Исследование воздействия ионизирующих излучений и химфармпрепаратов на биологические мембраны тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 01.04.16, кандидат физико-математических наук Алексеева, Полина Юрьевна

• Алексеева, Полина Юрьевна
• кандидат физико-математических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат физико-математических наук Алексеева, Полина Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. Обзор литературы

1.1. Экспериментальные исследования по воздействию ионизирующего излучения на биологические мембраны.11.

1.2. Комбинированное воздействие ионизирующего излучения и химфармпрепаратов на биологические мембраны.

1.3. Электропорация биологических мембран.

ГЛАВА II. Методика экспериментальных исследований

2.1. Схема экспериментов по воздействию ионизирующего излучения на суспензию эритроцитов,.

2.1.1. Параметры пучка ускоренных электронов.

2.1.2. Характеристики у-излучения радиоактивного изотопа 226Ra.

2.1.3. Характеристики УФ излучения.

2.2. Метод калиброванной электропорации для выявления скрытых дефектов мембран эритроцитов.

2.2.1. Приготовление рабочей суспензии. Кинетические кривые гемолиза эритроцитов.33.

2.2.2. Явление необратимой электропорации мембран. Схема воздействия импульсного электрического поля на биологическую мембрану. Критическое значение потенциала пробоя, его зависимость от температуры, параметров суспензии и возраста донора.3.

2.3. Методические опыты по воздействию химфармпрепаратов на суспензию эритроцитов.

2.3.1. Анестетики.

2.3.2. Радиопротекторы

2.3.3. Кровезаменитель

ГЛАВА III. Результаты экспериментов по воздействию пучка ускоренных электронов и УФ излучения на суспензию с химфармпрепаратами (антиоксиданты, этиловый спирт, миорелаксант, кровезаменитель)

3.1. Воздействие пучка ускоренных электронов на мембрану эритроцитов в «цельной» крови и в суспензии.

3.2. Действие УФ излучения и химфармпрепаратов на мембраны эритроцитов.80,

3.2.1. Воздействие УФ излучения на систему эритроциты + таурин»

3.2.2. Воздействие УФ излучения на систему «эритроциты + глютатион».

3.2.3. Воздействие УФ излучения на систему «эритроциты + этанол».

3.3. Действие пучка ускоренных электронов и химфармпрепаратов на мембраны эритроцитов.

3.3.1. Воздействие пучка ускоренных электронов на систему эритроциты + эсмерон».

3.3.2. Воздействие пучка ускоренных электронов на систему эритроциты + перфторан».

ГЛАВА IV. Результаты экспериментов по воздействию у-излучения в малых дозах (1 - 35 Р) и химфармпрепаратов в малых концентрациях на мембраны эритроцитов

4.1. Действие у-излучения радиоактивного изотопа Ra (доза 1-30 Р).

4.1.1. Неустойчивость отклика биологической системы при воздействии у-излучения в малых дозах.

4.1.2. Воздействие у-излучения на систему эритроциты + перфторан».

4.2. Неустойчивость отклика биологических систем при воздействии малых концентраций химфармпрепаратов на мембраны эритроцитов. Влияние УФ излучения.1.

ГЛАВА V. Теоретический анализ полученных результатов 5.1. Оценка количества активных центров воздействия, приходящихся на мембрану эритроцита.1.

5.1.1. Количество ускоренных электронов на один эритроцит.1.1.

5.1.2. Количество центров ионизаций в мембране, возникающих в результате воздействия у-излучения.1.1.

5.2. Изменение количества центров повреждения при совместном воздействии ионизирующих излучений и химфармпрепаратов.1.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование воздействия ионизирующих излучений и химфармпрепаратов на биологические мембраны»

Актуальность работы

В настоящее время различные виды ионизирующих излучений получили широкое применение в медицине. В частности, действие пучков электронов и ^излучения как на организм в целом, так и на отдельные клетки, остается актуальным в связи с развитием методов лучевой терапии, предотвращения патологий при пересадке тканей, радионейрохирургии, стерилизации суспензий. Распространено применение ультрафиолетового (УФ) излучения в фотохимиотерапии при лечении заболеваний кожи, используются его бактерицидные свойства.

В ряде случаев ионизирующее излучение применяется совместно с химфармпрепаратами. Для уменьшения воздействия на клетки тканей свободных радикалов, возникающих при действии ионизирующего излучения, используют антиоксидантные препараты. При операционных вмешательствах, в том числе с использованием методов лучевой терапии, применяются анестезирующие вещества. В ряде клинических процедур при критических состояниях и в плановой терапии различных заболеваний используются газотранспортные кровезаменители. Как правило, исследуется эффекты, характерные для совместной реакции систем организма в целом. Использование ионизирующего излучения и химфармпрепаратов приводит к изменению состояния мембран клеток, выполняющих жизненно важные клеточные функции. Является актуальным изучение в модельном эксперименте механизма действия физико-химических факторов на отдельные структуры, в том числе, клеточные мембраны, и установление оптимальных доз излучения и концентраций химфармпрепаратов.

