Полиморфизм CAG-повторов гена андрогенного рецептора при патозооспермии и мужском бесплодии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Меликян Люся Петросовна

• Меликян Люся Петросовна
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Меликян Люся Петросовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Степень разработанности темы исследования

Цель и задачи исследования

Научная новизна работы

Теоретическая и практическая значимость работы

Методология и методы диссертационного исследования

Основные положения, выносимые на защиту

Степень достоверности результатов

Соответствие диссертации паспорту научной специальности

Апробация работы

Личный вклад автора в проведение исследования

Публикации результатов исследования

Структура и объем диссертации

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Мужское бесплодие, его формы, причины и факторы

1.2 Сперматогенез у человека и его нарушения

1.3 Генетически обусловленные формы мужского бесплодия и генетические факторы нарушения сперматогенеза и мужской фертильности

1.3.1 Сидром Клайнфельтера

1.3.2 46,ХХ-тестикулярная форма НФП

1.3.3 Микроделеции Y-хромосомы

1.4 Андрогены, их влияние на мужскую репродуктивную систему

1.5 Ген андрогенного рецептора (АЯ/НиМАЯА)

1.6 Полиморфизм СЛО-повторов гена АЯ и его роль в нарушении сперматогенеза и мужской фертильности

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Объекты исследования

2.2 Материалы исследования

2.3 Методы исследования

2.3.1 Клинико-генетический анализ

2.3.2 Стандартное спермиологическое исследование эякулята

2.3.3 Выделение ДНК из крови и эякулята

2.3.4 Полимеразная цепная реакция

2.3.5 Электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ)

2.4 Статистический анализ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 СЛО-полиморфизм гена ЛЯ в группах мужчин с патозооспермией, с нормозооспермией и фертильных мужчин

3.2 Количество CAG-повторов в гене ЛЯ у пациентов с различными формами патозооспермии без частичных делеций в локусе AZFс

3.3 Распределение CAG-повторов гена ЛЯ в группах с различными формами патозооспермии и частичными делециями в локусе AZFс

3.4 Исследование зависимости нарушения фертильности и показателей спермограммы от длины СЛО-повторов гена ЛЯ

3.5 Исследование зависимости формы патозооспермии от числа CAG-повторов в гене ЛЯ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение

Приложение

Приложение

Приложение

Приложение

Приложение

Приложение

Приложение

Приложение

Приложение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Полиморфизм CAG-повторов гена андрогенного рецептора при патозооспермии и мужском бесплодии»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

Бесплодие в настоящее время является одной из наиболее социально значимых и медико-социальных проблем. Согласно определению Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) бесплодие определяют как неспособность супружеской пары к зачатию в течение одного календарного года при регулярном половом акте без использования противозачаточных средств [Руководство ВОЗ, 2012]. По литературным данным распространенность бесплодия в браке наблюдается в среднем у 15% супружеских пар [Кгаш7 С. е1 а1., 2018]. Нарушение фертильности у мужчин и женщин встречается примерно с равной частотой, при этом в 30% случаев бесплодия в браке его отмечают у обоих партнеров, и примерно в 50% случаев бесплодия причину нарушения фертильности не удается установить [ТаИшавЬроиг Е. е1 а1., 2014].

По данным современных исследований у 40-50% супружеских пар с нарушением фертильности отмечают мужской фактор бесплодия, а нарушение фертильности отмечают у 7% мужчин из общей популяции [ВаЬакИапгаёеЬ Е. е1 а1., 2020]. Нарушение репродуктивной функции у мужчин может быть обусловлено множеством причин и патогенных факторов, которые включают нарушения формирования пола (НФП) и аномалии развития органов половой системы (крипторхизм, гипоспадия, монорхизм и др.), различные генетические и эпигенетические факторы, гормональные нарушения (гипогонадизм, гиперпролактинемия и др.), инфекционные заболевания, травмы, облучение, интоксикация и токсические поражения, неблагоприятный образ жизни (неправильное питание, профессиональные вредности, вредные привычки), психо-сексуальные проблемы [ВаЬакИа^аёеИ Е. е1 а1., 2020].

В последние годы многими исследованиями показана высокая значимость генетических факторов для развития и функции репродуктивной системы и фертильности [Уоп§ Е. Ь. е1 а1., 2003]. Генетические факторы, связанные с

мужским бесплодием и другими формами нарушения фертильности у мужчин, включают хромосомные аномалии, вариации числа копий (CNV - copy number variation), наиболее частыми из которых являются микроделеции Y-хромосомы, различные варианты нуклеотидной последовательности в генах, контролирующих формирование пола, развитие мужских половых органов, сперматогенез, секрецию и действие релизинг-гормона, гонадотропных и половых гормонов, а также других процессов, вовлеченных в репродукцию [Yong E. L. et al., 2003]. К часто исследуемым генным вариантам, которые могут негативно влиять на репродуктивную функцию у мужчин, относят патогенные (мутации) и полиморфные варианты в генах муковисцидоза (CFTR) и андрогенного рецептора (AR/HUMARA) [Черных В.Б. и др., 2015].

Одним из наиболее изученных генетических факторов мужского бесплодия являются микроделеции в локусе AZF (Azoospermia factor, фактор азооспермии), располагающемся в длинном плече Y-хромосомы, локус Yq11.2 [Navarro-Costa P. et al., 2010]. AZF делеции могут быть «полными», т.е. целиком удаляющими один или более регион локуса AZF (AZFa, AZFb или AZF^ и «частичными» (например, b2/b3, gr/gr и sY1197), т.е. частично или не полностью захватывающими какой-либо из AZF-регионов. Почти все полные AZF делеции являются патогенными делеционными вариантами хромосомы Y, возникающими de novo, и приводят к тяжелому нарушению сперматогенеза (необструктивной азооспермии и олигозооспермии тяжелой степени). Частичные AZF делеции характеризуются различной степенью влияния на сперматогенез и мужскую фертильность, варьируя от негативного до нейтрального. Влияние частичных делеций, возможно, связано с локализацией и размером потерянного участка, определяющих состав утраченных генов. В целом для делеций AZF локуса характерна гено-фенотипическая зависимость: чем больше размер делеции хромосомы Y, тем более тяжелая степень нарушения сперматогенеза [Navarro-Costa P. et al., 2010].

Эндокринные факторы играют значимую роль в регуляции развития и функций органов репродуктивной системы. Нарушение гормональной регуляции

функции гипоталамо-гипофизарно-гонадной оси является распространенной причиной нарушений формирования пола, полового созревания и/или гипогонадизма, нарушения гаметогенеза, женского и мужского бесплодия [Salonia A. et al., 2019]. Достаточный уровень андрогенов в мужском организме необходим для формирования органов репродуктивной системы по мужскому типу, развитие вторичных мужских половых признаков, процессов, необходимых для нормального сперматогенеза и мужской фертильности, он также регулирует функции гонад, предстательной железы, клеточную пролиферацию и и другие андроген-зависимые процессы [Salonia A. et al., 2019]. Снижение продукции или нарушение метаболизма стероидных гормонов или чувствительности к андрогенам приводит к аномалиям формирования и развития половой системы по мужскому типу, гипогонадизму, нарушению сперматогенеза и снижению качества эякулята, бесплодию или снижению фертильности у мужчин [Черных В.Б. и др., 2015]. Ведущую роль в гормональной регуляции мужской репродуктивной системы играют андрогены: тестостерон и дигидротестостерон [Salonia A. et al., 2019]. Действие мужских половых гормонов реализуется через их взаимодействие с андрогеновым рецептором (АР).

Андрогеновый рецептор (АР) является важнейшей составляющей гормональной регуляции экспрессии генов в органах и тканях-мишенях. Его дефекты могут быть вызваны патогенными вариантами (мутациями) или полиморфизмами гена AR/HUMARA (Androgen receptor; OMIM 312700; локус Xq12), приводят к различными андроген-зависимыми заболеваниям и нарушениям. Варианты нуклеотидной последовательности, которые нарушают функцию АР, вызывают широкий спектр фенотипов: НФП и аномалии полового развития и нормогонадотропный гипогонадизм, обусловленные полной и неполной нечувствительностью к андрогенам, бесплодие или снижение фертильности у мужчин вследствие нарушения сперматогенеза, развитие спинальной-бульбарной мышечной атрофии (СБМА) и других андроген-зависимых заболеваний [La Spada A. R. et al., 1991; Davis-Dao C. A. et al., 2007]. Повышенное (более 40) количество CAG-повторов в экзоне 1 гена AR приводит к

развитию СБМА (болезни Кеннеди; OMIM 313200), сопровождающейся эндокринными нарушениями, атрофией тестикул, гипогонадизмом, гинекомастией, олигозооспермией или азооспермией, или снижением мужской фертильности [La Spada A. R. et al., 1991; Davis-Dao C. A. et al., 2007].

В ряде исследований показано, что не только патогенные, но и некоторые полиморфные варианты гена андрогенного рецептора связаны с нарушением сперматогенеза и «идиопатическим» мужским бесплодием [Yong E. L. et al., 2003; Davis-Dao C. A. et al., 2007]. У фертильных мужчин и пациентов с нарушением фертильности, связанных с различными формами патозооспермии, обнаруживают различные аллельные варианты CAGn-полиморфного локуса в экзоне 1 гена AR, при этом отмечаются межгрупповые и межпопуляционные различия по количеству тринуклеотидных повторов. Вероятно, что мужчины с «длинным» и «коротким» полиглутаминовым трактом в белке АР имеют повышенный риск нарушения сперматогенеза и репродуктивной функции [Черных В.Б. и др., 2015]. Однако влияние CAG-повторов на функцию гена AR, в том числе в зависимости от других генетических факторов (генетического фона), на сперматогенез, сперматологические параметры и мужскую фертильность, этнические особенности CAGn-полиморфного локуса в гене AR изучены недостаточно.

Степень разработанности темы исследования

Рядом авторов обнаружена ассоциация полиморфного локуса CAGn в экзоне 1 гена AR с нарушением сперматогенеза и репродуктивной функции у мужчин в различных популяциях. У мужчин-носителей «длинных» CAG-аллелей гена AR чаще встречается бесплодие и патозооспермия [La Spada A. R. et al., 1991; Komri S. et al., 1999; Mifsud A. et al., 2001; Plaseski T. et al., 2007; Giagulli V.A. et al., 2014; al Zoubi M.S. et al., 2020]. В некоторых работах сообщали о взаимосвязи нарушения фертильности у мужчин с «короткими» вариантами CAG-повторов [Komri S. et al., 1999; Lazaros L. et al., 2008]. Результаты являлись неоднозначными, что многие авторы объясняли особенностями исследованных выборок. Следует

отметить, что многие работы, в которых исследовали взаимосвязь нарушения мужской фертильности и сперматогенеза и количества СЛО-повторов, выполнены на небольших выборках пациентов с различными критериями отбора. Кроме того, не установлено влияние количества СЛО-повторов в гене ЛЯ на нарушения показателей эякулята и патозооспермии в зависимости от других генетических факторов, в частности от наличия или отсутствия в геноме микроделеций хромосомы У.

