Механизмы иммунорегулирующей активности грелина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Логинова Ольга Александровна

• Логинова Ольга Александровна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Логинова Ольга Александровна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Структурная и функциональная характеристика грелина

1.2. Роль грелина в регуляции репродуктивной системы

1.3. Роль грелина в регуляции клеток иммунной системы

1.4.Характеристика основных типов дендритных клеток и регуляторных лимфоцитов

1.5.Механизмы, определяющие формирование иммунной толерантности при беременности

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Методология и методы исследования

2.2. Объекты исследования

2.3. Биологически активные вещества

2.4. Получение мононуклеарных клеток периферической крови

2.5. Получение клеток тимуса

2.6. Генерация дендритных клеток из моноцитов периферической крови

2.7. Выделение дендритных клеток из тимуса

2.8. Иммуномагнитная сепарация Т- и В-лимфоцитов

2.9. Изучение роли грелина в регуляции формирования миелоидных и плазмоцитоидных дендритных клеток тимуса

2.10. Оценка роли грелина в регуляции формирования дендритных клеток, генерируемых из моноцитов периферической крови

2.11. Определение роли грелина в индукции регуляторных подтипов В-лимфоцитов из СВ19+СЭ25+-клеток

2.12. Изучение роли грелина в регуляции экспрессии иммуносупрессорных молекул на СВ4+СБ25+ Т-лимфоцитах

2.13. Экспериментальная модель для оценки роли миелоидных и плазмоцитоидных дендритных клеток в регуляции дифференцировки тимоцитов

2.14. Определение роли дендритных клеток в индукции Т^ и ТЫ7 из аллогенных лимфоцитов

2.15. Экспериментальные подходы для изучения роли дендритных клеток в регуляции толерогенного потенциала СВ19+СБ25+ В-лимфоцитов

2.16. Экспериментальная модель для определения роли СВ19+СБ25+ В-лимфоцитов в индукции формирования Т^ и ТЫ7

2.17. Определение фенотипа и отдельных поверхностных маркеров клеток периферической крови и тимуса

2.18. Оценка продукции цитокинов в супернатантах клеточных культур

2.19. Статистический анализ

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Влияние грелина на процессы индукции регуляторных Т- и В-лимфоцитов периферической крови

3.1.1. Роль грелина в регуляции функциональной активности СВ4+СБ25+-клеток

3.1.2. Влияние грелина на индукцию толерогенного фенотипа СБ 19+СБ25+-клеток

3.1.3. Роль грелина в регуляции количества Т^ и ТЫ7 в присутствии СБ 19+СБ25+-клеток

3.2. Значение грелина в регуляции созревания дендритных клеток периферической крови и их функциональной активности

3.2.1. Влияние грелина на созревание дендритных клеток, генерируемых из моноцитов и продукцию цитокинов

3.2.2 Роль прединкубированных с грелином дендритных клеток в регуляции баланса Тге§/ ТЫ7 и продукции цитокинов

3.2.3. Роль прединкубированных с грелином дендритных клеток в индукции толерогенного потенциала СВ19+СЭ25+ В-лимфоцитов

3.3. Влияние грелина на формирование субпопуляций дендритных клеток и Т-лимфоцитов тимуса и их функциональной активности

3.3.1. Значение грелина в регуляции фенотипа миелоидных и плазмоцитоидных дендритных клеток тимуса

3.3.2. Роль прединкубированных с грелином миелоидных и плазмоцитоидных дендритных клеток тимуса в индукции формирования Т^, ТЫ7 и ККТ-клеток

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы иммунорегулирующей активности грелина»

Актуальность темы и степень ее разработанности

Грелин - пептидный гормон, обладающий широким спектром эффектов в организме человека. Грелин принимает участие в регуляции энергетического и жирового обмена [120, 202], ростовых процессов, полового созревания, половых циклов, беременности, контроле поведенческих реакций, а также обладает выраженными иммуномодулирующими и противовоспалительными свойствами [24, 57, 79, 145, 176, 202].

Беременность сопровождается значительным изменением уровня грелина, что обусловлено усилением потребности матери и плода в питательных веществах и энергии [193]. При беременности уровень грелина нарастает и достигает своего максимума в середине II триместра, при этом грелин дополнительно продуцируется плацентой, но регуляция грелином процессов гестации начинается с имплантации и продолжается в течение всей беременности [81, 145]. Понижение уровня грелина при беременности, а также другие нарушения жирового обмена, сопряжены с аутоиммунными патологиями и репродуктивными проблемами иммунного генеза, такими как бесплодие и спонтанные аборты [151, 191, 204]. Причиной этих явлений является срыв состояния иммунной толерантности, которое, как известно, сопровождается развитием эффективных регуляторных механизмов и формированием состояния «неотвечаемости» иммунной системы матери к генетически чужеродному плоду. При беременности в децидуальной оболочке происходит увеличение доли толерогенных дендритных клеток (ДК), способствующих формированию индуцированных (i) регуляторных Т- лимфоцитов (англ. Treg), которые, в свою очередь, блокируют развитие индукторов провоспалительного иммунного ответа Т-хелперов 1 типа (англ. Th1) и IL-17-продуцирующих Т-хелперов (англ. Th17) [20, 36, 113, 167]. Кроме того, некоторые исследователи отмечают, что регуляторные В-лимфоциты (англ. Breg) также могут принимать участие в

индукции и кумуляции Т^, продуцируя соответствующие цитокины и хемокины [148]. Также необходимо учитывать, что формирование Тге§ идет не только на периферии, но и в тимусе, где ДК тимуса принимают участие в регуляции развития натуральных (п) Тге§ [16, 70]. Стоит отметить, что большинство клеток иммунной системы, а именно моноциты, макрофаги, дендритные клеткки, Т-, В-, и ЫК- клетки, несут рецепторы к грелину [98, 125, 202, 207].

Изменения уровня грелина наблюдаются при некоторых патологических состояниях, что открывает перспективы использования эндогенного гормона для их коррекции. Особый интерес представляет возможность лечения грелином нейродегенеративных расстройств, таких как рассеянный склероз, болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона, а также замедления старения в целом. Также в плане фармакологического потенциала, широко обсуждается возможность использования грелина для лечения саркопении, кардиопатии, также почечных и легочных расстройств. Помимо этого, имеются данные о возможности применения грелина при лечении депрессии, бесплодия, а также воспалительных и аутоиммунных заболеваний. Сейчас грелин уже используют для лечения осложнений метаболических расстройств, хронических воспалительных процессов, пареза желудка, анорексии и кахексии у онкологических больных [44, 52, 118, 143, 146].

Таким образом, несмотря на то, что грелин прежде всего метаболический гормон, он обладает плейотропными эффектами в организме млекопитающих, в том числе грелин обладает выраженной иммунорегуляторной активностью. Учитывая, что снижение уровня грелина при беременности сопряжено с угрозой ее прерывания, необходимо исследовать эффекты гормона в отношении клеток, обладающих толерогенной активностью, обеспечивающих формирование иммунной толерантности при беременности.

Цель исследования - исследование иммуномодулирующего действия грелина в концентрациях, характерных для беременности, на уровне регуляторных лимфоцитов и дендритных клеток периферической крови и тимуса.

Задачи исследования:

1. Определить роль грелина в процессах индукции и функциональной активности регуляторных подтипов T- и B-лимфоцитов периферической крови;

2. Исследовать влияние грелина на процессы формирования дендритных клеток из моноцитов периферической крови и их функциональную активность, а также оценить способность прединкубированных с грелином дендритных клеток к индукции регуляторных T- и B-лимфоцитов;

3. Определить вклад грелина в регуляции баланса основных субпопуляций дендритных клеток тимуса и роль прединкубированных с грелином миелоидных и плазмоцитоидных дендритных клеток тимуса в регуляции дифференцировки тимоцитов.

Методология и методы исследования

Работа выполнялась в лаборатории иммунорегуляции (ЛИР), заведующий лабораторией д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ С.В. Ширшев, Федерального государственного бюджетного учреждения науки Пермского федерального исследовательского центра «Института экологии и генетики микроорганизмов» Уральского отделения Российской академии наук (ФГБУН ПФИЦ «ИЭГМ УрО РАН») с 2013 по 2018 гг. Работа проводилась при поддержке грантов РФФИ (в которых соискатель являлся исполнителем): 13-04-00571 А (2013-2014 год) «Роль лептина и грелина в контроле созревания и функций дендритных клеток и их участия в индукции регуляторных Т-лимфоцитов в период физиологически протекающей беременности» (руководитель проекта д.б.н., в.н.с. ЛИР Орлова Е.Г.); 15-04-05670 А (2015-2016 год) «Роль лептина и грелина в контроле функций регуляторных В-лимфоцитов и опосредованной ими индукции регуляторных Т-лимфоцитов и дендритных клеток» (руководитель проекта д.б.н., в.н.с. ЛИР Орлова Е.Г.); 16-44-590631 р_а (2016-2018) «Гормональная регуляция тимического этапа дифференцировки лимфоцитов в контексте беременности» (руководитель проекта д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ Ширшев С.В.).

