Комплекс включения дисульфирама с гидроксипропил-бета-циклодекстрином для терапии катаракты тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Тюкова Виктория Сергеевна

• Тюкова Виктория Сергеевна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Тюкова Виктория Сергеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 1. ЦИКЛОДЕКСТРИНЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ

1.1 ИСТОРИЯ ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ

1.2 СТРОЕНИЕ МОЛЕКУЛ ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ

1.3. СВОЙСТВА ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ

1.4. ХИМИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 20 ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ

1.5 ПОЛУЧЕНИЕ КОМПЛЕКСОВ ВКЛЮЧЕНИЯ С 23 ЦИКЛОДЕКСТРИНАМИ

1.6 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КОМПЛЕКСОВ ВКЛЮЧЕНИЯ С 30 ЦИКЛОДЕКСТРИНАМИ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ

1.7 ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДИСУЛЬФИРАМА 3 8 ДЛЯ ТЕРАПИИ КАТАРАКТЫ

1.8 ВЫВОДЫ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.2 ПОЛУЧЕНИЕ КОМПЛЕКСА ВКЛЮЧЕНИЯ ДСФ С ГПВЦД

2.2.1 Получение комплекса включения гетерогенным способом

2.2.2 Получение комплекса включения методом сорас- 43 тирания в пасте

2.2.3. Получение комплекса включения жидкофазным методом

2.2.4 Получение комплекса включения методом сорастворения

2.3 ПОЛУЧЕНИЕ СМЕСИ ДСФ С ГПВЦД

2.4 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.5.1 Растворимость

2.5.2 ЯМР спектроскопия

2.5.3 Метод УФ-спектрофотометрии

2.5.4 Рефрактометрия

2.5.5 Гель-фильтрационная хроматография

2.5.6 Порошковая рентгеновская дифрактометрия

2.5.7 Метод дифференциальной сканирующей калориметрии

2.5.8 Термогравиметрический анализ с последующей регистрацией 56 ИК-спектров смеси выделяющихся газов

2.5.9 Определение размеров ассоциатов молекул

2.5.10 Метод газовой хроматографии

2.5.11 Хромато-масс-спектрометрическое исследование

2.5.12 Стерилизация насыщенным паром 61 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КОМПЛЕКСА 62 ВКЛЮЧЕНИЯ ДСФ с ГЩЦД

3.1 Выбор марки ГПвЦД

3.2 Растворимость комплекса включения ДСФ с ГПЩД в воде 63 и константа стабильности полученного продукта

3.3 Кинетика реакции комплексообразования ДСФ с ГПЩД

3.4 Эффективность образования комплексов включения ДСФ с 69 ГПЩД, полученных различными методами

3.5 Состав комплекса включения ДСФ с ГПЩД 72 и его молекулярная масса

3.6 Результаты исследования методами термического анализа

3.7 Стабильность комплекса включения ДСФ с ГПЩД 92 в условиях стерилизации насыщенным паром под давлением

3.8 Физико-химические свойства комплекса включения 101 ДСФ с ГПЩД

3.9 Исследование терапевтической активности ДСФ 104 в отношении дистрофических изменений сетчатки

и хрусталика глаза на модели крыс линии OXYS

4. РАЗРАБОТКА НОРМ КАЧЕСТВА КОМПЛЕКСА 106 ВКЛЮЧЕНИЯ ДСФ С ГПВЦД

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Комплекс включения дисульфирама с гидроксипропил-бета-циклодекстрином для терапии катаракты»

Актуальность темы исследования

Во всем мире от нарушения зрения вплоть до полной его утраты страдает около 20 млн человек [13, 14, 16, 103, 111]. Снижение остроты зрения наблюдается практически у каждого второго жителя Российской Федерации. На сегодняшний день самым распространенным заболеванием глаз является катаракта - помутнение хрусталика [2]. В Возрасте 70-80 лет катаракта диагностируется у 460 женщин и 260 мужчин из 1000 человек, а в возрасте старше 80 лет - практически у каждого [109]. В последнее время заболевание все чаще выявляется и в более молодом возрасте [13]. Среди граждан России около 1.7 млн человек страдают катарактой. Более 180 тысяч операций в год по удалению катаракты проводится в нашей стране [7, 16]. Чаще всего катаракта развивается в результате возрастных изменений глаз и приводит к существенному ухудшению зрения, иногда до полной его утраты [14]. По результатам анализа данных МСЭК, катаракта находится на первом месте среди заболеваний, ведущих к слепоте в пожилом возрасте (58%) и занимает седьмое место среди заболеваний, приводящих к инвалидности по зрению (12%) [2], по этой причине ВОЗ с каждым годом усиливает меры по борьбе с офтальмологическими заболеваниями [22]. По некоторым прогнозам, не смотря на все усилия офтальмохирургов, количество человек утративших зрение из-за катаракты в мире к 2025 году будет только возрастать и может составить около 40 млн.чел. [16]. Имеющимися на фармацевтическом рынке лекарственными средствами (Офтан-катахром, Квинакс, Витайодурол, Тауфон [127]), а так же использованием хирургических методов по замене хрусталика не всегда возможно добиться полного выздоровления [9, 38, 44]. Поэтому остаётся актуальным создание новых эффективных лекарственных средств для профилактики и лечения катаракты.

Ключевую роль в развитии катаракты играет оксидативный стресс [40, 36, 51] и избыточная генерация свободных радикалов на фоне снижение ферментной антиоксидантной защиты с возрастом, что сопровождается

агрегацией белков хрусталика, нарушением его ионного равновесия и метаболизма [11, 120]. Кислород является необходимым для жизнедеятельности элементом: он необходим для биологического окисления, при котором происходит получение необходимой для человека энергии. Однако в организме возможны самопроизвольные неферментативные реакции, в результате которых молекулярный кислород восстанавливается до свободного радикала [5, 13, 14, 16]. Эти радикалы активного кислорода приводят к разрушению клеточных мембран и вызывают гибель клеток [4]. В тканях глаза наиболее существенным дополнительным фактором, стимулирующим образование свободных радикалов, является свет, в особенности ультрафиолетовая часть спектра в диапазоне 200-300 нм [51, 123]. В результате в хрусталике образуются и накапливаются радикалы кислорода, приводящие к необратимым изменениям белков. Для борьбы со свободными радикалами в организме существует ферментная антиоксидантная защита, активность которой снижается с возрастом. В процессе защиты от свободных радикалов участвуют такие ферменты, как цитохромоксидаза, супероксиддисмутаза, глутатионпероксидаза, каталаза, пероксидаза [14]. Поэтому в качестве действующего вещества в лекарственной форме замедляющей развитие катаракты может использоваться вещество, активирующее эти ферменты.

В работе [60] описано исследование фармакологического эффекта дисульфирама в отношении развития сенильной катаракты на модели крыс Авторы предположили возможный механизм антиоксидантного действия ДСФ и установили, что инсталляция липосом, содержащих дисульфирам, значительно снижает содержание селена и препятствует образованию сенильной катаракты у крыс.

ДСФ легко метаболизируется до нестабильной ББС, которая далее деградирует с образованием Ме-ООС и глюкуроновой кислоты, обладающей антиоксидантными свойствами. Ме-ООС также подвергается окислительной биотрансформации до Ме-ОТС, который окисляется до его соответствующих

сульфоксидных и сульфоновых метаболитов, взаимодействующих с глютатионом и снижающим оксидативный стресс [63].

Таким образом, ДСФ, использующийся в настоящее время для лечения алкоголизма, также является перспективным средством для профилактики и лечения катаракты, поскольку подавляет действие гидроксильных радикалов, супероксидов, пероксинитритов и хелатов ионов металлов, приводящих к разрушению белков хрусталика и, в конечном итоге, к его помутнению [89]. Установлено, что ДСФ активирует антиоксидантную защиту, таким образом, замедляя развитие катаракты [88, 91], ряд лабораторных исследований подтверждает этот факт [88-94]. Использование ДСФ в офтальмологии, в частности для приготовления глазных капель, ограничено из-за его низкой растворимости в воде (4.09 мг/л, при 25о С [128]), поэтому для приготовления лекарственных форм с ДСФ целесообразно использовать различные вещества увеличивающие растворимость.

В фармацевтической промышленности для увеличения растворимости в воде лекарственных веществ широко используются ЦД [68, 70, 71, 74-76, 112, 113, 116]. Благодаря своему строению, ЦД образуют растворимые в воде комплексы включения с лекарственными веществами, что делает возможным разработку новых лекарственных форм на их основе.

Степень разработанности темы исследования. С 2007 по 2012 годы с целью повышения растворимости ДСФ группа ученых Nagai и соавт. предлагают использовать ГПЩД. Получение водорастворимой формы ДСФ показало перспективность его использования в терапии катаракты благодаря его антиоксидантным свойствам. Группа ученых исследует терапевтическую активность ДСФ в глазных каплях на различных биологических моделях и показывает предположительный механизм действия ДСФ на развитие катаракты. Однако, авторы не приводят данных о строении комплекса включения и его физико-химических свойствах, не устанавливают нормы качества полученного продукта.

В работе Кедика С.А. [18] представлен состав глазных капель, содержащих ДСФ с ГПЩД и таурином. Глазные капли получены путем смешения исходных компонентов без выделения комплекса включения в виде стабильного промежуточного продукта. Физико-химические свойства и состав комплекса включения также не были изучены, что может существенно влиять на качество готовой лекарственной формы.

Таким образом, актуальным направлением исследований является получение комплекса включения ДСФ с ГПЩД в виде стабильного промежуточного продукта для получения лекарственной формы для терапии катаракты.

Цель и задачи исследования: Целью работы является получение и исследование комплекса включения ДСФ с ГПЩД для разработки лекарственной формы на его основе. Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие основные задачи:

• Получить комплекс включения ДСФ с ГПЩД;

• Выявить связь между строением и свойствами полученного продукта для подтверждения образования комплекса включения;

• Исследовать физико-химические характеристики комплекса включения ДСФ с ГПЩД;

• Разработать и провести валидацию аналитической методики определения количественного содержания ДСФ в комплексе включения;

• Разработать проект спецификации к протоколу для внутрипроизводственного контроля качества комплекса включения ДСФ с ГПЩД;

• Изучить стабильность в процессе хранения комплекса включения ДСФ с ГПЩД;

• Исследовать терапевтическую активность комплекса включения ДСФ с ГПЩД в отношении дистрофических изменений сетчатки и хрусталика глаза на модели крыс линии ОХУБ.

