Патогенетическое обоснование местного применения в биоактивных раневых покрытиях модифицированного серебром монтмориллонита и водорастворимой формы фуллерена С60 (фуллеренола) (экспериментальное иссле тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат наук Касанов, Кирилл Николаевич

• Касанов, Кирилл Николаевич
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Касанов, Кирилл Николаевич

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. РАНЕВОЙ ПРОЦЕСС: НАНОБИОТЕХНОЛОГИИ ОПТИМИЗАЦИИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Раневой процесс и основные факторы его осложненного течения

1.1.1. Окислительный стресс

1.1.2. Раневая инфекция

1.2. Применение биоактивных нанопрепаратов при раневом процессе

1.2.1. Фуллерен С6о и его водорастворимые формы

1.2. 2. Наночастицы серебра

1.2.3. Монтмориллонит

1.3. Полимерные матрицы современных биоактивных раневых покрытий

1.3.1. Гидрогелевые полимеры и нанокомпозиты на их основе

1.3.2. Бактериальная целлюлоза Gluconacetobacter xylinus

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Лабораторные исследования

2.2. Микробиологические исследования

2.3. Биохимические исследования

2.4. Морфологические исследования

2.5. Экспериментальные исследования

2.6. Методы статистической обработки данных

ГЛАВА 3. БИОАКТИВНЫЕ СВОЙСТВА НАНОПРЕПАРАТОВ И ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ PIX ИММОБИЛИЗАЦИИ

НА РАНЕВЫХ ПОКРЫТИЯХ

3.1. Получение модифицированного серебром монтмориллонита

3.1.1. Изучение химического состава и морфологии модифицированного серебром монтмориллонита

3.1.2. Сравнительная оценка антимикробной активности модифицированного серебром монтмориллонита и традиционных антисептиков

3.2. Биоактивные свойства фуллеренола

3.2.1. Антиоксидантная активность фуллеренола

3.2.2. Морфофункциональные изменения во внутренних органах животных при внутрибрюшинном введении фуллеренола

3.2.3. Влияние внутрибрюшинного введения фуллеренола на метаболические сдвиги и реакцию системы кроветворения у животных

3.3. Патогенетическое обоснование иммобилизации комплекса

нанопрепаратов при раневом процессе

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА МАТРИЦ БИОАКТИВНЫХ РАНЕВЫХ ПОКРЫТИЙ

4.1. Синтез матрицы раневого покрытия на основе ги дроге левого нанокомпозита

4.2. Получение матрицы раневого покрытия на основе дезинтегрированной целлюлозы С1исопасе1:оЬас1ег хуНпш

4.3. Исследование сорбционной способности разработанных матриц раневых покрытий и экстракции антимикробного компонента

в лабораторных условиях

4.4. Исследование биосовместимости разработанных матриц раневых

покрытий в эксперименте на животных

ГЛАВА 5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ БИОАКТИВНЫХ РАНЕВЫХ ПОКРЫТИЙ

5.1. Сравнительная оценка антимикробного действия разработанных биоактивных раневых покрытий и коммерческих аналогов

5.2. Оценка эффективности местного применения разработанных

биоактивных раневых покрытий при раневом процессе

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПРИЛОЖЕНИЕ А

ПРИЛОЖЕНИЕ Б

ПРИЛОЖЕНИЕ В

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АА - акриламид

АК - акриловая кислота

АОС - антиоксидантная система

АлАТ - аланинаминотрансфераза

АсАт - аспартатаминотрансфераза

АФК - активные формы кислорода

БелГУ - Белгородский государственный национальный исследовательский университет

ВМедА - Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова

ГМК - гладкомышечные клетки

ГНК - гидрогелевый нанокомпозит

ГП - гель-пленка (бактериальной целлюлозы)

ДЦОХ - дезинтегрированная (бактериальная) целлюлоза С1исопасе1оЬас1ег хуНпш ДЭ - дрожжевой экстракт

ИВС РАН - Институт Высокомолекулярных Соединений Российской академии наук

КОЕ - колониеобразующая единица

КреД - коэффициент редукции

МБАА - КДчГ-метилен-бис-акриламид

МБК - минимальная бактерицидная концентрация

МИК - минимальная ингибирующая концентрация

МО РФ - Министерство обороны Российской Федерации

ПВП - ТчГ-поливинилпирролидон

ПВС - поливиниловый спирт

ПОЛ - перекисное окисление липидов

РАМН - Российская академия медицинских наук

РФС - рентгенофлуоресцентная спектроскопия

СПбГПУ - Санкт-Петербургский государственный политехнический университет

СПбИТМО - Санкт-Петербургский национальный исследовательский

университет информационных технологий, механики и оптики

ТМЭД - тетраметилэтилендиамин

ХЛсп - спонтанная хемилюминесценция

ХЛстим - стимулированная хемилюминесценция

Ag-MMT - модифицированный серебром монтмориллонит

AgNPs - Argentum Nano Particles, наночастицы серебра

АТСС - American Type Cultures Collection

Сбо/ПВП - комплекс фуллерена Сбо с N-поливинилпирролидоном С6о(ОН)п - фуллеренол

Сбо/Tween 80 - комплекс фуллерена Сбо с полисорбатом 80 (Твин 80)

EDS - Energy-dispersive spectroscopy, энергодисперсионная спектроскопия

IUPAC - International Union of Pure and Applied Chemistry, Международный союз

теоретической и прикладной химии

ММТ - монтмориллонит

Na-Ca-MMT - натрий-кальциевый (нативный) монтмориллонит

MRSA - Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, метициллин-устойчивые

штаммы золотистого стафилококка

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Патогенетическое обоснование местного применения в биоактивных раневых покрытиях модифицированного серебром монтмориллонита и водорастворимой формы фуллерена С60 (фуллеренола) (экспериментальное иссле»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы.

В практике врача любой хирургической специальности лечение ран различной этиологии является одним из ключевых направлений повседневной клинической деятельности (Зубарев П.Н, Кочетков A.B., 2011). Знание закономерностей течения раневого процесса, основных звеньев его патогенеза позволяет своевременно определить тактику ведения раны, предупредить развитие осложнений и, в конечном счете, сократить сроки заживления (Шанин В.Ю., 1998).

На сегодняшний день применение современных раневых покрытий, представляющих собой отдельный класс средств местного лечения ран, позволило значительно оптимизировать оказание квалифицированной медицинской помощи (Абаев Ю.К., 2005). Центральное место раневые покрытия занимают при лечении больных с хроническим вялотекущим раневым процессом сосудистого или эндокринного генеза, пострадавших в ожоговых стационарах (Абаев Ю.К., Капуцкий В.Е., Адарченко A.A., 1999; Алексеев A.A., Крутиков М.Г.б 2000; Шаповалов С.Г., 2005). Высокая частота природных и техногенных катастроф, локальных вооруженных конфликтов, сопровождающихся возникновением тяжелой механической травмы, огнестрельных пулевых и минно-взрывных ранений определяет актуальность применения раневых покрытий и для этой категории пострадавших (Быков И.Ю., Ефименко H.A., Гуманенко Е.К., 2009; Самохвалов И.М., Бадалов В.И., Головко К.П. с соавт., 2013; Хрупкин В.И., Самохвалов И.М., 1991).

Лечебный эффект, достигаемый при использовании раневых покрытий, осуществляется тремя основными механизмами: защитой, элиминацией и фармакокоррекцией (Назаренко Г. И., Сугурова И.Ю., Глянцев С. П., 2002). Защитный механизм раневого покрытия определяется свойствами его матрицы, выполняющей барьерную функцию между внешней средой и раневым ложем, препятствующей проникновению инфекции, дополнительному механическому травмированию при перевязках. Элиминирующий эффект реализуется в рамках сорбционно-аппликационного метода местного лечения - вульнеросорбции, т.е.

поглощения раневого экссудата, токсических продуктов распада тканей и раневой микрофлоры, и зависит от сорбционной способности матрицы покрытия (Грязнов В.Н., Передников Е.Ф., Черных A.B., 1990; Ефименко H.A., Нуждин О.И., 1998; Крюкова В.В., 2005). Фармакокоррекция предусматривает иммобилизацию на раневых покрытиях патогенетически обоснованных биологически активных компонентов, обладающих лечебным действием, оптимизирующих течение раневого процесса, обеспечивающих профилактику и борьбу с инфекцией, активирующих процессы репарации в наиболее ранние сроки. В настоящее время разработано множество раневых покрытий, где указанные механизмы представлены в различной степени. Покрытия, содержащие комплекс препаратов для фармакокоррекции патологических процессов в ране принято называть «биоактивными» (Горюнов C.B., Ромашов Д.В., Бутивщенко И.А., 2004).

Ведущими патогенетическими направлениями фармакологического воздействия раневых покрытий являются профилактика и борьба с раневой инфекцией, а также подавление каскада окислительных реакций, зачастую способствующих вторичной деструкции тканей (Лещенко И.Г. , Галкин P.A., 2003; Попов В.А., 2013).

Серебро с давних времен применяется для антимикробного лечения ран различного происхождения (Благитко Е.М., Бурмистров В.А., Колесников А.П., 2004). Обладая широким спектром антибактериального действия, серебро также воздействует на рост дрожжей, плесневых грибов (Melaiye A., Youngs W.J., 2005). Свидетельства о выявлении резистентных к серебру микроорганизмов имеют спорадический характер, что особенно актуально на фоне возросшей устойчивости к другим традиционным антисептикам (Андреев В.А., Попов В.А., Венгерович Н.Г, 2012). Для придания антимикробных свойств возможна иммобилизация серебра на раневые покрытия в различных формах: в виде солей, коллоидных растворов, серебросодержащих белков и др. Однако указанные формы не обеспечивают достаточной продолжительности антимикробного действия активного ионизированного серебра (Clement J.L., Jarrett P.S., 1994). По

данным многочисленных публикаций, наиболее перспективным для иммобилизации на раневые покрытия являются наноразмерные частицы серебра (AgNPs - Argentum Nano Particles), обеспечивающие дозированный и пролонгированный антимикробный эффект (Fong J., Wood F., 2006; Furno F. et al., 2004; Ip M., Lui S.L., Poon V.K., Lung I., 2006; Morones J.R., Elechiguerra J.L., Camacho A. et al., 2005; Rai M., Yadav A., Gade A., 2009; Taylor P.L., Ussher A.L., Burrell R.E., 2005). Разработка способов получения и введения в матрицу раневых покрытий наночастиц серебра позволит значительно улучшить их антимикробные свойства.

