Oцeнкa эффeктивнocти интpaмиoкapдиaльнoгo ввeдeния aутoлoгичныx мoнoнуклeapoв кpacнoгo кocтнoгo мoзгa и иx гoмoгeнизaтa нa peгeнepaцию миoкapдa пpи ocтpoм инфapктe миoкapдa тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат наук Борукаев, Ислам Заудинович

• Борукаев, Ислам Заудинович
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Борукаев, Ислам Заудинович

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ_5

ВВЕДЕНИЕ_6

ГЛАВА 1.

Современные достижения и перспективы в лечении острого инфаркта миокарда и профилактики хронической сердечной недостаточности_12

1.1. Основные подходы в лечении ИБС и их недостатки_

1.2. Альтернативные методы лечения ИБС_

1.2.1. Терапевтический ангиогенез_15

1.2.2. Клеточная регенеративная терапия_

1.3. Клеточная кардиомиопластика - новое направление в лечении

острого ИМ и профилактике ХСН_

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ_30

2.1. Экспериментальная часть:_

2.1.1. Получение мононуклеаров красного костного мозга (МККМ)_30

2.1.2. Получение гомогенизата (цитокинов, факторов роста) красного костного мозга_

2.1.3. Моделирование ИМ и введение МККМ и гомогенизата ККМ лабораторным животным_31

2.1.4. Определяемые клинические параметры и критерии их оценки_

2.2. Клиническая часть_36

2.2.1. Дизайн исследования_37

2.2.2. Критерии включения и исключения_38

2.2.3. Распределение пациентов по группам_38

2.2.4. Клеточная терапия_

2.2.5. Определяемые клинические параметры и критерии их оценки_40

2.3. Статистическая обработка материала_44

ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований_

3.1. Экспериментальные исследования_46

3.1.1. Течение ИМ у крысы_46

3.1.2. Морфометрическая характеристика миокарда крыс

3.1.3. Морфологическая характеристика миокарда крыс контрольной и опытной группы_51

3.1.4. Оценка влиния интрамиокардиального введения МККМ и цитокинов, факторов роста на функции автоматизма и проводимости сердца крысы_58

3.2. Клинические исследования_

3.2.1. Влияние трансплантации МККМ на частоту неблагоприятных событий и течение ХСН через 3 и 6 месяцев после ИМ_63

3.2.2. Лекарственная терапия через 3 и 6 месяцев после острого ИМ_70

3.2.3. Влияние клеточной кардиомиопластики аутологичными МККМ на показатели общего анализа крови через 6 месяцев после ИМ_72

3.2.4. Динамика показателей липидного спектра_73

3.2.5. Оценка повреждающего эффекта интрамиокардиальной трансплантации МККМ_74

3.2.6. Оценка влияния клеточной терапии на насосную функцию сердца_75

3.2.7. Динамика некоторых параметров геометрии, линейных размеров сердца после острого ИМ_79

3.2.8. Динамика сократительной функции сердца после острого ИМ по данным эхокардиографии, стресс-эхокардиографии_82

3.2.9. Влияние клеточной кардиомиопластики аутологичными МККМ на частоту возникновения злокачественных аритмий у больных, перенесших ИМ_88

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ_91

ВЫВОДЫ_104

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ_105

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ_

ПРИЛОЖЕНИЯ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АД - артериальное давление

ИАПФ - ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ИМ - инфаркт миокарда

ИСКА - инфаркт-связанная коронарная артерия

КДИ - конечный диастолический индекс

кдо - конечный диастолический объём

КСО - конечный систолический объём

КШ - коронарное шунтирование

лж - левый желудочек

мккм - мононуклеарные клетки костного мозга

св - сердечный выброс

ск - стволовая клетка

УО - ударный объём

ФВ - фракция выброса

ФК - функциональный класс

хсн - хроническая сердечная недостаточность

ЧКВ - чрескожное коронарное вмешательство

чсс - частота сердечных сокращений

ЧТКА - чрескожная транслюминальная коронарная ангиопластика

ЭКГ - электрокардиограмма

м среднее арифметическое

стандартное отклонение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Oцeнкa эффeктивнocти интpaмиoкapдиaльнoгo ввeдeния aутoлoгичныx мoнoнуклeapoв кpacнoгo кocтнoгo мoзгa и иx гoмoгeнизaтa нa peгeнepaцию миoкapдa пpи ocтpoм инфapктe миoкapдa»

ВВЕДЕНИЕ

Инфаркт миокарда (ИМ) - является одной из основных причин смертности и инвалидизации населения в развитых странах.

В России частота инфаркта миокарда в различных регионах колеблется от 2 до 5 на 1000 мужчин в год в возрасте от 25 до 64 лет. Ежегодно в Российской Федерации из 100 тысяч человек только от инфаркта миокарда умирают 330 мужчин и 154 женщины. Среди общей смертности сердечнососудистые заболевания составляют 57%. От хронической сердечной недостаточности (ХСН) умирают от 880 000 до 986 000 человек [14].

Современная фармакотерапия, включающая в себя фибринолитики, антиагреганты, ингибиторы ангиотензин-превращающих ферментов, ß-блокаторьт, антагонисты кальция и нитраты, дает позитивные клинические результаты [106]. Но, она оказывается недостаточно эффективной в предотвращении процессов ремоделирования миокарда, так как не обеспечивает фактическое замещение утраченных кардиомиоцитов. Сохраненный жизнеспособный миокард и симптомы рецидивирующей ишемии являются общепризнанными критериями, указывающими на необходимость выполнения коронарной реваскуляризации у больных с постишемической левожелудочковой дисфункцией [87].

Баллонная ангиопластика со стентированием коронарных артерий позволяет значительно улучшить состояние пациента, восстановить коронарный кровоток, но не решает проблему поврежденной инфарктом ткани миокарда [108]. Аорто-коронарное шунтирование, несмотря на значительную эффективность, имеет ограничения при дистальных поражениях и анатомически узких сосудах пациента, а также рассыпном типе кровоснабжения сердца [91].

Аллогенная трансплантация сердца показана при тяжелой хронической сердечной недостаточности при неэффективной фармакотерапии, но в связи с отсутствием достаточного количества доноров, применение данного метода ограничено [41]. Использование механических заменителей ЛЖ ограничено в связи с развитием множеств осложнений (тромбоз, тромбоэмболия).

В последнее время все большее внимание уделяется методу клеточного кардиомиогенеза в лечении больных с ИБС.