Решение поставленных задач осуществлялось путем обобщения литературных данных и выполнения экспериментальных исследований. Научная новизна исследования

Разработан новый метод получения комплекса включения ДСФ с ГПЩД и проведена количественная оценка изменения растворимости ДСФ в результате образования комплекса включения. Графическим методом определена константа стабильности полученного комплекса включения и рассчитана энергия активации реакции комплексообразования. Получены параметры уравнения Аррениуса, которые позволяют определить константу скорости реакции образования комплекса включения ДСФ с ГПЩД при любой температуре в рабочем интервале от 20 0С до 60 0С. Впервые установлены мольное соотношение компонентов комплекса включения в полученном продукте и его физико-химические характеристики (растворимость, фазовое состояние, температура термодеструкции). Предложены методы качественного и количественного анализа полученного продукта. Впервые установлены нормы качества комплекса включения ДСФ с ГПЩД. Разработана и проведена валидация методики определения количественного содержания ДСФ в комплексе включения. Обоснован срок годности комплекса включения ДСФ с ГПЩД на основании изучения стабильности в процессе хранения.

Теоретическая значимость диссертационного исследования определяется тем, что представленные экспериментальные данные анализа фазового состояния ДСФ обосновывают связь между строением и свойствами включаемого в комплекс с ГПЩД вещества. Представлена классификация известных способов получения комплексов включения. Отраженный в работе экспериментальный материал может служить теоретической базой для исследования и создания новых комплексов включения, ограниченно

растворимых в воде лекарственных веществ с ГПЩД. Материал диссертационного исследования может быть полезным для использования в курсе лекций по дисциплине «Основы бионанотехнологии», «Физико-химические методы исследования в биотехнологии».

Практическая значимость диссертационного исследования заключается в получении комплекса включения ДСФ с ГПЩД (защищен патентом РФ на изобретение № 2592625), исследована кинетика комплексообразования при различных температурах и подобраны оптимальные условия для получения комплекса включения. Разработан проект спецификации к протоколу для внутрипроизводственного контроля качества комплекса включения ДСФ с ГПЩД. Способ получения комплекса включения ДСФ с ГПЩД защищен патентом РФ на изобретение № 2580567.

Основные положения и результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс кафедры Биотехнологии и промышленной фармации Московского технологического университета Института тонких химических технологий имени М.В. Ломоносова (акт внедрения от 14.05.2018)

Методология и методы исследования. Методологическую основу исследования составили труды зарубежных и российских учёных по получению и исследованию комплексов включения ограниченно растворимых в воде веществ с ЦД.

Для установления состава и подлинности образования комплекса включения в диссертационном исследовании использованы современные физико-химические методы: 1Н ЯМР спектроскопия, УФ-спектрофотометрия, Масс-спектрометрия, рефрактометрия, гель-проникающая хроматография, порошковая рентгеновская дифрактометрия, дифференциальная сканирующая калориметрия, термогравиметрический анализ, метод газовой хроматографии, метод лазерного светорассеяния. Методом УФ-спектрофотометрии установлено количественное содержание ДСФ в фармацевтической субстанции.

Положения, выносимые на защиту:

• Обоснование выбора ГПЩД для получения комплекса включения;

• Кинетические параметры исследования комплекса включения;

• Количественная оценка изменения растворимости ДСФ в воде в результате образования комплекса включения;

• Способ получения комплекса включения ДСФ с ГПЩД;

• Молекулярная масса комплекса включения ДСФ с ГПЩД;

• Результаты исследования физико-химических характеристик полученного продукта;

• Установление норм качества полученного комплекса включения;

• Данные исследования стабильности при хранении комплекса включения ДСФ с ГПЩД

• Результаты исследования терапевтической активности комплекса включения ДСФ с ГПЩД в отношении дистрофических изменений сетчатки и хрусталика глаза на модели крыс линии ОХУБ.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 21 работа, в том числе 7 статей, 4 из которых опубликованы в научных изданиях, входящих в «Перечень ведущих рецензируемых научных журналов», рекомендуемых ВАК РФ. Получено 2 патента на изобретение «Способ получения комплекса включения дисульфирама с циклодекстрином» №2015103464, «Комплекс включения дисульфирама с циклодекстрином» №2592625.

Степень достоверности результатов. В диссертационной работе использованы современное сертифицированное оборудование, комплекс современных физико-химических методов исследования. Для получения достоверных статистически сходимых результатов соблюдены правила повторности экспериментов. Методами статистической обработки

установлена воспроизводимость и правильность результатов исследований. Сравнение полученных результатов с применением методов статистической обработки позволяет считать их достоверными. Результаты, полученные различными независимыми методами, хорошо согласуются между собой и взаимно дополняют друг друга.

Апробация результатов. Основные материалы диссертационной работы доложены на:

XIV и XV ежегодных международных молодежных конференциях ИБХФ РАН-ВУЗЫ "Биохимическая физика", Москва, 2014 г. и 2015 г.; XIV международной научно-практической конференции «Теоретические и практические аспекты развития современной науки» Москва, 2014 г.; Международной конференции «Nanotechnologies and nanomaterials in the contemporary world», Moscow, 2014 г; VIII и XIV международных научно-практических конференциях: «Современные концепции научных исследований», Москва, 2014 г и 2015 г; Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицины в России и за рубежом», Новосибирск, 2015 г; VI ежегодной Международной научной Интернет - конференции «Медицина в XXI веке: тенденции и перспективы», 2015 г; X Всероссийской конференции «Химия и медицина» Уфа, 2015; 10th International scientific conference, Munich 2015; The Seventh European Conference on Biology and Medical Sciences, Vienna, 2015; V международной научно-практической конференции, Москва, 2015 г.; Всероссийской молодежной конференции с международным участием, Москва, 2015 г.; II-й Международном молодежном конкурсе, Липецк, 2015.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертации соответствуют паспорту научной специальности 14.04.02 - «Фармацевтическая химия, фармакогнозия». Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 1, 2 и 3 паспорта специальности «фармацевтическая химия, фармакогнозия».

Связь задач исследования с планом НИР учреждения, где выполнялась диссертационная работа. Диссертационная работа выполнена в рамках инициативной НИР кафедры Биотехнологии и промышленной фармации Федерального государственного бюджетного образовательного учреждение высшего образования «Московский технологический университет» (ИТХТ им. М.В. Ломоносова).

Личный вклад автора. Автор принимал непосредственное участие в разработке и обсуждении основных идей диссертации, а также анализе экспериментальных результатов. Самостоятельно провел обзор и анализ литературы (в том числе, анализ требований нормативной документации, регламентирующей критерии, предъявляемые к разработке методов контроля качества лекарственных средств), а также выполнил основной объем экспериментальных исследований, включая разработку методик контроля качества комплекса включения ДСФ с ГПЩД. Диссертантом полностью выполнено оформление результатов диссертации в виде публикаций, научных докладов и рукописи диссертации.

Объём и структура диссертационной работы. Диссертационная работа изложена на 143 страницах машинописного текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, четырех глав экспериментальных исследований, общих выводов, списка литературы и приложений. Работа содержит 25 таблиц и 52 рисунка. Список литературы включает 126 источников, из них 99 на иностранных языках.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 1. ЦИКЛОДЕКСТРИНЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ

1.1 ИСТОРИЯ ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ

История ЦД начинается еще в XIX веке c работ французского ученого Виллерса (Villers), который изучал действие ферментов на различные углеводы [42]. В 1891 г Виллерс показал возможность получения из крахмала нового углевода, который он назвал «целлюлозином», используя при этом для ферментативного брожения штамм бактерий Bacilus amylobacter. Также Виллерс описал химический состав нового углевода и представил его простейшую формулу (СбН1005)2"3Н20.

В 1903 г. австрийский микробиолог Шардингер (Schardinger), известный как "отец-основатель" химии декстринов, выделил два кристаллических продукта (А и В), похожих на «целлюлозин» Виллерса, которые он назвал а-декстрин и ß-декстрин [85, 114]. В 1904 г. Шардингер выделил штамм микроорганизмов Bacillus macerans [25], устойчивый к высокой температуре, с помощью которого стало возможно получать из крахмала больше декстринов (25-30%) [45, 85]. На сегодняшний день для производства ЦД наиболее часто используемым источником фермента остаются бактерии штамма Bacillus macerans. В 1911 г. Шардингер подробно описал метод получения, разделения и очистки декстринов. Он первым изучил и описал основные свойства декстринов, а также открыл способность декстринов к образованию комплексов с органическими молекулами. Несмотря на то, что ему так и не удалось установить структуру декстринов, он и предположил, что они являются циклическими полисахаридами [45].

Фройденберг (Freudenberg) вместе с коллегами в 30-е годы XX века пришли к выводу, что декстрины Шардингера состоят из звеньев глюкозы,

объединенных а-(1,4) гликозидной связью [114] и в 1936 г. подтвердили предположение Шардингера о циклической структуре декстринов [114].

C начала 50-х годов XX века две группы ученых во главе c Френчем (French) и Крамером (Cramer) начали интенсивную работу по получению ЦД ферментативным способом, а также работы по выделению, очистке и исследованию физических и химических свойств природных ЦД [114]. Исследовательской группе во главе с Френчем удалось выделить ЦД, содержащие восемь и более глюкопиранозных звеньев и они уделили большое внимание исследованию полученных продуктов [57]. В это время исследования группы ученых во главе с Крамером в основном были направлены на получение молекулярных комплексов включения и исследование свойств этих комплексов [53, 67, 114]. В современной терминологии супрамолекулярной химии такие молекулярные комплексы

(рис.1) называют «кавитаты» [20].

+ _

в>

Рисунок 1. Молекулярное включение по типу гость-хозяин

В 1953 г. Фройденберг, Крамер и Плиенингер (Plieninger) получили патент [112], в котором они описали практически все наиболее важные аспекты применения ЦД в лекарственных формах. На нескольких примерах они описали способность ЦД увеличивать стабильность при хранении легко окисляющихся лекарственных веществ, увеличение растворимости в воде ограниченно растворимых лекарственных веществ, а также снижение потерь легко летучих веществ в результате комплексообразования с ЦД [114]. Первый фундаментальный обзор, посвященный ЦД, был опубликован в

1957 г. За ним последовали монография Тома (Thoma) и Стеварта (Stewart) в 1965 г. и Цезаря (Caesar) в 1968 г [114].

В б0-е годы XX века группой ученых во главе с Френчем проведено исследование токсичности ЦД на крысах [114], которое сделало невозможным использования ЦД для человека на протяжении последующих 25 лет, поскольку результаты этого исследования были неудовлетворительными. Стоит отметить, что на сегодняшний день эти результаты ставятся под сомнение, поскольку нет достоверной информации о химической чистоте используемых в данном исследовании ЦД, о наличие контрольной группы животных и об использованных дозировках ЦД. Тем не менее, использования ЦД в фармацевтической практике для получения лекарственных средств было приостановлено до появления обнадеживающих результатов токсикологических исследований ЦД, с появлением которых в конце 70-х годов снова возрос большой научный интерес к ЦД [114].

1.2 СТРОЕНИЕ МОЛЕКУЛ ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ

ЦД представляют собой макроциклические олигосахариды, состоящие из шести (а-), семи (ß-), восьми (у-) и более глюкопиранозных звеньев, связанных а-(1,4) гликозидной связью [33, 43, 85]. Поскольку все глюкопиранозные звенья имеют конформацию «кресло» и благодаря отсутствует свободного вращения связей между звеньями, молекула ЦД имеет форму усеченного конуса или тора [97], по нижнему и верхнему ободу которого расположены гидроксильные группы (рис.2).

