Полиморфизмы С-33Т, С-590Т, G-1098Т в промоторе гена ИЛ-4 при атопической бронхиальной астме тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Казначеев, Валерий Александрович

• Казначеев, Валерий Александрович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Казначеев, Валерий Александрович

Список сокращений.

Оглавление.

Глава 1. Введение.

Глава 2. Обзор литературы.

2.1 Молекулярные основы этиологии и патогенеза атопии и бронхиальной астмы.

2.2 SNP и известные методы их детекции.

2.3 Гены при астме и атопии.

2.3.1 Генетический контроль базального уровня общего IgE.

2.3.2 Интерлейкин-13.

2.3.3 Интерлейкин-5.

2.3.4. Рецептор ИЛ-4.

2.4 Интерлейкин 4.

2.4.1. Синтез.

2.4.2 Функции.

2.4.3. Роль в развитии астмы.

2.4.4. Полиморфизм ИЛ-4.

Глава 3. Материалы и методы.;.

3.1 Материалы и оборудование.

3.1.1. Исследуемый материал.

3.1.2. Реагенты.

3.1.3. Оборудование.

3.2. Методы исследования.

3.2.1. Выделение ДНК.

3.2.2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

3.2.3. Электрофорез фрагментов ДНК.

3.2.4. Гидролиз ДНК рестриктазами.

3.2.5. Твёрдофазый иммуноферментный анализ (ELISA).

3.2.6. Методы статистической обработки результатов.

Глава 4. Собственные исследования.

4.1. Характеристика групп больных бронхиальной астмой на основании клинико-иммунологического исследования.

4.2. Исследование полиморфизма С-ЗЗТ у больных бронхиальной астмой.

4.2.1. Частота выявления мутантного аллеля.

4.2.2. Определение IgE и ИЛ-4.

4.2.2.1. Влияние полиморфизма С-ЗЗТ на уровень общего IgE.

4.2.2.2. Влияние полиморфизма С-ЗЗТ на уровень сывороточного ИЛ-4.

4.2.2.3. Влияние полиморфизма С-ЗЗТ на тяжесть течения заболевания.

4.3. Исследование полиморфизма С-590Т у больных бронхиальной астмой.

4.3.1. Частота выявления мутантного аллеля.

4.3.2. Определение IgE и ИЛ-4.

4.3.2.1. Влияние полиморфизма С-590Т на уровень общего IgE.

4.3.2.2. Влияние полиморфизма С-590Т на уровень сывороточного ИЛ-4.

4.3.2.3. Полиморфизм С-590Т и тяжесть течения заболевания.

4.4. Исследование полиморфизма G-I098T у больных бронхиальной астмой.62 4.4.1.Частота выявления мутантного аллеля.

4.4.2.Определение ^Е и ИЛ-4.

Глава 5. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Полиморфизмы С-33Т, С-590Т, G-1098Т в промоторе гена ИЛ-4 при атопической бронхиальной астме»

