Оптимизированная питательная среда для суспензионного культивирования клеток ВНК-21/2-17 и репродукции вируса ящура тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Шевченко Максим Александрович

• Шевченко Максим Александрович
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Шевченко Максим Александрович

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Питательные среды

1.2 Гидролизаты в составе питательных сред

1.3 Требования к сыворотке крови

1.4 Бессывороточные питательные среды

1.5 Требования к клеточным культурам

1.6 Метод проточной цитометрии в исследованиях клеточного цикла

1.7 Адаптация вируса ящура к клеточным культурам

1.8 Механизм взаимодействия вируса ящура с клеткой

1.9 Производство противоящурных вакцин

1.9.1 Инактивация вируса ящура

1.9.2 Очистка вирусного антигена

1.9.3 Концентрирование антигена вируса ящура

1.9.4 Адъюванты в противоящурных вакцинах

1.10 Сорбированные и эмульсионные вакцины

1.11 Заключение по обзору литературы

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и оборудование

2.2 Методы исследований

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Изучение влияния разного количества глюкозы в питательной среде

на кратность прироста клеток ВНК 21/2-17

3.2 Изучение изменений аминокислотного состава питательных сред в процессе культивирования клеток ВНК-21/2-17

3.3 Влияние гидролизата белков крови, полученного в разные месяцы года, на кратность прироста клеточной линии ВНК-21/2-17 и количество 146Б компонента вируса ящура

3.4 Влияние содержания сыворотки крови в питательной среде на репродукцию клеток линии ВНК-21/2-17 и вируса ящура

3.5 Влияние концентрации клеток ВНК-21/2-17 на количество 146Б компонента вируса ящура

3.6 Исследование клеточного цикла линии ВНК-21/2-17 методом проточной цитометрии

3.7 Применение бессывороточной добавки «Sheff-Vax» в питательных средах для культивирования клеток ВНК-21/2-17

3.8 Адаптация клеток ВНК-21/2-17 к бессывороточной среде, репродукция вируса ящура

3.9 Изучение иммуногенной активности эмульсионных вакцин

4 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

4.1 Выводы

4.2 Практические предложения

4.3 Перспектива дальнейшей разработки темы

5 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

6 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

7 ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизированная питательная среда для суспензионного культивирования клеток ВНК-21/2-17 и репродукции вируса ящура»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. Ящур - высококонтагиозное вирусное заболевание домашних и диких парнокопытных животных. Возбудителем является вирус семейства Picomaviridae, рода Aphthovirus, который имеет семь серотипов (О, А, С, Asia-1, БЛТ-1, БЛТ-2 и SAT-3), а также различные подтипы. Ящур относится к категории трансграничных болезней, способных преодолевать границы между государствами, вызывать эпизоотии и наносить большой экономический ущерб животноводству. Высокая заболеваемость, большой диапазон хозяев, широкое генетическое разнообразие, способность продолжительное время сохраняться как во внешней среде, так и в организме животных, делают профилактику ящура и борьбу с ним исключительно сложной задачей [84, 136].

Предпочтительным методом искоренения болезни и ограничения распространения вируса ящура является вакцинация. В настоящее время противоящурные вакцины производятся с использованием клеток ВНК-21, полученных в виде суспензии. Преимуществом суспензионной культуры клеток является обеспечение быстрого роста в ферментерах, высокая чувствительность к вирусу ящура и рентабельное производство вакцины [149,158].

Для поддержания стабильного роста и размножения клеток ключевым фактором является выбор соответствующей питательной среды, способной обеспечить клетки элементами питания, метаболитами, необходимыми для биосинтеза, регуляторными факторами, веществами, способными выполнять защитные функции [71]. Среда поддерживает выживание и пролиферацию клеток, а также клеточные функции, а это означает, что качество питательной среды напрямую влияет на качество конечного продукта и соответствие полученной культуры необходимым требованиям [207].

Все питательные среды для клеточных культур составляются на основе какого-либо сбалансированного солевого раствора с достаточной буферной емкостью. Чаще всего ими являются растворы Хенкса и Эрла. Также важными компонентами большинства ростовых сред является сыворотка животных

(телячья, бычья, лошадиная), содержащая различные питательные вещества, которые поддерживают физиологический баланс, способствуя росту клеток или их подавлению. Источником аминокислот и витаминов в питательной среде могут быть как гидролизаты (гидролизат лактальбумина, гидролизат белков крови и др.) и экстакты (экстракты эмбриональной жидкости и др.), так и препараты всевозможного состава, полученные из смеси различных веществ [15, 21, 51].

Часто аминокислоты добавляют для того, чтобы восполнять неспособность некоторых клеток синтезировать их, либо для компенсации потерь в процессе роста и деления клеток. Количество и состав аминокислот обычно определяет максимальную плотность культуры и при достижении равновесия влияет на выживаемость клеток и скорость их роста [51]. Необходимость в этих органических кислотах может различаться у клеток различных типов. Культура клеток с высокой плотностью приводит к дефициту важных питательных веществ в системе (глюкоза, аминокислоты и др.), накоплению токсичных побочных продуктов метаболизма (молочная кислота, аммиак и др.), а также к изменению параметров среды культивирования (в частности, рН). Эти факторы, безусловно, оказывают влияние на физиологическое состояние клеток и образование клетками токсинов. Сравнительное изучение различных условий культивирования клеток, вероятно, также позволит оптимизировать процесс производства вирусного сырья [76, 116].

В конце прошлого века учеными были разработаны варианты составов бессывороточных сред для разных клеточных линий. Отсутствие сыворотки в составе питательной среды дает ряд преимуществ: исключает замену питательной среды перед процессом инфицирования вирусом клеточной суспензии и позволяет сразу запустить процесс репродукции вируса ящура непосредственно в реакторе, где подготовлена (или выращена, произведена) суспензия клеток. Однако идентификацию подходящей бессывороточной среды для разных линий клеток животных и условий культивирования следует определять экспериментально [191].

Состав питательной среды может влиять на выход иммуногенных компонентов вируса ящура. Размножение вируса ящура - многофакторный процесс, зависящий как от клеточной культуры, так и от вирусного материала [63]. Большое значение в получении препарата вирусного антигена с высоким накоплением иммуногенных компонентов имеет выбор подходящего клона клеток ВНК-21 для репродукции вируса, а также оптимальные условия культивирования. Антигены 146S являются наиболее эффективными иммуногенами в вакцине против ящура, поэтому их количественно контролируют на каждом этапе производства [180, 212].

Поиск новых компонентов и их оптимальных сочетаний для питательных сред, используемых в производственных процессах по культивированию клеток ВНК-21/2-17 и в наработке вируссодержащего сырья для изготовления противоящурных вакцин, является актуальным направлением для дальнейших исследований.

Цель и задачи исследования. Целью наших исследований была оптимизация питательной среды для суспензионного культивирования клеток ВНК-21/2-17 и репродукции вируса ящура.

Для достижения основной цели необходимо было решить следующие задачи:

- определить оптимальную концентрацию глюкозы в питательной среде для культивирования клеток ВНК-21/2-17;

- оценить возможность использования гидролизата белков крови в качестве основного источника аминокислот в питательной среде для культивирования клеток ВНК-21/2-17;

- определить оптимальную концентрацию сыворотки крови в питательной среде для культивирования клеток ВНК-21/2-17;

- использовать метод проточной цитометрии для оценки состояния популяции клеток ВНК-21/2-17 в процессе культивирования и репродукции вируса ящура;

- адаптировать линию клеток ВНК-21/2-17 к росту в питательной среде с использованием добавки «Sheff-Vax»;

- адаптировать линию клеток ВНК-21/2-17 к росту в бессывороточной среде «Cellvento»;

- сравнить иммуногенную активность вакцин, изготовленных из антигена вируса ящура, репродуцированного в клетках ВНК-21/2-17, выращенных в бессывороточной среде «Cellvento» и в оптимизированной среде.

Степень разработанности темы. Суспензионная культура клеток BHK-21 обеспечивает крупномасштабное размножение вируса и рентабельное производство вакцины. За последние десятилетия в биотехнологии сформировано и интенсивно развивается направление, связанное с конструированием питательных сред, содержащих в качестве источников аминокислот ферментативные гидролизаты белков животных и растений. Также актуальной темой для исследований остается подбор бессывороточных сред для культивирования клеток, способствующих обеспечению безопасности и эффективности конечного продукта [157].

В отношении вируса ящура в последние годы мало публикуется информации о компонентах питательной среды, которые необходимы для выращивания вируса до высоких титров в культуре клеток [158]. Исследования многих ученых были посвящены изучению условий культивирования клеток ВНК-21 для оптимального продуцирования вируса ящура: Манин Б.Л., 1998; Hassan A. I., 2016; Dill V. et al., 2018, 2019.

Научная новизна. Научная новизна исследований состоит в том, что:

- определена оптимальная концентрация глюкозы в питательной среде для культивирования клеток ВНК-21/2-17;

- доказана эффективность использования гидролизата белков крови в качестве основного источника аминокислот в питательной среде для культивирования клеток ВНК-21/2-17;

- установлена оптимальная концентрация сыворотки крови в питательной среде для культивирования клеток ВНК-21/2-17;

- разработан способ оценки состояния популяции клеток ВНК-21/2-17 методом проточной цитометрии;

- адаптирована линия клеток ВНК-21/2-17 к среде с использованием бессывороточной добавки «Sheff-Vax» и к бессывороточной среде «Cellvento»;

- определена иммуногенная активность вакцин, изготовленных из антигена вируса ящура, репродуцированного в клетках ВНК-21/2-17, выращенных в оптимизированной питательной среде и в бессывороточной среде «Cellvento».

