Переработка луба березовой коры с получением биологически активных продуктов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.21.03, кандидат наук Бадогина, Алёна Игоревна

• Бадогина, Алёна Игоревна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Бадогина, Алёна Игоревна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1 АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Строение берёзовой коры и ее состав

1.2 Состав бересты и ее использование

1.3 Состав луба

1.4 Методы извлечения ценных компонентов из коры березы

1.5 Дубильные вещества в составе экстрактов коры

1.5.1 Состав экстрактов, полученных из бересты

1.5.2 Состав экстрактов, полученных из луба

1.6 Интенсивные методы экстрагирования

1.7 Получение и применение продуктов переработки луба

1.8 Применение экстрактов луба для стимуляции роста растений

1.9 Выводы по аналитическому обзору литературы, обоснование цели и задач исследования

2 МЕТОДИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

2.1 Подготовка сырья и экстракция луба березовой коры

2.2 Определение содержания легкогидролизуемых полисахаридов (ЛГПС)

2.3 Определение лигнина 72 %-й серной кислотой

2.4 Определение содержания водорастворимых веществ

2.5 Определение содержания сухого остатка в экстракте

2.6 Определение ДВ

2.7 Определение содержания щелочи в спиртово-щелочном экстракте

2.8 Определение содержания щелочи в твердом остатке

2.9 Экстрагирование луба на установке Твиссельмана

2.10 Экстрагирование луба методом настаивания

2.11 Исследования кинетики СВЧ-экстракции исходного сырья

2.12 Исследование экстрактов луба березовой коры для стимуляции роста растений

2.13 Испытания грунта с добавкой проэкстрагированного луба

2.14 Инструментальные методы анализа

2.14.1 Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)

2.14.2 Инфракрасная спектроскопия (ИК - спектроскопия)

2.14.3 Атомно-абсорбционная спектроскопия

2.14.4 Хромато-масс-спектрометрия (ГХ/МС)

3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1 Характеристика объекта исследования

3.2 Математическое описание влияния основных параметров и определение оптимальных условий СВЧ-экстракции

3.3 Кинетические закономерности процесса экстракции луба спиртово-щелочными растворами в СВЧ-поле

3.4 Сравнение кинетических закономерностей процесса СВЧ-экстракции луба и березовой коры

3.5 Определение содержания ДВ

3.6 Изучение химического состава спиртово-щелочных экстрактов луба березовой коры, полученных методом СВЧ-экстракции

3.7 Изучение биологической активности экстрактов

3.8 Агрохимические испытания грунта с добавкой проэкстрагированного луб

3.9 Выводы по экспериментальной части

4 РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ БАВ ИЗ ЛУБА БЕРЕЗОВОЙ КОРЫ И ОЦЕНКА ЭКОНОМИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ

4.1 Технологическая схема

4.2 Оценка экономической эффективности

5 ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение 1

Приложение 2

Приложение 3

Приложение 4

Приложение 5

Приложение 6

Приложение 7

Приложение 8

Приложение 9

Приложение 10

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Переработка луба березовой коры с получением биологически активных продуктов»

ВВЕДЕНИЕ

Береза - ценное сырье для различных отраслей промышленности, причем все ее части - почки, ветки, листья, береста, сок и особенно древесина - широко используются. В настоящее время перерабатывается в основном стволовая древесина, которая находит применение в целлюлозно-бумажной и деревообрабатывающей промышленности, а также при изготовлении древесного угля. Небольшое количество бересты используется для получения дегтя. На лесосеках после рубки и на деревообрабатывающих предприятиях, скапливается большое количество отходов, которые не имеют промышленного применения. Наиболее многотоннажным из отходов березы является кора (30 тыс. м3 сырья). [1].

Кора составляет значительную часть (10 - 15 %) массы березы [2], ее переработка - важный фактор комплексного использования биоресурсов планеты. Перспективным направлением утилизации коры березы считается ее химическая переработка с получением биологически активных веществ (БАВ). Например, из бересты коры березы получают бетулин и его производные, суберин [3 - 6]. Луб может использоваться для получения дубильных веществ (ДВ) и антоцианидиновых красителей [7]. Предложено несколько вариантов получения сорбентов из луба березовой коры и применения их на практике [7 - 15].

В последние годы возрос интерес к препаратам, получаемым из растительного сырья, которые характеризуются высокой биологической активностью и при этом малой токсичностью. Среди таких препаратов особое место, благодаря широкому спектру проявляемых видов биологической активности, доступности сырья, технологичности методов выделения, занимают сухие и жидкие экстракты, содержащие в качестве основных действующих веществ соединения класса тритерпеноидов. Основным источником тритерпеноидов, обладающих иммуностимулирующими, антиоксидантными, гепатопротекторными, противовоспалительными, антивирусными и другими ценными достоверно доказанными свойствами, является березовая кора [16].

В настоящее время еще в недостаточной степени изучены ростостимулирующие свойства биологически активных компонентов, получаемых

из луба березовой коры. Поэтому дальнейшее исследование данной области становится приоритетным в данной работе.

Актуальность работы

Большая часть коры березы представлена лубом (внутренний слой), в состав которого входят танниды (полифенолы) и другие фенольные компоненты - основа дубильных экстрактов. В верхнем слое коры (бересте) находятся ценные БАВ, преимущественно бетулин, который используется в фармацевтической, пищевой промышленности, ветеринарии и др. Выделение экстрактивных веществ (ЭВ) -альтернатива другим методам переработки коры.

Извлечение полифенолов из луба осуществляется в основном спиртовыми растворами гидроксида натрия. При использовании гидроксида калия меняется характеристика получаемого экстракта. С целью снижения затрат на подготовку сырья березовую кору не разделяют на наружный и внутренние слои, однако кинетические закономерности извлечения ЭВ из луба и общей массы коры требуют изучения.

Использование метода СВЧ-экстракции позволяет интенсифицировать процесс выделения БАВ из растительного сырья, существенно сокращает продолжительность процесса.

Выделение БАВ из луба коры березы водно-спиртовым раствором гидроксида калия при экстракции в СВЧ-поле расширяет область применения продуктов, например, в качестве стимуляторов роста и антисептиков при предпосевной обработке семян. Остатки луба после спиртово-щелочной СВЧ-экстракции содержат калий - биогенный элемент, служат добавкой к почве и удобрением.

1 АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Строение берёзовой коры и ее состав

Березовая кора состоит из внешнего слоя (бересты или корки) и внутреннего слоя (луба), которые значительно отличаются друг от друга своим химическим составом, обладают различными функциями и строением [17].

Корка состоит из пробковой ткани, которая защищает древесину от повреждений и действия высоких температур. Стенки клеток пробки тонкие и состоят из трех слоев: внутренний состоит в основном из лигнина, наружный - одревесневший, т. е. лигнифицированный, и срединный слой, который содержит суберин и тритерпены, к которым относится бетулин, придающий бересте белый цвет [18].

Бетулин обнаружен в березе бородавчатой, или повислой (Betula verrucosa Ehrh = Betula pendula Roth.) и березе пушистой (B. pubescens Ehrh), наиболее широко распространенных в России. Его содержание в Betula pendula Roth. составляет 55 - 85 % от суммы тритерпеноидов. Бетулин является главным компонентом ЭВ четырех видов североамериканских белоствольных берез: Betula papyrifera (береза бумажная), Betula populifolia Marsh. (береза серая), Betula cordifolia Regel. (береза горная бумажная), Betula X caerulea Blanch. (береза голубая). Береста этих видов содержит 75... 80 % бетулина от суммы тритерпеноидов [16; 19]. Результаты проведенных исследований, направленные на изучение свойств бетулина и способов его получения, представлены в работах [20 - 22].

По результатам исследований [4; 23 - 34] основными стадиями производства бетулина являются измельчение коры, отделение мелкой фракции (луба), экстракция бересты, фильтрование и частичное (полное) выпаривание экстракта, разбавление упаренного экстракта водой, отделение твердой фазы (бетулинового концентрата), сушка продукта при температуре 60 о С и упаковка.

Суберин является природным высокомолекулярным веществом, содержащим реакционно-способные непредельные и эфирные связи, свободные кислородные группы, что делает перспективным его применение в качестве

связующего при производстве древесно-плитных материалов [3]. Начало исследованию состава суберина положили В.И. Шарков и В.К. Кальнина [12], продолжено в работах [35; 36]. Неизученность химического состава суберина не позволяет оценить экономическую целесообразность того или иного направления по утилизации коры березы.

Луб, составляющий основную часть березовой коры (около 80 %) содержит водорастворимые вещества, наиболее ценными из которых являются танниды -полифенольные соединения, обладающие дубящими свойствами [2]. В лубе различают клетки ситовидных трубок, паренхимные клетки, лубяные волокна и каменистые клетки. Ситовидные клетки служат магистралью для проведения жидкости и питательных веществ. Лубяные волокна и каменистые клетки являются механической тканью березовой коры. Паренхимные клетки составляют запасающие ткани [17].

Химический состав коры неоднократно изучался различными исследователями, но в количественной оценке содержания отдельных компонентов имеются разногласия, которые возникают из-за различий в схемах и методах анализа [1; 37; 39-43]. По данным работы [1] групповой состав бересты и луба березы повислой может быть представлен следующим образом (таблица 1.1).

Таблица 1.1 - Групповой состав бересты и луба березы повислой на относительной высоте 0,3_

Группы соединений Содержание, % от а. с. м.

