Метаболиты оксида азота и их модуляция при развитии гепатомы Зайделя тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.02, кандидат биологических наук Наумов, Андрей Анатольевич

• Наумов, Андрей Анатольевич
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Наумов, Андрей Анатольевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ЧАСТЬ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Экспериментальные модели опухолевого роста.

1.1. Спонтанные опухоли.

1.2. Индуцированные опухоли.

1.3. Перевиваемые или трансплантируемые опухоли.

1.4 Асцитная гепатома Зайделя.

1.5 Асцит. Формирование асцита.

Глава 2. Характеристика различных пулов миелоидных клеток и их роль в развитии опухоли.

2.1. Два пула макрофагов: М1 и М2.

2.2. Проопухолевые функции опухолъ-ассоциированных макрофагов (ТАМ) и антиопухолевые М1.

Глава 3. Оксид азота - одна из ключевых сигнальных молекул в организме.

3.1. Свойства оксида азота.

3.2. Основные внеклеточные метаболиты оксида азота.

Глава 4. Синтез оксида азота в организме.

4.1. Изоформы NO-синтазы.

4.2. Факторы, влияющие на индукцию NOS.

Глава 5. Мишени действия и физиологическая роль оксида азота.

5.1. Участие NO в регулировании активности ферментов.

5.2. Участие NO в развитие апоптоза.

5.3. Участие NO в функционировании различных систем организма.

5.4. Цитотоксическое действие оксида азота.

Глава 6. Перспективы применения лекарственных веществ, влияющих на уровень N0.

ЧАСТЬ II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ.

Глава 6. Материалы и методы исследования.

6.1. Материалы.

6.2. Объект исследования.

6.3. Животные.

6.4. Формирование экспериментальной опухоли.

6.5. Выделение перитонеалъных макрофагов из полости здоровых животных.

6.6. Выделение макрофагов из асцитной жидкости опухоленосителя.

6.7 Выделение ПМЯЛ из циркулирующей крови.

6.8. Подсчёт клеток.

6.9. Анализ клеточных популяций.

6.10. Определение продукции активных форм кислорода фагоцитирующими клетками.

6.11. Приготовление плазмы крови.

6.12. Приготовление бесклеточной асцитной жидкости.

6.13. Измерение концентрации нитритов/нитратов в асцитной жидкости и плазме крови.

6.13. Измерение концентрации Б-нитрозотиолов в асцитной жидкости и плазме крови.

6.14. Измерение концентрации нитротирозина в асцитной жидкости и плазме крови.

6.15. Измерение концентрации тиоловых групп белков.^.

6.16. Статистическая обработка данных.

ЧАСТЬ III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Глава 7. Динамика различных метаболитов оксида азота при развитии асцитной гепатомы Зайделя.

7.1. Динамика NOx в плазме крови и асцитной жидкости при развитии асцитной опухоли.

7.2. Динамика нитротирозина в плазме крови и асцитной жидкости при развитии опухоли.

7.3. Динамика R-SNO и в плазме крови и асцитной жидкости при развитии опухоли.

Глава 8. Изменение АФК-генерирующей активности ПМЯЛ и перитонеальных макрофагов при развитии асцитной опухоли.

8.1. Действие донора оксида азота на хемилюминесценцию фагоцитирующих клеток здорового животного.

Глава 9. Действие экзогенных модуляторов уровня оксида азота и флавоноида ДГК на развитие опухоли in vivo.

9.1. Действие нитроаргинина на уровень метаболитов NO, динамику АФК-генерируюгцей активности фагоцитов в плазме и асците опухоленосителя а интенсивность роста опухоли in vivo.

9.2 Действие инъекций SNP на баланс метаболитов NO, динамику АФК-генерируюгцей активности фагоцитов в плазме и асците опухоленосителя и интенсивность роста опухоли.

9.3. Действие ДГК на баланс метаболитов NO, динамику АФК-генерируюгцей активности фагоцитов в плазме и асците опухоленосителя и интенсивность роста опухоли.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Метаболиты оксида азота и их модуляция при развитии гепатомы Зайделя»

Факт образования в организме опухоли означает неэффективность работы специфических механизмов отслеживания и уничтожения трансформированных клеток. Следовательно, возрастает роль неспецифических механизмов защиты организма [Ackermann et al., 1989; van Kessel et al., 1990], которая до конца неясна. Рост опухоли сопровождается распространением сигналов, которые активируют компоненты врожденного иммунитета, клеточной составляющей которого, помимо натуральных киллерных клеток, являются полиморфноядерные лейкоциты (в основном, это нейтрофилы и моноциты), а также тканевые макрофаги. Активация данного типа клеток, относящихся к фагоцитам, сопровождается продукцией активных форм кислорода (АФК) и активных форм азота (АФА). При действии иммунных комплексов, активаторов рецепторов, микрочастиц на плазматической мембране фагоцитов происходит сборка и активация НАДФН-оксидазы, работа которой превращает 02 в супероксид анион (СЬ*-). Дальнейшие превращения(02*~) образуют ряд АФК, таких как гидроксил радикал, перекись водорода и т.д. Индукция другой ферментной системы фагоцитов - iNO-синтазы приводит к продукции оксида азота (N0), который является важным регуляторным фактором во многих системах организма, а также обеспечивает цитотоксическую активность данного типа клеток [Lepoivre et al., 1991]. Бактерицидное и цитотоксическое действие NO и АФК во многом зависит от продуктов их взаимодействия [Paulluy, 1996]. Возникающие в таких реакциях активные метаболиты - пероксинитрит, диоксид азота, и др. обладают высокой реакционной способностью и могут повреждать различные клеточные структуры, изменяя их функциональную активность. Так процесс нитрозилирования белков под действием активных форм азота является одним из механизмов регуляции активности некоторых ферментных систем [Kozlov, A.V1999]. Следует отметить, что некоторые метаболиты N0, такие как Б-нитрозотиолы и сам N0, при определённых условиях могут проявлять антиоксидантную активность И., 1993].

Например, оксид азота может связываться с ионами железа, которые катализируют реакции свободно-радикального окисления. Связывание железа вызывает тем самым ингибирование процесса разветвления свободно-радикальной цепи.

Таким образом, для понимания роли реакций неспецифического иммунитета при росте в организме злокачественных опухолей, актуальным является исследование состояния АФК - и N0- генерирующих систем, а также процессов их взаимовлияния в ходе роста опухоли. Активность этих систем определяет баланс антиоксидантных и прооксидантных реакций, как в зоне патологии, так и в кровеносном русле. В частности, исследование динамики основных внеклеточных метаболитов оксида азота, таких как нитраты/нитриты, пероксинитрита (продукт взаимодействия оксида азота и супероксид аниона) и нитрозотиолов в организме опухоленосителя является актуальной задачей. Изменение количественного и качественного состава продуцируемых организмом АФК и активных форм азота (АФА) могут выразиться в качественных изменениях поведения системы в целом. При этом с ростом концентрации этих метаболитов растет число потенциальных мишеней - от передачи сигналов до регуляции активности отдельных систем и цитотоксического эффекта.

В настоящее время одновременного исследования уровня метаболитов оксида азота и АФК в двух компартментах опухоленосителя - в плазме крови и в зоне роста опухоли не проводилось. Не выявлены временные параметры образования метаболитов N0 с разными функциональными свойствами. Недостаточно исследовано влияние соотношения между активными формами кислорода и азота на интенсивность опухолевого роста. В связи с этим является актуальным детальное исследование основных метаболитов оксида азота в плазме и асцитной жидкости опухоленосителя, исследование влияния экзо- и эндогенного оксида азота на АФК-генерирующую активность фагоцитирующих клеток (нейтрофилов и макрофагов) и использование модуляторов уровня оксида азота и АФК с целью снижения интенсивности опухолевого роста в организме опухоленосителя.

Цель работы

Целью настоящей работы является исследование временных и количественных характеристик метаболитов оксида азота в крови и асците опухоленосителя, а также возможности их коррекции с целью подавления опухолевого роста.

Задачи исследования

1. Изучить динамику следующих внеклеточных метаболитов оксида азота в крови и асцитной жидкости при развитии гепатомы Зайделя: а) нитратов/нитритов как конечных продуктов метаболизма короткоживущего соединения N0; б) нитротирозина — продукта NO-зависимого окисления тирозина в присутствии О2-; в) нитрозилированных SH- групп белков как важнейшего маркера нитрозилирующего стресса.

