Оптимальные многоступенчатые системы спектрофотометрических и хроматографических методов в клинической лабораторной диагностике эндокринных заболеваний: принцип построения и применение в анализе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Колоскова, Светлана Владимировна

• Колоскова, Светлана Владимировна
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Колоскова, Светлана Владимировна

v Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Методы определения холестерина в сыворотке крови человека.

1.1.1. Химические методы определения холестерина.

1.1.2. Ферментные методы определения холестерина.

1.1.3. Определение холестерина методами жидкостной хроматографии.

1.1.4. Определение холестерина методом газожидкостной хроматогра-^ фии.

1.2. Определение высших жирных кислот в плазме крови человека.

1.3. Определение катехоламинов в плазме крови человека.

Глава 2. Экспериментальная часть.

2.1. Реагенты и аппаратура.

2.2. Методы исследования.

Глава 3. Многоуровневая система определения холестерина в плазме крови человека

3.1. Определение содержания холестерина методом планарной хромато-- графии.

3.2. Определение холестерина фотометрическими методами.

3.3. Определение холестерина методом ВЭЖХ.

Глава 4. Методы определения высших жирных кислот в плазме крови.

Глава 5. Определение катехоламинов и важнейших биохимических маркеров в биологических жидкостях человека.

5.1. Определение катехоламинов методом ВЭЖХ.

5.2. Определение показателей кальций-фосфорного обмена в биологических жидкостях человека.

Глава 6. Использование совокупности параметров для решения классификационных задач в клинической диагностике.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимальные многоступенчатые системы спектрофотометрических и хроматографических методов в клинической лабораторной диагностике эндокринных заболеваний: принцип построения и применение в анализе»

Актуальность работы. Клиническая лабораторная диагностика является одной из важнейших областей современной медицины, успехи которой зависят как от уровня развития аналитической химии, так и степени внедрения наиболее перспективных методов анализа в практику. В настоящее время возможности абсолютного большинства клинико-диагностических лабораторий нашей страны ограничены применением фотометрических методов анализа. Это не всегда дает возможность быстро и правильно провести определение диагностически значимых параметров.

Многочисленные эпидемиологические исследования установили связь гиперхолестеринемии с риском развития сердечно-сосудистых заболеваний. В связи с этим определение холестерина в крови является одной из самых актуальных задач современной клинической лабораторной диагностики. Анализ литературных данных показывает, что исследования в этой области ведутся, в основном, с применением химических и ферментных фотометрических методик. Отсутствуют также данные о возможности оптимизации применения комплекса аналитических методов, что дало бы возможность повысить эффективность решения задачи определении холестерина (ХС) в биологических жидкостях.

Не менее важной проблемой современной клинической биохимии является определение содержания высших жирных кислот (ВЖК) и катехоламинов (КА) в плазме крови для ранней диагностики ряда тяжких расстройств здоровья. Одним из направлений в решении этой задачи является внедрение в практику медицинских лабораторий хроматографических методов анализа. Методом ГХ можно быстро выявлять малейшие изменения в содержании и соотношении ВЖК различного строения, что позволяет диагностировать ряд серьезных заболеваний эндокринной системы. Внедрение метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения содержания катехоламинов в плазме крови позволяет с высокой точностью проводить диагностику гормонально активных опухолей хромафинной ткани на ранних стадиях заболевания.

Целью работы явилась разработка системного подхода к определению основных показателей липидного и кальций-фосфорного обмена, катехолами-нов в биологических жидкостях человека спектрофотометрическими и хрома-тографическими методами.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

• систематизировать и оценить аналитические и метрологические характеристики методов, применяемых в клинико-диагностических лабораториях для определения параметров липидного и кальций-фосфорного обмена;

• оптимизировать условия спектрофотометрического определения некоторых показателей липидного и кальций-фосфорного обмена в биологических жидкостях;

• выбрать оптимальные условия и разработать методики хроматографиче-ского определения катехоламинов, высших жирных кислот и холестерина в плазме крови;

• выявить возможности использования совокупности основных параметров биологических жидкостей для решения классификационных задач в целях ранней диагностики эндокринных заболеваний и мониторинга лечебного процесса.

Научная новизна работы

• Изучена возможность использования системы методов жидкостной хроматографии, включающей планарные варианты (бумажную и тонкослойную) и ВЭЖХ для определения холестерина в сыворотке крови с целью оптимизации процесса диагностики нарушений липидного обмена.

Разработана рациональная многоступенчатая схема определения холестерина и высших жирных кислот, включающая спектрофотометрические и хроматографические методы анализа.

Разработана и внедрена методика ВЭЖХ - определения катехоламинов и холестерина при их совместном присутствии в пробе с использованием мультидетекторной схемы;

Показана принципиальная возможность применения элементов метода распознавания образов для обработки совокупности результатов определения содержания ключевых веществ в биологических жидкостях человека с целью решения классификационных задач;

Оптимизированы условия аналитического определения основных биохимических показателей кальций-фосфорного обмена в биологических жидкостях человека. Практическая значимость работы на основе результатов проведенных исследований предложены и внедрены в практику работы диагностической лаборатории тест-методики определения ХС и ВЖК; разработана и внедрена в практику работы лабораторий СамГМУ методика газохроматографического определения высших жирных кислот в плазме крови; разработана и внедрена методика определения ХС в плазме крови методом ВЭЖХ; предложена и внедрена многоуровневая схема определения ХС и ВЖК с использованием комплекса аналитических методик; разработан и внедрен в практику клинико-диагностической лаборатории ООО «Центр «Диабет» ВЭЖХ - методика количественного определения катехоламинов в плазме крови;

• разработана и внедрена в практику система классификации образцов биологических жидкостей в целях ранней диагностики расстройств здоровья, основанная на графическом представлении совокупности ключевых параметров крови и мочи.