береста луб

ЭВ извлекаемые: диэтиловым эфиром 19,6 3,0

этанолом 29,1 15,8

горячей водой 0,9 19,3

Вещества, растворимые в 1%-м растворе №ОН 34,5 25,5

Суберин 33,1 1,4

Холоцеллюлоза 8,5 38,7

Целлюлоза 7,3 23,4

Пентоназы 3,1 21,8

Лигнин после экстракции органическими растворителями

и 1%-м раствором щелочи 33,2 18,1

Лигнин после экстракции органическими растворителями,

удаления суберина омылением и экстракции 1%-м 7,1 18,1

раствором щелочи

Минеральные вещества 0,3 1,5

Азот 0,52 0,45

Группа ЭВ представляет особый интерес. Из бересты извлекается диэтиловым эфиром в 6 раз, а этанолом в 2 раза больше ЭВ, чем из луба. В лубе содержится значительно (в 20 раз) больше веществ, экстрагируемых горячей водой. Количество веществ, извлекаемых 1%-м раствором №ОН, в бересте больше (34,5 %), чем в лубе (25,5 %).

Таким образом, березовая кора является источником ценных БАВ, содержание которых для бересты и луба существенно различается.

1.2 Состав бересты и ее использование

В работе [44] исследовался элементный анализ бересты, который был проведен на элементном анализаторе ЕА-3000. Образцы анализировались до и после спиртовой экстракции. Данные приведены в таблице 1.2.

Таблица 1.2 - Элементный состав технической бересты, %

Техническая береста С Н N 5

До спиртовой экстракции 69,2 ± 4,8 9,18 ± 0,64 1,56 ± 0,11 -

После спиртовой эктракции 68,2 ± 4,8 9,17 ± 0,64 1,55 ± 0,11 -

Содержание элементов в технической бересте соответствует данным других

авторов, и после экстракции меняется незначительно. Элементарный состав бересты является важнейшим показателем, характеризующим кору с позиции использования в качестве топлива. Главными элементами в бересте, при сгорании которых выделяется теплота, являются углерод (при сгорании до углекислоты выделяется 8137 калорий) и водород (34180 калорий). Элементный состав проэкстрагированной бересты близок к бурому углю, а большое содержание в структуре углерода и водорода при низком содержании кислорода определяют ее высокую теплотворную способность (таблица 1.3).

Таблица 1.3 - Сравнение горючих материалов по элементному анализу и зольности

Горючий материал

Показатель береста (после экстракции) древесина Торф бурый уголь каменный уголь

Содержание, % С 68 50 60 70 80

Н 5 6 6 6 6

О 25 44 34 24 14

Зольность, % < 1 1 4...10 10.20 10.35

Бересту после выделения ЭВ на основании элементного анализа можно отнести к твердому углеродному топливу, наряду с такими «классическими» энергоносителями, как торф и бурый уголь.

В работе [1] исследовался состав березы повислой (Betula pendula Roth) по высоте ствола. Распределение основных компонентов бересты по высоте представлено в таблице 1.4.

Таблица 1.4 - Распределение компонентов бересты по высоте дерева, % от а. с. м.

Компоненты Доля от общей высоты ствола (26 м)

0,1 0,3 0,6 0,9

ЭВ, извлекаемые: диэтиловым эфиром 16,3 19,6 21,5 27,5

из них кислот 25 25 10 10

этанолом 24,2 29,1 32,0 37,9

горячей водой 1,8 0,9 0,9 0,6

Суберин 26,4 33,1 34,5 39,3

Холоцеллюлоза 7,6 8,5 9,1 9,7

Минеральные вещества 0,28 0,31 0,48 0,51

Содержание веществ, растворимых в диэтиловом эфире, в бересте увеличивается по высоте ствола с 16,3 до 27,5 %. Содержание веществ, растворимых в этаноле, по высоте ствола увеличивается в 1,5 раза. Содержание веществ, извлекаемых горячей водой, увеличивается сверху вниз. Наибольшее содержание суберина, холоцеллюлозы и минеральных веществ определено в бересте, отобранной из вершинной части дерева. Содержание целлюлозы колеблется от 22 до 24 % с тенденцией снижения по высоте ствола.

1.3 Состав луба

Исследований, посвященных изучению химического состава луба и разработке направлений его использования, недостаточно по сравнению с берестой. Наиболее ценными компонентами луба березы считают растворимые формы ДВ. Авторами [45] изучена возможность получения ДВ, красителей и энтеросорбентов из луба березовой коры. Распределение основных компонентов луба по высоте дерева представлено в таблице 1.5.

Таблица 1.5 - Распределение компонентов луба по высоте дерева, % от а. с. м.

Компоненты Доля от общей высоты ствола (26 м)

0,1 0,3 0,6 0,9

ЭВ, извлекаемые: диэтиловым эфиром 3,2 3,0 2,0 2,5

из них кислот 30 19 15 12

этанолом 17,3 15,8 14,4 13,6

горячей водой 19,6 19,3 18,9 15,0

Целлюлоза 23,9 23,4 22,6 22,5

Пентозаны 20,0 21,8 23,7 25,5

Лигнин 18,1 18,1 18,5 18,5

Содержание веществ, растворимых в диэтиловом эфире, снижается с 3,2 до 2,5 %; веществ, растворимых в этаноле, также по высоте ствола снижается. Луб содержит значительное количество (19,3 %) водорастворимых соединений, содержание которых увеличивается сверху вниз. Содержание лигнина более постоянно - около 18 % [1].

1.4 Методы извлечения ценных компонентов из коры березы

Большинство известных методов выделения ценных веществ из коры основано на раздельной переработке бересты и луба. В ранее выполненном исследовании [46] показана возможность экстракционного извлечения достаточно узких групп соединений из коры комлевой части ствола березы. В частности, установлено, что гексановый экстракт такого рода коры содержит 90 % бетулина. Путем последовательной экстракции коры гексаном и полярными растворителями получены экстракты, преимущественно содержащие полифенолы.

Эти экстракты могут использоваться в качестве дубителей, хотя наличие сахаров снижает их потребительскую ценность. Содержание сахаров в экстрактах коры березы варьируется от 5,3 % (изопропанольный экстракт) до 15,4 % (водный экстракт). Для их удаления может использоваться термическая обработка водных экстрактов, однако она приводит к снижению содержания ДВ [47].

В работе [5] изучено влияние продолжительности активации коры водяным паром на выход веществ, экстрагируемых гексаном, этилацетатом, изопропанолом и водой. Выход гексанового экстракта возрастает с 10,5 до 15,4 % при увеличении продолжительности активации коры с 15 до 60 с, но снижается до 12,5 % после

активации в течение 240 с. Этилацетат и изопропанол извлекают из коры примерно одни и те же классы ЭВ: бетулин, полифенолы, ДВ и сахара.

Выход ЭВ, извлекаемых из активированной коры этилацетатом и изопропанолом, при продолжительности активации от 15 до 120 с увеличивается в среднем в 1,5 раза. С увеличением полярности растворителя при переходе от этилацетата к изопропанолу и воде концентрация полифенолы и ДВ в выделенных экстрактах повышается, а содержание сахаров изменяется незначительно (таблица 1.6).

Таблица 1.6 - Состав экстрактов, выделенных из коры березы, активированной водяным паром при температуре 240 ° С и давлении 3,4 МПа

Экстрагируемые вещества, % (масс.) Продолжительность активации коры, с

0 15 30 45 60 90 120 180 240

Экстрагируемые этилацетатом, из них (% от экстракта): 15,5 18,1 20,8 22,0 23,8 26,2 26,3 27,2 29,0

бетулин 60,0 51,4 44,7 42,3 39,1 35,5 35,4 34,2 32,1

полифенолы 27,1 28,6 27,7 25,8 18,4 10,3 6,2 4,3 3,1

ДВ 18,5 19,1 18,1 13,5 8,3 5,2 3,1 2,7 2,5

Экстрагируемые изопропанолом, из них (% от экстракта): 20,6 23,8 26,2 27,7 29,2 30,1 31,6 31,2 30,2

бетулин 46,0 40,0 36,1 34,2 32,4 31,5 30,0 30,4 31,4

полифенолы 29,6 39,2 34,3 27,1 19,3 8,4 5,6 3,8 3,2

ДВ 26,3 26,4 25,3 21,2 14,4 7,8 5,7 5,1 4,3

Экстрагируемые водой, из них (% от экстракта): 9,7 12,1 13,2 10,9 10,0 8,4 8,2 8,0 7,6

полифенолы 71,7 69,8 68,0 56,8 31,7 18,5 13,2 8,4 7,1

ДВ 48,7 45,1 42,0 30,7 15,1 7,8 5,1 4,0 3,3

Количество полифенолов и ДВ в этих экстрактах остается примерно постоянным при продолжительности активации коры до 30 с, однако концентрация сахаров уменьшается в 2,0-2,5 раза по сравнению с неактивированной корой. Продолжительная активация коры (до 240 с) хотя и приводит к увеличению выхода этилацетатного и изопропанольного экстрактов до 29,0 - 30,2 %, но при этом в нем резко падает содержание полифенолов, ДВ и сахаров.

В случае экстракции водой выход ЭВ возрастает с 9,7 до 12-13 % после активации коры в течение 15 - 30 с. Дальнейшее увеличение продолжительности активации коры приводит к снижению выхода водного экстракта и к одновременному уменьшению содержания в нем полифенолов и ДВ.

По данным, полученным из работы [5], низкомолекулярные фенолы не проявляют свойств, характерных для полифенолов и ДВ. В таблицах 1.7 приведены данные о химическом составе образцов коры березы, экстрагированных этилацетатом, изопропанолом и водой.