В результате воздействия ионизирующего излучения и химфармпрепаратов могут возникнуть скрытые (потенциальные) повреждения, которые проявятся через длительное время. Метод калиброванной электропорации позволяет оценить степень поражения биологических мембран сразу после воздействия. Представляется интересным использование метода для исследования динамики повреждений мембран клеток.

В настоящее время для оптимизации методов лучевой терапии предлагается использовать комбинированное воздействие на клетки ионизирующего излучения, химфармпрепаратов и импульсного электрического поля. Необходимо изучение состояния мембран эритроцитов при совместном действии разнородных факторов.

Актуальным остается исследование действия на мембраны ионизирующего излучения как в летальных дозах, так и в малых дозах, при которых наблюдается нелинейный отклик системы.

Целью работы является экспериментальное исследование воздействия пучков электронов, у- и УФ излучения в сочетании с химфармпрепаратами на мембраны эритроцитов.

Задачи исследования

1. Экспериментальное исследование воздействия пучков электронов в дозах 750 - 2500 Гр в сочетании с химфармпрепаратами в различных концентрациях на мембраны эритроцитов.

2. Выявление скрытых повреждений биологических мембран при воздействии у-излучения в малых дозах (1 - 35 Р) и химфармпрепаратов в малых концентрациях методом калиброванной электропорации.

3. Исследование воздействия УФ излучения на мембраны эритроцитов в сочетании с различными концентрациями химфармпрепаратов.

4. Оптимизация метода калиброванной электропорации для выявления скрытых повреждений мембран эритроцитов в результате воздействия пучка ускоренных электронов, у-излучения, УФ излучения и химфармпрепаратов.

5. Оценка количества повреждений мембран эритроцитов в результате воздействия ионизирующих излучений и химфармпрепаратов.

Научная новизна работы

1. Показано, что воздействие ионизирующего излучения (пучок электронов в дозе 2500 Гр) и химфармпрепарата (эсмерон в концентрации 1 мкл на 1 мл крови) вызывает нелинейную зависимость константы скорости гемолиза от концентрации эритроцитов в суспензии.

2. Экспериментально установлено, что воздействие пучка электронов в сочетании с миорелаксантом (эсмероном) на суспензию вызывает скрытые повреждения мембран эритроцитов.

3. Показано, что при воздействии пучка электронов на суспензию эритроцитов кровезаменитель (перфторан) может выполнять протекторную функцию.

4. Показано, что при воздействии ионизирующего излучения и химфармпрепаратов по отдельности и при их сочетании изменяется значение порогового потенциала электрического пробоя мембран.

5. Физическим методом показано, что при воздействии УФ излучения на суспензию эритроцитов антиоксиданты (таурин, глютатион) и спирт (этанол) изменяют константу скорости гемолиза клеток.

6. В результате воздействия у-излучения в малых дозах (1 - 35 Р) выявлены скрытые повреждения биологических мембран.

7. Показано, что УФ излучение в сочетании с малыми концентрациями химфаримпрепаратов (глютатион 0,02 - 2 мкг/мл, таурин 0,02 - 20 мкг/мл, этанол 0,04 - 50 мкл/мл) вызывает скрытые повреждения биологических мембран.

8. Установлена зависимость степени скрытых повреждений мембран эритроцитов от температурных и временных параметров суспензии с помощью метода калиброванной электропорации.

Практическая значимость работы

Установленные в модельном эксперименте диапазоны концентраций химфармпрепаратов с выраженными радиопротекторными свойствами могут быть приняты во внимание при планировании лучевой терапии в клинике. Установленные данные могут быть учтены при разработке технологий воздействия ионизирующих излучений и химфармпрепаратов на красные клетки крови. Результаты, полученные в диссертации, могут быть включены в программу лекций и практических занятий студентов высших учебных заведений, специализирующихся в области ядерной физики, радиобиологии, биофизики и медицины.

Достоверность научных результатов и выводов обеспечена строгим соблюдением методик экспериментов, высокой воспроизводимостью экспериментальных данных. Полученные данные согласуются с экспериментальными данными и выводами работ других авторов, новые данные согласуются с современными представлениями по рассматриваемой проблеме.

Основные положения, выносимые па защиту

1. При воздействии ионизирующего излучения на биологические мембраны экспериментально определены концентрации химфармпрепаратов, уменьшающие и увеличивающие скрытые структурные дефекты мембраны.

2. Ионизирующее излучение (у-излучение) в малых дозах и антиоксиданты в малых концентрациях вызывают нестабильный ответ биологических наноструктур (мембран эритроцитов).

3. В результате воздействия пучка электронов константа скорости гемолиза в зависимости от концентрации эритроцитов изменяется нелинейно.

