Молочнокислые бактерии: индивидуальные особенности действия на патогенные микроорганизмы, макроорганизм и его микробиоту тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, доктор медицинских наук Ермоленко, Елена Игоревна

• Ермоленко, Елена Игоревна
• доктор медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Ермоленко, Елена Игоревна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общие сведения о пробиотических лактобациллах и энтерококках

1.2. Антимикробное действие LAB 26 1.2.1 .Факторы неспецифического антимикробного действия LAB

1.2.2. Бактериоцины и бактериоциноподобные вещества LAB

1.2.3. Механизмы опосредованного действия LAB

1.2.3.1. Блокирование адгезии патогенных микроорганизмов и способность LAB к агрегации

1.2.3.2. Конкуренция за метаболиты

1.3. Иммуномодулирующее действие LAB

1.3.1. Влияние LAB на врожденный иммунитет

1.3.2. Влияние LAB на приобретенный иммунитет

1.3.3. Иммунологическая толерантность организма к собственным LAB

1.3.4. Индивидуальные особенности действия LAB на иммунную систему.

1.3.5. Влияние структурных компонентов и метаболитов LAB

1.3.6. Иммуномодулирующее действие LAB при профилактике и лечении воспалительных заболеваний у людей

1.4. Влияние LAB на морфофункциональные характеристики организма

1.4.1. Метаболический вклад LAB в поддержание гомеостаза

1.4.1.1. Эффекты, выявленные при профилактике и лечении заболеваний у людей

1.4.1.2. Эффекты, выявленные на экспериментальных моделях в системе in vivo 67 1.4.1.3 .Исследование биохимической активности LAB в системе in vitro

1.4.2. Действие LAB на моторику, проницаемость и регенераторные процессы в слизистой желудочно-кишечного тракта

1.5. Методы исследования действия LAB

1.5.1. Методы исследования свойств молочнокислых бактерий в системе in vitro

1.5.2. Методы исследования LAB в системе in vivo

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молочнокислые бактерии: индивидуальные особенности действия на патогенные микроорганизмы, макроорганизм и его микробиоту»

Еще в начале XX века российский ученый И.И. Мечников впервые начал активно пропагандировать использование молочнокислых бактерий (lactic acid bacteria, LAB) в лечебно-профилактических целях. Он создал предпосылки для формирования нового научного направления, включающего изучение межмикробного антагонизма и оценку влияния LAB на организм хозяина, сформулировал основные постулаты для зарождающейся в наши дни научной дисциплины «пробиотической микробиологии» [Бондаренко В.М. и Королюк A.M., 2007; Нынь И.В., Королюк A.M., 2008]. Несмотря на длительное и достаточно успешное использование пробиотических пищевых продуктов и препаратов, их активное, но часто бесконтрольное применение в последние десятилетия привело к возникновению ряда серьезных проблем. Среди них можно указать: низкую эффективность действия некоторых препаратов, угнетение собственной микрофлоры хозяина, развитие инфекционной патологии при введении пробиотиков ослабленным больным [Lebenthal Е. and Lebenthal Y., 2003; Land M.II. et al., 2005]. Становится очевидным, что для увеличения эффективности лечебно-профилактического использования и предотвращения развития побочных эффектов LAB должны вводиться с учетом индивидуальных характеристик пациента и по назначению врача. Именно поэтому в настоящий момент как никогда остро встал вопрос о необходимости серьезных комплексных научных исследований особенностей действия молочнокислых бактерий на макроорганизм и его микробиоту.

К числу LAB относят бактерии родов Lactobacillus и Enterococcus [Axelsson L., 2004; Salminen S. et al., 2004], явившихся предметом настоящего исследования. Они представляют особый научный и практический интерес, так как входят в состав нормальной микробиоты человека и животных [Петровская В.Г. и Марко О.П., 1976; Tannock G.V., 1997], широко распространены во внешней среде, являются составной частью многих пробиотических препаратов и продуктов. Известно, что энтерококки и лактобациллы могут оказывать разностороннее влияние на биохимические, физиологические, нейрогуморальные и иммунные процессы в организмах человека и животных [Шендеров Б.А., 2005; Goldin B.R. and Gorbach S.L., 1984; Maldonado G. et al., 2007; Preter V. et al., 2007]. Эти бактерии участвуют в поддержании колонизационной резистентности и гомеостаза, нормализуют содержание в организме углеводов, желчных кислот, холестерина, осуществляют синтез витаминов и других биологически активных соединений [Gibson G.R. et al., 1995; Доронин А.Ф., Шендеров Б.А., 2002]. Некоторые штаммы энтерококков и лактобацилл способны продуцировать в окружающую среду такие продукты, как перекись водорода, лизоцим, бактериоцины и бактериоциноподобные субстанции, конкурировать с патогенными микроорганизмами за сайты прикрепления к эпителиальным клеткам и пищевые субстраты [Reid G., 2004; Salminen S. et al., 2004]. Основным требованием, предъявляемым к пробиотическим штаммам LAB, является наличие выраженной антимикробной активности [Reid G., 2008]. Это позволяет использовать пробиотики для усиления или коррекции эффектов антибиотиков, а в ряде случаев - как их альтернативу. На основании большого числа клинических наблюдений можно полагать, что пробиотики практически незаменимы при терапии дисбиотических состояний, болезни Крона, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки [Ткаченко Е.И. и Успенский Ю.П., 2006]. Кроме того, LAB активно используются при терапии сахарного диабета, аллергических заболеваний [Prescott S. and Bjórkstén В., 2009], ишемической болезни сердца, коррекции нарушений липидного и минерального обменов [Гриневич В.Б. и др., 2004]. Наряду с пероральным введением молочнокислых бактерий целесообразно их местное использование при вагинитах, тонзиллитах и стохматитах [Reíd G. et al., 2004; Elmer G.W., 2001; Maldonado G. et al., 2007].

Несмотря на несомненные успехи, достигнутые при изучении LAB, многое до сих пор остается неясным. Неизвестно, как молочнокислые бактерии, входя в состав микробиоты человека и животных, влияют на патогенные микроорганизмы и представителей нормальной микрофлоры, какое действие они оказывают на ткани, состояние отдельных систем и макроорганизм в целом. Обнаружены существенные различия в спектрах антибактериального действия различных штаммов молочнокислых бактерий, а также в их способности влиять на систему иммунитета и метаболические процессы, происходящие в организме человека и животных. Возможность соматической патологии пациента и особенности собственной микрофлоры хозяина делают необходимым индивидуальный подбор пробиотиков. Отсутствие стандартных методов исследования пробиотиков затрудняет сравнительный анализ различных штаммов молочнокислых бактерий и их паспортизацию. В связи с этим разработка методологии сравнительного исследования пробиотических культур, а также изучение особенностей-их действия в системах in vitro и in vivo, являются актуальной проблемой современной микробиологии.

Целью настоящей работы является изучение особенностей влияния молочнокислых бактерий на микробиоту и макроорганизм, а также разработка стратегии максимально эффективного использования пробиотических штаммов LAB дшь профилактики и лечения заболеваний человека и животных, вызванных стрептококками и другими патогенными микроорганизмами.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Разработать комплекс методических подходов для исследования влияния LAB на пато генные микроорганизмы, нормальную микрофлору и макроорганизм.

2. Провести сравнительное исследование антагонистической активности культур LAB в отношении различных грамотрицательных и грамположительных бактерий, микоплазм, грибов родов Candida и Ciyptococcus, а также вирусов простого герпеса.

3. Исследовать геномы LAB, обладающих антагонистической активностью в отношении патогенных бактерий и грибов, на наличие известных генов бактериоциногенности.

4. Изучить влияние антимикробных пептидов, продуцируемых LAB, а также искусственно синтезированных аналогов бактериоцинов на рост и морфофизиологические особенности патогенных микроорганизмов.

5. Провести анализ экспрессии генов бактериоциногенности LAB и исследовать влияние специфических пептидных индукторов на антибактериальную активность молочнокислых бактерий.

6. Исследовать в модельных условиях воздействие штаммов LAB и аутопробиотических энтерококков на клинические симптомы, метаболические процессы, иммунитет и микробиоту кишечника лабораторных животных при дисбиозе, вызванном приемом антибиотиков, а также при терапии урогенитальных инфекций.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Предложен комплекс методов (микробиологических. биохимических, генетических, иммунологических, гистологических, электронно-микроскопических) для разностороннего изучения воздействия LAB на макроорганизм и заселяющую его микрофлору.

Проведено сравнительное исследование лактобацилл и энтерококков, выделенных из различных источников. Благодаря введению нового количественного показателя удалось охарактеризовать степень антагонистической активности различных штаммов энтерококков и лактобацилл в отношении широкого круга индикаторных микроорганизмов (грамотрицательных и грамположительных бактерий,- микоплазм, а также грибов рода Candida и Cryptococcus). Впервые выявлена способность метаболитов лактобацилл и энтерококков угнетать рост микоплазм и репродукцию вирусов простого герпеса в системе in vitro.

Разработаны новые модели экспериментального дисбиоза и бактериального вагинита. При их использовании впервые установлены особенности влияния различных культур LAB на клинические симптомы, микробиоту, показатели иммунитета, тонкие морфологические изменения в тканях животных.

Впервые исследована степень влияния пробиотических штаммов, в частности молочнокислых бактерий, на метаболические процессы, происходящие в разных отделах желудочно-кишечного тракта.

Впервые на биологической модели доказана эффективность использования индигенных (аутопробиотических) энтерококков для коррекции дисбиозов у животных.

Впервые выявлено действие искусственно синтезированного энтероцина В и его аналога на грамотрицательные бактерии, проявляющееся в ингибировании роста Е. coli и повреждении их цитоплазматических мембран.

Выявлены штаммовые особенности действия метаболитов энтерококков и лактобацилл на морфологию S. pyogenes.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Теоретическое значение работы заключается в том, что диссертантом предложен новый подход для исследования влияния LAB на организм млекопитающих и их микрофлору. В результате удалось значительно дополнить имеющиеся представления об особенностях распространения молочнокислых бактерий в организме и возможности колонизации ими слизистых оболочек урогенитального и желудочно-кишечного трактов.

Установлено, что воздействие пробиотиков на организм сопровождается существенными сдвигами, как в сторону стимуляции, так и в сторону ингибирования реакций иммунной системы, а также пристеночного и просветного пищеварения на разных уровнях желудочно-кишечного тракта. Характер влияния вводимых пробиотических культур зависит от их индивидуальных особенностей, а также от наличия или отсутствия инфекционной патологии. Эти данные имеют большое значение для понимания сложного комплекса взаимодействий макроорганизма и его микробиоты, а также выбора пробиотика в зависимости от клинического диагноза и этиологии заболевания.

Полученные результаты важны для развития медицинской, а также ветеринарной микробиологии, открывают перспективы широкого практического использования и дальнейшего изучения LAB.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Прикладными аспектами исследования являются разработанные на основе экспериментальных данных: 1) метод двухслойного агара с количественной и качественной оценкой антимикробной активности молочнокислых бактерий in vitro-, 2) комплексный подход в исследования прямого и опосредованного антимикробного действия in vivo, с учетом влияния LAB на патогенные микроорганизмы, микробиоту хозяина, метаболизм и иммунную систему макроорганизма.

В ходе сравнительного исследования клинических изолятов из урогенитального тракта выбран и идентифицирован новый штамм LAB, L. fermentum Z, предложенный для использования в составе пробиотических препаратов или пищевых продуктов [Заявка на изобретение № 2008133794 от 15.08.08]. Его отличительной особенностью является избирательное действие в отношении патогенных микроорганизмов, отсутствие влияния на другие LAB, в частности Е. faeciam L3. При исследовании антимикробного эффекта эти молочнокислые бактерии выступают как синергисты и могут быть рассмотрены в качестве компонентов нового симбиотического препарата.

Исследование влияния аутопробиотических энтерококков на организм животных при дисбиозе кишечника может рассматриваться как предварительный экспериментальный этап перед комплексным исследованием перспектив применения в медицине компонентов собственной микрофлоры.

Результаты исследований могут быть использованы при клиническом назначении пробиотиков с целью лечения и профилактики заболеваний инфекционной природы. Применение пробиотических препаратов для лечения и профилактики эндометритов у коров, обусловленных условно-патогенной микрофлорой, изложено в методических рекомендациях, утвержденных методическим советом ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская Государственная академия ветеринарной медицины».

Модифицированный метод двухслойного агара применяется в лаборатории молекулярной микробиологии НИИЭМ СЗО РАМП, на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Санкт-Петербургской государственной медицинской академии имени И.И. Мечникова для изучения микробного антагонизма, на кафедре эпизоотологии ФГОУ ВПО Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины.

Результаты диссертационного исследования используются при чтении лекций и проведения практических занятий по микробиологии на медицинском факультете Санкт-Петербургского Государственного университета.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. При назначении пробиотиков, в состав которых входят молочнокислые бактерии, целесообразно учитывать спектр их антимикробной активности, а также особенности их влияния на иммунную систему и метаболические процессы.

2. Предложенные модели экспериментальных дисбиозов и вагинитов позволяют изучать особенности действия штаммов пробиотиков на макроорганизм и его микрофлору на фоне развития указанных патологических процессов.

3. Созданию симбиотических и комбинированных микробных препаратов должны предшествовать эксперименты, направленные на выявление степени антагонистической активности компонентов консорциумов по отношению друг к другу и к патогенным микроорганизмам при совместном и раздельном культивировании.

