Обоснование возможности использования производных хитозана для повышения иммуногенности гриппозных и полиомиелитных вакцин тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат медицинских наук Переверзев, Александр Дмитриевич

• Переверзев, Александр Дмитриевич
• кандидат медицинских наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Переверзев, Александр Дмитриевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. Гриппозные и полиомиелитные вакцины: преимущества и недостатки.

1.1. Живые и инактивированые вакцины.

ГЛАВА 2. Применение хитозана и других адъювантов как способ повысить иммуногенность гриппозных и полиомиелитных вакцин

ГЛАВА З.Врожденный иммунитет. Влияние ТЬЯ-адъювантов на иммунный ответ.

3.1. Эффекторная и инструктивная функции врожденного иммунитета.

32. Агонисты ТТЛ- адъюванты нового поколения для вирусных вакцин.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 4. Объекты и методы исследования.

4.1. Вакцины.

4.2. Штаммы вирусов гриппа.

4.3. Вирусный материал полиомиелита. » * >

И)1 ' 1 I I

4.4. Препараты хитозана, используемые в качестве адъюванта.

4.5. Куриные эмбрионы.

4.6. Экспериментальные животные.

4.7. Приготовление вирусного материала гриппа для опытов.

4.8. Приготовление препаратов хитозана.

4.9. Метод определения инфекционной активности вируса гриппа на куриных эмбрионах.

4.10. Парентеральная иммунизация мышей.

4.11. Мукозальная иммунизация мышей.

4.12. Выделение вирусов гриппа в куриных эмбрионах и их идентификация.

4.13. Пммуноферментный анализ (ИФА).

4.14. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) с вирусом гриппа.

4.15. Определение иммуногенности препаратов.

4.16. Определение специфической активности антигенов в реакции торможения пассивной гемагглютинации (РТПГА).

4.17. Получение дендритных клеток (ДК) из костномозговых предшественников.

4.18. Оценка фенотипа ДК мышей.

4.19. Получение ДК из мононуклеарных лейкоцитов периферической крови (МЛПК) человека.

4.19.1. Получение моноцитов из МЛПК.

4.19.2. Получение ДК из моноцитов.

4.20. Оценка экспрессии ТТЛв.

4.21. Получение суспензии мононуклеарных лейкоцитов (МЛ) мышей.

4.22. Характеристика поверхностных антигенов мононуклеарных лейкоцитов селезенки мышей.

4.23. Определение уровня цитокинов в культуре ДК костного мозга С57/ВЬ6 мышей.

4.24. Определение уровня цитокинов в сыворотках/плазме крови и супернатантах спленоцитов мышей.

4.25. Определение цитотоксической активности МЛ селезенок мышей.

4.26. Статистическая обработка данных.

ГЛАВА 5. Факторы, влияющие на адъювантные свойства производ-, ных хитозана при парентеральном введении инактивирован- < "ч ных гриппозных вацин.!

ГЛАВА 6. Сравнительное изучение адъювантных свойств препаратов хитозана при парентеральной иммунизации инактивирован-ной гриппозной вакциной.

ГЛАВА 7. Повышение иммуногенности холодоадаптированного

ХА) штамма-донора аттенуации для живых гриппозных вакцин.

ГЛАВА 8. Сравнительное изучение адъювантных свойств различных форм хитозана при мукозальной вакцинации живой и инакти-вированной гриппозными вакцинами.

ГЛАВА 9. Изучение иммунного ответа мышей, иммунизированных интраназально живой гриппозной холодоадаптированой (ХА) вакциной в комбинации с производными хитозана в качестве адъю-вантов.

9.1. Иммунофенотипические характеристики мононуклеарных лейкоцитов мышей интраназально иммунизированных ХА живой гриппозной вакциной в комбинации с производными хитозана в качестве адъювантов.

9.2. Влияние производных хитозана в составе ХА живой гриппозной вакцины на содержание ТЫ1-2, ТЫ1-4 и ТЫ1-9-экспресси-рующих клеток.

9.3. Влияние производных хитозана в составе ХА живой гриппозной вакцины на уровень цитокинов.

ГЛАВА 10. Особенности иммуногенного ответа при иммунизации мышей полимиелитиой вакциной в комбинации с препаратами хитозана в качестве адъювантов.

10.1. Влияние препаратов хитозана на иммунный ответ при парентеральном введении мышам этих препаратов в комбинации с инак-тивированными штаммами Сэбина полиовируса типов 1,2, 3.

10.2. Изучение иммунофенотипа мононуклеарных лейкоцитов мышей, иммунизированных парентерально инактивированным штаммом Сэбина 1 типа и инактивированной трехвалентной полиовакциной Имовакс в комбинации с препаратами хитозана.

10.3. Активация ТЬЯб в процессе парентеральной иммунизации мышей полиовирусом и полиомиелитной вакциной в комбинации с препаратами хитозана.

10.4. Цитотоксическая активность МЛ селезенок мышей.

10.5. Продукция цитокинов у мышей при парентеральной иммунизации мышей полиовирусом и полиомиелитной вакциной в комбинации с препаратами хитозана.

М . у- '

ГЛАВА 11. Воздействие производных хитозана на дифференцировку V 1 и функциональную активность дендритных клеток мышеи.

11.1. Влияние производных хитозана на экспрессию клеточных маркеров и ТЬЯб в культуре ДК мышей.

11.2. Влияние производных хитозана на уровень цитокинов в культуре

ДК мышей С57/ВЬ6.

ГЛАВА 12. Экспрессия эндоплазматических ТЫ^в в дендритных клетках человека под воздействием инактивированных и живых вирусных вакцин в сочетании с хитозаном.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Обоснование возможности использования производных хитозана для повышения иммуногенности гриппозных и полиомиелитных вакцин»

Актуальность темы. Инактивированные вирусные вакцины в течение последних 50 лет широко используются в борьбе с вирусными заболеваниями. Однако некоторые из них обладают серьезными недостатками. Так, в частности, гриппозные вакцины являются недостаточно эффективными для лиц пожилого возраста [102, 149, 128, 133] и не способны защищать от дрейфовых вариантов вируса гриппа [77, 92, 178]. С другой стороны, инактивированные полиомиелитные вакцины обладают относительно низкой иммуногенностью, и для создания прочного иммунитета против полиомиелита требуется многократная иммунизация.

