Изыскание методов оценки и средств повышения устойчивости иммунокомпетентных клеток к радиоиндуцированному апоптозу тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Иванов, Иван Семенович

• Иванов, Иван Семенович
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Иванов, Иван Семенович

Стр.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Радиационная патология, вызванная ионизирующими излучениями.

2.2. Иммунопатология радиационного поражения организма.

2.2.1. Молекулярно - клеточные механизмы патологии иммунной системы при радиационных поражениях.

2.2.2. Радиоиндуцированные патоморфологические изменения на клеточном и органном уровнях,.

2.2.3. Интерфазная гибель клеток по механизму радиоиндуцирован-но'гоапоптоза,.,.'.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Материалы и методы исследований.

3.1.1. Материалы.

3.1.2. Методы исследований.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4.1.Сравнительный анализ маркеров спонтанного и радиоиндуцированного апоптоза лимфоцитов периферической крови и иммунокомпетентных органов у интактных и облучённых животных.

4.1.1. Спонтанный и радиоиндуцированный апоптоз лимфоцитов ин вйтро.

4.1.2. Радиоиндуцированный апоптоз лимфоцитов иммунокомпетентных органов у облучённых животных ин виво.

4.1.3. Отбор оптимальных методов оценки радиоиндуцированного апоптоза на клеточном уровне.

4.1.4. Изучение возможности повышения устойчивости иммуноцитов ^ к радиоиндуцированному апоптозу в опытах ин витро.

4.1.5. Оценка антиапоптогенной активности отобранных препаратов на сельскохозяйственных животных.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

6. ВЫВОДЫ.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изыскание методов оценки и средств повышения устойчивости иммунокомпетентных клеток к радиоиндуцированному апоптозу»

Учитывая слабоизученность проблемы и отсутствие эффективных антиапоптогенных препаратов при радиационной патологии, нами предприняты настоящие исследования.

1.2. Цель и задачи. Целью настоящих исследований явилось изыскание методов оценки и средств повышения устойчивости клеток - мишеней (иммуно-цитов) к радиоиндуцированному апоптозу.

Исходя из цели, на разрешение были поставлены следующие задачи:

1) на основе сравнительного изучения различных методов отобрать наиболее характерные из них для оценки апоптоза клеток - мишеней ин витро;

2) изучить морфогистологические изменения иммунокомпетентных органов у животных в процессе развития радиоиндуцированного апоптоза;

3) провести оценку антиапоптогенных свойств препаратов антибактериальной и иммунотропной природы и отобрать из них наиболее активные в модельных опытах ин виво;

4) испытать эффективность отобранных аити ап о птоге н о в на. летально облученных животных.

Работа выполнена в соответствии с тематическим планом института «Разработка высокоэффективных лечебно - профилактических средств при радиационных поражениях сельскохозяйственных животных», № госрегистрации 01990005332.

1.3. Научная новизна. Впервые на основании изучения морфогистологических и биохимических изменений в органах и тканях системы иммунитета: 1) получены данные о механизмах развития в облучённом организме радиоиндуцированного апоптоза; 2) отобраны оптимальные критерии прямой оценки состояния радиоиндуцированного апоптоза иммунокомпетентных клеток периферической крови; 3) на основании сравнительного изучения эффективности различных методов оценки состояния апоптоза разработана методика оценки эффективности радиопротекторов ин витро; 4) с использованием разработанного метода оценки состояния апоптоза отобраны радиопротекторы - антиапоптогены с высокой радиозащитной активностью; 5) в опытах на лабораторных и сельскохозяйственных животных показана высокая эффективность новых радиопротекторов, повышающих устойчивость животных к радиоиндуцированному апоптозу и обеспечивающих выживание животных в условиях летального облучения.

1.4. Научно - практическая значимость работы.

Совершенствование диагностики радиационных поражений, а также их адекватной терапии невозможно без глубоких знаний о патогенезе радиобиологических эффектов в органах-мишенях. Проведённые исследования по изучению процессов радиоиндуцированного апоптоза клеток-мишеней радиационного поражения - иммуноцитов, позволяют углубить представления о механизмах развития радиационной патологии. Модель оценки спонтанного и радиоиндуцированного апоптоза лимфоцитов может быть использована для направленного поиска фармакологических средств для защиты организма от радиационных поражений.

Практическая значимость работы определяется тем, что результаты проведённых исследований использованы при составлении нормативно — технических документов:

1. Временного наставления по применению противорадиационного микробного полиантигена - Утв. ВНИВИ 18. 10. 2002 г.

2. Методических рекомендаций по оценке радиоиндуцированного апоптоза - Утв. ВНИВИ 14. 04. 2003 г.

3. Методических рекомендаций по повышению устойчивости лимфоцитов к радиоиндуцированному апоптозу - Утв. ВНИВИ 14. 04. 2003 г.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту.

1. Методы оценки радиоиндуцированного апоптоза иммунокомпетентных клеток у животных.

2. Методы и средства, повышающие устойчивость иммунокомпетентных клеток к радиоиндуцированному апоптозу.

1.6. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на: Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (г. Казань, 2002); Международной научнопрактической конференции по актуальным проблемам болезней молодняка в современных условиях (г. Воронеж, 2002); Научно-практической межрегиональной конференции по перспективам развития регионов России в 21 веке (г. Ижевск,2002); Международной конференции, посвященной шестидесятилетию образования факультета ветеринарной медицины Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии (г. Ульяновск, 2003), на заседаниях учёного совета ВНИВИ (2001-2003).

1.7. Публикация результатов исследований. Основные результаты диссертационной работы опубликованы в 13 работах, в том числе 1 статья, 6 тезисов, 3 отчёта о НИР, 3 нормативно-технических документа.

1.8. Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 150 страницах машинописного текста включающих введение, обзор литературы, собственных исследований материалов и методов, обсуждения полученных результатов, выводов5 практических предложений и приложений. Список литературы включает 212 работ отечественных и зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 8 таблицами и 25 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Иванов, Иван Семенович

6. ВЫВОДЫ

1. На основании сравнительного изучения эффективности различных методов (морфогистологических, биохимических, радиометрических) оценки интерфазной гибели облученных ин витро лимфоцитов, отобрана оптимальная тест-система - суправитальная окраска клеток флуоресцентными красителями (эозином, эритрозином, трипановым синим) с последующей микроскопической цитометрией апоптозных клеток.