4. Новый подход в оценке степени влияния пробиотических бактерий на метаболические процессы в разных отделах желудочно-кишечного тракта расширяет существующие научные представления о роли микробиоты в процессе пищеварения.

5. Модифицированный нами метод двухслойного агара позволяет проводить количественную оценку антагонистической активности LAB к широкому спектру микроорганизмов и выявлять возможные морфофункциональные изменения индикаторных культур.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Ермоленко, Елена Игоревна

ВЫВОДЫ

1. Разработан алгоритм исследования свойств пробиотических культур, позволяющий подбирать штаммы молочнокислых бактерий с учетом особенностей их действия на микрофлору и макроорганизм в целях повышения эффективности их использования.

2. Сравнительное исследование лактобацилл и энтерококков, выделенных из различных источников, позволило охарактеризовать степень их антагонистической активности в отношении широкого круга микроорганизмов.

3. Впервые выявлена противовирусная активность продуктов метаболизма лактобацилл и энтерококков в системе in vitro.

4. Доказана возможность увеличения антибактериальной активиости бактериоциногенных молочнокислых' бактерий при добавлении в культуральную среду специфических синтетических феромонов.

5. Впервые показано, что синтетический энтероцин В и его аналог ингибируют рост стрептококков группы В и эшерихии, а характер повреждения поверхностных структур последних позволяет предположить общий механизм действия этого бактериоцина на грамположительные и грамотрицательные бактерии.

6. Установлено, что введение LAB крысам с дисбиозом кишечника способствует ускоренному восстановлению микробиоты, нормализации морфофункциональных показателей слизистой желудочно-кишечного тракта, а также исчезновению клинических симптомов. Динамика и характер изменений указанных параметров зависит от особенностей штаммов молочнокислых бактерий.

7. Аутопробиотические энтерококки обладают выраженным лакто- и бифидогенным эффектом, однако ингибируют рост патогенных бактерий в меньшей степени, чем пробиотические лактобациллы и энтерококки.

8. Доказана способность молочнокислых бактерий, вводимых интравагинально при экспериментальном вагините у крыс, вызывать быструю элиминацию патогенных бактерий (эшерихий, стафилококков, стрептококков группы В) и предотвращать развитие местной воспалительной реакции.

9. Впервые показано, что внутриматочное введение коровам LAB эффективно устраняет симптомы послеродового эндометрита, вызывает элиминацию патогенных микроорганизмов и стимулирует системный иммунный ответ (выработку Ig М и IgA, увеличивает лизоцимную активность сыворотки крови).

БЛАГОДАРНОСТИ

Выражаю глубокую благодарность академику А.А.Тотоляну и профессору А.Н. Суворову за помощь в организации исследовательского процесса и приобретении необходимого оборудования, а также за ценные замечания при обсуждении результатов диссертационной работы.

Выражаю благодарность всем коллегам отдела молекулярной микробиологии НИИ СЗО РАМН за доброжелательное отношение и создание в коллективе творческой атмосферы.

Благодарю всех, кто непосредственно помогал мне выполнить эту работу: к.б.н. С.Х. Ждан-Пушкину, д.б.н., профессора О.В. Рыбальченко (ФГУП ГНИИ ОЧБ ФМБА), д.б.н., профессора В.Н. Кокрякова (ПИИ ЭМ СЗО РАМН), д.б.н. A.A. Колобова (ФГУП ГНИИ ОЧБ ФМБА), д.б.н., П.В. Пигаревского (НИИ ЭМ СЗО РАМН), д.б.н. Л.В. Громову (НИИ Физиологии им. И.П. Павлова), к.б.н. В.А. Фураеву (НИИ гриппа Северо-Западного отделения РАМН), к.в.н. И.В. Марцинковскую (Санкт-Петербургская Государственная академия ветеринарной медицины), A.B. Воейкову (клиническая лаборатория больницы №2 Санкт-Петербрга), Г.Е. Гефена и Г.А. Зарх (межрайонная лабоартория №2 Санкт-Петербурга).

Настоящее исследование поддержано грантами 02-04-06927 и 03-04-49760 Российского Фонда Фундаментальных исследований и грантом Президента Российской Федерации НШ-2206.2003.4

ГЛАВА 5. ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние годы в мире существенно возросло потребление пробиотических пищевых продуктов на основе LAB. Вместе с тем расширились и показания для использования пробиотических препаратов. В современной научной литературе описаны различные эффекты, оказываемые LAB: антимикробное и иммуномодулирующее действия, участие в процессах пищеварения, синтезе витаминов, стимуляции регенерации тканей и другие. Достигнуты большие лечебные успехи в применении молочнокислых бактерий при дисбиозах различной этиологии, кишечных и урогенитальных инфекциях, инфекционной патологии верхних дыхательных путей, метаболических нарушениях, а также при аллергических реакциях. К сожалению, активное использование LAB в практике происходило, как правило, на эмпирической основе, до накопления достаточного объема научных знаний, касающихся механизмов действия пробиотиков. Непонимание гаммы существующих рисков на введение хмолочнокислых бактерий пациентам с ослабленным иммунитетом приводило в ряде случаев к развитию инфекционной патологии [Белобородава Н.В., 2002; Apostolou et al., 2001; Lebenthal E. and Lebenthal Y., 2003; Salminen S. et al., 2004; Reid G., 2008]. Дополнительными сложностями, выявленными на фоне введения некоторых штаммов LAB, являются низкая их выживаемость в макроорганизме [Корниенко Е.А., 2007; Глушанова H.A. и Шендеров Б.А., 2005] и возможность формирования устойчивости патогенных микроорганизмов к действию пробиотиков [Rasch M. and Knöchel S. 1998; Gravesen A. et al., 2002]. Все эти проблемы связаны с использованием пробиотиков без учета их индивидуальных свойств, особенностей состояния макроорганизма, а главное, из-за недостаточного понимания механизмов действия молочнокислых бактерий. В настоящее время формируются противопоказания, требования, предъявляемые к пробиотическим пищевым продуктам и препаратам, в состав которых входят LAB. Инструкции к пробиотическим средствам постоянно пополняются новыми рекомендациями, основанными на результатах выявления новых эффектов, оказываемых этими бактериями.

В большей степени изучена антагонистическая активность молочнокислых бактерий в отношении различных микроорганизмов. Достаточно хорошо исследованы отдельные антимикробные факторы молочнокислых бактерий. Показано, что некоторые из них (перекись водорода, органические кислоты, лизоцим) не обладают специфичностью, другие, такие как бактериоцины, характеризуются избирательным антибактериальным действием.

В обзоре литературы настоящей диссертации представлен большой перечень микроорганизмов, рост которых в системе in vitro способны ингибировать молочнокислые бактерии. Спектр этих микроорганизмов велик. Он включает: 1) грамотрицательные бактерии (энтеробактерии, псевдомонады, спириллы, вибрионы); 2) грамположительные бактерии (стафилококки, стрептококки, клостридии, LAB); 3) грибы и простейшие.

Следует отметить, что представленный в обзоре анализ спектра антимикробной активности LAB основывался на результатах исследований, проводимых в различных лабораториях. В каждой из них, как правило, для выявления антагонизма молочнокислых бактерий использовали нестандартные методы и произвольно выбранные индикаторные штаммы. Эти обстоятельства существенно затрудняли сравнительный анализ полученных данных и позволяли в большинстве случаев оценивать антимикробную активность молочнокислых бактерий только качественно, без количественных характеристик. Тем не менее, не вызывает сомнений факт существования индивидуальной чувствительности бактерий и грибов к различным штаммам LAB. Очевидно, что она связана со скоростью роста и особенностями строения поверхностных структур индикаторных микроорганизмов. Нельзя исключить и существование отдельных механизмов формирования устойчивости к метаболитам LAB. По-видимому, в некоторых случаях они могут быть сходны с теми механизмами, что выявлены при исследовании бактерий, резистентных к антибиотикам [Навашин С.М. и Фомина И.П., 1982] и дефенсинам [Kraus D. and Peschel А., 2006].

Отсутствие стандартизации в исследованиях, количественной оценки степени антимикробной активности, использование сравнительно небольшого числа индикаторных микроорганизмов привело к тому, что до настоящего времени не удавалось выявить каких-либо строгих закономерностей в спектре антагонистической активности культур LAB в системе in vitro. В литературе имеются противоречивые данные о выраженности антагонистической активности по отношению к различным родам грамположительных, грамотрицательных бактерий и грибов. Также слабо изучены особенности влияния молочнокислых бактерий на характер роста индикаторных культур и экспрессию генов, обеспечивающих проявление патогенных свойств. В научной литературе существуют лишь единичные публикации на эту тему. Например, отмечено снижение токсигенности стафилококков при их культивировании в присутствии лактобацилл на плотной питательной среде [Salminen S. et al., 2004].

Эксперименты, выполненные в последние десять лет на биологических моделях, а также наблюдения, накопившиеся в результате использования пробиотических LAB в медицине и ветеринарии, позволили выявить различия в характере влияния отдельных штаммов молочнокислых бактерий на систему иммунитета и метаболические процессы, происходящие в организме. Однако результаты этих исследований носят фрагментарный и малоубедительный характер. На возможности сравнительного анализа полученных данных также отрицательно сказывается отсутствие единых подходов и стандартных методов для изучения влияния LAB на макроорганизм.

Таким образом, разработка методологии сравнительного исследования антимикробной активности молочнокислых бактерий в системах in vitro и in vivo составляют актуальную проблему современной микробиологии, медицины и ветеринарии.

Целью настоящей работы являлось изучение особенностей влияния молочнокислых бактерий на микробиоту и макроорганизм, а также разработка стратегии, позволяющей по возможности максимально эффективно применять пробиотические штаммы LAB для профилактики и лечения заболеваний человека и животных, вызванных рядом патогенных микроорганизмов. Изучение особенностей действия LAB проводилось на примере двух наиболее типичных представителей пробиотических бактерий: Enterococcus spp. и Lactobacillus spp. Выбор был продиктован широкой распространенностью энтерококков и лактобацилл в окружающей среде, а главное, тем, что они являются представителями резидентной микрофлоры и часто используются при создании пробиотических средств.

Именно поэтому в качестве антагонистов в работе были использованы штаммы энтерококков и лактобацилл, выделенные как из пробиотических препаратов, так и из полостей организма (урогенитального тракта и кишечника здоровых людей и животных). Изучение антимикробного действия живых молочнокислых бактерий, проводили двумя методами: рекомендованным ГОСТом методом штриховых посевов и предложенным нами вариантом метода двухслойного агара. Несмотря на удобство применения и простоту, метод штриховых посевов обладает существенными недостатками, так как позволяет изучать антимикробную активность LAB только в отношении ограниченного числа индикаторных культур и является полуколичественным. Поэтому данный метод можно рекомендовать лишь для начальных ориентировочных исследований. Преимущество предложенного нами варианта метода двухслойного агара состоит в возможности существенного расширения спектра индикаторных.культур. Так, впервые в качестве индикаторной культуры были использованы криптококки, микоплазмы, стрептококки групп С и G. Для сравнительного исследования антимикробной активности был предложен количественный показатель МИКА (минимальное ингибирующее количество антагониста), что позволило сопоставлять антагонистическую активность молочнокислых бактерий по выраженности этого эффекта («силе»).

Во всех вариантах постановки экспериментов in vitro влияние культур LAB на рост индикаторных микроорганизмов зависело от их количества, поскольку только при достижении определенных пороговых концентраций молочнокислых бактерий проявлялась их антимикробная активность. Объяснение этому явлению логично дать с позиций теории межклеточной сигнальной системы - «quorum sensing» [Risoen P.A. et al., 20004; Бондаренко B.M. и др., 2006]. В результате комплексного исследования антимикробной активности молочнокислых бактерий были выявлены общие закономерности в чувствительности различных групп индикаторных микроорганизмов. Примерами могут служить большая чувствительность стрептококков, особенно группы А, к действию LAB и выраженная устойчивость энтерококков и грибов к действию метаболитов молочнокислых бактерий.

Кроме того, в данной работе был проведен сравнительный анализ антимикробной активности моно- и смешанных культур молочнокислых бактерий. Показано, что при совместном культивировании энтерококков и лактобацилл, в зависимости от использованных комбинаций штаммов, суммарная антагонистическая активность может снижаться, оставаться неизменной либо увеличиваться по спектру и силе. Это указывает на важную роль взаимодействия антагонистов в условиях биоценоза и доказывает необходимость подбора бактериальных культур в интересах создания симбиотических пробиотических продуктов и препаратов. В качестве примера симбиотического консорциума с высокой антимикробной активностью предложена комбинация штаммов Е. faecium L3 и L. fermentum Z. Литературные данные, касающиеся суммарного антимикробного эффекта консорциумов в системе in vitro, немногочисленны.

Используя предложенные нами методы, оказалось возможным выявить штаммы LAB, обладающие выраженным изоантагонизмом и проявляющие способность ингибировать рост большинства исследованных культур, в том числе даже молочнокислые бактерии. Штаммы, проявляющие слабую активность в отношении LAB и выраженный антагонизм в отношении патогенных бактерий и грибов, представляли максимальный практический интерес и были отобраны для дальнейших исследований.