По данным работ Тюнина М.А. (2009), Венгеровича Н.Г. (2011) и Попова В.А. с соавт. (2013) о биологической активности кластеров фуллерена С60 на различных растворителях (ПВП, Tween 80, краун-эфире) установлены антиоксидантные, антирадикальные и иммуномодулирующие эффекты местного применения данного препарата. Иммобилизация водорастворимой формы фуллерена Сбо (фуллеренола) на раневых покрытиях позволит, сохранив активные биологические свойства углеродных наночастиц, избежать нежелательного использования токсичных растворителей.

В свете вышесказанного, разработка и внедрение современных раневых покрытий, содержащих комплекс патогенетически обоснованных биоактивных препаратов, позволяющих оптимизировать течение раневого процесса, является актуальной задачей стоящей перед врачами-хирургами и производителями (Попов В.А., 2013; Цыган В.Н., 2013).

Цель исследования.

Патогенетическое обоснование и экспериментальное изучение эффективности местного применения модифицированного серебром монтмориллонита и водорастворимой формы фуллерена С6о (фуллеренола), а также разработка на их основе биоактивных раневых покрытий для лечения ран различной этиологии.

Задачи исследования:

1) изучить химический состав и морфологию модифицированного серебром монтмориллонита, а также провести сравнительную оценку его антимикробной активности с традиционными антисептиками;

2) в эксперименте на животных изучить антиоксидантную активность водных растворов фуллеренола и исследовать морфофункциональные изменения в тканях внутренних органов, метаболические сдвиги и реакцию системы кроветворения при его парентеральном (внутрибрюшинном) введении;

3) обосновать с патогенетических позиций местное применение лечебного комплекса нанопрепаратов - модифицированного серебром монтмориллонита и водорастворимой формы фуллерена С6о (фуллеренола), как антимикробного и антиоксидантного компонентов биоактивных раневых покрытий;

4) разработать биосовместимые сорбирующие матрицы раневых покрытий на основе гидрогелевого нанокомпозита и дезинтегрированной целлюлозы Gluconacetobacter xylinus;

5) разработать биоактивные раневые покрытия с антиоксидантным и пролонгированным антимикробным действием для лечения ран различной этиологии и оценить эффективность их местного применения на модели инфицированных кожно-плоскостных и гранулирующих ран после глубоких ожогов.

Научная новизна исследования.

Впервые дано патогенетическое обоснование местного применения комплекса нанопрепаратов (модифицированного серебром монтмориллонита и фуллеренола) при раневом процессе. Иммобилизация указанного комплекса на полимерные матрицы, позволило получить современные биоактивные раневые покрытия для лечения ран различной этиологии. Разработаны полимерсиликатные композитные матрицы раневых покрытий на основе акриламидного гидрогеля и дезинтегрированной бактериальной целлюлозы (G. xylinus). В качестве наполнителя-модификатора полимерных матриц использовали слоистый силикат монтмориллонит (модифицированную серебром форму), что позволило

значительно оптимизировать их механические свойства и сорбционную способность, а также за счет дозированного выхода активных ионов серебра обеспечить пролонгированное антимикробное действие покрытий.

На большом экспериментальном материале (160 крыс-самцов линии Wistar) продемонстрирована способность разработанных раневых покрытий подавлять рост бактериальной микрофлоры в инфицированной ране, а также доказана эффективность их местного применения для лечения инфицированных кожно-плоскостных и гранулирующих ран после глубоких ожогов.

Показано, что для ведения ран, характеризующихся обильной экссудацией наиболее оптимально подходит биоактивное раневое покрытие на основе гидрогелевого нанокомпозита (приоритетная справка на изобретение №2013149052 от 06.11.2013). Биоактивное раневое покрытие на основе дезинтегрированной бактериальной целлюлозы (приоритетная справка на изобретение №2013145823 от 15.10.2013) эффективно для лечения инфицированных ран с умеренным количеством отделяемого.

Теоретическая и практическая значимость.

С использованием широкого спектра высокотехнологичных лабораторных методов (электронной микроскопии, РФ- и EDS- спектрометрии) изучены химический состава и морфология модифицированного серебром монтмориллонита (Ag-MMT). По результатам микробиологического исследования установлена значимая в сравнении с традиционными антисептиками биоцидная активность Ag-MMT, обусловленная содержащимися в его структуре наночастицами серебра (AgNPs).

В серии экспериментов на животных (100 крыс-самцов линии Wistar) изучены биоактивные свойства водорастворимой формы фуллерена С«) (фуллеренола). Путём определения супероксидпродуцирующей активности тканевых макрофагов выявлены антиоксидантные свойства фуллеренола, оптимально проявляющиеся в его водном растворе с концентрацией 0,01%. Исследование общерезорбтивных свойств фуллеренола показало отсутствие морфофункциональных изменений тканей внутренних органов, патологических сдвигов в системе кроветворения и метаболизме

при его парентеральном (внутрибрюшинном) введении, в той или иной степени характерных для водорастворимых кластеров фуллерена С6о/ПВП и Сбо/Tween 80

Разработаны биоактивные раневые покрытия, с высокой и умеренной сорбционной способностью, обладающие антиоксидантной и пролонгированной антимикробной активностью, местное применение которых оптимизирует раневой процесс, предотвращает его осложнённое течение и сокращает сроки заживления ран. Биоактивные раневые покрытия могут быть использованы при оказании медицинской помощи на догоспитальном и госпитальном этапах для местного лечения неогнестрельных и огнестрельных ран, ран при тяжелой механической травме, неинфицированных и инфицированных ран, в том числе гнойных и длительно незаживающих, гранулирующих ран после глубоких термических ожогов, в комплексном лечении трофических язв и пролежней.

Положения, выносимые на защиту:

1. Модифицированный монтмориллонит, за счет образования в его структуре наночастиц серебра, обладает выраженной биоцидной активностью в отношении референтных и госпитальных штаммов микроорганизмов, основных возбудителей раневой инфекции, при концентрации его высокодисперсной водной взвеси 0,05 г/мл. Введение монтмориллонита в качестве антимикробного наполнителя матриц раневых покрытий на основе гидрогелевого нанокомпозита (2 мас.%) и дезинтегрированной целлюлозы G. xylinus (0,2 мас.%) позволяет получать значимый бактериостатический эффект in vitro, и поддерживать уровень бактериального обсеменения раны ниже

10 (КОЕ) на протяжении 5-7 суток in

vivo.

2. Водорастворимая форма фуллерена С6о (фуллеренол) проявляет антиоксидантную активность в водных растворах с 0,01%-м содержанием углеродных наночастиц. Парентеральное введение фуллеренола не проявляет острой токсичности, не влияет на морфофункциональное состояние внутренних органов, метаболизм и не вызывает патологической реакции системы кроветворения.

3. Биоактивные раневые покрытия на основе гидрогелевого нанокомпозита и дезинтегрированной целлюлозы О. хуппиБ с иммобилизованными в их составе биоактивными компонентами (модифицированного серебром монтмориллонита и фуллеренола) являются эффективным средством местного лечения инфицированных кожно-плоскостных и гранулирующих ран при глубоких ожогах. Их применение предупреждает осложнённое течение раневого процесса и сокращает сроки заживления ран в среднем на 20%.

Реализация результатов исследования.

Результаты исследований используются в научно-исследовательской работе НИЛ (военной хирургии) ВМедА им. С.М. Кирова в рамках выполнения плановой НИР ВМедА «Разработка на основе нанобиокомпонентов биоактивного раневого покрытия для лечения огнестрельных ран в лечебно-профилактических учреждениях Министерства обороны РФ», шифр «Покрытие», VMA.02.05.06.1113/0167, заказ ГВМУ МО РФ.

Публикации.

Основные материалы диссертационного исследования опубликованы в 30 печатных работах в виде научных статей и тезисов докладов, в том числе 4 статьи в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ. Получен патент на изобретение: «Раневое покрытие с лечебным действием» (№ 2437681 от 09.08.2010 г.), получены приоритетные справки по заявкам на изобретения: «Биоактивное гидрогелевое раневое покрытие» (2013285615 от 31.10.2013) и «Сетчатое биоактивное раневое покрытие» (2013145823 от 15.10.2013).

Апробация работы.

Основные положения диссертационного исследования изложены в докладах на Итоговых конференциях Военно-научного общества курсантов и слушателей ВМедА 2008, 2009, 2010, 2011, 2012 (И место на конкурсе научных работ), 2013 годов, III Международной научной конференции «Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья» (Белгород, 2008), Международных научно-практических конференциях «XXXVIII, XXXIX, ХЬ, ХЫ недели науки СПбГПУ»

(Санкт-Петербург, 2009, 2010, 2011, 2012), Всероссийского форума «Изобретатели и инновационная политика России» (Санкт-Петербург, 2011), I и II Всероссийском конгрессе молодых ученых (Санкт-Петербург, 2012, 2013), VIII Санкт-Петербургская конференция молодых ученых международным участием «Современные проблемы науки о полимерах» (Санкт-Петербург, 2012), I Российской конференции по медицинской химии (MedChem Russia) с международным участием (Москва, 2013). Результаты работы представлены в виде постерных докладов на X Московском Международном Салоне инноваций и инвестиций (Москва, 2010), Всероссийском форуме студентов, аспирантов и молодых ученых «Наука и инновации в технических университетах» (Санкт-Петербург, 2012), Международной выставке-конференции «БИОИНДУСТРИЯ 2013» (Санкт-Петербург, 2013).

Личный вклад автора.

Личный вклад автора в получение результатов, выносимых на защиту, является определяющим. Автор принимал непосредственное участие в выполнении основного объема экспериментальных и лабораторных исследований, изложенных в диссертационной работе, с использованием микробиологических, биохимических и морфологических методов, а также анализ, статистическую обработку и оформление результатов в виде публикаций и научных докладов.

Объём и структура работы.

Материалы диссертационного исследования представлены на 150 странице машинописного текста. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания материалов и методов исследования (глава 2), собственных исследований (3, 4 и 5 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, приложения и списка литературы. Работа содержит 45 рисунков и 15 таблиц. Список литературы включает 205 источников: 98 отечественных и 107 иностранных авторов. Оформление диссертации и автореферата диссертации выполнено в соответствии с требованиями ГОСТ Р 7.0.11-2011.

