Клинико-патогенетическое и прогностическое значение изменений иммунного статуса и антиоксидантной системы у больных герпес- и ВИЧ-инфекцией тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.10, кандидат медицинских наук Азовцева, Ольга Владимировна

• Азовцева, Ольга Владимировна
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Азовцева, Ольга Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные аспекты герпесвирусной инфекции.

1.2. Методы этиологической диагностики герпесвирусной инфекции и их возможности в определение формы инфекционного процесса.

1.3. Особенности иммунного ответа при герпесвирусных инфекциях.

Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Характеристика обследованного контингента.

2.2. Методы этиологической диагностики герпесвирусной инфекции.

2.3. Методы иммунологического обследования.

2.4. Методы определения содержания металлопротеидов как одного из показателей антиоксидантной системы.

2.5. Методы статистической обработки.

Глава П1. КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕРПЕСВИРУСНОЙ И ВИЧ ИНФЕКЦИЙ НА ПРИМЕРЕ НОВГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

3.1. Клинико-эпидемиологическая характеристика герпесвирусной инфекции.

3.2. Клинико-эпидемиологическая характеристика ВИЧ инфекции.

3.3. Клинико-эпидемиологическая характеристика герпесвирусной инфекции на фоне ВИЧ-инфицирования.

Глава IV. ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА И СОДЕРЖАНИЯ МЕТАЛЛОПРОТЕИДОВ КАК ОДНОГО ИЗ ПОКАЗАТЕЛЕЙ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИЕЙ, ВИЧ ИНФЕКЦИЕЙ И ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИЕЙ НА ФОНЕ ВИЧ

4.1. Оценка иммунного статуса с помощью моноклональных антител у больных герпесвирусной инфекцией.

4.2. Оценка иммунного статуса с помощью моноклональных антител у ВИЧ-инфицированных больных.

4.3. Оценка иммунного статуса с помощью моноклональных антител у больных герпетической инфекцией, ВИЧ-инфицированных и у больных герпетической инфекцией на фоне ВИЧ/СПИД.

4.4. Оценка иммунного статуса с помощью проточной цитометрии у больных герпесвирусной инфекцией.

4.5. Изучение содержания металлопротеидов как одного из показателей антиоксидантной системы у больных герпесвирусной инфекцией.

Глава V. ВЛИЯНИЕ ТЕРАПИИ АЛЛОКИНОМ-АЛЬФА НА КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ У БОЛЬНЫХ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИЕЙ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-патогенетическое и прогностическое значение изменений иммунного статуса и антиоксидантной системы у больных герпес- и ВИЧ-инфекцией»

Актуальность темы.

В настоящее время известно 8 антигенных серотипов вирусов герпеса: вирусы простого герпеса 1 и 2 типа, ветряной оспы — опоясывающего герпеса, цитомегаловирус, вирус Эпштейна — Барр, вирусы герпеса человека 6, 7 и 8 типов. Герпесвирусы широко распространены в человеческой популяции, они способны поражать практически все органы и системы организма - хозяина, вызывая латентную, острую и хроническую формы инфекции (Лобзин Ю.В., 2003г.; Баринский И.Ф. и соавторы 1986г.; Рахманова А.Г., 1995г.). Особенно своё цитопатогенное действие они вызывают на фоне иммунодефицитных состояний.

Особая актуальность проблемы герпесвирусных инфекций связана с появлением больных СПИДом. Установлено, что вирусы герпеса могут активировать ВИЧ, находящийся в стадии провируса, и являются кофактором прогрессирования ВИЧ - инфекции и СПИДа. В этой связи герпетическая инфекция является одним из важных СПИД индикаторных заболеваний.

Число ВИЧ-инфицированных постоянно растет, каждый день появляется 6000 новых случаев болезни. В настоящее время в мире зарегистрировано 40 млн. ВИЧ-инфицированных, в то время как в 1996 г. число ВИЧ инфицированных в мире составляло 21,8 млн. По кумулятивным данным от СПИДа умерло более 8 млн. человек, из них более 2 млн. - дети. Около 42% ВИЧ-инфицированных взрослых приходится на долю женщин, и эта тенденция постоянно увеличивается. Следует отметить, что ВИЧ-инфицированные женщины находятся в репродуктивном возрасте, что, безусловно, влияет на вероятность рождения ими ВИЧ-инфицированных детей. В настоящее время СПИД занимает третье место в мире в группе смертельных исходов после заболеваний сердечно-сосудистой системы и новообразований, а среди детей ВИЧ/СПИД является основной причиной смерти в большинстве развивающихся стран. Распространение ВИЧ-инфекции в России приобрело характер пандемии. В Великом Новгороде и Новгородской области зарегистрировано 752 ВИЧ-инфицированных на 25.12.2004г.

Активация герпесвирусной инфекции у ВИЧ-инфицированных больных, помимо общего усиления репликации ВИЧ, происходит с повышенным выделением вирионов ВИЧ в местах герпетических кожных высыпаний, которые не всегда имеют характерный для герпеса вид. Наиболее важно то, что при этом могут образовываться частицы смешанного фенотипа - вирионы ВИЧ, "одетые" в оболочку герпеса. Такие "закамуфлированные" частицы в отличие от обычных вирионов ВИЧ способны инфицировать различные типы клеток, включая эпителиальные клетки и фибробласты, давая при этом продуктивную ВИЧ-инфекцию, то есть становится возможным заражение ВИЧ через контакты с кожей и слизистой оболочкой.

Доказано, что вирусами простого герпеса инфицировано 65-90% взрослого и детского населения планеты. Среди онкологических больных у 50% лиц отмечена герпетическая инфекция, при ВИЧ - инфекции и СПИДе — в 95-100% случаев.

При герпесе развиваются иммунодефицитные состояния, обусловленные недостаточностью различных звеньев иммунной системы и ее неспособностью элиминировать вирус из организма. Сохраняющиеся в течение всей жизни, иногда в довольно высоких титрах, вируснейтрализующие антитела хотя и препятствуют распространению, но не предупреждают возникновения рецидивов.

Спектр клинических проявлений герпесвирусных инфекций отличается значительным разнообразием. Он зависит от локализации патологического процесса и его распространенности, состояний иммунной системы больного и антигенного типа вируса. Более тяжелое течение заболевания отмечается после первичного инфицирования, когда отсутствуют специфические антитела к вирусу герпеса, у детей раннего возраста с незрелой иммунной системой, при иммунодефицитных состояниях различного генеза, в том числе при СПИДе (Исаков В.А., Сельков С.А. и другие, 2004г.; Пауашвили М.Н., Щелканов М.Ю., 2004г.; Рахманова А.Г., 2000г.). Так, клинические проявления инфекции, протекавшие ранее латентно, могут быть тяжелыми на фоне иммунодефицитных состояний, с тенденцией к генерализации и развитию осложнений, которые подчас определяют течение и исход основного заболевания, создавая угрозу для здоровья и жизни пациента.

Цель исследования.

Выявить клинико-патогенетическую и прогностическую значимость показателей иммунного статуса и содержания металлопротеидов у больных герпес и ВИЧ-инфекциями.

Задачи исследования.

1. Охарактеризовать клинические проявления у больных герпетической и ВИЧ- инфекциями и определить их частоту выявления;

2. Провести оценку иммунного статуса и содержания металлопротеидов как одного из показателей антиоксидантной системы у герпесвирусных больных и иммунного статуса у ВИЧ-инфицированных и ВИЧ/СПИД-больных с герпетической инфекцией;

3. Определить патогенетическую и прогностическую значимость выявленных изменений в иммунологическом статусе у больных с герпетической и ВИЧ-инфекциями;

4. Определить патогенетическую и прогностическую значимость выявленных изменений металлопротеидов у больных герпетической инфекцией;

5. Оценить терапевтическую эффективность препарата "аллокин-альфа" при лечении больных герпетической инфекцией.

Научная новизна работы.

Комплексная оценка клинико-эпидемиологических и иммунологических параметров позволяет оценить активность инфекционного процесса и ведущую роль вирусов герпеса либо ВИЧ в прогрессировании основного заболевания.