Бронхиальная астма (БА) - одно из наиболее распространенных во всём мире тяжёлых мультифакторных заболеваний (МФЗ). В некоторых странах эта болезнь является главной причиной инвалидизации населения, опережая даже сердечно-сосудистые и онкологические патологии [72]. В разных странах БА болеют от 4 до 35 % населения [15, 16, 162]. Причем имеются неопровержимые доказательства роста частоты БА во всем мире. Эти обстоятельства характеризуют БА как глобальную медико-социальную проблему и диктуют необходимость ее всестороннего изучения.Современные представления о генетической предрасположенности свидетельствуют, что для развития клинической формы БА требуется наличие в генотипе индивида определенных аллельных вариантов генов, формирующих неблагоприятный наследственный фон, реализующийся при взаимодействии с факторами внешней среды атопическим фенотипом [5, 6, 9].Сегодня, благодаря успехам молекулярной генетики наблюдается определенный сдвиг в раскрытии деталей этиологии и патогенеза астмы, что привело исследователей к пониманию важной роли группы родственных молекул интерлейкинов, которые ответственны за индукцию и поддержание аллергического воспаления при данном заболевании. С точки зрения генетики, интересным фактом оказалось то, что гены наиболее существенных при формировании БА интерлейкинов - ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-9, ИЛ-13, расположены тандемно в кластере на хромосоме 5q31-33. В э J нескольких исследованиях было установлено сцепление ряда признаков БА с этим локусом [45, 150, 155, 161]. В этой связи гены интерлейкинов, расположенные в регионе 5q31-33, стали важным объектом изучения наследственных основ предрасположенности к бронхиальной астме. На сегодняшний день получены данные о полиморфных вариантов генов интерлейкинов и их связи с БА. Однако они достаточно противоречивы и не дают однозначного ответа на вопрос об их патогенетической роли [111].ИЛ-4 является важнейшим цитокином воспаления, в том числе обусловленного развитием аллергического IgE ответа.Прежде всего, ИЛ-4 регулирует пролиферативный ответ Влимфоцитов и переключение изотипов иммуноглобулинов в них, индуцируя экспрессию IgG4 и IgE [139]. Наряду с ИЛ-2 он выступает, так же как фактор роста Т-лимфоцитов и тучных клеток и является ключевым сигналом дифференцировки CD4+ Т-клеток в хелперы 2 типа.Вследствие центральной роли ИЛ-4 в развитии воспаления, анализ генетической регуляции активности этого цитокина, имеет очень большое значение для понимания механизмов развития атопии и астмы. На сегодняшний день известно множество работ, посвященных регуляции синтеза этого цитокина [124, 125, 148].Довольно хорошо изучен промотор гена этого цитокина, выявлены сайты узнавания большого количества ядерных факторов, регулирующих его транскрипцию[137, 158]. Также выявлены и описаны несколько ключевых мутаций в промоторе гена ИЛ-4, играющих важнейшую роль в развитии атопии и БА. Впервые в 1995 году была обнаружена замена С-590Т в гене ИЛ-4 в популяции американцев [127]. Были проведены б исследования на культурах клеток in vitro, в которых [137, 33] выявлена связь этой замены с увеличением продукции ИЛ-4, однако работ, подтвердивших влияние этого полиморфизма на продукцию ИЛ-4 в сыворотках больных БА, не проводилось.В 1999 году в ходе скрининга гена ИЛ-4 были выявлены мутации, частота которых в популяции превышала 1%. Прежде всего это полиморфизм С-ЗЗТ, который был описан японскими учеными у больных БА. В ряде работ была подтверждена ассоциация полиморфизмов С-590Т и С-ЗЗТ [74, 107, 128] с БА, однако, есть и негативные результаты [105, 154]. Возможно, отсутствие однозначного ответа на вопрос о влиянии этих полиморфизмов на развитие БА обусловлено популяционными различиями.Среди внешнесредовых факторов, влияющих на формирование БА, особое внимание уделяется вирусным инфекциям, среди которых представляет интерес РСВ, вызывающий у маленьких детей бронхиолиты. В этой связи исследование полиморфизма G-1098T, изначально идентифицированного у больных, перенесших РСВ заболевание, может прояснить роль вирусной компоненты в патогенезе заболевания БА. Вместе с тем, в развитии такого сложного заболевания как БА большую роль играют не столько отдельные аллели генов, сколько их сочетания или «генетические ансамбли». Они могут быть неодинаковы в популяциях, обусловливая различия в подверженности к астме у разных народов. Поэтому, перспективным направлением исследований генетических основ БА является исследование вклада конкретных сочетаний аллелей в подверженность к болезни.Молекулярпо-генетические работы, посвященные БА, в России немногочисленны и затрагивают в основном спектр генов метаболизма ксенобиотиков [1, 6, 11]. Поскольку ИЛ-4 контролирует основные этапы развития БА, определенный интерес представляет изучение гена этого цитокина и механизмов регуляции его транскрипции в русской популяции.Цель работы: Исследовать промоторную область гена ИЛ-4 и выявить взаимосвязь между полиморфизмами С-ЗЗТ, С-590Т, G-1098T этого гена и основными маркерами атопии у больных бронхиальной астмой.Задачи исследования: 1. Сформировать группы больных атопической бронхиальной астмой с различным течением (лёгкая, средняя, тяжёлая) и определить в сыворотках крови больных БА и лиц из группы сравнения содержание общего ИЛ-4 и IgE.2. Провести анализ ДНК больных БА и группы сравнения на наличие замены С на Т в положениях (-33 и -590) и G на Т в положении (-1098) в промоторной области гена ИЛ-4.3. Выявить ассоциации исследуемых полиморфизмов с основными маркерами атопии у больных БА и со степенью тяжести этого заболевания. J I Научная новизна: Впервые на русской популяции проведено комплексное исследование частот полиморфных вариантов гена ИЛ-4 и их патогенетической значимости в отношении атопической БА. Оценена степень вклада аллелей гена ИЛ-4 в фенотипическую дисперсию количественных показателей. Установлена взаимосвязь полиморфных вариантов гена ИЛ-4 с БА и фенотипическими маркерами атопии ИЛ-4 и IgE.Научно-практическая значимость работы: Полученные сведения о промоторном полиморфизме гена ИЛ-4 в популяции дают информацию о роли отдельных генов в развитии таких сложных мультифакторных заболеваний как БА. С другой стороны, эти данные важны для планирования стратегии формирования групп риска и терапии БА с учетом генотипа индивидов по гену ИЛ-4. Результаты исследования могут быть учтены в организации мероприятий по профилактике аллергических и других распространенных заболеваний.Положения, выносимые на защиту: 1. Частота аллеля Т полиморфизма С-ЗЗТ в промоторной области гена ИЛ-4 составила 63% у больных БА и 23% у здоровых людей.Этот полиморфизм ассоциирован с интегральным показателем БА и такими фенотипическими проявлениями как повышение уровня общего IgE и сывороточного ИЛ-4. Существует корреляционная взаимосвязь между увеличением сывороточного ИЛ-4 и IgE при наличии полиморфизма С-ЗЗТ как в опытной, так и в контрольной группе. Между выявленным полиморфизмом С-ЗЗТ и тяжестью заболевания нет четкой ассоциации.2. Полиморфизм С-590Т в промоторной области гена ИЛ-4 с частотой мутантного аллеля Т - 51% в опытной группе не ассоциирован с заболеванием БА, но ассоциирован с такими иммунологическими показателями как уровни сывороточного ИЛ-4 и общего IgE. Выявлена корреляционная взаимосвязь между увеличением сывороточного ИЛ-4 и IgE при наличии полиморфизма С-590Т в опытной группе, однако в контрольной группе связи этого полиморфизма с концентрацией IgE не было обнаружено. Между выявленным полиморфизмом С-590Т у больных БА и тяжестью заболевания нет четкой ассоциации.3. Частота мутантного аллеля Т полиморфизма G-1098T составила 4% в группе больных БА и 13% в контрольной группе.Полиморфизм G-1098T не связан с интегральным показателем БА, тяжестью заболевания, а также с количественным содержанием сывороточного ИЛ-4 и общего IgE.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Казначеев, Валерий Александрович

Выводы

1. Клинико-иммунологическое обследование 109 больных бронхиальной астмой легкой, средней и тяжелой степени тяжести выявило наличие сенсибилизации к неинфекционным аллергенам в 57% случаев, у больных БА было отмечено снижение показателей функции внешнего дыхания, повышенный уровень общего ^Е и сывороточного ИЛ-4 в 71% и 66% случаев, соответственно.