Апробация работы

Основные результаты диссертации докладывались на следующих российских и международных конференциях и симпозиумах: 4th International Workshop on Space Radiation Research and 17th Annual NASA Space Radiation Health Investigators' Workshop (Москва, 2006); III Съезд биофизиков России (Воронеж, 2004); II Евразийский конгресс по медицинской физике (2005); 2nd, 3rd and 4th International Summer Student School "Nuclear Physics Methods and Accelerators in Biology and Medicine" (2003, 2005 и 2007); V и VI Межвузовская научная школа молодых специалистов «Концентрированные потоки энергии в космической технике, электронике, экологии и медицине» (Москва, 2004, 2005); «Ломоносовские чтения» (Москва, 2005, 2006); XI Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (Москва, 2004); Всероссийская конференция «Радиобиологические основы лучевой терапии» (Москва, 2005); European Association for Red Cell Research ,15th and 16th Meeting (Murten, Switzerland, 2005, England, Oxford, 2007); 57 International conference on nuclear physics "Nucleus 2007" (Voronezh, 2007).

Работы в данной области поддержаны грантом РФФИ № 71/07-Р и награждены серебряной медалью 7 Московского международного салона инноваций и инвестиций (Москва, 2007).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 16 научных работ. Из них 11 статей в реферируемых журналах: «Вестник Московского университета» - 2, «Технологии живых систем» - 1, «Медицинская физика» - 1, «Радиационная биология. Радиоэкология» - 1, «Общая реаниматология» - 6; 2 патента на изобретение.

Личный вклад автора

Экспериментальные и методические исследования выполнены при непосредственном участии автора на кафедре физики ускорителей высоких энергий физического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, в НИИЯФ МГУ им. Д. В. Скобельцына, на кафедре медицинской и биологической физики ММА им. И.М. Сеченова, в ГУ НИИ общей реаниматологии РАМН и в городской клинической больнице № 33 им. А. А. Остроумова. Теоретические оценки сделаны лично автором.

Заключение диссертации по теме «Физика атомного ядра и элементарных частиц», Алексеева, Полина Юрьевна

выводы

1. При воздействии пучка электронов в дозе 2500 Гр установлена нелинейная зависимость константы скорости гемолиза от концентрации эритроцитов в суспензии. При уменьшении концентрации эритроцитов с 10 до 0,3 % отношение констант скоростей гемолиза эритроцитов облученной Д, и контрольной суспензий возрастает (для концентрации 0,3 % PJPK= 5,0 ±0,5). При концентрации эритроцитов 10 - 100 % отношение Д7Д<- не зависит от концентрации клеток (Д./Рк= 1,50 ± 0,16). Соизмеримые по величине эффекты наблюдаются для суспензии с анестетиком эсмероном (в концентрации 1 мкл/мл). При концентрации эритроцитов 0,3 % отношение Д, / Ркоптроль = 5 ± 0,5, а при концентрациях 10

100 % отношение Дэ / Ркштрюь = 1 ± 0,1.

2. Для энергий пучка электронов 20 и 30 МэВ наблюдается экспоненциальная зависимость константы скорости гемолиза эритроцитов от времени облучения te на промежутке 3-10 мин. При времени облучения te = 10 мин в мембране возникает ~ 105 первичных центров ионизации.

3. При действии пучка электронов в дозах 100 - 1000 Гр, концентрациях эсмерона 0,02 - 2 мкг/мл и концентрации суспензии 14-Ю6 эритроцитов/мл наблюдается суперпозиция эффектов от воздействия пучка электронов и эсмерона по отдельности. При увеличении концентрации препарата и дозы облучения эффект от их совместного действия нелинейно увеличивается.

4. При воздействии пучком электронов (энергия 40 МэВ, мощность дозы 230 Гр/мин, время облучения 10 мин) на суспензию эритроцитов с добавлением перфторана в концентрации 10 мкл/мл статистически отличимой разницы константы скорости гемолиза облученной суспензии Д, и облученной суспензии с перфтораном Д+я не наблюдается Д = Д+я. При облучении суспензии эритроцитов с добавлением перфторана в концентрации 100 мкл/мл препарат защищает мембрану эритроцитов от воздействия ионизирующего излучения. Константа скорости гемолиза совместного воздействия пучка электронов и перфторана Д,+/7 меньше суммы констант скоростей гемолиза эритроцитов их воздействий по отдельности: Д,+/7 < Д, + Рп. Кинетическая кривая гемолиза эритроцитов, полученная в результате только добавления перфторана, и кривая, полученная в результате добавления перфторана и облучения, статистически не отличимы Рп = Д,+/7.

5. При воздействии у-излучения в малых дозах (1 - 35 Р) на суспензию эритроцитов наблюдается нестабильность отклика биологической системы. При дозе 2,5 сГр на мембрану приходится ~ 2 акта ионизации, или, считая центры возбуждения, ~ 60 центров повреждений.

