Механизмы действия лазерного излучения средней интенсивности на ткани тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Двалишвили, Манана Юрьевна

• Двалишвили, Манана Юрьевна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Двалишвили, Манана Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЭФФЕКТЫ ЛАЗЕРНЫХ ИЗЛУЧЕНИЙ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ТКАНЯХ И ИХ НЕКОТОРЫЕ МЕХАНИЗМЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1 Введение.

1.2 Влияние высокоинтенсивных лазерных излучений на ткани.

1.3 Действие низкоинтенсивного лазерного излучения на ткани.

1.3.1 Механизмы биологического действия низкоинтенсивных лазерных излучений на клетки.

1.3.2 Акцепторы низкоинтенсивного лазерного излучения.

1.3.3 Биологическое действие низкоинтенсивных лазерных излучений на клетки в зависимости от дозы и длины волны.

1.4 Понятие среднеинтенсивного лазерного излучения и его биологическое действие.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДЫ И АППАРАТУРА.

2.1 Объекты исследования.

2.1.1. Ткань «Фантом».

2.1.2 Раствор ДНК.

2.1.3. Лабораторные животные.

2.1.4. Лейкоциты,фибробласты.

2.2 Методы исследования.

2.3 Аппаратура и принадлежности.

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ РАЗЛИЧНОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ НА СТРУКТУРУ КОЖИ КРЫС.

3.1. Сравнительный анализ структуры кожи при различных режимах лазерного воздействия.

ГЛАВА 4. ТЕРМИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ СРЕДНЕИНТЕНСИВНОГО ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ТКАНЯХ.

ГЛАВА 5. МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ СРЕДНЕИНТЕНСИВНОГО ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА СТРУКТУРУ ДНК И ПРОЦЕССЫ ПЕРОКСИДА-ЦИИ В ЛЕЙКОЦИТАХ И ФИБРОБЛАСТАХ.

5.1 Влияние среднеинтенсивнога лазерного излучения на ДНК в растворе.

5.2 Влияние температуры на процессы пероксидации и ДНК в клетках.

5.3. Влияние среднеинтенсивнога лазерного излучения на процессы пероксидации в фибробластах и лейкоцитах.

5.4 Влияние среднеинтенсивного лазерного излучения на процессы программированной гибели фибробластов.

ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы действия лазерного излучения средней интенсивности на ткани»

Актуальность. В настоящее время лазерные медицинские технологии широко используются в клинической медицине как методы эффективной избирательной деструкции патологически измененных тканей (высокоинтенсивные излучения) с одной стороны и для стимуляции обменных процессов в клетках (низкоинтенсивные излучения) - с другой.

Высокоинтенсивные лазерные воздействия (8 Дж/см2 и более) применяются в качестве лазерного скальпеля при эндоваскулярных и других хирургических вмешательствах, для локальной интерстициальной гипертермии в онкологии (1, 8, 32, 82, 92). Высокоинтенсивные лазерные воздействия приводят к изменениям физического состояния тканей, вызывая в них абляцию, коагуляцию и гипертермию.

Низкоинтенсивные лазерные воздействия (0,1 3,0 Дж/см2) с успехом используются почти во всех областях медицины для коррекции нарушений иммунитета, улучшения реологических свойств крови и микроциркуляции, усиления процессов репарации (14, 21, 35, 58). Биологическое действие низкоинтенсивных лазерных излучений связывают с изменениями в клетках концентрации цитозольного кальция, фосфолипидов мембран, а также с образованием активных форм кислорода (7, 59).

При переходе лазерных воздействий из категории низкоинтенсивных в высокоинтенсивные выявляется диапазон доз (3,0 - 8,0 Дж/см2) - средней интенсивности, в котором лазерные излучения, по-видимому, ещё не проявляют деструктивное действие, но уже утрачивают биостимулирующий эффект в клетках (15, 16, 19, 41). Отдельные работы по применению среднеинтенсив-ных лазерных энергий показали, что в данном переходном диапазоне терапевтический эффект все-таки выявляется, а особую актуальность приобретают такие характеристики излучения как суммарная доза, время импульса, длина волны (50, 70, 73).

Лазерные излучения среднеэнергетического диапазона в клинической медицине в настоящее время остаются практически невостребованными ввиду недостаточности знаний о механизмах их действия на ткани. В то же время в клинической практике при лечении хронических дегенеративно-деструктивных процессов во внутренних органах, в сосудах и коже возможности изолированного применения высоко- и низкоинтенсивных лазерных излучений в ряде случаев весьма ограничены по причине неадекватности применяемых энергий состоянию тканей. В этих ситуациях деструкция тканей высокоинтенсивным лазерным излучением также неоправданна, как и упование на биостимулирующий эффект низкоинтенсивного лазерного воздействия. В связи с этим интерес к анализу механизмов и эффектов средне-интенсивного лазерного излучения с тканями продиктован запросами практической и теоретической медицины.

Цель работы: анализ механизмов действия среднеинтенсивного импульсного лазерного излучения на ткани на основе оценки его эффектов в фибробластах и лейкоцитах человека и коже крыс.

Задачи исследования:

1. Изучить зависимость морфологических изменений (эластические, коллагеновые волокна и др.) в коже крыс от суммарной дозы среднеинтенсивного лазерного воздействия.

2. Оценить термические эффекты среднеэнергетических импульсов лазеров в экспериментальной биологической ткани «Фантом» и при моделировании соответствующих температурных режимов в клеточной среде.

3. Изучить в стендовых опытах влияние среднеинтенсивного лазерного воздействия на ДНК тимуса теленка в растворе в зависимости от дозы и длины волны излучения.