Таблица 1.7 - Химический состав коры березы, %, активированной водяным паром при температуре 240 °С, давлении 3,4 МПа_

Компоненты коры березы* Продолжительность активации, с

0 15 30 45 60 90 120 180 240

После экстракции: этилацетатом

Целлюлоза 27,9 28,7 28,3 27,1 26,9 24,8 24,4 24,0 23,5

Лигнин 34,4 41,6 41,7 42,0 42,3 42,5 42,3 44,4 44,9

Трудногидролизуемые полисахариды 23,5 28,1 29,5 26,7 25,0 22,3 21,9 22,3 21,4

Легкогидролизуемые полисахариды 18,2 7,8 6,1 5,5 4,3 4,0 2,3 1,8 -

Изопропанолом

Целлюлоза 24,7 28,7 28,0 27,1 26,3 25,9 24,2 25,8 26,9

Лигнин 29,8 38,2 38,8 39,2 39,6 40,1 40,8 40,1 39,6

Трудногидролизуемые полисахариды 22,5 25,7 26,1 25,7 24,8 23,7 22,8 22,9 24,6

Легкогидролизуемые полисахариды 22,6 6,0 4,4 3,7 2,7 1,8 1,3 1,1 -

Водой

Целлюлоза 25,1 31,2 31,7 30,9 29,0 28,7 27,5 27,0 25,1

Лигнин 52,5 52,2 50,8 53,7 55,7 58,4 61,3 61,5 64,0

Трудногидролизуемые полисахариды 25,5 33,9 32,5 31,3 28,4 26,9 26,4 23,1 24,9

Легкогидролизуемые полисахариды 9,3 2,3 2,2 2,0 1,9 1,7 - - -

* В процентах от масс абсолютно сухой коры.

Содержание легкогидролизуемых полисахаридов в коре резко падает после ее активации и последующей экстракции всеми видами экстрагентов; при продолжительности активации 240 с они полностью отсутствуют. Содержание целлюлозы, лигнина и трудногидролизуемых полисахаридов изменяется мало.

В работе [48] изучены различные методы утилизации отходов переработки березовой коры с получением энергии, углеродных сорбентов, биопрепаратов и гуминовых веществ. Расчетным путем определены оптимальные способы сжигания твердых остатков экстракционной переработки березовой коры, различающихся по содержанию влаги и золы. Освобождение части пор луба березовой коры в

процессе извлечения экстрактивных веществ способствует формированию развитой пористой структуры после его карбонизации и последующей активации.

Полученные сорбенты по своим характеристикам соответствуют промышленным порошковым сорбентам, которые производятся из качественной древесины. Осуществлен подбор условий культивирования грибов рода Тпекоёегта на лубе березовой коры, обеспечивающих получение биопрепаратов при питании аммонийным азотом и гумусовых веществ при использовании нитратного азота.

1.5 Дубильные вещества в составе экстрактов коры

Среди ЭВ большое значение приобретают полимерные фенольные соединения, или ДВ (танниды). Они охватывают большой комплекс сложных высокомолекулярных оксиароматических соединений, разнородных по своей химической структуре. Все растительные ДВ делятся на два класса: гидролизуемые и конденсированные танниды. Гидролизуемые танниды являются сложными эфирами сахаров и фенилкарбоновых кислот, для них характерно расщепление их при кипячении с водой или разбавленными кислотами на простейшие вещества: сахара, многоатомные спирты, фенилкарбоновые кислоты.

Конденсированные (высококонденсированные, негидролизуемые) ДВ при воздействии на них окисляющих средств или кислот конденсируются в более высокомолекулярные аморфные вещества - флобафены. Конденсированные танниды являются производными катехинов и лейкоантоцианов. Значительно реже в их образовании принимают участие стильбены и флавонолы [2].

К водорастворимым нетаннидам относятся сахара, фенолы, органические кислоты, минеральные соли, крахмал, белки, красящие вещества. Характеристикой качества экстрактов, содержащих танниды и нетанниды, является доброкачественность (Д), вычисляемая в процентах [17]:

Т

Д---100,

Т + НТ

где Т - содержание таннидов,%; НТ - содержание нетаннидов,%.

ДВ коры березы относятся к таннидам конденсированного ряда, основу которых составляют катехины и лейкоантоцианы. Содержание лейкоантоцианидинов и конденсированных катехинов в лубе коры березы составляет 12-13 %. При их кислотном гидролизе образуются мономолекулярные соединения катехиновой группы, которые окисляются с образованием окрашенных антоцианидинов.

Количественное содержание дубильных и сопутствующих веществ в лубе и бересте березы повислой представлено в таблице 1.8.

Таблица 1.8 - Количественное содержание дубильных и сопутствующих веществ в лубе и бересте березы повислой, % от а.с.б._

Возрастная группа дерева, лет Луб Береста

Количество Доброкачественность Количество Доброкачественность

Растворимых Тан-нидов Нетан-нидов Растворимых Тан-нидов Нетан-нидов

31-40 22,6 17,0 10,5 9,3 12,1 7,7 46,4 54,7 4,3 3,3 2,4 1,9 1,9 1,4 55,8 57,5

41-50 25.8 20.9 12,2 11,5 13,6 9,4 47,3 55,0 4,0 3,6 2,1 1,7 1,9 1,9 52,5 47,2

51-60 17,9 18,9 9,0 7,3 8,9 11,6 50,2 39,1 3.8 3.9 2,3 2,2 1,5 1,7 60,5 56,4

61-70 21,1 17,7 15,0 9,6 6,1 8,1 71,0 54,2 3.7 3.8 1,8 1,7 1,9 2,1 48.6 44.7

81-90 24,8 23,6 12,0 11,8 12,8 11,8 48,3 50,0 4,4 4,1 2,5 2,0 1,9 2,1 56,8 48,7

Содержание таннидов в лубе изменяется в значительных пределах (7,3-15,0 %). Береста содержит мало ДВ (1,7-2,5 %). Несмотря на довольно низкое содержание таннидов в наружном слое коры березы, доброкачественность экстрактов из бересты выше, чем экстрактов из луба. Кроме полифенолов в экстрактах коры присутствуют простые фенольные вещества различного строения.

Исследован водный и щелочной экстракты луба и бересты (таблица 1.9). В лубе березы, который вплотную прилегает к камбию, отмечено наличие большого количества растворимых форм ДВ. Они представлены в основном таннидами, неосаждаемыми соляной кислотой. На долю осаждаемых веществ от общего количества растворимых таннидов приходится 13,2 - в лубе и 24,8 % - в бересте. Это свидетельствует о том, что водный экстракт коры березы содержит незначительное количество высококонденсированных полифенолов.

Таблица 1.9 — Состав ДВ луба и бересты березы повислой, мг/г а. с. с.

Компоненты Луб Береста

Растворимые в воде формы ДВ

свободные полифенолы 3,2 2,2

Танниды 77,6 12,5

осаждаемые соляной кислотой 10,2 3,1

неосаждаемые соляной кислотой 67,4 9,4

общая сумма растворимых в воде форм 80,8 14,7

Нерастворимые в воде формы ДВ

Свободные полифенолы 8,6 1,2

Танниды 16,6 61,6

общая сумма нерастворимых в воде форм 25,2 63,0

Содержание свободных полифенолов в лубе березы составляет 4,0; в бересте - 15,0 % от общей суммы растворимых ДВ. Следовательно, танниды бересты на 40 %, а луба - более чем на 80 % состоят из собственно таннидов. Эта группа веществ является наиболее ценной с точки зрения их практического использования.

Изучение нерастворимых в воде форм ДВ показывает, что состав этих веществ в лубе и бересте различен. Доля свободных полифенолов составляет в бересте лишь 2,0 %, в то время как в лубе количество их достигает 30 % от общей суммы нерастворимых форм. Высококонденсированных таннидов в лубе в 3,7 раза меньше, чем в бересте. Это свидетельствует о том, что дубильный комплекс бересты находится в более уплотненном состоянии, чем в лубе [49].

В работе [50] были получены данные по выходу и содержанию основных компонентов в исследуемых экстрактах коры (таблица 1.10).

Таблица 1.10 - Выход и состав ЭВ, извлекаемых при экстракции коры березы различными растворителями

Растворитель Выход ЭВ, %* Содержание бетулина в экстракте, % ** Содержание полифенолов в экстракте, % ** Содержание ДВ в экстракте, % ** Содержание сахаров в экстракте, %** Доброкачественность экстракта, %

Гексан 10,5 90,0 - - - -

Этилацетат 15,5 60,0 27,1 18,5 12,7 42,3

Изопропанол 20,6 46,0 39,6 26,3 14,2 46,5

Вода 9,7 - 71,7 48,7 24,8 46,4

* от веса сухой коры ** от веса экстракта

При экстракции коры водой в основном извлекаются фенольные вещества и

сахара, содержание которых в экстракте составляет 71,7 и 24,8 % соответственно.

16

Экстракты, выделенные этилацетатом и изопропанолом, с выходом 15,5 и 20,6 %, соответственно, содержат три основных компонента: бетулин, полифенолы и сахара. Бетулин преобладает в этилацетатном экстракте (60,0 %); в изопропанольном экстракте содержатся почти поровну бетулин (46,0) и полифенолы (39,6 %). Водой извлекается 9,7 % ЭВ, водные экстракты содержат 71,7 % полифенолов (из них 48,7 % ДВ) и 24,8 % сахаров.

В таблице 1.11 представлены выход и состав ЭВ, извлекаемых из коры березы при последовательной экстракции теми же растворителями.