но он

П I.OII

Рисунок 2. Схематическое изображение молекулы а-ЦД

Вторичные гидроксильные группы молекулы ЦД расположены на ее широком ободе и направлены в одну сторону, а первичные гидроксильные группы расположены на противоположном ободе молекулы ЦД и направлены в другую сторону [33, 43, 74, 85, 114]. Неполярные атомы водорода расположены во внутренней поверхности торо-подобной молекулы и образуют подобие пояса [85, 114]. Не поделенные пары электронов кислородных мостиков гликозидной связи также направлены во внутреннюю полость молекулы ЦД, создавая, таким образом, высокую электронную плотность и придавая молекуле свойства основания Льюиса [114]. Внутри молекулы ЦД гидроксильных групп нет, поэтому внутренняя полость является гидрофобной, а внешняя оболочка - гидрофильной (рис.3), что позволяет молекуле растворяться в воде, таким образом формируется подобие «микро гетерогенной среды» [81]. Гидроксильные группы, расположенные при С2 одного глюкопиранозного звена молекулы ЦД и при С3 соседнего глюкопиранозного звена, могут образовывать водородные связи [114], что также придает жесткость структуре и прочность кристаллической решетке [79].

Молекул ЦД с менее чем шестью звеньями глюкопиранозы не существует из-за стерического фактора и напряженности в кольце молекул ЦД [33, 114], в то время как имеются данные о существовании молекул с девятью (ё-), десятью (е-), одиннадцатью (!-), двенадцатью и

тринадцатью звеньями, которые предположительно имеют высокую растворимость в воде [97, 114]. Однако, увеличение диаметра внутренней полости тора молекулы ЦД приводит к увеличению количества связанной воды, что снижает выигрыш в энергии в результате комплексообразования, поэтому ЦД с большим содержанием глюкопиранозных звеньев имеют низкую комплексообразующую способность и на практике не используются

[114].

Также существуют разветвленные ЦД, образующиеся из амилопектина, одного из основных полисахаридов крахмала, который состоит из

разветвленных цепочек молекул глюкозы, связанных а-(1,4) и а-(1,6) гликозидными связями [114]. На рис. 4 изображены примеры таких разветвленных в-ЦД. Стоит отметить, что растворимость в воде таких разветвленных молекул значительно выше растворимости самого в-ЦД. Как правило содержание таких разветвленных ЦД при производстве в-ЦД не превышает 4%, однако выделение этих примесных соединений является достаточно кропотливым и дорогостоящим процессом [114].

1.3 СВОЙСТВА ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ

ЦД не растворимы в большинстве органических растворителей [70]. Молекулы ЦД не содержат восстанавливающих концевых групп [70, 114], гликозидные связи достаточно стабильны даже к воздействию высоких температур и щелочному гидролизу [70]. Под действием сильных кислот, таких как соляная и серная, происходит гидролиз ЦД с образованием смеси различных ациклических олигосахаридов или глюкозы [114]. С увеличением температуры скорость кислотного гидролиза возрастает [81]. ЦД более устойчивы к кислотному гидролизу по сравнению с линейными углеводами, причем гидролиз с раскрытием кольца происходит быстрее с увеличением диаметра внутренней полости ЦД [70, 81]. ЦД дают цветную реакцию с антроном, которая может быть использования для их количественного определения. 1% водные растворы ЦД должны быть прозрачны, бесцветны, рН растворов должно быть в нейтральной области. Для оценки чистоты ЦД может определяться показатель преломления (п|,0) насыщенного раствора ЦД. Так, показатель преломления насыщенного раствора в-ЦД составляет 1.33506 [114].

ЦД можно разделить на две группы: природные и химически модифицированные ЦД [114].

Природные ЦД, полученные ферментативным путем из крахмала, представляют собой белые кристаллические, негидроскопичные порошки, с температурой термодеструкции выше 200 С, которые могут образовывать

стабильные гидраты [114]. По результатам дифференциального термического анализа на термограммах предварительно высушенных образцов а-ЦД и у-ЦД присутствуют экзотермические пики при температуре 167 С и 152 С соответственно [114], что может свидетельствовать о некоторых структурных превращениях, в то время как на термограмме в-ЦД экзотермический пик в указанном диапазоне температур отсутствует. Также на термограммах предварительно высушенных образцов а-ЦД и в-ЦД наблюдаются небольшие эндотермические эффекты при 230 С и 225 С [48, 114], которые могут вызываться изменением кристаллической структуры, плавлением образцов. Поскольку ЦД представляют собой гидраты, при термическом анализе образцов, не подвергшихся предварительной сушке, на термограммах наблюдается широкий эндотермический пик, свидетельствующий испарению воды. Причем, для в-ЦД и у-ЦД такой эндотермический пик находится в диапазоне от 30 С до 50 С, а для а-ЦД наблюдается сразу несколько таких пиков при 80 С, 106 С и 129 С, характеризующих абсорбированную и связанную воду, имеющих различные энергии высвобождения [114].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Тюкова Виктория Сергеевна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Астахова А.В. Современные технологии лекарственных форм: получение, исследование и применение комплексов включения лекарственных веществ с циклодекстринами (обзор) / А.В.Астахова, Н.Б.Демина // Химико-фармацевтический журнал. -2004. - Т.38, №2. - C.46-49.

2. Бранчевский С.А. Распространенность нарушения зрения вследствие катаракты по данным исследования RAAB в Самаре/ Бранчевский С.Л., Малюгин Б.Э. // Офтальмология. -2013. - №3. - С. 82-85

3. Патент РФ на изобретение №2111216. Комплекс включения n-этоксикарбонил-3-морфолинсиднонимина или его соли с циклодекстрином или производным циклодекстрина, способ получения этого комплекса включения, фармацевтические композиции и способ их получения, способ лечения / Викмон М., Сейтли Й., Гаал Й., Хермец И., Хорват А., Мармароши К., Хорват Г., Мункачи И.; заявитель и патентообладатель Терабель Эндюстри С.А. -заявл. 03. 28.91; опубл. 20.05.98.

4. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И. // Соросовский образовательный журнал. - 2000. - Т. 6. - №12. - С.13-19

5. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран // Биофизика. - 1987. - Т. 32, - № 5. - С. 830-844

6. Патент РФ на изобретение №2464042. Клатратный комплекс ß-циклодекстрина с производным 5-гидрокси-4-аминометил-1-циклогексил (или циклогептил)-3-алкоксикарбонилиндола, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство / Воробьёв И.В., Хомиченок В.В., Подгородниченко В.К., Цыб А.Ф., Розиев Р.А., Гончарова А.Я.; заявитель и патентообладатель ООО «Научно-

исследовательская компания «Медбиофарм» - N 2011112073/04; заявл. 03. 31.11; опубл. 20.10.12, Бюл. N 29.

7. Ворошилов С.Н. Формирование стратегии продаж хирургических услуг путем привлечения пациентов на оперативное лечение катаракты на ранних стадиях. / Ворошилов С.Н., Бранчевский С.Л. // Современные тенденции развития науки и технологий. - 2016. - № 4/7.- С. 78-83

8. Патент РФ на изобретение №2129564. Комплексы включения солей нимезулида с циклодекстринами, способ их получения и фармацевтический препарат, обладающий противовоспалительным и аналгезирующим действием / Геци Ж.; заявитель и патентообладатель Юэрофармасетикалс С.А., Сайклолаб Лтд. - заявл. 05. 18.94; опубл. 27.04.99.

9. Гобеджишвили М.В. Макулярный отек при псевдофакии / Гобеджишвили М.В., Астахов С.Ю., Куглеев А.А. // Офтальмологические ведомости. - 2011. -Т. IV. - №4.- С.57-59

10. Патент ЕС на изобретение №020784. Комплекс включения пиноцембрина с циклодекстрином, способ его получения и применения / Гуаньхуа Д., Сун У, Янь Ц., Мэй Г., Циньгунь Я., Хунмей Г., Вэй Л., Юэхуа В., Юаньфэн Т.; заявитель и патентообладатель СиЭсПиСи ЧЖУНЦИ ФАРМАСЬЮТИКЛ ТЕКНОЛОДЖИ (ШИЦЯЧЖУАН) КО., ЛТД.; ИНСТИТЬЮТ ОВ МЭТИРИЭ МЕДИКЭ, ЧАЙНИЗ ЭКЭДЭМИ ОВ МЕДИКЛ САЙЭНСИЗ - N 054507/2010; заявл. 11.11.08; опубл. 31.10.11.

11. Капустин М.А. Получение и свойства комплексов включения циклодекстрина с диметиловым эфиром фталиевой кислоты / М.А.Капустин, Н.В.Гавриленко, В.П.Курченко // Труды БГУ. - 2011. - Т. 6, - ч. 2. - C. 127129.

12. Колесников А.В. Подбор эффективной антиоксидантной дозы ионола для ткани хрусталика при местном инстилляционном введении его масляного раствора // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова. - 2006. - С. 1-5

13. Колосова Н.Г. Преждевременно стареющие крысы охуБ как модель сенильной катаракты человека. Колосова Н.Г., Лебедев П.А., Фурсова А.Ж., Мороскова Т.С., Гусаревич О.Г. / Успехи геронтологии. - 2003. - В. 12.- С. 143-148

14. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация молекул: польза, вред и защита. // Соросовский образовательный журнал. -1999. - №1. - С.2-7

15. Либман Е.С. Слепота и инвалидность вследствие патологии органа зрения в России / Либман Е.С. Шахова Е.В. // Вестник офтальмологии.-2006.- № 1.- С. 35-37

16. Малюгин Б.Э. Хирургия катаракты и интраокулярная коррекция афакии: достижения, проблемы и перспективы развития// Вестник офтальмологии. - 2006.- №1. - С. 37-41

17. Патент РФ на изобретение №2108109. Способ получения комплекса силибинина с циклодекстрином, комплекс включения силибинина с циклодекстрином, фармацевтическая композиция антигепатотоксической активности и способ ее получения / Монтероссо В., Валкави У., Капони Р., Бозоне Э., Вахтер В.П., Сейтли Й.; заявитель и патентообладатель Мадаус АГ - заявл. 03. 28.91, опубл. 10.04.98.

18. Патент РФ на изобретение №2485939. Офтальмологический препарат в виде глазных капель, содержащий дисульфирам и таурин / Кедик С. А., Ярцев Е.И., Панов А.В., Суслов В.В., Сакаева И.В.; заявитель и патентообладатель Кедик С.А. - №2012125357/15; заявл. 06. 19.2012; опубл. 27.06.2013.

19. Скулачев В.П. Кислород в живой клетке: Добро и зло // Соросовский Образовательный Журнал. - 1996. - № 3. - С. 4-10

20. Стид Дж.В. Супрамолекулярная химия. Пер. с англ.: в 2 т. / Дж.В.Стид, Дж.Л.Этвуд. // Издательство Москва: ИКЦ Академкнига. - 2007. - Т.1. - 480 с.