6. В результате воздействия пучка электронов, УФ излучения и химфармпрепаратов изменяется значение порогового потенциала электрического пробоя мембран эритроцитов. При воздействии УФ л излучения (интенсивность I = 0,1 Вт/см , время облучения ty0 = 7 мин) и глютатиона (концентрация 40 мкг/мл) величины пороговых потенциалов электрического пробоя соотносятся как: (рконтроль> <Руф > 9глют> <Рглют+уф

7. Химфармпрепараты (таурин, глютатион, этанол) в зависимости от концентрации уменьшают (зона А) или увеличивают (зона Б) эффект воздействия УФ излучения на мембраны эритроцитов. При облучении систем «эритроциты + химфармпрепарат» ширина зоны А уменьшается, при этом отношение констант облученных суспензий с химфармпрепаратом было меньше, чем отношение констант не облученных суспензий с химфармпрепаратом ^ХФП*УФ < . Добавление таурина в концентрации Ст

УФ ^к 50 мкг/мл приводит к уменьшению относительной константы скорости гемолиза эритроцитов на 40 - 55 % (при интенсивности УФ излучения 1 = 0,1 Вт/см , времени облучения ty0 = 7 мин).

8. При малых концентрациях химфармпрепаратов в суспензии наблюдается нестабильность отклика биологической системы (для таурина -от 0,02 до 20 мкг/мл, для глютатиона - от 0,02 до 1,5 мкг/мл, для этанола - от 0,04 до 50 мкг/мл). Воздействие УФ излучения (/ = 0,1 Вт/см2) уменьшает данные диапазоны концентраций химфармпрепаратов в 2 - 4 раза.

9. Кривая зависимости скорости изменения числа эритроцитов от температуры в результате воздействия импульсным электрическим полем в интервале температур 10 — 37 °С имеет сигмоидальный характер.

10. Экспериментально установлено, что в первые 40 - 60 минут после создания суспензии в мембране эритроцитов происходят переходные процессы, а затем начинается участок относительной стабильности параметров системы, который и был выбран для проведения экспериментов.

11. При сохранении характерного вида кинетических кривых для доноров всех возрастных категорий, меняются значение константы скорости гемолиза эритроцитов /?. С возрастом (на интервале 20 - 70 лет) величина константы скорости гемолиза эритроцитов /? линейно увеличивается.

Считаю своим приятным долгом выразить благодарность научным руководителям за предоставление интересной темы научной работы, за постоянное внимание, советы и замечания, помощь в проведении экспериментов и подготовки материалов рукописи диссертации заведующему кафедрой физики ускорителей высоких энергий МГУ им. М.В. Ломоносова профессору, д.ф.-м.н. Черняеву Александру Петровичу и профессору кафедры медицинской и биологической физики ММА им. И.М. Сеченова, д.ф.-м.н., доценту Козловой Елене Карловне.

Выражаю искреннюю благодарность профессору кафедры медицинской и биологической физики ММА им. И.М. Сеченова, д.б.н., профессору Чернышу Александру Михайловичу за постоянную поддержку, ценные научные обсуждения и консультации, помощь в проведении экспериментов и подготовки диссертации.

Хочу выразить особенную благодарность заведующему кафедрой общей ядерной физики физического факультета МГУ, заведующему отделом ЭПВАЯ НИИЯФ МГУ, д.ф.-м.н., профессору Ишханову Борису Саркисовичу за постоянную поддержку, ценные рекомендации и консультации, интерес к работе и помощь в проведении экспериментов.

Благодарна директору НИИ общей реаниматологии РАМН, член-корр. РАМН профессору Морозу В.В. и вед. научн. сотр. Богушевич М.С. за научную постановку клинических задач. За помощь в клинических экспериментах сотруднику НИИ общей реаниматологии профессору Васильеву В.Ю. и аспиранту Казиеву Г.Р.

Благодарю за помощь и совместное проведение экспериментов в НИИЯФ им. Д.В. Скобельцына профессора Шведунова В.И., к.ф.-м.н. Ермакова А.Н. и сотрудника Смирнова В.И. Благодарю за ценные консультации Деева Л.И.

Хочу поблагодарить за участие и совместное проведение экспериментов аспирантов Близнюк У.А., Козлова А.П. и студенток Елагину В.М., Гудкову О.В., за участие в обсуждении результатов работы мне Белоусова А.В.

Благодарю за содействие в выполнении работы заведующую уч. частью ОЯФ Олейникову Э.П. и инспектора отд. Аспирантуры Дунаеву Л.А. А так же к.ф.-м.н. Варзаря С.М. и других сотрудников, аспирантов и студентов кафедры физики ускорителей высоких энергий.

А так же очень благодарна своим родным и близким за понимание и терпение в период написания рукописи.

Список литературы диссертационного исследования кандидат физико-математических наук Алексеева, Полина Юрьевна, 2007 год

1. Агеенко A.M., Кирилина С.И., Лебедева М.Н., Козлов Д.М. и соавт. Анестезиологическое обеспечение хирургического лечения дегенеративных заболеваний позвоночника у пожилых людей. // Хирургия позвоночника. 2004. №4. С. 103-106.

