Исследование метаболизма инсулина в эритроцитах крыс в норме и при экспериментальном диабете тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Николаев, Сергей Леонидович

• Николаев, Сергей Леонидович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Николаев, Сергей Леонидович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Роль инсулина в обмене веществ. Молекулярные механизмы действия инсулина на клетки.

1.2.1. Структура рецепторов инсулина.

1.2.2, Аутофосфорилирование рецепторов инсулина.

1.3. Роль специфического связывания инсулина плазматическими мембранами клеток в его расщеплении.

1.4. Методы исследования инсулин деградирующей системы клеток.

1.5.1. Ферменты, расщепляющие инсулин.

1.5.2. Инсулиназа и ее свойства.'

1.5.3. Роль инсулиназы в клетке.

1.5.4. Мембранная инсулиназа. 40 1.6.1. Ингибиторы инсулиназы. 41 1.7. Продукты деградации инсулина инсулиназой.

1.8.1. Деградация инсулина в эритроцитах.

1.8.2. Связывание инсулина рецепторами эритроцитов крыс в норме и при патологии. 48 1.8.3 Связывание инсулина рецепторами эритроцитов человека в норме и при инсулин зависимом диабете.

1.8.4.Инсулин деградирующая активность эритроцитов при диабете.

1.9. Патогенез развития сахарного диабета.

1.10. Методы лабораторной диагностики сахарного диабета.

1.11 Вклад в изучение метаболизма инсулина кафедры

Ленинградского химико-фармацевтического института.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. 2.1. Объекты исследования

2.2 Определение количества эритроцитов в эритроцитарной массе.

2.3 Создание экспериментального диабета.

2.4. Выделение и очистка инсулиназы из лизата эритроцитов.

2.4.1. Получение лизата эритроцитов.

2.4.2. Ионообменная хроматография на DEAE сефадексе.

2.4.3. Аффинная хроматография.

2.5. Выделение инсулиназы из цитозоля гепатоцитов.

2.6. Получение препарата инсулина, меченного I.

2.7. Методы определения активности инсулиназы.

2.8. Изучение влияния ионов металлов на активность инсулиназы.

2.9. Определение оптимума действия инсулиназы

2.10. Получение термо-кислото устойчивого ингибитора из лизата эритроцитов.

2.11. Выделение ингибитора инсулиназы из гепатоцитов.

2.12. Изучение обмена инсулиназы из цитозоля гепатоцитов.

2.13. Определение концентрации белка

2.13.1. Определение наличия гликозидной части в составе ингибитора инсулиназы.

2.13.2. Определение наличия липидной части в составе ингибитора инсулиназы.

2.14. Определение связывания инсулина рецепторами мембраны эритроцитов.

2.14.1. Определение процента специфического связывания инсулина рецепторами мембраны эритроцитов.

2.14.2. Определение количества мест связывания инсулина на эритроцит.

2.15. Электрофоретические методы анализа фермента.

2.15.1. Электрофорез в пластинах полиакриламидного геля.

2.15.2. Диск - электрофорез в градиентном ПААГ.

2.15.3. Электрофорез с добавлением ДС натрия.

2.15.4. Окраска полиакриламидных гелей для выявления белковых полос.

2.16. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Определение процента специфического связывания инсулина рецепторами мембраны эритроцитов.

3.2. Изучение сродства инсулиновых рецепторов мембраны эритроцита крысы в норме и при экспериментальном диабете.

3.3. Определение количества инсулиновых рецепторов на мембране эритроцита крысы в норме и при экспериментальном диабете.

3.4.1. Выделение и очистка инсулиназы из эритроцитов.

3.5. Характеристика инсулиназы из лизата эритроцитов.

3.5.1. Определение оптимума рН для инсулиназы лизата эритроцитов.

3.5.2. Изучение влияния ингибиторов и активаторов на активность инсулиназы из лизата эритроцитов.

3.5.3. Определение кинетических параметров инсулиназы из лизата эритроцитов.

3.5.4. Изучение инсулин деградирующей активности эритроцитов в норме и при экспериментальном диабете.

3.6. Изучение активности эндогенного ингибитора инсулиназы из лизата эритроцита.

3.6.1. Изучение ингибитора инсулиназы из плазмы крови.

3.7. Изучение мембранной инсулиназы эритроцитов.

3.8. Изучение деградации инсулина в гепатоцитах.

3.9. Характеристика инсулиназы из цитозоля гепатоцитов.

3.9.1. Изучение субстратной специфичности инсулиназы из гепатоцитов.

3.9.2. Изучение кинетических параметров инсулиназы цитозоля гепатоцитов.

3.10. Характеристика термо-кислото устойчивого ингибитора из цитозоля гепатоцитов.

3.10.1. Активность высокомолекулярного ингибитора при экспериментальном диабете.

3.11. Обмен инсулиназы из цитозоля гепатоцитов.

