ebola virus haemorrhagic fever. Elsevier/North-Holland, Amsterdam (1978), p.37-42.

12. Pattyn S, van der Groen G, Courteille G, Jacob W, Piot PIsolation of Marburg-like virus from a case of haemorrhagic fever in Zaire. // Lancet (1977) 1:573-574.

13. Centers for Disease Control and Prevention. Ebola virus infection in imported primatesVirginia. // MMWR Morb Mortal Wkly rep (1989)38:831-832.

14. Centers for Disease Control and Prevention. Ebola virus infection in imported primates-United States. // Can Dis Wkly Rep (1990) 16:17-18.

15. Jährling PB, Geisbert TW, Dalgard DW, Johnson ED, Ksiazek TG, Hall WC, Peters CJ. Preliminary report: Isolation of Ebola virus from monkeys imported to USA. // Lancet (1990) 335: 502-505.

16. Miranda ME, White ME, Dayrit MM, Hayes CG, Ksieazek TG, Burans JP. Seroepidemiological stady of filovirus related Ebola in the Philippines. // Lancet (1991) 337:425426.

17. Jährling PB, Geisbert TW, Jaax NK, Hanes MA, Ksiazek TG, Peters CJ. Experimental infection of cynomolgus macaques with Ebola-Reston filoviruses from the 1989-1990 epizootic. //Arch Virol Suppl (1996) 11:115-134.

18. Centers for Disease Control and Prevention. Outbreak of Ebola viral hemorrhagic fever Zaire,1995. // MMWR Morb Mortal Wkly Rep (1995) 44:381-382.

19. Centers for Disease Control and Prevention. Update: outbreak of Ebola viral hemorrhagic fever Zaire,1995. // MMWR Morb Mortal Wkly Rep (1995) 44:468-475.

20. Georges-Courbot MC, Lu CY, Lansoud-Soukate J, Leroy E, Baize S. Isolation and partial molecular characterisation of a strain of Ebola virus during a recent epidemic of viral haemorrhagic fever in Gabon. // Lancet (1997) 349:181.

21. World Health organization. // Disease outbreaks reported. 25 February (2002).

22. Smith CEG, Simpson DIN, Bowen ETW. Fatal human disease form vervet monkeys. // Lancet (1967) 11:1119-1121.

23. Martini G.A., Siegert R. Marburg virus disease. //Springer (1971), Berlin Heidelberg New York.

24. LeGuenno B, Formentry P, Wyers M, Gounon P, Walker F, Boesch C. Isolation and partial characterisation of new strain of Ebola virus. // Lancet (1995) 345:1271-1273.

25. Centers for Disease Control and Prevention. Update: Ebola-related filovirus infection in nonhuman primates and interim guidelines for handling nonhuman primates during transit and quarantine. // MMWR Morb Mortal Wkly Rep (1990) 39:22-24,29,30.

26. Monath TP. Ecology of Marburg and Ebola viruses: speculations and direction for future research. // J Infect Dis (1999) Feb; 179:127-138.

27. Breman JG, Johnson KM, van der Groen G,et al. A search for Ebola virus in animals in Democratic Republic of the Congo and Cameroon: ecologic, virologic, and serologic surveys, 1979-1980. Ebola virus study teams. // J Infect Dis (1999) Feb; 179:139-147.

28. Swanepoel R, Leman PA, Burt FJ et al. Experimental inoculation of plants and animals with Ebola virus.//J Emerg Infect Dis (1996) Oct;2(4):321-325.

29. Turell MJ, Bressler DS, Rossi CA. Short report: lack of virus replication in arthropods after intrathoracic inoculation of Ebola Reston virus. // American J Trop Med Hyg (1996) 55:89-90.

30. Baron RC, McCormick JB, Zubeir OA. Ebola virus disease in southern Sudan. Hospital dissemination and intrafamilial spread. // Bull WHO (1983) 61:997-1003.

31. Бажутин Н.Б., Беланов Е.Ф., Спиридонов B.A. и др. Влияние способов экспериментального заражения вирусом Марбург на особенности протекания болезни у зеленых мартышек. // Журнал «Вопросы вирусологии» N3 (1992). С.153-156.

32. Походаев В.А., Гончар Н.И., Пшеничнов В.А. Экспериментальное изучение контактной передачи вируса Марбург. //Журнал «Вопросы вирусологии» N 6 (1991). Том 36:506-508.

33. М.Ю. Луб, А.Н. Сергеев, О.В.Пьянков, О.Г. Пьянкова, В.А. Петрищенко, Л.А.Котляров. Некоторые патогенетические характеристики заболевания обезьян, аэрогенно инфицированных вирусом Марбург. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4 (1995). С. 158-161.

34. Гончар Н.И., Пшеничнов В.А., Походяев В.А. и др. Чувствительность к вирусу Марбург различных экспериментальных животных. // Журнал «Вопросы вирусологии» N5 (1991). С. 435-437.