Положения, выносимые на защиту

• многоступенчатая система определения параметров липидного обмена, включающая спектрофотометрические, колоночные и плоскостные хро-матографические методы;

• оптимальные условия спектрофотометрического определения биохимических показателей обменных процессов;

• оптимизация хроматографического определения параметров липидного обмена, катехоламинов в плазме крови;

• разработанные методики определения основных показателей обменных процессов и система использования совокупности ключевых параметров биологических жидкостей для ранней диагностики эндокринных заболеваний и мониторинга процесса лечения.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на VII Всероссийской конференции «Органические реагенты в аналитической химии» (Саратов, 1999г); I Российском съезде геронтологов и гериатров (Самара, 1999); Всероссийской конференции «Химический анализ веществ и материалов» (Москва, 2000); IV Российском съезде геронтологов и гериатров (Самара, 2001); VII Всероссийском симпозиуме по молекулярной жидкостной хроматографии и электрофорезу (Москва, 2001); Всероссийской конференции «Актуальные проблемы аналитической химии» (Москва, 2002); Всероссийском симпозиуме «Современные проблемы хроматографии» (к 100 - летию со дня рождения К.В.Чмутова) (Москва, 2002); XII Всероссийской конференция по газовой хроматографии (Самара, 2002); IV Всероссийской конференции молодых ученых «Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии» (Саратов, 2003), Всероссийской конференции «Аналитика России» (Москва, 2004), V Всероссийской конференции молодых ученых «Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии» (Саратов, 2005), Всероссийской конференции «Теория и практика хроматографии. Применение в нефтехимии» (Самара, 2005).

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Колоскова, Светлана Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Разработана многоступенчатая система аналитического контроля параметров липидного обмена, основанная на комплексном использовании спектрофотометрических и хроматографических методов, и отличающаяся большей экспрессностью и эффективностью по сравнению с традиционными биохимическими методами.

2. Найдены оптимальные условия и выявлены особенности применения спектрофотометрического метода, газовой, высокоэффективной жидкостной и планарной хроматографии для определения основных биохимических показателей липидного и кальций-фосфорного обмена, катехоламинов, позволяющие существенно повысить эффективность ранней диагностики эндокринных заболеваний и проводить непрерывный контроль за процессом лечения.

3. Предложен способ графического представления совокупности результатов определения биохимических показателей, позволяющий отнести объект исследования к одной из категорий групп риска для ранней диагностики ряда заболеваний и мониторинга лечения без привлечения методов функциональной диагностики.

4. Разработана ВЭЖХ-методика определения ХС, характеризующаяся наибольшей чувствительностью, точностью и надежностью определения данного аналита в сыворотке крови в интервале 33,3-3200 мг/л.

5. Показано, что в случае реализации метода обращено-фазовой ТСХ оптимальным является использование в качестве подвижной фазы системы ледяная уксусная кислота - ацетонитрил (1:1), насыщенная ундеканом. Рассчитаны Rf для индивидуальных высших жирных кислот Си -Сго- Разработана методика пробоподготовки для определения высших жирных кислот методом ГХ, оптимизированы условия газохромато-графического определения содержания их в плазме крови.

Разработана методика определения катехоламинов и холестерина при совместном присутствии методом ВЭЖХ с использованием мультиде-текторной схемы, включающей электрохимический и спектрофотомет-рический детекторы.

В практику работы клинико-диагностических лабораторий ООО «Центр «Диабет» и Самарского государственного медицинского университета внедрены методики определения холестерина, катехоламинов, высших жирных кислот, а также показателей костного метаболизма в биологических жидкостях человека с применением предложенного комплекса методов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Колоскова, Светлана Владимировна, 2006 год

1. Denti L., Cecchetti A., Annoni V., Merli M, Ablondi F, Valenti G. The role of lipid profile in determining the risk of ischemic stroke in the elderly: a case-control study// Arch. Gerontology and Geriatrics, 2003.- V. 37.- I. 1.- P. 51-62.

2. Aguilo A., Tauler P., Guix M.P., Villa G., Cordova A.,. Tur J.A., Pons A. Effect of exercise intensity and training on antioxidants and cholesterol profile in cyclists//J. Nutritional Biochem., 2003.- V. 14. I. 6.- P. 319-325.

3. Hirsch G.A., Blumenthal R.S. Usefulness of non-high-density lipoprotein cholesterol determinations in the diagnosis and treatment of dyslipidemia// Amer. J. Cardiology, 2003 V. 91.- I. 7.- P. 827-830.

4. Денисова O.B. Диагностика нарушений липидного обмена//Клин. лаб. диагностика, 1997. №6.- с. 28.

5. Руководство по клинической лабораторной диагностике. Ч.З. Клиническая биохимия/ Под ред. Базарновой М.А., Морозовой В.Т. -Киев: Головное издательство издательского объединения «Вища школа», 1996. -с.95-112.

6. Rylander L., Nilsson-Ehle P., Hagmar L. A simplified precise method for adjusting serum levels of persistent organohalogen pollutants to total serum lipids// Atherosclerosis, 2005. V. 180.-1. 2. - P. 233-244.

7. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник/ Под ред. В.В.Меньшикова. М.: Медицина, 1997. 241 с.

8. Захария Е.А., Децик Ю.И., Яворский О.Г. Лабораторная диагностика ишемической болезни сердца.- Киев: Здоровье, 1989. с. 16-170.

9. Waddington Е. I., Boadu Е., Francis G.A. Cholesterol and phospholipid efflux from cultured cells// Methods, 2005. V. 36.- I. 2. - P. 196-206.

10. Waddington E. I., Boadu E, Francis G. A. Cholesterol and phospholipid efflux from cultured cells// Methods, 2005.-V. 36.-I. 2.-P. 196-206.

11. Storch M., Konig D., Bultermann D., Blum A., Vogt S., Baumstark M., Berg A., Schmid A. Lipid profile in spinal cord-injured women with different injury levels//Preventive Medicine, 2005.- V.40.- I.3.- P.321-325.

12. Гуревич B.C., Шаталина Л.В., Ковалева И.Г., Бершадский Б.Г. Липидный состав крови пациентов с ишемической болезнью сердца// Биохимия, 1992.- Т.57.- №2.- с.267-274.

13. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Липопротеиды, дислипопротеидемии и атеросклероз. М.: Медицина, 1991.- с. 12-38.

14. Allison М. A., Wright М., Tiefenbrun J. The predictive power of low-density lipoprotein cholesterol for coronary calcification//Int. J. Cardiology, 2003.- V. 90.-I. 2-3.-P. 281-289.

15. Marin M. G., Zitter J. N. Expenditures associated with preventive healthcare//Preventive Medicine, 2004. V. 39.- I. 5.- P. 856-862.