2. Исследовать роль оксида азота в регулировании АФК-генерирующей активности фагоцитирующих клеток крови и асцита в процессе роста опухоли.

3. В опытах in vivo изучить действие NO- и АФК-модулирующих веществ на развитие нитрозилирующего и окислительного стресса и рост опухоли в организме.

Научная новизна.

В рамках диссертации впервые проведено одновременное исследование динамических параметров крови и асцита, характеризующих поведение неспецифического иммунитета в ответ на развитие асцитной гепатомы Зайделя. Впервые наряду с окислительным стрессом в плазме опухоленосителя показано развитие «нитрозилирующего стресса». Показано, что максимальная концентрация различных метаболитов оксида азота (пероксинитрит, МО-модифицированные белки и нитриты/нитраты) связана с различными фазами роста опухоли и имеет разную кинетику. Впервые исследовано влияние эндо и экзогенного донора оксид азота, а также ингибитора Ж)-синтазы на АФК-генерирующую активность перитониальных макрофагов и лейкоцитов крови в процессе развития опухоли. Впервые проведены исследования по модификации уровня нитрозилирующего стресса в организме опухоленосителя с помощью инъекций доноров N0, ингибитора ]ЧО-синтазы и флавоноидов с целью подавления роста опухоли в организме животного.

Практическая ценность.

Представленные в диссертации экспериментальные данные способствуют выявлению закономерностей формирования неспецифического иммунного ответа организма на образование злокачественных опухолей с целью поиска способов управления ими. Показана значительная роль оксида азота и его метаболитов в патогенезе асцитной опухоли, что говорит о необходимости контроля параметров нитрозилирующего стресса при лечении злокачественных процессов с целью улучшения качества терапевтического воздействия. Результаты могут быть использованы для разработки протоколов терапии патологических процессов, связанных с развитием окислительного и нитрозилирующих стрессов с использованием флавоноидов и регуляторов продукции N0. Результаты по снижению АФК-генерирующей способности фагоцитов эндогенными и экзогенными донорами оксида азота могут быть использованы при разработке методов коррекции критических состояний, сопровождающихся гиперпродукцией АФК.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Наумов, Андрей Анатольевич

ВЫВОДЫ

1. Впервые показано развитие нитрозилирующего стресса в плазме крови опухоленосителя с развивающейся асцитной гепатомой Зайделя, выраженного в образовании внеклеточных метаболитов NO: пероксинитрита, S-нитрозилированных белков и нитритов/нитратов (NOx).

2. Этапы опухолевого роста характеризуются различными соотношениями NO-модифицированных белков в плазме крови: в начале преобладает нитротирозин (увеличение в 3-4 раза) - маркер пероксинитрита, в середине роста опухоли отмечена максимальная концентрация S-нитрозотиолов (увеличение в 5-6 раз), на заключительном этапе процесс окисления белков АФК преобладает над нитрозилированием.

3. При развитии асцитной опухоли имеет место перенос оксида азота из плазмы в асцитную жидкость в форме S-нитрозилированных белков, т.е. R-SNO является запасающей и транспортной формой оксида азота.

4. В опытах in vitro впервые показано увеличение чувствительности лейкоцитов крови и асцита к эндогенному источнику NO (аргинин) в ходе роста опухоли, подтвержденное снижением АФК-генерирующей активности, активированной ФМА.

5. В опытах in vivo установлено, что: инъекции донора NO (SNP) увеличивают уровень метаболитов оксида азота, особенно нитритов и S-нитрозотиолов в асцитной жидкости, снижая концентрацию опухолевых клеток на 6 сутки развития гепатомы; инъекции ингибитора NO-синтазы (L-NAME) снижают уровень нитрозилирующего стресса в плазме и асците, но способствует увеличению АФК-генерирующей активности фагоцитов в зоне опухоли, что приводит к нетривиальному характеру роста опухоли -первоначальному усилению и последующему резкому торможению пролиферации клеток гепатомы.

6. Впервые в опытах in vivo показано, что инъекции ДГК усиливают нитрозилирующий стресс в плазме опухоленосителя, выраженный в увеличении концентраций нитратов/нитритов, пероксинитрита в 2-3 раза и степени S-нитрозилирования белков, резко снижая при этом пролиферацию опухолевых клеток.

Заключение.

В рамках фундаментальной проблемы по изучению роли неспецифического иммунитета при развитии злокачественных новообразований в данной работе были проведены исследования динамических характеристик внеклеточных метаболитов оксида азота в крови и асците опухоленосителя, а также возможности их коррекции с целью подавления опухолевого роста.

Рост опухоли в организме свидетельствует о неэффективности работы специфических механизмов отслеживания и уничтожения малигнантных клеток. В связи с этим возрастает роль неспецифических механизмов защиты организма. Известно, что рост опухоли сопровождается распространением сигналов, которые активируют компоненты врожденного иммунитета. Клеточной составляющей данного типа иммунитета, помимо натуральных киллерных клеток, являются полиморфноядерные лейкоциты (нейтрофилы и моноциты) и тканевые макрофаги. При их активации происходит сборка на плазматической мембране НАДФН-оксидазы, которая является электротранспортной системой, превращающей кислород в супероксид анион. Дальнейшие молекулярные превращения О2" образуют ряд АФК. Индукция другой ферментной системы фагоцитов — ТЧО-синтазы приводит к продукции оксида азота (N0), который является важным регуляторным фактором во многих системах организма. Действие N0 и АФК во многом зависит от продуктов их взаимодействия. Исследование состояния АФК- и МО-генерирующей систем и возможности их коррекции является актуальной задачей для понимания роли врожденного иммунитета при росте злокачественных опухолей в организме.

Для понимания эволюции взаимоотношений в системе «организм-опухоль» необходимо иметь адекватную экспериментальную модель. Такой моделью является рост перевиваемых асцитных опухолей в организме грызунов. Была использована асцитная гепатома Зайделя, трансплантированная в брюшную полость крыс линии Вистар. Объектом исследования являлись фагоцитирующие клетки (полиморфноядерные лейкоциты и перитонеальные макрофаги), внеклеточные метаболиты плазмы и асцита, а также растущие в брюшной полости клетки асцитной гепатомы Зайделя.

В рамках данной работы впервые проведено параллельное исследование динамических параметров плазмы и асцита, характеризующих состояние АФК- и Ж)-генерирующих систем фагоцитов, их взаимовлияние в ходе роста опухоли, а также проведены исследования по использованию модуляторов уровня оксида азота и АФК с целью оценки их влияния на интенсивность опухолевого роста.

Впервые показано, что в процессе роста опухоли в плазме крови помимо окислительного стресса имеет место и нитрозилирующий стресс, который характеризуется увеличением экзогенных метаболитов оксида азота. Причем их динамика в процессе роста опухоли не одинакова. Так на начальный период роста опухоли приходится максимальная концентрация нитротирозина - маркера цитотоксического метаболита оксида азота -пероксинитрита. При этом наблюдается интенсивное Б-нитрозилирование белков плазмы крови, что является наряду с окислением одной из причин снижения концентрации белковых 8Н-групп. Анализируя изменения концентраций Б-нитрозотиолов и уровень ЭИ-групп белков в плазме крови, мы установили высокую долю участия N0 в модификации белков, особенно на начальных этапах опухолевого роста. В дальнейшем в крови создаются значительно более окислительные условия из-за увеличивающейся численности и АФК-генерирующей активности фагоцитов. Это создает условия для необратимого окисления белков, что ведет к уменьшению доли нитрозотиолов в плазме на последних этапах роста опухоли. В результате этих процессов наблюдается рост концентрации нитритов/нитратов как наиболее стабильных метаболитов N0 в данных условиях.

В зоне роста опухоли также отмечается увеличение содержания различных метаболитов N0, причем динамика их концентраций тесно связана с развитием нитрозилирующего стресса в плазме крови. Обнаруженная корреляция между динамиками нитрозотиолов (К8-ЫО) в плазме и асцитной жидкости свидетельствует о значительной роли транспорта нитрозилированных белков из плазмы в асцит в процессе роста опухоли. При этом в асцитной жидкости поступающие 8-нитрозотиолы способны выступать как доноры N0, что, наряду с синтезом N0 макрофагами и замедлением эвакуации веществ из асцита приводит к росту Ж)х на заключительных фазах роста опухоли. Таким образом, оксид азота и его метаболиты активно участвуют в реакции организма на развитие опухоли, затрагивая как зону роста опухоли, так и кровяное русло.