35. Haas R., Maas I., Muller I. et al. Marburg virus disease. // Berlin (1971). P.136-143.

36. Peters С J, Johnson ED, Mc Kee KT, Filoviruses and management and viral hemorrhagic fevers. // In: Belshe RB (ed) Textbook of human virology. (1991) Mosby-Year Book, St. Louis. P.699-712.

37. Centers for Disease Control. // National Institutes of Health. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. Publication N.93-8395. Washington, DC: U.S. Department of Health and Human Services.

38. Ignat ev GM, Agafonov AP, Strelsova MA, Kashentseva EA. Inactivated Marburg virus elicits a nonprotective immune response in Rhesus monkeys. // J Biotechnology (1996),44:111-118.

39. Игнатьев Г.М., Агафонов А.П., Стрельцова M.A. и др. Сравнительное изучение некоторых иммунологических показателей при введении инактивированного вируса Марбург морским свинкам. // Журнал «Вопросы вирусологии» N2 (1991). Том 36, с.421-423.

40. Lupton HW, Lambert RD, Bumgardner DL, Мое JB, Eddy GA. Inactivated vaccine for Ebola virus efficacious in guinea pig model. // Lancet (1980) 11:1294-1295.

41. Чепурнов A.A., Чернухин И.В., Терновой B.A., Кудоярова Н.М., Махова Н.М. Азаев М.Ш. Смолина М.П. Попытка получения вакцины против лихорадки Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N 6 (1995), с. 257-260.

42. Pattyn SR, ed.Ebola virus haemorrhagic fever. // Elsevier/North-Holland; (1978).

43. Peters CJ, Sanchez A, Rollin PE, Ksiazek TG, Murphy FA. Filoviridae: Marburg and Ebola Viruses. // Fields Virology (1996).Chapter 39, p.l 161-1176.

44. Борисевич B.H., Михайлов B.B., Краснянский Б.П. и др. Разработка и изучение свойств иммуноглобулинов против лихорадки Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N6 (1996). Том 41, с.270-273.

45. Jahrling PB, Geisbert J, Swearengen JR, Jaax GP, Lewis T, Huggins JW, Schmidt JJ, LeDuc JW, Peters CJ. Passive immunization of Ebola virus-infected cynomolgus monkeys with immunoglobulin from hyperimmune Horses. // Arch Virol Suppl 1(996) 11:135-140.

46. Игнатьев Г.М., Стрельцова M.A., Кашенцева E.A., Патрушев Н.А. Эффективность использования анти-ФНО сыворотки при экспериментальной инфекции Марбург. // Вестник Рос Акад Мед Наук (1998);3:35-38.

47. Чепурнов А.А., Кудоярова-Зубовичине Н.М., Дедкова JI.M., Сергеев Н.Н., Нетесов С.В. Разработка методов получения специфических иммуноглобулинов для экстренной профилактики лихорадки Эбола и изучение их свойств. // Вестник РАМН 1998, N4.C.24-29.

48. Kudoyarova-Zubovichene NM, Sergeev NN, Chepurnov AA, Netesov SV. Preparation and use of hyperimmune serum for prophylaxis and therapy of Ebola virus infections. // J Infect Dis (1999) Feb; 179(l):218-223.

49. B.A. Маркин, B.B. Михайлов, В.П. Краснянский, И.В. Борисевич, И.В. Фирсова. Разработка принципов экстренной профилактики и лечения лихорадки Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N1 (1997). С. 31-34.

50. A.M. Титенко, С.С. Новожилов, Е.И. Андаев, Т.И. Борисова, Е.В. Куликова. Репродукция вируса Эбола в клеточных культурах. // Журнал «Вопросы вирусологии» N2 (1992). С. 110-113.

51. Котов А.Н. Автореферат диссерт. канд.биол.наук. (1996).

52. М.А. Стрельцова, А.П. Агафонов, Г.М. Игнатьев. Чувствительность культур клеток различных линий к вирусу Марбург. // Журнал «Вопросы вирусологии» N5 (1991). С. 437438.

53. А.А. Скрипченко, A.M. Шестопалов, О.Я. Ярославцева. Сравнительное изучение взаимодействия вируса Марбург с макрофагами различных видов животных in vitro. // Журнал «Вопросы вирусологии» N6, 1991. С. 503-506.

54. А.А.Скрипченко, Е.И. Рябчикова, JI.A. Воронцова, A.M. Шестопалов, С.А.Вязунов. Вирус Марбург и мононуклеарные фагоциты: изучение взаимодействия. // Журнал «Вопросы вирусологии» N5 (1994). С. 214-218.

55. Schnittler HJ, Mahner F, Drenckhahn D, Klenk HD, Feldmann H. Replication of Marburg virus in human endothelial cells. Apossible mechanism for the development of viral hemorragic disease. // J Clin Invest (1993) Apr;91(4):1301-1309.

56. Baskerville A, Fisher HS, Neild GH, Dowsett AB. Ultrastructural Pathology of experimental Ebola haemorrhagic fever virus infection. // J Pathol (1985) 147:199-209.