Научная новизна полученных результатов подтверждена получением патентов на изобретения: № 2650768 «Штамм О №2212/Приморский/2014 вируса ящура Aphtaeepizooticae типа О для контроля антигенной и иммуногенной активности противоящурных вакцин и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа О» (Приложение 1); № 2751664 «Способ получения иммуногенных компонентов культурального вируса ящура типов А, О, Азия-1 с применением бессывороточной среды «Се1^еПютм ВНК-200» для изготовления противоящурных вакцин» (Приложение 2); № 2722671 «BHK-21/SUSP/ЛRRIЛH - перевиваемая суспензионная сублиния клеток почки новорожденного сирийского хомячка, предназначенная для репродукции вирусов ящура, бешенства, парагриппа-3, болезни Ауески при производстве противовирусных вакцин, а также для изготовления диагностических и профилактических ветеринарных биопрепаратов» (Приложение 3).

Практическая значимость работы. В результате проведенных исследований по оптимизации питательной среды для суспензионного культивирования клеток ВНК-21/2-17 и репродукции вируса ящура были разработаны, одобрены ученым советом и утверждены директором ФГБУ «ВНИИЗЖ»:

«Методические рекомендации по получению матрового вируса ящура в монослойной клеточной линии из почки новорожденного сирийского хомячка (ВНК-21/2-17)» (Приложение 4);

«Методические рекомендации по определению биологической активности гидролизата белков крови» (Приложение 5);

«Методические рекомендации по определению флокулирующих свойств полисепта (полигексаметиленгуанидин гидрохлорида)» (Приложение 6).

Полученные результаты вошли в СТО 00495527-0065-2023 «Вакцина против ящура культуральная инактивированная эмульсионная «АРРИАХ-ВАК». (Приложение 7) и СТО 00495527-0143-2023 «Вакцина против ящура сорбированная моно- и поливалентная (из вируса, выращенного в клетках ВНК-21)» (Приложение 8).

Методология и методы исследований. Методология проведенных исследований включает стандартные процедуры с использованием различных материалов и естественно восприимчивых животных. В работе использованы вирусологические, химические, иммунологические методы.

Положения, выносимые на защиту. Основные положения, выносимые на защиту:

- влияние разных концентраций глюкозы в питательной среде на кратность прироста клеток ВНК-21/2-17;

- оптимизация аминокислотного состава питательной среды с использованием гидролизата белков крови;

- результаты изучения разных концентраций сыворотки крови КРС на кратность прироста клеток ВНК-21/2-17 и количество 146Б компонента вируса ящура;

- результаты исследования влияния концентрации клеток ВНК-21/2-17 на количество 146 Б компонента вируса ящура;

- результаты изучения методом проточной цитометрии клеточного цикла линии ВНК-21/2-17;

- адаптация линии клеток ВНК-21/2-17 к среде с использованием специализированной добавки «Sheff-Vax» и к бессывороточной среде «Cellvento»;

- сравнение иммуногенной активности вакцин, изготовленных из антигена вируса ящура, репродуцированного в клетках ВНК-21/2-17, выращенных в оптимизированной питательной среде и в бессывороточной среде «СеНуеШю».

Личный вклад соискателя. Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно. Автору принадлежит ведущая роль в планировании и выполнении основных исследований и обобщении полученных результатов.

За консультативную и методическую помощь автор выражает искреннюю благодарность заведующему лабораторией профилактики ящура, доктору ветеринарных наук Михалишину Д.В. и старшему научному сотруднику, кандидату биологических наук Гусевой М.Н.; за содействие в выполнении отдельных этапов работы сотрудникам лаборатории профилактики ящура доктору биологических наук Доронину М.И., кандидату ветеринарных наук Борисову А.В. и кандидату ветеринарных наук Елькиной Ю.С.

Степень достоверности и апробации результатов. Результаты проведенных исследований получены с использованием стандартных методик и других нормативных документов и большого объема экспериментального материала. Степень достоверности результатов экспериментов подтверждена обработкой их статистическими методами и комиссионными испытаниями. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях методической комиссии и Учёного совета ФГБУ «ВНИИЗЖ» в период с 2014 по 2023 гг.

Результаты диссертационных исследований обсуждены в работе двух международных конференций: IV Международной научно-практической конференции молодых ученых «Достижения молодых ученых в ветеринарную практику» (г. Владимир, 2016 г.) и V Международной научной конференции молодых ученых «Достижения молодых ученых в ветеринарную практику», (г. Владимир, 2019 г.).

По материалам диссертационных исследований опубликовано 13 научных работ, из них: шесть - статьи в журналах, включенных в Перечень рецензируемых научных изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук, на соискание ученой степени доктора наук; три патента на изобретение РФ.

Исследования по диссертационной работе являются частью комплексных тем НИР, выполнявшихся в ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» в 2015-2021 гг.:

- Государственный контракт № 25/19 от 01.04.2019 «Выполнение научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ по созданию нового защитного препарата на основе циркулирующих вновь выделенных изолятов особо опасных и экзотических инфекций животных и его испытание (противоящурная инактивированная вакцина для ранней защиты против вируса ящура типа Азия-1)» (Приложение 9);

- Государственный контракт № 10/20 от 02.03.2020 «Выполнение научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ по созданию нового защитного препарата на основе циркулирующих вновь выделенных изолятов особо опасных и экзотических инфекций животных и его испытание (противоящурная инактивированная вакцина для ранней защиты против вируса ящура типа А)» (Приложение 10).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах компьютерного текста и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, результаты собственных исследований, заключение, список сокращений, список литературы, приложения; иллюстрирована 11 таблицами и 23 рисунками. Список использованной литературы включает 213 источник, из них 124 иностранных. В приложении представлены копии титульных листов документов, подтверждающих достоверность результатов работы, ее научную новизну и практическую значимость.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Питательные среды

Современные питательные среды позволяют не только культивировать многие уникальные типы клеток в системе in vitro, но и производить достаточно большие количества продукта в клетках при масштабном их культивировании [32].

Различные типы клеток предъявляют очень специфические требования, и наиболее подходящую среду для каждого типа клеток необходимо определять экспериментально. Питательные среды обычно готовят путем объединения смеси питательных веществ. Десять основных компонентов, которые составляют большинство сред для культивирования клеток животных, следующие: неорганические соли (Ca2+, Mg2+, Na+, K+), источник азота (аминокислоты), источники энергии (глюкоза, фруктоза), витамины, жирорастворимые компоненты (жирные кислоты, холестерины), предшественники нуклеиновых кислот, факторы роста и гормоны, антибиотики. Потребности клеток в питании могут варьироваться на разных этапах цикла культивирования [207, 212].

Культивируемым клеткам требуются стерильные условия, постоянный приток питательных веществ и сложные условия инкубации. Система культивирования клеток включает такие физико-химические условия, как pH, соответствующая газовая смесь, температура и влажность, осмотическое давление, что позволяет клеткам воспроизводиться и расти [156]. Для того чтобы избежать изменения цитоморфологических, пролиферативных свойств, снижения чувствительности к вирусу, необходимо подбирать индивидуальные условия культивирования для каждой линии клеток [66].

Классически питательные среды, используемые для культивирования клеток животных, подразделяют на естественные (или природные) и искусственные (или синтетические). К естественным питательным средам относятся биологические жидкости (плазма, сыворотка, лимфа, сыворотка пуповинной крови человека, амниотическая жидкость), тканевые экстракты (экстракт печени, селезенки, костный мозг, экстракты бычьего и куриного

эмбрионов), коагуляты или сгустки плазмы крови. Искусственные среды подразделяются на сбалансированные солевые растворы, образующие основу для комплексных сред (фосфатно-солевой буфер, фосфатный буфер Дульбекко, раствор Хэнкса, раствор Эрла), основные или минимальные среды (MEM, DMEM) и комплексные (полусинтетические) среды (RPMI-1640, IMDM, F-10 и F-12 Хэма) [4, 71].

Использование сыворотки животных в среде для культивирования клеток дает несколько преимуществ (усиленная пролиферация и дифференцировка), а также некоторые недостатки (риск контаминации клеточных культур вирусами и микоплазмами) [173, 180].

Изучая потребности в аминокислотах различных клеток, Eagle H. разработал незаменимую среду (MEM), которая состояла из минимально необходимых компонентов, которые он идентифицировал (глюкоза, шесть неорганических солей, тринадцать аминокислот, восемь водорастворимых витаминов и диализованная сыворотка). Аналогичная базальная среда, модифицированная Dulbecco R .(DMEM), содержала нитрат железа, пируват натрия и отличалась от MEM более высокой концентрацией аминокислот и витаминов. Эти среды все еще используется для поддержания первичных культур клеток [73, 127, 130, 212].

Одним из факторов, лимитирующим рост культуры, является истощение в среде необходимых питательных компонентов. Следовательно, для получения высокой плотности клеток необходима периодическая замена питательной среды, а это может приводить к постоянному изменению состава, омывающему клетки, что весьма нежелательно [6].

Поскольку универсальной питательной среды не существует, возникает необходимость разработки среды для каждого типа клеток, которая бы обеспечивала их потребности. В настоящее время известно более 400 различных питательных сред [63].

Некоторые исследователи использовали различные добавки, которые оказывали стимулирующее воздействие на рост клеточной биомассы. Hu D. et al.

обнаружили, что дрожжевой экстракт значительно улучшал рост клеток СНО при низкой концентрации (1 г/л) и ингибировал этот процесс при высокой концентрации (5-10 г/л) во время непрерывных пассажей [129].

Selenius Ь.Л. et а!. установили, что низкие уровни селена стимулировали рост клеток, а селен является важным компонентом для роста клеток в культуре в условиях отсутствия сыворотки. Эффекты селена сильно зависели от концентрации [199].

Плотникова Э.М. и др. [24, 59] провели исследование влияния регуляторных пептидов-цитокинов, апифитоэкстрактов на метаболизм клеточных линий МОВК, ВНК-21/13-02, Таурус-1. Было установлено, что данные препараты не вызывали изменения морфологии клеток, оказывали стимулирующее действие на метаболизм клеток путем стимуляции NADH-зависимых дыхательных ферментов (оксиредуктаз), а также обеспечивали повышение репродукции вирусов в исследуемых культурах.