Отсутствуют практические рекомендации по медико-генетическому исследованию CAGn-полиморфизма в гене ЛЯ и консультированию пациентов с нарушением фертильности, которым выполнено данное тестирование.

Цель и задачи исследования

Цель работы: изучить влияние полиморфного локуса СЛОп гена ЛЯ на фертильность и сперматологические показатели у российских мужчин с нарушением фертильности.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Сформировать выборку российских мужчин с нарушением фертильности неясного генеза, а также две группы сравнения (контроль): фертильные мужчины (с доказанным отцовством) и мужчины с нормозооспермией.

2. Оценить количество СЛО повторов в экзоне 1 гена ЛЯ и распределение различных аллелей по данному локусу у мужчин отобранной выборки и групп сравнения.

3. Исследовать сперматологические показатели у пациентов с различными вариантами полиморфизма CAGn гена ЛЯ.

4. Провести сравнительный анализ количества CAG-повторов и сперматологических показателей у мужчин с патозооспермией без частичных делеций в регионе AZFc хромосомы Y.

Научная новизна работы

Впервые на репрезентативной выборке исследован полиморфный СЛОп локус в экзоне 1 гена ЛЯ у российских мужчин с различным статусом фертильности и сперматологическими диагнозами (мужчин с нормозооспермей, пациентов с бесплодием, связанным с патозооспермией неясного генеза). Исследована связь различных аллельных вариантов гена андрогенного рецептора с формами патозооспермии и их возможная корреляция со сперматологическими показателями, в том числе у мужчин, имеющих различный генотип (по наличию/отсутствию частичных делеций Л7Бс региона хромосомы У).

Теоретическая и практическая значимость работы

Оценено влияние полиморфизма CAG-повторов в экзоне 1 гена андрогенного рецептора (ЛЯ) на сперматогенез и мужскую фертильность, развитие их нарушений у российских мужчин с различным статусом фертильности и сперматологическими диагнозами. Исследованы формы патозооспермии и сперматологические показатели у мужчин с патозооспермией и нормозооспермией с различным количеством СЛО-повторов, их возможная связь с различными аллельными вариантами гена ЛЯ, в том числе учитывая генотип по хромосоме У. Наличие взаимосвязи генотип-фенотип, например, при обнаружении повторов СЛОп<18, позволит установить диагноз нарушение фертильности или бесплодие мужской фактор в супружеской паре и начать раньше оказание помощи в рамках вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ, ЭКО/ИКСИ), у которых ранее было установлено бесплодие неясного генеза. Разработаны практические рекомендации по медико-генетическому исследованию СЛОп-полиморфизма гена андрогенного рецептора (ЛЯ) у мужчин с нарушением фертильности, консультирования пациентов с бесплодием, связанным с нарушением сперматогенеза и мужской фертильности.

Методология и методы диссертационного исследования

Методологической и теоретической основной диссертационного исследования явились научные работы отечественных и зарубежных исследователей в области изучения андрогенного рецептора (ЛЯ) и его СЛО-полиморфного локуса, микроделеций У-хромосомы, влияния данных генетических факторов на сперматогенез и мужскую фертильность, а также молекулярно-генетических подходов к диагностике мужского бесплодия.

В работе использованы следующие методы: клинические методы обследования, выделение геномной ДНК, метод полимеразной цепной реакции, электрофорез ДНК в полиакриламидном геле, стандартное сперматологическое исследование, методы статистической обработки данных.

Основные положения, выносимые на защиту

1. У российских мужчин (СЛО)п-полиморфный локус в экзоне 1 гена андрогенового рецептора (ЛЯ) ассоциирован с нарушением фертильности, связанным с патозооспермией. Носительство вариантов гена андрогенного рецептора (ЛЯ) с 18 и менее CAG-повторами связано с повышенным риском развития нарушения сперматогенеза, приводящего к олигозооспермии умеренной или тяжелой степени (ОШ=12,3 и ОШ=9,5, соответственно).

2. У мужчин с нарушением фертильности не выявлено статистически значимой зависимости основных сперматологических параметров (концентрации и общего количества сперматозоидов в эякуляте; количества (%) живых, прогрессивно подвижных и морфологически нормальных сперматозоидов) от количества СЛО-повторов в полиморфном локусе экзона 1 гена ЛЯ.

Степень достоверности результатов

Работа выполнена на репрезентативной по объему выборке - 1378 индивидуумов, в том числе 994 мужчин с нарушением фертильности и 387 мужчин с нормозооспермией или фертильные мужчины (с доказанным отцовством). Исследование выполнено с использованием общепринятых клинических и лабораторных методов (спермиологическое исследование), современных молекулярно-генетических методов диагностики и адекватных методов статистической обработки данных анализа. Для теоретического обоснования и сравнительного анализа проанализировано большое количество источников отечественной и зарубежной литературы. Результаты, полученные автором, свидетельствуют о выполнении поставленных задач, выводы и умозаключения подкреплены убедительными экспериментальными данными и полностью отражают результаты проведенного исследования.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены на III Всероссийской конференции с международным участием «Репродуктивное здоровье женщин и мужчин», Москва, 2018 г.; Конференции молодых ученых ФГБНУ «МГНЦ», Москва, 2018 г.; VI Всероссийской конференции с международным участием «Репродуктивное здоровье женщин и мужчин», Москва, 2019 г.; 12-ой Встрече молодых ученых в андрологии «The 12th Meeting Of The Network For Young Researchers In Andrology (NYRA)», г. Гиссен, Германия, 2019 г.

Работа одобрена этическим комитетом, прошла экспертную комиссию, рекомендована к защите на заседании Диссертационного совета ФГБНУ «МГНЦ».

Соответствие диссертации паспорту научной специальности

Диссертация соответствует паспорту специальности 1.5.7. Генетика, а именно п. 19 (Генетика человека. Медицинская генетика. Наследственные болезни. Медико-генетическое консультирование. Болезни с наследственной предрасположенностью. Генетика старения. Иммуногенетика. Онкогенетика. Генетика поведения. Молекулярно-генетическая/биохимическая диагностика заболеваний человека. Фармакогенетика. Генотоксикология. Генетическая терапия). Работа включает в себя обсуждение наследственных болезней, медицинской генетики, генетики человека, генетику нарушений репродукции.

Личный вклад автора в проведение исследования

Автор непосредственно участвовал в разработке схемы эксперимента, постановке целей и задач, выборе методов исследования, проведении всех этапов эксперимента. При участии автора сформированы выборки пациентов с нарушением фертильности и группы сравнения, проведено молекулярно-генетическое исследование, оценены его результаты. Автором проанализирована литература по теме диссертации, обработаны и проанализированы полученные результаты, проведен математический и статистический анализ данных, сформулированы основные результаты и выводы и написана рукопись. Результаты настоящего исследования опубликованы в рецензируемых журналах, а также представлены на российских и зарубежных научных конференциях лично автором.

Публикации результатов исследования

Материалы диссертации представлены в 7 печатных работах соискателя, в том числе 4 статьях в журналах, рекомендованных ВАК при Минобрнауки России для соискателей ученой степени кандидата медицинских наук (3 из них в Web of

Science и/или Scopus). В опубликованных научных работах и автореферате полностью отражены основные результаты диссертации, положения и выводы.

Структура и объем диссертации

Диссертация имеет следующую структуру: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты и обсуждение, заключение, выводы, практические рекомендации, список литературы, приложения. Работа представлена на 121 страницах машинописного текста, содержит 10 таблиц, 10 рисунков и 9 приложений. Библиографический указатель включает 126 наименования, из них 18 отечественных и 108 иностранных источников, а также 2 интернет-ресурса.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Мужское бесплодие, его формы, причины и факторы

На сегодняшний день проблема бесплодия широко исследуется и обсуждается. Согласно определению Всемирной Организации Здравоохранения, ВОЗ (WHO, 2000), брак считается бесплодным, если в течение 1 года регулярной половой жизни без контрацепции беременность не наступает [National Institute for Health and Care Excellence, 2013; Глыбочко П. В., 2014; Katz D.J. et al., 2017].

По распространенности бесплодия в разных странах отсутствие беременности в течение одного года регистрируют примерно у 10-25% супружеских пар, из них за медицинской помощью обращаются от 15 до 50% пар. В отсутствие лечения 23% супружеских пар удается зачать ребенка в течение 2 лет и еще 10% пар - в течение 4 лет после начала наблюдения. От 2 до 10% супружеских пар не могут зачать ребенка естественным путем, у 10-25% пар вторая беременность не наступает, и примерно у 5% пар зачатие не происходит [Глыбочко П. В., 2014].

Не менее чем в 30% случаев бесплодие в браке связано с «мужским фактором» (мужское бесплодие или мужской фактор бесплодия в браке), в 35% -женским бесплодием, заболеваниями обоих партнеров объясняются 15% случаев бесплодия. В остальных случаях причину бесплодия установить не удается (идиопатическое бесплодие) [Глыбочко П. В., 2014]. Этиологические факторы бесплодия многочисленны и разнообразны. Мужское бесплодие может возникнуть в результате анатомических, врожденных аномалий или генетических нарушений, урологических, эндокринных, инфекционных, системных, онкологических, иммунологических и неврологических заболеваний, травм, ятрогенных повреждений, гонадотоксинов, репротоксикантов и выработки антител к сперме [Ferlin A. Et al., 2007; Poongothai J. Et al., 2009; Katz D.J. et al., 2017]. Причина бесплодия у 45-50% мужчин остается неизвестной [Jungwirth A. Et al., 2012; Dabaja A.A. et al., 2014].

Не менее 15-30% случаев нарушения фертильности у мужчин связано с генетическими причинами или факторами [Ferlin A. Et al., 2007; Naz M. Et al., 2017; National Institute for Health and Care Excellence, 2013; Katz D.J. et al., 2017]. Генетические дефекты, связанные с мужским бесплодием, включают хромосомные аномалии, вариации числа копий (CNV, copy number variation), наиболее частыми из которых являются микроделеции в локусе AZF (Yq11.2) хромосомы Y, различные генные варианты (патогенные и некоторые полиморфные), в том числе в гене CFTR (ген муковисцидоза), в генах, контролирующих сперматогенез, влияющих на секрецию и действие релизинг-гормона, в гене андрогенного рецептора (AR/HUMARA), гонадотропных и половых гормонов, и др. [Yong E. L. et al., 2003; Katz D.J. et al., 2017].