3.12. Исследование инсулин рецепторного и инсулин деградирующего комплекса эритроцитов человека.

3.12.1. Определение процента специфического связывания инсулина рецепторами мембраны эритроцитов человека.

3.12.2. Изучение сродства инсулиновых рецепторов мембраны эритроцита человека в норме и при инсулин зависимом диабете.

3.12.3. Определение количества инсулиновых рецепторов на мембране эритроцита человека в норме и при инсулин зависимом диабете

3.12.4. Выделение и очистка инсулиназы из эритроцитов человека.

3.13. Характеристика инсулиназы из лизата эритроцитов человека.

3.13.1. Определение оптимума рН для инсулиназы лизата эритроцитов человека.

3.13.2. Изучение влияния ингибиторов и активаторов на активность инсулиназы из лизата эритроцитов человека.

3.13.3. Определение кинетических параметров инсулиназы из лизата эритроцитов человека.

3.13.4. Изучение инсулин деградирующей активности эритроцитов человека в норме и при инсулин зависимом диабете.

3.14.1. Изучение активности эндогенного ингибитора инсулиназы из лизата эритроцита человека.

3.14.2. Изучение ингибитора инсулиназы из плазмы крови человека.

IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование метаболизма инсулина в эритроцитах крыс в норме и при экспериментальном диабете»

Актуальность исследований.

Сахарный диабет является одной из важных медико-социальных проблем здравоохранения практически всех стран мира. Распространенность сахарного диабета в промышленно-развитых странах составляет 5 — 6% и имеет тенденцию к увеличению.

Большая социальная значимость сахарного диабета состоит в том, что он приводит к ранней инвалидизации и летальности, которая обусловлена наличием поздних сосудистых осложнений диабета: микроангиопатии (ретинопатия и нефропатия), макроангиопатии (инфаркт миокарда, инсульт, гангрена нижних конечностей), нейропатии. Сахарный диабет — очень частая причина слепоты, смерти от уремии. У больных диабетом наиболее велик риск развития сердечно-сосудистых заболеваний. Более 40% всех, не обусловленных травмой ампутаций нижних конечностей, проводится в связи с синдромом диабетической стопы и гангреной нижних конечностей.

Сахарный диабет является тяжелым бременем для здравоохранения. В связи с этим представляют интерес данные Rubin R.J. и соавт. (1994 г.). В 1992 г. все расходы на здравоохранение, к примеру, в США составили 720,5 млрд. долларов, из них на сахарный диабет пришлось 105,2 млрд. или 14,6%. О социальной значимости сахарного диабета свидетельствует постоянное увеличение расходов на него. Подобных статистических данных по России в литературе не представлено, однако, есть основания предполагать, что значимость проблемы диабета чрезвычайно высока и в России.

Приведенные данные наглядно показывают социальную и экономическую важность проблемы сахарного диабета. Уменьшить текущие 9 расходы на оказание медицинской помощи больным диабетом, снизить заболеваемость сахарным диабетом, частоту поздних осложнений диабета и повысить качество жизни больных возможно лишь при осуществлении ранней диагностики и соответствующей организации всех звеньев диабетологической службы . Решению этих вопросов служит Федеральная целевая программа "Сахарный диабет", которая утверждена Правительством Российской Федерации 7 октября 1996 г.

Основными целями программы "Сахарный диабет" являются: радикальное увеличение продолжительности и улучшение качества жизни путем обеспечения специализированной медицинской помощью лиц, больных сахарным диабетом; проведение профилактики сахарного диабета и его поздних осложнений с привлечением достаточных материально-технических средств. Одним из основных разделов программы "Сахарный диабет" является организация системы профилактики и ранней диагностики сахарного диабета и его осложнений.

Для организации диабетологической службы создан Федеральный диабетологический центр, а также будут организованы диабетологические центры (отделения) субъектов Российской Федерации на базе имеющихся эндокринологических диспансеров или вновь организуемых отделений больниц с обязательным выделением профильных служб по лечению осложнений сахарного диабета (ретинопатии, нефропатии, ИБС, диабетической стопы), организацией школ по обучению лиц, больных сахарным диабетом, обеспечением диспансерного наблюдения женщин фертильного возраста, больных сахарным диабетом; будет разработан государственный регистр лиц, больных сахарным диабетом. При этом обеспечиваются сохранение кадрового потенциала, соответствующих материальной, научной, лечебно-профилактических баз учреждений и

10 организаций, а также подготовка высококвалифицированных кадров диабетологической службы, в том числе для обеспечения функционирования государственного регистра, проведения эпидемиологических исследований и мониторинга лиц, больных сахарным диабетом, обучения больных, лечения поздних осложнений, возникающих вследствие заболевания сахарным диабетом, и медицинской реабилитации больных.