При сочетанием течении герпетического заболевания на фоне ВИЧ-инфекции отмечаются более выраженные иммунологические изменения по большинству показателей иммунного статуса: снижение содержания CD3-клеток в 1,3 раза, С04-клеток в 1,3 раза, IgA в 1,3 раза и фагоцитоза в 1,8 раза по сравнению с аналогичными показателями при раздельном течении данных инфекций.

Впервые изучены иммунологические показатели высокотехнологичным методом проточной цитометрии у больных герпесвирусной инфекцией и выявлены более значимые нарушения в иммунном статусе при исследовании данным методом. В частности, установлено достоверное снижение в 1,3 раза содержания не только CD3-, СБ4-клеток, выявляемых общепринятыми методами, но и существенное снижение содержания апоптотических клеток, несущих CD95 в 3 раза; количества В1 и В2-лимфоцитов, несущих CD20+CD5+ и CD20+CD5- в 2 раза по сравнению с аналогичными показателями у практически здоровых лиц. Выявлено увеличение количества CD3+CD16&56-клеток, отвечающих за антителозависимую цитотоксичность в 2,1 раза; HLA-DR в 1,8 раза и СБ25-клеток (несущих ИЛ-2), отвечающих за активацию и пролиферацию цитотоксических клеток в 2,9 раза по сравнению с аналогичными показателями у практически здоровых лиц.

Выявлена связь между тяжестью заболевания и количеством сопутствующей герпесвирусу бактериальной флоры. Чем тяжелее протекает герпесвирусная инфекция, тем в большем количестве выявляются различные виды бактерий в урогенитальной системе.

Выявленные повышения содержания церулоплазмина (ЦП) и снижение уровней лактоферрина (ЛФ), трансферрина (ТФ) в сыворотке крови больных при обострении ГВИ указывают на тяжесть и остроту процесса, что предпологает их прогностическую значимость у больных герпесвирусной инфекцией.

Впервые проведена оценка терапевтической эффективности препарата аллокин-альфа у больных рецидивирующей герпетической инфекцией с учетом показателей иммунного статуса.

Практическая значимость работы.

Выявленные разнонаправленные изменения показателей иммунной системы и содержания металлопротеидов, как одного из показателей антиоксидантной системы у больных ГВИ в период обострения и ремиссии позволяют оценить активность инфекционного процесса и прогнозировать тяжесть заболевания.

Выявленная положительная динамика изменений клинической симптоматики и иммунологических показателей при использовании аллокин-альфа в комплексном лечении ГВИ указывают на его терапевтическую эффективность.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. При сочетанном течении герпесвирусной инфекции и ВИЧ/СПИД заболевании отмечаются более выраженные клинические проявления и изменения в показателях клеточного и гуморального иммунитета.

2. Использование высокотехнологичного метода проточной цитометрии для оценки иммунного статуса позволяет выявить больший спектр значимых изменений иммунологических показателей у больных герпесвирусной инфекцией.

3. Определение металлопротеидов как одного из показателей антиоксидантной системы при герпетической инфекции позволяет оценить тяжесть заболевания и активность инфекционного процесса. В период обострения при тяжелых формах ГВИ отмечаются более выраженные изменения в содержании металлопротеидов: снижение содержание ЛФ в 3,3 раза и повышение содержания ЦП в 1,4 раза по сравнению со значениями этих показателей в период ремиссии.

4. В оценке тяжести заболевания имеет также определенное значение наличие сопутствующей герпесвирусу бактериальной микрофлоры в урогенитальной системе.

5. Выявленное положительное влияние препарата аллокин-альфа на клиническую картину и на некоторые показатели иммунной системы, в частности CD 16, у больных герпесвирусной инфекцией позволяет рекомендовать этот препарат в комплексной терапии этого заболевания.

Апробация работы.

Материалы доложены на научно-практической конференции "Актуальные вопросы инфекционной патологии" на IX, X, XI и XII научно-практических конференциях сотрудников и студентов ИМО НовГУ им. Ярослава Мудрого (Великий Новгород 2002, 2003, 2004, 2005), на научно-практической конференции - Актуальные вопросы инфекционной патологии, посвященной 10-летию кафедры микробиологии, иммунологии и инфекционных болезней ИМО НовГУ им. Ярослава Мудрого В.Новгород 2004г.

По материалам диссертации опубликовано 10.

Внедрение в практику.

Результаты диссертационных исследований внедрены в практику работы Городской инфекционной больницы и центра по борьбе и профилактики со СПИДом "Хелпер" Великого Новгорода. Материалы работы используются в учебном процессе на кафедре микробиологии, иммунологии и инфекционных болезней (МИиИБ) ИМО НовГУ.

Объем и структура диссертации.

Диссертация включает следующие разделы и главы: введения, обзора литературы, материалы и методы, три главы, посвященные результатам собственных клинических наблюдений и исследований, заключение, выводы и практические рекомендации, список литературы. Материал диссертации изложен на 156 страницах компьютерного набора, с учетом 40 таблиц и 32 рисунков, в том числе 6 гистограмм; список литературы включает 169 названий работ отечественных и зарубежных исследователей.

Заключение диссертации по теме «Инфекционные болезни», Азовцева, Ольга Владимировна

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ)

ГВ широко циркулируют среди людей и являются пантропными, этим объясняется широкий клинический полиморфизм течения ГВИ у человека с поражением основных органов и систем. Важным свойством ГВ является способность к длительной персистенции в клетках иммунной и нервной систем (Баринский И.Ф., Шубладзе А.К. и другие 1986г., Исаков В.А., Борисова В.В. и другие 1998г.).

Спектр клинических проявлений ГВИ отличается значительным разнообразием. Он зависит от локализации патологического процесса и его распространенности, состояния иммунной системы больного и антигенного типа вируса. Наиболее тяжело заболевание протекает после первичного инфицирования, когда отсутствуют специфические антитела к вирусу герпеса, а также у детей раннего возраста, так как наряду с отсутствием антител ещё отмечается незрелость иммунной системы. Самым неблагоприятным по течению и исходам наблюдается течение болезни у иммунодефицитных больных различного генеза, в том числе при СПИДе (Исаков В.А., Сельков С.А. и другие, 2004г., Пауашвили М.Н. и другие, 2004г., Рахманова А.Г., 2000г). На фоне ИДС может быть обострение латентных форм ГИ, которые протекают, как правило, с большим разнообразием клинических симптомов инфекции, генерализацией и развитием осложнений, которые нередко определяют течение и исход основного заболевания, создают угрозу для жизни и здоровья пациента.

Особая актуальность проблемы герпесвирусных инфекций связана с ростом заболевания СПИДа. По литературным данным известно, что вирусы герпеса активируют геном вируса иммунодефицита человека, находящийся в стадии провируса, и являются кофактором прогрессирования ВИЧ-инфекции и СПИДа (Исаков В.А. и другие, 2001г.; Новик А.А. и соавторы, 2001г.).

Также принимая во внимание тот факт, что к 7-летнему возрасту инфицированность населения герпесвирусами составляет 95-99%, можно предположить, что первичная активация ранее персистирующего вируса герпеса происходит непосредственно вирусом иммунодефицита человека, либо через вызванную им иммуносупрессию. Активация же герпетической инфекции способствует прогрессированию ВИЧ/СПИД-инфекции. В некоторых случаях возможна реинфекция новыми серотипами герпесвирусов, которые в данном случае служат кофактором активации ВИЧ-инфекции и прогрессировании основного заболевания.

В последние годы показано, что активация ГВИ у ВИЧ-инфицированных больных помимо общего усиления репликации ВИЧ происходит повышенное выделение вирионов ВИЧ в местах герпетических кожных высыпаний, которые не всегда имеют характерный для герпеса вид (Schacker Т., Ryncarz A.J, 1998; Mostad S.B., Kreiss J.K., 2000). Наиболее важно то, что при этом могут образовываться частицы смешанного фенотипа - вирионы ВИЧ, "одетые" в оболочку герпеса. Такие "закамуфлированные" частицы, в отличие от обычных вирионов ВИЧ, способны инфицировать различные типы клеток, включая эпителиальные клетки и фибробласты, давая при этом продуктивную ВИЧ-инфекцию, иными словами, становится возможным заражение ВИЧ через контакты с кожей и слизистой оболочкой (Calistri A. et а]., 1999).