2. Антонов В.Ф. Липиды и ионная проницаемость мембран. // М.: Наука, 1982.148 с.

3. Антонов В.Ф., Смирнова ЕЛО., Шевченко Е.В. Липидные мембраны при фазовых превращениях. // М.: Наука, 1992.156с.

4. Атауллаханов Ф.И. "Чем заменить кровь", " АиФ Здоровье", № 52 (540). 2004.

5. Бескровная Л.А. Использование гипертауринурии в качестве теста биохимической индикации лучевого поражения. //Механизмы регуляции функций организма при экстремальных поражениях. // Томск, 1987. С.99-104.

6. Бурлакова Е.Б. Действие сверхмлых доз // Вестник РАН. 1994. Т.64. С. 425-431.

7. Бурлакова Е.Б., А.Н.Голощапов, Г.П.Жижина, А.А.Конрадов. Новые аспекты закономерностей действия низкоинтенсивного облучения в малых дозах // Радиационная биология. Радиоэкология, 1999. Т.39, №1. С.26-33.

8. Вислобоков А.И., Зайцев А.А., Игнатов Ю.Д., Савоськин A.JI. Мембранные механизмы действия на нервные клетки анестетиков, аналгетиков и противоаритмических средств. // Мед. акад. журн. 2001. Т. lv№ 1. С. 25-33.

9. Владимиров Ю.А., Потапенко А.Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов. М.: Дрофа, 2006.

10. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. // Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М. 1972. С. 20-35.

11. Владимиров В.В. "О принципах фотохимиотерапии и определении начальной дозировки длинноволновых ультрафиолетовых лучей при лечении методом фотохимиотерапии (ПУФА)", Вестник Дерматологии и Венерологии, Москва, "Медицина",№1, 1981г.;

12. Галенко-Ярошевский А.П., Фистуненко П.Н., Духанин А.С. Динамика взаимодействия местных анестетиков с сывороточным альбумином человека. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2005. 140. № 9 (сентябрь). С. 295-300.

13. Геннис Р. // Биомембраны. М. Мир, 1997.

14. Древаль В.И., Сичевская J1.B. Уменьшение связи гемоглобина с мембраной эиртроцита под действием ионизирующего излучения // Биофизика. 2000. Т 45, вып. 6. С. 1086- 1088.

15. Древаль В.И., Сичевская J1.B., Дорошенко В.О., Геннис Р. // Биомембраны. М. Мир, 1997.

16. Зима Г.В., Древаль В.И. Действие ионизирующего излучения в широком диапазоне доз на структурно-функциональные характеристики белковых и липидных компонент в плазматических мембранах эритроцитов// Радиационная биология. Экология. 2000. Т. 40. С.261-265.

17. Иваницкий Г.Р. "Биофизика на пороге нового тысячелетия: перфторуглеродЕЕые среды и газотранспортные кровезаменители", журЕЕал Medline.ru, том 1, декабрь 2000;

18. ИваЕшцкий Г.Р. // Материалы Десятой международной конференции по проблеме «Перфторуглероды в биологии и медицшЕе». ПущиЕЕо, 1999. -С. 229-242.

19. Иванов JI.B. Мембранотропные свойства лекарственных веществ. Проблемы поиска, скрининга и биодоступности. // Фармаком. 2004. №2. С. 1-5.

20. Капцов В.В. // Материалы Десятой международной конфереЕЕции по проблеме «Перфторуглероды в 6ееологии и медицине». Пущино, 1999. -С. 203-218.

21. Кармен Н.Б., МшпотшЕа Н.П., Орлов А.А. и др.// Материалы XII международной конфереЕЕции «Перфторуглеродные соедшЕеЕЕия в медицине и биологии». ПущиЕЕо, 2003. - С. 122 - 125.

22. КахЕЕОвскЕЕЙ И.М., Королева Е.В., ЗахарчеЕЕко В.Н., Ларионов С.М. ТауриЕЕ в лечении сахарного диабета // Клиническая фармакология и терапия. 1997. № 6. С. 3.

23. Козлова Е.К., Черняев А.П., Черныш A.M., Алексеева П.Ю. Электропорация эффективный метод экспресс-диагностики повреждений биологических мембран в результате воздействия физико-химических факторов на эритроциты. II Препринт НИИЯФ МГУ - 20057/773.

24. КорогодиЕЕ В.И. // Проблемы П0стради0ци0ЕЕ1Е0Г0 восстановления. М. 1966. С. 50-60.

25. Косталев В.А., Черняев А.П., Антипина Н.А. // ионизирующие излучения в терапии, Издательство Московского университета 2000г.

26. Кузин A.M. Стимугшрующее действие ионизирующего излучения на биологические процессы: к проблеме биологического действия малых доз. М.: Атомиздат, 1977.284 с.