Характер активности LAB оценивали, исследуя их действие на культуральные и морфологические свойства индикаторных бактерий и грибов. Используя метод реплик, удалось показать, что при дозе антагониста в 10-100 и более раз, чем МИКА, действие антагониста приводит к гибели индикаторной культуры. Одновременно, были выявлены особенности роста и морфологии клеток исследуемых штаммов патогенных индикаторных микроорганизмов.' Изменения подобного рода были выявлены у стафилококков, протея и грибов рода Candida. Под влиянием молочнокислых бактерий утрачивалась подвижность протея, а также способность грибов рода Candida образовывать ростовые трубки и формировать псевдомицелий. Очевидно, что подобные изменения могут служить показателями снижения патогенных свойств рассматриваемых индикаторных бактерий и грибов. Эти факты должны привлечь внимание специалистов, изучающих экспрессию патогенных свойств микроорганизмов.

Большое внимание в данной работе было уделено действию LAB на бактерии родов Streptococcus и Enter ococcus. Выявлены штаммовые особенности в чувствительности энтерококков, стрептококков групп А, В, С и G к действию метаболитов молочнокислых бактерий. С медицинской точки зрения интерес представляет высокая восприимчивость к действию лактобацилл и энтерококков стрептококков группы А и несколько в меньшей степени - стрептококков других серогрупп. Полученные результаты предполагают возможность использования пробиотических молочнокислых бактерий для профилактики и лечения инфекций верхних дыхательных путей и урогенитального тракта, вызываемых стрептококками разных групп.

Фундаментальное значение имели эксперименты, в ходе которых впервые выявлены особенности влияния двух культур LAB на морфологию стрептококков группы А. Пробиотический штамм Е. faecium L3 вызывал нарушение морфогенеза фимбриеподобных структур на поверхности S. pyogenes, существенных для проявления патогенности, и способствовал образованию удлиненных клеток. Штамм L. fermentum Z также нарушал характер деления клеток данного микроба. Эти сведения, дополняют представления о многообразии механизмов действия LAB, доказывают высокую информативность электронно-микроскопического исследования для изучения механизмов их действия.

В данной работе исследования антимикробного эффекта LAB проводились с использованием ряда дополнительных методов: турбодиметрии, метода радиальной диффузии, совместного культивирования грибов и антагонистов в жидких и плотных питательных средах, а также культивирования вирусов в культуре перевиваемых клеток. Это расширило возможности для исследования влияния отдельных антимикробных факторов, позволило впервые выявить способность метаболитов и живых молочнокислых бактерий ингибировать репродукцию вируса простого герпеса и изучить особенности взаимодействия грибов с молочнокислыми бактериями в различных условиях культивирования.

Исследование отдельных антимикробных факторов, которые для удобства-анализа были разделены на факторы прямого и опосредованного действия, а также специфические и неспецифические, способствует выявлению наиболее важных из них в проявлении микробного антагонизма. Максимальное значение, как показано при рассмотрении данных литературы, в проявлении специфического действия LAB имеют бактериоцины. Эти преимущественно низкомолекулярные соединения пептидной природы, сравнительно хорошо изученные, охарактеризованные по химическому составу, молекулярной массе, генетическому детерминированию, спектру и механизмам действия.

Дальнейшие исследования антагонистически активных штаммов молочнокислых бактерий позволили нам выявить в их геноме гены, обеспечивающие продукцию ранее описанных другими авторами энтероцинов А и В i?, faecium L3 и лактоцина F у L. fermentum Z. В супернатантах культуры энтерококков обнаружены пептиды, по массе соответствующие энтероцинам А и В, ранее выделенным в других штаммах энтерококков [Moreno G. et al., 2003; deVuist L. and Leroy F., 2007]. В качестве доказательства продукции энтероцинов А и В культурой Е. faecium L3 следовало признать обнаружение экспрессии генов при помощи ОТ-ПЦР, обеспечивающих продукцию указанных энтероцинов, а также ее усиление в случае добавления специфических феромонов. Эти исследования имеют большое значение, так как позволили выявить еще один непатогенный штамм Е. faecium, способный продуцировать энтероцины А и В или оба энтероцина одномоментно. Высокая частота выделения из молочнокислых и других пищевых продуктов рассматриваемых бактериоциногенных энтерококков свидетельствует в пользу биологической целесообразности их присутствия в материале в качестве транзиторного или резидентного компонента микробиоты человека.

Дополнительные перспективы раскрываются и при использовании синтетических феромонов. Как показано в данной работе, добавление специфического пептида-индуктора и его более коротких аналогов в низких концентрациях в культуральную среду позволяет существенно увеличить антимикробные свойства энтерококков. Впервые показано, что синтетические аналоги феромона с более короткой аминокислотной последовательностью также могут эффективно индуцировать продукцию бактериоцинов. Описанный феномен весьма важен не только для изучения механизмов регуляции продукции антимикробных факторов, но и для разработки современных комплексных пробиотических биопрепаратов.

Помимо описанных энтероцинов А и В (с молекулярными массами 4,8 и 5,5кДа, соответственно), из супернатанта культуры энтерококка L3 были выделены дополнительные пептидные фракции с меньшими молекулярными массами (1,9-2,2 кДа), также обладающие антимикробной активностью. С большой вероятностью можно утверждать, что в данных фракциях пептидного экстракта присутствуют фрагменты энтероцинов А и В и/или ранее неидентифицированные бактериоцины с меньшей молекулярной массой.

Особенно большое значение приобрело изучение антибактериального действия синтетического энтероцина В и его аналога с измененной молекулярной структурой.

Выявлены способность этих пептидов, ингибировать рост L. monocythogenes и S. pyogenes, а также особенности их воздействия на Е. coli. Установлена способность этого энтероцина и его аналога вызывать образование зоны задержки роста эшерихий, засеянных газоном на плотную питательную среду. Методом электронной микроскопии показано, что данный бактериоцин повреждает цитоплазматическую мембрану эшерихий.

Существенной частью проведенного исследования явилась оценка антимикробного действия LAB в системе in vivo. Как правило, опосредованные антимикробные эффекты оказывают молочнокислые бактерии, конкурируя с другими микроорганизмами за сайты прикрепления к клеткам млекопшающих и питательные субстраты, а также оказывая влияния на иммунитет и метаболизм макроорганизма. Именно эти моменты позволяют предотвратить адгезию патогенных микробов на клетках слизистых оболочек, дальнейшее развитие процессов пенетрации и инвазии, а также ускоряют компенсаторные реакции организма в ответ на внешние воздействия.

В данной работе эксперименты были проведены на здоровых мышах и крысах, а также на моделях кишечного дисбиоза и урогенитальных инфекций. Исследования на здоровых животных были важны для выяснения механизмов действия LAB при их использовании в профилактических целях, а также для рассмотрения возможности длительного приема пробиотиков. Показано, что ежедневное введение молочнокислых бактерий в течение 14 и даже 42 дней не вызывало существенных изменений в биохимических показателях сыворотки крови животных, а также уровня иммуноглобулинов в слизи желудочно-кишечного тракта и сыворотке крови. Однако по мере введения пробиотических микроорганизмов (к 14 дню наблюдения) их количество в организме экспериментальных животных (здоровые крысы) постепенно возрастало, а уровень СЗ фракции комплемента в сыворотке крови увеличивался. При введении пробиотической закваски с энтерококками, в отличие от молочного продукта, содержащего эшерихии, дополнительно увеличивалась секреция IL-10, блокирующего развитие иммунных реакций по Th-1 пути. Эти проявления можно отнести к штаммовым особенностям Е. faecium L3, так как во всех случаях его введения животным отмечалось увеличение синтеза данного цитокина. Индивидуальные особенности штаммов энтерококков и лактобацилл, проявляющиеся в увеличении или уменьшении экспрессии IL-8, IL-6, IL-12 и IL-18, блокировании экспрессии TLR2, как уже было отмечено в обзоре, ранее выявляли и другие исследователи , и в этой части наши данные подтвердили ранее полученные результаты.

Значимым, на наш взгляд, является обнаружение мРНК хемоаттрактанта IL-8, привлекающего фагоциты и другие ИПК в зону воспаления. Повышенная экпрессия данного цитокина, имело место только в случае развития у крыс дисбиотических состояний без дальнейшего введения молочнокислых заквасок. Возможно, обнаружение подобных признаков воспаления может рассматриваться в качестве маркера неблагоприятного развития дисбиотического процесса.

Благодаря проведенному комплексному исследованию животных и использованию маркированного штамма энтерококков мы смогли проследить особенности обсеменения этой культурой разных отделов кишечника и влагалища на разных сроках эксперимента, а после вскрытия животных и бактериологического исследования их крови и внутренних органов - удостовериться в отсутствии транслокации этих бактерий. Исследуя активность метаболических процессов, происходивших в слизи, химусе, эпителии разных участков тонкой и толстой кишки здоровых крыс и крыс с дисбиозом, вызванном введением антибиотиков, нам удалось доказать участие энтерококков в метаболических процессах. Также доказано ингибирование выработки ферментов (мальтазы) эпителиоцитами в участках максимального скопления энтерококков. Наиболее вероятно, что культура Е. faecium L3, ферментирующая мальтозу, активно участвовала в расщеплении данного дисахарида и за счет механизмов обратной связи ингибировала выработку мальтазы эпительными клетками тонкой кишки.

Подобный эффект пробиотических культур ранее не был описан. Бактериологические исследования фекалий животных, участков тонкой и толстой кишки до и после воздействия пробиотическими заквасками свидетельствовали о быстрой колонизации кишечника крыс генетически маркированными энтерококками, что при дисбиозе приводило к полной элиминации протея, клебсиелл, золотистого стафилококка. Другие культуры, в частности аутопробиотики, вызывали более слабые изменения микробиоты, проявляющиеся лишь снижением числа патогенных бактерий. Кроме того, отмечено, по-видимому, компенсаторное увеличение числа собственных лактобацилл и бифидобактерий в кишечнике животных на фоне введения молочнокислых заквасок. В большей степени этот эффект проявлялся при использовании аутопробиотиков. Таким образом, в серии экспериментов с введением молочнокислых заквасок крысам при дисбиозе кишечника впервые удалось добиться выявления особенностей антимикробного действия LAB в системе in vivo. Особенно важно, что впервые было предложено использовать в качестве аутопробиотиков не лактобациллы и бифидобактерии, [Шендеров Б.А., 2003], а непатогенные энтерококки, выделенные из кишечника хозяина.

Аналогичные доказательства быстрого вытеснения патогенных микробов были получены и при экспериментальном вагините. Использование генетически маркированного штамма Е. faecium L5, как и в экспериментах на модели дисбиоза, позволило проследить динамику обсемененности различных тканей животных на фоне введения молочнокислых бактерий. Показано, что изначально патогенные микроорганизмы препятствовали колонизации слизистых культурой L5, затем, после увеличения числа энтерококков до 106 lg КОЕ/мл, происходило быстрое снижение концентрации патогенных бактерий или их элиминация. В рассматриваемый период, как правило, отмечалось увеличение числа бифидобактерий и лактобацилл. Этот динамический процесс взаимодействия пробиотиков с резидентными представителями микробиоты и патогенными микроорганизмами в организме хозяина ранее не описывался.

Полученные результаты исследования влияния LAB на макроорганизм и его микрофлору еще раз подтверждаю г, что действие пробиотиков не сводится к простому заселению кишечника или урогенитального тракта, как это нередко описывается или представляется. Их взаимовлияние более сложное и многоплановое. Оно включает конкурентные взаимоотношения с патогенными и условно-патогенными микроорганизмами; взаимодействие с эпителием слизистых оболочек и MAJIT, а также сдвиги в иммунологической реактивности. Выявленные особенности этих динамических процессов, зависящие от штаммов вводимых LAB, открывают дальнейшие перспективы для изучения свойств этих бактерий с целыо создания новых и усовершенствования уже имеющихся пробиотических пищевых продуктов и препаратов.

Таким образом, в работе сформулирована проблема - «научное обоснование увеличения эффективности защитного и лечебного действия молочнокислых бактерий для борьбы с патогенными микроорганизмами и для коррекции вызываемых ими процессов и состояний» и предложено ее экспериментальное изучение и решение. В исследовании представлен и обоснован алгоритм комплексного исследования биологических свойств культур молочнокислых бактерий, включающий их выявление, идентификацию, определение биодоступности, биосовместимости, спектра антимикробного действия в системах in vitro и in vivo, особенностей иммуномодулирующего действия, а также влияния на морфофункциональные характеристики слизистого эпителия, временную колонизацию которых они могут осуществлять. Подробное изучение свойств пробиотических культур по предложенной схеме позволяет совершенствовать паспортизацию и индивидуальный подбор пробиотических препаратов с целью их рационального использования и увеличения эффективности при практическом использовании в медицине и ветеринарии.

Все пробиотические LAB до внедрения в практику должны быть охарактеризованы с учетом их иммуномодулирующей и метаболической активности, что желательно отражать в индивидуальных рекомендациях к использованию препаратов и в описании противопоказаний. Для дальнейших разработок и внедрения молочнокислых бактерий может быть рекомендована следующая рациональная схема двухэтапного комплексного исследования каждого из используемых пробиотических штаммов.

Первый этап включает изучение свойств пробиотического штамма перед его регистрацией, как элемент паспортизации. В этом случае кроме обязательных в настоящее время тестов для выявления антагонистической активности [ГОСТ, 2004], доказательств отсутствия токсичности, устойчивости к действию молочной кислоты, низкого pH, желчи, спермы и других биологических жидкостей [Шендеров Б.А. 2006; Бондаренко В.М. и др. 2007; Golbach S.L., 2000; Reíd G., 2008] предлагается проведение дополнительных исследований. К числу последних следует отнести: определение антагонистической активности в отношении стандартных референс культур, выявление особенностей влияния на иммунитет и метаболические функции макроорганизма.

