Особенности ангиогенеза в первичных злокачественных эпителиальных опухолях печени и значение их в прогнозе заболевания (клинико-иммуногистохимическое исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.15, кандидат медицинских наук Тен, Владислав Петрович

• Тен, Владислав Петрович
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Тен, Владислав Петрович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ИССЛЕДОВАНИЕ АНГИОГЕНЕЗА ОПУХОЛЕЙ литературный обзор)

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Дифференциальная диагностика первичных карцином печени.

3.2. Изучение экспрессии гепатоцитарного антигена в первичных карциномах печени.

3.3. Изучение влияния клинико-морфологических показателей на выживаемость больных первичными карциномами печени.

3.4. Количественная оценка микррциркуляторного русла в первичных раках печени по маркеру CD31.

3.5. Изучение морфо-функционального состояния микроциркулятор-ного русла в первичных раках печени с помощью маркеров, отражающих дифференцировку гладкомышечных клеток (гладкомышечный актин, калпонин).

3.6. Изучение факторов ангиогенеза в сопоставлении с плотностью микрососудистого русла. I q ^

3.6. Изучение показателей цитоморфометрии (площадь ядра и цитоплазмы, ядерно-цитоплазматическое соотношение) в первичных раках печени. ^^

3.7. Изучение экспрессии общего лейкоцитарного антигена (CD45RB) в первичных раках печени. ^

3.8. Изучение экспрессии СК LW, СК19, CEAp, CD10, TTF, а-фетопротеина в первичных раках печени.

3.9. Однофакторный анализ прогностической значимости клинических, морфологических и иммуногистохимически признаков.

3.10. Многофакторный анализ прогностической значимости клинических, морфологических и иммуногистохимически признаков.

3.11. Регрессионная модель Кокса в анализе выживаемости больных первичным раком печени (ГЦК).

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности ангиогенеза в первичных злокачественных эпителиальных опухолях печени и значение их в прогнозе заболевания (клинико-иммуногистохимическое исследование)»

Актуальность темы.

Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) является одной из наиболее часто встречаемых злокачественных опухолей, особенно в определенных регионах мира (Гранов A.M., Петровичев Н.Н., 1977), и составляет более 90% всех первичных раков печени. Ежегодно в мире регистрируется более 500 ООО новых случаев этой опухоли, однако распространенность ее неравномерна. Так, в Северной Америке ежегодно регистрируется 3,2 случая на 100000 населения, а в странах Юго-Восточной Азии доходит до 35,8/100000 человек (Hirphashi S. и соавт., 2000). В тоже время имеются сведения о резком учащении этих опухолей в США (El-Serag Н. В.2002), что привело к двукратному увеличению смертности от онкологических заболеваний за последние 20 лет. Вторая разновидность злокачественных опухолей печени - холангиоцеллюлярный карцинома (ХЦК) также характеризуется резко выраженными географическими различиями: США-0,4, а Таиланд-84,6 на 100000 жителей (Nakamuna У. и соавт., 2000) Средняя продолжительность жизни у больных с первичными раками печени (гепа-тоцеллюлярным раком и холангиоцеллюлярным раком) является одной из наименьших, не превышая 8 мес. с момента установления диагноза (Schoniger-Henike М, 2001).

Известно, что лучшие данные выживаемости среди пациентов со злокачественными опухолями печени достигаются путём выполнения радикальных резекций (Таразов П.Г., 2001). Однако такие операции до сих пор осуществимы лишь у 5-15% больных (Гранов A.M. и Таразов П.Г., 1999). Низкая эффективность различных хирургических, химио- и радиотерапевтических методов лечения заставляет искать новые подходы к терапии первичных раков печени (Гранов A.M., Петровичев Н.Н., 1977).

Одним из таких направлений может быть разработка так называемой антиангиогенной терапии (Kerbel Т., 2002), которая базируется на специфическом действии противоопухолевого химиотерапевтического средства на сосудистое русло опухоли, таким образом, редуцируя его, приводит к некробиотическим и апоптотическим изменениям в самой опухоли.

В настоящее время опухолевый неоангиогенез интенсивно изучается во многих странах в различных аспектах: роль его в патогенезе опухолевого роста, диагностических методах, в качестве противоопухолевой терапии, прогностических маркеров течения онкологических заболеваний, значение разработки методов интервенционной радиологии и хирургических способов лечения разнообразных опухолей.

Учение об опухолевом ангиогенезе, инициированное и обоснованное J. Folkman (Folkman J., 1971), и развитое другими исследователями (Harris A.L., 1997; Hoeben А. и соавт., 2004; Holash J. и соавт.,1999; Kerbel R.S., 2000), оказалось весьма продуктивным в онкоморфологии. Оно, с одной стороны, внесло много важных фактов в патогенез опухолевого роста (Hanahan D., Folkman J., 1996; Harris A.L., 1997; Hoeben А. и соавт., 2004; Holash J. и соавт., 1999), а, с другой стороны, стало значительным достижением в практической медицине как для поиска новых мишеней лекарственного воздействия на опухоль, так и в определении прогноза при многих онкологических заболеваниях. В этом направлении проведено огромное количество исследований, показавших, что степень кровоснабжения опухоли является фактором, определяющим клиническое течение новообразования (Gasparini G., Harris A.L., 1999). Такие сведения получены для рака молочной железы (Vartanian R.K., Weidner N., 1994), простаты (Halvorsen O.J. и соавт., 2000), легкого (Fontanini G. и соавт., 1997), мела-номы (Graham С.Н. и соавт., 1994). К сожалению, в нашей стране это важное и крайне перспективное направление практически не получило развития. В то же время, в связи с внедрением в научные исследования методов иммуногистохимии, создались хорошие предпосылки для широкого и глубокого изучения проблемы опухолевого неоангиогенеза в самых различных направлениях. Сейчас трудно найти опухоли, которые не подвергались бы изучению в плане особенностей их ангиогенеза.

Однако, ангиогенезу в опухолях печени посвящено мало исследований. Кроме того, в работах, по изучению ангиогенеза в гепатоцеллюляр-ной карциноме, обычно используются единичные иммуногистохимиче-ские маркеры [Kimura Н. и соавт. 1998; Jin-no К. и соавт., 1998; Li Х.М. и соавт., 1999; Sasaki Y. и соавт., 2002; Sugimachi К. и соавт., 2003; Moon W.S. и соавт., 2003; Chen X. и соавт., 2004.], что не дает возможности получить целостное представление об этом процессе в опухоли. Для этого необходимы комплексные исследования с анализом экспрессии многочисленных маркеров, отражающих как уровень неоангиогенеза, так и факторы его регуляции.

Этому способствует широкое распространение компьютерных технологий (цифровые камеры, анализаторы изображений и т.д.) для использования морфометрии, в частности для количественной и качественной характеристики кровоснабжения новообразований. При компьютерной обработке изображений достигается высокая воспроизводимость результатов за счет большого массива исследованных объектов (Ваак К., 1994; Sallinen С., 1994). Осуществление такого изучения возможно только в центрах, занимающихся оперативной гепатологией и владеющих многочисленными иммуногистохимическими технологиями и способами мор-фометрического анализа.

Цель исследования.

Целью настоящей диссертационной работы является комплексное сравнительное иммуногистохшшческое изучение уровня развития микро-циркуляторного русла (плотности микрососудов на единицу площади), степени его дифференцировки и факторов ангиогенеза в гепатоцеллю-лярном и холангиоцеллюлярном раках с для определения роли степени кровоснабжения опухоли в ее биологическом поведении (клиническом течении) и исходе заболевания.

Эта цель реализована путем использования широкой панели имму-ногистохимических маркеров (более 15), отражающих гистогенетическое происхождение опухоли, степень развития ее микроциркуляторного русла и факторов, способствующих опухолевому неоангиогенезу с количественной оценкой перечисленных факторов при помощи компьютерного анализа изображений.

Задачи исследования.

1. Разработка оптимальной иммуногистохимической панели для определения нозологической формы (гистогенеза) первичных опухолей печени гепатоцеллюлярные, холангиоцеллюлярные карциномы

2. Разработка оптимальных способов исследования сосудистого статуса опухоли, методики измерения плотности микрососудистой сети, экспрессии факторов ангиогенеза и их соотношения с выраженностью микроциркуляторного русла.

3. Количественная оценка микроциркуляторного русла в первичных раках печени.

4. Изучение морфо-функционального состояния микроциркуляторного русла в первичных раках печени с помощью маркеров, отражающих дифференцировку гладкомышечных клеток.

5. .Выявление значения плотности микрососудов, уровни их дифферен-цировки и факторов ангиогенеза в клиническом поведении первичных опухолей печени (рецидивирование, метастазирование, выживаемость) на основании изучения корреляционных связей между изучаемыми параметрами

6. Изучение факторов ангиогенеза: VEGF, ангиопоэтин - 1, ангиопоэтин - 2 в сопоставлении с количественными параметрами микроциркуля-торного русла.

7. Построение математической модели клинического поведения опухоли печени по количественным показателям оценки экспрессии имму-ногистохимических маркеров.