Объектами исследования являлись регуляторные Т- и В- лимфоциты, а также ДК. В связи с тем, что при беременности многократно увеличивается концентрации других специфических гормонов, оказывающих влияние на иммунную систему, для оценки «чистого» эффекта грелина в качестве объектов исследования выступали иммунные клетки, получаемые из периферической крови условно-здоровых небеременных женщины репродуктивного возраста (от 19 до 40 лет), в первую фазу менструального-овариального цикла (2-8 день). Клетки тимуса получали из фрагмента органа, удаляемого в ходе плановых сердечнососудистых операций у детей до года, в соответствии с существующей хирургической практикой Федерального краевого центра сердечно-сосудистой хирургии г. Перми. Обязательным критерием включения в выборку являлось наличие информированного согласия добровольного донора или законных представителей несовершеннолетних об использовании биологического материала в научных целях. Исследования были проведены согласно Хельсинской Декларации ВМА 2000 г. и соответствуют протоколу Конвенции Совета Европы «О правах человека и биомедицине» 1999 г.

Т- и В- лимфоциты, миелоидные (м) и плазмоцитоидные (п) ДК тимуса выделяли методом иммуномагнитной сепарации с использованием коммерческих наборов. Для исследования ДК периферической крови их генерировали из моноцитов. Для оценки влияния грелина на фенотип и функциональную активность исследуемых клеток их культивировали с гормоном in vitro от 24ч до 5 суток, в зависимости от условий эксперимента. Влияние грелина оценивалось после инкубации исследуемых клеток с гормоном методом проточной цитофлюориметрии по экспрессии мембранных и внутриклеточных молекул-маркеров, а также по продукции ими цитокинов в супернатантах культур методом иммуноферментного анализа (ИФА). Используемое в данном исследовании биологически активное вещество - гормон грелин - продукт рекомбинантного синтеза E.coli, с чистотой более 97%. Грелин использовали в концентрациях, воспроизводящих его уровень в крови I-II и III триместрах беременности.

Степень достоверности, апробация результатов, личное участие автора

Для решения установленных задач использовались иммунологические методы, соответствующие современному мировому уровню в области молекулярной и клеточной биологии. Проработанный дизайн исследования в совокупности с адекватными методами статистического анализа позволили получить достоверные результаты. Первичная обработка эмпирических данных ИФА проводилась с использованием программы «Microsoft Excel 2010», а данных, полученных в ходе проточной цитофлюориметрии, с помощью программ «WinMDI 2.9», «Kaluza 1.5» и «CytExpert 2.0». Статистический анализ данных проводился в программе «STATISTICA 11.0». Проверка гипотезы о нормальности распределения в выборке проводилась с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Оценка статистических отличий для данных подчиняющихся закону нормального распределения осуществлялась с использованием парного /-критерия Стьюдента, а в случае ненормального распределения для определения статистических отличий использовался парный Г-критерий Вилкоксона. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.

Материалы диссертации представлены и обсуждены на региональной молодежной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в биологии и экологии» (г.Пермь, 2014 г.); XII Конференции «Иммунология Урала» (г.Пермь, 2015 г.); XIII Конференции «Иммунология Урала» (г.Калининград, 2016 г.); IX Всероссийском конгрессе молодых ученых-биологов «Симбиоз-Россия 2016» (г.Пермь, 2016 г.); Всероссийской научно-практическая конференции с международным участием «Наукоемкие и биомедицинские технологии: от фундаментальных исследований до внедрения» (г.Пермь, 2016 г.); Международной конференции «Рецепторы и внутриклеточная сигнализация» (г.Пущино, 2017 г.); XIV Конференции «Иммунология Урала» (Челябинск, 2017 г.); II международной научно-практической конференции «Высокие технологии, определяющие качество жизни», проводимой в рамках Пермского

естественнонаучного форума «Наука и глобальные вызовы XXI века» (г.Пермь, 2018 г.).

Соискатель принимал непосредственное участие на большинстве этапов настоящего исследования. Планирование научной работы, формулировка цели и задач диссертационного исследования выполнено автором совместно с научным руководителем, заведующим лабораторией иммунорегуляции Федерального государственного бюджетного учреждения науки «Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук» «ИЭГМ УрО РАН» д.м.н., профессором заслуженным деятелем науки РФ Ширшевым С.В., а также руководителем проектов, поддержанных грантами РФФИ, в рамках которых проведена часть исследований, д.б.н., в.н.с. лаборатории иммунорегуляции «ИЭГМ УрО РАН» Орловой Е.Г., за что автор выражает им благодарность. Автором выполнены анализ и систематизация литературных данных, а также весь комплекс практических исследований, статистической обработки и интерпретации полученных результатов, написание и оформление рукописи.

Публикации по теме диссертации подготовлены автором совместно с научным руководителем. Результаты исследовательской работы представлялись в виде докладов на научных конференциях соискателем лично.

Автор выражает благодарность сотрудникам лаборатории иммунорегуляции, а также сотрудникам лаборатории экологической иммунологии «ИЭГМ УрО РАН», и лично к.м.н. Бахметьеву Б.А., д.м.н. Шмагелю К.В. за предоставление возможности выполнения исследований методом проточной цитофлюориметрии, а также доценту кафедры гистологии, эмбриологии, цитологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пермский государственный университет им. акад. Е.А. Вагнера» Министерства здравоохранения Российской Федерации, д.м.н. Логиновой Н.П. за помощь в организации исследования клеток тимуса.

Положения, выносимые на защиту

1. Грелин оказывает модулирующие эффекты на регуляторные подтипы Ти В-лимфоцитов периферической крови, контролируя экспрессию ими иммуносупрессорных мембранных молекул. Грелин не влияет на Treg/Th17-девиацию из СЭ4+-лимфоцитов при совместном культивировании с регуляторными В-клетками;

2. Грелин регулирует продукцию цитокинов дендритными клетками и модулирует их способность индуцировать формирование регуляторных В-лимфоцитов, а также продукцию цитокинов аллогенными лимфоцитами;

3. Грелин не влияет на количество миелоидных и плазмоцитоидных дендритных клеток тимуса, но разнонаправлено контролирует их способность индуцировать формирование инвариантных Т-лимфоцитов с функциями натуральных киллеров.

Научная новизна

В работе впервые определена роль грелина, в концентрациях соответствующих уровню гормона в периферической крови во время беременности, в модуляции свойств регуляторных Т- и В-лимфоцитов, ДК, генерируемых из моноцитов периферической крови, а также мДК и пДК тимуса.

Впервые установлены модулирующие, зависимые от концентрации, эффекты гормона в индукции толерогенного фенотипа регуляторных Т- и В-лимфоцитов периферической крови. Установлены иммунорегуляторные механизмы грелина в отношении функций ДК, а также способность прединкубированных с грелином ДК индуцировать формирование регуляторных В-лимфоцитов и Т-лимфоцитов, а также регулировать их свойства. Впервые продемонстрирован регуляторный эффект грелина на способность разных типов ДК тимуса влиять на формирование iNKT из интактных тимоцитов.

Таким образом, механизмы, принимающие участие в реализации эффектов грелина обеспечивают усиление толерогенной активности ДК и регуляторных

лимфоцитов. При участии грелина в исследуемых клетках наблюдается усиление синтеза толерогенных цитокинов и поверхностных иммуносупрессорных молекул и/или подавление продукции провоспалительных цитокинов, что способствует смещению баланса от ТЫ в сторону ТИ2/Тге§ и формированию иммунной толерантности, которая является необходимым условием для сохранения плода и успешного течения беременности.

Теоретическая и практическая значимость работы

Изучение молекулярных механизмов гормональной регуляции иммунных реакций в области общей теории иммунитета особенно важно для решения серьезных медицинских задач и имеет практические перспективы. Данное исследование углубляет представления о регуляции грелином активности клеток иммунной системы, позволяя расширить границы и сферу использования этого гормона в медицинской практике для лечения социально значимых заболеваний, а также обосновать возможность использования грелина в качестве лекарственного препарата для коррекции воспалительных и аутоиммунных процессов. Полученные в работе результаты дополняют современные представления о роли грелина в регуляции иммунных процессов.

Внедрение результатов исследования в практику

Данные, полученные в ходе настоящего исследования, внедрены в учебный процесс в программу курсов «Общая эндокринология» и «Иммунология репродукции» на кафедре микробиологии и иммунологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «ПГНИУ», а также в программу курсов и «Гистология» на кафедре гистологии, эмбриологии, цитологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пермского государственного медицинского университета» им. академика Е.А. Вагнера Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 132 листах машинописного текста, и включает разделы: «обзор литературы», «материалы и методы», «результаты собственных исследований», а также введение, обсуждение, выводы, практические рекомендации, список используемых сокращений и библиографический список, включающий 221 источник, в том числе 20 отечественных и 201 зарубежный. Диссертация содержит 29 рисунков.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

История изучения грелина началась сравнительно недавно - в конце ХХ века. Тогда ученые обратили внимание на то, что секреция гормона роста (ГР, англ. Growth hormone, GH) может регулироваться не только соматолиберином (англ. Growth hormone releasing hormone, GHRH) и соматостатином, но и синтетическим гексапептидом GHRP-6 (англ. Growth hormone releasing peptide-6), который усиливал секрецию ГР по пути, отличному от соматолиберина. GHRP-6 и GHRP-2 - «стимуляторы секреции ГР» (англ. Growth hormone secretagogues, GHSs), и, как выяснилось позже, пептидные миметики грелина. Активность GHRP-6 и GHRP-2 подтверждала факт того, что существует неизвестный естественный гормон, который имеет потенциальный клинический эффект у людей [39, 71, 89, 104, 153]. В результате поиска в 1996 году Howard A.D. с коллегами идентифицировали новый рецептор, принимающий участие в регуляции секреции ГР, который был назван «рецептор, усиливающий секрецию ГР» (англ. Growth hormone secretagogue receptor, GHS-R) [104], а три года спустя группой японских ученых был идентифицирован лиганд для этого рецептора -неизвестный ацилированный пептид, содержащийся в экстракте желудков крыс и человека, который после определения его структуры был назван «грелином» (ghrelin) от прото-индо-европейского «ghre», что означает - «расти», из-за его способности стимулировать секрецию ГР [120].