Глава 1. РАНЕВОЙ ПРОЦЕСС: НАНОБИОТЕХНОЛОГИИ ОПТИМИЗАЦИИ

(ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Раневой процесс и основные факторы его осложненного течения

Раневой процесс представляет собой сложный комплекс биологических реакций - клеточных, физиологических, биохимических и морфологических, в ответ на повреждение тканей и органов, заканчивающийся обычно их заживлением (Кузин М.И., Костюченок Б.М., 1990).

С позиции общей патологии раневой процесс рассматривается как частный вариант воспаления, типового патологического процесса, развивающегося в васкуляризованных органах и тканях в ответ на любое местное повреждение и проявляющегося в виде поэтапных изменений микроциркуляторного русла, крови и стромы органа или ткани, направленных на локализацию, разведение, изоляцию и устранение агента, вызвавшего повреждение, и на восстановление поврежденной ткани (Михайлов В.В., 2001; Шанин В.Ю., 2006).

В тоже время клиническое течение раневого процесса несколько отлично от выделяемых стадий воспаления: альтерации, экссудации и пролиферации (Шанин В.Ю., 2005). Наиболее полной и патогенетически обоснованной является классификация М.И. Кузина (1990), в которой выделяются следующие основные фазы течения раневого процесса:

I. Фаза воспаления, включающая периоды сосудистых изменений и очищения раны;

II. Фаза регенерации, в течение которой происходит образование и созревание грануляционной ткани;

III. Фаза образования, реорганизации рубца и эпителизации.

Патогенез раневого процесса отражает последовательную смену этих фаз, каждая из которых характеризуется определенными морфофункциональными изменениями, протекающими в ране и окружающих тканях. Продолжительность и характер течения каждой фазы раневого процесса вариабельны и зависят от

выраженности патологических сдвигов в предыдущей фазе (Литвицкий П.Ф., 2007; Шанин В.Ю., 1998).

Морфологически процесс заживления раны может протекать различно в зависимости от характера повреждающего агента, типа анатомического субстрата поражения, наличия осложняющих факторов раневого процесса и общего состояния организма (Григорьев В.В., Зайцева К.К., Косачев И.Д., 1983; Brun Р., Cortivo R., Abatalengo G., 1997). В связи с этим выделяют три типа раневого заживления: первичным натяжением, вторичным натяжением и заживление под струпом (Шехтер А.Б., Серова В.В., 1995; Edwards S.L., 2006).

Конечным результатом неосложненного заживления ран по типу первичного натяжения являются образование нежного рубца с небольшим фиброзом, минимальным при наличии раневой контракции и практически полное возвращение к нормальной структуре ткани и функции органа. Заживление вторичным натяжением происходит, когда объем поражения велик и края раны оказываются на значительном расстоянии друг от друга. При этом формируется хорошо выраженная грануляционная ткань, которая в последующем фиброзируется с образованием глубокого рубца. Заживление под струпом наблюдается, когда дефект ткани покрыт корочкой из свернувшегося и подсохшего секрета, крови и некротических масс. Регенерирующий эпидермис постепенно продвигается под струпом с краев раны, ложась на молодую соединительную ткань, восполняющую образовавшийся дефект (Адо А.Д., Адо М.А., Пыцкий В.И., 2002; Литвицкий П.Ф., 2007).

Отклонения от процесса нормального раневого заживления могут быть обусловлены как системными, так и локальными факторами. В клинической практике чаще наблюдается осложненное течение раневого процесса, обусловленное местными причинами, для выявления патогенетических предпосылок которых, необходимо рассмотреть каскад биологических реакций происходящие в ране (Шехтер А.Б., Серова В.В., 1995; Li J., Chen J., KirsnerR., 2007).

Обмен веществ в очаге воспаления характеризуется преобладанием катаболических реакций (Серов В.Б., Пауков B.C., 1995). Все виды обмена веществ - углеводный, белковый, жировой и водно-солевой перестраиваются. Гликогенолиз и гликолиз активируется, образование АТФ нарушается, отмечается переход гликолиза на анаэробный путь, что способствует накоплению избытка лактата и пирувата. Вследствие усиления липолиза происходит чрезмерное образование кетокислот и свободных высших жирных кислот. На фоне описанных изменений развивается метаболический ацидоз (Литвицкий П.Ф., 2007; Baum C.L., Arpey C.J., 2005). Нарушение вне- и внутриклеточного электролитного баланса значительно увеличивает внутриклеточное осмотическое давление, что приводит к перерастяжению и разрыву мембран. Представленные изменения наиболее точно характеризуют состояние метаболизма в воспалительной фазе раневого процесса термином «пожар обмена» (Попов В.А., 2003).

В первые часы воспалительного ответа клеточный компонент составляют, главным образом, нейтрофильные лейкоциты, являющиеся клетками первой линии защиты, осуществляющими поиск, распознание, уничтожение и удаление некротизированных тканей и микроорганизмов путем фагоцитоза. В течение первых суток в зоне воспаления формируется так называемый лейкоцитарный вал, отграничивающий зону микробной инвазии. Нейтрофильные лейкоциты в ходе выполнения своих основных функций распадаются или фагоцитируются макрофагами (Кауфман О.Я., Серов В.В., Пауков B.C., 1995; DiPietro L.A., 1995). Появление фибробластов, формирующих постепенно выполняющую раневой дефект грануляционную ткань при неосложненном течении, знаменует начало 11-ой фазы раневого процесса (Адо А.Д., Адо М.А., Пыцкий В.И., 2002).

Возникающие в момент повреждения активация клеточного компонента и высвобождение медиаторов воспаления, которые при взаимодействии между собой способствуют развитие локальной системной острой воспалительной реакции, называют первичной альтерацией (Литвицкий П.Ф., 2007; Михайлов В.В., 2001; Шанин В.Ю., 2005; Vowden К., Vowden Р., 2003).

Клеточный компонент воспаления и продукты первичной альтерации зачастую вызывают вторичное повреждение тканей, получившее название вторичной альтерации. Происходящие в очаге воспаления и прилежащих к нему тканях изменения микроциркуляции определяют значительное падение напряжения кислорода. На фоне гипоксии и связанного с ней гипоэргоз клеточных элементов происходит развитие гипоксического тканевого некробиоза, преходящего под действием агентов вторичной альтерации в некроз, получивший название вторичного (Шанин В.Ю., 1995; Попов В.А., 2003).

Наиболее значимыми среди агентов вторичной альтерации в формировании вторичных повреждений являются активные формы кислорода (АФК) и лизосомальные гидролитические ферменты лизосом (липазы, нейтральные и кислые протеазы, гликозидазы) (Панкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н., 2001). Цитотоксическое действие обусловлено, главным образом, АФК. Индукция перекисного окисления липидов (ПОЛ) приводит к образованию стимулирующих активную миграцию микро- и макрофагов высокомолекулярных хемотаксических факторов. При этом в очаге воспаления происходит накапление возбужденных лейкоцитов, продуцирующих кислородные радикалы (Владимиров Ю.А., Арчаков А.И., 1972; Зенков Н.К., Лапкин В.З., Меныцикова Е.Б., 2003). При этом, на фоне грубого нарушения микро- и макроциркуляции, гомеостаза, истощения антиоксидантной защиты активация кислород- зависимых и независимых механизмов вторичной альтерации сначала ведет к расширению воспалительного очага за счет окружающих тканей, а затем к их повреждению и гибели. Объем формирующейся таким образом зоны вторичного повреждения всегда больше первичного (Берченко Г.Н., 1997; Шанин Ю. Н., Шанин В.Ю., Зиновьев Е.В., 2003).

Действие факторов вторичной альтерации приводит к снижению местного иммунитета в ране, что является благоприятным фоном для активной инвазии микробных агентов и, в конечном счете, развитию раневой инфекции (Абаев Ю.К., 2003; Фейгельман С.С., 1997; Чеснокова Н.П., Моррисон В.В., Кудин Г.Б., 1999). При этом образуемые бактериальными клетками экзо- и

эндотоксины повреждают окружающие раневой дефект ткани и оказывают общетоксическое действие на организм (Никитенко Н. И., Захаров Б.В., Бородин A.B., 2001).

Таким образом, согласно современным представлениям именно вторичная альтерация и раневая инфекция, инициация и развитие которых происходит в I-ую (воспалительную) фазу, являются ведущими факторами осложненного течения раневого процесса и патологии заживления ран (Девятое В.А., Петров C.B., 1992; Никитенко В.И., 1990; Фейгельман С.С., 1997). С учетом этого, эффективность лечебных мероприятий по оптимизации процессов репарации и сокращении сроков заживления ран, проводимых в ранние сроки развития раневого процесса, определяется их патогенетической направленностью на указанные факторы (Минченко А.Н., 2003; Толстых, М.П., 2007).

1.1.1. Окислительный стресс

В последние годы в учении о раневом процессе большой интерес вызывает «оксидативный» или «окислительный стресс», которому отводится ключевая роль в процессе вторичной альтерации (Зенков Н.К., Лапкин В.З., Меныцикова Е.Б., 2003; Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н., 2001).

Окислительный стресс связан с резкой интенсификацией свободно-радикальных процессов в поврежденных тканях и является следствием усиленного образования лейкоцитами активных форм кислорода (АФК), что в свою очередь приводит к активации процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) клеточных мембран и плазмы крови Владимиров Ю.А., Арчаков А.И., 1971; Крыжановский Г.Н., 2002).

Наиболее важное значение среди АФК имеют супероксиданион-радикал (02"), пергидроксильный радикал (Н02), гидроксилрадикал (ОН), молекулярный синглетный кислород ('02) и пероксил-радикал (ROO). Образование АФК происходит в течение первых часов и достигают своего пика на 4-5-е сутки (Шанин Ю. Н., Шанин В.Ю., Зиновьев Е.В., 2003), их физиологическая роль представлена в Приложении А (Таблица 1 .А).

Важно подчеркнуть, что существенное уменьшение активности сбалансированной эндогенной антиоксидантной системы (АОС) происходит уже с момента образования раневого дефекта (Чеснокова Н.П., Моррисон В.В., Кудин Г.Б., 1999). Исследование в условиях неинфицированных ран динамики активности ферментативных и неферментативных компонентов АОС (супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, каталазы, аскорбиновой кислоты, глутатион-8-трансферазы, витамина А и глутатиона) выявило их сокращение на 60-70 % в течение первой недели с восстановлением показателей лишь к концу второй недели. При этом, количество продуктов ПОЛ (малоновый диальдегид) находилось первые сутки на высоком уровне и снижалось лишь через 2 недели (Martinez-Cayuela М., 1995).