4. Изучить выраженность разрывов ДНК и образование активных форм кислорода после среднеинтенсивного лазерного воздействия в зависимости от дозы и длины волны излучения в культуре фибробластов и в лейкоцитах человека.

5. Провести сравнительную оценку интенсивности разрывов ДНК и ок-сидативных эффектов среднеинтенсивного лазерного воздействия в зависимости от дозы и длины волны излучения в лейкоцитах и фибробластах человека.

6. Оценить возможность среднеинтенсивного импульсного лазерного излучения инициировать в культуре фибробластов человека процессы некроза и апоптоза.

Научная новизна. Показано, что когерентный свет (595 нм) в средне-интенсивном импульсном режиме (3,0 Дж/см2) при многократном действии на кожу способен активировать пролиферативные процессы в дерме и её производных. При увеличении энергии в импульсе и переходе её в высокоинтенсивный диапазон в коже наблюдаются признаки дистрофии и некробиоза клеток. Выявлено, что локальные термические эффекты среднеэнерге-тических импульсных воздействий не превышают 33°С, они недостаточны для инициации в клетках повреждений, приводящих к некрозу.

Установлено, что среднеинтенсивные импульсные воздействия (3-6 Дж/см2) лазеров на красителе (595 нм) и александрите (755 нм) приводят к наибольшей внутриклеточной активации процессов перекисного окисления и деструкции ДНК в лейкоцитах и в меньшей степени в культуре фибробластов человека. При переходе энергии импульсов из среднеэнергетического в высокоэнергетический диапазон эти различия нивелируются, а деструкция ДНК в клетках увеличивается экспоненциально.

Впервые выявлено, что импульсные лазерные воздействия (595 нм, 755 нм) в диапазоне доз 4-6 Дж/см2 способны инициировать программированную гибель фибробластов. Установлены оптимальные режимы лазерных воздействий для селективного апоптозостимулирующего эффекта.

Тсорс тчсекня к практическая значимость. Результаты исследования расширяют представления о механизмах взаимодействия монохроматического когерентного света с животными клетками. Полученные в работе факты позволяют рассматривать средменнтенсниные импульсные лазерные воздействия (595 км, 755 км; 4 - 6 Дж1гсм3) в качестве физических факторов, которые способны влиять на интенсивность апоптоза в поцуляшмх животных клеток. Это открывает перспективу исследований по применению импульсных ерелнскктснсивных лазерных воздействий в экспериментальной и клинической мели пине для изменения интенсивности иролиферативных процессов в патологически измененных тканях. Учитывая универсальный характер действие света на клетки, результаты работы могут быть использованы дня разработки способов управления апоптозом в культурах растительных и микробных клеток с целью оптимизации бнотсхкалогмчсскнл процессов и решения задач практической фармации

Основные положения, вмноснмы« ня защиту: I Средненнтенснвные импульсные лазерные (краситель) излучения вызывают зависимые от дозы морфологические изменения в коже лабораторных животных. При суммарной доэе 3 Дж/см: в лень 3-х кратное средне-ннтенсивное лазерное воздейсгвие приводит а коже крыс к усилению процессов пролиферации и гипертрофии клеток дермы и ее производных.

I. При воздействии импульсами ладного излучения с длиной волны 595 им» 755 км в дозах 4-6 Л ж/см5 локальная температура в экспериментальной биологической ткани увеличивается с 25ФС до Импульсные лазер~ ные излучения с длннамн волн 595 им, 755 нм в .диапазоне доз 4~6 Дж/см не оказывают термического повреждающего действии на ткани.

3 При воздействии импульсным среднейитенсииным излучением квантовых генераторов (александрит, краситель) на фибробласты и лейкоциты в клетках резко усиливаются процессы фрагментации дезоксирибонукленно-вой кислоты на фоке умеренной активации, особенно в фнбробластах, генерации активных форм кислорода.

4. Средненнтежнаные нмлульсные лазерные (александрит, краситель) воздействия шшщшруют в культуре фибробластов человека процессы программированной гибели клеток. При переходе энергии в высокомнтенеилиый диапазон лазерное облучение приводит к увеличению количества некротиэн-рованных клеток и уменьшению числа фибробластов с морфологическими признаками апоптоза.

Личное участие »втора в мроиелгнни нсслеловипин

Личное участие автора осуществлялось на всех этапах работы и включало; анализ литературных источников, организацию стендовых испытаний и экспериментов, проведение лазерных воздействий на лабораторных животных и экспериментальную биологическую ткань, а также на лейкоциты и фнбробласты, оценку полученных данных и нх статистическую обработку, формулировку выводов и практических рекомендаций.

Апробаций п вислргнн!.' результатов работы

По теме диссертации опубликовано 7 работ, ш них 2 статьи. Результат ты исследований доложены на Всероссийской конференции с международным участием «Актуальные проблемы прикладной анатомии, оперативной н клинической хирургии» (2004), а также апробированы на Второй международно Гг конференции «Патофизиология и современная медицина» (2004) и межкафедральном заседании СГ1ХФА (2005). Результаты работы используются и учебном процессе кафедры физиологии и патологии СПХФА, а также в научной работе «Центра лазерной медицины» СПбГМУ нм, акад. И,П. Павлова н СПХФА, Исследование выполнено в рачках плановой НИР СПХФА,

Объем и структура работы

Диссертация изложена па 108 страницах машинописного текста, состоит из введения. 5 глав, заключения, выводов, рекомендаций по использованию научных выводов, списка литературы. Работа содержит 13 таблиц и 30 рисунков. Указатель литературы включает 113 отечественных и 39 иностранных источников,

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Двалишвили, Манана Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. Среднеинтенсивное импульсное лазерное излучение с длиной волны 595 нм (краситель) вызывает зависимые от суммарной дозы морфологические изменения в коже крыс. При суммарной дозе среднего энергетического воздействия 3-8 Дж/см- в день облучение инициирует выраженный пролифе-ративный и гипертрофический эффекты в дерме и её производных. Увеличение дозы воздействия (9-24 Дж/см2 и более) приводит к дистрофическим изменениям и очаговой деструкции тканей.