2. Частота аллеля Т составила 74% у астматиков и 21% у здоровых людей. Обнаружено, что полиморфизм С-ЗЗТ в промоторной области гена ИЛ-4 ассоциирован с заболеванием БА и такими фенотипическими проявлениями как уровни сывороточного ИЛ-4 и общего 1§Е. Не выявлено ассоциации между искомым полиморфизмом С-ЗЗТ и тяжестью заболевания.

3. Частота мутантного аллеля Т оказалась 51% в опытной группе и 43% - в контрольной. Обнаружено, что полиморфизм С-590Т в промоторной области гена ИЛ-4 не ассоциирован с заболеванием БА, но достоверно ассоциирован с такими иммунологическими показателями как уровни сывороточного ИЛ-4 и общего ^Е. Не выявлено ассоциации между искомым полиморфизмом С-590Т и тяжестью заболевания.

4. Частота полиморфизма 0-Ю98Т составила 16% в группе больных БА и 9% в контрольной группе. Полиморфизм не связан с интегральным показателем БА и с тяжестью заболевания. Не обнаружено ассоциации исследованного полиморфизма 0-Ю98Т с количественным содержанием сывороточного ИЛ-4 и общего 1ВЕ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Казначеев, Валерий Александрович, 2005 год

1. Баранов B.C., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э., с соавт. Геном человека и гены "предрасположенности" (Введение в предиктивную медицину).// СПб.-Интермедика. - 2000. - С. 272.

2. Гриппи М. А. Патофизиология легких. М. - Восточная книжная компания. - 1997. - С. 344.

3. Гущин И.С. Физиология иммуноглобулина Е. // Аллергология и Иммунология 2000. - Т. I. - № 1. - С. 76-88

4. Иващенко Т.Э., Сиделева О.Г., Петрова М.А. с соавт. Генетические факторы предрасположенности к бронхиальной астме.//Генетика. 2001.- Т. 37. - С. 107-111.

5. Колчанов Н. А., Ананько Е. А., Колпаков Ф. А. с соавт. Генные сети.// Молек. биол. 2000. - Т. 34. - № 4. - С. 533-544.

6. Ляхович В. В., Вавилин В. А., Макарова С. И. с соавт. Роль ферментов биотрансформации ксенобиотиков в предрасположенности к бронхиальной астме и формировании особенностей ее клинического фенотипа.// Вестн. РАМН 2000. -№ 12. - С. 36-41.

7. Пузырев В. П., Степанов В. А. Патологическая анатомия генома человека.// Новосибирск: Наука 1997. - С.224.

8. Резник И.Б. Генетические механизмы развития бронхиальной астмы.// Аллергология 1998. - Т1. - С. 5-12.

9. Украинцева С. В., Сергеев А. С. Популяционный риск возникновения бронхиальной астмы в Москве // Генетика 1995. -Т. 31. -№ 2. - С. 264-267.

10. Ю.Флелс Дж. Статистические методы для изучения таблиц долей и пропорций. // М.: Финансы и статистика 1989. - С. 319.

11. П.Фрейдин М.Б., Брагина Е.Ю., Огородова Л.М., с соавт. Полиморфизм генов глугатионтрансфераз тета1 и мю1 (GSTTI и GSTM1 у больных атонической бронхиальной астмой в Западносибирском регионе// Молекулярная биология 2002. - Т. 36. - № 4. - С. 630-634

12. Фрейдин М. Б., Кобякова О. С., Огородова Л. М. с соавт. Наследуемость уровня общего интерлейкина-5 и полиморфизм С-703Т гена ИЛ5 у больных бронхиальной астмой.// Бюлл. эксп. биол. 2000. - Т. 129. - Прил. 1. - С. 50-52.

13. П.Фрейдин М.Б. Генетические основы подверженности к бронхиальной астме.//Генетика-2002. Т.5 С.25-37.

14. Фрейдин МБ., Пузырев В.П., Огородова Л.М., с соавт. Полиморфизм генов интерлейкипов и их рецепторов: популяционная распространенность и связь с атопической бронхиальной астмой.// Генетика. 2002. - Т. 38.- № 12. С. 89-96.

15. Хаитов Р. М., Богова А. В., Ильина Н. И. Эпидемиология аллергических заболеваний в России.// Иммунология. 1998. -№ 3. - С. 4-9.

16. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма. «Русский врач» 2001. -С. 144

17. A genome-wide search for asthma susceptibility loci in ethnically diverse populations. The Collaborative Study on Genetics of Asthma.// Nat Genet 1997. - V. 15 - P. 389-392.

18. Abe E., De Waal Maleiyt R., Matruda L. el al. An 11-base-pair DNA sequence motif apparently unique to the interleukin 4 gene confers responsiveness to T-cell activation signals.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1992.-V. 89.-P. 2864.

19. Alberts B., Johnson A., Lewis S. Molecular biology of the Cell // J. Mol bio!.-2002. P. 858

20. Anderson L.C., Beaty J.S., Nettles J.W., Seyfried C. E. et al. Allelic polymorphism in transcriptional regulatory regions of HLA-DQB genes.// J. Exp. Med. 1991,-V. 173. P. 181-183.

21. Anderson G.G., Cookson W.O. Recent advances in the genetics of allergy and asthma.// Mol. Med. Today 1999. - V. 5. - P. 264-273.