Наконец, на втором этапе рекомендуется определение чувствительности патогенных микроорганизмов к различным пробиотическим препаратам с целью выбора наиболее эффективно действующего.

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Ермоленко, Елена Игоревна, 2009 год

1. Анкирская A.C. Бактериальный вагиноз// Ж. акуш. и гинекол.- 1995.- №.- 6.- С. 13-16.

2. Афанасьев А.И. Этиопатогенетическая терапия коров, больных эндометритами. Автореферат . кандидата ветеринарных наук. Воронеж, 1983.- 17с.

3. Арзамасцев Е.В., Гуськова Т.А., Березовская И.В., Любимов Б.И., Рудаков А.Г., Верстакова О.Л. Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ. М., 2000. -.20 с.

4. Афанасьев А.И. Этиопатогенетическая терапия коров, больных эндометритами: Автореферат кандидата ветеринарных наук. Воронеж, 1983.- 17с.

5. Баринский И.Ф., Чепик С.Г. Инфекции, вызванные вирусами человека простого герпеса 1-го и 2-го типов (413 с) //Медицинская вирусология/ Под ред. РАМН Д.К. Львова, Москва: МИА, 2008.- 656 с.

6. Баснакьян И.А. Стресс у бактерий.- М.: «Медицина», 2003.-136 с.

7. Белобородова Н.В. Гомеостаз малых молекул микробного происхождения и его роль во взаимоотношениях микроорганизмов с хозяином// Вестник РАМН.- 1999. -Т. 16, №7.- С.25-31.

8. Белобородова Н.В. Дискуссия о бактериемии сепсисе// Антибиотики и химиотерапия.- 2002.- №47-8.- С. 20-29.

9. Бельмер C.B. Антибиотик ассоциированный дисбактериоз кишечника// РМЖ.-2004,- № 12(3) 148 http://www.rmj.ru/articles.

10. Беляев И.М. Иммунная система слизистых// Иммунология,- 1997.- № 4.- С. 7-13.

11. Блинкова Л.П. Бактериоцины: критерии, классификация, свойства, методы выявления//Журн/ микробиол,- 2003.-№ 3 .-С. 109-113.

12. Блинкова Л.П., Альтшуллер М.Л., Дорофеева Е.С., Горобец О.Б. Молекулярные основы продукции и действия бактериоцинов//Журн. микробиол.- 2007.- № 2,- С. 97-104.

13. Бондаренко B.M. Русакова Э.И. Лаврова В.А. Иммуностимулирующее действие лактобактерий, используемых в качестве основы препаратов пробиотиков// Журн. микробиол. 1998. - №5,- С.107-112.

14. Бондаренко В.М., Виноградов H.A., Малеев Антимикробная активность окиси азота и его роль в инфекционном процессе// Журн. микробиол.- 1999.- №5.- С. 61-67.

15. Бондаренко В.М. Грачева Н.М. Препараты пробиотики, пребиотики и синбиотики в терапии и профилактике, кишечных дисбактериозов.// Фарматека: Международный медицинский журнал. 2003. - № 7. - С. 56-63.

16. Бондаренко В.М., Воробьев A.A. Дисбиозы и препараты с пробиотической функцией// Журн. микробиол. 2004.- №1.- С.84-92.

17. Бондаренко В.М., Чупринина Р.П., Аладышева Ж.И., Мацулевич Т.В. Пробиотики и механизмы их лечебного действия// Эксперим. и клин, гастроэнтерол. -2004.-№3,- С. 83-87.

18. Бондаренко В.М., Вахитов Т.Я., Петров Л.Н. Перспективы состояния пробиотических препаратов на основе «чувства кворума» бактерий// Журн. микробиол. -2006.-№3. С. 105-113.

19. Бондаренко В.М., Суворов А.Н. Симбиотические энтерококки и проблемы энтерококковой оппортунистичской инфекции.- Москва, 2007.- 30 с.

20. Борисенко К.К., Тоскин И.А., Кисина В.И. О значении колонизации мочеполовых органов Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealytician// Проблемы ИПП. -1999.-№3. -С. 28-32.

21. Бойцов А.Г., Л.Ю. Нилова, Оришак Е.А. Дисбиотические нарушения микрофлоры толстого кишечника: проблемы диагностики и коррекции// Вестник СПбГМА им. И.И. Мечникова. 2008. - №3. - С. 120-123.

22. Брилис В. И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П., Ленцнер A.A. Адгезивные и гемагглютинационные свойства лактобацилл//Журн. микробиол.- 1982.- № 9.-С. 75-78.

23. Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П., Ленцнер A.A. Методы изучения адгезивного процесса микроорганизмов// Лаб. Дело. -1987.- №4.- С. 210-212.

24. Бухарин О. В., Васильев Н. В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине.-Томск, 1974.- 183 с.

25. Бухарин О.В., Валышев A.B., Гильмутдинова Ф.Г., Гриценко В.А., Карташова В.Л., Кузьмин М.Д., Усвятцов В.Я., Черкасов C.B., Экология микроорганизмов человека,- Екатерининбург: Ж УрО РАН, 2006,- 479 с.

26. Волчков В.А. Краткое практическое руководство по биометрии для врачей. -СПб, 1998.-63 с.

27. Воробьев A.A., Несвижский Ю.В., Богданова Е.А., Корнеев М.Л. Особенности микробиоценоза пристеночного муцина желудочно-кишечного тракта крыс// Журн. микробиол. 2005.- № 6. -С. 3-7.

28. Гаврилов Б.Н. Усовершенствование методов лечения при эндометритах у коров: Автореферат кандидата ветеринарных наук. Краснодар, 2005. - 22с.

29. Гавриш В.Г. Клинико-лабораторная диагностика и рациональные методы терапии субклинического эндометрита у коров: Автореферат доктора ветеринарных наук. -Воронеж, 1997 40с.

30. Глушанова H.A. Биологические свойства лактобацилл// Бюллетень сибирской медицины.-2003, Т.2, № 4.- С.50-57.

31. Глушанова, Н. А. Экспериментальное изучение колонизации кишечника гомопробиотиками// Сибирский медицинский журналнал. 2004. - Том 19, № 1. - С. 4351.

32. Глушанова H.A., О биологической и антагонистической активности «сухохо» и «жидкого» пробиотика «№ппе»//Бюллетень Восточно-Сибирского НЦ СО РАМН.-2005.- №1.- С. 130-133.

33. Глушанова H.A., Шендеров Б. А. заимоотношения пробиотических и индигенных лактобацилл хозяина в условиях совместного культивирования in vitro// Журнал, микобиол. 2005.- №2.- С. 75-79.

34. Гончаров В.П. Карпов В.А. Профилактика и лечение гинекологических заболеваний коров.- М.: Росагропромиздат, 1991. 190с.

35. ГОСТ 24067-80 «Молоко. Метод определения перекиси водорода», переиздание июнь 1987, с изменением №1, утвержденным в январе 1986 г., ИУС 5-86

36. Грибова И.А. Гематологическая норма// Руководство по гематологии. М.: Медицина, 1979.-54 с.

37. Григорьева Т.Е. Лечение и профилактика эндометритов у коров.- Москва.: Росагропромиздат, 1988. 63с.

38. Гриневич В.Б., Сас Е.И., Захарченко М.М. . К.В. Системные эффекты коррекции микробиоценоза человека// Вестник Российской военно-медицинской академии. 2004. - № 2 . - С. 91-97.

39. Грудянов А.И., Дмитриева H.A., Фоменко Е.В. Применение пробиотиков в комплексном лечении воспалительных заболеваний пародонта.- М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006.- 112с.

40. Далин М.Ф., Фиш Н.Г. Адгезины микроорганизмов. М.: Мир, 1985.- 43 с.

41. Дисбиоз кишечника. Руководство по диагностике и лечению/ Под редакцией проф. Е.И.Ткаченко, проф. А.Н.Суворова.- СПб.: СпецЛит, 2007.- 238 с.

42. Дмитриева Н.Ф., Кудрина Е.С., Петров Г.И. Биоогические свойства бактериальных тейхоевых кислот// Журн. микробиол. 1982.- № 2.- С. 12-18.

43. Доронин А.Ф., Шендеров Б.А. Функциональное питание. М.: Грантъ, 2002.- 296 с.

44. Дорофейчук А.Г. Реомендации по определению показателей естественной резистентности птиц.- Ленинград, 1980.- С.5-7

45. Еганян P.A. Изучение влияния кисломолочного продукта «НАРИНЭ» на уровень холестерина сыворотки крови при гиперхолестеринемии// Лечащий врач. 1999. -№6.-С. 15-17.

46. Егоров Е. С., Баранова И.Н. Бактериоцины: образование, свойства, применение// Антибиотики и химиотерапия.- 1999,- № 6.- С. 33-40.

47. Егорова В.В., Питран Б.В., Джаиани H.H., Иезуитова H.H., Тимофеева Н.М., Цветкова В.В., Уголев A.M. Радиальное распределение пищеварительных ферментов в тонкой кишке// Доклады Академии наук СССР. -1987, Т. 293.- № 5. С.1235-1238.

48. Зинченко Е.В., Панин А.Н. Иммунобиотики в ветеринарной практике. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН, 2000. -64 с.

49. Зорина В.В., Николаева Т.Н., Наровлинский А.Н. Влияние бактерий рода Lactobacillus на продукци. Цитокинов клетками пейровых бляшек экспериментальных животных// Иммунология,- 2004- №5.-С.288-290.

50. Калинина Н.М. Заболевания иммунной системы. Диагностика и фрармакотерапия/Н.М. Калинина, С.А. Кетлинский, С.В. Оковитый, С.Н. Шуленин.- М.: Эксмо, 2008.- 496 с.

51. Калмыкова А.И. Пальчикова H.A., Богатова Н.П., Дружинина Ю.Г. Селятицкая В.Г. Системная реакция организма экспериментальных животных на длительный прием пробиотика// Бюллетень СО РАМН. 2005.-№ 3(117). - С. 97-101.

52. Кетлинский С.А., Симбирцев A.C. Цитокины.- СПб: ООО «Издательство фолиант», 2008. 552 с.

53. Кира Е.Ф. Бактериальный вагиноз. Вчера, сегодня, завтра// Журнал акушерства и женских болезней. 1994. - № 2. - С. 32-35.

54. Кокряков В.Н. Очерки о врожденном иммунитете.- СПб.: «Наука», 2006.- 261с.

55. Кондракова O.A., Ещина A.C., Дмитриева Н.Ф., Брико Н.И., Бабин В.Н. Чувствительность бета-гемолитических стрептококков к антибиотикам и альтернативным препаратам// Антибиотики и химиотерапия.- 1998.- 43.- №7.- С. 26-30.

56. Корниенко Е.А. Современные принципы выбора пробиотиков// Детские инфекции . 2007.- Том 6. - № 3 .- С. 63-68 .

57. Коршунов В.М., Кафарская, Л.И., Володин H.H., Тарабрина Н.П. Коррекция дисбиотических нарушений вагинальной микрофлоры с помощью препарата высокоадгезивных лактобактерий// Журн. микробиол.-1990.- №7.-С.17-19.

58. Коршунов В.М., Уртаева З.А., Смеянов В.В., Ефимов Б.А. и др. Изучение антагонистической активности бифидобактерий in vivo и in vitro с использованием гнотобиологической технологии// Журн. микробиол.- 1999.- №5.- С.12-11

59. Костюкевич О.И. Современные представления о микробиоценозе кишечника. Дисбактериоз и его коррекция// РМЖ. 2007. 2176.

60. Кремлев Е.П., Банакова Л.А. Лечение при микозном эндометрите//Ветеринария.-1979.-№5.- С. 45-46.

61. Кубась В.Г., Данилова О.П.,Чайка H.A. Кандидоз. Санкт-Петербург, 1997.- 52 с.

62. Кудлай М.Г., Лиходед В.Г. Бактериоциногения. Л, 1966.- с. 234.

63. Ленцнер A.A., Ленцнер Х.П., Тоом М.А. О способности лактобацилл микрофлоры человека продуцировать лизоцим// Журн. микробиол.- 1975.- №8.- С. 77-81.

64. Лобзин Ю.В., Макарова В.Г., Кровякова Е.Р. Дисбактериоз кишечника (клиника, диагностика, лечение): Руководство для врачей .СПб:000 «Изд-во Фолиант», 2003.-256 с.

65. Лыкова Е.А., Мурашова А.О., Бондаренко В.М. Нарушения микрофлоры кишечника и иммунитета у детей с аллергическими дерматитами и их коррекция// Росс, педиатр, журн.- 2000. № 2.- С. 20-24.

66. Лясковский Т.М., Рыбалко С.Л., Подгорский B.C. Индукция интерферона молочнокислыми бактериями в экспериментах in vitro и in vivo// Микробиол. журн.-2005,- Т. 67, №2,- С. 81-87.

67. Мечников И.И. Этюды оптимизма М.: «Наука», 1988.- 328 с.

68. Миронов A.A., Комиссарчик Я. Ю., Миронов В. А. Методы электронной- микроскопии в биологии и медицине: Методическое руководство. СПб.: Наука, 1994.400 с.

69. Михайлов И.Б., Корниенко Е.А. Применение про- и пребиотиков при дисбиозе кишечника у детей: Методическое пособие для врачей-педиатров.- СПб, 2004.- 18 с.