В настоящее время для повышения эффективности вакцин в экспериментальных и клинических исследованиях применяют адъюванты различного происхождения: минеральные соли (гидроксид или фосфат алюминия и др.); растительные (сапонины - QuilA, QS21); микробные (убитые бактерии, липополисахарид и его производные, CpG-мотивы ДНК) и др. [132, 148].

Вследствие токсичности или недостаточной эффективности большинства адъювантов для широкого клинического использования разрешены только соли алюминия и водно-масляная эмульсия MF-59, а в некоторых странах вирусоподоб-¿и, ные частицы (VLP - virus-like particles) и иммуностимулирующий комплекс ,

1 f •> 1 ' КУ""'1 ' N , /I • 1 > v\ * ' < V ' " !>1 (ISCOM - immunostimulating complex) [180, 76]. Зарубежные коммерческие грип- ь позные вакцины выпускаются лишь с одним адъювантом MF-59, и такие вакцины оказались более иммуногенными при вакцинации пожилых лиц, однако, обладали повышенной реактогенностью [72, 112].

В литературе появились сообщения об использовании природного катионно-го полисахарида - хитозана в качестве мукозо-адгезивного адъюванта для инакти-вированных гриппозных и некоторых других вакцин, вводимых мукозально [72, 112, 113, 115, 183, 175, 175, 124, 155]. Хитозан является линейным полимером, состоящим из мономеров D-глюкозамина и М-ацетил-Б-глюкозамина, и отличающимся низкой токсичностью, биодеградируемостью и биосовместимостью. В последние годы было показано, что хитозан повышает эффективность инактивиро-ванных гриппозных и полиомиелитных вакцин при парентеральном введении [189, 99, 100]. Однако, несмотря на большой интерес к данному полимеру, многие аспекты иммунологической активности хитозана и его практического применения остаются до настоящего времени малоисследованными. Отсутствует информация о сравнительной адъювантной активности различных форм производных хитозана (растворимых, мелкодисперсных и.т.д.), а также о влиянии производных хитозана на врожденные механизмы иммунитета при парентеральной и мукозальной иммунизации инактивированными и живыми вирусными вакцинами.

Цель исследования: изучение адъювантных свойств производных хитозана на модели гриппозных и полиомиелитных вакцин с оценкой молекулярно-клеточ-ных механизмов их действия на эффекторы врожденного и адаптивного иммунитета.

Задачи исследования:

1. Исследовать адъювантные свойства производных хитозана различной химической природы.

2. Изучить влияние производных хитозана на активацию адаптивного иммунитета при иммунизации мышей инактивированными и живыми вирусными вакцинами.

3. Исследовать экспрессию Толл-подобных рецепторов дендритными клетками и спленоцитами мышей в ответ на введение инактивированных и живых вирусных вакцин в комбинации с производными хитозана в качестве адъювантов. , 4. Оценить цитокиновый профиль мышей при введении инактивированных и живых вирусных вакцин в комбинации с производными хитозана.

5. Определить особенности иммунофенотипа спленоцитов мышей при иммунизации инактивированными и живыми вирусными вакцинами в комбинации с препаратами хитозана.

Научная новизна работы

Впервые исследовано воздействие высокомолекулярного (ММ 200 Ша) глю-тамата хитозония и микро/наночастиц сульфата хитозония при парентеральном и мукозальном методах введения с инактивированными и живыми гриппозными вакцинами на стимуляцию врожденного и адаптивного иммунитета мышей. Установлена возможность повышения иммуногенности инактивированной полиомиелит-ной вакцины при включении в ее состав производных хитозана в качестве адъювантов.

Показано, что при парентеральном введении производных хитозана в комбинации с инактивированной гриппозной сплит-вакциной происходило усиление активации врожденного и адаптивного иммунитета у мышей, что проявлялось в экспрессии эндосомальных Толл-подобных рецепторов ДК (TLR7, TLR8, TLR9), индукции синтеза цитокинов в крови IL-12, INF-y, IL-17, IL-ip и IL-5; повышении численности Т (CD3, CD4, CD8, у5Т), В лимфоцитов (CD19, CD5), NK (CD16/32), NKT (CD3/NK), T-reg (CD4/CD25/Foxp3) клеток. Включение в состав полиомие-литных вакцин производных хитозана приводило к увеличению численности CD3, CD8, NK, CD3/NK, CD4/CD25/Foxp3 и yST позитивных клеток и ДК с экспрессией эндосомальных TLRs.

Выявлены общие закономерности цитокиного профиля при иммунизации животных инактивированными и живыми гриппозными и инактивированными по-лиомиелитными вакцинами: резкое повышение IL-12, умеренное повышение IFN-y и снижение TNF-a.

Установлено, что мукозальная иммунизация мышей живой гриппозной вакциной в комбинации с производными хитозана способствовала повышению уровней IgG и slgA в респираторном тракте мышей и препятствовала размножению вирулентного штамма вируса гриппа в легких мышей; увеличивала содержание TLR2 и t ' 1

ТЬЮ-экспрессирующих клеток, а также субпопуляций B1 (CD5) и Т-лимфоцитов (CD3, CD 8 и CD4) и NK.

Включение производных хитозана в состав инакгивированных гриппозных и полиомиелитных вакцин мобилизует различные звенья врожденного иммунитета, приводя к поляризации иммунного ответа по Thl-типу.

Научно-практическая значимость

Получено положительное решение Федерального Института промышленной собственности РФ на заявку № 2010114819/15 (020894) «Способ повышения имму-ногенности холодоадаптированного донора аттенуации для живых гриппозных вакцин» от 14.04.2010.

Показана целесообразность использования глютамата хитозония и суспензии микро/наночастиц сульфата хитозония для повышения иммуногенности и защитной эффективности инактивированных и живых гриппозных вакцин, активирующих мукозальный и системный иммунитет, при парентеральной иммунизации.

Включение в состав инакгивированной полиомиелитной вакцины модифицированных препаратов хитозана в качестве адъювантов, позволит повысить им-муногенность и защитную эффективность полиомиелитных вакцин.

