Особенности иммунного статуса и апоптоз лимфоцитов при опийной наркомании тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Ризберг, Виталий Юрьевич

• Ризберг, Виталий Юрьевич
• кандидат медицинских наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Ризберг, Виталий Юрьевич

Список сокращений использованных в диссертации.

Введение.

1.Обзор литературы.

1.1. Влияние опиатов на механизмы неспецифической резистентности.

1.2. Влияние опиатов на Т- и В-системы иммунитета.

1.3. Роль апоптоза в регуляции функций иммунной системы и апоптоз при опийной наркомании.

2. Материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика групп обследуемых.

2.2. Иммунологические методы исследования.

2.2.1. Процедура взятия крови.

2.2.2. Оценка субпопуляционной структуры лимфоцитов.

2.2.3. Оценка функциональной активности лимфоцитов.

2.2.4. Оценка апоптоза лимфоцитов.

2.2.5. Определение содержания сывороточных иммуноглобулинов.

2.2.6. Оценка фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов.

2.2.7.0ценка цитокинового статуса.

2.2.8. Прочие методы исследования.

2.3. Методы статистической обработки данных.

3. Результаты исследования и их обсуждение.

3.1. Структура гемограммы и функциональная активность нейтрофилов у больных опийной наркоманией.

3.2. Субпопуляционная структура лимфоцитов у больных опийной наркоманией.

3.3. Пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови у больных опийной наркоманией.

3.4. Содержание сывороточных иммуноглобулинов у больных опийной наркоманией.

3.5. Цитокиновый статус у больных опийной наркоманией.

3.6 Экспрессия Рав-рецептора (СБ95) и Баз-лиганда на лимфоцитах периферической крови у больных опийной наркоманией.

3.7. Спонтанный и активационный апоптоз лимфоцитов периферической крови и активность ключевых генов-регуляторов апоптоза у больных опийной наркоманией.

3.8. Особенности иммунного статуса опийных наркоманов в зависимости от наличия клинически выраженной вторичной иммунологической недостаточности (ВИН).

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности иммунного статуса и апоптоз лимфоцитов при опийной наркомании»

Актуальность исследования.

В настоящее время накоплен обширный материал, свидетельствующий о грубых нарушениях иммунологической реактивности у больных, страдающих опийной наркоманией. Длительное употребление опийных наркотоксикантов приводит к формированию иммунодефицита, который сопровождается чрезвычайно высоким риском развития бактериальных инфекций, вызываемых как патогенной, так и оппортунистической микрофлорой, вирусных инфекций, течение которых приобретает у наркоманов нередко «фатальный характер» (Rouveix В., 1992; Roy S., Loh Н., 1996; EisensteinT.,HiburgerM., 1998;NunezG.,UrzuaJ., 1999). Отмечено (Bewley Т. et al., 1968), что чаще всего причиной смерти опийных наркоманов являются гноеродные инфекции (39%), гепатиты (29%) и передозировка наркотика (17%). В настоящее время в связи с массивной экспансией вируса иммунодефицита человека к этому «списку» прибавилась ВИЧ-инфекция, частота которой максимальна в среде наркоманов. В этом случае фактором риска являются не только использование нестерильных шприцев и игл, но и особенности нарушений иммунитета, «облегчающие» инфицирование и способствующие более быстрому размножению вируса в организме, в частности С04+-лимфоцитоз (Rouveix В., 1992). Несмотря на интенсивные исследования, механизм нарушений неспецифических и специфических механизмов иммунитета при опийной наркомании и при длительном введении экзогенных опиатов экспериментальным животным до конца не ясен. Характер воздействия опийных наркотоксикантов на иммунные процессы поливалентен и обусловлен как прямым воздействием на опиатэргические механизмы, так и опосредованным через ЦНС влиянием, в том числе так называемым «химическим стрессом» (Carr D. et al., 1995; Van der Laan J. et al., 1995).

В последние годы резко возрос интерес к роли апоптоза в регуляции иммунных функций. Апоптоз - естественный закономерный процесс рецеп-торно-опосредованной, генетически запрограммированной, физиологически активной гибели клетки, в настоящее время рассматривается как один из ключевых механизмов под держания иммунного гомеостаза - селекции лимфоцитов в онтогенезе, регуляции силы и продолжительности иммунного ответа, реализации механизмов цитолиза, иммунопривилегированности и т.д. (А. А. Ярилин, 1996; Аббасова С.Г. и соавт., 1999). Сформулирована концепция «апоптотического иммунодефицита» (А.Н. Чередеев, Л.В. Коваль-чук, 1997; Л.В. Ковальчук, А.Н. Чередеев, 1998; Kovalchuk L., Cheredeev А., 1999). Недостаточность апоптотической элиминации может лежать в основе ряда аутоиммунных и лимфопролиферативных процессов, преобладание «негативной активации» - апоптоза может лежать в основе некоторых первичных иммунодефицитов и индуцированных различными факторами вторичных иммунодефицитных состояний. Избыточный апоптоз лимфоцитов, как субстрат формирования иммунодефицита, описан при туберкулезе легких (А.Г. Хоменко и соавт., 1996; Р.Ш. Sibiryak S. et al., 1999; Юсупова и соавт., 2000), гнойно-септических процессах (Е.Р. Черных и соавт., 1999), ВИЧ-инфекции (Bohler Т. et al., 1997), воздействии ксенотоксических факторов (Sibiryak S. et al., 1998).

Апоптоз лимфоцитов при воздействии морфина впервые был описан в 1993 году (Fuchs В., Pruett S., 1993). За прошедший период времени в доступной литературе появились лишь единичные работы, свидетельствующие об активации апоптоза лимфоцитов и макрофагов при длительном воздействии опиатов, и высказано предположение о возможной связи этого факта с высоким риском бактериальных инфекций и тяжелым течением ВИЧ-инфекции (Ыа1г М. е1 а!., 1997; 8^Иа1 Р. е1 а1., 1999,2000). Можно полагать, что исследования в этом направлении углубят понимание механизмов формирования иммунологической недостаточности у наркоманов и позволят разработать новые подходы к иммунокоррекции и, возможно, фармакотерапии лекарственной зависимости.

Цель исследования.

Оценить особенности нарушений иммунного статуса и изучить апоптоз лимфоцитов у больных опийной наркоманией.

Задачи исследования:

1. изучить иммунный статус опийных наркоманов, включая субпопуля-ционную структуру лимфоцитов, их функциональную активность, уровень сывороточных иммуноглобулинов, цитокиновый статус, состояние фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов.

2. изучить экспрессию ассоциированных с апоптозом ИаБЯ и РазЬ у больных опийной наркоманией в сравнении со здоровыми донорами.

3. изучить апоптоз лимфоцитов периферической крови у больных опийной наркоманией.

4. охарактеризовать особенности иммунного статуса и апоптоза лимфоцитов у опийных наркоманов в зависимости от наличия или отсутствия клинически выраженной вторичной иммунологической недостаточности.

Научная новизна.

В работе реализован патогенетический принцип оценки иммунного статуса у больных опийной наркоманией II стадии. Выявлены характерные особенности нарушений субпопуляционной структуры лимфоцитов, их функциональной активности, цитокиновый дисбаланс, нарушение фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов. Этот комплекс нарушений позволяет охарактеризовать иммунный статус данных больных, как состояние патологической активации иммунной системы в сочетании с функциональной недостаточностью неспецифических и специфических систем имму-норезистентности.

Впервые изучена экспрессия ассоциированных с апоптозом РаэЯ и РавЬ на лимфоцитах периферической крови при опийной наркомании. Обнаружено, что при опийной наркомании наблюдается гиперэкспрессия РавЯ и тенденция к увеличению экспрессии РавЬ, а также нарушение нормального соотношения содержания РавЯ+ и РаБЬ+ лимфоцитов с основными субпопуляциями лимфоцитов, лимфоцитов, экспрессирующих активационные антигены и интегральный белок митохондрий - продукт антиапоптогена Вс1-2. Гиперэкспрессия ассоциированных с апоптозом мембранных гликопротеи-нов отражает общую тенденцию к активации и повышенную апоптотичес-кую готовность лимфоцитов.

Впервые выявлено, что в периферической крови опийных наркоманов повышено содержание лимфоцитов с морфологическими, тинкториальны-ми признаками апоптоза, а также отмечено повышение активности одного из ключевых ферментов, участвующих в реализации программы апоптоза -каспазы 3. Обнаружено, что Т-лимфоциты опийных наркоманов при активации через Т-клеточный рецептор характеризуются повышенной готовностью к апоптозу, но резистентностью к проапоп -огенному эффекту глюко-кортикостероидов.

Впервые показано, что преобладание процессов апоптоза наиболее характерно для опийной наркомании, осложненной наличием инфекционного иммунопатологического синдрома, т.е. вторичной иммунологической недостаточности.

Научно-практическая значимость работы.

Полученные результаты расширяют представления о механизме и характере иммунотоксиче ¿кого действия опийных наркотоксикантов, что открывает перспективу разработки новых подходов к иммунокорригирую-щей терапии и, возможно, оптимизации терапии абстинентного синдрома.

Внедрение результатов исследования.