57. Bo wen ET, Piatt GS, Lloyd G, Raymond RT, Simpson DI. A comparative stady of strans of Ebola virus isolated from southern Sudan and northern Zaire in 1976. // J Med Virol (1980) 6:129-138.

58. McCormick JK, Bauer SP, Elliott LH, Webb PA, Johnson KM. Biologic Differences between strains of Ebola virus from Zaire and Sudan. // J Infect Dis (1983) 147:264-267.

59. Murphy FA, Simpson DI, Whitfield SG, Zlotnik I, Carter GB. Marburg virus infection in monkeys. Ultrastrutural studies. // Lab Invest (1971) 24:279-291.

60. Ryabchikova E, Kolesnikova L, Smolina N, Tkachev V, Pereboeva L, Baranova A, Rassadkin Y. Ebola virus Infection in guinea pigs: Presumable role of granulomatous inflammation in pathogenesis. // Arch Virol (1996) 141:909-921.

61. Ryabchikova E, Strelets L, Kolesnikova L, Pyankov O, Sergeev A. Respiratory Marburg virus infection in guinea pigs. // Arch Virol (1996) 141:2177-2190.

62. Перебоева JI.А., Ткачев B.K., Колесникова Л.В., Кренделева Л.И., Рябчикова Е.И., Смолина М.П. Ультраструктурное изучение органов морских свинок при последовательном пассировании вируса Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4 (1993). Том 38:179-182.

63. Е.И. Рябчикова, С.Г. Баранова, В.К. Ткачев, А.А. Гражданцева. Морфологические изменения при Эбола-инфекции у морских свинок. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4 (1993). С. 176-179.

64. Краснянский В.П., Михайлов В.В., Борисевич И.В. и др. Получение гипериммунной лошадиной сыворотки против вируса Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N2 (1994), с. 91-92.

65. Рябчикова Е.И. Морфофункциональные аспекты патогенеза филовирусных геморрагических лихорадок. // Автореферат диссертации доктора наук (1997).

66. Дадаева А.А., Сизикова Л.П., Жуков В.А., Чепурнов А.А. Динамика иммунологических показателей у морских свинок при введении различных препаратов вируса Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4 (1998). Том 43, с.163-169.

67. Fisher HS, Piatt GS, Neild GH, Southee T, Baskerville A, Raymond RT, Lloyd G, Simpson DI. Pathophysiology of shockand hemorrhage in a fulminating viral infection (Ebola). // J Infect Dis (1985) 152:887-894.

68. Schnittler HJ, Mahner F, Drenckhahn D, Klenk HD, Feldmann H. Replication of Marburg virus in human endothelial cells. A possible mechanism for development of viral hemorrhagic disease. // J Clin Invest (1993) 91:1301-1309.

69. Feldmann H, Bugany H, Mahner F, Klenk HD, Drenckhahn D, Schnittler HJ. Filovirus-induced endothelial leakage triggered by infected monocytes/macrophages. // J Virol (1996). 70:2208-2214.

70. Feldmann H, Klenk H-D, Sanchez A. Molecular biology and evolution of filoviruses. // Arch Virol (1993) 7 (suppl):81-100.

71. Kiley MP, Regnery RL, Johnson KM. Ebola virus: identification of virion structural proteins. //J Gen Virol (1980) 49:333-341.

72. Regnery RL, Johnson KM, Kiley MP. Virion nucleic acid of Ebola virus. // J Virol (1980)36:465-469.

73. Murphy FA, van der Groen G, Whitfield SG, Lange JV. Ebola and Marburg virus morphology and taxonomy. In: Pattyn SR (ed) Ebola virus haemorrhagic fever. // Elsevier North-Holland(1978), Amsterdam. P.61-8

74. Peters D, Mueller G, Slenczka W. Morphology, Development and classification of the Marburg virus. // (1971) In: Martini G, Siedelberg New York. P. 68-83.

75. Feldmann H, Will C, Schikore M, Slenczka W, Klenk HD. Glycosylation and oligomerization of the spike protein of Marburg virus. // Virology (1991) 182:353-356.

76. Mitchell SW, McCormick JB. Physicochemical inactivation of Lassa, Ebola, and Marburg viruses and effect on clinical laboratory analyses. // J Clin Microbiol (1984) 20:486-489.

77. Elliott LH, McCormick JB, Johnson KM. Inactivation of Lassa, Marburg, and Ebola viruses by gamma irradiation. // J Clin Microbiol (1982) 16:704-708.

78. Bukreyev AA, Volchkov VE, Blinov VM, Dryga SA, Netesov SV. The complete nucleotide sequence of the Popp (1967) strain of Marburg virus: a comparison with the Musoke (1980) strain. //Arch Virol (1995) 140:1589-1600.