Внедрение результатов исследования в практику

Материалы диссертационной работы включены в научно-экспериментальную работу лабораторий генетики РНК-содержащих вирусов и механизмов регуляции иммунитета ФГБУ «НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова» РАМН. Результаты исследований используются в циклах лекций курса «Вакцинопрофилак-тика» ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Выявлена зависимость адъювантных свойств производных хитозана от особенностей их химической природы при наибольшей активности глютамата хито-зония и микро/наночастиц сульфата хитозония, которые существенно не различались по адъювантным свойствам при введении с гриппозными и полиомиелитными вакцинами.

2. Введение производных хитозана в состав живых и инактивированных гриппозных вакцин способно повысить их иммуногенность и защитную эффективность. Введение производных хитозана в состав инактивированных полиовакцин повышает их иммуногенность.

3. Производные хитозана в составе вирусных вакцин при иммунизации животных приводят к повышению в крови количества Т и В лимфоцитов, клеток; уровня провоспалительных (1Ь-1р, 11.-6) и регуляторных (№N-7,1Ь-12,1Ь-17) цито-кинов и снижению Т№-а, что устраняет последствия иммуносупрессии, индуцированной вирусными вакцинами, и нейтрализует гиперактивацию иммунной системы при введении живых вакцин.

Апробация материалов диссертации и публикации

Основные материалы диссертационной работы доложены на: Международной конференции «Физиология и патология иммунной системы»(Москва, 2010); IX Конгрессе детских инфекционистов России (Москва, 2010), VII Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (2010), научно-практической конференции молодых учёных НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН (Москва, 2011), XIV Всероссийском форуме с международным участием им. академика В.И.Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2011), Международной научно-практической конференции «От теории - к практике: вопросы современной ветеринарии, биотехнологии и медицины» (Саратов, 2011), X Латино-американском конгрессе иммунологов (Перу, 2012).

Апробация диссертации состоялась 29 мая 2012 г на совместной конференции Кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, лаборатории механизмов регуляции иммунитета и лаборатории генетики РНК-содержащих вирусов ФГБУ «НИИВС им. И.И. Мечникова» РАМН.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13 работ, из них 5

1,1 л статей в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, девяти глав собственных исследований, заключения и выводов. Список цитируемой литературы включает 189 источников, из которых 68 отечественных работ. Работа изложена на 138 страницах машинописного текста, иллюстрирована 3 рисунками и 29 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Переверзев, Александр Дмитриевич

выводы

1. На модели инактивированиых гриппозных вакцин установлена высокая адъ-ювантная активность производных хитозана: глютамата хитозония (ММ 200 kDa) и микро/наночастиц сульфата хитозония.

2. Включение производных хитозана в состав инактивированиых гриппозных и полиомиелитных вакцин мобилизует различные звенья врожденного иммунитета и, в том числе, активирует эндосомальные рецепторы дендритных клеток (TLRs 3,7,8,9), приводя к поляризации иммунного ответа по Thl- типу.

3. На модели ХА штамма - донора атгенуации А/Краснодар/101/35/59 (H2N2) показана принципиальная возможность повышения иммуногенности и защитной эффективности живых гриппозных вакцин (ЖГВ) при включении в состав вакцины производных хитозана в качестве адъювантов.

4. При парентеральной иммунизации мышей гриппозными и полиомиелитными вакцинами в комбинации с производными хитозана обнаружены общие закономерности в формировании цитокинового профиля: повышение уровня IL-12 и IFN-y, а также снижение TNF-a в сыворотке крови и культуре спленоцитов мы ' , < W't, I I1'!1 1 i

ШеЙ. ' '

5. Иммунизация живыми и инактивированными вирусными вакцинами в сочетании с производными хитозана сопровождается иммунокорригирующим действием, что выражается в увеличении количества Т и В лимфоцитов, NK клеток, повышении уровня провоспалительных(1Ь-1р, IL-6) и регуляторных (IL-17, IL-12, IFN-y) цитокинов, а также снижении TNF-a и TGF-р в крови иммунизированных мышей. Данная активность устраняет последствия иммуносупрессии, индуцированной вирусными вакцинами, и нейтрализует гиперактивацию иммунной системы.

6. При парентеральном введении инактивированной гриппозной вакцины с производными хитозана выявлено повышение численности CD3, CD4, CD5, CD8, MHCII, CD3/NK, убТ, CD4/CD25/Foxp3 (T-reg) -экспрессирующих эффекторов, которые в наибольшей степени были выражены на 7 сутки второй иммунизации. Введение препаратов инактивированного полиовируса в сочетании с глютаматом хитозония повышает численность клеток с маркерами CD3, CD 8, MHCII, CD 19, yST, NK и T-reg.

7. При мукозальной иммунизация живой гриппозной вакциной в комбинации с производными хитозана происходила активация NK, у8Т CD4, CD71, В1-лимфоцитов (CD5) и увеличивалась продукция IgG и slgA в респираторном тракте мышей.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Переверзев, Александр Дмитриевич, 2012 год

1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемио-логическом благополучии населения»

2. СП 3.1.1.2343-08 «Профилактика полиомиелита в постсертификацонный период», утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 05.03.2008 № 16

3. Об усилении мероприятий по профилактике гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций. Приказ МЗ РФ №25 от 27. 01. 98 г.

4. Ахматова Н.К., Киселевский М.В. Врожденный иммунитет противоопухолевый и противоинфекционный. М.: Практическая медицина, 2008. - 256 С. •■ ' , ' • "И" 1 ' <1

5. Байер В.Е.П., Палаш A.M., Остерхаус А.Д.М.Е. Сравнение иммуногенности и реактогенности субъединичных, цельновирионных и расщепленных вакцин против гриппа. Вакцинопрофилактика.//Русский медицинский журнал. 2000. - №5. - том 8. - С.237-241.

6. Бектимиров Т.А. Экономические приоритеты вакцинопрофилакгики.// Вакцинация. 2000. - №7. - С.3-5.