Научная новизна исследования.

Впервые проведено комплексное клинико-иммуногистохимическое исследование первичных карцином печени с одновременным определением ряда маркеров, характеризующих наиболее важные патогенетические особенности опухоли, а именно, микрососудистую плотность (количество микрососудов сосудов, суммарный периметр микрососудов и суммарная площадь просвета на единицу площади препарата), ядерно-цитоплазматическое соотношение, воспалительную лейкоцитарную реакцию, экспрессия факторов ангиогенеза (эндотелиальный сосудистый фактор роста, ангиопоэтины 1 и 2).

Показано, что суммарный периметр стенки микрососудов и суммарная площадь просвета являются высокозначимыми прогностическими признаками. Впервые показано взаимодействие изученных морфометри-ческих показателей микрососудистой плотности, ядерно-цитоплазматического соотношения, воспалительной лейкоцитарной реакции и экспрессии факторов ангиогенеза, обусловливающее биологическое поведение ГЦК.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Наиболее адекватным гистогенетическим маркером ГЦК является ге-патоцитарный антиген (HepParl) чувствительность 100%, специфичность 92%, а ХЦК - СК19 чувствительность 83%, специфичность 78%

2. ГЦК характеризуется богатой, равномерно распределенной сосудистой сетью, что может служить дифференциально-диагностическим признаком для отличия ее от гиперпластических изменений печени, с одной стороны, холангиоцеллюлярной карциномы, с другой.

3. Выраженность микроциркуляторного русла ГЦК, определенная по сумме периметров сосудов и или сумме площади сечения сосудов, выявляемых иммуногистохимическим маркером эндотелия CD31, служит достоверным прогностическим признаком для оценки общей и безрецидивной выживаемости больных этим типом рака.

4. Экспрессия факторов ангиогенеза (VEGF, ангиопоэтины 1 и 2), определенная иммуногистохимически не является прогностическим признаком для оценки общей и безрецидивной выживаемости больных ГЦК.

Заключение диссертации по теме «Патологическая анатомия», Тен, Владислав Петрович

Выводы.

1. Морфологическая дифференциальная гистогенетическая диагностика первичных карцином печени является сложной задачей и решающее значение в ее разрешении принадлежит иммуногистохимическим исследованиям. Для ГЦК характерна экспрессия гепатоцитарного антигена (HepParl) и CD 10; для ХЦК патогномоничным является обнаружение СК19. Кроме того, ГЦК обладает густой равномерной сетью синусоидных сосудов, выявляемых с помощью CD31 и CD34. В противоположность этому в ХЦК микроциркуляторное русло более бедно и характеризуется неравномерностью распределения

2. Предлагаемый нами способ оценки выраженности ангиогенеза по сумме периметра микроциркуляторного русла на единицу площади обладает большей прогностической информативностью, чем обычно используемая плотность микрососудов (MVD; Weidner N и соавт., 1991).

3. В первичных карциномах печени имеется статистически значимая разница в выраженности микроциркуляторного русла: в ГЦК в среднем 58,4±5,47 микрососудов, суммарный периметр 1830±130,3 р.м, суммарная площадь сечения микрососудов 6239±601 р.м2; в ХЦК - 11,8±1,01 микрососудов, суммарный периметр 1201±103,3 |ш.

4. Степень развития микроциркуляторного русла в ГЦК, оцененная по величине суммы периметров микрососудов, обладает высокой статистически значимой прогностической информативностью: при величине этого показателя выше медианы (равной 1632 цм) средняя выживаемость больных составляла 19,3 мес, а при ее значении меньше медианы она увеличивалась до 86,7 мес. (р=0,035); 5-летнаяя выживаемость равна соответственно 0% и 43% (р=0,038). Средняя безрецидивная выживаемость при этих же условиях соответственно равна

15,3 мес и 62,4 мес. (р=0,026). Выраженность ангиогенеза в ГЦК является независимым прогностическим признаком.

5. Факторы ангиогенеза — VEGF, ангиопоэтин - 1 и ангиопоэтин - 2 экспрессируются в цитоплазме опухолевых и неопухолевых (перитуморозная зона) гепатоцитов и эндотелиальных клетках. Степень экспрессии этих факторов не коррелирует со степенью выраженности микроциркуляторного русла и не отражается на агрессивности опухоли и выживаемости больных.

6. Количественная и качественная оценка экспрессии иммуногистохимических маркеров в перифокальной зоне опухоли не выявила значимого влияния на биологическое поведение опухоли окружающей ткани печени.

7. Математическая модель, построенная на данных суммарного периметра и площади микрососудов, ядерно-цитоплазматического соотношения и индексе CD45RB в перифокальной зоне печени дает возможность с высокой точностью предсказать клинический исход заболевания. Наиболее важным является суммарный периметр сосудов. Уравнение регрессии имеет вид:

Выживаемость (месяцы) = 258 - 67{я/ц о/п) - 0,0129 {суммарная площадь микрососудов в опухоли, мкм ) - 1,52{количество CD45RB позитивных клеток в перитуморозной зоне) + 2,5{площадь экспрессии VEGF в перитуморозной зоне,%).

Практические рекомендации.

1. Все резецированные первичные опухоли печени, после рутинного гистологического исследования (необходимо для выделения ГЦК) проводить иммуногистохимическое исследование на определение экспрессии гепатоцитарного антигена. Среди первичных опухолей негативных к гепатоцитарному антигену необходимо выделить ГЦК негативные к гепатоцитарному антигену путем исследования экспрессии CD31 (равномерность сосудистого рисунка, равномерность распределения сосудов, паттерн - трабекулярный или синусоидный тип сосудов), и др. антитела.

2. Первичные опухоли печени позитивные к гепатоцитарному антигену (для выделения метастазов других локализаций), необходимо проводить исследование ШИК и ШИК с диастазой (наличие или отсутствие гликогена - ' дифференциальная диагностика с аденокациномами), иммуногистохимическое исследование с использованием следующих антител CD31 (равномерность распределения сосудов — дифференциальная диагностика с аденомами); CD 10, СК19 (дифференциальная диагностика с ХЦК).

3. ГЦК для оценки сосудистого статуса иммуногистохимически исследуются на один из панэндотелиальных маркеров (CD31, CD34). По экспрессии маркера на малом увеличении х50-100 определяются участки с наибольшей концентрацией сосудов и наиболее отчетливым окрашиванием (hot spot). С помощью цифровой камеры производятся 5-10 фиксированных изображения с увеличением х200-400. С помощью компьютерного анализатора изображения - оператор измерения дистанции определяется суммарный периметр стенки микрососудов на единицу площади или оператор площадь определяется суммарная площадь сечения микрососудов на единицу площади. Для оценки сосудистого статуса ГКЦ не приемлема методика определения микрососудистой плотности по Weidner, т.к дает результат не согласующийся с теорией ангиогенеза.

4. При исследовании факторов ангиогенеза (VEGF, ангиопоэтин — 1 и ангиопоэтин - 2) в ГЦК следует исследовать экспрессию маркеров в опухоли и перитуморозной зоне, и оценивать степень превышения экспрессии факторов ангиогенеза в опухоли над перитуморозной зоной.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Тен, Владислав Петрович, 2009 год

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство. М.: Медицина, 1990.-384 с.I

2. Боровиков В.П., Боровиков И.П. Статистический анализ и обработка данных в среде Windows. Москва, 1998. - 592с.

3. Вуколов А.А. Искусство обработки статистических данных. Москва, 2003.-315 с.

4. Гранов A.M., Петровичев Н.Н., Первичный рак печени. — JI. — Медицина, 1977, - 224с.

5. Гранов A.M. и Таразов П.Г., 1999; Гранов A.M., Таразов П.Г. Предоперационная эмболизация печёночной артерии у больных со злокачественными опухолями печени. // Вопр. онкол. 1990. - Т. 36, № 10. -С. 1189-1191.

6. Таразов П.Г., 2001 Таразов П.Г. Предоперационная артериальная химиоэмболизация при злокачественных опухолях печени (обзор литературы) // Вестн. хирургии. 2001. - № 3. - С. 119-123.

7. Achen M.G., Stacker S.A. The vascular endothelial growth factor family; proteins which guide the development of the vasculature.// Int J Exp Pathol. -1979.-P. 255 -265.

8. O.Ahmad S.A., Liu W., Jung Y.D., Fan F., Reinmuth N., Bucana C.D., Ellis L.M. Differential expression of angiopoietin-1 and angiopoietin-2 in colon carcinoma.// Cancer (Phila.).-2001.-P. 1138- 1143.

9. Ahmad S.A., Liu W., Jung Y., Fan F., Wilson M., Reinmuth N., Shaheen R. M., Bucana C.D., Ellis L.M. The effect of angiopoietin-1 and -2 on tumor growth and angiogenesis in human colon cancer.// Cancer Res. 2001. - Vol. 61. - P. 1255 - 1259.

10. Aikawa H., Takahashi H, Fujimura S., Sato M., Endo C., Sakurada A. et al. Immunohistochemical study on tumor angiogenic factors in non-small cell lung cancer.// Anticancer Res. 1999. - Vol. 19. - P. 4305 - 4309.