Материалы диссертационной работы включены в учебный процесс при чтении лекций врачам по курсу иммунологии на кафедре глазной и пластической хирургии с курсом иммунологии института последипломного образования Башкирского государственного медицинского университета (БГМУ), в учебный процесс курса иммунологии БГМУ, кафедры психиатрии и наркологии БГМУ. Разработанные автором методические подходы реализованы в клинико-диагностической работе отдела клинической и экспериментальной иммунологии и ВИЧ-диагностики Всероссийского центра глазной и пластической хирургии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. характер нарушений иммунного статуса при опийной наркомании II стадии отражает состояние патологической активации иммунитета на фоне функциональной недостаточности специфических и неспецифических механизмов иммунореактивности.

2. лимфоциты периферической крови больных опийной наркоманией характеризуются гиперэкспрессией ассоциированных с апоптозом FasR и FasL, а также повышенным апоптозом как непосредственно в организме наркоманов, так и при специфической активации в витральной системе. Механизмы интенсификации апоптоза у опийных наркоманов полимодальны.

3. избыточный апоптоз лимфоцитов при опийной наркомании может являться субстратом развития вторичной иммунологической недостаточности.

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены на научных конференциях, в том числе и международных: III и IV научных конференциях с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге - 2000» (Санкт-Петербург,

2000); «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге -2001» (Санкт-Петербург,

2001), III съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Сочи, 2000); 4-th Xenobiotic Metabolism and Toxicity Workshop (Antalya, Turkey, 2000), 4-м Конгрессе РААКИ (Москва, 2001); 11 -м Международном Конгрессе иммунологов ICI-2001 (Stokcholm, 2001); 1-й конференции иммунологов Урала (Екатеринбург, 20001). Фрагменты работы неоднократно докладывались на заседаниях Башкирского научного общества иммунологов (2000,2001).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 10 работ, из них 2 работы в международной печати.

Объем и структутра диссертации.

Диссертационная работа изложена на 129 страницах, иллюстрирована 13 таблицами и 15 рисунками. Она состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы, посвященной результатам собственных исследований и их обсуждению, заключения, выводов, библиографического списка, включающего 230 литературных источников.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Ризберг, Виталий Юрьевич

выводы

1. Иммунологические нарушения у опийных наркоманов в период раннего абстинентного синдрома можно рассматривать как патологическую активацию иммунной системы, сопряженную с функциональной неполноценностью неспецифических и специфических механизмов иммунореактив-ности.

2. Наиболее типичными нарушениями иммунного статуса опийных наркоманов являются:

Т-лимфоцитоз с явлением субпопуляционного дисбаланса с преобладанием СБ8+ Т-лимфоцитов, В-лимфоцитоз, ЫК-лимфоцитопения, гиперэкспрессия антигенов ранней и поздней активации; угнетение пролиферативного ответа лимфоцитов при их стимуляции лектинами и, в большей степени, опосредованной через Т-клеточный рецептор; явления дисиммуноглобулинемии с гипериммуноглобулинемией класса М, гипоиммуноглобулинемией по классу в; нарушения цитокинового баланса с увеличением содержания про-воспалительных и Т-клеточных цитокинов в сыворотке, но депрессией индуцированного синтеза цитокинов.

3. В периферической крови опийных наркоманов выявлено значительное увеличение содержания лимфоцитов, экспрессирующих ассоциированных с апоптозом РавЯ, а также изменение соотношения РавИ/ и РаэЬ+ лимфоцитов с другими субпопуляциями лимфоцитов и с содержанием Ьс1-2+ лимфоцитов, свидетельствующее о состоянии «повышенной апоп-тотической готовности».

4. В периферической крови опийных наркоманов выявлено увеличение содержания лимфоцитов с морфологическими и тинкториальными признаками апоптоза, а также повышенная активность ключевого фермента, реализующего программу апоптоза - цистеиновой протеиназы апопаина (каспазы 3).

5. Т-лимфоциты опийных наркоманов при их активации через анти-генсвязывающий рецептор, в сравнении с лимфоцитами здоровых лиц, наряду с угнетением пролиферативного ответа характеризуются гиперактивацией каспазы 3, но отсутствием адекватного усиления апоптоза при воздействии глюкокортикоидов, что свидетельствует о глубоком нарушении баланса механизмов регуляции пролиферации и апоптоза в лимфоцитах.

6. Вторичная иммунологическая недостаточность (ВИН) у опийных наркоманов, выражающаяся в наличии инфекционного иммунопатологического синдрома, ассоциируется с максимальной интенсивностью апоптоза лимфоцитов, что свидетельствует о важной роли апоптотического иммунодефицита в ее развитии.

4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Злоупотребление наркотоксикантами (алкоголем, никотином, опиатами, ингалянтами, лекарственными препаратами с психотропным действием) и привыкание к их чрезмерному употреблению является серьезной и сложной социальной и медицинской проблемой во всем мире. Особые сложности возникали в нашей стране, где до периода 80-х годов в связи с «информационной блокадой» даже специальные статьи были довольно редки. Среди наркотоксикантов опийные препараты (природные алкалоиды опия и их синтетические аналоги, в первую очередь - диацетилморфин - героин) занимают особое место. Злоупотребление опием описано в период Шумерской цивилизации в арабской литературе X века. Синтез героина и внедрение шприца для инъекций в 1874 - 1875 годах способствовали широкому использованию опиатов как средств анальгезии и, соответственно, росту опийной наркомании. Злоупотребление опиатами приводит к формированию наиболее тяжелой зависимости, опийная наркомания является хроническим, рецидивирующим заболеванием. Это связано с тем, что введение экзогенных опиатов грубо и нередко необратимо нарушает сложную систему опи-атэргической регуляции психосоматических функций и гомеостаза организма.

Снижение неспецифических и специфических механизмов антиинфекционной резистетности - неизбежный спутник опийной наркомании. Почти в 40% случаев причиной смерти наркоманов являются генерализованные инфекции, вызванные оппортунистической микрофлорой. В последние годы к списку «типичных» бактериальных и вирусных инфекций прибавился СПИД, причем восприимчивость к вирусу иммунодефицита у наркоманов, вследствие специфических нарушений Т-клеточных функций, резко возрастает.

Несмотря на интенсивные исследования, характер и механизмы нарушения иммунореактивности у опийных наркоманов и экспериментальных животных до конца не понятны. Характер изменения иммунных функций при введении экзогенных опиатов во многом отличен от иммунотропной активности эндогенных опиатных пептидов. Большинство автороя склонны считать, что ВИН, возникающий у наркоманов, связан с полимодальным воздействием на иммунную систему. Выделяют четыре основных фактора: 1) нарушение механизмов опиатэргической регуляции функций имму-нокомпетентных клеток вследствие прямого влияния на опиатные рецепторы или явления десенситизации последних; 2) прямое ксенотоксическое воздействие на клетки; 3) активация гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы, гиперпродукция кортикостероидов - хронический химический стресс; 4) массивное поступление антигенного материала, связанное с употреблением нестерильных растворов и шприцев.

Как показывают исследования, нарушения лабораторных показателей, отражающих иммунный статус, достаточно однотипны как в период употребления наркотоксикантов, так и в фазе абстинентного синдрома. Эти нарушения сохраняются довольно длительный период после отмены опиатов. В настоящей работе обследованы наркоманы, находящиеся в ранней фазе абстинентного синдрома, до начала дезинтоксикационной терапии. Именно в этот период иммунологические нарушения выражены в максимальной мере. Важно учитывать и возможную интерференцию иммунотропных эффектов опиатов с психонейротропными препаратами, используемыми для купирования абстинентного синдрома, поскольку большинство из них так или иначе изменяет иммунологическую реактивность (Е.К. Алехин и соавт., 1993).

Обнаруженные в настоящем исследовании изменения иммунного статуса наркоманов, в целом, подтверждают многочисленные результаты других исследователей.

Выявлено существенное угнетение фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов и, что особенно существенно, снижение «реактивности» кислородзависимых систем, обеспечивающих внутриклеточный киллинг микроорганизмов. Результаты изучения цитокинового статуса показали, что несмотря на отчетливое нарастание содержания «острофазных цитокинов» - ИЛ 1 р и ТОТа, что свидетельствует о воспалительной активации системы мононуклеарных фагоцитов, индуцированный бактериальным ЛПС синтез цитокинов был существенно угнетен. Глубокие нарушения касались и системы интерферона, продукция которого в ответ на индуктор в витральной системе практически полностью отсутствовала. Гипопродукция цитокинов в ответ на физиологический активатор является важным показателем глубокого нарушения акцессорной функции макрофагов в реализации иммунного ответа.

Выявленный характер нарушений субпопуляционной структуры шм фоцитов сходен с таковыми, описанными другими исследователями. Эти нарушения выражаются в Т-лимфоцитозе с выраженным С04+/С08+ Т-субпопуляционном дисбалансом (в сторону увеличения содержания СР8+ Т-лимфоцитов), В-лимфоцитозе, 1^К-лимфоцитопении и увеличении содержания клеток, экспрессирующих активационные антигены. Таким образом для наркоманов характерен активационный, дизрегуляторный тип субпопуляционной структуры лимфоцитов. Именно такой характер изменения субпопуляционной структуры рассматривается некоторыми исследователями как фактор, предрасполагающий к инфицированию ВИЧ. Несмотря на гиперэкспрессию активационных антигенов «отвечаемость» Т-лимфоци-тов при их стимуляции неспецифическими (лектины) так и, в большей степени, физиологическими (антиСОЗМКА) стимулами была снижена. Очевидно, нарушалась и продукция Т-клеточных цитокинов, поскольку прослеживался выраженный дисбаланс между уровнем 1Ь-2 и 1Ь-4 в сторону преобладания последнего. Нарушения касались и антителогенеза. Резкая дисимму-ноглобулинемия выражалась в значительном преобладании ^М при статистически значимой гипоиммуноглобулинемии по классу в, тенденции к снижению уровня иммуноглобулина класса А. Такая картина характерна для поликлональной активации В лимфоцитов. Это в свою очередь может быть связано с нарушением процесса «переключения» синтеза иммуноглобулинов вследствие цитокинового дисбаланса, продукции специфических антител к морфину (в основном класса М).