21. Пат. 2339649 РФ, С08В 37/16. Комплекс включения циклодекстрина с уксусной кислотой / Усанов Н.Г., Гильванова Е.А.; заявитель и патентообладатель Институт биологии Уфимского научного центра

Российской Академии Наук - N 2007110777/04; заявл. 03.23.07; опубл. 27.11.08, Бюл. N 33.

22. Фадеева ДА. Токсикологическое исследование новых антикатарактальных капель. / Фадеева Д.А., Халикова М.А., Жилякова Е.Т., Новиков О.О., Покровский М.В., Новикова М.Ю., Попов И.И. // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация. - №10 (81). - В.10 .- 2010. - С. 93-96

23. Патент РФ на изобретение №2213343. Комплекс включения s-омепразола (эсомепразола) с циклодекстрином / Хамид Ю.Х., Рао Д.Р; заявитель и патентообладатель СИПЛА ЛИМИТЕД. - N 20003137221/15; заявл. 06.06.02; опубл. 27.12.07, Бюл. N 36. - 7 с.

24. Шагина С.Е. Создание комплексов включений циклодекстринов на основе бета-специфичнойциклодекстринглюканотрансферазы: автореф. дис. канд. техн. Наук: 03.00.04 / Шагина Светлана Евгеньевна. - Москва. - 2008. -с. 26

25. Шагина С.Е. Поиск новых продуцентов в-циклодекстринглюканотрансферазы / С.Е.Шагина, Л.И.Войно // Естественные и технические науки. -2008. -Т.33, №1. - С. 318-320.

26. Baboota S. Cyclodextrins in Drug Delivery Systems: An update / S.Baboota, R.Khanna, S.P.Agarwal // Pharmaceutical Information. -2003. - Т.58. -P.73-74.

27. Bary A.R. Considerations in the use of hydroxypropyl-beta-cyclodextrin in the formulation of aqueous ophthalmic solutions of hydrocortisone / A.R.Bary, I.G.Tucker, N.M.Davies // Eur. J. Pharm Biopharm. -2000. -Т.50, №2. -Р.237-244.

28. Baudin C. Inclusion of organic pollutants in cyclodextrin and derivatives / C.Baudin, C.Pean, B.Perly, P.Goselin, // Int. J. Environ. Anal. Chem. -2000. -Т.77. -Р.233-242.

29. Belyakova L.A. Complexation in a в-cyclodextrin-salicylic acid system / L.A.Belyakova, A.M.Varvarin, D.Yu.Lyashenko, O.V.Khora, E.I.Oranskaya // Colloid Journal. -2007. -Т.69, №5. -Р.546-551.

30. Beraldo H. An effective anticonvulsant prepared following a host-guest strategy that uses hydroxypropyl-beta-cyclodextrin and benzaldehyde semicarbazone / H.Beraldo, R.D.Sinisterra, L.R.Vieira, M.C.Doretto // Biochem Biophys Res Commun. -2002. -T.296. -P.241-246.

31. Berg H. Residual neuromuscular block is a risk factor for postoperative pulmonary complications: a prospective, randomised, and blinded study of postoperative pulmonary complications after atracurium, vecuronium and pancuronium / H.Berg, J.Roed, J.Viby-Mogensen, C.R.Mortensen, J.Engbaek, L.T.Skovgaard, J.J.Krintel // Acta Anaesthesiol. Scand. -1997. -T.41. -P.1095-1103.

32. Berzas Nevado J.J. Spectrofluorometric study of the P-cyclodextrin: vitamin K3 complex and determination of vitamin K3 / J.J.Berzas Nevado, J.A.Murillo Pulgarin, M.A.Gomez Laguna // Talanta. -2001. -T.53. -P.951-959.

33. Bilensoy E. Cyclodextrins in pharmaceutics, cosmetics and biomedicine. Current and future industrial applications. / Bilensoy E., Hoboken, New Jersey: John Wiley and Sons. - 2011. -395 p.

34. Bounaceur A. Study of the maturation of a Ketoprofen/p-cyclodextrin complex / A.Bounaceur, E.Rodier // Journal of Pharmaceutical Science and Technology. -2010. -T.2, N.3. -P.171-183.

35. Bozkir A. Effect of hydroxypropil-P-cyclpdextrin on the solubility, stability and in vitro release of ciprofloxacin for ocular drug delivery / A.Bozkir, Z.Denli // Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug research. -2012. -T.69, N.4. -P.719-724.

36. Brennan LA. Mitochondrial function and redox control in the aging eye: role of MsrA and other repair systems in cataract and macular degenerations/ Brennan LA, Kantorow M // Exp Eye Res. - 2009. - V. 88. - P.195-203

37. Brewster M.E. Cyclodextrins as pharmaceutical solubilizers / M.E.Brewster, T.Loftsson // Advanced Drug Delivery Reviews. -2007. -T.59, N.7. -P.645-666.

38. Brian G. Cataract blindness — challenges for the 21st century / Brian G., Taylor H. // Bull. Wld Hlth Org. - 2001. - Vol. 79 (3). - P. 249-256

39. Castronuovo G. Thermodynamics of inclusion complexes of natural and modified cyclodextrins with acetylsalicylic acid and ibuprofen in aqueous solution at 298 K / G.Castronuovo, M.Niccoli // Thermochimica Acta. -2013. -T.557. -P.44- 49.

40. Challa R. Cyclodextrins in drug delivery: an update review / R.Challa, A.Ahuja, J.Ali // Pharmaceutical Science Technology. -2005. -T.6, N.2. -P.329-357.

41. Chan AW. Synergistic effect of osmotic and oxidative stress in slow-developing cataract formation / Chan AW, Ho YS, Chung SK, Chung SS // Exp Eye Res. - 2008. - V. 87.-P. 454-461

42. Chen Z. High-Throughput Phase-Distribution Method to Determine Drug-Cyclodextrin Binding Constants / Z.Chen, D.Lu, S.G.J.Weber // Pharmaceutical Sci. -2008. -T.98, N.1. -P.229-238.

43. Dodziuk H. Cyclodextrins and their complexes. / H.Dodziuk. - Wheinheim: Wiley-VCH Verlag GmbH and Co. - 2006. -489 p.

44. Dong L. M. Progression of age-related macular degeneration after cataract surgery / Dong L. M., Stark W. J., Jefferys J. L. // Arch. Ophthalmol. - 2009. - Vol. 127 (11). - P. 1412-1419

45. Eastburn SD. Applications of modified cyclodextrins / Eastburn SD, Tao BY.// Biotechnol Adv. - 1994. - V. 12 (2). - P.325-339.

46. Felton Linda A. Experimental and Computational Studies of Physicochemical Properties Influence NSAID-Cyclodextrin Complexation. / Linda A. Felton, Carmen Popescu, Cody Wiley, Emilio Xavier Esposito, Philippe Lefevre, Anton J. Hopfinger // AAPS PharmSciTech. - 2014. - 15(4). - P. 872881.

47. Evaluation of Certain Food Additives and Contaminants // WHO Technical Report Series. -2002. -T.909. -P.41-42.

48. Fromming K-H. Cyclodextrins in Pharmacy. / K-H.Fromming, J.Szejtli. Dordrecht: Kluwer Academic Publishers, 1993. - P.225

49. Gossop M. Disulfiram, Cocaine, and Alcohol: Two Outcomes for the Price of One?/ Gossop M., Carroll K. // Alcohol & Alcoholism. - 2006. - V.41.- P. 119-120

50. Gudmundsdottir E. Methazolamide 1% in cyclodextrin solution lowers IOP in ocular hypertensive humans / E.Gudmundsdottir, E.Stefansson, G.Bjarnadottir, J.F.Sigurjonsdottir, G.Gudmundsdottir, M.Masson, T.Loftsson // Inv. Ophthalmol. Vis. Sci. -2000. -T.41, N.11. -P.3552-3554.

51. Gupta SK. Advances in pharmacological strategies for the prevention of cataract development / Gupta SK, Selvan VK, Agrawal SS., Saxena R. // Indian J Ophthalmol. - 2009. - V. 57. -P. 175-183

52. Hafner V. Pharmacokinetics of Sulfobutylether-Beta-Cyclodextrin and Voriconazole in Patients with End-Stage Renal Failure during Treatment with Two Hemodialysis Systems and Hemodiafiltration / V.Hafner, D.Czock, J.Burhenne, K-D.Riedel, J.Bommer, G.Mikus, C.Machleidt, T.Weinreich, W.E.Haefeli1 // Antimicrobial agents and chemotherapy. -2010. -T.54, N.6. -P.2596-2602.

53. Hedges R.A. Industrial applications of cyclodextrins / R.A.Hedges // Chem. Rev. -1998. -T.98. -P.2035-2044.

54. Helge Kragh. From disulfiram to antabuse: The invention of a drug // Bull. Hist. Chem. - 2008. - V. 33. - N. 2. - P. 82-88

55. Helge Kragh E. E. Effects of Alcohol on Workers with Carbon Disulfide / Helge Kragh E. E., Williams" J. // Am. Med. Assoc. - 1937. - V. 109.- P. 14721473

56. Higuchi T, Kristiansen H. Binding specificity between small organic solutes in aqueous solution: Classification of some solutes into two groups according to binding tendencies. J Pharm Sci. 1970;59:1601-1608.

57. Pat. 55480 JP. Hirose T. Preparation containing cyclo-olefin polymer compositions and their molding with excellent antimicrobial and gas barrier properties / Hirose T, Yamamoto Y., Hinokito I. - 2001.

58. Holvoet C, Heyden YV, Plaizier-Vercammen J. Inclusion complexation of lorazepam with different cyclodextrins suitable for parenteral use / Holvoet C,

Heyden YV, Plaizier-Vercammen J. // Drug Dev Ind Pharm. - 2005. - V.31.- P. 567-575

59. Hussein K. Comparative Evaluation of Ibuprofen/p-Cyclodextrin Complexes Obtained by Supercritical Carbon Dioxide and Other Conventional Methods / K.Hussein, M.Turk, M.A.Wahl // Pharmaceutical Research. -2007. -T.24, N.3. -P.585-592.

60. Ito Y. Correlation between prevention of cataract development by disulfiram and fates of selenium in selenite-treated rats / Ito Y., Cai H., Koizumi Y., Nakao M., Terao M. // Current eye Research. - 1999. - V. 18(4).- P.292-299

61. Jansen T. Beta-cyclodextrins as vehicles in eye-drop formulation: an evaluation of their effects on rabbit corneal epiteliumn / T.Jansen, B.Xhonneux, J.Mesens, M.Borgers // Lens Eye Toxicity Res. -1990. -T.7. -P.459-468.

