Обнаружение и характеристика инсулиноподобных пептидов нервной ткани моллюска Anodonta cygnea тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Шипилов, Валерий Николаевич

• Шипилов, Валерий Николаевич
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шипилов, Валерий Николаевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 СТРУКТУРА И ФУНКЦИИ ГОРМОНОВ СУПЕРСЕМЕЙСТВА ИНСУЛИНА ПОЗВОНОЧНЫХ ЖИВОТНЫХ.

1.1.1. Семейство инсулина.

1.1.2. Семейство ИФР-1.!.

1.1.3. Семейство ИФР-И.

1.1.4. Семейство релаксина.

1.1.5. Сигнальные пути действия гормонов инсулинового суперсемейства.

1.2. ИНСУЛИНОПОДОБНЫЕ ПЕПТИДЫ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ БЕСПОЗВОНОЧНЫХ ЖИВОТНЫХ.

1.2.1. Структурно-функциональная организация ИПП беспозвоночных.

1.2.2. Клетки нервной системы, продуцирующие ИПП.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ЖИВОТНЫЕ.

2.2. ВЫЯВЛЕНИЕ ИНСУЛИН-ИММУНОРЕАКТИВНЫХ КЛЕТОК В ГАНГЛИЯХ МОЛЛЮСКА ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИМ МЕТОДОМ.

2.3. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ КОМПЬЮТЕРНЫЙ АНАЛИЗ мРНК ИПП РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ БЕСПОЗВОНОЧНЫХ.

2.4. ПОДБОР ПРАЙМЕРОВ И АМПЛИФИКАЦИЯ мРНК МОЛЛЮСКА С ПОМОЩЬЮ ПЦР-АНАЛИЗА.

2.5. ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА РИП ИЗ НЕРВНОЙ ТКАНИ МОЛЛЮСКА.

2.6. ПОЛУЧЕНИЕ ФРАКЦИИ ПЛАЗМАТИЧЕСКИХ МЕМБРАН ПЕЧЕНИ КРЫС.

2.7. ПОЛУЧЕНИЕ ГЕТЕРОГЕННОЙ ФРАКЦИИ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН МОЗГА КРЫС.

2.8. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОГО СВЯЗЫВАНИЯ РИП МОЛЛЮСКА С РЕЦЕПТОРАМИ ИНСУЛИНА И ИФР-1.

2.9. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АДЕНИЛАТЦИКЛАЗЫ И ГТФ-СВЯЗЫВАНИЯ В МЫШЕЧНОЙ И НЕРВНОЙ ТКАНЯХ.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ.

3.1. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ В ГАНГЛИЯХ МОЛЛЮСКА НЕЙРОНОВ, СОДЕРЖАЩИХ ПЕПТИДЫ, РОДСТВЕННЫЕ ИНСУЛИНУ.

3.2. АМПЛИФИКАЦИЯ УЧАСТКОВ мРНК, ПРЕДПОЛОЖИТЕЛЬНО КОДИРУЮЩИХ РИП МОЛЛЮСКА.

3.3. ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА РОДСТВЕННЫХ ИНСУЛИНУ ПЕПТИДОВ МОЛЛЮСКА.

3.4. ОЦЕНКА СПОСОБНОСТИ РИП МОЛЛЮСКА ВЗАИМОДЕЙСТВОВАТЬ С РЕЦЕПТОРАМИ ИНСУЛИНА И ИФР-1.

3.5. ВЛИЯНИЕ РИП МОЛЛЮСКА НА АКТИВНОСТЬ АДЕНИЛАТЦИКЛАЗЫ И ГТФ-СВЯЗЫВАНИЯ О-БЕЛКОВ.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. КЛЕТКИ, СИНТЕЗИРУЮЩИЕ РОДСТВЕННЫЕ ИНСУЛИНУ ПЕПТИДЫ В ГАНГЛИЯХ А СУвЫЕА.

4.2. ПРИРОДНЫЕ ВАРИАНТЫ ГОРМОНОВ ИНСУЛИНОВОГО СУПЕРСЕМЕЙСТВА КАК ОТРАЖЕНИЕ СТРУКТУРНОГО ПОЛИМОРФИЗМА ПЕПТИДОВ.

4.3. ПЛЕЙОТРОПНОСТЬ ДЕЙСТВИЯ НЕЙРОПЕПТИДОВ БЕСПОЗВОНОЧНЫХ КАК ПРИЗНАК ДИВЕРГЕНЦИИ ФУНКЦИЙ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Обнаружение и характеристика инсулиноподобных пептидов нервной ткани моллюска Anodonta cygnea»

Актуальность проблемы. Обнаружение инсулина, инсулиноподобных факторов роста (ИФР), релаксина и их рецепторов в ЦНС позвоночных привело к изменению представлений о происхождении и роли гормонов инсулинового суперсемейства (Бондарева и др., 1988; Бондарева, Лейбуш, 1997; Havrankova et al., 1978а; Baskin et al., 1988; McKelvie et al., 1992; Sytze van Dam et al., 2004). Однако, несмотря на идентификацию и выявление экспрессии генов инсулиноподобных пептидов (ИПП) в нервной ткани, их биологические свойства и функции изучены недостаточно. Таким образом, установление природы и роли ИПП, синтезируемых нервной тканью, остается одной из актуальных проблем современной нейроэндокринологии.

Известно, что обнаруженные в нервной ткани гормоны инсулинового суперсемейства регулируют утилизацию глюкозы по аутокринному и паракринному типу, а также осуществляют в ЦНС нейромодуляторные и нейромедиаторные функции (Schwartz et al., 1992; Schwartz, 2000). В их компетенцию также входят некоторые анаболические и анти-апоптотические функции, контроль процессов роста, дифференцировки нейронов и синаптогенеза, участие в регуляции пищевого поведения и ряда когнитивных функций (Баркан и др.,1992; Schechter et al., 1999; Woods et al., 2000; Park, 2001; Carro et al., 2003; Bondy, Cheng, 2004; McGowan et al., 2005). Что касается нейрокринной продукции гормонов инсулинового суперсемейства, то она показана для ИФР и релаксина, тогда как сведения, позволяющие однозначно ответить на вопрос о синтезе инсулина в ЦНС позвоночных до сих пор отсутствуют (Plisetskaya et al., 1993). Синтез инсулина у позвоночных показан только в эмбриональной нервной ткани (Schechter et al., 1990; Devaskar et al., 1994).

Значительные успехи в изучении проблемы достигнуты в исследованиях на беспозвоночных, у которых основным местом синтеза ИПП является нервная ткань. С помощью методов молекулярной биологии расшифрованы гены, кодирующие ИПП, установлена первичная структура этих пептидов у представителей нескольких типов беспозвоночных, включая круглых червей, моллюсков и членистоногих (Robitzki et al., 1989; Hetru et al., 1991; Kondo et al., 1996; Smit et al., 1998; Floyd et al., 1999; Brogiolo et al., 2001; Li et al., 2003; Krieger et al., 2004). Принципиальное сходство структурной организации ИПП беспозвоночных с инсулином позволило включить эти молекулы в инсулиновое суперсемейство. Однако, в силу особенностей аминокислотной последовательности, нейропептиды беспозвоночных выделены в отдельную группу, и степень родства данных пептидов с другими членами суперсемейства инсулина еще предстоит выяснить.