1.2 Гидролизаты в составе питательных сред

В последнее время в клеточной биотехнологии четко определено и интенсивно развивается направление, связанное с конструированием питательных сред, содержащих в качестве ростовой аминокислотной составляющей гидролизаты белкового сырья [21, 76, 88].

Использование гидролизата в культуре клеток животных началось в 1970-х годах. Белковые гидролизаты представляют собой продукты расщепления белка до аминокислот в вариабельной концентрации, ди- и трипептидов. В дополнение к пептидам разной молекулярной массы гидролизаты могут содержать другие молекулы, такие как витамины, липиды и неорганические кислоты, которые могут поддерживать рост клеток животных [97].

Большинство гидролизатов получено путем глубокого расщепления протеина до аминокислот при воздействии на сырье концентрированных кислот. Известны три метода гидролиза белков - кислотный, щелочной, энзимный (ферментативный). При всех этих видах гидролизации полипептиды

расщепляется на составные части, однако продукты гидролиза различны. Кислотный и щелочной гидролиз осуществляется в процессе кипячения белка с концентрированными растворами кислот и щелочей. Эти способы гидролиза являются грубыми и часто вызывают рацемизацию аминокислот (превращение природных L-форм в неусваиваемые организмом D-формы), разрушение ароматических аминокислот, их частичное дезаминирование (отщепление МН2-группы от аминокислоты) и, как следствие, ослабление или потерю биологической и физиологической ценности, а также снижение фармакологической активности аминокислот [46, 66А, 74].

В отличие от кислотного и щелочного ферментативный гидролиз, протекающий при умеренной температуре (37-55°С), мягко воздействует на белок, не вызывая рацемизацию аминокислот и разрушение триптофана. Кроме того, он обеспечивает сохранность биологически активных веществ (витаминов, нуклеиновых и желчных кислот). Учитывая, что ферментативный гидролиз протекает медленно, требуется гораздо больше времени для получения препарата, лишенного нативного белка, полипептидов и пептидов. Ферментативные гидролизаты получают, инкубируя белковое сырье (казеин, кровь, фибрин) с протеолитическими ферментами. При этом не всегда удается полностью расщепить протеины в этих условиях [21, 46, 66А].

В литературе [36, 85] описан электрохимической способ получения белкового гидрозата, который заключается в использовании ферментных препаратов и процесса электролиза водных растворов неорганических солей. При электролизе обеспечиваются необходимые значения величины рН и температуры для проведения процесса ферментативного гидролиза белоксодержащего сырья. Таким образом, создаются условия ферментолиза без использования агрессивных химических реагентов - кислот и щелочей, а нагрев реакционной среды осуществляется за счет выделения омического тепла при прохождении электрического тока через раствор электролита.

В нашей стране широко используются гидролизаты из белков крови животных, главным образом, крупного рогатого скота (КРС). Кровь является

лучшим сырьем, поскольку содержит 18% полноценного белка, а также минеральные вещества, которые остаются в готовом препарате [21,66А].

Ферментативный гидролиз белков крови включает в себя несколько критических этапов, которые могут достаточно сильно влиять на химические и биологические свойства конечного продукта: точность расчета необходимого количества железы и ее свежесть; использование при остановке процесса концентрированного раствора соляной кислоты; внесение хлористого кальция для коагуляции и осаждения крупномолекулярных продуктов гидролиза и гемовых пигментов; удаление избытка СаС12 путем введения в гидролизат двузамещенного фосфата натрия; применение хлороформа в качестве бактериостатика. Малейшие отклонения в силу различных причин от технологического процесса могут привести к появлению токсичности гидролизата белков крови, снижению ростовых свойств питательных сред, в составе которых используется ГБК вплоть до гибели клеток. По этим причинам в биотехнологическом производстве важен контроль входящего сырья, в данном случае, оценка качества серий ГБК [66А, 88].

Биофармацевтическая промышленность стремится создавать химически определенные питательные среды, которые содержат наименьшее количество компонентов, необходимых для роста клеток. С развитием аналитических методов с высоким разрешением, таких как технологии на основе хроматографии и масс-спектрометрии, можно лучше определить состав гидролизатов [97].

1.3 Требования к сыворотке крови

Исторически сыворотка была важнейшим компонентом методологии культивирования клеток как поставщик сложных биологических молекул, таких как гормоны, факторы роста, факторы прикрепления, а также многочисленные низкомолекулярные питательные вещества. В качестве важного компонента среды она поддерживает успешный рост различных типов клеток и развитие постоянных клеточных линий. Сыворотка крови животных характеризуется чрезвычайно сложным составом, разнообразными функциями и универсальностью применения [48, 139].

Лучшей добавкой к базальной среде является фетальная бычья сыворотка, которая наиболее часто используется для всех типов культур клеток. Различные категории бычьей сыворотки имеются в продаже, включая фетальную бычью сыворотку, сыворотку теленка, сыворотку быка и донорскую сыворотку крупного рогатого скота. Коммерческая сыворотка крови КРС обычно представляет собой объединенную сыворотку, часто состоящую из сотен или тысяч отдельных образцов [143]. Эмбриональная бычья сыворотка имеет самое высокое качество, потому что она не подвергается воздействию внешней среды и имеет самые низкие антитела и комплемент [113].

Широкое распространение в технологии культивирования клеток получили также сыворотки новорожденных телят, овец, лошадей. Было обнаружено, что козья сыворотка подходила для большинства клеточных линий и первичных культур. В альтернативных сыворотках отсутствовал полный спектр и оптимальная концентрация стимуляторов роста [13, 71, 190].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Шевченко Максим Александрович, 2024 год

6 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. А. с. № 543674 А1 СССР, МПК C12K 7/00. Способ очистки вируссодержащей суспензии: № 2009475: заявл. 28.03.1974: опубл. 25.01.1977 / Улупов Н. А., Дудников А. И., Гембицкий П. А., Жук Д. С.; заявитель Всесоюзный научно-исследовательский ящурный институт.

2. Аминоэтиленимин - средство инактивации инфекционности вируса ящура // Н.А. Улупов, В.В. Михалишин, А.А. Гусев, Т.Н. Лезова // Современные аспекты ветеринарной патологии животных: материалы. конф., посвящ. 40-летию ВНИИЗЖ. - Владимир, 1998. - С. 53-62.

3. Анализ поствакцинального иммунитета при ящуре / А. Я. Самуйленко, С. А. Гринь, Р. Н. Мельник [и др.] // Российская с. - х. наука. - 2017. - № 2. - С. 48-50.

4. Анисимова, Л. И. Получение перевиваемых культур клеток, адаптированных к росту в питательных средах с пониженным содержанием сыворотки крови КРС: дис. ... канд. ветеринарных наук: 03.00.23 / Анисимова Любовь Ивановна. - Покров, 2002. - 142 с.

5. Бессывороточная питательная среда для культивирования клеток и вирусов / Е. А. Нечаева, И. Ф. Радаева, Н. Б. Думченко [и др.] // Вестник Пермского национального исследовательского политехнического университета. Химическая технология и биотехнология. - 2018. - № 4. - С. 85-97.

6. Блажевич, О. В. Культивирование клеток: курс лекций / О. В. Блажевич. -Минск.: БГУ, 2004. - 78 с.

7. Большакова, М. В. Эффективность противоящурных вакцин в зависимости от используемого адъюванта: дис. ... канд. биологических наук: 03.00.23 / Большакова Маргарита Васильевна. - Щелково, 2000. - 108 с.

8. Борисов, В. В. Очистка тканевого вируса ящура комплексом флокулянтов / В. В. Борисов, Н. А. Улупов, Т. Н. Лезова // Вирусные и микробные болезни животных: сб. науч. тр. - Владимир, 1995. - С. 232-236.

9. Борисов, В. В. Разработка метода получения стерильных вирусосодержащих суспензий для изготовления противоящурных инактивированных вакцин:

автореф. дис. ... канд. ветеринарных наук: 16.00.03 / Борисов Владимир Владимирович. - Владимир, 1992. - 20 с.

10. Василевич, Н. И. Бессывороточные питательные среды: научные, этические и биотехнологические аспекты / Н. И. Василевич, В. В. Честков // Лаборатория и производство. - 2019. - № 6(10). - С. 64-71.

11. Войткова, В. В. Изучение апоптоза методом проточной цитофлуориметрии (обзор литературы) / В. В. Войткова // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2010. -№ 6 (76), ч. 1. - С. 220-225.

12. Воробьев, А.А. Адъюванты / А. А. Воробьев, Н. Н. Васильев. - Москва: Медицина, 1969. - 206 с.

13. Гасанова, Б. С. Культивирование клеток млекопитающих с различными видами сывороток и заменителями сывороток: автореф. дис. ... канд. биологических наук: 03.00.06 / Гасанова Барият Саидовна. - Москва, 1993. - С. 810.

14. Гель гидроокиси алюминия для противоящурных вакцин / А. И. Абдулов, А. Я. Самуйленко, Н. Д. Скичко, В. И. Еремец // Научные основы технологии пром. пр-ва ветеринарных биологических препаратов: тез. докл. 3-й Всесоюз. конф. -М., 1987. - С. 159-160.

15. Гизитдинов, Н. Н. Питательные среды для выращивания культур клеток и вирусов / Н. Н. Гизитдинов // Достижения науки и техники. - 1992. - № 6. - С. 2223.

16. Государственная фармакопея РФ XIII 0ФС.1.7.2.0011.15 «Требования к клеточным культурам-субстратам производства иммунобиологических лекарственных препаратов». - URL: https://pharmacopoeia.ru/ofs-1-7-2-0011-15-trebovaniya-k-kletochnym-kulturam-substratam-proizvodstva-immunobiologicheskih-lekarstvennyh-preparatov/ (дата обращения: 12.11.22)

17. Грачев, В. П. Применение перевиваемых линий клеток человека и животных для изготовления вирусных вакцин / В. П. Грачев, Ю. Х. Хапчаев // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2008. - № 1. - С. 82.