При герпесе могут развиваться иммунодефицитные состояния, причем как на уровне клеточного, так и гуморального звена иммунитета (Рахманова А.Г., 2000г., Покровский В. В. и соавторы, 2003г., Исаков В.А. и другие 1998г.). То есть ослабленная, в конечном итоге, иммунная система становиться менее способной к элиминации вируса из организма, хотя сохраняет при этом свою функцию синтеза антител в течение всей жизни, причем иногда в довольно высоких титрах. Однако они лишь участвуют в нейтрализации определенных антигенов вируса, а не предупреждают возникновения рецидивов.

В последнее время вопросам иммунитета при ГВИ и ВИЧ-инфекции посвящено достаточно большое количество работ (Рахманова А.Г., 2000г., Покровский В. В. и другие, 2003г., Исаков В.А. и соавторы 1998г.). В тоже время отдельные иммунопатогенетические проблемы при ГВИ изучены недостаточно, а сведения зачастую носят противоречивый характер. А при сочетанном течении ГИ на фоне ВИЧ/СПИД инфекции иммунитет изучен недостаточно, особенно с позиции современных технологий оценки иммунного статуса, в частности, методом проточной цитометрии. Недостаточно также изучен вопрос о роли АОС при сочетанном течении герпетической и ВИЧ инфекции.

До сих пор остается недостаточно решенным вопрос о лечении ГВИ и, особенно об использовании препаратов, обладающих одновременно и противовирусным и иммуномодулирующим эффектом.

В своих исследованиях мы попытались решить некоторые малоизученные вопросы иммунопатогенеза ГВИ, особенно ее сочетанного течения на фоне ВИЧ/СПИД заболевания. Изучали указанные вопросы с позиции современных технологий оценки иммунного статуса, в частности метода проточной цитометрии. Постарались определить подходы к терапии ГВИ новым препаратом - аллокин-альфа, обладающим не только антивирусной, но и иммуномодулирующим эффектом.

Для решения поставленных вопросов и определения значимости проблемы, мы изучали не только фактологическую часть запланированного исследования, но и эпидемиологическую ситуацию по ГВИ, ВИЧ-инфекции и их сочетанного течения на территории Новгородской области. Причем анализ эпидемической ситуации проводили с учетом различных нозологических форм ГВИ.

Наши исследования показали, что на территории Новгородской области за последние 5 лет сложилась неблагоприятная эпидемиологическая ситуация по герпесвирусной инфекции, это проявляется ростом заболеваемости ветряной оспы, инфекционного мононуклеоза и опоясывающего лишая среди взрослых пациентов по сравнению с 2000 годом. Отмечается увеличение госпитализированных детей с заболеваниями, вызванными ВПГ и ВГЧ-4, в том числе, среди детей до года и значительное уменьшение частоты госпитализированных детей с ветряной оспой. Это указывает на перераспределение циркуляции герпес-вирусов среди взрослого и детского населения.

Исследованиями проводились выявления сопутствующих вирусу герпеса возбудителей, таких как Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealiticum, Candida albicans. Установлено, что у больных с более тяжелым течением генитального герпеса чаще обнаруживались сопутствующие герпесвирусу возбудители. Так, при тяжелой форме заболевания сопутствующие возбудители обнаруживались в 71,42% случаев, при среднетяжелом и латентном течении ГГ сопутствующие возбудители регистрировалась соответственно в 50% и 33,3% случаев. Выделение от больных меньшего количества сопутствующих возбудителей соответствовало менее тяжелому заболеванию. Три и более патогенов удавалось выделить только при тяжелом течении ГИ. Таким образом, определение частоты сопутствующих герпесу возбудителей имеет не только диагностическое, но и прогностическое значение в определении тяжести течения основного заболевания.

Так как в целом задачами исследования явилось изучение клинико-иммунологических показателей при ГВИ, в том числе на фоне ВИЧ/СПИД заболеваний, поэтому нами проанализирована эпидемиологическая ситуация и по ВИЧ-инфекции. На территории Новгородской области сложилась неблагоприятная эпидемиологическая ситуация, связанная с ростом кумулятивного числа ВИЧ-инфицированных, увеличением числа инфицированное™ женщин, молодой возрастной группы, нарастанием частоты полового пути передачи и появлением вертикального пути инфицирования.

В представленной работе проведен сравнительный анализ клинической симптоматики и частоты сопутствующих заболеваний у больных в различных наблюдаемых группах, в том числе при герпесвирусной инфекции (ГВИ) в сочетании с ВИЧ/СПИД инфекцией и отдельно при ВИЧ/СПИД. При этом установлено, что при наличии клинических проявлений герпетической инфекции у ВИЧ-инфицированных и СПИД-больных отмечаются более выраженная симптоматика, как герпесвирусной инфекции, так и ВИЧ/СПИД заболевания. В обеих группах с одинаковой частотой (примерно 25-30%) выявляются гемоконтактные гепатиты, но у ВИЧ-инфицированных с проявлениями герпесвирусной инфекции чаще выявлялись урогенитальные инфекции в 74,96% случаев, когда как в группе ВИЧ-инфицированных сопутствующая урогенитальная патология отмечалась только в 5,9% случаев.

В работе были изучены показатели клеточного и гуморального иммунитета у больных ГВИ, её сочетанного течения с ВИЧ/СПИД, а также отдельно при ВИЧ/СПИД.

При анализе показателей иммунограммы у больных герпетической инфекцией установлено, что содержание большинства клеток достоверно снижено: лейкоцитов на 21%, лимфоцитов на 32,6%, СОЗ-клеток на 37,1%, С04-клеток на 40,5%, С08-клеток на 28,6% по сравнению с их содержанием у практически здоровых лиц. Количество других лимфоцитов, например, CD 16 клеток, выполняющих преимущественно киллерную функцию, достоверно не отличается от аналогичных показателей здоровых лиц (287±20,2, а в норме 355,9±46,2). Известно, что натуральным киллерам в основном отводится роль в противоопухолевой защите, а при вирусных инфекциях, в частности, при ГВИ данная субпопуляция клеток имеет определенное значение лишь на начальном этапе развития заболевания (Хаитов P.M., Пинегин Б.В. и др., 1995). В динамике развития инфекционного процесса при ГВИ, вероятно, более значительную роль играют другие клетки иммунной системы. Нашими исследованиями установлено достоверное снижение иммунорегуляторного индекса на 22,7% и снижение показателей фагоцитоза с латексом на 26,2% по сравнению с их содержанием у практически здоровых лиц.

Показатели гуморального иммунитета изменяются в меньшей степени. У больных ГВИ отмечено лишь увеличение содержания IgA в 1,5 раза по сравнению с его содержанием у практически здоровых лиц, который является секреторным и в определенной степени обеспечивает местный, на уровне слизистых оболочек, иммунитет. Полученные нами данные по изучению IgA при ГВИ не противоречат данным других авторов (Исаков В.А. и др., 1999).

В присутствии вируса герпеса в организме замедляется элиминация ЦИК. Объяснение этого факта многие ученые связывают с недостаточной функцией иммунокомпетентных клеток, комплемента и цитокинов (Исаков В.А., Архипов Г.С. и др., 1999, Пригожина В. К. и соавт., 1990). Действительно, нашими исследованиями установлено понижение элиминации ЦИК на 31,5% по сравнению с аналогичным показателем у практически здоровых лиц, что может явиться одним из факторов накопления иммунных комплексов в организме.

В методе проточной цитометрии у больных ГВИ дополнительно выявлено: снижение содержания Т-лимфоцитов, несущих иммунофенотип CD5 в 1,25 раза и снижение содержания В1- и В2-лимфоцитов, несущих соответственно иммунофенотипы CD20+CD5+ и CD20+CD5- в 2,2 раза, отвечающих за синтез антител, что может способствовать низкому накоплению противогерпетических антител. Возможно, персистенция вирусных антигенов является следствием выше указанных факторов.