Изменения в уровне оксида азота способны оказывать существенное влияние на функционирование различных систем организма. Так в данной работе было показано, что оксид азота угнетающе влияет на АФК-генерирующую активность клеток • неспецифического иммунитета. Также установлено, что эндогенный источник N0 -аргинин, являющейся субстратом Ж)-синтазы, также снижает продукцию АФК перитонеальных макрофагов и нейтрофилов крови, что мы связываем с усилением активности ПЧ08 в исследуемых клетках в процессе роста опухоли. В результате увеличения внутриклеточной концентрации N0 происходит ингибирование функции множества белков, в том числе НАДФН-оксидазы, что и является

•л причиной снижения продукции О Это обстоятельство является важным фактором для поддержания тонкого равновесия между N0 и О2" и точного выполнения ферментами клеточных функций. Также можно утверждать, что при развитии асцитной опухоли АФК-генерирующая способность фагоцитов находится в обратной зависимости от состояния ИО-генерирующей системы.

Было высказано предположение, что исскуственное изменение сложившегося баланса между активными формами кислорода и азота с помощью модуляторов уровня N0 и антиоксидантов может повлиять на интенсивность опухолевого роста. С этой целью было исследовано действие инъекций ингибитора NO-синтазы, донора оксида азота и флавоноида с антиоксидантными свойствами (ДГК) на развитие асцитной гепатомы Зайделя in vivo.

Показано, что снижение активности NO-генерирующих систем инъекциями ингибитора NO-синтаз - нитроаргинина ожидаемо снижают проявления нитрозилирующего стресса в организме опухоленосителя. При этом блокирование NO-генерирующей системы приводило к увеличению АФК-генерирующей способности макрофагов в зоне опухоли, что снижало опухолевый рост, но, к сожалению, на поздних стадиях. В крови АФК-генерирующая активность лейкоцитов практически не изменялась. Данный факт, наряду с увеличением белковых SH-групп демонстрирует снижение уровня окислительного «напряжения» в крови, что благоприятно для состояния опухоленосителя.

При внутрибрюшинном введении донора оксида азота (SNP) наблюдали усиление нитрозилирующего стресса, о чем свидетельствовал рост концентраций исследуемых метаболитов NO. Как и в опытах in vitro эндогенный и экзогенный донор оксида азота способствовал падению уровня АФК и, что особенно важно, в плазме опухоленосителя, где наблюдался окислительный и нитрозилирующий стресс. Это подтверждает регуляторное действие NO на функционирование АФК-генерирующей системы. SNP способствовал резкому падению концентрации опухолевых клеток, по-видимому, из-за усиления NO-индуцированного апоптоза. Однако, несмотря на эффективное снижение опухолевого процесса, достоверного увеличения продолжительности жизни опухоленосителя не было отмечено.

Для модуляции окислительного и нитрозилирующего стресса в организме опухоленосителя был использован флавоноид дигидрокверцетин (ДГК). Впервые было установлено, что при инъекциях ДГК кроме снижения окислительного стресса в крови наблюдается значительное усиление нитрозилирующего стресса, выраженного в сильной МО-зависимой модификации белков. По-видимому, этот факт обусловлен способностью ДГК активировать синтез оксида азота эндотелиальными клетками, т.к. известно, что флавоноиды стимулируют эндотелиальные клетки к выработке N0 через увеличение уровня внутриклеточного кальция. В тоже время при инъекциях ДГК обнаружено уменьшение окислительной модификации белков в плазме опухоленосителя. Это обусловлено антиоксидантными свойствами ДГК и способностью флавоноидов ингибировать активность НАДФН-оксидазы. В то же время в зоне роста опухоли, как было показано, отсутствуют значительные изменения в уровне метаболитов N0. Такая ситуация обусловлена, по-видимому, ингибирующим действием флавоноидов на синтез индуцибельной МО-синтазы через воздействие на транскрипционный фактор КБ- кВ. В зоне роста опухоли практически отсутствуют другие источники оксида азота, кроме активированных макрофагов и транспорта модифицированных белков из плазмы, а введенный ДГК ингибирует синтез N0 у фагоцитов, снижая тем самым синтез N0 в зоне роста опухоли. Инъекции ДГК не вызывали негативного действия, способствовали увеличению продолжительности жизни опухоленосителя.

Объединяя все известные и полученные эффекты от воздействия ДГК на организм опухоленосителя, можно заключить, что данный флавоноид может быть использован для разработки протоколов терапии патологических процессов, связанных с развитием окислительного и нитрозилирующего стрессов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Наумов, Андрей Анатольевич, 2011 год

1. Андреева НА, Шуматова ТА, and Мотавкин ПА. Нитрооксидергические нейроны органов дыхания. Бюл эксперим биологии и медицины 129(2): 222-224, 2000.

2. Брюне Б, Сандау К, and фон Кнетен А. Апоптотическая гибель клеток и оксид азота: механизмы активации и антагонистические сигнальные пути. Биохимия 63(7): 966—975, 1998.

3. Горен АКФ, and Б. М. Универсальная и комплексная энзимология синтазы оксида азота. Биохимия 636(7): 870-880, 1998.

4. Караванова ИД, Банников ГА, and Троянский СМ. Различия в экспрессии прекератина и виментина в органной и монослойной культурах гепатоцитов крысы. Цитология 27(9): 1039-1043., 1987.

5. Луъ\енко СБ, Фельдман НБ, Туманов СГ, and Северин СЕ. Молекулярные механизмы противоопухолевой активности антибиотиков антрациклинового ряда. Вопр мед и фарм химии 2: 3-9, 2001.

6. Малышев ИЮ, and Манухина ЕБ. Стресс, адаптация и оксид азота Биохимия 63(7): 881-904, 1998.

7. Манухина ЕБ, and Малышев ИЮ. Роль оксида азота в сердечнососудистой патологии: взгляд патофизиолога. Российский кардиологический журнал 5: 55-63, 2000.

8. Меньшиков ВВ. Лабораторные методы исследования в клинике. М: Медицина 1987

9. Недоспаев АА. Биогенный NO в конкурентных отношениях. Биохимия 63(7): 881-904, 1998.

10. Попова НА. Модели экспериментальной онкологии. Соросовский образоват журн 6: 33-38, 2000.

11. Поцелуева ММ, Пустовидко АВ, Алабин ВС, and Евтодиенко ЮВ. Генерагщя реактивных форм кислорода полиморфноядерными лейкоцитами в процессе развития гепатомы в брюшной полости животного. Цитология 41(2): 162-166, 1999.

12. Поцелуева ММ, Пустовидко АВ, Ковалева ЕВ, Шаталин ЮВ, Евтодиенко ЮВ. Цитотоксическое действие полиморфноядерных лейкоцитов на опухолевые и нормальные клетки in vitro и in vivo. Цитология 71(1): 57-63, 2005.

13. Реутов ВП, and Сорокина ЕГ. NO-синтазная и нитритредуктазная компоненты цикла оксида азота. Биохимия 63(7): 1029-1040, 1998.

14. Сандау К, and фон Кнетен А. Апоптотическая гибель клеток и оксид азота: механизмы активации и антагонистические сигнальные пути. . Биохимия 63(7): 966-975, 1998.

15. Серов ВВ, and Пауков ВС. Воспаление. М: Медицина 1995.

16. Тэйлор jЕС. Индуцибельная синтаза оксида азота в печени: регуляг^ия «функции». Биохимия 63(7): 905-923, 1998.

17. Шаталин ЮВ, Наумов АА, and Поцелуева ММ. Изменение состава клеточных популяций и уровня активных форм кислорода в крови и в асцитической жидкости опухоленосителя. Цитология 52(2): 131-135, 2010.

18. Abramson SB. Nitric oxide in inflammation and pain associated with osteoarthritis. Arthritis Res Ther 10 Suppl 2: S2, 2008.

19. Ackermann MF, Lamm KR, Wiegand GW, and Luster MI. Antitumor activity of murine neutrophils demonstrated by cytometric analysis. Cancer Res 49: 528-532, 1989.

20. Ackermann R. Comments on the contribution by K.-J. Neumarker et al. Borrelia encephalitis and catatonia in adolescents. Nervenarzt (1989) 60:115-119. Nervenarzt 60: 765, 1989.