Наличие генетических причин и факторов, связанных с нарушением мужской фертильности, выявляют с помощью разных методов: клинических, клинико-генетических, цитогенетических и молекулярно-цитогенетических (стандартное цитогенетическое исследование - анализ кариотипа, FISH-анализ), а также различных молекулярно-генетических методов исследования. С помощью последних выполняют поиск вариантов нуклеотидной последовательности в генах, ответственных за нарушение фертильности у мужчин. Арсенал молекулярно-генетических методов в диагностике мужского бесплодиия включает полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и ее модификации, в частности, мультиплексную ПЦР, количественную флуоресцентную ПЦР (КФ-ПЦР) и ПЦР в режиме реального времени (Real-time PCR), метод ПЦР-ПДАФ (полиморфизм длин амплифицированных фрагментов), MLPA (Multiplex ligation-dependent probe amplification - мультиплексная лигазо-зависимая амплификация проб), таргетный анализ отдельных генов или локусов, анализ панелей генов и их вариантов, в том числе секвенирование отдельных генов по Сенгеру, секвенирование экзома и генома с помощью массового параллельного секвенирования (MPS) и другие.

Различные патогенные генетические и неблагоприятные средовые факторы, в том числе инфекции, передаваемые половым путем, хронические и онкологические заболевания, вредные привычки, вредные профессиональные

факторы и загрязненность окружающей среды, а также их сочетание, влияют на один из ключевых критериев мужской фертильности - сперматогенез.

1.2 Сперматогенез у человека и его нарушения

Сперматогенез - это сложный многостадийный биологический процесс клеточной трансформации, в результате которого из незрелых (диплоидных, 2n) сперматогониальных клеток (сперматогоний) образуются зрелые (гаплоидные, n) мужские половые клетки (сперматозоиды). Этот процесс характеризуется морфологическими, генетическими и эпигенетическими изменениями в дифференцирующихся половых клетках [Hess R.A., de Franca L.R., 2008].

Сперматогенез осуществляется в извитых семенных канальцах яичка, содержащих незрелые и зрелые мужские половые клетки, образующих многочисленные концентрические слои, пронизанные клетками Сертоли. Цитоплазма клеток Сертоли простирается тонкими рукавами вокруг дифференцирующихся половых клеток, чтобы питать и поддерживать их клеточные ассоциации на протяжении всего процесса сперматогенеза. Выведение сперматозоидов из яичка в его придаток (эпидидимис) происходит с помощью сокращения мышечного слоя извитых и прямых семенных канальцев и движения по ним жидкости [Hess R.A., de Franca L.R., 2008; Орлов Р.С., 2010]. В момент прохождения через придаток яичка (эпидидимис) сперматозоиды приобретают способность к подвижности и оплодотворению [James E.R. et al., 2020].

Основные этапы сперматогенеза происходят следующим образом: сперматогонии размножаются сначала повторяющимися митотическими делениями, а затем они становятся сперматоцитами, которые входят в мейоз, который включает в себя два деления - первое (редукционное) и второе (эквационное) (рисунок 1).

В премейотических половых клетках происходит репликация ДНК, а в профазе I мейоза - генетическая рекомбинация гомологичных хромосом, а затем сокращение числа хромосом клетки с образованием овальных сперматид, которые

имеют гаплоидный набор хромосом (n) и дифференцируются в зрелые мужские половые клетки (мужские гаметы) - сперматозоиды, локализованные в просвете (люминальной зоне) извитых семенных канальцев (рисунок 1) [Hess R.A., de Franca L.R., 2008].

СПЕРМАТОЗОИДЫ

Рисунок 1 - Схема сперматогенеза человека и млекопитающих [Курило Л.Ф. и

др., 1989; 2015]

Сперматогенез состоит из трёх фаз: митоза, двух делений мейоза и спермиогенеза [Heller, Clermont, 1964].

Сперматогонии и их пролиферация (митоз). Сперматогониальная популяция возникает из первичных половых клеток, которые мигрируют в развивающиеся семенники в период внутриутробного развития плода [Heller, Clermont, 1964; de Kretser D.M. et al., 1998]. Они связываются с клетками мезенхимы, которые являются предшественниками, дифференцирующимися в клетки Сертоли, образуя семенные канальцы. В формирующихся тестикулах первичные половые клетки преобразуются в гоноциты, которые остаются в центре семенных канальцев, будучи окруженными незрелыми клетками Сертоли. После периода размножения гоноциты мигрируют к базальной мембране извитых семенных канальцев, где они делятся с образованием сперматогониев типа А, которые преобразуются в сперматогонии типа B [Heller, Clermont, 1964; de Kretser D.M. et al., 1998].

Сперматогонии высокочувствительны к патогенным факторам и повреждающим воздействиям, к ним относятся ионизирующее излучение, алкоголь, голодание, перегревание, тяжелые заболевания, инфекции и местное воспаление, которые приводят к дегенеративным изменениям сперматогененого эпителия [Орлов Р.С., 2010].

Мейоз. Вступление сперматогониев типа B в профазу I мейоза представлено преобразованием этих клеток в первичные сперматоциты (сперматоциты I), которые делятся с образованием вторичных сперматоцитов (сперматоциты II). Последние после очень краткой стадии развития (длящейся около 6 часов) образуют круглые сперматиды. Проходя два деления (I и II) мейоза мужские половые клетки с диплоидным набором хромосом (2n=46), преобразуются в клетки с гаплоидным набором хромосом (n=23) [de Kretser D.M. et al., 1998].

Фаза формирования (спермиогенез). Округлая сперматида, которая формируется в результате второго мейотического деления, претерпевает ряд сложных морфологических изменений, в результате которых она трансформируется в сперматозоид [de Kretser D.M. et al., 1998]. Этот процесс включает конденсацию хроматина и компактизацию и перемещение ядра к периферии клетки; образование модифицированной лизосомы - акросомы,

которая расположена у апикальной поверхности ядра сперматозоида, прилегая к клеточной мембране. Уменьшение размеров ядра (примерно в 5 раз) происходит за счет компактизации хроматина путем замены ДНК-связывающих гистоновых белков на протамины. Из сперматид путем эксфузии удаляется большая часть цитоплазмы в виде остаточных (резидуальных) телец, которые фагоцитируют клетки Сертоли. Происходит формирование аксонемы из микротрубочек, которая модифицируется, в проксимальной части жгутика образуется фиброзная оболочка [de Kretser D.M. et al., 1998].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Меликян Люся Петросовна, 2024 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аль-Шукри С.Х., Урология // под ред. С.Х. Аль-Шукри, В.Н. Ткачука. -М.: ГЭОТАР-Медиа - 2012. - 640 с.

2. Глыбочко П. В., Урология // под ред. Глыбочко П. В., Аляева Ю. Г. - 3-е изд., перераб. и доп. -М.: ГЭОТАР-Медиа - 2014. - 592 с.

3. Курило Л.Ф., Штаут М.И. Генетические и эпигенетические механизмы регуляции, хронология и динамика сперматогенеза у млекопитающих // Андрология и генитальная хирургия. - 2015. - Том. 16. - С. 31-40.

4. Меликян Л.П., Черных В.Б. Полиморфизм CAG-повторов гена рецептора андрогенов, болезнь Кеннеди и мужское бесплодие // Андрология и генитальная хирургия. - 2019. - Том. 20(2). - С. 35-39.

5. Михайленко Д.С., Соболь И.Ю., Сафронова Н.Ю., Симонова О.А., Ефремов Е.А., Ефремов Г.Д., Алексеев Б.Я., Каприн А.Д., Немцоваи М.В. Частота выявления делеций AZF, мутаций CFTR и длинных аллелей CAG-повтора AR при первичной лабораторной диагностике в гетерогенной группе пациентов с мужским бесплодием // Урология. - 2019. № 3. - С. 101-107.

6. Эндокринология. Национальное руководство. Краткое издание // под ред. И. И. Дедова, Г. А. Мельниченко. -М.: ГЭОТАР-Медиа - 2013. - 832 с.

7. Орлов Р.С., Нормальная физиология // Орлов Р.С., Ноздрачев А.Д. - 2-е изд., испр. и доп. -М.: ГЭОТАР-Медиа - 2010. - 832 с.

8. Онопченко М.А., Васильев Г.В., Осадчук А.В., Осадчук Л.В. Этнические различия длины CAG-повторов в гене андрогенового рецептора и уровня тестостерона у молодых мужчин Сибирского региона России // Новейшие достижения в области медицины, здравоохранения и здоровьесберегающих технологий. Сборник материалов I Международного конгресса. Под общей редакцией Просекова А.Ю. - Кемерово, Издательство: Кемеровский государственный университет (Кемерово). 2022. - 318 с.

9. Руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека // 5-е изд., 2010 г. Пер. с англ. Н.П. Макарова. Науч. ред. Л.Ф. Курило. М.: Капитал Принт. -2012. - 305 с.

10. Столбовская О.В., Курносова Н.А., Дрождина Е.П., Слесарев С.М., Слесарева Е.В. Биология размножения и развития: учебное пособие. Часть 1. Детерминация пола // Ульяновск: УлГУ - 2015. - 704 с.

11. Фесай О.А., Кравченко С.А., Тыркус М.Я., Макух Г.В., Зинченко В.М., Стрелко Г.В., Лившиц Л.А. CAG-полиморфизм гена андрогенового рецептора у мужчин с азооспермией и олигозооспермией из Украины // Цитология и генетика.

- 2009. - Том. 43. - С. 45-51. [Fesai O.A., Kravchenko S.A., Tyrkus M.Ya. et al. Androgen receptor CAG gene polymorphism among azoospermic and Oligozoospermie men from Ukraine // Tsytologiya i genetika = Cytology and genetics. - 2009. - Vol. 43.

- P. 45-51. (In Russ.)].

12. Черных В.Б., Степанова А.А., Бескоровайная Т.С. Сорокина Т.М. Шилейко Л.В., Курило Л.Ф., Поляков А.В. Анализ частых мутаций и IVS8-T полиморфизма гена CFTR у российских мужчин с бесплодием // Генетика. - 2010. - Том. 46(6). -С. 844-852.

13. Черных В.Б. Аномалии половых хромосом при нарушениях формирования пола и репродукции человека: диссертация доктора медицинских наук: 03.02.07 // Черных Вячеслав Борисович. - М. - 2015. - 435 с.

14. Черных В.Б., Руднева С.А., Сорокина Т.М. Шилейко Л.В., Остроумова Т.В., Ермолаева С.А., Курило Л.Ф., Рыжкова О.П., Близнец Е.А., Чухрова А.Л., Поляков А.В. Влияние СAG-полиморфизма гена андрогенового рецептора (AR) на сперматогенез у мужчин с бесплодием // Андрология и генитальная хирургия. -2015. - Том. 16(4). - С. 55-61.

15. Черных В.Б. Гоносомные аномалии и CNV, и их диагностика // Медицинская Генетика. - 2018. - Том. 17(10). - С. 8-14.