16. Poli A., Bruschi F., Cesana В., Rossi M., Paoletti R., Crosignani P. G. Plasma low-density lipoprotein cholesterol and bone mass densitometry in postmenopausal women//Obstetrics & Gynecology, 2003.- V. 102.- I. 5.-P. 922-926.

17. Kishimoto Т., Matsuoka Т., Imamura S., Mizuno K. A novel colorimetric assay for the determination of cholesterol in plasma// Clin. Chem. Acta, 2003. V. 333.-I. 1.- P. 59-67.

18. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. Медицинские лабораторные технологии/ Под редакцией проф. А.И.Карпищенко. Санкт-Петербург: Интермедика, 1999. - 656 с.

19. Kourounakis А. P., Victoratos P., Peroulis N., Stefanou N., Yiangou M., Hadjipetrou L., Kourounakis P. N. Experimental Hyperlipidemia and the Effect of NSAIDs//Experimental and Molecular Pathology, 2002.-V. 73.- I. 2.-P. 135-138.

20. Contarini G., Povolo M., Bonfitto E., Berardi S. Quantitative analysis of sterols in dairy products: experiences and remarks// Int. Dairy J., 2002.-V. 12.-1. 7.- P. 573-578.

21. Хайдукова И.Л., Шахов Ю.А., Еремеева M.E., Малахов В.Н. Определение содержания общего холестерина в сыворотке крови человека// Вопросы медицинской химии, 1989.- №5. -с. 133-138.

22. Superko R., Harvey S. Hecht Metabolic disorders contribute to subclinical coronary atherosclerosis in patients with coronary calcification// The Am. J. of Cardiology, 2001.- V. 88.-1. 3.- P. 260-264.

23. Valerio L., Fontas E., Pradier C., Lavrut Т., Garraffo R., Dunais В., Cua E., Dellamonica P. Lopinavir/ritonavir combination and total/HDL cholesterol ratio// J. of Infection, 2005.-V. 50.-1. 3.-P. 229-235.

24. Suman C., Pundir S. Co-immobilization of cholesterol esterase, cholesterol oxidase and peroxidase onto alkylamine glass beads for measurement of total cholesterol in serum//Current Applied Physics, 2003.-V. 3.- I. 2-3.-P. 129-133.

25. Hamed S. A., Hamed E. A., Kandil M. R., El-Shereef H.K., M. M. Abdellah and Omar H. Serum thyroid hormone balance and lipid profile in patients with epilepsy//Epilepsy Research, 2005.-V. 66.-1. 1-3. P. 173-183.

26. Yazawa N., Ono J., Yoshimura H., Kimura S. Influence of nonspecific reaction on determination of H2O2 using Trinder reagents// Clin. Chem. Acta, 2005. V. 360. -I. 1-2.- P. 52-59.

27. Gay C. A., Stocker R. Simultaneous Determination of Coenzyme Q10, Cholesterol, and Major Cholesterylesters in Human Blood Plasma// Methods in Enzymology, 2004.-V. 378.-P. 162-169.

28. Герег Ш. Количественный анализ стероидов. М.: Мир, 1985. 281 с.

29. Nogueira G. С., Bragagnolo N. Assessment of methodology for the enzymatic assay of cholesterol in egg noodles//Food Chemistry, 2002.- V. 79.- I. 2,- P. 267270.

30. Vidal J. C., Garcia E. and Castillo J. R. In situ preparation of overoxidized PPy/oPPD bilayer biosensors for the determination of glucose and cholesterol in serum//Sensors and Actuators B: Chemical, 1999.-V. 57.- I. 1-3.- P. 219-226.

31. Ефимов A.C., Черепанов Д.С. Возможности нового портативного анализатора для определения холестерина в сыворотке крови// Вопросы медицинской химии, 1989.- №5.- С.124-128.

32. Каринова И.Н., Дворкин В.И., Золотов H.H. Определение содержания холестерина и его эфиров методом ВЭЖХ в сыворотке крови // Журн. аналит. химии, 1989.- Т.40,- №11. С.2104-2107.

33. Rordic A. Determination of cholesterol in egg yolk by high performance liquid chromatography using an automated F.A.//J. Liq. Chromatogr. and Relat. Technol, 1999. V. 22. -1.8.- P. 1235-1246.

34. Горячковский A.M. Справочное пособие по клинической биохимии. -Одесса: ОНФА, 1994.- 415 с.

35. Hirowatari Y., Yoshida H., Kurosawa H., Doumitsu K., Tada N. A new convenient HPLC method for determination of the cholesterol levels in HDL, LDL, IDL, VLDL, and chylomicron//Atherosclerosis Supplements, 2003. V. 4. -I. 2. - P. 220.

36. Masukawa Y., Tsujimura H., Imokawa G. A systematic method for the sensitive and specific determination of hair lipids in combination with chromatography//.!. Chromatogr. B, 2005.- V. 823.-1. 2.- P. 131-142.

37. Boswart J., Kostiuk P., Thomas J. High-performance liquid chromatographic determination of cholesteryl esters in the blood of obese children//J. Chromatogr.: Biomedical Applications, 1991.- V. 571.-1. 1-2.- P. 19-28.

38. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии / Под ред. А. Хеншена, К.-П. Хуне, Ф. Лотшнайк, В. Вёльтера. М.: Мир, 1988.- С. 383428.

39. Boselli Е., Velazco V., Caboni М. F., Lercker G. Pressurized liquid extraction of lipids for the determination of oxysterols in egg-containing food//J. Chromatogr. A, 2001.- V. 917.- I. 1-2.- P. 239-244.

40. Новиков Д.К., Мятиева С.Д., Мухамедова H.A., Чарыев Х.Э. Определение липидов крови методом ВЭЖХ с УФ-детектированием// Клин, лаб. диагностика, 1993.- №2.-с. 24-27.

41. Хайдукова ИЛ., Шахов Ю.А., Еремеева М.Е., Малахов В.Н. Хроматографическое определение холестерина сыворотки крови// Вопросы медицинской химии, 1989.-№5.-с. 133-138.

42. Tvrzicka Е., Mares P., Pi'saFikova A., Novakovic J., Hrabak P. Simplified gas chromatographic method for the simultaneous determination of phytosterols and cholesterol// J. Chromatogr.: Biomedical Applications, 1991.- V. 563.- I. 1.- P. 188-192.