2. При воздействии импульсами лазерного излучения с длиной волны 595 нм (краситель) и 755 нм (александрит) в дозах 4-6 Дж/см2 локальная температура в экспериментальной биологической ткани в момент воздействия увеличивается с 25°С до 33°С.

3. Увеличение температуры взвеси лейкоцитов с 25°С до 35°С не приводит к усилению деструкции ДНК и увеличению количества активных форм кислорода. При нагреве лейкоцитов до 40°С и более выявляются признаки повреждения клеток. Импульсные лазерные излучения с длинами волн 595 нм и 755 нм в диапазоне доз 4-6 Дж/см2 не оказывают термического повреждающего действия на ткани.

4. Интенсивность деструкции ДНК и образования активных форм кислорода в фибробластах и лейкоцитах после среднеинтенсивных лазерных воздействий зависит от спектра излучения, дозы импульса и вида клеток.

5. Лазерное среднеинтенсивное излучение с длиной волны 595 нм вызывает большую деструкцию ДНК в клетках, чем излучение с длиной волны 755 нм. В среднеинтенсивном диапазоне доз 3-6 Дж/см2 деструкция ДНК не сопровождается активацией процессов перекисного окисления. При одинаковых дозах воздействия в лейкоцитах наблюдается более выраженная деструкция ДНК и увеличение концентрации активных форм кислорода, чем в фибробластах.

6. Воздействия излучением лазера на александрите с энергией импульса 6 Дж/см2 в фибробластах инициируют процессы апоптоза. При увеличении дозы импульса (8-10 Дж/см2) количество некротизированных клеток не изменяется, а число фибробластов с апоптозом уменьшается.

7. Воздействия излучением лазера на красителе с энергией импульса 44,5 Дж/см2 вызывают преимущественно апоптоз, а при увеличении дозы до 5 Дж/см2 количество некротизированных клеток увеличивается, а число фибробластов с апоптозом уменьшается.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. Сведения о способности среднеинтенсивных импульсных лазерных излучений инициировать процессы апоптоза следует учитывать при разработке и применении медицинских лазерных технологий для лечения заболеваний, сопровождающихся нарушениями процессов пролиферации и репарации в органах и тканях.

2. Целесообразно проведение экспериментальных и клинических исследований по использованию среднеинтенсивных импульсных лазерных излучений в эстетической медицине для оптимизации процессов обновления клеточного состава кожи.

3. Вывод о способности среднеинтенсивного лезерного излучения стимулировать процессы программированной гибели клеток целесообразно учитывать при использовании лазеров для усовершенствования методик лечения в экспериментальной и клинической онкологии.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Завершая настоящее исследование необходимо подчеркнуть, что наиболее значимым его результатом является установление факта, что когерентное импульсное излучение в среднеэнергетическом диапазоне доз способно инициировать процессы программированной гибели клеток.

Начало апоптоза может быть связано с физическими и фотохимическими внутриклеточными эффектами лазерного излучения. В качестве возможных механизмов апоптоза рассматривают понижение уровня глютатиона в клетке, повышение образования АФК, активацию дезоксирибонуклеаз и деструкцию, в первую очередь, митохондриальной ДНК, а во вторую -ядерной.

В результате воздействия лазерного излучения отмечалось дозозависи-мое, но не пропорциональное дозе увеличение образования АФК и разрывов ДНК. Связь в изменениях изученных биохимических показателей с активацией только апоптоза или только некроза остается неопределенной. С другой стороны увеличение доли фрагментированной ДНК более надежно отражает начало процессов повреждения клеток в культуре после лазерного воздействия, чем генерация АФК. В определенной степени это может быть связано с тем, что фибробласты не являются фагоцитирующими клетками и классический " оксидативный взрыв", характерный для нейтрофилов, у них мало вероятен. Здесь возможен механизм инактивации глютатиона, основного внутриклеточного антиоксиданта.

В соответствии с современными представлениями в фотобиологии для взаимодействия света с клетками необходимо наличие в них акцепторов энергии. Прямые фотобиологические процессы возникают при совпадении спектров поглощения молекул с длиной волны излучения лазеров в результате чего повышается реакционность внутриклеточных систем и увеличивается концентрация свободнорадикальных продуктов. Для лазеров на александрите и красителе назвать такой внутриклеточный акцептор энергии затруднительно. Представляется, что выявление инициации апоптоза излучением лазеров расширяет представления о механизмах взаимодействия когерентного света с животными клетками и открывает перспективы для анализа механизмов программированной гибели клеток, а также разработки на этой основе методических подходов к управлению апоптозом с помощью физических факторов.

С учетом того, что лазерное воздействие в среднеэнергетическом диапазоне способно вызвать только апоптоз - нормальный процесс элиминации клеток, открываются интересные перспективы усовершенствования на этой основе лазерных технологий, направленных на оптимизацию пролифератив-ных и репаративных процессов при различных видах патологии, в экспериментальной и клинической онкологии, а также в эстетической медицине для стимуляции процессов обновления клеточного состава кожи. В частности, с этих позиций можно объяснить и стимулирующий эффект среднеинтенсивного лазерного излучения в дерме лабораторных животных низкой, а также повреждающий - при высокой суммарной дозе воздействия.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Двалишвили, Манана Юрьевна, 2006 год

1. Александров М.Т. Применение лазеров в медицине // Обзор отечественной и зарубежной печати за 1971 - 1985 гг. - М., 1986. - 185 с.