2. Установлено, что облучение лимфоцитов периферической крови как ин витро, так и ин виво в сублетальных дозах гамма-лучей ускоряет частоту интерфазной гибели клеток в 9,8 раза, а в условиях летального облучения выживает не более 0,7-1,1 % клеток.

3. Интерфазная гибель облученных клеток реализуется по пути апоптоза, включающего распад ядерного хроматина (кариопикноз) и фрагментацию ядра (кариорексис). Указанные формы кариопатологии наблюдаются как в условиях культур клеток (ин витро), так и при облучении самого макроорганизма.

4. Феноменология интерфазной гибели лимфоидных клеток в облученном организме имеет некоторые особенности, наиболее ранним признаком которой является вакуолизация ядра с последующим появлением полусферических глы-бок - апоптозных телец.

5. Усиленный распад ядер (кариорексис) и самих клеток (цитолиз) под воздействием ионизирующих излучений сопровождается опустошением лимфоидной ткани центральных и периферических органов иммунной системы, появлением в синусах лимфоузлов розеткообразующих макрофагов с повышенной активностью фермента щелочной фосфатазы, свидетельствующие о развитии в облученном организме аутоаллергии, фагоцитоза, пиноцитоза апоптотических процессов.

6. Установлено, что предварительное или последующее за облучением введение в инкубируемую лимфоцитов среду испытуемых потенциальных радиопротекторов — антиапоптогенов в отобранной тест-системе позволяет проводить быструю (за 1-2 суток) скрининговую оценку эффективности радиозащитных средств без использования лабораторных животных с последующим 30-суточным наблюдением за ними для получения окончательного ответа.

7. С использованием отобранной тест-системы по оценке апоптозного поражения облученных клеток проведены скрининговые исследования по поиску антиапоптогенных средств. Установлено, что из испытанных 4 потенциальных радиозащитных средств и 2 сочетаний их отобраны 2 препарата «Иммуно Н» и МК-1, на основе которых сконструирована композиция, применение которой в модельных опытах ин витро как до (24 ч), так и после (через 24 ч) облучения в летальной дозе (5,0 Гр) способствовало к повышению устойчивости лимфоцитов к радиоиндуцированному апоптозу, значительно увеличивая число жизнеспособных клеток.

8. Применение сконструированного радиозащитного препарата за 24 ч до и через 24 ч после летального облучения на овцах в дозе 25 мг/кг («Иммуно Н») и 17 мг/кг (МК-1) оказывало радиомодифицирующий эффект на течение и исход лучевой болезни, обеспечивая более благоприятное ее течение (менее выраженные лейко- и лимфопения, сохранение архитектоники иммунокомпетентных органов, ингибирование процессов опустошения лимфоидной ткани и уменьшения количества апоптозных клеток) и большую выживаемость (до 80 %) облученных и обработанных препаратом животных.

9. Антиапоптогенное действие сконструированного радиозащитного препарата реализуется блокированием механизма запуска программированной гибели клеток - мишеней апоптоза лимфоцитов путем:

- нейтрализации липидных радиотоксинов и ингибирования активности фермента липоксигеназы, участвующих в усилении и поддержании апоптозного сигнала;

- повышением устойчивости клеток-мишеней апоптоза лимфоцитов их ци-топлазматических ферментов под воздействием иммунотропного препарата («Иммуно Н»), сочетанного с антибактериальным средством (МК - 1).

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты проведенных исследований позволили рекомендовать методы оценки радиоиндуцированного апоптоза и средство для повышения устойчивости клеток — мишеней апоптоза — лимфоцитов, применение которых регламентируется следующими нормативно - техническими документами:

1. Временное наставление по применению противорадиационного микробного полиантигена - Утв. ВНИВИ 18.10.2002 г.

2. Методические рекомендации по оценке радиоиндуцированного апоптоза - Утв. ВНИВИ 14. 04. 2003 г.

3. Методические рекомендации по повышению устойчивости лимфоцитов к радиоиндуцироваиному апоптозу - Утв. ВНИВИ 14. 04. 2003 г

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Иванов, Иван Семенович, 2003 год

1. Акоев И.Г., Максимов Г.К., Тяжелова В.Г. Количественные закономерности радиационного синдрома//М.: Энергоиздат, 1981. 112 с.

2. Ариэль Б.М. О повреждении миокарда под влиянием рентгеновских лучей в условиях функционального отягощения сердечно-сосудистой системы: Дис. . канд. мед. наук. Л., 1965 (ЦНИРРИ). 123 с.

3. Ахмадеев P.M., Зайнуллин Л.И., Алимов A.M. Методические рекомендации по определению электрофоретических и антигенных свойств полипептидов сальмонелл методами диск —электрофореза в ПААГ ДСН и иммуноблотин-га. - Казань, 2002.-24с.

4. Белов А.Д., Киршин В.А. Ветеринарная радиобиология, М.: Колос, 1981. -250 с,

5. Белов А.Д., Киршин В.А. Ветеринарная радиобиология // 2-е изд. псрер. и доп. /Учебники и учебное пособие для студентов высших учебных заведений. М.: Агропромиздат, 1987. - 287 с.

6. Белов АД., Киршин В.А., Лысенко И.П., Пак В.В. Радиобиология. М.: Колос, 1999. - 384 с.

7. Белоусова О.И., Горизонтов П.Д., Федотова М.И. Радиация и система крови. -М.: Атомиздат, 1979. 125 с.

8. Боднарчук И.А. Гипотеза о механизме индукции адаптивного ответа при облучении клеток млекопитающих в малых дозах // Радиационная биология. Радиоэкология. 2002. - Т.42. - №1. - С. 36 - 43.

9. Боднарчук И.А. Анализ роли репарации ДНК, регуляции клеточного цикла и апоптоза в радиационно-индуцированном адаптивном ответе клеток млекопитающих // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003. - Т.43. - №1. - С. 19 - 28.