43. Момыналиев K.T., Осипова C.B., Садовская В.Л., Говорун В.М., Сергиенко В.И. ВЭЖХ- определение холестерина в биологических объектах// Биохимия, 1997.- Т.62,- №2. -С. 187-194.

44. Park Е. J., Lee D., Shin Y. G., Lantvit D. D., Breemen R., Kinghorn A. D., Pezzuto J. M. Determination of cholesterol using liquid chromatography// J. Chromatogr. B: Biomedical Sciences and Applications, 2001.- V. 754.- I. 2.-P. 327-332.

45. Boswart J., Kostiuk P., Thomas J. High-performance liquid chromatographic determination of cholesteryl esters in the blood of obese children// J. Chromatogr.: Biomedical Applications, 1991.-V. 571.- I. 1-2.-P. 19-28.

46. Jeannot R., Sabik H., Sauvard E., Dagnac Т., Dohrendorf К. Determination of endocrine-disrupting compounds in environmental samples using gas and liquid chromatography with mass spectrometry// J. Chromatogr. A, 2002.- V. 854.- I. 12.- P. 521-534.

47. Choudhari К. В., Jayanthi S., Murty R. В., Matharu R. P. A high-performance liquid chromatographic method for the analysis of lipids from lyophilized formulations// J. Chromatogr. A, 1996.- V. 724,- I. 1-2.- P. 343-347.

48. SetaHaruo K., Okuyama N.T. Determination of a-tocopherol, free cholesterol, esterified cholesterols and triacylglycerols in human lipoproteins by high-performance liquid chromatography// J. Chromatogr. A, 1990.-V. 515.-P. 585-595.

49. Красиков В. Д. Современная планарная хроматография// Журн. аналит. химии, 2003.- Т. 58.- №8.- с.792-808.

50. Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У, Джонс К. Справочник биохимика . — М.: Мир, 1991.-с.142-158.

51. Kim Н. S., Choi С. К., Park Y. Н. Determination of cholesterol and its fermentation products by liquid chromatography// J. Chromatogr. A, 1987.- V. 398.-P. 372-374.

52. Singh R., Ajagbe M., Bhamidipati S., Ahmad Z., Ahmad I. A rapid liquid chromatography method for determination of cholesterol in liposome-based drug formulations // J. Chromatogr. A, 2005,- V. 1073.- I. 1-2.- P. 347-353.

53. Hradec J. A chromatographic method for the quantitative determination of cholesterol in biological materials// J. Chromatogr., 1988.-V. 32.- P. 511-518.

54. Horvath C. Quantitative determination of cholesterol in auto-oxidation mixtures by thin-layer chromatography// J. Chromatogr. A, 1986.- V. 22.-P. 52-59.

55. Крыжановская H. А., Басалгина Т. А. Хроматографические методы исследования в практике клинико-диагностической лаборатории// Клин. лаб. диагностика, 2004. №9. - С.63.

56. Shan Н., Pang J., Li S., Chiang Т. В., Wilson W. К., Schroepfer G. J. Chromatographic behavior of oxygenated derivatives of cholesterol// Steroids, 2003.- V. 68.-1. 3.- P. 221-233.

57. Hwang B.S., Wang J.T., Y.M. Choong. A simplified method for the quantification of total cholesterol in lipids using gas chromatography// J. of Food Composition and Analysis, 2003.- V. 16.- I. 2.- P. 169-178.

58. Garcia Regueiro J. A., Maraschiello C. Procedure for the determination of eight cholesterol oxides in poultry meat using on-column and solvent venting capillary gas chromatography// J. Chromatogr. A, 1997.-V. 764.- I. 2,- P. 279-293.

59. Bragagnolo N., Rodriguez-Amaya D. B. Simultaneous determination of total lipid, cholesterol and fatty acids in meat and backfat of suckling and adult pigs// Food Chemistry, 2002.- V. 79.-1. 2.- P. 255-260.

60. Garcia Regueiro J. A., Gibert J., Diaz I. Determination of neutral lipids from subcutaneous fat of cured ham by capillary gas chromatography and liquidchromatography// J. Chromatogr. A, 1994.- V. 667.- I. 1-2.- P. 225-233.

61. Toivo J., Phillips K., Lampi A., Piironen V. Determination of Sterols in Foods: Recovery of Free, Esterified, and Glycosidic Sterols// J. of Food1.

62. Composition and Analysis, 2001.- V. 14,-1. 6,- P. 631 -643.

63. Batta A. K., Salen G. Gas chromatography of lipids// J. Chromatogr. B: Biomedical Sciences and Applications, 1999.- V. 723.- I. 1-2.- P. 1-16.

64. Хейфец Г.М. Газохроматографическое определение холестерина в плазме крови //Журн. аналитической химии, 1990.- Т.45,- №4.- С.802-808.9 81. Bailey Е., F. Brooks A. G, Purchase М, Meakings М., Davies М., Walters D.

65. G. Improved method for the determination of the major neutral steroids andunconjugated bile acids in human faeces using capillary gas chromatography// J. Chromatogr.: Biomedical Applications, 1987.-V. 421.- P. 21-31.

66. Paterson E., Amado R. Simplified Method for the Simultaneous Gas Chromatographic Determination of Fatty Acid Composition and Cholesterol in Food// Anal. Chem. Acta, 1997.- V. 330.- I. 2.-P. 202-209.

67. Seppanen-Laakso Т., Laakso I., Hiltunen R. Analysis of lipids by gas chromatography, and its relevance to research on health and nutrition// Anal. Chem. Acta, 2002.- V. 465.- I. 1-2.- P. 39-62.

68. Xu X., Li R., Chen J., Chen P., Ling X., Rao P. Quantification of cholesterol in foods using gas chromatography// J. Chromatogr. B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences, 2002.- V. 768.- I. 2.- P. 369-373.

69. Лапин Б.Н. Применение хроматографии в пищевой, микробиологической и медицинской промышленности.- Геленджик: Наука, 1990.-е. 48-49.

70. Машнов А.П. Клинические исследования.- М.: Медицина, 1990 56 с.

71. Руководство по современной тонкослойной хроматографии. По материалам школы-семинара по тонкослойной хроматографии/ Под ред. О.Г.Ларионова.- М., 1994.-312 с.

72. Li Y., Lander R., Manger W., Lee A. Determination of lipid profile in meningococcal polysaccharide using reversed-phase liquid chromatography// J. Chromatogr. B, 2004.- V. 804.- I. 2.- P. 353-358.