79. Sanchez A, Trappier SG, Many BW, Peters CJ, Nichol ST. The virion glycoproteins of Ebola viruses are encoded in two readieng frames and are expressed through transcriptional editing. // Proc Natl Acad Sei USA (1996); 93:3602-3607.

80. Johnson ED, Johnson BK, Silverstein D. et al. Characterization of new Marburg virus isolated from a 1987 fatal case in Kenya. // Arch Virol Suppl (1996) 11:101-114.

81. Pringle Cr. The order Mononegavirales. // Arch Virol (1991) 117:137-140.

82. Feldmann H, Slenczka W, Klenk HD. Emerging and reemerging of filoviruses. // Arch Virol Supp (1996) 11:77-100.

83. Kiley MP, Regnery RL, Johnson KM. Ebola virus: identification of virion structural proteins. //J Gen Virol (1980) 49:333-341.

84. Feldmann H, Muhlberger E, Randolf A, Randolf A, Will C, Kiley NP, Sanchez A, Klenk HD. Marburg virus, a filovirus: Messenger RNAs, gene order, and regulatory elements of the replication cycle. // Virus Res (1992) 24:1-19.

85. Bukreyev A, Volchkov VE, Blinov VM, Netesov SV. The VP35 and VP40 proteins of filoviruses. Homology between Mar burg and Ebola viruses. // FEBS Lett (1993) 322:41-46.

86. Sanchez A, Kiley MP, Holloway BP, Auperin DD. Sequence analysis of the Ebola virus genom: organization, genetic elements, and comparison with the genom of Marburg virus. // Virus Res (1993) 29:215-240.

87. Bukreyev A, Volchkov VE, Blinov VM, Netesov SV. The GP-protein of Marburg virus contains the region similar to the immunosuppressive domain of oncogenic retrovirus PI5 E proteins. // FEBS Lett (1993) 323:183-187.

88. Muehlberger E, Sanchez A, Randolf A, Will C, Kiley MP, Klenk HD, Feldmann H. The nucleotide sequence of the L gene of Marburg virus, a filovirus: homologies with paramyxoviruses and rhabdoviruses. // Virology (1992) 187:534-547.

89. Sanchez A, Killey MP, Holloway BP, Auperin DD. Sequence analysis of the Ebola virus genom: organization, genetic elemets, and comparison with the genom of Marburg virus. // Virus Res (1993) 29:215-240.

90. Sanchez A, Kiley MP, Klenk HD, Feldmann H. Sequence analysis of the Marburg virus nucleoprotein gene: comparison to Ebola virus and other non-segmented negative-strand RNA viruses. // J Gen Virol (1992) 73:347-357.

91. Will C, Muhlberger E, Linder D, Slenczka W, Klenk HD, Feldmann H. Marburg virus gene 4 encodes the virion membrane protein, a type I transmembrane glycoprotein. // J Virol (1993) 67:1203-1210.

92. Bukreev AA, Belanov EF, Blinov VM, Netesov SV. Complete nucleotide sequences of Marburg virus genes 5 and 6 encoding VP30 and VP24 proteins. // Biochem Mol Biol Int (1995) 35:605-613.

93. Volchkov VE, Volchkova VA, Chepurnov AA, Blinov VM, Dolnik O, Netesov SV, Feldmann H. Characterization of the L gene and 5' trailer region of Ebola virus. // J.Gen. Virol (1999) Feb;80 (Pt2):355-362.

94. Becker S, Huppertz S, Klenk HD, Feldmann H. The nucleoprotein of Marburg virus is posphorylated. // J Gen Virol (1994) 75:809-818.

95. Muhlberger E, Lotfering B, Klenk H-D, Becker S. Three of the four nucleocapsid proteins of Marburg virus, NP, VP35, and L, are sufficient to mediate replication and transcription of

96. Marburg virus-specific monocistronic minigenomes. // Journal of Virology (1998) 72, 11:87568784.

97. Muhlberger E, Trommer S, Funke S, Volchkov V, Klenk HD, Becker S. Termini of all mRNA species of Marburg virus: sequence and secondary structure. // Virology (1996) Sep. 15;223(2):376-80.

98. Volchkov VE, Volchkova VA, Muhlberger E, Kolesnikova L, and Klenk H-D. Expression strategy of the Ebola virus GP gene: implication of the transcriptional RNA editing. // Marburg 2000. Symposium on Marburg and Ebola viruses, abstract. P. 4.

99. Volchkov VE, Becker S, Volchkova VA, Ternovoj VA, Kotov AN, Netesov SV, Klenk HD. GP mRNA of Ebola virus is edited by the Ebola virus polymerase and by T7 and vaccinia virus polymerases. // Virology (1995) 214:421-430.

100. Takada A, Robison C, Goto H. et al. A system for functional analysis of Ebola virus glycoprotein. // Proc Natl Acad Sei USA (1997) Dec.23; 94(26):14764-14769.

101. Chan SY, Speck RF, Ma MC, Goldsmith MA. Distinct mechanisms of entry by envelope glycoprotein of Marburg and Ebola (Zaire) viruses. // J Virology (2000) May;74(10):4933-4937.