7. Бектимиров Т.А. Тактика использования разных вакцин против грип-па.//Биопрепараты. 2002. - № 3(7). - С.8-11

8. Бектимиров Т.А. Вакцинопрофилактика гриппа.//Лечащий врач. 2005. - №9. -С.33-36

9. Бережная Н.М. Цитокиновая регуляция при патологии: стремительное развитие и неизбежные вопросы.//Цитокины и воспаление. 2007. - № 2. - С.3-8.

10. Бурцева Е.И., Слепушкин А.Н., Власова JI.H. и др. Сравнительное изучение ре-актогенности и иммуногенности инактивированных гриппозных вакцин у лиц пожилого возраста.//Журнал микробиол. 2000. - №5. - С.4-45.

11. Гендон Ю.З., Маркушин С .Г., Акопова И.И. и др. Аттенуированный холодо-адаптированный штамм вируса гриппа А(Н2М2)/Краснодар/101/35/59 для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины. Патент № 2354695 РФ.

12. Гендон Ю.З., Маркушин С.Г., Кривцов Г.Г. и др. Способ повышения иммуногенности инактивированной гриппозной вакцины. Патент № 2323742 РФ.

13. Гендон, Ю. 3 Мукозальные вирусные вакцины: успехи и проблемы.//Вопросы вирусологии. 2003. - №4. - С.4-10.

14. Гендон Ю.З. Преимущества и недостатки инактивированной и живой вакцины против гриппа. Обзор.//Вопросы вирусологии. 2004. - №4. - С. 4-12

15. Гендон Ю. 3. Вакцины и химиопрепараты для профилактики гриппа. Обзор.// Вопросы вирусологии. 2007. - №1. - С.4-10.

16. Гендон Ю.З., Маркушин С.Г., Кривцов Г.Г., Акопова И.И. Хитозан как адъ-ювант для инактивированных гриппозных вакцин, вводимых парентераль-но.//Вопросы вирусологии. 2008. - №5. - С.14-19

17. Гендон Ю. 3. Живая холодоадаптированная гриппозная вакцина: современное состояние. Обзор.//Вопросы вирусологии. 2011. - №1. - С.4-16.

18. Грачев В.П. Разработка и практическое применение вакцин для профилактики актуальных вирусных инфекций.//Вопросы вирусологии. 2005. - №3. - С.32-35.

19. Григорьева Е.П., Дорошенко Е.М., Руденко Л.Г. Современное состояние вакци-нопрофилактики гриппа с помощью живой гриппозной вакцины.//Эпидемиология и вакциопрофилактика. 2005. - №4. - С.13-16.

20. Демьянов A.B., Котов А.Ю., Симбирцев A.C. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике.//Цитокины и воспаление. -2003. -№3.~ С. 20-35.

21. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высш. Школа, 1991. - 288 С.

22. Железникова Г.Ф. Цитокины как предикторы течения и исхода инфекций.// Ци-токины и воспаление. 2009. - №1. - С.10-17.

23. Зверев В.В. Вакцинопрофилактика гриппа и эпидемический про-цесс.//Вакцинопрофилакгика гриппа. 2001. - №5(17). - С.З.

24. Иванова O.E. Вакциноассоциированный паралитический полиомиелит. // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2006. - №5. - С.42-48.

25. Кетлинский С.А., Симбирцев A.C. Цитокины. М: Фолиант, 2008. - 552 С.

26. Киселев О.И., Васильева И.А., Чепик Е.А. Роль лимфокинов в иммунном ответе при респираторных вирусных инфекциях.//Эпидемиология и инфекционные болезни. 2002 - №.5. - С.84-92.

27. Ковальчук Л.В., Хорева М.В., Варивода A.C. Врожденные компоненты имму-j^i jii^vJI/.i, • , нитета: ТоП;Подобные рецепторы в норме и при иммунопатологии.//Журн. микроf N Г<*'! 'биол.уимму& " "

28. Костинов М.П., Гурвич Э.В. Вакцины нового поколения в профилактике инфекционных заболеваний. М.: Медицина для всех, 2002. - 152 С.

29. Кравцов А.Л., Шмелькова Т.П., Клюева С.Н., Смолькова Е.А. Применение проточной цитометрии при разработке вакцин против особо опасных инфекций. Современные достижения и перспективы.//Эпидемиология и вакцинопрофилактика. -2011. №4. - С.53-60.

30. Красильников И.В., Гамбарян A.C., Машин В.В., Лобастова А.К. Иммуноген-ные и протективные свойства инактивированных и живых кандидатных вакцин против высокопатогенных вирусов гриппа H5N1.//Вопросы вирусологии. — 2011. — №4.-С. 10-18.

31. Лашкевич В.А.100 лет изучения вируса полиомиелита и неполиомиелитных эн-теровирусов.//Вопросы вирусологии. -2008. №4. - С.41-45.

32. Лашкевич В.А. 50 лет живой пероральной вакцине против полиомиелита.// Вопросы вирусологии. 2009. - №6. - С.44-48.

33. Лебединская Е.А., Лосева Л.Ф., Лебединская О.В.,. Ахматова Н.К, Семенова И.Б., Годовалов А.П., Киселевский М.В. Коррекция изменений цитотокинового профиля мышей с индуцированной иммуносупрессией.//Цитокины и воспаление. -2011.- №3.- С.23-26.

34. Меджитов Р., Джаневей Ч. Врожденный иммунитет./ЯСазанский мед. журн. -2005. T.LXXXV. -№3. - С.161-167.

35. Онищенко Г.Г., Пальцев М.А., Зверев В.В. и др. Биологическая биобезопасность М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2006. - 304 С.

36. Покровский В.И, Семенов Б.Ф. Вакцинопрофилактика. Итоги XX века и перспективы следующего столетия.//Журн. микробиолог. №5. - 1999. - С.6-8.

37. Полиомиелит. Информационный бюллетень ВОЗ №114. Февраль 2012.

38. Рекстин А.Р., Лу К., Кац Д., Руденко Л.Г. Особенности продукции ранних цитокинов in vivo после инфицирования вирусом гриппа А/Ленинград/134/57 (H2N2) и его холодоадаптированными атгенуированными вариантами.//Вопросы вирусологии. 2006. - №2. - С.27-30.

39. Романова Ю.Р. Генетические детерминанты инфекционности вируса гриппа и иммуногенности противогриппозных вакцин.//Автореферат дис. доктора биол. наук. СПб. - 2012. - 38 С.