16. Штаут М.И., Сорокина Т.М., Курило Л.Ф., Шмарина Г.В., Марнат Е.Г., Репина С.А., Красовский С.А., Черных В.Б. Сравнительный анализ результатов спермиологического исследования у пациентов с азооспермией, вызванной

муковисцидозом и синдромом врожденной двусторонней аплазии семявыносящих протоков // Андрология и генитальная хирургия. - 2019. - Том. 20(1). - С. 82-90.

17. Штаут М.И., Опарина Н.В., Шилова Н.В., Сорокина Т.М., Курило Л.Ф., Поляков А.В., Черных В.Б. Делеции в AZF локусе и нарушения сперматогенеза у мужчин c мозаицизмом по хромосоме Y // Медицинская Генетика. - 2022. - Том. 21(11). - С. 4-11.

18. Штаут М.И., Сорокина Т.М., Курило Л.Ф., Андреева М.В., Опарина Н.В., Поляков А.В., Шилова Н.В., Черных В.Б. Генетическое и спермиологическое обследование пациентов с 46,ХХ-тестикулярной формой нарушения формирования пола // Андрология и генитальная хирургия. - 2023. - Том. 24(1). -С. 115-129.

19. Agarwal A., Mulgund A., Hamada A., Chyatte M.R. A unique view on male infertility around the globe // Reprod Biol Endocrinol. - 2015. - V. 13(1). - P. 37.

20. Al Zoubi M.S., Bataineh H., Rashed M., Al-Trad B., Aljabali A.A.A., Al-Zoubi R.M., Al Hamad M., AbuAlArjah M.I., Batiha O., Al-Batayneh K.M. CAG Repeats in the androgen receptor gene is associated with oligozoospermia and teratozoospermia in infertile men in Jordan // Andrologia. - 2020. - V. 52(9). - P. e13728.

21. Arnold F.J., Merry D.E. Molecular Mechanisms and Therapeutics for SBMA/Kennedy's Disease // Neurotherapeutics. - 2019. - V. 16. - P. 928-947.

22. Babakhanzadeh E., Nazari M., Ghasemifar S., Khodadadian A. Some of the Factors Involved in Male Infertility: A Prospective Review // Int J Gen Med. - 2020. -V. 13. - P. 29-41.

23. Batiha O., Haifawi S., Al-Smadi M., Burghel G.J., Naber Z., Elbetieha A.M., Bodoor K., Al Sumadi A., Swaidat S., Jarun Y, Abdelnour A. Molecular analysis of CAG repeat length of the androgen receptor gene and Y chromosome microdeletions among Jordanian azoospermic infertile males // Andrologia. - 2018. - V. 50(4). - P. e12979.

24. Bennett N.C., Gardiner R.A., Hooper J.D., Johnson D.W., Gobe G.C. Molecular cell biology of androgen receptor signalling // Int J Biochem Cell Biol. - 2010. - Vol. 42(6). - P. 813-827.

25. Bonomi M., Rochira V., Pasquali D., Balercia G., Jannini E.A., Ferlin A. Klinefelter ItaliaN Group (KING) Klinefelter syndrome (KS): genetics, clinical phenotype and hypogonadism // J Endocrinol Invest. - 2017. - V. 40(2). - P. 123-134.

26. Boroujeni P.B., Firouzi V., Moradi S.Z., Mokhtari P., Dehghankhalili F., Mollaahmadi F., Gourabi H., Sadighi-Gilani M.A., Sabbaghian M., Mohseni-Meybodi A. Study of trinucleotide expansions and expression of androgen receptor in infertile men with abnormal spermogram referred to Royan institute // Andrologia. - 2018. - Vol. 50(10). - P. e13121.

27. Brinkmann A.O. Molecular basis of androgen insensitivity // Mol Cell Endocrinol. - 2001. - Vol. 179(1-2). - P. 105-109

28. Brinkmann A.O., Faber P.W., van Rooij H.C., Kuiper G.G., Ris C., Klaassen P., van der Korput J.A., Voorhorst M.M., van Laar J.H., Mulder E. et al. The human androgen receptor domainstructure, genomic organization and regulation of expression // Journal of Steroid Biochemistry. - 1989. - Vol. 34(1-6). - P. 307-310.

29. Carrell D.T. Contributions of Spermatozoa to Embryogenesis: Assays to Evaluate Their Genetic and Epigenetic Fitness // Reproductive BioMedicine Online. - 2008. -Vol. 16(4). - P. 474-784.

30. Ceylan G.G., Ceylan C., Elyas H. Genetic anomalies in patients with severe oligozoospermia and azoospermia in eastern Turkey: a prospective study // Genet Mol Res. - 2009. - Vol. 8(3). - P. 915-22.

31. Chamberlain N.L., Driver E.D., Miesfeld R.L. The length and location of CAG trinucleotide repeats in the androgen receptor N-terminal domain affect transactivation function // Nucleic Acids Res. - 1994. - V. 22(15). - P. 3181-3186.

32. Chamberlain N.L., Driver E.D., Miesfeld R.L. The length and location of CAG trinucleotide repeats in the androgen receptor N-terminal domain affect transactivation function // Nucleic Acids Res. - 1994. - Vol. 22(15). - P. 3181-3186

33. Chemes H.E. Infancy is not a quiescent period of testicular development // Int J Androl. - 2001. - Vol. 24(1). - P. 2-7.

34. Colaco S. and ModiM D. Genetics of the human Y chromosome and its association with male infertility // Reprod Biol Endocrinol. - 2018. - Vol. 16(1). - P. 14.

35. Dabaja A.A., Schlegel P.N. Medical treatment of male infertility // Transl Androl Urol. - 2014. - Vol. 3(1). - P. 9-16.

36. Davis-Dao C.A., Tuazon E.D., Sokol R.Z., Cortessis V.K. Male infertility and variation in CAG repeat length in the androgen receptor gene: a meta-analysis // J Clin Endocrinol Metab. - 2007. - Vol. 92(11). - P. 4319-4326.

37. de Kretser D.M. Loveland K.L., Meinhardt A., Simorangkir D., Wreford N. Spermatogenesis // Hum Reprod. - 1998. - Vol. 13. - P. 1-8.

38. De la Chapelle A. The etiology of maleness in XX men // Hum Genet. - 1981. -Vol. 58(1). - P. 105-116.

39. Detera-Wadleigh S.D., Fanning T.G. Phylogeny of the steroid receptor superfamily // Mol Phylogenet Evol. - 1994. - Vol. 3(3). - P. 192-205.

40. Emery B.R., Carrell D.T. The Effect of Epigenetic Sperm Abnormalities on Early Embryogenesis // Asian J Androl. - 2006. - Vol. 8(2). - P. 131-142.

41. ESHRE Capri Workshop Group. A prognosis-based approach to infertility: understanding the role of time // Hum Reprod. - 2017. - V. 32(8). - P. 1556-1559.

42. Ferlin A., Garolla A., Foresta C. Chromosome abnormalities in sperm of individuals with constitutional sex chromosomal abnormalities // Cytogenet Genome Res. - 2005. - Vol. 111(3-4). - P. 310-316.

43. Ferlin A., Raicu F., Gatta V., Zuccarello D., Palka G., Foresta C. Male infertility: role of genetic background // Reprod Biomed Online. - 2007. - Vol. 14(6). - P. 734745.

44. Ferro P., Catalano M.G., Dell'Eva R., Fortunati N., Pfeffer U. The androgen receptor CAG repeat: a modifier of carcinogenesis? // Mol Cell Endocrinol. - 2002. - V. 193. - P. 109-120.

45. Foresta C., Garolla A., Bartoloni L., Bettella A., Ferlin A. Genetic abnormalities among severely oligospermic men who are candidates for intracytoplasmic sperm injection // J Clin Endocrinol Metab. - 2005. - Vol. 90(1). - P. 152-156.

46. Foresta C., Moro E., Ferlin A. Prognostic value of Y deletion analysis. The role of current methods // Hum Reprod. - 2001. - Vol. 16(8). - P. 1543-1547.

47. Galani A., Kitsiou-Tzeli S., Sofokleous C., Kanavakis E., Kalpini-Mavrou A. Androgen insensitivity syndrome: clinical features and molecular defects // Hormones. - 2008. - Vol. 7(3). - P. 217-229.

48. Giagulli V. A., Carbone M. D., de Pergola G., Guastamacchia E., Resta F., Licchelli B., Sabba C., Triggiani V. Could androgen receptor gene CAG tract polymorphism affect spermatogenesis in men with idiopathic infertility? // J Assist Reprod Genet. - 2014. - Vol. 31(6). - P. 689-697.

49. Giagulli V.A., Carbone M.D., De Pergola G., Guastamacchia E., Resta F., Licchelli B., Sabba C., Triggiani V. Could androgen receptor gene CAG tract polymorphism affect spermatogenesis in men with idiopathic infertility? // J Assist Reprod Genet. - 2014. - V. 31(6). - P. 689-697.

50. Glass C.K. Differential recognition of target genes by nuclear receptor monomers, dimers, and heterodimers // Endocr Rev. - 1994. - Vol. 15(3). - P. 391-407.

51. Hasani N., Meybodi A.M., Rafaee A., Gilani M.A.S., Mohammadzadeh R., Sabbaghian M. Spermatogenesis disorder is associated with mutations in the ligand-binding domain of an androgen receptor // Andrologia. - 2019. - Vol. 51(10). - P. e13376.

52. Heinlein C.A., Chang C. Androgen receptor (AR) coregulators: an overview // Endocr Rev. - 2002. - Vol. 23(2). - P. 175-200.

53. Heller C.G., Clermont Y. Kinetics of the germinal epithelium in man // Recent Prog Horm Res. - 1964. - Vol. 20. - P. 545-575.

54. Helsen C., Dubois V., Verfaillie A., Young J., Trekels M., Vancraenenbroeck R., De Maeyer M., Claessens F. Evidence for DNA - binding domain -ligand - binding domain communications in the androgen receptor // Molecular and Cellular Biology. -2012. - Vol. 32(15). - P. 3033-3043.

55. Hess R.A., de Franca L.R. Spermatogenesis and cycle of the seminiferous epithelium // Adv Exp Med Biol. - 2008. - Vol. 636. - P. 1-15.

56. James E.R., Carrell D.T., Aston K.I., Jenkins T.G., Yeste M., Salas-Huetos A. The Role of the Epididymis and the Contribution of Epididymosomes to Mammalian Reproduction // Int J Mol Sci. - 2020. - V. 21(15). - P. 5377.

57. Jenster G., van der Korput H.A., Trapman J., Brinkmann A.O. Identification of two transcription activation units in the N-terminal domain of the human androgen receptor // J Biol Chem. - 1995. - Vol. 270(13). - P. 7341-7346.