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Касанов, Кирилл Николаевич

122 ВЫВОДЫ

1. Изучение в лабораторных условиях химического состава и морфологии модифицированного серебром монтмориллонита позволило визуализировать, образующиеся в результате катионного обмена, наночастицы серебра кубической, призматической и сфероидной формы размерами от 20 до 70 нм, локализующиеся в межслоевом пространстве и на поверхности силиката. Оценка антимикробной активности модифицированного серебром монтмориллонита выявила значимое в сравнении с традиционными антисептиками (диоксидином, катаполом, повиарголом) биоцидное действие его высокодисперсной (Б<0,25 мм) водной взвеси в отношении референтных и госпитальных штаммов микроорганизмов, при оптимальной концентрации от 0,05 г/мл.

2. Экспериментальное изучение супероксиданионпродуцирующей активности тканевых макрофагов позволило определить антиоксидантные свойства фуллеренола, максимально выраженные в его 0,01%-м водном растворе. При исследовании общерезорбтивного действия не установлено морфофункциональных изменений тканей внутренних органов, метаболических сдвигов и реакции системы кроветворения экспериментальных животных после парентерального (внутрибрюшинного) введения водного раствора фуллеренола, что позволило сделать вывод об отсутствии его острой токсичности.

3. По результатам полученных данных о биологических свойствах нанопрепаратов сформулировано патогенетическое обоснование местного применения модифицированного серебром монтмориллонита и водорастворимой формы фуллерена С6о (фуллеренола) в качестве антимикробного и антиоксидантного компонентов лечебного комплекса биоактивных раневых покрытий.

4. На основе гидрогелевого нанокомпозита и дезинтегрированной целлюлозы в. хуНпиБ разработаны матрицы раневых покрытий обладающие сорбционной способностью по отношению к компонентам раневого экссудата. Дозированный характер антимикробного действия разработанных матриц,

л

обусловлен экстракцией активных ионов серебра при набухании полимеров в минимальных количествах (от 7 до 54 ммоль/л), что позволяет заключить об отсутствии цитотоксического эффекта на рану. Биосовместимость и биоинертность разработанных матриц установлены по результатам макроскопической оценки и гистоморфологического исследования после их аппликации на модели кожно-плоскостных условно асептических ран.

5. Биоактивные раневые покрытия на основе гидрогелевого нанокомпозита и дезинтегрированной целлюлозы G. xylinum с иммобилизованными в их составе биоактивными компонентами, обладают антиоксидантным и пролонгированным антимикробным действием, проявляют значимый, в сравнении с коммерческими аналогами, бактериостатический эффект in vitro и позволяют поддерживать уровень бактериального обсеменения раны

3 *

ниже 10 (КОЕ) на протяжении 5-7 суток in vivo. Разработанные раневые покрытия являются эффективным средством местного лечения инфицированных кожно-плоскостных и гранулирующих ран после глубоких ожогов, применение которых предупреждает осложнённое течение раневого процесса и сокращает сроки заживления ран, в среднем, на 20%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Природный слоистый силикат монтмориллонит, являясь специфическим нанореактором, позволяет получать наноразмерные частицы металлов, в частности, серебра. В отличие от существующих физических и химических методов, требующих использования дорогостоящих реактивов и специальных технологических условий, в основе представленного в работе способа лежит, протекающий в межпакетном пространстве монтмориллонита процесс катионного обмена. Указанный способ может быть использован для синтеза и дальнейшего изучения биологических свойств наночастиц металлов в свете их медицинского применения.

2. Высокодисперсная водная взвесь модифицированного серебром монтмориллонита обладает значимым в сравнении с традиционными антисептиками бактерицидным действием при оптимальной концентрации 0,05 г/мл, что позволяет рекомендовать его в качестве антимикробного препарата для профилактики и борьбы с раневой инфекцией, в том числе в качестве антимикробного компонента биоактивных раневых покрытий.

3. Иммобилизация монтмориллонита (нативного и модифицированного серебром) в качестве наполнителя-модификатора полимерных матриц раневых покрытий позволяет значимо улучшить их механические свойства (прочности на разрыв, относительного удлинения) и сорбционную способность по отношению к компонентам раневого экссудата.

4. Местное применение фуллеренола в качестве антиоксидантного препарата в виде 0,01%-го водного раствора или иммобилизованного на матрице биоактивного раневого покрытия для лечения ран различной этиологии предупреждает формирование вторичной альтерации, возникающей в результате активации свободнорадикальных процессов и развития окислительного стресса в воспалительной фазе раневого процесса, предотвращает увеличение объема повреждения за счет вторичнонекротизированных тканей и обеспечивает стимулирующее влияние на раневое заживление.

5. Для фармакокоррекции процессов вторичной альтерации в воспалительной ^азе раневого Процесса с патогене 1ических позиции целесообразно совместное применение биоактивных нанопрепаратов -модифицированного серебром монтмориллонита и водорастворимой формы фуллерена С60 (фуллеренола), обладающих антиоксидантной и антимикробной активностью, синергетическое действие которых на основные факторы осложненного течение раневого процесса позволит сократить сроки заживления ран.

6. Биоактивные раневые покрытия на основе ги дроге левого нанокомпозита и дезинтегрированной целлюлозы в. хуПпит с иммобилизованными в их составе нанопрепаратами, обеспечивающими антиоксидантное и пролонгированное антимикробное действие, могут быть использованы при оказании медицинской помощи на догоспитальном и госпитальном этапах для местного лечения неогнестрельных и огнестрельных ран, ран при тяжелой механической травме, неинфицированных и инфицированных ран, в том числе гнойных и длительно незаживающих, гранулирующих ран после глубоких термических ожогов, в комплексном лечении трофических язв и пролежней.

126

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Касанов, Кирилл Николаевич, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абаев, Ю.К. Раневая инфекция в хирургии: учебное пособие/ Ю.К. Абаев. — Минск: Беларусь, 2003. — 293 с.

2. Абаев, Ю.К. Хирургическая повязка / Ю.К. Абаев. — Минск: Беларусь, 2005, — 150 с.

3. Абаев, Ю.К. Многокомпонентные перевязочные средства в лечении гнойных ран / Ю.К. Абаев, В.Е. Капуцкий, A.A. Адарченко // Хирургия. — 1999. —№ 10. —С. 38-41.

4. Абаев, Ю.К. Эффективность антисептиков и значение микрофлоры в процессе раневого заживления / Ю.К. Абаев, Н.Р. Прокопчук,

A.A. Адарченко // Дет. хирургия. —2008. —№1. — С. 25-29.

5. Автадинов, Г.Г. Медицинская морфометрия: руководство / Г.Г. Автадинов.

— М.: Медицина, 1990. — 283 с.

6. Адо, А.Д. Патологическая физиология / А.Д. Адо, М.А. Адо, В.И. Пыцкий.

— М.: Триада X, 2002. — 616 с.

7. Александер, Дж. Иммунология для хирургов / Дж. Александер, Р. М. Гуд; пер. с англ. — М.: Медицина, 1974. — 191 с.

8. Алексеев, A.A. Местное лечение ожоговых ран / A.A. Алексеев, М.Г. Крутиков // Рос. мед. журн. — 2000. — № 5. _ С. 51-53.

9. Андреев, В. А. Антибактериальная активность традиционных и наноантисептиков, перспектива их абсорбции на раневых покрытиях /

B.А. Андреев, В.А. Попов, Н.Г. Венгерович и др. // Вестник Российской Военно-медицинской академии, 2012.— Т.3,№39. — С. 168-173.

10. Арутюнян, A.B. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма: методические рекомендации / A.B. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, H.H. Зыбина. — СПб.: Фолиант, 2000. — 104 с.

11. Бакеева, И.В. Современные нанокомпозитные материалы - органо-неорганические гибридные гели: учебное пособие / И.В. Бакеева,

И.В. Морозова. — M.: МИТХТ им. М.В. Ломоносова, 2006. — 40 с.

12. Баклагина, Ю.Г. Изучение структурных параме!ров целлюлозы Acetobacter xylinum в процессе сушки гель-плёнок / Ю.Г. Баклагина, А.К. Хрипунов, A.A. Ткаченко // Журнал прикладной химии. —- 2003. — Т. 76, №6 . — С. 1017-1024.

13. Берченко, Г.Н. Морфологические аспекты заживления осложнённых ран : автореф. дис. ... д-ра мед. наук : 14.00.15 / Берченко Геннадий Николаевич.

— М., 1997,— 31 с.

14. Благитко, Е.М. Серебро в медицине / Е.М. Благитко, В.А. Бурмистров, А.П. Колесников. — Новосибирск: Наука-центр, 2004. — 254 с.

15. Буханов, В.Д. Антибактериальные свойства монтмориллонит содержащих сорбентов / В.Д. Буханов, А.И. Везенцев, Н.Ф. Пономарева и др. // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Естественные науки, 2011. — Т.17, №21. — С.57-63.

16. Венгерович, Н.Г. Патогенетическое обоснование применения биоактивных наноматериалов при раневом процессе : дис. ... канд. мед. наук : 14.03.03 / Венгерович Николай Григорьевич.— СПб, 2011.— 152 с.

17. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. — М.: Наука, 1972. — 252 с.

18. Военно-полевая хирургия: национальное руководство / под ред. И.Ю. Быкова, H.A. Ефименко, Е.К. Гуманенко. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. —816 с.

19. Воспаление: руководство для врачей / под ред. В.В. Серова, B.C. Паукова.

— М.: Медицина, 1995. — 640 с.

20. Галахин, К.А. К вопросу о побочном действии поливинилпирролидона / К.А.Галахин // Патолопя. — 2006. — Т. 3, № 1. — С. 89-90.

21. Горюнов, C.B. Гнойная хирургия: атлас. / C.B. Горюнов, Д.В. Ромашов, И.А. Бутивщенко. — М.: БИНОМ, 2004. — 558 с.

22. ГОСТ 270-75 Резина. Метод определения упругопрочностных свойств при растяжении. — М.: ИПК Издательство стандартов, 1993. — 11 с.