В связи с этим разрабатываются новые способы регенерации пораженного миокарда на основе современных достижений молекулярной и клеточной биологии. Таким новым направлением в кардиологии и кардиохирургии является использование клеток костного мозга. Клеточная кардиомиопластика - современный метод лечения инфаркта миокарда, нацеленный на замещение поврежденных кардиомиоцитов путем трансплантации и мобилизации стволовых клеток. Главная цель методики -улучшение сократительной функции поврежденного миокарда и усиление кровоснабжения миокарда за счет улучшения регионарной микроцикуляции. Данное обстоятельство возможно путем сохранения и увеличения количества здоровых кардиомиоцитов и улучшения перфузии ишимизированной зоны миокарда путем стимуляции неоангиогенеза и неоваскуляризации. По данным, полученным в 2004 Шаховым В.П.и Поповым C.B., это возможно за счет способности клеток костного мозга участвовать в регенерации поврежденного миокарда. В терапии инфаркта миокарда используют различные клетки костного мозга: гемолитические стволовые клетки, эндотелиальные прогениторные клетки, мезенхимальные стромальные клетки, мононуклеарные клетки костного мозга. Применяется как аллогенная, так и аутологичная трансплантация клеток, причем наиболее перспективным считается трансплантация аутологичных клеток в связи с отсутствием необходимости иммуносупрессивной терапии и отсутствием этических и юридических проблем. Наибольшую популярность получила аутотрансплантация мезенхимальных стромальных и мононуклеаров крастного костного мозга.

Клеточная кардиомиопластика включает в себя три основных подхода: - проведение локальной терапии цитокинами.

-введение колонийстимулирующих факторов для мобилизации выхода резидентных клеток костного мозга, -трансплантация стволовых клеток.

Многочисленные экспериментальные работы посвещенные данной проблеме показывают положительный эффект трансплантации этих клеток на регенерацию поврежденного миокарда. Однако, многие проблемы в этой области медицины остаются нерешенными и требуют дальнейшего исследования. К примеру, все еще не определен наиболее эффективный тип клеток и оптимальный способ их введения для восстановления миокарда.

Цель работы

Провести сравнительную оценку влияния аутологичных мононуклеа-ров красного костного мозга и гомогенизата из них на регенерацию миокарда при остром инфаркте миокарда в эксперименте на лабораторных животных и в клиническом исследовании.

Задачи исследования

1. Определить оптимальный способ получения мононуклеаров красного костного мозга и гомогенизата из них у крыс для последующей аутотрансплантации.

2. На модели инфаркта миокарда у крыс изучить эффект интра-миокардиальной доставки аутологичных мононуклеаров и гомогенизата из них, содержащего цитокины и факторы роста, в пограничную зону инфаркта миокарда.

3. Сравнить эффект клеточного и цитокинового воздействия на динамику образования постинфарктного рубца левого желудочка с помощью макроскопического и гистологического исследования.

4. Оценить влияние клеточной кардиомиопластики на динамику насосной функции сердца и формирование хронической сердечной недостаточности у больных, перенёсших острый инфаркт миокарда.

5. Изучить возможные негативные эффекты клеточной терапии ауто-логичными мононуклеарами у больных, перенёсших острый инфаркт миокарда.

Научная новизна исследования

Впервые на модели инфаркта миокарда проведено сравнение влияния трансплантации мононуклеаров красного костного мозга и гомогенизата из них, содержащего цитокины и факторы роста, при интрамиокардиальном введении на течение инфаркта миокарда у крыс. Полученные данные свиде-

тельствуют о негативном влиянии гомогенизата на течение инфаркта миокарда, в отличие от аутологичных мононуклеаров крас-ного костного мозга.

Впервые проведена оценка морфофункционального состояния миокарда крыс после трансплантации мононуклеарных клеток с ис-пользованием инструментальных методов обследования.

Впервые в клиническом исследовании показано достоверное снижение выраженности явлений ХСН и повышение качества жизни в течение 6 месяцев после клеточной терапии аутологичными МККМ у больных с ИМ.

Практическая значимость исследования

Данные, полученные в исследовании, являются теоретической основой для применения кле-точных технологий в лечении инфаркта миокарда и хронической сер-дечной недостаточности.

Результаты исследования доказывают положительное влияние аутологичными МККМ на процессы регенерации и ремоделирования миокарда у больных, перенёсших ИМ, что позволяет считать их трансплантацию эффективным и безопасным методом клеточной кардиомиопластики.

На основании полученных результатов определены рекомендемые сроки и оптимальный метод трансплантации МККМ больным, перенёсшим острый ИМ.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Введение мононуклеаров красного костного мозга оказывает выраженное положительное влияние на морфофункциональное состояние миокарда в разные сроки наблюдения после коронароокклюзии.

2. Применение гомогенизата из красного костного мозга приводит к увеличению размера зоны повреждения и ухудшению функционального состояния миокарда на модели инфаркта миокарда у крыс.

3. Интракоронарная трансплантация аутологичных мононуклеаров больным, перенёсшим острый инфаркт миокарда, является безопасным методом лечения, не обладает кардиотоксическим эффектом, не оказывает влияния на электрическую стабильность миокарда в послеоперационном

периоде, развитие рестеноза и степень выраженности коронарной недостаточности, не повышает летальность по результатам 6-месячного наблюдения.

4. Клеточная кардиомиопластика уменьшает выраженность явлений хронической сердечной недостаточности в ближайшем и отдалённом послеоперационном периоде.

Апробация работы и публикации

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, из них 4 - в журналах, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.

Материалы диссертационного исследования доложены на студенческой научной конференции Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова (Санкт-Петербург, 2011); конкурсе научно-исследовательских разработок молодых ученых до 30 лет Санкт-Петербургского Государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова (Санкт-Петербург, 2011), Юбилейной научной конференции кафедры общей хирургии Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова (Санкт-Петербург, 2011); научно-практической интернет-конференции Проект 8\\/ог1с1 «Современные проблемы и пути их решения в науке, транспорте, производстве и образовании» (Украина, 2011); Международной научно-практической конференции, посвященной памяти профессора А.О. Шомахова «Вопросы и перспективы развития медицинской науки и практики на современном этапе» (Нальчк, 2012); II конгрессе кардиологов Кавказа (Нальчк, 2012).

Апробация диссертации состоялась на совместном заседании кафедр пропедевтики внутренних болезней, факультетскойтерапии и госпитальной терапии медицинского факультета Кабардино-Балкарского государственного университета им. Х.М. Бербекова.

Внедрение результатов работы в практику

Результаты исследования внедрены в учебный процесс и практическую работу кафедр факультетской терапии медицинского факультета ГБОУ ВПО «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова» Минздрава России и факультетской хирургии ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им И.П. Павлова» Минздрава России, Государственного бюджетного учреждения министерства здравоохранения Кабардино-Балкарской республики «Кардиологический центр».

Личный вклад соискателя

Автором сформулированы цель, задачи и дизайн исследования, проведён анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, обеспечены организация и реализация экспериментального и, совместно с коллегами, клинического этапов исследования. Диссертантом осуществлён анализ и интерпретация экспериментальных и клинических данных, выполнена математическая обработка результатов, их обсуждение, сформулированы выводы и практические рекомендации.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 22 отечественных и 93 иностранных источников. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 34 рисунками.