40. Сейбиль В.Б. Как завершить ликвидацию полиомиелита.//Журн. микробиолог. -2002.- №2. С.107-113.

41. Сейбиль В.Б. Вируса полиомиелита ликвидировать невозможно. Почему?// Вопросы вирусологии. 2006. - №5. - С.48-50.

42. Сейбиль В.Б., Малышкина Л.П. Ликвидация вируса полиомиелита задача без видимого решения в ближайшие годы.//Вопросы вирусологии. - 2011. - №1. -С.41-43.

43. Семенов Б.Ф., Зверев В.В. Концепция создания быстрой иммунологической защиты от патогенов.//Журн. микробиол. 2007. - №4. - С.93-100.

44. Симбирцев A.C. Цитокины новая система регуляци защитных свойств.//Цитокины и воспаление. - 2002. - №1. - С.9-16.

45. Симбирцев A.C. Цитокины: классификация и биологические функции.// Цитокины и воспаление. 2004. - №2. - С. 16-22.

46. Симбирцев A.C. Цитокины: классификация и биологические функции.// Цитокины и воспаление. 2004. - №4. - С.38.

47. Симбирцев A.C. Физиология и патология иммунной системы.//Цитокины и воспаление. 2004. - №10. - С.3-10.

48. Симбирцев A.C. Толл-белки: специфические рецепторы неспецифического иммунитетам/Иммунология. 2005. - №26 (6). - С.368-376.

49. Чумаков K.M. Вакцины против полиомиелита: прошлое, настоящее, будущее. // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2010. - №4. - С.68-73.

50. Яковенко М.Л., Короткова Е.А. Эволюция вакцинных штаммов полиовируса. // Вопросы вирусологии. 2008. - №53 (3) - С.45-48.

51. Abe Т., Takahashi Н., Hamazaki Н. et al. Baculovirus induces an innate immune response and confers protection from lethal influenza virus infection in mice.//J. immunol. 2003. - V.171. - P.l 133-1139.

52. Akira S., Takeda K., Kaisho T. Toll-like receptors: critical proteins linking innate an-dacquired immunity .//Nat. Immunology. 2001. - V. 2 (8). -P.675-681.

53. Bacon A., Makin J., Sizer P.J., Jabbal-Gill I., Hinchcliffe M., Ilium L., Chatfield S., Roberts M. Carbohydrate biopolymers enhance antibody responses to mucosally delivered vaccine antigens .//Infect. Immun. 2000 - V.68. - P. 5764-5770.

54. Banchereau J. Immunobiology of dendritic cells.//Annu.Rev.Immunol. 2002. -V.18.-P.767-811.

55. Bates J., Honko A., Graff A. et al. Mucosal adjuvant activity of flagellin in aged mice.//Mech. Ageing. Dev. 2008.- V.129.-P.271-281.

56. Baudner B.C., Ronconi V., Casini D., Tortoli M., Kazzaz J., Singh M., Hawkins L.D., Wack A., O'Hagan D.T. MF59 emulsion is an effective delivery system for a synthetic TLR4 agonist (E6020).//Pharm Res. 2009. - V.26 (6). - P. 1477-1485.

57. Belshe R, Gruber W., Mendelman P. et al. Efficacy of vaccination with live attenuated, cold-adapted, trivalent, intranasal influenza virus vaccine against a variant A/Sydney not contained in the vaccine.//! Pediatr. 2000.- V.136.- P.168-175.

58. Bertram U., Bernard M.C., Haensler J., Maincent P., Bodmeier R. In situ gelling nasal inserts for influenza vaccine delivery .//Drug Dev Ind Pharm. 2010. - V.36 (5). -P.581-593.

59. Beyer W.E., Palache A.M., Osterhaus A.D. Comparison of Serology and Reactogen-icity between Influenza Subunit Vaccines and Whole Virus or Split Vaccines: A Review and Meta-Analysis of the Literature.//Clin Drug Investig.-1998.-V.15(l).- P.l-12.

60. Beyer W.E., de Bruijn I.A., Palache A.M., Westendorp R.G., Osterhaus A.D. Protection against influenza after annually repeated vaccination: a meta-analysis of serologic and field studies.//Arch Intern Med. 1999. - V.159 (2). - P.182-188.

61. Borges O., Silva M., de Sousa A., Borchard G., Junginger H.E., Cordeiro-da-Silva A. , „ Alginate coated chitosan nanoparticles are an effective subcutaneous adjuvant for hepati

62. V; ' tis B surface antigen.//Int. Immuriopharmacol. -2008. V^8 (13-14). - P.773-780.

63. Boyum A. Separation of leucocytes from blood and bone marrow.//Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1968. - V. 267. - P. 95-99.

64. Burton O.T., Zaccone P. The potential role of chitin in allergic reactions.//Trends Immunol. -2007. -Oct; 28(10). P. 419-22.

65. Clark H.F, Gurney A.L, Abaya E, et al. The secreted protein discovery initiative (SPDI), a large-scale effort to identify novel human secreted and transmembrane proteins: a bioinformatics assessment.//Genome Res. 2003. - V.13 (10). - P.2265-2270.

66. Cluff C., Baldridge J., Stover A. et al. Synthetic toll-like receptor 4 agonists stimulate innate resistance to infectious challenge.//Infect. Immunity. 2005. - V.73. - P.3044-3052.

67. Colonna M., Trinchieri G., Liu Y.J. Plasmacytoid dendritic cells in immunity .//Nat. Immunol. 2004. - V.5 (12). - P.1219-1226.

68. Condie R., Zak S., Good R. Effect of meningococcal endotoxin on the immune re-sponse.//Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1955. - V.90. -P.355-360.

69. Culter C.W., Jotwani R. Dendritic Cells at the Oral Mucosal Interface.//.!. Dent. Res. 2006. - V.85 (8). - P.678-689.

70. David A. Zaharoff, Connie J. Rogers, Kenneth W. Hance, Jeffrey Schlom, John W. Greiner. Chitosan solution enhances both humoral and cell-mediated immune responses to subcutaneous vaccination.//Vaccine. 2007. - V.25 (11). - P.2085-2094.

