Определение гена полифункционального пептида гуманина и белков, физически взаимодействующих с ним тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат биологических наук Максимов, Вадим Владимирович

• Максимов, Вадим Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Максимов, Вадим Владимирович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Митохондрии и рак. Эффект Отто Варбурга и гипотеза Отто Варбурга об этиологии рака: современный взгляд

1.2 Длинные некодирующие РНК и онкогенез

1.2.1 Доказательства существования большого класса генов, кодирующих длинные некодирующие РНК

1.2.2 Длинные некодирующие РНК в онкогенезе

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Рекомбинантные конструкты

2.2 Культивирование кишечной палочки Е. coli

2.3 Культивирование дрожжей

2.4 Культивирование клеток млекопитающих

2.5 Иммунопреципитация и Вестерн-блот

2.6 Выделение тотальной клеточной РНК и нозерн-блот

2.7 Биоинформационные методы

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1 Биоинформационный анализ митохондриального гена, кодирующего 16S рРНК человека, на наличие открытых рамок (ОРС)

3.2 Идентификация белков, физически взаимодействующих с гуманином, методом дрожжевого двухгибридного скрининга

3.3 Подтверждение физического взаимодействия гуманина с фосфобелком М-фазы 8 (ФБМФ8) методом ко-иммунопреципитации сверхэкспрессированных белков из клеток млекопитающих и картирование участков гуманина и ФБМФ8, отвечающих за это взаимодействие

3.4 Аминокислотная последовательность гуманина и/или нуклеотидная последовательность его ОРС содержат сигнал, значительно уменьшающий экспрессию на уровне белка, но не РНК

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1 Человеческая митохондриальная 168 рибосомальная РНК как пример длиной «некодирующей» РНК, которая кодирует, как минимум, один пептид

4.2 Физические взаимодействия гуманина со многими белками могут быть необходимы для осуществления его разнообразных биологических функций

4.3 Физическое взаимодействие гуманина с ФБМФ8 может вовлекать гуманин в метастазирование и эпигеномную регуляцию экспрессии генов

4.4 Регулирование экспрессии гуманина и гены, осуществляющие это регулирование, могут быть вовлечены в канцерогенез

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ!

ПРИЛОЖЕНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.

168 рРНК - 16Э рибосомальная РНК

АТФ - аденозинтрифосфат

БСА - бычий сыворочный альбумин

БТШ90АА1 - белок теплового шока, 90 кДа, А1, альфа

ГМН - гуманин

ГМНА - мутант гуманина с заменой 8-ого цистеина на аланин ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ДКВКЛ - диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома ДСД - ДНК-связывающий домен

кДНК - комплементарная дезоксирибонуклеиновая кислота

мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота

МФЭТТз - митохондриальный фактор элонгации трансляции Тб

ОРС - открытая рамка считывания

ПРДКС1 - пероксиредоксин

ПСМА5 - субъединица протеасомы, тип альфа,

ПФА1 - неорганическая пирофосфатаза

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РНК - рибонуклеиновая кислота

ТАД - транс-активирующий транскрипцию домен

уЗФБ - зелёный флуоресцентный белок с увеличеной флуоресценцией ФБМФ8 - фосфобелок М-фазы

ЭФЭТ1А1 - эукарнотнческий фактор элонгации трансляции 1 альфа

AGO - argonaute protein

ANK - ankyrin repeats

BAX - BCL2-associated X protein

BID - BH3-interacting protein

BimEL - BCL2-interacting protein, extra-long

Cav-1 - caveolin

CD11С - cluster of differentiation 11С CDC42 - cell division cycle

CDRlas - antisense to the cerebellar degeneration-related protein 1 transcript

CHROMO - chromodomain

CoREST - rest corepressor

DUSP1 - dual specificity protein phosphatase

Ezh2 - enhancer of zeste, drosophila, homolog

FH - fumarate hydratase

FPRL1 — G protein-coupled formylpeptide receptor-like 1 FPRL2 - G protein-coupled formylpeptide receptor-like 2 Gal - galactose

Glue - glucose

H3K4me3 - триметилирование 4-ого лизина гистона НЗ

НЗКЗбшеЗ - триметилирование 36-ого лизина гистона НЗ

HIF-1 а - hypoxia-inducible factor 1, alpha subunit

HNIP - humanin-interacting protein

HOT AIR - HOX transcript antisense intergenic RNA

HOXC - homeobox С

HOXD - homeobox D

FBS - fetal bovine serum

IDH1 - isocitrate dehydrogenase

IDH2 - isocitrate dehydrogenase

IGFBP3 - insulin-like growth factor-binding protein

LET - low expression in tumor

MALAT1 - metastasis associated in lung adenocarcinoma transcript

NF90 - nuclear factor of activated T cells, 90-kD

NFkB - nuclear factor kappa В

Oct4 - octamer-binding transcription factor

PBS - Phosphate Buffered Saline

PRC2 - polycomb group repression complex

Рахб - paired box gene

Raff - raffinose

RhoA - Ras homolog family member A

SDHD - succinate dehydrogenase complex, subunit D

Suzl2 - Suppressor of zeste

Tlr4 - toll-like receptor

TRIM11 - tripartite motif protein

VSTM2L - V-set and transmembrane domain containing 2 like protein XIST - X-inactive specific transcript

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Определение гена полифункционального пептида гуманина и белков, физически взаимодействующих с ним»

ВВЕДЕНИЕ.

Диагноз диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома (ДКВКЛ) ставится в 30% всех случаев не-Ходжкинских лимфом (Blood 1997; V. 89(11): pp. 3909-3918). Эта агрессивная лимфома остается смертельной для 30% всех пациентов и 45% пациентов с наиболее неблагоприятным прогнозом (Sehn L.H. et al., 2007). Таким образом, разработка более эффективных методов лечения этого заболевания по-прежнему актуально. Рациональный подход к поиску эффективной терапии для ДКВКЛ требует понимания механизмов патогенеза для этого типа лимфомы. Несмотря на значительные успехи, достигнутые за последние три десятилетия, наши знания о молекулярных и клеточных механизмах этого заболевания всё ещё фрагментарны и далеко не полны.

Одним из этапов в изучении этих механизмов было определение изменений экспрессии генов в ДКВКЛ по сравнению с В-лимфоцитами здорового человека. В нашей лаборатории для достижения этой цели был успешно использован метод вычитающей гибридизации. В результате этих исследований удалось идентифицировать ряд генов с изменённой экспрессией в ДКВКЛ (Николаев А.И. и др., 1999; Tarantul V.Z. et al., 2000; Tarantul V. et al., 2001; Николаев А.И. и др., 2001; Nenasheva V.V. et al., 2005). Полиаденилированные транскрипты митохондриального гена 16S рибосомальной РНК (рРНК) были среди генов, сверхэкспрессированных в ДКВКЛ (Tarantul V. et al., 2001; Nenasheva V.V. et al., 2005). Значение сверхэкспрессии этих транскриптов в лимфомогенезе не было исследовано и, следовательно, изучение этого явления могло осветить неизвестные раннее механизмы лимфомогенеза.

Целью настоящей работы является установление, кодирует ли

митохондриальный ген 16S рРНК какие-либо биологически-активные белки

или пептиды и, если таковые имеются, исследование механизмов их

9

биологической активности. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Используя биоинформационный подход определить, способны ли полиаденилированные транскрипты человеческого митохондриального гена 168 рРНК кодировать экспрессирующиеся белки или пептиды.

2. При наличии таких белков или пептидов, найти с помощью дрожжевого двухгибридного скрининга белки, взаимодействующие с ними физически, что может прояснить молекулярные механизмы, посредством которых сверхэкспрессия полиаденилированных транскриптов гена 168 рРНК связана с процессом лимфомогенеза.

3. Для взаимодействий, потенциально важных для лимфомогенеза, определить участки белков и/или пептидов, отвечающие за эти взаимодействия, посредством ко-иммунопреципитации. Решение этой задачи способствует дальнейшему изучению функционального значения таких взаимодействий для лимфомогенеза и поиску путей к терапии этого злокачественного заболевания.

Все эксперименты были выполнены автором самостоятельно или в сотрудничестве с другими сотрудниками Института молекулярной генетики.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Максимов, Вадим Владимирович

ВЫВОДЫ.

1. С помощью биоинформационного анализа установлено, что в митохондриальном гене 16Б рРНК человека присутствует 7 ОРС размером более 50 нуклеотидов (согласно митохондриальному генетическому коду трансляции) и 4 ОРС размером более 50 нуклеотидов (согласно стандартному генетическому коду трансляции). Одна из этих ОРС кодирует ранее описанный пептид гуманин (24 а.о.), природа кодирующей области которого до нашего исследования оставалась неизвестной.

2. Методом дрожжевого двухгибридного скрининга обнаружено 7 белков, физически взаимодействующих с гуманином: протеасомная субъедининца а5 (ПСМА5); белок теплового шока, 90 кДа, а, класс А, член 1 (БТШ90АА1); неорганическая пирофосфатаза 1 (ПФА1); пероксиредоксин 1 (ПРДКС1); фосфобелок М-фазы 8 (ФБМФ8); эукариотический фактор элонгации трансляции 1, а-1 (ЭФЭТ1А1) и митохондриальный фактор элонгации трансляции Тб (МФЭТТБ).

3. Физическое взаимодействие фосфобелка М-фазы 8 (ФБМФ8) с пептидом гуманином было подтверждено методом ко-иммунопреципитации сверхэкспрессированных ФБМФ8 с гуманином из культур клеток млекопитающих.

4. Методом ко-иммунопреципитации с использованием делеционных мутантов гуманина и ФБМФ8 определено, что за их взаимодействие отвечают участок ФБМФ8 с 431 по 560 а.о. и участок гуманина с 5 по 12 а.о.

5. Аминокислотная последовательность гуманина и/или нуклеотидная последовательность его ОРС несут сигнал, значительно понижающий экспрессию на уровне белка, но не РНК.

6. Совокупность имеющихся данных по повышенной экспрессии мРНК гуманина в раковых клетках, его физическом взаимодействии с ФБМФ8, который участвует в метастазировании, и наличии у гуманина антиапоптотического действия позволяют предположить, что этот пептид обладает онкогенным потенциалом.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Максимов, Вадим Владимирович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.

1. A clinical evaluation of the International Lymphoma Study Group classification of non-Hodgkin's lymphoma. The Non-Hodgkin's Lymphoma Classification Project. Blood 1997; V. 89(11): pp. 3909-3918.

2. Sehn L.H., Berry В., Chhanabhai M., Fitzgerald C., Gill K., Hoskins P., Klasa R., Savage K.J., Shenkier Т., Sutherland J., Gascoyne R.D., Connors J.M. The revised International Prognostic Index (R-IPI) is a better predictor of outcome than the standard IPI for patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with R-CHOP. Blood 2007; V. 109(5): pp. 1857-1861.