ГЛАВА 1

Современные достижения и перспективы в лечении острого ИМ и

профилактики ХСН

Сердечно - сосудистые заболевания являются одной из главных причин смертности населения, превосходя экзогенные причины и онкологические заболевания. Основное место среди заболеваний сердечно-сосудистой системы у взрослых занимает ишемическая болезнь сердца. Острый инфаркта миокарда проявляется гибелью кардиомиоцитов с последующим замещением некротизированного участка соединительной тканыо, что приводит к снижению насосной функции сердца и развитию сердечной недостаточности. Ведущими факторами возникновения ХСН после инфаркта миокарда являются размер инфарцированного миокарда и состояние коронарного русла [39]. Гибель кардиомиоцитов, артериол и капилляров в зоне инфаркта миокарда необратима, что в последующем ведёт к формированию рубцовой ткани [88], ремоделированию сердца и, в конечном итоге, приводит к возникновению ХСН. Современные методы лечения ХСН, направленные на улучшение прогноза болезни, основаны на предотвращении гибели кардиомиоцитов (некроза и апоптоза); улучшении насосной функции сердца (повышение сердечного выброса и ресинхронизация сердечной деятельности); уменьшении ремоделирования сердца (дилатации камер); увеличении жизнеспособного миокарда (выход кардиомиоцитов из спячки или создание новых клеток). Для воздействия на эти мишени в настоящее время используют широкий спектр лекарственных препаратов и немедикаментозных методов лечения.

1.1. Основные подходы в лечении ишемической болезни сердца и их

недостатки

Существует 3 принципиальных подхода в лечении ИБС: - Профилактика ИБС: а именно - изменение образа жизни, условий окружающей среды, социальных и экономические аспектов жизни, борьба с

курением табака, борьба с избыточной массой тела и сидячим, малоактивным образом жизни);

- трансплантация донорского сердца или механического искусственного

ЛЖ.

- Ограничение зоны повреждения и сохранение жизнеспособного миокарда.

Однозначно, ведущими по эффективности являются первый и второй виды лечения, однако профилактическое направление не получило широкого распространения в нашей стране, а трансплантация сердца ограничевается количеством доноров, материальными, этическими и юридическими аспектами. Таким образом, самый распространенный подход в терапии ИБС заключается в ограничении зоны повреждения, сохранении жизнеспособного миокарда и представлен медикаментозным и хирургическим методами.

Медикаментозная терапия, которая включает в себя ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента и В-адреноблокаторы, получила широкое распространение для лечения ИМ, профилактики и лечения ХСН вследствие ИМ, помимо интервенционных методов лечения ИМ. Применение иАПФ в ранние сроки после ИМ и длительное их использование статистически значимо уменьшают, смертность, а также риск развития серьёзных нефатальных сердечно-сосудистых осложнений ИМ [30].

Хирургическое лечение представлено следующими видами:

1. Аорто -, мамаро- коронарное шунтирование.

2. Стентирование коронарных артерий.

3. Трансмиокардиальная лазерная реваскуляризация.

Золотым стандартом в хирургическом лечении больных ИБС является аорто-коронарное шунтирование и транслюминальная баллонная ангиопластика. Однако у пациентов с конечной стадией поражения коронарных артерий, при диффузном изменении в сосудах или поражении дистального русла эти методы становятся неэффективными [56].

Трансмиокардиальная лазерная реваскуляризация - новый метод реваскуляризации миокарда, основанный на индукции каналов в миокарде с помощью лазера, что приводит к альтерации миокарда в зоне трансмиокардиального канала с последующей репарацией, рубцеванием в зоне канала и формированием в нем новых сосудов. Однако в исследованиях проведенных в 1997 г. Hartman R., Whittaker Р., продемонстрирован непродолжительный эффект от трансмиокардиальной лазерной реваскуляризации: ухудшение течения стенокардии, снижение перфузии миокарда и дисфункция ЛЖ.

Плановое коронарное шунтирование улучшает выживаемость в сравнении с медикаментозной терапией у больных с гемодинамически значимыми стенозами коронарных артерий. Риск наиболее высок в первые 48 часов ИМ и снижается в течение следующих 2 недель [35].

Пересадка сердца часто является единственным средством, позволяющим продлить жизнь и значительно улучшить её качество у больных с финальной ХСН. Нехватка донорских органов сильно ограничивает возможность применения этого способа лечения у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями [17].

Несмотря на многообразие методов лечения инфаркта миокарда, ХСН остается заболеванием с неуклонным прогрессивным характером течения. Именно поэтому существует необходимость в разработке принципиально новых, доступных и эффективных методов коррекции ХСН. В этой связи большие надежды возлагаются на меры по восполнению необходимого объема кардиомиоцитов и предотвращению интерстициального ремоделирования.

1.2. Альтернативные подходы в лечении ишемической болезни сердца

Разрабатываются два принципиально новых методов лечения ишемической болезни сердца: терапевтический ангиогенез и клеточная регенеративная терапия.

1.2.1. Терапевтический ангиогенез

Терапевтический ангиогенез - это метод клинического применения ангиогенных факторов роста или их генов для стимуляции развития кровеносных сосудов в ишемизированных тканях [96]. Принцип основан на использовании собственного резерва к регенерации. Истинный ангиогенез-формирование новых капилляров, ответвляющихся от уже существующих, что позволяет увеличить плотность капилляров и уменьшить сосудистое сопротивление в области ишемии; неоартериогенез - трансформация имеющихся артериол в небольшие мышечные артерии и ремоделирование предсуществующих коллатеральных сосудов. Но такой естественный компенсаторный процесс часто не способен адекватно обеспечивать потребность в кровоснабжении тканей при быстро нарастающей обструкции. Процесс неоваскуляризации тканей регулируется стимуляторами и ингибиторами ангиогенеза, а также взаимодействием эндотелиальных клеток и гладкомышечных клеток с внеклеточным матриксом через интегрины. В экспериментах было также доказано, что инсулинподобный фактор предотвращает апоптоз кардиомиоцитов и стимулирует восстановление левого желудочка. Кардиопротетктивным и антиапоптическим эффектом обладает эритропоэтин, рецепторы к которому обнаружены на кардиомиоцитах, эндотелиальных клетках и фибробластах сердца. Инсулиноподобный фактор роста также предотвращает гибель кардиомиоцитов и стимулирует восстановление левого желудочка [42].

Экспериментальное введение эритропоэтина животным с индуцированным ИМ в эндокардиальную зону значительно снижает уровень апоптоза кардиомиоцитов, снижает соотношение инфарцированого и неизмененного миокарда в пользу последнего, и улучшает сердечную функцию [33, 50].

Проведение кардиомиопластики возможно с помощью введения гранулоцитарного колонийстимулирующего фактора, вызывающего мобилизацию резидентных стволовых клеток костного мозга, которые затем

достигают поврежденного участка миокарда и стимулируют его восстановление [79].

Спонтанное увеличение содержания гранулоцитарного колонийстимулирующего фактора в сыворотке крови в ранний постинфарктный период приводит к мобилизации выхода CD34+ клеток с высоким уровнем экспрессии CXCR4- рецептора к SDF-1 (stromal derived factor) [49].

Нехватка кислорода в зоне пораженной ткани миокарда приводит к резкому повышению уровня экспрессии фактора HIF-1 (hypoxiainduciblefactor -1), который является транскрипционным фактором для гена SDF-1. Он активирует его экспрессию в кардиомиоцитах, эндотелиоцитах и фибробластах [55, 93]. Повышенный уровень SDF-1 является индикатором пораженной области миокарда и активно участвует в привлечении стволовых клеток в данный участок, т.е. является локальным медиатором адгезии. Самый высокий уровень концетрации SDF-1 в сыворотке крови наблюдается в первые 12-24 часа после инфаркта миокарда [48, 58]. В более поздние сроки его максимальную экспрессию можно определить в периинфарктной зоне [112].