Реализация мероприятий, предусмотренных программой "Сахарный диабет", поможет добиться результатов, рекомендуемых Всемирной организацией здравоохранения и Сент-Винсентской декларацией, в том числе уменьшения на 33% числа больных с поздними стадиями почечной недостаточности; уменьшения на 33% числа больных со слепотой, развившейся вследствие диабетической ретинопатии; уменьшения на 50% числа ампутаций нижних конечностей у больных сахарным диабетом; обеспечения такого же уровня успешного исхода беременности у женщин, больных сахарным диабетом, как и у здоровых женщин; увеличения продолжительности активной жизни и снижения ранней инвалидизации лиц, больных сахарным диабетом.

Цель и задачи работы.

Представленное исследование проведено с целью изучения инсулин деградирующего комплекса эритроцитов млекопитающих при экспериментальном аллоксановом диабете для сравнения с изменениями в активности такого комплекса человеческих эритроцитов. Исследование механизмов регуляции содержания инсулина в крови проведено для оценки вклада компонентов инсулин деградирующего комплекса в этот процесс. Кроме того, целью данного исследования являлось обнаружение возможных, диагностически значимых изменений параметров связывания инсулина эритроцитами в начальных стадиях диабета. и

1. Разработать схему выделения и очистки инсулиназы, а также инсулиназного ингибитора из лизата эритроцитов.

2. Определить количество и аффинность инсулиновых рецепторов мембраны эритроцитов крыс в норме и на разных стадиях развития экспериментального диабета.

3. Изучить активность компонентов инсулин деградирующего комплекса эритроцитов крыс в норме и на разных стадиях развития экспериментального диабета.

4. Изучить активность инсулин деградирующего комплекса эритроцитов человека, количество и аффинность инсулиновых рецепторов мембраны эритроцитов человека в норме и при инсулин зависимом диабете.

5. Сопоставить результаты экспериментальных и клинических исследований инсулин деградирующего комплекса и инсулиновых рецепторов эритроцитов. Оценить возможность использования этих данных для ранней диагностики инсулин зависимого диабета у человека.

Научная новизна.

Впервые охарактеризованы качества высоко- и низко-аффинных инсулиновых рецепторов мембраны эритроцита крысы и человека при экспериментальной инсулинопении и инсулин зависимом диабете соответственно. Впервые обнаружен и охарактеризован эндогенный низко молекулярный ингибитор эритроцитарной инсулиназы. Изучено влияние этого ингибитора на инсулиназу и изменение его активности в плазме крови и цитозоле эритроцитов при экспериментальном диабете у крыс и инсулин

12 зависимом диабете у человека. Установлено наличие высоко молекулярного ингибитора в гепатоцитах и охарактеризована его активность при экспериментальном диабете. Установлено, что механизмы компенсации инсулинопении у крысы осуществляются на ранних стадиях эритропоэза, путем уменьшения синтеза инсулиновых рецепторов и цитозольной инсулиназы эритроцитов. Основной причиной уменьшения деградации инсулина в гепатоцитах крысы, также является уменьшение синтеза инсулиназы гепатоцитами при экспериментальном диабете. Выявлено, что при беременности, происходит увеличение связывания инсулина рецепторами эритроцитов и увеличение темпов деградации инсулина в эритроцитах. При диабете у беременных женщин происходит уменьшение, как связывания так и деградации инсулина эритроцитами.

Теоретическое и практическое значение.

В результате выполнения работы оптимизированы методы выделения и очистки компонентов инсулин деградирующего комплекса эритроцитов. Это позволило получить инсулиназу лизата эритроцитов и инсулиназный ингибитор из лизата эритроцитов с достаточно высоким выходом. Полученные результаты показывают зависимость активности инсулиназы лизата эритроцитов от содержания инсулина в крови. В результате исследования связывания инсулина рецепторами мембраны эритроцитов установлено наличие двух типов инсулиновых рецепторов. Установлено, что количество и сродство этих рецепторов на мембране эритроцита зависит от концентрации инсулина в крови. Представленные данные могут служить критериями диагностики инсулин зависимого диабета у человека. Изучение инсулиназного ингибитора из лизата эритроцитов позволило установить зависимость его

13 активности от инсулинопении, что является ценным вкладом в понимание механизмов развития сахарного диабета.

Положения , представляемые на защиту.

1. Активность компонентов инсулин деградирующего комплекса эритроцитов и гепатоцитов, а также связывание инсулина эритроцитами зависят от концентрации его в крови.

2. Существует корреляция между параметрами деградации и связывания инсулина эритроцитами животных при экспериментальном аллоксановом диабете и человека при инсулин зависимом диабете.

3. Связывание и деградация инсулина эритроцитами женщин изменяются при беременности и инсулин зависимом диабете. Изменения параметров как связывания, так и деградации инсулина эритроцитами могут учитываться при диагностике инсулин зависимого диабета.

Апробация работы.