Содержание натуральных киллеров (NK-клетки) с высоким цитотоксическим потенциалом, несущих только CD8, при отсутствии CD3, достоверно не отличается от нормальных показателей, хотя имеет тенденцию к снижению (288,8±43,5, а у здоровых лиц 344+84,6). Количество Т-клеток антителозависимой цитотоксичности, несущих иммунофенотип CD3+ CD 16+ CD56+, при ГВИ выше по сравнению с аналогичными показателями у практически здоровых лиц в 1,1 раза. Наряду с понижением содержания многих CD-клеток, исследованиями выявлено еще снижение числа активизированных Т-лимфоцитов в 3 раза, несущих апоптотический маркер CD95 среди CD3 по сравнению с нормой. Это свидетельствует о преждевременной гибели иммунокомпетентных клеток и, прежде всего, Т-лимфоцитов, участвующих в противовирусной защите. Возможно, вирус герпеса обладает способностью индуцировать гены апоптоза Т-лимфоцитов, тем самым, обеспечивая самосохранность в организме.

При изучении содержания Т-лимфоцитов, несущих ИЛ-2 рецепторы, иммунофенотипа CD25+, у больных с ГВИ достоверно выявлено увеличение числа этих клеток в 3,2 раза при сравнении с нормой. Эти клетки отвечают за активацию и пролиферацию цитотоксических Т-лимфоцитов и их количественное изменение может оказывать влияние на цитотоксичность. Действительно, в наших исследованиях содержание С08-клеток, отвечающих за цитотоксичность, имеют тенденцию к увеличению. Несмотря на увеличение содержания указанных фенотипов, функционально они не обеспечивают цитотоксичность, что, вероятно, связано с более быстрой их гибелью. Исследованиями установлено снижение апоптотических иммунофенотипов CD95 среди Т-лимфоцитов, что косвенно свидетельствует о гибели С08-клеток, так как они являются одной из субпопуляций общих Т-лимфоцитов.

Исследованиями выявлено достоверное снижение С020-клеток, отвечающих за гуморальное звено иммунитета, что также может влиять на нейтрализацию вируса меньшим количеством антител, что, в определенной степени, создает условия для накопления и персистенции вируса в организме.

Указанным методом проточной цитометрии и с помощью моноклональных антител выявлено достоверное снижение иммунорегуляторного индекса CD4/CD8 в 2,4 раза по сравнению с аналогичными показателями у практически здоровых людей, что подтверждает наличие иммунодепрессии в организме при ГВИ. Известно, что при большинстве высококонтагиозных вирусных инфекциях, включая ВИЧ/СПИД, отмечается снижение иммунорегуляторного индекса CD4/CD8, поэтому косвенно можно предполагать о высокой контагиозности герпесвирусов.

Следовательно, результаты, полученные методом проточной цитометрии, расширяют спектр оценки иммунного статуса и позволяют на более глубоком уровне выявлять функционирование иммунной системы, в частности при ГВИ дополнительно установлено снижение в 3 раза содержания клеток, несущих апоптотический маркер CD95 и увеличение содержания CD25-iaieTOK в 3,2 раза, отвечающих за пролиферацию клеток.

Совокупность вызванных нарушений в иммунном статусе может приводить к персистенции вирусов герпеса в организме и рецидивирующему течению. Учитывая все вышесказанное, в комплексную терапию герпесвирусной инфекции необходимо включать не только иммуномодуляторы клеточного звена иммунитета, но и препараты, влияющие на активацию гуморального звена иммунитета.

Таким образом, проведенные клинические исследования по изучению иммунного статуса у больных герпетической инфекцией, ВИЧ/СПИД инфекцией и при их сочетанном течении выявили достоверные изменения основных показателей клеточного иммунитета, особенно CD4 фенотипа лимфоцитов при ГВИ и, в большей степени, при сочетанном течении этих двух заболеваний. Отмечается увеличение содержания ЦИК как при ГВИ, так и при ВИЧ инфекции и, особенно, при их сочетанном течении. Выявленные изменения в иммунном статусе разной степени выраженности у больных в различных группах наблюдений могут служить дополнительным критерием оценки тяжести, течения и прогноза заболеваний. Так, при сочетанном течении герпесвирусной инфекции и ВИЧ/СПИД заболевании отмечаются более выраженные клинические проявления и изменения в показателях клеточного и гуморального иммунитета: снижение содержания CD3-клеток в 1,2 раза, СБ4-клеток в 1,3 раза, снижение уровня IgA в 1,3 раза в сравнении с аналогичными показателями при раздельном течении данных инфекций.

При изучении содержания металлопротеидов, как одного из показателей антиоксидантной системы у больных ГВИ установлено, что в период обострения заболевания происходит повышение концентрации ЦП на 36,9% и снижение содержания ТФ на 10,5%, ЛФ на 67,96% в сыворотке крови больного. Основные металлопротеиды обладают не только антиоксидантными свойствами, но являются важными компонентами системы неспецифической резистентности, обеспечивая устойчивость организма к вирусным инфекциям.

Следовательно, определение концентрации металлопротеидов в сыворотке крови больных с ГВИ имеет не только диагностическое, но, что очень важно, и прогностическое значение в определении активности инфекционного процесса основного заболевания.

В период рецидива отмечено повышение антиоксидантного потенциала сыворотки крови (повышение содержания ЦП в 2,4 раза и снижение уровней ЛФ в 3,1 раза, ТФ в 1,1 раз). Повышение концентрации ЦП происходит вследствие активного выделения биологически активных веществ в ответ на повреждающее действие ГВ, что усиливает синтез печенью "белков острой фазы" воспаления. Увеличение концентрации ЦП обусловлено способностью I медьоксидазы инактивировать свободные радикалы, в избытке имеющиеся в очаге воспаления. Кроме того, большее количество ЦП способствует усилению продукции антител, улучшает выработку ИЛ-1 активированными макрофагами, повышает пролиферацию цитотоксических Т-клеток в том числе цитотоксических лимфоцитов. Тогда как повышение уровня ЛФ в сыворотке крови больных можно рассматривать как АОЗ и благоприятный прогностический признак.

Напряжение в функционировании АОС защиты организма сохраняется и в периоде ремиссии, что обусловлено необходимостью инактивации повышенных концентраций активных форм кислорода.

Установленное нашими исследованиями изменения в иммунном статусе и содержании металлопротеидов, как одного из показателей АОС при ГВИ и наиболее выраженных изменений этих показателей при сочетании ГВИ с ВИЧ/СПИД-заболеванием позволило нам провести изучение нового иммунокорректора (препарата аллокин-альфа), одновременно обладающим противовирусной активностью. В настоящее время для лечения ГВИ разработано и применяется большое количество препаратов, общим недостатком которых является отсутствие клинической излеченности. Эффект противовирусной терапии носит, как правило, кратковременный характер. Основная масса противогерпетических средств наиболее активна при остром течении и мало влияет на продолжительность ремиссии. Часто при отмене препаратов рецидивы повторяются с прежней частотой. Еще одной важной проблемой является появление резистентных штаммов (в том числе исходно резистентных) к базисной противовирусной терапии, в частности к ацикловиру, что представляет серьезную проблему при лечении данной патологии и может непосредственно повлиять на течение и исход самого заболевания. Это обстоятельство заставляет активно разрабатывать новые подходы комплексной терапии рецидивирующей ГВИ.

Таким препаратом в настоящее время является аллокин-альфа.

В испытуемую группу были включены 17 пациентов, которые в течение 1 недели с интервалом в один день получали 3 подкожные инъекции аллокин-альфа в дозе 1 мг.

В группу клинического контроля было включено 15 пациентов, которые получали базовую терапию в течение недели (ежедневный прием ацикловира по 200 мг 5 раз в сутки).

Ближайшие результаты лечения оценивали по изменению длительности и тяжести рецидива герпетической инфекции. Для оценки длительности рецидива использовалось время достижения полной реэпителизации, измеряемое в днях. Дополнительно оценивали показатели иммунного статуса.

Отдаленные результаты лечения оценивали по течению заболевания в течение 3-х месяцев амбулаторного наблюдения, а именно: по количеству последующих рецидивов за наблюдаемый период, по длительности ремиссий (дни).

Проведенное исследование применения препарата аллокин-альфа для лечения больных с рецидивирующими ГВИ показало эффективность аллокин-альфа - 1,0 мг. Трехкратное введение аллокин-альфа приводило к статистически значимому снижению продолжительности рецидива, снижению его тяжести, статистически значимому снижению продолжительности и тяжести следующего рецидива, уменьшению частоты последующих рецидивов.