22. Arai N., Nomura D., Villaret D. et al. Complete nucleotide sequence of the chromosomal gene for human IL-4 and its expression. // J.Immunol. 1989. -V. 142(1). - P. 274-82.

23. Barnes K.C., Marsh D.G. The genetics and complexity of allergy and asthma.// Immunol. Today 1998. - V. 19. - P. 325-332.

24. Beaty J.S., West K.A., Nepom G.T. Functional effects of a natural polymorphism in the transcriptional regulatory sequence of HLA-DQB 1.// Mol. Cell. Biol. 1995 - V. 15. - P. 4771.

25. Beghe B., Barton S., Rorke S. et al. Polymorphisms in the interleukin-4 and interleukin-4 receptor alpha chain genes confer susceptibility to asthma and atopy in a Caucasian population.// Clin Exp Allergy. -2003. V. 33 (8)-P. 1111-1117.

26. Bleecker E.R., Meyers D.A. Genetics of allergy and asthma.// Allergy and allergic diseases Ed. A. B. Kay. Blackwell Science, Oxford. -1997. - P. 1196-1207.

27. Borish L., Chipps B., Deniz Y. Total serum IgE levels in a large cohort of patients with severe or difficult-to-treat asthma.// Ann. Allergy Asthma Immunol. 2005. - V. 95 (3) - P. 247-253

28. Broide D., Paine M.M., Firestein G.S. Eosinophils express interleukin 5 and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor mRNA at sites of allergic inflammation in asthmatics.// J. Clin Invest. 1992. -V. 90. - P. 1414-1424.

29. Brookes A. The essence of SNPs.// Gene-1999.-V.234(2) P. 177-186

30. Bruhn K.W., Nelms K., Boulay J.L. et al. Molecular dissection of the mouse interleukin-4 promoter.// Proc Nat Acad Sci USA. 1993. - V. 90.-P. 9707-9711.

31. Burchard E.G., SILverman E.K., Rosenwasser U., et al. Association between a sequence variant in the IL-4 gene promoter and FEV( 1) in asthma.// Am J Respir Crit Care Med. 1999. - V. 160. P. 919-922.

32. Cantrel D. T cell antigen receptor signal transduction pathways.// Annu. Rev. Immunol. 1996. - V. 14. - P. 259-274.

33. Casolaro V., Georas S.N., Song D. et al. Inhibition of NF-AT-dependent transcription by NF-kB: Implications for differential cytokine expression.// Proc. AcadSci USA 1995. - V. 92. - P. 11623.

34. Ceresa B.P., Horvath C.M., Pessin J.E. Signal transducer and activator of transcription-3 serine phosphorylation by insulin is mediated by a Ras/Raf/MEK-dependent pathway. //Endocrinology. 1997. V. 138. -P. 4131-4137.

35. Chand N., Harrison J.E., Rooney S. et al. Anti IL-5 monoclonal antibody inhibits allergic late phase bronchial eosinophilia in guinea pigs.//Eur J Pharmacol. 1992. - V. 211. - P. 121-123.

36. Choi E.H., Lee H.J., Yoo T. et al. A common haplotype of interleukin-4 gene is associated with severe respiratory syncytial virus disease in Korean children.//J.Infect. 2002. -V. 186. - P. 1207-1211.

37. Chung K.F., Barnes P.J. Cytokines in asthma.// Thorax. 1999. -V. 54. - P. 825-857.

38. Chung J., Uchida E., Grammer T.C. et al. STAT3 serine phosphorylation by ERK-dependent and -independent pathways negatively modulates its tyrosine phosphorylation. // Mol.Cell Biol. -1997. -V. 17. P. 6508-6516.

39. Claudia Sengler et al. Interactions between genes and environmental factors in asthma and atopy: new developments.// Respir. Res. 2002. - V. 3 (1).-P. 7-10.

40. Clutterbuck E.J., Hirst E.M., Sanderson C.J. Human interleukin-5 (IL-5) regulates the production of eosinophils in human bone marrow cultures: comparison and interaction with IL-1, 1L-3, IL-6 and GM-CSF.//Blood. 1989. - V. 73. - P. 1504-1512.

41. Cookson W.O. The alliance of genes and environment in asthma and allergy.//Nature. 1999. - V. 402., Suppl. - B. 5-11.

42. Cookson W.O., Sharp P.A., Faux J.A. et al. Linkage between immunoglobulin E responses underlying asthma and rhinitis and chromosome llq.//Lancet.- 1989. V. 112.-P. 1292-1295.

43. Corry D.B., H.G., Folkesson M.L. et al. Interleukin 4, but not interleukin 5 or eosinophils, is required in a murine model of acute airway hyperreactivity.// J. Exp. Med. 1996. - V. 193. - P. 109.

44. Crow S. Quarreling geneticists and a diplomat Genetics.// 1995. V. 140 (2).-P. 421-426.

45. Daniels S.E., Bhattacharrya S., James A. et al. A genome-wide search for quantitative trait loci underlying asthma.// Nature. 1996. - V. 383.-P. 247-250.

46. De Santis G.T. et al. A loose cage for transition metals.// Inorg. Chem. 1997. - V. 36 (10). - P. 1996-2001.

47. Dubucquoi S., Desreumaux P., Janin A. et al. Interleukin 5 synthesis by eosinophils: association with granules and immunoglobulin-dependent secretion.// J Exp Med. 1994. - V. 179. P. 703-708.

48. Duetsch G. et al. STAT6 as an asthma candidate gene: polymorphism-screening, association and haplotype analysis in a Caucasian sib-pair study.//Hum. Mol. Genet.-2002. V. 11(6). - P. 613-621.