Материалы диссертационной работы были представлены на "Юбилейной Конференции Молодых Ученых", посвященной 200 летию Военно-Медицинской Академии в Санкт-Петербугре в 1998 г. и на Международной конференции "Фармация в 21 веке: инновации и традиции" в Санкт-Петербурге в 1999 г.

Объем работы.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Николаев, Сергей Леонидович

ВЫВОДЫ.

1. Установлено, что содержание инсулина в крови влияет на интенсивность его связывания и деградации эритроцитами крыс и человека.

2. Впервые охарактеризованы свойства высоко- и низко-аффинных инсулиновых рецепторов мембраны эритроцитов крыс и человека при экспериментальной инсулинопении и инсулин зависимом диабете соответственно. Выделена и изучена инсулиназа из эритроцитов крыс и человека и гепатоцитов крыс.

3. Впервые обнаружен и охарактеризован эндогенный, низко молекулярный ингибитор эритроцитарной инсулиназы. Изучено влияние этого ингибитора на инсулиназу и изменение его активности в плазме крови и лизате эритроцитов при экспериментальном диабете у крыс и инсулин зависимом диабете у человека. Установлено наличие высокомолекулярного ингибитора в гепатоцитах крыс и охарактеризована его активность при экспериментальном диабете.

4. Установлено, что механизмы компенсации инсулинопении у крыс осуществляются в процессе эритропоэза, путем уменьшения синтеза инсулиновых рецепторов и растворимой инсулиназы эритроцитов. Основной причиной уменьшения деградации инсулина в гепатоцитах крыс, также является уменьшение синтеза инсулиназы гепатоцитами при экспериментальном диабете.

159

5. Выявлено, что при беременности у женщин происходит увеличение связывания инсулина рецепторами эритроцитов и увеличение темпов деградации инсулина в эритроцитах. При диабете у беременных и не беременных женщин происходит уменьшение, как связывания, так и деградации инсулина эритроцитами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Николаев, Сергей Леонидович, 2000 год

1. Кассандрова О.Н., Лебедев В.В. Обработка результатов наблюдений. // М.1. Наука. 1970. Стр. 104 с.

2. Кусень С.И., Стойка Р.С. Молекулярные механизмы в действииполипептидных факторов роста.// Проблемы эндокринологии. . -М.,1985. Стр .48-49.

3. Маурер Г. Диск-электрофорез.// М. Мир. 1971. Стр.114.

4. Минченко А.Г. Молекулярные механизмы действия инсулина на клетки:множественность пострецепторных путей.//Успехи современной биологии 1988,- Том 106,вып.3 (6). -Стр. 36-38.

5. Abumrad NA, Briscoe Р, Beth АН, Whitesell RR Temperature dependence ofglucose transport in erythrocytes from normal and alloxan-diabetic rats. //Biochim Biophys Acta.-1988.-Feb 18;938 (2). P.222-230.

6. Adames N, Blundell K, Ashby MN, Boone C. Role of yeast insulin-degradingenzyme homologs in propheromone processing and bud site selection.//Science.-1995.-Oct 20;270 (5235).-P.464-467.

7. Affholter JA, Cascieri MA, Bayne ML, Brange J, Casaretto M, Roth RA.1.entification of residues in the insulin molecule important for binding to160insulin-degrading enzyme. // Biochemistry. 1990. - Aug 21;V.29N.33. -P.7727-7733.

8. Agardh CD, Lesniak MA, Gerritsen GC, Roth J. The influence of plasma insulinconcentrations on tissue insulin levels in rodents: a study of the diabetic Chinese hamster and the ob/ob mouse.// Metabolism. 1986. - Mar;35 (3). -P.244-249.

9. Agarrwal V.R., Rastorgi A.K. Agarwal C.G.// ActaDiabetol Lat, Vol. 23,1986.pp. 233.

10. Agarwal VR, Rastogi AK. In vitro insulin action on erythrocyte glucose metabolism in normal and diabetic rats.// Diabetologia 1988. Jan;31 (1). -P.51-53.

11. Ahmed HM. Effect of calcium chloride on some metabolic actions of certainantidiabetic drugs in normal and alloxanised rabbits.//Pharmazie. 1975 . -Sep.-V.30 (9). - P.598-602.

12. Akiyama H, Shii K, Yokono K, Yonezawa K, Sato S, Watanabe K, Baba S

13. Cellular localization of insulin-degrading enzyme in rat liver using monoclonal antibodies specific for this enzyme .//Biochem Biophys Res Commun.-1988.- Sep 15.-V.155 (2). P.914-922.

14. Akiyama H, Yokono K, Shii K, Ogawa W, Taniguchi H, Baba S, Kasuga M.

15. Natural regulatory mechanisms of insulin degradation by insulin degrading enzyme.//Biochem Biophys Res Commim. 1990. - Aug 16;V.170N.3. -P.1325-1330.