Терапия препаратом вызывала значимое повышение функциональной активности естественных киллеров.

Аллокин-альфа был удобен в применении и хорошо переносился больными, не оказывал гепато-нефротоксического действия и токсического действия на кроветворные органы.

Следовательно, препарат аллокин-альфа может быть рекомендован для широко практического применения как препарат выбора в комплексной терапии рецидивирующих ГВИ.

ВЬГООДЫ:

1. Герпетическая инфекция до сих пор остается широко распространенным заболеванием, что подтверждается девятикратным увеличением числа госпитализаций среди взрослого населения, по сравнению с 2000 годом. Отмечается увеличение госпитализированных детей с заболеваниями, вызванными ВПГ и ВГЧ-4, в том числе, среди детей до года и значительное уменьшение частоты госпитализированных детей с ветряной оспой, что указывает на перераспределение циркуляции герпес-вирусов среди взрослого и детского населения.

2. У большинства больных ГВИ отмечаются существенные изменения, как в клеточном, так и в гуморальном звене иммунитета. Отмечается достоверное снижение количественного содержания CD3-клеток в 1,6 раза, CD4-icieTOK в 1,7 раза по сравнению с показателями здоровых лиц. Увеличение содержания секреторного IgA в 1,5 раза, ациркулирующих иммунных комплексов в 1,3 раза. Наиболее выраженные нарушения в иммунном статусе выявлены у больных ГВИ на фоне ВИЧ/СПИД-заболевания, что может являться одним из критериев оценки активности инфекционного процесса и прогноза заболевания.

3. Изучение иммунологических показателей высокотехнологичным методом проточной цитометрии выявило более глубокие нарушения в иммунном статусе у большинства больных ГВИ. Установлено достоверное снижение содержания не только CD3-клеток на 37,4%, CD4-клеток на 40,7%, выявляемых общепринятыми методами, но и количества С095-клеток в 3 раза, количества В1 и В2-лимфоцитов, несущих CD20+CD5+ и СБ20+СВ5-иммунофенотипы в 2 раза. Выявлено существенное увеличение содержания CD3+CD16&56-клеток в 2,1 раза, отвечающих за антителозависимую цитотоксичность; HLA- j DR в 1,8 раз и СБ25-клеток (несущих ИЛ-2), отвечающих за активацию и пролиферацию цитотоксических клеток в 3,2 раза по сравнению с аналогичными показателями у здоровых лиц.

4. При герпетической инфекции выявлены изменения показателей металлопротеидов: повышение концентрации ЦП на 36,9% и снижение содержания ТФ на 10,5%, ЛФ на 67,96% в сыворотке крови больных.

5. Наличие сопутствующей бактериальной флоры у больных герпесвирусной инфекцией утяжеляет течение заболевания. При тяжелой форме ГВИ 2 и более возбудителей выявлялось у 42,8% больных, а при легкой форме ГВИ только у третей части больных выявлялось не более 1 возбудителя.

6. Выявленное положительное влияние аллокин-альфа на клиническое течение и иммунологический статус у наблюдающихся больных позволяет рекомендовать этот препарат в комплексной терапии герпетической инфекции.

РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Выявленные разнонаправленные изменения в иммунном статусе в динамике ВИЧ/СПИД- и герпес-инфекции позволяют рекомендовать проведение оценки иммунного статуса в обследовании больных. Причем у больных ВИЧ/СПИД-инфекцией достаточно определения количественного содержания CD3-, CD4-KJieTOK для оценки активности и тяжести заболевания. У больных ГВИ необходимо проводить дополнительные обследования методом проточной цитометрии. Данный метод позволяет за счет большого спектра иммунофенотипирования и более выраженных индивидуальных изменений в показателях иммунного статуса, оценить глубину изменений количественного содержания CD3-, CD4-, CD95-, CD25-, CD20-, СБ5-клеток, а также их сочетания, что позволит оценить активность инфекционного процесса и послужит основанием для рекомендации выбора эффективной персонализированной противовирусной и иммунокорригирующей терапии.

2. Выявленное увеличения содержания ЦП и снижение уровней ЛФ, ТФ в сыворотке крови при обострении ГВИ позволяют дополнительно рекомендовать определение содержания металлопротеидов для оценки активности инфекционного процесса, тяжести и прогноза заболевания.

3. Выявленное положительное влияние аллокин-альфа на динамику клинической картины и иммунологические показатели позволяет рекомендовать данный препарат для комплексного лечения больных герпетической инфекцией.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Азовцева, Ольга Владимировна, 2005 год

1. Ажипа Я.И. Медико-биологические аспекты применения метода электронного парамагнитного резонанса. М.: Наука, 1983; 527.

2. Алимбарова Л.М., Гараев М.М. Лабораторные методы диагностики герпесвирусных инфекций // Актуальные проблемы герпесвирусных инфекций. М. 2004. 8-25с.

3. Амвросьева Е.В., Вотяков В.И. с соавт.1993.

4. Анохин В.А. Современные принципы клинико-лабораторной диагностики герпетических инфекций // Каз. мед. журнал. 1999.-№ 2-С. 127-129.

5. Баринский И. Ф. Герпетическая инфекция как вторичный иммунодефицит и пути его коррекции // ВИНИТИ, серия «Иммунология». М., 1988. Т. 22. С. 126-146.

6. Баринский И. Ф., Шубладзе А. К. Лейкоцитарные культуры в вирусологических исследованиях — М.: Медицина, 1980.175с.

7. Баринский И. Ф., Шубладзе А. К., Каспаров А. А„ Гребенюк В. И. Герпес (этиология, диагностика, лечение). — М., Медицина. 1986. 206, 272с.

8. Башмакова М.А., Савичева A.M. Папилломавирусная инфекция. — М.: Медицинская книга; Н.Новгород: Изд-во НГМА, 2002.-21с.

9. Бахрамов СМ., Казакбаева Х.М., Бугланов А.А. Трансферрин: роль в обмена железа и некоторые клинические аспекты. Гематолгия и трансфузиология 1987; (3): 39-42.

10. Богомолов Б. П., Бахур Е. Г. О трудностях в диагностике опоясывающегоi jлишая // Терапевтический архив, 1984. № 8. С. 138 140. ' j

11. Бойцов А.Г., Ластовка О.Н, Порин А.А. Вопросы качества при лабораторной диагностике урогенитальных инфекций // Клиническая лабораторная диагностика. -2000. №2. - с. 37-38.

12. Н.Борисова В. В. Клинико-иммунологические и прогностическое значение маркеров герпесвирусов при ВИЧ-инфекции: Автореферат диссертации кандидата медицинских наук. — СПб., 1994.

13. Бочаров А. Ф., Кицак В. Я., Бочаров Е, Ф., Трухачев А. А. Вирус простого герпеса. — Новосибирск. 1982. 322с.

14. Брязжикова Т. С. Этиологические особенности и Клинико-иммунологические проявления современной герпетической инфекции // Автореферат диссертации кандидата медицинских наук. СПб., 1995. 21 с.

15. Брязжикова Т. С., Алешина Г. М; Исаков В. А„ Мазинг Ю. А. Катионные белки нейтрофильных гранулоцитов у больных рецидивирующим герпесом // Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения. Тезисы докл. научн. канд., 23 24 марта 1995 г. СПб. С. 351.

16. Вичоградская Г. Р., Горышин И. Ю., Плуталов О. В. и Ор. Использование цепной реакции полимеризации для выявления вируса цитомегалии в тканях человека // VII Всесоюзный симпозиум «Молекулярные механизмы генетических процессов» (Москва). — 1990. С. 203.

17. Вирусные инфекции у онкогематологических больных (патогенез, диагностика, клиника, профилактика и лечение)./ ред.проф. В.НЛеботкевич, К.М.Абдулкадыров. Изд-во РОЗА МИРА, СПб,.2002.-133с.

18. Вирусология в 3-х томах. / Под ред. Б. Филдса, Д. Найпа. Перевод с англ. — М.:.Мир, 1989.

19. Внутренние болезни под ред. Харрисона Т.Р. пер. с англ.// М. "Медицина", 1994.