Несмотря на положительные результаты экспериментов внутривенное или интракоронарное введение ангиогенных факторов роста и/или генетических конструкций может послужить причиной системных реакций, например роста сосудов в невыявленных опухолях, усилению атеросклеротического процесса, ведущего к тромботическим осложнениям.

Таким образом, терапевтический ангиогенез представляет собой современный и эффективный метод лечения ишемических состояний, однако непродолжительность эффекта и наличие осложнений ограничивает его применение и требует дальнейших исследований.

1.2.2. Клеточная регенеративная терапия

По определению Шевченко IO.JL, клеточная терапия - это метод, основанный на введении в организм пациента живых аутологичных,

аллогенных и ксеногенных клеток, подвергнутых предварительной обработке и/или модификации вне тела пациента, для направленного терапевтического воздействия на организм с целью изменения (модификации, улучшения, восстановления или замены утраченной) функции органа или ткани. Эффект от клеточной терапии реализуется через специфические (компенсация специализированных функций тканей и органов) и неспецифические механизмы (регуляция процессов репарации, трофическая функция, стимуляция ангиогенеза).

В эксперименте Jacobson в 1949 году была продемонстрирована возможность долгосрочного восстановления гемопоэза у млекопитающих, получивших летальную дозу облучения, с помощью трансплантации клеточной взвеси селезенки от здорового донора.

Большие успехи достигнуты в трансплантации островковых клеток поджелудочной железы больным инсулинзависимым сахарным диабетом. В работах Шумакова В.И. [27], клеточная терапия приводила к выраженному снижению потребности в экзогенном инсулине, стойкой регрессии симптомов ангио-, ретино-, нефро- и нейропатии. В экспериментальных и клинических исследований ряда авторов была проведена оценка применения различных популяций стволовых/прогениторных клеток для лечения хронических гепатитов, которая показала положительный эффект в терапии хронических заболеваний печени [6].

Результаты экспериментальных работ Викторова И.В., Сухих Г.Т., 2004г., показали, что трансплантированные клетки обладают способностью стимулировать регенерацию поврежденных и замещать погибшие нейроны и глиальные клетки.

Последние 3 года идея клеточной трансплантации успешно реализуется в лечении больных с ишемией нижних конечностей. После трансплантации различных типов клеток отмечалось улучшение кровотока в ишемизированной конечности, увеличение времени безболевой ходьбы, ускорение заживления трофических язв [27].

Таким образом, на сегодняшний день клеточная терапия с успехом применяется во многих областях медицины, позволяя улучшить течение заболевания и качество жизни пациентов.

1.3. Клеточная кардиомиопластика - новое направление в лечении острого ИМ и профилактики ХСН

Идеальная донорская клетка для воссоздания миокарда - это аутологичная клетка, которая может быть легко получена и доставлена в миокард, способна фиксироваться в месте повреждения, обладает хорошей способностью к репликации и низким риском неопластической трансформации и дифференцируется, в морфологически, биохимически и функционально нормальные КМЦ [86]. Данная клетка должна быть устойчива к ишемии и апоптозу и быть доступна в больших количествах для трансплантации [24].

Стволовые клетки представляют собой популяцию незрелых (недифференцированных) клеток, способных к долгосрочному самовоспроизведению (самообновлению) и дифференцировке в любой тканевой тип взрослого организма [118].

Использование стволовых клеток в терапии инфаркта миокарда

КЛАССИФИКАЦИЯ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПО РЕПИНУ B.C., 1998:

1. по источнику происхождения:

- эмбриональные

- взрослого организма (гемопоэтические, мезенхимальные)

2. по степени дифференцировки:

- тотипотентные (способны образовывать клетки любых типов)

- плюрипотентные (способны образовывать клетки многих типов)

- мультипотентные (способны образовывать клетки нескольких типов)

- унипотентные (способны образовывать клетки одного типа)

СВОЙСТВА СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК (РЕПИН B.C., 1998):

1. неспециализированы

2. способны к пролиферации

3. способны к дифференцировке

4. асимметрично делятся.

Клеточная кардиомиопластика

Среди возможных кандидатов для клеточной кардиомиопластики рассматривают:

1. эмбриональные стволовые клетки;

2. фетальные стволовые клетки:

а) фетальные кардиомиоциты;

3. соматические стволовые клетки и клетки-предшественницы:

а) эндотелиальные предшественницы,

б) клетки-сателлиты поперечно-полосатой мускулатуры,

в) мезенхимальные стволовые клетки,

г) гемопоэтические стволовые клетки,

д) эндогенные стволовые клетки сердца.

Стволовые клетки обладают целым рядом характерных особенностей: они способны к самовозобновлению и к мультилинейной дифференцировке. Между стволовой клеткой и ее терминальным потомством обычно имеется несколько промежуточных клеток с возрастающей способностью к дифференцировке. Существует понятие о примитивных стволовых клетках -эмбриональных, фетальных стволовых клетках и стволовых клетках пуповинной крови, которые обладают наибольшим потенциалом самообновления, дифференцировки (пластичности) и плюрипотентностью, однако их применение в клинической практике связано с большим количеством этических проблем [118]. Во взрослом организме выделяют постнатальные, или "взрослые", стволовые клетки, которые локализуются в различных органах, таких как костный мозг (мезенхимальные/стромальные стволовые клетки - МСК, эндотелиальные прогениторные клетки - ЭПК и гемопоэтические стволовые клетки - ГСК), жировая ткань и скелетная мускулатура (миобласты). Кроме того, в каждом органе и виде ткани существует свое собственное депо тканевых стволовых клеток (клеток-

предшественниц), которое активируется для дифференцировки при повреждении органа под действием определенных биологически активных веществ [76].

Использование фетальных кардиомиоцитов в терапии инфаркта

миокарда

Введение в периинфарктную зону фетальных кардиомиоцитов, получаемых из фетальной сердечной мышцы абортивного материала путем культивирования по стандартной методике [85] в экспериментах на лабораторных животных показали увеличение толщины инфарктной области, уменьшение дилатации ЛЖ и увеличение ФВ ЛЖ. Также клетки были способны экспрессировать кардиоспецифические белки [34]. В экспериментальных работах было показано, что фетальные кардиомиоциты обладают способностью к делению, и при трансплантации в область миокардиального рубца формируют нормально функционирующие вставочные диски с кардиомиоцитами реципиента [102, 47]. Особенностью фетальных кардиомиоцитов, трансплантированных в область поврежденного миокарда, является очень низкая выживаемость. Всего 15% от введенного клеточного пула сохраняют жизнеспопобность на 12 неделе [113].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Борукаев, Ислам Заудинович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Беленков Ю.Н. Неинвазивные методы диагностики ишемической болезни сердца. Кардиология. - 1996. №1. - С. 4-11.

2. Беленков Ю.Н., Агеев Ф.Т., Мареев В.Ю., Савченко В.Г. Мобилизация стволовых клеток костного мозга в лечении больных с сердечной недостаточностью. Протокол и первые результаты исследования РОТ ФРОНТ (ростовые факторы в лечении больных с хронической сердечной недостаточностью). Кардиология. -2003. № 3. - С. 7-12.