11. Baak JP., Ladekarl M., Sorensen FB Reproducibility of mean nuclear volume and correlation with mean nuclear area in breast cancer: an investigation of various sampling schemes// Hum. Pathol. 1994 - Vol. 25. - P. 80-85.

12. Barleon В., Sozzani S., Zhou D., Weich H.A., Mantovani A., Marme D. Migration of human monocytes in response to vascular endothelial growth factor (VEGF) is mediated via the VEGF receptor fit-1.// Blood. 1996. - Vol. 87. - P. 3336-3343.

13. Barth P.J., Weingartner К., Kohler H.H., Bittinger A. Assessment of the vascularization in prostatic carcinoma: a morphometric investigation.// Hum Pathol. 1996.-Vol. 27.-P. 1306-1310.

14. Behrem S., Zarkovic K., Eskinja N., Jonjic N. Endoglin is a better marker than CD31 in evaluation of angiogenesis in glioblastoma.// Croat Med J. 2005. -Vol. 46(3).-P. 417-422.

15. Benjamin L.E., Hemo I., Keshet E. A plasticity window for blood vessel remodelling is defined by pericyte coverage of the preformed endothelial network and is regulated by PDGF-B and VEGF.// Development. 1998. - Vol. 125. - P. 1591 - 1598.

16. Bernatchez P.N., Rollin S., Soker S., and Sirois M.G. Relative effects of VEGF-A and VEGF-C on endothelial cell proliferation, migration and PAF synthesis: role of neuropilin-1.// J Cell Biochem. 2000. - Vol. 85. - P. 629 - 639.

17. Berse В., Brown L.F., van de Water L., Dvorak H.F., Senger D.R. Vascular permeability factor (vascular endothelial growth factor) gene is expressed differentially in normal tissues, macrophages and tumors.// Mol Biol Cell. 1992. -Vol.3.P.211.-.220.

18. Bochner B.H., Cote R.J., Weidner N., Groshen S., Chen S.C., Skinner D.G. et al. Angiogenesis in bladder cancer: relationship between microvessel density and tumor prognosis.// J Natl Cancer Inst. 1995. - Vol. 87.-P. 1603 - 1612.

19. Boehm Т., Folkman J., Browder T. O'Reilly M.S. Antiangiogenic therapy of experimental cancer does not induce acquired drug resistance.// Nature (Lond.). -1997. Vol. 386. - P. 671 - 674.

20. Borre M., Offersen B.V., Nerstrom В., Overgaard J. Microvesel density predict survival in prostate cancer patients subjected to watchful waiting.// Br J Cancer. —1998. Vol. 78. - P. 940 - 944.

21. Borscheri N, Roessner A, Rocken C. Canalicular immunostaining of neprilysin (CD 10) as a diagnostic marker for hepatocellular carcinoma // Am. J. Surg Pathol.-2001 Vol. 25.-P. 1297-1303.

22. Bossi P., Viale G., Lee A.K., Alfano R., Coggi G., Bosari S. Angiogenesis in colorectal tumors: microvessel quantitation in adenomas and carcinomas with clinicopathological correlations.// Cancer Res. 1995. - Vol. 55. - P. 5049 - 5053.

23. Brawer M.K., Deering R.E., Brown M., Preston S.D., Bigler S.A. Predictors of pathologic stage in prostatic carcinoma. The role of neovascularity.// Cancer. -1994.-Vol. 73.-P. 678-687.

24. Вгет S., Cotran R., Folkman J. Tumor angiogenesis: a quantitative method for histologic granding.// J.Natl.Cancer Inst. 1972. Vol 48. - P. 347-356.

25. Brustmann H., Naude S. Vascular endothelial growth factor expression in serous ovarian carcinoma: relationship with high mitotic activity and high FIGO stage.// Gynecol Oncol. 2002. - Vol. 84(1). - P. 47 - 52.

26. Busam K.J., Berwick M., Blessing K., Fandrey K., Kang S., Karaoli T. et al. Tumor vascularity is not a prognostic factor for malignant melanoma of the skin.// Am J Pathol.- 1995.-Vol. 147.-P. 1049- 1056.

27. Carnochan P., Briggs J.C., Westbury G., Davies A.J. The vascularity of cutaneous melanoma: a quantitative histological study of lesions 0.85-1.25 mm in thickness.// Br J Cancer. 1991. - Vol. 64. — P. 102- 107.

28. Chen X. Chen X, Higgins J, Cheung ST, Li R, Mason V, Montgomery K, Fan ST, van de Rijn M, So S. Novel endothelial cell markers in hepatocellular carcinoma. Mod Pathol. 2004 Oct; 17(10):1198-210.

29. Chhieng D.C., Tabbara S.O., Marley E.F., Talley L.I., Frost A.R. Microvessel density and vascular endothelial growth factor expression in infiltrating lobular mammary carcinoma.// Breast J. 2003. - Vol. 9(3). - P. 200 - 207.

30. Chu P.G., Ishizawa S., Wu E., Weiss L.M. Hepatocyte antigen as a marker of hepatocellular carcinoma.// Am. J. Surg. Pathol. 2001 - Vol. 26. - P. 978-988.

31. Cianchi F., Palomba A., Messerini L., Boddi V., Asirelli G., Perigli G., et al. Tumor angiogenesis in lymph node-negative rectal cancer: correlation with clinicopathological parameters and prognosis.// Ann Surg Oncol. 2002. - Vol. 9. -P. 20-26. .

32. Cooper J., Sharkey A., Mc Laren J., Charnock-Jones D., Smith S. Localization of vascular endothelial growth factor and its receptor gflt, in human placenta and decidua by immunohistochemistry.// J Reprod Fertil. 1995. - Vol. 105. - P. 205213.

33. Cox G., Walker R.A., Andi A., Steward W.P., O'Byrne K.J. Prognostic significance of platelet and microv.essel counts in operable non-small cell lung cancer.// Lung Cancer. 2000. - Vol. 29. - P. 169 - 177.

34. Cristensen WN, Boitnott JK, Kuhajda FP. Immunoperoxidase staining as a diagnostic aid for hepatocellular carcinoma.// Mod. Pathol 1989 - Vol.2 - P.8-12.

35. Cui S., Hano H., Sakata A., Harada Т., Liu Т., Takai S., Ushigome S. Enhanced CD34 expression of sinusoid-like vascular endothelial cells in hepatocellular carcinoma.// Pathol Int. 1996. - Vol. 46(10). - P. 751 - 756.

36. D'Errico A, Baccarini P, Fiorentino M, et al. Histogenesis of Primary Liver carcinomas: strengths and weaknesses of cytokeratin profile and albumin mRNA detection.//Hum Pathol 1996 - Vol. 27 - P.599-604

37. Davis S., Yancopoulos G.D. The angiopoietins: Yin and Yang in angiogenesis. Curr.// Top. Microbiol. Immunol. 1999. - Vol 237. - P. 173-185.

38. Deli G., Jin C.H., Mu R., Yang S., Liang Y., Chen D., Makuuchi M. Immunohistochemical assessment of angiogenesis in hepatocellular carcinoma and surrounding cirrhotic liver tissues.// World J. Gastroenterol. 2005. - Vol. 21. - P. 960-963.

39. Demirag F., Unsal E., Yilmaz A., Caglar A. Prognostic significance of vascular endothelial growth factor, tumor necrosis, and mitotic activity index in malignant pleural mesothelioma.// Chest. 2005. - Vol. 128(5). - P. 3382 - 3387.

40. Dhillon A.P., Colombari R., Savage K., Scheuer P.J. An immunohistochemical study of the blood vessels within primary hepatocellular tumours.// Liver. 1992. -Vol. 12(5).-P. 311 -318.

41. Di Raimondo F., Palumbo G.A., Molica S., Giustolisi R. Angiogenesis in chronic myeloproliferative diseases.// Acta Haematol. 2001. - Vol. 106. - P. 177. - 183.

42. Dickinson A.J., Fox S.B., Persad R.A., Hollyer J., Sibley G.N., Harris A.L. Quantification of angiogenesis as an independent predictor of prognosis in invasive bladder carcinomas.// Br J Urol. 1994. - Vol. 74. - P. 762 - 726.

43. Duband J.L., Gimona M., Scatena M., Sartore S., Small J.V. Calponin and SM22 as differentiated markers of smooth muscle: spatiotemporal distribution during avian embryonic development.// Differentiation. — 1993. Vol. 55. - P. 1 -11.

44. Dumont D.J., Yamaguchi T.P., Conlon R.A., Rossant J., Breitman M.L. Тек, a novel tyrosine kinase gene located on mouse chromosome 4, is expressed inepithelial cells, and their presumptive precursors.// Oncogene. 1992. - Vol. 7. -P. 1471-1480.

45. Dvorak H.F., Brown L.F., Detmar M. and Dvorak A.M". Review: Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor, microvascular hyperpermeability and angiogenesis.// Am. J. Pathol. 1995. - Vol. 146. - P. 1029 - 1039.