Таблица 1.11 - Выход и состав ЭВ, извлекаемых из коры березы при последовательной экстракции

Растворитель Выход ЭВ, %* Содержание бетулина в экстракте, % ** Содержание полифенолов в экстракте, % ** Содержание ДВ в экстракте, % ** Содержание сахаров в экстракте, % ** Доброкачественность экстракта, %

Гексан 10,5 90,0 - - - -

Этилацетат 6,9 1,4 78,3 67,5 8,5 46,3

Изопропанол 5,2 - 61,8 56,2 5,3 48,4

Вода 4,3 - 54,2 51,3 15,4 49,7

Общий выход ЭВ 26,9

* от веса сухой коры ** от веса экстракта

При последовательной экстракции коры гексаном, этилацетатом, изопропанолом и затем водой в сумме извлекается 26,9 % ЭВ. Причем этилацетатный, изопропанольный и водный экстракты преимущественно состоят из полифенолов (78,3; 61,8; 54,2 %), и в них ДВ доминируют. Доброкачественность этих экстрактов варьируется незначительно, от 46,3 до 49,7 %; они содержат от 5,3 % (изопропанольный экстракт) до 15,4 % (водный экстракт) сахаров, снижающих этот показатель.

Таким образом, кора березы, многотоннажный отход деревообработки, является неисчерпаемым источником получения различных БАВ [50].

1.5.1 Состав экстрактов, полученных из бересты

Наиболее богата ЭВ внешняя кора. Их можно извлекать, в зависимости от

используемого растворителя, в количестве до 40 % относительно веса бересты [50].

17

В работе [51] были получены данные по элементному составу бересты, бетулина и экстрактов бересты, которые представлены в таблице 1.12. Температура плавления этанольного экстракта бересты составляет 260 °С.

Исходя из данных, полученных в таблице, больше всего С, % содержится в этанольном экстракте бересты (81,70 %), меньше всего - в бересте (70,62 %).

Таблица 1.12 - Элементный состав бересты, бетулина и этанольного экстракта бересты_

Образец Содержание элементов, %

С Н О 5 N

Береста 70,62 9,04 19,57 0,08 0,07

Бетулин 76,26 11,26 9,78 0,11 0,06

Этанольный экстракт бересты 81,70 11,11 6,86 0,00 0,26

Содержание водорода в бетулине и этанольном экстракте бересты примерно одинаковое. Количество кислорода в бересте выше (19,57 %), чем в этанольном экстракте бересты (6,86 %). Содержание 5 и Ы, %, в бересте и бетулине примерно одинаково.

1.5.2 Состав экстрактов, полученных из луба

В работе [38] изучен процесс получения дубильного экстракта водно-спиртово-щелочной экстракцией луба. В качестве сырья использовался луб коры березы повислой следующего состава (% от а. с. м. луба): общее содержание полисахаридов - 49,1, из них легкогидролизуемых - 26,3, трудногидролизуемых -22,8; лигнина - 34,8; веществ, экстрагируемых горячей водой - 13,7; минеральных веществ - 3,4. Перед использованием воздушно-сухой луб измельчали в дезинтеграторе до фракции менее 1,5 мм. В качестве экстрагента, наиболее полно извлекающего вещества фенольной природы, использовали гидроксид натрия различных концентраций (от 0,5 до 1,5 %) в водном растворе этанола. Экстракцию проводили при жидкостном модуле (соотношение кора: экстрагент), равном 10, и температуре 70 °С. Продолжительность процесса экстракции варьировалась от 30 до 90 мин.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бадогина, Алёна Игоревна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Ведерников Д.Н., Шабанова Н.Ю., Рощин В.И. Изменение химического состава корки и луба березы повислой Betula pendula Roth. (Betulaceae) по высоте дерева // Химия растительного сырья. - 2010. - № 2. - С. 43-48.

2. Черняева Г. Н., Долгодворова С.Я., Бондаренко С.М. Экстрактивные вещества березы / Институт леса и древесины СО РАН / Красноярск, 1986. 123 с.

3. Кислицын А.Н. Экстрактивные вещества бересты: выделение, состав, свойства, применение // Химия древесины. - 1994. - №3. - С. 3-28.

4. Кузнецов Б.Н. Выделение бетулина и суберина из коры березы, активированной в условиях «взрывного автогидролиза»/ Б.Н. Кузнецов, В.А. Левданский, А.П. Еськин, Н.И. Полежаева// Химия растительного сырья. - 1998. -№ 1. - С. 5-9.

5. Левданский В.А., Кузнецов Б.Н., Полежаева Н.И. Влияние активации коры березы перегретым паром на выход и состав экстрактов, содержащих бетулин и дубильные вещества // Химия растительного сырья. - 2005. - № 2. - С. 15-20.

6. Судакова И.Г., Кузнецов Б.Н., Гарынцева Н.В. Изучение процесса выделения субериновых веществ из бересты березовой коры // Химия растительного сырья. -2008. -№ 1. -С. 41-44.

7. Кузнецова С.А. Получение дубильных веществ, красителей и энтеросорбентов из луба березовой коры / С.А. Кузнецова, В.А. Левданский, Б.Н. Кузнецов, М.Л. Щипко // Химия в интересах устойчивого развития. - 2005. - Т.13. - С. 401-409.

8. Веприкова Е.В. Свойства энтеросорбентов, полученных из автогидролизованной коры березы / Е.В. Веприкова, С.А. Кузнецова, Н.В. Чесноков, Б.Н. Кузнецов // Химия в интересах устойчивого развития. - 2012. -Т. 20. - № 6. С. 673-678.

9. Коваленко Г.А., Кузнецова Е.В. Адсорбция антисептиков (фурацилина, хлоргексидина) и витамина Е на углеродсодержащих энтеросорбентах // Химико-фармацевтический журнал. - 2000. - Т. 34. - № 6. - С. 45-49.

10. Пак Т.С., Тахтаганова Д.Б., Кристаллович Э.Л. Энтеросорбент на основе фиброина натурального шелка и его механохимическая модификация

дезоксипеганин гидрохлоридом // Химико-фармацевтический журнал. - 2007. - Т. 41. - № 1. - С. 21.

11. Пьянова Л.Г. Углеродные сорбенты в медицине и протеомике // Химия в интересах устойчивого развития. - 2011. - Т. 20. - № 1. - С. 113-122.

12. Николаев В.Г. Энтеросорбция: состояние вопроса и перспективы на будущее // Вестник проблем биологии и медицины. - 2007. - № 4. - С. 7-17.

13. Sarnatskaya V.V., Lindup W.E., Walther P. et. ol. Albumine, bilirubine and activated carbon: new edges of an old triangle // Art. Cells, Blood Substit. And Immobiliz. Biotechologe. - 2002. - No 2. - Рр. 113-127.

14. Воробьева О.В. Сорбенты на основе белкового комплекса казеина. I. Структурные характеристики сорбентов /О.В. Воробьева, С.М. Кунижев, О.В Анисенко, А.А. Филь // Вестник Ставропольского ГУ, 2003. - Вып. 34. - С. 111115.

15. Веприкова Е.В. Изучение сорбции маркера белковой природы - желатина на пористой подложке из луба березы/ Е.В. Веприкова, М.Л. Щипко, С.А. Кузнецова, Б.Н. Кузнецов // Катализ в промышленности. - 2011. - № 2. - С. 72-76.

16. Похило Н.Д., Уварова Н.И. Изопреноиды различных видов рода Betula // Химия природных соединений. - 1988. - Т. 3. - С. 325-341.

17. Толстиков Г.А., Флехтер О.Б., Шульц Э.Э. Бетулин и его производные. Химия и биологическая активность // Химия в интересах устойчивого развития. -2005. - №13. - С. 1-30.

18. Комплексная химическая переработка древесины: учебник для вузов /И.Н. Ковернинский, В.И. Комаров, С.И. Третьяков и др. под ред. проф. И.Н. Ковернинского. - 3-е изд., испр. и доп. - Архангельск: Изд-во Арханг. гос. техн. ун-та, 2006. - 374 с.

19. Cole B.J.W., Bentley M.D., Hua J. Triterpenoid extractives in the outer bark of Betula lenta (Black birch) // Holzforschung. - 1991. - Vol. 45. - No 4. - Pp. 265-268.

20. Drebushchak T. N. Crystal structure of betulin ethanol solvate / T.N. Drebushchak, M. A. Mikhailenko, M. E. Brezgunova et ol./ J. Struct. Chem. - 2010. -Vol. 51. - Pp. 798-801.

21. Guoling Z., Weidong Y., Dan C. Simultaneous determination of betulin and betulinic acid in white birch bark using RP-HPLC // J. Pharm. Biomed. Analysis. - 2007. - Vol. 43, No. 3. - Pp. 959-962.

22. Tolstikov G.A., Flekhter O.B., Shultz E.E. Betulin and Its Derivatives. Chemistry and Biological Activity / G.A. Tolstikov, O.B. Flekhter, E.E. Shultz, L.A. Baltina, A.G. Tolstikov // Chem. Sustain. Dev. - 2005. - Vol. 13, No. 1. - Pp. 1-29.

23. Левданский В. А. Комплексная переработка древесной коры с использованием процессов экстракции и взрывного автогидролиза: автореф. дис. ... д-ра хим. наук. - Красноярск, 2006. - 40 с.

24. Коптелова Е.Н. Интенсификация процесса выделения бетулина из бересты с использованием СВЧ-поля / Е.Н. Коптелова, Л.Н. Кузнецова, Н.А. Кутакова, С.И. Третьяков // ИВУЗ. Лесной журнал. - 2013. - № 5. - С. 23-33.