Резкий рост интереса к проблеме апоптоза в целом закономерно привел к интенсификации исследований, посвященных изучению роли апоптоза в функционировании иммунной системы. Процесс «негативной активации» играет чрезвычайно важную роль не только в механизме селекции тимоци-тов и онтогенезе В-клеток. Апоптоз, реализуемый через «профессиональный» для иммуноцитов рецептор апоптогенного сигнала - РазЯ и систему РавЯ/РавЬ, является важным механизмом регуляции иммунного ответа, ци-тотоксичности, поддерживания иммунопривилегированности. Нарушение баланса между позитивной (пролиферация, клональная экспансия) и негативной активацией выявлено при различных патологических состояниях. При этом дефицит апоптоза рассматривается как один из важных патогенетических факторов ауутоиммунного и лимфопролиферативного синдромов, а избыточный апоптоз - как фактор развития ВИН (А.Н. Чередеев, Л.В.

Ковальчук, 1999).

Процесс избыточной негативной активации иммуноцитов описан при воздействии различных ксенотоксических факторов. Несмотря на то, что избыточный апоптоз лимфоцитов при воздействии опиатов был описан 9 лет назад (Fuchs В., Pruett S., 1993; Frier D., Fuchs В., 1993), исследования этого аспекта действия наркотоксикантов интенсифицировались лишь в последние годы, причем высказывается предположение о возможной взаимосвязи между активацией апоптоза и развитием состояния иммунокомп-рометированности (Nair М. et al., 1997; Singhai Р. et al., 1999,2000).

Используя различные клоны МКА против FasR (ICO-160 и DX2), в настоящей работе было выявлено статистически значимое увеличение экспрессии рецептора на лимфоцитах периферической крови опийных наркоманов. Наряду с этим изменялся и характер корреляционных связей между содержанием клеток, экспрессирующих FasR и других субпопуляций лимфоцитов. Для зрелых лимфоцитов (в основном Т-клеток) FasR, наряду с другими, является активационным белком, экспрессия которого возрастает при антигенспецифической и неспецифической активации клетки. Немаловажную роль может играть и увеличение концентрации АФК и липоперок-сидов, оксида азота как внутриклетчно, так и в микроокружении, что способствует экспрессии FasR. В этой связи следует отметить тот факт, что в сыворотке оьийных наркоманов определялся высокий уровень продуктов липопероксидации, в частности МДА, что является прямым свидетельством оксидативного стресса. Гиперэкспрессия FasR возможна и при взаимодействии клетки с белками некоторых вирусов (в том числе HBV и HCV). Сама по себе гиперэкспрессия FasR не является отражением процесса апоптоза, но в определенной мере характеризует повышенную готовность систем негативной активации. В этой связи весьма информативно увеличение показателей, отражающих отношение количества FasR клеток к общему количеству основных субпопуляций лимфоцитов (показатель вероятности апопто-за, ПВА) и лимфоцитов, экспрессирующих другие активационные антигены (показатель готовности к апоптозу, ПГА). Оба этих показателя были значительно повышены у опийных наркоманов. Что наиболее существенно, в периферической крови опийных наркоманов, при неизменном, в сравнении со здоровыми донорами, содержании клеток, экспрессирующих интегральный белок митохондрий - продукт протоонкогена bcl-2, значительно снижалось соотношение количества bcl-2+ клеток к количеству FasR+ лимфоцитов. Этот белок является основным белком - негативным регулятором процесса апоптоза. Гиперэкспрессия bcl-2 обеспечивает, в частности, защиту от апоптоза CD45R0* примированных лимфоцитов памяти, характеризующихся высоким уровнем экспрессии FasR. Снижение соотношения bcl-2+/FasR+, названное нами индексом супрессии апоптоза, может служить ценным диагностическим критерием. Отсутствие адекватного увеличения экспрессии bcl-2 может быть следствием прямого ингибирующего влияния экзогенных опиатов или связанного с их введением оксидативного стресса на bcl-2, как это описывают, к примеру, Singhal Р. и соавторы (1999).

Не менее интересны и результаты, полученные при анализе экспрессии mFasL. Этот белок, член суперсемейства TNF-подобных цитокинов, эксп-рессируется на активированных Т-лимфоцитах (CD8+ > CD4+) и NK-клет-ках. Взаимодействие mFasL a FasR клетки мишени реализует механизмы CD8+UTJ1- опосредованного и, как аргументировано в последние годы NK-опосредованного цитолиза. Еще более интересен факт, что активированные

CD4+ Т-хелперы, экспрессирующие FasL, способны инициировать каскад апоптоза в активированных, FasR-экспрессирующих CD4+ Т-клетках (феномен «братоубийства»). В настоящей работе выявлено, что содержание FasL+ лимфоцитов в периферической крови наркоманов, в сравнении со здоровыми донорами, также было повышено. Что особенно интересно - изменялось соотношение содержания FasL+ лимфоцитов к числу клеток соответствующей субпопуляции, потенциально способной экспрессировать FasL. Так, соотношение FasL+/CD4+ возрастало у наркоманов почти в 2 раза, в равной мере это касалось и отношения FasL+/CDl 6+, в то время как отношение FasL+/CD8+ оставалось практически неизменным. Этот факт свидетельствует, хотя и косвенно, о возможной активации механизма клеточно-автономного апоптоза.

Использование различных методов изучения апоптоза (выявление клеток с фрагментацией ядра окрашиванием Hoechst 33342, выявление гипох-ромных клеток при окрашивании PI с последующей проточной цитофлюо-риметрией, оценка активности ключевого фермента апоптоза -каспазы 3) убедительно продемонстрировала статистически значимое увеличение содержания апоптотирующих лимфоцитов в пуле свежевыделенных мононуклеаров больных опийной наркоманией. Содержание апоптотирующих лимфоцитов в группе наркоманов, но не доноров, коррелировало с содержанием FasR+ клеток.

Все эти факты свидетельствуют о возрастании интенсивности активаци-онного FasR-опосредованного апоптоза у опийных наркоманов. Этот механизм, однако, не является единственным. Сравнительный анализ интенсивности пролиферации и апоптоза лимфоцитов здоровых доноров и опийных наркоманов в витральной системе при стимуляции антиС03МКА показал, что наряду с более низкой пролиферативной активностью, в Т-клет-ках наркоманов активность каспазы 3 была резко повышена. В то же время, добавление в культуру дексаметазона, индуцирующего апоптоз и ингиби-рующего пролиферацию Т-лимфоцитов здоровых доноров, практически не изменяло эти параметры у опийных наркоманов. Механизмы трансдукции апоптогенного сигнала при стимуляции ТКР и воздействии глюкокортико-идов различны. В первом случае необходимым компонентом ответа клетки является активация протеинкиназы С, во втором - протеинкиназы А и аде-нилатциклазы. Таким образом, полученный факт отражает глубокое нарушение реактивности сигнал-передающих систем в лимфоцитах больных опийной наркоманией. При этом индукция ТКР- опосредованного апоптоза свидетельствует о интенсификации негативной активации при антигенспецифи-ческом взаимодействии лимфоцита, но резистентности клеток к воздействию ключевых гуморальных регуляторов иммунного ответа - глюкокортикосте-роидов.

В результате проведенного клинического обследования было выявлено, что 54% обследованных наркоманов страдали хроническими рецидивирующими инфекциями кожи и мягких тканей (пиодермия, абсцессы в месте введения наркотоксикантов и другой локализации, фурункулез). У ряда больных это сочеталось с хроническими урогенитальными инфекциями, частыми и затяжными инфекциями верхних-дыхательных путей. Таким образом, имелась клиническая картина инфекционного иммунопатологического синдрома, т. е. вторичной иммунологической недостаточности (ВИН). При классификации наркоманов по наиболее близким типовым особенностям была использована процедура иерархического кластерного анализа. При этом, наряду с наличием или отсутствием ВИН, учитывалась также продолжительность наркомании, «спектр» употребляемых опиатов, заболеваемость гепатитами В и С (по выявляем ости антител к анитегнам вирусов в сыворотке). Наиболее «типичными» были две группы наркоманов. У всех наркоманов первой группы наблюдался синдром ВИН, что ассоциировалось с длительным употреблением наркотоксикантов (в среднем 6 лет), возрастанием частоты употребления суррогатов опия, высокой частотой выявляемости антител к вирусным гепатитам С (антиНСУ) и В (aнтиHbcAg) в сыворотке, что косвенно свидетельствует о перенесенных инфекциях. Вторая группа объединила наркоманов со средней продолжительностью употребления наркотоксикантов 3.8 лет, в этой группе преобладали наркоманы, употребляющие в основном героин, у большинства наркоманов не выявлялись антитела к антигенам вирусов гепатитов. Признаков ВИН в этой группе наркоманов не было. Третья группа наркоманов употребляла опиаты в среднем 2 года, причем, исключительно, героин. Частота встречаемости антител к вирусам гипеатитов была минимальна. Однако, у всех наркоманов этой группы был выявлена ВИН. Сравнительный анализ иммунного статуса в этих группах выявил достаточно однотипные изменения, которые различались по степени проявляения нарушений. Так, именно в первой группе выявлена наиболее значительная патологическая активация иммунной системы в сочетании с глубокой функциональной неполноценностью специфических и неспецифических механизмов иммунитета. Закономерно нарастает экспрессия активационных, ассоциированных с апоптозом ИаБЯ и РавЬ, что увеличивает апоптотическую готовность клеток и интенсивность активационного апоптоза, который, судя по полученным данным, может осуществлять по клеточно-автономному механизму. Интенсификация процесса апоптоза в этой группе наркоманов не вызывает резкой депрессии содержания лимфо

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Ризберг, Виталий Юрьевич, 2002 год

1. АббасоваС.Г., Липкин В.М., Трапезников H.H., Кушлинский Н.Е. Система Fas FasL в норме и при патологии // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. - 1999.- №3. - С. 3- 17.