58. Jungwirth A., Giwercman A., Tournaye H., Diemer T., Kopa Z., Dohle G., Krausz C., European Association of Urology Working Group on Male Infertility. European Association of Urology guidelines on Male Infertility: the 2012 update // Eur Urol. -2012. - Vol. 62(2). - P. 324-332.

59. Katz D.J., Teloken P., Shoshany O. Male infertility - The other side of the equation // Aust Fam Physician. - 2017. - Vol. 46(9). - P. 641-646.

60. Koivisto P.A., Schleutker J., Helin H., Ehren-van Eekelen C., Kallioniemi O.P., Trapman J. Androgen receptor gene alterations and chromosomal gains and losses in prostate carcinomas appearing during finasteride treatment for benign prostatic hyperplasia // Clin Cancer Res. - 1999. - Vol. 5(11). - P. 3578-3582.

61. Komori S., Kasumi H., Kanazawa R., Sakata K., Nakata Y., Kato H., Koyama K. CAG repeat length in the androgen receptor gene of infertile japanese males with oligozoospermia // Mol Hum Reprod. - 1999. - V. 5(1). - P. 14-16.

62. Krausz C., Riera-Escamilla A. Genetics of male infertility // Nat Rev Urol. - 2018. - V. 15(6). - P. 369-384.

63. Kruger T.F., Menkveld R., Stander F.S., Lombard C.J., Van der Merwe J.P., van Zyl J.A., Smith K. Sperm morphologic features as a prognostic factor in in vitro fertilization // Fertil. Steril. - 1986. - Vol. 46(6). - P. 1118-1123.

64. Kumar R., Atamna H., Zakharov M.N., Bhasin S., Khan S.H., Jasuja R. Role of the androgen receptor CAG repeat polymorphism in prostate cancer, and spinal and bulbar muscular atrophy // Life Sci. - 2011. - Vol. 88(13-14). - P. 565-571.

65. Kuroda-Kawaguchi T., Skaletsky H., Brown L.G., Minx P.J., Cordum H.S., Waterston R.H., Wilson R.K., Silber S., Oates R., Rozen S., Page D.C. The AZFc region of the Y chromosome features massive palindromes and uniform recurrent deletions in infertile men // Nat Genet. - 2001. - Vol. 29(3). - P. 279-286.

66. La Spada A.R., Wilson E.M., Lubahn D.B., Harding A.E., Fischbeck K.H. Androgen receptor gene mutations in X-linked spinal and bulbar muscular atrophy // Nature. - 1991. - Vol. 352(6330). - P. 77-79.

67. Lashkari F.M., Totonchi M., Zamanian M.R., Mansouri Z., Gilani M.A.S., Sabbaghian M., Meybodi A.M. 46,XX males: a case series based on clinical and genetics evaluation // Andrologia. - 2017. - Vol. 49(7). - P. e12710.

68. Lazaros L., Xita N., Kaponis A., Zikopoulos K., Sofikitis N., Georgiou I. Evidence for association of sex hormone-binding globulin and androgen receptor genes with semen quality // Andrologia. - 2008. - V. 40(3). - P. 186-91.

69. Lazaros L., Xita N., Takenaka A., Sofikitis N., Makrydimas G., Stefos T., Kosmas I., Zikopoulos K., Hatzi E., Georgiou I. Semen quality is influenced by androgen receptor and aromatase gene synergism // Hum Reprod. - 2012. - Vol. 27(12). - P. 3385-3392.

70. Li J. H., Huang T. H., Jiang X. W., Xie Q.D. 46,XX male sex reversal syndrome // Asian Journal of Andrology. - 2004. - Vol. 6(2). - P. 165-167.

71. Li L., Liu W.M., Liu M.X., Zheng S.Q., Zhang J.X., Che F.Y., Liu S.G. A missense mutation in the androgen receptor gene causing androgen insensitivity syndrome in a Chinese family // Asian Journal of Andrology. - 2017. - Vol. 19(2). - P. 260-261.

72. Loprinzi C.L., Michalak J.C., Quella S.K., O'Fallon J.R., Hatfield A.K., Nelimark R.A., Dose A.M., Fischer T., Johnson C., Klatt N.E., et al. Megestrol acetate for the prevention of hot flashes // N Engl JMed. - 1994. - Vol. 331(6). - P. 347-352.

73. Lu C., Xu M., Rong W., Qin Y., Wang Y., Wu W., Song L., Wang S., Shen H., Sha J., Miao D., Hu Z., Xia Y., Wang X. Pathogenic variants screening in five nonobstructive azoospermia associated genes // Mol. Hum. Reprod. - 2014. - Vol. 20(2). -P. 178-183.

74. Masoumi S.Z., Parsa P., Darvish N., Mokhtari S., Yavangi M., Roshanaei G. An epidemiologic survey on the causes of infertility in patients referred to infertility center in Fatemieh Hospital in Hamadan // Iran J Reprod Med. - 2015. - V. 13(8). - P. 513.

75. Massin N., Bry H., Vija L., Maione L., Constancis E., Haddad B., Morel Y., Claessens F., Young J. Healthy birth after testicular extraction of sperm and ICSI from an azoospermic man with mild androgen insensitivity syndrome caused by an androgen receptor partial loss-of-function mutation // Clinical Endocrinology. - 2012. - Vol. 77(4). - P. 593-598.

76. Mateizel I., Verheyen G., Van Assche E., Tournaye H., Liebaers I., Van Steirteghem A. FISH analysis of chromosome X, Y and 18 abnormalities in testicular sperm from azoospermic patients // Hum Reprod. - 2002. - Vol. 17(9). - P. 2249-2257.

77. Mifsud A., Sim C.K., Boettger-Tong H., Moreira S., Lamb D.J., Lipshultz L.I., Yong E.L. Trinucleotide (CAG) repeat polymorphisms in the androgen receptor gene: molecular markers of risk for male infertility // Fertil Steril. - 2001. - V. 75(2). - P. 275281.

78. Milatiner D., Halle D., Huerta M., Margalioth E.J., Cohen Y., Ben-Chetrit A., Gal M., Mimoni T., Eldar-Geva T. Associations between androgen receptor CAG repeat length and sperm morphology // Hum Reprod. - 2004. - Vol. 19(6). - P. 1426-1430.

79. Montgomery J.S., Price D.K., Figg W.D. The androgen receptor gene and its influence on the development and progression of prostate cancer // J Pathol. - 2001. -Vol. 195(2). - P. 138-146.

80. Navarro-Costa P., Carlos E., Gonfalves P. J. Genetic dissection of the AZF regions of the human Y chromosome: thriller or filler for male (in)fertility? // Journal of Biomedicine and Biotechnology. - 2010. - Vol. 2010. - P. 18.

81. Navarro-Costa P., Gonfalves J., Plancha C.E. The AZFc region of the Y chromosome: at the crossroads between genetic diversity and male infertility // Hum Reprod Update. - 2010. - Vol. 16(5). - P. 525-42.

82. Navarro-Costa P., Pereira L., Alves C., Gusmao L., Proenfa C., Marques-Vidal P., Rocha T., Correia S.C., Jorge S., Neves A., Soares A.P., Nunes J., Calhaz-Jorge C., Amorim A., Plancha C.E., Gonfalves J. Characterizing partial AZFc deletions of the Y chromosome with amplicon-specific sequence markers // BMC Genomics. - 2007. -Vol. 8. - P. 342.

83. Naz M., Kamal M. Classification, causes, diagnosis and treatment of male infertility: a review // Orient Pharm Exp Med. - 2017. - Vol. 17(2). - P. 89-109.

84. Nelson P.S., Clegg N., Arnold H., Ferguson C., Bonham M., White J., Hood L., Lin B. The program of androgen-responsive genes in neoplastic prostate epithelium // Proc Natl Acad Sci USA. - 2002. - Vol. 99(18). - P. 11890-11895.

85. Nenonen H.A., Giwercman A., Hallengren E., Giwercman Y.L. Non-linear association between androgen receptor CAG repeat length and risk of male subfertility a meta-analysis // Int J Androl. - 2011; - V. 34(4). - P. 327-332.

86. Oates R.D., Silber S., Brown L.G., Page D.C. Clinical characterization of 42 oligospermic or azoospermic men with microdeletion of the AZFc region of the Y chromosome, and of 18 children conceived via ICSI // Hum Reprod. - 2002. - Vol. 17(11). - P. 2813-2824.

87. O'Hara L., Smith L.B. The Genetics of Androgen Receptor Signalling in Male Fertility. Genetics of Human Infertility // Monogr Hum Genet. - 2017. - Vol. 21(4). -P. 86-100.

88. Ozanne D.M., Brady M.E., Cook S., Gaughan L., Neal D.E., Robson C.N. Androgen receptor nuclear translocation is facilitated by the f-actin cross-linking protein filamin // Mol Endocrinol. - 2000. - Vol. 14(10). - P. 1618-1626.

89. Palermo G.D., Colombero L.T., Hariprashad J.J., Schlegel P.N., Rosenwaks Z. Chromosome analysis of epididymal and testicular sperm in azoospermic patients undergoing ICSI // Hum Reprod. - 2002. - Vol. 17(3). - P. 570-575.

90. Pan B., Li R., Chen Y., Tang Q., Wu W., Chen L., Lu C., Pan F., Ding H., Xia Y., Hu L., Chen D., Sha J., Wang X. Genetic association between androgen receptor gene CAG repeat length polymorphism and male infertility: a meta-analysis // Medicine (Baltimore). - 2016. - Vol. 95(10). - P. e2878.

91. Plaseski T., Noveski P., Dimitrovski C., Kocevska B., Efremov G.D., Plaseska-Karanfilska D. CAG repeat number in androgen receptor gene and male infertility // Balkan J Med Genet. - 2007. - V. 10(1). - P. 19-24.

92. Poongothai J., Gopenath T.S., Manonayaki S. Genetics of human male infertility // Singapore Med J. - 2009. - Vol. 50(4). - P. 336-347.

93. Punab M., Poolamets O., Paju P., Vihljajev V., Pomm K., Ladva R., Korrovits P., Laan M. Causes of male infertility: a 9-year prospective monocentre study on 1737 patients with reduced total sperm counts // Hum Reprod. - 2017. - Vol. 32(1). - P. 1831.

94. Qi X., Wang K., Zhou G., Xu Z., Yu J., Zhang W. The role of testicular artery in laparoscopic varicocelectomy: a systematic review and meta-analysis // Int Urol Nephrol. - 2016. - V. 48 (6). - P. 955-965.

95. Radmayr C., Lunacek A., Schwentner C., Oswald J., Klocker H., Bartsch G. 5-alpha-reductase and the development of the human prostate // Indian J Urol. - 2008. -Vol. 24(3). - P. 309-312.