62. Jerson Laks. Disulfiram Efficacy in the Treatment of Alcohol Dependence: A Meta-Analysis / Jerson Laks. Marilyn D. Skinner, Pierre Lahmek, Heloise Pham, Henri-Jean Aubin // PLoS One. - V. 9(2): - 2014. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3919718/

63. Johansson B. A review of the pharmacokinetics and pharmacodynamics of disulfiram and its metabolites // Acta Psychiatrica Scandinavica. Supplementum. -1992. - V. 369.- P.15-26

64. Kacso I. Inclusion compound of vitamin B13 in b-Cyclodextrin / I.Kacso, G.Borodi, S.I.Farcas, I.Bratu // J. Phys.: Conference Series 182. -2009. doi:10.1088/1742-6596/182/1/012009

65. Kikuchi K. Improvement of oral and rectal bioavailabilities of carmofur by methylated-P-cyclodextrin complexation / K.Kikuchi, F.Hirayama // International Journal of Pharmaceutics. -1997. -T.39. -P.191-198.

66. Knights Harry D. J. A Critical Review of the Evidence Concerning the HIV Latency Reversing Effect of Disulfiram, the Possible Explanations for Its Inability to Reduce the Size of the Latent Reservoir In Vivo, and the Caveats Associated with Its Use in Practice // AIDS Research and Treatment. - 2017. - V. 2017. https://doi.org/10.1155/2017/8239428

67. Koukiekolo R. Mechanism of porcine pancreatic alpha-amylase inhibition of amylose and maltopentaose hydrolysis by alpha-, beta- and gammacyclodextrins / R.Koukiekolo, V.Desseaux, Y.Moreau, M.G.Marchis, M.Santimone // Eur. J. Biochem. -2001. -T.268. -P.841-848.

68. Krzysztof C. Use of cyclodextrins in topical formulations: Practical aspects / C.Krzysztof, K.Centkowska // European Journal of Pharmaceutical and Biopharmaceutics. -2008. -T.68. -P.467-478.

69. Kumar R. Biotransformation of cholesterol using Lactobacillus bulgaricus in glucose controlled bioreactor / R.Kumar, J.S.Dahiya, D.Singh, P.Nigam // Bioresour. Technol. -2001. -T.28. -P.209-211.

70. Kumar Das S. Cycljdextrins - the molecular container / S.Kumar Das, R.Rajabalaya, S.David, N.Gani, J.Khanam, A.Nanda // RJPBCS. -2013. -T.4, N.2. -P.1694-1720.

71. Kurkov S.V. The Effect of Parenterally Administered Cyclodextrins on the Pharmacokinetics of Coadministered Drugs / S.V.Kurkov, D.E.Madden, D.Carr, T.Loftsson // Journal of Pharmaceutical Sciences. -2012. DOI 10.1002/jps.23329

72. Leng W. Chitosan and Randomly Methylated P-cyclodextrin Combined to Enhance the Absorption and Elevate the Bioavailability of Estradiol Intranasally: in situ and in vivo Studies / W.Leng, L.Qin, X.Tang // The Journal of American Science. -2006. -T.2, N.1. -P.61-66.

73. Pat. 5472954 A US. Cyclodextrin complexation / LoftssonT.; assignee Cyclops H.F. - № 240510/08; filed 07.14.1992; publication 05.12.1995.

74. Loftsson T. Cyclodextrins and their pharmaceutical applications / T.Loftsson, D.Ducheneb // International Journal of Pharmaceutics. -2007. -T.329, N.1-2. -P.1-11.

75. Loftsson T. Cyclodextrins in drug delivery / T.Loftsson, P.Jarho, M.Masson, T.Jarvinen// Expert Opinion on Drug Delivery. -2005. -T.2, N.2. -P.335-351.

76. Loftsson T. Evaluation of cyclodextrin solubilization of drugs. / Loftsson T, Hereinsdottir D, Masson M. // Int J Pharm. - 2005. - V.302.- P.18-28

77. Pat. 6699849 US. Cyclodextrin complexes of benzodiazepines / LoftssonT., Masson M., Stefansson E.; assigneeCyclps, ehf - № 09/250185; filed 02.16.1999; publication 02.03.2004.

78. Loftsson T. The effects of cyclodextrins on topical delivery of hydrocortisone: the aqueous diffusion layer / T.Loftsson, S.D.Sigfusson, H.H.Sigurdsson, M.Masson// STP Pharma Sci. -2003. -T.13. -P.125-131.

79. Loftsson T. Cyclodextrin enhanced topical delivery of corticosteroids to the eye / T.Loftsson, E.Stefansson// Acta Ophthalmol. Scand. -2002. -T.80. -P.144-150.

80. Loftsson t, brewster me. Pharmaceutical applications of cyclodextrins. 1. Drug solubilization and stabilization. J. Pharm. Sci. (1996) 85:1017-1025.

81. Lu X. Chiral separation of amino acids derivatized with fluoresceine-5-isothiocyanate by capillary electrophoresis and laserinduced fluorescence detection using mixed selectors of beta-cyclodextrin and sodium taurocholate / X.Lu, Y.Chen // J. Chromatogr. A. -2002. -T.955. -P.133-140.

82. Magnusdottir A. Cyclodextrins. / Magnusdottir A., Masson M. , Loftsson T// J. Incl. Phenom. Macroc Chem. - 2002. - V. 44. P. 213-218.

83. Malaekeh-Nikouei B. The effect of cyclodextrin mixtures on aqueous solubility of beclomethasone dipropionate / B.Malaekeh-Nikouei, S.A.S.Tabassi, G.Gerayeli, M.A.Salmani, A.Gholamzadeh // Journal of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry. -2012. -T.72, N.3. -P.383-387.

84. von Mach M.A. Accumulation of the solvent vehicle sulphobutylether beta cyclodextrin sodium in critically ill patients treated with intravenous voriconazole under renal replacement therapy / M.A.von Mach, J.Burhenne, L.S.Weilemann // BMC Clin. Pharmacol. -2006. - V. -6 (6) - doi:10.1186/1472-6904-6-6

85. Martin Del Valle E.M. Cyclodextrins and their uses: a review / E.M.Martin Del Valle // Process Biochemestry. -2004. - V.39, - N.9. -P.1033-1046.

86. Masson M. Complexation of drug compounds with ionic and ionic cyclodextrins / M.Masson, T.Loftsson, H.Fridriksdottir, D.S.Petersen// Proceedings of the 8th International Cyclodextrins Symposium. -1996.- P.365-368.

87. Matsuda H. Cyclodextrins in transdermal and rectal delivery / H.Matsuda, H.Arima // Adv. Drug Deliv. Rev. -1999. -T.36, N.1. -P.81-99.

88. Nagai N. Delay in ICR/f rat lens opacification by the instillation of eye drops containing disulfiram and hydroxypropyl-b-cyclodextrin inclusion complex / Nagai N., Takeda M., Ito Y., Takeuchi N., Kamei A. // Biol. Pharm. Bull. - V. 30(8). -2007. - P.1529—1534

89. Nagai N. Effect of Disulfiram Eye Drops on Lipid Peroxide Formation via Excessive Nitric Oxide in Lenses of Hereditary Cataract ICR/f Rats/ Nagai N., Ito Y., Takeuchi N. // Biol. Pharm. Bull. - V. 31(5). - 2008. - P.981—985

90. Nagai N. Preparation of ophthalmic formulations containing cilostazol as an anti-glaukoma agent and improvement in its permeability through the rabbit cornea / N.Nagai, Y.Ito, N.Okamoto // J. Oleo Science. -2010. -V.59, - N.8. -P.423-430.

91. Nagai N. Correlation between hyper-sensitivity to hydrogen peroxide and

2+

low defense against Ca influx in cataractogenic lens of Ihara cataract rats / Nagai N., Ito Y., Takeuchi N. // Biol. Pharm. Bull. - 2011. - V. 34(7). - P. 1005—1010

92. Nagai N. Pharmacokinetic and Pharmacodynamic evalution of the anti-cataract effect of drops containing Disulfiram and low-substituted methylcellulose using ICR/f rats as a hereditary cataract model / N.Nagai, Y.Ito, N.Takeuchi// Biol. Pharm. Bull. -2012. -T.35, N.2/ -P.239-245.

93. Nagai N. A nanoparticle formulation of disulfiram prolongs corneal residence time of the drug and reduces intraocular pressure / Nagai N, Yoshioka C., Mano Y., Tnabe W., Ito Y., Okamoto N., Shimomura Y. // Experimental Eye Research. - 2015. - V. 132. - P. 115-123

94. Nagai N. An ophthalmic formulation of disulfiram nanoparticles prolongs drug residence time in lens / Nagai N.,Mano Y., Ito Y // Biol. Pharm. Bull. - 2016. - V. 39. - N. 11.- P. 1881-1887

95. Naguib M. Neuromuscular monitoring and postoperative residual curarisation: a metaanalysis / M.Naguib, A.F.Kopman, J.E.Ensor // Br. J. Anaesth. -2007. -V.98. -P.302-316.

96. Nakai Y. Interaction of tri-O-methyl-P-cyclodextrin with drugs / Y.Nakai, K.Yamamoto, K.Terada // J. Incl. Phenom. -1984. -V.2. -P.523-531.

97. Nishimura K. Improvement of dispersion and release properties of nifedipine in suppositories by complexation with 2-hydroxypropyl- P-cyclodextrin / K.Nishimura, R.Hidaka, F.Hirayama, H.Arima, K.Uekama // Journal of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry. -2006. -V.56. -P.85-88.

98. Otagirri M. Improvements to some pharmaceutical properties of flurbiprofen by в- and у- cyclodextrin complexations / M.Otagirri, T.Imai // Acta Pharm. Suec. -1993. -V.20. -P.1-10.

99. Pitha J. Hydrophilic cyclodextrin derivates enable effective oral administration of steroidal hormones / J.Pitha, S.M.Harmau, M.E.Michel // J. Pharm. Sci. -1996. -V.75. P.165-167.

100. Popescu C. Бета-циклодекстрины как инструмент солюбилизации нерастворимых АФС (BCS класс II и класс VI) / C. Popescu // «Фармацевтическая отрасль». -2015. -T.5, N.52. -P.52-56.

101. Post M. Serum selenium concentration is associated with the development of age-related cataract / Post M., Marciniak W., Muszynska M., Lener M., Serrano P., Lubinski J., Krzystolik K., Lubinski W. // Journal of Clinical & Experimental Ophthalmology. - 2014. - V.7. - I.3. - P.1-5

102. Ravindra Reddy K. Preparation and evaluation of Aceclofenac ophthalmic in-situ gels / K.Ravindra Reddy, M.Ravi Shankar Yadav, P.Sabitha Reddy // Journal of Chemical, Biological and Physical Sciences. - 2011. -V. 1(2). - P 289298.

103. Rodal S.K. Extraction of Cholesterol with Methyl-b-Cyclodextrin Perturbs Formation of Clathrin-coated Endocytic Vesicles / S.K.Rodal, G.Skretting, 0.Garred, F.Vilhardt, B.v.Deurs, K.Sandvig // Molecular Biology of the Cell. -1999. -T.10. -P.961-974.