20. Галкин Ю. Н., Нильсон И, О., Эриксен Т. и др. О клиническойклассификации синдрома приобретенного иммунодефицита // Клиническая медицина 1990. Т.68. № 10. С. 99- 102.

21. Гирин В. Н., Липкам Г., Пороховницкий В. Г. Синдром приобретенного иммунодефицита. — Киев, Здоровье, 1991. 141с.

22. Гранитов В.М. Герпесвирусная инфекция // Н. Новгород. -2001.-82с.

23. Гриневич Ю.А., Алферова А.Н. Определение иммунных комплексов в крови онкологический больных. Лабораторное дело, 1981, 8, 493-496с.

24. Диагностика герпесвирусных инфекций человека: меморандум совещания ВОЗ // Берлин,25-26.08.90.

25. Диагностика, лечение и профилактика заболеваний, передаваемых половым путем. Методические материалы./ред.проф. К.К.Борисенко. М., 1997 -72 с.

26. Егоров А. М., Осипов А. П., Дзантиев Б. Б. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа — М.: Высшая школа, 1991. 288с.

27. Иванов К.С., Лобзин Ю.В., Решетников М.М., Жданов К.В. ВИЧ-инфекция: некоторые клинические и экспертно-диагностические аспекты // Военно-медицинский журнал. 1994. №1. - с. 48-51.

28. Ивановская Т. Е., Гусман Б. С. Заболевания, обусловленные вирусами герпеса // Патологическая анатомия болезней плода и ребенка: Руководство для врачей. / Под ред. Т. Е. Ивановской, Л. В. Леоновой. — М. 1989. Т. 2. С. 266-271.

29. Исаков В.А., Архипов Г.С., Аспель Ю.В. и др. Иммунопатогенез и лечение генитального герпеса и хламидиоза. Руководство для врачей. Новгород СПб., 1999. - 150с.

30. Исаков В.А., Борисова В.В., Исаков Д.В. Патогенез и лабораторная диагностика герпеса. Руководство для врачей. СПб., Лань. 1998. 205с.

31. Исаков В.А., Каболова И.В., Ермоленко Д.К., Азовцева О.В. Актуальные вопросы инфекционной патологии// Матир. Научно — практической конференции. В.Новгород.2004.С.88-91.

32. Исаков В.А., Сафронова М.М., Аспель Ю.В. Противовирусная терапия герпеса у больных с иммунодефицитами.//Тегга Medica.l999.-N2.-C.12-14.

33. Исаков В. А., Ермоленко Д. К. Брязжикова Т. С. и др. Принципы терапии больных простым герпесом: Информационно-методическое письмо. СПб., 1993. 23 с.

34. Исаков В. А., Ермоленко Д. К., Черных М. Д. Терапия герпетической инфекции. — СПб., 1993. 40с.

35. Исаков В.А., Сафонова М.М., Семенова А.Е. и др. Медико-социальное значение и современная терапия генитального герпеса.// Int.J. on Immunorehabilitation. 1996.-№2.-С. 11-25.

36. Исаков В. А., Сафронова М. М. Клиника и лечение генитального герпеса. — СПб., 1997.30с.

37. Исаков В.А., Сельков С.А., Мошетова JI.K., Чернакова Г.М. Современная терапия герпесвирусных инфекций. Руководство для врачей. СПб-М., 2004.-167с.

38. Исаков В. А., Туркин В. В., Киселев О. И. и др. Использование антиоксидантов в терапии гриппа и ОРЗ. — СПб., 1996. 52 с.

39. Исаков В. А., Чайка Н.А., Ермоленко Д. К., Вирус герпеса 6-го типа и СПИД-Л., 1991.28с.

40. Келли Е. И., Шишов А. С. Клинико-морфологический анализ причин летальных исходов у больных опоясывающим герпесом // Актуальные проблемы медицинской вирусологии. Тезисный доклад конференции. — М., 1985. 252с.

41. Кетлинский С. А., Калинина Н.А. Иммунология для врача. — СПб., 1998. 155с.

42. Кибардин В. М. и др. Простой и быстрый метод определения антител к вирусу простого герпеса // Журнал микробиологии 1989. № 1. С. 61.

43. Козлов В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий. Руководство для врачей. М.: Триада-Х.2003. —493с.

44. Коломиец А. А., Вотяков В. И., Бикбулатов Р. М. Генерализованная герпетическая инфекция: факты и концепция. Минск. 1992. 350с.

45. Коломиец А. Г., Малевич Ю. К., Коломиец Н.Д. Многоликий герпес. Минск. 1988. 70с.

46. Кудашов Н.И. Герпесвирусная инфекция у новорожденных детей // Вопр. охр. материнства и детства.- 1991.- Т. 36.- № 5.- С. 3-8.

47. Кулаков В. В., Дис. докт. мед. наук. М., 1998.

48. Кулаков В. В., Воробьева Н. В., Пинегин Б, В. //Иммунология,-1995.-№ 4.-С. 31-34/

49. Кулаков В. В., Пинегин Б. В. // Иммунология.-1995- № 5.-С. 44- 46.

50. Лобзин Ю.В.,Жданов К.В., Иванов К.С. К вопросу о врачебной экспертизы ВИЧ-инфицированных//Актуальные вопросы ВИЧ-инфекции.-СПб.,1997г.-с.95-96.

51. Лысенко А. Я., Лавдовская М. В. СПИД-ассоциируемые инфекции и инвазии / /М.: Медикас, 1992. 320с.

52. Марченко Л.А., Лушкова И.П. Генитальный герпес и его влияние нарепродуктивное здоровье женщин./ Качество жизни. Медицина. // Болезни репродуктивной системы. № 3 (6)/2004.- с.39-43.

53. Недоборский К.В., Романович И.К., Федоренко В.И. // Вирусы и вирусные инфекции на пороге 21 века: эпидемиология и профилактика. СПб. -1999. 109с.

54. Новик А.А., Цыган В.Н., Дулатова Н.Х. и др. Синдром хронической усталость т иммунной дисфункции. СПб., 2001.- 100 с.

55. Новицкий В.А., Пушкарская Н. Л., Баринский И. Ф. // Вопросы вирусологии 1987. №3, 261-277с.58.0нищенко Г.Г. ВИЧ-инфекция в России и странах СНГ: современнаяситуация и перспективы // Микробиология, эпидемиология, иммунология. 2003г. -№3.с.21-27.

56. Пауашвили М.Н., Щелканов М.Ю. Некоторые аспекты герпеса у ВИЧ-инфицированных пациентов.//Актуальные проблемы герпесвирусных инфекций. М.,2004.-С. 106-123.

57. Перадзе Т. В., Халонен П. Иммунологическая диагностика вирусных инфекций. — М.: Медицина, 1985. 301с.

58. Петров Р. В., Лопухин Ю. М., Чередеев А. Н. и др. Оценка иммунного статуса человека: методические рекомендации. — М., 1984.

59. Поздеев O.K. Медицинская микробиология/ Под ред. Акад. РАМН В.И. Покровского.- М: ГЭОТАР-МЕД. 2001.- 768с.: ил.- (XXI век)

60. Покровский В.И. и соавторы. СПИД глобальная проблема века. О перспективных научных исследованиях по проблеме «СПИД»//Вестник РАМН, 1992. - № 9,10, с.3-8.

61. Покровский В.В., Юргин О.Г., Беляева В.В. и др. Клиническая диагностика и лечение ВИЧ-инфекции. Практическое руководство. М., ГОУ ВУНМЦ РФ.-2001 .-91с.

62. Покровский В. В., Ермак Т. Н., Беляева В. В., Юрин О. Г. ВИЧ-инфекция: клиника, диагностика и лечение. Под общ. ред. В.В.Покровского (2-е изд., испр. и доп.).-М.: Гэотар Медицина, 2003.-c.488

63. Пригожина В. К., Исаков В.А., Ермоленко Д. К. и др. Актуальные вопросы инфекционной патологии // Матер, научно-практическая конференция — Тольятти. 1990. С. 61-63.

64. Пригожина В. К., Чайка Н.А., Рахманова А. Г. Герпетическая инфекция и СПИД: рекомендации для врачей. —-Л., 1990. 44 с.

65. Рахманова А.Г. ВИЧ-инфекция. Клиника и лечение. СПб.,2000.-3 67с.