96. Reijo R., Lee T.Y., Salo P., Alagappan R., Brown L.G., Rosenberg M., Rozen S., Jaffe T., Straus D., Hovatta O., et al. Diverse spermatogenic defects in humans caused by Y chromosome deletions encompassing a novel RNA-binding protein gene // Nat Genet. - 1995. - Vol. 10(4). - P. 383-393.

97. Repping S., Skaletsky H., Lange J. Silber S., Van Der Veen F., Oates R.D., Page D.C., Rozen S. Recombination between palindromes P5 and P1 on the human Y chromosome causes massive deletions and spermatogenic failure // Am J Hum Genet. -2002. - Vol. 71(4). - P. 906-922.

98. Salonia A., Rastrelli G., Hackett G., Seminara S.B., Huhtaniemi I.T., Rey R.A., Hellstrom W.J.G., Palmert M.R., Corona G., Dohle G.R., Khera M., Chan Y.M., Maggi M. Paediatric and adult-onset male hypogonadism // Nat Rev Dis Primers. - 2019. - V. 5(1). - P. 38.

99. Sar M., Lubahn D.B., French F.S., Wilson E.M. Immunohistochemical localization of the androgen receptor in rat and human tissues // Endocrinology. - 1990. - Vol. 127(6). - P. 3180-3186.

100. Schiffer L., Kempegowda P., Arlt W., O'Reilly M.W. MECHANISMS IN ENDOCRINOLOGY: The sexually dimorphic role of androgens in human metabolic disease // Eur J Endocrinol. - 2017. - Vol. 177(3). - P. R125-R143.

101. Schoenmakers E., Alen P., Verrijdt G., Peeters B., Verhoeven G., Rombauts W., Claessens F. Differential DNA binding by the androgen and glucocorticoid receptors

involves the second Zn-finger and a C-terminal extension of the DNA-binding domains // Biochem J. - 1999. - Vol. 341. - P. 515-521.

102. Sedova A.O., Shtaut M.I., Bragina E.E., Sorokina T.M., Shmarina G.V., Andreeva M.V., Kurilo L.F., Krasovskiy S.A., Polyakov A.V., Chernykh V.B. Comprehensive semen examination in patients with pancreatic-sufficient and pancreatic-insufficient cystic fibrosis // Asian Journal of Andrology. - 2023. - Vol. 25(5). - P. 591-597.

103. Singh R., Artaza J. N., Taylor W. E., Braga M., Yuan X., Gonzalez-Cadavid N.F., Bhasin S. Testosterone inhibits adipogenic differentiation in 3T3-L1 cells: Nuclear translocation of androgen receptor complex with beta-catenin an T-cell factor 4 may bypass canonical Wnt signaling to down-regulate adipogenic transcription factors // Endocrinology. - 2006. - Vol. 147(1). - P. 141-154.

104. Skaletsky H., Kuroda-Kawaguchi T., Minx P.J., Cordum H.S., Hillier L., Brown L.G., Repping S., Pyntikova T., Ali J., Bieri T., et al. The male-specific region of the human Y chromosome is a mosaic of discrete sequence classes // Nature. - 2003. - Vol. 423 (6942). - P. 825-837.

105. Song S.H., Chiba K., Ramasamy R., Lamb D.J. Recent advances in the genetics of testicular failure // Asian J Androl. - 2016. - Vol. 18(3). - P. 350-355.

106. Strum S.B., McDermed J.E., Scholz M.C., Johnson H., Tisman G. Anaemia associated with androgen deprivation in patients with prostate cancer receiving combined hormone blockade // Br J Urol. - 1997. - Vol. 79(6). - P. 933-941.

107. Stuppia L., Gatta V., Fogh I., Gaspari A.R., Morizio E., Mingarelli R., Di Santo M., Pizzuti A., Calabrese G., Palka G. Genomic organization, physical mapping, and involvement in Yq microdeletions of the VCY2 [BPY 2] gene // Genomics. - 2001. -Vol. 72(2). - P. 153-157.

108. Tahmasbpour E., Balasubramanian D., Agarwal A. A multifaceted approach to understanding male infertility: Gene mutations, molecular defects and assisted reproductive techniques (ART) // J Assist Reprod Genet. - 2014. - V. 31(9). - P. 11151137.

109. Tse J.Y.M., Liu V.W.S., Yeung W.S.B., Lau E.Y.L., Ng E.H.Y., Ho P.C. Molecular analysis of the androgen receptor gene in Hong Kong Chinese infertile men // J Assist Reprod Genet. - 2003. - V. 20(6). - P. 227-233.

110. Turchi P. Prevalence, definition, and classification of infertility. In: Cavallini G., Beretta G., editors. Clinical Management of Male Infertility // Springer. - 2015. - 187 p.

111. Umesono K., Evans R.M. Determinants of target gene specificity for steroid/thyroid hormone receptors // Cell. - 1989. - Vol. 57(7). - P. 1139-1146.

112. Vander Borght M., Wyns C. Fertility and infertility: definition and epidemiology // Clin Biochem. - 2018. - V. 62. - P. 2-10.

113. Verrijdt G., Haelens A., Claessens F. Selective DNA recognition by the androgen receptor as a mechanism for hormone-specific regulation of gene expression // Mol Genet Metab. - 2003. - Vol. 78(3). - P. 175-185.

114. Vogt P.H., Edelmann A., Kirsch S., Henegariu O., Hirschmann P., Kiesewetter F., Köhn F.M., Schill W.B., Farah S., Ramos C., Hartmann M., Hartschuh W., Meschede

D., Behre H.M., Castel A., Nieschlag E., Weidner W., Gröne H.J., Jung A., Engel W., Haidl G. Human Y chromosome azoospermia factors (AZF) mapped to different subregions in Yq11 // Hum Mol Genet. - 1996. - Vol. 5(7). - P. 933-943.

115. von Eckardstein S., Syska A., Gromoll J., Kamischke A., Simoni M., Nieschlag

E. Inverse correlation between sperm concentration and number of androgen receptor CAG repeats in normal men // J Clin Endocrinol Metab. - 2001. - V. 86(6). - P. 25852590.

116. Walker W.H. Non-classical actions of testosterone and spermatogenesis // Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. - 2010. - Vol. 365(1546). - P. 1557-1569.

117. Wang Q., Ge X., Wang H.X., Shi Q.M., Ding Z., Xu L.C. Association of androgen receptor gene CAG and GGN repeat polymorphism with cryptorchidism: A meta-analysis // Andrologia. - 2018. - Vol. 50(3). - P. e12909.

118. Wang J.M., Li Z.F., Yang W.X. What Does Androgen Receptor Signaling Pathway in Sertoli Cells During Normal Spermatogenesis Tell Us? // Front Endocrinol (Lausanne). - 2022. - V. 13. - P. 1-19

119. Wu Q.Y., Li N., Li W.W. Clinical, molecular and cytogenetic analysis of 46,XX testicular disorder of sex development with SRY-positive // BMC Urol. - 2014. - Vol. 14. - P. 70-74.

120. Xiao F., Lan A., Lin Z., Song J., Zhang Y., Li J., Gu K., Lv B., Zhao D., Zeng S., Zhang R., Zhao W., Pan Z., Deng X., Yang X. Impact of CAG repeat length in the androgen receptor gene on male infertility - a meta-analysis // Reprod Biomed Online. -2 016. - V. 33. - P. 39-49

121. Yong E.L., Loy C.J., Sim K.S. Androgen receptor gene and male infertility // Hum Reprod Update. - 2003. - Vol. 9(1). - P. 1-7.

122. Yu X.W., Wei Z.T., Jiang Y.T., Zhang S.L. Y chromosome azoospermia factor region microdeletions and transmission characteristics in azoospermic and severe oligozoospermic patients // Int J Clin Exp Med. - 2015. - Vol. 8(9). - P. 14634-14646.

123. Zegers-Hochschild F., Adamson G.D., Dyer S., Racowsky C., de Mouzon J., Sokol R., Rienzi L., Sunde A., Schmidt L., Cooke I.D., Simpson J.L., van der Poel S. The international glossary on infertility and fertility care // Hum Reprod. - 2017. - V. 32(9). - P. 1786-1801.

124. Zhou Z.X., Sar M., Simental J.A., Lane M.V., Wilson E.M. A ligand-dependent bipartite nuclear targeting signal in the human androgen receptor. Requirement for the DNA-binding domain and modulation by NH2-terminal and carboxyl-terminal sequences // J Biol Chem. - 1994. - Vol. 269(18). - P. 13115-13123.

125. Zitzmann M., Depenbusch M., Gromoll J., Nieschlag E. Prostate volume and growth in testosterone-substituted hypogonadal men are dependent on the CAG repeat polymorphism of the androgen receptor gene: a longitudinal pharmacogenetic study // J Clin Endocrinol Metab. - 2003. - Vol. 88(5). - P. 2049-2054.

126. Zitzmann M., Depenbusch M., Gromoll J., Nieschlag E. X-chromosome inactivation patterns and androgen receptor functionality influence phenotype and social characteristics as well as pharmacogenetics of testosterone therapy in Klinefelter patients // J Clin Endocrinol Metab. - 2004. - Vol. 89(12). - P. 6208-6217

Ссылки на интернет-ресурсы

1. Online Mendelian Inheritance in Man®. An Online Catalog of Human Genes and Genetic Disorders (OMIM): https://omim.org/

2. National Institute for Health and Care Excellence. Fertility problems: Assessment and treatment. - London: NICE, 2013. Available at www.nice.org.uk/guidance/cg156 [Accessed September 2017]

ПРИЛОЖЕНИЯ

Нормативные значения показателей эякулята (ВОЗ, 2010)

Параметры Нормальные показатели нормы ВОЗ 2010г.

Объем эякулята 1,5 - 5,0 мл.

Вязкость < 20 мм

рН 7,2 - 7,8

Срок разжижения < 60 мин.

Концентрация сперматозоидов в 1 мл >15х106

Категории подвижности: 40% и более подвижных (категории «РЯ» + «ИР»)

Быстрое поступательное движение - категория «а» категория «РЯ» прогрессивно поступательное движение > 32%

Медленное поступательное движение - категория «Ь»

Непоступательное движение - категория «с» Непрогрессивно подвижные -категория «ИР»

Неподвижные - категория Неподвижные - категория «1М» (категория

Живые сперматозоиды > 58%

Морфологически нормальные сперматозоиды > 4%

Количество лейкоцитов Менее 1 млн/мл

Приложение 2

Классификация спермиологических «диагнозов» (ВОЗ, 2010)

Спермиологический диагноз Критерии ВОЗ 2010г.

Нормозооспермия Концентрация сперматозоидов в эякуляте >15 млн/мл и/или общее количество >39 млн., количество подвижных прогрессивно и непрогрессивно подвижных («PR» + «МР» >40%) и/или прогрессивно подвижных «PR» сперматозоидов >32%, сперматозоидов нормальной формы >4%.