102. Feldmann H, Volchkov VE, Volchkova VA, Klenk HD. The glycoproteins of Marburg and Ebola virus and their potential roles in pathogenesis. // Arch Virol Suppl (1999);15:159-169.

103. Feldmann H, Nichol ST, Klenk HD, Peters CJ, Sanchez A. Characterization of filoviruses based on differences in structure and antigenicity of the virion glycoprotein. // Virology (1994) Mar; 199:469-473.

104. Volchkov VE, Feldmann H, Volchkova VA, Klenk HD. Processing of the Ebola virus glycoprotein convertase furin. // Proc Natl Acad Sei USA (1998).95:5762-5767.

105. Volchkov VE, Volchkova VA, Slenczka W, Klenk Hd, Feldmann H. Release of viral glycoproteins during Ebola virus infection. // Virology (1998) May 25;245(1):110-119.

106. Ayato Takada, Shinji Watanabe, Hirohi Ito, and Yoshihiro Kawaoka. Infectivity-enhancing antibodies to Ebola virus glycoprotein. // Simposium on Marburg and Ebola viruses. Marburg, Germany (2000), abstract. P.53.

107. Yang Z, Delgado R, Xu L, Todd RF, Nabel EG, Sanchez A, Nabel GJ. Distinct cellular interactions of secreted and transmembrane Ebola virus glycoproteins. // Science (1998) 279:1034-1037.

108. Chan SY, Ma MC, Goldmith MA. Differential induction of cellular detachment by envelope glycoproteins of Marburg and Ebola (Zaire) viruses. // J Gen Virol (2000) Sep;81:2155-2159.

109. Takada A, Watanabe S, Ito H, Okazaki K, Kida H, Kawaoka Y. Downregulation of beta 1 integrins by Ebola virus glycoprotein: implication for virus entry. // Virology (2000) Dec 5;278(l):20-26.

110. Weissenhorn W, Carfi A, Lee KH, Skehel JJ, Wiley DC. Crystal structure of the Ebola virus membrane fusion subunit, GP2, from the envelope glycoprotein ectodomain. // Mol Cell (1998) Nov; 2(5):605-616.

111. Ruiz-Arguello MB, Goni FM, Pereira FB, Nieva JL. Phosphatidylinositol-dependent membrane fusion induced by a putative fusogenic seguence of Ebola virus. // J Virol (1998) Mar;72(3): 1775-1781.

112. Cianciolo GJ, Copeland TJ, Oroszlan S, Snyderman R. Inhibition of lymphocyte proliferation by a synthetic peptide homologous to retroviral envelope protein. // Science (1985) 230:453-455.

113. Harris DT, Cianciolo GJ, Snyderman R, Argov S, Koren HR. Ingibition of human natural killer cell activity by a synthetic peptide homologous to a conserved region in the retroviral protein, pl5E. // J Immunol (1987) 138:889-894.

114. Elliot LH, Killey MP, McCormick JB. Descriptive analyses of Ebola virus proteins. // J Virology (1985);147:169-176.

115. Jasenosky LD, Neumann G, Lukashevich I, Kawaoka Y. Ebola virus VP40-induced particle formation and association with the lipid bilayer. // J.Virol (2001) Jun;75(l 1):5205-5214.

116. Timmins J, Scianimanico S, Schoehn G, Weissenhorn W. Vesicular release of Ebola Virus matrix protein VP40. // Virology (2001) Apr 25;283(l)l-6. (P)

117. Scianimanico S, Schoehn G, Timmins J, Ruigrok RH, Klenk HD, Weissenhorn W. Membrane association induces a conformational change in the Ebola virus matrix protein. // J EMBO (2000) Dec 15;19(24):6732-6741.

118. Dessen A, Volchkov V, Dolnik 0,Klenk HD, Weissenhorn W. Crystal structure of the matrix protein VP40 from Ebola virus. // J EMBO (2000) Aug 15;19(16):4228-4236.

119. Фримель X., Брок Й. // Основы иммунологии (1986). Москва, «Мир».

120. Lotfering B, Modrof J, Moritz C, Sanger C, Muhlberger E, and Becker S. Phosphorylation of Marburg virus structural proteins. // Symposium on Marburg and Ebola viruses. Marburg, Germany (2000). Abstract. P.9.

121. Geibert TW, Jahrling РВ. Differentiation of filoviruses by electron microscopy. // Virus Res 1995 Dec;39 (2-3): 129-150.

122. Muhlberger E, Weik M, Volchkov VE, Klenk HD, Becker S. Comparison of the transcription and replication strategies of Marburg virus and Ebola Vims by using artificial replication systems. // J Virol (1999) Mar;73(3):2333-2342.

123. Sanchez A, Kiley MP. Identification and analysis of Ebola virus messenger RNA. // Virology (1987) 157:414-420.

124. Becker S, Feldmann H, Will C, Slenczka W. Evidence for occurrence of filovirus antibodies in humans and imported monkeys: do subclinical filovirus infections occur worldwide? // J Med Microbiol Immunol (1992);181:43-55.