2. Алексеев В.А., Никифоров В.Г. Лазеры на красителях с ламповой накачкой для медицины П Лазеры в медицине: Материалы Межд. конф. -Ташкент, 1989.-С. 71

3. Аль- Шукри С.Х., Ткачук В.Н., Соколов А.Н. Применение аиг-неодимовой лазерной хирургической установки «Люксус-100» в урологической практике \\ Лазеры в медицине-99\ Материалы третьего межд. симпозиума.- С П6.1999.-С. 8-9.

4. Армичев A.B., Леонтьев М.Я., Странадко Е.Ф. Опыт использования ла~ зеров на основе паров меди, золота и растворов красителей для фотодинамической терапии \\ Новые направления лазерной медицины \ Материалы межд. конференции. M., 1996.-С. 353.

5. Бажанов В.П. Баграмов Р.И. Применение импульсного С02 лазерного скальпеля при костных и костнопластических операциях на лицевом черепе. \\ Новое в лазерной медицине и хирургии \ Материалы межд. конференции.-М., 1991.-С.-38-40.

6. Баллюзек Ф.В., Морозова С.И., Самойлова К.А. Медицинская лазеро-логия. СПб, 2000. - 160 с.

7. Ю.Борисова A.M., Хорошилова Н.В., Булгакова Г.И. Действие низкоинтенсивного лазерного излучения на иммунную систему // Терапевтический архив 1992. - Т.64. - N5. - С.111-116.

8. Брилль А.Г., Брилль Г.Е., Киричук В.Ф., Шенкман Б., Тамарин И., Дар-дик Р., Варон Д., Савион Н. Влияние излучения He-Ne лазера на активацию и агрегацию тромбоцитов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - Т. ¡28. - N7. - С.48-49.

9. Брилль Г.Е., Брилль А.Г. Гуанилатциклаза и NO-синтетаза-возможные первичные акцепторы энергии низкоинтенсивного лазерного излучения /У Лазерная медицина 1997. - Т. I. - N2. - С.39-42.

10. Буйлин В.А. Низкоинтенсивная лазерная терапия с применением матричных импульченых лазеров И Иформационно-методический сборник. -М.: ТОО «Фирма «Техника», 1996. 122 с.

11. Венков A.A. Лазерная гипертермия в лечении хирургических заболеваний." Автореф. дис. д-ра мед. наук. 2001. - 35 с.

12. Венков A.A., Миррахимов Ш.С. Лазерное флебосклерозирование при вари козе Н Материалы третьей ежегодной сессии НЦ ССХ им. А.Н. Бакулева. М., 1998. - С. 53.

13. Виноградов А.Б.,Бахтин В.И. Определение эффективных лечебных параметров низкоинтенсивного импульсного лазерного света с длиной волны 0,89 мкм \\ Новое в лазерной медицине и хирургии \ Материалы межд. конференции.-1990.- C.127-I28.

14. Воздвиженский И.С., Щеглова O.E., Сарыгин П.В. Возможности применения лазеров в лечении пигментных образований кожи // Новые направления лазерной медицины. Материалы Межд. конф. М., J 996 — С. 27-28.

15. Волков В.М., Гликин Л.С. Использование лазеров на парах меди в лечении сосудистых заболеваний кожи и остроконечных кондилом. \\ Новые направления лазерной медицины \ Материалы межд. конференции.-М., 1996-С.-29.

16. Гамалея Н.Ф. Лазеры в эксперименте и клинике. М.: Медицина, 1972. - 232 с.

17. Гамалея Н.Ф., Шишко Е.Д., Яниш Ю.В. Новые данные по фоточувствительности живой клетки и механизму лазерной биостимуляции // Доклады Академии Наук СССР. 1983. - Т. 273. - N1. - С.24-230.

18. Гаусман Б.Я., Елисеенко В.И. Различные виды лазерных излучений в профилактике нагноений послеоперационных ран: Материалы Межд. конф. М., 1996 - С. 141-143.

19. Генкин В.М., Новиков В.Ф., Парамонов Л.В., Эдькина Б.И. Влияние низкоинтенсивного лазерного облучения на состояние белков крови//

20. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1989. - Т. 108. -N2.--С. 188-189.

21. Герцен A.B., Леонтьева Г.В. и соавт. Изучение влияния низкоинтенсивного ИК-лазерного излучения в эксперименте // Новое в лазерной хирургии и медицине / Материалы Межд. конф. M., 1990. - с. 31-32.

22. Глухов Е.И. Эффективность лечения трофических язв и длительно незаживающих ран С02-лазером по данным коллагеногенеза // Применение лазеров в медицине: Материалы Всесоюз. конф. М., 1984. - С. 36.

23. Горбатейкова Е.А., Азизова O.A. Парамонов Н.В., Владимиров Ю.А. Механизм фотореактивации гелий-неонового лазера // Доклады Академии Наук СССР. 1988. - Т.299. - N4. -С.995-1003.

24. Горбатова Н.Е., Лившиц Ю.Л. Первый опыт совместного воздействия излучениями импульсно-периодических АИГ-неодимовых и АИГ-эрбиевых лазеров на ткани лабораторных животных // Лазеры и медицина: Материалы Межд. конф. М., 1989. - С. 103-104.

25. Гуща А.Л., Тарасенко C.B. Механизм терапевтического воздействия эндоваскулярного облучения крови низкоинтенсивным лазерным светом в условиях хирургического эндотоксикоза // Материалы Межд. конф. M., 1990 - С. 36-37.

26. Дадашев А.И, Эфендиев А.И. и соавт. Лечение гнойных ран с применением С02-лазера и полиферментных повязок // Актуальные проблемы применения магнитных и электромагнитных полей в медицине: Материалы Всесоюзн. конф. Л. 1990. - С. 140.