73. Mjos S. A. Identification of fatty acids in gas chromatography by application of different temperature and pressure programs on a single capillary column// J. Chromatogr. A, 2003.- V. 1015.- I. 1-2.- P. 151-161.

74. Титов В. Н., Лисицын Д. М. Этерификация жирных кислот спиртами и функциональная роль полярных и неполярных липидов в кровотоке. Двойные связи жирных кислот липидов в липопротеинах// Клин. лаб. диагностика, 2003. №1. - С 4-10.

75. Seppanen-Laakso Т., Laakso I., Hiltunen R. Analysis of fatty acids by gas chromatography, and its relevance to research on health and nutrition// Anal. Chem. Acta, 2002.- V. 465.-1. 1-2.- P. 39-62.

76. Пилипчак E. M., Гирина О. H., Брюзгина Т. С. Сезонные особенности соотношений жирных кислот липидов сыворотки крови у больных с постинфарктным кардиосклерозом// Клин. лаб. диагностика, 2004. №6.-С.17-19.

77. Ардатская М. Д., Иконников Н. С., Минушкин О. Н. Способ определения короткоцепочечных жирных кислот (фракции С2—С6 с изомерами) в различных биологических субстратах методом газожидкостной хроматографии// Клин. лаб. диагностика, 2004.- №9. С.64.

78. Zghibeh С. М., Gopal V. R., Poff С. D., Falck J. R., Balazy M. Determination of trans-arachidonic acid isomers in human blood plasma// Anal. Biochem., 2004.-V.332.-I. l.-P. 137-144.

79. Осочук С. С., Коневалова Н. Ю. Изменения жирнокислотного спектра липопротеинов высокой плотности у мужчин и женщин при остром аппендиците// Клин. лаб. диагностика, 2005.- №1.- С.8-12.

80. Яценко О. В., Брюзгина Т. С., Рева С. Н. Жирно-кислотный состав липидов в биологических объектах при возрастной катаракте// Клин. лаб. диагностика, 2000.- №2. -С 11-13.

81. Брюзгина Т. С., Амосова Е. Н., Лыховский О. И., Вретик Г. М., Голод А. Г., Рева С. Н. Жирно-кислотный состав липидов в липопротеинах сыворотки крови при хронических заболеваниях печени// Клин. лаб. диагностика, 1999. -№7. -С.5.

82. Giacometti J., Miloevi A., Milin С. Gas chromatographic determination of fatty acids contained in different lipid classes after their separation by solid-phase extraction//J. Chromatogr. A, 2002.- V. 976.- I. 1-2,- P. 47-54.

83. Moldovan Z., Jover E., Bayona J. M. Gas chromatographic and mass spectrometric methods for the characterisation of long-chain fatty acids: Application to wool wax extracts// Anal. Chem. Acta, 2002.- V. 465.- I. 1-2.-P. 359-378.

84. Yang Y. J., Choi M. H, Paik M., Yoon H.R., Chung В. C. Gas chromatographic-mass spectrometric determination of plasma saturated fatty acids// J. Chromatogr. B: Biomedical Sciences and Applications, 2000.- V. 742.- I. 1.-P. 37-46.

85. Garcia С. C., Hernandez J. L., Lozano J. S. Gas chromatographic determination of the fatty-acid content of heat-treated green beans// J. Chromatogr. A, 2000.- V. 891.-1. 2.- P. 367-370.

86. Bragagnolo N., Rodriguez-Amaya D. B. Simultaneous determination of total lipid, cholesterol and fatty acids in meat and backfat of suckling and adult pigs// Food Chemistry, 2002.- V. 79.- I. 2.- P. 255-260.

87. Hu£ek P., Simek P., Tvrzicka E. Simple and rapid procedure for the determination of individual free fatty acids in serum// Anal. Chem. Acta, 2002.- V. 465.-1. 1-2.-P. 433-439.

88. Кузнецова Э.Э., Долгушина Г.С. Определение спектра жирных кислот в плазме крови пациентов с ишемической болезнью сердца// Клин. лаб. диагностика, 1993.- №6.- С.4-6.

89. Orellana-Coca С., Adlercreutz D., Andersson М. М., Mattiasson В., Hatti-Kaul R. Analysis of fatty acid by gas- chromatography// Chemistry and Physics of Lipids,2005.- V. 135.- I. 2.- P. 189-199.

90. Heravi M. J., Vosough M. Characterization and determination of fatty acids in fish oil using gas chromatography// J. Chromatogr. A, 2004.-V. 1024.- I. 1-2.- P. 165-176.

91. Destaillats F., Sebedio J., Berdeaux O., Juaneda P., Angers P. Gas chromatography determination of fatty acid// J. Chromatogr. B, 2005,- V. 820.- I. 1-P. 15-22.

92. Diniz Y. S., Cicogna A. C., Padovani C. R., Santana L. S., Faine L. A., Novel E. L. Diets rich in saturated and polyunsaturated fatty acids: metabolic shifting and cardiac health// Nutrition, 2004.- V. 20.- I. 2.- P. 230-234.

93. Розен В.Б. Основы эндокринологии.- M.: Изд-во МГУ, 1994. 128 с.

94. Бохонски А. Современные воззрения в биохимии.- М.: Мир, 1990.- 364 с.

95. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия.- М.: Медицина, 1990.- 652 с.

96. Ленинджер А. Основа биохимии. -М.: Мир, 1985 620 с.

97. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков В.В. Биохимические исследования в клинике. Л.: Медицина, Ленинградское объединение, 1989.-с.191-196.

98. Бессонова Е.А. Хроматографическое и электрофоретическое определение стероидов и биогенных аминов в биологических объектах: Автореф. дисс.канд. хим. наук. СПб., 2004.- 22 с.

99. Королева Е. М., Адамсон В. Г., Лапшина А. С., Похелайнен Е. JL, Никитина Т. Г. Использование высокоэффективной жидкостной и газовой хроматографии в медицинских исследованиях// Клин. лаб. диагностика, 2004.- №9. с.66

100. Каримова M.X., Кудрин B.C., Гайнетдинов P.P. Оценка содержания катехоламинов в крови у практически здоровых людей// Клин. лаб. диагностика, 1993.-№2.-c.33-35.