Исследования показали, что грелин вырабатывается у многих классов животных (млекопитающих, птиц, рыб) в различных органах и тканях. Биологическая активность грелина оказалась более разнообразна, чем предполагали изначально, и включает широкий спектр эндокринных и неэндокринных эффектов [64, 69]. Физиологические эффекты грелина представлены на рисунке 1.1.

Рисунок 1.1. - Физиологические эффекты грелина [52]

Основной эндокринный эффект грелина на уровне ЦНС - орексигенный, который приводит к усилению чувства голода и стимуляция аппетита. Среди всех желудочно-кишечных гормонов, регулирующих потребность в пище и энергетический гомеостаз, грелин играет уникальную роль, т.к. способен не только усиливать аппетит, но и стимулировать секрецию ГР [96]. Помимо ЦНС, грелин воздействует на органы и ткани ЖКТ, репродуктивной, дыхательной, сердечно-сосудистой, нервной и иммунной систем, в том числе за счет регуляции процессов клеточной пролиферации и апоптоза [24, 109, 160, 174, 202]. К неэндокринным эффектам относят установленную взаимосвязь между концентрацией грелина и циклами сон-бодрствование, а также некоторыми другими поведенческими реакциями, такими как концентрация внимания и память [202].

Спустя несколько лет после открытия грелина, была выделена еще одна его изоформа - неацилированный пептид, который был назван деацилгрелином (англ. Desacylghrelin, DAG) [29, 101]. Эффекты деацилгрелина активно исследуются. Уже установлено, что деацилгрелин вовлечен в регуляцию энергетического гомеостаза, он, как и ацилированная изоформа, способен пересекать гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) и индуцировать активность нейронов в аркуатных ядрах гипоталамуса, активируя, как предполагается, собственные специфические мишени, действуя GHSR-независимым образом [77]. С другой стороны, отмечается что, деацилгрелин может иметь противоположные ацилированному грелину эффекты. В частности, деацилгрелин оказывает анорексигенный эффект. Помимо этого, показано, что деацилгрелин обладает некоторой кардиопротективной и антипролиферативной активностью, предположительно, за счет связывания с особыми подтипами рецептора, которые на данный момент еще не обнаружены [77, 192].

1.1.Структурная и функциональная характеристика грелина

Приблизительно 60-70% циркулирующего грелина секретируется энтероэндокринными P/Огклетками слизистой оболочки дна желудка, а

наибольшая часть оставшегося производится клетками тощей, тонкой и двенадцатиперстной кишок: в общей сложности ЖКТ синтезирует около 75-80% циркулирующего грелина [60, 120, 181]. В небольших количествах грелин вырабатывается в других органах и тканях, таких как поджелудочная железа, печень, плацента, яички, головной мозг, гипофиз, гипоталамус, легкие, почки, щитовидная железа, лимфоидные органы и клетки иммунной системы [23, 93, 120, 140; 125, 200, 202]. Кроме этого, в аркуатных ядрах гипоталамуса, которые являются важнейшей структурой в реализации эффектов грелина, также обнаруживается небольшое число грелин-продуцирующих нейронов [54, 82, 174].

У всех позвоночных грелин закодирован в ghrl гене. У человека ген GHRL находится на правом плече третьей хромосомы в регионе 3p26-p25. GHRL имеет длину 511 пар оснований (п.о.), содержит 5 экзонов и 4 интрона [172-173]. Механизм образования молекулы грелина представлен на рисунке 1.2. GHRL несет 2 транскрипционных старт-сайта (зрелая молекула грелина кодируется экзонами 1 и 2), что приводит к экспрессии двух различных транскриптов: грелина и обестатина [114, 188]. Образование грелина происходит в несколько этапов: на первом транслируется последовательность для препро-гормона (препрогрелина), состоящего из 117 аминокислот (ак). Препрогрелин содержит сигнальный пептид (23 ак) и прогормон (прогрелин, 94 ак) [123, 126, 216]. На втором этапе прогрелин претерпевает ряд последовательных стадий, в ходе которых происходит его модификация - сначала в энтнроэндокринных клетках происходит процесс ограниченного протеолиза (протеазой PC1/3 в позиции Arg28/Ala29) с образованием N-концевой молекулы грелина [121, 220], а затем, при участии фермента грелин-О-ацилтрансферазы (ГОАТ; англ. Ghrelin O-acyltransferase, GOAT), катализируется связь одного n-октаноил радикала [94, 131, 216], что приводит образованию ацилированного грелина, состоящего из 28 ак (с Arg на С-конце) и содержащего n-октановый сложный эфир на 3 сериновом остатке (Ser3) [101] с молекулярной массой 3,314 кДа. Кроме того, из препрогрелина в результате альтернативного сплайсинга может образовываться деацилгрелин, состоящий из 27 ак (с Pro на С-конце) [60, 103] и обестатин (23 ак)

[220]. Механизм образования ацилированной и деацилированной изоформ грелина представлен на рисунке 1.3.

Обе существующие изоформы грелина имеют широкий спектр эффектов и играют фундаментальную роль при различных физиологических процессах в организме млекопитающих, хотя в некоторых случаях могут перекрывать или оказывать противоположные друг другу эффекты [180], а биологические свойства ацилгрелина, по всей видимости, определяются именно уникальной посттрансляционной модификацией [102], благодаря которой становится возможным его взаимодействие со своим основным рецептором (ОИБ-КЛа) [60, 79, 120, 121, 202]

Рисунок 1.2. - Механизм образования молекулы грелин [60]

Рисунок 1.3. - Механизм образования АГ и ДАГ [52]

Структура рецептора грелина

Первый сиротский (орфанный) рецептор для молекул, стимулирующих периодическую секрецию ГР (GHSs) в гипофизе и гипоталамусе, был открыт в 1996 году, и получил название - GHS-R [104]. Затем в 1999 году Kojima M. с коллегами обнаружил эндогенный лиганд для этого рецептора - пептидный гормон грелин [120].

Рецептор грелина относится к суперсемейству рецепторов, сопряженных с G-белком (англ. G-protein coupled receptors, GPCRs). GPCRs вовлечены в распознавание и трансдукцию разнообразных сигналов, таких как: свет, ионы Ca2+, ароматических веществ, и, небольших молекул, включая остатки аминокислот, нуклеотиды, пептиды, а также белки. Существует несколько механизмов, которые позволяют различным лигандам взаимодействующим с GPCRs активировать ядро домена, индуцируя изменение его конформации [104].

Рецепторы семейства GPCRs контролируют активность ферментов, ионных каналов и транспортных везикул посредством катализа ГДФ до ГТФ на гетеродимерных Gа-pт-белках [37, 209]. Существуют 5 семейств GPCRs, при этом некоторые семейства GPCRs содержат по несколько подтипов. Представители разных семейств GPCRs имеют общий план строения их центральной части -трансмембранных спиралей [37]. Рецепторы данного типа начинаются с внеклеточного ^концевого домена и заканчиваются внутриклеточным С-концевым доменом [25].

На сегодняшний день известны две изоформы рецептора грелина - ОИБ-Я типа 1а ^Ш-Юа) и GHS-R типа 1Ь которые экспрессируются в виде

сплайс-вариантов [104] и широко представлены в различных органах и тканях [218]. Строение GHS-R1a и GHS-R1b схематично представлено на рисунке 1.4. ОШ-^а состоит из 366 ак и имеет молекулярную массу 41 кДа. GHS-R1a содержит 7 трансмембранных а-спиральных гидрофобных домена, соединенных 3-мя внутриклеточными и 3-мя внеклеточными петлями [25]. ОИБ-^а связывает лиганд, в полости, формируемой III-VI трансмембранными доменами [37]. ОИБ-R1a имеет конститутивную активность [104], кроме того, большинство изученных эффектов грелина осуществляется при взаимодействии именно с этим рецептором [50].

Другой рецептор грелина - ОИБ-^Ь состоит из 289 ак, и активируется, преимущественно, короткими пептидами, которые взаимодействуют с внеклеточными петлями и ^концевым доменом [196] (рисунок 1.4.). В состав ОИБ-^Ь входит 5 трансмембранных доменов, его мРНК имеет широкое представление в различных тканях, но его физиологическая роль в организме изучена недостаточно [125, 202].

СРСЯ типа 1а

GPCR типа 1Ь

Рисунок 1.4. - Схематическое строение GPSR типа 1а и 1Ь [37].

GHS-R1a совместно с GHS-R1b могут образовывать гетеродимеры, что, предположительно, позволяет им действовать как доминантно-негативной мутаген полнометражного рецептора грелина [130].

В периферических тканях рецепторы грелина представлены в желудке, тонком кишечнике, поджелудочной железе, а также в легких, почках и сердце. В ЦНС рецепторы грелина представлены в гипоталамических структурах (аркуатных и вентромедиальных ядрах), в гиппокампе, передней доле гипофиза, черной субстанции, ядрах медиального шва. Самым важным, в контексте данного исследования, является присутствие рецепторов к грелину на клетках иммунной системы: моноцитах, макрофагах, дендритных клетках, Т-, В-, и МК- клетках [98, 125, 202, 208].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Логинова Ольга Александровна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Акинфиева, О.В. NKT-клетки: характерные свойства и значимость для

регуляции иммунного ответа / О.В. Акинфиева, Л.Н. Бубнова, С.С. Бессмельцев // Онкогематология. - 2010. - Т. 4. - С. 39-47.