10. Ю.Бойчук C.B. Механизмы апоптоза лимфоцитов при атопических заболеваниях: Автореф. дис. .д-ра мед. наук. Казань, 2002. - 38 с.

11. Бонд В., Флиднер И., Аршамбо Д. Радиационная гибель млекопитающих /

12. Пер. с англ. А.Г. Свердлова и др. М.: Атомиздат, 1971. - 317 с.

13. Брондз Б.Д. Рохлин О.В. Молекулярные и клеточные основы иммунологического распознавания. М.: Наука, 1978. - 336 с.

14. Бронштейн М.И. Гистохимические особенности лейкоцитов крови и костного мозга в норме // Руководство по гематологии. М.: Медицина, 1985. - Т.1. - С. 110.

15. Н.Бурлакова Е.Б., Шишкина JI.H. Репарация клеточных мембран и ее значение в лучевом поражении // Проблемы природной и модифицированной радиочувствительности. М.: Наука, 1983. - С. 29-43.

16. Бэрстон М. Гистохимия ферментов, М.: Мир, 1965. - С, 143-144,

17. Вайль С.С. Функциональная морфология нарушений деятельности сердца. П.: Медгиз, 1960. С. 109-121, 141=164.

18. Валькович A.A., Долгопетова М.А., Хансон К.П. Молекулярные механизмы радиационной гибели лимфоидных клеток // Радиобиология. 1981. = Т. 21. -Вып; 1.-С. 14-17.

19. Веленчик М.М. Нестабильность ДНК и отдаленные последствия воздействия излучений. М.: Энергоатомиздат, 1987. - 192 с.

20. Воккен Г.Г. Радиобиология / Учебное пособие для ветеринарных институтов и факультетов. М.: Высшая школа, 1967. - 381 с.

21. Воккен Г.Г. Ветеринарная радиология. JL: Колос, 1973. - 248 с.

22. Воробьев Е.И., Бессонов H.H., Степанов Р.П., Мочалова И.Н., Фомина Э.В., . Яковлева Л.А. Очерки радиационной кардиологии. М.: Атомиздат, 1978.253 с.

23. Галитовский В.Е., Гогвадзе В.Г. Влияние энергетического состояния митохондрий на межнуклеосомную фрагментацию ДНК в тимоцитах после облучения // Радиобиология. 2001. - Т. 41. - № 2. - С. 137-140.

24. Гашек М., Ленгерова А. Иммунология // Механизмы радиобиологического эффекта / Пер. с англ. под ред. A.B. Лебединского. М.: Гостамиздат, 1962. -Т.2-С. 186-204.

25. Гемпельман Л., Лиско Г., Гофман Д. Острый лучевой синдром / Перев. с. англ.- М., 1954. 230 с.

26. Гончаренко E.H., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения. М., 1985. - 279 с.

27. Горизонтов П.Д. Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1968. -Т.12. -№4. -С. 5-11.

28. Гудков И.Н. Основы общей и сельскохозяйственной радиобиологии. Киев: Изд-во УСХА, 1991. - 328 с.

29. Гуськова А.К., Байсоголов Г.Л. Лучевая болезнь человека. М.: Медицина, 1971.- 384 с.

30. Гурьянова В.А., Трошин Е.И. Содержание продуктов перекисного окисления липидов в периферической крови крыс как индикатор лучевого поражения // Матер, Респ. научн,- произв. конф, по акт, пробл. ветер, и животноводства, -Казань, 1997,-С. 112.

31. Гуценко А.К., Иванов A.A., Клемпарская H.H. и др. Противолучевое действие иммуноглобулинов при экспериментальной острой лучевой болезни // Противолучевые эффекты иммуноглобулинов. М.: Энергоиздат, 1990. - С. 22-60.

32. Давыдов A.C. Солитон в молекулярных системах // Тр., Ин-та теор. физики АН УССР. Киев, 1983. - 53 с.

33. Джаналиев Б.Р., Золотаревский В.Б., Попова И.В., Радионов К.В. Морфологическая характеристика дисплазии гепатоцитов // Арх. пат. 1990. - № 8. -С. 17-22.

34. Егоров А.П., Бочкарев В.В. Кровь и ионизирующая радиация. М., 1954. -259 с.

35. Жербин Е.А., Хансон К.П., Рещиков A.M. и др. Разделение популяции тимо-цитов крыс в градиенте фиколл-пака // Цитология. 1982. - № 6. - С. 699-703.

36. Животовский Б.Д., Воскобойников Г.В., Хансон К.П. Молекулярные механизмы интерфазной гибели облученных лимфоидных клеток // Радиобиология. 1982. - Т.22. - Вып. 6. - С. 312-357.

37. Жорова Е.С., Заликин Г.А., Анисимов П.Г. Гистопатология легких при инкорпорации плутония 238 // Радиобиология. - 1989. - Т.29. - № 2. - С. 202206.

38. Жукова A.A., Гогвадзе В.Г. Влияние сверхвысоких доз у радиации на энергетику митохондрий печени крыс // Радиационная биология. Радиоэкология. - 1997. - Т.37. - № 3. - С. 382-386.

39. Иванов A.A. Повышение выживаемости облученных животных введением гетерологичных сывороток после облучения // Радиобиология. 1972. - Т. 12. -Вып.2.-С. 317-319.

40. Иванов A.A. Анафилактоидные механизмы первичной реакции на облучение // Иммунотерапия экспериментальной острой лучевой болезни / Под ред. H.H. Клемпарской, = Мл Энергоиздат, 1981. = С, 32-43.

41. Иванов А,А, Влияние радиации на систему иммунитета и иммунологические методы модификации радиорезистентности // Лучевое поражение / Под ред. проф. Ю.Б. Кудряшова. М.: Изд-во МГУ, 1987. - С. 154-161.

42. Иванов A.A. Иммунный статус и радиация // Сб. тез. науч. конф. М., 1991. -С. 15.

43. Иванов А.Е. Патологоанатомические изменения в легких собак при общем облучении рентгеновыми лучами // Архив патологии. 1957. - Т. 19. - №1. -С. 31-36.