71. Davis S.S., Ilium L. Absorption enhancers for nasal drug delivery. Review.//Clin Pharmacokinet. 2003. - 42 (13). -P.l 107-1128.

72. Davis S.S. The use of soluble polymers and polymer microparticles to provide improved vaccine responses after parenteral and mucosal delivery .//Vaccine. 2006. - V. 24. -P.7-10. Review.

73. Doring G., Meisner C., Stern M. A double-blind randomized placebo controlled phase III study of Pseudomonas aeruginosa flagella vaccine in cystic fibrosis pa-tients.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2007. - V.104. - P.l 1020-11025.

74. Didierlaurent A., Goulding J., Patel S. et al. Sustained desensitization to bacterial Toll-like receptor ligands after resolution of respiratory influenza infection.//JEM. -2008. V.205. - P.323-329.

75. Dupuis M., Murphy T., Higgins D. et al. Dendritic cells internalize vaccine adjuvant after intramuscular injection.//Cell Immunol. 1998. - V.186. - P. 18-27.

76. Fischer H., Widdicombe J.H., Illek B. Acid secretion and proton conductance in human airway epithelium.//Am J Physiol Cell Physiol. 2002. - V.282 (4). - P.736-743.

77. Fujihashi K., Koga T., van Ginkel F.W., Hagiwara Y., McGhee J.R. A dilemma for mucosal vaccination: efficacy versus toxicity using enterotoxin-based adju-vants.//Vaccine. 2002. - V.20 (19-20). - P.2431-2438. Review.

78. Ghendon Y., Markushin S., Krivtsov G., Akopova I. Chitosan as an adjuvant for par-enterally administered inactivated influenza vaccines.//Arch Virol. 2008. -153(5). -P.831-837.

79. Ghendon Y., Markushin S., Akopova I., Koptiaeva I., Krivtsov G. Chitosan as an adjuvant for poliovaccine.//J. Med Virol. -2011- V.83 (5) P.847-852.

80. Gorden K., Gorski K., Gibson S. et al. Synthetic TLR agonists reveal functional differences between human TLR 7 and TLR 8.//J. Immunol. 2005. - V.174. - P.1259-1268.

81. Gross P.A., Hermogenes A.W., Sacks H.S., Lau J., Levandowski R.A. The efficacy of influenza vaccine in elderly persons. A meta-analysis and review of the litera-ture.//Ann Intern Med. 1995. - V.123 (7). - P.518-527.

82. Hagan D.T., Wack A, Podda A. MF-59 is asafe and potent vaccine adjuvant for flu vaccines in humans: what did we leam during its development.//Clin. Pharmacol Ther. -2007. V.82. - P.740-744.

83. Heil F., Hemmi H., Hochrein H. et al. Species-specific recognition of single -stranded RNA via toll-like receptors 7 and 8.//Science. 2004. - V.303. - P.1526-1529.

84. Hemmi H., Kaisho T., Takeuchi O. et al. Small anti-viral compounds activate immune cells via the TLR7 MyD88-dependent signaling pathway .//Nat. Immunol. 2002. -V.3.-P. 196-200.

85. Hoebe K., Jiang Z., Tabeta K., Du X., Georgel P., Crozat K., Beutler B. Genetic analysis of innate immunity .//Adv. Immunol. 2006. - V.91. - P. 175-226. Review.

86. Honko A.N., Mizel S.B. Mucosal administration of flagellin induces innate immunity in the mouse lung.// nfect. Immun. 2004. - V.72(l 1). - P.6676-6679.

87. Hornef M.W., Wick M.J., Rhen M., Normark S. Bacterial strategies for overcoming host innate and adaptive immune responses.//Nat. Immunol. 2002. - V.3. - P.1033-1040.

88. Hornef M. W. The role of ephitelial TLR expression in host defense and microbial tolerance.//J. Endotoxin Researche. 2005. - V.l 1. - P.124-128.

89. Ilium L. Chitosan and its use as a pharmaceutical excipient.//Pharm Res. 1998. -V.l5 (9). -P.1326-1331. Review. 1 ' " V/\ . > 1

90. Ilium L., Davis S.S. Nasal vaccination: a non-invasive vaccine delivery method that holds great promise for the future.//Adv Drug Deliv Rev.- 2001. V.51(l-3)-P.l-3.

91. Ilium L. Nasal clearance in health and disease. Review.//J. Aerosol Med. 2006. -V.l9 (1). -P.92-99.

92. Ilium L. Nanoparticulate systems for nasal delivery of drugs: a real improvement over simple systems? Review.//J. Pharm Sci. 2007. - V. 96 (3). -P.473-483.

93. Ilium L. Nasal drug delivery recent developments and future prospects.//J Control Release. - 2012. - V.161(2). - P.254-263. Review.

94. Ishinohe T., Tamura S., Kawaguchi A. et al. Cross-protection against H5N1 influenza virus infection is afforded by intranasal inoculation with seasonal trivalent inactivated influenza vaccine.//J. infect.dis. 2007. - V.196. - P.1313-1320.

95. Iwanaga S., Lee B.L. Recent advances in the innate immunity of invertebrate ani-mals.//J. Bio-chem. Mol. Biol. 2005. - V.38 (2). - P.128-150.

96. Ivanov A., Dragunsky E., Chumakov K. 1,25- dihydroxyvitamin D3 enhances systemic and mucosal immune responses to inactivated poliovirus vaccine in mice.//J. Inf. Dis. 2006. - V.193. - P.598-600.

97. Jabbal-Gill I. Nasal vaccine innovation.//Drug Target. 2010. - V.l8(10). -P.771-786.

98. Janeway C.A. Jr, Yagi J., Conrad P.J., Katz M.E., Jones B., Vroegop S., Buxser S. T-eell responses to Mis and to bacterial proteins that mimic its behavior.//Immunol Rev.- 1989. V.107. -P.61-88. Review.

99. Kabir S. The Role of Interleukin-17 in the Helicobacter pylori induced infection and Immunity .//Helicobacter. 2011. - 16. - P. 1-8.

100. Kadowaki N., Ho S., Antonenko S. et al. Subsets of human dendritic cell precursors express different Toll-like receptors and respond to different microbial antigens.//J. Exp. Med. V. 2005. - P.863-869.