3. Николаев A.M., Бодемер В., Калмырзаев Б.Б., Хунсманн Г., Дубовая В.И., Мухоян И.А., Ненашева В.В., Хённиг X., Тарантул В.З. Анализ лимфомоспецифических транскриптов в В-клеточных Неходжкинских лимфомах больных, инфицированных вирусом иммунодефицита человека типа 1. Молекулярная биология, 1999; Т. 33(2): стр. 252-260.

4. Tarantul V.Z., Nikolaev A.I., Martynenko A., Hannig Н., Hunsmann G., Bodemer W. Differential gene expression in B-cell non-Hodgkin's lymphoma of SIV-infected monkey. AIDS Res Hum Retroviruses. 2000; V. 16(2): pp. 173-179.

5. Tarantul V., Nikolaev A., Hannig H., Kalmyrzaev В., Muchoyan I., Maximov V., Nenasheva V., Dubovaya V., Hunsmann G., Bodemer W. Detection of abundantly transcribed genes and gene translocation in human immunodeficiency virus-associated non-Hodgkin's lymphoma. Neoplasia. 2001; V. 3(2): pp. 132-142.

6. Николаев A.M., Максимов B.B., Ненашева B.B., Тарантул В.З. Сравнительный анализ уровней транскрипции генов в двух типах ВИЧ-ассоциированных лимфом. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология, 2001; (4): стр. 27-31.

7. Nenasheva V.V., Nikolaev A.I., Martynenko A.V., Kaplanskaya I.B., Bodemer W., Hunsmann G., Tarantul V.Z. Differential gene expression in HIV/SIV-associated and spontaneous lymphomas. Int J Med Sci. 2005; V. 2(4): pp. 122-128.

8. Warburg O. On the origin of cancer cells. Science. 1956; V. 123(3191): pp. 309-314.

9. Benard G., Rossignol R. Ultrastructure of the mitochondrion and its bearing on function and bioenergetics. Antioxid Redox Signal. 2008; V. 10(8): pp. 1313-1342.

10.Fearon K.C., Plumb J. A., Burns H.J., Calman K.C. Reduction of the growth rate of the Walker 256 tumor in rats by rhodamine 6G together with hypoglycemia. Cancer Res. 1987; V. 47(14): pp. 3684-3687.

11.Moreno-Sánchez R., Rodríguez-Enríquez S., Marín-Hernández A., Saavedra E. Energy metabolism in tumor cells. FEBS J. 2007; V. 274(6): pp. 13931418.

12.Baysal B.E., Ferrell R.E., Willett-Brozick J.E., Lawrence E.C., Myssiorek D., Bosch A., van der Mey A., Taschner P.E., Rubinstein W.S., Myers E.N., Richard C.W. 3rd, Cornelisse C.J., Devilee P., Devlin B. Mutations in SDHD, a mitochondrial complex II gene, in hereditary paraganglioma. Science. 2000; V. 287(5454): pp. 848-851.

13.Tomlinson I.P., Alam N.A., Rowan A.J., Barclay E., Jaeger E.E., Kelsell D., Leigh I., Gorman P., Lamlum H., Rahman S., Rovlance R.R., Olpin S., Bevan S., Barker K., Hearle N., Houlston R.S., Kiuru M., Lehtonen R., Karhu A., Vilkki S., Laiho P., Eklund C., Vierimaa O., Aittomàki K., Hietala M., Sistonen P., Paetau A., Salovaara R., Herva R., Launonen V., Aaltonen L.A.; Multiple Leiomyoma Consortium. Germline mutations in FH predispose to dominantly inherited uterine fibroids, skin leiomyomata and papillary renal cell cancer. Nat Genet. 2002; V. 30(4): pp. 406-410.

14. Wallace D.C. A mitochondrial bioenergetic etiology of disease. J Clin Invest. 2013; V. 123(4): pp. 1405-1412.

15.Raimundo N., Baysal B.E., Shadel G.S. Revisiting the TCA cycle: signaling to tumor formation. Trends Mol Med. 2011; V. 17(11): pp. 641-649.

16.Parsons D.W., Jones S., Zhang X., Lin J.C., Leary R.J., Angenendt P., Mankoo P., Carter H., Siu I.M., Gallia G.L., Olivi A., McLendon R., Rasheed B.A., Keir S., Nikolskaya T., Nikolsky Y., Busam D.A., Tekleab

H., Diaz L.A. Jr., Hartigan J., Smith D.R., Strausberg R.L., Marie S.K., Shinjo S.M., Yan H., Riggins G.J., Bigner D.D., Karchin R., Papadopoulos N., Parmigiani G., Vogelstein B., Velculescu V.E., Kinzler K.W. An integrated genomic analysis of human glioblastoma multiforme. Science. 2008; V. 321(5897): pp. 1807-1812.

17.Balss J., Meyer J., Mueller W., Korshunov A., Hartmann C., von Deimling A. Analysis of the IDH1 codon 132 mutation in brain tumors. Acta Neuropathol. 2008; V. 116(6): pp. 597-602.

18.Bleeker F.E., Lamba S., Leenstra S., Troost D., Hulsebos T., Vandertop W.P., Frattini M., Molinari F., Knowles M., Cerrato A., Rodolfo M., Scarpa A., Felicioni L., Buttitta F., Malatesta S., Marchetti A., Bardelli A. IDH1 mutations at residue p.R132 (IDH1(R132)) occur frequently in high-grade gliomas but not in other solid tumors. Hum Mutat. 2009; V. 30(1): pp. 7-11.

19.Yan H., Parsons D.W., Jin G., McLendon R., Rasheed B.A., Yuan W., Kos

I., Batinic-Haberle I., Jones S., Riggins G.J., Friedman H., Friedman A., Reardon D., Herndon J., Kinzler K.W., Velculescu V.E., Vogelstein B., Bigner D.D. IDH1 and IDH2 mutations in gliomas. N Engl J Med. 2009(a); V. 360(8): pp. 765-773.

20.Mardis E.R., Ding L., Dooling D.J., Larson D.E., McLellan M.D., Chen K., Koboldt D.C., Fulton R.S., Delehaunty K.D., McGrath S.D., Fulton L.A., Locke D.P., Magrini V.J., Abbott R.M., Vickery T.L., Reed J.S., Robinson J.S., Wylie T., Smith S.M., Carmichael L., Eldred J.M., Harris C.C., Walker

J., Peck J.B., Du F., Dukes A.F., Sanderson G.E., Brummett A.M., Clark E., McMichael J.F., Meyer R.J., Schindler J.K., Pohl C.S., Wallis J.W., Shi X., Lin L., Schmidt H., Tang Y., Haipek C., Wiechert M.E., Ivy J.V., Kalicki J., Elliott G., Ries R.E., Payton J.E., Westervelt P., Tomasson M.H., Watson M.A., Baty J., Heath S., Shannon W.D., Nagarajan R., Link D.C., Walter M.J., Graubert T.A., DiPersio J.F., Wilson R.K., Ley T.J. Recurring mutations found by sequencing an acute myeloid leukemia genome. N Engl J Med. 2009; V. 361(11): pp. 1058-1066.

21 .Hartmann C., Meyer J., Balss J., Capper D., Mueller W., Christians A., Felsberg J., Wolter M., Mawrin C., Wick W., Weiler M., Herold-Mende C., Unterberg A., Jeuken J.W., Wesseling P., Reifenberger G., von Deimling A. Type and frequency of IDH1 and IDH2 mutations are related to astrocytic and oligodendroglial differentiation and age: a study of 1,010 diffuse gliomas. Acta Neuropathol. 2009; V. 118(4): pp. 469-474.

22.Yan H., Bigner D.D., Velculescu V., Parsons D.W. Mutant metabolic enzymes are at the origin of gliomas. Cancer Res. 2009(b); V. 69(24): pp. 9157-9159.

23.Gravendeel L.A., Kloosterhof N.K., Bralten L.B., van Marion R., Dubbink H.J., Dinjens W., Bleeker F.E., Hoogenraad C.C., Michiels E., Kros J.M., van den Bent M., Smitt P.A., French P.J. Segregation of non-p.R132H mutations in IDH1 in distinct molecular subtypes of glioma. Hum Mutat. 2010; V. 31(3): El 186-1199.

24. Ward P.S., Patel J., Wise D.R., Abdel-Wahab O., Bennett B.D., Coller H.A., Cross J.R., Fantin V.R., Hedvat C.V., Perl A.E., Rabinowitz J.D., Carroll M., Su S.M., Sharp K.A., Levine R.L., Thompson C.B. The common feature of leukemia-associated IDH1 and IDH2 mutations is a neomorphie enzyme activity converting alpha-ketoglutarate to 2-hydroxyglutarate. Cancer Cell. 2010; V. 17(3): pp. 225-234.

25.Marcucci G., Maharry K., Wu Y.Z., Radmacher M.D., Mrozek K., Margeson D., Holland K.B., Whitman S.P., Becker H., Schwind S., Metzeler K.H., Powell B.L., Carter T.H., Kolitz J.E., Wetzler M., Carroll A.J., Baer M.R., Caligiuri M.A., Larson R.A., Bloomfield C.D. IDH1 and IDH2 gene mutations identify novel molecular subsets within de novo cytogenetically normal acute myeloid leukemia: a Cancer and Leukemia Group B study. J Clin Oncol. 2010; V. 28(14): pp. 2348-2355.

26.Lopez G.Y., Reitman Z.J., Solomon D., Waldman T., Bigner D.D., McLendon R.E., Rosenberg S.A., Samuels Y., Yan H. IDH1(R132) mutation identified in one human melanoma metastasis, but not correlated with metastases to the brain. Biochem Biophys Res Commun. 2010; V. 398(3): pp. 585-587.

27.Paschka P., Schlenk R.F., Gaidzik V.I., Habdank M., Kronke J., Bullinger L., Spath D., Kayser S., Zucknick M., Gotze K., Horst H.A., Germing U., Dohner H., Dohner K. IDH1 and IDH2 mutations are frequent genetic alterations in acute myeloid leukemia and confer adverse prognosis in cytogenetically normal acute myeloid leukemia with NPM1 mutation without FLT3 internal tandem duplication. J Clin Oncol. 2010; V. 28(22): pp. 3636-3643.

28.Amary M.F., Bacsi K., Maggiani F., Damato S., Halai D., Berisha F., Pollock R., O'Donnell P., Grigoriadis A., Diss T., Eskandarpour M., Presneau N., Hogendoorn P.C., Futreal A., Tirabosco R., Flanagan A.M. IDH1 and IDH2 mutations are frequent events in central chondrosarcoma and central and periosteal chondromas but not in other mesenchymal tumours. J Pathol. 2011; V. 224(3): pp. 334-343.