21. Albina JE, and Reichner JS. Role of nitric oxide in mediation of macrophage cytotoxicity and apoptosis. Cancer Metastasis Rev 17: 39-53, 1998.

22. Albina JE, Mahoney EJ, Daley JM, Wesche DE, Morris SM, Jr., and Reichner JS. Macrophage arginase regulation by CCAAT/enhancer-binding protein beta. Shock 23: 168-172, 2005.

23. Alvarez B, Rubbo H, Kirk M, Barnes S, Freeman BA, and Radi R. Peroxynitrite-dependent tryptophan nitration. Chem Res Toxicol 9: 390-396, 1996.

24. Arnelle DR, and Stamler JS. NO+, NO, and NO- donation by S-nitrosothiols: implications for regulation of physiological functions by S-nitrosylation and acceleration of disulfide formation. Arch Biochem Biophys318: 279-285, 1995.

25. Balkwill F. Chemokine biology in cancer. Semin Immunol 15: 49-55, 2003.

26. Bermudes D, and Joiner KA. The role of parasites in generating evolutionary novelty. Parasitol Today 9: 458-463, 1993.

27. Billiau AD, Wouters CH, and Lagae LG. Epilepsy and the immune system: is there a link? Eur JPaediatr Neurol 9: 29-42, 2005.

28. Single L, Brown NJ, and Lewis CE. The role of tumour-associated macrophages in tumour progression: implications for new anticancer therapies. J Pathol 196: 254-265, 2002.

29. Bingle L, Singleton V, and Bingle CD. The putative ovarian tumour marker gene HE4 (WFDC2), is expressed in normal tissues and undergoes complex alternative splicing to yield multiple protein isoforms. Oncogene 21: 27682773, 2002.

30. Biswas S, Raoult D, and Rolain JM. Molecular characterization of resistance to macrolides in Bartonella henselae. Antimicrob Agents Chemother 50: 3192-3193, 2006.

31. Biswas SK, and Lopes de Faria JB. Hypertension induces oxidative stress but not macrophage infiltration in the kidney in the early stage of experimental diabetes mellitus. Am J Nephrol 26: 415-422, 2006.

32. Bolat F, Kayaselcuk F, Nursal TZ, Yagmurdur MC, Bal N, andDemirhan B. Microvessel density, VEGF expression, and tumor-associated macrophages in breast tumors: correlations with prognostic parameters. J Exp Clin Cancer Res 25: 365-372, 2006.

33. Boutard V, Havouis R, Fouqueray B, Philippe C, Moulinoux JP, and Baud L. Transforming growth factor-beta stimulates arginase activity in macrophages. Implications for the regulation of macrophage cytotoxicity. J Immunol 155: 2077-2084, 1995.

34. Brown GC, and Cooper CE. Nanomolar concentrations of nitric oxide reversibly inhibit synaptosomal respiration by competing with oxygen at cytochrome oxidase. FEBS Lett 356: 295-298, 1994.

35. Cabrera C, and Bohr D. The role of nitric oxide in the central control of blood pressure. Biochem Biophys Res Commun 206: 77-81, 1995.

36. Caltagirone S, Rossi C, Poggi A, Ranelletti FO, Natali PG, Brunetti M, Aiello FB, and Piantelli M. Flavonoids apigenin and quercetin inhibit melanoma growth and metastatic potential. Int J Cancer 87: 595-600, 2000.

37. Cannon RO, 3rd, Schechter AN, Panza JA, Ognibene FP, Pease-Fye ME,

38. Waclawiw MA, Shelhamer JH, and Gladwin MT. Effects of inhaled nitric oxide on regional blood flow are consistent with intravascular nitric oxide delivery. J Clin Invest 108: 279-287, 2001.

39. Ceradini DJ, Kulkarni AR, Callaghan MJ, Tepper OM, Bastidas N, Kleinman ME, Capla JM, Galiano RD, Levine JP, and Gurtner GC. Progenitor cell trafficking is regulated by hypoxic gradients through HIF-1 induction ofSDF-1. Nat Med 10: 858-864, 2004.

40. Chang CJ, Tai KF, Roffler S, and Hwang LH. The immunization site of cytokine-secreting tumor cell vaccines influences the trafficking of tumor-specific T lymphocytes and antitumor efficacy against regional tumors. J Immunol 173: 6025-6032, 2004.

41. Chang MK, Binder CJ, Miller YI, Subbanagounder G, Silverman GJ, Berliner JA, and Witztum JL. Apoptotic cells with oxidation-specific epitopes are immunogenic and proinflammatory. J Exp Med 200: 13591370, 2004.

42. Condeelis J, and Pollard JW. Macrophages: obligate partners for tumor cell migration, invasion, and metastasis. Cell 124: 263-266, 2006.

43. Cooper CE. Nitric oxide and iron proteins. Biochim Biophys Acta 1411: 290-309, 1999.

44. Cremers B, Flesch M, Sudkamp M, and Bohm M. Effects of the novel T-type calcium channel antagonist mibefradil on human myocardial contractility in comparison with nifedipine and verapamil. J Cardiovasc Pharmacol 29: 692-696, 1997.

45. Culotta VC, Klomp LW, Strain J, Casareno RL, Krems B, and Gitlin JD. The copper chaperone for superoxide dismutase. J Biol Chem 272: 2346923472, 1997.

46. Czapski G, and Goldstein S. The role of the reactions of .NO with superoxide and oxygen in biological systems: a kinetic approach. Free Radic Biol Med 19: 785-794, 1995.

47. Deem S, Gladwin MT, Berg JT, Kerr ME, and Swenson ER. Effects of S-nitrosation of hemoglobin on hypoxic pulmonary vasoconstriction and nitric oxide flux. Am J Respir Crit Care Med 163: 1164-1170, 2001.

48. DeMaster EG, Ouast BJ, Redfern B, and Nagasawa HT. Reaction of nitric oxide with the free salfhydryl group of human serum albumin yields a sulfenic acid and nitrous oxide. Biochemistry 34: 11494-11499, 1995.

49. Deonarain R, Verma A, Porter AC, Gewert DR, Platanias LC, and Fish EN. Critical roles for IFN-beta in lymphoid development, myelopoiesis, and tumor development: links to tumor necrosis factor alpha. Proc Natl Acad Sci USA 100:13453-13458, 2003.

50. Dicks AP, and Williams DL. Generation of nitric oxide from S-nitrosothiols using protein-bound Cu2+ sources. Chem Biol 3: 655-659, 1996.

51. Dirkx ML, de Boer JC, and Heijmen BJ. Improvement of radiotherapy treatment delivery accuracy using an electronic portal imaging device. Radiat Prot Dosimetry 121: 70-79, 2006.

52. EwingJF, and Janero DR. Specific S-nitrosothiol (thionitrite) quantification as solution nitrite after vanadium(III) reduction and ozone-chemiluminescent detection. Free Radic Biol Med 25: 621-628, 1998.

53. Flavahan NA. Atherosclerosis or lipoprotein-induced endothelial dysfunction. Potential mechanisms underlying reduction in EDRF/nitric oxide activity. Circulation 85: 1927-1938, 1992.

54. Fotsis T, Pepper MS, Aktas E, Breit S, Rasku S, Adlercreutz H, Wahala K, Montesano R, and Schweigerer L. Flavonoids, dietary-derived inhibitors of cell proliferation and in vitro angiogenesis. Cancer Res 57: 2916-2921, 1997.

55. Frears ER, Zhang Z, Blake DR, O'Connell JP, and Winyard PG. Inactivation of tissue inhibitor of metalloproteinase-1 by peroxynitrite. FEBS Lett 381: 21-24, 1996.

56. Fujimori H, and Pan-Hou H. Effect of nitric oxide on L-3H.glutamate binding to rat brain synaptic membranes. Brain Res 554: 355-357, 1991.

57. Furlong B, Henderson AH, Lewis MJ, and Smith J A. Endothelium-derived relaxing factor inhibits in vitro platelet aggregation. Br J Pharmacol 90: 687-692, 1987.

58. Ganster RW, Taylor BS, Shao L, and Geller DA. Complex regulation of human inducible nitric oxide synthase gene transcription by Stat 1 and NF-kappaB. Proc Natl Acad Sci USA 98: 8638-8643, 2001.

59. Goldstein S, and Czapski G. The reaction of NO. with 02.- and H02.: a pulse radiolysis study. Free Radic Biol Med 19: 505-510, 1995.