25. Пат. 2172178 РФ, С1 A61K35/78, C08H5/04. Способ получения бетулина / Сироткин Г.В., Стернин Ю.И. № 2000129749/14, заявл. 29.11.2000. Опубл. -20.08.2001.

26. Patent 09/038173 (US) Birch bark processing and isolation of natural products from Birch bark / P.A. Krasutsky, R.M. Carlson, I.M. Kolomitsyn, C. Edwardson, V.V. Nesterenko. 2001. Aug 23.

27. Darrick S.H.L. Kim, Zhidong Chem, Van Tuyen Nguen A concise semi-synthetic approach to betulinic acid from betulin/ S.H.L. Kim Darrick, Chem Zhidong, Van Tuyen Nguen, John M. Pezzuto, Shengxiang Qiu, Zhi-Zhen Lu // Synthetic communication. - 1997. - Vol. 27, No 9. - Pp. 1607-1612.

28. Levdansky V. A., Korolkova I. V., Levdansky A. V. Influence of the Nature of Organic Solvent on Betulin Isolation from an External Layer of a Birch Bark/ V. A. Levdansky, I. V. Korolkova , A. V. Levdansky, N. M. Ivanchenko, B. N. Kuznetsova // Journal of Siberian Federal University. - 2012. - No 5. - Pp. 302-310.

29. Nurmesniemi H. and Pulkkinen E. Isolation and partial hydrolysis of acidic xylan from birch (Betula Verrucosa) inner bark // Paperi ja Puu. 1981. - No3. - Pp. 121125.

30. Nurmesniemi H. Molecular properties of 4-O-methylglucuronoxylan from birch (Betula Verrucosa) inner bark // Paperi ja Puu. - 1981. - No 1. - Pp. 25-29.

31. Pub № W0/2001/0110885 PCT/US2000/021829. Birch bark processing and the isolation of natural products from birch bark / Edwardson C.F., Kolomitsyn I.V., Krasutsky P.A., Carlson R.M., Nesterenko V.V.; Bul. № 2008/42. 15.02.2001. - 25 р.

32. Pakdel H., Murwanashyaka JN., Roy C. Extraction of betulin by vacuum pyrolysis of birch bark // Wood Chem. And Technol. - 2002. - No 2-3. - Pp. 147-155.

33. Hua J. Triterpenes from the outer bark of Betula nigra/ J. Hua, M.D. Bentley, B.J.W. Cole, K.D. Murray, A.R. Alford // Journal of wood chemistry and technology. -1991. - Vol. 11, No 4. - Pp. 503-516.

34. Habiyaremye I., Pentacyclic triterpenes of yellow birch bark from Quebec/ I. Habiyaremye, T. Stevanovic-Janezic, B. Riedl, F-X. Garneau, F-I. Jean // Sixth European Workshop on Lignocellulosics and Pulp. 3-6 September 2000. - Bordeaux, 2000. - Pp. 355-359.

35. Paula C.R. Quercus suber and Betula pendula outer barks as renewable sources of oleochemicals: A comparative study/ C.R. Paula, O. Pinto, F. Sousa Andreia, J.D. Silvestre Armando, Carlos Pascoal Neto, Alessandro Gandini, Christer Eckerman, Bjarne Holmbom // Iindustrial Crops and Products. - 2009. - Pp. 126-132.

36. Alessandro Gandini, Carlos Pascoal Neto, Armando J.D. Silvestre. Suberin: A promising renewable resource for novel macromolecular materials. // Progress in Polymer Science. - 2006. -Pp. 878-892.

37. Гелес И.С. К вопросу определения химического состава древесного сырья // ИВУЗ.Лесной журнал. - 2001. - № 3. - С. 102-111.

38. Рязанова Т.В. Оптимизация процесса получения дубильного экстракта из луба березовой коры/ Т.В. Рязанова, Б.Н. Кузнецов, С.А. Кузнецова и др. - Химия растительного сырья. - 2004. - № 3. - С. 29-33.

39. Кузнецов Б.Н. Новые способы получения ценных химических продуктов из биомассы березы и отходов ее механической переработки // Повышение эффективности использования отходов лесопромышленного комплекса: материалы междунар. научн.-техн. конф. 7-8 декабря 2004 г. - Черноголовка, 2004. - С. 33-37.

40. Юрьев Ю.Л., Кузнецова Т.В. Выделение бетулина из бересты // Пути повышения эффективности лесохимических и гидролизных производств: тез. научн.-техн. конф. - Свердловск: УЛТИ, 1985. - С. 20.

41. Количественный химический анализ растительного сырья / В.И. Шарков, Н.И. Куйбина, Ю.П. Соловьева, Т.А. Павлова. - М.: Лесн. пром-сть, 1976. - 72 с.

42. Ukkonen K., Era V. Birch bark extractives // Kemia-Kemi. - 1979. - Vol. 6, No 5. - Pp. 217-220.

43. Павлова Т.А., Куйбина Н.И., Иванова Л.Я. [и др.]. Химический состав коры и древесины хвойных и лиственных пород // Гидролизная и лесохимическая промышленность. - 1977. - № 4. - С. 9-11.

44. Бетулин: Получение, применение, контроль качества: монография / С.И. Третьяков, Е.Н. Коптелова, Н.А. Кутакова и др.- Архангельск: САФУ, 2015. -180 с.

45. Kuznetsova S.A. Obtaining Tanning Agents, Dyes, and Enterosorbents from Bast of a Birch Bark/ S.A. Kuznetsova, V.A. Levdansky, B.N. Kuznetsov et ol. // Chem. Sustain. - 2005. - №. 3. - P£. 399-407.

46. Левданский В.А. Выделение и изучение экстрактивных веществ коры березы/ В.А. Левданский, Н.И. Полежаева, А.В. Левданский, Б.Н. Кузнецов // Лесной и химический комплексы: проблемы и решения: Сб. ст. Всероссийской науч.- практ. конф., 24-25 апреля. Красноярск, 2003. С. 422-426

47. Жученко А.Г., Авдюкова Н.В. Влияние экстрактивных веществ коры ели на превращение компонентов при термогидролитической обработке // Сборник трудов СвердНИИПДрев. Вып. 4. М., 1969. С. 69-75.

48. Kuznetsov B. N. Optimisation of Thermal and Biochemical Methods for Recovery of Wastes from Extraction Processing of Birch Bark/ B. N. Kuznetsov, T. V. Ryazanova, M. L. Shchipko et ol. // Chemistry for Sustainable Development. - 2005. -Pр. 439-447.

49. Долгодворова С.Я., Черняева Г.Н. Дубильные вещества коры березы. Академия наук СССР. Биологические ресурсы лесов Сибири. - Красноярск, 1980. -С. 72-80.

50. Левданский В.А. Изучение экстракции коры березы гексаном, этиацетатом, изопропиловым спиртом и водой/ В.А. Левданский, Н.И. Полежаева,

А.В. Левданский, Б.Н. Кузнецов // Химия растительного сырья. - 2004. - № 2. - С. 17-20.

51. Кузнецова С. А. Изучение состава этанольного экстракта бересты и его токсико-фармакологических свойств/ С.А. Кузнецова, Г.П. Скворцова, Г.С. Калачева и др. // Химия растительного сырья. - 2010. - № 1. - С. 137-141.

52. Арбузов Г.А., Шипков П.Ф. Товароведение растительных дубильных материалов. - М.-Л.: Гизлегпром, 1932. - 121 с.

53. Dan C., Guoling Z., Weidong Y. Solubilities of betulin in fourteen organic solvents at different temperatures // J. Chem. Eng. Data. - 2007. - Vol. 52, Ко. 4. - Рр. 1366-1368.

54. Пат. 2176158 РФ, С2 B03B5/02. Способ акустической обработки (варианты) и акустическая установка (варианты) / Михайлов А.Г., Ким А.П., Брагин В.И., Вагнер В.А., Зубарев В.В. № 99113968/03, заявл. 25.06.1999. Опубл. 27.11.01. - Бюл. № 24. - 6 с.

55. Фридман В.М. Ультразвуковая химическая аппаратура. - М.: Машиностроение, 1967. - 130 с.

56. Димов Х.Т., Пономарев В.Д. Влияние электрогидравлического удара на степень разрушенности структуры сырья листьев красавки и семян дрона // Фармация. - 1979. - № 6. - С. 57-58.

57. Аксельруд Г.А. Экстрагирование. Система твердое тело-жидкость. - Л.: Химия, 1974. - 256 с.

58. Пат. 2090593 РФ, С1 C11B1/10, C11B9/02. Способ извлечения растительных масел / Квасенков О.И., Ратников А.Ю., Юрьев Д.Н., Андреев В.Г. № 95110356/13, заявл. 21.06.1995. Опубл. - 20.09.1997.

59. Анашенков С.Ю. Переработка древесной зелени в щелочных средах с использованием роторно-пульсационных аппаратов: дис. ... канд. техн. наук. -СПб, 2008. - 133 с.

60. Молчанов Г.И. Интенсивная обработка лекарственного сырья. - М.: Медицина, 1981. - 208 с.

61. Кошевой Е.П. Экстракция двуокисью углерода в пищевой технологии. -Майкоп, 2000. - 495 с.

62. Oomah B. Dave. Microwave heating of grapeseed: Effect on oil quality/ B. Dave Oomah, Jun Liang, David Godfray, Giuseppe Mazza // J. Agr. And Food Chem. -1998. - Vol. 46, No 10. - Pp. 4017-4021.