27. Данилин H.A., Маренич В.Ф. и соавт. Опыт использования лазерной хирургической установки «ЛСТ-20-01» в практике отделения кожнопластической хирургии // Новые направления лазерной медицины / Материалы Межд. конф. М. 1996. - С. 45-46.

28. Девятков Н.Д. Газовые лазеры в медицине // Вестник АН СССР. 1983. -Вып. 1.-С. 51-56.

29. Девятков Н.Д., Беляев В.П., Гамалея Н.Ф. Лазеры в клинической медицине. М.: Медицина, 1981.-285 с.

30. Девятков Н.Д., Бецкий О.В. Медико-биологические аспекты лазерных излучений низкой интенсивности // Сборник науч. тр. М., 1987. - С. 7-10.

31. Демидов Б.С., Бодкин Р.Г., Назаров П.П. Особенности применения излучения лазеров различных типов при хирургическом лечении больных эмпиемами плевры. \\ Применение лазеров в клинике и эксперименте \ Материалы межд. конференции.- М., 1987.- С. 35.

32. Добкин В.Г. Лазерная хирургия при заболевании легких // Применение лазеров в клинике и эксперименте: Материалы Всесоюзн. конф. М., 1987.-С. 21.

33. Доценко А.П., Ходос В.А., Князев В.И. Лазерная терапия гнойных заболеваний и ран мягких тканей // Применение лазеров в клинике и эксперименте: Материалы Всесоюзн. конф. М., 1987. - С. 38.

34. Дубинина Е.Е. Биологическая роль супероксидного анион-радикала и супероксиддисмутазы в тканях организма. П Успехи современной биологии.-1989- т. 108 вып.1. - N4.-С.3-18.

35. Евстигнеев А.Р. Современные медицинские лазерные установки на полупроводниковых лазерах и перспективы их развития и производства // Лазеры в медицине: Материал Межд. конф. М., 1989. - С. 84.

36. Ермолов A.C. Волков C.B., Сордин Д.Г. Лечение желудочно-кишечных кровотечений инфракрасным импульсным лазерным излучением // Новые направления лазерной медицины / Матералы межд. конф.-М., 1996.-с. 51-53.

37. Желтов Г.И., Глазков В.Н. Механизмы лазерного воздействия на биоткани // Действие электромагнитного излучения на биологические объекты и лазерная медицина: Материалы Всесоюзн. конф. Владивосток. 1989-С. 72-89.

38. Каныкин А.Ю. Использование красного лазерного света в лечении незаживающих ран, хронических язв и кожных рубцов в амбулаторных условиях: Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 1992. - 19 с.

39. Каплан M.А., Степанов В.А. Физико-химические основы действия лазерного излучения в ближней ИК-области на биоткани. // Лазеры и медицина / Материалы Межд. конф. Ташкент. 1989. - с.85-66.

40. Кару Т.Й, Афанасьева Н.И. Цитохром с оксидаза как первичный фотоакцептор при лазерном воздействии света видимого и ближнего ИК-диапазона на культуру клеток. // Доклады Академии Наук. 1995. — Т.342. - N5. - С.693-695.

41. Кару Т.Й. О молекулярном механизме терапевтического действия излучения низкоинтенсивного лазерного света. // Доклады АН СССР. — 1986.- Т.291.-СЛ245-1249.

42. Кару Т.Й. Первичные и вторичные клеточные механизмы лазерной терапии // Низкоинтенсивная лазерная терапия / Под ред. Москвина C.B., Буйлина В.А.; М.: ТОО "Фирма Техника", 2000. Гл. 4. - С.71-94.

43. Кару Т.Й., Календо Г.С., Лобко В.В. Зависимость биологического действия низкоинтенсивного видимого света на клетки от параметров излучения-когерентности, дозы и длины волны // Известия Академии Наук СССР. 1983. - Т.47. - N10. -С.2017-2022.

44. Кару Т.Й., Пяти брат Л.В., Календо Г.С., Серебряков Н.Г. Изменение количества АТФ в клетках HeLa под воздействием излучения He-Ne лазера // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. -N.6. — NT 15. - С.617-618.

45. Козлов В.И. Лазерная терапия: итоги и перспективы // Лазер и здоро-вье-99: Матер, междунар. конгр., 1999г. -Москва, 1999. С. 317-319.

46. Козлов В.И., Буйлин В.А. Лазеротерапия. М.: АСТР, 1993. - 149 с.

47. Коломиец J1.A., Щепеткин И.А. Механизмы терапевтического действия низкоинтенсивного лазерного излучения // Сибирский медицинский журнал. 1996.-N 1.-С.49-51.

48. Конов В.И., Прохоров A.M., Щербаков И.А. Перспективы развития силовой лазерной техники для медицины // Новое в лазерной медицине и хирургии: Материалы Межд. конф. М., 1991. - С. 221 -226.

49. Лаптева P.M., Баишева С.А., Фрязинова Т.С. Системная реакция компонентов иммунитета на низкоэнергетические лазерные излучения // Новое в лазерной медицине и хирургии: Материалы Межд. конф. М., 1990.-С. 51-53.

50. Литвин Г.Д. и соавт. Возможности использования импульсных АИГ-лазеров в абдоминальной хирургии // Новое в лазерной медицине и хирургии: Материалы Межд. конф. М. 1991. - С. 76-78.

51. Литвин Г.Д. Принципы применения лазеров, лазерных аппаратов и инструментов в хирургии паренхиматозных органов // Актуальные вопросы лазерной хирургии: Материалы Всесоюзн. конф. М. 1982. - С. 9195.

52. Луцевич Э.В., Странадко Е.Л. Лазерные технологии в хирургии и онкологии // Международный медицинский журнал. 1998. - XI-XII. -с.927-931.