101. Corcuff J. -В., Monsaingeon М., Gatta В., Simonnet G. Diagnostic biochimique des pheochromocytomes: Biochemical diagnosis of pheochromocytoma// Immunoanalyse & Biologie Specialisee, 2002.-V. 17.- I. 5.-P. 293-296.

102. Zhang X.-H., Wang S.-F. Determination of ethamsylate in the presence of catecholamines using 4-amino-2-mercaptopyrimidine self-assembled monolayer gold electrode//Sensors and Actuators B: Chemical, 2005.- V. 104.- I. 1.- P. 29-34.

103. Gouarne C., Foury A., Duclos M. Critical study of common conditions of storage of glucocorticoids and catecholamines in 24-h urine collected during resting and exercising conditions// Clin. Chem. Acta, 2004.-V. 348.- I. 1-2.- P. 207-214.

104. Карцова Л. А., Сидорова А. А., Казаков В. А.,Бессонова E. А., Яшин A. Я. Определение катехоламинов методами капиллярного электрофореза и обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии// Журн. аналит. химии, 2004.- Т. 59. -№8.- с.812-818.

105. Simeon D., Guralnik О., Knutelska М., Yehuda R., Schmeidler J. Basal norepinephrine in depersonalization disorder// Psychiatry Research, 2003.-V. 121.-I. l.-P. 93-97.

106. McKenzie J. M., Watson C. J., Rostand R. D., German I., Witowski S. R., Kennedy R. T. Automated capillary liquid chromatography for simultaneous determination of neuroactive amines and amino acids// J. Chromatogr. A, 2002,-V. 962.-I. 1-2.- P. 105-115.

107. Nonutoshi K., Tatsuo M. Determination of catecholamines by high-performance liquid chromatography with catalytic photometric detection// J. Chromatogr. B, 1985.- V. 329.- I. 1.- P. 147-152.

108. CanditoAnte M. M., Sbirazzuoli K.V., Chambon P. Proposal for the standardization of the calibration method for the assay of plasma catecholamines //

109. J. Chromatogr. В: Biomedical Sciences and Applications, 1990.- V. 526.- P. 194202.

110. Tzontcheva A., Denikova N. Analytical interference of drugs on the fluorimetric determination of urinary catecholamines// Clin. Chem. Acta, 2000.- V. 297.-1. 1-2.- P. 217-223.

111. Яшин Я. И., Яшин А. Я Аналитические возможности амперометрического детектирования в ВЭЖХ// Журн. аналит. химии, 2003.Т. 58.- №7.- с.728-729.

112. Красиков В. Д. Современная планарная хроматография// Журн. аналит. химии, 2003.-Т. 58.- №8.- с.792-808.

113. Сумина Е. Г., Штыков С. Н., Тюрина Н. В. Тонкослойная хроматография. Теоретические основы и практическое применение. Учебно-методическое пособие. Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 2002.- 108 с.

114. Титов В. Н. Атеросклероз — патология полиеновых жирных кислот (обзор литературы)// Клин. лаб. диагностика, 2001.- №1. С 3-10.

115. Storch M.-J., Konig D., Biiltermann D., Blum A., Vogt S., Baumstark M., Berg A., Schmid A. Lipid profile in spinal cord-injured women with different injury levels// Preventive Medicine, 2005.- V. 40,- I. 3.- P. 321-325.

116. С. Гланц. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М.: Практика, 1998.-459 с.

117. Лифшиц В.М., В.И.Сидельникова. Медицинские лабораторные анализы. 2-е изд., исправ. и доп.- М.: Триада-Х, 2003.- 312 с.

118. Mo Y., Dobberpuhl D., Dash А.К. A simple HPLC method for the analysis of creatine //J. Pharm. and Biomed. Anal, 2003. Vol. 32. - N 1. - 125-132.

119. Zuojun S., Zimin S., Lin W., Kui W., Siqin S., Zunbo H. Rapid method for the determination of creatine in serum by capillary electrophoresis// J. Chromatogr. A, 2002. Vol. 979. - N 1-2. - 227-232.

120. Ефимов А.С., Черепанов Д.С. Ферментные электроды для анализа метаболитов// Вопр. мед. химии, 1992.- №5.- с.16-18.

121. Khalil A., El-Sayed K., Belal F., Khalil N.Y., Hamann M. Spectrophotometric determination of phosphorus in spiked human urine and plasma// Pharmazie, 2003. -Vol. 58.-N6. -385-388.

122. Jong Y.J., Hsu H.O., Wu H.L., Kou H.S., Wu S.M. Analysis of phosphorus and calcium in human plasma by spectrophotometry// Anal. chem. Acta, 2003. -Vol. 488. N 2. - 223-230

123. Misztal G., Skibinski R., Olajossy M., Paw B. Spectrophotometric determination of phosphorus in plasma // J. Pharm. and Biomed. Anal., 2002. -Vol. 30.-N4.- 1277-1285.

124. Гурьев И.А., Калугин А.А., Абражеев Р.В., Нипрук О.В., Егорова О.А. Фотометрическое определение малых количеств урана, фосфора, мышьяка в насыщенных водных растворах малорастворимых соединений// Журн. аналит. химии, 2000.-Т.55.- №10.- с.1060-1064.

125. Yamada Hiroyuki, Yoshizawa Katsuyoshi, Hayase Tetsuo. Sensitive determination method of alkaline phosphatase in plasma// J. Pharm. and Biomed. Anal., 2002. Vol. 775. - N 2. - 209-213.

126. Левченко Л.В. Фотометрическое определение щелочной фосфатазы в сыворотке крови// Клин. лаб. диагностика, 1993.- №8.- с.26-28.

127. Атякшева Л.Ф., Чухрай Е.С., Полторак О.М., Козленков А.А., Вознесенская В.В., Вайсоки Ч.Д. Влияние андростенона на щелочную фосфатазу, иммобилизованную на природных носителях// Журн. физ. химии , 1999. Т. 73. - N 5. - с. 915-917.

128. Атякшева Л.Ф., Чухрай Е.С., Полторак О.М. Ассоциация щелочной фосфатазы из Е. coli в растворе// Журн. физ. химии, 1998. Т. 72. - N 8. -1490-1492.