27. Кузин A.M. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии. М.: Наука, 1986.284 с.

28. Кудряшов Ю.Б., Беренфельд Б.С. Основы радиационной биофизики. Московский Университет, 1982.356 с.

29. Кудряшов Ю.Б. Радиационная биофизика (ионизирующие излучения). М.: Физматлит. 2004.

30. Лев А.А. Дискретность токов ионных каналов как общее свойство систем с доминирующей поверхностной проводимостью. // Информационный бюллетень РФФИ. 1998. 6. № 4. С. 259.

31. Ломанов М.Ф., Луговцов О.В., Канчели И.Н., Хорошков B.C. Оптимизация протонной терапии как обратная задача дозиметрического планирования облучения. Препр./физ. ф-та МГУ им. М.В. Ломоносова № 2/2007. Физ. ф-т МГУ. 2007.

32. Мельников К.Н., Вислобоков А.И. Влияние бупивакаина и лидокаина на ионные каналы изолированных нейронов моллюска. // Психофармакология и биологическая наркология. 2004.4. № 2-3 (осень). С. 638-644.

33. Мороз В.В., Козлова Е.К., Богушевич М.С. и соавт. Перфторан в суспензии крови. Эффекты закрепляющего и разрушающего действия на модифицированные электрическими импульсами мембраны // Общая реаниматология. 2005. Т. 1. № 3. С. 5 10.

34. Мороз В.В., Е.К.Козлова, М.С. Богушевич, , А.М.Черныш, У.А. Близнюк, А.П. Козлов, П.Ю. Алексеева. Состояние мембран эритроцитов у доноров различных возрастных групп. Общая реаниматология. 2006. Том И, № 3. С. 9-12.

35. Мухин К.Н. Экспериментальная ядерная физика.Т. 1. Физика атомного ядра. М.: Атомиздат, 1974. 584 с.

36. Нефёдов Л.И. Таурин (биохимия, фармакология и медицинское применение). Мн.:, 1999.— 145с.

37. Плясунова С.А., Айвазова Д.Х., Сметанина Н.С. и др. // Материалы XII международной конференции «Перфторуглеродные соединения в медицине и биологии». Пущино, 2003. С. 188 - 189.

38. Потапенко А.Я. "Псоралены и медицина-4000-летний опыт фотохимиотерапии","Соросовский образовательный журнал" том 6, №11,2000.

39. Пшенкина Н.Н., Веселова О.М., Мурзина Е.В., Андреева Н.Б. Влияние перфторана на радиационный апоптоз тимоцитов.

40. Пшенкина Н.Н., Веселова О.М., Мурзина Е.В., Андреева Н.Б Влияние перфторана на показатели оксидативного стресса и выраженность радиационного апоптоза у крыс.

41. Рошаль А.Д. Структурные изменения в белках мембран эритроцитов под действием радиации // Биофизика. 2000. Т. 45, вып.5. С. 836 838.

42. Рубин А.Б. // Биофизика. 2-е изд., - М.: Книжный дом «Университет», 1999.

43. Самойлова К. А., Действие ультрафиолетовой радиации на клетку, Л., 1967.

44. Селиванов Е.А., Софронов Г.А., Ханевич М. Д., Кровезамещающие растворы переносчики кислорода, "Мир медицины" № 5 Т. 6.2000.

45. Смит К., Хэнеуолт Ф., Молекулярная фотобиология, пер. с англ., М., 1972.

46. Спитковский Д.М. Концепция действия малых доз ионизирующих излучений на клетки и ее возможные последствия к трактовке медико-билогических последствий // Радиационная биология. Радиоэкология. 1992. Т. 32, вып. 3. С. 382-400.

47. Спитковский Д.М. Новые биофизические и биохимические аспекты механизмов действия малых доз ионизирующей радиации.//Радиациоиная биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39, №1. С. 145 -155.

48. Таркунов П.А., Сапронов Н.С. Кардиопротекторное действие таурина // Эксперим. и клин, фармакология. 1997. Т. 60, № 5. С. 70-77.

49. Черняев А.П., А.М.Черныш, Алексеева П.Ю., Козлов А.П., Близнюк У.А., Е.К. Козлова, Диагностика скрытых повреждений мембран эритроцитов в результате воздействия физико-химических факторов. Технологии живых систем. 2007.Т. 4. № 1. С. 28-36.

50. Хасанов В.В., Г.Л.Рыжова, Е.В.Мальцева Методы исследования антиоксидантов. Химия растительного сырья. 2004. №.3. С. 63-75.

51. Черняев А.П. Взаимодействие ионизирующего излучения с веществом. М.: Наука, 2004.

52. Чайлахян Л. М и др., // Электростимулируюемое слияние клеток в биоинженерии "Биофизика" (том XXXII, вып. 5,1987).