125. Sanchez A, Khan AS, Zaki SR, Nabel GJ, Ksiazek, and Peters CJ. Filoviridae: Marburg and Ebola viruses. // J Filds Virology (2001) Charter 40. P.1279-1304.

126. Towbin H, Staekelin T, Gordon J. Electrohporetic transfer of proteins from polyacrylamide gels tonitrocellulose sheets: Procedure and some applications. // Proc Natl Acad Sci USA (1979); 76:4350-4354.

127. Gonzalez JP, Nakoune E, Slenczka W, Vidal P, Morvan JM. Ebola and Marburg virus antibody prevalence in selected populations of the Central African Republic. // J Microbes Infect (2000) Jan; 2(l):39-44.

128. Baize S, Leroy EM, Mavoungou E, Fisher-Hoch SP. Apoptosis in fatal Ebola infection. Does the virus toll the bell for immune system? // Apoptosis 2000 Feb;5(l):5-7.

129. Агафонов А.П. Изучение иммуногенных и протективных свойств препаратов вируса Марбург. // Автореферат диссертации канд.биол.наук. Кольцово (1996).

130. Стрельцова М.А. Иммунобиологическая характеристика живого и инактивированного вируса Марбург. Автореферат диссертации канд.биол.наук. Кольцово (1998).

131. Ayato Takada , Shinji Watanabe, Hirohi Ito, and Yoshihiro Kawaoka. Ebola virus glycoproteins. // Simposium on Marburg and Ebola viruses. Marburg, Germany (2000), abstract. P.14.

132. Ito H, Watanabe S, Takada A, Kawaoka Y. Ebola virus glycoprotein: proteolytic processing, acylation, cell tropism, and detection of neutralizing antibodies. // J Virol (2001) Feb;75(3): 1576-1580.

133. Volchkov VE, Blinov VM, Netesov SV. The envelope glycoprotein of Ebola virus contains an immunosuppressive-like domain similar to oncogenic retroviruses. // FEBS Lett (1992) 305:181-184.

134. Becker Y. Retrovirus and filovirus «immunosuppressive motif» and the evolution of virus pathogenicity in HIV-1, HIV-2, and Ebola viruses. // Virus Genes (1995);11(2-3):191-195.

135. Wilson JA, Hart MK. Protection from Ebola virus mediated by cytotoxic T lymphocytes specific for the viral nucleoprotein. // J Virol (2001) Mar; 75(6):2660-2664.

136. Игнатьев Г.М., Стрельцова M.A., Кашенцева EA. Индукция вирусом Марбург медиаторов иммунитета в культуре мононуклеаров человека. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4(1998), с. 169-173.

137. Bray М. The role of the Type I interferon response in the resistance of mice to filovirus infection. // J Gen Virol (2001) Jun;82(Pt6):1365-1373.

138. Tilson MD, Ozsvath KJ, Hirose H, Xia S, and Lanita R. A novel hypothesis to explain the hemorrhagic and connective tissue manifestations of Ebola virus infection. // J Clinical immunology and immunopathology (1996) Dec;81(3):303-306.

139. Kolesnikova L, and Becker S. Interaction of nucleoprotein, VP30 and VP35 in morphogenesis of Marburg virus nucleocapsids. // Symposium on Marburg and Ebola viruses. Abstract, p. 50.

140. Gear JH. Hemorrhagic fevers, with special reference to recent outbreaks in southern Africa. //RevInfectDis (1979) 1:571-591.

141. Мерзликин H.B. Иммуноферментные тест-системы для изучения лихорадки Эбола. // Автореферат диссертации канд.биол.наук. Кольцово (1995).

142. Johnson ВК, Gitau LG, Gichogo A, Tukei РМ, Else JG, Suleman MA, Kimani R, Sayer PD. Marburg, Ebola and Rift Valley Fever virus antibodies in East African primates. // Trans R Soc Trop Med Hyg (1982) 76:307-310.

143. Johnson BK, Ocheng D, Gichogo A, Okiro M, Libondo D, Tukei PM, Mugambi M, French M. Antibodies aganst haemorrhagic fever viruses in Kenia population. // Trans R Soc Trop Med Hyg (1983) 77:731-733.

144. Elliott LH, Bauer SP, Perez OG, Lloyd ES. Improved specificity of testing methods for filovirus antibodies. // J Virol Methods (1993) 43:85-89.

145. Jährling P.B., Geisbert T.W., Dalgard D.W. et al. Preliminary report: isolation of Ebola virus from monkeys imported to USA. // Lancet (1990) Vol 335, p.502-505.

146. Ksiazek TG, West CP, Rollin PE, Jährling PB, Peters С J. ELISA for the detection of antibodies to Ebola viruses. // J Infect Dis (1999) Feb; 179:192-198.