53. Мариава О.М., Толстых П.И. Новое в лечении гнойных заболеваний мягких тканей с сочетанным использованием высокоэнергетических и низкоэнергетических лазеров \\ Новое в лазерной медицине и хирургии \ Материалы межд. конференции М., 1991.- С. 82-85.

54. Маркосян A.A. Физиология тромбоцитов. -Л: Наука, 1970. 164 с.

55. Маслова М.Г. Новые аспекты применения лазерного излучения в лечении гнойно-воспалительных заболеваний // Лазеры в медицине: Материалы Межд. конф. Ташкент, 1989. - С. 37-38.

56. Матчин E.H., Потапов В.Д. Опыт применения хирургического лазера «Ланцет» в работе ожогового отделения // Новые направления лазерной медицины: Материалы Межд. конф. М., 1996. - С. 70-72.

57. Михайлова И.А., Соколов Д.В., Проценко Н.Е., Рябова М.А., Соколов A.B. Лазеры в медицине: методическое пособие -СПб., СПбГМУ им.акад. И.П. Павлова, 1998. 108 с.

58. Москалик К.Г., Козлов А.П., Вагнер Р.И. Результаты лечения злокачественных опухолей кожи импульсным лазером // Лазеры в медицине-99: Материалы Межд. симп. СПб, 1999. - С. 16.

59. Мчедлидзе М.Ю., Неворотин А.И., Тюкавин А.И., Венков A.A. Термические эффекты высокоэнергетических лазерных излучений при взаимодействии с биологической тканью // 4 конгресс «Паллиативная медицина и реабилитация в здравоохранении М., 2002. - С. 26.

60. Мчедлидзе М.Ю., Парамонов Б.А., Смирнова Т.Д., Потсдам И.Л., Тюкавин А.И., Венков A.A. Влияние высокоэнергетических лазерных излучений на фибробласты легкого человека // Цитология. СПб, 2002. -С. 115-121.

61. Мчедлидзе М.Ю., Тюкавин А.И., Венков A.A. Возможности применения высокоинтенсивного лазерного излучения в лечении гипертрофических рубцов и контрактур. // Здоровье образование в XXI веке: Материалы III Междунар. науч. практ. конф. М., 2002. - С. 19-20.

62. Неворотин А.И. Введение в лазерную хирургию. СПб: СпецЛит, 2000,- 160 с.

63. Неворотин А.И. Лазерная рана в теоретическом и прикладном аспектах Н Лазерная биология и лазерная медицина: практика: Материалы Респ. школы-семннара. Тарту, 1991. - С. 3-12.

64. Овчинников М.М., Подгорный Т.Н. Балаховский И.С. Количественный спектрофотометрический анализ в ультрафиолетовой, видимой и ближней инфракрасной областях // Клиническая лабораторная диагностика. -2000.-N2.- С.6-11

65. Пальцев Ю.П. Биоэффекты и критерии их оценки при действии лазерных излучений // Новое в лазерной медицине и хирургии: Материалы Межд. конф. -М., 1990.-С. 14-15.

66. Плетнев С.Д. Лазеры в клинической медицине. М.: Медицина, 1996. -430 с.

67. Полонский А.К., Черкасов A.B. Об использовании полупроводниковых лазеров в экспериментальной и клинической медицине Н Вопросы курортологии. 1983. -№ 4. - С. 66-67.

68. Привалов В.Е. Сравнительные характеристики газоразрядных и полупроводниковых лазеров, используемых в медицине // Лазеры в медицине 99: Материалы III Межд. семинара. СПб, 1999. - С. 33.

69. Ракчеев А.П. Перспективы применения лазеров в дерматологии // Применение лазеров в медицине: Материалы Всесоюзн. конф. М., 1984. -С. 139.

70. Романов В.А. Применение аргонового лазера для деструкции опухолей желудка и толстой кишки // Применение лазеров в медицине: Материалы Межд. конф. Ташкент, 1989. - С. 49-50.

71. Рошаль A.M., Горбатова Н.Е. Антибактериальное свойство излучения АИГ-эрбиевого лазера и возможность использования его в медицине //

72. Новое в лазерной медицине и хирургии: Материалы Межд. конф. М., 1990. - С. 70-72.

73. Рычагов Г.П., Голуб А.Н. Назаренко П.М. Роль АИГ-неодимового лазера в лечении послеоперационных стриктур эзофагогастроанаастомо-зов // Новые направления лазерной медицины: Материалы Межд. конф. -М., 1996.-С. 87-89.

74. Саранцев В.П., Вейченко В.А., Ларюшин А.И. Новый аппарат лазерной хирургии на основе диодных полупроводниковых лазеров с длиной волны 805 и 890 нм // Новые направления лазерной медицины: Материалы Межд. конф. -М., 1996. С. 370-371.

75. Серых М.М., Древаль В.И., Аверкиева О.Н., Соколовский A.B. Влияние многократного лазерного облучения крыс на активность фосфатаз плазмы крови // Биологические науки. 1980. - N11. - С. 25-28.

76. Скобелкин O.K. Лазеры в хирургии. М.: Медицина, 1989. - 256 с.

77. Скобелкин O.K., Брехов Е.И., Ерипанов В.И. Применение лазера в хирургии // Хирургия. 1983. - № 3. - С. 15-18.

78. Смольянинова Н.К., Кару Т.Й., Зеленин A.B. Облучение He-Ne лазером усиливает бласттрансформацию, вызванную фитогемагглютином II Доклады Академии Наук СССР. 1990 -Т. 315. - N5. - С. 1256-1259.

79. Солдатов А.Н., Юдин H.A. Лазерная медицинская установка для лечения дерматологических заболеваний (на парах меди) // Лазеры для медицины и биологии: Материалы 5 школы-семинара. СПб, 1997. - С. 25.