49. Elliott K, Fitzpatrick E., Hill D. et al. The -590C/T and -34C/T interleukin-4 promoter polymorphisms are not associated with atopic eczema in childhood.//J AllergyClinImmunol.-2001 .-V. 108.- P. 285.

50. Emery P.B., Mach, Reith W. The different level of expression of HLA-DRB1 and -DRB3 genes is controlled by conserved isotypic differences in promoter sequence.// Hum. Immunol. 1993. - V. 38. -P. 137.

51. Endo T.A., Masuhara M., Yolcouchi M. et al. A new protein containing an SH2 domain that inhibits JAK kinases. // Nature. -1997.-V. 387.-P. 921-924.

52. Falconer D.S. The inheritance of liability to certain diseases, estimated from the incidence among relatives.// Ann. Hum. Genet. -1965.-V. 29.-P. 51-76.

53. Finlay G.A. et al. Matrix metalloproteinase expression and production by alveolar macrophages in emphysema.// Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1997. - V. 156. - P. 240-247.

54. Foster P.S., Hogan S.P., Ramsay A.J. et al. IL-5 deficiency abolishes eosinophilia, airways hyperreactivity and lung damage in a mouse asthma model.//J. Exp. Med. 1996. - V. 193. - P. 195.

55. Gelfand E.W. et al. T lymphocytes: setting the tone of the airways.// Nat.Med. 1997. - V. 3 (4). - P. 382-383.

56. Gonzalez F.A., Raden D.L. Davis R.J. Identification of substrate recognition determinants for human ERK1 and ERK2 protein kinases. // J.Biol.Chem. 1991. - V. 266. - P. 22159-22163.

57. Gotoh A., Takahira H., Mantel C. et al Steel factor induces serine phosphorylation of Stat3 in human growth factor-dependent myeloid cell lines. // Blood. 1996. - V. 88. - P. 138-145.

58. Graves P.E., Kabesch M., Halonen M. et al. A cluster of seven tightly linked polymorphisms in the IL-13 gene is associated with total serum IgE levels in three populations of white children.// J Allergy Clin Immun. 2000. - V. 105. - P. 506-513.

59. Grunig G., Warnock M., Wakil A.E. et al. Requirement for IL-13 independently of IL-4 in experimental asthma.// Science. 1998. -V. 282. - P. 2261-2262.

60. Hall I.P. Genetics and pulmonary medicine: asthma.// Thorax. 1999. - V. 54. - P. 65-69.

61. Hamid Q., Azzawi M., Sun Ying et al. Expression of mRNA for interleukin-5 in mucosal bronchial biopsies from asthma.// J Clin Invest. 1991. - V. 87. - P. 1541-1548.

62. Hautamaki R.D., Kobayashi D.K., Senior R.M. et al. Requirement for macrophage elastase for cigarette smoke-induced emphysema in mice.// Science. 1997. - V. 277. - P. 2002-2004.

63. Heinrich P.C., Behrmann I., Muller N.G. et al. // Biochem.J. 1998. -V. 334.-P. 297-314.

64. Heinzmann A., Mao X.Q., Akaiwa M. Genetic variants of IL-13 signaling and human asthma and atopy.// Hum Mol Genet. 2000. -V. 9. - P. 549-559.

65. Hershey G.K., Friedrich M.F., Esswein L.A. et al. The association of atopy with a gain-of-function mutation in the alpha subunit of the interleukin-4 receptor.// N Engl J Med. 1997. - V. 337. - P. 17201725.

66. Hershey G.K.K. IL-13 receptors and signaling pathways: an evolving web // J.Allergy Clin.Jmmunol. 2003. - V. 111 (4). - P. 677-90.

67. Hijazi Z., Haider. M.Z. Interleukin-4 gene promoter polymorphism C590T. and asthma in Kuwaiti Arabs.// Int Arch All Immun. 2000. - V. 122. - P. 190.

68. Jarvis D., Burney P. Epidemiology of atopy and atopic diseases // Oxford Press 1997. - P. 1208-1224.

69. Jin Y., Chen C., Xu Y. et al. Genetic epidemiological study of asthma in general. // Wei Sheng Yan.Jiu. 1998. - V. 27(1). - P. 29-31.

70. Kabesch M., Baldini M., Graves PE., et al. Complete screening of the IL-4 gene and its flanking region for novel polymorphisms. // Am.Jour.Resp.Crit.Care Medicine. 2000. - V. 161(3). - P. A929.

71. Kawashima T., Noguchi E., Arinami T. et al. Linkage and association of an inteiieukin 4 gene polymorphism with atopic dermatitis in Japanese families. // J Med Gene 1998. - V. 35. P. 502-504.

72. Keatings VM., O'Connor BJ., Wright LG. et al. Late response to allergen is associated with increased concentrations of tumor necrosis factor-alpha and IL-5 in induced sputum. // J Allergy Clin Immunol -1997.-V. 99.-P. 693-698.

73. Kita H., Gleich G.J. Chemokines active on eosinophils. Potential roles in allergic inflammation. // J. Exp. Med. 1996. - V. 193. - P. 24212426.

74. Kruse S., Japha T., Tedner M. et al. The polymorphisms S503P and Q576R in the interleukin-4 receptor a gene are associated with atopy and influence the signal transduction. // Immunology 1999. - V. 96. -P. 365-371.

75. Kumar G., Gupta S., Wang S. et al. Involvement of Janus kinases, p52shc, Raf-1, and MEK-1 in the IL-6-induced mitogen-activated protein kinase cascade of a growth-responsive B cell line // J.Immunol. 1994. - V. 153. - P. 4436-4447.