44. Иванов А.Е., Куршакова H.H. Гистохимические исследования окислительных ферментов в легочной ткани при лучевой болезни, вызванной инкорпорированными радиоактивными веществами // Арх. пат. -1961,- №6.-С. 31 -38.

45. Иванов А.Е., Куршакова H.H. Гистохимическое изучение экспериментальной пневмонии при острой лучевой болезни // Арх. пат. 1962. - №8. - С. 28-37.

46. Иванов А.Е., Куршакова H.H., Шиходыров В.В. Патологическая анатомия лучевой болезни. М.: Медицина, 1981. - 304с.

47. Ивницкий Ю.Ю., Носов A.B., Малоховский В.Н. Механизмы церебральноголучевого синдрома//Радиобиология. 2001. - Т. 41. - № 1. - С. 48-53.

48. Иммунотерапия экспериментальной острой лучевой болезни // Под ред. H.H. Клемпарской. М.: Энергоиздат, 1981. - 103 с.

49. Ишмухаметов К.Т., Конюхов Г.В., Низамов Р.Н. и др. Влияние длительного у-облучения на субпопуляции Т- и В- лимфоцитов кроликов // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. Пугцино, 1997. - Т.1. - С. 55-56.

50. Ишмухаметов К.Т., Тюменев P.C., Покровский Б.С. Особенности развития лучевого поражения у животных на следе аварии чернобыльской АЭС // Матер. Респ. науч.-произв. конф. по скот, пробл. ветерин. и зоотехн. Казань, 1996.-С. 102.

51. Казаева Ф.М. Клинико-гёматологические особенности течения острой лучевой болезни у ягнят, = Алма-Ата, 1970. = 79 с.

52. Караваев В.М,, Косяков В .Л., Коржавенко Г.И., Ильин ВТ. Защита животных от поражения ядерным оружием, М.: Колос, 1970. - 400 с.

53. Карташов П.А. Лучевая болезнь овец // Вестник сельскохозяйственной науки. 1970.-№ 6. - С. 74-78.

54. Карташов П.А. Ранняя диагностика острой лучевой болезни овец // Ветеринария. 1970. -№ 8. - С.82-84.

55. Карташов П.А., Киршин В.А., Ильин В.Г., Бурба П.Г., Песков П.Г., Голосной В.Т. Лучевая болезнь сельскохозяйственных животных // М.: Колос. 1978. -272 с.

56. Квачева Ю.Е. Морфологические типы радиационно-индуцированной гибели клеток кроветворной ткани, ее биологическая суть и значимость на различных этапах развития острого радиационного поражения // Радиобиология. -2002. Т. 42. -№ 3. - С. 287-292.

57. Кирик О.В., Степанов Р.П. Структурные изменения в тканях почки у крыс, вызванные малыми дозами ионизирующего излучения // Тез. докл. 4-го съезда по рад. иссл. Москва, 2001. - T.l. - С.348.

58. Киршин В.А. Обеспечение радиационной безопасности с.-х. животных /

59. Ветеринарная патология. 2002. - № 3. - С. 51-57.

60. Киршин В.А., Белов А.Д., Бударков В.А. Ветеринарная радиобиология. М.: Агропромиздат, 1986. - 175 с.

61. Киршин В.А., Бобрьппев К.П., Бударков В.А. и др. Радиобиологические эффекты у животных. М.: МГАВМиБ. - 1999. - 196 с.

62. Киршин В.А., Бударков В.А. Ветеринарная противорадиационная защита. -М.: Агропромиздат, 1990. 158 с.

63. Клемедсон К.И., Нельсон А. Общая радиобиология. Биологическое действие излучений на взрослый организм // Механизмы радиобиологического эффекта / Пер. с англ. под ред. A.B. Лебединского. М.: Госатомиздат, 1962. - Т. 2. -С. 87-185.

64. Клемпарская H.H. и др, Аллергия, и радиация. = М.: Медицина, 1968, 239 с.

65. Клемпарская H.H. и др. Радиоактивные изотопы и иммунитет, М,: Атомиз-дат, 1969.- 183 с.

66. Клемпарская H.H. Аутоантитела облученного организма. М.: Атомиздат. -1972.-280 с.

67. Клемпарская H.H. Аутосенсибилизация облученного организма // Иммунотерапия экспериментальной острой лучевой болезни / Под ред. H.H. Клемпар-ской. М.: Энергоиздат, 1981. - С. 5-14.

68. Клемпарская H.H., Петров Р.В. Инфекция и иммунитет у облученных организмов // Радиационная медицина / Под ред. А.И. Бурназяна и A.B. Лебединского. М.: Госатомиздат, 1963. - С. 232-256.

69. Клемпарская H.H., Раева Н.В., Сосова В.Ф. Антибактериальный иммунитет и вакцинация. М.: Медицина, 1963. - 120 с.

70. Клемпарская H.H., Шальнова Г.А. Нормальные аутоантитела как радиозащитные факторы. М.: Атомиздат, 1978. - 132 с.

71. Комар В.Е., Хансон К.П. Информационные макромолекулы при лучевом поражении клеток. М.:,Атомиздат, 1980. - 251 с.

72. Коноплянников А.Г. Радиобиология стволовых клеток. М.: Энергоатомиздат, 1984. 119 с.

73. Конюхов Г.В., Низамов Р.Н., Новиков H.A. и др. Влияние хронического гамма-облучения в малых дозах на костный мозг и эритроциты крови кроликов // Тез. докл. 3-го съезда по рад. исслед. Пущино, 1997. - Т.1. - С. 407408.

74. Корупу В.Я. Электронно-микроскопические исследования печени при общем рентгеновском облучении // Вопросы биофизики и механизма действия ионизирующей радиации. Киев, 1964. - С.57-64.

75. Корыстов Ю.Н., Шапошникова В.В. Радиационный апоптоз тимоцитов: инициация и передача сигнала к генам // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. -Пущино, 1997.-Т.1.-С. 117-118.

76. Краевский H.A. Очерки патологической анатомии лучевой болезни. М.: -1957.-231 с.