Особенностью ИПП беспозвоночных является полиморфизм генов, кодирующих множественные изоформы, что практически не встречается у позвоночных. Число изоформ пептидов, синтезируемых нейронами отдельных видов, может колебаться от 2 (моллюск Aplysia californica) до 38 (нематода Caenorhabditis elegans). Различия аминокислотных последовательностей между изоформами могут превышать 50 %, что предполагает разнонаправленность их действия. Немногочисленные данные свидетельствуют о проявлении метаболических и рост-стимулирующих эффектов ИПП нервной ткани беспозвоночных, однако, регуляторная роль большинства известных пептидов во многом остается не выясненной (Claeys et al., 2002).

В данной работе впервые выявлена локализация инсулиноподобных пептидов в ганглиях пресноводного двустворчатого моллюска Anodonta cygnea, показана способность нейронов к их синтезу, проведены выделение и очистка из ганглиев пептидов, обозначенных нами как родственные инсулину пептиды (РИП), оценена способность полученных РИП связываться с рецепторами инсулина и ИФР-I, а также влияние пептидов на активность аденилатциклазной сигнальной системы, реализующей действие гормонов инсулинового суперсемейства.

Цели и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось обнаружение и характеристика родственных инсулину пептидов в нервной ткани моллюска Апо^Ша су^еа.

В соответствии с этим в конкретные задачи входило:

1. Установить локализацию клеток, синтезирующих инсулиноподобные пептиды в ганглиях с помощью иммуногистохимического метода и показать присутствие мРНК, кодирующих пептиды моллюска.

2. Выделить с помощью ионообменной и высокоэффективной жидкостной хроматографий родственные инсулину пептиды из трех видов нервных ганглиев моллюска.

3. Дать сравнительную характеристику функциональных свойств выделенных пептидов, оценив их способность связываться с рецепторами инсулина и ИФР-1 тканей позвоночных, а также по регуляторному эффекту пептидов на внутриклеточный аденилатциклазный сигнальный каскад.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Обнаружение в нервных ганглиях моллюска А. cygnea клеток, содержащих пептиды, взаимодействующие с антителами к инсулину позвоночных, позволяет констатировать, что в нейронах этого вида присутствуют субстанции родственные инсулину.

2. Выделение РИП из ганглиев А. су^пеа по оригинальной схеме получения инсулина и последующая ВЭЖХ очистка подтверждает присутствие в нервной ткани этого вида моллюска пептидов, сходных с инсулинами позвоночных.

3. Оценка способности РИП, полученных из ганглиев А. cygnea, взаимодействовать с рецепторами инсулина и ИФР-1 в специфичных радиолигандных тест-системах дает основание считать исследуемые пептиды функционально близкими к гормонам инсулинового суперсемейства. В тоже время, низкое относительное сродство

РИП моллюска к обоим типам рецепторов свидетельствует о значительных отличиях их структур от стандартных инсулина свиньи и ИФР-1 человека.

4. Способность РИП моллюска стимулировать активность аденилатциклазы и ГТФ-связывающей активности О-белков, оказывая сопоставимые с инсулином и ИФР-1 эффекты, указывает на возможность осуществления их регуляторных эффектов через аденилатциклазную сигнальную систему.

Научная новизна

1. Впервые выявлена локализация родственных инсулину пептидов в нервной системе моллюска А су^еа

2. Впервые из нервной ткани представителя беспозвоночных, двустворчатого моллюска А су^еа, выделены и очищены родственные инсулину пептиды.

3. Впервые проведена оценка биологических и функциональных свойств родственных инсулину пептидов, присутствующих в клетках ганглиев моллюска А су^иея.

Теоретическое и практическое значения работы

Выявление в нервной ткани моллюска А. судреа пептидов, обладающих свойствами, как инсулина, так и ИФР-1, является вкладом в развитие представлений об эндокринной функции нервной ткани и представляется важным для понимания генезиса и эволюции регуляторных систем, продуцирующих инсулиноподобные пептиды.

Характеристика биологических свойств РИП, полученных из ганглиев А. су%пеа в тест-системах млекопитающих позволяет приблизиться как к пониманию природы и роли этих субстанций, так и проиллюстрировать структурно-функциональную дивергенцию гормонов суперсемейства инсулина в филогенезе.

Обнаружение у моллюсков пептидов, обладающих свойствами инсулина и ИФР-1, в практическом плане может быть использовано для гормональной стимуляции роста и развития в процессе выращивания марикультур беспозвоночных.

Апробация работы

Результаты исследования доложены на Седьмой региональной конференции международного общества нейробиологии беспозвоночных (Калининград-Светлогорск-Отрадное, 2003); Международной научной конференции «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов (Петрозаводск, 2004); Двадцать второй конференции европейских сравнительных эндокринологов (Уппсала, Швеция, 2004); Седьмой Всероссийской конференции «Нейроэндокринология-2005» (С-Петербург, 2005).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 6 научных статей в рецензируемых российских и иностранных журналах и 5 тезисов докладов.

Личный вклад автора

Все экспериментальные данные, приведенные в диссертационной работе, получены лично автором или при его непосредственном участии.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методического раздела, результатов, обсуждения, заключения и выводов. Работа изложена на 105 страницах, включая 20 рисунков и 6 таблиц. Список цитируемой литературы содержит 212 ссылок.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Шипилов, Валерий Николаевич

ВЫВОДЫ

1. В цереброплевральных, педальных и висцеропариетальных ганглиях пресноводного моллюска АпойоШа су^еа выявлены нейроны, содержащие пептиды, способные взаимодействовать с антителами к инсулину позвоночных. Расположение инсулин-иммунореактивных клеток не имело упорядоченности, характерной для более высокоорганизованных беспозвоночных животных. Результаты ПЦР-анализа по выявлению мРНК, кодирующих родственные инсулину пептиды моллюска, показали различия в экспрессии ПЦР-продуктов в отдельных видах ганглиев.

2. Родственные инсулину пептиды выделены из ганглиев моллюска А. сурреа с применением оригинального метода ионообменной хроматографии используемого для получения инсулина. Очистка пептидов с помощью двуступенчатой высокоэффективной жидкостной хроматографии выявила 19 пептидных изоформ, различающихся по величине относительной гидрофобности (30-50 % концентрации ацетонитрила в сравнении с 39% инсулина), что косвенно отражает различия первичных структур отдельных изоформ.

3. Полученные РИП моллюска при тестировании в видоспецифичной радиолигандной системе инсулина проявили принципиальную способность взаимодействия с рецептором инсулина позвоночных, при этом отдельные пептидные изоформы значительно различались по степени сродства к рецептору инсулина (Ю50 17-1700 нМ).

4. РИП моллюска при тестировании в радиолигандной системе ИФР-1 проявили способность конкурировать за связывание с рецептором ИФР-1. Показано, что большинство пептидов моллюска взаимодействовали с рецептором ИФР-1 с более высоким сродством, чем с рецептором инсулина.