46. Eberhard A., Kahlert S., Goede V., Hemmerlein В., Plate K.H., Augustin H.G. Heterogeneity of angiogenesis and blood vessel maturation in human tumors: implications for antiangiogenic tumor therapies.// Cancer Res. 2000. - Vol. 60(5).-P. 1388- 1393.

47. Edwards J.G., Cox G., Andi A., Jones J.L., Walker R.A., Waller D.A., O'Byrne K.J. Angiogenesis is an independent prognostic factor in malignant mesothelioma. //Br J Cancer. 2001. - Vol. 85(6). - P. 863 - 868.

48. Edwards J.G., Swinson D.E., Jones J.L., Muller S., Waller D.A., O'Byrne K.J. Tumor necrosis correlates with angiogenesis and is a predictor of poor prognosis inmalignant mesothelioma.// Chest. 2003. - Vol. 124(5). - P. 1916 - 1923.i

49. Eggert A., Ikegami N., Kwiatkowski J., Zhao H., Brodeur G. M., Himelstein B. P. High-level expression of angiogenic factors is associated with advanced tumor stage in human neuroblastomas.// Clin. Cancer Res. 2000. - Vol. 6. - P. 1900 -1908.

50. E1-Serag H.B Hepatocellular carcinoma: an epidemiologic view.// J. Clin. Gastroenterol. 2002. - Vol. 35. - P. S72 - S78

51. Etoh Т., Inoue H., Tanaka S., Barnard G. F., Kitano S., Mori M. Angiopoietin-2 is related to tumor angiogenesis in gastric carcinoma: possible in vivo regulation via induction of proteases.// Cancer Res. 2001. - Vol. 61. -P. 2145 - 2153.

52. Fallowfield M.E., Cook M.G. The vascularity of primary cutaneous melanoma.// J Pathol. 1991. - Vol. 164. - P. 241 - 244.

53. Ferrara N., Carver-Moore K., Chen H., Dowd M., Lu L., O'Shea K.S., Powell-Braxton L., Hillan K.J., Moore M.W. Heterozygous embryonic lethality induced by targeted inactivation of the VEGF gene.// Nature. 1996. - Vol. 380. - P. 439 -442.

54. Ferrara N., Henzel W.J. Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding growth factor specific for endothelial cell.// Biochem. Biophys. res. Commun. — 1989.-Vol. 161.-P. 851 -855.

55. Fine B.A., Valente P.T., Feinstein G.I., Dey T. VEGF, flt-1, and KDR/flk-1 as prognostic indicators in endometrial carcinoma.// Gynecol Oncol. 2000. - Vol.76.-P. 33 39.

56. Folkman J. Angiogenesis in Cancer, vascular, rheumatoid and other disease.// Nat. Med. 1995. - Vol. 1. - P. 27 - 31.

57. Folkman, J. Tumor angiogenesis: therapeutic implications.// N. Engl.J.Med. — 1971.-Vol. 285.-P. 1182- 1186.

58. Fontanini G., Bigini D., Vignati S., Basolo F., Mussi A., Lucchi M et al. Microvessel count predicts metastatic disease and survival in non-small cell lung cancer.//J Pathol. 1995.-Vol. 177.-P. 57-63.

59. Fontanini G., Lucchi M., Vignati S., Mussi A., Ciardiello F., De Laurentiis M. et al. Angiogenesis as a prognostic indicator of survival in non-small-cell lung carcinoma: a prospective study.// J Natl Cancer Inst. 1997. - Vol. 89. — P. 881 -886.

60. Franco D, Capussotti L, Smadja C, et al. Resection of hepatocellular carcinomas. Results in 72 european patients with cirrhosis J/Gastroenterology -.1990-Vol. 98 -P.733-738.

61. Fregene T.A., Khanuja P.S., Noto A.C., Gehani S.K., Van Egmont E.M., Luz D.A. et al. Tumor-associated angiogenesis in prostate cancer.// Anticancer Res. -1993.-Vol. 13.-P. 2377-2381.

62. Friedkin M., Roberts D. The enzymatic synthesis of nucleosides. I. Thymidine phosphorylase in mammalian tissue.// J Biol Chem. 1954. - Vol. 207(1). - P. 245 -256.

63. Fujiwaki R., Hata K., Iida K., Maede Y., Watanabe Y., Koike M., Miyazaki K. Co-expression of vascular endothelial growth factor and thymidine phosphorylase in endometrial cancer.// Acta Obstet Gynecol Scand. 1999. - Vol. 78(8). - P. 728 -734.

64. Furukawa Т., Yoshimura A., Sumizawa Т., Haraguchi M., Akiyama S., Fukui K., Ishizawa M., Yamada Y. Angiogenic factor.// Nature. 1992. - Vol. 23. - P. 356 -372.

65. Gallo R.C., Perry S., Breitman T.R. The enzymatic mechanisms for deoxythymidine synthesis in human'leukocytes. I. Substrate inhibition by thymine and activation by phosphate or arsenate.// J Biol Chem. 1967. - Vol. 242(21). -P. 5059- 5068.

66. Gasparini G., Harris A L. Prognostic significance of tumor vascularity.// In: Teicher B.A., editor. Antiangiogenic agents in cancer therapy. Totowa (NJ): Humana Press. 1999. - P. 317 - 399.

67. Gasparini G. Clinical significance of determination of surrogate markers of angiogenesis in breast cancer.// Crit Rev Oncol Hematol. 2001. - Vol. 37. - P. 97 -114.

68. Giatromanolaki A., Koulcourakis M., O'Byrne K., Fox S., Whitehouse R., Talbot D.C. et al. Prognostic value of angiogenesis in operable non-small cell lung cancer.// J Pathol. 1996. - Vol. 179. - P. 80 - 88.

69. Gitay-Goren H., Halaban R., Neufeld G. Human melanoma cells but not normal melanocytes express vascular endothelial growth factor receptors.// Biochem Biophys Res Commun. 1993. - Vol. 190. - P. 702 - 708.

70. Graham C.H., Rivers J., Kerbel R.S., Stankiewicz K.S., White W.L. Extent of vascularization as a prognostic indicator in thin (<0.76 mm) malignant melanomas.//Am J Pathol. 1994.-Vol. 145-P. 510-514.

71. Greenblatt M., Shubi P. Tumor angiogenesis: transfilter diffusion studies in the hamster by transparent chamber technique.// J.Natl.Cancer Inst. 1968 - Vol. 41. -P. 111-124.

72. Guyton A.C., Hall J.E. Local control of blood flow by the tissues, and humoral regulation.// Textbook of Medical Physiology. Ed by M.J. Wonsiewicz. Philadelphia, WB Saunders Company. 1996. - P. 199 - 208.

73. Halvorsen O.J., Haukaas S., Hoisaeter P.A., Akslen L.A. Independent prognostic importance of microvessel density in clinically localized prostate cancer.// Anticancer Res. 2000. - Vol. 20. - P. 3791 - 3799.

74. Hanahan D, Folkman J: Patterns and emerging mechanism of the angiogenicswitch during tumorigenesis. Cell 1996, 86:353-364i

75. Haraguchi M., Miyadera K., Uemura K., Sumizawa Т., Furukawa Т., Yamada K., Akiyama S., Yamada Y. Angiogenic activity of enzymes.// Nature. -1994.-Vol. 368.-P. 198-204.

76. Harris A.L. Antiangiogenesis for cancer therapy.// Lancet. 1997. - Vol. 349.-P. 13-15.

77. Harrison LE, Fong Y, Klimstra DS, Zee SY, Blumgart LH. Surgical treatment of 32 patients with peripheral intrahepatic cholangiocarcinoma//5r J Surg- 1998. Vol.85. -P.l068-70.

78. Hartenbach E.M., Olson T.A., Goswitz J.J., Mohanraj D., Twiggs L.B., Carson L.F., Ramakrishnan S. Vascular endothelial growth factor (VEGF) expression and survival in human epithelial ovarian carcinomas.// Cancer Lett. -1997.-Vol. 121(2).-P. 169- 175.

79. Hazar В., Paydas S., Zorludemir S., Sahin В., Tuncer I. Prognostic significance of microvessel density ^nd vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in non-Hodgkin's lymphoma.// Leuk Lymphoma. 2003. - Vol. 44(12). -P. 2089-2093.

80. Hill C.B., Yeh I.T. Myoepithelial cell staining patterns of papillary breast lesions: from intraductal papillomas to invasive papillary carcinomas.// Am J Clin Pathol. 2005. - Vol. 123(1). - P. 36 - 44.

81. Hirphashi S. и соавт., 2000

82. Ho J.W., Poon R.T., Sun C.K, Xue W.C., Fan S.T. Clinicopathological and prognostic implications of endoglin (CD 105) expression in hepatocellular carcinoma and its adjacent non-tumorous liver.// World J Gastroenterol. 2005. — Vol. 11(2).-P. 176-181.

83. Hoeben A., Landuyt В., Highley M.S., Wildiers H., Van Oosterom A.T., De Bruijn E.A. Vascular endothelial growth factor and angiogenesis. Review.// Pharmacol Rev. 2004. - Vol. 56(4). - P.549 - 580.