77. Краевский H.A., Иванов А.Е. Воспаление и проникающее ионизирующее излучение // Архив патологии. 1963. - Т.25. - № 6. - № 8. - С. 3-13.

78. Кругликов Б.П. Радиочувствительность сельскохозяйственных животных // Сельскохозяйственная биология. 1986. - № 11. - С. 91-96.

79. Кругликов Б.П., Васильев A.B., Шевченко A.C. Действие ионизирующих излучении на сельскохозяйственных животных // Сельскохозяйственная радиоэкология / Под ред. P.M. Алексахина, H.A. Корнеева. М.: Экология, 1991.-С. 174-195.

80. Кудряшов Ю.Б., Береифельд Б.С. Основы радиационной биофизики. М.: Изд-во МГУ, 1982. - 302 с.

81. Кудряшов Ю.Б. Лучевое поражение "критических систем" // Лучевое поражение / Сб. под ред. Ю.Б. Кудряшова. М.: Изд-во МГУ, 1987. - С. 5-72.

82. Кузин A.M. Основные регуляторные системы клетки и молекулярные механизмы влияния на них ионизирующей радиации // Тез. докл. Всесоюз. сим-поз. "Влияние радиации на регуляторные процессы в клетке". Пущино, 1976.-С. 3-4.

83. Кузин A.M. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии. М.: Наука, 1986, - 284 с.

84. Кузин A.M. Проблемы современной радиобиологии,- М,; Знание, 1987,-64 с.

85. Кузин А,М, Радиационный гормезис в иммунологии // Сб. тез. Всесоюз. научн. конф.-М., 1991.-С. 17-18.

86. Кузин A.M. Природный радиоактивный фон и его значение для биосферы Земли. М.: Наука, 1991. - 177 с.

87. Кузин A.M., Копылов В.А. Радиотоксины. М.: Наука, 1983. - 173 с.

88. Купер Э. Сравнительная иммунология. М.: Мир, 1980. - 418 с.

89. Куршакова H.H. Изучение содержания нуклеиновых кислот при острой лучевой болезни у обезьян при помощи гистохимических методов // Бюлл. экс-пер. биол. 1961. - №1. - С. 31-35.

90. Лаврентьев Л.И. Патоморфологические изменения // Биологическое действие продуктов ядерного деления. М., 1975. - С. 203-212.

91. Люлько A.B., Люлько A.A., Струсь В.П. Морфофункциональное состояние почек крыс после острого и хронического воздействия ионизирующей радиации. Днепропетровск, 1989. - 23 с.

92. Май ер Н. Практическая гистохимия. М.: Мир, 1969. - С. 426-427.

93. Мальцев В.Н. Иммунохимические свойства белков элюатов из тканей внутренних органов, содержащих аутоантитела // Аутоантитела облученного организма / Под ред. H.H. Клемпарской. М.: Атомиздат, 1972. - С. 60-65.

94. Маркевич JI.H. Количество липидов в печени крыс в отдаленные сроки после фракционированного воздействия у-излучения // Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. - Т.35. - № 6. - С. 857-859.

95. Медуницин Н.В., Литвинов В.И., Мороз A.M. Медиаторы межклеточного взаимодействия. = М.: Медицина, 1980. 256 с.

96. Методические указания по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве. М., 1988, - 17 с,

97. Москалев Ю.И. Отдаленные последствия ионизирующих излучений. М.: Медицина, 1991. - 464 с.

98. Москалев Ю.И., Стрельцова В.Н. Отдаленные последствия радиационного поражения. Неопухолевые формы // Итоги науки и техники. Сер. Радиационная биология. М.: ВИНИТИ, 1987. - Т. 5. - 214 с.

99. Мудрецов Н.И. Патологоанатомическая характеристика легочных осложнений экспериментальной острой лучевой болезни // Тр, Всесоюз. конф. по мед. радиологии. М., 1957. - С. 208-213.

100. Непомнящих Г.И., Непомнящих JI.M. Прижизненная патологоанатомиче-ская диагностика и прогноз хронических воспалительных процессов в легких // Арх. патологии. 1990. - Т. 52. - № 2. - С. 30-35.

101. Новикова А.Н. Изменения органов выделения // Многотомное руководство по патологической анатомии. М,э 1962. - Т.8. - Кн,2. - С. 149-159.

102. Окада Ш. Радиационная биохимия клетки / Пер. с англ. М.: Мир, 1974. -407 с.

103. Орлова Н.В., Смирнова С.Г., Замухаева И.А, и др, Апоптоз лимфоцитов периферической крови здоровых и больных раком лиц после воздействия у-излучения in vitro // Рад. биол. и радиоэкол. 2001. - Т. 41. -№ 4. - С. 366372.

104. Остапченко Л.И., Ручко М.В., Кучеренко Н.Е. Нарушение в системе фос-фолирования лимфоидных клеток тимуса и селезенки // Иммунный статус человека и радиации / Сб. тез. Всесоюз. науч. конф. М., 1991. - С.50.

105. Петров Р.В. Иммунология острого лучевого поражения. М.: Госатомиз-дат, 1962.-426 с.

106. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина, 1987. - 416 с.

107. Пирс Э.А. Гистохимия.- М.: Иностр. лит-ра, 1962. 596 с.

108. Пожарисская Т.Д., Лаврентьева Т.Д. Восстановление клеточного состава различных зон коры лимфатического узла после общего и частичного облучения // Радиобиология. 1987. - Вып. 1. - С. 51-55.

109. Покровский Б.С. Субпопуляционный состав Е- и ЕАС розеткообразую-щих лимфоцитов периферической крови индеек при воздействии малых доз гамма- квантов // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. - Пущино, 1997. - Т. 1. -С. 34-35.

110. Покровский Б.С. Физиологическое состояние сельскохозяйственной птицы при воздействии малых доз ионизирующих излучений: Дис. докт, биол/наук, = Боровск, 1997. = 397 с,

111. Поспелов В.А,, Светликова QB,, Воробьев В.И. Электрофоретическое изучение гетерогенности субъединиц хроматина // Мол. Биол. 1977. - Т.11. -Вып.4.-С. 781-789.