29.Pansuriya T.C., van Eijk R., d'Adamo P., van Ruler M.A., Kuijjer M.L., Oosting J., Cleton-Jansen A.M., van Oosterwijk J.G., Verbeke S.L., Meijer D., van Wezel T., Nord K.H., Sangiorgi L., Toker B., Liegl-Atzwanger B., San-Julian M., Sciot R., Limaye N., Kindblom L.G., Daugaard S., Godfraind

C., Boon L.M., Vikkula M., Kurek K.C., Szuhai K., French P.J., Bovée J.V. Somatic mosaic IDH1 and IDH2 mutations are associated with enchondroma and spindle cell hemangioma in Oilier disease and Maffucci syndrome. Nat Genet. 2011; V. 43(12): pp. 1256-1261.

30.Borger D.R., Tanabe K.K., Fan K.C., Lopez H.U., Fantin V.R., Straley K.S., Schenkein D.P., Hezel A.F., Ancukiewicz M., Liebman H.M., Kwak E.L., Clark J.W., Ryan D.P., Deshpande V., Dias-Santagata D., Ellisen L.W., Zhu A.X., Iafrate A.J. Frequent mutation of isocitrate dehydrogenase (IDH)l and IDH2 in cholangiocarcinoma identified through broad-based tumor genotyping. Oncologist. 2012; V. 17(1): pp. 72-79.

31.Kipp B.R., Voss J.S., Kerr S.E., Barr Fritcher E.G., Graham R.P., Zhang L., Highsmith W.E., Zhang J., Roberts L.R., Gores G.J., Hailing K.C. Isocitrate dehydrogenase 1 and 2 mutations in cholangiocarcinoma. Hum Pathol. 2012; V. 43(10): pp. 1552-1558.

32.Dang L., White D.W., Gross S., Bennett B.D., Bittinger M.A., Driggers E.M., Fantin V.R., Jang H.G., Jin S., Keenan M.C., Marks K.M., Prins R.M., Ward P.S., Yen K.E., Liau L.M., Rabinowitz J.D., Cantley L.C., Thompson C.B., Vander Heiden M.G., Su S.M. Cancer-associated IDH1 mutations produce 2-hydroxyglutarate. Nature. 2009; V. 462(7274): pp. 739-744.

33.Turcan S., Rohle D., Goenka A., Walsh L.A., Fang F., Yilmaz E., Campos C., Fabius A.W., Lu C., Ward P.S., Thompson C.B., Kaufman A., Guryanova O., Levine R., Heguy A., Viale A., Morris L.G., Huse J.T., Mellinghoff I.K., Chan T.A. IDH1 mutation is sufficient to establish the glioma hypermethylator phenotype. Nature. 2012; V. 483(7390): pp. 479483.

34.Lu C., Ward P.S., Kapoor G.S., Rohle D., Turcan S., Abdel-Wahab O., Edwards C.R., Khanin R., Figueroa M.E., Melnick A., Wellen K.E., O'Rourke D.M., Berger S.L., Chan T.A., Levine R.L., Mellinghoff I.K.,

Thompson C.B. IDH mutation impairs histone demethylation and results in a block to cell differentiation. Nature. 2012; V. 483(7390): pp. 474-478.

35.Duncan C.G., Barwick B.G., Jin G., Rago C., Kapoor-Vazirani P., Powell D.R., Chi J.T., Bigner D.D., Vertino P.M., Yan H. A heterozygous IDH1R132H/WT mutation induces genome-wide alterations in DNA methylation. Genome Res. 2012; V. 22(12): pp. 2339-2355.

36. Wang F., Travins J., Delabarre B., Penard-Lacronique V., Schalm S., Hansen E., Straley K., Kernytsky A., Liu W., Gliser C., Yang H., Gross S., Artin E., Saada V., Mylonas E., Quivoron C., Popovici-Muller J., Saunders J.O., Salituro F.G., Yan S., Murray S., Wei W., Gao Y., Dang L., Dorsch M., Agresta S., Schenkein D.P., Biller S.A., Su S.M., de Botton S., Yen K.E. Targeted Inhibition of Mutant IDH2 in Leukemia Cells Induces Cellular Differentiation. Science. 2013 Apr 4. [Epub ahead of print]

37.Pavlides S., Whitaker-Menezes D., Castello-Cros R., Flomenberg N., Witkiewicz A.K., Frank P.G., Casimiro M.C., Wang C., Fortina P., Addya S., Pestell R.G., Martinez-Outschoorn U.E., Sotgia F., Lisanti M.P. The reverse Warburg effect: aerobic glycolysis in cancer associated fibroblasts and the tumor stroma. Cell Cycle. 2009; V. 8(23): pp. 3984-4001.

38.Witkiewicz A.K., Dasgupta A., Sotgia F., Mercier I., Pestell R.G., Sabel M., Kleer C.G., Brody J.R., Lisanti M.P. An absence of stromal caveolin-1 expression predicts early tumor recurrence and poor clinical outcome in human breast cancers. Am J Pathol. 2009; V. 174(6): pp. 2023-2034.

39.Bonuccelli G., Whitaker-Menezes D., Castello-Cros R., Pavlides S., Pestell R.G., Fatatis A., Witkiewicz A.K., Vander Heiden M.G., Migneco G., Chiavarina B., Frank P.G., Capozza F., Flomenberg N., Martinez-Outschoorn U.E., Sotgia F., Lisanti M.P. The reverse Warburg effect: glycolysis inhibitors prevent the tumor promoting effects of caveolin-1 deficient cancer associated fibroblasts. Cell Cycle. 2010(a); V. 9(10): pp. 1960-1971.

40.Migneco G., Whitaker-Menezes D., Chiavarina B., Castello-Cros R., Pavlides S., Pestell R.G., Fatatis A., Flomenberg N., Tsirigos A., Howell A., Martinez-Outschoorn U.E., Sotgia F., Lisanti M.P. Glycolytic cancer associated fibroblasts promote breast cancer tumor growth, without a measurable increase in angiogenesis: evidence for stromal-epithelial metabolic coupling. Cell Cycle. 2010; V. 9(12):pp. 2412-2422.

41.Bonuccelli G., Tsirigos A., Whitaker-Menezes D., Pavlides S., Pestell R.G., Chiavarina B., Frank P.G., Flomenberg N., Howell A., Martinez-Outschoorn U.E., Sotgia F., Lisanti M.P. Ketones and lactate "fuel" tumor growth and metastasis: Evidence that epithelial cancer cells use oxidative mitochondrial metabolism. Cell Cycle. 2010(b); V. 9(17): pp. 3506-3514.

42.Martinez-Outschoorn U.E., Prisco M., Ertel A., Tsirigos A., Lin Z., Pavlides S., Wang C., Flomenberg N., Knudsen E.S., Howell A., Pestell R.G., Sotgia F., Lisanti M.P. Ketones and lactate increase cancer cell "sternness," driving recurrence, metastasis, and poor clinical outcome in breast cancer: Achieving personalized medicine via Metabolo-Genomics. Cell Cycle. 2011; V. 10(8): pp. 1271-1286.

43.Elgar G., Vavouri T. Tuning in to the signals: noncoding sequence conservation in vertebrate genomes. Trends Genet. 2008; V. 24(7): pp. 344352.

44.Kapranov P., Willingham A.T., Gingeras T.R. Genome-wide transcription and the implications for genomic organization. Nat Rev Genet. 2007; V. 8(6): pp. 413-423.

45.Guttman M., Amit I., Garber M., French C., Lin M.F., Feldser D., Huarte M., Zuk O., Carey B.W., Cassady J.P., Cabili M.N., Jaenisch R., Mikkelsen T.S., Jacks T., Hacohen N., Bernstein B.E., Kellis M., Regev A., Rinn J.L., Lander E.S. Chromatin signature reveals over a thousand highly conserved large non-coding RNAs in mammals. Nature. 2009; V. 458(7235): pp. 223227.

46.Khalil A.M., Guttman M., Huarte M., Garber M., Raj A., Rivea Morales D., Thomas K., Presser A., Bernstein B.E., van Oudenaarden A., Regev A., Lander E.S., Rinn J.L. Many human large intergenic noncoding RNAs associate with chromatin-modifying complexes and affect gene expression. Proc Natl Acad Sci USA. 2009; V. 106(28): pp. 11667-11672.

47.Jia H., Osak M., Bogu G.K., Stanton L.W., Johnson R., Lipovich L. Genome-wide computational identification and manual annotation of human long noncoding RNA genes. RNA. 2010; V. 16(8): pp. 1478-1487.

48.Jeck W.R., Sorrentino J.A., Wang K., Slevin M.K., Burd C.E., Liu J., Marzluff W.F., Sharpless N.E. Circular RNAs are abundant, conserved, and associated with ALU repeats. RNA. 2013; V. 19(2): pp. 141-157.

49.Memczak S., Jens M., Elefsinioti A., Torti F., Krueger J., Rybak A., Maier L., Mackowiak S.D., Gregersen L.H., Munschauer M., Loewer A., Ziebold U., Landthaler M., Kocks C., le Noble F., Rajewsky N. Circular RNAs are a large class of animal RNAs with regulatory potency. Nature. 2013; V. 495(7441): pp. 333-338.

50.Wutz A. Gene silencing in X-chromosome inactivation: advances in understanding facultative heterochromatin formation. Nat Rev Genet. 2011; V. 12(8): pp. 542-553.

51.Richardson A.L., Wang Z.C., De Nicolo A., Lu X., Brown M., Miron A., Liao X., Iglehart J.D., Livingston D.M., Ganesan S. X chromosomal abnormalities in basal-like human breast cancer. Cancer Cell. 2006; V. 9(2): pp. 121-132.

52.Pageau G.J., Hall L.L., Ganesan S., Livingston D.M., Lawrence J.B. The disappearing Barr body in breast and ovarian cancers. Nat Rev Cancer. 2007; V. 7(8): pp. 628-633.

53.Yildirim E., Kirby J.E., Brown D.E., Mercier F.E., Sadreyev R.I., Scadden D.T., Lee J.T. Xist RNA is a potent suppressor of hematologic cancer in mice. Cell. 2013; V. 152(4): pp. 727-742.

54. Ji P., Diederichs S., Wang W., Boing S., Metzger R., Schneider P.M., Tidow N., Brandt B., Buerger H., Bulk E., Thomas M., Berdel W.E., Serve H., Müller-Tidow C. MALAT-1, a novel noncoding RNA, and thymosin beta4 predict metastasis and survival in early-stage non-small cell lung cancer. Oncogene. 2003; V. 22(39): pp. 8031-8041.

55.Lin R., Maeda S., Liu C., Karin M., Edgington T.S. A large noncoding RNA is a marker for murine hepatocellular carcinomas and a spectrum of human carcinomas. Oncogene. 2007; V. 26(6): pp. 851-858.

56.Fellenberg J., Bernd L., Delling G., Witte D., Zahlten-Hinguranage A. Prognostic significance of drug-regulated genes in high-grade osteosarcoma. Mod Pathol. 2007; V. 20(10): pp. 1085-1094.