53. Широков Ю.М., Юдин Н.П. Ядерная физика. М. Наука. 1980. 728 с.

54. Шмидт Р., Тевс Г. // Физиология человека. Т 2. М.: Мир. 1996 г.

55. Ярцев Е.И., Гольдберг Е.Д., Комешшков Ю.А. Taypmi (фармакологические и противолучевые свойства) — М.: Медицина, 1975.— 158с.

56. Azuoma I., Halliwell В., Наеу В.М. The antioxidant action of taurine, hypotaurine and their precursors //BiochemJ. — 1988. — V.256, N.l. — P.251-255.

57. Benderitter M., Vincent-Genod L., Pouget J.P., Voisin P. The cell membrane as a biosensor of oxidative stress induced by radiation exposure: a multiparameter investigation // Radiat. Res. 2003. 159(4). P. 471 483.

58. Benderitter M., Viricent-Genod L., Berroud A., Muller S., Donner M., Voisin P. Radio-induced structural membrane modifications- a potential bioindicator of ionizing radiation exposure? // Int J Radiat Biol. 1999.75(8). P. 1043-53.

59. Bhushan B. at str. Activity of radiation degradation products of vitamins A and E to haemolyse erythrocyte. // J. Biosci., Vol. 7, Numbers 3 & 4, June 1985, pp. 303-313.

60. Bulter Т., Bradley C.A., Owensby J.E., Plasma components protect erythrocytes against experimental haemolysis caused by mechanical trauma and hypotonicity// Int. J. Exp. Pathol. 1992.73(1) P. 27 33.

61. Chang L., Xu-J.X., Zhao J., Pang Y.Z., Tang C.S., Qi Y.F. Taurine antagonized oxidative stress injury induced by homocysteine in rat vascular smooth muscle cells // Acta Pharmacol Sin. 2004. Mar. № 25(3). P. 341-346.

62. Godin C., Caprani A. // Eur. Biophys. J. 1997. V.26. №2. P. 175-182.

63. Grzeliska E; Bartosz G; Leyko W; Chapman IV Effect of hyperthermia and ionizing radiation on the erythrocyte membrane. Int J Radiat Biol Relat Stud Phys Chem Med. 1982; 42(l):45-55

64. Heath R.L. Scintillation spectrometry. Gamma-ray spectrum catalogue, Ray spectrometry center. Idaho National Engineering &Environmental Laboratory. 1997.540 p.

65. Hofer M, Viklicka S, Gerasimenko VN, Kabachenko AN. Effects of sublethal irradiation with helium ions (300 Mev/nucleon) on basic hematological parameters of mice // Acta Astronaut 1994.V32. № 11. P.757 760.

66. Isobe K., Shimizu Т., Nikaido Т., Takaoka K. Low- voltage electrochemotherapy with low-dose methotrexate enhances survival in mice with osteosarcoma// Clin. Orthop. 2000: 1(426). P. 226-231.

67. Jumaa M., Muller B. W. Lipid emulsions as a novel system to reduce the hemolytic activity of lytic agents: mechanism of the protective effect // Eur. Pharm. Sci. 2000.9 (3). P. 285 290.

68. Karbownik Magorzata and Russel J. Reiter Antioxidative Effects of Melatonin in Protection Against Cellular Damage Caused by Ionizing Radiation // Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine 225:9-22 (2000)

69. Kitazuru E. R., A. V. B. Moreira, J. Mancini-Filho, H. Delincee and A. L. C. H. Villavicencio Effects of irradiation on natural antioxidants of cinnamon (Cinnamomum zeylanicum N.) 2004.

70. Kleszczynska H., Bonarska D., Luczynski J., Witek S., Sarapuk J. Hemolysis of erythrocytes and erythrocyte membrane fluidity changes by new lysosomotropic compounds. // Fluoresc. 2005 Mar . V. 15. P. 137-41.

71. Kotkoskie LA, Norton S. Acute response of the fetal telencephalon to short-term maternal exposure to ethanol in the rat. Acta Neuropathol (Berl). 1990. V. 79(5). P. 513-9.

72. Koziczak R., Gonciarz M., Krokosz A., Szweda-Lewandowska Z. // J Radiat Res (Tokyo). 2003; 44(3): 217-222.

73. Kozlova E.K., A.M. Chernysh, A.P. Chernyaev et al. Membrane electroporation under the combined action of physicochemical factors on erythrocytes // European Association for Red Cell Research ,15th Meeting , Murten, Switzerland, April. 2005. P. 78.

74. Kitazuru E. R.', A. V. B. Moreira0, J. Mancini-Filho, H. Delinceed and A. L. С. H. Villavicencio Effects of irradiation on natural antioxidants of cinnamon (Cinnamomum zeylanicum N.) 2004.

75. Kubasova Т., Chukhlovin А. В., Somosy Z., Ivanov S.D., Koteles G. J., Zherbin E.A., Hanson K. P. Detection of early membrane and nuclear alterations of thymocytes upon in vitro ionizing irradiation. Acta Physiol. Hung. 1993. V. 81 (3). P. 277 288.