18. Дудников, А. И. Общие требования к производству и качеству противоящурных вакцин / А. И. Дудников, В. В. Михалишин // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2009. - Т. 7. - С. 35-43.

19. Елькина, Ю. С. Противоящурные вакцины типов О, Азия-1, А для формирования раннего иммунитета у животных: автореф. дис. ... канд. ветеринарных наук: 4.2.3. / Елькина Юлия Сергеевна. - Владимир, 2021. - 21 с.

20. Жданова, Н. А. Получение суспензионной перевиваемой линии клеток тестикул поросенка и оптимизация условий ее культивирования: автореферат дис. ... канд. биологических наук: 03.00.23 / Жданова Наталья Александровна. -Покров, 2008. - 24 с.

21. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии) / под ред. Л. П. Дьяконова. - Москва.: Компания Спутник+, 2009. - 656 с.

22. Завьянцев, В. Е. Инактивация вируса ящура нагреванием, формальдегидом, этиленоксидом и гамма-облучением. (Нидерланды) / В. Е. Завьянцев // Ветеринария. Реферативный журнал. - 2000. - № 1. - С. 47.

23. Изучение адъювантной активности этония в составе противоящурной вакцины / В. А. Стариков, Д. В. Михалишин, Т. Н. Лезова, А. В. Борисов // Российский ветеринарный журнал. С. - х. животные. - 2014. - № 1. - С. 30-31.

24. Изучение влияния биологически активных веществ на репродукцию перевиваемой линии культур клеток / Э. М. Плотникова, И. А. Нестерова, З. Г. Чурина [и др.] // Ученые записки Казанской гос. акад. ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2021. - Т. 246, № 2. - С. 157-160.

25. Инактивация культурального вируса ящура бинарным этиленимином / Т. Н. Лезова, Д. В. Михалишин, Н. С. Мамков, Н. Д. Клюкина // Актуальные проблемы инфекц. патологии животных: материалы Междунар. науч. конф., посвящ. 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ». - Владимир, 2003. - С. 399-400.

26. Инфекционная патология животных. Руководство: в 7 т. Т. 1. Ящур / ред. А. Я. Самуйленко. - Москва: ВНИТИБП, 2014. - 264 с.

26а. Исследование клеточного цикла линии ВНК-21 /2-17 методом проточной цитометрии / М. А. Шевченко, М. Н. Гусева, Д. В. Михалишин [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2017. - № 4(23). - С. 58-62.

27. Использование очищенной от антител сыворотки крови крупного рогатого скота для промышленного культивирования суспензионных клеток ВНК-21 и вируса ящура / М. В. Котова, А. Н. Бурдов, В. В. Прохоров [и др.] // Ящур. К новой стратегии борьбы с ящуром: материалы междунар. конф. - Владимир, 1992. - Ч. 2. - С. 24-31.

27а Использование специализированных добавок Sheff-Vax ACF для культивирования клеток ВНК-21/SUSP/ARRIAh и репродукции вируса ящура / М. Н. Гусева, М. И. Доронин, А. А. Шишкова [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2021. - № 1(36). - С. 15-21.

28. Испытания эмульсионных вакцин на основе белых масел, полученных гидрокаталитической переработкой нефтяного сырья / И. В. Пиголева, А. С. Шарыпов, Т. Н. Шабалина [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2017. - № 4. - С. 4248.

29. Клетки / под ред. Б. Льюина [и др.]. - Москва: Бином, Лаборатория знаний, 2011. - 951 с.

30. Клюкина, Н. Д. Очистка и концентрирование культурального вируса ящура с помощью полиакриловой кислоты / Н. Д. Клюкина, В. В. Михалишин, Т. Н. Лезова // Ветеринарная патология. - 2006. - № 4. - С. 39-42.

31. Клюкина, Н. Д. Сополимеры ПАК и ПВПД как адъюванты в противоящурной вакцине / Н. Д. Клюкина // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2005. - Т. 3. - С. 134-138.

32. Колокольцева, Т. Д. Культуры клеток человека и животных: выделение, культивирование, криоконсервация и контроль / Т. Д. Колокольцова, И. Н. Сабурина, А. А. Кубатиев // Патогенез. - 2015. - Т.13, № 2. - С. 50-65.

33. Комбинированный метод концентрирования вируса ящура / В. В. Борисов, Т. Н. Лезова, В. В. Михалишин [и др.] // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии. - Покров, 1992. - Ч. 2. - С. 179.

34. Концентрирование вируса ящура методом «сорбции-элюции» для изготовления противоящурных вакцин / Н. Д. Клюкина, Т. Н. Лезова, Д. В. Михалишин [и др.] // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. -Владимир, 2009. - Т. 7. - С. 20-28.

35. Концентрирование вируса ящура методом ультрафильтрации на полых волокнах и получение на его основе противоящурных вакцин / В. И. Еремец, Н. Д. Скичко, А. Я. Самуйленко, В. А. Стрельников // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: тез. докл. науч. конф. к 30-летию ВНИЯИ. -Владимир, 1988. - Ч. 2. - С. 24-25.

36. Куприна, Е. Э. Исследование процессов деструкции и гидролиза белков при их экстрагировании электрохимическим способом / Е. Э. Куприна, С. В. Водолажская, Г. Г. Няникова // Журнал прикладной химии. - 2003. - Т. 76, № 4. -С. 663-666.

37. Лезова, Т. Н. Усиление преципитации вируса ящура при концентрировании полиэтиленгликолем / Т. Н. Лезова, Н. А. Улупов, В. В. Михалишин // Вирусные и микробные болезни животных: сб. науч. тр. - Владимир, 1995. - С. 182-185.

38. Литусов, Н. В. Общая микробиология. Иллюстрированное учебное пособие. - Екатеринбург: Изд-во УГМУ, 2015. - 516 с.

39. Мамаева, С. Е. Закономерности кариотипической эволюции клеток в культуре / С. Е. Мамаева, Т. Р. Сухих // Цитология. - 1996. - № 2. - С. 222-223.

40. Манин, Б. Л. Влияние артефактов биологического статуса поросят на культивирование первичной культуры, полученной из почки / Б. Л. Манин, Н. В. Коропова // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2012. - Т. 10. - С. 238-245.

41. Методические рекомендации по определению концентрации 146S, 75S, 12S компонентов вакцинных штаммов культурального вируса ящура в реакции связывания комплемента (РСК) / Д. А. Лозовой, Д. В. Михалишин, В. А. Стариков [и др.]. - Владимир: ФГБУ «ВНИИЗЖ», 2017. - 44 с.

42. Михалишин, В. В. Адъюванты и их использование. Вопросы биотехнологии / В. В. Михалишин, Н. С. Мамков // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2008. - Т. 6. - С. 340-371.

43. Михалишин, Д. В. Влияние температуры культивирования на сохранность антигена вируса ящура / Д. В. Михалишин, Н. Д. Клюкина // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2012. - Т. 10. - С. 26-30.

44. Михалишин, Д. В. Разработка технологии изготовления эмульсионной вакцины против ящура сельскохозайственных животных: автореф. дис. .д-ра ветеринарных наук: 06.02.02 / Михалишин Дмитрий Валерьевич. - Владимир, 2021. - 39 с.

45. Михалишин, Д. В. Сравнение иммуногенной активности эмульсионной вакцины с «прямым» и «обратным» типом эмульсии / Д. В. Михалишин // Научные основы пр-ва ветеринарных биологических препаратов. - Щелково, 2000. - С. 5051.

46. Нельсон, Д. Л. Основы биохимии Ленинджера: в 3 т. / Д. Л. Нельсон; Д. Нельсон, М. Кокс; пер. с англ. Т. П. Мосоловой, Е. М. Молочкиной, В. В. Белова; под ред. А. А. Богданова, С. Н. Кочеткова. - Москва: Бином. Лаборатория знаний, 2011. - 694 с.

47. Новые ростстимулирующие добавки в питательные среды для культивирования животных клеток / И. М. Ганиев, Н. И. Гурьянов, Р. Я. Гильмутдинов [и др.] // Ветеринарный врач. - 2009. - № 6. - С. 30-32.

48. Ночевный, В. Т. Биологический контроль ростовой активности питательных сред и сыворотки крови животных / В. Т. Ночевный // Питательные среды и сыворотки для культивирования клеток: тез. докл. Всесоюз. конф. -Новосибирск, 1991. - С. 46.

49. Определение критериев для исследования флокулирующих свойств полисепта (полигексаметиленгуанидин гидрохлорида) / М. Н. Гусева, М. И. Доронин, М. А. Шевченко [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2022. - Т. 11, № 3. - С. 254-261.

50. Оптимизация процесса промышленного культивирования культуры клеток ВНК-21/13-13 для производства вакцин против ящура, болезни Ауески и бешенства / А. Я. Самуйленко, Н. В. Мельник, С. А. Гринь [и др.] // Ветеринарный врач. - 2018. - № 1. - С. 24-28.

51. Оптимизация состава питательных сред для культивирования суспензии клеток ВНК-21/2-17 / М. Н. Гусева, Д. В. Михалишин, А. А. Шишкова [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2016. - № 4(19). - С. 35-39.

52. Основные этапы разработки и применения метода проточной цитометрии в ФГУ РНЦРХТ / А. С. Ягунов, А. В. Карташев, С. В. Токалов, Л. Н. Киселева // Вопросы онкологии. - 2008. - Т. 54, № 4. - С. 494-497.

53. Очистка концентратов вируса ящура для изготовления вакцин / В. В. Борисов, Н. А. Улупов, А. И. Дудников [и др.] // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии, эпизоотологии: материалы науч. конф. ВНИИВиМ. - Покров, 1992. - Ч. 1. - С. 178-179.

54. Паспортизация и стандартизация сублиний клеток ВНК-21 методом проточной цитометрии / Б. Л. Манин, В. В. Михалишин, В. Т. Ночевный, Е. В. Белик // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - 2011. - Т. 9. -С. 270-281.