5. РИП дозозависимо стимулировали активность аденилатциклазы и ГТФ-связывания в мышечной и нервной тканях моллюска, оказывая эффекты сопоставимые с инсулином и ИФР-1. При этом выявлена ткане- и видоспецифичность действия РИП. Использование синтетических пептидов соответствующих С-концевым участкам альфа-субъединиц О-белков показало, что пептиды моллюска могут действовать как через О-белки стимулирующего типа (РИП1), так и через другие типы О-белков (РИП7).

6. Выявленный функциональный полиморфизм и предполагаемое структурное разнообразие РИП моллюска свидетельствуют в пользу того, что эти пептиды являются одной из ключевых точек дивергенции гормонов инсулинового суперсемейства.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Из результатов настоящей работы следует, что, как и у других видов беспозвоночных, нервная ткань моллюска способна синтезировать РИП, которые обнаруживаются в клетках коркового слоя ганглиев. Неупорядоченное расположение этих клеток в отличие от более высокоорганизованных беспозвоночных позволяет говорить о присутствии у данного вида начального этапа развития системы синтезирующей инсулиноподобные пептиды.

С использованием хроматографических методов, из ганглиев А. су^га было выделено 19 изоформ РИП. Полученные РИП проявили способность связываться с рецепторами инсулина и ИФР-1 млекопитающих, что предполагает присутствие на данном этапе филогенеза инсулиноподобных молекул, обладающих ростовыми и метаболическими функциями. Однако более высокое сродство РИП к рецепторам ИФР-1 свидетельствует о преобладании у нейропептидов моллюска ростовой активности. Для дальнейшей характеристики выделенных пептидов было показано участие аденилатциклазной системы, в передаче гормонального сигнала РИП. Отдельные пептиды оказали дозозависимое стимулирование активности АД и ГТФ-связывания О-белков сходным с инсулином и ИФР-1 образом, что свидетельствует о консервативности механизмов передачи сигнала кодируемого ИПП в разных филетических линиях.

Становится все более очевидным, что молекулярная эволюция относительно небольших инсулиноподобных молекул и систем, обеспечивающих их функционирование, происходили в крайне детерминированных условиях, ограничивающих вариации структуры этих пептидов. Филогенетические изменения гормонов инсулинового суперсемейства можно условно разделить на «макро-» и «микроэволюционные». Макроуровень отражает изменения структуры пептидов, связанные с приобретением новых функций и затрагивающие не только гормон, но и структуры обеспечивающие передачу гормонального сигнала, что в конечном итоге приводит к появлению из общего пептида-предшественника инсулина, ИФР и релаксина. Микроуровень оперирует изменениями, как правило, не затрагивающими участки молекулы гормона, ответственные за связывающие места с рецептором, что позволяет пептиду сохранять принадлежность к определенному семейству.

Макро- и микроэволюционные модификации инсулиноподобных гормональных молекул и обеспечивающих их функционирование систем, прослеживается на примере исследованных нами РИП моллюска А. су^пеа. В первую очередь, на это указывает множественность пептидных изоформ, обладающих инсулиновой и ИФР-подобной активностью, что можно считать свидетельством в пользу существования на ранних этапах филогенеза белка-предшественника общего для гормонов инсулинового суперсемейства.

Выявленная способность множественных изоформ РИП моллюска взаимодействовать с рецепторами инсулина и ИФР-1 говорит о принципиальной возможности осуществления сходных с гормонами позвоночных эффектов, что свидетельствует о консервативности конкретных функциональных свойств, сохраненных в процессе эволюции.

Дальнейшее изучение функций и установление структуры РИП моллюска могут оказаться существенными как для понимания регуляторной роли этих нейропептидов, так и эволюции гормонов инсулинового суперсемейства.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шипилов, Валерий Николаевич, 2005 год

1. Баркан Р. С., Бондарева В. М., Русаков Ю. И. Митогенное влияние инсулина, выделенного из мозга млекопитающих, на клетки Swiss ЗТЗ // Цитология. 1992. Т.34. С. 84-89.

2. Бландел Т., Джонсон Л. Кристаллография белка. М.: Мир. 1979. 620 С.

3. Бондарева В. М., Лейбуш Б. Н. Инсулин мозга и его рецепторы в условиях естественного голодания у рыб и круглоротых // Журн. эвол. биохим. и физиол. 1997. Т. 33. С. 23-28.

4. Бондарева В. М., Лейбуш Б. Н., Русаков Ю. И. Выделение инсулина из ткани мозга крыс и его биологическая характеристика // Нейрохимия. 1988. Т. 7. С. 268273.

5. Верещагин С. М., Лапицкий В. П. Нейрофизиология беспозвоночных. Л.: изд-во Ленингр. ун-та. 1982. 96 С.

6. Гребенщиков Ю. Б., Мошковский Ю. Ш. Физико-химические свойства, структура и функциональная активность инсулина. М.: «Биоорганическая химия» (Итоги науки и техники. ВИНИТИ АН СССР). 1986.Т. 7. 296 С.

7. Колычев А. П. Инсулиноподобный фактор роста II (ИФР-П). Место среди регуляторных пептидов суперсемейства инсулина // Журн. эвол. биохим. и физиол. 2000. Т. 36. С. 69-82.

8. Лейбсон Л. Г. Успехи и проблемы эволюционной эндокринологии // Журн. эвол. биохим. и физиол. 1981. Т. 17. С. 116-126.

9. Лейбуш Б. Н., Чистякова О. В. Рецептор инсулиноподобного фактора роста-1 в тканях моллюска Anodonta cygnea II Журн. эвол. биохим. и физиол. 2003. Т. 39. С. 128-133.

10. Осадчук М.А., Киричук В.Ф., Кветной И.М. Диффузная нейроэндокринная система: общебиологические и гастроэнтерологические аспекты. Саратов : изд-во Саратовского мед. ун-та. 1996. 128 С.

11. Перцева М. Н, Шпаков А. О. Консервативность инсулиновой сигнальной системы в эволюции беспозвоночных и позвоночных животных // Журн. эвол. биохим. и физиол. 2002. Т. 38. С. 430-441.

12. Перцева М. Н., Шпаков А. О., Плеснева С. А. Современные достижения в изучении сигнальных механизмов действия инсулина и родственных ему пептидов //Журн. эвол. биохим. и физиол. 1996. Т. 32. С. 318-339.

13. Русаков Ю. И., Бондарева В. М., Карасев В. С., Лейбуш Б. Н., Баркан Р. С., Перцева М. Н. Некоторые биохимические характеристики инсулиноподобного вещества двустворчатого моллюска Anodonta cygnea II Биохимия. 1991. Т. 56. С. 718-726.

14. Русаков Ю.И., Бондарева В.М. Выделение и очистка инсулинов горбуши Oncorhynchus gorbuscha и минтая Theragra chalcogramma. 1979. Журн. эвол. биохим. физиол. Т. 15. С. 136-140.

15. Adamo М., Roberts С. Т. Jr., LeRoith D. How distinct are the insulin and insulinlike growth factor I signalling systems? // Biofactors. 1992. V. 3. P. 151-157.