57.Schmidt L.H., Spieker T., Koschmieder S., Schäffers S., Humberg J., Jungen D., Bulk E., Hascher A., Wittmer D., Marra A., Hillejan L., Wiebe K., Berdel W.E., Wiewrodt R., Muller-Tidow C. The long noncoding MALAT-1 RNA indicates a poor prognosis in non-small cell lung cancer and induces migration and tumor growth. J Thorac Oncol. 2011; V. 6(12): pp. 19841992.

58.Lai M.C., Yang Z., Zhou L., Zhu Q.Q., Xie H.Y., Zhang F., Wu L.M., Chen L.M., Zheng S.S. Long non-coding RNA MALAT-1 overexpression predicts tumor recurrence of hepatocellular carcinoma after liver transplantation. Med Oncol. 2012; V. 29(3): pp. 1810-1816.

59.Ying L., Chen Q., Wang Y., Zhou Z., Huang Y., Qiu F. Upregulated MALAT-1 contributes to bladder cancer cell migration by inducing epithelial-to-mesenchymal transition. Mol Biosyst. 2012; V. 8(9): pp. 22892294.

60.Tano K., Mizuno R., Okada T., Rakwal R., Shibato J., Masuo Y., Ijiri K., Akimitsu N. MALAT-1 enhances cell motility of lung adenocarcinoma cells by influencing the expression of motility-related genes. FEBS Lett. 2010; V. 584(22): pp. 4575-4580.

61 .Xu C., Yang M., Tian J., Wang X., Li Z. MALAT-1: a long non-coding RNA and its important 3' end functional motif in colorectal cancer metastasis. Int J Oncol. 2011; V. 39(1): pp. 169-175.

62.Gutschner T., Hämmerle M., Eissmann M., Hsu J., Kim Y., Hung G., Revenko A., Arun G., Stentrup M., Gross M., Zornig M., MacLeod A.R., Spector D.L., Diederichs S. The noncoding RNA MALAT1 is a critical regulator of the metastasis phenotype of lung cancer cells. Cancer Res. 2013; V. 73(3): pp. 1180-1189.

63.Tripathi V., Shen Z., Chakraborty A., Giri S., Freier S.M., Wu X., Zhang Y., Gorospe M., Prasanth S.G., Lai A., Prasanth K.V. Long Noncoding RNA MAL ATI Controls Cell Cycle Progression by Regulating the Expression of Oncogenic Transcription Factor B-MYB. PLoS Genet. 2013; V. 9(3): el003368.

64.Eißmann M., Gutschner T., Hämmerle M., Günther S., Caudron-Herger M., Groß M., Schirmacher P., Rippe K., Braun T., Zornig M., Diederichs S. Loss of the abundant nuclear non-coding RNA MAL ATI is compatible with life and development. RNA Biol. 2012; V. 9(8): pp. 1076-1087.

65.Rinn J.L., Kertesz M., Wang J.K., Squazzo S.L., Xu X., Brugmann S.A., Goodnough L.H., Helms J.A., Farnham P.J., Segal E., Chang H.Y. Functional demarcation of active and silent chromatin domains in human HOX loci by noncoding RNAs. Cell. 2007; V. 129(7): pp. 1311-1323.

66.Gupta R.A., Shah N., Wang K.C., Kim J., Horlings H.M., Wong D.J., Tsai M.C., Hung T., Argani P., Rinn J.L., Wang Y., Brzoska P., Kong B., Li R., West R.B., van de Vijver M.J., Sukumar S., Chang H.Y. Long non-coding RNA HOT AIR reprograms chromatin state to promote cancer metastasis. Nature. 2010; V. 464(7291): pp. 1071-1076.

67.Yang Z., Zhou L., Wu L.M., Lai M.C., Xie H.Y., Zhang F., Zheng S.S. Overexpression of long non-coding RNA HOT AIR predicts tumor

recurrence in hepatocellular carcinoma patients following liver transplantation. Ann Surg Oncol. 2011; V. 18(5): pp. 1243-1250.

68.Kogo R., Shimamura T., Mimori K., Kawahara K., Imoto S., Sudo T., Tanaka F., Shibata K., Suzuki A., Komune S., Miyano S., Mori M. Long noncoding RNA HOT AIR regulates polycomb-dependent chromatin modification and is associated with poor prognosis in colorectal cancers. Cancer Res. 2011; V. 71(20): pp. 6320-6326.

69.Milhem M.M., Knutson T., Yang S., Zhu D., Wang X., Leslie K.K., Meng X. Correlation of MTDH/AEG-1 and HOTAIR Expression with Metastasis and Response to Treatment in Sarcoma Patients. J Cancer Sci Ther. 2011; S5(4).

70.Geng Y.J., Xie S.L., Li Q., Ma J., Wang G.Y. Large intervening non-coding RNA HOTAIR is associated with hepatocellular carcinoma progression. J Int Med Res. 2011; V. 39(6): pp. 2119-2128.

71.Niinuma T., Suzuki H., Nojima M., Nosho K., Yamamoto H., Takamaru H., Yamamoto E., Maruyama R., Nobuoka T., Miyazaki Y., Nishida T., Bamba T., Kanda T., Ajioka Y., Taguchi T., Okahara S., Takahashi H., Nishida Y., Hosokawa M., Hasegawa T., Tokino T., Hirata K., Imai K., Toyota M., Shinomura Y. Upregulation of miR-196a and HOTAIR drive malignant character in gastrointestinal stromal tumors. Cancer Res. 2012; V. 72(5): pp. 1126-1136.

72.Lu L., Zhu G., Zhang C., Deng Q., Katsaros D., Mayne S.T., Risch H.A., Mu L., Canuto E.M., Gregori G., Benedetto C., Yu H. Association of large noncoding RNA HOTAIR expression and its downstream intergenic CpG island methylation with survival in breast cancer. Breast Cancer Res Treat. 2012; V. 136(3): pp. 875-883.

73.Chisholm K.M., Wan Y., Li R., Montgomery K.D., Chang H.Y., West R.B. Detection of long non-coding RNA in archival tissue: correlation with

polycomb protein expression in primary and metastatic breast carcinoma. PLoS One. 2012; V. 7(10): e47998.

74.Kim K., Jutooru I., Chadalapaka G., Johnson G., Frank J., Burghardt R., Kim S., Safe S. HOTAIR is a negative prognostic factor and exhibits pro-oncogenic activity in pancreatic cancer. Oncogene. 2013; V. 32(13): pp. 1616-1625.

75.Li D., Feng J., Wu T., Wang Y., Sun Y., Ren J., Liu M. Long intergenic noncoding RNA HOTAIR is overexpressed and regulates PTEN methylation in laryngeal squamous cell carcinoma. Am J Pathol. 2013; V. 182(1): pp. 6470.

76.Nie Y., Liu X., Qu S., Song E., Zou H., Gong C. Long non-coding RNA HOTAIR is an independent prognostic marker for nasopharyngeal carcinoma progression and survival. Cancer Sei. 2013; V. 104(4): pp. 458464.

77.1shibashi M., Kogo R., Shibata K., Sawada G., Takahashi Y., Kurashige J., Akiyoshi S., Sasaki S., Iwaya T., Sudo T., Sugimachi K., Mimori K., Wakabayashi G., Mori M. Clinical significance of the expression of long non-coding RNA HOTAIR in primary hepatocellular carcinoma. Oncol Rep. 2013; V. 29(3): pp. 946-950.

78.Yang F., Huo X.S., Yuan S.X., Zhang L., Zhou W.P., Wang F., Sun S.H. Repression of the long noncoding RNA-LET by histone deacetylase 3 contributes to hypoxia-mediated metastasis. Mol Cell. 2013; V. 49(6): pp. 1083-1096.

79.Baserga S.J., Linnenbach A.J., Malcolm S., Ghosh P., Malcolm A.D., Takeshita K., Forget B.G., Benz E.J. Jr. Polyadenylation of a human mitochondrial ribosomal RNA transcript detected by molecular cloning. Gene. 1985; V. 35(3): pp. 305-312.

80.Hartmann T.B., Mattern E., Wiedemann N., van Doom R., Willemze R., Niikura T., Hildenbrand R., Schadendorf D., Eichmuller S.B. Identification

of selectively expressed genes and antigens in CTCL. Exp Dermatol. 2008; V. 17(4): pp. 324-334.

81 .http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/gorf.html

82.http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM-blastp&BLAST PROG RAMS=blastp&PAGE TYPE=BlastSearch&SHOW DEFAULTS=on&LI NK LOC=blasthome

83.Hashimoto Y., Niikura T., Tajima H., Yasukawa T., Sudo H., Ito Y., Kita Y., Kawasumi M., Kouyama K., Doyu M., Sobue G., Koide T., Tsuji S., Lang J., Kurokawa K., Nishimoto I. A rescue factor abolishing neuronal cell death by a wide spectrum familial Alzheimer's disease genes and Ab. Proc Natl Acad Sci USA 2001 (a); V. 98(11): pp. 6336-6341.

84.Simon D.K., Pulst S.M., Sutton J.P., Browne S.E., Beal M.F., Johns D.R. Familial multisystem degeneration with parkinsonism associated with the 11778 mitochondrial DNA mutation. Neurology. 1999; V. 53(8): pp. 17871793.

85.Hashimoto Y., Niikura T., Ito Y., Sudo H., Hata M., Arakawa E., Abe Y., Kita Y., Nishimoto I. Detailed characterization of neuroprotection by a rescue factor humanin against various Alzheimer's disease-relevant insults. J Neurosci. 2001 (b); V. 21(23): pp. 9235-9245.

86.Yamagishi Y., Hashimoto Y., Niikura T., Nishimoto I. Identification of essential amino acids in Humanin, a neuroprotective factor against Alzheimer's disease-relevant insults. Peptides. 2003; V. 24(4): pp. 585-595.

87.Kotova E., Coleman T., Serebriiskii I. Two-hybrid dual bait system. Curr Protoc Mol Biol. 2009; Chapter 20: Unit 20.7.

88.Brent R., Ptashne M. Mechanism of action of the lexA gene product. Proc Natl Acad Sci U S A. 1981; V. 78(7): pp. 4204-4208.

89.Sauer R.T., Anderegg R. Primary structure of the lambda repressor. Biochemistry. 1978; V. 17(6): pp. 1092-1100.

90.Ma J., Ptashne M. A new class of yeast transcriptional activators. Cell. 1987; V. 51(1): pp. 113-119.

91 .Petermann R., Mossier B.M., Aryee D.N., Kovar H. A recombination based method to rapidly assess specificity of two-hybrid clones in yeast. Nucleic Acids Res. 1998; V. 26(9): pp. 2252-2253.

92.Serebriiskii I.G., Kotova E. Analysis of protein-protein interactions utilizing dual bait yeast two-hybrid system. Methods Mol Biol. 2004; V. 261: pp. 263-296.

93.Kokura K., Sun L., Bedford M.T., Fang J. Methyl-H3K9-binding protein MPP8 mediates E-cadherin gene silencing and promotes tumour cell motility and invasion. EMBO J. 2010; V. 29(21): pp. 3673-3687.