84. Holash J., Maisonpierre P.C., Compton D., Boland P., Alexander C.R., Zagzag D., Yancopoulos G.D., Weigand S.J. Vessel cooption, regression, and growth in tumors mediated by angiopoietins and VEGF.// Science. 1999. - Vol. 284.-P. 1994- 1998.

85. Hurlimann J, Gardiol D. Immunohistochemistry in the differential diagnosis of liver carcinomas//Am. J. Surg. Pathol. 1991 - Vol.15 -P.280-8

86. Ichikura Т., Tomimatsu S., Ohkura E., Mochizuki H. Prognostic significance of the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and VEGF-C in gastric carcinoma.//J Surg Oncol.-2001.-Vol. 78(2).-P. 132- 137.

87. Utzsch M.H., el Kouni M.H., Cha S. Kinetic studies of thymidine phosphorylase from mouse liver.// Biochemistry. 1985. - Vol. 24(24). - P. 6799 -67807.

88. Ishak KG, Goodman ZD, Stocker JT Hepatocellular Carcinoma. In Atlas of Tumor pathology: Tumor of the Liver and Intrahepatic Bile Ducts. Washington, DC: Armed Forces Institute of Pathology, 2001: 199-244

89. Islam A.H., Ehara Т., Kato. H., Hayama M., Kobayashi S., Igawa Y., Nishizawa O. Calponin hi expression in renal tumor vessels: correlations with multiple pathological factors of renal cell carcinoma.// J Urol. 2004. - Vol. 171(3).-P. 1319- 1323.

90. Islam A.H., Ehara Т., Kato H., Hayama M., Nishizawa O. Loss of calponin hi in renal angiomyolipoma correlates with aggressive clinical behavior.// Urology. 2004. - Vol. 64(3). - P. 468 - 473.

91. Jin-no K, Tanimizu M, Hyodo I, Nishikawa Y, Hosokawa Y, Endo H, Doi T, Mandai K, Ishitsuka H. Circulating platelet-derived endothelial cell growth factor increases in hepatocellular carcinoma patients//Cancer 1998. Vol. 82. — P. 1260-7.

92. Jones A., Fujiyama C., Turner K., Fuggle S, Cranston D., Turley H. et al. Angiogenesis and lymphangiogenesis in stage 1 germ cell tumours of the testis.// BJU Int. 2000. - Vol. 86. - P. 80 - 86.

93. Kakar S, Muir T, Murphy LM, Lloyd RV, Burgart LJ. Immunoreactivity of Hep Par 1 in hepatic and extrahepatic tumors and its correlation with albumin in situ hybridization in hepatocellular carcinoma.// Am J Clin Pathol 2003, - Vol. 119.-P361-66.

94. Karpanen Т., Egeblad M., Karkkainen M.J., ICubo H., Yla-Herttuala S., Jaattela M., Alitalo K. Vascular endothelial growth factor С promotes tumor lymphangiogenesis and intralymphatic tumor growth.// Cancer Res. 2001. - Vol. 61.-P. 1786- 1790.i

95. Kerbel R.S. Tumor angiogenesis: past, present and the near future.// Carcinogenesis. 2000. - Vol. 21. - P. 505 - 515.

96. Kim K.J., Li В., Winer J., Armanini M., Gillett N., Phillips H.S., Ferrera N. Inhibition of vascular endothelial growth factor-induced angiogenesis suppresses tumour growth in vivo.//Nature. 1993. - Vol. 362. - P. 841 - 844.

97. Kimura H., Nakajima Т., Kagawa K., Deguchi Т., Kakusui M., Katagishi Т., Okanoue Т., Kashima K., Ashihara T. Angiogenesis in hepatocellular carcinoma as evaluated by CD34 immunohistochemistry.// Liver. 1998. - Vol. 18(1). - P. 14 -19.

98. Koga K., Todaka Т., Morioka M., Hamada J., Kai Y., Yano S., Okamura A., Takakura N., Suda Т., Ushio Y. Expression of angiopoieton-2 in human glioma cells and its role for angiogenesis.// Cancer Res. 2001. - Vol. 61. - P. 6248 -6254.

99. Konno S., Takebayashi Y., Aiba M., Akiyama S., Ogawa K. Clinicopathological and prognostic significance of thymidine phosphorylase and proliferating cell nuclear antigen in gastric carcinoma.// Cancer Lett. 2001. -Vol. 166(1).-P. 103-111.

100. Konno S., Takebayashi Y., Higashimoto M , Katsube T , Kanzaki A , Kawahara M , Takenoshita S , Aiba M , Ogawa K. Thymidine phosphorylase expression in gastric carcinoma as a marker for metastasis.// Anticancer Res. — 2003.-Vol. 23(6D). P. 5011 -5014.

101. Krenitsky Т.A., Koszalka G.W., Tuttle J.V. Purine nucleoside synthesis, an efficient method employing nucleoside phosphorylases.// Biochemistry. — 1981. -Vol. 20(12).-P. 3615 -3621.

102. Kumar P., Wang J. M., Bemabeu C. CD105 and angiogenesis.// J. Pathol. -1996. Vol. 178. - P. 363 - 366.

103. Kumar P., Ghellal A., Li C„ Byrne G., Haboubi N., Wang J. M., Bundred N. Breast carcinoma: vascular density determined using CD 105 antibody correlates with tumor prognosis.// Cancer Res. 1999. - Vol. 59. - P. 856 - 861.

104. Lamps LW, Folpe AL The diagnostic value of hepatocyte paraffin antibody 1 in differentiating hepatocellular neoplasms from nonhepatic tumors: a review// Advances in Anatomic Pathology 2003 - Vol. 10 - P. 39-43.

105. Langley R.R., Ramirez K.M., Tsan R.Z., Van Arsdall M., Nilsson M.B., Fidler I.J. Tissue-specific microvascular endothelial cell lines from H-2K(b)-tsA58 mice for studies of angiogenesis and metastasis.// Cancer Res. 2003. - Vol. 63(11).-P. 2971 -2976.

106. Lauren J., Gunji Y., Alitalo K. Is angiopoietin-2 necessary for the initiation of tumor angiogenesis?// Am J Path. 1998. - Vol. 153.-P. 1333- 1339.

107. Lei JY, Bourne PA, diSantAgnese PA, Huang J. Cytoplasmic staining of TTF-1 in the differential diagnosis of hepatocellular carcinoma vs cholangiocarcinoma and metastatic carcinoma of the liver// Am J Clin Pathol. -2006-Vol. 125 -P.519-25.

108. Leong AS, Sormunen RT, Tsui WM, Liew CT. Hep Par 1 and selected antibodies in the immunohistological distinction of hepatocellular carcinoma from cholangiocarcinoma, combined tumours and metastatic carcinoma.// Histopathology 1998 - Vol.33 - P.318-324

109. Leung D.W., Cachianes G., Kuang W.J., Goeddel D.V., Ferrara N. Vascular endothelial growth factor is a secreted angiogenic mitogen.// Science. 1989. -Vol. 246.-P. 1306- 1309.

110. Li X.M., Tang Z.Y., Qin L.X., Zhou J., Sun H.C. Serum vascular endothelial growth factor is a predictor of' invasion and metastasis in hepatocellular carcinoma.// J Exp Clin Cancer Res. 1999. - Vol. 18(4)P.511 - 517.

111. Lind A.J., Wikstrom P., Granfors Т., Egevad L., Stattin P., Bergh A. Angiopoietin 2 expression is related to histological grade, vascular density, metastases, and outcome in prostate cancer.// Prostate. 2005. - Vol. 62(4). - P. 394-399.

112. Lindmark G., Gerdin В., Sundberg C., Pahlman L., Bergstrom R., Glimelius

113. B. Prognostic significance of the microvascular count in colorectal cancer.// J Clin Oncol. 1996. - Vol. 14. - P. 461 - 466.

114. Loncaster J.A., Cooper R.A., Logue J.P., Davidson S.E., Hunter R.D., West

115. C.M. Vascular endothelial growth factor (VEGF) expression is a prognostic factor for radiotherapy outcome in advanced carcinoma of the cervix.// Br J Cancer. -2000. Vol. 83(5). - P. 620 - 625.

116. Ma CK, Zarbo RJ, Frierson HF Jr, Lee MW. Comparative immunohistochemical study of primary and metastatic carcinomas of the liver11 Am J Clin Pathol 1993 - Vol.99 - P.551-557

117. Macchiarini P., Fontanini G., Hardin M.J., Squartini F., Angeletti C.A. Relation of neovascularisation to metastasis of non-small-cell lung cancer.// Lancet 1992. Vol. 340. - P. 145 - 146

118. MacConmara M., O'Hanlon D.M., Kiely M.J., Connolly Y., Jeffers M., Keane F.B. An evaluation of the prognostic significance of vascular endothelial growth factor in node positive primary breast carcinoma.// Int J Oncol. 2002. -Vol. 20(4).-P. 717-721.