60. Goldstein S, Squadrito GL, Pryor WA, and Czapski G. Direct and indirect oxidations by peroxynitrite, neither involving the hydroxyl radical. Free Radic Biol Med 21: 965-974, 1996.

61. Gorbunov NV, Osipov AN, Day BW, Zayas-Rivera B, Kagan VE, and Elsayed NM. Reduction of ferrylmyoglobin and ferrylhemoglobin by nitric oxide: a protective mechanism against ferryl hemoprotein-induced oxidations. Biochemistry 34: 6689-6699, 1995.

62. Gordon S. Do macrophage innate immune receptors enhance atherogenesis? Dev Cell 5: 666-668, 2003.

63. Gow AJ, and Stamler JS. Reactions between nitric oxide and haemoglobin under physiological conditions. Nature 391: 169-173, 1998.

64. Granger DL, Hibbs JB, Jr., Perfect JR, and DurackDT. Metabolic fate ofL-arginine in relation to microbiostatic capability of murine macrophages. J Clin Invest 85: 264-273, 1990.

65. Grasemann H, and Ratjen F. Cystic fibrosis lung disease: the role of nitric oxide. Pediatr Pulmonol 28: 442-448, 1999.

66. Grasemann H, Gartig SS, Wiesemann HG, Teschler H, Konietzko N, and Ratjen F. Effect of L-arginine infusion on airway NO in cystic fibrosis and primary ciliary dyskinesia syndrome. Eur Respir J13: 114-118, 1999.

67. Grasemann H, Yandava CN, and Drazen JM. Neuronal NO synthase (NOS1) is a major candidate gene for asthma. Clin Exp Allergy 29 Suppl 4: 39-41, 1999.

68. Green LC, Tannenbaum SR, and Fox JG. Nitrate in human and canine milk. N Engl J Med 306: 1367-1368, 1982.

69. Green SJ, Nacy CA, and Meltzer MS. Cytokine-induced synthesis of nitrogen oxides in macrophages: a protective host response to Leishmania and other intracellidar pathogens. JLeukoc Biol 50: 93-103, 1991.

70. Gupta S, Afaq F, Mukhtar H. Involvement of nuclear factor-kappa B, Bax and Bcl-2 in induction of cell cycle arrest and apoptosis by apigenin in human prostate carcinoma cells. Oncogene 2002; 21: 3727-38.

71. Gupta S, and Keane S. Renal enlargement as a primary presentation of acute lymphoblastic leukaemia. Br J Radiol 58: 893-895, 1985.

72. Hayashi T, Yamada K, Esaki T, Kuzuya M, Satake S, Ishikawa T, Hidaka H, and Iguchi A. Estrogen increases endothelial nitric oxide by a receptor-mediated system. Biochem Biophys Res Commun 214: 847-855, 1995.

73. Hayashi T, Yamada K, Esaki T, Mutoh E, and Iguchi A. Effect of estrogen on isoforms of nitric oxide synthase: possible mechanism of anti-atherosclerotic effect of estrogen. Gerontology 43 Suppl 1: 24-34, 1997.

74. Hiratsuka T. The interaction of Phe472 with a fluorescent inhibitor bound to the complex of myosin subfragment-1 with nucleotide. Biochemistry 45: 1234-1241, 2006.

75. Hogg N, and Kalyanaraman B. Nitric oxide and lipid peroxidation. Biochim Biophys Acta 1411: 378-384, 1999.

76. Hogg N, Kalyanaraman B, Joseph J, Struck A, and Parthasarathy S. Inhibition of low-density lipoprotein oxidation by nitric oxide. Potential role in atherogenesis. FEBS Lett 334: 170-174, 1993.

77. Hogg N, Struck A, Goss SP, Santanam N, Joseph J, Parthasarathy S, and Kalyanaraman B. Inhibition of macrophage-dependent low density lipoprotein oxidation by nitric-oxide donors. J Lipid Res 36: 1756-1762, 1995.

78. Hornung RL, Young HA, Urba WJ, and Wiltrout RH. Immunomodulation of natural killer cell activity by flavone acetic acid: occurrence via induction of interferon alpha/beta. J Natl Cancer Inst 80: 1226-1231, 1988.

79. Hughes MN. Chemistry of nitric oxide and related species. Methods in enzymology 02(436): 3-19, 2008.

80. Huie RE, and Padmaja S. The reaction of no with superoxide. Free Radic Res Commim 18: 195-199, 1993.

81. Hunt JA, Moisidis E, and Haertsch P. Initial experience of Integra in the treatment of post-burn anterior cervical neck contracture. Br J Plast Surg 53: 652-658, 2000.

82. Inoue S, and Kawanishi S. Oxidative DNA damage induced by simultaneous generation of nitric oxide and superoxide. FEBS Lett 371: 86-88, 1995.

83. Ischiropoulos H, Zhu L, and Beckman JS. Peroxynitrite formation from macrophage-derived nitric oxide. Arch Biochem Biophys 298: 446-451, 1992.

84. Ischiropoulos H, Zhu L, Chen J, Tsai M, Martin JC, Smith CD, and Beckman JS. Peroxynitrite-mediated tyrosine nitration catalyzed by superoxide dismutase. Arch Biochem Biophys 298: 431-437, 1992.

85. Ishimura N, Bronk SF, and Gores GJ. Inducible nitric oxide synthase up-regulates Notch-1 in mouse cholangiocytes: implications for carcinogenesis. Gastroenterology 128:1354-1368, 2005.

86. Ishimura Y, Gao YT, Panda SP, Roman LJ, Masters BS, and Weintraub ST. Detection of nitrous oxide in the neuronal nitric oxide synthase reaction by gas chromatography-mass spectrometry. Biochem Biophys Res Commun 338: 543-549, 2005.

87. Jourd'heuil D, Gray L, and Grisham MB. S-nitrosothiol formation in blood of lipopolysaccharide-treated rats. Biochem Biophys Res Commun 273: 2226, 2000.

88. Jourd'heuil D, Hallen K, Feelisch M, and Grisham MB. Dynamic state of S-nitrosothiols in human plasma and whole blood. Free Radic Biol Med 28: 409-417, 2000.

89. Kleinert H, Schwarz PM, and Forstermann U. Regulation of the expression of inducible nitric oxide synthase. Biol Chem 384: 1343-1364, 2003.

90. Kosaka H, and Seiyama A. Physiological role of nitric oxide as an enhancer of oxygen transfer from erythrocytes to tissues. Biochem Biophys Res Commun 218: 749-752, 1996.

91. Kozlov AV, Staniek K, and Nohl H. Nitrite reductase activity is a novel function of mammalian mitochondria. FEBS Lett 454: 127-130, 1999.

92. Langford EJ, Wainwright RJ, and Martin JF. Platelet activation in acutemyocardial infarction and unstable angina is inhibited by nitric oxide donors. Arterioscler Thromb Vase Biol 16: 51-55, 1996.

93. Lee JH, Yang ES, and ParkJW. Inactivation of NADP+-dependent isocitrate dehydrogenase by peroxynitrite. Implications for cytotoxicity and alcohol-induced liver injury. J Biol Chem 278: 51360-51371, 2003.

94. Lee SC, Dickson DW, Brosnan CF, and Casadevall A. Human astrocytes inhibit Cryptococcus neoformans growth by a nitric oxide-mediated mechanism. J Exp Med 180: 365-369, 1994.

95. Leek RD, and Harris AL. Tumor-associated macrophages in breast cancer. J Mammary Gland Biol Neoplasia 7: 177-189, 2002.

96. Lefer AM, and Lefer DJ. Endothelial dysfunction in myocardial ischemia and reperfusion: role of oxygen-derived free radicals. Basic Res Cardiol 86 Suppl 2: 109-116, 1991.

97. Lefer AM, Johnson G, 3rd, Ma XL, Tsao PS, and Thomas GR. Cardioprotective and endothelial protective effects of Ala-IL8.77 in a rabbit model of myocardial ischaemia and reperfusion. Br J Pharmacol 103: 1153-1159, 1991.

98. Lefer AM, Tsao PS, Lefer DJ, and Ma XL. Role of endothelial dysfunction in the pathogenesis of reperfusion injury after myocardial ischemia. FASEB J 5: 2029-2034, 1991.