76. Lacour F. cAMP up-regulates IL-4 and IL-5 production from activated CD4+ T cells while decreasing IL-2 release and NF-AT induction. // Int.Immunol. 1994. - V. 6(9) - P. 1333-1342.

77. Lamb P., Seidel HM., Haslam J. et al STAT protein complexes activated by interferon-gamma and gpl30 signaling molecules differ in their sequence preferences and transcriptional induction properties. //Nucleic.Acids.Res. 1995. - V. 23. - P. 3283-3289.

78. Laitinen T., Kauppi P., Ingatius J. et al. Genetic control of serum IgE levels and asthma: Linkage and linkage disequilibrium studies in an isolated population. // Hum. Mol. Gen. 1997. - V. 6. - P.2069-2076

79. Lander E.S., Schork N.J. Genetic dissection of complex traits. // Science. 1994. -V. 265. - P. 2037-2047.

80. Li-Weber, M., Eder A., KralTt-Czepa H. et al. T cell-specific negative regulation of transcription of the human cytokine IL-4. // J. Immunol. 1992. - V.148. - P. 1913.

81. Li-Weber M., Laur O.J., Davydov V.C. et al. What controls tissue-specific expression of the IL-4 gene? // Immunobiology 1997. - V. 198. - P. 170-178.

82. Li-Weber M., Kramer P. H. Regulation of IL-4 gene expression by T cells and therapeutic perspectives. // Nat.Rev.Immunol. 2003. - V. 3(7). - P. 534-43.

83. Li-Weber M., Davydov I.V., Krafft, H. et al. The role of NF-Y and IRF-2 in the regulation of human IL-4 gene expression // J.Immunol. 1994. -V. 153(9)-P. 4122-33

84. Li-Weber M., Salgame P., Hu C. et al. Th2-specific protein/DNA interactions at the proximal nuclear factor-AT site contribute to the functional activity of the human IL-4 promoter // J.Immunol. 1998. -V. 161(3)-P. 1380-9

85. Lim CP., Cao X Regulation of Stat3 activation by MEK kinase 1 -J.Biol.Chem. 2001 276(24) 21004-11

86. Lim CP., Cao X. Serine phosphorylation and negative regulation of Stat3 by JNK // J.Biol.Chem. 1999. - V. 274. - P. 3 1055-31061.

87. Liu X., Nickel R., Beyer K. et al. An IL 13 coding region variant is associated with a high total serum IgE level and atopic dermatitis in the German multicenter atopy study (MAS-90). // J. Allergy Clin Immunol 2000. - V. 106.-P. 167-170.

88. Lopez AF., Begley CG., WILliamson DJ. et al. Murine eosinophil differentiation factor. An eosinophil-specific colony-stimulating factor with activity for human cells. // J Exp Med 1986. - V. 163. - P. 1085-1099.

89. Lopez AF., Sanderson CJ., Gamble JR., et al. Recombinant human interleukin 5 is a selective activator of human eosinophil function. // J Exp Med 1988. - V.l67. - P. 219-224.

90. Mauser PJ., Pitman A., Witt A. et al. Inhibitory effect of the TRFK-5 anti-IL-5 antibody in a guinea pig model of asthma. // Am Rev Respir Dis 1993. - V. 148. - P. 1623-1627.

91. Mauser PJ., Pitman AM., Fernandez X. et al. Effects of an antibody to interleukin-5 in a monkey model of asthma. // Am J Respir Crit Care Med 1995. - V. 152. - P. 467-472.

92. Marsh DG., Neely JD., Breazeale DR. et al: Linkage analysis of IL4 and other chromosome 5q31.1 markers and total serum immunoglobulin E concentrations. // Science 1994. - V. 264. - P. 1 152-1156.

93. Meyers D. A., Postma D. S., Panhuysen C. I. M. et al. Evidence for a locus regulating total serum IgE levels mapping to chromosome 5 // Genomics 1994. - V. 23. - P. 464-470.

94. Meyers D. A. New approaches to understanding the genetics of asthma // Immunol.Allergy Clin.North Am. 2005. - V.25(4). - P. 743-55.

95. Mitsuyasu H., Izuhara K., Mao X.Q. et al. ILe50Val variants or IL4Ra upregulates IgE synthesis and associates with atopic asthma //Nature Genet. 1998,- V. 19.-P. 119-120.

96. Mitsuyasu H., Yanagihara Y., Mao X.Q. et al. Dominant effect of ILe50Val variant of the human IL-4 receptor a-chain in IgE synthesis //J. Immunol. 1999. - V. 162.-P. 1227-1231.

97. Miyajima A., Kitamura T., Harada N. et al. Cytokine receptors and signal transduction // Annu.Rev.Immunol. 1992. - V. 10. - P. 295331.

98. Moffatt MF., Schou C., Faux JA. Et al. Germline TCR-A restriction of immunoglobulin E responses to allergen. // Immunogenetics -1997. -V. 46. P. 226-230.

99. Naka T., Narazaki M., Hirata M. et al. Structure and function of a new STAT-induced STAT inhibitor // Nature-1997.-V.387.-P.924-29.

100. Ng J., Cantrell D. STAT3 Is a Serine Kinase Target in T Lymphocytes. IL-2 and T cell antigen receptor signals converge upon BiyKiiiTy 727 // J.Biol.Chem. 1997. - V. 272. - P. 24542-24549.

101. Nagarkatti R., Kumar R., Sharma SK. et al. Association of IL4 gene polymorphisms with asthma in North Indians. // Int Arch Allergy Immunol 2004 - V. 134. - P. 206-212

102. Noguchi E., Shibasaki M., Arinami T. et al: Evidence for linkage between asthma/atopy in childhood and chromosome 5q31.1-q33 in Japanese. // Am J Respir Crit Care Med 1997. - V. 156. - P. 13901393.