2. Алехин Е. К., Лазорева Д. IL, Сибиряк С. В. Иммунотропные свойства лекарственных средств. Уфа, 1993. - 202 с.

3. Байков И.Р., Юлдашев В.Л., Сибиряк C.B., Юсупова Р.Ш., Курчатова H.H. Субпопуляционная структура и митогенный ответ лимфоцитов периферической крови у лиц, страдающих опийной наркоманией // Здраво-охр. Башкортостана. 1998. - № 6. - С. 88-93.

4. Барабой В. А., Брехман И. И., Голотин В. Г., Кудряшов Ю. Б. Пе-рекисное окисление и стресс. С.-Пб.: Наука, 1992 - 148 с.

5. Балмасова И.П., Торопова Н.Е. Оценка готовности к апоптозу лимфоцитов периферической крови у пациентов с заболеваниями простаты // Аллергология и иммунология. 2000. - Т. 1, № 2. - С. 169.

6. Барышников А.Ю., Полосухина Е.Р., Заботина Т.Н. и др. Fas (АРО-1/CD95) антиген: новый активационный маркер для оценки иммунного статуса // Рос. Иммунол. Журнал (R. J. I. ) 1997. - Т.2, № 2. - С. 115 -120.

7. Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В. Fas/APO-1-антиген молекула, опосредующая апоптоз // Гематол. и трансфузиол. - 1995. - Т.40, № 6. -С. 35 - 38.

8. Боровская Т.Ф., Ганьчева Е.А., Макаревич A.M., Фролова Е.Г. Выраженность экспрессии маркеров мембран иммунокомпетентных клеток слизистой оболочки толстой кишки и периферической крови в норме // Мед. иммунология. 2000. - Т.2, №2. - С. 123 - 124.

9. Бубнова Л.Н., Глазанова Т.А., Зубарева Т.С., Лысова Л.В. и др. Характеристика иммунокомпетентных клеток при некоторых органоспеци-фических аутоиммунных забс юваниях // Мед. иммунология. 1999. - Т.1, № 3-4. - С. 50-51.

10. Гамалея Н.Б., Векшина Н.Л., Проскурякова Т.В. и др. Влияние морфина на активность аденилатциклазы лимфоцитов здоровых, больных алкоголизмом и опийной наркоманией //Бюлл. эксперим. биол. мед. 1991. -№ 12. - С.610 - 612.

11. Гришина Т.Н., А.Л. Пухальский. Основы иммунодиагностики / В кн.: Клиническая иммунология. //Ред. Е.И. Соколов. М.; Медицина, 1998. -С.57 - 76.

12. Данченко Е.О. Влияние препаратов желчных кислот на апоптоз и некроз гепатоцитов // Иммунопатология. 2000. - № 1. - С.34 - 40.

13. Добродеева Л.К., Добродеев К.Г., Миролюбова O.A. // Иммунология -1998.-№ 6. С. 13 - 14.

14. Дюран Б., Оделл П. Кластерный анализ. М., 1977. - 128 с.

15. Жамбю М. Иерархический кластер анализ соответствий. - М., 1984.-204 с.

16. Зеленина Н.В., Марьянович А.Т., Цыган В.Н. Гуморальная регуляция апоптоза // В кн.: Программированная клеточная гибель/ Ред. B.C. Новиков С-Пб., 1996 - С. 89 - 104.

17. Казначеев К.С. Механизм развития цитокининдуцированного апоптоза.// Гематол. и трансфузиол. -1999. Т. 44, № 1. - С.40 - 43.

18. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. С.Пб., 1998.- 156 с.

19. Кетлинский С.А., Симбирцев A.C., Воробьев A.A. Эндогенныемедиаторы иммунитета. С-Пб., 1992.

20. Ковальчук J1. Н.,. Чередеев А. Н. Апоптогенные механизмы возникновения иммунодефицитных заболеваний // Журн. микробиол. -1999. -№ 5. С. 47 - 52.

21. Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н. Новые иммунопатогенетические взгляды: апоптотические иммунодефициты // Иммунология. 1998. - №6. -С. 17-18.

22. Колесникова И.Н. Особенности динамики процессов апоптоза лим фоцитов при ВИЧ-инфекции //Russian J. Immunol. 1999. - Vol.4. - Suppl.l -P. 176.

23. Кутуев О.И., Егоров В.Б., Мурзабаева Р.Т. и др. Клинико-иммуно-логические особенности хронических вирусных гепатитов у больных, принимающих наркотические средства // Здравоохр. Башкортостана -1996. № 6.-С. 31 -36.

24. Лапин C.B., Калленберг К.Г., Тотолян A.A. Апоптоз Т-лимфоци-тов и антифосфолипидные антитела больных системной красной волчанкой // Медицинская иммунология -1999. Т. 1, № 3 - 4. - С.69 - 70.

25. Личко А.Е., Битенский B.C. Подростковая наркология. М., Медицина, 1991. - 304 с.

26. Лушников Е.Ф., Загребин В.М. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития // Архив патологии. 1987. - Т.49,2. С. 84 - 89.

27. Маркелова Е.В., Просекова Е.Б., Гельцер Б.И. и др. Динамика про-воспалительных цитокинов у больных с патологией легких// Аллергология и иммунология. 2000. - Т. 1, № 2. - С.77 - 78.

28. Мельнов С.Б., Дударенко О.И., Савицкий В.П., Барышников А.Ю. Экспрессия антигена АРО-1 /Fas у детей, больных раком щитовидной железы, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях // Иммунология. 1998. - № 6. - С. 52 - 54.

29. Нестерова И.В. Алгоритмы обследования пациентов со вторичными иммунодефицитными состояниями, сопровождающимися ведущим синдромом вирусно-бактериальной инфекции // Int. J. Immunorehab. 2000. - Vol.2, №1.-С. 81 -86.

30. Поскотникова Л.В., Щеголева Л.С. Содержание фенотипов лимфоцитов в периферической крови в условиях хронического стресса // Труды РААКИ С. 407.

31. Салмаси Ж.М., Казимирский А.Н., Феденко Е.С. и др. Характеристика нарушений поверхностного фенотипа лимфоцитов крови у больных атопическим дерматитом // Russian. J. Immunol. -1999 Vol. 4. - Suppl.- P. 117.

32. Самойлина Н.Л. Морфологический метод оценки бластной трансформации лимфоцитов в культуре. // Лаборат. дело 1970. - № 8. -С. 455 - 463.

33. Сепиашвили Р.И., Славянская Т.А. Фенотипические особенностилимфоцитов крови больных ревматоидным артритом // Russian. J. Immunol.- 1999-Vol. 4. Suppl.- P. 143.

34. Сергеева M.Г., Гришина З.В., Варфоломеев С.Д. Механизм влияния морфина на пролиферацию лимфоцитов человека // Иммунология. -1995.- №3.-С. 35 38.

35. Сибиряк C.B., Юсупова Р.Ш., Каюмова Э.Ю. и др. Экспрессия АРО-l/Fas(CD95)-Ha лимфоцитах периферической крови в норме, при туберкулезе легких и воздействии наркотоксикантов // Гематол. и трансфузиол. -1999. -Т. 44,№2.-С. 18-20.

36. Сизякина Л.П., Шемшуров А.Б., Колесникова И.Н., Шестакова И.В. Апоптоз иммунокомпетентных клеток при ВИЧ-инфекции // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофар-макологии. Сб. тр. М., 1997. - С. 318.

37. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. М., 1977. - С. 58 - 62.

38. ТалаевВ.Ю., Лебедева И.Е., Мазепа В.Н.,ТалаеваЕ.Б. Индуцированный активацией апоптоз лимфоцитов крови новорожденных. Зависимость характера ответа лимфоцитов от клинического состояния новорожденных // Иммунология. 1997. - № 1. - С. 47 - 49.

39. Уманский С.Р. Генетическая программа клеточной гибели: гипотеза и некоторые приложения II Успехи соврем, биологии -1992. Т.93., № 1. -С. 139- 148.

40. Фрейндлин И.С. Кинетика воспаления и иммунного ответа // Медицинская иммунология. -1999. Т. 1, № 3 - 4. - С .25 - 26.