2. Бутенко, Е.В. Динамика грелина, лептина и гормонов роста в эмбриогенезе

человека: дис. ... канд. биол. наук. Ставрополь, 2011. - 119 с.

3. Орлова, Е.Г. Регуляция грелином функциональной активности моноцитов

человека в модели in vitro / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Доклады академии наук. - 2010. - Т. 434(6). - С. 821-824.

4. Орлова, Е.Г. Регуляция лептином и грелином экспрессии мембранных

молекул и апоптоза лимфоцитов человека при беременности / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Проблемы эндокринологии. - 2010. - Т. 56 (3). -С. 26-30.

5. Орлова, Е.Г. Регуляция лептином и грелином апоптоза CD4+ лимфоцитов

in vitro / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Вестник Пермского университета.

- 2013. - Вып.3 - С. 100-104.

6. Орлова, Е.Г. Регуляция лептином и грелином индукции Т-

регуляторных лимфоцитов / Е.Г. Орлова // Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2011. - Т.35, № 2/1. - С. 55-56.

7. Орлова, Е.Г. Роль лептина и грелина в индукции дифференцировки ИЛ17-

продуцирующих и Т-регуляторных лимфоцитов / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 2013.

- Т.156, №12. - С. 786-791.

8. Орлова, Е.Г. Роль лептина и грелина в индукции дифференцировки Th17-

лимфицитов / Е.Г. Орлова // Вестник уральской медицинской академической науки. - 2012. - №4(41). - С. 56-57.

9. Орлова, Е.Г. Регуляция лептином и грелином продукции интерферона-

гамма и интерлейкина-4 в системе in vitro / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Вестник Пермского университета. - 2012. - Вып.3 - С. 81-83.

10. Орлова, Е.Г. Регуляция грелином функциональной активности

моноцитов. Роль блокады кальциевых каналов L-типа верапамилом / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Иммунология. - 2013. Т.34, № 1.. С. 19-24.

11. Орлова, Е.Г. Роль лептина и грелина в индукции дифференцировки

регуляторных Т-лимфоцитов / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Российский иммунологический журнал. - 2013. - Т.7(16), №2-3. - С. 132-133. [5]

12. Орловa, Е.Г. Основные аспекты регуляции лептином и грелином клеток

иммунной системы: дис. ... докт. биол. наук. Челябинск, 2015. - 261 с

13. Романцова, Т.И. Лептин и грелин: антагонизм и взаимодействие в

регуляции энергетического обмена / Т.И. Романцова, Г.Е. Волкова // Ожирение и метаболизм. - 2005. - №2. - С. 2-9.

14. Талаев, В.Ю. Действие клеток плацентарного барьера на созревание

дендритных клеток in vitro / В.Ю. Талаев, А.В. Матвеичев, М.А. Ломунова и др. // Иммунология. - 2010. - №3. - С.125-131.

15. Хайдуков, С.В. Малые субпопуляции Т-хелперов (Th наивные тимические,

Th наивные центральные, Th9, Th22 и CD4+CD8+ дважды положительные Т-клетки) / С.В. Хайдуков // Медицинская иммунология. - 2013. - Т. 15, №6. - C.503-512.

16. Шарова, Н.И. Линия дендритных клеток из тимуса человека. Особенности

экспрессии маркеров субпопуляций дендритных клеток и секреции

цитокинов / Н.И. Шарова, М.М. Литвина, А.Н. Митин и др. // Иммунология. - 2011. - Т. 32., № 6. - С. 296-300.

17. Шестопалов, А.В. Грелин и соматотропный гормон при физиологически

протекающей беременности / А.В. Шестопалов, Е.В. Бутенко, А.А. Александрова и др. / Журнал акушерства и женских болезней. - 2011. -№ 2. - С.68- 72.

18. Ширшев, С.В. Гормональная регуляция продукции IFN-g и IL-4

тимоцитами / С.В. Ширшев, Е.Г. Орлова, С.А. Заморина и др. // Вестник уральской медицинской академической науки. - 2012. №4(41). - С. 7677.

19. Ширшев, С.В. Роль гормонов, ассоциированных с гестацией, в регуляции

экспрессии молекул, отвечающих за функциональную активность NK-клеток / С.В. Ширшев, С.А. Заморина, О.Л. Горбунова и др. // Доклады академии наук. - 2014. - Т. 457, №5. - C. 618-621.

20. Ширшев, С.В. Иммунология материнско-фетальных взаимодействий / С.В.

Ширшев // УрО РАН. - Екатеринбург. - 2009. - 582 с.

21. Agnello, D. Cytokines and transcription factors that regulate T helper cell

differentiation: new players and new insights / D. Agnello, C.S. Lankford, J. Bream et al. // J. Clin. Immunol. - 2003. - Vol. 23(3). - P. 147-161.

22. Amu, S. Regulatory B cells prevent and reverse allergic airway inflammation

via FoxP3-positive T-regulatory cells in a murine model / S. Amu, S. P. Saunders, M. Kronenberg et al. // J. Allergy and Clin. Immunol. - 2010. -Vol. 125, №. 5. - P. 1114.e8-1124.e8.

23. Ariyasu, H. Stomach is a major source of circulating ghrelin, and feeding state

determines plasma ghrelin-like immunoreactivity levels in humans / H. Ariyasu, K. Takaya, T. Tagami et al. // J. Clinical Endocrinol. & Metab. -2001. - Vol. 86, Is.10. - P.4753-4758.

24. Baatar, D. The effects of ghrelin on inflammation and the immune system /

D. Baatar, K. Patel, D.D. Taub // Mol. Cell. Endocrinol. - 2011. - Vol. 340. - P. 44-58.

25. Baldwin, J.M. The probable arrangement of the helices in G protein-coupled

receptors / J.M. Baldwin // EMBO J. - 1993 - Vol.12. - P. 1693-1703.

26. Banchereau, J. Dendritic cells and the control of immunity / J. Banchereau, R.M.

Steinman // Nature. - 1998. - Vol. 392. - P. 245-252.

27. Barreiro, M.L. Cellular location and hormonal regulation of ghrelin expression

in rat testis / M.L. Barreiro, F. Gaytan, J.E. Caminos et al. // Biol. Reprod. -2002. - Vol.67, №6. - P. 1768-1776.

28. Barreiro, M.L. Ghrelin inhibits the proliferative activity of immature Leydig

cells in vivo and regulates stem cell factor messenger ribonucleic acid expression in rat testis / M.L. Barreiro, F. Gaytan, J.M. Castellano et al. // J. Endocrinology. - 2004. - Vol.145. - P.4825-4834.

29. Beaumont, N.J. Ghrelin can bind to a species of high density lipoprotein

associated with paraoxonase / N.J. Beaumont, V.O. Skinner, T.M. Tan et al. // J.Biol Chem. - 2003. - Vol.278. - P.8877-8880.

30. Behar, S.M. CD1d restricted T cells: diverse phenotypes and diverse functions /

S.M. Behar, S. Cardell // Semin. Immunol. - 2000. - Vol. 12. - P. 551-560.

31. Bendelac, A. The biology of NKT cells / A. Bendelac, P.B. Savage, L. Teyton //

Annu. Rev. Immunol. - 2007. - Vol.25. - P. 297-336.

32. Benlagha, K. A thymic precursor to the NK T cell lineage / K.Benlagha, T. Kyin,

A. Beavis et al. // Science. - 2002. - Vol. 296. - P. 553-555.

33. Berthelot, J. Regulatory B cells play a key role in immune system balance / J.

Berthelot, C. Jamin, K. Amrouche et al. // Joint Bone Spine - 2013. - Vol. 80, №9. - P. 18-22.

34. Bhardwaj, N. Dendritic cells are potent antigen-presenting cells for microbial

superantigens / N. Bhardwaj, S.M. Friedman, B.C. Cole et al. // J. Exp. Med. - 1992. - Vol.175(1). - P. 267-273.

35. Bhatia, S. B7-1 and B7-2: similar costimulatory ligands with different

biochemical, oligomeric and signaling properties / S. Bhatia, M. Edidin, S.C. Almo et al. // Immunol. Lett. - 2006. - Vol. 104(1-2). - P. 70-75.

36. Blois, S.M. Dendritic cells: key to fetal tolerance / S.M. Blois, U. Kämmerer, C.

Alba Soto // J.Biol. Reprod. - 2007. - Vol.77. - P.590-598.

37. Bockaert, J. Molecular tinkering of G protein-coupled receptors: An

evolutionary success / J. Bockaert, J.P. Pin // EMBO J. - 1999. - Vol.18. -P.1723-1729.

38. Borowski, C. Signaling for NKT cell development: the SAP-FynT connection /

C. Borowski, A. Bendelac // JEM. - 2005. - Vol.201, №6. - P.833-836.

39. Bowers, C. Y. On a peptidomimetic growth hormone-releasing peptide / C.Y.

Bowers // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1994. - Vol .79. - P. 940-942.

40. Boyson, J.E. CD1d and invariant NKT cells at the human maternal-fetal

interface / J.E. Boyson, B. Rybalov, L.A. Koopman et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. - 2002. - Vol.99. - P. 13741-13746.

41. Boyum, A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood.

Isolation of monuclear cells by one centrifugation, and of granulocytes by combining centrifugation and sedimentation at 1 g. // A. Boyum // Scand J. Clin. Lab. Invest. - 1968. - Vol.21, Suppl. 97, - P. 77-89.