94.Bua D.J., Kuo A.J., Cheung P., Liu C.L., Migliori V., Espejo A., Casadio F., Bassi C., Amati B., Bedford M.T., Guccione E., Gozani O. Epigenome microarray platform for proteome-wide dissection of chromatinsignaling networks. PLoS One 2009; V. 4(8): e6789.

95.Bork P. Hundreds of ankyrin-like repeats in functionally diverse proteins: mobile modules that cross phyla horizontally? Proteins 1993; V. 17(4): pp. 363-374.

96.Kotova E., Serebriiskii I., Coleman T. Two-hybrid dual bait system. Curr Protoc Mol Biol. 2002 Nov; Chapter 20: Unit 20.7.

97.Rorbach J., Minczuk M. The post-transcriptional life of mammalian mitochondrial RNA. Biochem J. 2012; V. 444(3): pp. 357-373.

98.Agrawal R.K., Sharma M.R. Structural aspects of mitochondrial translational apparatus. Curr Opin Struct Biol. 2012; V. 22(6): pp. 797-803.

99.Dubin D.T., Montoya J., Timko K.D., Attardi G. Sequence analysis and precise mapping of the 3' ends of HeLa cell mitochondrial ribosomal RNAs. J Mol Biol. 1982; V. 157(1): pp. 1-19.

100. Mercer T.R., Neph S., Dinger M.E., Crawford J., Smith M.A., Shearwood A.M., Haugen E., Bracken C.P., Rackham O.,

Stamatoyannopoulos. J.A., Filipovska A., Mattick J.S. The human mitochondrial transcriptome. Cell. 2011; V. 146(4): pp. 645-658.

101. Maximov V., Martynenko A., Hunsmann G., Tarantul V. Mitochondrial 16S rRNA gene encodes a functional peptide, a potential drug for Alzheimer's disease and target for cancer therapy. Med Hypotheses. 2002; V. 59(6): pp. 670-673.

102. Kariya S., Takahashi N., Ooba N., Kawahara M., Nakayama H., Ueno S. Humanin inhibits cell death of serum-deprived PC12h cells. Neuroreport. 2002; V. 13(6): pp. 903-907.

103. Jung S.S., Van Nostrand W.E. Humanin rescues human cerebrovascular smooth muscle cells from Abeta-induced toxicity. J Neurochem. 2003; V. 84(2): pp. 266-272.

104. Guo B., Zhai D., Cabezas E., Welsh K., Nouraini S., Satterthwait A.C., Reed J.C. Humanin peptide suppresses apoptosis by interfering with Bax activation. Nature. 2003; V. 423(6938): pp. 456-461.

105. Ikonen M., Liu B., Hashimoto Y., Ma L., Lee K.W., Niikura T., Nishimoto I., Cohen P. Interaction between the Alzheimer's survival peptide humanin and insulin-like growth factor-binding protein 3 regulates cell survival and apoptosis. Proc Natl Acad Sci USA. 2003; V. 100(22): pp. 13042-13047.

106. Kariya S., Takahashi N., Hirano M., Ueno S. Humanin improves impaired metabolic activity and prolongs survival of serum-deprived human lymphocytes. Mol Cell Biochem. 2003; V. 254(1-2): pp. 83-89.

107. Sponne I., Fifre A., Koziel V., Kriem B., Oster T., Pillot T. Humanin rescues cortical neurons from prion-peptide-induced apoptosis. Mol Cell Neurosci. 2004; V. 25(1): pp. 95-102.

108. Luciano F., Zhai D., Zhu X., Bailly-Maitre B., Ricci J.E., Satterthwait A.C., Reed J.C. Cytoprotective peptide humanin binds and inhibits

proapoptotic Bcl-2/Bax family protein BimEL. J Biol Chem. 2005; V. 280(16): pp. 15825-15835.

109. Zhai D., Luciano F., Zhu X., Guo B., Satterthwait A.C., Reed J.C. Humanin binds and nullifies Bid activity by blocking its activation of Bax and Bak. J Biol Chem. 2005; V. 280(16): pp. 15815-15824.

110. Wang D., Li H., Yuan H., Zheng M., Bai C., Chen L., Pei X. Humanin delays apoptosis in K562 cells by downregulation of P38 MAP kinase. Apoptosis. V. 2005; 10(5): pp. 963-971.

111. Colyn E., Strand M.L., Carlsson-Skwirut C., Wahlgren A., Svechnikov K.V., Cohen P., Su,der O. Anti-apoptotic factor humanin is expressed in the testis and prevents cell-death in leydig cells during the first wave of spermatogenesis. J Cell Physiol. 2006; V. 208(2): pp. 373-385.

112. Yang Z., Zhang Q., Ge J., Tan Z. Protective effects of tetramethylpyrazine on rat retinal cell cultures. Neurochem Int. 2008; V. 52(6): pp. 1176-1187.

113. Hoang P.T., Park P., Cobb L.J., Paharkova-Vatchkova V., Hakimi M., Cohen P., Lee K.W. The neurosurvival factor Humanin inhibits beta-cell apoptosis via signal transducer and activator of transcription 3 activation and delays and ameliorates diabetes in nonobese diabetic mice. Metabolism 2010; V. 59(3): pp. 343-349.

114. Jin H., Liu T., Wang W.X., Xu J.H., Yang P.B., Lu H.X., Sun Q.R., Hu H.T. Protective effects of [Gly 14]-Humanin on beta-amyloid-induced PC 12 cell death by preventing mitochondrial dysfunction. Neurochem Int. 2010; V. 56(3): pp. 417-423.

115. Lue Y., Swerdloff R., Liu Q., Mehta H., Hikim A.S., Lee K.W., Jia Y., Hwang D., Cobb L.J., Cohen P., Wang C. Opposing roles of insulin-like growth factor binding protein 3 and humanin in the regulation of testicular germ cell apoptosis. Endocrinology 2010; V. 151(1): pp. 350-357.

116. Li L.M., Zhang Y., Qiao J.T., Zhang C. Humanin protects neurons against apoptosis induced by Abeta31-35 through suppression of intrinsic pathway. Sheng Li Xue Bao. 2010; V. 62(2): pp. 93-100.

117. Xu X., Chua K.W., Chua C.C., Liu C.F., Hamdy R.C., Chua B.H. Synergistic protective effects of humanin and necrostatin-1 on hypoxia and ischemia/reperfusion injury. Brain Res. 2010; V. 1355: pp. 189-194.

118. Men J., Zhang X., Yang Y., Gao D. An AD-related neuroprotector rescues transformed rat retinal ganglion cells from CoCl2-induced apoptosis. J Mol Neurosci. 2012; V. 47(1): pp. 144-149.

119. Kariya S., Hirano M., Furiya Y., Ueno S. Effect of humanin on decreased ATP levels of human lymphocytes harboring A3243G mutant mitochondrial DNA. Neuropeptides. 2005(a); V. 39(2): pp. 97-101.

120. Kariya S., Hirano M., Furiya Y., Sugie K., Ueno S. Humanin detected in skeletal muscles of MELAS patients: a possible new therapeutic agent. Acta Neuropathol. 2005(b); V. 109(4): pp. 367-372.

121. Ying G., Iribarren P., Zhou Y., Gong W., Zhang N., Yu Z.X., Le Y., Cui Y., Wang J.M. Humanin, a newly identified neuroprotective factor, uses the G protein-coupled formylpeptide receptor-like-1 as a functional receptor. J Immunol. 2004; V. 172(11): pp. 7078-7085.

122. Harada M., Habata Y., Hosoya M., Nishi K., Fujii R., Kobayashi M., Hinuma S. N-Formylated humanin activates both formyl peptide receptorlike 1 and 2. Biochem Biophys Res Commun. 2004; V. 324(1): pp. 255-261.

123. Muzumdar R.H., Huffman D.M., Atzmon G., Buettner C., Cobb L.J., Fishman S., Budagov T., Cui L., Einstein F.H., Poduval A., Hwang D., Barzilai N., Cohen P. Humanin: a novel central regulator of peripheral insulin action. PLoS One. 2009; V. 4(7): e6334.

124. Xu X., Chua C.C., Gao J., Hamdy R.C., Chua B.H. Humanin is a novel neuroprotective agent against stroke. Stroke 2006; V. 37(10): pp. 2613-2619.

125. Xu X., Chua C.C., Gao J., Chua K.W., Wang H., Hamdy R.C., Chua B.H. Neuroprotective effect of humanin on cerebral ischemia/reperfusion injury is mediated by a РІЗК/Akt pathway. Brain Res. 2008; V. 1227: pp. 12-18.

126. Muzumdar R.H., Huffman D.M., Calvert J.W., Jha S., Weinberg Y., Cui L., Nemkal A., Atzmon G., Klein L., Gundewar S., Ji S.Y., Lavu M., Predmore B.L., Lefer D.J. Acute humanin therapy attenuates myocardial ischemia and reperfusion injury in mice. Arterioscler Thromb Vase Biol. 2010; V. 30(10): pp. 1940-1948.

127. Chiba T., Yamada M., Sasabe J., Terashita K., Shimoda M., Matsuoka M., Aiso S. Amyloid-beta causes memory impairment by disturbing the JAK2/STAT3 axis in hippocampal neurons. Мої Psychiatry. 2009; V. 14(2): pp. 206-222.

128. Niikura T., Sidahmed E., Hirata-Fukae C., Aisen P.S., Matsuoka Y. A humanin derivative reduces amyloid beta accumulation and ameliorates memory deficit in triple transgenic mice. PLoS One. 2011; V. 6(1): ЄІ6259.

129. Zhang W., Zhang W., Li Z., Hao J., Zhang Z., Liu L., Mao N., Miao J., Zhang L. S14G-humanin improves cognitive deficits and reduces amyloid pathology in the middle-aged APPswe/PS 1 dE9 mice. Pharmacol Biochem Behav. 2012; V. 100(3): pp. 361-369.

130. Tajima H., Kawasumi M., Chiba T., Yamada M., Yamashita K., Nawa M., Kita Y., Kouyama K., Aiso S., Matsuoka M., Niikura T., Nishimoto І. A humanin derivative, S14G-HN, prevents amyloid-beta-induced memory impairment in mice. JNeurosci Res. 2005; V. 79(5): pp. 714-723.

131. Chiba T., Yamada M., Hashimoto Y., Sato M., Sasabe J., Kita Y., Terashita K., Aiso S., Nishimoto I., Matsuoka M. Development of a femtomolar-acting humanin derivative named colivelin by attaching activity-dependent neurotrophic factor to its N terminus: characterization of

colivelin-mediated neuroprotection against Alzheimer's disease-relevant insults in vitro and in vivo. J Neurosci. 2005; V. 25(44): pp. 10252-10261.