3. Белов A.A., Данилогорская Ю.А., Лакшин A.A. Основные методы функциональной диагностики в клинике внутренних болезней. М.: Издательский дом «Русский врач». - 2003. №106. - С. 56.

4. Борукаев И.З., Уметов М.А. Нарушения ритма сердца при интрамиокардиальном введении мононуклеаров костного мозга и цитокинов // Известия КБНЦ РАН. - Нальчк, 2011, № 6 (44). - С. 290-295.

5. Борукаев И.З., Уметов М.А. Влияние клеточной терапии на гемодинамические показатели при лечении инфаркта миокарда // Электронный журнал «Медицина и образование в Сибири». - Новосибирск, 2012, №2.

6. Борукаев И.З., Уметов М.А., Хараева З.Ф., Арамисова P.M., Хутуева С.Х. Клеточная кардиомиопластика - новейший метод лечения инфаркта миокарда // Известия КБГУ. - Нальчк, 2012, Том II, № 1. - С. 36-39.

7. Борукаев И.З., Уметов М.А. Сравнительная оценка динамики функционального состояния левого желудочка после интракоронарного введения мононуклеаров красного костного мозга в комплексной терапии больных с инфарктом миокарда // Профилактическая медицина. - Москва, 2012, №3(15). -С. 16-19.

8. Борукаев И.З., Уметов М.А. Оценка влияния клеточной кардиомиопластики на показатели насосной функции сердца после инфаркта // Сборник научных трудов Sworld. Научно — практическая интернет конференция «Современные проблемы и пути их решения в науке,

транспорте, производстве и образовании», электронный журнал. - 2011. УДК: 616.1/.4 19 ЦИТ: 411-0447. -С. 22-29.

9. Борукаев И.З., Уметов М.А. Сравнительная оценка влияния интрамиокардиального введения мононуклеаров красного костного мозга и цитокинов, факторов роста на морфо- гистологическое состояние миокарда на модели инфаркта миокарда // Сборник научных трудов Sworld. Научно -практическая интернет конференция «Современные проблемы и пути их решения в науке, транспорте, производстве и образовании», электронный журнал. -2011 УДК: 616.1/.4 19 ЦИТ: 411-0447. -С. 29-37.

10. Борукаев И.З., Уметов М.А. Оценка параметров гемодинамики при клеточной терапии // Материалы международной научно-практической конференции посвященные памяти профессора А.О. Шомахова «Вопросы и перспективы развития медицинской науки и практики на современном этапе». -Нальчк, 2012. - С. 31-34.

11. Борукаев И.З., Уметов М.А. Клеточная кардиомиопластика при инфаркте миокарда // Второй конгресс кардиологов Кавказа. - Нальчк, 2012. - С. 19-20.

12. Борукаев И.З., Уметов М.А. Клеточная терапия инфаркта миокарда // Второй конгресс кардиологов Кавказа. - Нальчк, 2012. - С. 21-22.

13. Гендлин Г.Е., Самсонова Е.В., Бухало О.В., Сторожаков Г.И. Методики исследования качества жизни у больных хронической недостаточностью кровообращения. Сердечная недостаточность. -2000. -Т. №1. -С. 44 - 54.

14. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М: Практика. -1999. -С. 459.

15. Гумерова A.A., Шафигулина А.К., Абдулкахов С.Р. Перспективы использования различных популяций стволовых/прогениторных клеток в клеточной терапии заболеваний печени. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. -2010. -Т. 5. №3. -С. 25.

16. Заволожин С.А., Миролюбова O.A., Голышев C.B., Заволожин A.C. Влияние отсроченной коронарной ангиопластики после тромболитической терапии на исход острого инфаркта миокарда. Кардиология. -2006. №10. -С. 8-12.

17. Казаков A.B., Мюллер П., Бельтрами А.П. и соавт. Стволовые клетки и регенерация миокарда человека. Кардиология. -2005. №11. -С. 65 -75.

18. Карпов P.C. (ред.) Коронарная и сердечная недостаточность. Томск: STT. -2005.-С. 716.

19. Карпов P.C. (ред.) Тромболитическая терапия острого инфаркта миокарда на догоспитальном этапе: методика, эффективность, защита миокарда. Методические рекомендации. Томск. -1999. -С. 34.

20. Маслов JI.H., Рябов В.В., Сазонова С.И. Клеточная трансплантация в лечении инфаркта миокарда: проблемы и перспективы. Вестн. трансплантол. и искусст. Органов. -2003. №4. -С 78 - 86.

22. Оганов Р.Г, Фомина И.Г. Кардиология: Руководство для врачей. М.: Медицина. -2004. -С. 848.

23. Рахмат-Заде Т.М., Скридлевская Е.А., Акчурин P.C. Костномозговые стволовые клетки в лечении ишемической болезни сердца. Кардиология. -2007. № 1.-С. 47-51.

24. Российские национальные рекомендации ВНОК и ОССН по диагностике и лечению ХСН (второйпересмотр). //М: ООООССН. - 2007.

25. Руда М.Я. О системе лечения больных с острым коронарным синдромом. Кардиологический вестник. - 2006. -Т. 2. №XIII. -С. 5-9.

26. Смолянинов А.Б., Лобзин Ю.В., Васильев В.Б., Козлов К.Л., Кириллов Д.А. Стволовые клетки в клеточной кардиомиопластике при ишемической болезни сердца. Трансфузиология. - 2006. № 2. -С. 4 - 38.

27. Современное состояние проблемы клеточной терапии сердечнососудистых заболеваний./Л.А. Бокерия, З.Б. Махалдиани, A.B. Сергеев//Литературный обзор в 3 частях. Бюллетень НЦССХ им. А.Н. Бакулева. РАМН. -2006. -№7. -С. 5.

28. Сыркин А.Л. Инфаркт миокарда. 2-е изд., перераб. и доп. М.: ООО «Медицинское информационное агентство». -1998. -С. 398.

29. Терещенко С.Н., Джаниани H.A. Хроническая сердечная недостаточность. Вопросы диагностики и лечения. Методические рекомендации. М.: РКИ' Северопресс. - 2004. -С. 48.

30. Терещенко С.Н., Жиров И.В. Место блокаторов в лечении больных, перенесших инфаркт миокарда. Кардиология. - 2006. №12. -С. 73 - 77.

31. Фейгенбаум X. Эхокардиография. Пер. с англ. под ред. Митькова В.В. М: Видар. -1999. -С. 512.

32. Шиллер Н., Осипов М.А. Клиническая эхокардиография. М.: Практика, -1993.-С. 347.

33. A novel protective effect of erythropoietin in the infarcted heart. /C.J. Parsa, A. Matsumoto, J. Kim et al.// J. Clin. Invest. -2003. Vol. 112. -P. 999-1007.

34. A pilot study to assess the feasibility of transplanting fetal cardiac tissue into pericardium of in- farcted rat heart./M. Yao, S.L. Hale, J.S. Dow et al// Cardiac Vase. Regen. -2000. -Vol. 1. -P. 221-227.