104. Rudrangi S.R.S. Solid-state flurbiprofen and methyl-P-cyclodextrin inclusion complexes prepared using a single-step, organic solvent-free supercritical fluid process / S.R.S.Rudrangi, W.Kaialy, M.U.Ghori, V.Trivedi, M.J.Snowden,

B.D.Alexander // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. -2016. doi: http://dx.doi.org/10.1016/i.eipb.2016.04.024

105. Saetern AM. Effect of hydroxypropyl-B-cyclodextrin complexation and pH on solubility of camptothecin / Saetern AM, Nguyen NB, Bauer-Brandl A, Brandl M. // Int J Pharm. - 2004. - V. 284. -P. 61-68

106. Sauna Z. E. Disulfiram, an Old Drug with New Potential Therapeutic Uses for Human Cancers and Fungal Infections / Sauna Z. E., Shukla S., Ambudkar S. V. // Mol. BioSystems. - 2005. -V. 1.- P. 127-134

107. Shahsuvaryan M. The Management of Cataract: Where We Are? // EC Ophthalmology. - 2016. - V. 3(3).- P. 304-308

108. Sheila K. West. Looking forward to 20/20: a focus on the epidemiology of eye diseases// Epidemiologic Reviews. -2000. - V. 22, - No. 1. - P.64-70

109. Soares,L.A.,Leal,A.F.V.B.,Fraceto,L.F.,Maia,E.R.,Resck,I.S., Kato, M.J., Gil, E.S., Sousa, A.R., Cunha, L.C., Rezende, K.R.: Host-guest system of 4-nerolidylcatechol in 2-hydroxypropyl b- cyclodextrin: preparation, characterization and molecular modeling. J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem. 64, 23-35 (2009).

110. Stefansson E. Cyclodextrins in eye drop formulations / E.Stefansson, T.Loftsson // Journal Incl. Phenom. Macroc. Chem. -2002. -T.44. -P.23-27.

111. Stefansson E., Thorisdottir S., Gudmundsson O.G., Loftsson T., Fridriksdottir H., Kristinsson J.K., HPßCD in eye drops: evaluation of artificial tear-drops in human patients / E.Stefansson, S.Thorisdottir, O.G.Gudmundsson, T.Loftsson, H.Fridriksdottir, J.K.Kristinsson // Proceedings of the 8th International Cyclodextrins Symposium. -1996. -P.391-394.

112. Szejtli J., Past, present, and future of cyclodextrin research / J.Szejtli // Pure Appl. Chem. -2004. -T.76, N.10. -P.1825-1845.

113. Szejtli J. Comprehensive Supramolecular chemistry/ Szejtli J, Osa T. // Oxford, Pergamon Press. - 1996. - V. 3. -P. 57-127.

114. Pat. 4228160 US. Inclusion complex of cyclodextrin and Indomethacin and a process for the preparation thereof, method of use and pharmaceutical composition / Szejtli J., Szente L., David A., Virag S., Sebestyen G., Mandi A.; assignee

Chinoin, Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt - N 9976387/65; Filed 01.27.79; publication 14.10.80.

115. Szente L. Suppositories containing cyclodextrin complexes / L.Szente, I.Apostol, J.Szejtli // Pharmazie. -1995. -V.40. -P.406-407.

116. Szente L. Highly soluble cyclodextrin derivatives: chemistry, properties, and trends in development / L.Szente, J.Szejtli // Adv. Drug Deliv. Rev. -1999. V.36, N.1. -P.17-38.

117. Uekama K. Improvement of the oral bioavailability of digitalis glycosides by cyclodextrin complexation / K.Uekama, T.Fujinaga, F.Hirayama // Pharmaceutical Science. -1983. -V.72. -P.1338-1341.

118. Uekama K. Improvement of oral bioavailability of Prednizalone by P-cyclodextrin complexation in humans / K.Uekama, M.Otagiri, K.Tasaki, A.Sugii // J. Pharm. Dyn. -1993. -V.6. -P.124-127.

119. Uekama K. Improvement of dissolution and absorption characteristics of indomethacin by water soluble a-cyclodextrine-epichlorohydrin polymer / K.Uekama, K.Udo, T.Irie // Acta Pharm. Suec. -1987. -V.24. -P.27-36.

120. Uekama K. Cyclodextrin drug carrier systems / Uekama K. Hirayama F, Irie T. // Chem Rev. - 1998. - V. 98. - P. 2045-2076.

121. Varma SD. Prevention of cataracts by nutritional and metabolic antioxidants / Varma SD, Devamanoharan PS, Morris SM // Critical Reviews in Food Science and Nutrition. - 1995. - V. 35(1-2).- P. 111-129

122. Vavia P.R. Inclusion Complexation of Nimesulide with P-Cyclodextrins / P.R.Vavia, N.A.Adhage // Drug Development and Industrial Pharmacy. -1999. -V.25. -P.543-545.

123. Vila-Jato T. Spirolactone / P-cyclodextrine complex: oral bioavailability in humans / T.Vila-Jato, J.Blanco // Acta Pharmaceutical Technology. -1998. -V. 32. -P. 82-85.

124. Wright C. Disulfiram treatment of alcoholism/ Wright C, Moore RD // Am J Med. - 1990. - V.88(6).- P.647-55

125. Yang C. Enhanced ternary 1:2 host-guest complexation of amino-c-cyclodextrins with 2-anthracenecarboxylic acid / Yang C, Fukuhara G, Nakamura A, Origane Y, Mori T, Wada T, Inoue Y. // J Incl Phenom Macrocycl Chem. -2007. - V. 57. - P. 433-437.

126. Yano H. Colon-specific delivery of prednisolone-appended a-cyclodextrin conjugate: alleviation of systemic side effect after oral administration / H.Yano, F.Hirayama, M.Kamada, H.Arima, K.Uekama // J. Cont. Rel. -2002. -V.79. N.1-3. -P.103-112.

127. Государственный реестр лекарственных средств, http://grls.rosminzdrav.ru/GRLS.aspx?RegNumber=&MnnR=%D0%B4%D0%B8 %D1%81%D1%83%D0%BB%D1%8C%D1%84%D0%B8%D1%80%D0%B0% D0%BC&lf=&TradeNmR=&0wnerName=&Mnf0rg=&Mnf0rgCountry=&isfs=0 &isND=0&order=RegDate&orderType=desc&RegType=&pageSize=10&pageNu m=1

128. https://compendium.com.ua/akt/68/3161/disulfiramum/

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение 1. Патент №2580567 «Способ получения комплекса дисульфирама с циклодекстрином

Приложение 2. Патент № 2592625 «Комплекс включения дисульфирама с циклодекстрином»

Приложение 3. Исследование терапевтической активности комплекса включения дисульфирама с гидроксипропил-в- циклодекстрином в отношении дистрофических изменений сетчатки и хрусталика глаза у крыс линии ОХУБ

Приложение 4. Протокол валидации методики количественного определения дисульфирама в комплексе включения с гидроксипропил-в-циклодекстрином.

Приложение 5. Протокол исследования стабильности комплекса включения дисульфирама с гидроксипропил-в-циклодекстрином

Приложение 6. Лабораторный регламент на производство «Дисульфирам, комплекс включения»

Приложение 7. Спецификация «Дисульфирам, комплекс включения» Приложение 8. Акт внедрения в ЗАО «Институт фармацевтических технологий»

Приложение 9. Акт внедрения в учебный процесс

Приложение 1. Патент №2580567 «Способ получения комплекса

дисульфирама с циклодекстрином»

ФВДЮАШДО

НА ИЗОБРЕТЕНИЕ

№ 2580567

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА ВКЛЮЧЕНИЯ ДИСУЛЬФИРАМА С ЦИКЛОДЕКСТРИНОМ

П ате 11 тообладател ь( л и): Кедик Станислав Анатольевич (Щ1)

Автор(ы): Тюкова Виктория Сергеевна (Л11), Панов Алексеи Валерьевич (1111), Суслов Василий Викторович (И11), Кочкина Юлия Вячеславовна (КС), Кедик Станислав Анатольевич (Ш)

Заявка №2015103464

Приоритет изобретения 03 февраля 2015 Г.

Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 22марта 2016г. Срок действия патента истекает 03 февраля 2035 г.

Руководитель Федеральной службы ?ю интеллектуальной собственности

7

Г. П. Ивлиев

Приложение 2. Патент № 2592625 «Комплекс включения

днсулъфнрама с цнклодекстрнном»

тееотйшлш «диращшщ

НА ИЗОБРЕТЕНИЕ

№ 2592625

КОМПЛЕКС ВКЛЮЧЕНИЯ ДИСУЛЬФИРАМА С ЦИ КЛ ОДЕКСIРИ11 ом

Пате!ггооб.падатель(ли): Кедик Станислав Анатольевич (ИV)

Лвтор(ы): Тюкова Виктория Сергеевна (Ш1), Панов Алексей Валерьевич (К11), Суслов Василий Викторович (1Ш), Кочкина Юлия Вячеславовна (Н11), Кедик Станислав Анатольевич

<т

Заявкам 2015103463

Приоритет изобретения 03 февраля 2015 Г.

Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 04 июля 2016 г. Срок действия патента истекает 03 февраля 2035 г.

Руководитель Федеральной службы по интеллектуальной собственности

Г.П. Ивлиев

Приложение 3. Исследование терапевтической активности комплекса включения дисульфирама с гидроксипропил-в- циклодекстрином в отношении дистрофических

изменений сетчатки и хрусталика глаза у крыс линии 0ХУ8

Российская Академия Наук Сибирское Отделение

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ЦИТОЛОГИИ И ГЕНЕТИКИ СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК

по теме «Исследование терапевтической активности препарата дисульфирам в отношении дистрофических изменений сетчатки и хрусталика глаза у крыс

линии ОХУ$»

ОТЧЕТ

О НАУЧНО ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЕ

Новосибирск

2015

Резюме

Цель исследования - оценка профилактической активности дисульфирама в отношении катаракты у крыс линии OXYS.

Методы. Работа выполнена на 48 преждевременно стареющих крысах ОХ YS, которых отличает раннее развитие катаракты, аналогичной сенильной катаракте у людей. Опытные [руппы крыс OXYS (п= 12, количество глаз 24) получали ежедневно с возраста 1,5 до 3,5 месяцев инсталляции капель - комплекса ци клоде кстри на с дисульф ирамом -действующим агентом и различных концентрациях: 0,25%, 05% или 1%. С контрольными животными проводили те же манипуляции, ЧТО и с опытными (ХЭНДЛиШ'), НО никаких инсталляций не проводили. Выраженность патологических изменений хрусталиков оценивали п соответствии с международным протоколом Age-Related Eye Disease Study (AREDS) и «Офтальмология: национальное руководство».

Результаты. Дисульф ирам существенно замедлил развитие катаракты, при этом в концентрации 0,25 и 0,5% был эффективнее (р<0.0(Ж)1), чем в концентрации 1%. Вывод. Дисульфирам перспективен как препарат для профилактики катаракты, однако для окончательного заключения необходимо сравнить сю эффективность с эффективностью инсталляций позитивного контроля.