80. Солдатов И.Б. и соавт. Опыт использования С02 лазера в лечении заболеваний уха, горла, носа // Материалы 9 съезда оториноларингологов СССР. Кишинев, 1989. - С. 106-107.

81. Стаханов М.Л., Королев В.А. Опыт применения 250 Вт лазера на АИГ с неодимом в эндоскопии И Лазеры и медицина: Материалы Межд. конф. -М., 1989.-С. 56-57.

82. Сгранадко Е.Ф. Новый метод лечения рака лазером ФДТ // В сб. «Актуальные проблемы лазерной медицины». - Рязань, 993. ~С. 46-50.

83. Странадко Е.Ф., Скобелкин O.K. Маркичев H.A., Рябов М.В. Четырехлетний опыт клинического применения фотодинамической терапии злокачественных новообразований // Новые направления лазерной медицины: Материалы Межд. конф. М., 1996. - С. 267-269.

84. Ступин И.В. Сравнительная оценка факторов термического воздействия на ткани и хирургии /У Новое в лазерной медицине и хирургии: Материалы Междунар. конф. М., 199 J. - С. 111.

85. Трофимов В. А., Миннебаев М.М., Власов А.П. Влияние низкоинтенсивного излучения He-Ne лазера на спектр липидов и кинетику агрегации тромбоцитов при перитоните. // Казанский медицинский журнал 1998. - Т.79. - N6. -С.426-429.

86. Ухов Ю.И. Сравнительная оценка действия гелий-неонового и инфракрасного лазерных излучений при внутрибрюшинном облучении на иммунореактивность в эксперименте. \\ Новое в лазерной медицине и хирургии \ Материалы межд. конференции.- М., 1990.- С. 86-87.

87. Федорова К.Н., Спитковский Д.М. Состояние ядерного хроматина лимфоцитов периферической крови у страдающих болезнью Дауна и у больных фенилкетонурией. // Бюлл. эксперт, биологии. 1971. № 9. С.103.

88. Федосеева Г.Е., Кару Т.Й., Ляпунова Т.С., Помощникова H.A., Мейсель М.Н., Пескин A.B. Действие незкоинтенсивного красного света на ферментативную активность дрожжевой культуры Torulopsis Sphaerica// Микробиология. 1986. - Т.55. - N6. - С.944-948.

89. Хромов Б.М. Действие лучей ОКГ на кожу // В сборнике науч. трудов, посвященном 50-летию кафедры оперативной хирургии. Л. Медицина, 1971. С. 45-50.

90. Хромов Б.М. Применение оптических квантовых генераторов в медицине // В сб. науч. трудов, посвященном 50-летию кафедры оперативной хирургии. -JI. Медицина, 1971. С. 15-36.

91. Чичук Т.В. Страшкевич И.А., Клебанов Г.И. Свободнорадикаль-ные механизмы стимулирующего действия низкоинтенсивного лазерного излучения // Вестник РАМН. 1999. - N2. - С.27-32.

92. Чудновский В.М., Леонова Г.Н., Скопионов С.А., Дроздов А.Л., Юсупов В.И. Биологические модели и физические механизмы лазерной терапии. Владивосток: Дальнаука, 2002. 157с.

93. Шахматова М.П. и соавт. Возможности применения С02 лазера в гинекологии // Акушерство и гинекология. 1989. - № 4. - С. 43-45.

94. Швейкин В.И. Основные направления применения полупроводниковых лазеров в медицине // Лазеры и медицина: Материалы Межд. конф.-М., 1989.-С. 106-107.

95. Шевченко В.Л. Классификация способов применения лазерного излучения // Там же. С. 343-344.

96. Шевченко В.Л. Сравнительный анализ эффективности непрерывного импульсного и модулированного лазерных излучений // Новые направления лазерной медицины: Материалы Межд. конф. -М., 1996. -С. 342-343.

97. Юкина Г.Ю. и соавт. Лазерная рана: комплексный анализ: Материалы респ. конф. Эстонии. Тарту, 1992. - С. 176-183.

98. Aptelberg D.B., Maser M.R., Lash Н., Rivers Т. The role of the argon laser in the management of int. // J. Dermatol. 1982 - Vol. 21. - N 10. - P. 579.

99. Ascher P.W. Interstitial laser- thermotherapy of inoperable central tumors. \\ M. Lasers and Med. ¡989. - P. 67.

100. Auvari B. Effects of suface irrigation on the thermal response of tissue during laser irradiation \\ Laser Surg. Med.- 1994.- Vol.14.- P. 386- 395.

101. Bednarska K., Wachowicz B. Bucxynski A, UV-B-tnduced generation of free radicals in blood platelets // Journal of Photochemistry & Photo-biology. B-Biology, 2000. - Vol.SS, N2-3. - P 109-12.

102. IS- Berlien HP, Lasers in gerieral surgery, stale of the art und futures \\ V. Lasers and Med.- 1989-P- 66.

103. Bems M.W. Laser phoîoradiatton therapy of cancer ; possible role of hyperthermia V\ M. Lasers and Med. 1984,-VoU - P. 87-92.

104. Callaghan A., Rionlan C., Gimore W-, Mcimrye t., Allen J., Hannigan B. Reactive oxygen species inducible by low-imensity laser radiation after t>NA synthesis in the haemapoetic cell line U937// Lasers Surg Med. 1996. Vol.19, P. 201-206.

105. Castren-Persons M. Laser-induced hyperthermia : comparison of two different methods \\ Laser Surg. Med 1992 ,- Vol.-t2.-P 665-668.