55. Патент № 2054039 С1 Российская Федерация, МПК С^ 7/02, А61К 39/135. Способ очистки и стерилизации культурального вируса ящура: № 5026100/13: заявл. 07.02.1992: опубл. 10.02.1996 / Лезова Т. Н., Улупов Н. А., Борисов В. В. [и др.]; заявитель Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных.

56. Патрикеев, В. Г. Этапы разработки и 10-летний опыт использования мембранной технологии для промышленного концентрирования антигенов вируса ящура / В. Г. Патрикеев // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2006. - Т. 4. - С. 36-37.

57. Петров, Р. В. Иммуногенетика и искусственные антигены / Р. В. Петров, Р. М. Хаитов, Р. И. Атауллаханов. - Москва: Медицина, 1983. - 255 с.

58. Петрова, И. Д. Концентрирование вирусов и электронная микроскопия / И. Д. Петрова, Б. Н. Зайцев, О. С. Таранов // Вавиловский журнал генетики и селекции. - 2020. - Т. 24, № 3. - С. 276-283.

59. Плотникова, Э. М. Влияние регуляторных пептидов-цитокинов на функциональную активность клеток животных в культуре / Э. М. Плотникова, И. А. Архарова // Ветеринарная патология. - 2020. - № 3(73). - С. 42-47.

60. Полевая эффективность противовирусных вакцин для крупного рогатого скота / В. А. Мищенко, Д. К. Павлов, А. В. Кононов [и др.] // Ветеринарная патология. - 2007. - № 2(21). - С. 235-238.

61. Получение очищенной сыворотки крови крупного рогатого скота / В. А. Бабак, А. А. Гусев, П. А. Красочко [и др.] // Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария. - 2011. - № 1. - С. 13-18.

62. Пономарев, А. П. Вирус ящура: структура, биологические и физико-химические свойства / А. П. Пономарев, В. Л. Узюмов, К. Н. Груздев. - Владимир: Фолиант, 2006. - 250 с.

63. Пономарев, А. П. Культивирование клеточных линий человека и животных с использованием сыворотки крови, очищенной лантаноидами / А. П. Пономарев, Б. Л. Манин, М. М. Коган // Ветеринарная патология. - 2019. - № 4(70). - С. 6170.

64. Пономарев, А. П. Очистка сыворотки крови крупного рогатого скота от контаминирующих микроорганизмов / А. П. Пономарев // Ветеринарная патология. - 2019. - № 2(68). - С. 61-70.

65. Применение ультрафильтрации для концентрирования и очистки антигенов / А. В. Комиссаров, Ю. А. Алешина, О. В. Громова [и др.] // Проблемы особо опасных инфекций. - 2015. - № 1. - С. 79-84.

65а. Ререр, Х. Ящур / Х. Ререр. - Москва: Колос, 1971. - 303 с.

т?

65 . Сергеев, В. А. Вирусы и вирусные вакцины / В. А. Сергеев Е. А. Непоклонов, Т. И. Алипер. - М.: Библионика, 2007. - 523 с.

66. Сергеев, В. А. Структура и биология вирусов животных / В. А. Сергеев, Б. Г. Орлянкин. - Москва: Колос, 1983. - 336 с.

66А. Сравнительный анализ активности гидролизатов белков крови / М. Н. Гусева, М. А. Шевченко, М. И. Доронин [и др.] // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2019. - № 2(42). - С. 22-27.

67. Султаналиев, Н. К. Отработка оптимального режима инактивации вируса ящура формальдегидом / Н. К. Султаналиев // Вестник Кыргызского национального аграрного университета им. К.И. Скрябина. - 2008. - № 4. - С. 1011.

68. Табаков, В. Ю. Современные принципы классификации и разработки питательных сред для культивирования клеток человека и животных / В. Ю. Табаков, Ю. В. Щепкина, В. В. Честков // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2013. - № 1. - С. 47-56.

69. Текерлеков, П. Исследования по использованию бинарного этиленимина в качестве инактиватора вируса ящура / П. Текерлеков, Е. Велева // СЭВ. Приложение вне протокола научно-координац. совещ.. .по теме У.И.Ш. - Москва, 1984. - С. 100.

70. Требования к клеточным культурам, используемым для производства и контроля качества иммунобиологических лекарственных препаратов / Н. В. Шалунова, В. А. Меркулов, А. В. Комратов [и др.] // Ведомости НЦЭСМП. - 2013.

- № 1. - С 28-32.

71. Трухан, И. С. Питательная среда как ключевой фактор культивирования клеток млекопитающих / И. С. Трухан // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2018. - № 12-1. - С. 165-172.

72. Улупов, Н. А. Лапинизированная противоящурная вакцина ФГУ "ВНИИЗЖ" / Н. А. Улупов, А. И. Дудников, В. В. Михалишин // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2008. - Т. 6: Материалы Междунар. науч. конф. "Инфекц. патология животных", посвящ. 50-летию ФГУ "ВНИИЗЖ".

- С. 323-340.

73. Универсальная роллерная технология культивирования перевиваемых клеток животных / С. Г. Юрков, А. Н. Курносов, С. А. Витина [и др.] // Ветеринария. - 1995. - № 9. - С. 29.

74. Филиппович, Ю.Б. Основы биохимии: учеб. для хим. и биол. спец. пед. ун-тов. - Москва: Агар, 1999. - 512 с.

75. Фраймович, Ю. Г. Концентрирование антигена лапинизированного вируса ящура методом проточной ультрафильтрации / Ю. Г. Фраймович, П. Н. Сисягин, В. Л. Узюмов // Актуальные проблемы ветеринарной вирусологии: тез. докл. науч. конф. ВНИЯИ. - Владимир, 1983. - С. 43-45.

76. Фрешни, Р. Я. Культура животных клеток: практ. руководство / Р. Я. Фрешни; пер. с англ. Ю. Н. Хомяков. - 4-е изд., испр. и доп. - Москва: Лаборатория знаний, 2018. - 791 с

77. Фунтиков, А. А. Антигенные и иммуногенные свойства эпизоотических изолятов вируса ящура типа О, выделенных в 2014 - 2019 гг.: автореф. дис. ... канд. ветеринарных наук: 06.02.02 / Фунтиков Андрей Александрович. -Владимир, 2019. - 24 с.

78. Ходакова, Н. Н. Очистка культурального вируса ящура типа Азия-1 полигексаметилгуанидином / Н. Н. Ходакова // Ветеринарная патология. - 2006. -№ 4(19). - С. 43-46.

79. Хухоров, В. М. Эффективность иммунизации новорожденных поросят против ящура / В. М. Хухоров, Н. А. Яременко // Ветеринария. - 1982. - № 9. - С. 27-28. 80.

80. Цыганкова, Е. С. Разработка технологии производства препаратов для культур клеток / Е. С. Цыганкова, Ю. В. Щепкина // Передовые пищевые технологии: состояние, тренды, точки роста: сборник науч. тр. I междунар. научно-практ. конф., Москва, 29-30 ноября 2018 года / отв.

81. Шамшева, О. В. Клиническая вакцинология / О. В. Шамшева, В. Ф. Учайкин, Н. В. Медуницын. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2016. - 576 с.

82. Шарыпов, А. С. Усовершенствование технологии изготовления эмульсионной противоящурной вакцины: автореф. дис. ... канд. ветеринарных наук: 06.02.02 / Шарыпов Андрей Сергеевич. - Владимир, 2019. - 24 с.

83. Широкова, И. Адъюванты - настоящее и будущее вакцин / И. Широкова // Ремедиум. Журнал о российском рынке лекарств и медицинской техники. - 2019. - № 11. - С. 18-22.

84. Щербаков, А. В. Молекулярная эпизоотология ящура в России (Филогенетический анализ российских изолятов вируса ящура) / А. В. Щербаков // Ветеринария сегодня. - 2015. - № 3. - С. 30-36.

85. Электрохимический способ получения ферментативных белковых гидролизатов из гидробионтов, используемых для приготовления микробиологических питательных сред / Ю. А. Кучина, Е. В. Шошина, С. Ю. Дубровин [и др.] // Вестник МГТУ. Труды Мурманского государственного технического университета. - 2007. - Т. 10, № 4. - С. 628-632.

86. Элюция сорбированного вируса ящура сополимерами полиакриловой кислоты / Т. Н. Лезова, Н. Д. Клюкина, Д. В. Михалишин, А. В. Борисов // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2009. - Т. 7. - С. 14-20.

87. Эффективность метода проточной цитометрии в изучении механизмов репарации клеток ВНК-21 в процессе культивирования и криоконсервирования / Б. Л. Манин, В. Т. Ночевный, С. В. Хайдуков, В. Н. Ласкавый // Ветеринарна медицина. - 2011. - № 95. - С. 66-70.

88. Юрчишин, В. Д. Влияние сроков хранения гидролизатов белков крови на пролиферативную активность ВНК-21/2-17 и репродукцию вируса ящура / В. Д. Юрчишин, В. В. Михалишин, М. Н. Гусева // Ветеринария и кормление. - 2011. -№ 6. - С. 50-51.

89. Ящур / А. Н. Бурдов, А. И. Дудников, П. В. Малярец [и др.]. - Москва: Агропромиздат, 1990. - 320 с.

89а. A brief review on diagnosis of foot-and-mouth disease of livestock: conventional to molecular tools / N. Longjam, R. Deb, A.K. Sarmah [et al.] // Veterinary Medicine Intern. - 2011. - Vol. 2011. - P. 1-17.

90. A hydrophobic interaction chromatography strategy for purification of inactivated foot-and-mouth disease virus / H. Li, Y. Yang, Y. Zhang [et al.] // Protein Expr Purif. - 2015. - Vol.113. - P. 23-29.

91. A serum-free medium formulation efficiently supports isolation and propagation of canine adipose-derived mesenchymal stem/stromal cells / L. R. Devireddy, M. Myers, R. Screven [et al.] // PLoS ONE. - 2019. - Vol. 14, N 2. - P. 121.