147. Мерзликин H.B., Чепурнов A.A., Истомина H.H., Офицеров В.И., Воробьева М.С. Разработка и применение иммуноферментных тест систем для диагностики лихорадки Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4 (1995). Том 40, с.31-35.

148. A.C. Владыко, A.A. Чепурнов, С.И. Быстрова, H.H. Лемешко, И.С. Лукашевич. Выявление антигена вируса Марбург методом твердофазного иммуноферментного анализа. //Журнал «Вопросывирусологии»N5 (1991). С. 419-421.

149. Saijo М, Niikura М, Morikawa S, Ksiazek T.G., Meyer R.F., Peters С.J., Kurane I. Enzyme-linked immunosorbent asseys for detection of antibodies to Ebola and Marburg viruses using recombinant nucleoproteins. // J Clin Microbiol (2001) Jan; 39 (1): 1-7.

150. Гендон Ю.З. Прогресс в разработке вирусных полинуклеотидных (ДНК) вакцин. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4 (2001). Том 44, с.148-154.

151. VanderZanden L, Custer D, Bray M, Huggins J, Schmaljohn C. Developments in nucleic acid vaccines for filoviruses. // In: American Society for Virology 16th Annual Meeting (1997). Bozeman, Montana, July. P. 19-23.

152. Xu L, Sanchez A, Yang Z, Zaki SR, Nabel EG, Nichol ST, Nabel GJ. Immunization for Ebola virus infection. /. Nat Med (1998) 4:37-42.

153. Hevey M, Negley D, Pushko P, Smith J and Schmaljohn A. Marburg virus vaccines based upon alphavirus replicons protect guinea pigs and nonhuman primates. // Virology (1998) 251,28-37.

154. Hevey M, Negley D, VanderZanden L at al. Marburg virus vaccines: comparing classical and new appoaches. // J Vaccine (2001), Nov 12;20(3-4):586-93.

155. Wilson JA, Hevey M, Bakken R, Guest S, Bray M, Schmaljohn A.L, Hart MK. Epitopes involved in antibody-mediated protection from Ebola virus. // J Science (2000) Mar 3;287 (5458):1664-1666.

156. Wilson JA, Bray М, Bakken R, Hart MK. Vaccine potential of Ebola virus VP24, VP30, VP35, and VP40 proteins. // J Virology (2001) Aug 1;286 (2):384-390.

157. Sullivan NJ, Sanchez A, Rollin PE, Yang ZY, Nabel GJ. Development of a preventive vaccine for Ebola vims infection in primates. // J Nature (2000) Nov 30;408(6812):605-609.

158. Volchkov VE, Volchkova VA, Muhlberger E, Kolesnikova LV, Weik M, Dolnik O, Klenk HD. Recovery of infectionus Ebola virus from complementary DNA: RJSfA editing of the GP gene and viral cytotoxicity. // J Science (2001) Mar 9;291 (5510):1965-1969.

159. Kohler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. //Nature (1975), 256,495.

160. Roger H Kennett and Thomas J. McKearn. Hybridomas: A new dimension in biological analyses. // Plinum Press (1981). New York and London.

161. A.C. Новохатский. Моноклональные антитела к антигенным детерминантам возбудителей инфекционных заболеваний. // Итоги науки и техники, Москва (1983). Том 12.

162. JI.M. Михайлов, A.M. Титенко. Получение и характеристика моноклональных антител к антигенам Brucella abortus 19 ВА. // Журнал «Биотехнология» N1 (2001). С.38-43.

163. Л.А. Шевченко, O.K. Бичуль, Б.Н. Мишанькин. сАМР-связывающий белок возбудителя чумы: изучение свойств с помощью полученных к нему моноклональных антител. // Журнал «Биотехнология» N4 (1996), с.42-46.

164. Локтев В.Б. Диссертация доктора биол. наук. (1993).

165. Hevey М, Negley D, Geisbert J, Jahrling P and Schmaljohn A. Antigenicity and vaccine potential of Marburg virus glycoprotein. // Virology (1997) 239,206-216.

166. Maruyama T, Rodriguez LL, Jahrling PB, Sanchez A, Khan AS, Nihol ST, Peters CJ, Parren PW and Burton D. Ebola virus can be effectively neutralized by antibody produced in natural human infection. // Jurnal of Virology (1999) July, p.6024-6030.

167. A. Lucht, C. Otterbein, P. Moller, H. Feldmann, S. Becker, and R. Grunow. Prodution of monoclonal antibodies to Ebola-Zaire virus. // Symposium on Marburg and Ebola viruses. Germany, Marburg (2000), October 1-4. P. 5.

168. Takada A, Watanabe S, Okazaki K, Kida H, Kawaoka Y. Infectivity-Enhancing Antibodies to Ebola virus glycoprotein. // Journal of Virology N5 (2001) March.75:2324-2330.