Азооспермия Отсутствие сперматозоидов, при наличии эякулята

Олигозооспермия Концентрация сперматозоидов в эякуляте <15 млн/мл и/или общее количество сперматозоидов в эякуляте -менее 39 млн.

Тератозооспермия Количество сперматозоидов нормальной формы (морфологически типичных) в эякуляте менее 4% при концентрации сперматозоидов в эякуляте >15 млн/мл и/или общем количестве сперматозоидов в эякуляте >39 млн.

Астенозооспермия Концентрация сперматозоидов в эякуляте >15 млн/мл и/или общее количество >39 млн.: - прогрессивно подвижные «PR» <32%; («РЯ» + «ЯР» менее 40%)

Олигоспермия Объем эякулята больше 0 мл, но менее 1,5 мл

Аспермия Отсутствие эякулята

Расчет нормального распределения с помощью критерия Колмогорова-Смирнова для различных групп и подгрупп

Названия групп и подгрупп СЛО-повтор ы Концентрация сперматозоидо в в 1мл эякулята, млн/мл Общее количество сперматозоидо в в эякуляте, млн Живые сперматозоиды , % Морфологическ и нормальные сперматозоиды, % Прогрессивно подвижные (РК) сперматозоиды , %

Нормозооспермия, (п=101) <0,0001 0,0476 >0,1 <0,0001 <0,0001 <0,0001

Доказанная фертильность (фертильные мужчины), (п=286) <0,0001 - - - - -

Пациенты с патозооспермией без делеций региона AZFс, (п=597) <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001

Пациенты с патозооспермией с микроделециями региона Л7Бс (п=397) <0,0001 - - - - -

Азооспермия, (п=105) 0,007 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001

Олигозооспермия тяжелой степени, <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001

(п=160)

Олигозооспермия умеренной 0,0002 <0,0001 >0,1 <0,0001 <0,0001 <0,0001

степени, (п=82)

Астено-

/тератозооспермия , (п=250) 0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 0,0058

Пациенты с

патозооспермией и делецией Ь2/Ь3, <0,0001 - - - - -

(п=276)

Пациенты с

патозооспермией с делецией вг/§г, (п=111) 0,0133 - - - - -

Пациенты с

патозооспермией с делецией sY1197, >0,1000 - - - - -

(п=10)

При расчете критерия Колмогорова-Смирнова, если значении р<0,05 выборка относится ненормальному

распределению, а если значении р>0,05 выборка относится к нормальному распределению.

Квантильные диаграммы количества CAG-повторов гена АЯ у мужчин разных групп

Приложение 5

Расчет зависимости показателей спермограммы от длины СЛО-аллелей с помощью критерия Манна-Уитни для подгрупп с патозооспермией без частичных делеций Л7Бс и нормозооспермией с «короткими», «средними» и «длинными» аллелями полиглутаминого тракта

Подгруппа, количество пациентов, п Нормозооспермия, п=101

варианты (СЛО)п аллеля Концентрация сперматозоидов в эякуляте, млн/мл Общее количество сперматозоидов в эякуляте, млн Живые сперматозоиды, % Прогрессивно подвижные (РЯ) сперматозоиды, % Морфологически нормальные сперматозоиды, %

Азооспермия, п=105 «короткие» (п<18), (105/9; 101/1) - - - - -

«средние» (п=19-25), (105/84; 101/83) <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001

«длинные» (п>26), (105/12; 101/17) <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001

Олигозооспермия тяжелой степени, п=192 «короткие» (п<18), (160/14; 101/1) - - - - -

«средние» (п=19-25), (160/128; 101/83) <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001

«длинные» (п>26), (160/18; 101/17) <0,0001 <0,0001 0,0018 <0,0001 <0,0001

Олигозооспермия умеренной степени, п=136 «короткие» (п<18), (82/9; 101/1) - - - - -

«средние» (п=19-25), (82/65; 101/83) <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001

«длинные» (п>26), (82/8; 101/17) <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 0,0455

Астено-/тератозооспермия, п=158 «короткие» (п<18), (250/18; 101/1) - - - - -

«средние» (п=19-25), (250/197; 101/83) <0,0001 <0,0001 0,0024 <0,0001 <0,0001

«длинные» (п>26), (250/35; 101/17) 0,0017 0,0002 0,0689 <0,0001 0,0005

Нормативные значения показателей эякулята (ВОЗ - 1999 и 2010)

Параметры Нормальные показатели нормы ВОЗ 1999 г. Нормальные показатели нормы ВОЗ 2010 г.

Объем эякулята 2,0 мл и более 1,5 - 5,0 мл.

Вязкость До 20 мм < 20 мм

рН 7,2-7,8 7,2 - 7,8

Срок разжижения До 60 минут < 60 мин.

Концентрация сперматозоидов в 1 мл 20 млн. и более >15х106

Категории подвижности: 40% и более подвижных (категории «РЯ» + «МР»)

Быстрое поступательное движение - категория «а» 25% и более категория «РЯ» прогрессивно поступательное движение > 32%

Медленное поступательное движение - категория «Ь»

Непоступательное движение - категория «с» Непрогрессивно подвижные - категория «ЯР»

Неподвижные - категория е+ё=50% и менее Неподвижные -категория «1М» (категория

Живые сперматозоиды 50% и более > 58%

Морфологически нормальные сперматозоиды 30% и более > 4%

Количество лейкоцитов 1 млн и менее Менее 1 млн/мл

Расчет корреляции с помощью критерия Спирмена для подгрупп с патозооспермией без частичных делеций AZFc

Группы с нарушением фертильности Варианты (СЛО)п аллеля Концентрация сперматозоидов в 1мл эякулята, млн/мл Общее количество сперматозоидов в эякуляте, млн Живые сперматозоиды, %* Прогрессивно подвижные (PR) сперматозоиды, %* Морфологически нормальные сперматозоиды, %*

«короткие» (п<18), п=1 - - - - -

Нормозооспермия, п=101 «средние» (п=19-25), п=83 Р=0,3 (г= 0,1) Р=0,9 (г= 0,007) Р=0,6 (г= 0,05) Р=0,9 (г= 0,004) Р=0,1 (г= 0,2)

«длинные» (п>26), п=17 Р=0,8 (г= -0,07) Р=0,9 (г= 0,02) Р=0,8 (г= 0,05) Р=0,08 (г= -0,4) Р=0,3 (г= 0,3)

«короткие» (п<18), п=14 Р=0,9 (г= -0,03) Р=0,9 (г= 0,005) Р=0,2 (г= 0,3) Р=0,5 (г= 0,2) Р=0,6 (г= 0,1)

Олигозооспермия тяжелой степени п=160 «средние» (п=19-25), п=128 Р=0,9 (г= 0,007) Р=0,7 (г= -0,03) Р=0,7 (г= -0,03) Р=0,6 (г= 0,04) Р=0,7 (г= 0,03)

«длинные» (п>26), п=18 Р=0,7 (г= -0,08) Р=0,6 (г= -0,1) Р=0,7 (г= -0,07) Р=0,06 (г= 0,4) Р=0,8 (г= 0,03)

«короткие» (п<18), п=9 Р=0,2 (г= -0,5) Р=0,6 (г= -0,2) Р=0,2 (г= -0,4) Р=0,3 (г= -0,3) Р=0,6 (г= -0,2)

Олигозооспермия умеренной степени п=82 «средние» (п=19-25), п=65 Р=0,9 (г= -0,002) Р=0,6 (г= 0,05) Р=0,4 (г= -0,09) Р=0,5 (г= 0,07) Р=0,2 (г= 0,2)

«длинные» (п>26), п=8 Р=0,9 (г= -0,05) Р=0,2 (г= 0,5) Р=0,6 (г= 0,2) Р=0,8 (г= 0,1) Р=0,01 (г= 0,8)

Астено-/тератозооспермия п=250 «короткие» (п<18), п=18 Р=0,1 (г= 0,6) Р=0,9 (г= 0,003) Р=0,1 (г= 0,3) Р=0,4 (г= 0,2) Р=0,8 (г= -0,05)

«средние» (n=19-25), n=197 p=0,5 (r= -0,05) p=0,3 (r= -0,08) p=0,6 (r= -0,03) p=0,2 (r= 0,1) p=0,9 (r= -0,007)

«длинные» (n>26), n=35 p=0,05 (r= -0,3) p=0,4 (r= -0,13) p=0,3 (r= 0,2) p=0,01 (r= -0,4) p=0,02 (r= -0,4)

Значения точного критерия Фишера по результатам расчета отношения шансов (ОШ) для выявления значимости различий

Группы с нарушением фертильности Нормозооспермия, п=101

Варианты (CAG)n аллеля Все CAG аллели, кроме п<18 Все CAG аллели, кроме п=19-25 Все С АО аллели, кроме п>26

Азооспермия п=105 «короткие» (п<18), (105/9; 101/1) 0,0187 - -

«средние» (п=19-25), (105/84; 101/83) - 0,72 -

«длинные» (п>26), (105/12; 101/17) - - 0,32

Олигозооспермия тяжелой степени п=160 «короткие» (п<18), (160/14; 101/1) 0,01 - -

«средние» (п=19-25), (160/128; 101/83) - 0,74 -

«длинные» (п>26), (160/18; 101/17) - - 0,26

Олигозооспермия умеренной степени п=82 «короткие» (п<18), (82/9; 101/1) 0,006 - -

«средние» (п=19-25), (82/65; 101/83) - 0,71 -

«длинные» (п>26), (82/8; 101/17) - - 0,19

Астено-/тератозооспермия п=250 «короткие» (п<18), (250/18; 101/1) 0,0180 - -

«средние» (п=19-25), (250/197; 101/83) - 0,50 -

«длинные» (п>26), (250/35; 101/17) - - 0,51

Расчет значений %2 и вероятности (р) при сравнительном анализе количества CAG-повторов от 18 до 25 в гене ЛЯ у мужчин из разных групп и подрупп

Спермиологический Диагноз х2, р<0,01

(СЛО)-1 8, (Р<0,01) (СЛО)-1 9, (Р<0,01) (СЛО)п-2 0 (Р<0,01) (СЛО)п-2 1 (р<0,01) (СЛО)п-2 2 (Р<0,01) (СЛО)п-2 3 (р<0,01) (СЛО)п-2 4 (Р<0,01) (СЛО)п-2 5, (Р<0,01)

Нормозоосперми я, п-101 Азооспермия, п-105 Х2 =2,59 р-0,2 Х2 =0,53 р-0,6 Х2 =1,37 Р-0,3 Х2 =1,11 р-0,3 Х2 =0,11 р-0,8 Х2 =3,92 р-0,06 Х2 =1,55 р-0,2 Х2 =0,69 р-0,4