41. Фридман Л.С., Флеминг Н.Ф., Роберте Д.Г., Хайман С.Е. Наркология М.-С-Пб., 1998.- 317 с.

42. Хансон К.П. Программированная клеточная гибель (апоптоз): молекулярные механизмы и роль в биологии и медицине // Радиобиология. 1997. -№3. - С. 402-415.

43. Хоменко А.Г., Ковальчук J1.B., Мишин В.Ю. и др. Повышенный апоптоз иммунокомпетентных клеток как один из возможных механизмов в развитии иммунодефицита у больных остропрогрессирующим туберкулезом // Пробл. туберкулеза. 1996. - № 6. - С. 6 - 9.

44. Чередеев А. Н., Ковальчук JT.B. Апоптоз как важный этап оценки иммунной системы по патогенетичсескому принципу // Клин. лаб. диагн. -1997.-№7.-С. 31 -34.

45. Чередеев А.Н., Ковальчук J1.B. Патогенетический принцип оценки иммунной системы человека: современное состояние проблемы // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофарма-кологии. Сб. тр. М., 1997. - С. 74 - 80.

46. Черных Е.Р., Норкин М.Н., Захарова Н.Ф. и др. Суперантиген-индуцированная анергия и апоптоз Т-лимфоцитов при различных формах хирургической инфекции II Мед. иммунология. -1999. Т. 1, № 3 - 4. - С. 92 -93.

47. Штирт М.Б., Арипов O.A., Ершова В.И. Влияние опия-сырца на иммунобиологическую реактивность организма экспериментальных животных II Гигиена труда и проф. забол. -1967. № 1. - С. 42 \- 43.

48. Юсупова Р.Ш. Особенности экспрессии Fas/Apo-1 (СЭ95)-антиге-на и апоптоз лимфоцитов периферической крови в норме и при инфильтра-тивном туберкулезе легких / Автореф. дисс. канд.биол. наук Челябинск, 2000-21 с.

49. Юсупова Р.Ш., Сибиряк С.В., Каюмоваа Э.Ю., Сибиряк Д.С. Экспрессия Fas-антигена на лимфоцитах периферической крови и антиген-специфический апоптоз лимфоцитов при туберкулезе легких // Мед. иммунология. 2000. - Т.2, № 2. - С. 205 - 206.

50. Ярилин А. А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология. -1996. № 6. - С. 10 - 23.

51. Ярилин А.А. Система цитокинов при иммунопатологии // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофар-макологии. Сб. тр. М., 1997. - С. 161 -168.

52. Ярилин А.А. Апоптоз при аллергии как объект фармакологической коррекции II Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. Сб. тр. М., 1998. - С. 769 - 773.

53. Adelson М.О., Novikc D.M. Effects of the opioid antagonist naloxone on human natural killer cell activity in vitro // Isr. J. Med. Sci. 1994. - Vol.30. -P. 679 - 684.

54. Alnemri E., Livingston D., Nicolson D. Human ICE/CED-3 protease nomenclature. -1996. Vol. 87. - P. 181.

55. Anderson D. The role of phagocytic cells in host defense and inflammatory disease // Nutrition. -1990. Vol. 6. - P.5 - 15.

56. Aries S., SchaafB., MullerC., Dennin R., DalhofTK. Fas expression on CD4+ T-cells from HIV-infected patients increases with disease progression // 31 Mol. Med. 1995. - Vol. 73. - P. 591 - 593.

57. Bauer M., Vogt M., Los M., Siegel J., Wesselborg S., Schulze-Osthoff K. Role of reactive oxygen intermediates in activation induced CB95 ligand expression IIJ/ Biol. Chem. 1998. - Vol.273. - P. 8048 - 8055.

58. Baumann H., Glaudie M. The acute phase response// Immunol. Today. 1994.-Vol. 15.-P. 74-80.

59. Belka C., Marini P., Budach W., Schulxe-Osthoff K., Lang F. Radiation-induced apoptosis in human lymphocytes and lymphoma xells critically relies on the up-regulation og CD95/Fas/Apo-l ligand // Radiat. Res. 1998. - Vol 159. -P.588 - 595.

60. Bellgrau D., Gold D., Selawry H. A role for CD95 ligand in preventing graft rejection. // Nature. 1995. - Vol. 24. - P.630 - 632.

61. Bencsics A., Elenkov I., Vizi E. Efect of morphine on lipopolysaccharide-induced tumor necrosis factor-alpha production in vivo: involvement of the symphathetic nervous system /13. Neuroimmunol. 1997. - Vol. 73. - P.l - 6.

62. Bhargava H.N., Thomas P.T., Thorat S., House R.V. Effects of morphine tolerance and abstinence on cellular immune function // Brain Res. -1994. -Vol. 642.-P.l 10.

63. BianT.H., WangX.F.,Li X.Y. Effect of morphine on interleukin-1 and tumor necrosis factor alpha production from mouse peritoneal macrophages in vitro // Chung Kuo Yao Li Hsueh Pao. 1995. -Vol. 16. - P.449 - 451.

64. Boechini G., Bonanno F., Ganeconi A. Influence of morphine andnaloxone on hu,man peripheral blood T-lymphocytes //Drug Alchohol Depend. 1983 -Vol. 11.-P.233 -237.

65. Bohler T., Nedel S., Debatin K. CD95-induced apoptosis contributes to loss of primed/memory resting/naive T cells in children infected with human immunodificiency virus type I // Pediatr. Res. 1997. - Vol .4. - P.878 - 885.

66. Boyum A. Separation of leucocytes from blood and bone marrow. II Scand. J. Clin. Lab. Investig. -1968. Vol.267. - P. 95 - 99.

67. Brugo M.A., Gufanti A., Guzzetti S., Pedretti D., Sringhetti M., Confalonieri F. Difference in the behavior of T-lymphocyte populations in heroin and methadone addicts // Boll. I-st Sieroter. Milan.- Vol.62. P.517 - 523.

68. Bryant H., Bernton E., Holaday J. Immunosuppressive effects of chronic morphine treatment in mice//Life Sci. 1987. - Vol. 41. - P. 1731 - 1738.

69. Campbell D., Douglas S. Phagocytic cell Functions. I. Oxidation and Chemotaxis /In. Mannuual of Clinical and Laboratory Immunology I Ed. N. Rose et al. ASM Press, Washington, 1997. - P.320 - 329.

70. Carpenter G.W., Breeden L., Carr D.J. Acute exposure to morphine suppresses cytotoxic T-lymphocyte activity II Int. J. Immunopharmacol. -1995. -Vol. 17.-P. 1001-1006.

71. Carpenter G.W., Carr D.G. Pretreatment with beta-funaltrexamine blocks morphine-mediated suppression of CTL activity in alloimmunized mice// Immunopharmacology. 1995. - Vol. 29. - P. 129 - 140.

72. Carr D., Serou M. Exogenous and endogenous opioids as biological respons modifiers // Immunopharmacology. 1995. - Vol. 31. - P.59 - 71.

73. Carr D J., Carpenter G. W. Morphine-induced suppression of cytotoxic T lymphocyte activity in alloimmunized mice is not mediated through a natrindole-sensitive delta opioid receptor // Neuroimmunomodulation. 1995. - Vol. 2. -P.44 - 53.

74. Carr D.J., France C.P. Immune alterations in morphine-treated rhesus monkeys // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993. - Vol. 267. - P.9 -15.

75. Carr D.J. Cellular mechanisms involved in morphin-mediated suppression of CTL activity// Exp. Med. Biol.- 1995. Vol. 373. - P. 131 -139.

76. Chen S.Y.,Huo Q„ Huang J.B., Chen Z.L., Shi X.H., Liao X.L. Moprphine inhibited respiratory burst of neutrophils and scavenged oxygen free radicals // Chung Kuo Yao Li Hsueh Pao. -1995. Vol. 16. - P.445 - 448.

77. Chiesara E., Cutrufello R., Rizzi R. Chromosome damage in heroin-marijuana and maijiuana addicts // Arch. Toxicol. Suppl. 1983. - Vol. 6. -P.128 - 130.

78. Choi Y., Chuang L.F., Lam K.M., Kung H.F., Wang J.M., Osburn B.I., Chuang R.Y. Inhibition of chemokine-induced chemotaxis of monkey leukocytes by mu-opioid receptor agonists // In Vivo. 1999. - Vol. 13. -P.389 - 396.

79. Chuang L., Kiliam K., Chuang R. Induction and activation of mitogen-activated proteun kinases of human lymphocytes as one of the signaling pathways of the immunomodulatory effects of the morphine sulfate // J. Biol. Chem. -1997.-Vol. 272.-P.15- 17.

80. Chuang L.F., Killam K.F., Chuang RY. Opioid dependency and T-helper cell functions in rhesus monkey // In Vivo. 1993. - Vol. 7. - P. 159 - 166.

81. Chuang T.K., Killam K.F Jr.,Chuang L.F., Kung H.F., Sheng W.S., Chao C.C., Yu L., Chuang R. Y. Mu opioid receptor gene expression in immune cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995. - Vol. 216. - P.922 - 930.

82. Corridori S., Barbarini G., Trespi G., Chiesa A., Campisi D. Immunophathology of HTLV III infection in drug addicts // Boll. 1st. Sieroter. Milan. 1986. -Vol. 65. - P.354 - 356.