63. Коновалов Н.П. Применение СВЧ - энергии для переработки угля и отходов резины в жидкие продукты: дис. ... д-ра техн. наук. - Москва, 2001. -208 с.

64. Ширеторова В.Г. Разработка основ технологии получения кедрового масла СВЧ-экстракцией спиртом этиловым: дис. ... канд. техн. наук. - Улан-Удэ, 2002. - 155 с.

65. Кузнецова С.А. Интенсификация процесса водной экстракции арабиногалактана из древесины лиственницы/ С.А. Кузнецова, А.Г. Михайлов, Г.П. Скворцова, Н.Б. Александрова // Химия растительного сырья. - 2005. - №1. - С. 53-58.

66. Ем И.А. Совершенствование технологии переработки семян хлопчатника путем применения экструзионной обработки: автореф. дис. ... канд.техн.наук. - Л., 1990. - 23 с.

67. Рахманкулов Д.Л. Микроволновое излучение и интенсификация химических процессов / Д.Л. Рахманкулов, И.Х. Бикбулатов, Н.С. Шулаев, С.Ю. Шавшукова - М.: Химия, 2003. - 220 с.

68. Vivekananda Mandal, Yogesh Mohan, S. Hemalatha. Microwave Assisted Extraction An Innovative and Promising Extraction Tool for Medicinal Plant Research // Pharmacognosy Reviews. Jan-May 2007. - Vol 1. - Pp. 7-18.

69. Hu, Zhuoyan. Microwave Assisted Extraction: The Effects mechanisms and application selection // Hong Kong: Polytechnic University. - 2011. - 157 p.

70. Коптелова Е.Н., Кутакова Н.А., Третьяков С.И. Исследование кинетики массопереноса в процессе экстрагирования бересты // ИВУЗ. Лесной журнал. -2013. - № 4. - С. 56-63

71. Pakowski Z., Mujumdar A.S. Handbook of Industrial Drying. 3-rd Edition, Mujumdar, A.S. Eds.; CRC Press. - 2007. - Pp. 54-179.

72. Kays W.M. Convective heat and mass transfer. Mac Graw-Hill. - 2005. -

546 p.

73. Midilli A., Kucuk H., Vapar Z. Drying Technology. - 2002. - Vol. 20, No. 7. - Pp. 1503-1513.

74. Коптелова Е.Н., Кутакова Н.А., Третьяков С.И. Извлечение экстрактивных веществ и бетулина из бересты при воздействии СВЧ-поля // Химия растительного сырья. - 2013. - № 4. - С. 159-164.

75. Бровко О.С. Сравнительный анализ традиционных и современных методов экстракции усниновой кислоты из лишайникового сырья /О.С. Бровко, И.А. Паламарчук, Т.А. Бойцова и др. // Фундаментальные исследования.- 2015. -№ 11. - С. 659-663.

76. Кунавин А.А., Кутакова Н.А. Влияние технологических параметров СВЧ-экстракции на выход экстрактов из луба / Ломоносовские научные чтения студентов, аспирантов и молодых учёных - 2016: сборник материалов конференций. 2016. С. 399-404.

77. Матухин А.Л., Кутакова Н.А. Кинетические закономерности экстрагирования луба березовой коры / Ломоносовские научные чтения студентов, аспирантов и молодых учёных - 2016: сборник материалов конференций. 2016. С. 415-420.

78. Коропачинская Н.В., Тарабанько В.Е., Левданский В.А. Каталитическое окисление березового луба кислородом в сиреневый альдегид и ванилин // Химия растительного сырья. - 2004. - № 1. - С. 27-30.

79. Третьяков С.И. Баланс щелочи в технологии дубильных веществ при экстракции луба березовой коры / С.И. Третьяков, Е.Н. Коптелова, Н.А. Кутакова и др.// Новейшие достижения в области инновационного развития в химической промышленности и производстве строительных материалов: международная научно-техническая конференция. 2015. С. 347-350.

80. Veprikova Е. V. Properties of Enterosorbents Obtained by Immobilization of Furacilin and Gelatin on the Porous Carrier from Inner Birch Bark / Е. V. Veprikova, C. А. Kuznetsova, N. V. Chesnokov, B. N. Kuznetsov // Journal of Siberian Federal University. - 2014. - Pp. 100-111.

81. Sarnatskaya V.V., Lindup W.E., Walther P. Albumine, bilirubine and activated carbon: new edges of an old triangle. // Art.Cells, Blood Substit. And Immobiliz. Biotechologe. - 2002. - No 2. - Pp. 113-127.

82. Bettelheim Fredericr A., Priel Zvi. Adsorption of biopolymers on solid surface // Journal of colloid and interface science. - 1979. -Vol. 70. - Pp. 395-398.

83. Кузнецова С. А. Энтеросорбент из луба березовой коры с нанесенным бетулином /С.А. Кузнецова, Н.В. Чесноков, Г.П. Скворцова и др. // Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья: материалы VII Всероссийской конференции с международным участием. 2017. С. 169-170.

84. Veprikova E. V. Properties and Application of the Sorption Materials from Outer Birch-Bark / E. V. Veprikova, S.A. Kuznetsova, G. P. Skvortsova, M. L. Shchipko // Journal of Siberian Federal University. - 2008. - Pp. 286-292.

85. Веприкова Е.В. Получение энтеросорбентов из отходов окорки березы / Е.В. Веприкова, М.Л. Щипко, С.А. Кузнецова, Б.Н. Кузнецов // Химия растительного сырья.-2005. - № 1. - С. 65-70.

86. Пат. 2311954 РФ. Энтеросорбент и способ его получения / Кузнецова С.А., Щипко М.Л., Кузнецов Б.Н., Ковальчук Н.М., Веприкова Е.В., Лезова А.А. Опубл. - 10.12.2007.

87. Bruce A., Palfreyman John W. Forest Products Biotechnology. - Taylos & France. - 1998. - 243 p.

88. Harum J., Labosky P. Plavonone from Douglas fir heartwood // Wood and Fiber Science. - 1985. - Vol.17. - 327 p.

89. Кузнецова С.А., Щипко М.Л., Кузнецов Б.Н. и др. Получение и свойства энтеросорбентов из луба березовой коры // Химия растительного сырья. - 2004. -№ 2. - С. 25-29.

90. Бондаренко С.М., Долгодворова С.Я., Черняева Г.Н. Лейкоантоцианидины коры березы повислой // Изв. СО РАН СССР. Сер. хим. науки. - 1989. № 1. - С. 86-90.

91. Танчев С.С. Антоцианы в плодах и овощах. - М.: Пищевая пром-сть, 1980. - 304 с.

92. Ветчинкин А.Р. Естественные органические красящие вещества. -Саратов: Приволжское книжное издательство, 1966. - 250 с.

93. Левданский В.А., Кузнецов Б.Н. Получение антоцианидиновых красителей из луба коры березы betula pendula roth / Химия растительного сырья. -2004. - № 3. - С. 25-28.

94. B.N. Kuznetsov, V.A. Levdansky, N.I.Poleshaeva, Proc. 6th European Workshop on Lignocellulosics and Pulp, Bordeux, France. - 2000. - 417 p.

95. Левданский В.А., Полежаева Н.И., Кузнецов Б.Н. Новые методы комплексной переработки древесной коры в ценные химические продукты // Сборник научных трудов / Институт химии и химической технологии СО РАН. Красноярск, 2001. С. 161-175.

96. Пат. 2367460 РФ Способ получения проантоцианидинов из луба коры березы / Левданский В.А., Левданский А.В., Кузнецов Б.Н. Опубл. - 09.07.2008

97. Чубарова И.В. Исследование удобрений на основе луба березы / Молодежь и наука: сборник материалов IX Всероссийской научно-технической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых с международным участием, посвященной 385-летию со дня основания г. Красноярска [Электронный ресурс] № заказа 2394/отв. ред. О.А.Краев - Красноярск : Сиб. федер. ун-т.,2013. — Режим доступа: http://conf.sfu-kras.ru/sites/mn2013/section041.html, свободный.

98. Kuznetsova S. A. Synthesis and Properties of Biocomposite Fertilizers on the Basis of Urea and Birch Bark / S. A. Kuznetsova, B. N. Kuznetsov, E. S. Skurydina et ol. // Journal of Siberian Federal University. - 2013. - Pp. 380-393.

99. Выделение и определение компонентов древесины: метод. указания к выполнению лаб. работ / сост. Е.В. Новожилов, Г.И. Попова, А.С. Грошев. -Архангельск: Изд-во Арханг. гос. ун-та, 2008. - 58 с.

100. Оболенская А.В., Ельницкая З.П., Леонович А.А. Лабораторные работы по химии древесины и целлюлозы: Учебное пособие для вузов. - М.: Экология, 1991. - 320 с.

101. Лабораторный практикум по технологии биологически активных веществ и углеродных адсорбентов: в 2 ч. Ч. 2. Анализ БАВ: учебное пособие / Н.А. Кутакова, Н.И. Богданович, С.Б. Селянина и др.; Сев. (Арктич.) федер. ун-т им. М.В. Ломоносова. - САФУ, 2015. - 114 с.:ил.

102. Государственная фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1991. - 400 с.

103. Малаховец П.М. Лесные культуры: практическое пособие / П.М. Малаховец. - Архангельск: Изд-во Арханг. гос. ун-та, 2006. - 103 с.

104. Богданович Н.И., Кузнецова Л.Н., Третьяков С.И., Жабин В.И. Планирование эксперимента в примерах и расчетах: учеб. пособие. Архангельск: Изд-во САФУ, 2010. 126 с.