112. Предпосевное гамма-облучение семян сельскохозяйственных культур / Под ред. А.Н. Кузина, Н.М. Березиной, Д.А. Каушанского. М.: Атомиздат, 1976.- 149 с.

113. Пристер Б.С., Лощилов H.A., Немец О.Ф., Поярков В.А. Основы с.-х. радиологии. К.: Урожай. - 1991. - 472 с.

114. Притулин П.И. Влияние ионизирующих излучений на инфекцию и иммунитет //Ветеринария. 1965. - № 12. - С. 9-11.

115. Прищеп С.Г. Структурно-функциональная модификация мембран клеток костного мозга крыс при действии хронического и острого гамма-облучения // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. Пущино, 1997. - Т. 1. - С. 129-130.

116. Рабинович P.M., Шапиро И.В. Рентгенологическая семиотика лучевых повреждений легких // Вестник рентг. и радиол. 1976. - №2. - С. 15-20,

117. Рапопорт Я.Л., Основные вопросы современной иммуноморфологии //

118. Патофизиология и экспериментальная терапия. 1965. - Т.П. - 1. С. 26 - 35.

119. Резункова О.П., Сунгуров А.Ю. О некоторых закономерностях лучевого поражения мембран лимфоцитов тимуса // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. Пущино, 1997. - Т. 1. - С. 71 -72.

120. Решл М., Петырек П., Куна П. Морфология изменений в легких после общего однократного гамма-облучения кроликов // Радиобиология. 1987. -Т.27. - №4. - С. 532-535.

121. Романцев Е.Ф. Радиация и химическая защита. М.: Атомиздат, 1968.-24 с.

122. Рыбак П.Я. Основы радиационной патологии у животных. М.: Сельхозгиз, 1959. = 297 с.

123. Рыскулова С.Т. Радиационная биология плазматических мембран. М.: Медицина, 1986. 271 с.

124. Салимов А.Г., Карпухин A.B., Кузьмина И.В., Синтковский Д.М. Малые дозы и радиации индуцируют изменение положения хромосом в интерфазных ядрах лимфоцитов человека // Тез докл. 3-го съезда по рад. иссл. Пущино, 1997. - С. 40-41.

125. Серкиз Я.И., Пинчук В.Г., Пинчук Л.Б. Радиобиологические аспекты аварии на Чернобыльской АЭС. Киев, 1992.-172 с.

126. Сисев В.А., Должанов А.Я., Давыдова O.E. Иммунокомпетентные клетки слизистой тощей кишки при воздействии ионизирующего облучения // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. Пущино, 1997. - Т.1. - С. 73-74.

127. Сыпин В.Д., Бижанов Б.Р., Егоров В.Г. Влияние гамма-излучения на Т- и В-системы лимфоцитов в периферической крови овец // Иммунный статус человека и радиации / Сб. тез. Всесоюз. науч. конф. М., 1991. - С. 112.

128. Талько B.B. Лизосомальные гидролитические ферменты и нуклеазы имму-нокомпетентных клеток при активации их лектинами у лиц, перенесших острую лучевую болезнь // Иммунный статус человека и радиации / Сб. тез. Всесоюз. научн. конф. М., 1991. - С. 33.

129. Тимохин A.A. Лечебно-профилактическая эффективность диэтиламмоние-вой соли 1Ч-бензилиденамино-1-фенилменсульфоновой кислоты: Авт. дис. . канд. вет. наук. Казань, 2002. - 19 с.

130. Тихонова Н.М., Фрумкис Э.М. Морфологическая характеристика лимфоид-ных органов при острейшей лучевой болезни // Сосудистая и нервная система в норме и патологии. Томск, 1975. - С. 59-63.

131. Троицкий В.Л., Туманян М.А. Влияние ионизирующих излучений на иммунитет, М.: Медгиз, = 1958.- С. 50-55.

132. Троицкий В.Л, Нарушение образования антител под влиянием облучения и влияние радиации на различные фазы антителообразования // Радиационная иммунология. М.: Медицина, 1965. - С. 143-172.

133. Тронов В.А., Коноплянников М.А., Никольская Т.А. и др. ДНК-кометы как маркер клеточной гибели // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. ПуЩино, 1997. -Т.1. - С. 132-133.

134. Уланова A.M. Выявление клеточной лучевой аутоаллергии у мышей с помощью метода ингибиции миграции лимфоцитов // Радиобиология. 1974. -Т. 14.-Вып. 1,-С. 88-91.

135. Уманский С.Р. Генетическая программа клеточной гибели: гипотеза и некоторые положения//Усп. совр. биол. -1982. Т. 93. - Вып. 1.-С. 139-148.

136. Урбах В.Ю. Вариационная статистика для биологов и медиков. М.: Изд-во АН СССР. - 1962. -322 с.

137. Урнышева В.В., Гуляева О.Н., Кушнирева Е.В., Шишкина Л.Н. Влияние антиоксидантного статуса на характеристики липидов в тканях животных после острого облучения в сублетальных дозах // Радиобиология. 2002. -Т.42. - №5. - С. 481-487.

138. Федоренко Б.С., Опарина Д.Я. Структурные изменения в печени животных в отдаленном периоде поражения протонами высоких энергий // Вопросы радиобиологии и биологического действия цитостатических препаратов. -Томск, 1971,- Т.З.- С. 29-34.

139. Федоренко Б.С., Шиходыров В.В. Патологоанатомические изменения почек у собак в отдаленном периоде после облучения протонами высоких энергий //Космическая биол. 1970. - №6. - С. 14-18.

140. Федоров Е.А., Пристер Б.С., Буров Н.И. и др. Биологическое действие молодых продуктов деления на молочный скот и их переход в продукцию животноводства // Радиобиология и радиоэкология с.-х. животных. М.: Атомиздат, 1973, - С. 71-139.

141. Фрадкин Г.Е. О лучевом поражении критических систем // Инф. бголл. радиобиол. = 1985. -'Вып. 6L С. 7-9.