99. Lepoivre M, Fieschi F, Coves J, Thelander L, and Fontecave M. Inactivation of ribonucleotide reductase by nitric oxide. Biochem Biophys Res Commun 179: 442-448, 1991.

100. Lepoivre M, Raddassi K, Oswald I, Tenu JP, and Lemaire G. Antiproliferative effects of NO synthase products. Res Immunol 142: 580583; discussion 591-582, 1991.

101. Lewis CE, and Pollard JW. Distinct role of macrophages in different tumor microenvironments. Cancer Res 66: 605-612, 2006.

102. Li D, Shirakami G, Zhan X, and Johns RA. Regulation of ciliary beat frequency by the nitric oxide-cyclic guanosine monophosphate signaling pathway in rat airway epithelial cells. Am J Respir Cell Mol Biol 23: 175181, 2000.

103. Liang YC, Huang YT, Tsai SH, Lin-Shiau SY, Chen CF, Lin JK. Suppression of inducible cyclooxygenase and inducible nitric oxide synthase by apigenin and related flavonoids in mouse macrophages. Carcinogenesis 1999; 20: 1945-1952.

104. Lin KT, Xae JY, Nomen M, Spur B, and Wong PY. Peroxynitrite-induced apoptosis in HL-60 cells. J Biol Chem 270: 16487-16490, 1995.

105. Liu SX, Fabisiak JP, Tyurin VA, Borisenko GG, Pitt BR, Lazo JS, andKagan VE. Reconstitution of apo-superoxide dismutase by nitric oxide-induced copper transfer from metallothioneins. Chem Res Toxicol 13: 922-931, 2000.

106. LiuX, Miller MJ, Jos hi MS, Thomas DD, and Lancaster JR, Jr. Accelerated reaction of nitric oxide with 02 within the hydrophobic interior of biological membranes. Proc Natl Acad Sci USA 95: 2175-2179, 1998.

107. Luo Y, and Wei YO. The regulating roles of angiopoietins/TEK-2 in angiogenesis. Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi 23: 63-66, 2006.

108. Luo Y, He DL, Ning L, Shen SL, Li L, and Li X Hypoxia-inducible factor-lalpha induces the epithelial-mesenchymal transition of human prostatecancer cells. Chin Med J (Engl) 119: 713-718, 2006.

109. Luo Y, Zhou H, Krueger J, Kaplan C, Lee SH, Dolman C, Markowitz D, Wu W, Liu C, Reisfeld RA, and Xiang R. Targeting tumor-associated macrophages as a novel strategy against breast cancer. J Clin Invest 116: 2132-2141, 2006.

110. Malinski T, Bailey F, Zhang ZG, and Chopp M. Nitric oxide measured by a porphyrinic microsensor in rat brain after transient middle cerebral artery occlusion. J Cereb Blood Flow Metab 13: 355-358, 1993.

111. Malinski T, Kapturczak M, Dayharsh J, and Bohr D. Nitric oxide synthase activity in genetic hypertension. Biochem Biophys Res Commun 194: 654658, 1993.

112. Malinski T, Radomski MW, Taha Z, and Moncada S. Direct electrochemical measurement of nitric oxide released from human platelets. Biochem Biophys Res Commun 194: 960-965, 1993.

113. Malinski T, Taha Z, Grunfeld S, Patton S, Kapturczak M, and Tomboulian P. Diffusion of nitric oxide in the aorta wall monitored in situ by porphyrinic microsensors. Biochem Biophys Res Commun 193: 1076-1082, 1993.

114. Mannick JB, Asano K, Izumi K, Kieff E, and Stamler JS. Nitric oxideproduced by human B lymphocytes inhibits apoptosis and Epstein-Barr virus reactivation. Cell 79: 1137-1146, 1994.

115. Mannick JB, Hausladen A, Liu L, Hess DT, Zeng M, Miao QX, Kane LS, Gow AJ, and Stamler JS. Fas-induced caspase denitrosylation. Science 284: 651-654, 1999.

116. Mantovani A, Bottazzi B, Colotta F, Sozzani S, and Ruco L. The origin and function of tumor-associated macrophages. Immunol Today 13: 265-270, 1992.

117. Mantovani A, Sozzani S, Locati M, Allavena P, and Sica A. Macrophage polarization: tumor-associated macrophages as a paradigm for polarized M2 mononuclear phagocytes. Trends Immunol 23: 549-555, 2002.

118. Mantovani A. La mala educacion of tumor-associated macrophages: Diverse pathways and new players. Cancer Cell 17: 111-112, 2010.

119. Martin S, Andriambeloson E, Takeda K, Andriantsitohaina R. Red wine polyphenols increase calcium in bovine aortic endothelial cells: a basis to elucidate signalling pathways leading to nitric oxide production. Br J Pharmacol 2002;135: 1579-1587.

120. Maruyama W, Hashizume Y, Matsubara K, and Naoi M. Identification of 3-nitro-L-tyrosine, a product of nitric oxide and superoxide, as an indicator of oxidative stress in the human brain. J Chromatogr B Biomed Appl 676: 153158, 1996.

121. Mayer B, Pfeiffer S, Schrammel A, Koesling D, Schmidt K, and Brunner F. A new pathway of nitric oxide/cyclic GMP signaling involving S-nitrosoglutathione. J Biol Chem 273: 3264-3270, 1998.

122. McCall T, and Vallance P. Nitric oxide takes centre-stage with newly defined roles. Trends Pharmacol Sci 13: 1-6, 1992.

123. McCall TB, Palmer RM, and Moncada S. Interleukin-8 inhibits the induction of nitric oxide synthase in rat peritoneal neutrophils. Biochem Biophys Res Commun 186: 680-685, 1992.

124. McMahon TJ, Exton Stone A, Bonaventura J, Singel DJ, and Solomon Stamler J. Functional coupling of oxygen binding and vasoactivity in S-nitrosohemoglobin. J Biol Chem 275: 16738-16745, 2000.

125. Melillo G, Musso T, Sica A, Taylor LS, Cox GW, and Varesio L. A hypoxia-responsive element mediates a novel pathway of activation of the inducible nitric oxide synthase promoter. J Exp Med 182: 1683-1693, 1995.

126. Melkova Z, and Esteban M. Inhibition of vaccinia virus DNA replication byinducible expression of nitric oxide synthase. J Immunol 155: 5711-5718, 1995.

127. Middleton E, Jr., Kandaswami C, Theoharides TC. The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implications for inflammation, heart disease, and cancer. Pharmacol Rev2000; 52: 673-751

128. Mills CD. Molecular basis of "suppressor" macrophages. Arginine metabolism via the nitric oxide synthetase pathway. J Immunol 146: 27192723, 1991.

129. Mohammad Javaid Akhtar FTB, Martin N. Hughes. Reaction of nitric oxide with hyponitrous acid: a hydrogen atom abstraction reaction. Inorg Chem 24 (12): 1934-1935, 1985.

130. Мог E, Tur-Kaspa R, Sheiner P, and Schwartz M. Treatment of hepatocellular carcinoma associated with cirrhosis in the era of liver transplantation. Ann Intern Med 129: 643-653, 1998.

131. Moreno JJ, and Pryor WA. Inactivation of alpha 1 -proteinase inhibitor by peroxynitrite. Chem Res Toxicol 5: 425-431, 1992.

132. Morris SM, Jr. Regulation of enzymes of the urea cycle and arginine metabolism. Annu Rev Nutr 22: 87-105, 2002.

133. Motta M, Ferlito L, Malaguarnera L, Vinci E, Bos со S, Maugeri D, and Malaguarnera M. Alterations of the lymphocytic set-up in elderly patients with cancer. Arch Gerontol Geriatr 36: 7-14, 2003.

134. Muller A, Homey B, Soto H, Ge N, Catron D, Buchanan ME, McClanahan T, Murphy E, Yuan W, Wagner SN, Barrera JL, Mohar A, Verastegui E, and Zlotnik A. Involvement of chemokine receptors in breast cancer metastasis. Nature 410: 50-56, 2001.

135. Munder M, Mallo M, Eichmann K, and Modolell M. Murine macrophages secrete interferon gamma upon combined stimulation with interleukin (IL)-12 and IL-18: A novel pathway of autocrine macrophage activation. J Exp Med 187: 2103-2108, 1998.

136. Munoz-Fernandez MA, Fernandez MA, and Fresno M. Activation of human macrophages for the killing of intracellular Trypanosoma cruzi by TNF-alpha and IFN-gamma through a nitric oxide-dependent mechanism.1.munol Lett 33: 35-40, 1992.