16. Ailion M., Inoue Т., Weaver С. I., Holdcraft R. W., Thomas J. H. Neurosecretory control of aging in Caenorhabditis elegans II Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1999. V. 96. P. 7394-7397.

17. Amoui M, Craddock B.P., Miller W.T. Differential phosphorylation of IRS-1 by insulin and insulin-like growth factor I receptors in Chinese hamster ovary cells // J. Endocrinol. 2001. V. 171. P. 153-162.

18. Baccari, M. C., Calamai F. Relaxin: new functions for an old peptide // Curr. Protein Pept. Sci. 2004. V. 5. P. 9-18.

19. Baker J., Liu J-P., Robertson E. J., Efstratiadis A. Role of insulin-like growth factors in embryonic and postnatal growth // Cell. 1993. V. 75. P. 73-82.

20. Barbieri M., Bonafe M., Franceschi C., Paolisso G. Insulin/IGF-I-signaling pathway: an evolutionarily conserved mechanism of longevity from yeast to humans // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2003. V. 285. P. 1064-1071.

21. Baron V., Kaliman P., Gautier N., Van Obberghen E. The insulin receptor activation process involves localized conformations changes // J. Biol. Chem. 1992. V. 267. P. 23290-23294.

22. Baskin D. G., Wilcox B. J., Figlewicz D. P., Dorsa D. M. Insulin and insulin-like growth factors in the CNS // Trends Neurosci. 1988. V. 11. P. 107-111.

23. Bathgate R. A., Samuel C. S., Burazin T. C., Gundlach A. L., Tregear G. W. Relaxin: new peptides, receptors and novel actions // Trends Endocrinol. Metab. 2003. V. 14. P. 207-213.

24. Baxter R. C. Insulin-like growth factor binding proteins in the human circulation: a review // Horm. Res. 1994. V. 42. P. 140-144.

25. Bedarkar S., Turnell W. G., Blundell T. L., Schwabe C. Relaxin has conformational homology with insulin //Nature. 1977. V. 270. P. 449-451.

26. Blundell T. L., Bedarkar S., Humbel R. E. Tertiary structures, receptor binding, and antigenicity of insulin like growth factors // Fed. Proc. 1983. V. 42. P. 2592-2597.

27. Blundell T. L., Bedarkar S., Rinderknecht E., Humbel R. E. Insulin-like growth factor: a model for tertiary structure accounting for immunoreactivity and receptor binding // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1978. V. 75. P. 180-184.

28. Bondy C. A., Cheng C. M. Signaling by insulin-like growth factor 1 in brain // Eur. J. Pharmacol. 2004. V. 490. P. 25-31.

29. Brogiolo W., Stocker H., Ikeya T., Rintelen F., Fernandez R., Hafen E. An evolutionarily conserved function of the Drosophila insulin receptor and insulin-like peptides in growth control // Curr. Biol. 2001. V. 11. P. 213-221.

30. Bryant-Greenwood G. D., Schwabe C. Human relaxins: chemistry and biology // Endocr. Rev. 1994. V. 15. P. 5-26.

31. Burazin T. C., Bathgate R. A., Macris M., Layfield S., Gundlach A. L., Tregear G. W. Restricted, but abundant, expression of the novel rat gene-3 (R3) relaxin in the dorsal tegmental region of brain // J. Neurochem. 2002. V. 82. P. 1553-1557.

32. Butler A.A., Yakar S, Gewolb I.H., Karas M, Okubo Y, LeRoith D. Insulin-like growth factor-I receptor signal transduction: at the interface between physiology and cell biology. Comp. Biochem. Physiol. B Biochem. Mol. Biol. 1998. V. 121. P. 19-26.

33. Cao Q-P., Duguay S. J., Plisetskaya E. M., Steiner D. F., Chan S. J. Nucleotide sequence and growth hormone regulated expression of salmon insulin-like growth factor-I mRNA // Mol. Endocrinol. 1989. V. 3. P. 2005-2010.

34. Carro E, Trejo J. L, Nunez A, Torres-Aleman I. Brain repair and neuroprotection by serum insulin-like growth factor I // Mol. Neurobiol. 2003. V. 27. P. 153-162.

35. Chan C., Brown M. R. Localization of an insulin-like peptide in brains of two flies. // Cell Tissue Res. 2001. V. 304. P. 317-321.

36. Chan S. J., Nagamatsu S., Cao Q-P., Steiner D. F. Structure and evolution of insulin-like growth factors in chordates // Prog. Brain Res. 1992. V. 92. P. 15-24.

37. Chassin D., Laurent A., Janneau J.L., Berger R., Bellet D. Cloning of a new member of the insulin gene superfamily (INSL4) expressed in human placenta // Genomics. 1995. V. 29. P. 465-470.

38. Chen C., Jack J., Garofalo R. S. The Drosophila insulin receptor is required for normal growth//Endocrinology. 1996. V. 137. P. 846-856.

39. Claeys I., Simonet G., Poels J., Van Loy T., Vercammen L., De Loof A., Vanden Broeck J. Insulin-related peptides and their conserved signal transduction pathway // Peptides. 2002. V. 23. P. 807-816.

40. Clancy D. J., Gems D., Harshman L. G., Oldham S., Stacker H., Hafen E., Leevers S. J., Partridge L. Extension of life-span by loss of CHICO\^Drosophila insulin receptor substrate protein // Science. 2001. V. 292. P. 104-106.

41. Collip J. B. The demonstration of an insulin-like substance in the tissues of the clam

42. Myct arenaria) II J. Biol. Chem. 1923. V. 55. P. 39-39.

43. Conklin D., Lofton-Day C. E., Haldeman B. A., Ching A., Whitmore T. E., Lok S., Jaspers S. Identification of INSL5, a new member of the insulin superfamily // Genomics. 1999. V. 60. P. 50-56.

44. Conlon J. M. Evolution of the insulin molecule: insight into structure-activity and phylogenetic relationships // Peptides. 2001. V. 22. P. 1183-1193.

45. Conlon J. M., Bondareva V., Rusacov Y., Plisetskaya E. M., Mynarcik D. C., Whittaker J. Characterization of insulin, glucagon and somatostatin from river lamprey, Lampetra fluviatilis II Gen. Comp. Endocrinol. 1995. V. 100. P. 96-105.

46. Conn P. J, Kazmareck L. K. The bag cell neurons of Aplysia. Mol. Neurobiol. 1989. V. 3. P. 237-273.

47. Conover C. A. In vitro studies of insulin-like growth factor I and bone // Growth Horm. IGF Res. 2000. Y. 10. P. 107-110.

48. Constancia M., Hemberger M., Hughes J., Dean W., Ferguson-Smith A., Fundele R., Stewart F., Kelsey G., Fowden A., Sibley C., Reik W. Placental-specific IGF-II is a major modulator of placental and fetal growth // Nature. 2002. V. 417. P. 945-948.

49. Cooke R. M, Harvey T. S, Campbell I. D. Solution structure of human insulin-like growth factor 1: a nuclear magnetic resonance and restrained molecular dynamics study // Biochemistry. 1991. V. 30. P. 5484-5491.