70. Михайлова JI.E., Кохреидзе H.A., Шамардина Н.М., Петров JI.H. Опыт использования препарата ВИТАФЛОР в лечении вульвовагинитов у детей.// Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. 1999. - №1, Т.З. - С. 118-119.

71. Мухина Ю.Г., Бельмер С.В., Т.В.Гасилина, Завалин П.А. Принципы лечения " язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у детей// Медикал маркет,- 1996.- № 20.1. С.34-35.

72. Навашин С. М., Фомина И. П. Рациональная антибиотикотерапия//М: Изд-во: «Медицина», 1982 .-496 с.I

73. Николаева Т.Н., Зорина В.В. Бондаренко В.М. Роль цитокинов в модудяции ■ иммунореактивности организма бактериями рода Lactobacillus!'1 Журн. микробиол.2004.-№4,- С. 101-106.

74. Нилова Л.Ю., Бойцов А.Г., Оришак Е.А. К вопросу о применении пробиотиков для коррекции дисбактериоза толстого кишечника// Вестник СПбГМА им. И.И. Мечникова. 2008. - №3. - С. 154-157.

75. Нилова Л.Ю. Характерисика условно-патогенных микроорганизмов, выделенных при диагностике дисбактериоза толстого кишечника: Автореферат к.м.н., 2009.- с 24.

76. Нынь И.В., Королюк A.M. Настоящее и будующее пробиотической микробилогии// Известия Государственного технологичского института,- 2008- №3(29). -С. 70-74.

77. Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (ОСТ 91500.11.0004-2003, утвержден Приказом Министерства здравоохранения РФ № 231 от 09.06.2003).

78. Парфенов А.И., Ручкина И.Н., Осипов Г.А. Антибиотико-ассоциированная диарея// Экспер. и клин. Гастроэнтерол,- 2002. № 5.- С. 92-95.

79. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека. М.: Медгиз, 1955.- 436 с.

80. Петров Л.Н. Витафлор. Бактериальный препарат нового поколения для лечения и профилактики дисбиозов. М,- СПб.: Гер да, 2004. - 72 с.

81. Петров Л.Н. Петров Л.Н., Вербицкая Н.Б., Добрица В.П., Галкин Г.Н., Петров Н.Л. Бактериальные пробиотики: биотехнология, клиника, алгоритм выбора/ Биотехнология.- Спб.:ФГУ Гос НИИ ОЧБ, 2008.- 136 с.

82. Петровская В.Г., Марко О.П. Микрофлора человека в норме и патологии. -М: Медицина, 1976. 231 с.

83. Похиленко В.Д. Перелыгин В.В. Проботики на основе спорообразующих бактерий и их безопасность// Химическая и биологическая безопасность.-2007.- №2-3 (32-33).- С. 20-41.

84. Правила доклинического исследования безопасности фармакологических средств. М., 1992.

85. Прозоровский С.В., Раковская И.В. Персистенция микоплазм в инфицированном организме: наблюдения, причины и механизмы, диагностика // Журн. микробиол. 1997. №4. С. 47-51.

86. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.Г., Демченко В.Е. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и её ошибки // Фармакология и токсикология. -1978 -№4.-С. 497-502.

87. Работнова И.Л., Позмогова И.П. Хемостатное культивирование и ингибирование микроорганизмов. М.: Наука, 1979. - 207 с.

88. Рищук С.В., Ильясов Ю.Ю., Гречанинова Т.А. Адгезия лактобактерий к клеткам буккального и вагиального эпителия// Вестник СПбГМА им. Мечникова,- 2004.- №4.- С. 191-193.1

89. Рокитский П.Ф. Биологическая статистика. Минск: Вьппейшая школа, 1973.329 с.

90. Рубцов В.И. Микрофлора при маститах и гинекологических заболеваниях укоров. Москва, 2004. - 5 с.

91. Руш К., Руш Ф. Микробиологическая терапия. М.: Арнебия, 2003. - 160 с.

92. Рыбальченко О.В. Электронно-микроскопическое исследование межклеточных взаимодействий микроорганизмов при антагонистическом характере взаимоотношений//Микробиология.- 2006. Т. 75, №4.- С. 550-555.

93. Рыбальченко О.В., Бондаренко ВМ., Вербицкая Н.Б. Проявление антагонистического действия бактериоциногенных Lactobacillus acidophilus на Klebsiella pneumoniae, Citrobacter jreundi и Proteus vulgaris //Журн. микробиол.-2006.-№7.- С. 8-11.

94. Симаненков В.И. Клинические аспекты диагностики и лечения дисбиоза кишечника в общетерапевтической практике. Учебно-методическое пособие. СПб., 2003. -36 с.

95. Соколова К.Я., Соловьева И.В. Дисбактериозы: теория и практика/ Под ред. Княжева В.А.- Н.Новгород: НГТУ, 1999.- 240 с.

96. Страчунский, J1. С., Белькова, А. В., Дехнич Ю. А. Внебольничные MRSA -новая проблема антибиотико-резистентности// Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия.- 2005. Том 7.- № 1. - С. 32-46.

97. Суворов А.Н. Захаренко С.М., Алехина Г.Г. Энтерококки как пробиотики выбора// Клиническое питание. 2003.- №1. - С. 26-29.

98. Суворов А.Н., Алехина Г.Г., Пигаревский П.В., Грабовская К.Б., Нежинская Г.И., Назаров П.Г. Опыт применения лактококков в терапии экспериментального вагиноза// Гастро Бюллетень.- 2004,- № 4,- С. 29-31.

99. Тартаковский И. С. Листерии: роль в инфекционной патологии человека и лабораторная диагностика//Клиническая микробиология и антимикробная терапия.-2002,-Том 2.- №2- С.20-30.

100. Телешева Л. Ф., Долгушина В. Ф., Долгушин И. И. Механизмы противо-инфекционной защиты репродуктивного тракта женщин // Журн. микробиол. -1998. -№ 4. С. 85-90.

101. Тимофеева Н.М., Иезуитова H.H., Громова Л.В. Современные представления о всасывании моносахаридов, аминокислот и пептидов в тонкой кишке млекопитающих // Успехи физиол. Наук,- 2000.- Т. 31.-.№ 4.- С. 24-37.

102. Ткаченко Е.И., Успенский Ю.П. Питание, микробиоценоз, и интеллект человека.- СПб: СпецЛит, 2006.- 560 с.

103. Тотолян А.А, Суворов А.Н., Дмириев A.B. Стрептоокки группы В: клиника, лабораторная диагносика и лечение.- СПб.: «Наука», 2009.- 289 с.

104. Тюрин М.В., Шендеров Б.А., Рахимова Н.Г., Поспелова В.В., Лагода И.В. К механизму антагонистической активности лактобацилл// Журн. микробиол.-1989.-№2.-С.З-8.

105. Уголев A.M. Теория адекватного питания и трофология.- Спб: Наука, 1991.- 271 с.

106. Хавкин А.И. Роль микрофлоры в развитии иммунной системы пищеварительного тракта// Педиатрия.- 2008. №4,- С. 4-5.

107. Хаитов P.M. Физиология иммунной системы//М.: ВИНИТИ, 2001. 224 с.

108. Халяпин Б. Д., Прокопьев A.A. Кинетический метод количественного определения комплемента// Иммунология.- 1986.- № 3. С.66-69

109. Холод В.М., Ермолаев Г.Ф. Определение иммуноглобулинов в сыворотке крови методом осаждения сульфата цинка//Справочник по ветеринарной биохимии. -Минск: Ураджай, 1988,- С. 86-87.

110. Хорошилова Н.В. Имуномодулирующее и лечебное действие пробиотиков // Иммунология.-2006. №6. - С. 252-256.

111. Цой И.Г., Сапаров A.C., Тимофеева И.К. Иммуно-стимулирующее действие лактобактерий на цито- токсичность естественных клеток-киллеров// Журн микробиол.- 1994,-№6.- С. 112-113.

112. Чахава О.В. Гнотобиология о микрофлоре организма хозяина и антибиотикотерапии// Антибиотики и медицинская биотехнология.- 1987.- TXXXII, №3,- 1987.-С. 170-179.

113. Шатаева JI. К., Хавинсон В. X., Ряднова И. Ю. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы).- Спб: Наука, 2003,- 224 с.

114. ИГендеров Б. А., Манвелова М.А. Способ получения аутопробиотика, содержащего живые бифидобактерии и лактобациллы// Авторское свидетельство CCCPN 1286212, А 61 К 35/74, 30.01.87.

115. Шендеров Б.А. Микрофлора человека и животных и ее функции//Медицинская микробная экология и функциональное питание. Т.1. Микрофлора животных и человека и ее функции. М.: ГРАНТЪ, 1998. - 288 с.

116. Шендеров Б.А Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том 3. Пробиотики и функциональное питание. М.: ГРАНТЪ, 2001. -288 с.

117. Шендеров Б.А. Функциональное питание, криогенные банки микробиоценозов и их роль в сохранении и восстановлении здоровья //Вестник восстановительной медицины. -2003. -№1. С 29-31.

118. Шендеров Б.А. Пробиотики, пребиотики и синбиотики. Общие и избранные разделы проблемы// Пищевые ингредиенты. Сырье и добавки.- 2005.- №2.- С. 23-26.

119. Яковлев В.П., Яковлев C.B. Рациональная антимикробная фармакотерапия: Руководство для практических врачей. М., 2003.- 1008 с.

120. Юнкерова В.И. и Григорьева С.Г. «Метематико-статистическая обработка данных медицинских исследований».- СПб.: ВМедА, 2002.- 266 с.

121. Ярилин A.A. Система цитокинов и принципы ее фукционированияв норме и при патологии//Иммунология.- 1997.- № 5, С.7-14.

122. Abee T., Klaenhammer Т. R., Letellier L. Kinetic studies of the action of lactacin F, a bacteriocin produced by Lactobacillus johnsonu that forms poration complexes in the cytoplasmic membrane// Appl Environ Microbiol.- 1994.- Vol. 60.- P.1006-1013.

123. Allison G. E., Fremaux C., Klaenhammer T. R. Expansion of bacteriocin activity and host range upon complementation of two peptides encoded within the lactacin F operon// J. Bacterid.- 1994,- Vol. 176.- P. 2235-2241.

124. Andreeva P., Dimitrov A. The probiotic Lactobacillus acidophilus — an alternative Treatment of bacterial vaginosis // Akush. Ginekol.(Sofia).- 2002,- № 41(6).- P. 29-31.

125. Apostolou E., Kirjavainen P.V., Saxelin M. Good adhesiion properties of probiotics: a potential risk for bacteriemia// FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2001.- №.- 31.- P. 35-39

126. Arakawa K., Kawai Y., Fujitani K., Nishimura J., Kitazawa H. Bacteriocin production of probiotic Lactobacillus gasseri LA39 isolated from human feces in milk-based media// Animal Science Journal. 2008. - Vol. 79, Issue 5.- P. 634 - 640.

127. Ayebo A.D., Angelo I. A., Shahani K.M. Effect of ingesting Lactobacillus acidophilus milk upon fecal flora and enzyme activity in humans // Milchwiss.- 1980. Vol. 35. -P.730-733.

128. Ayger P., Joly J. Factors influencing germ tube production in Candida albicans!'/ Mycopathologia.- 1977.- Vol. 61,- №3.- P.183-186.

129. Axelsson L.T., Chung T.C., Dobrogosz W.J., Lindgren S.E. Production of a broad spectrum antimicrobial substance by Lactobacillus reuterill Microbial Ecology in Health and Disease.- 1989. № 2.- P. 131-136.

130. Axelsson L., Hoick A. The genes involved in production of and immunity to sakacin A, a bacteriocin from Lactobacillus sakei Lb706// Journal of Bacteriology.- 1995. № 177. -P. 2125-2137

131. Axelsson L. Lactic acid bacteria: Classification and physiology// Lactic acid bacteria: microbiological and ftmctional aspects/ 3rd rev. and exp. ed. Marcel Dekker, Inc., New York. 2004. - P. 1-66.

132. Baker D., Plotkin S.A. Enhancement of vaginal infection in mice byHerpes Simplex Virus type I// Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1978.- Vol. 158. - -P. 131-134.

133. Banasaz M., Norin E., Holma R., Midtved T. Increased enterocite production in gnotobiotic rats monoassociated with Lactobacillus rhamnosus GG// Appl. Env. Microbial.- 2002.-Vol. 68. P. 3031-3034.

134. Barefoot SF, Klaenhammer TR. Purification and characterization of the Lactobacillus acidophilus bacteriocin lactacin B// Antimicrob. Agents Chemother. -1984. Vol.26.- №. 3.- P. 328-334.

135. Bengmark S., Ecological control of the gastrointestinal tract. The role of probiotic floraII Gut. 1998,- Vol. 42,- №1.- P. 2-7.

136. Benyacub J., Czarnecki-Maudlen G.L., Cavardini C., Sauthier T., Anderson R.E., Schiffrin E., von der Weid T. Supplentation of food with Enterococcus faecium (SF68) stimulates immune functions in young dogs// J.Nutr.- 2003.- Vol. 133.- P. 1158-1162.

137. Bittencourt E., Suzart S. Occurrence of virulence-associated genes in clinical Enterococcus faecalis strains isolated in Londrina, Brazil// J. Med. Microbiol. 2004. -Vol. 53. - P.1069-1073.