101. Kang M.L., Cho C.S., Yoo H.S. Application of chitosan microspheres for nasal delivery of vaccines./ZBiotechnol. Adv. 2009. - V.27. - P.857-865.

102. Kendal A., Pereira M., Skehel J. Concepts and procedures for laboratory-based influenza surveillance.//WHO Collaborating Centers for Reference and Research on Influenza Geneva Switzerland. -1984.

103. Kew O.M., Wright P.F., Agol V.I., Delpeyroux F., Shimizu H. et al. Circulating vaccine-derived polioviruses: current state of knowledge.//Bulletin of the World Health Organization. 2004. - V.82 (1). - P. 16-23.

104. Khatri K., Goyal A.K., Gupta P.N. Plasmid DNA loaded chitosan nanoparticles for nasal mucosal immunization against hepatitis B.//Int. J. Pharm. 2008. - V.354. -P.235-241.

105. Klinman D., Xie H., Little S. et al. CpG oligonucleotides improve the protective immune response induced by the anthrax vaccination of rhesus macaques.//Vaccine. -2004.-V.22.- P.2881-2886.

106. Kobiyama K., Takeshita F., Ishii K. et al. A signaling polypeptide derived from an innate immune adaptor molecule can be harnessed as a new class of vaccine adjuvant.//J. Immunol. 2009. - V. 182. - P. 1593-1601.

107. Kopecky-Bromberg S.A., Fraser K.A., Pica N., Carnero E., Moran T.M., Franck R.W., Tsuji M., Palese P. Alpha-C-galactosylceramide as an adjuvant for a live attenuated influenza virus vaccine.//Vaccine. 2009. -V.27 (28). - P.3766-3774.

108. Kositanont U., Assantachai P., Wasi C., Puthavathana P., Praditsuwan R. Kinetics of the Antibody Response to Seasonal Influenza Vaccination Among the Elderly .//Viral Immunol. 2012. - Oct. 12. Epub ahead of print.

109. Koyama S., Ishii K., Kumar H. et al. Differential role of TLR- and RLR -signaling in the immune responses to influenza A virus infection and vaccination.//J. Immunol. -2007. V.179. - P.4711-4720.

110. Kumar H., Koyama S., Ishii K.J. et al. Cutting edge: cooperation of IPS-1 and TRIF -dependent pathways in poly IC-enhanced antibody production and cytotoxic T cell responses.//J. Immunol. 2008. - V.180. - P.683-687.

111. Li H., Willingham S., Ting J., Re F. Cutting edge: inflammasome activation by alum and alum's adjuvant effect are mediated bu NLRP3.//J. Immunol. 2008. - V.181. - P. 17-21.

112. McSorley S J., Ehst B.D., Yu Y., Gewirtz A.T. Bacterial flagellin is an effective adjuvant for CD4+ T cells in vivo.// J. Immunol. 2002. - V.l 169 (7). - P.3914-3919.

113. Mi F.L. Synthesis and characterization of a novel chitosan-gelatin bioconjugate with fluorescence emission./ZBiomacromolecules. -2005. V.6 (2). -P.975-987.

114. Mosca F., Tritto E., Muzzi A.et al. Molecular and cellular signatures of human vaccine adjuvants.//Proc. Natl. Acad. Sci.USA.- 2008.- V.105.- P.10501-10506.

115. Mostow S.R., Hopkins J.A., Wright P.F. Behavior of vaccine revertants of temperature-sensitive mutants of influenza virus in ferret tracheal organ culture.//Infection and Immunity. 1979. - V.26 (1). -P.193-196.

116. Müllbacher A.Cell-mediated; cytotoxicity in recovery from poxvirus infec-; tions.//Rev Med Virol. 2003. - V.13 (4). - P.223-232. Review.

117. Nagai H., Cambronne E.D., Kagan J.C. et al. A C-terminal translocation signal required for Dot/lcm-dependent delivery of the Legionella RalF protein to host cells.//Proc. Natl Acad Sci USA. 2005.- V.18.- P.826-831.

118. Odoom J.K., Yunus Z., Dunn G., Minor P.D., Martm J. Changes in population dynamics during long-term evolution of sabin type 1 poliovirus in an immunodeficient pa-tient.//Journal of Virology. 2008. - V.82 (18). - P.9179-9190.

119. O'Hagan D.T, De Gregorio E. The path to a successful vaccine adjuvant- the long and winding road.//Drug Discov Today. 2009. - V.14 (11-12). - P.541-551. Review.

120. Olafsdottir TA, Lingnau K, Nagy E, Jonsdottir I. IC31, a two-component novel adjuvant mixed with a conjugate vaccine enhances protective immunity against pneumococcal disease in neonatal mice.//Scand J. Immunol. 2009. - V.69 (3). - P. 194-202.

121. Palache A.M. Influenza vaccines. A reappraisal of their use.//Drugs. 1997-V.54 (6). - P.841-856. Review.

122. Palache A.M., Beyer W.E., Osterhaus A.D. Influenza vaccine dosages.//Vaccine. -2008.- V.26 (19).- P.2305-2306.

123. Pawar D., Goyal A.K., Mangal S., Mishra N., Vaidya B., Tiwari S., Jain A.K., Vyas S.P. Evaluation of mucoadhesive PLGA microparticles for nasal immunization.// AAPS J. -2010. V.12 (2). - P.130-137.

124. Podda A. The adjuvanted influenza vaccine with novel adjuvants: experience with the MF 59 adjuvanted vaccine.//Vaccine. - 2001.- V.19.-P.2637-2680.

125. Podda A., Del Guidice G. MF 59-adjuvanted vaccines: increase immunogenicity with an optimal safety profile.//Expertr Rev Vaccines. 2003. - V.2. - P. 197-204.

126. Porporatto C., Bianco I.D., Correa S.G. Local and systemic activity of the poply-saccharide chitosan at lymphoid tissues after oral administration.//J. Leukocyte Biology.- 2005.-V.78.-P.715-723.

127. Prego C., Paolicelli P., Díaz B., Vicente S., Sánchez A., González-Fernández A., Alonso M.J. Chitosan-based nanoparticles for improving immunization against hepatitis B infection.//Vaccine. 2010. - V.28 (14). - P.2607-2614.