35. Antman E.M., Anbe D.T., Armstrong P.W. et al. ACC/AHA Guidelines for management of patients with ST-elevation myocardial infarction. Circulation. -2004. -Vol. 110.-P 82-292.

36. Assmus В., Schachinger V., Teupe C. et al. Transplantation Of Progenitor Cells And Regeneration Enhancement in Acute Myocardial Infarction (TOPCARE- AMI) Circulation. - 2002. -Vol. 106. -P. 3009 - 3017.

37. Assmuss B, Honold J, Schachinger V et al. Transcoronary transplantation of progenitor cells after myocardial infarction. N Engl J Med. -2006. -Vol 355. -P 1222-1232.

38. Autologous intramyocardial injection of cultured skeletal muscle-derived stem cells in patients with non-acute myocardial infarction. /J. Herreros, F. Prosper, A. Perez et al.// Eur. Heart. J. -2003. -Vol. 24. -P. 2012-2020.\79\

39. Beltrami AP, Urbanek K, Kajstura J et al. Evidence that human cardiac myocytes divide after myocardial infarction. N Engl J Med. -2001. -Vol. 344. -P. 1750- 1757.

40. Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow. Scand.J.Clin.Lab.Investig. -1968. .-Vol.21. -P. 1-9.

41. Can stem cells mend a broken heart? / S. Davani, F. Deschaseaux, D. Chalmers et al.// Cardiovasc. Res. - 2005; -Vol. 65. -P. 305-316.

42. Cardiac specific IGF-1 expression attenuates dilated cardiomyopathy in tropomodulin-overexpressing transgenic mice. /S. Welch, D. Plank, S. Witt et al.// Circ. Res. -2002. -Vol. 90. -P. 641-648.

43. Cardiomyocytes grafting for cardiac repair: graft cell death and antideath strategies./M. Zhang, D. Methot, V. Poppa et al.//J. Mol. Cell. Cardiol. -2001. -Vol. 33.-P. 907-921.

44. Caspi O., Gepstein L. Stem cells for myocardial repair. Eur Heart J. - 2006; -Vol. 8, Suppl. E: E43 - E54.

45. Characterization and functionality of cell surface molecules on human mesenchymal stem cells./M.K. Majumdar, M. Keane-Moore, D. Buyaner et al.// J Biomed Sei. -2003. -Vol. 10. -P. 228-241.

46. Chien KR. Stem cells: lost in translation. Nature 2004; 428: 607-608.

47. Comparison of the effects of fetal cardiomyocyte and skeletal myoblast transplantation on postinfarction left ventricular fiinction./M. Scorcin, A. Hagege, J.T. Vilquin et al.//J. Thorac. Cardiovasc. Surg. -2000. -Vol. 119. -N. 6. -P. 11691175.

48. Crucial role of stromal cell-derived factor-15 in neointima formation after vascular injury in apolipoprotein-E- deficient mice. /A. Schober, S. Knarren, M. Lietz et al.// Circulation. -2003. -Vol. 108. -P. 2491-7.

49. Endogenous G-CSF and CD34+ cell mobilization after acute myocardium infarction. / A.M. Leone, S. Rutello, G. Bonanno et al.// Int. J. Cardiol. In Press. -2005.

50. Erythropoietin reduces myocardial infarction and left ventricular functional decline after coronary ligation in rats. /C. Moon, M. Krawczyk, D. Ahn et al.//Proc. Natl. Acad. Sei. USA. -2003. -Vol. 100. -P. 11612-7.

51. Fernandez-Aviles F, San Roman JA, Garcia Frade J Experimental and clinical regenerative capability of human bone marrow cells after myocardial infarction. Circ.Res. -2004. -Vol. 95. -P. 742-748.

52. Fuchs S, Baffour R, Zhou YF, et al. Transendocardial delivery of autologous bone marrow enhances collateral perfusion and regional function in pigs with

chronic experimental myocardial ischemia. J Am Coll Cardiol. - 2001. -Vol. 37. -P. 1726- 1732.

53. Geng YJ. Molecular mechanisms for cardiovascular stem cell apoptosis and growth in the hearts with atherosclerotic coronary disease and ischemic heart failure. Ann NY Acad Sci. -2003. -Vol. 1010. -P. 687 - 697.

54. Hirsh J., Raschke R., Warkentin T.E. et al. Heparin: mechanism of action, pharmacokinetics, dosing considerations, monitoring, efficacy, and safety. Chest -1995.-Vol. 108.-P. 258S-275S.

55. Homing to hypoxia: HIF-1 as a mediator of progenitor cell recruitment to injured tissue. /D.J. Ceradini, G.C. Gurther// Trends Cardiovasc. Med. -2005. -Vol. 15.-P. 57-63.

56. Hofmann M, Wollert K, Meyer G. Monitoring of Bone Marrow Cell Homing Into the Infarcted Human Myocardium. Circulation. -2005. -Vol. 111. -P. 2198 -2202.

57. Implantation of bone marrow mononuclear cells into ischemic myocardium enhances collateral perfusion and regional function via side supply of angio- blasts, angiogenic ligands, and cytokines./H. Kamihata, H. Matsubara, T. Nishiue et al.//Circulation. -2001. -Vol. 104. -P. 1046-1052.

58. Increased circulating hematopoietic and endothelial progenitor cells in the early phase of acute myocardial infarction. /M. Massa, V. Rosti, M. Ferrario et al. //Blood.- 2005.-Vol. 105[1].-P. 199-206.

59. JanssensS., Dubois C., Boogaerts M. et al. Autologous bone marrow-derived stem-cell transfer in patients with ST-segment elevation myocardial infarction. Lancet. -2006. -Vol. 367. -P. 141-148.

60. Kang HJ, Kim HS, Zhang SY, et al. Effects of intracoronary infusion of peripheral blood stem cells mobilised with granulocyte-colony stimulating factor on left ventricular systolic function and restenosis after coronary stenting in myocardial infarction: the MAGIC cell randomized clinical trial. Lancet. -2004; . -Vol. 363.-P. 751 -756.

61. Kamihata H, Matsubara H, Nishiue T. et al. Improvement of collateral perfusion and regional function by implantation of peripheral blood mononuclear

cells into ischemic hibernating myocardium. Arterioscler Thromb Vase Biol. -2002.-Vol. 22.-P. 1804-10.

62. Klug MG, Soonpaa MH, Koh GY, Field LJ. Genetically selected cardiomyocytes from differentiating embronic stem cells form stable intracardiac grafts. J Clin Invest. -1996. -Vol. 98. -P. 216 - 224.

63. Kocher AA, Schuster MD, Szabolcs MJ, et al. Neovascularization of ischemic myocardium by human bone marrow derived angioblasts prevents cardiomyocyte apoptosis, reduces remodeling and improves cardiac function. Nat Med. -2001. -Vol. 7.-P. 430-436.

64. Kuethe F, Richartz BM, Kasper C, et al. Autologous intracoronary mononuclear bone marrow cell transplantation in chronic ischemic cardiomyopathy in humans. Int J Cardiol. - 2005. -Vol. 100. -P. 485 - 491.