138. Bergey's manual of Systematic Bacteriology. 1986. - Volume 2. - 1214 p.

139. Bittencourt E., Suzart S. Occurrence of virulence-associated genes in clinical Enterococcus faecalis strains isolated in Londrina, Brazil// J. Med. Microbiol. 2004. -Vol. 53.- P.1069-1073.

140. Blum S., Alvares S., Haller D. Intestinal microflora and the interaction with immunocompetent cells// Antonie van Leewenhoek. 1999. - Vol. 76,- P. 199-205.

141. Both M.C., Bogie C.P., Sahl H.-G., Siezen R.G., Halter K. L., Gilmore M.S. Structural analysis and proteolytic activation of Enterococcus faecalis cytolysin, a novel lantibiotic// Molecular Microbiol. 1996. - Vol. 21, Iss. 6. - P. 1175-1184.

142. Byczkowski J.Z., Gessner T. Biological role of superoxide ion-radical// Int. J. Biochem. 1998. Vol. 20. - P. 569-580.

143. Caetano J.A., Parames M.T., Babo M.J., Santos A., Ferreira A.B., Freitas A.A., Coelho M.R., Mateus A.M. Immunopharmacological effects of Saccharomyces boulardii in healthy human volunteers// Int. J. Immunopharmacol. 1986. -Vol. 8.- P. 245-259.

144. Casaus P., Nilsen T., Cintas L.M., Nes I.F., Hernandez P.E., Holo H. Enterocin B, a new bacteriocin from Enterococcus faecium T136 wich can act synergistically with enterocin All Microbiology. -1997. Vol.- 143.- P. 2287-2294.

145. Catteral R.D. Influence of gestogenic contraceptive pills on vaginal candidiasis// Br. J. Vener.Dis. 1978. - Vol. 47.- P. 45-47.

146. Characklis W.G., Marshall K.G. Biofilms: a basis for an interdisciplinary approach.-New York.- 1990. -P. 3-5

147. Chen H., Hoover D.G. Bacteriocins and their food applications// Compichensive rewiews in food science and food safety. 2003. - Vol. 2.- P. 82-100.

148. Choorpenning F.W. Immunologic effects of teichic acid and inanimate bacterial product in the environment: arewiew// OHIO j. Sci. 1982, Vol. 882. - № 31.- P.31-37.

149. Christensen H.R., Frokiaer H., Pestska J.J. Lactobacilli differently modulate expression of cytokines and maturation surface markers in murine dendritic cells// J. Immunol. 2002. Vol.168. - №1.- P. 171-178.

150. Chung T.C., Axelsson L., Lindgren S.E., Dobrogosz W.J. In vitro studies on reuterin synthesis by Lactobacillus reuterill Microbiology in health and diseases. 1989. - Vol. 2. -P. 137-144.

151. Cole C.B., Fuller R., Mallet A.K., Rowland I.R. The influence of the host on expression of intestinal microbial enzyme activities involved in metabolism of foreign compounds// J Appl Bacteriol. 1985. - Vol.59. - №.6. - P. 549-553.

152. Collins E. B. and Aramaki K. Production of hydrogen peroxide by Lactobacillus acidophilus //Journal of Dairy Science. 1980, № 63. - P. 353-357.

153. Cox C.R., Coburn P.S., Gilmore M.S Enterococcal cytolysin: a novel tho komponent peptide system that serves as a bacterial defense against eucaryotic and procaryotic cells// Curr Protein Pept Sci.- 2005,- Vol.- 6,- №1. P. 77- 84.

154. Cuozzo S. A., Castellano P., Sesma F. J.M., Graciela M., Vignolo R.R. Differential Roles of the Two-Component Peptides of Lactccin 705 in Antimicrobial Activity// Current microbiology.- 2003,- Vol. 46,- № 3.- P. 180-183.

155. Daher K., Selsted M.E., Lehrer R.I Direct inactivation of viruses by human granulocyte defensins// J. Virol. 1986.-Vol.60. - P. 1068-1074.

156. Dalet K., Briand C., Cenatiempo Y. and Héchard Y. The rpoN gene of Enterococcus faecalis directs sensitivity to subclass Ila bacteriocins // Current Microbiology, 2000, № 41. -P. 441-443.

157. De Petrino S.F., De Jorrat B.B., Meson O., Perdigón G. Protective ability of certain lactic acid bacteria against an infection with Candida albicans in a mouse immunosupression by corticoidII Food Agrie. Immunol. -1995. Vol. 7.- P. 365-373.

158. De Vuyst L., Leroy F. Bacteriocins from Lactic Acid Bacteria: Production, Purification, and Food Applications// J. Mol. Microbiol. Biotechnol. 2007. - Vol.13. - P. 194-199.

159. Diep D.B., Axelsson L., Grefsli C., Nes I.F. The synthesis of the bacteriocin sakacin A, is a temperature-sensitive process regulated by a pheromone peptide through a three-component regulatory system// Microbiol.- 2000,- Vol. 146.- P. 2155-2160.

160. Drider D., Fimland G., Héchard Y., McMullen L.M., Prévost H. The Continuing Story of Class Ha Bacteriocins// Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2006,- Vol. 70.- № 2,- P. 564-582.

161. Earashaw R. G. The antimicrobial action of lactic acid bacteria: natural food preservation systems/ Ed. Wood B. J. B: The lactic acid bacteria in health and disease.- Vol. 1. Chapman and Hall: London. 1992. - P. 211-232.

162. Eijsink V. G., Skeie M., Middelhoven P. H., Brurberg M. B. and Nes I. F. Comparative studies of class lia bacteriocins of lactic acid bacteria // Appl. Environ. Microbiol. 1998,- № 64. - P. 3275-3281.

163. Elmer G.W., Surawicz C.M., McFarland L.V. Biotherapeutic agents. A neglected modality for the treatment and prevention of selected intestinal and vaginal infections// JAMA, 1996.-Vol. 275. №11. - P.870-876.

164. Elmer G.W. Probiotics: «living drugs»//Amm. J. Health Syst. Pharm. 2001,- Vol. 58.-№12.-P. 1101-1109.

165. Ennahar S., Deschamps N. Anti-Listeria effect of enterocin A, produced by cheese-isolated Enterococcus faecium EFM01, relative to other bacteriocins from lactic acid bacteria // Journal of Applied Microbiology. 2000. - Vol. 88.- № 3.- P. 449-457.

166. Ericson K.L., Hubbard N.E. Probiotic immunomodulation in health and diseases//J.Nutr. 2000. - № 130(2).- P. 403-409.

167. FAO/WHO. Evalution of health and nutritional properties of probiotics in food .Cordoba, Argentina: Food and Agriculture Organization of the United Nations and World Health Organization.; 2001.-P.1-34.

168. Farias M.E., Farias R.N., Holgado R. Letters in Purification and N-terminal acid" sequence of enterocinCRL35, a pediocin-like bacteriocin produced by Enterococcus faecium CRL35//J. Applied Microbiology.- 1996.- Vol. 22.- P. 417-419.

169. Fimland G., Eijsink V. G. H., Nissen-Meyer J. Comparative studies of immunity proteins of pediocin-like bacteriocins //Microbiology, 2002.- Vol.148.- №3,- P. 661-3 670.

170. Fischetti R„ Novick R.P., Ferrettti J.J. Gram-positive pathogens// ASM Press.- 2002.-p. 736.

171. Fitzssimmons N., BerryD.R. Inhibition of Candida albicans by Lactobacillu acidophilus: evidence for the involvement of a peroxidase system// Microbios. 1994.-Vol. 34.- P. 125-13.

172. Flores R. Analytical biochemistry. 1978. - Vol.88. - P. 605-611.

173. Fremaux C. C., Klaenhammer T. R. Molecular analysis of the lactacin F operon// Appl. Environ. Microbiol. 1993.-Vol.59,- № 11.- P.3906-3915.

174. Fuller R. Probiotics in man and animals// J.Appl. Bacteriol. 1989, N66, P. 365-369.

175. Gaskins HR. The role of probiotics in paediatrics// Current Paediatrics, 1997.- Vol. 14, Issue 2,-P. 104-109.

176. Gibson GR, Roberfroid M. Dietary modulation of the human colonic microbiota: Introducing the concept of prebiotics// J Nutr. 1995. - Vol.1256.- P. 1401-1412.

177. Gibson G.R. Human gut microbiology: the end of the food chain or the start of good health //Microbiology today. Vol 29. 2002.- P. 229-254.

178. Goldin B.R., Gorbach S.L. The effect of milk and lactobacillus feeding on human intestinal bacterial enzyme activity//Am J .Clin. Nutr.- 1984.-Vol.39.-№5 P.756-761.

179. Grangette C., Muller-Alouf H., Hols P., Goudercourt, D., Delcour, J., Turneer, M. & Mercenier, A. Enhanced mucosal delivery of antigen with cell wall mutants of lactic acid bacteria// Infect. Immun. 2004. - Vol. 72. - P. 2731-2737.

180. Gravesen A., Axelsen A.-M., Silva J.M., Hansen T. B., Knochel S.Frequency of Bacteriocin Resistance Development and Associated Fitness Costs in Listeria monocytogenes //Appl. Envir. Microbiol. 2002. - Vol. 68. - № 2.- P. 756 - 764.

181. Greene J.D., Klaenhammer T.R. Factors involved in adherence of lactobacilli to human Caco-2 cells// Appl. Envir.Microbiol. 1994. - Vol. 60.- P.4487-4494.

182. Gutteridge, J.M.C., Stocks, J. Caeruloplasmin: physiological and pathological perspectrives// Cri. Rev. Clin. Lab. Sci. -1981. P. 257-329.

183. Haghighi H.R.,. Gong J., Gyles C.L., Hayes M.A., Sannei B., Parvizi P., Gisavi H., Chambers J.R., Sharif S. Modulation of antibody-mediated immune response by probiotics in chickens// Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2005. - Vol.12.- №12. - P. 1387-1392.

184. Hampl H., Schlehofer J.R. Habermehl K.O. Differences in the morphology of herpes simplex virus infected cells. II Type specific virus membrane alterations of HSV-1 and HSV-2 infected cells// Med Microbiol Immunol., 1981,- Vol.169.- №3.- P. 209-223.

185. Harwig S., Chen N., Park A., Lehrer R. Purification of cysteine-rich bioactive peptides from leucocytes by continuosus acid-urea-polyacrilamide gel electrophoresis// Anal. Biochem., 1993,- Vol. 208.- P. 382-386.

186. Hauge, H. H., Mantzilas D., Eijsink, V.G.H., Nissen-Meyer J. Membrane-Mimicking Entities Induce Structuring of the Two-Peptide Bacteriocins Plantaricin E/F and Plantaricin J/K//J. Bacteriol. 1999. - Vol. 181.- P. 740-747.

187. Havarstein L. S., Diep D. B., Nes I. F. A family of bacteriocin ABC transporters carry out proteolytic processing of their substrates concomitant with export// Molecular. Microbiology. 1995,- № 16.- P. 229-240.

188. Henderson B., Wilson M. Homo bacteriens and a network of surprises// J.Med. Microbiol.- 1996.- Vol. 45.- P. 393-394.

189. Hickey R. M., Twomey D. P., Ross R. P., Hill C. Potential of the enterocin regulatory system to control expression of heterologous genes in Enterococcus// Journal of Applied Microbiology. 2003. - № 95. - P. 390-397.

190. Hilton E., Isenberg H.D., Alperstein P., France K., Borenstein M.T. Ingestoin of yogurt containing Lactobacillus acidophilus as prophylaxis for candidal vaginitis // Annals of Internal Medicine. 1992,-Vol.116. - №5. - P.353-355.

191. HolmF. Gut Health and diet//World Food Ingredient.-2003.-P. 52-55.

192. Holt J. G., Krieg N. R., Sneath P .H. A., Staley J. T„ Williams S. T.// Bergey's manual of determinative bacteriology. Regular, nonsporing Gram-positive rods/ 9th ed.: The Williams &Wilkins Co., 1994, Baltimore. P. 565-567.

193. Holzapfel W. H., Haberer P., Snel J., Schillinger U. and Huis in't Veld J. H. J. Overview of gut flora and probiotics// Journal of Food Microbiology. 1998. - № 41. - P. 85-101.

194. Holzapfel W.H., Haberer P., Geisen R., Bjorkroth J. and Schillinger U. Taxonomy and important features of probiotic microorganisms in food and nutrition// The American Journal of Clinical Nutrition, 2001. № 73, Suppl. 2. - P. 365S-373S.

195. Huycke M.M., Spiegel C.A., Gilmore M.S. Bacteremia caused by hemolytic, highlevel gentamicin-resistant Enterococcus faecalisll Antimicrob. Agents Chemother. 1991. -Vol.35.-№8. - P. 1626- 1629.

196. Ishibashi N., Yamazaki S. Probiotics and safety//Am. J. Clin. Nutr. 2001.- Vol. 73,-№2.- Suppl.- P.465-470.

197. Isolauri E., Sutás Y., Kankaanpaa P., Arvilommi H., Salminen S. Probiotics: effects on immunity// Am J Clin Nutr. 2001. - Vol. 73, 2 suppl.- P.444 -450.

198. Jack R.W., Tagg I.R., Ray B. Bacteriocins of gram-positive bacteria//Microbiol. Rev. 1995. - Vol 59.- №. 2. - P. 171-200.

199. Jay J. M. Antimicrobial properties of diacetyl// Appl. Environ. Microbiol. 1982, № 44. - P. 525-532.

200. Jay J. M. Intrinsic and extrinsic parameters of food that affect microbial growth// Modern Food Microbiology: 3 Avi Book, New York, 1992. P. 38-62.