50. Daughaday W. H, Rotwein P. Insulin-like growth factors I and II. Peptide, messenger ribonucleic acid and gene structures, serum, and tissue concentrations // Endocr. Rev. 1989. V. 10. P. 68-91.

51. D'Ercole A. J., Ye P., O'Kusky J. R. Mutant mouse models of insulin-like growth factor actions in the central nervous system // Neuropeptides. 2002. V. 36. P. 209-220.

52. Devaskar S.U., Giddings S.J., Rajakumar P.A., Carnaghi L.R., Menon R.K., Zahm D.S. Insulin gene expression and insulin synthesis in mammalian neuronal cells // J. Biol. Chem. 1994. V. 269. P. 8445-8454.

53. Duguay S. J., Chan S. J., Mommsen T. P., Steiner D. F. Divergence of insulin-like growth factors I and II in the elasmobranch, Squalus acanthias IIFEBS Lett. 1995. V. 71. P. 69-72.

54. Duguay S. J., Milewski W. M., Young B. D., Nakayama K., Steiner D. F. Processing of wild-type and mutant proinsulin-like growth factor-IA by subtilisin-related proprotein convertases // J. Biol. Chem. 1997. V. 272. P. 6663-6670.

55. Dupont J., Holzenberger M. Biology of insulin-like growth factors in development // Birth Defects Res. Part C: Embryo Today. 2003. V. 69. P. 257-271.

56. Duret L., Guex N., Peitsch M. C., Bairoch A. New insulin-like proteins with atypical disulfide bond pattern characterized in Caenorhabditis elegans by comparative sequence analysis and homology modeling // Genom Res. 1998. V. 8. P. 348-353.

57. Fawcett J., Rabkin R. The processing of insulin-like growth factor-I (IGF-I) by a cultured kidney cell line is altered by IGF-binding protein-3 // Endocrinology. 1995. V. 136. P. 1340-1347.

58. Ferlin A., Foresta C. Insulin-like factor 3: a novel circulating hormone of testicular origin in humans //Ann. N. Y. Acad. Sci. 2005. V. 1041. P. 497-505.

59. Fernandez R., Tabarini D., Azpiazu N., Frasch M., Schlessinger J. The Drosophila insulin receptor homolog: a gene essential for embryonic development encodes two receptor isoforms with different signaling potential // EMBO J. 1995. V. 14. P. 33733384.

60. Fernandez-Almonacid R., Rosen O. M. Structure and ligand specificity of the Drosophila melanogaster insulin receptor // Mol. Cell. Biol. 1987. V. 7. P. 2718-2727.

61. Fullbright G., Lacy E. R., Bullesbach E. E. Bombyxin: an insect neurohormone targets the ovaries in Lepidoptera // SAAS Bull. Biochem. Biotechnol. 1997a. V. 10. P. 37-41.

62. Fullbright G., Lacy E. R., Bullesbach E. E. The prothoracicotropic hormone bombyxin has specific receptors on insect ovarian cells // Eur. J. Biochem. 1997b. V. 245. P. 774-780.

63. Garofalo R. S., Rosen O. M. Tissue localization of Drosophila melanogaster insulin receptor transcripts during development // Mol. Cell. Biol. 1988. V. 8. P. 1638-1647.

64. Gerisch B., Weitzel C., Kober-Eisermami C., Rottiers V., Antebi A. A hormonal signaling pathway influencing C. elegans metabolism, reproductive development, and life span//Dev. Cell. 2001. V. 1. P. 841-851.

65. Gerozissis K. Brain insulin: regulation, mechanisms of action and functions // Cell. Mol. Neurobiol. 2003. V. 23. P. 1-25.

66. Gregoire F. M., Chomiki N., Kachinskas D., Warden C. H. Cloning and developmental regulation of a novel member of the insulin-like gene family in Caenorhabditis elegans II Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. V. 249. P. 385-390.

67. Guo Z. Y., Jia X. Y., Feng Y. M. Replacement of the interchain disulfide bridge-forming amino acids A7 and B7 by glutamate impairs the structure and activity of insulin //Biol. Chem. 2004.V. 385. P. 1171-1175.

68. Hajos F. An improved method for the preparation of synaptosomal fractions in high purity // Brain Res. 1975. V. 93. P. 485-489.

69. Havrankova J., Schmechel D., Roth J., Brownstein M. Identification of insulin in rat brain // Proc. Nat. Acad. Sci. 1978a. V. 75. P. 5737-5741.

70. Havrankova J., Roth J., Brownstein M. Insulin receptors are widely distributed in the central nervous system of the rat //Nature. 1978b. V. 272. P. 827-829.

71. Hawkes C., Kar S. The insulin-like growth factor-II/mannose-6-phosphate receptor: structure, distribution and function in the central nervous system // Brain Res. Rev. 2004. V. 44. P. 117-140.

72. Hayes E. S. Biology of primate relaxin: a paracrine signal in early pregnancy? // Reprod. Biol. Endocrinol. 2004. V. 2. P.36.

73. Heidenreich K. A., Zahniser N. R., Berhanu P., Brandenburg D., Olefsky J. M. Structural differences between insulin receptors in the brain and peripheral target tissues //J. Biol. Chem. 1983. V. 258. P. 8527-8530.

74. Hetra C., Li K. W., Bulet P., Lagueux M., Hoffman J. A. Isolation and structural characterization of an insulin-related molecule, a predominant neuropeptide from Locusta migratoria II Eur. J. Biochem. 1991. V. 201. P. 495-499.

75. Hisaw F. L. Experimental relaxation of the pubic ligament of the guinea pig // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1926. V. 23. P. 661-663.

76. Hodgkin D. C. Insulin molecules: the extend our knowledge // Pure a. Appl. Chem. 1971. V. 26. P. 375-384.

77. Hua Q., Nagasawa S. H., Wilken J., Ramos R. R., Jia W., Bass J., Weiss M. A. A divergent INS protein in Caenorhabditis elegans structurally resembles human insulin and activates the human insulin receptor // Genes Dev. 2003. V. 17. P. 826-831.

78. Ikeya T., Galic M., Belawat P., Nairz K., Hafen E. Nutrient-dependent expression of insulin-like peptides from neuroendocrine cells in the CNS contributes to growth regulation in Drosophila // Curr. Biol. 2002. V. 12. P. 1293-1300.

79. Ishizaki H., Suzuki A. The brain secretory peptides that control moulting and metamorphosis of the silkmoth Bombyx mori II Int. J. Dev. Biol. 1994.V. 38. P. 301-310.

80. Ivell R, Anand-Ivell R, Bartsch O. Relaxin signaling from natural receptors // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2005a. V. 1041. P. 280-287.

81. Ivell R., Bathgate R. A. Reproductive biology of the relaxin-like factor (RLF/INSL3) // Biol. Reprod. 2002. V. 67. P. 699-705.

82. Ivell R., Einspanier A. Relaxin peptides are new global players // Trends Endocrinol. Metab. 2002. V. 13. P. 343-348.

83. Ivell R., Hartung S., Anand-Ivell R. Insulin-like factor 3: where are we now? // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2005b. V. 1041. P. 486-496.