76. Lee S.W., Ducoff H.S. The effect of ionizing radiation on avian erythrocytes //Radiat. Res. 1994.137(1). P. 104-110.

77. Li Sh. Electroporation Gene Therapy: new developments in vivo and vitro // Current Gene Therapy. 2004. V. 4. № 3. p.309 316.

78. Mintz P.D., Anderson G. // Effect of gamma irradiation on the in vivo recovery of stored red blood cells, www.medline.com.

79. Mitchel R.E.J. Involvement of hydroxyl radicals in the release by ionizing radiation of a cell surface nuclease from Micrococcus radiodurans // Radiation research, 1975.64,321 330.

80. Nakamura Т., Ogasawa M., Koyama I., Nemoto M., Yoshida T. The protective effect of taurine on the biomembrane against damage produced by oxygen radicals //Biol. Pharm. Bull. 1993. V.16, N.10. P.970-972.

81. Nanda G.S., Mishra K.P. Studies on electroporation of thermally and chemically treated human erythrocytes // Bioelectrochem Bioeneg. 1994. V. 34. P. 129 134.

82. Neamtu S, Morariu VV, Turcu I, Popescu AH, Copaescu LI. Pore resealing inactivation in elctrpoporated erythrocyte membrane irradiated with electrons // Bioelectrochem Bioenerg. 1999. V.48. №2. P.441 445.

83. Ortolani 0., A. Conti, A. Raffaelle et al. The effect of glutatione and N-acetylcysteine on lipoperoxide damagein patients with early septic shock // Am. J. Respir. Crit. Care Med., Volume 161, N 6, June 2000, 1907 1911

84. Pelevina I.I., Afanas'ev G.G. et al. Low doses of radiation: area they dangerous?/Ed. E.B. Burlakova. Hungtington, new York: Nova Scince Publishers, Inc. 2000. Ch. 11. P. 141 153.

85. Rabin BM, Hunt WA, Lee J Attenuation and cross-attenuation in taste aversion learning in the rat: studies with ionizing radiation, lithium chloride and ethanol. Pharmacol Biochem Behav. 1988 Dec;31(4):909-18.

86. Rozhdestvenskii L.M., Pro and contra regardilng the threshold/non-threshold mutagenic (Carcinogenic) action of low-level ionizing radiation. Radiats. Biol. Radioecol. 2001. V. 41 (5). P. 580 588.

87. Shinde S., Kumar P., Patil N. Decreased Levels Of Erythrocyte Glutathione In Patients With Myocardial Infarctioa // The Internet Journal of Alternative Medicine. 2005. Volume 2 Number 1.

88. Sharifi S., Dzik W.H., Sadrzadeh S.M. Human plasma and tirilazad mesylate protect stored human erythrocytes against the oxidative damage of gamma-irradiation // Trasfus. Med. 2000. V. 10(2). P. 125 130.

89. Stenz R., Bauer K.H. A new physiologically approached in vitro test for quick evaluation of the hemolytic activity of surfactants // Pharmazie. 1996. V. 51 (5). P. 283-287.

90. Tekle, E., R. D. Astumian, and P. B. Chock. Selective and asymmetric molecular transport across electroporated cell membranes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. V. 91. P. 11512-11516.

91. Tekle E., Astumian R.D., Friauf W.A.,' Chock P.B. Asymmetric Pore Distribution and Loss of Membrane Lipid in Electroporated DOPC Vesicles // Biophys. J. 2001. V.81(2).P. 960-968.

92. Tieleman D.P. The molecular basis of electroporation. // BMC Biochem. 2004 Jul 19;5:10. medline www. Pubmed. gov

93. Timbrell J.A., Seabra V., Waterfield C.J. The in vivo and in vitro protective propeties of taurine //Gen. Pharmac. 1995. V.26., N.3. P.453-462.

94. Vorontsova ZA, Dedov VI, Ushakov IB. Tissue basophils of the thyroid gland in separate and combined exposure to ionizing radiation and ethanol AviakosmEkolog Med. 1997;31(3):39-43.

95. Vorontsova ZA, Atiakshin DA, Ushakov IB Morpho-functional status of the thyroid gland and large cell hypothalamus nuclei in the ionizing irradiation and ethanol Aviakosm Ekolog Med. 2001 ;35(3):66-9

96. Wong J.C.F. and A.V. Parisi Assessment of ultraviolet radiation exposure in photobiological experiments

97. Zhang J.Z., Canaday D. J., Beckett M.A., Astumian R.D., Weichselbaum R.R., Lee R.C. Surfactant sealing of membranes permeabilized by ionizing radiation. Radiat. Res. 2000. V. 154(2). P. 171 177.

98. Zimmermann U. and G.A. Neil. Electromanipulation of cells. // CRC Press. 1996.