16. Andersen O, Kuhl С Insulin receptor binding to monocytes and erythrocytesduring normal human pregnancy.//Eur J Clin Invest 1986 Jun;16 (3). P.226-.

17. Auletta M, Anton i ell о S, Abrescia N. Insulin-degrading activity in experimentalliver cirrhosis of the rat.// Enzyme Protein. 1994. - V.48 (4). - P. 197-201.161

18. Authier F, Bergeron JJ, Ou WJ, Racliubinski RA, Posner BI, Walton PA

19. Degradation of the cleaved leader peptide of thiolase by a peroxisomal proteinase.//Proc Natl Acad Sci U S A.-1995.-Apr 25;92 (9).-P.3859-3863.

20. Authier F, Cameron PH, Taupin V Association of insulin-degrading enzymewith a 70 kDa cytosolic protein in hepatoma cells.//Biochem J.-1996.-Oct 1,-V.319 (Pt 1). P.149-158.

21. Authier F, Posner BI, Bergeron JJ Insulin-degrading enzyme.//Clin Invest Med1996 Jun; 19(3): 149-160.

22. BalapureA.K. Saleem M. Kumari K, Rastogi A.K. Insulin binding.// Indian

23. Jornal of Experimental Biology Vol.23,1985,pp. 169.

24. Beauregard G, Potier M.Radiation inactivation of membrane proteins: molecular weight estimates in situ and after Triton X-100 solubilization.//Anal Biochem. 1984. - Aug 1;.V.140.N.2. - P.403-408.

25. Becker AB, Roth RA. Department of Pharmacology, Stanford University School of Medicine, CA 94305. An unusual active site identified in a family of zinc metalloendopeptidases. // Proc Natl Acad Sci USA.- 1992. May 1;V.89.N.9. - P.3835-3839.

26. Bellmaim O, Hartmann E Influence of pregnancy on the kinetics of insulm.//Am J Obstet Gynecol. -1975. -Aug 1;122 (7). P829-833.

27. Bennett RG, Hamel FG, Duckworth WC Identification and isolation of a cytosolic proteolytic complex containing insulin degrading enzyme and themulticatalytic proteinase.//Biochem Biopliys Res Commim.-1994.-Jul 29;202 (2). P. 1047-1053.

28. Bennett RG, Hamel FG, Duckworth WC. Characterization of the insulin inhibition of the peptidolytic activities of the insulin-degrading enzyme-proteasome complex.//Diabetes. 1997. - Feb;46 (2). - P. 197-203.

29. Black M, Heick HM, Begin-Heick N Abnormal regulation of insulin secretion in the genetically obese (ob/ob) mouse. //Biochem J.-1986.-Sep 15;238 (3). -P.863-869.

30. Bondy CA, Zhou J, Chin E, Reinhardt RR, Ding L, Roth RA. Cellular distribution of insulin-degrading enzyme gene expression. Comparison with insulin and insulin-like growth factor receptors. .//J Clin Invest.- 1994,- Mar; V. 93.-N.3. P.966-973.

31. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quontitation of microgramm quontaties of protein? Using the principle of protein dying binding. // Anal.bioch. 1976? №72 p.248-254.

32. Burghen G. A., Duckworth W.C.,Kitabchi A.E., Relationships between insulin binding, action, and degradation. 1976 // J.Clin.Invest. . V.57,hh.1088-1092.

33. Caro JF, Amatruda JM. Functional relationships between insulin binding, action, and degradation. A reassessment. // TypeJ Biol Chem. 1980. - Nov 10;255 (21). - P.l0052-10055.

34. Carpentier JL, Gorden P, Lew DP. Calcium ions are required for the intracellular routing of insulin and its receptor.// Exp Cell Res. 1992. -Jan;V.198.N.1. - P. 144-149.163

35. Carpentier JL, Hamer I, Gilbert A, Paccaud JP. Molecular and cellularmechanisms governing the ligand-specific and non-specific steps of insulin receptor internalization.//Z Gastroenterol.-1996.-Jim;34 Suppl 3,-P.73-75.

36. Chandler M.L., Varandani P.T. Insulin degradation. XV. Use of different assaymethods for the study of mechanism of action of glutathione-insulin transhydrogenase.// Biochim Biophys Actav 1975. Aug 26;397 (2). - P.307-317.

37. Chesneau V, Perlman RK, Li W, Keller GA, Rosner MR. Insulin-degradingenzyme does not require peroxisomal localization for insulin degradation.//Endocrinology.-1997.-Aug; 138 (8) .- P.3444-3451.

38. Chevenne D, Letailleur A, Trivin F, Porquet D. Effect of hemolysis on theconcentration of insulin in serum determined by RIA and IRMA.//Clin Chem-1998,- Feb;44 (2).-P.354-356.

39. Davies JG, Muir AV, Offord RE Identification of some cleavage sites of insulinby insulin proteinase.//Biochem J . -1986. Dec 1;240 (2). - P.609-612.