169. Niikura M., Ikegami Т., Saijo M., Kurane I., Miranda M.E., Morikawa S. Detection of Ebola viral antigen by enzyme-linked immunosorbent assay using a novel monoclonal antibody to nucleoprotein. // J Clinical Microbiol (2001)39:3267-3271.

170. Мертвецов Н.П., Беклемишев А.Б., Савич И.М. Современные подходы к конструированию молекулярных вакцин. // Москва. Наука, 1987.

171. Sambrook J, Frisch EF, Maniatis Т. Molecular Cloning: a Laboratory Manual. // 2 nd Ed, New York (1989).

172. Д.В. Дебабов. Гетерологичная секреция в системе Escherichia coli. // Журнал «Молекулярная биология» N 3 (1994). Том 28. С.496-505.

173. Машко С.В. Генетика промышленных микроорганизмов и биотехнология. // Москва, Наука (1990), с. 220-239.

174. Редакционная заметка. Рекомбинантные белки, синтезированные в бактериях: применение в диагностике вирусных заболеваний. // Журнал «Вопросы вирусологии» N6 (1989), с.765-767.

175. Geysen Н.М., Rodda S.J., Mason T.J. et al. Strategies for epitope analysis using peptide senthesis. // J Immunol Meth (1987). Vol 102. P.259-274.

176. Meloen R.H., et al. Antigenicity and immunogenicity of synthetic peptides of foot-and-mouth disease virus. // J Gen Virol (1987) Vol 115, p.305-314.

177. Weber E.L., Buchmaier M.J. Fine mapping of a peptide sequence containing an antigenic site conserved among arenavirus. // Virology (1988) Vol 164, p.30-38.

178. Clegg J., Barber G., et al. Expression of Lassa virus nucleocapsid gene fragments in bacteria. // Med Microbiol Immunol (1986) 175(2-3):93-95.

179. Fisher L.E. Localization of antigenic sites in the primary sequence of the Sendai virus NP protein. // Intervirology (1990) Vol 31, p.l 16-121.

180. Van der Groen G, Elliot L, Lack of cross reactivity of rhabdovirus antibodies with Marburg and Ebola antigens in the inderect immunofluorescent antibody test. // Ibid (1982) Vol 62, p.67-68.

181. Чепурнов А.А., Мерзликин Н.В., Рябчикова Е.И. и др. Получение очищенного вируса Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии N 6 (1994). Т.39, с.254-257.

182. Букреев А.А., Скрипченко А.А., Гусев Ю.М. и др. Перспективный метод препаративной наработки и очистки вируса Марбург. // Журнал «Вопросы вирусологии» N4(1995). Т. 40,-с.161-165.

183. Mitchel SW, McCormick JB. Physicochemical inactivation of Lassa, Ebola, and Marburg viruses and effect on clinical labratory analyses.// J Clin.Microbiol.- 1984,- Vol.20, N3.-P.486-489.

184. Чепурнов A.A., Мерзликин H.B., Чепурнова T.C, Воробьева М.С. Получение кроличьих антисывороток к вирусу Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N6 (1994). Том 39, с. 286-288.

185. Казачинская Е.И., Терновой В.А., Рудзевич Т.Н., Нетесов С.В., Чепурнов А.А., Разумов И.А. Исследование антигенной структуры белка VP35 вируса Эбола. // Журнал «Вопросы вирусологии» N5 (2001), с.25-31.

186. Gefler ML, Margulies DH, Scharff MD. A simple method for potyethylene glucol promoted hybridization of mouse myeloma cells. // Somat Cell Genet (1977); 3:231-236.

187. Берзовски Д., Берковер Д. Взаимодействие антиген- антитело. // Иммунология (под ред. У.Пол). Мир, Москва (1989). Том 3, с.5-89.

188. Альберте Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. // Молекулярная биология клетки. // Мир, Москва (1994). Том 3, с.215-283.

189. Покровский А.Г., Беланов Е.Ф. Волков Г.Н. и др. Ингибирование репродукции вируса Марбург глицирризиновой кислотой и ее производными. // Доклад РАН N5 (1995). Том 344, с.709-711.

190. Остерман А.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. // Москва (1981), с.37-64.

191. Kolesnikova L and Becker S. Interation of nucleoprotein, VP30 and VP35 in morphogenesis of Marburg virus nucleocapsids. // Symposium on Marburg and Ebola viruses. Marburg, Gemany (2000). Abstract, p.50.

192. Ksiazek T.G, P.E.Pollin et al. Clinical virology of Ebola hemorrhagic fever (EHF): virus, virus antigens, and IgG and IgM antibody findings among EHF patients in Kikwit, Democratic Republic of the Congo, 1995. // J Infect Dis (1999) 179: 192-198.

193. Остерман JI.А. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами. // Москва, «Наука» (1983). С.304.

194. Tsekhanovskya MA, Matveev LE, Rubin SG, et all. Epitope analyses of TBE complex viruses using monoclonal antibodies to envelope glycoprotein of TBE virus (persulcatus subtype). // Virus Res (1993), Vol.30, p.1-16.