84. Iwami M., Furuya I., Kataoka H. Bombyxin-related peptides: cDNA structure and expression in the brain of the hornworm Agrius convolvili II Insect. Biochem. Mol. Biol. 1996. V. 26. P. 25-32.

85. Jonas E. A., Knox R. J., Kaczmarek L. K., Schwartz J. H., Solomon D. H. Insulin receptor in Aplysia neurons: characterization, molecular cloning, and modulation of ion currents // J. Neurosci. 1996. V. 16. P. 1645-1658.

86. Jonas E. A., Knox R. J., Smith T. C., Wayne N. L., Connor J. A., Kaczmarek L. KRegulation by insulin of a unique neuronal Ca2+ pool and of neuropeptide secretion // Nature. 1997. V. 385. P. 343-346.

87. Jones J. I, Clemmons D. R. Insulin-like growth factors and their binding proteins: biological actions // Endocr. Rev. 1995. V. 16. P. 3-34.

88. Kahn C. R. The molecular mechanism of insulin action. Annu Rev Med. 1985. V. 36. P. 429-451.

89. Kavsan V. M, Petrenko O. I. Evolution of insulin genes and their introns // Folia Biol. 1984. Y. 30. P. 65-71.

90. Kawano T., Ito Y., Ishiguro M., Takuwa K., Nakajima T., Kimura Y. Molecular cloning and characterization of a new insulin/IGF-like peptide of the nematode Caenorhabditis elegans II Biochem. Biophys. Res. Com. 2000. V. 273. P. 431-436.

91. Khandwala H. M, McCutcheon I. E., Flyvbjerg A., Friend K. E.The effects of insulin-like growth factors on tumorigenesis and neoplastic growth // Endocr. Rev. 2000. V. 21 P. 215-244.

92. Kidwai A. M., Radcliffe M. A., Lee E. Y., Daniel E. E. Isolation and properties of skeletal muscle plasma membrane // Biochim. Biophys. Acta. 1973. V. 298. P. 593-607.

93. Kimura K. D., Tissenbaum H. A., Liu Y., Ruvkun G. daf-2, an insulin receptor-like gene that regulates longevity and diapause in Caenorhabditis elegans II Science. 1997. V. 277. P. 942-946.

94. Kimura-Kawakami M., Iwami M., Kawakami A., Nagasawa H., Suzuki A., Ishizaki H. Structure and expression of bombyxin-related peptide genes of the moth Samia cynthia ricini II Gen. Comp. Endocrinol. 1992. V. 86. P. 257-268.

95. Krieger M. J., Jahan N., Riehle M. A., Cao C., Brown M. R. Molecular characterization of insulin-like peptide genes and their expression in the African malaria mosquito, Anopheles gambiae II Insect Mol. Biol. 2004. V. 13. P. 305-315.

96. Kuznetsova L, Plesneva S, Deqabina N, Omeljaniuk E, Pertseva M. On the mechanism of relaxin action: the involvement of adenylyl cyclase signalling system // Regul. Pept. 1999. V. 80. P. 33-39.

97. Lagueux M., Lwoff L., Meister M., Goltzene F., Hoffmann J. A. cDNAs from neurosecretory cells of brains of Locusta migratoria (Insecta, Orthoptera) encoding a novel member of the superfamily of insulins // Eur. J. Biochem. 1990. V. 187. P. 249-254.

98. Leevers S. J. Growth control: Invertebrate insulin surprises! // Current Biol. 2001. V. 11. P. 209-212.

99. LeRoith D., Baserga R., Helman L., Roberts C. T. Jr. Insulin-like growth factors and cancer // Arm. Intern. Med. 1995. V. 122. P. 54-59.

100. LeRoith D., Lesniak M. A., Roth J. Insulin in insects and annelids // Diabetes. 1981. V. 30. P. 70-76.

101. LeRoith D., Shiloach J., Heffron R., Rubinovitz C., Tanenbaum R., Roth J. Insulin-related material in microbes: similarities and differences from mammalian insulins // Can. J. Biochem. Cell. Biol. 1985. Y. 63. P. 839-849.

102. Li K. W., Geraerts W. P. M. Isolation and chemical characterization of a novel insulin-related neuropeptide from the freshwater snail, Lymnea stagnalis // Eur. J. Biochem. 1992. V. 205. P. 675-678.

103. Li W., Kennedy S. G., Ruvkun G. daf-28 encodes a C. elegans insulin superfamily member that is regulated by environmental cues and acts in the DAF-2 signaling pathway // Genes Dev. 2003. V. 17. P. 844-858.

104. Liu C, Chen J, Sutton S, Roland B, Kuei C, Farmer N, Sillard R, Lovenberg TW. Identification of relaxin-3/INSL7 as a ligand for GPCR142 //J. Biol. Chem. 2003.V. 278. P. 50765-50770.

105. Lomedico P., Rosenthal N., Efstratidadis A., Gilbert W., Kolodner R., Tizard R. The structure and evolution of the two nonallelic rat preproinsulin genes // Cell. 1979. V. 18. P. 545-558.

106. Lowry O. H., Rosenbrough N. J., Farr A. L., Randall R. J. Protein measurements with folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. V. 193. P. 265-275.

107. Marin-Hincapie M., Garofalo R. S. The carboxyl terminal extension of the Drosophila insulin receptor homologue binds IRS-1 and influences cell survival // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. P. 24987-24994.

108. Masumura M., Satake S., Saegusa H., Mizoguchi A. Glucose stimulates the release of bombyxin, an insulin-related peptide of the silkworm Bombyx mori II Gen. Comp. Endocrinol. 2000. V. 118. P. 393-399.

109. Mathews L. S., Norstedt G., Palmiter R. D. Regulation of Insulin-Like Growth Factor I Gene Expression by Growth Hormone // PNAS. 1986. V. 83. P. 9343-9347.

110. McCulloch D., Gems D. Body size, insulin/IGF signaling and aging in the nematode Caenorhabditis elegans II Exp. Gerontol. 2003. V. 38. P. 129-136.

111. McGowan B.M., Stanley S.A., Smith K.L., White N.E., Connolly M.M., Thompson E.L., Gardiner J.V., Murphy K.G., Ghatei M.A., Bloom S.R. Central relaxin-3 administration causes hyperphagia in male Wistar rats // Endocrinology. 2005. V. 146. P. 3295-3300.

112. Mclntire W. E., MacCleery G., Garrison J. C. The G protein beta subunit is a determinant in the coupling of Gs to the beta 1-adrenergic and A2a adenosine receptors // J. Biol. Chem. 2001. V. 276. P. 15801-15809.

113. McKelvie P. A., Rosen K. M., Kinney H. C., Villa-Komaroff L. Insulin-like growth factor II expression in the developing human brain // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1992. V. 51. P. 464-471.

114. Meglasson M. D., Matschinsky M. F. Pancreatic islet glucose metabolism and regulation of insulin secretion // Diabetes Metab. 1986. V. 2. P. 163-214.

115. Meneses P., De los Angeles Ortiz M. A protein from Drosophila melanogaster with insulin-like activity // Comp. Biochem. Physiol. 1975. V. 51. P. 483-485.