83. Counor J., Sawezek I., Benson M. Calcium channel antagonists delay regression of androgen-dependent tissues and supress gene activity assotiated with the cell death // Prostate 1988. - Vol. 13. - P.l 19 -128.

84. Cushman P. Jr., Gupta S., Grieco M.H. Immunological studies in methadone maintained paitients // Int. J. Addict. -1977. Vol. 12. - P.241 - 253.

85. Darmon A., Nicholson D., Bleackley R. Activation of the apoptotic protease CPP32 by cytotoxic T-cell-derived granzyme B // Nature. 1995. -Vol.377.-P.446-448.

86. Debatin K. M., Goldmann C., Bamford R., Waldmann Th., Krammer P. Monoclonal-antibody-mediated apoptosis in adult T-cell leukemia // The Lancet. - 1990. - Vol. 335, # 3. - P.497 - 500.

87. Deuren M., Dofferhoff A., Van Der Meer J. Cytokines and the response to infection // J. Pathol. -1992. Vol. 168. - P.346 - 356.

88. Drenou B., Choqueux C., Ghalbzouri A., Blancheteau V. Et al. Characterization of the roles of CD95 and CD95 ligand in cord blood //Bone Marrow Transplant. 1998. - Vol.22 - P.44 - 47.

89. Ellis R., Yuan J., Horvitz H. Mechanism abd function of cell death //

90. Ann. Rev. Cell. Biol. -1991. Vol. 7. - P.663 - 698.

91. Enari M., Hug H., Nagata S. Involvment of an ICE-like protease in Fas-mediated apoptosis II Nature 1995. - Vol. 375. - P.78 - 81

92. Enari M., Talanian R., Wong W., Nagata S. Sequential activation of ICE-like and CPP32-like prteases during Fas-mediated apoptosis // Nature -1996.- Vol.380. P. 723 - 726.

93. Evans Th. The role of macrophages in the septic shock // Immunobiology/- 1996.-Vol. 195. P.655 - 659.

94. Falek A., Hollingsworth F. Opiates and human chromosome alterations // Int. J. Addict. 1980. - Vol. 15. - P. 155 - 163.

95. Fecho K., Maslonek K.A., Dykstra L.A., Lysle D.T. Mechanisms whereby macrophage-derived nitric oxide is involved in morphin-induced suppression of splenic lymphocyte proliferation //J. Pharmacol. Exp.Ther. -1995.- Vol. 272 .- P.477 483.

96. Fecho K., Nelson C.J., Lysle D.T. Phenotypic and functional assessments of immune status in the rat spleen following acute heroin treatment // Immunopharmacology. 2000. - Vol. 46. - P. 193 - 207.

97. Fletcher M.-A., Urban R., Asthana D., Waklling J., Friedlander A.,

98. Page B. Lymphocyte proliferation I In.: Manual of Clinical Laboratory Immunology II Ed.: N. Rose et al. ASM PRESS - Washington, 1997. -P.313 - 319.

99. Flores LR., Wahl SM., Bayer BM. Mechanisms of morphine-induced immunosuppression: effect of acute morphine administration on lymphocyte trafficking // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1995. - Vol. 272. - P. 1246 - 1251.

100. Freier D.O., Fuchs B.A. A mechanism of action for morphine-induced immunosuppression: corticosterone mediates morphine-induced suppression of natural killer cell activity // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1994. - Vol.270. -P.1127 -1133.

101. Fuchas B., Pruett S. Morphine induces apoptosis in murine thymocytes in vivo but not in vitro: involvement of both opiate and glucocorticioid receptors II J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993. - Vol.266. - # 1. - P. 417 - 423.

102. Gamaleya N., Parshin A., Tronnikov S., Yusupov D. Induction of antibodies to morphine during chronic treatment in rodents and opiate addicts / / Drug Alcohol Depend. 1993. - Vol. 32. - P.59 - 64.

103. Giordano C., DeMaria R., Stassi G., Todaro M. et al. Defective expression of the apoptosis-inducing CD95 molecule on T- and B cells in IDDM II Diabetologia 1995. - Vol. 38. - P. 1449 - 1454.

104. GiordanoC., DeMaria R.,StassiG.,Todaro M., RichiusaP.,Giordano M., Testi R., Galluzzo A. Defective expression of the apoptosis-inducing CD95 molecule on T- and B-cells in IDDM //Diabetologia. -1995. Vol. 38, # 12. - P. 1449. 1454.

105. Goldberg Y., Nicholson D., Rasper D., Kalchman M., Koide H., Graham R., Vaillancourt J., Hayden M. Cleaage og Huntington by apopain, a proapoptotic cysteine protease, is modulated by the polyglutamine tract // Nat.

106. Genet. 1996. - Vol. 13. - P.442 - 449.

107. Gong J., Traganos F., Darzynkiewicz Z. A selective procedure for DNA extraction from apoptotic cells applicable for gel electrophoresis and flow cytometry // Ann. Biochem. -1994. Vol. 218. - P. 314 - 319.

108. Govitrapong P., Suttitum T., Kotchabhakdi N., Uneklabh T. Alterations of immune functions in heroin addicts and heroin withdrawal subjects //J. Pharmacol. Exp. Ther. 1998. - Vol. 286. - P.883 - 889.

109. Green D., Scott D. Activation-induced apoptosis in lymphocytes // Curr. Opin. Immunol. 1994. - Vol. 6. - P.476 - 483.

110. Griffith T., Brunner T., Fletcher S., et al. Fas ligand-induced apoptosis as a mechanism of immune privilege // Science. 1995. - Vol.270. - P.793 - 802.

111. Grimm MC., Ben-Baruch A., Taub D.D., Howard O.M., Wang J.M., Oppenheim J.J. Opiate inhibition of chemokine-iduced Chemotaxis // Ann. N. Y. Acad. Sci.- 1998. Vol. 840. - P.9 - 20.

112. Gruol D., Altschmied J. Synergistic induction of apoptosis with glucocorticoids and 3'5'-cAMP reveals agonist activity by RU 486 //Mol. Endocrinol. 1993. - Vol. 7. - P. 104 - 113.

113. Gulbins E., Brenner B., Schlottmann K., Welch J. Et al. Fas-inducedprogrammed cell death is mediated by a Ras-regulated 02 synthesis 11 Immunology 1996.-Vol.89.-P. 205-212.

114. Gyires K., Budavari I., Furst S., Molnar I. Morphine inhibits the carrageenan-induced oedema and the chemoluminescens of leucocytes stimulated by zymosan //J. Pharmacol. -1985. Vol. 37. - P. 100 -104.

115. Hernandez M.C., Flores L.R., Bayer B.M. Immunosuppression by morphine is mediated by central pathways // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993. -Vol.267.-P. 1336 - 1341.

116. HilburgerM.E., Adler M.W., Rogers T.J., Einstein TK. Morphin alters macrophag and lymphocyte populations in the spleen and peritoneal cavity // J. Neuroimmunol. 1997. - Vol. 80. - P. 106 - 114.

117. Hirschorn K., Hirschorn R. Mechanisms of lymphocyte activation.// Mechanisms of cell-mediated immunity./Ed. McCluskey R., Cohen S. J.Wiley & Sons: New York, 1974. - P.225 - 240.

118. Itoh N., Tsuijimoto Y., Nagata S. Effect of bcl-2 on Fas-antigen-mediated cell death//J/Immunol. 1993. - 1993. - Vol. 112.-P. 166-171.

119. Ju Sh., Panka D., Cul H., Ettinger R., ElKhabib M., Sherr D., Stanger B. Fas (CD95)/FasL interactions required for programmed cell death after T-cell activation // Nature. 1995. - Vol.373. - P.444 - 448.

120. Kerr J. A histochemical study of hypertrophy and ischaemic injury of rat liver with spetial reference to changes in lysosomes // J. Pathol. Bacteriol. -1965.-Vol. 90.-P. 419-430.

121. Kerr J. Schrinkage necrosis: A distinct mode of cellular death //J. Pathol. -1971.-Vol.105.-P.13- 18.

122. Kerr J., Wyllie A., Currie A. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implication in tissue kinetics // Brit. J. Cancer. -1972. Vol. 26. - P. 239 - 257.

123. Klimiuk P., Bernacka K., Kuryliszyn-Moskal A. Apoptosis in autoimmune diseases // Rocz. Akad. Med. Bialymstoku. 1995. - Vol. 40. -P. 227 - 232.

124. Kovalchuk L., Cheredeev A. Apoptogenesis of immunodeficiency diseases // R. J. I. 1999. - Vol. 4. - P. 1 - 9.

125. Kreek M.J. Immune function in heroin addicts and former heroin addicts in treatment: pre- and post-AIDS epidemic // NIDA Res. Monogr. -1990. Vol. 96. - P. 192 - 219.

126. Latorre X., Cuturi C., Miro J.M., Anegon I., Gatell J.M., Gallart T., Bruguera M., Pumarola T., Trilla A., Ginel J., et al. Lymphocyte subpopulations in Spanish parenteral drug addicts // Scand. J. Infect. Dis. Vol. 18. - P.71 - 78.

127. Lazaro M.I., Tomassini N., Gonsales I., Renaud F.L.Reversibility ofmorphine effects on phagocytosis by murin macrophages // Drug Alcohol Depend.-2000. Vol. 58. -P. 159-164

128. Lazzarin A., Mella L., Trombini M., Uberty-Foppa C., Franzetti F., Mazzoni G., Galli M. Immunological status in heroin addicts: effects of methadone maintenance treatment//Drug Alcohol Depend. -1984. Vol. 13. - P. 117 -123.