40. Davis B. Disc electrophoresis II. Method and application to human serum proteins. //Ann. NY Acad. Sci. 1964. V.121. Art.2. P.404-427.

41. Davies JG, Muir AV, Rose K, Offord RE. Identification of radioactive insulinfragments liberated by insulin proteinase during the degradation of semisynthetic 3H.GlyAl]insulin and [3H]PheBl]insulin.//Biochem J. -1988. Jan 1;249 (1) . - P.209-214

42. DePirro R, Fusco A, Lauro R, Testa I, Ferreti F, DeMartinis C. Erythrocyteinsulin receptors in non-insulin-dependent diabetes mellitus.//Diabetes 1980 Feb;29 (2). P.96-99164

43. Duckworth WC. Insulin degradation: mechanisms, products, and significance.//

44. EndocrRev. 1988. - Aug;V.9.N.3. - P.319-345.

45. Duckworth WC, Bennett RG, Hamel FG . The significance of intracellularinsulin to insulin action.//J Investig Med . 1997. - Feb;45 (2). - P.20-27.

46. Duckworth WC, Bennett RG, Hamel FG. Insulin acts intracellularly on proteasomes through insulin-degrading enzyme.//Bioehem Biophys Res Commun .-1998,- Mar 17;244 (2).- P.390-394.

47. Duckworth WC, Bennett RG, Hamel FG. A direct inhibitory effect of insulin ona cytosolic proteolytic complex containing insulin-degrading enzyme and multicatalytic proteinase.//J Biol Chem. 1994. - Oct 7;269 (40). - P.24575-24580.

48. Duckworht W.C., Heinemann M.A.,Kitabchi E. The insulin degrading enzyme.

49. Proc. Nat. Acad. Sci. USA.-1972 -Vol.69.-P.3698-3701.

50. Duckworth WC, Hamel FG, Liepnieks JJ, Peavy DE, Ryan MP, Hermodson

51. MA, Frank BH Identification of A chain cleavage sites in intact insulin produced by insulin protease and isolated hepatocytes.//Biochem Biophys Res Commun. 1987 . -Sep 15; 147 (2). - P.615-621.165

52. Duckworth WC, Hamel FG, Peavy DE. Two pathways for insulin metabolism inadipocytes.//BiochimBiophys Acta.-1997.-Sep 11;1358 (2) .-P.163-171.

53. Duckworth WC, Runyan KR, Wright RK, Halban PA, Solomon SS. Insulindegradation by hepatocytes in primary culture.// Endocrinology . 1981. -Apr; 108 (4). -P. 1142-1147.

54. Duckworth WC, Stentz FB, Heinemann M, Kitabchi AE Initial site of insulincleavage by insulin protease. //Proc Natl Acad Sci U S A 1979 Feb;76 (2):635-639

55. Duckworth WC, Stentz FB, Heinemann M, Kitabchi AE. Initial site of insulincleavage by insulin protease. // Proc Natl Acad Sci USA.- 1979. -Feb;V.76.N.2. -P.635-639.

56. Ebrahim A, Hamel FG, Bennett RG, Duckworth WC Identification of the metal associated with the insulin degrading enzyme.//Biochem Biophys Res Commun. 1991. - Dec 31;181 (3). - P. 1398-1406 .

57. Espinosa R 3d, Lemons RS, Perlman RK, Kuo WL, Rosner MR, Le Beau MM1.calization of the gene encoding insulin-degrading enzyme to human chromosome 10, bands q23—q25.//Cytogenet Cell Genet. 1991. -V. (4). -P.184-186.

58. Fawcett J, Rabkin R.Degradation of insulin by isolated rat renal cortical endosomes.//Endocrinology. 1993. - Oct;133 (4). -P.1539-1547.

59. Gambhir KK, et al. Red blood cell insulin receptors in health and disease.

60. Biochem Med Metab Biol. .-1991.-Apr 1; 45 (2).-P. 133-153.

61. Gambhir KK, Nerurkar SG. Degradation and internalization of bound insulin in human erythrocytes.// Biochem Int. 1991. - Jan. V.23. N.2. - P.405-412.

62. Gavin J. R.„ Roth J, Neville D.M., Melyts P De. Proc Natl Acad Sci USA.1974.-V.71 .P.84.

63. Gehm BD, Kuo WL, Perlman RK, Rosner MR.Ben May Institute, University of

64. Chicago, Illinois 60637. Mutations in a zinc-binding domain of human insulin-degrading enzyme eliminate catalytic activity but not insulin binding.// J Biol Chem 1993 Apr 15;.V.268.N.ll. P.7943-7948.