201. Jeavons H.S. Prevention and treatment of vulvovaginal cadidiasis using exogenous// J. Obstet. Gynecol. Neonatal. Nurs. 2003. - Vol.32.- №3- P.287-296.

202. Jessen T.E., Barkholt V., Welinder K.G. A simple alternative pathway for hemolytic assay of human complement component C3 using methylamine-treated plasma. // JimmunoLMethods, 1983. Vol.60.- № 1-2. - P.89-100.

203. Jijón H. Backer J., Diaz H., Yeung H., Thiel D., McKaigney C., De Simone C.,

204. Madsen K., DNA from probiotic bacteria modulates murine and human epithelial andimmune functions//Gastroenterology.-2004.- Vol. 126.-P. 1358-1373.i

205. Joerger M.C., Klaenhammer T.R, Characterization and purification of helveticin J and evidence for a chromosomally determined bacteriocin produced by Lactobacillus helveticus 481//J. Bacteriol. -1986. Vol. 167. - № 2. - P. 439-446.

206. Joosten H. M., Devreese M., Van Beeumen M., Nunez B. J., Marugg J. D. Purification and characterization of enterocin 4. a bacteriocin produced by Enterococcus faecalis INIA 4//Appl. Environ. Microbiol. 1996. - Vol. 62. - №11.- P. 4220^223.

207. Kaila M., Isolauri E., Arvilommmi H., Vesikari T. Viable versus inactivated lactobacillus strain GG in acute rotavirus diarrhea// Archives of Disease in Childhood.-1995,- Vol. 72,- №1.- P. 43-51.

208. Kalu D.N. The ovariectomized rat model of postmenopausal bone loss// Bone Miner. -1991. Vol. 15,- №3.- P. 175-179.

209. Katla T., Naterstad K. Vancanneyt M., Swings J. and Axelsson L. Differences in susceptibility of Listeria monocytogenes strains to sakacin P, sakacin A, pediocin PA-1, and nisin // Appl. Environ. Microbiol. 2003. - № 69. - P. 4431-4437.

210. Kaushic C., Zhou F., Murdin A.D. Wira C.R. Effects of estradiol and progesterone on susceptibility and early immune response to Chlamydia trachomatis infection in the female reproductive tract//Inf.Immun. 2000 Vol.68.-№7. - P. 4207-4216.

211. Kita E., Matsuura H., Kashiba S. A mouse model for the study of gonococcal genital infection//J.Infect. Dis. 1981. - Vol. 143.- P. 67-70.i

212. Klaenhammer T.R. Genetics of bacteriocins produced by lactic acid bacteria// FEMS Microbiol. Rew. 1993. - Vol.12. - P. 39-86.

213. Klebanoff S.J, Belding M.E. Virucidal activity of EbCVgenerating bacteria: requirement for peroxidase and a halide// J. Infect. Dis. 1974. -•'Vol.129.- №3.-P. 345-348.

214. Klebanoff J., Coombs R.W. Virucidal effect of Lactobacillus acidophilus on human immunodeficiency virus type 1: possible role in heterosexual transmission// J. Exp. Med. -1991.- Vol.174.- P. 289-292.

215. Klebanoff S.J., Watts D.H., Mehlin C., Headley C.M. Lactobacilli and vaginal host defense: activation of the human immunodeficiency virus type 1 long terminal repeat, cytokine production, aNF-KB// J.Infect. dis. 1999. - Vol. 179.- P. 653-660.

216. Kleerbezem M., Quadri L.E., Kuipers O.P., Vos W.M. Qouorum sensing by peptide heromones and two-component signal-transduction systems in Gram-positive bacteria// Mol. Microbiol. 1997,-Vol. 24. - №5. - P.895-904.

217. Knox K.W., Wicken A.J. Immunological properties of teichoic acids// Bacteriol. Rev. 1973.-№37.-P. 215-257.

218. Komatsu S. Panes J., Mori N., Grisham M.B., Russel J.M., Granger D.N. Effect of intestinal stasis on 1CAM-1 expresssion: role enteric bacteria// Gastroenterology. 1997. -Vol 112. - P. 1018-1023.

219. Kos B., Suskovic J., Vukovic S., Simpraga M., Frece J., Matosic S. Adhesion and aggregation ability of probiotic strain Lactobacillus acidophilus M92// Journal of Applied Microbiology. 2003. - Vol. - 94, Issue 6. - P. 981-987.

220. Kraus D., Peschel A. Molecular mechanisms of bacterialresistance to antimicrobial peptides//CTMI. 2006. - Vol. 306.-P. 231-250.

221. Kushak R.I., Winter H.S. Dietary Carbohydrates: Digestion and Absorption// Trends in Dietary Fats Research. /Ed. Landow M.V. 2005.- P. 1-30.

222. Lan J.-G., Cruicshank S.M., Singh J.C.I., Farrar M., Lodge J.P.A., Felsburg P.J., Carding S.R. Different cytokine response of primary colonic epithelial cells to commensal bacteria// World Gastroenterol. 2005. - Vol. 11. - № 22. - P. 3375-3384.

223. Land M.H., Rouster-Stevens K., Woods C.R., Cannon M.L., Cnota J., Shetty A.K. Lactobacillus sepsis assosiated with probiotic therapi//Pediatrics. 2005. - Vol. 111.- № 1,-P. 178-181.

224. Laukova A., Czikkova S. Antagonistic effect of enterocin CCM 4231 from Enterococcus faecium on «bryndza», a traditional Slovak dairy product from sheep milk// Microbiological Research. 2001.- Vol. 156, Issue l.-P. 31-34

225. Laukova, A.; Guba, P.; Nemcova, R. and Marekova, M. Inhibition of Samonella enterica serovar Dusseldorf by enterocin A in gnotobiotic Japanese quails// Vet. Med.-Czech. 2003. - Vol. 49. - P. 47-51.

226. Lebenthal E., Lebenthal Y. Пробиотики: концепция лечебного применения, ожидающая своего признания// Журн. микробиол. 2003,- № 4.- С.- 88-90.

227. Lehrer R.I., Daher K., Ganz Т., Selsted M.E. Direct inactivation of viruses by MCP-1 and MCP-2, natural peptide antibiotics from rabbit leucocytes// J. Virol/ 1985. - Vol. 56. -P. 5255-5265.

228. Lehrer R. I., Rosenman M., Harwig S.S., Jackson R., Eisenhauer P. Ultrasensetive assays for endogenous antimicrobial polypeptides// Journal of immunological methods/ -1991.-Vol. 137.-P. 167-173.

229. Lilly D.M., Stilwell R.H. Probiotics: growth promoting factors produced by microorganisms// Science. 1965,- Vol. 147.-P. 747-748.

230. Ling W.H., Korpela R., Mykkanen H., Salminen S. Lactobacillus strain GG and fiber supplementation decreases colonic hydrolytic and reductive enzyme activities in healthy female subjects// J. Nutr. 1994. - Vol.124. - № 1. - P.18-23.

231. Lorea G., Torino M.J., Fot de Valdez G., Liungh A. Lactobacilli express cell surface proteins with mediate binding of immobilized collagen and fibronectin// FEMS Microbiol. Letters. 2002. - Vol. 206. - P. 31-37.

232. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall RJ. Protein measurement with the Folin reagent// J. Biol. Chem. 1951,- Vol.193.- P. 265- 275.

233. Magnusson J., Schniirer J. Lactobacillus coryniformis subsp. coryniformis strain Si3 produces a broad-spectrum proteinaceous antifungal compound// Appl. Environ. Microbiol. -2001.-Vol. 67 P.1-5.

234. Majamaa H., Isolauri E., Saxelin M., Vesikari T. Lactic acid bacteria in the treatment of acute rotavirus gastroenteritis// J. Pediatr Gastroenterol Nutr. 1995.- Vol. 20. -№3. - P. 333-338.

235. Maldonado A., Ruiz-Barba J.L., Jimenez-Diaz R. Production of plantaricin NC8 by Lactobacillus plantarum NC8 is induced in the presence of different types of Gram- positive bacterin//Arch. Microbiol.- 2003.- Vol.1.- P.29-35.

236. Maldonado G. C., de Moreno de Blance A., Vinderola G., Bibas Bonet M.E. Perdigón G. Proposed model: mechanisms of immunomodulation induced by probiotic bacteria// Clinical and Vaccine Immunology. 2007. - Vol. 14. - № 5, P. 484-492.

237. Mannual of clinical microbiology.// 5 th ed.: editor in chif BalowsA. Washington: D.C., 2004. 1364 p.

238. Maqueda M., Gálvez A., Martínez-Bueno M., Guerra I., Valdivia E. Neutralizing antibodies against the peptide antibiotic AS-48// Antimicrob. Agents Chemother. 1993. -Vol. 37. -№ 1. - P. 148-151.

239. Maqueda M., Galvez A., Bueno M. M., Sanchez-Barrena M. J., Gonzalez C., Albert A., Rico M., Valdivia E. Peptide AS-48: Prototype of a New Class of Cyclic Bacteriocins// Current Protein and Peptide Science. 2004.-Vol. 5. - № 5.- P.399-416.

240. Mardh P.A., Soltesz L.V. In vitro interactions between lactobacilli and other microorganisms occurring in the vaginal flora// Scand. J. Infect. Dis. 1983, Suppl. -Vol.40. - №3. -P.47-51.

241. Marekova M., Laukova A., de Vuist L., Skaugen M., Nes I.F. Partial characterization of bacteriocins produced by environmental strain Enterococcus faecium EK13// Journal of Applied Microbiology. 2003.-Vol. 94, Issue 3. - P. 523-530.

242. McFarland L. Epidemiology, risk factors and treatments for antibiotic associated diarrhea//Diagn.Dis. 1998. - Vol.16. - P.292-307.

243. McGroarty J.A. Probiotic use of Lactobacilli in the human urogenital tract//FEMS Immunol. Med. Microbial. -1993.-Vol.36. P.251-264.

244. Milling S.W.F., Cousins L., MacPherson G. How do dendritic cells interact with intestinal antigens?//Trends Immunol. 2005. - Vol. 26. - P. 349-352.

245. Moreno M.R. F., Callewaeri R., Devreesed B., Beeumen J. V., Vuysi L. De Vuysi Isolation and biochemical characterization of enterocins produced by enterococci from different sources// Journal of Applied Microbiology. 2003.- Vol.94.- P. 214-220.

246. Moreno M. R. F., Sarantinopoulos P., Tsakalidou, De Vuyst L. The role appplication of enterococci in food and health// Intern. Journal of Food Microbioloy. 2006. - Vol. 106, Is. l.-P. 1-24.

247. Morotomi M. Propertis of Lactobacillus caseli Shirota strain as probiotics// Asia Pacific Journal of Clinical Nutrition. 1996. - Vol.5.- P.29-30.

248. Morovsky M., Pristas P., Javorsky P., Nes I.F., Holo II. Isolation and characterization of enterocin BC25 and occurrence of the entA gene among ruminal gram-positive cocci//Microbiol Res. 2001. - Vol.156.- № 2,- P.133-138.

249. M0rtvedt C. I., Nissen-Meyer J., Sletten K., Nes I. F. Purification and amino acid sequence of lactocin S, a bacteriocin produced by Lactobacillus sake L45// Appl. Environ. Microbiol. -1991.- Vol. 57.- № 6. -P. 1829-1834.

250. Munson V.A., Byun R. Molecular analysis of the microflora associated with dental caries// J. Clin.Microbiol. 2004. - Vol. 42. - № 7.- P. 3023-3029.

251. Myllyluoma E., Ahonen A.M., Korpela R., Vapaatalo H., Kankuri E. Effects of multispecies probiotic combination on Helicobacter pylori infection in vitro//Clin Vaccine Immunol. 2008,- Vol.l5.-№ 9.- P. 1472-1482.

252. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2004. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. Fourteenth informational supplement M100-S14. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Wayne, Pa.

253. Nes I. F., Diep D. B., Holo H. Bacteriocin diversity in Streptococcus and Enterococcus II Journal of Bacteriology, 2007, Vol. 189.- № 4.- P. 1189-1198.

254. Ness R.B., Hiller S.L., Holly E.R., Soper D.E., Stamm C., Bass D.C., Sweet R.L., Rice P. Douching in relation to bacterial vaginosis, lactobacilli, and facultative bacteria in the vagina// Obstetr. Gynecology. 2002. Vol. 100. - № 4. - P. 765-772.

255. Nilsen T., Nes I. F., Holo H. An exported inducer peptide regulates bacteriocin production in Enterococcus faecium CTC492// J. of Bacteriology. 1998.- № 180. - P. 1848-1854.

256. Nilsen T., Nes I. F. and Holo H. Enterolysin A, a cell wall-degrading bacteriocin from Enterococcus faecalis LMG 2333 // Appl. Environ. Microbiol. 2003. - № 69. - P. 29752984.

257. Ocana VS, Nader-Macias ME Vaginal lactobacilli: self- and co-aggregating ability// Br J Biomed Sci. 2002. - Vol.59- №4. - P.l 83-90.

258. Ohashi T., Minamishima Y., Yokokura T., Mutai M. Induction of resistance in mice against murine cytomegalovirus by cellular components of Lactobacillus caseill. Biotherapy. 1989. - Vol. 1. - № 2.- P.89-95.

259. O'Keeffe T., Hill C. and Ross R. P. Characterization and heterologous expression of the genes encoding enterocin A production, immunity, and regulation in Enterococcus faecium DPC1146// Appl. Environ. Microbiol. 1999. - № 65. - P. 1506-1515.