119. Madariaga JR, Iwatsuki S, Todo S, Lee RG, Irish W, Starzl ТЕ. Liver resection for hilar and peripheral cholangiocarcinoma: a study of 62 cases.// Ann Surg. 1998. Vol. 227. - P.70-79.

120. Maeda K., Chung Y.S., Takatsuka S., Ogawa Y., Sawada Т., Yamashita Y. et al. Tumor angiogenesis as a predictor of recurrence in gastric carcinoma.// J Clin Oncol.-1995.-Vol. 13.-P. 477-481.

121. Makitie Т., Summanen P., Tarkkanen A., Kivela T. Microvascular density in predicting survival of patients with choroidal and ciliary body melanoma.// Invest Ophthalmol Vis Sci. 1999. - Vol. 40. - P. 2471 - 2480.

122. Martone T, Rosso P, Albera R, Migliaretti G, Fraire F, Pignataro L, Pruneri G, Bellone G, Cortesina G.1 Prognostic relevance of CD 105+ microvessel density in HNSCC patient outcome.// Oral Oncol. 2005. - Vol. 41(2). - P. 147 -155.

123. Mivervini MI, Demetris AJ, Lee RG, Carr BI, Madariaga J, Nalesnik MA. Utilization of hepatocyte-specific antibody in the immunocytochemical evaluation of liver tumors I I Mod Pathol 1997 - Vol.10 - P.686-692.

124. Moehler T.M, Neben К, Ho A.D, Goldschmidt H. Angiogenesis in hematologic malignancies.// Ann Hematol. 2001. - Vol. 80. - P. 695 - 705.

125. Munshi N.C, Wilson C. Increased bone marrow microvessel density in newly diagnosed multiple myeloma carries a poor prognosis.// Semin Oncol. -2001.-Vol. 28.-P. 565 569.

126. Moon WS, Rhyu KH, Kang MJ, Lee DG, Yu HC, Yeum JH, Koh GY, Tamawski AS. Overexpression of VEGF and angiopoietin 2: a key to high vascularity of hepatocellular carcinoma?// Mod Pathol. 2003. - Vol.16 - P.552-7.

127. Nakamura S., Muro H., Suzuki S., Sakaguchi Т., Konno H., Baba S., Syed A.S. Immunohistochemical studies on endothelial cell phenotype in hepatocellular carcinoma.// Hepatology. 1997. - Vol. 26(2). - P. 407 - 415.

128. Neufeld G., Cohen Т., Gengrinovitch S., Poltorak Z. Vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptors.// FASEB J. 1999. - Vol. 13(1). - P. 9 -22.

129. Ng I.O., Poon R.T., Lee J.M., Fan S.T., Ng M., Tso W.K. Microvessel density, vascular endothelial growth factor and its receptors Flt-1 and Flk-l/KDR in hepatocellular carcinoma.// Am J Clin Pathol. 2001. - Vol. 116(6). - P. 838 -845.

130. Niedergethmann M., Hildenbrand R., Wolf G., Verbeke C.S., Richter A., Post S. Angiogenesis and cathepsin expression are prognostic factors in pancreatic adenocarcinoma after curative resection.// Int J Pancreatol. 2000. - Vol. 28(1). -P. 31 -39.

131. Ochiumi Т., Tanaka S., Oka S., Hiyama Т., Ito M., Kitadai Y., Haruma K., Chayama K. Clinical significance of angiopoietin-2 expression at the deepest invasive tumor site of advanced colorectal carcinoma.// Int J Oncol. 2004. - Vol. 24(3).-P. 539-547.

132. Offersen B.V., Pfeiffer P., Hamilton-Dutoit S., Overgaard J. Patterns of angiogenesis in nonsmall-cell lung carcinoma.// Cancer. 2001. - Vol. 91(8). - P. 1500- 1509.

133. Olivarez D., Ulbright Т., DeRiese W., Foster R., Reister Т., Einhorn L. et al. Neovascularization in clinical stage A testicular germ cell tumor: prediction of metastatic disease.// Cancer Res. 1994. - Vol. 54. - P. 2800 - 2802.

134. Oliveira AM, Erickson LA, Burgart LJ, et al. Differentiation of primary and metastatic clear cell tumors in the liver by in situ hybridization for albumin messenger RNA //Am. J. Surg. Path6l. 2000 - Vol.24 - P. 177-82

135. Ortega N., Hutchings H., and Plouet J. Signal relays in the VEGF system.// Front Biosci. 1999. - Vol. 4. - P. 141 - 152.

136. Owens G. Regulation of differentiation of vascular smooth muscle cells.// Physiol Rev. 1995.-Vol. 75.-P. 487-517.

137. Paley P.J., Staskus K.A., Gebhard K., Mohanraj D., Twiggs L.B., Carson L.F., Ramakrishnan S. Vascular endothelial growth factor expression in early stage ovarian carcinoma.// Cancer. 1997. Vol. 80(1). - P. 98 - 106.

138. Paradis V., Lagha N.B., Zeimoura L., Blanchet P., Eschwege P., Ba N., Benoit G., Jardin A., Bedossa P. Expression of vascular endothelial growth factor in renal cell carcinomas.// Virchows Arch. 2000. - Vol. 436(4). - P. 351 - 356.

139. Park Y.N., Kim Y.B., Yang K.M., Park C. Increased expression of vascular endothelial growth factor and angiogenesis in the early stage of multistep hepatocarcinogenesis.// Arch Pathol Lab Med. 2000. - Vol. 124(7). - P. 1061 -1065.

140. Pietra N., Sarli L., Caruana P., Cabras A., Costi R., Gobbi S. et al. Is tumour angiogenesis a prognostic factor in patients with colorectal cancer and no involved nodes?// Eur J Surg. 2000. - Vol. 166. - P. 552 - 556.

141. Plate K.H., Breider G., Weich H.A., Risau W. Vascular endothelial growth factor is a potent tumour angiogenic factor in human glioma in vivo.// Nature (London). 1992. - Vol. 359. - P. 845 - 848.

142. Plouet J., Schilling J., Gospodarowicz D. Isolation and characterization of a new identified endothelial cell mitogen produced by AtT20 cells.// EMBO J. -1989.-Vol. 8.-P. 3801 -3806.

143. Poon R.T., Ng I.O., Lau C., Yu W.C., Yang Z.F., Fan S.T., Wong J. Tumor microvessel density as a predictor of recurrence after resection of hepatocellular carcinoma: a prospective study.// J Clin Oncol. 2002. - Vol. 20(7). - P. 1775 -1785.

144. Rajkumar S.V., Kyle R.A. Angiogenesis in multiple myeloma.// Semin Oncol.-2001.-Vol. 28.-P. 560-564.

145. Rajkumar S.V., Mesa R.A., Tefferi A. A review of angiogenesis and anti-angiogenic therapy in hematologic malignancies.// J Hematother Stem Cell Res. -2002.-Vol. 11.-P. 33 -47.

146. Reiher F., Ozer O., Pins M., Jovanovic B.D., Eggener S., Campbell S.C. p53 and microvessel density in primary resection specimens of superficial bladdercancer.//J Urol. 2002. - Vol. 167.- 1469- 1474.i

147. Risau W. Mechanisms of angiogenesis.// Nature. 1997. - Vol. 386. - P. 671-674.

148. Risau W. Differentiation of endothelium.// FASEB J. 1995. - Vol. 9. - P. 926-933.

149. Rogatsch H., Hittmair A., Reissigl A., Mikuz G., Feichtinger H. Microvessel density in core biopsies of prostatic adenocarcinoma: a stage predictor?// J Pathol 1997.-Vol. 182.-P. 205 -210.

150. Rubin M.A., Buyyounouski M., Bagiella E., Sharir S., Neugut A., Benson M. et al. Microvessel density in prostate cancer: lack of correlation with tumor grade, pathologic stage, and clinical outcome.// Urology. 1999. - Vol. 53. - 542 -547.

151. Saad R.S., El-Gohary Y., Memari E., Liu Y.L., Silverman J.F. Endoglin (CD105) and vascular endothelial growth factor as prognostic markers in esophageal adenocarcinoma.// Hum Pathol. 2005. - Vol. 36(9). - P. 955 - 961.

152. Saad R.S., Liu Y.L., Nathan G., Celebrezze J., Medich D., Silverman J.F. Endoglin (CD 105) and vascular endothelial growth factor as prognostic markers in colorectal cancer.// Mod Pathol. 2004. - Vol. 17(2). - P. 197 - 203.

153. Saclarides T.J., Speziale N.J., Drab E., Szeluga D.J., Rubin D.B. Tumor angiogenesis and rectal carcinoma.// Dis Colon Rectum. 1994. - Vol. 37. - P. 921 - 926.

154. Sage E.H. Pieces of eight: bioactive fragment of extracellular proteins as regulators of angiogenesis.// Trends Cell Biol. 1997. - Vol. 7. - P. 182 - 186.

155. Sakamoto M., Ino Y., Fujii Т., Hirohashi S. Phenotype changes in tumor vessels associated with the progression of hepatocellular carcinoma.// Jpn J Clin Oncol. 1993. - Vol. 23(2). - P. 98 - 104.