65. Gherzi R, Andraghetti G, Adezati L, Cordera R Insulin receptor regulation inhuman mature red cells in vitro.//Horm Res 1985;22 (4). P.270-275

66. Goldfine ID. Does insulin need a second messenger?//Diabetes. 1977 Feb.1. V.26 (2). P.148-155.

67. Goldstein В J, Livingston JN.Insulin degradation by insulin target cells. // Metabolism. 1981,- Aug;V.30.N.8. - P.825-835.

68. Grundleger ML, Godbole VY, Thenen SW Age-dependent development of insulin resistance of soleus muscle in genetically obese (ob/ob) mice.//Am J Physiol.-1980.-Nov;239 (5). P.E363-E371.167

69. Gupta BL, Azam M, Baquer NZ Changes in erythrocyte glutathione peroxidaseand glutathione reductase in alloxan diabetes.//Biochem Int.-1990.-V.21 (4). -P.725-731.

70. Gupta DK, Ahmad F, Suhail M Effect of alloxan induced mild insulin dependent diabetes mellitus on rat erythrocyte cytosolic dehydrogenases.// Indian J Exp Biol.-1996.-Mar.-Y.34 (3). P.262-263.

71. Haft CR, De La Luz Sierra M, Hamer I, Carpentier JL, Taylor SI. Analysis ofthe juxtamembrane dileucine motif in the insulin receptor.//Endocrinology.-1998,- Apr; 139 (4).- P.1618-1629.

72. Hamel FG, et al. Intraendosomal degradation of transforming growth factoralpha.//Mol Cell Endocrinol. .-1997.-Feb 7; 126 (2) .-P.185-192.

73. Hamel FG, Gehm BD, Rosner MR, Duckworth WC. Identification of the cleavage sites of transforming growth factor alpha by insulin-degrading enzymes.//Biochemistry. 1996,- Nov 12;V.35. N.45. - P.14318-14325.

74. Hamel FG, Mahoney MJ, Duckworth WC Degradation of intraendosomal insulin by insulin-degrading enzyme without acidification.//Diabetes. -1991. -Apr;40 (4). P.436-443.

75. Harada S, Smith RM, Hu DQ, Jarett L Dexamethasone inhibits insulin bindingto insulin-degrading enzyme and cytosolic insulin-binding protein p82 .//Biochem Biophys Res Commun.-1996.-Jan 5.-Y.218 (1). P. 154-158.

76. Harada S, Smith RM, Smith JA, Jarett L. Inhibition of insulin-degrading enzyme increases translocation of insulin to the nucleus in H35 rat hepatoma cells: evidence of a cytosolic pathway.//Endocrinology. 1993. -Jun;132 (6). -P.2293-2298.

77. Harada S, Smith RML Smith JA, Shall N, Jarett L. Demonstration of specific insulin binding to cytosolic proteins in H35 hepatoma cells, rat liver and skeletal muscle.//Biocliem J. 1995. - Feb 15;306 (Pt 1). - P.21-28.

78. Hari J, Shii K, Roth RA. In vivo association of 125I.-insulin with a cytosolic insulin-degrading enzyme: detection by covalent cross-linking and immunoprecipitation with a monoclonal antibody.// Endocrinology. 1987. -Feb; 120 (2). - P.829-831.

79. Hern EP, Sliroyer LA, Varandani PT. Insulin-degrading neutral cysteine proteinase activity of adipose tissue and liver of nondiabetic, streptozotocin-diabetic, and insulin-treated diabetic rats .//Arch Biochem Biophys. 1987 . -Apr. - V.254 (1).-P.35-42.

80. Herzberg V, Boughter JM, Carlisle S, Hill DE Evidence for two insulin receptor populations on human erythrocytes JINature 1980 Jul 17;2S6 (5770). P.279-281

81. Hunter W.W., Greenwood F.C. Preparation of iodin labeled growth hormone of high specific activity.//Nature, 1962 pp. 194-195.

82. Hyvarinen A., NikkilaE.A. //Clin. chim. Acta, 1962,V.7,pp.1401.nushas BS, Matuliavichus VA, Ostrauskas RV, Brazauskas AP, Vareikis EI. Blood insulinase activity in patients with diabetes mellitus.// Ter Arkli . -1987. V.59 (11). - P.12-15.169

83. Flint DJ, Gardner MJ. Effects of cell volume on insulin binding, internalizationand degradation in rat adipocytes.//Mol Cell Endocnnol.-1984.-Jul;36 (3).-P.229-236.

84. J Wilson C, Peterson SW Insulin receptor processing as a function oferythrocyte age. Akinetic model for down-regulation.//Biol Chem 1986 Feb 15;261 (5). P.2123-2128

85. Juul S.M., Jones RR.H. Insulin-degrading neutral cysteine proteinase activity ofliver of nondiabetic, streptozotocin-diabetic rats. // Biohcem. J. 1982,- Vol. 206.-P.295-299.