65. Leor J, Patterson M, Qumones MJ et al. Transplantation of Fetal Myocardial Tissue Into the Infarcted Myocardium of Rat A Potential Method for Repair of Infarcted Myocardium? Circulation. - 1996. -Vol. 94 . -P. 11332 -11336.

66. Leri A, Kajstura J, Anversa P. Cardiac stem cells and mechanisms of myocardial regeneration. Physiol Rev. -2005. -Vol. 85. -P. 1373 - 1416.

67. Li R.K., Mickle D.A., Weisel R.D. et al. Optimal time for cardiomyocyte transplantation to maximize myocardial function after left ventricular injury. Ann. Thorac. Surg. -2001. -Vol. 72 (6). -P. 1957 - 1963.

68. Li RK, Jia ZQ, Weisel RD et al. Smooth Muscle Cell Transplantation into Myocardial Scar Tissue Improves Heart Function. J Mol Cell Cardiol. -1999. -Vol. 31.-P. 513-522.

69. Limana F, Urbanek K, Chimenti S, et al. bcl-2 overexpression promotes myocyte proliferation. Proc Natl Acad Sei USA. -2002. -Vol. 99. -P. 6257 -6262.

70. Limbourg FP, Drexler H. Bone marrow stem cells for myocardial infarction: effector or mediator? Circ Res. -2005. -Vol. 96. -P. 6-8.

71. Lin GS, Lu JJ, Jiang XJ et al. Autologous transplantation of bone marrow mononuclear cells improved heart function after myocardial infarction. Acta Pharmacol Sin. -2004 Jul. -Vol. 25(7) . -P. 876 - 86.

72. Lunde K., Solheim S., Aakhus S. et al. Intracoronary Injection of Mononuclear Bone Marrow Cells in Acute Myocardial Infarction. N Engl J Med. -2006. -Vol. 355. -P. 1199 - 1209.

73. Mangi AA, Noiseux N, Kong D, et al. Mesenchymal stem cells modified with Akt prevent remodeling and restore performance of infarcted hearts. Nat Med. -2003.-Vol. 9.-P. 1195- 1201.

74. Marat T, Doulet LT. Revascularization in ischemic heart with autologous bone marrow transplantation. Jpn J Cardiovasc Surg. -1997; 26: 248 - 253.

75. Mesenchymal stem cells and their potential as cardiac therapeutics./M.F. Pittenger,B.J. Martin//Circ Res. -2004. -Vol. 95. -P. 9-20.

76. Mesenchymal Stem Cells: Future Source for Reparative Medicine. /R. Bhatia, J.M. Hare // Congest Heart Fail. -2005. -Vol. 11. -N. 2. -P. 87-91.

77. Meyer G.P., Wollert K.C., Lötz J., et al. Intracoronary Bone Marrow Cell Transfer After Myocardial Infarction. Eighteen Months' Follow-Up Data From the Randomized, Controlled BOOST (BOne marrOw transfer to enhance ST- elevation infarct regeneration) Trial. Circulation 2006; 113:1287 - 1294.

78. Migration of muscle cells./D.J. Watt, J. Karasinski, J. Moss et al.//Nature. -1994. -Vol. 368. -P. 406-408.

79. Mobilized bone marrow cells repair the infracted heart, improving function and survival./ D. Orlic, J. Kajstura, S. Chimenty et al.// Proc. Natl. Acad. Sei. USA. -2001.-Vol. 98.-P. 10344-9.

80. Montalescot G, Barragan P, Wittenberg O, et al. Platelet glycoprotein Ilb/IIIa inhibition with coronaiy stenting for acute myocardial infarction. N Engl J Med. -2001.-Vol. 344.-P. 1895-1903.

81. Muller-Ehmsen J., Peterson K.L., Kedes L. et al. Rebuilding a damaged heart: Long-term survival of transplanted neonatal rat cardi- omyocytes after myocardial infarction and effect on cardiac function. Circulation. -2002. -Vol. 105. -P. 1720—1726.

82. Murry CE, Soonpaa MH, Reinecke H, et al. Haematopoietic stem cells do not transdifferentiate into cardiac myocytes in myocardial infarcts. Nature. -2004. -Vol. 428.-P. 664-668.

83. Myoblast cell grafting into heart muscle: cellular biology and potential application.//?.D. Kessler, B. Byrne//. J.Annu.Rev. Physiol. -1999. -Vol. 61. -P. 219-242.

84. Myoblast transplantation for heart failure. /P. Menasche, A. Hagege, M. Scorsin. et al.// Lancet -2001. -Vol. 357. -P. 279-280.

85. Myoblast transplantation: feasibility, safety and efficacy ./P. Menasche// Ann Med. -2002. -Vol. 34. -P. 314—315.

86. Nadal-Ginard B., Kajstura J., Leri A., Anversa P. Circulation Research. -2003-Vol. 92.-P. 139-150.

87. Nemkov A. S., Yakovlev D. A., Borisov A. I., Beliy S. A. Hibernating and stunning of myocardium are the special forms of myocardial existence due to coronary artery desease Part II. Stunning. - 2011. - N 3. -Vol. 39. -P. 4-9

88. Nygren JM, Jovinge S, Breitbach M, et al. Bone marrow-derived hematopoietic cells generate cardiomyocytes at a low frequency through cell fusion, but not transdifferentiation. Nat Med. -2004-Vol. 10. -P. 494 - 501.

89. Orlic D, Kajstura J, Chimenti S, et al. Bone marrow cells regenerate infarcted myocardium. Nature.-2001.-Vol. 410.-P. 701-705.

90. Pagani FD, DerSimonian H, Zawadzka A, et al. Autologous skeletal myoblast transplanted to ischemia-damaged myocardium in humans. J Am Coll Cardiol. -2003.-Vol. 41.-P. 879- 888

91. Partial left ventriculoctomy to treat end-stage heart disease. /R.J. Batista, J. Verde, P. Nery, et al.// Ann. Jhorac. Surg. -1997; -Vol. 64[3], -P. 634-638.

92. Penicka M, Widimsky P, Kobylka P, Kozak T, Lang O. Early tissue distribution of bone marrow mononuclear cells after transcoronary transplantation in a patient with acute myocardial infarction. Circulation. -2005. -Vol. 112. -P. e63 - e65.

93. Peritransplant ischemic injury is associated with up regulation of SDF-1. /M.H. Yamani, N.B. Ratliff, DJ. Cook et al.// J. Am. Coll. Cardiol. -2005. -Vol. 46[6]. -P. 1029-1035.

94. Pfeffer MA, Braunwald E, Moye LA, et al. Effect of Captopril on mortality and morbidity in patients with left ventricular dysfunction after myocardial infarction: results of the survival and ventricular enlargement trial: the SAVE Investigators. N Engl J Med. -1992. -Vol. 327. -P. 669 - 677.

95. Profoundly reduced neovascularization capacity of bone marrow mononuclear cells derived from patients with chronic ischemic heart disease./C. Heeschen, R. Lehmann, J. Honold et al.//Circulation. -2004. -Vol. 109. -P. 1615-1622.