Ключевые слова: дисульфирам, терапевтический потенциал, катаракта, модель сенильной катаракты крысы ОХУБ.

Введение

Создание и характеристика биологических моделей социально значимых заболеваний человека - традиционный подход к выяснению их этиологии и патогенеза, к разработке и оценке эффективности новых способов лечения и профилактики. R последние годы лавинообразно растет количество генетических моделей, при этом доминируют моногенные: это или трансгенные, или животные с определенными мутациями или с нокаутом генов. Такой подход приближает к пониманию вклада конкретного гена в развитие признака, но не воспроизводит проявления заболеваний мол и генной природы, к которым относятся и «болезни пожилого возраста», развивающиеся на фоне комплексных проявлений старения. 13 мире существует практически одна признанная модель преждевременного старения: линия мышей SAM (senesccnce accelerated mouse, Япония). Она представлена 12-Ю сублиниями, различающимися «набором» проявлений ускоренного старения. Исследованиями последних 10 лет доказано, что полноценной моделью преждевременного старения и связанных с ним заболеваний может служить созданная в ИЦиГ СО РАИ линия крыс OXYS. Развитие комплекса признаков преждевременного старения у этих животных явилось результатом направленной селекции крыс Вистар по признаку ранней спонтанной катаракты, развитие которой в 5 поколениях вызывали обогащенной галактозой диетой (Колосова и др., 2003, 2005, 2014, Румянцева и др., 2008, 2014). На сегодня мы имеем 104-е поколение крыс OXYS со спонтанно развивающейся катарактой и сцешюнно с ней унаследованным синдромом преждевременного старения - ранним развитием ассоциированных со старением заболеваний, в том числе катаракты и ретинопатии, аналогичной возрастной макулярной дегенерации (ВМД), проявления которых воспроизводятся на клиническом, морфологическом и молекулярном уровнях (Кол осот а и др., 2003; Румянцева и др., 2008; Muraleva et а!., 2010; Stefanova et al., 2010; Markovets et a I., 2011). Модель плодотворно используется для экспресс-оценки эффективности новых методов диагностики, лечения и профилактики этих ассоциированных со старением заболеваний и преждевременного старения в целом. Пример успешного использования крыс OXYS - выявление терапевтического потенциала митохондриальною ангиоксиданга пластохинонип-децил-трифенилфоофония (SkQI, «ионы Скулачева»). Установлено, что он способен не только замедлять развитие катаракты и ретинопатии, но и снижать выраженность патологических изменений хрусталиков и сетчатки и ряда других признаков ускоренного старения. Использование крыс OXYS позволило сократить ло 7 лет путь от синтеза SkQ1 до поступления в аптеки лекарственного препарата па его основе

- глазных капель Визомитин, которые с 2012 года продаются в аптеках с показаниями «возрастные изменения слезной железы, синдром «сухого глаза», «компьютерном синдром».

Цель настоящей работы - оценка способности дисульфирама предупреждать развитие катаракты у крыс ÜXYS.

Животные и воздействие на них

Эксперимент выполнен 48 крысах ОХ YS (по договору - 40) на базе Центра коллективного пользования «Генофонды лабораторных животных» ИЦиГ СО РАН. Животных содержали при естественном освещении и свободном доступе к воде и пище группами по 5 особей и клетках размером 57 36*20 см при температуре 22±2НС в условиях фиксированного режима освещения (12 ч свет /12 ч темнота) при свободном доступе к воде и пище - стандартному гранулированному корму для лабораторных животных (Чара, ЗАО «Ассортимент-Arpo», Россия). С возраста 1,5 до 3,5 месяцев животные опытных групп получали ежедневные инсталляции капель - комплекса циютодекстрина с дисульфирамом - действующим агентом в различных концентрациях: 0.25%, 05% или 1%. С контрольными животными проводили те же манипуляции, что и с опытными (хэндлинг), но никаких инсталляций не проводили.

Офтальм исканичеекчй осмотр

Офтальмоскопический осмотр проводили дважды ДО и после Лечения после расширения зрачков 1% раствором тропиками да с помощью прямого электрического офтальмоскопа "Beta" (Германия) и ручной щелевой лампы-насадки к нему, а также методами биомикроскопии с помощью щелевой лампы ST.-45 "ShinNippon" (Япония). Для оценки наличия и степени выраженности патологических изменений хрусталиков использовали принятую к клинической практике классификацию в соответствии с рекомендациями, представленными в «Офтальмология: национальное руководство» под ред. С.Э. Аветасова, Е.А. Егорова, JI.K. Мошетовой, В.В. Нероева, Х.П. Тахчид (М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008) и в международном протоколе Agc-Rdalcd Eye Disease Study (AREDS, «Возраст-зависимых глазных болезней исследование») (http://eyephoto.ophth.wisc.edu). Результаты осмотров представлены в баллах, соответствующих стадиям заболевания: 0 баллов хрусталик прозрачный; 1 балл очаговые, нежные кортикальные или ядерные помутнения (соответствующие по десятичной шкале эталону 1-4): 2 балла - очаги помутнения (соответствующие по

десятичной шкале эталону 5-8); 3 балла - интенсивное помутнение коры или ядра хрусталика (соответствующие по десятичной шкале эталону 9-10).

Результаты осмотров

При предварительном осмотре в возрасте 1.5 месяцев 25% крыс ОХУ8 имели признаки начальной катар акт и. У контрольных крыс ОХ У 8 катаракта активно прогрессировала, чему способствовал хэндлинг, являющийся стрессом для крыс: у интактных од по возрастных крыс ОХУБ патологические изменения хрусталиков были менее выражены Дисульфнрам существенно замедлил развитие катаракты, при этом в концентрации 0,25 и 0,5% был эффективнее (р<0,00001), чем в концентрацйии 1% (таблица). Условиями договора позитивный контроль не был предусмотрен, по для сравнения мы включили в таблицу результаты оценки профилактической эффективности БАД Стрикс форте (Тепокап, Дания), который животные получали с кормом по 14 мг на кг массы ежедневно (доза и частота приема в соответствии с рекомендациями производителя). Привести его считаем возможным в связи с тем, что динамика и интенсивность развития наголо гиче пек их изменений хрусталиков оказались практически одинаковыми е той, что наблюдалась в настоящем исследовании. Как видим из таблицы, эффективность приема Стрикс а форте инсталляций дисульфирама оказалась сопоставимой.

Таблица.

Влияние инсталляций дисульфирама на развитие катаракты у крыс ОХУ8. Данные (усредненные) представлены в баллах, соответствующих стадиям катаракты (см. методы).

Концентрация дисульфирама п (глаз) М ± ш

0 24 2.42±0.10

0,25% 24 1.33±0.10* Р<0,00010

0,5% 24 1.29±0.09* Р<0,00014

1% 24 1.83x0.08* Р<0,00014

Стрикс-форте 24 1.67±0.12* Р <0,0002

Приложение 4. Протокол валидации методики количественного определения дисульфирама в комплексе включения с гидроксипропил-^-циклодекстрином

Приложение 5. Протокол исследования стабильности комплекса включения

дасулъфарама с гидроксипропил-Р-циклодекстрином

Институт

Фармацевтических Технологий

УТВЕРЖДАЮ

Исполнительный директор ЗАО «Институт фармацевтических технологий» _ Ю.В. Кочкина У-/ 20 г.

ПРОТОКОЛ

исследования стабильности «Дисульфирам, комплекс включения»

СОСТАВЛЕНО: Научный сотрудник

СОГЛАСОВАНО: Директор по науке

В.С. Тюкова «¿22»

А.В. Панов

-/У 20а>Гг.

Москва 2016

Программа исследования стабильности

1. В соответствии с требованиями ГФ XIII, ч. 1 и на основании базовых документов ICH разработана программа по исследованию стабильности экспериментальных образцов комплекса включения дисульфирама с гидроксипропил-Р-циклодекстрином.

2. Программа исследования стабильности включает: Долгосрочные испытания при естественных условиях хранения.

- Температура 25 °С ± 2 °С;

Исследования в условиях ускоренного хранения.

- Температура 45 °С ± 2 °С;

3. Для оценки стабильности определены следующие показатели качества препарата в соответствии с проектом НД:

- Описание;

- Растворимость

- Подлинность (методы 1Н ЯМР спектроскопии, реакция с антроном);

- Прозрачность раствора

- Цветность раствора

- рН

- Родственные примеси (метод ВЭЖХ, ГЖХ)

- Потеря в массе при высушивании

- Количественное определение дисульфирама (метод УФ-спектрофотометрии)

4. В соответствии с разработанными программами по изучению стабильности на долгосрочное хранение заложены три серии экспериментальных образцов: С0010814 , С0020814, С0030814, дата изготовления 08.14 г.

Для исследования стабильности в условиях ускоренного хранения заложены три серии экспериментальных образцов: С0010115 , С0020115, С0030115, дата изготовления 01.15 г.

5. Образцы заложены на хранение в климатическую камеру KBF, BINDER с контролем климатических условий.

6. Периодичность исследования для долгосрочных испытаний при естественных условиях хранения осуществляли каждые 3 месяца в течение первого года, каждые 6 месяцев в течение второго года. Периодичность исследования в условиях ускоренного хранения - каждые 45 суток.

Страница 2 из 15

Наименование образца Дисульфирам. комплекс включения

Серия С0010814

Дата изготовления 08.2014 г.

Вид упаковки, количество По 100 г в банки из полистирола или из полиэтилена, или полиэтиленте-

рефталата (ПЭТФ) или аналогичных материалов, укупоренные крышками с

контролем первого вскрытия. На банку наклеивают этикетку из бумаги

этикеточной писчей. Банку помещают в пачку го картона для потребитель-

ской тары. Банки допускается упаковывать в термоусадочную пленку.

Вид исследования Долгосрочное хранение (2 года 3 месяца), естественные условия

Условия испытаний Температура 25 °С ± 2 °С

Дата закладки образца на хранение 01.08.2014 г

Дата окончания хранения 01.11.2016 г

Показатели качества

Описание Растворимость Подлинность Прозрачность раствора Цветность раствора РН Родственные примеси Потеря в массе при высушивании Колич. определение ДСФ

1 2 3 4 5 6 7 8 9

о

&

к к

с

р

К

ю ы 00 ы и) о Нормы

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Аморфный порошок от белого до светло-желтого цвета -

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Легко растворим в воде, растворим в спирте этиловом 96%, практически не растворим в ацетоне и гексане ы

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв 'Н ЯМР спектр 2% раствора, зарегистрированный в Г)2С), по положению, интегральным интенсивностям, мультиплетности и химическим сдвигам сигналов должен соответствовать прилагаемому спектру

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Окрашивание раствора в синий цвет

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв 5 % раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталонном I

ОУ6 ОУ6 ОУ6 ОУ7 ОУ7 Менее ОУ7 Менее ОУ7 Менее ОУ7 Интенсивность окрашивания 5 % раствора не должна превышать интенсивность окрашивания эталона ОУ5

(О 4- 1—* То о ы зо -а са лл От 5,5 до 7,5

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Примесь А не более 1,35 %

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Пропиленгликоль не более 2,25%

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Не более 10,0% 30

45 00 У ы Ы У и> о а\ Не менее 7,5% и не более 10,0% чО

Наименование образца Дисульфирам, комплекс включения

Серия С0020814

Дата изготовления 08.2014 г.