42. Brisslert, M. Phenotypic and functional characterization of human CD25+ B

cells / M. Brisslert, M. Bokarewa, P. Larsson et al. // J. Immunology. - 2006. - Vol.117. - P.548-557.

43. Brown, K.L. Raman spectroscopic modeling of early versus late T-lymphocyte

activation via differential spectral detection of receptor expression / K.L.

Brown, O.Y. Palyvoda, G.W. Auner et al. // J.Immunol. Methods. - 2014. -Vol.415. - P.31-35.

44. Cao, C. Ghrelin inhibits insulin resistance induced by glucotoxicity and

lipotoxicity in cardiomyocyte / C. Cao, Y. Chen, W. Wang et al. // J.Peptides. - 2011. - Vol.32. - P.209-215.

45. Carter, C.R. Do defective B cells contribute to reduced Treg cells and

autoimmunity in patients with Common Variable Immunodeficiency? / C.R. Carter, G. Aravind , N.L. Smalle et al. // Immunol. Lett. - 2012. - Vol.148, №1. - P.39-40.

46. Casanueva, F.F. Neuroendocrine regulation and actions of leptin / F.F.

Casanueva, C. Dieguez // J.Neuroendocrinol. - 1999. - Vol.20. - P.317-363.

47. Caux, C. CD34+ hematopoietic progenitors from human cord blood differentiate

along two independent dendritic cell pathways in response to GM-CSF+TNF alpha / C. Caux, B. Vanbervliet, C. Massacrier et al. // J. Exp. Med. - 1996. -Vol.184. - P.695-706.

48. Cekic, C. Evaluation of the relationship between serum ghrelin, C-reactive

protein and interleukin-6 levels, and disease activity in inflammatory bowel diseases / C. Cekic, M. Arabul, E. Alper et al. // Hepatogastroenterology. -Vol.61, №133. - P. 1196-1200.

49. Chang, H.C. The transcription factor PU.1 isrequired for the development of IL-

9-producing T cells and allergic inflammation / H.C. Chang, S. Sehra, R.Goswami, W.Yao et al. // Nat. Immunol. - 2010. - Vol. 11. - P. 527-534.

50. Chanoine, J.P. Ghrelin gene expression is markedly higher in fetal pancreas

compared with fetal stomach: effect of maternal fasting / J.P. Chanoine, A.C. Wong // J.Endocrinology. - 2004. - Vol.145. - P.3813-3820.

51. Coffman, R.L. Origins of the T(H)1-T(H)2 model: a personal perspective / R.L.

Coffman // Nat. Immunol. - 2006. - Vol. 7(6). - P. 539-541.

52. Collden, G. Therapeutic Potential of Targeting the Ghrelin Pathway / G.

Collden, M.H. Tschöp, T.D. Müller // Int J Mol Sci. - 2017. - Vol.18(4). pii: E798. doi: 10.3390/ijms18040798.

53. Collin, M. Human dendritic cell subset / M. Collin, N. McGovern, M. Haniffa //

Immunology. - 2014. - Vol.140. - P.22-30.

54. Cowley, M.A. The distribution and mechanism of action of ghrelin in the CNS

demonstrates a novel hypothalamic circuit regulating energy homeostasis / M.A. Cowley, R.G. Smith, S. Diano et al. // J.Neuron. - 2003. - Vol.37. -P.649-661.

55. Cummings, D.E. A preprandial rise in plasma ghrelin levels suggests a role in

meal initiation in humans / D.E. Cummings, J.Q. Purnell, R.S. Frayo et al. // J.Diabetes. - 2001. - Vol.50. - P.1714-1719.

56. Curotto de Lafaille, M.A. Natural and adaptive FOXP3+ regulatory T cells: more

of the same or a division of labor? / M.A Curotto de Lafaille, J.J. Lafaille // Immunity. - 2009. - Vol.30 (5). - P. 626-635.

57. Dafopoulos, K. Blood ghrelin, resistin, and adiponectin concentrations during the

normal menstrual cycle / K. Dafopoulos, D. Sourlas, A. Kallitsaris et al. //Fertil. Steril. -2009. - Vol. 92. - P.1389-1394.

58. Dai, H. Syndecan-1 identifies and controls the frequency of IL-17-producing

naive natural killer T (NKT17) cells in mice / H. Dai, A. Rahman, A. Saxena et al. // Eur. J. Immunol. - 2015. - Vol. 45. - P. 3045-3051.

59. Das, R. Transcriptional control of invariant NKT cell development / R. Das, D. B.

Sant'Angelo, K. E. Nichols // Immunol. Rev. - 2010. - Vol. 238, №1. - P. 195-215.

60. Date, Y. Ghrelin, a novel growth hormone-releasing acylated peptide, is

synthesized in a distinct endocrine cell type in the gastrointestinal tracts of rats and humans / Y. Date, M. Kojima, H. Hosoda et al. // Endocrinology. -2000. Vol.141. - P.4255- 4261.

61. De Smet, B. Effect of peripheral obestatin on gastric emptying and intestinal

contractility in rodents / B. De Smet, T. Thijs, T.L. Peeters et al. // J.Neurogastroenterol Motil. - 2007. - Vol.19. - P.211-217.

62. Della Bella, S. Incomplete activation of peripheral blood dendritic cells during

healthy human pregnancy / S. Della Bella, S. Giannelli, V. Cozzi et al. // Clin. Exp. Immunol. - 2011. - Vol. 164. - P. 180-192.

63. Dellabona, P. An invariant V alpha 24-J alpha Q/V beta 11 T cell receptor is

expressed in all individuals by clonally expanded CD4-8- T cells / P. Dellabona, E. Padovan, G. Casorati et al. // J. Exp. Med. - 1994. - Vol.180, №3. - P.1171-1176.

64. Delporte, C. Structure and Physiological Actions of Ghrelin / C. Delporte //

Scientifica. - 2013. - 25p.

65. Dhillo, W.S. The neuroendocrine physiology of kisspeptin in the human /

W.S.Dhillo, K.G.Murphy, S.R. Bloom // Rev. Endocrinol. Metab. Disord. -2007. -Vol. 8. - P. 41-46.

66. Diano, S. Ghrelin controls hippocampal spine synapse density and memory

performance / S. Diano, S.A. Farr, S.C. Benoit et al. // J.Nat Neurosci. -2006. - Vol.9. - P.381-388.

67. Diveu, C. Cytokines that regulate autoimmunity / C. Diveu, M.J. McGeachy,

D.J. Cua // Curr. Opin. Immunol. - 2008. - Vol.20. - P. 663-668.

68. Dixit, V.D. Ghrelin inhibits leptin- and activation-induced proinflammatory

cytokine expression by human monocytes and T cells / V.D.Dixit, E.M. Schaffer, R.S. Pyle et al. // J. Clin. Invest. - 2004. - Vol.1. - P. 57-66.

69. Dixit, V.D. Ghrelin and immunity: a young player in an old field / V.D. Dixit,

D.D. Taub // Exp. Gerontol. - 2005. - Vol. 40. - P. 900-910.

70. Dixit, V.D. Ghrelin promotes thymopoiesis during aging / V.D. Dixit, H.

Yang, Y. Sun et al. // J.Clin. Invest. - 2007. - Vol. 117, №10. - P.2778-2790.

71. Diz Chaves, Y. GH responses to GHRH and GHRP-6 in Streptozotocin (STZ)-

diabetic rats / Y. Diz Chaves, C. Spuch Calvar, D. Pérez Tilve et al. // Life Sci. - 2003. - Vol. 14, №73(26). - P.3375-3385.

72. El-Eter, E. In vivo and in vitro antioxidant activity of ghrelin: Attenuation of

gastric ischemic injury in the rat / E. El-Eter, A. Al Tuwaijiri, H. Hagar et al. // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2007. - Vol.22, №11. - P. 1791-1799.

73. Evans, V.A. Thymic plasmacytoid dendritic cells are susceptible to productive

HIV-1 infection and efficiently transfer R5 HIV-1 to thymocytes in vitro / V.A. Evans, L. Lal, R. Akkina et al. // Retrovirology. - 2011. - Vol. 43. - P. 1-12.

74. Fainboim, L. Mechanisms involved in the expansion of Tregs during pregnancy:

role of IL-2/STAT5 signalling / L. Fainboim, L.Arruvito // J.Reprod. Immunol. -2011. - Vol.88, №2. - P.88-93.

75. Fassbender, M. Cyclic adenosine monophosphate and IL-10 coordinately

contribute to nTreg cell-mediated suppression of dendritic cell activation // M. Fassbender, B. Gerlitzki, N. Ullrich et al. // Cell Immunol. - 2010. - Vol. 265. - P. 91-96.

76. Feng, Y. Control of the Inheritance of Regulatory T Cell Identity by

a cis Element in the Foxp3 Locus / Y. Feng, A. Arvey, T. Chinen et al. // J. Cell. - 2014. - Vol.158 (4). - P. 749-763.

77. Fernandez, G. Des-Acyl Ghrelin Directly Targets the Arcuate Nucleus in a

Ghrelin-Receptor Independent Manner and Impairs the Orexigenic Effect of Ghrelin / G. Fernandez, A. Cabral, M.P. Cornejo et al. // J. Neuroendocrinol. - 2016. - Vol.28, №2. - P.12349-_.

78. Fernández-Fernández, R. Ghrelin effects on gonadotropin secretion in male and

female rats / R. Fernández-Fernández, M. Tena-Sempere, E. Aguilar et al. // Neurosci Lett. - 2004. - Vol.362, №2. - P.103-107.