142. Хансон К.П. Генетическая гипотеза интерфазной гибели лимфоидных клеток // Интерфазная гибель облученных клеток. Обнинск НИИ мед. радиол АМН СССР, 1978. - С. 80-82.

143. Хансон К.П., Комар В.Е. Молекулярные механизмы радиационной гибели клеток. М.: Энергоатомиздат, 1985. - 148 с.

144. Хансон К.П., Комар В.Е. Биохимические аспекты действия ионизирующей радиации на живой организм. Л.: Медицина, 1977. - 322 с.

145. Харлова Г.В. Регенерация лимфоидных органов у млекопитающих. М.: Медицина. - 1975. - С. 91-98.

146. Шальнова Г.А., Кузьмина Т.Д., Уланова A.M., Добронравова H.H. Сывороточные глобулины как противолучевые препараты // Иммунотерапия экспериментальной острой лучевой болезни / Под. H.H. Клемпарской. М.: Энергоатомиздат, 1981. - С. 15-31.

147. Шапошникова В.В., Эйдус Л.Х., Добровинская O.P., Корыстов Ю.Н. Межклеточные взаимодействия при интерфазной гибели облученных тимоцитов // Иммунный статус человека и радиации / Сб. тез. научн. конф. М., 1991.1. С. 59.

148. Шарифуллина Д.Т. Разработка методов и средств для выявления лучевой аллергии у животных: Автореф. дис. . канд. биол. наук.-Казань, 2002.- 23с.

149. Шевченко A.C., Кобялко В.О., Шевченко Т.С. Нарушения плазматической мембраны для Ca 2+ при радиационно-индуцированном апоптозе тимоцитов // Тез. докл.3-го съезда по рад. иссл. Пущино, 1997. - Т.1. - С. 142-143.

150. Шубик В.М. Ионизирующие излучения и иммунитет. М.: Атомиздат, 1977. - 148 с.

151. Шубик В.М, Иммунологические исследования в радиационной гигиене. -М.: Энергоатомиздат, 1987. 144 с.

152. Шутко А.Н., Шатинина H.H., Комар В.Е. и др. Поздние субпопуляционные отклонения в периферических лимфоцитах человека после облучения в малых дозах // Тез. докл. 3-го съезда по рад. иссл. Пущино, 1997. - Т.1. - С. 50-51.

153. Эйдус JI.X. Неспецифическая реакция клеток и радиочувствительность. -М.: Атомиздат, 1977. 151 с.

154. Эйдус JI.X. Интерфазная гибель облученных тимоцитов результат «эффекта свидетеля» // радиобиология. - 2002. - Т. 42. - № 3. - С. 284-286.

155. Юнусова P.M., Ильина А.Н., Архипов Н.И., Бударков В.А., Зенкин A.C. Морфологические изменения с иммунокомпетентных органах жвачных животных, находящихся в зоне аварийного выброса ЧАЭС // Иммунный статус человека и радиация. М., 1991. - С. 113-114.

156. Яковлева JI.A. Сравнительное исследование лучевой болезни и ее последствий. Л., 1966. - 157 с.

157. Ярилин A.A. Динамика популяции В- и Т- лимфоцитов в облученном организме // Мед. радиол. 1978. - №1. - С. 37-40.

158. Ярилии А.А. Нарушение и восстановление взаимосвязей популяций лимфоцитов после облучения: Автореф! дис. . докт. мед. наук. Д., 1981.

159. Ярилин А.А. Радиация и иммунитет. Современный взгляд на старые проблемы // Радиационная биология. Радиоэкология. 1997.- Т.37. - Вып.4. — С. 597-603.

160. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных. Изд. 1-е. - М.: Высшая школа, 1977. - 368 с.

161. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных. Изд. 2-е. - М.: Высшая школа, 1988. - 424 с,

162. Ahlqvict J. Endocrine influences on limphatic organs inflamation and autoimmunity // Strain Technol, 1972. ^ V. 7. - N i. - P. 17-27.

163. Applefeld M.M. Radiation-induced cardiac disease // Primary Cariol. 1986, -V.12. - РЛ59-162, 148, 150, 153455, 164-170.

164. Ashwell J. D., Schwart R.H., Mitchell J. В., Russo A. Effect of y-radiation on resting B-lymphocytes // J. Immunol. 1986. - V. 136. - P. 3649-3656.

165. Bacg Z. M. and Herve A. Sur un noureon protecteur contre la rayonnement x. // Scweiz med Wschr . 1952. - V.40. - P. 1018.

166. Bond V. P., Robinson С. V. A mortality determinant in nonuniform exposures of the mannual. Schweiz. med Wschz. - 1967, Sappl., - V.7. - P. 265 - 275.

167. Bustad L. K. et. al. Effect of stabile iodine on uptake of radioiodihe in sheep // Am. J. Vet. Res. 1985. - V. 19. - N 73. - P. 893-894.

168. Burkart W. Radiation biology of the lung: recent progress in understanding cancer induction and nonstochastic effects of ihaled radon daughters, hot particles and other radionuclides // Sci. Total Environm.- 1989.- V. 89. N 112. - 216 c.

169. Burnet F.M. Cellular Immunology. Melbourne: Acad. Press, 1969. - 650 p.

170. Casarett G.W., Waeburq H.E. Radiation histopathology // Boca Raton: CRC Press.- 1980. V.I. - 160 p.; V.2-176 p.

171. Clark A. Cieneral pharmacology Handbuch der Experimentellen Pharmokologie, Erganzungswerk, IV Berlin, Sprinder, 1936. P. 123.

172. Damage to Livestock from Radioactive Fallout in Event of Nuclear War // Nat. Acad. Sci. Nat. Res. Council. Washington. 1963. - 1078 p.

173. Drewinko B., Humphrey R. Repair mechanisms in humans lympoid cells // Int. J. Radiat. Biol. 1971. - V.20. - P. 149-171.

174. Durum S.K., Gengozian N. The comparative radiosensitivity of T- and B-lymphocytes // Iht. J. Radiat. Biol. 1978. - V.34. - P. 1-15.