66. Рахманова А. Г., Исаков В.А., Чайка Н.А. Цитомегаловирусная инфекция и СПИД: рекомендации для врачей. — Л., 1990. 61 с.

67. Рахманова А.Г., Голубев Д.Б., Борисова В.В., Исаков В.А. Способпрогнозирования течения ВИЧ-инфекции.//Патент РФ № 2097766 от 27.11.1997г.

68. Рахманова А. Г., Пригожина В. К., Неверов В.А. Инфекционные болезни: Руководство для врачей общей практики. М.; СПб., 1995. 302 с.

69. Рахманова А. Г., Исаков В.А„ Чайка Н.А. Цитомегаловирусная инфекция и СПИД. — Л.: НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, 1990. 64с.

70. Рахманова А. Г., Мальцева И. В., Чайка Н.А Вирус Эпштейна — Барр и СПИД. — Л.: НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, 1990. 48 с.

71. Рахманова А.Г, Неверов В.А., Кирпичникова Г.И„ Ремезов А.П. Стратегия и тактика диагностики и лечения герпетических инфекций. СПб. - 1999. -С.4-5.

72. Роит А. Основы иммунологии./М., «Мир», 1991.-327с.

73. Руководство по инфекционным болезням /Под редакцией проф. Ю.В. Лобзина и проф. А.П. Казанцева. СПб.: ТИТ "Комета", 1996 - 720 с. ISBN-5-7116-0098-2.

74. Семенов Б. Ф., Каулен Д. О., Баландин И. Г. Клеточные и молекулярные основы противовирусного иммунитета. М: Медицина, 1982. С. 35 47.

75. Семенова Т. Б., Красников Д. Г., Судариков А. Р. Клиника, диагностика и лечение генитального герпеса у женщин // Акушерство и гинекологии 1990. №6. с. 70.

76. Сизова Н.В., Москвина Е.А., Бурова Н.В., Корягин В.Н., Амбросимова Л.Н. Герпетические инфекции по материалам ГИБ №30 им. С.П.Боткина.//Инфекционные заболевания в Санкт-Петербурге на рубеже веков// СПб.: Изд-во НИИХ СПбГУ, 2003.-123-125с.

77. Сорокина М.Н., Безух С. М. Поражения нервной системы при герпесе // СПб. —1996. 34 с.

78. Стефании Д.В., Виноградова Т.В. Метод определения циркулирующихиммунных комплексов с использованием сыворотки, содержащей ревматоидный фактор. Лаборарорное дело, 1981, №7

79. Сухих Г. Т., Ванько Л. В., Кулаков В. И. Иммунитет и генитальный герпес. — Н. Новгород—Москва, 1997. 221с.

80. Трофимова Е.И. Использование полимеразной цепной реакции для выявления герпесвирусов у пациентов с иммунодефицитными состояниями // Автореферат диссертации кандидата биологических наук -М. -1997.-28с.

81. Фрейдлин И.С. Иммунная система и ее дефекты // СПб. -1998.-112с. 85.Чеботкевич В.Н., Абдулкадыров К.М., Волков А.В., Моисеев С.И.,

82. Ушкалова В.Н., Иоанидис Н.В., Кадочникова Г.Д. и др. Контроль перекисного окисления липидов. Новосибирск: Изд. Новое, ун-та, 1993; 179.

83. Ярилин А.А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме // Патол. физиология и эксп. Терапия, 1998, №2, с. 38-48.

84. Ярилин А.А., Никонова М.Ф. Ярилина А.А., Варфоломеева М.И. Григорьева Т.Ю. Апоптоз, роль в патологии и значимость его оценки при клинико-иммунологическом обследовании больных. // Медицинскаяиммунология, 2000, Т 2, с. 7-16.

85. Ярославский В.К., Исаков В.А., Семенов А.Е., Анчуков А.А. Герпетическая инфекция и беременность. СПб. -1996. - С.8-9.

86. Шишов А. С., Уманский К. Г. Опоясывающий герпес и его генерализованная форма // Клиническая медицина 1988. Т.59. № 9. С. 66 -71.

87. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология. М.: издательство ВНИРО, 1995г.-219с.

88. Цинзерлинг А.В., Шабалов Н.П. Внутриутробные инфекции (частота и диагностика) // Арх. пат. 1992.- №1- с.24-30.

89. Эбралидзе JI. К., Хамаганова И. В. Новые возможности лабораторной диагностики генитального герпеса // Вестник дерматологии и венерологии 1991. №6.

90. Ярилин А. А. Основы иммунологии. М., 1999.-С. 474-478.

91. Apperly J.F., Goldman J.M. Cytomegalovirus biology, clinical features and methods for diagnosis // Bone Marrow Transplantation 1988. - vol.2. - P.253-264.

92. Armstrong D., Ely M., Steger L. Post-transfusion cytomegaloviremia and persistence of cytomegalovirus in blood // Infect, immun. -1971. -vol.3.-P. 159163.

93. Amadori A., Zamarchi R., Ciminele V. et al, HTV-1 specific В cell activation: A major constituent of spontaneous В cell activation during HIV-1 infection // J. Immunol. 1989. Vol. 143. №2. P. 2146 2152.

94. Berry E.B. The effects of nutrients on lipoprotein susceptibility to oxidation. Current opinion in lipidology 1992; (1): 5-11.

95. Bovemi P., Mirandola P., Secchiero P. et al. Human herpes virus 6 (variant A) in Kaposi's sarcoma // Lancet. 1993, Vol. 341. JS6 8846. P. 1288 1289.

96. Campanini A. Importanza degli immunocomplessi circolanti in patologia. (Osservazioni critiche Sulle tecniche di rilevamento degli 1С circolanti). "Rass., paton. Appar. Respire.", 1979, 29 №2, 161-184

97. Carrigan D. R., Knox К. K., Tapper M. A. Supression of human immunodeficiency virus type 1 replication by human herpesvirus-6 // J. Infect. Dis. 1990. Vol. 162. JM» 4. P. 844 851.

98. Carney W.P, Lacoviello V., ffirsch M.S. Functional properties of T-lymphocytes subsets in cytomegalovirus mononucleosis // J. Immunol. 1983, -vol.130.-P.390-393.

99. Couch R.B., England J.A., Whimbey E. Respiratory viral infections in immunocompetent and immunocompromised persons // Amer. J. Med. -1997.-vol .102.-Ne 17.-P.2-9.

100. Croen K. D., Ostvove J. M., Dragovic L. I, et al. Patterns of gene expression and sites of latency in human nerve ganglia are different for varicella-zoster and herpes simplex virus // Proc. Nat. Acad. 1988. Vol. 85, № 24. P. 9773-9777.

101. Danis V., Trent R., Clancy R. A modified clg deviation radioimmunoassay for usein a routine clinical laboratory. "J. Imm. Meth." 1980, №2, 175-182p.

102. Detection of circulating immune complex by the inhibition of anti-ahtibody. "Clin.Immunol and ImmunopathoF'./Aut. Kano Kyoichi, Nichimaki Tomor, Palosuo Timo, Loza Ulana, Milgrom Filix. 1978, 9, №4, 425-435.

103. Einsele H., Steidle M., Vallbracht A. et al. Early occurrence of human cytomegalovirus infection after bone marrow transplantation as demonstrated by the polymerase chain reaction technique // Blood. 1991. - vol.77. ■ № 5. -P.1104-1110.

104. Fabricant C.G., Fabricant J., 1985

105. Foucar K, Glueken JA. Clinical application of immunologic techniques to the diagnosis of lymphoproliferative and immunodeficiency disorders. Lab. Medicine. 1982; 13:403-413.

106. Fowler K.B., Stagno S., Pass R.F., Britt W. G., Alfold C.A. The outcome of congenital cytomegalovirus infection in relation to maternal antibody status // N. Engl. J. Med. 1992 - vol.326. -P.663-667.

107. Frencel N., Schirmer Т. C., Wyatt L. S. et al. Isolation of a new herpes virus from human CD4+ T cells // Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1990. 87. P. 748 752.