79. Fernández-Fernández, R. Novel signals for the integration of energy balance and

reproduction / R. Fernandez-Fernandez, A.C. Martini, V.M. Navarro et al. // Mol. Cell Endocrinol. - 2006. - Vol. 25, № 254-255. - P. 127-132.

80. Fontenot, J.D. Foxp3 programs the development and function of CD4+CD25+

regulatory T cells / J.D. Fontenot, M.A. Gavin, A.Y. Rudensky // Nat. Immunol. -2003. - Vol.4. - P.330-336.

81. Fuglsang, J. Ghrelin and its relationship to growth hormones during normal

pregnancy / J. Fuglsang , C. Skjaerbaek , U. Espelund et al. // Clin. Endocrinol. - 2005. - Vol. 62. - P. 554-559.

82. Cabral, A. Is ghrelin synthesized in the central nervous system? / A. Cabral, E.J.

López Soto, J. Epelbaum et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2017. - Vol. 15, №18 (3).

- ppi. E638.

83. Geginat, J. Plasticity of human CD4 T cell subsets /J. Geginat, M. Paroni, S.

Maglie et al.// Front. Immunol. -2014. Vol.5, №630. doi: 10.3389/fimmu.2014.00630.

84. Gnanapavan, S. The tissue distribution of the mRNA of ghrelin and subtypes of

its receptor, GHS-R, in humans / S. Gnanapavan, B. Kola, S.A. Bustin et al. // J.Clin. Endocrinol. Metab. - 2002. - Vol.87. - P.2988.

85. Godfrey, D. I Going both ways: immune regulation via CD1d-dependent NKT

cells / D.I.Godfrey, M. Kronenberg // J. Clin. Invest. - 2004. - Vol. 114. - P. 379-1388.

86. Gonzalez-Rey, E. Therapeutic action of ghrelin in a mouse model of colitis / E.

Gonzalez-Rey, A. Chorny, M. Delgado // Gastroenterology. - 2006. - Vol. 30. - P. 1707-1720.

87. Gordon, J.R. Regulatory dendritic cells for immunotherapy in immunologic

diseases / J.R. Gordon, Y. Ma, L. Churchman et al. // Front Immunol. - 2014.

- Vol. 5. - P.7.

88. Gray, P.C. Regulation of ion channels by cAMP-dependent protein kinase and A-

kinase anchoring proteins / P.C.Gray, J.D. Scott. W.A. Catterall // Curr. Opin. Neurobiol. - 1998. - Vol. 8, №4. - P. 330-334.

89. Granado, M. Anti-inflammatory effect of the ghrelin agonist growth hormone-

releasing peptide-2 (GHRP-2) in arthritic rats / M. Granado, T. Priego, A.I. Martin et al. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. - 2005. - Vol. 288. -P.486-492.

90. Gregori, S. Isolation, expansion, and characterization of human natural and

adaptive regulatory T cells / S. Gregori, R. Bacchetta, L. Passerini et al. // Methods. Mol. Biol. - 2007. - Vol. 380. - P.83-105.

91. Gregori, S. Dendritic cells in networks of immunological tolerance / S. Gregori //

Tissue Antigens. - 2011. - Vol.77. - P.89-99.

92. Grouard, G. The enigmatic plasmacytoid T cells develop into dendritic cells with

interleukin (IL)-3 and CD40-ligand / G. Grouard, M.C. Rissoan, L. Filgueira et al. // J Exp Med. - 1997. - Vol. 185(6). - P.1101-1111.

93. Gualillo, O. Ghrelin, a novel placental-derived hormone / O. Gualillo, J.

Caminos, M. Blanco et al. // Endocrinology. - 2001. - Vol. 142. - P.788-794.

94. Gutierrez, J.A. Ghrelin octanoylation mediated by an orphan lipid transferase /

J.A. Gutierrez, P.J. Solenberg, D.R. Perkins et al. // J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2008. - V.105. - P.6320-6325.

95. Hahn, S.A. Soluble GARP has potent antiinflammatory and immunomodulatory

impact on human CD4+ T cells / S.A. Hahn, H.F. Stahl, C. Becker et al. // Blood. - 2013. - Vol.122. - P.1182-1191.

96. Hassouna, R. Hypothalamic regulation of body growth and appetite by ghrelin-

derived peptides during balanced nutrition or undernutrition / R. Hassouna, A. Labarthe, V. Tolle // Mol. Cell. Endocrinol. - 2016. - Vol.438. - P.42-51.

97. Hattori, N. Expression, regulation and biological actions of growth hormone

(GH) and ghrelin in the immune system / N. Hattori // Growth Hormone. IGF. Res. - 2009. - Vol.19. - P.187-197.

98. Hattori, N. GH, GH Receptor, GH Secretagogue Receptor, and Ghrelin

Expression in Human T Cells, B Cells, and Neutrophils / N. Hattori, T.Saito, T. Yagyu et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2001. - Vol.86. - P. 42844291.

99. Heikkinen, J. Phenotypic characterization of regulatory T cells in the human

deciduas / J. Heikkinen, M. Mottonen, A. Alanen et al. // Clin. Exp. Immunol.

- 2004. - Vol. 136. - P. 373-378.

100. Hori, S. Control of regulatory T cell development by the transcription factor

Foxp3 / S. Hori, T. Nomura, S. Sakaguchi // Science. - 2004. - Vol. 299. - P. 1057-1061.

101. Hosoda, H. Ghrelin and des-acyl ghrelin: two major forms of rat ghrelin peptide

in gastrointestinal tissue / H. Hosoda, M. Kojima, H.Matsuo et al. // J.Biochem Biophys. Res. Commun. - 2000. - Vol.279, I.3. - P.909-913.

102. Hosoda, H. Ghrelin and the regulation of food intake and energy balance / H.

Hosoda, M. Kojima, K. Kangawa // Mol. Interventions. - 2002. - Vol.2. - P. 494-503.

103. Hosoda, H. Structural divergence of human ghrelin. Identification of multiple

ghrelin-derived molecules produced by post-translational processing / H. Hosoda, M. Kojima, T. Mizushima et al. // J. Biol. Chem. - 2003. - Vol.278.

- P.64-70.

104. Howard, A.D. A receptor in pituitary and hypothalamus that functions in growth

hormone release / A.D. Howard, S.D. Feighner, D.F. Cully et al. // J. Science. - 1996. - Vol.16, I.8. - P. 974-977.

105. Huang, H. Characteristics of distribution and quantity of dendritic cells subtypes

in hyperplastic thymus in patients with myasthenia gravis / H. Huang, P.

Chen, C.Y. Ou et al. // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. - 2017. - Vol. 97(19). - P. 1463-1468.

106. Hubert, P. The cross-talk between dendritic and regulatory Tcells: good or evil? /

P. Hubert, N. Jacobs, J.-H. Caberg et al. // J. of Leukocyte Biol. - 2007. -Vol. 82. - P. 787-794.

107. Iglesias, M.J. Growth hormone releasing peptide (ghrelin) is synthesized and

secreted by cardiomyocytes / M.J. Iglesias, R. Pineiro, M. Blanco et al. // Cardiovasc Res. - 2004. - Vol.62. - P.481-488.

108. Ito, T. Specialization, kinetics, and repertoire of type 1 interferon responses by

human plasmacytoid predendritic cells / T. Ito, H. Kanzler, O. Duramad et al. // Blood. - 2006. - Vol. 107(6). - P. 2423-2431.

109. Isgaard, J. Ghrelin and the cardiovascular system / J. Isgaard // Endocr Dev. -

2013. - Vol. 25. - P.83-90.

110. Jaiswal, A.K. Syndecan-1-coating of interleukin-17-producing natural killer T

cells provides a specific method for their visualization and analysis // A.K. Jaiswal, M. Sadasivam, A.R.A. Hamad // World. J. Diabetes. - 2017. - Vol. 8, №4. - P. 130-134.

111. Jaremka, L.M. Interpersonal stressors predict ghrelin and leptin levels in women /

L.M. Jaremka, M.A. Belury, R.R. Andridge et al. // Psychoneuroendocrinology. - 2014. - Vol. 48. - P.178-188.

112. Kamegai, J. Central effect of ghrelin, an endogenous growth hormone

secretagogue, on hypothalamic peptide gene expression / J. Kamegai, H. Tamura, T. Shimizu et al. // J.Endocrinology. - 2000. - Vol.141. - P.4797-4800.

113. Kammerer, U. Role of dendritic cells in the regulation of maternal immune

responses to the fetus during mammalian gestation / U. Kammerer, A. Kruse, G. Barrientos et al. // J.Immunol. Invest. - 2008. - Vol. 37, I.5. - P.499-533.

114. Kanamoto, N. Genomic structure and characterization of the 5'-flanking region of

the human ghrelin gene // N. Kanamoto, T. Akamizu, T.Tagami et al. // Endocrinology. - 2004. - Vol.145, №9. - P. 4144-4453.

115. Kessel, A Human CD19(+)CD25(high) B regulatory cells suppress proliferation

of CD4(+) T cells and enhance Foxp3 and CTLA-4 expression in T-regulatory cells / A. Kessel, T. Haj, R. Peri et al. // J. Autoimmun. Rev. -2012. - Vol. 11. - P. 670-677.

116. Klechevsky, E. Functional specializations of human epidermal Langerhans cells

and CD14+ dermal dendritic cells / E. Klechevsky, R. Morita, M. Liu et al. // Immunity. - 2008. - Vol. 29. - P. 497-510.