23. ГОСТ Р 7.0.11-2011 Система стандартов по информации, библиотечному и издательскому делу. Диссертация и автореферат диссертации. Структура и правила оформления. — М.: Стандартинформ, 2012. — 16 с.

24. Гостищев, В.К. Пути и возможности профилактики инфекционных осложнений в хирургии / В.К. Гостищев, В.В. Омельяновский // Хирургия. — 1997.—№8. —С. 11-15.

25. Григорьев, В.В. Морфология заживления огнестрельной раны после первичной хирургической обработки в эксперименте / В.В. Григорьев, К.К. Зайцева, И.Д. Косачев // Арх. патологии. — 1983. — Т. 45, № 8. — С. 64-72.

26. Грязнов, В.Н. Использование гелевых сорбентов в экспериментальной и клинической хирургии / В.Н.Грязнов, Е.Ф.Передников, А.В Черных. — Воронеж: Изд-во ВГУ, 1990. — 88 с.

27. Девятое, В.А. Микробное обсеменение ран и профилактика гнойных осложнений / В.А. Девятов, С.В.Петров // Хирургия. — 1992. — № 7-8. — С. 70-74.

28. Евсикова, О.В. Синтез, набухание, и адсорбционные свойства композитов на основе полиакриламидного геля и бентонита натрия / О.В. Евсикова, С.Г. Стародубцев, А.Р. Хохлов // Высокомолекулярные соединения. — 2002. — Т. 44, № 5. _ с. 802-808.

29. Ефименко, H.A. Применение сорбционных материалов в комплексном лечении гнойных ран / H.A. Ефименко, О.И. Нуждин // Воен.-мед. журн. — 1998, —Т. 319, №7. —С. 28-32.

30. Зайцев, В.Г. Методологические аспекты исследований свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма / В.Г. Зайцев, В.И. Закревский // Вестник Волгоград. Мед. акад. — 1998. — Т. 54, вып. 4. — с. 49-53.

31. Зенков, Н.К. Окислительный стресс. Биохимический и патофизиологические аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Лапкин, Е.Б. Меныцикова. — М.: Наука / Интерпериодика, 2001. — 343 с.

32. Измайлов, С.Г. Лечение ран / С.Г. Измайлов, Г.А. Измалов, И.В. Подушкип, В.И. Логинов. — Казань: Изд-во Казане, гос. тех. ун-та,

. 2003,— 292 с.

33. Кауфман, О.Я. Макрофаги. Воспаление / О.Я. Кауфман, В.В. Серов, B.C. Пауков. — М.: Медицина, 1995. — 180 с.

34. Крюкова, В.В. Патогенетическое обоснование сорбционно-аппликационной терапии гнойных ран : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.00.16 / Крюкова Виктория Викторовна. — Чита, 2005. — 22 с.

35. Крыжановский, Г.Н. Свободнорадикальное окисление / Г.Н. Крыжановский // Патолог, физиология и эксперим. терапия, 2002. — №3.— С.5-16.

36. Ланкин, В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях: пособие для врачей / В.З.Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков. — М.: РКНПК МЗ РФ, 2001. — 78 с.

37. Лещенко, И.Г. Гнойная хирургическая инфекция / И.Г. Лещенко, P.A. Галкин. — Самара, 2003. — 189 с.

38. Маянский, АЛ. Микробиология для врачей. (Очерки патогенетической микробиологии) / АЛ.Маянский. — Н. Новгород: Изд-во НГМА, 1999. — 400 с.

39. Мелихов, И.В. Физико-химия наносистем: успехи и проблемы / И.В. Мелихов // Вест. РАН. — 2002. —Т. 72, № 10. — С. 900-909.

40. Меныцикова, Е.В. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.В. Меныцикова, H.H. Зенков // Успехи современ. биологии. — 1993. — Т. 113, вып. 4. — С.442-453.

41. Методические рекомендации по микробиологической диагностике раневых инфекций в лечебно-диагностических учреждениях армии и флота / В.М. Добрынин, И.А. Добрынина, В.В. Кацалуха и др. — М.: ГВМУ МО РФ, 1999. —75 с.

42. Микитаев, А. К. Полимерные нанокомпозиты. Многообразие структурных форм и приложений : монография / А. К. Микитаев, Г. В. Козлов,

Г.Е. Заиков. — М. : Наука, 2009. — 278с.

43. Минченко, А.Н. Рапы. Лечение и профилактика осложнений / А.Н. Минченко. — СПб.: СпецЛит, 2003. — 207 с.

44. Назаренко, Г. И. Рана. Повязка. Больной: руководство для врачей и медсестер / Г. И. Назаренко, И. Ю.Сугурова, С. П. Глянцев. — М.: Медицина, 2002. — 369 с.

45. Никитенко, В.И. Взаимоотношение макроорганизма и бактерий в ране и тканях человека и животных / В.И. Никитенко // Хирургия. — 1990. — № 9.

— С. 94-98.

46. Никитенко, Н. И. Роль транслокации бактерий в патогенезе хирургической инфекции / Н. И. Никитенко, В.В. Захаров, A.B. Бородин // Хирургия. — 2001. —Т.2. —С. 63-66.

47. Никитин, С.Р. Патогенетическое обоснование местного применения иммобилизованной 4 лизоамидазы и антиоксидантов для лечения огнестрельных ран: автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.00.27 / Никитин Сергей Радикович. — М., 2004. — 24 с.

48. Общая хирургия: учебник для медицинских ВУЗов / под ред. П.Н Зубарева,

A.B. Кочеткова. — 3-е изд., доп. и перераб.— СПб.: СпецЛит. — 2011. — 608 с.

49. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания. МУК 4.12.1890-04. — М.: Федерал. Центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. —91 с.

50. Основы патологической физиологии: руководство для врачей /

B.В. Михайлов. — М.: Медицина, 2001. — 704 с.

51. Павлюченко, В.Н. Композиционные полимерные гидрогели / В.Н. Павлюченко, С.С. Иванчев // Высокомолек.соед. — 2009. —Т.51, №7.

— С.1075-1095.

52. Парамонов, Б.А. Ожоги: руководство для врачей / Б.А. Парамонов, Я.О. Порембский, В.Г. Яблонский. —СПб.: СпецЛит, 2000. — 480 с.

53. Парамонов, Б.А. Опыт и перспективы применения раневых покрытий,

полученных на основе целлюлозы Acetobacter xylinum / Б.А. Парамонов, Д.Ю. Андреев, А..К. Хрипунов // Сб. науч. трудов «Актуальные вопросы термических поражений»: прил. вест. Росс. Воен.-мед. академии. — №1 (29). — СПб.: ВМедА, 2010. —С. 92-93.

54. Патофизиология: учебник для вузов с компакт-диском / П.Ф. Литвицкий. — 4-е изд., испр. и,доп. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. — 493 с.

55. Патофизиология / под ред. В.Ю. Шанина. — СПб: ЭЛБИ-СПб, 2005. — 639 с.

56. Петрович, Ю. А. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса / Ю. А. Петрович, Д. В. Гуткин // Патол. физиолог, и эксперимен. терапия. — 1986. — №5. — С. 85-92.

57. Пиотровский, Л.Б. Фуллерены в биологии /Л.Б.Пиотровский, О.И. Киселев. — СПб.: Росток, 2006. — 336 с.

58. Пиотровский, Л.Б. Наномедицина как часть нанотехнологий / Л.Б. Пиотровский. — Вестник РАМН, 2010. — №3. — С.41-46.

59. Полимерные нанокомпозиты / под ред. Ю-Винг Май, Ю.-М. Жонг-Жен; пер. с англ. Грахов А.Е. — М.: Техносфера, 2011. — 688 с.

60. Помогайло, А.Д. Нанобиокомпозиты / А.Д. Помогайло // Успехи химии. — 2000. — Т. 69. — С. 60-85.

61. Попов, В.А. Морфофункциональные изменения во внутренних органах экспериментальных животных при внутрибрюшинном введении комплекса Сбо с N-поливинилпирролидоном / В.А. Попов, М.А. Тюнин, О.Б. Зайцева, Д.Н. Николаев, Л.Б. Пиотровский // Прил. вест. Росс. Воен.-мед. академии. — 2008. — Т. 23, № 3. — С. 484.

/

62. Попов, В.А. Применение биоактивных наноматериалов при раневом процессе / В.А. Попов, Н.Г. Венгерович, Е.В. Антоненкова, В.А. Андреев // Вестник Рос. Военно-мед. академии. — 2001. — Т.1. №333—С. 162-167.

63. Попов, В.А. Применение фуллеренов в биоактивных раневых покрытиях / В.А. Попов, М.В. Успенская, Н.Г. Венгерович // Науч.-тех.

вестник ИТМО. Вып. 47. Системный анализ, модернизация и управление. — 2008. — С. 78-83.

64. Раневая инфекция: учебное пособие / A.C. Рожков. — СПб.: ВМедА, 1994.

— 80 с.

65. Раневой процесс: нанобиотехнологии оптимизации / под ред. В.А. Попова.

— СПб.: СпецЛит, 2013. — 199 с.

66. Раны и раневая инфекция: руководство для врачей / под ред. М.И. Кузина, Б.М. Костюченок. —2-е изд., перераб. и доп. — М.: Медицина, 1990. — 592 с.

67. Ревина, A.A. Нанотехнологии в приложении к биологическим системам / A.A. Ревина // Сб. материалов 1-го Российского научно-методического семинара «Наночастицы в природе». — М.: РАЕН-МААНОИ, 2003. — С. 61-68.

68. Роко, М.К. Нанотехнология в ближайшем десятилетии: прогноз направления исследований / М.К. Рокко, P.C. Уильяме; пер. с англ. — М.: Мир, 2002. — 292 с.

69. Самохвалов, И.М. Перспективные технологии оказания хирургической помощи раненым / И.М. Самохвалов, В.И. Бадалов, К.П. Головко и др. // Материалы научно-практич. конф. «Перспективные технологии медицинского обеспечения Вооруженных сил Российской Федерации». — СПб.: ВМедА, 2013,— С. 150-155.

70. Самченко, Ю.М., Топологические параметры гидрогелей на основе акриламида и акриловой кислоты / Ю.М. Самченко, З.Р. Ульберг, // Деп. нац. АН Украины. — 2003.— №3.— С. 136-140.

71. Сергеев, Г.Б. Нанохимия / Г.Б. Сергеев. — М.: Изд-во МГУ, 2003. — 336 с.