105. Романков П.Г., Курочкина М.И. Экстрагирование из твердых материалов. Л.: Химия, 1983. 256 с.

106. Коптелова Е.Н, Третьяков С.И., Кутакова Н.А Влияние вида измельчения на процесс экстракции бересты // X Междунар. науч.-практ. конф. «Современные концепции научных исследований» (Москва, 30-31 янв. 2015 г.). Ч. 1: Техн. науки. С. 59-61.

107. Веселкина Е.А Исследование цитотоксичного эффекта экстракта луба коры березы/ Е.А. Веселкина, А.Л. Матухин, К.С. Болотова, Н.А. Кутакова // Ломоносовские научные чтения студентов, аспирантов и молодых ученых - 2016: сборник материалов конференций / сост. Н.В. Баталова. Архангельск: ИД САФУ, 2016. С. 1878-1881.

ПРИЛОЖEHИЯ

Результаты элементного анализа образцов проэкстрагированного луба, полученного в ходе планированного эксперимента

Северный (Арктический) федеральный университет _имени М.В. Ломоносова_

ЦЕНТР КОЛЛЕКТИВНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ НАУЧНЫМ ОБОРУДОВАНИЕМ «Арктика» 163002, Архангельск, ул. Свфв^вш, 14, тел: [phone] доб. 1721

ПРОТОКОЛА 74-14 аналитически работ

Заказчик: кафедра химических технологии Наименование объекта: пуб коры березы Дата поступления: 06.06.2014

Шифр проб Обозначение проб заказчиком

743-Р исход

744-Р юн

745-Р >51

746-Р Ж!

747-Р №3

748-Р >54

749-Р №5

750-Р Ш

751-Р

752-Р

753-Р М

754-Р >®10

755-Р >511

75&-Р >512

757-Р >513

758-Р >514

759-Р №15

7Й0-Р >516

761-Р >517 (нов)

7Й2-Р >518

763-Р >519

Дата выполнения аналитических работ: 04.07.2014-09.07.2014 Дата оформления протокола: 09.07.2014

Результаты юмеренпп:

Шифры Ед. Результата аналпзл Метод иеслелования

проб изм. Азот (N) Углерод (С) Водород (ÏÏ) (пробор)

743-Р % 0,353 46,9 6.71

744-Р % 0,444 43,8 6.16

745-Р % 0,310 46,5 6.36

746-Р % 0,40S 45,4 6.32

747-Р % 0,393 41,9 5,77

748-Р % 0,463 43,9 6,21

749-Р % 0,441 46,2 6.49

750-Р % 0,437 46,0 6.43

751-Р % 0,410 44,7 6.43

752-Р % 0,321 43,9 6,26 'Элементный анализ

753-Р % 0,356 44,2 6.61 (БАЗООО)

754-Р % 0,299 44,2 6.41

755-Р % 0,320 47.0 6.45

756-Р % 0,354 44,3 6,05

757-Р % 0,306 44,1 6.15

758-Р % 0,402 43,7 6,02

759-Р % 0,337 44,0 6.16

760-Р % 0,63S 44,4 6,55

761-Р % 0,600 46,3 6.77

762-Р % 0,757 44,0 6.50

763-Р % 0,694 44,0 6.36

Примечание: - Относительная погрешив;тъ анализа составила 1 %

Директор

Управляющий по качества

Д.С. Косяков А,Е. Кошелева

Результаты элементного анализа образцов луба до и после экстракции в различных

условиях

Результаты определения содержания калия в остатках луба березовой коры

Северный (Арктический) федеральный университет _имени М.В. Ломоносова_

ЦЕНТР КОЛЛЕКТИВНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ НАУЧНЫМ ОБОРУДОВАНИЕМ «Арктика»

163692, .Архангельск, щ. Северодвинская, 14, тел: [phone] доА.1721

ПРОТОКОЛ >• 2-1-15 аналитических работ

Заказчик: кафедра химии ¡1 химической технологии Дата поступления: 17.02.2015

Наименование объекта исследовании: луб трегесыны Обозначение проб лабораторией:_

Шифр пробы Обозначение пробы заказчиком ТТТтгфр прооы Обозначение пробы заказчиком

104-Р Исхлуб 115-Р 10

105-Р Луб кон. 116-Р 11

10Й-Р 1 117-Р 12

107-Р 2 113-Р 13

10В-Р 3 119-Р 14

109-Р 4 120-Р 15

110-Р 5 121-Р 16

Ш-Р 6 122-Р 17

112-Р 7 123-Р 18

113-Р 8 124-Р 19

114* 9

Дата выполнения анализа: 20.02.2014 - Ой.03.2015 Дата оформления протокола: 10.03.201?

Директор ХС. Косяков

У пра вляюшнй по качеству АЛ К о шел ев а

Результаты намерений:

Шифр пробы и Показатели Метод исследования

HJM. Кип

104-Р мг/кг \Ш

105-Р мг/кг 19292

106-Р мг/кг 15041

107-Р мг/кг 16069

108-Р мг/кг 29693

109-Р мг/кг 35597

110-Р мг/кг 10887

111-Р мг/кг 13456

112-Р мг/кг 17445

113-Р мг/кг 24603 Агомно-абс орбцношш спектроскопия

ПФР мг/кг 15609

115-Р мг/кг 35471

116-Р мг/кг 15920

117-Р мг/кг 37126

11S-P мг/кг 33873

119-Р мг/кг 37859

120-Р мг/кг 40220

121-Р мг/кг 33400

122-Р мг/кг 20562

123-Р мг/кг 37976

124-Р мг/кг 3S631

Директор Д.С. Косяков

Управляющий по качеству А.Е. Кошелевл

Результаты анализа экстрактов луба методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии

Заключение по результатам исследования

Хроматографический анализ проводился с использованием ВЭЖХ-системы LC-30 «Nexera» (Shimadzu, Япония), включающего два насоса LC-30AD, дегазатор, автосамплер LC-30AC, термостат колонок CTO-20A, диодноматричный детектор SPD-M30A.

Исследуемые аналиты: галловая кислота, гесперидин, гиперозид, лютеолин (3',4',5,7-Tetrahydroxyflavone), кверцетин, рутин, кумарин, феруловая кислота, хлорогеновая кислота, кофейная кислота, ванилиновая кислота, сиреневая кислота и эпикатехин

Разделение проводили в обращенно-фазовом режиме на колонке ZorbaxSb-Aq (Agilent, США), размер частиц 3,5 мкм, размер 150 х 3,0 мм. Объем пробы, вводимый в колонку - 5 мкл, скорость потока элюента - 0,7 мл/мин. Температура термостата 40°С. Детектирование проводилось при длине волны 280 нм. Управление хроматографом, сбор и обработка данных осуществлялись с использованием ПО LabSolutions

Для хроматографического разделения в качестве элюента использовалась вода с 0,5% муравьиной кислотой (раствор А) с ацетонитрилом с 0,5% муравьиной кислотой (раствор В). Для сокращения продолжительности анализа использовано градиентное элюирование по следующей программе: 0-20 мин - 5% В, 25 - 30 мин - 20% В, 35 мин - 40% В. Общее время анализа составило 35 минут. Хроматограмма стандартной смеси исследуемых соединений приведена на рисунке 1.

в

20,0 | 1 17,5 15,0

с

0

ш 12,5 jf

g 10,0 г Ей S

2 7,5 0)

1 5.0 2,5

0,0 -у*-*

1 ' ' 1 ' [ ....................1 I ........

0,0 5,0 10,0 15,0 20.0 25.0 30,0 Время, мин

Рисунок 1 - Хроматограмма стандартной смеси исследуемых образцов с концентрацией 10 мг/л: 1 -галловая кислота, 2 - ванилиновая кислота, 3 - кофейная кислота, 4 - хлорогеновая кислота, 5 - эпикатехин, 6 - сиреневая кислота, 7 - кумарин, 8 - Феруловая кислота, 9 - рутин, 10 - гиперозид, 11 - гесперидин,

12 - кверцетин, 13 - лютеолин

Анализ стандартных образцов показал, что градуировочные зависимости линейны для всех исследуемых компонентов в диапазоне концентраций 0,02-10 мг/л, при этом коэффициент корреляции составил более 0,999. По полученным результатам рассчитаны пределы обнаружения для изучаемых соединений на основе 3о критерия, а также пределы детектирования (табл 1).

Таблица 1 - Градуировочные зависимости площади пика (5) от концентрации с (мг/л)

вида 5= ас

Компонент а-10"3 Я2 Предел обнаружения, мг/л Предел детектирования, мг/л

Галловая кислота 19962,6 0,999 0,04 0,119

Ванилиновая кислота 12653,9 0,999 0,14 0,418

Кофейная кислота 26297,1 0,999 0,08 0,235

Хлорогеновая кислота 12124,4 0,999 0,27 0,823

Эпикатехин 4539,3 0,999 0,73 2,199

Сиреневая кислота 22253,9 0,999 0,13 0,396

Кумарин 34100,3 0,999 0,04 0,133

Феруловая кислота 23793,3 0,999 0,04 0,119

Рутин 6155,72 0,999 0,08 0,246

Гиперозид 8769,48 0,999 0,07 0,203

Гесперидин 11985,9 0,999 0,08 0,226

Кверцетин 10354,1 0,999 0,03 0,103

Лютеолин 15999,1 0,999 0,02 0,072

Данная методика была применена к исследуемым экстрактам. В экстрактах

присутствуют определяемые соединения, их содержание представлено в таблице 1, пример хроматограммы экстракта представлен на рисунке 2.