Олигозооспермия тяжелой степени, п-160 Х2 =1,81 р-0,2 Х2 =2,52 р-0,1 Х2 =1,03 Р-0,3 Х2 =0,22 р-0,7 Х2 =0,57 р-0,5 Х2 =3,45 р-0,09 Х2 =0 р-1,0 Х2 =14,61 р-0,0002

Олигозооспермия умеренной степени, п-82 Х2 =4,92 р-0,05 Х2 =0,93 р-0,4 Х2 =0,27 р-0,6 Х2 =0,02 р-1,0 Х2 =0,22 р-0,8 Х2 =0 р-1,0 Х2 =0,43 р-0,6 Х2 =0,72 р-0,5

Астено-/тератозоосперми я, п-250 Х2 =2,15 р-0,2 Х2 =0,44 р-0,6 Х2 =3,76 р-0,07 Х2 =0,45 р-0,5 Х2 =1,7 р-0,2 Х2 =3,51 р-0,08 Х2 =0,19 р-0,7 Х2 =2,83 р-0,11

Ь2/Ь3, п-276 Х2 =2,86 р-0,1 Х2 =0,2 р-0,8 Х2 =0,3 р-0,6 Х2 =0,21 р-0,6 Х2 =0,55 р-0,6 Х2 =4,72 р-0,03 Х2 =0,95 р-0,3 Х2 =0,64 р-0,5

ёг/ёг, п-111 Х2 =4,12 р-0,06 Х2 =0,03 р-1,0 Х2 =0,78 р-0,4 Х2 =1,52 р-0,3 Х2 =0,75 р-0,5 Х2 =2,76 р-0,1 Х2 =1,9 р-0,2 Х2 =0,23 р-0,7

8У1197, п-10 - - - Х2 =0 р-1,0 - Х2 =2,69 р-0,1 Х2 =0,4 р-0,6 Х2 =0,28 р-0,6

Патозооспермия без делеций в локусе Л2Ре Х2 =2,8 р-0,1 Х2 =1,26 Р-0,3 Х2 =2,63 р-0,11 Х2 =0,44 р-0,5 Х2 =0,76 р-0,5 Х2 =3,4 р-0,09 Х2 =0,34 р-0,6 Х2 =3,12 р-0,09

п=597

Патозооспермия с делециями в локусе Л2Ре, п=397 Х2 =3,27 р=0,09 Х2 =0,05 Р=0,9 Х2 =0,67 Р=0,4 Х2 =0,57 Р=0,5 Х2 =0,32 Р=0,7 Х2 =4,69 р=0,03 Х2 =1,31 Р=0,3 Х2 =0,12 Р=0,7

Азооспермия, п=105 Х2 =0,33 Р=0,5 Х2 =0,03 Р=1,0 Х2 =1,99 Р=0,2 Х2 =3,36 р=0,09 Х2 =0,74 Р=0,5 Х2 =0,88 Р=0,4 Х2 =0,01 Р=1,0 Х2 =2,53 Р=0,1

Олигозооспермия тяжелой степени, п=160 Х2 =0,02 Р=0,9 Х2 =0,88 Р=0,4 Х2 =1,71 Р=0,2 Х2 =1,7 Р=0,2 Х2 =0,66 Р=0,4 Х2 =0,52 Р=0,5 Х2 =4,02 р=0,06 Х2 =13,52 р=0,0001

Олигозооспермия умеренной степени, п=82 Х2 =2,24 Р=0,1 Х2 =0,03 Р=0,8 Х2 =0,42 Р=0,6 Х2 =0,15 Р=0,8 Х2 =0,17 Р=0,7 Х2 =1,62 Р=0,3 Х2 =0,51 Р=0,5 Х2 =0,29 Р=0,7

Астено-/тератозоосперми я, п=250 Х2 =0,09 Р=0,8 Х2 =0,2 Р=0,7 Х2 =6,36 р=0,01 Х2 =2,93 Р=0,1 Х2 =2,71 Р=0,1 Х2 =0,49 Р=0,5 Х2 =2,39 Р=0,13 Х2 =2,23 Р=0,1

Фертильные мужчины, п=286 Ь2/Ь3, п=276 Х2 =0,53 Р=0,5 Х2 =0,64 Р=0,4 Х2 =0,65 Р=0,5 Х2 =2,15 Р=0,2 Х2 =0,69 Р=0,4 Х2 =1,4 Р=0,2 Х2 =0,79 Р=0,4 Х2 =0,14 Р=0,8

ёг/ёг, п=111 Х2 =1,54 Р=0,3 Х2 =1,47 Р=0,3 Х2 =1,2 Р=0,3 Х2 =4,22 р=0,05 Х2 =0,02 Р=0,8 Х2 =0,25 Р=0,6 Х2 =0, Р=1,0 Х2 =1,32 Р=0,2

8У1197, п=10 - - - Х2 =0,04 Р=1,0 - Х2 =0,82 Р=0,3 Х2 =2,16 Р=0,2 Х2 =0,6 Р=0,3

Патозооспермия без делеций в локусе Л2Ре, п=597 Х2 =0,51 Р=0,6 Х2 =0,02 Р=0,9 Х2 =5,8 р=0,02 Х2 =4,01 р=0,05 Х2 =1,18 Р=0,3 Х2 =0,36 Р=0,6 Х2 =2,76 Р=0,1 Х2 =2,77 Р=0,1

Патозооспермия с делециями в локусе AZFc, п=397 Х2 =0,94 Р=0,3 Х2 =1,53 Р=0,2 Х2 =1,48 Р=0,2 Х2 =3,99 р=02,05 Х2 =0,35 Р=0,6 Х2 =1,37 Р=0,3 Х2 =0,65 Р=0,5 Х2 =0,8 р=0,08

Расчет значений %2 и вероятности (р) при сравнительном анализе количества ОАО-повторов от 26 до 37 в гене ЛЯ у мужчин из разных групп и подрупп

Спермиологический Х2, р<0,01

Диагноз (САО)=26 (р<0,01) (САО)=27 (р<0,01) (САО)=28 (р<0,01) (САО)=29 (Р<0,01) (СА0)=30 (Р<0,01) (САО)=31 (р<0,01) (САО)=32 (Р<0,01) (САО)=33 (Р<0,01) (САО)=37 (р<0,01)

Азооспермия, п=105 х2 = 0,87 р=0,4 X2 = 0,19 Р=0,7 X2 = 0,17 Р=1,0 - - X2 =0,97 Р=1,0 - - -

Олигозооспермия тяжелой степени, п=160 X2 = 1,44 Р=0,3 X2 =1,03 Р=0,4 X2 =1 Р=0,5 X2 = 0 Р=1,0 - X2 = 1,27 Р=0,5 X2 =0,63 Р=0,9 X2 = 0,63 Р=0,9 -

Олигозооспермия умеренной степени, п=82 X2 = 1,46 Р=0,3 X2 =1,28 Р=0,3 X2 =0,04 Р=0,9 X2 = 0,04 Р=0,9 - - - - -

Астено-/тератозооспермия, п=250 X2 = 0,14 Р=0,8 X2 =2,8 Р=0,1 X2 =0,39 Р=0,7 X2 =0,89 Р=0,3 X2 = 0,03 Р=1,0 X2 = 0,41 Р=1,0 - - X2 = 0,41 Р=1,0

Нормозооспермия, п=101 Ь2/Ь3, п=276 X2 =6,83 р=0,01 X2 = 0,91 Р=0,4 X2 = 0,45 Р=0,6 X2 = 2,45 Р=0,1 X2 = 0,12 Р=0,9 - X2 =0,37 Р=1,0 - -

В^г, п=111 X2 = 0,04 Р=1,0 X2 = 0,9 Р=0,4 X2 =0,12 Р=1,0 X2 =0,44 Р=0,6 - - X2 =0,91 Р=1,0 - -

8У1197, п=10 X2 = 0,05 Р=0,6 - - - - - - - -

Патозооспермия без делеций в локусе AZFc, п=597 X2 = 1,05 Р=0,3 X2 = 2,3 Р=0,1 X2 = 0,05 Р=0,9 X2 = 0,44 Р=0,6 X2 =0,36 Р=0,4 X2 =0,68 Р=1,0 X2 =0,17 Р=0,9 X2 =0,17 Р=0,9 X2 = 0,17 Р=0,9

Патозооспермия с делециями в локусе AZFc, п=397 X2 = 3,14 Р=0,1 X2 =1,3 Р=0,2 X2 = 0,11 Р=0,6 X2 =2,2 Р=0,1 X2 = 0 Р=1,0 - X2 = 0,51 Р=0,9 - -

Азооспермия, п-105 Х2 - 0,33 р-0,5 х2 - 1,66 р-0,3 Х2 - 0,93 р-0,3 - - Х2 -0,55 р-0,4 - - -

Олигозооспермия тяжелой степени, п-160 Х2 - 0,22 р-0,6 х2 -0,53 р-0,6 Х2 - 0,55 р-0,6 х2 -0,15 р-0,7 - Х2 -1,24 р-0,2 х2 -1,79 р-0,3 Х2 -1,79 р-0,3 -

Олигозооспермия умеренной степени, п-82 Х2 -0 р-0,9 Х2 -0,02 р-0,9 Х2 -0,43 р-0,6 Х2 -0,43 р-0,6 - - - - -

Астено-/тератозооспермия, п-250 Х2 - 3,04 р-0,11 х2 - 0,03 р-1,0 Х2 - 1,98 р-0,2 Х2 - 0,43 р-0,6 Х2 - 0,35 р-0,6 Х2 - 0,01 р-1,0 - - Х2 -1,15 р-0,4

Фертильные мужчины, п-286 Ь2/Ь3, п-276 Х2 - 0,89 р-0,4 Х2 - 1,13 р-0,3 х2 - 0,11 р-0,9 Х2 -1,71 р-0,3 х2 -0,75 р-0,4 - х2 -1,04 р-0,4 - -

В^г, п-111 Х2 -2,54 р-0,1 Х2 - 0,36 р-0,6 Х2 - 0,79 р-0,4 х2 -0,16 р-0,9 - - Х2 - 2,58 р-0,2 - -

8У1197, п-10 Х2 - 1,14 р-0,3 - - - - - - - -

Патозооспермия без делеций в локусе AZFc, п-597 Х2 -1,48 р-0,2 Х2 - 0,52 р-0,5 Х2 -0,87 р-0,4 Х2 - 0,08 р-0,7 Х2 -0,13 р-0,6 Х2 - 0,35 р-1,0 Х2 -0,48 р-1,0 Х2 -0,48 р-1,0 Х2 -0,48 р-1,0

Патозооспермия с делециями в локусе AZFc, п-397 Х2 - 0,04 р-1,0 Х2 - 0,98 р-0,3 х2 - 0,01 р-1,0 Х2 - 1,53 р-0,2 Х2 -0,18 р-1,0 - Х2 - 1,45 р-0,5 - -