156. Salvesen H.B., Gulluoglu M.G., Stefansson I., Alcslen L.A. Significance of CD 105 expression for tumour angiogenesis and prognosis in endometrial carcinomas.// APMIS. 2003. -Vol. 111(11).-P. 1011 - 1018.

157. Sato T.N, Qin Y, Kozak C.A, Audus K.L. Tie-1 and tie-2 define a new class of putative receptor tyrosine kinase genes expressed in early embryonic vascular system.// Proc Natl Acad Sci USA. 1993. - Vol. 90. - P. 9355 - 9358.

158. Schlaeppi J.M, Siemeister G, Weindel K, Schnell C, Wood J. Characterization of a new potent, in vivo neutralizing monoclonal antibody to human vascular endothelial growth factor.// J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1999. -Vol. 125.-P. 336-342.i

159. Schnurch H, Risau W. Expression of tie-2, a member of a novel family of receptor tyrosine kinases, in the endothelial cell lineage.// Development. 1993. — Vol. 119.-P. 957-966.

160. Senger D, Brown L, Claffey K, Dvorak A. Vascular permeability factor, tumor angiogenesis and stroma degeneration.// Invasion Metastasis. 1995. - Vol. 14.-P. 385-394.

161. Senger D.R, Galli S.J, Dvorak A.M., Perruzzi C.A, Harvey V.S, Dvorak H.F. Tumor cells secrete a vascular permeability factor that promotesaccumulation of ascites fluids.// Science. 1983. - Vol. 219. - P. 983 - 985.i

162. Senger D.R., Van De Water L., Brown L.F., Nagy J.A., Yeo K.-T., Yeo T.-K., Berse В., Jackman R.W., Dvorak A.M., Dvorak H.F. Vascular permeability factor (VPE, VEGF) in tumor biology.// Cancer Metastasis Rev. 1993. - Vol. 12. -P. 303 -324.

163. Sezer O., Niemoller K., Eucker J., Jakob C., Kaufmann O., Zavrski I. et al. Bone marrow microvessel density is a prognostic factor for survival in patients with multiple myeloma.// Ann Hematol. 2000. - Vol. 79. - P. 574 - 577.

164. Shen G.H., Ghazizadeh M., Kawanami O., Shimizu H., Jin E., Araki Т., Sugisaki Y. Prognostic significance of vascular endothelial growth factor expression in human ovarian carcinoma.// Br J Cancer. 2000. - Vol. 83(2). — P. 196-203.

165. Shih C.H., Ozawa S., Ando N., Ueda M., Kitajima M. Vascular endothelial growth factor expression predicts outcome and lymph node metastasis in squamous cell carcinoma of the esophagus.// Clin Cancer Res. 2000. - Vol. 6. - P. 1161 -1168.

166. Shiraishi S., Nalcagava K., Kinukawa N., Nakano H., Sueshi K. Immunohistochemical localization of vascular endothelial growth factor in the human placenta.//Placenta. 1996.- Vol. 17.-P. 111 - 121.

167. Shweiki D., Itin A., Soffer D.^ Keshet E. Vascular endothelial growth factor induced by hypoxia may mediate hypoxia-initiated angiogenesis.// Nature. 1992. -Vol. 359.-P. 843-845.

168. Smith B.D., Smith G.L., Carter D., Sasaki C.T., Haffty B.G. Prognostic significance of vascular endothelial growth factor protein levels in oral and oropharyngeal squamous cell carcinoma.// J Clin Oncol. 2000. - Vol. 18(10). -P. 2046 - 2052.

169. Soker S., Takashima S., Miao H.Q., Neufeld G., Klagsbrun M. Neuropilin-1 is expressed by endothelial and tumor cells as an isoform-specific receptor for vascular endothelial growth factor.// Cell. 1998. - Vol. 92. - P. 735 - 745.

170. Srivastava A., Laidler P., Davies R.P., Horgan K., Hughes L.E. The prognostic significance of tumor vascularity in intermediate-thickness (0.76-4.0 mm thick) skin melanoma. A quantitative histologic study.// Am J Pathol. 1988. -Vol. 133.-P. 419-423.

171. Staume O., Akslen L.A., 2001 Expresson of vascular endothelial growth factor, its receptors (FLT-1, KDR) and TSP-1 related to microvessel density and patient outcome in vertical growth phase melanomas.//Am J Pathol. 2001 - Vol. 159-P. 223-35.

172. Sternfeld Т., Foss H.D., Kruschewski M., Runkel N. The prognostic significance of tumor vascularization in patients with localized colorectal cancer.// Int J Colorectal Dis. 1999. - Vol. 14. - P. 272 - 276.

173. Stratmann A., Risau W., Plate K.H. Cell type-specific expression of angiopoietin-1 and angiopoietin-2 suggests a role in glioblastoma angiogenesis.// Am. J. Pathol. 1998. - Vol. 153. - P. 1459 - 1466.

174. Sugimachi К, Tanaka S, Taguchi K, Aishima S, Shimada M, Tsuneyoshi M. Angiopoietin switching regulates angiogenesis and progression of human hepatocellular carcinoma //J Clin Pathol. 2003. - Vol. 56 - P.854-60

175. Sun H.C., Tang Z.Y., Li X.M., Zhou Y.N., Sun B.R., Ma Z.C. Microvessel density of hepatocellular carcinoma: its relationship with prognosis.// J Cancer Res Clin Oncol. 1999. - Vol. 125(7). - P.419 - 426.

176. Suri C., Jones P.F., Patan S., Bartunkova S., Maisonpierre P.C., Davis S., Sato T.N., Yancopoulos G.D. Requisite role of angiopoietin-1, a ligand for the tie2 receptor, during embryonic angiogenesis.// Cell. 1996. - Vol. 87. — P. 1171 — 1180.

177. Takahashi K., Hiwada K., Kokubu K. Vascular smooth muscle calponin; a novel troponin T-like protein.// Hypertension. 1988. - Vol. 11. - P. 620 - 626.

178. Takahashi K., Nadal-Ginard B. Molecular cloning and sequence analysis of smooth muscle calponin.// J Biol Chem. 1991. - Vol. 266. - P. 13284 - 13288.

179. Takebayashi Y., Aklyama S., Yamada K., Akiba S., Aikou T. Angiogenesis as an unfavorable prognostic factor in human colorectal carcinoma.// Cancer. -1996.-Vol. 78.-P. 226-231.

180. Takebayashi Y., Miyadera K., Akiyama S., Hokita S., Yamada K., Akiba S., Yamada Y., Sumizawa Т., Aikou T. Expression of thymidine phosphorylase in human gastric carcinoma.// Jpn J Cancer Res. 1996. - Vol. 87(3). - P. 288 - 295.

181. Tanaka F,Ishikawa S,Yanagihara KM, , Yanagihara K, Miyahara R, Kawano Y, Li M, Otake Y, Wada H Expression of angiopoietins and its clinical significance in non-small cell lung cancer// Cancer Res. 2002 - Vol.62. - P.7124-9.

182. Tanaka S., Mori M., Sakamoto Y., Makuuchi M., Sugimachi K., Wands J.R. Biologic significance of angiopoietin-2 expression in human hepatocellular carcinoma.// J. Clin. Investig. 1999. - Vol. 103. - P. 341 - 345.

183. Tanigawa N., Amaya H., Matsumura M., Shimomatsuya T. Association of tumour vasculature with tumour progression and overall survival of patients with non-early gastric carcinomas.// Br J Cancer. 1997. - Vol. 75. - P. 566 - 571.

184. Tanigawa N., Amaya H., Matsumura M., Shimomatsuya T. Correlation between expression of vascular endothelial growth factor and tumor vascularity, and patient outcome in human gastric carcinoma.// J Clin Oncol. 1997. — Vol. 15(2).-P. 826-832.

185. Tanigawa N., Lu C., Mitsui Т., Miura S. Quantitation of sinusoid-like vessels in hepatocellular carcinoma: its clinical and prognostic significance.// Hepatology. 1997. - 26(5). - P. 1216 - 1223.

186. Tanigawa N., Matsumura M., Amaya H., Kitaoka A., Shimomatsuya Т., Lu C. et al. Tumor vascularity correlates with the prognosis of patients with esophageal squamous cell carcinoma.// Cancer. 1997. - Vol. 79. - P. 220 - 225.

187. Terada Т., Nalcanuma Y. Arterial elements and perisinusoidal cells in borderline hepatocellular nodules and small hepatocellular carcinomas.// Histopathology. 1995. - Vol. 27(4). - P. 333 - 339.

188. Toi M., Hoshina S., Taniguchi Т., Yamamoto Y., Ishitsuka H., Tominaga T. Expression of platelet-derived endothelial cell growth factor/thymidine phosphorylase in human breast cancer.// Int J Cancer. 1995. - Vol. 64(2). - P. 79 - 82.

189. Toi M., Inada K., Suzuki H., Tominaga T. Tumor angiogenesis in breast cancer: its importance as a prognostic indicator and the association with vascular endothelial growth factor expression.// Breast Cancer Res Treat. 1995. - Vol. 36(2).-P. 193 -204.