103. Noguchi E., Shibasaki M., Arinami T. et al: Association of asthma and the interleukin-4 promoter gene in Japanese. // Clin Exp Allergy -1998.-V. 28.-P. 449-453.

104. Noguchi E., Shibasaki M., Arinami T. et al. Lack of association of atopy/asthma and the interleukin-4 receptor a gene in Japanese // Clin. Exp. Allergy 1999. - V. 29. - P. 228-233.

105. Noguchi E., Shibasaki M., Arinami T et al. No association between atopy/asthma and the Ue50Val polymorphism of IL-4 receptor. // Am J Respir Crit Care Med 1999. - V. 160. - P. 342-345.

106. Paul W.E., Seder R.A. Lymphocyte response and cytokines. // Cell. 1994.-V. 76.-P. 241-251.

107. Patuzzo C., Trabetti E., Malerba G. et al. No linkage or association of the IL-4Ralpha gene Q576R mutation with atopic asthma in Italian famlLies. // J Med Genet. 2000. - V. 37. - P. 382-384.

108. Pellegrini S., Dusanter-Fourt I. The structure, regulation and function of the Janus kinases (JAKs) and the signal transducers and activators of transcription (STATs) // Eur.J.Biochem. 1997. - V. 248. - P. 615-633.

109. Polvi A., West A., Kinos R. et al. Development of Asthma-Immuno Chip for gene expression studies of asthma and other immune mediated diseases. // Am. J. Hum. Genet. 2000. - V. 67- P. 382.

110. Postma D.S., Bleecker E.R., Amelung P.J. et al. Genetic susceptibility to asthma bronchial hyperresponsiveness coinherited with a major gene for atopy.// N.Eng.J.Med.-l995.-V.333-P.894-900.

111. Renauld J-C. New insights into the role of cytokines in asthma. // J Clin Pathol. 2001. - V. 54. - P. 577-589.

112. Ricci M., Matucci A., Rossi O. Pathogenetic mechanisms and genetic aspects of bronchial asthma. // ACI International. 1997. -V. 9.-P. 141-148.

113. Rooney J.W., Hoey T., Glimcher L.H. The Proximal promoter of the IL-4 gene is composed of multiple essential regulatory sites that bind at least two distinct factors. // Immunity. 1995. - V. 2. - P. 473.

114. Rooney J.W., Hodge M.R., McCaffrey P.G. et al. A common factor regulates both Thl- and Th2-specific cytokine gene expression. // EMBO J. 1994. - V. 13. - P. 625.

115. Rosa-Rosa L., Zimmermann N., Bernstein J.A. et al. The R576 IL-4 receptor alpha allele correlates with asthma severity. // J Allergy Clin Immunol. 1999. - Y. 104. - P. 1008-1014.

116. Rosenwasser L.J. The genetics of atopy. // Allergy. 1998. - V. 53 (46). - P. 8-11.

117. Rosenwasser L.J., Klemm D.J., Dresback J.K. et al. Promoter polymorphisms in the chromosome 5 gene cluster in asthma and atopy. // Clin Exp Allergy. 1995. - V.25 (2). - P. 74-78.

118. Scarel-Caminaga R.M., TrevILatto P.C., Souza A.P. et al. Frequencies of the -330 (T -» G) IL-2 and -590 (T C) IL-4 gene polymorphisms in a population from south-eastern Brazil. // European Journal of Immunogenetics. 2001. - V. 29. - P. 293-296.

119. Schindler C., Darnell-JE J. Transcriptional responses to polypeptide ligands: the JAK-STAT pathway. // Annu.Rev.Biochem. 1995. - V. 64. - P. 621-651.

120. Schindler U., Wu P., Rothe M. Components of a Stat recognition code: evidence for two layers of molecular selectivity.// Immunity -1995. V. 2. - P. 689-697.

121. Schreiber S.L., Crabtree G.R. The mechanisms of action of cyclosporin A and FK506. // Immunol Today. 1992. - V. 13. -P. 136-142.

122. Sibbald B. Genetic bases of asthma. // Semin. Resp. Med. 1986. -V. 7. - P. 307-315.

123. Shapiro S.D. Animal models for chronic obstructive pulmonary disease. Age of klotho and marlboro mice. Am. // J. Respir. Cell Mol. Biol. -2000. V. 22. - P. 4-7.

124. Song Z., Casolaro V., Chen R. et al. Polymorphic nucleotides within the human 1L-4 promoter that mediate overexpression of the gene. // J Immunol. 1996. - V. 156. - P. 424-429.

125. Starr R., WILlson T.A., Viney E.M. et al. A family of cytokine-inducible inhibitors of signaling. //Nature 1997.-V. 387.- P. 917-21.

126. Stavnezer J. Antibody class switching. // Adv. Immunol. 1996. -V. 61. - P. 79-146.

127. Stranick K.S., Zambas D.N., Uss A.S. et al. Identification of transcription factor binding sites important in the regulation of the human interleukin-5 gene. // J Biol Chem. 1997. V. 272. P. 1645316465.

128. Suzuki I., Hizawa N., Yamaguchi E., et al. Association between a C+33T polymorphism in the IL-4 promoter region and total serum IgE levels. // Clin Exp Allergy 2000. - V. 30 - P. 1746-1749.

129. Suzuki 1., Yamaguchi E., Hizawa N. et al. A new polymorphism in the 5' flanking region of the human interleukin (IL)-4 gene. // Immunogenetics. 1999. - V. - 49. - P. 738-739.