106. Cubeddi R, Brancaro R. Study of pbotoablation by Er : Y AG kascr \\ Laser Surg. Med.- l996.-VoU9.-P. 32-39.

107. Cuzzocrea S.r McDonald M.C., Filipe H.M. et al. Effects of tempol, a membrane-permeable radical scavenger, in rodent mode! of carragcnan-induced pleurisy //Eur. J Pharm, 2000. Vol.390. P,209-222.

108. Dixon J, A. Surgical applications of lasers \\ Proceeding of LTTT.-1982.- Vol.70.- N.6.-P. 579-588.

109. Douchcrty T.J. Pbotodynamik therapy. In: Shapshay SM (cd): U Endoscopic Laser Surgery Handbook. New York: Marcel Dekker Inc. - 1987. -P 423-45 L

110. Factor V.M., Laskowska D., Jensen M R et al-. Vitamin E reduced chromosomal damade and inhibits hepatic tumor formation in transgenic mouse model, Proe.Natl. Acad,Sri., 2000, Vol. 97. P/ 2196-2201.

111. Gregor R., Valet G., Flow cytometric assay of oxidative burst activity in phagocytes, Methods EnzymoL 1994, Vol 233. P. 539-548

112. Grossman N., Schneid N. Reuventi H., Halevy S., Lubart H. R.780 nm low power diode laser irradiation stimulates proliferation of keratinocyte cultures: involvement of reactive oxygen species // Lasers Surg. Med. 1998. Vol.22. P.212-218.

113. Hohenleuther U., Walther T. Leg telangiectasia treatment with a 1,5 ms pulsed dya laser, ice cube cooling of the skin 595 and 600 nm: preliminary results \\ Lasers in Surg, and Med.- 1998.- Vol.23.- N 2.- P. 72-78.

114. Jurin M. Biomedical effects of low energy AsCa laser irradiation W M. Lasers and Med.- 1989.- Vol.-12.- P. 48-52.

115. Karu T.I., Lukpanova G., Parkhomenko I, Tiphlova O. Effect of irradiation with monochromatic visible light in cAMP content in Chines hamster fibroblast // Nuovo Cimento D. 1987. Vol.9. P. 1245-1251.

116. Karu T.I. Photobiology of low-power laser effects // Health. Phys. -1989.-Vol.56.-P. 691-704.

117. Kaufmann R., Hibst R. Pulsed Erbium : YAG laser ablation in cutaneous surgery \\ Laser Surg. Med. 1996.-Vol. 19.- P. 324- 330.

118. Lobel B. Temperature controlled C02 laser welding of soft tissues urinary bladder welding in different models \\ Lasers in Surgery and Medi-cineA 2000.- Vol. 18.-N. 1P. 4 12.

119. Loevschall H., Schärft O., Foder B., Arenholdt-Bindslev D. Effects of low level laser irradiation on cytosolic Ca2+ in human neutrophils in vitro // Laser Life Sei. -1998. Vol.8. - P.127-136.

120. Lubart R. Friedmann H., Sinyakov M., Grossman B. Biostimulation of low incident levels of visible light energy // Laser Therapy 1995 -Vol.7. - P. 101-106

121. Mecori Y.A. 11-3 dependent murine mast cells under go apoptosis on removal of il-3. Prevention of apoptosis by c-kin ligand. // J. Immunol. 1993. Vol.151. P. 3775-3784.

122. Meier R., Cross A.R., Hancock J.T. Identification of a superoxidegenerating NADPH oxidase system in human fibroblast // Biochem. J. -1991. Vol.275. - P.241 -245.

123. OhsHiro T., Calderhead R.G. Low Level laser therapy: a practical introduction. New York: John Wiley and Sons, 1988. P.2I2.

124. Rozenkranz A.R., Schmaldienst S., Stuhlmeier K.M. et al., A microplate assay for the detection of oxidative products using 2,7-dichlorofluorescein- diacetate. J.Immunol.Methods, 1992, Vol. 156. P. 3945

125. Shugar Y., Som P. An evaluation of the carbon dioxide laser in the treatment of traumatic laryngeal stenosis \\ Laryngoscope.- 1982,- Vol. 92.-N l.-P. 233- 236.

126. Stafford N.J. et al. Role of alexandrite laser removal of tattoos \\ Laser Surg. Med. 1995.- Vol. 17.- P. 32- 38.

127. Stewart R., Benbrahim A. Laser assisted vascular welding with real time temperature control \\ Laser Surg. Med.- 1996.- Vol. 19.- P. 9- 16.

128. Van Gemert M., Welch A. Wavelengths for laser treatment of port wine stains and telangiectasia \\ Laser Surg. Med. 1995.- Vol. 16.- P. 147155.

129. WalzK., Miller B. The C02 laser for myocutaneous flap and removal of tattoos \\ Laser.- Bologna. 1986,- P. 643- 646.

130. Wheeland R. Clinical uses of lasers in dermatology \\ Laser Surg. Med.- 1995,- Vol. 16.-P. 2- 23.

131. Wolf D. Incidence of bacteremia with elective upper gastrointestinal endoscopic laser therapy \\ Gastrointest. Endosc. 1985.-Vol. 31.- N4. - P. 247- 250.

132. Wyman D., Wilson B. Dependence of laser coagulation on interstitial delivery parameters \\ Laser Surg. Med. 1994.- Vol. 14.- P. 59- 64.

133. Yokozawa T.,Kashiwada Y., Hattori M., Chung H.Y., Study on the components of Luobuma with peroxynitrite-scavenging activityA\ 1995, Vol. 148/P.- 178- 182.

134. Yoo Y-Ch. Watanabe R., Koike Y. et al., Apoptosis in human leukemic cells induced by lactoferricin, a bovine milk protein derived peptide: involvement of reactive oxygen species, Biochim.Biophys.Res.Communs, 1997, Vol. 237. P.- 624-628