137. Mur E, Zabernigg A, Hilbe W, Eisterer W, Halder W, and Thaler J. Oxidative burst of neutrophils in patients with rheumatoid arthritis: influence of various cytokines and medication. Clin Exp Rheumatol 15: 233237, 1997.

138. Murphy ME, and Sies H. Reversible conversion of nitroxyl anion to nitric oxide by superoxide dismutase. Proc Natl Acad Sei USA 88: 10860-10864, 1991.

139. Nathan CF, and Hibbs JB, Jr. Role of nitric oxide synthesis in macrophage antimicrobial activity. Curr Opin Immunol 3: 65-70, 1991.

140. Olszanecki R, Geb ska A, Kozlovski VI, and Gryglewski RJ. Flavonoids and nitric oxide synthase. Journal of physiology and pharmacology : an official journal of the Polish Physiological Society 53: 571-584, 2002

141. O'Sidlivan C, Lewis CE, Harris AL, and McGee JO. Secretion of epidermal growth factor by macrophages associated with breast carcinoma. Lancet 342: 148-149, 1993.

142. Palluy O, and Rigaud M. Nitric oxide induces cultured cortical neuron apoptosis. Neurosci Lett 208: 1-4, 1996.

143. Palmer RM, Ashton DS, and Moncada S. Vascular endothelial cells synthesize nitric oxide from L-arginine. Nature 333: 664-666, 1988.

144. Palmer RM, Rees DD, Ashton DS, and Moncada S. L-arginine is the physiological precursor for the formation of nitric oxide in endothelium-dependent relaxation. Biochem Biophys Res Commun 153: 1251-1256, 1988.

145. Paulus WJ, Vantrimpont PJ, and Shah AM. Acute effects of nitric oxide on left ventricular relaxation and diastolic distensibility in humans. Assessment by bicoronary sodium nitroprusside infusion. Circulation 89: 2070-2078, 1994.

146. Peet GW, Li J. IkappaB kinases alpha and beta show a random sequential kinetic mechanism and are inhibited by staurosporine and quercetin. J Biol Chem 1999; 274: 32655-32661

147. Pufahl RA, Singer CP, Peariso KL, Lin SJ, Schmidt PJ, Fahrni CJ, Culotta VC, Penner-Hahn JE, and O'Halloran TV. Metal ion chaperone function of the soluble Cu(I) receptor Atxl. Science 278: 853-856, 1997.

148. Pustovidko AV, Potselueva MM, and Evtodienko YV. Generation of reactive oxygen species by polymorphonuclear leukocytes and its modulation bycalcium ions during tumor growth. IUBMB Life 50: 69-73, 2000.

149. Radi R, Beckman JS, Bush KM, and Freeman BA. Peroxynitrite oxidation of sulfhydryls. The cytotoxic potential of superoxide and nitric oxide. J Biol Chem 266: 4244-4250, 1991.

150. Radi R, Beckman JS, Bush KM, and Freeman BA. Peroxynitrite-induced membrane lipid peroxidation: the cytotoxic potential of superoxide and nitric oxide. Arch Biochem Biophys 288: 481-487, 1991.

151. Ramaekers F, Puts J, Moesker O, Kant A, Jap P, and Vooijs P. Demonstration of keratin in human adenocarcinomas. Am J Pathol 111: 213-223, 1983.

152. Rand MJ, and Li CG. Discrimination by the NO-trapping agent, carboxy-PTIO, between NO and the nitrergic transmitter but not between NO and EDRF. Br J Pharmacol 116: 1906-1910, 1995.

153. Rossig L, Fichtlscherer B, Breitschopf K, Haendeler J, Zeiher AM, Mulsch

154. A, and Dimmeler S. Nitric oxide inhibits caspase-3 by S-nitrosation in vivo. J Biol Chem 274: 6823-6826, 1999.

155. S.M. M. Arginine metabolism:boundaries of or knowledge. Jr Nutrition 137(6 Suppl 2): 1602-1609.

156. Saccani A, Schioppa T, Porta C, Biswas SK, Nebuloni M, Vago L, Bottazzi

157. B, Colombo MP, Mantovani A, and Sica A. p50 nuclear factor-kappaB overexpression in tumor-associated macrophages inhibits Ml inflammatory responses and antitumor resistance. Cancer Res 66: 11432-11440, 2006.

158. Saleem M, and Ohshima H. Xanthine oxidase converts nitric oxide to nitroxyl that inactivates the enzyme. Biochem Biophys Res Commun 315: 455-462, 2004.

159. Salgo MG, Stone K, Squadrito GL, Battista JR, and Pry or WA. Peroxynitrite causes DNA nicks in plasmid pBR322. Biochem Biophys Res Commun 210: 1025-1030, 1995.

160. Saran M, Michel C, and Bors W. Reaction of NO with 02-. implications for the action of endothelium-derived relaxing factor (EDRF). Free Radic Res Commun 10: 221-226, 1990.

161. Schioppa T, Uranchimeg B, Saccani A, Biswas SK, Doni A, Rapisarda A,

162. Bernasconi S, Saccani S, Nebuloni M, Vago L, Mantovani A, Melillo G, and Sica A. Regulation of the chemokine receptor CXCR4 by hypoxia. J Exp Med 198: 1391-1402, 2003.

163. Schmidt HH, Hofmann H, Schindler U, Shutenko ZS, Cunningham DD, and Feelisch M. No .NO from NO synthase. Proc Natl Acad Sci USA 93: 14492-14497, 1996.

164. Schwartsburd PM, and Lankin VZ. Endogenous induction of transient oxidant-imbalances in Ehrlich cells as a possible trigger to fast tumor fluid accumulation. Med Oncol 12: 203-207, 1995.

165. Schwartsburd PM, and Lankin VZ. Lipoproteins in hypoxic tumor cells as traps of free radicals. Med Oncol 11: 101-110, 1994.

166. Selemidis S, Dusting GJ, Peshavariya H, Kemp-Harper BK, and Drummond GR. Nitric oxide suppresses NADPH oxidase-dependent superoxide production by S-nitrosylation in human endothelial cells. Cardiovasc Res 75: 349-358, 2007.

167. Selemidis S, Sobey CG, Wingler K, Schmidt HH, and Drummond GR. NADPH oxidases in the vasculature: molecular features, roles in disease and pharmacological inhibition. Pharmacol Ther 120: 254-291, 2008.

168. Selemidis S. Suppressing NADPH oxidase-dependent oxidative stress in the vasculature with nitric oxide donors. Clin Exp Pharmacol Physiol 35: 13951401, 2008.

169. Semenza GL. Angiogenesis in ischemic and neoplastic disorders. Annu Rev Med 54: 17-28, 2003.

170. Semenza GL. Targeting HIF-1 for cancer therapy. Nat Rev Cancer 3: 721732, 2003.

171. Shafirovich V, and Lymar SV. Nitroxyl and its anion in aqueous solutions: spin states, protic equilibria, and reactivities toward oxygen and nitric oxide. Proc Natl Acad Sci USA 99: 7340-7345, 2002.

172. Shaw AWV, A. J. Solubility of nitric oxide in aqueous and nonaqueous solvents. J Chem Soc Faraday Trans 8: 1239—1244, 1977.

173. Sica A, and Bronte V. Altered macrophage differentiation and immunedysfunction in tumor development. J Clin Invest 117: 1155-1166, 2007.

174. Sica A, Schioppa T, Mantovani A, and Allavena P. Tumour-associated macrophages are a distinct M2 polarised popidation promoting tumour progression: potential targets of anti-cancer therapy. Eur J Cancer 42: 717727, 2006.

175. Silkojf PE, McClean PA, Caramori M, Slutsky AS, and Zamel N. A significant proportion of exhaled nitric oxide arises in large airways in normal subjects. Respir Physiol 113: 33-38, 1998.

176. Sneddon JM, and Vane JR. Endothelium-derived relaxing factor reduces platelet adhesion to bovine endothelial cells. Proc Natl Acad Sci USA 85: 2800-2804, 1988.

177. Solinas G, Germano G, Mantovani A, and Allavena P. Tumor-associated macrophages (ТАМ) as major players of the cancer-related inflammation. J Leukoc Biol 86: 1065-1073, 2009.