129. Чухрай Е.С., Атякшева Л.Ф., Полторак О.М., Козленков А. А., Вознесенская В.В., Вайсоки Ч.Д. Адсорбционные и каталитические свойства щелочной фосфатазы на обонятельном эпителии// Журн. физ. химии, 1999. -Т. 73.-N4.- с.739-742.

130. Полторак О.М., Чухрай Е.С., Торшин И.Ю., Наккар С., Веселова М.Н. Стабилизация щелочной фосфатазы ионами магния// Вестник МГУ, 1998. Т. 39. - N 4. - с.233-235.

131. Wolfert Robert L., Hill Craig S. Assay for bone alkaline phosphatase// Anal, chem. Acta, 2002. Vol. 388. - N 2. - 124-128.

132. Lendl В., Krieg P., Kellner R. Determination of alkaline phosphatase activity in human sera by mid-FTIR spectroscopy // J. Anal. Chem., 1998. Vol. 360. - N 6.-P. 717-720.

133. De Silva Renuka, Akhavan-Tafti H., Eickholt R.A., Lauwers K., Chrovian C., Handley R.S., Schaap A.P. Novel red chemiluminescent substrates for alkaline phosphatase// Luminescence, 2000. Vol. 15. - N 4. - 205-206.

134. Атякшева Л.Ф., Чухрай E.C., Полторак О.М. Стабильность щелочной фосфатазы из Е. coli // Журн. физ. химии, 2001. Т. 75. - N 2. - 369-371.

135. Fenoll J., Jourquin G., Kauffmann J. M. Fluorimetric determination of alkaline phosphatase in solid and fluid dairy products// Talanta, 2002. Vol. 56. -N6.- 1021-1026.

136. Wibawa J.I.D., Fowkes D., Shaw P.N., Barrett D.A. Measurement of alkaline phosphatase in plasma and gastric samples using high-performance liquidchromatography with fluorimetric detection// J Chromatgr. B, 2002. Vol. 774. - N 2.-141-148.

137. Перелыгин В.М., Подгорнова Н.М., Сорокина Ю.Н. К вопросу об определении кальция // Мат. 41 Отчетной науч. конф. за 2002 год, Воронеж, 2002 Воронеж: ВГТА, 2003. - Ч. 1 - с. 24-26

138. Синяев В.А., Григгс Дж., Левченко Л.В., Шустикова Е.С. Фосфаты кальция для медицины// Тез. Докл. 17 Менделеевский съезда по общей и прикладной химии, Казань, 21-26 сент., 2003. Казань: Центр операт. печ., 2003.-с. 298.

139. Suzuki Kazuo Т., Mandal Badal К., Ogra Yasumitsu. Speciation of calcium in body fluids// Talanta, 2002. Vol. 58. - N 1. - 111-119.

140. Слепченко Г.Б., Дубова Н.М. Применение метода амперометрического титрования для определения кальция в пищевых продуктах и биологических материалах // Завод, лаб.: Диагност, матер., 2003. Т. 69. - N 7. - с. 18-20.

141. Л Xueping, Ren Jujie. Determination of calcium and zinc in serum by a new method// Analyst, 2002. Vol. 127. - N 3. - 416-419.

142. Сапельникова C.B., Кручкова E.C., Кудашева Ф.Х., Бердникова И.В., Боголюк Г.Б., Пухова В.М., Нафикова С.Х. Фотометрическое определениекальция в сыворотке крови реагентами арсеназо-I и арсеназо-П .- Уфа: Гилем, 2003.-с. 61-62.

143. Dash Alekha К., Sawhney Angeli. A simple method for the analysis of creatine, calcium and creatinine // J. Pharm. and Biomed. Anal., 2002. Vol. 29. -N5.-p. 939-945.

144. Motellier S., Petit S., Decambox P. Quantitative capillary electrophoretic analysis for calcium and magnesium in sodium-matrix waters // Anal. chem. Acta, 2000,-Vol. 410.-N 1-2.-p. 11-23.

145. Mo Y., Dobberpuhl D., Dash Alekha K. A simple method for the analysis of calcium and creatine// J. Pharm. and Biomed. Anal., 2003. Vol. 32. - N 1. - p. 125-132.

146. Kargosha K., Sarrafi Amir H.M Simultaneous spectrophotometric determination of calcium and magnesium in dialysis fluids using multivariate calibration methods//Anal. Lett, 2001. Vol. 34. - N 10.-p. 1781-1793.

147. Ekinci N., Sahin Y. Determination of calcium and iodine in gall bladder stone using energy dispersive X-ray fluorescence spectrometry// Spectrochim. acta. B, 2002.-Vol. 57. -N l.-p. 167-171.

148. Werner Т., Kurner J. M., Krause C., Wolfbeis O. S. New longwave absorbing chromogenic for calcium determination in aqueous environment// Anal. chem. acta 2000. - Vol. 421. - N 2. - p. 199-205.

149. Brodkin С.A., Moon J.-D., Camp J., Echeveriia D., Redlich C.A., Willson R.A., Checkoway H. Serum biochemical activity in two populations of workers exposed to styrene//Anal. chem. acta, 2001. Vol. 458. - N 2. - p. 95-102.

150. Martin S.P., Lamb D.J., Lynch J.M., Reddy S.M. Enzyme-based determination of cholesterol using the quartz crystal acoustic wave sensor // Anal, chem. acta 2003. - Vol. 487. - N 1. - p. 91-100.

151. Тогузов Р.Т., Яшин Я.И., Яшин А.Я., Лапин Б.П., Гугля Е.Б., Тихонов Ю.В. Биомаркеры заболеваний человека как проблема аналитической химии// Тез. Докл. Всерос. симп. "Хроматография и хроматографические приборы», 2004: Сборник тезисов М., 2004. - с. 72.

152. Лапшина А.С., Королева Е.М. Определение катехоламинов и винилилминдальной кислоты в моче методом ВЭЖХ с флуориметрическим детектором// Тез. Докл. Всерос. симп. "Хроматография и хроматографические приборы», 2004: Сборник тезисов М., 2004. - с. 253.

153. Gyurcsanyi R. Е., Bereczki A., Nagy G., Neuman М. R., Lindner Е. Amperometric microcells for alkaline phosphatase assay// Analyst 2002. - Vol. 127.-N2.-235-240.

154. ГОСТ 8.315-97 «Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов».- М.: ИПК Издательство стандартов, 1997.