Таблица 2 - Результаты содержания соединений в экстрактах.

Компонент 1654, мг/кг 1655, мг/кг 1656 мг/кг 1657, мг/кг 1658, мг/кг 1659, мг/кг 1660, мг/кг

Галловая кислота 0,019 0,002 0,026 0,004 0,037 0,047 0,005

Ванилиновая кислота 0,039 0,106 0,025 0,011 0,059 0,036 0,100

Кофейная кислота - - - - - -

Хлорогеновая кислота - - - - - - -

Эпикатехин - - 0,001 0,001 0,001 0,001 0,001

Сиреневая кислота 0,026 0,016 0,001 0,001 0,001 0,001 -

Кумарин - - - - - - -

Феруловая кислота - - - - - - -

Рутин 0,010 0,004 0,001 - 0,002 0,006 0,001

Гиперозид - - - - - - -

Гесперидин - - - - - - -

Кверцетин - - - - - - -

Лютеолин - - - - - - -

Примечание: * - менее предела обнаружения

6

5

с: о ш

2 4

о

0,0 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 Время, мин

Рисунок 2 - Пример хроматограммы экстракта: 1 - галловая кислота, 2 -ванилиновая кислота, 3 - сиреневая кислота, 4 - рутин

В случае с таннином мы имеем дело не как с индвидуальным соединением, а как со смесью, что видно по хроматогрмамме таннина полученного в тех же условиях, что и исследуемые аналиты, таким образом количественный анализ вызывает затруднения.

5

О ш

Е 3

I 1 ' 1 1 I 1 1 1 1 I 1 1 1 1 I 1 1 1 1 I 1 1 1 1 I 1 1 1 1 I 1 1 1 1 0,0 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 Время, мин

Рисунок 3 - Хроматограмма таннина

Шифры: 1654 - №1, 1655 - №2, 1656 - №3, 1657 - №5, 1658 - №7, 1659 - №9, 1660 -

Результаты анализа экстрактов луба методом инфракрасной спектроскопии

Северный (Арктический) федеральный университет имени _М.В. Ломоносова_

ЦЕНТР КОЛЛЕКТИВНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ НАУЧНЫМ ОБОРУДОВАНИЕМ «Арктика»

163002, Архангельск, ул. Северодвинская, 14, тел: [phone]

доб.1721

ПРОТОКОЛ № 25-15 аналитических работ

Заказчик: кафедра химии и химической технологии Дата поступления: 20.02.2015

Наименование объекта исследований: экстрактивные вещества Обозначение проб лабораторией:

Шифр пробы Обозначение пробы заказчиком

125-S 1

126-S 2

Дата выполнения анализа: 02.03.2015 - 06.03.2015

Дата оформления протокола: 10.03.2015

Запись ИК-спектр отражения осуществлена с использованием приставки однократного нарушенного полного внутреннего отражения (НПВО) GladiATR (Pike Tech.) с алмазным кристаллом на приборе ИК-Фурье-спектрометр Vertex 70 (Bruker, Germany). Условия записи спектра: диапазон 4000-400 см-1, разрешение 4 см-1, 128 сканирований. Полученные данные представлены на рис.1,2.

Рисунок 1 - ИК-спектр образца 125 ^

Раде 1/1

Рисунок 2 - ИК-спектр образца 126^

Директор

Управляющий по качеству

Д.С. Косяков А.Е. Кошелева

Результаты анализа экстрактов луба методом хромато-масс-спектрометрии

Северный (Арктический) федеральный университет имени М.В. Ломоносова

ЦЕНТР КОЛЛЕКТИВНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ НАУЧНЫМ ОБОРУДОВАНИЕМ «Арктика» 163002, Архангельск, ул. Северодвинская, 14, гелг 3 (8182)216100 доб. 1721

ПРОТОКОЛ №44-15 аналитических работ

Заказчик: CA ФУ. кафедра хнмнн в химических технологий Заявка №4415 (ШИ-23.2015)

Обозначение анализируемой пробы:_

Шифр пробы Обозначение пробы заказчиком

427-W 1

42S-W Ъ

429-W 4

43Ü-W 15

431W 16

Дата поступления: 20.04.2015

Дата выполнения анализа: 20.04.-2S.04.2015

Дата оформления протокола: 2S.04.2015

Результаты измерении методом газовой промято мл с с-спектр о метр ни и газовой хроматографии:

Характеристика проб, представленных на анализ:

Для исследований была представлены 5 проб экстрактивных веществ в хлористом метилене: 427-W,42S-W, 429-W, 430-W, 431-W.

Условия хроматографироватт:

Хроматограф Agilent Technologies 7S20A GC System Maestro. Капиллярная колонка: HP-5, ЗОш *0,32шшх0,5рш. Газ носитель — азот. Детектор — ГЩД-Начальнал температура — 100 "С (6 минут) до 150 "С со скоростью подъема 5 град/мин. конечная температура — 250 °С (4 мннуш) со скоростью подъема 10 град/мин. Время анализа - 30 минут Объем пробы — 2 мкл. Деление потока — 10:1. Температура испарителя - 250 t. Температура детектора — 250 "С. Поток поддувочного газа для детектора (азот) — 25 мдАяш Скорость газа-носителя в колонке — 1мЛ''мин.

Дтя нденгнфнканнн соединений использовался хромагомасс-спектрометр Sbimadzu GC-MS QP2010 Flui, (капиллярная колонка: HP-5MS, ЗОш xfl^ЗДппп*0^25|ла газ носитель — гелии) с подобной температурной программой анализа. Данному анализу подвергались все пробы.

Полученные хроматомасс-спектры соединении представлены в виде дополнительных файлов в pdf-формате.

Стр. 1нз 5

Рафтпяишы rcorömwufi: Авалю -.арау.ттуых. вежса',21-04-201

РЬ = Инх Вревся Пнвццдь Про:г5нт плошали

1 Тр'гПТСГ-ПЙЧ 4.660 4071 0.240

2 а-шшел 4.709 52.212

3 Li" V ф íb 5.OÍS 140347 E£B9

p-onx-iH 5,622 55497 3^73

5 Л. bí.J>5H 6.S9: 10701 0.Й32

б гшиинез &700 1Я0821 1CLÙ7SÏ

7 :гннйса Ö.&40 +2541 2,512

3 ]0Д 17 В№5 4.112

г чп-pWiil чгц-il 10.241 5125 0,535

10 борвеол 10.717 9ÓS21 5,718

11 мрнеопалегзг 14,13] 111143 ä,554

11 I-BuTSDoaií. +<-4-кртЬткуркшу!)- 20Д47 169Í2 1,001

13 Zhbuty] phrthailate 25,178 71522 4Л14

xÍTGTG

1Ö93-26S 100,000

Сгр Ы

Авалю шлршлшыз EänrecrB21-\>4-201.5'42S-'w.d£t

Ai /ли Bp ma Ч-Л-2 Е ЗИЗ IZ-DCï Плои ал Прол-шг плошалн

1 Трсггит.-л^Б 4.654 5545 0.325

2 с-пне в 4.7Р6 5521® 40.355

5 имфеи sim 39307 5;7С'7

4 5,615 33580 2.455

5 ¿ :-:арен Í.583 £4£7 0.415

6 ЛНЬИЗ-ЕН 6.691 130791 3,34£

7 шшеол ■5LB2S 51134 1£Я7

Д ЕД-чск^ра 10Д12 +5673 2,915

9 mjdimilml 10 ¿33 5277 0J37

10 10,710 Ö7620 -1,315

11 оорвеслаггетат 14.125 S1344 5,153

12 З-БМапе, 4-[4-hyiirc-^ph-ïûvL)- 20.157 5Í724S 21+13

i3 Iübanl pb±a]a:e 25.174 67251 +ДИ

Итого

1566552 100,üüü

Сгр Зс t

Анализ i ■!■! i е-5ш-6сгвLI 1 4M- 201 5 -.42У-w.dit

Pt = Han Брасн jл^ z л z в ai-л lz Плои эль Прол-гнт плошали

1 4.652 39851 0J54

2 о-пхнек 4.754 6911523 30291

3 еамфьн 5.092 55В57] 4J 47

4 ß-пнвш 5,615 423515 1,355

5 л bi.]>ïa 5.576 35454 0J75

6 .ниже;-: 5.690 1435616 ÚJ52

7 &B25 343551 1,505

3 10.059 518130 2^71

9 С Hi rpTl^nil -чГц-ll 10.223 53747 0.:3Ö

10 борнеол 10.703 745535 3^37

11 (»(»аавдахг Ы.Ш ■350421 3,502

12 Ei.ph.thi.LiDe 19.539 133173 0.ÄJS

13 deles cadinBue 19.557 155]43 0,742

14 quita 19.374 94535 0.414

15 1 - Eut :ID oiií. 4<4-bydroKYpbeiyJ)- 20Д57 9025762 39.557

15 ть im 4 -h]i -. г. Lphj. -:и&-.Ьу1-. ÇEj- 20,313 513451 4,025

Итого

22315533 100,000

Сгр 4íc- f

Авш эшпрапниньс; вра^21-04-ЭЛ5Ш«й1

№1 Иш Вреш " Л л. Е íl>j 11 Плолзалъ Пролает плошалн

1 тр]:икьл£н 4.617 4173 0,188

2 ft- ДЕД 4.732 933530 44.541

3 камфее 5,07В 15275В 7,334

4 |"i- 1 НН1РН 5.604 5 8133 2,520