92. Adaption of FMDV Asia-1 to suspension culture: Cell resistance is overcome by virus capsid alterations / V. Dill, B. Hoffmann, A. Zimmer [et al.] // Viruses. -2017. - Vol. 9, N 8. - P. 1-17.

93. Adherent and suspension baby hamster kidney cells have a different cytoskeleton and surface receptor repertoire / V. Dill, F. Pfaff, A. Zimmer [et al.] // PLoS One. - 2021. - Vol. 16, N 6. - P. 1-15.

94. Adjuvants - a balance between toxicity and adjuvanticity / R. K. Gupta, E. H. Relyveld, E. B. Lindbald [et al.] // Vaccine. - 1993. - Vol. 11. - P. 293-306.

95. Adjuvants for animal vaccines / Y. Burakova, R. Madera, S. McVey [et al.] // Viral Immunology. - 2018. - Vol. 31, N 1. - P. 11-22.

96. Alternative to FBS in animal cell culture - An overview and future perspective / K. Chelladurai, C. J. D. Selvan, K. Rajagopalan [et al.] // Heliyon. - 2021. - Vol. 7, N 8. - P. 1-9.

97. Applications and analysis of hydrolysates in animal cell culture / Y. Y. Ho., H. K. Lu, Z. F. S. Lim [et al.] // Bioresources and Bioprocessing. - 2021. - Vol. 8, N 93. - P. 1-15.

98. Assessment of the potency and effectiveness of a heptavalent oil-adjuvanted (ISA 206) foot-and-mouth disease vaccine in Egypt / A. H. Bazid, H. M. Amer, M. Nayel [et al.] // Archives Virology. - 2023. - Vol. 168, N 2. - P. 62.

99. Bahnemann, H. G. Binary ethylenimine as an inactivant for foot-and-mouth disease virus and its application for vaccine production / H. G. Bahnemann // Archives Virology. - 1975. - Vol. 47. - P. 47-56.

99a Balamurugan, V. Past and present vaccine development strategies for the control of foot-and-mouth disease / V. Balamurugan, R.M. Kumar, V.V. Suryanarayana // Acta Virologica. - 2004. - Vol. 48, N 4. - P. 201-214.

100. Barnum, K.J. Cell cycle regulation by checkpoints / K. J. Barnum, M. J. O'Connell // Methods Mol. Biol. - 2014. - Vol. 1170. - P. 29-40.

101. Barteling, S. J. Development and performance of inactivated vaccines against foot and mouth disease / S. J. Barteling // Revue Sci. techn. Off. Intern. Epiz. - 2002. -Vol. 21, N 3. - P. 577-588.

102. Barteling, S. J. Use of polyethyleneglycol-treated serum for animal cell cultures / S. J. Barteling // Developments Biol. Standazdiz. - 1976. - Vol. 37. - P. 91-95.

103. Barteling, S.J. Developments in foot-and-mouth disease vaccines / S. J. Barteling, J. Vreeswijk // Vaccine. -1991. - Vol. 9, N 2. - P. 75-88.

104. Barteling, S.J. Very fast (and safe) inactivation of foot-and-mouth disease virus and enteroviruses by a combination of binary ethyleneimine and formaldehyde / S.J. Barteling, N.I. Cassim // Developments Biol. (Basel). - 2004. - Vol. 119. - P. 449-455.

105. Basarad, O. The protection of fattening pigs against foot-and-mouth disease with an oil adjuvant vaccine. 1. Studies on European foot-and-mouth disease virus strains / O. Basarad // International Pig. Vet. Soc. 5th Congr. Proc. - Zagreb, 1978. - P. 13-46.

106. Bauer, K. Die Inaktivierung des Maul- und Klauenseuche (MKS)-Virus durch Aethylaethylenimin und die Eignung des inaktivierten Virus zur Impfstoffherstellung / K. Bauer // Zentralblat Bakteriol. Orig. - 1970. - Bd. 213, N 3. - S. 285-297.

107. Belsham, G.J. Towards improvements in foot-and-mouth disease vaccine performance / G.J. Belsham // Acta Vet. Scand. - 2020. - Vol. 62, N 20. - P.1-12.

108. Bertheussen, K. Growth of cells in a new defined protein-free medium / K. Bertheussen // Cytotechnology. - 1993. - Vol. 11. - P. 219-231.

109. Broedel, S. E. The case for serum-free media / S. E. Broedel, S. M. Papciak // BioProcess Intern. - 2003. - Vol. 1. - P. 56-58.

110. Brown, F. Application of agar-gel diffusion analysis to a study of the antigenic structure of inactivated vaccines prepared from the virus of foot-and-mouth disease / F. Brown, J. Crick // J. Immunology. - 1959. - Vol. 82, N 5. - P. 444-447.

111. Brown, F. Inactivation of viruses by azirdines / F. Brown // Vaccine. - 2001. -Vol. 20. - P. 332-327.

112. Cao, Y. Adjuvants for foot-and-mouth disease virus vaccines: recent progress / Y. Cao // Expert Rev. Vaccines. - 2014. - Vol. 13, N 11. - P. 1377-1385.

113. Ceccherini-Nelly, L. Biomedical tissue culture. - Vol.1. / L. Ceccherini-Nelly, B. Matteoli. - 2012. - 250 p.

114. Cell lines as biological models: practical steps for more reliable research / A. Capes-Davis, A. Bairoch, T. Barrett [et al.] // Chemical Res. Toxicol. - 2019. - Vol. 32, N 9. - P. 1733-1736.

115. Chemical and immunological characteristics of aluminum-based, oil-water emulsion, and bacterial-origin adjuvants / S. Martinon, A. Cisneros, S. Villicana [et al.] // J. Immunol. Res. - 2019. - Vol. 19. - P. 1-9.

116. Chen, M. Development and optimization of serum-free medium for high-density culture of suspended BHK-21 cells and high-yield of FMD virus / M. Chen, X. Liu, L. Zhao // Biotechnology Bull. - 2020. - Vol. 36, N 10. - P. 62-71.

117. Comparative study on the immunopotentiator effect of ISA 201, ISA 61, ISA 50, ISA 206 used in trivalent foot and mouth disease vaccine / E. I. El-Sayed, W. M. Gamal, A. I. Hassan [et al.] // Veterinary World. - 2015. - Vol. 8, N 10. - P. 11891198.

118. Completely self-contained cell culture system: from storage to use / U. Bhardwaj, Y. H. Zhang, Z. Rangwala, E. R. McCabe // Molecular Genetics and Metabolism. -2006. - Vol. 89, N 1-2. - P. 168-173.

119. Cruz, H. J. Metabolic shifts by nutrient manipulation in continuous cultures of BHK cells / H. J. Cruz, J. L. Moreira, M. J. Carrondo // Biotechnology and Bioengineering. - 1999. - Vol. 66, N 2. - P. 104-113.

120. Culturing cells without serum: lessons learnt using molecules of plant origin / P. Pazos, M. Boveri, A. Gennari [et al.] // ALTEX. - 2004. - Vol. 21, N 2. - P. 67-72.

121. Cunliffe, H. R. Inactivation of foot-and-mouth disease virus with ethylenimine / H. R. Cunliffe // Applied Microbiol. - 1973. - Vol. 26, N 5. - P. 747-750.

122. Development of foot-and-mouth disease vaccines in recent years / Z. Lu, S. Yu, W. Wang [et al.] // Vaccines. - 2022. - Vol.10. - P. 1-17.

123. Dill, V. Cell culture propagation of foot-and-mouth disease virus: adaptive amino acid substitutions in structural proteins and their functional implications / V.

124. Dill, M. Eschbaumer // Virus Genes. - 2020. - Vol. 56, N 1. - P. 1-15.

125. Discrimination of cell cycle phases in PCNA-immunolabeled cells / F. Schönenberger, A. Deutzmann, E. Ferrando-May, D. Merhof // BMC Bioinformatics. -2015. - Vol. 16. - P. 1-10.

126. Doel, T. R. Optimisation of the immune response to foot-and-mouth disease vaccines / T. R. Doel // Vaccine. - 1999. - Vol. 17, N 13-14. - P. 1767-1771.

127. Duration of protection and humoral immunity induced by an adenovirus-vectored subunit vaccine for foot-and-mouth disease (FMD) in Holstein steers / T. Sitt, M. Kenney, J. Barrera [et al.] // Vaccine. - 2019. - Vol. 37, N 42. - P. 6221-6231.

128. Eagle, H. The specific amino acid requirements of a mammalian cell (strain L) in tissue culture / H. Eagle // J. Biol. Chemistry. - 1955. - Vol. 214, N 2. - P. 839-852.

129. Effect of formaldehyde and binary ethyleneimine (BEI) on the integrity of foot-and-mouth disease virus capsid / M. M. Rweyemamu, O. Unehara, W. Giorgi [et al.] // Revue Sci. techn. Off. Intern. Epiz. - 1989. - Vol. 8, N 3. - P. 747-764.

130. Effects of yeast extract on cell growth and antibody production in CHO cell culture / D. Hu, L. Zhao, L. Fan [et al.] // J. Biotechnol. Bull. - 2017. - Vol. 33, N 6. - P. 162169.

131. Effekts of serum and serum-derived faktors on growth and differentiation of mouse keratino - cytes / F. Bertolero M. E.Kaighn, R. F. Camalier [et al.] // In Vitro. - 1986. -Vol. 22. - P. 423-428.

132. Enhanced immune responses of foot-and-mouth disease vaccine using new oil/gel adjuvant mixtures in pigs and goats / M. E. Park, S. Y. Lee, R. H. Kim [et al.] // Vaccine. - 2014. - Vol. 32, N 40. - P. 5221-5227.

133. Espinet, R. G. Posibilidades de una vacuna antiaftosa a silice diatomeas. I. Comunication / R. G. Espinet // Gaceta Vet. B. Aires. - 1977. - Vol. 89, N 11-12. - P. 967-985.