96. Schachinger V., Erbs S., Elsasser W., et al. Improved clinical outcome after intracoronary administration of bone-marrow-derived progenitor cells in acute myocardial infarction: final 1-year results of the REP AIR-AMI trial. Eur Heart J. -2006. -Vol. 27(23). -P. 2775 -2783.

97. Schachinger V., Erbs S., Elsasser W., et al. Intracoronary Bone Marrow-Derived Progenitor Cells in Acute Myocardial Infarction. N Engl J Med. -2006. -Vol. 355.-P. 1210-1221.

88. Schiller NB, Shah PM, Crawford M et al. Recommendations for quantitation of the left ventricle by two-dimensional echocardiography. J Am Soc Echocardiogr -1989. -Vol. 2. -P. 356-368.

99. Setoguchi M, Leri A, Wang S, et al. Activation of cyclins and cyclin-dependent kinases, DNA synthesis, and myocyte mitotic division in pacing-inducing heart failure in dogs. Lab Invest. -1999. -Vol. 79. -P. 1545 - 1558.

100. Siminiak T, Fiszer D, Jerzykowska 0, et al. Percutaneous trans-coronary-venous transplantation of autologous skeletal myoblasts in the treatment of postinfarction myocardial contractility impairment: the POZNAN trial. Eur Heart J. -2005.-Vol. 26.-P. 1188 - 1195.

101. Soonpaa MH, Koh GY, Klug MG et al. Formation of nascent intercalated disks between grafted fetal cardiomyocytes and host myocardium. Science. -1994. -Vol. 264.-P. 98-101.

102. Stable fetal cardiomyocytes grafts in the hearts of dystrophic mice and dogs. //G.Y. Koh, M.H. Soonpaa, M.G. Klug et al.//J. Clin. Invest. -1995. -Vol. 96. -P. 2034-2042.

103. Steen R, Morkrid L, Tjonnfjord GE, Egeland T. c-kit Ligand combined with GM-CSF and/or IL-3 can expand CD34+ hematopoietic progenitor subsets for several weeks in vitro. Stem Cells. -1994. -Vol. 12. -P. 214 - 224.

104. Stem cell transplantation for the treatment of myocardial infarction. /W. Dai, S. Hale, R. Kloner// Transpllmmunol. -2005: In Press.

105. Stem cells in adult skeletal muscle./A. Asakura// Trends Cardiovasc. Med. -2003.-Vol. 13.-P. 123-128.

106. Stem-cell transplantation in myocardial infarction: a status report. / M.S. Lee, R.R. Makkar// Ann. Intern. Med. -2004. -Vol.140 [9]. -P. 729-737.

107. Stone GW, Grines CL, Cox DA, et al. Comparison of angioplasty with stenting, with or without abciximab, in acute myocardial infarction. N Engl J Med. -2002. -Vol. 346. -P. 957 - 966.

108. Strategies for directing the differentiation of stem cells into the cardiomyogenic lineage in vitro./ B.C. Iieng, K.H. Husnain, Sim E Kwang-Wei. et al.// Cardiovasc. Res. -2004; -Vol. 62. -P. 34-42.

109. Strauer B, Brehm M, Zeus T, et al. Regeneration of human infarcted heart muscle by intracoronary autologous bone marrow cell transplantation in chronic coronary artery disease. J Am Coll Cardiol. -2005. -Vol. 46. -P. 1651-1658.

110. Strauer B., Kornowski R. Stem Cell Therapy in Perspective. Circulation. -2003.-Vol. 107. -P.929 -934.

111. Strauer B.E., Brehm M., Zeus T. et al. Repair of infracted myocardium by autologous intracoronary mononuclear bone marrow cell transplantation in humans. Circulation. -2002. -Vol. 106. -P. 1913 - 1918.\121\

112. Stromal cell-derived factor-15 plays a critical role in stem cell recruitment to the heart after myocardial infarction but is not sufficient to induce homing in the absence of injury. /J. Abbott, Y. Huang, D. Liu et al.//Circulation. -2004. -Vol. 110.-P. 3300-5.

113. Survival and development of neonatal rat cardiomyocytes transplanted into adult myocardium. /J. Muller-Ehmsen, P. Whittaker, R.A. Kloner et al.//J. Mol. Cell Cardiol. -2002. -Vol. 34. -P. 107-116.

114. Taylor DA, Atkins BZ, Hungspreugs P et al. Regenerating functional myocardium: Improved performance after skeletal myoblast transplantation. Nature Medicine.-1998.-Vol. 4.-P. 929-933.

115. Thum T, Bauersachs J, Poole-Wilson PA, Volk HD, Anker SD. The dying stem cell hypothesis: immune modulation as a novel mechanism for progenitor cell therapy in cardiac muscle. J Am Coll Cardiol. -2005. -Vol. 46. -P. 1799 - 1802.

116. TomitaS, Li RK, Weisel RD et al. Autologous transplantation of bone marrow cell inproves damaged heart function. Circulation. -1999. —Vol. 100. -P. 24711-256.

117. Transdifferentiation of human peripheral blood CD34+-enriched cell population into car- diomyocytes, endothelial cells, and smooth muscle cells in vivo./E.T.H. Yeh, S. Zhang, H.D. Wu et al.//Circulation. -2003. -Vol. 108. -P.2070-2073.

118. Transendocardial autologous bone marrow mononuclear cell injection in ischemic heart failure: postmortem anatomicopathologic and immunohis-tochemical findings. /HF. Dohmann, E.C. Perin, C.M. Takiya et al.//Circulation. -2005. -Vol. 112. -N. 4. -P. 521-526.

119. Transplantation of embryonic stem cells improves cardiac function in postinfarcted rats./J.Y. Min, Y. Yang, K.L. Converso et al.//J ApplPhysiol. -2002. -Vol. 92. -P. 288—296.

120. Transplantation of neonatal cardiomyocytes after permanent coronary artery occlusion increases regional blood flow of infarcted myocardium./T. Reffelmann, J.S. Dow, W. Dai et al.//J Mol Cell Cardiol. -2003. -Vol. 35. -P. 607—613.

121. Villa-diaz I.G., Brown S.E., Krebsbach P.H., Liu Y. Derivation of mesenchymal stem cells from human induced pluripotent stem cells cultured on synthetic substrates // Stem Cells.. -2012. -Vol. 30. -N. 6. -P. 1174-1181.

122. Vulliet P.R., Greeley M., Halloran S.M., et al. Intracoronary arterialinject tion of mesenchymal stromal cells and microinfarction in dogs. Lancet. -2004. -Vol. 363.-P. 783-784.

123. Wagner G, Freye C, Palmari S et al. The evaluation of a QRS scoring system for estimating myocardial infarct size. Circulation. -1982. -Vol. 65: 342 - 347.

124. Yoon Y.-S., Park J.-S., Tkebuchava T., et al. Unexpected Severe Calcification After Transplantation of Bone Marrow Cells in Acute Myocardial Infarction. Circulation.-2004.-Vol. 109.-P. 3154-3157.

125. Zhang S, Guo J, Zhang P. Long-term effects of bone marrow mononuclear cell transplantation on left ventricular function and remodeling in rats. Life Sci. -2004. -Vol. 74(23). -P. 2853 - 64.