116. Murray-Rust J., McLeod A. N., Blundell T. L., Wood S. P. Structure and evolution of insulins: implications for receptor binding // Bioessays. 1992. V. 14 P. 325-331.

117. Nakae J., Kido Y., Accili D. Distinct and overlapping functions of insulin and IGF-I receptors //Endocr. Rev. 2001. V. 22. P. 818-835.

118. Neville D. M. Jr. Isolation of an organ specific protein antigen from cell-surface membrane of rat liver // Biochim. Biophys. Acta. 1968. V. 154. P. 540-552.

119. Nijhout H. F., Grunert L. W. Bombyxin is a growth factor for wing imaginal disks in Lepidoptera // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. V. 99. P. 15446-15450.

120. O'Dell S. D., Day I. N. Insulin-like growth factor II (IGF-II) // Int. J. Biochem. Cell. Biol. 1998. V. 30. P. 767-771.

121. Ohlsson C., Sjogren K., Jansson J. O., Isaksson O. G. The relative importance of endocrine versus autocrine/paracrine insulin-like growth factor-I in the regulation of body growth // Pediatr. Nephrol. 2000. V. 14. P. 541-543.

122. Oldham S., Stocker H., Laffargue M., Wittwer F., Wymann M., Hafen E. The Drosophila insulin/IGF receptor controls growth and size by modulating PtdInsP(3) levels // Development. 2002. Y. 129. P. 4103-4109.

123. Osheroff P. L., Ling V. T., Vandlen R. L., Cronin M. J., Lofgren J. A. Preparation of biologically active 32P-labeled human relaxin. Displaceable binding to rat uterus, cervix, and brain 11 J. Biol. Chem. 1990. V. 265. P. 9396-9401.

124. Panchenko M. P., Hoffenberg S. I., Tkachuk V. A. Purification and some properties of GTP-binding proteins from pig heart plasma membranes // Biomed. Biochim. Acta. 1987. V. 46. P. 452-455.

125. Park C.R. Cognitive effects of insulin in the central nervous system // Neurosci. Biobehav. Rev. 2001. V. 25. P. 311-323.

126. Perks C. M., Peters A. R., Wathes D. C. Follicular and luteal expression of insulinlike growth factors I and II and the type 1 IGF receptor in the bovine ovary // J. Reprod. Fertil. 1999. V. 116. P. 157-165.

127. Plisetskaya E. M., Bondareva V. M., Duan C., Duguay S. J. Does salmon brain produce insulin? // Gen Comp.Endocrinol. 1993. V. 91. P. 74-80.

128. Polak J. M., Van Noorden S /(eds.) Immunocytochemistry, practical applications in pathology and biology. Bristol.: John Wright and Sons. 1983.

129. Porte D. Jr., Baskin D. G., Schwartz M. W. Insulin signaling in the central nervous system: a critical role in metabolic homeostasis and disease from C. elegans to humans // Diabetes. 2005. V. 54. P. 1264-1276.

130. Rajah R., Khare A., Lee P. D., Cohen P. Insulin-like growth factor-binding protein-3 is partially responsible for high-serum-induced apoptosis in PC-3 prostate cancer cells // J. Endocrinol. 1999. V. 163. P. 487-494.

131. Recio-Pinto E., Ishii D. N. Effects of insulin, insulin-like growth factor-II and nerve growth factor on neurite outgrowth in cultured human neuroblastoma cells // Brain Res. 1984. V. 302. P. 323-334.

132. Riehle M. A., Brown M. R. Insulin stimulates ecdysteroid production through a conserved signaling cascade in the mosquito Aedes aegypti // Insect Biochem. Mol. Biol. 1999. V. 29. P. 855-860.

133. Riehle M. A., Brown M. R. Insulin receptor expression during development and a reproductive cycle in the ovary of the mosquito Aedes aegypti II Cell Tissue Res. 2002. V. 308. P. 409-420.

134. Riehle M. A., Brown M. R. Molecular analysis of the serine/threonine kinase Akt and its expression in the mosquito Aedes aegypti II Insect Mol. Biol. 2003. V. 12. P. 225232.

135. Riehle M. A., Garczynski S. F., Crim J. W., Hill C. A., Brown M. R. Neuropeptides and peptide hormones in Anopheles gambiae II Science. 2002. V. 298. P. 172-175.

136. Rinderknecht E., Humbel R. E. The amino acid sequence of human insulin-like growth factor-I and its structural homology with proinsulin // J. Biol. Chem. 1978a. V. 253. P. 2769-2776.

137. Rinderknecht E., Humbel R. E. Primary structure of human insulin-like growth factor-II // FEBS. Lett. 1978b. V. 89. P. 283-286.

138. Robitzki A., Schroder H. C., Ugarkovic D., Pfeifer K., Uhlenbruck G., Muller W. E. Demonstration of an endocrine signaling circuit for insulin in the sponge Geodia cydonium If EMBO J. 1989. V. 8. P. 2905-2909.

139. Roovers E., Vincent M. E., van Kesteren E., Geraerts W. P., Planta R. J., Vreugdenhil E., van Heerikhuizen H. Characterization of a putative molluscan insulin-related peptide receptor // Gene. 1995. V. 162. P. 181-188.

140. Rosen C. J. Serum insulin-like growth factors and insulin-like growth factor-binding proteins: clinical implications // Clin. Chem. 1999. V. 45. P. 1384-1390.

141. Ruan Y. C., Chen Y., Garofalo R. S. The Drosophila insulin receptor contains a novel carboxyl-terminal extention likely to play an important role in signal transduction // J. Biol. Chem. 1995. V. 270. P. 4236-4243.

142. Rusakov Y. I., Moriyama S., Bondareva V. M., Kolychev A. P., Amemiya Y., Yasuda A., Kawauchi H. Isolation and characterization of insulin in Russian sturgeon Acipenser guldenstaedti II J. Peptide Res. 1998. V. 51. P. 395-400.

143. Rusakov Yu. I., Karasev V. S., Bondareva V. M., Pertseva M. N., Pankov Yu. A. Isolation, primary structure, and biological and immunological properties of pink and chum salmon insulins // Comp. Biochem. Physiol. 1990. V. 95. P. 477-482.

144. Salomon Y., Londos C., Rodbell M. A highly sensitive adenylate cyclase assay // Anal. Biochem. 1974. V. 58. P. 541-548.

145. Sanger F. Chemistry of insulin // Science. 1959. V.129. P. 1340-1344.

146. Schechter R, Abboud M, Johnson G. Brain endogenous insulin effects on neurite growth within fetal rat neuron cell cultures // Brain Res. Dev. Brain Res. 1999.V. 116. P. 159-167.

147. Schechter R., Sadiq H. F., Devaskar S. U. Insulin and insulin mRNA are detected in neuronal cell cultures maintained in an insulin-free/serum-free medium // J. Histochem. Cytochem. 1990. V. 38. P. 829-836.

148. Schulingkamp R. J., Pagano T. C., Hung D., Raffa R. B. Insulin receptors and insulin action in the brain: review and clinical implications // Neurosci. Biobehav. Rev. 2000. V. 24. P. 855-872.