Вид упаковки, количество По 100 г в банки из полистирола или из полиэтилена, или полиэтиленте-рефталата (ПЭТФ) или аналогичных материалов, укупоренные крышками с контролем первого вскрытия. На банку наклеивают этикетку из бумаги этикеточной писчей. Банку помещают в пачку из картона для потребительской тары. Банки допускается упаковывать в термоусадочную пленку.

Вид исследования Долгосрочное хранение (2 года 3 месяца), естественные условия

Условия испытаний Температура 25 °С ± 2 °С

Дата закладки образца на хранение 01.08.2014 г

Дата окончания хранения 01.11.2016 г

Показатели качества

Описание Растворимость Подлинность Прозрачность раствора Цветность раствора РН Родственные примеси Потеря в массе при высушивании Колич. определение ДСФ

1 2 л 5 4 5 6 7 8 9

о

&

к s с

s>

to to ■fc. 00 to so <7\ UJ О Нормы

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Аморфный порошок от белого до светло-желтого цвета -

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Легко растворим в воде, растворим в спирте этиловом 96%, практически не растворим в ацетоне и гексане ю

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв 'Н ЯМР спектр 2% раствора, зарегистрированный в Б20, по положению, интегральным интснсивностям, мультиплетности и химическим сдвигам сигналов должен соответствовать прилагаемому спектру UJ

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Окрашивание раствора в синий цвет

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв 5 % раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталонном I

GY6 GY6 GY6 GY7 GY7 Менее ОУ7 Менее СУ 7 Менее ОУ7 Интенсивность окрашивания 5 % раствора не должна превышать интенсивность окрашивания эталона С У5 Ui

6,99 7,00 -j о U) 6,99 ■о о -j о о -о о (JJ OS VO сю От 5,5 до 7,5 ON

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Примесь А не более 1,35 % -J

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Пропиленгликоль не более 2,25%

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Не более 10,0% GO

00 "vo ОО JO о ;о о о \о о }0 о eu у VO so VO jj so о о Не менее 7,5% и не более 10,0% SO

6SI

Наименование образца Дисульфирам, комплекс включения

Серия С0030814

Дата изготовления 08.2014 г.

Вид упаковки, количество По 100 г в банки из полистирола или из полиэтилена, или полиэтиленте-рефталата (ПЭТФ) или аналогичных материалов, укупоренные крышками с контролем первого вскрытия. На банку наклеивают этикетку из бумаги этикеточной писчей. Банку помещают в пачку из картона для потребительской тары. Банки допускается упаковывать в термоусадочную пленку.

Вид исследования Долгосрочное хранение (2 года 3 месяца), естественные условия

Условия испытаний Температура 25 °С ± 2 °С

Дата закладки образца на хранение 01.08.2014 г

Дата окончания хранения 01.11.2016 г

Показатели качества

Описание Растворимость Подлинность Прозрачность раствора Цветность раствора рН Родственные примеси Потеря в массе при высушивании Колич. определение ДСФ

1 2 3 4 5 6 7 8 9

п

я

J=

р

ы <1 ю 00 ю 4D tjj О 1 lop мы

Соотв О о G to Соотв Соотв О О о g п о с и Соотв Соотв Аморфный порошок от белого до светло-желтого цвета

О с с Я Соотв О о о ч Соотв Соотв Соотв О о о ч Соотв Легко растворим в воде, растворим в спирте этапов ом 96%, практически пе растворим в ы

ацетоне и гексане

'il Я MP спектр 2% раствора, зарегистриро-

О с о с о о О о о с о о f> о О о ванный в ])20, по положению, интегральным интенсивное'!ям, мулышшетности и химическим сдвигам сигналов должен соответствовать прилагаемому спектру.

1 Si ч 3 Si Si 3 3 ÎJJ

Соотв о о о у Соотв Соотв о с о й о с с у Соотв Соотв Окрашивание раствора в синий цвет

Соотв о с о у о о о у О о о у п с с У п с с и О о о э Соотв 5 % раствор должен быть прозрачным иди выдерживать сравнение с эталонном 1 -pi

О MJ а\ GY6 s GY7 GY7 Менее GY7 Менее GY7 Менее GY7 Интенсивность окрашивания 5 % раствора не должна превышать интенсивность окрашивания эталона OY5 Ui

<1 ij ю о-» 7,12 7,13 3 ¿-j 00 j-j От 5,5 до 7,5 Oi

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв 11римесь А не более 1,35 %

О с с a О о о а Соотв Соотв О с с у О С с у Соотв Соотв 11ропиленгликоль не более 2,25%

о о с й о с о у Соотв Соотв О с о s о о о Э Соотв п о = Не более 10,0% 00

9.29 !Р о oj \о 9,43 SO "-U \о Ш ч-Л KJ кР V л С\ ' л 11е менее 7,5% и не более 1 (),()% чо

Наименование образца Дисульфирам, комплекс включения

Серия С0010115

Дата изготовления 01.2015 г.

Вид упаковки, количество По 100 г в банки из полистирола или из полиэтилена, или полиэтиленгерефталата (ПЭТФ) или аналогичных материалов, укупоренные крышками с контролем первого вскрытия. На байку наклеивают этикетку из бумаги этикеточной писчей. Банку помещают в пачку из картона для потребительской тары. Банки допускается упаковывать в термоусадочную пленку.

Вид исследования Ускоренное хранение (182 суток)

Условия испытаний Температура 45 °С ± 2 °С

Дата закладки образца на хра- 27.01.2015 г

нение

Дата окончания хранения 24.07.2015 г

Показатели качества

Описание Растворимость Подлинность Прозрачность раствора Цветность раствора рН Родственные примеси Потеря в массе при высушивании Колич. определение ДСФ

1 2 3 4 5 6 7 8 9

n

»

к

s С

я

о я

to to i- 00 to so es UJ О Нормы

Соотв Соогв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Аморфный порошок от белого до светло-желтого цвета -

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Легко растворим в воде, растворим в спирте этиловом 96%, практически не растворим в ацетоне и гексане to

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв 'Н ЯМР спектр 2% раствора, зарегистрированный в Б20, по положению, интегральным интснсивностям, мультиплетности и химическим сдвигам сигналов должен соответствовать прилагаемому спектру OJ

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Окрашивание раствора в синий цвет

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв 5 % раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталонном I 4—

GY6 GY6 GY6 GY7 GY7 Менее ОУ7 Менее СУ 7 Менее СУ7 Интенсивность окрашивания 5 % раствора не должна превышать интенсивность окрашивания эталона С У5 Ui

SJ Lu ■о 1—1 7,20 -о -J 7,16 ■о ы -о ОС ■о сю От 5,5 до 7,5 ON

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Примесь А не более 1,35 % -J

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Пропиленгликоль не более 2,25%

Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Соотв Не более 10,0% ÛO

JC QO SO SO ;о ос )0 SO "to OS so ы SO о so ы Не менее 7,5% и не более 10,0% SO

Наименование образца Дисульфирам, комплекс включения

Серия С0020115

Дата изготовления 01.2015 г.

Вид упаковки, количество По 100 г в банки из полистирола или из полиэтилена, или полиэтилентерефталата (ПЭТФ) или аналогичных материалов, укупоренные крышками с контролем первого вскрытия. На банку наклеивают этикетку из бумаги этикеточной писчей. Банку помещают в пачку из картона для потребительской тары. Банки допускается упаковывать в термоусадочную пленку.

Вид исследования Ускоренное хранение (182 суток)

Условия испытаний Температура 45 °С ± 2 °С

Дата закладки образца на хра- 27.01.2015г

нение

Дата окончания хранения 24.07.2015 г

Показатели качества

Описание Растворимость Подлинность Прозрачность раствора Цветность раствора РН Родственные примеси Потеря в массе при высушивании Колич. определение ДСФ

1 2 3 4 5 6 7 8 9

о

-ё &

to Я

К) оо KJ \0 оч о I lop мы

Соотв О - о ч да о о с - да О с с да О о о ч да о о о ч а О - О ч да О о о да Аморфный порошок от белого до светло-желтого цвета

п з о а п о о а П с 0 1 О с С W О о В О о о а Г! о о а г> о 0 1 Легко растворим в воде, растворим в спирте этиловом 96%, практически не растворим в ацетоне и гексане ы

о о о н да о о о н да О с = -да О о а да о о о - да о о о н да о о о и да О о о да 'il Я MP спектр 2% раствора, зарегистрированный в DjO, по положению, интеграль-ным иитепстп гостам, мультиплетноети и химическим сдвигам сигналов должен соответствовать прилагаемому спектру со

Соотв О о о 0 с 1 О о о да О о о 3 О о а О о о П о о да Окрашивание раствора в синий цвет

П о 3 да О о 3 сз Г! £ к О о g да О о 3 03 О о 3 сэ Г! 3 со О О 3 W 5 % раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталонном 1 4*.

О к! as S и § ON О Й< ч О £ сь о гь 2 Менее GY7 g 1Ъ ' ЕС о (Т> 9 Интенсивность окрашивания 5 % раствора не должна превышать интенсивность окрашивания эталона GY5 Ui

as '■О ос "•о -о сл 00 о СЛ сл ОС Ы <JS 00 ю ON 00 о о\ 00 го От 5,5 до 7,5

Соотв П о о о о о 3 О о с да П о о а О о о О о о О О о 03 Примесь А не более 1,35 % —J

о о 3 да О о я о с 3 да О о з да о о 3 — о о 3 да о с 3 да О о 3 № Пропиленгликоль не более 2,25%

О о о ч а о о о - ы о о с - ы О О О ttf О о о ч ы О о о - ГЗ О О - ы п о о ьз Не более 10,0% oo

t- О ЧО V о V Щ V \о V ijj ЧО ■■с V ю SD V Ln Не менее 7,5% и не более 10,0% sO

Наименование образца Дисульфирам, комплекс включения

Серия С0030115

Дата изготовления 01.2015 г.

Вид упаковки, количество По 100 г в банки из полистирола или из полиэтилена, или полиэтиленгерефталата (ПЭТФ) или аналогичных материалов, укупоренные крышками с контролем первого вскрытия. На банку наклеивают этикетку из бумаги этикеточной писчей. Банку помещают в пачку из картона для потребительской тары. Банки допускается упаковывать в термоусадочную пленку.

Вид исследования Ускоренное хранение (182 суток)

Условия испытаний Температура 45 °С ± 2 °С

Дата закладки образца на хра- 27.01.2015 г