190. Tomisaki S., Ohno S., Ichiyoshi Y., Kuwano H., Maehara Y., Sugimachi K. Microvessel quantification and its possible relation with liver metastasis in colorectal cancer.// Cancer. 1996. - Vol. 77(8). - 1722 -1728.

191. Uenishi T, Hirohashi K, Kubo S, Yamamoto T, Yamazaki O, Kinoshita H. Clinicopathologic factors predicting outcome after resection of mass-forming intrahepatic cholangiocarcinoma.//f>r У,S«rg- 2001. Vol.88. P. 1-6.

192. Uenishi T, Kubo S, Yamamoto T, Shuto T, Ogawa M, Tanaka H, Tanaka S, Kaneda K, Hirohashi К Cytokeratin 19 expression in hepatocellular carcinoma predicts early postoperative recurrence. //Cancer Sci. 2003. — Vol. 94. — P.851-7

193. Ushijima C., Tsukamoto S., Yamazaki K., Yoshino I., Sugio K., Sugimachi K. High vaskularity in the peripherial region of non-small cell lung cancer tissue is associated with tumor progression.// Lung Cancer. 2001. - Vol. 34. - P. 233 -241.

194. Vartanian R.K., Weidner N. Correlation of intratumoral endothelial cell proliferation with microvessel density (tumor angiogenesis) and tmor cell proliferation in breast carcinoma.// Am. J. Pathol. 1994. - Vol. 144. - P. 1188 -1194.

195. Vaupel P, Hoeckel M. Predictive power of the tumor oxygenation status.// Adv.Exp. Med. Biol. 1999. - Vol. 471. P. 533 - 539.

196. Vernon R.B, Sage E.H. Between molecules and morphology. Extracellular matrix and creation of vascular form.// Am. J. Pathol. 1995. - Vol. 147. - P. 873 -883.

197. Vesalainen S, Lipponen P, Talja M, Alhava E, Syrjanen K. Tumor vascularity and basement membrane structure as prognostic factors in T1-2MO prostatic adenocarcinoma.// Anticancer Res. 1994. - Vol. 14. - P. 709 - 714.

198. Vlaykova T, Muhonen T, Hahka-Kemppinen M, Pyrhonen S, Jekunen A. Vascularity and prognosis of metastatic melanoma.// Int J Cancer. 1997. - Vol. 74.-P. 326 -329.

199. Wakui S, Furusato M, Itoh T, Sasaki H, Akiyama A, Kinoshita I. et al. Tumour angiogenesis in prostatic carcinoma with and without bone marrow metastasis: a morphometric study.// J Pathol. 1992. - Vol. 168. - P. 257 - 262.

200. Waltenberger J, Claesson-Welsh L, Siegbahn A, Shibuya M, Heldin C.H. Different signal transduction properties of KDR and Fltl, two receptors for vascular endothelial growth factor.// J Biol Chem. 1994. - Vol. 269. - 26988 -26995.

201. Wang J.M, Kumar S, Pye D^, Haboubi N, Al-Nakib L. Breast carcinoma: comparative study of tumor vasculature using two endothelial cell markers.// J. Natl. Cancer Inst. (Bethesda). 1994. - Vol. 86. - P. 386 - 388.

202. Wang J.M, Kumar S, van Agthoven A, Kumar P, Pye D, Hunter R.D. Irradiation induces up-regulation of E9 protein (CD 105) in human vascular endothelial cells.//Int. J. Cancer. 1995. - Vol. 62. - P. 791-796.

203. Weidner N, Carroll P.R, Blumenfeld W, Folkman J. Tumor angiogenesis correlate with metastasis in invasive prostate carcinoma.// Am. J Pathol. 1993. -Vol. 143.-P. 401 -409.

204. Weidner N, Carroll P.R, Flax J, Blumenfeld W, Folkman J. Tumor angiogenesis correlates with metastasis in invasive prostate carcinoma.// Am J Pathol. 1993. - Vol. 143. - P. 401 - 409.

205. Weidner N., Folkman J., Pozza F., Bevilacqua P., Allred E.N., Moore D.H. et al. Tumor angiogenesis: a new significant and independent prognostic indicator in early-stage breast carcinoma.// J Natl. Cancer Inst. 1992. - Vol. 84. - P. 1875 - 1887.

206. Weidner N., Semple J.P., Welch W.R., Folkman J. Tumor angiogenesis and metastasis correlation in invasive breast carcinoma.// N Engl Med. - 1991. -Vol. 324.-P. 1-8.

207. Wen X.F., Shen Z., Shen Z.Z., Nguyen M., Shao Z.M. The expression of ER beta protein correlates with vascular endothelial growth factor and its prognostic significance in human breast cancer.// Oncol Rep. 2002. - Vol. 9(5). - P. 937 -944.

208. Wennerberg AE, Nalesnic MA, Coleman WB. Hepatocyte paraffin 1: a monoclonal antibody that reacts with hepatocytes and can be used for differential diagnosis of hepatic tumors// Am J Pathol. 1993. - Vol. 143. -P.1050-1054.

209. West A.F., O'Donnell M., Charlton R.G., Neal D.E., Leung H.Y. Correlation of vascular endothelial growth factor expression with fibroblast growth factor-8 expression and clinico-pathologic parameters in human prostate cancer.// Br J Cancer.-2001.

210. West C.M., Cooper R.A., Loncaster J.A., Wilks D.P., Bromley M. Tumor vascularity: a histological measure of angiogenesis and hypoxia.// Cancer Res. — 2001.-Vol. 61.-P. 2907 -2910.

211. Wikstrom P., Lissbrant I.F., Stattin P., Egevad L., Bergh A. Endoglin (CD 105) is expressed on immature blood vessels and is a marker for survival inprostate cancer.// Prostate. 2002. - Vol. 51(4). - P. 268 - 275.i

212. Witte L., Hicklin D.J., Zhu Z., Pytowski В., Kotanides H., Rockwell P., Bohlen P. Monoclonal antibodies targeting the VEGF receptor-2 (Fllcl/KDR) as an anti-angiogenic therapeutic strategy.// Cancer Metastasis Rev. 1998. - Vol. 17. — P. 155-161.

213. Wong A.L., Haroon Z.A., Werner S., Dewhirst M.W., Greenberg C.S., Peters K.G. Tie2 expression, and phosphorylation in angiogenic, and quiescent adult tissues.//Circ Res. 1997. -Vol. 81.-P. 567-574.

214. Wu PC, Fang JWS, Lau V ICT, Lai CH, Lo CK, Lau J YN Classfiication of hepatocellular carcinoma according to hepatocellular and biliary differentiation markers// Am J Pathol 1996. - Vol.149. - P. 1167-1175

215. Yagasaki H., Kawata N., Takimoto Y., Nemoto N. Histopathological analysis of angiogenic factors in renal cell carcinoma.// Int J Urol. 2003. — Vol. 10(4).-P. 220-227.

216. Yamada Y., Nezu J., Shimane M., Hirata Y. Molecular cloning of a novel vascular endothelial growth factor, VEGF-D.// Genomics. 1997. - Vol. 42. - P. 483-488.

217. Yamaguchi K, Nalesnik MA, Can- BI. In situ hybridization of albumin mRNA in normal liver and liver tumors: identification of hepatocellular origin// Virchows Arch В Cell Pathol Incl Mol Pathol 1993. - Vol. 64. - P. 361-365

218. Yamaguchi R., Yano H., Iemura A., Ogasawara S., Haramaki M., Kojiro M. Expression of vascular endothelial growth factor in human hepatocellular carcinoma.// Hepatology. 1998. - Vol. 28(1). - P. 68 - 77.

219. Yamazaki K., Abe S., Takekawa H., Sukoh N., Watanabe N., Ogura S. et al. Tumor angiogenesis in human lung adenocarcinoma.// Cancer. 1994. - Vol. 74. -P. 2245 - 2250.

220. Yancopoulos G.D., Davis S., Gale N.W., Rudge J.S., Wiegand S.J., Holash J. Vascular-specific growth factors and blood vessel formation.// Nature (Lond.). — 2000. Vol. 407. - P. 242 - 248.

221. Yano Т., Tanikawa S., Fujie Т., Masutani M., Horie T. Vascular endothelial growth factor expression and neovascularisation in non-small cell lung cancer.// Eur J Cancer. 2000. - Vol. 36.-P. 601-619.

222. Yoon DS, Jeong J, Park YN, Kim KS, Kwon SW, Chi HS, Park C, Kim BR Expression of biliary antigen and its significance in hepatocellular carcinoma//Yousei Medical journal 1999. - Vol. 40 - P. 472-477

223. Yu Q., Stamenkovic I. Angiopoietin-2 Is Implicated in The Regulation of Tumor Angiogenesis.// AJP. 2001. - Vol. 158. - P. 563 - 570.

224. Zachary I. Vascular endothelial growth factor: how it transmits its signal.// Exp Nephrol. 1998. - Vol. 6. - P. 480 - 487. )