149. Schwabe C., Bullesbach E. E. Relaxin: structures, functions, promises, and nonevolution // FASEB J. 1994. V. 8. P. 1152-1160.

150. Schwabe C., McDonald J. K. Relaxin: a disulfide homolog of insulin // Science. 1977. V. 197. P. 914-915.

151. Schwartz M. W. Biomedicine. Staying slim with insulin in mind // Science. 2000. V. 289. P. 2066-2067.

152. Schwartz M. W. Figlewicz D. P. Baskin D. G. Woods S. C., Porte D. Jr. Insulin in the brain: a hormonal regulator of energy balance // Endocrine Rev. 1992. V. 13. P. 387414.

153. Sherwood O. D. Relaxin's physiological roles and other diverse actions // Endocr. Rev. 2004. V. 25. P. 205-234.

154. Shingleton A. W., Das J., Vinicius L., Stern D. L. The temporal requirements for insulin signaling during development in Drosophila // PLoS Biol. 2005. V. 3. P. 16071617.

155. Skorokhod A., Gamulin V., Gundacker D., Kavsan V., Muller I. M., Muller W. E. Origin of insulin receptor-like tyrosine kinases in marine sponges // Biol. Bull. 1999. V. 197. P. 198-206.

156. Smit A. B., Vreugdenhil E., Ebberink R. H., Geraerts W. P., Klootwijk J., Joosse J. Growth-controlling molluscan neurons produce the precursor of an insulin-related peptide //Nature. 1988. V. 331. P. 535-538.

157. Soares M. B., Schon E., Henderson A., Karathanasis S. K., Cate R., Zeitlin S., Chirgwin J., Efstratiadis A. RNA-mediated gene duplication: the rat preproinsulin I gene is a functional retroposon // Mol. Cell. Biol. 1985. V. 5. P. 2090-2103.

158. Sossin W.S., Chen C.S., Toker A. Stimulation of an insulin receptor activates and down-regulates the Ca2+-independent protein kinase C, Apl II, through a Wortmannin-sensitive signaling pathway in Aplysia // J. Neurochem. 1996. V. 67. P. 220-228.

159. Steiner D. F., Chan S. J., Welsh J. M., Kwok S. C. Structure and evolution of the insulin gene // Annul. Rev. Genet. 1985. V. 19. P. 463-484.

160. Steinetz B. G., Schwabe C., Callard I. P., Goldsmith L. T. Dogfish shark (Squalus acanthias) testes contain a relaxin // J. Androl. 1998. V. 19. P. 110-115.

161. Summerlee A. J., Ramsey D. G., Poterski R. S. Neutralization of relaxin within the brain affects the timing of birth in rats // Endocrinology. 1998. V. 139. P. 479-484.

162. Sunn N., McKinley M. J., Oldfield B. J. Identification of efferent neural pathways from the lamina terminalis activated by blood-borne relaxin // J. Neuroendocrinol. 2001. V. 13. P. 432-437.

163. Sytze van Dam P., Aleman A. Insulin-like growth factor-I, cognition and brain aging // Eur. J. Pharmacol. 2004. V. 490. P. 87-95.

164. Tatar M. The neuroendocrine regulation of Drosophila aging // Exp. Gerontol. 2004. V. 39. P. 1745-1750.

165. Tatar M., Kopelman A., Epstein D., Tu M. P., Yin C. M., Garofalo R. S. A mutant Drosophila insulin receptor homolog that extends life-span and impairs neuroendocrine function // Science. 2001. V. 292. P. 107-110.

166. Terasawa H., Kohda D., Hatanaka H., Nagata K., Higashihashi N., Fujiwara H., Sakano K., Inagaki F. Solution structure of human insulin-like growth factor II; recognition sites for receptors and binding proteins // EMBO J. 1994. V. 13. P. 55905597.

167. Tissenbaum H. A., Ruvkun G. An insulin-like signaling pathway affects both longevity and reproduction in Caenorhabditis elegans // Genetics. 1998. V. 148. P. 703717.

168. Torres A. M., Forbes B. E., Aplin S. E., Wallace J. C., Francis G. L., Norton R. S. Solution structure of human insulin-like growth factor II. Relationship to receptor and binding protein interactions // J. Mol. Biol. 1995. V. 248. P. 385-401.

169. Ullrich A., Gray A., Tam A. W., Yang-Feng T., Tsubokawa M., Collins C., Henzel W., Le Bon T., Kathuria S., Chen E., Jacobs S., Franke U., Ramachandran J., Fujita

170. Yamaguichi Y. Insulin-like growth factor I receptor primary structure: comparison with insulin receptor suggests structural determinants that define functional specificity // EMBO J. 1986. V. 5. P. 2503-2512.

171. Van den Berghe G. How does blood glucose control with insulin save lives in intensive care? // J. Clin. Invest. 2004. V. 114. P. 1187-1195.

172. Van Minnen J., Reichelt D., Lodder J. C. An ultrastructural study of the neurosecretory canopy cell of the pond snail Lymnaea stagnalis (L.), with the use of the horseradish peroxidase tracer technique // Cell Tissue Res. 1979. V. 204. P. 453-462.

173. Van Minnen J., Schallig H. Demonstration of insulin-related substances in the central nervous system of pulmonates and Aplysia californica II Cell Tiss. Res. 1990. V. 260. P. 381-386.

174. Van Obberghen E. Signalling through the insulin receptor and the insulin-like growth factor-I receptor // Diabetologia. 1994. V. 37. P. 125-134.

175. Wentworth B. M., Schaefer I. M., Villa-Komaroff L., Chirgwin J. M. Characterization of the two nonallelic genes encoding mouse preproinsulin // J. Mol. Evol. 1986. V. 23. P. 305-312.

176. White M. F., Kahn C. R. The insulin signaling system // J. Biol. Chem. 1994. V. 269. P. 1-4.

177. Winslow J. W., Shih A., Bourell J. H., Weiss G., Reed B., Stults J. T., Goldsmith L. T. Human seminal relaxin is a product of the same gene as human luteal relaxin // Endocrinology. 1992. V. 130. P. 2660-2668.

178. Woods S.C., Schwartz M.W., Baskin D.G., Seeley R.J. Food intake and the regulation of body weight // Annu. Rev. Psychol. 2000. V. 51. P. 255-277.

179. Yakar S., Wu Y., Setser J., Rosen G. J. The role of circulating IGF-I: lessons from human and animal models // Endocrine. 2002. V. 19. P. 239-248.

180. Yalow R. S., Berson S. A. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man // J. Clin. Invest. 1960. V. 39. P. 1157-1175.

181. Yip C. C., Ottensmeyer P. Three-dimensional structural interactions of insulin and its receptor // J. Biol. Chem. 2003. V. 278. P. 27329-27332.

182. Zapf J. Physiological role of the insulin-like growth factor binding proteins // Eur. J. Endocrinol. 1995. V. 132. P. 645-654.

183. Zs.-Nagy I. New data on the anatomy of the visceral ganglion of fresh water mussel. Ibid. 1966. V. 33. P. 103-110.