108. Fuicher D.A. Wong S. /Carboxifluorescein succinilinidyl ester-based proliferative assays for assessment of T cell function in the diagnostic laboratory/ Immunology and Cell Biology.-1999.-Vol. 77.-P.-559-564

109. Fujinami R.S., Nelson J.A., Walker L. and Oldstone M.A. Sequence homology and immunologic cross-reactivity of human cytomegalovirus with HLA-DR s-chain: a means for graft rejection and immunosupression // J. Virol. 1988.-vol.62.-P. 100-105.

110. Gallo R. C. Mechanism of disease induction by HIV// J. AIDS. 1990. № 3. P. 380 -389.

111. Gilden D. H., Vafai A., Shtram Y. et al. Varicella-zoster virus DNA in human sensory ganglia //Nature. 1983. Vol. 306. P. 478 480.121. GrattonM.T., 1989

112. Halliwell В., Gutteridge J.M.C. The antioxidants of human extracellular fluids. Arch Biochem Biophys 1990; 280:1-8.

113. Hanshow J.B, Development abnormalities associated with congenital cytomegalovirus infection//Adv. Teratol.-1970.-vol.4.P.64-93.

114. Hashido M., Kawana T. Herpes simplex virus-specific IgM, IgA and IgG subclass antibody responses in primary and nonprimary genital herpes patients

115. Microbial Immunity. 1997. - 41. - № 5. -P.415-420.

116. Ha-sbold, Gen AV, Rush JS. at al. // Immunology and Cell Biology.- 1999.-Vol. 77.-P -516-522.

117. Herald В. C. Glycoprotein С of herpes simplex virus type 1 plays a principal role in the adsoption of virus to cells and in infectivity // J. Virol. 1991. Vol. 65, № 3. P.1090 1098.

118. Hoffinan C., Kamps B. S. HIV Medicine 2003. Flying Publisher, Paris, 2003. p. 239.

119. Hudson L., Hay F.C. "Practical Immunology". Oxford, London, Edinburg, Boston, Merlburn, 1980, 400p.

120. Ibraham A., Gauder E., Roittmann S. et al. Should cytomegalovirus be tested for both blood and bronchoalveolar lavage fluid of patients at a high risk of CMV pneumonia after bone marrow transplantation // Br. J. Haematol. 1997. 98 (1). - P.222-227.

121. Jackson A. Basic phenotyping of lymphosytes: Slection and testing of rgents and interpretation of data. Clin. Immunol. Newslett, 1990; 10: 43-55.

122. Jacobson M.A., Mills J. Serious cytomegalovirus disease in the acquired immunodeficiency syndrom (AIDS). Clinical findings, diagnosis, and treatment // Ann. Intern. Med. 1988. - vol.108. -P.585-594.

123. Jang I. K. et al. Human 4 IBB (CD137) signals are mediated by TRAF2 and activate nuclear factor-kkB// Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. Vol.242. P. 613-620.

124. Kawana Т., Kawagoe К., Takizawa J.Т., Cheng Т., Kawaguchi Т., Sakamoto S. Clinical and virologic studies on female herpes // Obset. Gynecol. 1982. - V.60.-P.456-461.

125. Kempe A., Hall C.B., McDonald N.E. et al. Influenza in children with cancer//J. Pediatr. 1989. v. 115. P.33-39.

126. Kerr J.F., Wyllie A.H., Curie A.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implication in tissue kinetics // Br. J. Cancer, 1972, V. 26, P. 239-257.

127. Ken- J.F., Winterford C.M., Harmon B.Y. // Cancer, 1994, V. 73, P. 379388.

128. Koichi Yamanishi. Human Herpesvirus 6 and 7 Infection // IHMF Herpes. 1995. Vol. 2. ,№3. P. 69 75.

129. Lindsley M.D., Torpey DJ.III, Rinaldo C. R. Jr. HLA-DR-restricted cytotoxity of cytomegalovirus-infected monocytes mediated by Leu-3-positive T-cells//J. lmmunol.-1986.-vol. 136.-P.3045-3051.

130. Luginbuhl L. M., Orav E. J., Mcintosh K., Lipshultz S. E. Cardiac morbidity and related mortality in children with HIV infection // JAMA. 1993. Vol. 269. №22. P. 2869 75.

131. Lusso P., Gallo R. G. Human herpes 6 in AIDS //Lancet. 1994. Vol. 343. № 8897. P.555.

132. Lyons A. B.at al. Determination of lymphocyte division by flow cytometry // Jornal of Imrnmol. Methods,-1994.-Vol. 171.-P.-131-137.

133. Mathiesen T, Linde A., Olding-Stenkvist E. et al. Specific IgG subclass reactivity in herpes simplex encephalitis. // J. Neurol. 1988. vol.235. - №7. -P.400-406.

134. Mc Geoch D. J. The genome of herpes simplex virus: structure, function and evolution//Biol. Chem. Hoppe-Seyler. 1986. Vol. 367. P. 477.

135. McGuire T. Chronic active Epstein — Bair virus infection, an AIDS-Co

136. Factor or predominant infection? // Med Hypotheses. 1993. Vol. 40. №1. P. 8 -14.

137. Melbye M., Grossman R. J., Goedert J. J. et. at. Risk of AIDS after herpes zoster // Lancet. 1987, № 8535. P. 728 731.148. Melnick J. Et al, 1990

138. Meurman O., Waris M., Heedman K. Immunoglobulin G antibody avidity in patient with respiratory syncytial infection // J.Clin. Microbiol. -1992. V.30. — P.407-413

139. Meyers J.D., Flournoy N., Thomas E.D. Cytomegalovirus infection and specific cell-mediated immunity after marrow transplantation // J. Infect. Dis. -1980.-vol.142.-P.816-824.

140. Meyers J.D., Flournoy N., Thomas E.D. Risk factors for cytomegalovirus infection after human marrow transplantation//.!. Infect. Dis. 1986. vol. 153. -P.478-488.

141. Parish R С// Immunology and Cell Biology.- 1999.-Voi. 77.-P.- 499-508.

142. Patel R., Smith T.F. et ai.// J.Inf. Dis.l71:1010-1014.1995

143. Plettenberg A., Stoehr A., Meigei W. Skin and mucosal infections caused by viruses of the herpesvirus group in HTV infections // Dtsch. Med. Wochenschr. 1993. Vol. 118. .№ 1-2. P. 30 7.108.

144. Plotkin S.A., Huang E.-S. Cytomegalovirus vaccine (Towne-strain) does not induce latency // J. Infect. Dis. 1985. - 152, P.395-397.

145. Russel J.H. Activation-induced apoptosis of mature T cells in the regulation of immune responses// Curr. Opin. Immunol., 1995, v. 7, p. 382-388.

146. Schacker Т., Ryncarz A.J, 1998; Mostad S.B., Kreiss J.K., 2000

147. Schoud B.D., Blackburn N.K., Jonson S., McAnerney J.M., Miller B. Low antibody avidity in elderly chickenpox patient // J.Med.Virol. -1992. —V.37. — P.113-115.

148. Slater T.F. Free-radicals mechanisms in tissue injury. J Biochem 1984; 222(1): 1-15 (84 ret).

149. Smith M.G. Propagation in tissue virus from human satwary gland virus (SGV) disease //Proc. Soc. Exp. Biol. (N.Y.). -1956. -vol. 92.-P.424.

150. Snoeck R., de Clercq E. Herpesvirus infections in immunocompromised patients // Infectious complications of cancer / ed. Klastersky J. Boston et al. -1995. - P.149-171.

151. Stocks J. Studies of the anti-oxidant component of humen serum and red cell: Ph D thesis. University of London, 1982.

152. Tchebotkevitch V., Abdouikadirov K., Voikov A. PCR in diagnosis of infection in immunosupressed patients. // First European Meeting on Diagnosic PCR, Amsterdam, 1995, №12-13 October, P.28.

153. Thomas H.I.J., Morgan Capner P., Enders G,, O'Shea S., Calicott D., Best J.M. Persistent of specific IgM and low avidiry specific IgG, following primary rubella // J.Viron.Meth. - 1992. - V.339. - P.149-155.

154. Vitale M., Caruso A., Licenziati S. // Cytometry.-Vol.-39.-P.-189-194.

155. Wildly P. Portraits of viruses. Herpes virus // Intervirology. 1986. Vol. 25.P. 117-140.