132. Miao J., Zhang W., Yin R., Liu R., Su C., Lei G., Li Z. S14G-Humanin ameliorates Abeta25-35-induced behavioral deficits by reducing neuroinflammatory responses and apoptosis in mice. Neuropeptides. 2008; V. 42(5-6): pp. 557-567.

133. Mamiya T., Ukai M. [Gly( 14)]-Humanin improved the learning and memory impairment induced by scopolamine in vivo. Br J Pharmacol. 2001; V. 134(8): pp. 1597-1599.

134. Krejcova G., Patocka J., Slaninova J. Effect of humanin analogues on experimentally induced impairment of spatial memory in rats. J Pept Sci. 2004; V. 10(10): pp. 636-639.

135. Kunesov G., HlavScek J., Patocka J., Evangelou A., Zikos C., Benaki D., Paravatou-Petsotas M., Pelecanou M., Livaniou E., Slaninova J. The multiple T-maze in vivo testing of the neuroprotective effect of humanin analogues. Peptides. 2008; V. 29(11): pp. 1982-1987.

136. Oh Y.K., Bachar A.R., Zacharias D.G., Kim S.G., Wan J., Cobb L.J., Lerman L.O., Cohen P., Lerman A. Humanin preserves endothelial function and prevents atherosclerotic plaque progression in hypercholesterolemic ApoE deficient mice. Atherosclerosis. 2011; V. 219(1): pp. 65-73.

137. Zhang X., Urbieta-Caceres V.H., Eirin A., Bell C.C., Crane J.A., Tang H., Jordan K.L., Oh Y.K., Zhu X.Y., Korsmo M.J., Bachar A.R., Cohen P., Lerman A., Lerman L.O. Humanin prevents intra-renal microvascular remodeling and inflammation in hypercholesterolemic ApoE deficient mice. Life Sci. 2012; V. 91(5-6): pp. 199-206.

138. Niikura T., Hashimoto Y., Tajima H., Ishizaka M., Yamagishi Y., Kawasumi M., Nawa M., Terashita K., Aiso S., Nishimoto I. A tripartite motif protein TRIM11 binds and destabilizes Humanin, a neuroprotective

peptide against Alzheimer's disease-relevant insults. Eur J Neurosci. 2003; V. 17(6): pp. 1150-1158.

139. Kigawa A., Wakui H., Maki N., Okuyama S., Masai R., Ohtani H., Komatsuda A., Suzuki D., Toyoda M., Kobayashi R., Sawada K. Interaction of the spectrin-like repeats of alpha-actinin-4 with humanin peptide. Clin Exp Nephrol. 2004; V. 8(4): pp. 331-338.

140. Hashimoto Y., Kurita M., Aiso S., Nishimoto I., Matsuoka M. Humanin inhibits neuronal cell death by interacting with a cytokine receptor complex or complexes involving CNTF receptor alpha/WSX-l/gpl30. Mol Biol Cell. 2009; V. 20(12): pp. 2864-2873.

141. Rossini L., Hashimoto Y., Suzuki H., Kurita M., Gianfriddo M., Scali C., Roncarati R., Franceschini D., Pollio G., Trabalzini L., Terstappen G.C., Matsuoka M., Caricasole A. VSTM2L is a novel secreted antagonist of the neuroprotective peptide Humanin. FASEB J. 2011; V. 25(6): pp. 1983-2000.

142. Kaplan K.B., Li R. A prescription for 'stress—the role of Hsp90 in genome stability and cellular adaptation. Trends Cell Biol. 2012; V. 22(11): pp. 576-583.

143. Barrott J.J., Haystead T.A. Hsp90, an unlikely ally in the war on cancer. FEBS J. 2013; V. 280(6): pp. 1381-1396.

144. Matyskiela M.E., Martin A. Design principles of a universal protein degradation machine. J Mol Biol. 2013; V. 425(2): pp. 199-213.

145. Micel L.N., Tentler J.J., Smith P.G., Eckhardt G.S. Role of ubiquitin ligases and the proteasome in oncogenesis: novel targets for anticancer therapies. J Clin Oncol. 2013; V. 31(9): pp. 1231-1238.

146. Kortuem K.M., Stewart A.K. Carfilzomib. Blood. 2013; V. 121 (6): pp. 893-897.

147. Terkeltaub R.A. Inorganic pyrophosphate generation and disposition in pathophysiology. Am J Physiol Cell Physiol. 2001; V. 281(1): Cl-Cl 1.

148. Jeong S.H., Ko G.H., Cho Y.H., Lee Y.J., Cho B.I., Ha W.S., Choi S.K., Kim J.W., Lee C.W., Heo Y.S., Shin S.H., Yoo J., Hong S.C. Pyrophosphatase overexpression is associated with cell migration, invasion, and poor prognosis in gastric cancer. Tumour Biol. 2012; V. 33(6): pp. 1889-1898.

149. Wood Z.A., Schroder E., Robin Harris J., Poole L.B. Structure, mechanism and regulation of peroxiredoxins. Trends Biochem Sci. 2003; V. 28(1): pp. 32-40.

150. Browne G.J., Proud C.G. Regulation of peptide-chain elongation in mammalian cells. Eur J Biochem. 2002; V. 269(22): pp. 5360-5368.

151. Ejiri S. Moonlighting functions of polypeptide elongation factor 1: from actin bundling to zinc finger protein R1-associated nuclear localization. Biosci Biotechnol Biochem. 2002; V. 66(1): pp. 1-21.

152. Matsumoto-Taniura N., Pirollet F., Monroe R., Gerace L., Westendorf J.M. Identification of novel M phase phosphoproteins by expression cloning. Mol Biol Cell. 1996; V. 7(9): pp. 1455-1469.

153. Bual D.J., Kuol A.J., Cheungl P., Liu C.L., Migliori V., Espejo A., Casadio F., Bassi C., Amati B., Bedford M. T., Guccione E., Gozani O. Epigenome microarray platform for proteome-wide dissection of chromatin-signaling networks. PLoS One. 2009; V. 4(8): e6789.

154. Quinn A.M., Bedford M.T., Espejo A., Spannhoff A., Austin C.P., Oppermann U., Simeonov A. A homogeneous method for investigation of methylation-dependent protein-protein interactions in epigenetics. Nucleic Acids Res. 2010; V. 38(2): el 1.

155. Kokura K., Sun L., Bedford M. T., Fang J. Methyl-H3K9-binding protein MPP8 mediates E-cadherin gene silencing and promotes tumour cell motility and invasion. EMBO J. 2010; V. 29(21): pp. 3673-3687.

156. Hashimoto Y., Niikura T., Ito Y., Sudo H., Hata M., Arakawa E., Abe

Y., Kita Y., Nishimoto I. Detailed characterization of neuroprotection by a

105

rescue factor humanin against various Alzheimer's disease-relevant insults. J Neurosci. 2001; V. 21(23): pp. 9235-9245.

157. Moretti E., Giannerini V., Rossini L., Matsuoka M., Trabalzini L., Collodel G. Immunolocalization of humanin in human sperm and testis. Fertil Steril. 2010; 94(7): 2888-2890.

158. Ijiri K., Tsuruga H., Sakakima H., Tomita K., Taniguchi N., Shimoonoda K., Komiya S., Goldring M.B., Majima H.J., Matsuyama T. Increased expression of humanin peptide in diffuse-type pigmented villonodular synovitis: implication of its mitochondrial abnormality. Ann Rheum Dis. 2005; V. 64(6): pp. 816-823.

159. Di K., Linskey M.E., Bota D.A. TRIM11 is overexpressed in highgrade gliomas and promotes proliferation, invasion, migration and glial tumor growth. Oncogene. 2012 Nov 26. [Epub ahead of print]

160. Tuoc T.C., Stoykova A. Triml 1 modulates the function of neurogenic transcription factor Pax6 through ubiquitin-proteosome system. Genes Dev. 2008; V. 22(14): pp. 1972-1986.

161. Mascarenhas J.B., Young K.P., Littlejohn E.L., Yoo B.K., Salgia R., Lang D. PAX6 is expressed in pancreatic cancer and actively participates in cancer progression through activation of the MET tyrosine kinase receptor gene. J Biol Chem. 2009; V. 284(40): pp. 27524-27532.

162. Shyr C.R., Tsai M.Y., Yeh S., Kang H.Y., Chang Y.C., Wong P.L., Huang C.C., Huang K.E., Chang C. Tumor suppressor PAX6 functions as androgen receptor co-repressor to inhibit prostate cancer growth. Prostate. 2010; V. 70(2): pp. 190-199.

ПРИЛОЖЕНИЕ 1. Карты плазмид, использованных при выполнении исследования.

Расі ЄзгСІ Нра\

Рисунок 19. Карта плазмиды рМ\\Ч03, предназначенной для клонирования основного бэйта. Рисунок взят из (Ко1:оуа Е. еі аі., 2002).

ЕсоШ &

Нюб III

йэО

Араи

Рисунок 20. Карта плазмиды рСВБЮ, предназначенной для клонирования альтернативного бэйта. Рисунок взят из (КоШуа Е. е1 а!., 2002).

Рисунок 21. Карта репортёрной плазмиды рОЯ8. Рисунок взят из (Коїоуа Е. еі аі., 2002).

Kpn!

5ас1

ßsal

AatII

AH III

^ <0

чОО

рго^оУел

Eco Rl

fusion с as se t tev„X"®У<э \

Sph\

/

AW ßamHI

„ . Sä 1

a

ßc/l

fusion cassette:

I NLS I

?

B42 domain

HAiiag

ATG

Eco Rl

Xho\

Рисунок 22. Карта плазмиды рЮ4-5, предназначенной для клонирования прэя. Рисунок взят из (КоЮуаЕ е1 а!, 2002)

А рМ\Л/103 (рЕ0202)

5а Л І 5*11 ЕсоЯІ ВатНІ ЯсоІ ХЬої саа ітс :со- взс- атс сст сса сса тсс- ссс ссс стс за з тсс ас

рЫ1.ехА

ЫоИ ВатНІ ЯсоИІ ХЬої з -а^ ссд сдд сед ссг еда чдд ?хс с^а "с АТС ААА г Я Р ~ Р К 5 І 0 Р Ч К

В сИивюп ріавтісів (е.д., рбВЭ 10)

А = ААТ їгате

ВсгІІІ АраІ NotI ЯаЛ ЯсоИ ЗасІ Р^иІІ Кппі ХЬої С ААТ ТСЬ АСЗ ТТС АСС ТСА САТ СТС АСС ТСС ОС" ССС ТА" ССС ССС ССС ТСС АСТ С ЗА Ссї £ 5 І. 3 3 В Ь 3 И А ?. ї Я О к 5 г Я Р ЯСЧ А

В = САА іїате

ЕсоЯІ Ваі II Араї ЛГоСІ гаї І гасі Руціі Крпі ХЬої 3 ДАТ ТГ.:-АА ТТС САС СТС АСА ТСТ САС СТС- ССС ССС СТА ССЗ ССС СГО СТС САС т:с АСС !■; 1 Е ? Е Ь ?. 5 С І- С Р V Р Н Г Ь Е £ Т и-

с р0С4-5 (ака рВ42АО, сіїзрІауТагдеї)

ЯсоИІ ХЬої АТС С-ЗТ ¡ЗСТ ССТ ССА ААА ААС ААС ССС САА ТТС ССС ССА СТС ОАО ААС СТТ М С- А Р Р К К К РЕГСКІ_ЕКЬ

рУевТгр2 КрпІ ВаШІ НіпОІІІ гасі АТС СІТ -ААС :ст . . ААО СТТ ССТ АГС ЗАС (.ТС ССА ТСС АСТ АСТ ААС ЗСС (■* С- \ Р КЬСТЕІ-СЗТЗИС

ЕсоКІ МЫ: І ЄрЬІ зггхі взгх: хйоі ;зс тст зет сс.-. атт стс сас ата тсс атс аса стс ссс єсс сст сса ссс ато с Р С Г А С І ь о І 3 І Т Ь А А А Р С К К

Рисунок 23. Полилинкеры в плазмидах: (А) рМ\\П03 и рІЧЬехА, кодирующих основной бэйт; (В) рвВЗЮ, кодирующей альтернативный бэйт; (С) рЮ4-5 и рУезТгр2, кодирующих прэй. Рисунок взят из (КоЮуэ Е. ЄІ а!., 2002).