72. Соловьев, B.C. Композиционные водопоглощающие материалы на основе акриловых сополимеров и бентонитов : дис. ... канд. техн. наук : 05.17.06 / Соловьев Валерий Сергеевич. — СПб, 2012. — 128 с.

73. Стручков, В.И. Хирургическая инфекция / В.И. Стручков, В.К. Гостищев, Ю.В. Стручков. — М.: Медицина, 1991. — 560 с.

74. Ткаченко, A.A. Бактериальная целлюлоза - шедевр наноархитектуры / A.A. Ткаченко. Т.А. Петрова, A.B. Пиневич // Фундаментальные основы инновационных биологических проектов в «Наукограде». — СПб, 2000. — С. 136-155.

75. Толстых, М.П. Лечение ран антиоксидантами /М.П. Толстых, Б.А. Ахмедов, А.Р. Атаев, Ф.Е. Шин. — Махачкала: Эпох, 2004. — 167 с.

76. Толстых, М.П. Молекулярно-клеточные механизмы лазерной и антиоксидантной коррекции заживления ран / М.П. Толстых, В.Г. Толстых, К.В. Ширинский // Лазерная медицина. —2006. —Т. 10, № 2. — С. 40-46.

77. Толстых, М.П. Проблема комплексного лечения гнойных ран различного генеза и трофических язв : автореф. дис. ... д-ра мед. наук : 14.00.27/ Толстых Михаил Петрович. — М., 2002. — 43 с.

78. Толстых, М.П. Теоретические и практические аспекты заживления ран / М.П. Толстых, О.Э.Луцевич. — М.: Дипак, 2007. — 96 с.

79. Тюнин, М.А. Патофизиологическое обоснование применения комплекса фуллерен Сбо с N-поливинилпирролидоном при раневом процессе : дис. ... канд. мед. наук : 14.00.16 / Тюнин Михаил Александрович. — СПб, 2009. — 141 с.

80. Успенская, М.В. Акриловые гидрогели в качестве полимерных связующих : автореф. дисс....д-ра техн. наук : 05.17.06 / Успенская Майя Валерьевна. — СПб, 2009. - 40 с.

81. Успенская, М.В. Создание материалов на основе бентонита и акрилатных сополимеров /B.C. Соловьев, М.В. Успенская // Материалы всероссийского форума студентов, аспирантов и молодых ученых «Наука и. инновации в технических университетах». — СПб, 2007. — С. 109

82. Успенская, М.В. Полимерные водопоглощающие композиции с повышенной прочностью / B.C. Соловьев, М.В. Успенская, Н.В. Сиротинкин // Приборостроение. — 2010. — Т. 53, № 4 . — С. 63-66.

83. Физиологические основы военно-полевой и неотложной хирургии: методическое пособие для практикующих врачей / под ред. В.А. Попова. —

СПб.: ЭЛБИ-СПБ, 2003. —304 с.

84. Фейгельман, С.С Воспаление к раневая инфекция: взгляд на проблему / С.С. Фейгельман // Врач. — 1997. —№5. —С.41-42.

85. Хирургические инфекции: Руководство / под ред. И.А. Ерюхина, Б.Р. Гельфанда, С.А. Шляпникова. — СПб.: Питер, 2003. — 864 с.

86. Хрипунов, А.К. Свойства целлюлозы АсеШЬа^ег хуНпиш / А.К. Хрипунов,

A.А. Ткаченко, Ю.Б. Москвичева // Биотехнология и генетика: Межвуз. сб. науч. тр. ИНГУ. — Н. Новгород, 1991. — С. 54-64.

87. Хрупкин, В.И. Современные методы лечения огнестрельных ран /

B.И. Хрупкин, И.М. Самохвалов // Огнестрельная рана и раневая инфекция. — Л., 1991,— С.117-118.

88. Цыган, В. Н. Патофизиологическая характеристика инновационных разработок новых раневых покрытий / В. Н. Цыган // Материалы научно-практической конференции «Перспективные технологии медицинского обеспечения Вооруженных сил Российской Федерации». — СПб.: ВМедА, 2013,— С. 150-155.

89. Чеснокова, Н.П. Недостаточность антиоксидантной системы как ведущий фактор дезорганизации при бактериальных инфекциях и интоксикациях / Н.П. Чеснокова, В.В. Моррисон, Г.Б. Кудин // Материалы Всероссийской научн. конф., посвящ. 150-летию со дня рождения И.П. Павлова. — СПб,

1999,— С.27-28.

90. Чвалун, С.Н. Полимерные нанокомпозиты / С.Н. Чвалун // Природа. —

2000.— №7,— С. 1-13.

91. Шальнев, А.Н.Лечение огнестрельных и гнойно-осложненных ран с помощью антиоксидантов и углеродных тканевых сорбентов : автореф. дис. ... доктора медицинских наук : 14.00.22, 14.00.16 / Шальнев Анатолий Николаевич. — М., 1996. — 28 с.

92. Шанин, В.Ю. Клиническая патофизиология: учебник для мед. ВУЗов / В.Ю. Шанин. — СПб:Спецлит, 1998. — 569 с.

93. Шанин, В.Ю. Типовые патологические процессы (общая патология и

клиническая патофизиология) / В.Ю. Шанин. — СПб:Спецлит, 1996. — 278 с.

94. Шанин, Ю. Н. Антиоксидантная терапия в клинической практике (теоретическое обоснование и стратегия проведения) / Ю. Н. Шанин,

B.Ю. Шанин, Е.В. Зиновьев. — СПб: ЭЛБИ-СПб, 2003. — 128 с.

95. Шаповалов, С.Г. Современные раневые покрытия в комбустиологии /

C.Г. Шаповалов // ФАРМиндекс-Практик. — 2005. — №8. — С. 38-46.

96. Шехтер, А.Б. Воспаление и регенерация / А.Б. Шехтер, В.В. Серова. — М.: Медицина, 1995. — 218 с.

97. Шибалович, В.Г. Полиакрилатные гидрогели и их абсорбционная способность / В.Г. Шибалович, И.Ю. Голубева, А.Ф. Николаев // Материалы, научн.-техн. Семинара «Пластмассы со специальными свойствами». — СПб. — 1992 . — С. 105-108.

98. Юнкеров, В.И. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований / В.И. Юнкеров, С.Г. Грирорьев. — СПб.: ВМедА, 2002. — 266 с.

99. Ahmad, М.В. Synthesis and antibacterial activity of silver/montmorillonite nanocomposites / M.B. Ahmad, K. Shameli, W.M.Z.W. Yunus et al. // Res. J. Biol. Sci. —2009. — Vol. 4(9) . — P. 1032-1036.

100. Ahmad, M.B. Synthesis and Characterization of Silver/Clay Nanocomposites by Chemical Reduction Method / M.B. Ahmad, K. Shameli, M. Darroudi, W.M.Z.W. Yunus // Am. J. Applied Sci. — 2009. — Vol. 6. — P. 1909-1914.

101. Ali, S.S. A biologically effective fullerene (C6o) derivative with superoxide dismutase mimetic properties / S.S. Ali, J.I. Hardt, K.L. Quick, J.S. Kim-Han et al. // Free Rad. Biol. Med. — 2004. — Vol. 37. — P. 1191-12020.

102. Ayyappan, S. Nanoparticles of Nickel and Silver Produced by the Polyol Reduction of the Metal Salts Intercalated in Montmorillonite / S. Ayyappan, G.N. Subbanna, R.S. Goplan, C.N.R. Rao // Solid state ion. — 1996. — Vol. 84. — P. 271-281.

103. Baker, C. Synthesis and antibacterial properties of silver nanoparticles / C. Baker,

A. Pradhan, L. Pakstis et al. 11 Nanosci. Nanotechnol. —2005. — Vol. 5. — P. 244-249.

104. Baum, C.L. Normal cutaneous wound healing: clinical correlation with cellular and molecular events / C.L. Baum, C.J. Arpey // Dermatol. Surg. — 2005. — Vol. 31, № 6. —P. 674-686.

105. Beck, M. Solubility of C60/ M. Beck, G. Mandy // Full. Sci. Technol. — 1997. — Vol. 5. —P. 291-310.

106. Belly, R.T. Silver resistance in microorganisms / R.T. Belly, G.C. Kydd // Dev. Ind. Microbiol. —1982. — Vol. 23. — P. 567-577.

107. Bensasson, R.V. C6o in model biological systems - a visible-UV absorption study of solvent-dependent parameters and solute aggregation / R.V. Bensasson // J. Phys. Chem. —1994. — Vol. 98. — P. 349-350.

108. Beuerle, F. Cytoprotective activities of water-soluble fullerenes in zebrafish models / F. Beuerle, P. Witte, U. Hartnagel, et al. // J. Exp. Nanosci. 2007. — Vol. 2, —P. 147-170.

109. Bianco, A. Biological applications of fullerenes / A/ Bianco, T. Da Ros // Fullerenes - Principles and Applications. — Cambridge: Royal Chemical Society. — 2007. — P. 301-328.

110. Bohn, A. X-ray texture investigations of bacterial cellulose / A. Bohn, H. P. Fink, J. Ganster, M.Pinnow // Macromolecular Chemistry and Physics. — 2000. — Vol. 201,No. 15,—P. 1913-1921

111. Bosi, S. Fullerene derivatives: an attractive tool for biological applications/ S. Bosi // Eur. J. Med. Chem. —2003. —Vol. 38. —P. 913-923.

112. Brown, M. Jr. The Biosynthesis of cellulose / M. Jr. Brown // Pure Appl. chem. — 2002. — Vol. 4. — P. 1345-1373.

113. Brun, P. The physiology of wound healing / P. Brun, R. Cortivo, G. Abatalengo // New approaches to the management of chronic wound: Proc. of EWMA/JWC Conf. — Milan-London, 1997. — P. 4-7.

114. Burd, A. A comparative study of the cytotoxicity of silver-based dressings in monolayer cell, tissue explant, and animal models / A. Burd, C.H. Kwok et al. //

Wound Repair Regen. — 2007. — Vol. 15, №1. — P. 94-104.

115. Cataldo, F. In Medicinal Chemistry and Pharmacological Potential of Fuiierenes and Carbon Nanotubes / F. Cataldo, T. Da Ros. — Rome: Springer, 2008. — 408p.