175. Fajardo L., Brown J., Glatstein E. Glomerular and juxtaglomerular lesions in radiation nephropathy //Radiat, Res. 1976, - V.68. - P. 177-183.

176. Glatstein E,, Fajardo L,, Bown J. Radiation injury in the mouse kidney. I. Sequential light mieroscopie study // Tnt.,1.Radiat. Oncol., Biol., Phy.s., 1977. -V.2. P. 933-943.

177. Iseki S., Mori T. Actidated mouse lymphocyte release factors witch modulate the proliferative responses of other lymphocytes // Histochem. Cytochem. 1966 - V. 37.-N 5.-P. 177-189.

178. Hampton J. Acute radiation effects in kidney // Radiat. Res. 1972. - V.52. - P. 316-323.

179. Ju S.T., Matsui K., Ozdemirli M. Molecular and cellular mechanisms regulating T and B cell apoptosis through Fas/ FasL interaction // Int. Rev. Immunol. -1999. V. 18. - N 5-6. - P. 485-513.

180. Kindt A., Sattler E.L., Schraub A. Radiation-indiced anorexia in Syrian hamsters // Radiat. and Environ. Biophys. 1980. - V.18. - N 2. - P. 149-155.

181. Kumar R.K., Lykke A.W. Granulocyte contamination of separated blood mononuclear cells // Brit J. Concer. 1980. - V. 42. - P. 794-796.

182. Mays C.W., Lioyd R.D., Marshall J.H. Malignancy risk to humans from total body gamma rays // Proc. 3 rd. Int. Rad., protect. Assoc.- 1973.- P. 9-14.

183. Naomi H. Interaction of particles with bronchial cells // Ibid.- 1988.- 55. —N 4.-P. 665-669.

184. Olinic A., Rusu M. Dinamic modificarilor fosfatazei alcaline si fosfatazei acide in rini chiul de sobolan iradiax // Clujul med. 1976. - V.49. - P. 88-94.

185. Planel H., Soleilhavoup J.P., Cottin F. et. ' al. Etude de la croissance de Paramecium aurelia et P. caudatum en latoratoir // C. R. Acad. Ski. 1969. - V. 269. - P. 1697-1701.

186. Polyak K., Xia Y., Zweier J.L., et al. A model for p53-induced apoptosis // Na-ture.-1997.- V. 389.- N 6648.- P. 300-303.

187. Pontes P.I. Efeito dos raios-X sobre o tubulo contorcide proximal de rim de camundango (Mus muscular) // Rev. Brasil. Biol. 1977. - V.37. - P. 457-462.

188. Ragowski F. Citco A. Oddzialywanie promieniowania jonizujacego na ludzi i zwierreta // Zesz nauk. P Bialosy Elek. 1988. - V.8. - P. 89-101.

189. Robins M.E., Campling D,, Rezvani M., Golding S J,, Hopewell J.M. Radiation nephropathy in mature piqs following the irradiation of both kindneys // Int. J, Radiat. Biol. 1989. - V.56. - P. 83-98.

190. Rüssel L.B., Bussel W.L. Radiation harards to the embryo and fetus // Radiology. 1952.-V.58.-P. 3.

191. Schouse S.S., Warren S.L., Whipple G.H. Aplasia of morrow and fatal intoxication in dogs produced by roentgen radiation of all bones // J. du tissue Exp. Med. 1931. - V.53. - P. 421-435.

192. Schock E., Pattie R.E., Creasey M. Methods for electron microscopy of the La-mellated osmiophilic bodies of the long // J. Microse. Gr. Brit. 1973.- 97.- N 3.-P. 321-330.

193. Seale R.L., Simpson R.T. The preparation of peptide and protein componeuts // J. Mol. Biol. 1975. - V. 94. - P. 479-501.

194. Sharplin J. Franko A. A quantitative histological study of strain-dependeni differences in thr effects of irradiation on mouse lung during the early phase // Radiat. Res. 1989. - V. 119. - N1. - P. 1-14.

195. Simonnet H., Demaux G., Kahn T. Recherches experimentales sur les reactions splenique a Jirradiation. Rate en plase dans Jorganisme irradie in tato et rate exteriorisce//C. R. Soc. Biol. 1955. - 1949. - V.ll-12. - P. 1183-1186.

196. Tullis J.L. and Warren S. Gross autopsy observations in animals exposed at Bikini preliminary report//J.A.M.A. 1947. - V.134. - P. 1155-1159.

197. Tzuzuki M. Eyperimentsl studies on the biological action of hard roentgen rays // Am.J.Roentgen. 1926. - V.16. - P. 134-150.

198. Vlachaki M.T., Meyn M.D., Meyn R.E. Astro research fellowship: the role of bcl-2 and gluthatione in an atioxidant pathway to present radiation-induced apoptosis // Int. J. Radiat. Bioolloogy.- 1999.- V. 42. N 1.- P. 185-190.

199. Virsik R, Reineske K., Wolf T., Harder D. Absenct of fractionation, protaction, radiation quality and radical scavender effects on radiation induced interphase death of human G0 lymphocytes in vitro // Stxahlenterapie, 1980,- Bd. 156. - P, 830-844.

200. Wang J.F., Jerrells T.R., Sprizer J.J. Descreaset production of reactive oxygen intermediates is an early event during in vitro apoptosis of rat thymocytes // Free radical Biol. Med.- 1996.- V. 20. N 4. - P. 533-542.

201. Warren Sh. Effects of radiation on normal tissues // Arch. Pathol., 1942. V.34. -P. 562-608.

202. Watters D. Molecular mechanisms of ionizing radiation-induced apoptosis Immunol. Cell. Biol.- 1999.-V. 77.- N 3,- P. 263-271.

203. Wilkinson M. Changes in the phagocytic activiti of polymorphonuclear lewkocytes following total body x-irradiation in the rat // Blood. The J. Hematology. 1954. - V.9. - P. 8.

204. Yeung T.K., Lauk S., Simmonds R.H., Hopewell J.W., Tpott K.R. Morphological and functional changes in the rat heart after x-irradiation: Strain, differences // Radiat. Res. 1989. - V.119. - N.3. - P. 489-499.