260. Olivares M., Diaz-Ropero M.P., Sierra S., Lara-Viiilostada F., Fonolla J., Navas M., Rodriguez , Xaus J. Oral intake o£ Lactobacillus fermentum CECT5716 enhances the effects of influenza vaccination//Nutrition. 2007.- Vol. 23.- № 3.- P. 254-260.

261. Oscariz J.C., Pissabarro A.G. Classification and mode of action of membrane-active bacteriocins produced by gram-positive bacteria//Int. Microbiol. 2001.- Vol. 4.- P. 13-19.

262. Otero M.C., Ocana V.S., Nader-Macias M.E. Bacterial surface characteristics applied to selection of probiotic microorganisms// Methods Mol. Biol. 2004.- Vol.268.- P.435 -440.

263. Parish M. E. and Davidson P. M. Methods for evaluation// Antimicrobials in Foods/ 2nd edition, ed.: Davidson P.M., Branen A.L., Mareel Dekker Inc., New York, 1993. P. 597-615.

264. Perdigon G., Vintini E., Medina M., Medici M. Study of the possible mechanisms involved in the mucosal immune system activation by Lactic Acid Bacteria// J. Dairy Sci. -1999.-Vol. 82.-P.l 108-1114.

265. Perdigon G., Fuller R., Ray a R. Lactic acid bacteria and their effect on the immune system// Curr. Issues Intest. Microbiol. 2001. - Vol. 2. - №1. - P. 27-42.

266. Perdigon G., Madonado G. C., Vinderola C.G., de Moreno A., Medici M., Bibas Bonet M.E. Immunomodulation of mucosal immune response by probiotics// Curr.Trends Immunol. 2005.- № 6,- P. 69-85.

267. Podolak R. K., Zays Z. E., Kastner C. L. and Fung D. Y. C. Inhibition of Listeria monocytogenes and Escherichia coli 0157:H7 on beef by application of organic acids // Journal of Food Protection.- 1996. № 59. - P. 370-373.

268. Prescott S., Björksten B. Probiotics for the prevention or treatment of allergic diseases// Journal of Allergy and Clinical Immunology. 2009. - Vol. 120, Issue 2. - P. 255-262.

269. Preter V., Raemen H., Cloetens L., Houben E., Rutgeerts, Verbeke K. Effect of dietary intervention with different pre- and probiotics on intestinal bacterial enzyme activities// Eur. J. Clin.Nutr. 2007. - Vol. 10. - P.1038-1046.

270. Rambaud J.- C., Buts J.-P., Corthier G., Flourie B. Gut microflora Digestive physiology and pathology, 2006/ John Libbey Eurotex, Paris 247 p.

271. Rasch M. and Knöchel S. Variations in tolerance of Listeria monocytogenes to nisin, pediocin PA-1 and bavaricin A// Lett Appl. Microbiol. 1998. - Vol. 27. - P. 275-278.

272. Ravin H.A. An improved colorimetric enzymatic assay for caeruloplasmin// J. Lab. Clin. Med. 1961.- Vol. 58,- P. 161-168.

273. Reid G., Tieszer C., Lam D. Influence of Lactobacilli on the adhesion of Staphylococcus aureus and Candida albicans to fibers and epithelial cells// J.Ind.Microbiol.-1995.- Vol.15. №3. - P. 248-53.

274. Reid G., Bruce A.W. Urogenital infections in women: can probiotics help?//. Postgraduate Medical Journal. 2003.-Vol.79. - №34. - P. 428-432.

275. Reid G. Probiotic Lactobacilli for urogenital health in women// J Clin Gastroenterol. -2008.- Vol.42., Suppl 3, Pt 2. P. 234-236.

276. Richardson D. Probiotics and product innovation// Nutr. Food Sci. 1996. -№ 4. -P. 27-33.

277. Rinne M., Kalliomaki M., Arylommi H., Salmines S., Isolauri E. Effect of probiotics and breastfelling on the Lactobacillus/ Enterococcus microbiota and humoral immune responses/ J. Pediatr. 2005,- Vol. 147.- №2,- P. 143-146.

278. Risoen P.A. Brurberg M.V.B., Eijsink V.G, Nes I.F. Functional analysis of promoters involved in quorum sensing-based regulation of bacteriocin production in Lactobacillus!! Mol.Microbiol.- 2000.- Vol. 37.- P. 619-628

279. Rolfe R.D. Interactions among microorganisms of the indigenous intestinal flora and their influence on the host// Rev Infect Dis. 1984.-Vol.6.- Suppl 1.- P.73-79.

280. Rosenthal K.S., Killius J., Hodnichak C.M., Venetta T.M., Gyurgyik L., Janiga K. Mild acidic pH inhibition of the major pathway of herpes simplex virus entry into HEp-2 cells// J. Gen. Virol. 1989. - Vol.70. - №4. -P. 857-867.

281. Roy P. H. Dissemination of antibiotic resistance// Med. Sci. 1997,- Vol. 13,- P. 927933.

282. Saarela M., Crittenden L., Salminen S., Mattila-Sandholm T. Gut bacteria and Health foods-the European perspective// International J. Food Microbiology. 2002. - Vol.78. - P. 99-117.

283. Sakayori Y, Muramatsu M, Hanada S, Kamagata Y, Kawamoto S, Shima J. Characterization of Enterococcus faecium mutants resistant to mundticin KS, a class Ila bacteriocin // Microbiology. 2003,- Vol.149.- № 10,- P. 2901-2918.

284. Sambrook J. Fritsch F., Maniatis T. Molecular cloning, a laboratory manual// Gold Spring Harbor Laboratory Press/ 2 Ed., 1989. Vol. 2. - P. 1418-1419.

285. Sarous S., Dalet K., Hechard Y. Involvement of the mpo operon in resistance to class Ha bacteriocins in Listeria monocytogenes// FEMS Microbiology Letters. 2004.-Vol. 238, Issue 1.- №1,- P. 37-41.

286. Sessen T.E., Barkholt V., Welinder K.G. A simple alternative pathway for hemolytic assay of human complement component C3 using methylamine-treated plasma// J. Immunol. Methods. 1983. - Vol. 60. - № 1-2. - P. 89-100.

287. Shagger H., von Jagow G. Tricine dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa// Analytical biochemistry. -1987.-Vol. 166.-P. 368-379.

288. Shima J., Kawamoto S., Mori K., Choi S. H., Doi K., Ohmomo S., Ogata S. Isolation and characterization of enterocin SE-K4 produced by thermophilic enterococci. Enterococcus faecalis K-4// Biosci. Biotechnol. Biochem. 2001. - Vol. 65. - P. 247-253.

289. Silva C. R., Rey M.R., Nader-Maclas M.E. Structural and ultrastructural studies of the urinary tract of mice inoculated with Lactobacillus fermentum// BJU International. 2003.-Vol. 91, Issue 9. - P. 878-886.

290. Singh K. V., Qin X., Weinstock G. M., Murray B. E. Generation and testing of mutants of Enterococcus faecaliy in a mouse peritonitis model// J. Infect. Dis. 1998. -Vol.178.-P.1416-1420.

291. Sonneburg J.L., Chen C.T.L., Gordon J.I Genomic and metabolic Studies of the impact of probiotics on a model gut symbiont and host// PLoSBiology. 2006. - Vol. 4. -Issue 12. - P. 2213-2226.

292. Strompfova V., Laukova A., Ouvehand A. Lactobacilli and enterococci potential probiotics for dogs// Folia microbiol. - 2004. - Vol.49. - P. 2003-2007.

293. Strompfova V., Laukova A., Simonova M., Marcinakova M. Occurrence of the structural enterocin A, P, B, L50B genes in enterococci of different originII Vet Microbiol. -2008. Vol. 132. - №.3-4. -P. 293-301.

294. Tannock G. W. Normal microbiota of the gastrointestinal tract of rodents. In Mackie R. I., White B. A., Isaacson R. E., ed.: Gastrointestinal microbiology. Chapman and Hall, London, United Kingdom, 1997. P. 187-215.

295. Tarnberg M., Jakobsson T., Jonasson J., Forsum U. Identification of randomly selected colonies of lactobacilli from normal vaginal fluid by pyrosequencing of the 16 SrDNA variable VI and V3 regions//APMIS. 2002. -Vol 110. - P. 802-810.

296. Taylor-Robinson D., Bebear C. Antibiotic susceptibilities of Mycoplasmas and treatment of micoplasmal infection// Jornal of Antimicrobial Chemotherapy. -1997. Vol. 40.-№5.-P. 622-630.

297. Tichaczek P.S.,Vogel R. F., Hammes W.P. Cloning and sequencing of cur A encoding curvacin A, the bacteriocin produced by Lactobacillus curvatus LTH1174//Archives of Microbiology .- 1993,- Vol. 160. №4. - P. 279-283.

298. Tlaskalova-Hogenova H., Tuckova L., Mestecky J. , Kolinska J., Rossmann P., Stepankova R., Kozakova H., Hudcovic T., Hrncir T., L. Frolova M. Kverka Interaction of

299. Mucosal Microbiota with the Innate Immune System// Scandinavian Journal of Immunology. 2005. - Vol. 62, Issue sl.-P.106-113.

300. Traub W. H., Leonhaid B. Comparative susceptibility of clinical group A, B, C, F, and G beta-hemolytic streptococcal isolates to 24 antimicrobial drugs// Chemotherapy.- 1997. -№43. -P. 10-20.

301. Vaughan E.E., Daly C., Fitzgerald G.F. Identification and characterization of helveticin V-1829, a bacteriocin produced by Lactobacillus helveticus 1829// J. Appl. Bacteriol. .1992. - Vol. 73. - №4,- P. 299-308.

302. Vielfort K., Sjolinder H., Roos S., Jonsson H., Aro H. Adherence of clinically isolated lactobacilli to human cervical cells in competition with Neisseria gonorr hoeae/l Microbes and Infection. 2008. - Vol. 10, Issues 12-13 .- P. 1325-1334.

303. Vinderola G., Perdigon G., Duarte J., Farnoworth E., Matar C. Effect of the oral administration of the exopolysaccharide produced by Lactobacillus kefiranofaciens on the gut mucosal immunity// Cytokine.- 2006. Vol. 36,- № 5-6.- P. 254-260.

304. Venema K., Haverkort R.E., Abee T., Haandrikman A.J., Leenhouts K.J., de Leij L., Venema G., Kok J. Mode of action of LciA, the lactococcin A immunity protein// Mol. Microbiol. 1994. - Vol. 14. - №3. - P.521-532.

305. Vuist L., Neysens P. The sourdough microflora: biodiversity and metabolic interactions// Trends in food Science technology. -2005. Vol. 16., Issue 1-3:43-56.

306. Wachsman M.V., Farias M.E., Takeda E., Sesma F., de Ruiz Holgado A.P., de Torres R.A., Coto C.E.Antiviral activity of enterocin CRL35 aginst herpesviruses// J. Antimicrobial agents . 1999.- Vol. 12,- P. 293-299.

307. Wachsman M.B., Castilla V., Holgado A.P., Torres R.A., Sesma F„ Coto C.E. Enterocin CRL35 inhibits late stages of HSV-1 and HSV-2 replication// Antiviral Res. -2003.- Vol. 58.-№1.- P. 17-24:

308. Wagner R.D., Pierson C., Wagner T., Dohnalek M., Farmer J, Roberts L., Y. M. , Balish E. Biotherapeutic effects of probiotic bacteria on candidosis in immunodeficient mice// Infectlmmun. 1997. - Vol. 65. -№10. - P.4165-4172.

309. Wang S., Mei Ng L.H., Chow W.L., Lee Y.K. Infant intestinal Enterococcus faecalis down-regulates inflammatory responses in human intestine al cell lines//World J. Gastroenterology, 2008. Vol. 14. - № 7. - P. 1067-1076.

310. Woolfolk C. A. Metabolism of N-methylpurines by a Pseudomonas putida strain isolated by enrichment on caffeine as the sole source of carbon and nitrogen// J. Bacteriology, 1975. -№ 123.-P. 1088-1106.

311. Yang R., Ray B. Factors influencing production of bacteriocins by lactic acid bacteria II Ibid. 1994. - № 4. - P. 281-291.

312. Yi H., Zhang, L., Tuo Y., Han X., Du M. A novel method for rapid detection of class Ha bacteriocin-producing lactic acid bacteria//Access Online Article Food Control/ Press, Corrected Proof, Available online. 9 July 2009.

313. Young G., Krasner R.I., Yudkofski P.L. Interaction of oral strains of Candida and Lactobacilli//J. Bacteriol. 1956. - Vol. 72. -№36. - P.525-529.

314. Zarate G., Santos V., Nader-Macias M.E. Protective Effect of Vaginal Lactobacillus paracasei CRL 1289 against Urogenital Infection Produced by Staphylococcus aureus m a Mouse Animal Model// Infect. Dis. Obstet. Gynecol. 2007,- 48358

315. Zhong W., Millsar K., Bialkowska H., Reid G Differentiation of Lactobacilli species by molecular typing//Appl. Environm.microbiol. 1998. - Vol 64. - №7. - P. 2418-2423.

316. Zhou Z.-H., Tzioufas A.G., Notkins A.L. Properties and function of polyreactivc antibodies and polyreactive antigen-binding B cells// J. Autoimmun. 2007. - Vol. 29.-№ 4. - P. 219-228.