178. Soriano FG, Lorigados CB, Pacher P, and Szabo C. Effects of a potent peroxynitrite decomposition catalyst in murine models of endotoxemia and sepsis. Shock 35: 560-566, 2011.

179. Stamler JS, Goldman ME, Gomes J, Matza D, and Horowitz SF. The effect of stress and fatigue on cardiac rhythm in medical interns. J Electrocardiol 25: 333-338, 1992.

180. Stamler JS, Jaraki O, Osborne J, Simon DI, Keaney J, Vita J, Singel D, Valeri CR, and Loscalzo J. Nitric oxide circulates in mammalian plasma primarily as an S-nitroso adduct of serum albumin. Proc Natl Acad Sci U S A 89: 7674-7677, 1992.

181. Stamler JS, Jia L, Eu JP, McMahon TJ, Demchenko IT, Bonaventura J, Gernert K, and Piantadosi CA. Blood flow regulation by S-nitrosohemoglobin in the physiological oxygen gradient. Science 276: 20342037, 1997.

182. Stamler JS, Loh E, Roddy MA, Currie KE, and Creager MA. Nitric oxide regulates basal systemic and pulmonary vascular resistance in healthy humans. Circulation 89: 2035-2040, 1994.

183. Stamler JS, Simon DI, Jaraki O, Osborne JA, Francis S, Mullins M, Singel D, and Loscalzo J. S-nitrosylation of tissue-type plasminogen activator confers vasodilatory and antiplatelet properties on the enzyme. Proc Natl AcadSci USA 89: 8087-8091, 1992.

184. Stamler JS, Singel DJ, and Loscalzo J. Biochemistry of nitric oxide and its redox-activatedforms. Science 258: 1898-1902, 1992.

185. Stamler JS. Redox signaling: nitrosylation and related target interactions of nitric oxide. Cell 78: 931-936, 1994.

186. Stepuro I, Chaikovskaya N, Piletskaya T, and Solodunov A. Glutathione oxidation under the action of sodium nitrite on hemoglobin. Pol J Pharmacol 46: 601-607, 1994.

187. Stone JR, Sands RH, Dunham WR, and Marietta MA. Electron paramagnetic resonance spectral evidence for the formation of a pentacoordinate nitrosyl-heme complex on soluble guanylate cyclase. Biochem Biophys Res Commun 207: 572-577, 1995.

188. Stout NL. Cancer prevention in physical therapist practice. Phys Ther 89: 1119-1122, 2009.

189. Summersgill JT, Powell LA, Buster BL, Miller RD, and Ramirez JA. Killing of Legionella pneumophila by nitric oxide in gamma-interferon-activated macrophages. J Leukoc Biol 52: 625-629, 1992.

190. T. Logager KSaJH. Radiat Phis Chem 97: 5451-5456, 1993.

191. Talks KL, and Harris AL. Current status of antiangiogenic factors. Br J Haematol 109: 477-489, 2000.

192. Tanner P, Onaca O, Balasubramanian V, Meier W, and Palivan CG. Enzymatic cascade reactions inside polymeric nanocontainers: a means to combat oxidative stress. Chemistry 17: 4552-4560, 2011.

193. Tauber AI, Fay JR, Marietta MA. Flavonoid inhibition of the human neutrophil NADPH-oxidase. Biochem Pharmacol 1984; 33:1367-1369.

194. Taylor WF, and Bishop VS. A role for nitric oxide in active thermoregulatory vasodilation. Am J Physiol 264: H1355-1359, 1993.

195. Trichopoulos D, Li FP, and Hunter DJ. What causes cancer? Sci Am 275: 80-87, 1996.

196. Troy CM, Derossi D, Prochiantz A, Greene LA, and Shelanski ML. Downregulation of Cu/Zn superoxide dismutase leads to cell death via the nitric oxide-peroxynitrite pathway. JNeurosci 16: 253-261, 1996.

197. Tsuda Y, Takahashi H, Kobayashi M, Hanafusa T, Herndon DN, and Suzuki F. Three different neutrophil subsets exhibited in mice with different susceptibilities to infection by methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Immunity 21: 215-226, 2004.

198. Vanin AF, Malenkova IV, and Serezhenkov VA. Iron catalyzes both decomposition and synthesis of S-nitrosothiols: optical and electron paramagnetic resonance studies. Nitric Oxide 1: 191-203, 1997.

199. Vanin AF, Mordvintcev PI, Hauschildt S, and Mulsch A. The relationship between L-arginine-dependent nitric oxide synthesis, nitrite release and dinitrosyl-iron complex formation by activated macrophages. Biochim Biophys Acta 1177: 37-42, 1993.

200. Vanin AF. Endothelium-derived relaxing factor is a nitrosyl iron complex with thiol ligands. FEBS Lett 289: 1-3, 1991.

201. Virag L, Scott GS, Antal-Szalmas P, O'Connor M, Ohshima H, and Szabo C.

202. Requirement of intracellular calcium mobilization for peroxynitrite-induced poly(ADP-ribose) synthetase activation and cytotoxicity. Mol Pharmacol 56: 824-833, 1999.

203. Wennmalm A, Benthin G, Edlund A, Jungersten L, Kieler-Jensen N, Lundin S, Westfelt UN, Petersson AS, and Waagstein F. Metabolism and excretion of nitric oxide in humans. An experimental and clinical study. Circ Res 73: 1121-1127, 1993.

204. Williams DL. Nitrosating agents: is peroxynitrite a likely candidate? Nitric Oxide 1: 522-527, 1997.

205. Williams DL. S-nitrosothiols and role of metal ions in decomposition to nitric oxide. Methods Enzymol 268: 299-308, 1996.

206. Williams EA, Quinlan GJ, Anning PB, Goldstraw P, and Evans TW. Lung injury following pulmonary resection in the isolated, blood-perfused rat lung. Eur Respir J14: 745-750, 1999.

207. Wizemann TM, and Laskin DL. Effects of acute endotoxemia on production of cytokines and nitric oxide by pulmonary alveolar and interstitial macrophages. Ann N YAcad Sci 730: 336-337, 1994.

208. Wizemann TM, Gardner CR, Laskin JD, Quinones S, Durham SK, Goller NL, Ohnishi ST, and Laskin DL. Production of nitric oxide and peroxynitrite in the lung during acute endotoxemia. JLeukoc Biol 56: 759-768, 1994.

209. Wong PS, Hyun J, Fukuto JM, Shirota FN, DeMaster EG, Shoeman DW, and Nagasawa HT. Reaction between S-nitrosothiols and thiols: generation of nitroxyl (UNO) and subsequent chemistry. Biochemistry 37: 5362-5371, 1998.

210. Wong PS, Hyun J, Fukuto JM, Shirota FN, DeMaster EG, Shoeman DW, and Nagasawa HT. Reaction between S-nitrosothiols and thiols: generation of nitroxyl (HNO) and subsequent chemistry. Biochemistry 37: 5362-5371, 1998.

211. Xie Q, Nathan C. The high-output nitric oxide pathway: role and regulation. J Leukoc Biol 1994; 56: 576-682.

212. Yamagishi S, and Matsui T. Nitric oxide, a janus-faced therapeutic target for diabetic microangiopathy-Friend or foe? Pharmacol Res 64: 187-194, 2011.

213. Yang ES, Richter C, Chun JS, Huh TL, Kang SS, and Park JW. Inactivation ofNADP(+)-dependent isocitrate dehydrogenase by nitric oxide. Free Radic Biol Med 33: 927-937, 2002.

214. Yin K, Lai PS, Rodriguez A, Spur BW, and Wong PY. Antithrombotic effectsof per oxy nitrite: inhibition and reversal of aggregation in human platelets. Prostaglandins 50: 169-178, 1995.

215. Yousefipour Z, Oyekan A, and Newaz M. Interaction of oxidative stress, nitric oxide and peroxisome proliferator activated receptor gamma in acute renal failure. Pharmacol Ther 125: 436-445, 2010.

216. Zhang J, and Snyder SH. Nitric oxide in the nervous system. Annu Rev Pharmacol Toxicol 35: 213-233, 1995.

217. Zhu L, Gunn C, and Beckman JS. Bactericidal activity of peroxynitrite. Arch Biochem Biophys 298: 452-457, 1992.1. Благодарности.

218. Я благодарен своим родителям, которые всегда мне помогали и давшие достойное образование. Я благодарен своим друзьям и коллегам за понимание и поддержку, спасибо вам всем.