134. Evaluation of cell lines for the isolation of foot-and-mouth disease virus and other viruses causing vesicular disease / A. R. Gray, B. A. Wood., E. Henry [et al.] // Frontiers in Veterinary Sci. - 2020. - Vol.7. - P. 1-11.

135. Fellowes, O. N. Comparison of the inactivation and antigenicity of foot-and-mouth-disease virus by acetylethyleneimine and by combined effect of ultraviolet light and P-propiolactone / O. N. Fellowes // J. Immunology. - 1965. - Vol. 95, N 6. - P. 1100-1106.

136. Fetal calf serum-free suspension culture of Chinese hamster ovary cells employing fish serum / M. Fujiwara, Y. Aizu, I. Shioya [et al.] // J. Biosci. Bioeng. - 2010. - Vol. 109, N 3. - P. 307-309.

137. Foot-and-mouth disease vaccines / F. D. S. Segundo, G. N. Medina, C. Stenfeldt [et al.] // Veterinary Microbiol. - 2017. - Vol. 206. - P. 102-112.

138. Foot-and-mouth disease virus concentration and purification by affinity chromatography / A.A. Navarro del Cañizo, M. Mazza, R. Bellinzoni, O. Cascone // Applied Biochem. Biotechnol. - 1996. - Vol. 61, N 3. - P. 399-409.

139. Foot-and-mouth disease virus: molecular interplays with IFN response and the importance of the model / M. Sarry, D. Vitour, S. Zientara[et al.] /// Viruses. - 2022. -Vol. 14, N 10. - P. 1-39.

140. Francis, G. L. Albumin and mammalian cell culture: implications for biotechnology applications / G. L. Francis // Cytotechnology. - 2010. - Vol. 62. - P. 116.

141. Frenkel, H. S. Research on foot-and-mouth disease. 3. The cultivation of the virus on a practical scale in explantations of bovine tongue epithelium / H. S. Frenkel // American J. Vet. Res. - 1951. - Vol. 12, N 44. - P. 187-190.

Freund, J. The mode of action of immunologic adjuvants / J. Freund // Advances Tuberc. Res. - 1956. - Vol. 7. - P. 130-148.

142. Gamil, M. Effect of vegetable oils as adjuvants on immune response to polyvalent foot and mouth disease inactivated vaccine / M. Gamil, E. Soliman // J. Applied Vet. Sci. - 2021. - Vol. 6, N 2. - P. 37-43.

143. Gamma irradiation of animal serum: validation of efficacy for pathogen reduction and assessment of impacts on serum performance // M. Plavsic, R. Nims, M. Wintgens, R. Versteegen // BioProcessing J. - 2016. Vol. 15, N 2. - P. 12-21.

144. Gao, Y. Biological function of foot-and-mouth disease virus non-structural proteins and non-coding elements / Y. Gao, S. Q. Sun, H. C. Guo // Virology J. - 2016. - Vol. 13, N 107. - P. 1-17.

145. Giard, D. J. Routine heat inactivation of serum reduces its capacity to promote cell attachment / D. J. Giard // In Vitro Cell Dev Biol. - 1987. - Vol. 23, N 10. - P. 691697.

146. Grubman, M. J. Foot-and-mouth disease / M. J. Grubman, B. Baxt // Clinical Microbiol. Rev. - 2004. - Vol. 17, N 2. - P. 465-493.

147. Gstraunthaler, G. Alternatives to the use of fetal bovine serum: serum-free cell culture / G. Gstraunthaler // ALTEX. - 2003. - Vol. 20, N 4. - P. 275-281.

148. Hartung, A. Use of medium supplemented with molecules of plant origin to culture epithelial cells / A. Hartung, T. Pazos, P. Gennari // ALTEX-Alt. Anim. Exp. - 2003. -Vol. 20. - P. 175-176.

149. Hassan, A. I. Effect of different culture systems on the production of foot and mouth disease trivalent vaccine / A. I. Hassan // Veterinary World. - 2016. - Vol. 9. -P. 32-37.

150. He, P. Advances in aluminum hydroxide-based adjuvant research and its mechanism / P. He, Y. Zou, Z. Hu // Human Vaccines and Immunother. - 2015. - Vol. 11, N 2. - P. 477-488.

151. Heat-inactivated coelomic fluid of the earthworm Perionyx excavatus is a possible alternative source for fetal bovine serum in animal cell culture / V. N. Chellathurai, K. Rajagopalan C. J. D Selvan [et al.] // Biotechnology Progress. - 2019. - Vol. 35, N 4. -P. 281-287.

152. Higher-order structures of the foot-and-mouth disease virus RNA-dependent RNA polymerase required for genome replication / E. A. Loundras, J. Streetley, M. R. Herod [et al.] // Commonications Biol. - 2022. - Vol. 5, N 61. - P. 1-12.

153. Improved immune responses and safety of foot-and-mouth disease vaccine containing immunostimulating components in pigs / J. H. Choi, S. H. You, M. K. Ko [et al.] // J. Vet. Sci. - 2020. - Vol. 21, N 5. - P. 1-13.

154. Inactivation of FMD virus with aziridines / T. W. F. Pay, R. C. Telling, A. C. Thorne // European Comm. Control FMD, Tubingen, 1981. - Rome, 1982. - P. 55-57.

155. Incursions of foot-and-mouth disease virus into Europe between 1985 and 2006 / J. F. Valarcher, Y. Leforban, M. Rweyemamu [et al.] //Transboundary Emerg. Dis. -2008. - Vol. 55. - P. 14-34.

156. Inferences of carbon dioxide in present-day cell culture systems: an unacknowledged problem and perspectives / A. K. Dubey, L. Lavanya, D. Sadananda [et al.] // Austin Therapeutics. - 2021. - Vol. 6, N 1. - P. 1033.

157. Influence of cell type and cell culture media on the propagation of foot-and-mouth disease virus with regard to vaccine quality / V. Dill, B. Hoffmann, A. Zimmer [et al.] // Virology J. - 2018. - Vol. 15, N 1. - P. 1-11.

158. Investigation of cell culture conditions for optimal foot-and-mouth disease virus production / V. Dill, A. Zimmer, M. Beer, M. Eschbaumer // BMC Biotechnol. - 2019. - Vol. 19, N 1. - P. 1-10.

159. Jackman, M.R. Cyclins and the G2/M transition / M.R. Jackman, J.N. Pines // Cancer Surveillance. - 1997. - Vol. 29. - P. 47-73.

160. Jayme, D. W. Media formulation options and manufacturing process controls to safeguard against introduction of animal origin contaminants in animal cell culture / D. W. Jayme, S. R. Smith // Cytotechnology. - 2000. - Vol. 33, N 1-3. - P. 27-36.

161. Jayme, D. W. Basal medium development for serum-free culture: a historical perspective / D. W. Jayme, T. Watanabe, T. Shimada // Cytotechnology. - 1997. - Vol. 23, N 1-3. - P. 95-101.

162. Keen, M. J. Development of a serum-free culture medium for the large scale production of recombinant protein from a Chinese hamster ovary cell line / M. J. Keen, N. T. Rapson // Cytotechnology. - 1995. - Vol. 17, N 3. - P. 153-163.

163. Keenan, J. The role of recombinant proteins in the development of serum-free media / J. Keenan, D. Pearson, M. Clynes // Cytotechnology. - 2006. - Vol. 50, N 1-3. - P. 49-56.

164. Kensil, C. R. Saponins as vaccine adjuvants / C. R. Kensil // Critical Rev. Ther. Drug Carrier Syst. - 1996. - Vol. 13. - P. 1-55.

165. Leland, D. S. Role of cell culture for virus detection in the age of technology / D. S. Leland, C. C. Ginocchio // Clinnical Microbiol. Rev. - 2007. - Vol. 20, N 1. - P. 4978.

166. Loeffler, F. Berichte der Commission zur Erforschung der Maul-und-Klauenseuche bei dem Institut fur Infektionskrankheiten in Berlin / F. Loeffler, P. Frosch // Deutsche Med. Wschr. 1998. - Bd. 24, N 35. - S. 80-83, 97-100, 562-564.

167. Lombard, M. A brief history of vaccines and vaccination / M. Lombard, P.-P. Pastoret, A.-M. Moulin // Revue Sci. techn. Off. Intern. Epiz. - 2007. - Vol. 26, N 1. -P. 29-48.

168. Long-term cryopreservation of human and other mammalian cells at -80 °C for 8 Years / Y. Miyamoto, M. Ikeuchi, H. Noguchi, S. Hayashi // Cell Med. - 2018. - Vol. 10. - P. 1-7.

169. Lukas, J. Mammalian cell cycle checkpoints: signalling pathways and their organization in space and time // J. Lukas, C. Lukas, J. Bartek // DNA Repair (Amst). -2004. - Vol. 3, N 8-9. - P. 997-1007.

170. MacPherson, I. Polyoma transformation of hamster cell clones - An investigation of genetic factors affecting cell competence / I. MacPherson, M. Stoker // Virology. -1962. - Vol. 16. - P. 147-151.

171. Marigliani, B. Adaptation of mammalian cells to chemically defined media / B. Marigliani, L. B. L. Balottin, E. F. P. Augusto // Current Protocols Toxicol. - 2019. -Vol. 82, N 1. - P. 88.

172. McKinnon, K. M. Flow cytometry: An overview / K. M. McKinnon // Current Protocols Immunol. - 2018. - Vol. 120. - P. 1-16.

173. Nims, R. W. Best practices for the use and evaluation of animal serum as a component of cell culture medium / R. W. Nims, J. W. Harbell // In Vitro Cell 174. Dev. Biol. Anim. - 2017. - Vol. 53, N 8. - P. 682-690.

175. OLE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. - 24th Ed. -Paris, 2022. - Vol. 1, Chapter 3.1.8. - P. 12-13.

176. Optimization of chemically defined cell culture media—replacing fetal bovine serum in mammalian in vitro methods / J. van der Valk, D. Brunner, K. De Smet [et al.] // Toxicology in Vitro. - 2010. - Vol. 24, N 4. - P. 1053-1063.