155. Дворкин В.И. Метрология и обеспечение качества количественного химического анализа. М.: Химия, 2001,- 263 с.

156. Шаевич А.Б. Стандартные образцы для аналитических целей.- М.: Химия, 1987.- 184 с.

157. Гаранина Е.Н. Качество лабораторного анализа.- М.: Лабинформ, 1997.192 с.

158. Липперт Г. Международная система единиц в медицине.- М.: Медицина, 1980.- 208 с.

159. Управление качеством клинических лабораторных исследований/ Под ред. В.В. Меньшикова.- М.: Лабпресс, 2000.- 152 с.

160. МИ 2552-99 Рекомендация. Государственная система обеспечения единства измерений. Применение Руководства по выражению неопределенности измерений.- М., 1999.

161. Дерффель К. Статистика в аналитической химии. Пер с нем.- М: Мир, 1994.-268 с.

162. МИ 2336-95 «Характеристика погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания». Екатеринбург, 1995.

163. Чарыков А.К. Математическая обработка результатов химического анализа. JL: Химия, 1984.- с.ЗЗ.

164. Мердок Дж. Контрольные карты. М.: Финансы и статистика, 1986.- 150 с.

165. ЖХ жидкостная хроматография

166. ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография

167. ТСХ тонкослойная хроматография1. МЭ метиловые эфиры1. Кл колонка1. НФ неподвижная фаза1. ПФ подвижная фаза

168. ПИД пламенно-инизационный детектор1. ВС внутренний стандарт

169. Т кл ~ температура колонки

170. Т исп температура испарителя

171. Т дет температура детектора1. А адреналин1. НА норадреналин1. ДА дофамин

172. ДГБА дигидроксибензиламин ЭДТА - этилендиаминтетраацетат СЖК - свободные жирные кислоты бенз. - бензолац. ацетонлед. уксус, к-та ледяная уксусная кислота эф. — эфирх.р. хорошо растворимум.р. умеренно растворимн.р. нерастворимоб./мин — обороты в минуту

173. ИБС ишемическая болезнь сердца1. AJIAT аланинтрасфераза1. АСАТ аспартаттрансфераза1. УТВЕЖДАЮ

174. Проректор по НИР Самарского государственного университета1. Ю.Н. Горелов200£г.твенного рситета1. В.В.Косарев/// 2005г.1. М.П.1. АКТо внедрении методики "Определение катехоламинов в плазме крови методом ВЭЖХ"

175. Настоящий акт составлен о том, что на кафедре эндокринологии Самарского государственного медицинского университета с 01.03.2005 г. проведено внедрение методики № 17/05 "Определения катехоламинов в плазме крови методом ВЭЖХ".

176. Данная методика разработана профессором СамГУ Лобачевым А.Л. и спе- . циалистом клинической лабораторной диагностики/аспирантом Колосковой С.В.

177. Авторы: Заведующий кафедройэндокринологии СамГМУ д.м.н., профессор

178. Лобачев А.Л. /X^tW ■ Вербовая Н.И.1. УТВЕЖДАЮ

179. Проректор по НИР Самарского государственного1. Ю.Н. Горелов200&Г.1. Мр. В.Косареварственного |верситета2005г.1. М.П.1. АКТо внедрении методики "Определение высших жирных кислот методом газовой хроматографии"

180. Настоящий акт составлен о том, что на кафедре эндокринологии Самарского государственного медицинского университета с 12.01.2005 г. проведено внедрение методики № 14/05 «Определение высших жирных кислот методом газовой хроматографии».

181. Данная методика разработана профессором СамГУ Лобачевым А.Л. и специалистом клинической лабораторной диагностики/аспирантом Колосковой С.В.

182. Авторы: Заведующий кафедройэндокринологии СамГМУ д.м.н., профессор1. Лобачев А.Л.1. Вербовая Н.И.с/1. УТВЕЖДАЮ

183. Проректор по НИР Самарского государственного университете1. Ю.Н. Горелов 2006г.1. ООО «Центр «Диабет»1. Н.И. Вербовая 2005г.1. АКТо внедрении методики "Определение холестерина в плазме крови методом ВЭЖХ"

184. Настоящий акт составлен о том, что в ООО «Центр «Диабет» с 12.05.2004 г. проведено внедрение методики № МИ-003-04 "Определения холестерина в плазме крови методом ВЭЖХ".

185. Данная методика разработана профессором СамГУ Лобачевым А.Л. и специалистом клинической лабораторной диагностики/аспирантом Колосковой С.В.

186. Авторы: у. Медицинский директор

187. Лобачев А.Л. //W^- Антонова М.В.

188. Колоскова С.В. /Ul-ttiZe&j1. УТВЕЖДАЮ

189. Проректор по НИР Самарского государственного университета1. Ю.Н. Горелов2006г.1. ООО «Центр «Диабет»1. И. Вербовая 2005г.1. АКТо внедрении методики "Определение катехоламинов в плазме крови методом ВЭЖХ"

190. Настоящий акт составлен о том, что в ООО «Центр «Диабет» с 06.02.2004 г. проведено внедрение методики №. МИ-001-04 "Определения катехоламинов в плазме крови методом ВЭЖХ".

191. Данная методика разработана профессором СамГУ Лобачевым А.Л. и специалистом клинической лабораторной диагностики/аспирантом Колосковой С.В.

192. Авторы: Медицинский директор

193. Лобачев А.Л. l/W\) v Антонова М.В.1. УТВЕЖДАЮ

194. Проректор по НИР Самарского государственного университетаШ1. Ю.Н. Горелов1. ООО «Центр «Диабет»1. И. Вербоваяi>/ \1. Ж/л. Аг/2005г.I1. АКТо внедрении методики "Использование совокупности аналитических параметров для решения диагностических задач"

195. Настоящий акт составлен о том, что в ООО «Центр «Диабет» с 01.02.2005 г. проведено внедрение методики № МИ-001-05 "Использование совокупности аналитических параметров для решения диагностических задач".

196. Данная методика разработана профессором СамГУ Лобачевым А.Л. и специалистом клинической лабораторной диагностики/аспирантом Колосковой С.В.

197. Авторы: jT/1 Медицинский директор

198. Лобачев А.Л. l/^Hj Антонова М.В.1. УТВЕЖДАЮ

199. Проректор по НИР Самарского государственного университета1. Ю.Н. Горелов2005 г.