рЕСРР-С1 \Zector 1пЬгтайоп

СепВапк АссбБвюп #: 1155763

РТ3028-5 Са1а1од #6084-1

£со0109I

(3854)

Аэе I

АргИ I

(431

5лэВ I

13411 ЫЬв I (592)

Есо47 III (597) Аде 1(601)

I (1323)

МСБ

(1330-1417)

М1и I (1642) 0га III (1872)

5Ы

(2577)

ТАС ААБ ТСС Б6А СТС АБА ТСТ СБА 6СТСАА6СТ ТСБ ДАТ ТШЗСАБТС БАС БЕТ АСС БСБ 66С ССЕ ББА ТСС АСС Б6А ТСТА6А ТАА СТ6 АТС А Взр£ I 00/11 И>«1 \ НМ М £етЯ1 Рй1 5аЛ (Грл1 7 Дрз1 \ 8атН I ХЬа1* Вс/1*

Асс! Мпт\! 05171201 *пи1 5эс11 г Эта!

Вд1» ХЬо I ,нмт Яве! £сЛ38 И

Рисунок 24. Карта и полилинкер плазмиды рЕСРР-С1. Рисунок взят с веб-сайта компании ОоШесЬ (США).

pCWV-IVJyc-N Vector information

Cii

___SilJ

ATS 3A3 CAS AAS СГ5 A7C: TCA SAS SAS SAC CTS C7T ATS SCC ATS OAS ТлС С-. С С-ТЗ ТТС ЗАС ТАЗ AST СГГС СТС CTS ЗАС ЗАЛ ТА С СЗЗ ТАС СТС

SKI hcoKl Sail Xiwl_ Кро1_ .........Nofl_

••«4. SCC CCA AIT ©G<3 TOG ACC SAG АТС 7CT CCA «5Т ACC SOS SCC GC CGS SCT TAA SCC AGS TC»G STC. TAG AGA GC7 CCA TC.S CGC COG CG

pCMV-Myc-N vector map and multiple cloning site.

Рисунок 25. Карта и полилинкер плазмиды pCMV-Myc-N. Рисунок взят с веб-сайта компании Clontech (США).

ПРИЛОЖЕНИЕ 2. Нуклеотидные последовательности кДНК, кодирующие прэи, которые были отобраны в результате дрожжевого двухгибридного скрининга на белки, взаимодействующие с гуманином. Кодирующие белок участки нуклеотидных последовательностей разбиты на тринуклеотидные кодоны. Зелёным выделены нуклеотидные последовательности кДНК. Одинадцатинуклеотидная последовательность в начале является адаптором. Нуклеотидная последовательность между адаптором и кДНК в клоне НШР-1 выделена фиолетовым. 5'-нетранслируемая область в клоне Н№Р-20 выделена жёлтым (нарушения ОРС при этом не происходит). Сдвиг ОРС в клоне Н1М1Р-22 выделен красным.

Н№Р-1.

Овс АСв АСС ( (.А САС АСА САТ ОСА САТ ССА вСТ вСС АТС ТСТ СвТ ССС ТТТ ввА

СТА ССА ТТА ТТА ТТТ ССА ССА СТТ САТ САС ААА ССА ССС САС СТС ТТТ САТ АТС САС ССА ТСТ ССС АСС ТТТ СТА САС ТСГ САТ ОСТ ССА ССА АТТ вСС ТСТ ССТ ТСА

ОАО СОТ ОСС САС АСС ТСС ТГС САА САА СТТ ТАС САС ААС ТСТ АТС АСТ ТТС ААА

САА ССС АТС ААС ТСТ ТСА СТС АТС АТС СТС К'АА САА СТА АТС САС САС ААС СТС

ААТ ССА АСА ААС АТТ САС СТА вСС АСА СТС САС ССТ ССС САС ААТ ТТС САС АТС

ТТС АСА ААС САА САА СТТ САА САС СТТ АТС ААС САС АТТ ТАА

ССААТССТСАТССТСАСААСТТСТСТСССАСААТТТСАСТТСТААТААТСТССТТАААТТТТА

ТТТССАССТССТСТТТССТТССААААТСТССАТТСТАТСТССАТТТТТТАААТСАТСТСТСТАС

АТАААСССАСТТСТСАААТАААСААААТТТТААААТАААААААААААААААААА

НМР-8

ССС АСС АСС ССА САС АТТ САТ ССТ САС АТА ССТ ТСТ ССС АТС АСТ ССС СТА АТТ

ССТ САТ ССТ ААС АСТ ТТА АТТ САТ ААА ССС АСА СТС САС АСА САС ААС САС ТСС ТТС АСС ТАС ААТ САС АСА АТС АСА СТС САС АСТ СТС АСС САА ССТ С'ГС ТСС ААТ

СТС ССТ ТТС САС ТТТ ССА САА САА САТ ССА САТ ССА ССТ ССС АТС ТСТ ССТ ССС

ТТТ ССА СТА ССА ТТА ТТА ТТТ ССА ССА СТТ САТ САС ААА ССА ССС САС СТС ТТТ

САТ АТС САС ССА ТСТ ССС АСС ТТТ СТА САС ТСТ САТ ССТ ССА ССА АТТ ССС ТСТ

ССТ ТСА САС ССТ ССС САС АСС ТСС ГТС САА САА СТТ ТАС САС ААС ТСТ АТС АСТ

ТТС ААА САА ССС АТС ААС ТСТ ТСА СТС АТС АТС СТС ААА САА СТА АТС САС САС

ААС СТС ААТ ССА АСА ААС АТТ САС СТА ССС АСА СТС САС ССТ ССС САС ААТ ТТС

САС АТС ТТС АСА ААС САА САА СТТ САА САС СТТ АТС ААС САС АТТ ТАА

ССААТССТСАТССТСАСААСТТСТСТСССАСААТТТСАСП СТААТААТСТССТТАААТТТТА

ТТТССАССТССТСТТССТТСССААААТСТССАТТСТАТСТССАТТТТТТАААТСАТСТСТСТАС

АТАААСССАСТТСТСАААТАААСААААТТТТААААТАТТАААААААААААААААА

Н№Р-11

ССС АСС АСС ССО ОАС ААА АТС ССС ТАТ САА АСС ТТС АСА САТ ССС АСТ ААА ТТА САС ТСТ ССС ААА САС СТС САТ АТТ ААС СТТ АТА ССС ААС ААА САА САТ ССА АСТ

СТС АСТ АТТ СТС САТ АСТ ССА АТТ ССА АТС АСС ААС ССТ САС ТТС АТС ААТ ААС СТТ ССТ АСТ АТС ССС ААС ТСТ ССС АСС ААА ССС ТТС АТС САА ССТ ТТС САС ССТ

ССТ ССА САТ АТС ТСТ АТС АТТ ССС САС ТТС ССТ СТТ ССТ ТТТ ТАТ ТСТ ССТ ТАТ ТТС

GTT GCT GAG AAA GTA ACT GTG АТС ACC AAA CAT AAC GAT GAT GAG CAG TAC GCT

GAG GCT GAA GAA AAG GAA GAC

HNIP-12

GGC AC G AGG CGG AAC TAT GGT GCC АТС CCT CAG ACT TGG GAA GAC CCA GGG CAC

AAT GAT AAA CAT ACT GGC TGT TGT GGT GAC AAT GAC CCA ATT GAT GTG TGT GAA ATT GGA AGC AAG GTA TGT GCA AGA GGT GAA ATA ATT GGC GTG AAA GTT СТА GGC

GAT GGA AAA CCA GAA AAT GAG TTT GCG TTT AAT GCA GAA TTT AAA GAT AAG GAC

TTT GCC ATT GAT ATT ATT AAA AGC АСА CAT GAC CAT TGG AAA GCA TT A GTG ACT AAG AAA ACG AAT GGA AAA GGA АТС AGT TGC ATG AAT АСА ACT TTG TCT GAG AGC CCC TTC AAG TGT GAT CCT GAT GCT GCC AGA GCC ATT GTG GAT GCT TTA CCA CCA CCC TGT GAA TCT GCC TGC АСА GTA CCA АСА GAC GTG GAT AAG TGG TTC CAT CAC CAG AAA AAC TAA