129. LeVier D.G., Brown R.D., McCay J.A., Fuchs B.A., Harris L.S., Munson A.E. Hepatic and splenic phagocytosis in female B6C3F1 mice implanted with morphine sulfate pellets // J. Pharmacol. And Exp. Ther. 1993. - Vol. 267.- P.357 -3 63.

130. LeVier DG., Brown R.D., Musgrove D.L., Butterworth L.F., McCay J.A., White K.L. Jr., Fuchs B.A., Harris L.S., Munson A.E. The effect of methadone on the immune status of B6C3F1 mice// Fundam. Appl. Toxicol. -1995. Vol. 24.- P.275 84.

131. Lockwood L., Silbrt L., Fleshner M., McNeal C., Watkins L., Lauderslager M., Rice K., Weber R., Maier S. Morphine-induced alterations in antibody levels: receptor and immune mechanisms //J. Pharmacol. Exp. Ther. -1996.- Vol.278. P.689 - 696.

132. Long B., Anders G., Idenburg M. Influence of erythrocyte contamination on optimal PHA concentration in Chinese hamster lymphocyte cultures. //J. Immunol. Meth. -1983. Vol. 61. - P.43 - 48.

133. Lopez MC., ChenG.J., ColomboL.L., Huang D.S., Darban H.R., Watzl B., Watson R.R. Spleen and thymus cell subsets modified by long-term morphineadministration and murin AIDS II // Int. J. Immunopharmacol.-1993. - Vol. 15. - P.909 - 918.

134. Lopez M.C., Colombo L.L., Chen G.J., Watzl B., Darban H.R., Huang D.S., Watson R.R. Spleen and thymus cell subsets modified by long-term morphine administration in protein-undernourished mice // Int. J. Immunopharmacol. -1993.-Vol. 15. P.899 - 907.

135. Los M., Craen M., Penning L. Requirement of an ICE/CED-3 protease for Fas/APO-1 mediated apoptosis // Nature 1995. - vol. 375. - P.565 - 576.

136. LuZ.W.,Dai W.J., Wang G.L., Lin Z.B. Subchronic in vivo treatments of morphine inhibit T-cell proliferation by a cting on macrophages // Brain Behav. Immun. 1996. - Vol. 10. - P.351 - 363.

137. Lysle D.T., Coussons M.E., Watts V.J., Bennett E.H., Dykstra L.A. Morphin-induced alterations of immune status: dose dependency, compartment specifity and antagonism by naltrexone // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993. - Vol. 265. -P.1071 - 1078.

138. Makman M.H. Morphine receptors in immunocytes and neurons // Adv. Neuroimmunol. -1994. Vol.4. - P.69 - 82.

139. Makman M.H., Dobrenis K., Surratt C.K. Properties of mu 3 opiate alkaloid receptors in macrophages, astrocytes, and HL-60 human promyelocytic leukemia cells // Adv. Exp. Biol. 1998. - Vol. 437. - P. 137 - 148.

140. Makman M.H., Drovkin B., Stefano G.B. Murin macrophage cell lines contain mu 3-opiate receptors // Eur. J. Pharmacol. -1995. Vol. 273. - P.5 - 6.

141. Marsters S., Sheridan J., Pitti R. Identification of a ligand for the death-domain-containing receptor Apo-3 // Curr/ Biol. -1998/ Vol. 8/ - P.525 - 528.

142. Martinez F., Watson R.R. Effects of cocaine and morphine on IgG production by human peripheral blood lymphocytes in vitro II Life Sci. -1990. -Vol. 47 -P.59 64.

143. MazzoneA., Fossati G., Mazzuccheli I., Gritti D.,CanaleC., Ricevuti G. Opioid reseptors and phagocyte defects in drug addicts // Recenti Prog. Med. 1996.-Vol.87. -P.530-537.

144. Miyagi T., Chuang LF., Lam KM., Kung H.et al.Opioids suppress chemokine-mediated migration of monkey neutrophils and monocytes-an instant response // Immunopharmacology. 2000. - Vol. 47. - P.53 - 62.

145. Miyawaki T., Uehara T., Nibu R., Tsuji T., Yachie A., Yonehara S., Tanigushi N. Differential expression of apoptosis-related Fas antigen on lymphocyte subpopulations in human peripheral blood IIJ. Immunol. 1992. -Vol. 149.-P.3753-3758.

146. Morris A. Immunoregulation by the interferons // Mad. Lab. Sci. 1992. -Vol.49.-P. 192-196.

147. Nagata S. Apoptosis by death factor. 1997. - Vol.88. - P. 355 - 365.

148. Nagata S., Goldstein P. The Fas death factor // Science. 1995. - Vol. 267. - P. 1449- 1456.

149. Nair M., Schwartz S., Polasani R., Hou J., Sweet A., Chadha K. Immunoregulatory effects of morphine on human lymphocytes // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1997. - Vol. 4. - # 2. - P. 127 - 132.

150. Nicholson D., AliA., ThornberryN., Vaillancourt J., DingC.,Gallant M., et al. Identification and inhibition of ICE/CED-3 protease necessary for mammalian apoptosis //Nature. -1995. Vol. 376. - P.37 - 43.

151. Nicholson D. ICE/CED3- like proteases as therapeutic targets for the control of inappropriate apoptosis // Nature Biotech. 1996. - Vol. 14. -P. 297 -301.

152. Nunez G.,Ursua J. Opiods and the immune system // Rev. Med. Chil. -1999.-Vol. 127.-P.341 -348.

153. Ochshorn M., Novick., Kreek MJ. In vitro studies of the effect of methadone on natural killer cell activity // Isr. J. Med. Sci. 1990. - Vol.26. -P.421 - 425.

154. Orrenius S., McCabe M., Nicotera P. Ca2+ -dependent mechanism of cytotoxicity and programmed cell death // Toxicol. Lett. 1992. - Vol. 64. -P. 357 - 364.

155. Owens G., Cohen J. Identification of genes involved in programmed cell death // Cancer Metastasis Rev. -1992. Vol. 11. - P. 149 - 156.

156. Pasotti D., Mazzone A., Ricevuti G. In vitro effects of morphine and opioid peptides on neutrophil granulocyte aggregation and ATP releas II Recenti. Prog. Med. 1989. -Vol.80. - P.557 - 560.

157. Pasotti D., Mazzone A., Rucevuti G. The nervous system and the immune system: the role of morphine and opioid peptides in the function of neutrophilic granulocytes II Minerva Med. -1992. Vol. 83. - P.433 - 438.

158. PortolesJ.M.,OjedaG., Ronda M., LezaJ.C., RojoJ.M. Suppression of immune parameters in animal models of morphine dependence // Immunol. Invest. 1995. - Vol. 24. - P.643 - 652.

159. Provinciali M., Di Stefano G., Raffaeli W., Pari g., Desiderio F., Fabris N. Evaluation of NK and LAK cell activities in neoplastic patients during treatment with morphine// Int. J. Neurosci. -1991. Vol.59. - P. 127 - 133.

160. Reiux-Laucat F., Le Deist F., Hivroz C. Mutations in Fas assotiated with human lymphoproliferative syndrome and auto-immunity // Science -1995. -Vol. 268.-P. 1347- 1349.

161. Ren J., Zheng R., Shi Y., Gong B., Li J. Apoptosis and arresting proliferation simultaneously triggered by oxidative stress in human hepatoma cells // Cell Biol. Int. 1998. - Vol. 22. - P.41 - 49.

162. Rothstein T., Wang J., Panka D., et al. Protection against Fas-dependent Thl mediated apoptosis by antigen receptor engagement in B-cells // Nature. -1995.-Vol. 374.-P. 163 165.

163. Rouveix B. Opiats and immune function. Consequences on infectious diseases with special reference to AIDS II Therapie. 1992. - Vol. 47. -P.503 - 512.

164. Roy S., Bark R.A., Loh H.H. MU-opioid receptor-knockout mice: role of mu-opioid receptor in morphine mediated immune functions // Brain Res. Mol. Brain Res. 1998. - Vol. 1. - P.190 - 194.

165. Roy S., Loh H.H. Effects of opioids on the immune system // Neurochem. Res. 1996.-Vol. 21.-P. 1375- 1386.

166. Roy S., Charboneau R., Barke R. Morphine synergizes with lipopolysaccharide in a chronic endotoxemia model //J. Neuroimmunol. -1999. -Vol.1.-P.107- 114.

167. Saini A., Sei Y. Morphine inhibits signal transduction subsequent to activation of protein kinase C in mouse splenocytes // Life Sei. 1993. -Vol. 52.-P.1751 - 1758.

168. Sala R., Miro J.M., Feliu E., Bianchi J.L., Gatell J.M., Reverter J.C., Soriano E., Garcia San Miguel J. In vitro effect of heroin on neutrophil polymorphonuclear leukocytes from peripheral blood // Med. Clin. (Bare). -1996. -Vol. 107.-P.726-729.

169. Satoh M., Lindahl T. Role of poly (ADP-ribose) formation in DNA repair // Nature. 1993. - Vol. 356. - P.356 - 368.

170. Schneider GM., Lysle DT. Role of central mu-opioid receptors in the modulation of nitric oxide production by splenocytes // J. Neuroimmunol. 1998. -Vol. 89.-P. 150- 159.