130. Symula D.J., Frazer K.A., Ueda Y. et al. Functional screening of an asthma QTL in YAK transgenic mice. // Nature Genet. 1999. - V. 23.- P. 241-244.

131. Szabo S.J., Gold J. S., Murphy T. L., et al. Identification of cisacting regulator elements controlling interleukin-4 gene expression in T cells: roles for NF-Y and NFATc. // Mol. Cell. Biol. 1993. -V. 13. -P. 4793-4805.

132. Takabayashi. A., Ihara. K., SasakiY. et. al. Novel polymorphism in the 5'-untranslated region of the interleukin-4 gene. // J. Hum.Genet. 1999.-V. 44.-P. 352-353.

133. Takeda K., Akira S. STAT family of transcription factors in cytokine-mediated biological responses // Cytokine Growth Factor Rev. 2000. - V. 11. - P. 199-207.

134. Trejaut J.A., Tsai Z.U., Lee H.L. Cytokine gene polymorphisms in Taiwan. // Tissue Antigens. 2004. - V. 64(4). - P. 492-499.

135. Todd M.D., Grusby M.J., Lederer J.A. et al. Transcription of the Interleukin 4 Gene Is Regulated by Multiple Promoter Elements. // J. Exp. Med. 1993. - V. 177. - P. 1663-1674.

136. Tokoyoda K., Tsujikawa K., Matsushita H. Up-regulation of IL-4 production by the activated cAMP/cAMP-dependent protein kinase (protein kinase A) pathway in CD3/CD28~stimulated naive T cells. // Int.Immunol. 2004. - V. 16 (5). - P. 643-655.

137. The Collaborative Study on the Genetics of Asthma. A genome-wide search for asthma susceptibility loci in ethnically diverse populations //Nature Genet. 1997. - V. 15. - P. 389-392.

138. Walley A.J., Cookson W.O. Investigation of an interleukin-4 promoter polymorphism for associations with asthma and atopy. // J Med Genet. 1996. - V. 33. - P. 689.

139. Walley A.J., Wiltshire S., Ellis C.M. et al. Linkage and allelic association of chromosome 5 cytokine cluster genetic markers with atopy and asthma associated traits. // Genomics. 2001. - V. 72 (1). -P. 15-20.

140. Walker C.E., Bode L., Boer T.T. et al. Allergic and nonallergic asthmatics have distinct patterns of T-cell activation and cytokine production in peripheral blood and bronchoalveolar lavage. // Am. Rev. Respir. Dis. 1992. - V. 146. - P. 109-112.

141. Walker C., Jr J.C., Virchow P.L. et al. T cell subsets and their soluble products regulate eosinophilia in allergic and nonallergic asthma. //J. Immunol. 1991. - V. 146. - P. 1929-1932.

142. Wenner C.A., Szabo S.J., Murphy K.M. Identification of IL-4 promoter elements conferring Th2-restricted expression during Thelper cell subset development. // J. Immunol. 1997. - V. 158. -P. 765-773.

143. Wills-Karp M., Luyimbazi J., Xu X. et al. Interleukin-13: central mediator of allergic asthma.// Science. 1998.-V. 282.-P. 2258-2261.

144. Woolcock A.J., Peat J.K. Evidence for the increase of asthma worldwide // The rising trends in asthma Ed. D. Chadwick, G. Cadrew. J. WILey & Sons, Chichester. - 1997. P. 122-139.

145. Yamaguchi Y., Hayashi Y., Sugama Y. et al. Highly purified murine interleukin 5 (IL-5) stimulates eosinophil function and prolongs in vitro survival. IL-5 as an eosinophil factor. // J Exp Med. 1988. -V. 167. - P. 1737-1740.

146. Yan L., Galinsky R.E., Bernstein J.A. et al. Histamine N-methyltransferase pharmacogenetics: association of a common functional polymorphism with asthma. // Pharmacogenetics. 2000. -V. 10.-P. 261-266.

147. Zhang Y., Lefort J., Kearsey V. et al. A genome-wide screen for asthma-associated quantitative trait loci in a mouse model of allergic asthma. //Hum. Mol. Genet. 1999. - V. 8. - P. 601-605.

148. Zheng T., Zhu Z., Wang Z. Inducible targeting of IL-13 to the adult lung causes matrix metalloproteinase- and cathepsin-dependent emphysema. / J. Clin. Invest. 2000. - V. 106(9). - P. 1081-1093.

149. Zheng T., Zhu Z., Liu W. et al. Cytokine regulation of IL-13Ralpha2 and IL-13Ralphal in vivo and in vitro. // J. Allergy Clin. Immunol.2003. -V. 11 (4). P. 720-728.

150. Zhou G., Zhai Y., Dong X. et al. Haplotype structure and evidence for positive selection at the human IL13 locus. // Mol.Biol.Evol.2004. V. 21 (1). - P. 29-35.

151. Zhu Z, Homer R.J., Wang Z. et al. Pulmonary expression of interleukin-13 causes inflammation, mucus hypersecretion, subepithelial fibrosis, physiologic abnormalities, and eotaxin production. // J Clin Invest. 1999. - V. - 102. - P. 779-788.

152. Zhu Y., Chen L., Huang Z. et al. IL-5 primes Th2 cytokine-producing capacity in eosinophils through a STAT5-dependent mechanism. // J. Immunol. 2004. - V. 173 (5) - P. 2918-2922.

153. Zhu Z., Lee C.G., Zheng T., Chupp G. et al. Airway inflammation and remodeling in asthma. Lessons from interleukin 11 and interleukin 13 transgenic mice. // Am. J. Respir. Crit Care Med. -2001. V. 164 (10). - P. 67-70.