117. Klinker, M.W. Multiple mechanisms of immune suppression by B lymphocytes /

M.W. Klinker, S.K. Lundy // Mol. Med. - 2012. - Vol. 18. - P. 123-137.

118. Koch, A. Regulation and prognostic relevance of serum ghrelin concentrations in

critical illness and sepsis / A. Koch., E. Sanson., A. Helm et al. // Critical Care. - 2010. - Vol.14 - P.94-98.

119. Kohrgruber, N. Survival, maturation, and function of CD11c- and CD11c+

peripheral blood dendritic cells are differentially regulated by cytokines / N. Kohrgruber, N. Halanek, M. G^ger et al. // The Journal of Immunology. -1999. - Vol. 163 (6). - P. 3250-3259.

120. Kojima, M. Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from

stomach / M. Kojima, H. Hosoda, Y. Date et al. // Nature. - 1999. - Vol. 402. - P. 656-660.

121. Kojima, M. Ghrelin: structure and function / M. Kojima, K. Kangawa // Physiol

Rev. - 2005. - Vol.85, №2 - P. 495-522.

122. Kojima, M. Drug insight the function of ghrelin and its potential as a

multitherapeutic hormone / M. Kojima, K. Kangawa // J.Nature clinical practice Endocrinology and Metabolis. - 2006. - Vol.2., I.2. - P.234-237.

123. Kojima, M. Ghrelin: more than endogenous growth hormone secretagogue / M.

Kojima, K.Kangawa //Ann N Y Acad Sci. - 2010. - Vol.1200. - P.140-148.

124. Komai, T. The effects of TGF-ßs on immune responses / T. Komai, T. Okamura,

K. Yamamoto et al. // Nihon Rinsho Meneki Gakkai Kaishi - 2016. - Vol.39, №1. - P.51-58.

125. Korbonits, M. Presence of ghrelin in normal and adenomatous human pituitary /

M. Korbonits, M. Kojima, K. Kangawa, A.B. Grossman // Endocrine. - 2001.

- Vol. 14. - P. 101-104.

126. Korbonits, M. Ghrelin - a hormone with multiple functions / M. Korbonits, A.P.

Goldstone, M. Gueorguiev et al. // Front. Neuroendocrinol. - 2004. - Vol. 25.

- P. 27-68.

127. Krijgsman, D. The role of natural killer T cells in cancer—a phenotypical and

functional approach // D. Krijgsman, M. Hokland, P.J.K. Kuppen1 // Front .Immunol. - 2018. - Vol. 9, №367. - 21p.

128. Kronenberg, M. Toward an understanding of NKT cell biology: progress and

paradoxes / M. Kronenberg // Annu. Rev. Immunol. - 2005. - Vol. 23). - P. 877-900.

129. Lagana, A. S. Natural Killer T cell subsets in eutopic and ectopic endometrium:

a fresh look to a busy corner / A.S. Lagana, O. Triolo, F.M. Salmeri et al. // Arch. Gynecol. - 2016. - Vol. 293, № 5. - P. 941-949.

130. Leung, P.K. The truncated ghrelin receptor polypeptide (GHS-R1b) acts as a

dominant-negative mutant of the ghrelin receptor / P.K. Leung, K.B. Chow, P.N. Lau et al. // Cell Signal. - 2007. - Vol. 19. - P. 1011-1022.

131. Liu, J. Novel ghrelin assays provide evidence for independent regulation of

ghrelin acylation and secretion in healthy young men / J. Liu, C.E. Prudom, R. Nass et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2008. - Vol.93. - P.1980-1987.

132. Liu, Y. Role of IL-10-producing regulatory B cells in control of cerebral malaria

in Plasmodium berghei infected mice / Y. Liu, Y. Chen, Z. Li e et al. // Eur. J. of Immunology. - 2013. - Vol. 43, № 11. - P. 2907-2918.

133. Lutz, M.B. Immature, semi-mature and fully mature dendritic cells: witch signals

induce tolerance or immunity? / M.B. Lutz, G. Schuler // Trends Immunol. -2002. - Vol.23. - P.235-244.

134. Mahnke, K. Induction of immunosuppressive functions of dendritic cells in vivo

by CD4 + CD25 + regulatory T cells: role of B7-H3 expression and antigen presentation / K. Mahnke, S. Ring, T.S. Johnson et al. // Eur. J. Immunol. -2007. - Vol. 37. - P. 2117-2126.

135. Manni, M.L. A tale of two cytokines: IL-17 and IL-22 in asthma and infection /

M.L. Manni, K.M. Robinson, J.F. Alcorn // Expert Rev Respir Med. - 2014. -Vol. 8(1). - P.25-42.

136. Martín-Gayo, E. Plasmacytoid dendritic cells resident in human thymus drive

natural Treg cell development / E. Martín-Gayo, E. Sierra-Filardi, A.L. Corbí et al. // Blood. - 2010. - Vol. 115(26). - P. 5366-5375.

137. Mauri, C. The 'short' history of regulatory B cells Claudia / M. Mauri R.M.

Ehrenstein // Trends Immunol. - 2008. - Vol. 29, Is.1. - P.34-40.

138. McNab, F.W. The influence of CD1d in postselection NKT cell maturation and

homeostasis / F.W. McNab, S.P. Berzins, D.G. Pellicci et al. // J. Immunol. -2005. - Vol. 175. - P. 3762-3378.

139. Miyao, T. Plasticity of Foxp3 + T Cells Reflects Promiscuous Foxp3 Expression

in Conventional T Cells but Not Reprogramming of Regulatory T Cells / T. Miyao, S.Floess, R. Setoguchi et al. // Immunity. - 2012. - Vol. 36, № 2. -P.262-275.

140. Mori, K. Kidney produces a novel acylated peptide, ghrelin / K. Mori, A.

Yoshimoto, K. Takaya et al. // FEBS Lett. - 2000. - Vol. 486. - P. 213-216.

141. Mosmann, T.R. TH1 and TH2 cells: different patterns of lymphokine secretion

lead to different functional properties / T.R. Mosmann, R.L. Coffman // Annu. Rev. Immunol. - 1989. - Vol. 7. - P. 145-173.

142. Mowen, K.A. Signaling pathways in Th2 development / K.A. Mowen, L.H.

Glimcher // Immunol. Rev. - 2004. - Vol. 202. - P. 203-222.

143. Muccioli, G. Neuroendocrine and peripheral activities of ghrelin: implications in

metabolism and obesity / G. Muccioli, M. Tschop, M. Papotti et al. // Eur J Pharmacol. - 2002. - Vol. 440. - P. 235-254.

144. Muccioli, G. Ghrelin and des-acyl ghrelin both inhibit isoproterenol-induced

lipolysis in rat adipocytes via a non-type 1a growth hormone secretagogue receptor / G. Muccioli, N. Pons, C. Ghe et al. // Eur. J. Pharmacol. - 2004. -Vol. 13, №498 (1-3). - P. 2735.

145. Muccioli, G. Beyond the metabolic role of ghrelin: a new player in the regulation

of reproductive function / G. Muccioli, T. Lorenzi, M. Lorenzi et al. // Peptides. - 2011. - Vol. 32. - P. 2514-2521.

146. Nagaya, N. Hemodynamic and hormonal effects of human ghrelin in healthy

volunteers / N. Nagaya, M. Kojima, M. Uematsu et al. // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. - 2001. - Vol. 280. - P. 1483-1487.

147. Nakahara, K. Maternal ghrelin plays an important role in rat fetal development

during pregnancy / K. Nakahara, M. Nakagawa, Y. Baba et al. // Endocrinology. - 2006. - Vol. 147. - P. 1333-1342.

148. Noh, G. Regulatory B cells and allergic diseases / G. Noh, J.H. Lee // Allergy

Asthma Immunol. Res. - 2011. - Vol. 3. - P. 168-177.

149. Nowak, E.C. IL-9 as a mediator of Th17-driven inflammatory disease / E.C.

Nowak, C.T. Weaver, H. Turner et al. // J. Exp. Med. - 2009. - Vol. 206. -P.1653-1660.

150. O'Doherty, U. Human blood contains two subsets of dendritic cells, one

immunologically mature and the other immature / U.O'Doherty, M.Peng, S. Gezelter et al. // Immunology. - 1994. - Vol. 82(3). - P. 487-493.

151. O'Brien, M. Ghrelin in the human myometrium / M. O'Brien, E. Padraig, J.

J. Morrison et al. // Reproductive Biology and Endocrinology. - 2010. - Vol. 8. - P. 55-66.

152. Pellicci, D.G. A natural killer T (NKT) cell developmental pathway involving a

thymus-dependent NK1.1-CD4+ CD1d-dependent precursor / D.G. Pellicci, K.J. Hammond, A.P. Uldrich et al. // J. Exp. Med. - 2002. - Vol. 195. -P. 835-844.

153. Petersenn, S. Structure and regulation of the growth hormone secretagogue

receptor / S. Petersenn // Minerva Endocrinol. - 2002. - Vol. 27. - P. 243256.

154. Pinto, S. Rapid rewiring of arcuate nucleus feeding circuits by leptin / S. Pinto,

A.G. Roseberry, H. Liu et al. // J. Science. - 2004. - Vol.304. - P.110-115.

155. Pletinckx, K. Role of dendritic cell maturity/costimulation for generation,

homeostasis, and suppressive activity of regulatory T cells / K. Pletinckx, A. Dohler, V. Pavlovic et al. // Front Immunol. - 2011. - Vol. 2. - P .39.