171. Schwartzman R., Cidlowski J. Glucocorticoid-induced apoptosis of lymphoid cells // Int. Arch. Allergy Immunol. -1994. Vol. 105. - P. 347 - 354.

172. Scott M., Carr D.J. Morphine suppresses the alloantigen-drivenCTL response in a dose-dependent and naltrexone reversible manner // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1996. - Vol. 278. - P.980 - 988.

173. Sen S. Programmed cell death: concept, mechanism and control //Biol. Revs. Cambridge. Phil. Soc. 1992. - Vol. 67. - P.287 - 319.

174. Shafer DA., Falek A., Donahoe R.M., Madden J.J. Biogenetic effects of opiates // Int. J. Addict. 1990 - 91. - Vol. 25. - P.l - 18.

175. Shafer DA., Xie Y., Falek A. Detection of opiate-enhanced increases in DNA damage, HPRT mutants, and the mutation frequency in human HUT-78 cells // Environ. Mol. Mutagen. 1994. - Vol. 23. - P.37 - 44.

176. Shavit Y.,Cohen E.,Gadin R.,AvitsurR., Pollak Y.,ChakinG., Wolf G., Yirmiya R. Effects of prenatal morphine exposure on NK cytotoxicity and responsiveness to LPS in rats // Pharmacol. Biochem. Behav. -1998. Vol. 59. -P.835-41.

177. Sibiryak S., Amirova Z., Kurchatova N., Yusupova R. et al. Thebiomarkers of immunotoxicity of the polychlorinated dibenzodioxines/furans. Organohal. Comp. 1998 - Vol. 38 - P.267 - 270.

178. SibiryakS., Muldashev E., SelskyN., Yusupova R. FAS(APO-l/CD95) antigen expression on the perif heral blood lymphocytes (PBL) in different disease states. Abstr. 4th World Cong. Inflammation Paris, 1999 - P.245.

179. Sibiryak S., Yusupova R., Kayumova E. Fas/Apo-1 (CD95) Antigen Expression on the peripheral blood lymphocytes in healthy donors and pulmonary tiberculosis patients //R.J.I. 1999 - Vol 4. - P.33 - 42.

180. Simpskin CO.,Ives N., Tate E. Johnson M. Naloxone inhibits superoxide releas from human neutrophils II Life Sci. 1985. - Vol. 37. -P. 1381 - 1386.

181. Singh V., Jakubovic A., Thomas D. Suppressive effects of methadone on human blood lymphocytes //Immunol. Lett. -1980 Vol. 2 - P. 177 -180.

182. Singhal P.C., Mattana J., Garg P., Arya M., Shan Z., Gibbons N., Franki N. Morphin-induced macrophage activity modulates mesangial cell proliferation and matrix synthesis // Kidney Int. 1996 - Vol. 49. - P.94 - 102.

183. Singhal P.C., Pan C., Gibbons N. Effect of morphine on uptake of immunoglobulin G complexes by mesangial cells and macrophages // Am. J. Physiol. 1993. - Vol. 264. - P.859 - 866.

184. Singhal P., Sharma P., Kapasi A., Reddy K., Franki N., Gibbons N. Morphine enchances macrophage apoptosis //J. Immonol. 1998. - Vol. 160. -№4.-P. 1886- 1893.

185. Singhal P., Kapasi A., Reddy K., Franki N., Gibbons N. Morphine promotes apoptosis in Jurkat cells.// J. Leukoc. Biol. 1999 - Vol. 66. - # 4. -P.650 - 658.

186. Singhal P., Kapasi A., Franki N., Reddy K. Morphine-inducedmacrophafe apoptosis; the role of transforming growth factor-bets. // Immunology 2000. - Vol. 100. - P. 57 - 62.

187. Steinman H. The Bcl-2 oncoprotein functions as a pro-oxidant // J. Biol. Chem. -1995. Vol. 270. - P. 3487 - 3490.

188. Stoll-Keller F., Schmitt c., Thumann C., Schmitt M.P., Caussin C., Kirn A. Effects of morphine on purified human blood monocytes. Modifications of properties involved in antiviral defences // Int. J. Immunopharmacol. 1997. -Vol. 19.-P.95- 100.

189. Suda T., Takahashi T., Goldshteion P., Nagata S. Molecular cloning and expression of the Fas ligand, a novel member of the tumor necrosis factor family // Cell. -1993. Vol. 75. - P. 1169 - 1178.

190. Suito K., Nishioka K., Iwatsuki K., Kumagai K., Sasaki M. Effect of morphine on PHA-stimulated human lymphocyte transformation //Tohoku J. Exp. Med. 1975. - Vol. 117. - P.199 - 200.

191. Szabo I., Rojavin M., Bussiere J.L., Einstein T.K., Adler M.W., Rogers T.G. Suppression of peritoneal macrophage phagocytosis of Candida albicans by opioids // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993. - Vol. 267. - P.703 - 706.

192. Tanaka M., Suda T., Haze K. Fas ligand in human serum //Nature Med. 1996.-Vol. 2. - P.317 - 320.

193. Thomas P.T., Bhargava H.N., House R.V. Iimmunomodulatory effects of in vitro exposure to morphine and its metabolites // Phrmacology. -1995. Vol. 50.-P.51 -62.

194. Thomas P.T., House R.V., Bhargava H.N. Durect cellular immunomodulation produced by diacetilmorphine (heroin) or methadone // Gen. Pharmacol.- 1995.- Vol.26. P.123 - 130.

195. Trauth B., Klas C., Peters A., et al. Monoclonal antibody-mediatedtumor regression by induction of apoptosis // Science 1989. - Vol.245. -P.301 -304.

196. Tubaro E., Santiangeli C., Belogi L., Borelli G., Cavallo G., Croce C., Avico U. Methadon vs morphin : comparison of their effect on phagocytic functions II Immunopharmacol. -1987. Vol.9. - P.79 - 88.

197. Tubaro E., Avico U., Santiangeli C., Zuccaro P., Cavallo G., Pacifici R., Croce C., Borelli G. Morphine and methdone impact on human phagocytic physiology // Int. J. Immunopharmacology. 1985. - vol. 7. - P. 865 - 874.

198. Tubaro E., Santiageli C., Belogi L., Borelli G., Cavallo G., Croce C., Avico U. Mathadone vs morphine: comprasion of their effect on phagocytic function // Int. J. Immunopharmacol. 1987. - Vol. 9. - P. 79 - 88.

199. Turka L., Linsley P. //J. Exp. Med. -1995. Vol. 179. - P.709 - 713.

200. VanderLannJ.W. etal .Immunotoxicological screening of morphine and methadone in an extended 28 day study in rats // Immunopharmacol.-1995. -Vol.17.-P.535- 543.

201. Westendorp M., Frank R., Ochsenbauer C., Striker K. et al. Sensitization of T-cells to CD95-mediated apoptosis by HIV-1 Tat and gpl20 // Nature. 1995. - Vol. 8. - P. 497 - 500.

202. Wyllie A. Glucocorticoid induced thymocyte apoptosis ia assotiated with endogenous endonuclease activation //Nature. 1980. - Vol. 95. -P. 555 - 556.

203. Wyllie A., Kerr J., Currie A. Cell death: The significance of apoptosis // Int. Rev. Cytol. -1980. Vol. 68. - P. 251 - 260.

204. Wyllie A., Arends M., Morris R. et al. The apoptosis endonuclease and its regulation // Semin. Immunol. -1992. Vol.111. - P.255 - 277.

205. Yager M.P., Colaccho T.A., Yu C.T., Hildebrandt L., Howell A.L., Weiss J., Guyre P.M. Morphine inhibits spontaneous and cytokine-echancedfpnatural killer cell cytotoxicity in volonteers 1! Anesthesiology.-1995.-Vol.83.-P. 500-8.

206. Yager MP.,Campbell AS., Yu C.T., Moschella M., Guyre P.M. Effect of morphine and beta-endorphin on human Fc receptor-dependent and natural killer cell functions // Clin Immunol Immunophathol.-1992.-Vol.62.-P.336-43.

207. Yonehara S,. Ishii S., Yonehara M. A cell-killing monoclonal antibody (Anti-Fas) to a cell surface antigen co-downregulated with the receptor of tumor necrosis factor//J. Exp. Med. 1989 - Vol 169. - P. 1747 - 1756.

208. Young L. Opportunistic Infections in the immunocompromised host // In.: Basic & Clinical Immunology. Eds.: D. Stites, A. Terr, T. Parslow. -Appleton&Lange, 1994. Norwalk, Connecticut P.706 - 715.

209. Zhivotovsky B., Wade D., Nicotera P., Orrenius S. Role of nuclease in apoptosis // Exp. Cell Res. 1995. - Vol. 202. - P. 333 - 336.

210. Zhong F., Li XY., Yang SL.Augmentation ofTNF-alpha production, NK cell activity a id IL-12 p-53 mRNA expression by methionine enkephalin // Chung Kuo Yao Li Hsueh Pao.-1996.-Vol.l7.-P.182-5.

211. Zipp F., Faber E., Sommer N., Muller C., Dichgans J., Krammer P. et al. CD95 expression and CD95-mediated apoptosis of T cells in multiple sclerosis //J. Neuroimmunol. -1999 Vol.81. - P. 168 - 172.