177// Currents Protocjls Cell. Biol. - 2007. - Chapter 1, Unit 1.1. - URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18228494/ (дата обращения: 11.01.2023)

178. Place, T. L. Limitations of oxygen delivery to cells in culture: an underappreciated problem in basic and translational research / T. L. Place, F. E. Domann, A. J. Case // Free Radic. Biol. Med. - 2017. - Vol. 113. - P. 31-322.

179. Potential use of adult bovine serum obtained during the slaughtering process as a biological reagent / E. Yu, M. Kim, S. Pokharel [et al.] // Animal Cells and Systems. -2013. - Vol. 17, N 2. - P. 106-112.

180. Preksha, G. Cell culture techniques in gastrointestinal research: methods, possibilities and challenges / G. Preksha, R. Yesheswini, C.V. Srikanth // Indian J. Pathol. Microbiol. - 2021. - Vol. 64. - P. 52-57.

181. Production of a foot-and-mouth disease vaccine antigen using suspension-adapted BHK-21 cells in a bioreactor / S. Park, J. Y. Kim, K. H. Ryu [et al.] // Vaccines (Basel). - 2021. - Vol. 9, N 5. - P. 1-13.

182. Production of stable, immunogenic foot-and-mouth disease vaccine in a chemicallydefined, serum-free medium optimized for BHK-21 cells / P. Gulde, S. Barrett, B. Naumovich [et al.] // Cell Culture Engineering XV, ECI Symposium Series. - 2016. - P. 1-2.

183. Pyl, G. Die prufung von Aluminium hydroxydauf Seine Eignung fur die Maul-und-Klauenseuche-Vakzine / G. Pyl // Archives exp. Vet. Med. - 1953. - Bd. 7, N 1. - S. 917.

184. Pyl, G. Die Rolle des Aluminium hydroxyds im Adsorbat-Impfstoff gegen Maul-und-Klauenseuche / G. Pyl // Wissenschaftliche Zschr. Ernst. Moritz Arndt-Universität Greifswald, Math. - Nat. R. - 1955, 1956. - N 3-4. - S. 189-192.

185. Relationship between adjuvant activity and amphipathic structure of soyasaponins / K. Oda, H. Matsuda, T. Murakami [et al.] // Vaccine. -2003. - Vol.21, N 17-18. - P. 2145-2151.

186. Review of the current research on fetal bovine serum and the development of cultured meat / D. Y. Lee, S. Y. Lee, S. H. Yun [et al.] // Food Sci. Anim. Resources. -2022. - Vol. 42, N 5. - P. 775-799.

187. Ryu, W. S. Virus life cycle / W. S. Ryu // Molecular Virology of Human Pathogenic Viruses. - London, 2017. - P. 31-45.

188. Schmidt, S. Immunisation active du cobaye contre la fievre aphteuse au moyen du virus active combine aves E'hydroxide d'aluminium / S. Schmidt, A. Hansen // Acta Pathol. Microbiol. Scand. - 1936. - Vol. 13. - P. 405-423.

189. Serotyping and adaptation of foot and mouth disease virus in BHK-21 cell line towards the development of vaccine candidate / A. N. M. Shahiduzzaman, M. E. Haque, M. H. Rahman [et al.] // International J. Vaccines and Vaccination. - 2016. - Vol. 3, N 2. - P. 1-5.

190. Serum-free cell culture: the serum-free media interactive online database / D. Brunner, J. Frank, H. Appl [et al.] // ALTEX. - 2010. - Vol. 27, N 1. - P. 53-62. Siegel, W. Fetal bovine serum: The impact of geography / W. Siegel, L. Foster // J. BioProcess. - 2013. - Vol. 12, N 3. - P. 28-30.

191. Sinacore, M. S. Adaptation of mammalian cells to growth in serum-free media / M. S. Sinacore, D. Drapeau, S. R. Adamson // Molecular Biotechnol. - 2000. - Vol. 15. -P. 249-257.

192. Spickler, A. R. Adjuvants in veterinary vaccines: modes of action and adverse effects / A. R. Spickler, J. A. Roth // J. Vet. Internal Med. - 2003. - Vol. 17. - P. 273281.

193. Stein, A. Decreasing variability in your cell culture / A. Stein // Biotechniques. -2007. - Vol. 43. - N 2. - P. 228-229.

194. Strohmaier, K. Virus concentration by ultrafiltration / K. Strohmaier // Methods Virol. - 1967. - Vol. 3. - P. 245-274.

195. Studies on in vitro culture characteristics of adherent baby hamster kidney-21(BHK-21) cell line / S. U. Rahman, M. Rabbani, K. Sahidullah, Z. Muhammed // International J. Agric. Biol. - 2007. - Vol. 9, N 6. - P. 821-826.

196. Suryadinata, R. Control of cell cycle progression by phosphorylation of cyclin-dependent kinase (CDK) substrates / R. Suryadinata, M. Sadowski, B. Sarcevic // Bioscience Rep. - 2010. - Vol. 30, N 4. - P. 243-255.

197. Systematic evaluation of sericin protein as a substitute for fetal bovine serum in cell culture / L. Liu, J. Wang, S. Duan [et al.] // Science Rep. - 2016. - Vol. 6. - P. 315316.

198. Terpstra, C. Endurance of immunity against foot-and-mouth disease in cattle after three consecutive annual vaccinations / C. Terpstra, C. Maanen, J. G. Bekkum // Research Vet. Sci. -1990. - Vol. 49, N 2. - P. 236-242.

199. The cell culture medium affects growth, phenotype expression and the response to selenium cytotoxicity in A549 and HepG2 cells / L. A. Selenius., M. W. Lundgren, R. Jawad [et al.] // Antioxidants (Basel). - 2019. - Vol. 8, N 5. - P. 1-14.

200. The comparison of the efficacy of swine FMD vaccine emulsified with oil adjuvant of ISA 201 VG or ISA 206 VG / D. Li, C. Zhou, D. She [et al.] // J. Biosciences and Medicines. - 2013. - Vol. 1. - P. 22-25.

201. The humane collection of fetal bovine serum and possibilities for serum-free cell and tissue culture / J. van der Valk, D. Mellor, R. Brands [et al.] // Toxicology in Vitro. - 2004. - Vol. 18, N 1. - P. 1-12.

202. The pH stability of foot-and-mouth disease virus particles is modulated by residues located at the pentameric interface and in the N terminus of VP1 / F. Caridi, A. Vázquez-Calvo, F. Sobrino, M.A. Martín-Acebes // J. Virol. - 2015. - Vol. 89, N 10. -P. 5633-5642.

203. The relationship between the 140S antigen dose in aqueous foot-and-mouth disease vaccines and the serum antibody response of cattle // M. M. Rweyemamu, L. Black, A. Boge [et al.] // J. Biol. Stand. -1984. - Vol.12, N 1. - P. 111-120.

204. Usability of size-excluded fractions of soy protein hydrolysates for growth and viability of Chinese hamster ovary cells in protein-free suspension culture / B. H. Chun, J. H. Kim, H. J. Lee, N. Chung // Bioresour Technol. - 2007. - Vol. 98, N 5. - P. 10001005.

205. Validation of binary ethyleneimine (BEI) used as an inactivant for foot and mouth disease tissue culture vaccine / D. Aarthi, K. A. Rao, R. Robinson, V. A. Srinivasan // Biologicals. - 2004. - Vol. 32, N 3. - P.153-156.

206. Vallée, H. Sur l'immunisation anti-aphteuse par le virus formolé / H. Vallée, H. Carré, P. Rinjard // Revue Gén. Méd. Vét. - 1926. - Vol. 102, N 35. - P. 129-134.

207. Verma, A. Animal tissue culture principles and applications / A. Verma, M. Verma, A. Singh // Animal Biotechnol. - 2020. - Chap 14. - P. 269-293.

208. Virus-host interactions in persistently FMDV-infected cells derived from bovine pharynx / V. O'Donnell, J.M. Pacheco, M. Larocco [et al.] // Virology. -2014. - Vol. 468-470. - P. 185-196.

209. Vogel, F. R. Adjuvants in perspective. Modulation of the immune response to vaccine antigens / F. R. Vogel // Developments Biol. Standazdiz. - 1998. - Vol. 92. - P. 241-248.

210. Waldmann, O. Die active Immunisierung des Rindes gegen Maul-und-Klauenseuche / O. Waldmann, K. Kobe // Deutsches Tierarzteblatt. - 1938. - N 5. - S. 3.

211. Wang, Z. Cell cycle progression and synchronization: An Overview / Z. Wang // Methods Mol. Biol. - 2022. - Vol. 2579. - P. 3-23.

212. Yao, T. Animal-cell culture media: History, characteristics, and current issues / T. Yao, Y. Asayama // Reproductive Medicine and Biology. - 2017. - Vol. 16, N 2. - P. 99-117.

213. Zabal, O. Selection of highly susceptible cell lines to foot and mouth disease virus infection / O. Zabal, N. Fondevila // Open J. Vet. Medicine. - 2013. - Vol. 3, N 5. - P. 263-266.

7 ПРИЛОЖЕНИЯ

Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный центр охраны здоровья животных» (Ф1 БУ «ВНИИЗЖ»)

утвгржд \н»

Зам. .шре^трацо качеству

_ --г /У" С.К. Старое ! 8 г.

М ЕТОД11111: С К И Е Р Е КС) М Е Н ДА Ц ИII

[ Ю ОПРЕДЕЛЕНИЮ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АК ГИВНОСТИ ГИДРОЛИЗЛТЛ Ь К Л КОВ КРОВИ

Авторы'

Шевченко VI.Л-Мнхаяншим Д. В. Гусева М.Н.

Раесмогреио ученым советом н рекомендовано к ут нерждению Протокол .4? 8 от "31" августа 201В г.

Рассмотрено и одобрено метод комиссией Протокол № 5 от "17" августа 2018 г