116. Chawla, P. R. Microbial Cellulose: Fermentative Production and Applications / P. R. Chawla, I. B. Bajaj, S. A Survase, R. S. Singhal // Food Technology And Biotechnology. — 2009. — Vol.47, №o.2. — P. 107-124

117. Clement, J.L. Antibacterial silver / J.L. Clement, P.S. Jarrett // Met. Based Drugs. — 1994. — Vol. 16 №5-6. — P. 467-482.

118. Cockschott, W. The history of the treatment of the burns / W. Cockschott // Surg. Gynec. Obstet.— 1956, —Vol. 102, №1, —P. 116-124.

119. Czaja, W. K. The future prospects of microbial cellulose in biomedical applications / W. K. Czaja, D. J. Young, M. Kawecki, R. M. Brown // Biomacromolecules. — 2007. — Vol.8, №1. — P. 1-12

120. Czaja, W. Microbial cellulose — the natural power to heal wounds / W. Czaja, A. Krystynowicz, S.Bielecki, R. J. Brown // Biomaterials. — 2006. — Vol.27, №2. — P.145-151

121. Darroudi, M. Synthesis and characterization of UV-irradiated silver/montmorillonite nanocomposites / M. Darroudi, M.B. Ahmad, K. Shameli et al. // Solid. State Sci. — 2009. — Vol. 11. — P. 1621-1624.

122. Dayal, U. Synthesis of acrylic superabsorbents / U. Dayal, S.K. Mehta, M.S. Choudhary, R.C. Jain // J. Macromol. Sci. Part. C. — 1999. — Vol. 39, №3. — P. 507-525.

123. Dekany, I. Preparation of size-quantised CdS and ZnS particles in nanophase reactors provided by binary liquid adsorption at layered silicates / I. Dekany, L. Turi, J.H. Fendler // Langmuir. — 1995. — Vol.11. — P. 2285-2292.

124. DiPietro, L.A. Wound healing: the role of the macrophage and other immune cells / L.A. DiPietro // Shock. — 1995. — Vol. 4, № 4. — P. 233-240.

125. Dugan, L.L. Carboxyfullerenes as neuroprotective agents / L.L. Dugan etal. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1997. — Vol. 94. — P. 9434-9439.

126. Dugan, L.L. Fullerene-based antioxidants and neurodegenerative disorders /

T T nilOiin //PacHnonnicm Dalot I _ ?ftfi1 _ Vr.l 1C, _ P 9/1A

// .al.Mliovinoiii ivviai. lyuuiu. - ¿UU I. - V VJ1. J J. - r. ¿tj—ZtO.

127. Edwards, S.L. Tissue viability: understanding the mechanisms of injury and repair / S.L. Edwards // Nursing Standart. — 2006. — Vol. 21, №13. — P. 4856.

128. Feng,Q. L. A mechanistic study of the antibacterial effect of silver ions on Escherichia coli and Staphylococcus aureus / Q. L. Feng, J. Wu, G.Q. Chen et al. // J. Biomed. Mater. —2001. — Vol.52, №4. — P.662-668

129. Fong, J. Nanocrystalline silver dressings in wound management: a review / J. Fong, F. Wood // Int. J. Nanomedicine. — 2006. — Vol.1, №4. — P. 441-449.

130. Furno, F. Silver nanoparticles and polymeric medical devices: a newapproach to prevention of infection? / F. Furno, K.S. Morley, B. Wong, et al. // J. Antimicrob. Chemother. — 2004. — Vol. 54. — P. 1019-1024.

131. Gao, Y. Deposition of silver nanoparticles on montmorillonite platelets by chemical plating / Y. Gao, Y. Yunzhao // J. Mater. Sci. — 2002. — Vol. 37. — P.5083-5087.

132. Grune, A.U. Degradation of oxidased proteins in mammalian cells / A.U. Grune, T. Reichenkel, K.J.A. Davies // FASEB J. — 1997. — Vol. 11, №7. — P. 526534.

133. Guldi, D.M. Activity of water-soluble fullerenes towards -OH-radicals and molecular oxygen / D.M. Guldi, K.D. Asmus // Radiation Phys. Chem. - 1999. — Vol. 56.—P. 449-456.

134. Gurin, V.S. Silver and copper clusters and small particles stabilized within nanoporous silicate-based materials / V.S. Gurin, V.P. Petranovskii, M.A. Hernandez et al. // Mater. Sci. Eng. A. — 2005. — Vol.391, №1-2. — P.71-76.

135. Hart, J. Inflamation and its role in the healing of the acute wounds / J.Hart// J. Wound Care. — 2002. — Vol. 11, № 6. — P. 205-209.

136. Hidalgo, E. Study of cytotoxicity mechanisms of silver nitrate in human dermal fibroblasts / E. Hidalgo, C. Dominguez // Toxicol. Lett. — 1998. — Vol. 98, №3.

— P. 169-179.

137. In, M Antimicrobial activities of silver dressings: an in vitro comparison i ivi. Ip, S.L. Lui, V.K. Poon, I. Lung // J. Med. Microbiol. —2006. — Vol.55, Pt.l. — P. 59-63.

138. Jensen, A. W. Biological applications of fullerenes / A.W.Jensen, S.R. Wilson, D.I. Schuster // Bioorg. Med. Chem. —1996. —Vol. 4. —P. 767-779.

139. Jung, R. Antimicrobial properties of hydrated cellulose membranes with silver nanoparticles / R. Jung, Y. Kim, H.S. Kim, H.J. Jin // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. — 2009. — Vol. 20, №3. — P. 311-324.

140. Kasermann, F. Buckminsterfullerene and photodynamic inactivation of viruses/ F. Kasermann, C. Kempf// Rev. Med. Virol. — 1998. — Vol. 8. — P. 143-151.

141. Kerstein M. Wound infection: assessment and management // Wounds. — 1996.

— Vol. 8.—P. 141-144.

142. Khripunov, A.K. Gluconacetobacter xylinus cellulose as a perspective material for nanobiotechnology / A.K. Khripunov, R.Y. Smyslov, K.N. Kasanov, V.A. Popov et al. // Molecular Mobility and Order in Polymer Systems - Book of abstracts 7th International Symposium, SPb, 2011. — P. 185.

143. Kim, J.S. Antimicrobial effects of silver nanoparticles / J.S. Kim et al. // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology, and Medicine. — 2007. — Vol.3. — P.95-101.

144. Klasen, H.J. A historical review of the use of silver in the treatment of burns. II. Renewed interest for silver / H.J. Klasen // Burns. — 2000. — Vol.26, №2. — P.131-138.

145. Kotelnikova, R.A. Membranotropic properties of the water-soluble amino acids and peptide derivatives of fullerene C6o / RA. Kotelnikova et al. // Mol. Mat. — 1998. —Vol. 11.—P. 111-116.

146. Kroto, H.W. C60: Buckminsterfullerene / H.W. Kroto / Nature. —1985. — Vol. 318.—P. 162-163.

147. Krusic, P.J. Radical reactions of C6o / P.J. Krusic [et al.] // Science. — 1991. — Vol. 254.—P. 1183-1185.

148. Kuo, T.T. Mucicarminophilic histiocytosis. A polyvinylpyrrolidone (PVP) storage disease simulated signet-ring cell carcinoma / T.T. Kuo, S. Hsuch // Am. J. Surg. Pathol. — 1984. — Vol. 63. — P. 419-428.

149. Lagaly, G. Nanoparticle growth in clays / G.Lagaly, I. Dekany // Handbook of Clay Science. — London: Elsevier Ltd, 2001. — 406p.

150. Lai, H.S. Free radical scavenging activity of fullerenol on grafts after small bowel transplantation in dogs / H.S. Lai // Transplant. Proc. —2000. —Vol. 32. — P.1272-1274.

151. Lai, H.S. Free radical scavenging activity of fullerenol on the ischemia-reperfusion intestine in dogs / H.S. Lai, W.J. Chen, L.Y. Chiang // World J. Surg.

— 2000. — Vol. 24. — P. 450-454.

152. Lansdown, A.B. Silver. I: Its antibacterial properties and mechanism of action / A.B. Lansdown // J. Wound Care. — 2002. — Vol. 11, №4. — P. 125-130.

153. Li, J. Pathophysiology of acute wound healing/ J.Li, J.Chen, R. Kirsner// Clin. Dermatol. — 2007. — Vol. 25, № 1. — P. 9-18.

154. Lin, H.S. Fullerenes as a new class of radioprotectors / H.S. Lin // Int. J. Radiat. Biol. — 2001. — Vol. 77, №2. —P. 235-239.

155. Liw, Z.S. Preparation of superabsorbent polymer by crosslinking acrylic acid and acrylamide copolymers / Z.S. Liw, G.L. Rempel // J. Appl. Polym. Sci. — 1997.

— Vol. 64, № 7. — P.1345-1353.

156. Magana, S.M. Antibacterial activity of montmorillonites modified with silver / S.M. Magana, P. Quintana, D.H. Aguilar et al. // J. Mol. Catal. A-Chem. — 2008.

— Vol. 281. —P. 192-199.

157. Maria, L. C. S. Preparation and Antibacterial Activity of Silver Nanoparticles Impregnated in Bacterial Cellulose / L. C. S. Maria, A. L. C. Santos, P.C. Oliveira, A. S. S. Valle et al. // Polimeros-Ciencia E Tecnologia. — 2010. — Vol.20, №1,— P. 72-77.

158. Martinez-Cayuela, M. Oxygen free radicals and human disease / M. Martinez-Cayuela // Biochimie. — 1995. — Vol.77, №3. — P. 147-161.

159. Mathur, A.M. Methods for Synthesis of Hydrogels Networks: A Review /

A.M. Mathur, S.K. Moorjani, A.B. Scranton // Journal of Macromolecular Science. Part. C: Chem. Phys. — 1996. — V. 36, № 2. — P. 405-430.

160. Matsuura, T. Prolonged antimicrobial effect of tissue conditioners containing silver-zeolite / T. Matsuura, Y. Abe, Y. Sato, et al. // J. Dent. — 1997. — Vol. 25. —P. 373-377.

161. Medina-Ramirez, I. Green synthesis and characterization of polymer-stabilized silver nanoparticles /1. Medina-Ramirez, S. Bashirb, Z. Luo et al. // Colloids Surf

B. Biointerfaces. — 2009. — Vol. 73. — P. 185-191.

162. Melaiye, A. Silver and its application as an antimicrobial agent / A. Melaiye, W.J.Youngs // Expert Opin. Ther. Pat. — 2005. — Vol. 15. — P.125-130.