128. Racaniello V.R. One hundred years of poliovirus pathogenesis.//Virology. 2006.- V.344 (1). P.9-16.

129. Read R.C., Naylor S.C., Potter C.W., Bond J., Jabbal-Gill I., Fisher A., Ilium L., Jennings R. Effective nasal influenza vaccine delivery using chitosan.//Vaccine. 2005.- V.23(35). P.4367-4374.

130. Rossi S., Marciello M., Sandri G.,'Bonferoni M.C., Ferrari F., Caramella C. Chitosan ascorbate: a chitosan salt with improved penetration enhancement proper-ties.//Pharm Dev. Technol. 2008. - V.13 (6). - P.513-521.

131. Rock FL., Hardiman G., Timans J.C., Kastelein R.A., Bazan J.F. A family of human receptors structurally related to Drosophila Toll.//Proc. Natl Acad Sci U S A. -1998.-V.95 (2). -P.588-593.

132. Sadler A., Williams B. Interferon-inducible antiviral effectors.// at. Rev. Immunol.- 2008.- V.8. -P.559-568.

133. Sayin B., Somavarapu S., Li X.W., Thanou M., Sesardic D., Alpar H.O., Senel S. Mono-N-carboxymethyl chitosan (MCC) and N-trimethyl chitosan (TMC) nanoparticles for non-invasive vaccine delivery.//Int J Pharm. 2008. - V.363 (1-2). - P. 139-148.

134. Schmidt A.C, Couch R.B., Galasso G.J., Hayden F.G., Mills J., Murphy B.R., Chanock R.M. Current research on respiratory viral infections.//Third International Symposium Antiviral Res. 2001.- V.50(3)-P. 157-196. Review

135. Seo S., Lee K., Byun Y. et al. Immediate and broad-spectrum protection against heterologous and heterotypic lethal challenge in mice by live influenza vac-cine.//Vaccine. 2007.- V.25.-P.8067-8076.

136. Sharp F., Ruane D., Claass B. et al. Uptake of particulate vaccine adjuvants by dendritic cells activates the NALP3 inflammasome.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2009. - V.106. - P.870-875.

137. Shinya K., Ito M., Makino A., Tanaka M., Miyake K., Eisfeld A.J., Kawaoka Y. The TLR4-TRIF pathway protects against H5N1 influenza virus infection.//J Virol. -2012.- V.86 (1). -P.19-24.

138. Slutter B., Bal S.M., Que I., Kaijzel E., Lowik C., Bouwstra J., Jiskoot W. Antigen-adjuvant nanoconjugates for nasal vaccination: an improvement over the use of na-noparticles?//Mol Pharm. 2010. - V.7 (6). - P.2207-2215.

139. Sui Z., Chen Q., Fang F., Zheng M., Chen Z. Cross-protection against influenza virus infection by intranasal administration of Ml-based vaccine with chitosan as an ad-juvant.//Vaccine. 2010. - V.28 (48). - P.7690-7698.

140. Teijaro J., Walsh K., Cahalan S.et al. Endothelial cells are central orchestrators of cytokine amplification during influenza virus infection.//Cell. 2011. - V.146. - P. 980991.

141. Thanou M., Verhoef J.C., Junginger H.E. Chitosan and its derivatives as intestinal absorption enhancers //Adv Drug Deliv Rev. 2001. - V.50. - P.91-101. Review.

142. Thanou M., Verhoef J.C., Junginger H.E. Oral drug absorption enhancement by chitosan and its derivatives./Adv. Drug Deliv Rev. 2001. - V.52 (2). - P. 117-126. Review.

143. Thompson W.W., Shay D.K., Weintraub E., Brammer L., Bridges C.B., Cox N.J., Fukuda K. Influenza-associated hospitalizations in the United States.//JAMA. 2004. -V.292(l 1). - P.1333-1340.

144. Tscherne D., Garcia-Sastre A. Virulence determinants of pandemic influenza vi-ruses.//J.of clinic investigations. 2011.- V.121.-P.6-13.

145. Valiante N.M., O'Hagan D.T., Ulmer J.B. Innate immunity and biodefence vac-cines.//Cell Microbiol. 2003. - V.5(l 1). - P.755-760. Review.

146. Van Campen H. Influenza A virus replication is inhibited by tumor necrosis factor alpha in vitro.//Arch. Virol. 1994. - V.136. - P.439-446.

147. Van der Lubben I., Verhoef I., Borchard G. et al. Chitosan and its derivatives in mucosal drug and vaccine delivery .//J. Pharm. Sci. 2001. - V.14. - P.201-207.

148. Van der Lubben I.M., Kersten G., Fretz M.M. et al. Chitosan microparticles for mucosal vaccination against diphteria oral and nasal efficacy studies in mice.//Vaccine. -2003. V.38. - P.1400-1408.

149. Washington N., Steele R.J., Jackson S.J., Bush D., Mason J., Gill D.A., Pitt K., Rawlins D.A. Determination of baseline human nasal pH and the effect of intranasally administered buffers.// nt J Pharm. 2000. - V.198 (2). - P.139-146.

150. Wong J., Christopher M., Viswanathan S. et al. Activation of toll-like signaling pathway for protection against influenza virus infection.//Vaccine. 2009. - V.27. -P.3481-3483.

151. WHO Influenza reagent kit for identification of influenza isolates. WHO Geneva Switzerland-2004. ' ' < ' < '

152. WHO. Global Influenze Surveillance Netwoek. Manual for the laboratorydiagno-sis and virological surveillance of influenze. WHO, Geneva. 2011.

153. Yang C, Shi H., Zhou J., et al. CpG oligodeoxynucleotids are a potent adjuvant for an inactivated polio vaccine produced from Sabin strains of poliovirus.//Vaccine. 2008. - V.27. - P.6558-6563.

154. Zaharoff D.A, Rogers C.J., Hance K.W., Schlom J., Greiner J.W. Chitosan solution enhances both humoral and cell-mediated immune responses to subcutaneous vac-cination.//Vaccine. 2007. - V.25 (11). - P.2085-2094.