156. Poliani, P.L. Human peripheral lymphoid tissues contain autoimmune regulator-

expressing dendritic cells / P.L. Poliani, K. Kisand, V. Marrella et al. // Am J Pathol. - 2010. - Vol.176(3). - P.1104-1112.

157. Qian, J. Distinct pattern of Th17/Treg cells in pregnant women with a history of

unexplained recurrent spontaneous abortion / J. Qian, N. Zhang, J. Lin et al. // Biosci Trends. - 2018. - Vol.12, №2. - P157-167.

158. Quah, B.J. Maturation of function in dendritic cells for tolerance and immunity /

B.J. Quah, H.C. O'Neill // J. Cell Mol. Med. - 2005. - Vol. 9, №3. - P.643-654.

159. Reizis, B. Plasmacytoid dendritic cells: recent progress and open questions / B.

Reizis, A. Bunin, H.S. Ghosh et al. // Annu Rev Immunol. - 2011. - Vol.29. -P. 163-183.

160. Repasi, A. Ghrelin and reproductive disorders / A. Repaci, A. Gambineri, U.

Pagotto, R. Pasquali // Mol. Cell Endocrinol. - 2011. - Vol. 340. - P. 70-79.

161. Rezzani, R. Thymus and aging: morphological, radiological, and functional

overview / R.Rezzani, L.Nardo, G.Favero et al. // Age. - 2014. - Vol. 36(1). -P. 313-351.

162. Robbins, S.H. Novel insights into the relationships between dendritic cell subsets

in human and mouse revealed by genome-wide expression profiling / S.H. Robbins, T. Walzer, D. Dembele et al. // Genome Biol. - 2008. - Vol. 9(1): -R17.

163. Rolle, L Cutting edge: IL-10producing regulatory B cells in early human

pregnancy / L. Rolle, M. Memarzadeh Tehran, A. Morell-Garcia et al. // Am. J. Reprod. Immunol. - 2013. - Vol. 70. - P. 448-453.

164. Ronnblom, L. Properties of human natural interferon-producing cells stimulated

by tumor cell lines / L. Ronnblom, U. Ramstedt, G.V. Alm // Eur J Immunol. - 1983. - Vol. 13(6). - P. 471-476.

165. Rueda, C.M. Neonatal regulatory T cells have reduced capacity to suppress

dendritic cell function // C.M. Rueda, M.E. Moreno-Fernandez, C.M. Jackson et al. // Eur. J. Immunol. - 2015. - Vol. 45. - P. 2582-2592.

166. Saito, S. CD4(+)CD25(high) regulartory T cell in human pregnancy / S. Saito, Y.

Sasaki, M. Sakai // J. Reprod. Immunol. - 2005. - Vol. 65, № 2. - P.111-120.

167. Saito, S. Th1/Th2/Th17 and regulatory T-cell paradigm in pregnancy/ S. Saito,

A. Nakashima, T. Shima et al. // Am. J. Reprod. Immunol. - 2010. - Vol. 601, № 63. - P. 601- 610.

168. Sakaguchi, S. Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells

expressing IL-2 receptor alpha-chains (CD25) Breakdown of a single

mechanism of selftolerance causes various autoimmune diseases. / S. Sakaguchi, S N.akaguchi, M.Asano et al. // J. Immunol. - 1995. - Vol.155. -P. 1151-1164.

169. Sakaguchi, S. Regulatory T cells and immune tolerance / S. Sakaguchi, T.

Yamaguchi, T. Nomura et al. // Cell. - 2008. - Vol. 133, № 5. - P. 775-787.

170. Shevach, E.M. Garp as a therapeutic target for modulation of T regulatory cell

function / E.M. Shevach // Expert Opin. Ther Targets. - 2017. - Vol. 21, №2. - P.191-200.

171. Shohan, M. Th9 Cells: Probable players in ulcerative colitis pathogenesis / M.

Shohan, S. Elahi, H. Shirzad et al. // Int. Rev. Imm. - 2018. - Vol. 19. - P. 114.

172. Smith, RG. Modulation of pulsatile GH release through a novel receptor in

hypothalamus and pituitary gland. Review // R.G. Smith, S.S. Pong, G. Hickey et al. // Recent Prog Horm Res. - 1996 - Vol. 51. - P. 261-285; discussion 285-286.

173. Smith, RG. Peptidomimetic regulation of growth hormone secretion / R.G. Smith,

L.H. Van der Ploeg, A.D. Howard et al. // Endocr Rev. - 1997 - Vol.5. - P. 621-645.

174. Smith, RG. Growth hormone releasing substances: types and their receptors /

R.G. Smith, O.C. Palyha, S.D. Feighner et al. // J. Hormone research in pediatrics. - 1999. - Vol.51. - S.3. - P.1-8.

175. Soriano-Guillén, L. Ghrelin levels in obesity and anorexia nervosa: effect of

weight reduction or recuperation / L. Soriano-Guillén, V. Barrios, A. Campos-Barros et al. // J. Pediatr. - 2004. - Vol. 144, № 1. - P. 36-42.

176. De Souza, M.J. Fasting ghrelin levels in physically active women: relationship

with menstrual disturbances and metabolic hormones / M.J. de Souza, H.J. Leidy, E. O'Donnell et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2004. - Vol. 89. -P. 3536-3542.

177. Souza-Moreira, L. Therapeutic effect of ghrelin in experimental autoimmune

encephalomyelitis by inhibiting antigen-specific Th1/Th17 responses and inducing regulatory T cells Brain / L. Souza-Moreira, V. Delgado-Maroto, M. Morell et al. // Behavior and Immunity. - 2013, № 30 - P.54- 60.

178. Spiegel, K. Twenty-four-hour profiles of acylated and total ghrelin: relationship

with glucose levels and impact of time of day and sleep // K. Spiegel, E. Tasali, R. Leproult et al. // J Clin Endocrinol Metab. - 2011. - Vol.96, № 2. -P. 486-493

179. Stanic, B. IL-10-overexpressing B cells regulate innate and adaptive immune

responses / B. Stanic, W. Van de Veen, O.F. Wirz et al. // J. Allergy Clin. Immunol. - 2015. - Vol. 135, №3. - P.771-780.

180. Stark, R. Des-Acyl Ghrelin and Ghrelin O-Acyltransferase Regulate

Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis Activation and Anxiety in Response to Acute Stress / R. Stark, V.V. Santos, B. Geenen et al. // Endocrinology. -2016. - Vol.157, №10. - P.3946-3957.

181. Stasi, C. Functions of Ghrelin in Brain, Gut and Liver / C. Stasi, S. Milani // CNS

Neurol. Disord. Drug Targets. - 2016. - Vol.15, №8. - P.956-963.

182. Steinman, R.M. Tolerogenic dendritic cells / R.M. Steinman, D. Hawiger,

M.C. Nussenzweig // Annu. Rev. Immunology. - 2003. - Vol. 21. - P. 685711.

183. Stoeckle, C. Isolation of myeloid dendritic cells and epithelial cells from human

thymus / C. Stoeckle, I. Rota, E. Tolosa et al. // Journal of visualized experiments. - 2013. - Vol.79. - pp: e50951.

184. Strauss, L. Selective Survival of Naturally Occurring Human

CD4+CD25+Foxp3+ Regulatory T Cells Cultured with Rapamycin./ L.Strauss, T. Whiteside, A. Knights et al. // J. Immunology. - 2007. - V. 178. - P. 320-329.

185. Stuart, P. Long-Term Retention of Mature NK1.1+ NKT Cells in the Thymus S.P.

Berzins, F.W. McNab, C.M. Jones, M.J. Smyth and D.I. Godfrey // J. Immunol. - 2006. - Vol. 176, №7. - P. 4059-4065.

186. Sun, L. GARP: a surface molecule of regulatory T cells that is involved in the

regulatory function and TGF-P releasing. / L. Sun, H. Jin, H. Li // Oncotarget. - 2016. - Vol.7, №27. -P.42826-42836.

187. Szabo, S.J. Developmental commitment to the Th2 lineage by extinction of IL-

12 signaling / S.J. Szabo, N.G. Jacobson, A.S. Dighe et al. // Immunity. -1995. - Vol.2, №6. - P. 665-675.

188. Tanaka, M. Role of central leptin signaling in the starvation-induced alteration of

B-cell development / M. Tanaka, T. Suganami, M. Kim-Saijo et al. // J. Neuroscience. - 2011. - Vol.31, № 23. - P. 8373-8380.

189. Tena-Sempere, M. Exploring the role of ghrelin as novel regulator of gonadal

function / M. Tena-Sempere // Growth Horm IGF Res. - 2005. - Vol.2. -P.83-88.

190. Tena-Sempere, M. Ghrelin: novel regulator of gonadal function / M. Tena-

Sempere // J. Endocrinol Invest. - 2005. - Vol.28. - Suppl.5 - P.26-9.

191. Tena-Sempere, M. Roles of ghrelin and leptin in the control of reproductive

function / M. Tena-Sempere // Neuroendocrinology. - 2007. - Vol. 86. -P.229-241.

192. Tena-Sempere, M. Ghrelin as a pleotrophic modulator of gonadal function and

reproduction / M. Tena-Sempere // Nat. Clin. Pract. Endocrinol. Metab. -2008. - Vol. 4, № 12. - P. 666-674.

193. Tena-Sempere, M. Interaction between energy homeostasis and reproduction:

central effects of leptin and ghrelin on the reproductive axis / M. Tena-Sempere // Horm. Metab. Res. - 2013. - Vol. 45. - P.919-927.

194. Thornton, A.M. CD4+CD25+ immunoregulatory T cells suppress polyclonal T