163. Morones, J.R. The bactericidal effect of silver nanoparticles / J.R. Morones, J.L. Elechiguerra, A. Camacho et al. // Nanotechnology. — 2005. — Vol. 16. — P. 2346-2353.

164. Moussa, F. Fullerene is an in vivo Powerful Antioxidant With no Acute or Subacute Toxicity / F. Moussa // Nano Letters. — 2005. —Vol. 5, № 12. — P. 25782585.

165. Oberdorster, E. Manufactured nanomaterials (fullerenes, C6o) induce oxidative stress in brain of juvenile largemoth bass / E. Oberdorster // Environ. Health Perspect. — 2004. — Vol. 112. — P. 1058-1062.

166. Papp, S. Metal Nanoparticle Formation on Layer Silicate Lamellae / S. Papp, R. Patakfalvi, I. Dekany // Colloid and Polymer Science. — 2008. —Vol. 286. — pp. 3-14.

167. Patakfalvi, R.A. Synthesis and characterization of silver nanoparticles/kaolinite composites / R.A. Patakfalvi, A. Oszka, I. Dekany // Colloids Surf. Physicochem. Eng. Asp. — 2003. — Vol. 220. — P. 45-54.

168. Percival ,S. L. Bacterial resistance to silver in wound care / S.L. Percival, P.G. Bowler, D. Russell // Journal of Hospital Infection. — 2005. — Vol. 60. — P. 1-7

169. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility-Testing; Seventeenth Informational Supplement. CLSI document M100-S17. Clinical and Laboratory

Standards Institute. — 94jo West Valley Road. Suite 1400. Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2007. — 182P.

170. Piotrovsky, L.B. Biological activity of pristine fullerene C6o / L.B. Piotrovsky // Carbon Nanotechnology / L. Dai (ed.). — Elsevier, 2006. — P. 235-253.

171. Piotrovsky, L.B. Fullerenes and viruses / L.B. Piotrovsky, O.I. Kiselev // Carbon Nanostruct. — 2004. — Vol. 12. — P. 397-403.

172. Praus, P. Study of silver adsorption on montmorillonite / P. Praus, M. Turicova, M. Valaskova // J. Braz. Chem. Soc. — 2008. — Vol. 19. — P. 549556.

173. Quintana, J. Mechanical properties of poly (N-isopropyl-acrylamide-co-itaconic acid) hydrogels / J. Quintana, N. Valderruten, I. Katime // Journal of applied polymer science. —2002. —Vol. 85. —P. 2540-2545.

174. Rai, M. Silver nanoparticles as a new generation of antimicrobials / M. Rai, A. Yadav, A.Gade // Biotechnol. Adv. — 2009. —Vol.27. — P. 76-83.

175. Rao, C.N.R. The Chemistry of Nanomaterials / C.N.R. Rao, A. Muller, A.K. Cheetham // Darmstadt: WILEY-VCH GmbH & Co.KgaA, 2004. — P. 113-200.

176. Richards, R.M.E. Antimicrobial action of silver nitrate / R.M.E. Richards // Microbios. — 1981. —Vol. 31. —P.83-91.

177. Russell, A.D. Antimicrobial activity and action of silver / A.D. Russell, W.B. Hugo // Prog. Med. Chem. — 1994. — Vol.31. — P. 351-371.

178. Satoh, M. Pharmacological Studies on Fullerene (C6o), a Novel Carbon Allotrope, and Its Derivatives / M. Satoh, I. Takayanagi // J. Pharmacol. Sci. — 2006. — Vol. 100, —P. 513-518.

179. Sayes, C.M. The Differential Cytotoxicity of Water-Soluble Fullerenes/ C.M. Sayes et al. //Nano. Lett. — 2004. —Vol. 4, № 10. — P. 1881-1887.

180. Schreurs, W.J.A. Effect of silver ions on transport and retention of phosphate by Escherichia coli / W.J.A. Schreurs, H. Rosenburgh // J. Bacteriol. — 1982, —Vol. 152. —P. 7-13.

181. Shameli, K. Synthesis of silver/montmorillonite nanocomposites using y-

irradiation / K. Shameli, M.B. Ahmad, W.M.Z.W. Yunus et al. // Int. J. Nanomedicine. — 2010. — Vol. 5. — P. 1067-1077.

182. Shameli, K. Green synthesis' of silver/montmorillonite/chitosan bionanocomposites using the UV irradiation method and evaluation of antibacterial activity / K. Shameli, M.B. Ahmad, W.M.Z.W. Yunus et al. // Int. J. Nanomedicine. — 2010. — Vol.5. — P. 875-887.

183. Shameli, K. Fabrication of silver nanoparticles doped in the zeolite framework and antibacterial activity / K. Shameli, M.B. Ahmad, W.M.Z.W. Yunus et al. // Int. J. Nanomedicine. —2011. —Vol. 6.— P. 331-341.

184. Shameli, K. Synthesis and characterization of silver/talc nanocomposites using the wet chemical reduction method activity / K. Shameli, M.B. Ahmad, W.M.Z.W. Yunus et al. // Int. J. Nanomedicine. — 2010. — Vol.5. — P. 743751.

185. Shukla, A. Depletion of reduced glutathions of carbic acid, vitamin E and antioxidant defence enzymes in a healing cutaneus wound / A. Shukla, A.M. Rasic, G.K. Patnaik// Free Rad. Biol. Med. — 1997. — Vol. 26, № 2. — P. 93-101.

186. Talebi, J. Sonochemical synthesis of silver nanoparticles in Y-zeolite substrate / J. Talebi, R. Halladj, S. Askari // J. Mater. Sci. — 2010. — Vol. 45. — P. 33183324.

187. Taylor ,P. L. Impact of heat on nanocrystalline silver dressings: Part I: Chemical and biological properties / P.L. Taylor, A.L. Ussher, R.E. Burrell // Biomaterials.

— 2005. — Vol. 26, №35. — P. 7221-7229

188. Thomas, S. A comparison of the antimicrobial effects of four silver-containing dressings on three organisms / S. Thomas, P. McCubbin // J. Wound Care.

— 2003, — Vol. 12, №3.—P. 101-107.

189. Thurmann, R.B. The molecules mechanisms of copper and silver ion disinfection of bacteria and viruses / R.B. Thurmann, C.P. Gerba // Crit. Rev. Environ. Control. — 1989, —Vol. 18.—P. 295-315.

190. Tobler, D. Nanotech Silver Fights Microbes in Medical Devices / D. Tobler, L.

Warner 11MDDI. — 2005. — Vol. 27. — P. 164-169.

1 01 Ti./iT«- A S T +1__tii'.i___n / * * T T___1 _ _ T i T-I i r>

luuKu, ivx. J. uicacascD ui UK VV ISim JVcll / 1V1. J. 1 UCKCI. - l^OriUOri: iayior <56

Francis, 1997. — 269p.

192. Tsai, M.C. Polyhydroxylated C60, fullerenol, a novel free radical trapper, prevented hydrogen peroxide-and cumene hydroperoxide-elicited changes in rat hippocampus in vitro / M.C. Tsai, Y.H. Chen, L.Y. Chiang // J. Pharm. Pharmacol. — 1997. — Vol. 49. — P. 438-445.

193. Valaskova, M. Silver nanoparticles/ montmorillonite composites prepared using nitrating reagent at water and glycerol / M. Valaskova, G. Martynkova, J. Leskova et al. // J. Nanosci. Nanotechnol. — 2007. — Vol. 8. — P. 1-9.

194. Valles, E. Equilibrium swelling and mechanical properties of hydrogels of acrylamide and itaconic acid or its esters / E. Valles, D. Durando, I. Katime // Polymer Bulletin. — 2000. — Vol. 44. — P. 109-114.

195. Vileno, B. In vitro assa of singlet oxygen generation in the presence of water-soluble derivatives of C60 / B. Vileno // Carbon. —2004. —Vol. 42. — P. 11951198.

196. Vowden, K. Understanding exudate management and the role of exudate in the healing process / K. Vowden, P. Vowden // Br. J. Community Nurs. - 2003. — Vol. 8, №11.—P. 4-13.

197. Walker, M. Silver deposition and tissue staining associated with wound dressings containing silver / M. Walker, C.A. Cochrane, P.G. Bowler, D. Parsons // Ostom. Wound Manag. —2006. —Vol. 52, №1. —P. 42-44.

198. Wang, H. Preparation of silver nanoparticles by chemical reduction method / H. Wang, X. Qiao, J. Chen et al. // Colloid Surface A. —2005. —Vol. 256, №2-3. — P. 111-115.

199. Wang, I.C. C6o and water-soluble fullerene derivatives as antioxidants against radicalinitiated lipid peroxidation / I.C. Wang et al. // J. Med. Chem. — 1999. — Vol. 42. — P. 4614-4620.

200. Wright, J.B. Efficacy of topical silver against fungal burn wound pathogens / J.

B. Wright, K. Lam, D.Hansen, R. E. Burrell // Am. J. of Infection Control. — 1999. — Vol. 27. — P. 344-350.

201. Yamakoshi, Y.N. Solubilization of fullerenes into water with polyvinylpyrrolidone applicable to biological tests / Y.N. Yamakoshi et al. // J. Chem. Soc. Chem. Commun. — 1993. — P. 517-518.

202. Zanaveskina, I.S. Properties of bacterial cellulose / I.S. Zanaveskina, N.D. Stiopina N.D, A.K. Khripunov // 8th Eur. Conf. on organized films: Abstr. Otranto -Italy, 2001, — P. 11-12.

203. Zhou, W.-J. Studies of crosslinked poly (AM - MS AS- AA) gels. Effects of polymerization conditions on the water absorbency / W.-J. Zhou, H.-J. Yao, M.J. Kurlh // J. Appl. Polym. Sci. — 1997. — Vol.64, №5. — P. 1009-1014.

204. Zlatanic, A. Effect of crosslinking on swelling, transitions and mechanical properties of poly-N-isopropylacrylamide responsive hydrogels / A. Zlatanic, Z. Petrovic // Kansas Polymer Research Center, Plastics-the lone star: conference proceeding - Dallas, Texas.: ANTEC, 2001. — P. 3319-3323.

205. URL: http://en.wikipedia.org/wiki/Montmorillonite