TGAGATTTCTCTGGAATACAAGCTGATATTGCTACATCGTGTTCATCTGGATGTATTA

HNIP-13

GGC ACG AGG C( .A TTT AAG AAA CTC AAC TGC CAA GTG ATT GGT GCT TCT GTG GAT

TCT CAC TTC TGT CAT СТА GCA TGG GTC AAT АСА CCT AAG AAA CAA GGA GGA CTG

GGA CCC ATG AAC ATT CCT TTG GTA TCA GAC CCG AAG CGC ACC ATT GCT CAG GAT

TAT GGG GTC TTA AAG GCT GAT GAA GGC АТС TCG TTC AGG GGC CTT TTT АТС ATT

GAT GAT AAG GGT ATT CTT CGG CAG АТС ACT GTA AAT GAC CTC CCT GTT GGC CGC

TCT GTG GAT GAG ACT TTG AGA СТА GTT CAG GCC TTC CAG TTC ACT GAC AAA CAT

GGG GAA GTG TGC CCA GCT GGC TGG AAA CCT GGC AGT GAT ACC АТС AAG CCT GAT

GTC CAA AAG AGC AAA GAA TAT TTC ТСС AAG CAG AAG TGA

GCGCTGGGCTGTTTTAGTGCCAGGCTGCGGTGGGCAGCCATGAGAACAAAACCTCTTCTGTA

TTl'ITTTTTNCCATTAGTAAAACACAANACTTCANA ITCANCCGAATTGTGGTGTCTTACAAG

GCAGGCCTTTCCTACAGGGGGTGGANAGACCAGCCTTTCTTCCTTTGGTAGGAATGGCCTGA

TTTGGCGTTGTGGGCAGGCTACTGGTTTGTATGAT

HNIP-14

GGC ACG AGG CGA TCC AAA GAA AAA TAT CAG AAA AGG CAT GAT TCT GAC AAG GAj \

GAA AAA GGC AGA AAA GAG CCA AAA GGA TTA AAG АСА CTT AAG GAA АТС AGA AAT

GCA TTT GAT TTA TTT AAA TTA ACT CCA GAA GAA AAA AAT GAT GTT TCT GAG AAT

AAT CGG AAA AGG GAA GAA ATA CCA CTG GAT TTT AAA ACC ATA GAC GAT CAC AA^

ACC AAG GAA AAC AAA CAG TCA CTT AAA GAA AGG AGA AAC ACC AGA GAC GAA ACG

GAT ACT TGG GCA TAC ATT GCT GCA GAA GGT GAT CAG GAG GTT TTA GAC AGC GTG

TGC CAA GCA GAT GAG AAT TCA GAT GGC AGG CAG CAG ATT CTG AGT TTG GGC ATG

GAC CTG CAG TTG GAA TGG ATG AAG TTG GAA GAT TTC CAA AAG CAC CTT GAT GGG AAA GAT GAG AAT TTT GCT GCA АСА GAT GCA ATT CCA AGT AAT GTG TTA AGG GAT GCT GTG AAA AAT GGG GAT TAT ATT ACT GTA AAA GTT GCA CTT AAT TCA AAT GAA

GAA TAT AAC CTG GAC CAA GAG GAA CAT GGT AAT TCT АСА TTC ACT CAG CTC TTC ATT TAT АТС CTT AAG CAA AGT TCT ATG GGT TTT TTCA TTC ATA TAG ACG TTG С

HNIP-15

GGC ACG AGG

GAC TCT GGG AAA GAG CTG CAT ATT AAC CTT ATA CCG AAC AAA CAA GAT CGA ACT CTC ACT ATT GTG GAT ACT GGA ATT GGA ATG ACC AAG GCT GAC TTG АТС AAT AAC CTT GGT ACT АТС GCC AAG TCT GGG ACC AAA GCG TTC ATG GAA GCT TTG CAG GCT GGT GCA GAT АТС TCT ATG ATT GGC CAG TTC GGT GTT GGT TTT TAT TCT GCT TAT TTG GTT GCT GAG AAA GTA ACT GTG АТС ACC AAA CAT AAC GAT GAT GAG CAG TAC GCT TGG GAG ТСС TCA GCA GGG GGA TCA TTC ACA GTG AGG АСА GAC АСА GGT GAA CCT ATG GGT CGT GGA АСА AAA GTT АТС СТА CAC CTG AAA GAA GAC CAA ACT GAG TAC TTG GAG GAA CGA AGA ATA AAG GAG ATT GTG AAG AAA CAT TCT CAG TTT ATT GGA TAT CCC ATT ACT CTT TTT GTG GAG AAG GAA CGT GAT AAA GAA GTA AGC GAT GAT GAG GCT GAA GAA AAG GAA GAC

HNIP-16

cg^^^III^híi^hhhbhhiihhiibhihbihii

ATG CAC CAT GAA GCT TTG AGT GAA GCT CTT CCT GGG GAC AAT GTG GGC TTC AAT GTC AAG AAT GTG TCT GTC AAG GAT G IT CGT CGT GGC AAC GTT GCT GGT GAC AGC AAA AAT GAC CCA CCA ATG GAA GCA GCT GGC TTC ACT GCT CAG GTG ATT АТС CTG AAC CAT CCA GGC CAA ATA AGC GCC GGC TAT GCC CCT GTA TTG GAT TGC CAC ACG GCT CAC ATT GCA TGC AAG TTT GCT GAG CCG AAG GAA AAG ATT GAT CGC CGT TCT GGT AAA AAG CTG GAA GAT GGC CCT AAA TTC TTG AAG TCT GGT GAT GCT GCC ATT GTT GAT ATG GTT CCT GGC AAG CCC ATG TGT GTT GAG AGC TTC TCA GAC TAT CCA CCT TTG GG TCG CTT TGC TGT TCG TGA TAT GAG АСА GAC AGT TGC GGT GGG TGT CAT CAA AGC AGT GGA CAA GAA GGC TGC TGG AGC TGG CAA GGT CAC CAA GTC TGC CCA GAA AGC TCA NAA GGC TAA

ATGAATATTATCCCTAATACCTGCCACCCCACTCTTAATCAGTGGTGCAAGA

HNIP-18

GGC ACG AGG CGG CCT GAC AGA GAA GGC TCA CTC AAG GAT CAG TTG GCT TTA CK \ ATT GGA AAA CTG GGA GAA AAC ATG ATT CTT AAA CGA GCT GCA TGG GTG AAG GTG CCA TCT GGG TTC TAC GTT GGC TCT TAT GTC CAC GGA GCA ATG CAG AGT CCC TCA CTT CAC AAG CTG GTG CTG GGG AAG TAT GGG GCC CTG GTC АТС TGT GAG ACG TCT GAA CAG AAA АСА AAC CTT GAA GAC GTT GGC CGC CGC CTT GGG CAG CAT GCG GTG GGC ATG GCC CCC CTC TCT GTT GGC TCC CTG GAC GAT GAG CCT GGG GGA GAG GCA GAG ACT AAG ATG CTG TCC CAG CCG TAT TTG CTG GAT CCC TCC ATT ACC TTG GGG CAG TAT GTG CAG CCT CAG GGG GTG TCG GTA GTA GAC TTT GTG CGG TTT GAA TGT GGA GAA GGT GAA GAG GCA GCA GAA ACT GAA TAG

GTTCCAGAGACTTITGGCCCAGGAGGAATATTrACTTTTAGCTCTGGACATCATTACAAAAA GGAATATTTCCCAAACCTCTTCAGACCGAGAATGCATGGGTAAAATTATTAAATAGTTGTAT AATAAAAATAATTTTTTCCTTGTTTTGCGTAAAAAAAAAAAAAAAAAAAC

HNIP-20

GGC ACG AGG CGG CGT CCC GGT GTG GCT GTG CCG TTG GTC CTG TGC GGT CAC TTA GCC AAG ATG CCT GAG GAA ACC CAG ACC CAA GAC CAA CCG ATG GAG GAG GAG GAG

GTT GAG ACG TTC GCC TTT CAG GCA GAA ATT GCC CAG TTG ATG TCA TTG АТС АТС

AAT ACT TTC TAC TCG AAC AAA GAG АТС TTT CTG AGA GAG CTC ATT TCA AAT TCA

TCA GAT GCA TTG GAC AAA АТС CGG TAT GAA AGC TTG АСА GAT CCC AGT AAA TTA

GAC TCT GGG AAA GAG CTG CAT A IT AAC CTT ATA CCG AAC AAA CAA GAT CGA ACT

CTC ACT ATT GTG GAT ACT GGA ATT GGA ATG ACC AAG GCT GAC TTG АТС AAT AAC

CTT GGT ACT АТС GCC AAG TCT GGG ACC AAA GCG TTC ATG GAA GCT TTG CAG GCT

GGT GCA GAT АТС TCT ATG ATT GGC CAG TTC GGT GTT GGT TTT TAT TCT GCT TAT TTG GTT GCT GAG AAA GTA ACT GTG АТС ACC AAA CAT AAC GAT GAT GAG CAG TAC GCT

TGG GAG TCC TCA GCA GGG GGA TCA TTC АСА GTG AGG АСА GAC АСА GGT GAA CCT

ATG GGT CGT GGA АСА AAA GTT АТС СТА CAC CTG AAA GAA GAC CAA ACT GAG TAC

TTG GAG GAA CGA A

HNIP-21

GGC ACG AGG

CGGCCCTTATGCGGTTAATTTTGAAGTGCTGTTTATTAATCTTAGTGTATGATTACTGGCCTT

ГІТСАТТТАТСТАТААТП ACCTAAGATTACAAATCAGAAGTCATCTTGCTACCAGTATTTAG

CTTTATAACTAACATGTCCTGCCTATTATCTGTCAGCTGCAAGGTACTCTGGTGAGTCACCAC

rrCAGGGCTl I ACTCCGTAACAGA rTTTGlTGGCATAGCTCTGGGGTGGGCAGTTTTTTGAAA

ATGGGCTCAACCAGAAAAGCCCAAGTTCATGCAGCTGTGGCAGAGTTACAGTTCTGTGGTTT

CATGTTAGTTACCTTATAGTTACTGTGTAATTAGTGCCACTTAATGTATGTTACCAAAAATAA

ATATATCTACCCCAGACTAGATGTAGTATTTTTTGTATAATTGGATTTCCTAATACTGTCATC

CTCAAAGAAAGTGTATTGGTTTTTTAAAAAAGAAAGTGTATTGGGAAATAAAGTCAGATGG AAAÀTTCATTTTTT

HNIP-22

GGC ACG AGG ССИШ ATG GCT CGT GGT CCC AAG AAG CAT CTG AAG CGG GTG GCA

GCT CCA AAG CAT TGG ATG CTG GAT AAA TTG ACC GGT GTG TTT GCT CCT CGT CCA

TCC ACC GGT CCC CAC AAG TTG AGA GAG TGT CTC CCC CTC АТС ATT TTC CTG AGG

AAC AGA CTT AAG TAT GCC CTG АСА GGA GAT GAA GTA AAG AAG ATT TGC ATG CAG

CGG TTC ATT AAA АТС GAT GGC AAG GTC CGA ACT GAT ATA ACC TAC CCT GCT GGA

TTC ATG GAT GTC АТС AGC ATT GAC AAG ACG GGA GAG AAT TTC CGT CTG АТС TAT

GAC ACC AAG GGT CGC TTT GCT GTA CAT CGT ATT АСА CCT GAG GAG GCC AAG TAC

AAG TTG TGC AAA GTG AGA AAG АТС TTT GTG GGC АСА AAA GGA АТС CCT CAT CTG

GTG ACT CAT GAT GCC CGC ACC АТС CGC TAC CCC GAT CCC CTC АТС AAG GTG AAT

GAT ACC ATT CAG ATT GAT TTG GAG ACT GGC AAG ATT ACT GAT TTC АТС AAG TTC

GAC ACT GGT AAC CTG TGT ATG GTG ACT GGA GGT GCT AAC СТА GGA AGA ATT GGT

GTG АТС ACC AAC AGA GAG AGG CAC CTG GAA TCT TTT GAC GTG GTT CAC GTG AAA

GAT GCC AAT GGC AAC AGC TTT GCC ACT CGA CTT TCC AAC ATT TTT GTT ATT GGC

ЯШ&сЛ