86. Juul S.M., Jones R.H.Evanns J. L. et al. Evidence for an early degradative eventto the insulin molecule followingbinding to hepatocyte receptors. // Biochem. Biofys. Akta.-1986.-Vol.856.-P.310-319.

87. Kaplan SA. The insulin receptor.//J Pediatr.-1984.-Mar; 104 (3).-P.327-336.

88. Kayalar C, Wong WT. Metalloendoprotease inhibitors which block the differentiation of L6 myoblasts inhibit insulin degradation by the endogenous insulin-degrading enzyme.// J Biol Chem. 1989. - May 25;264 (15). -P.8928-8934.

89. Kitabchi A.E.,Stendz F.B., Cole C., Duckworth W.C. Insulin proteinase// Diab.

90. Care. 1979. - V. 2. - P.414-417.

91. Kobayashi M, Ohgaku S, Iwasaki M, Harano Y, Maegawa H, Shigeta Y

92. Evaluation of the method of insulin binding studies in human erythrocytes//Endocrinol Jpn 1980 Jun;27 (3). P.337-342

93. Kolb HJ, Standi E. Purification to homogeneity of an insulin-degrading enzymefrom human erythrocytes. //Hoppe Seylers Z Physiol Chem. 1980. -Jul;V.361.N.7. -P.1029-1039.

94. Kuo WL, Gehm BD, Rosner MR Cloning and expression of the cDNA for a

95. Drosophila insulin-degrading enzyme.//Mol Endocrinol Mol Endocrinol 1990 Oct;4 (10): 1580-1591.

96. Kuo WL, Gehm BD, Rosner MR. Regulation of insulin degradation.-P. expression of an evolutionaiily conserved insulin-degrading enzyme increases degradation via an intracellular pathway .//Mol Endocrinol-1991 Oct;5 (10). P. 1467-1476 .

97. Kuo WL, Gehm BD, Rosner MR, Li W, Keller G Inducible expression and cellular localization of insulin-degrading enzyme in a stably transfected cell line.//J Biol Chem.-1994.-Sep 9;269 (36). P.22599-22606.

98. Kuo WL, Montag AG, Rosner MR. Insulin-degrading enzyme is differentiallyexpressed and developmentally regulated in various rat tissues. // Endocrinology. 1993,- Feb;V.132.N.2. - P.604-611.

99. Kupfer SR, Wilson EM. Androgen and glucocorticoid receptors interact with insulin degrading enzyme. 11 French FSLaboratories for Reproductive Biology, University of North Carolina. Biol Chem. 1994. - Aug 12. V.269. N.32. - P. 20622-20628.

100. Kurochkin IV, Goto S. Alzheimer's beta-amyloid peptide specifically interactswith and is degraded by insulin degrading enzyme .//FEB S Lett . 1994. -May 23. - V.345 (1). - P.33-37.171

101. Leibush BN, Lappova YL, Gutierrez J, Plisetskaya EM.Lamprey but not porcineinsulin binds with different affinity to lamprey and rat hepatocytes.// Comp Biochem Physiol С Pharmacol Toxicol Endocrinol.-1997.-Feb;116 (2) .-P. 135-139.

102. Levy JR, et al. Demonstration of insulin receptors and modulation of alkalinephosphatase activity by insulin in rat osteoblastic cells.//Endocrinology.-1986.-Oct 1; 119 (4).-P. 1786-1792.

103. Lowiy O., Hosenbrough N., Farr A., Randall R. Protein measurement with the folin phenol reagent. // J. Biol. Chem. 1951. V.193. N1. P.265-276.

104. Lucja S, Franciszek B, Tadeusz R, Mieczyslaw W, Jerzy G. Binding and degradation of 1251 insulin of erythrocyte receptors—effect of physical exertion.//Endokrynol Pol.- 1993.-V.44 (2).- P.137-145

105. Makino H, Osegawa M, Kanatsuka A, Suzuki T. Increased sensitivity of insulin-sensitive phosphodiesterase to insulin in fat cells from streptozotocin diabetic rats.//Endocrinology 1983.-Aug;113 (2). - P.646-650.

106. Matulevichus V. ,Vareikis E. , Lasas L. //Sveikatos Aspauga. -1983. -N-5. -P. 29-31.

107. Matuliavichius VA, Vareikis EI, Lashas LV Insulin-like substance and insulin-degrading complex in hemolysates of human erytlu'ocytes./ZBiokhimiia . -1986. Feb;51 (2). - P.278-284.172

108. McElduff A, Eastman CJ The effect of sulfhydryl active agents on insulinbinding to the erythrocyte insulin receptor.//J Recept Res 1981;2 (1). P. 8795

109. McElduff A, Eastman С J The erythrocyte insulin receptor.//Aust J Exp Biol Med Sci 1981 Aug;59 (4). P.439-448

110. McKenzie R.A. Burgen G.A. Partial purification and characterization of insulin protease and its intracellular inhibitor from rat liver. // Arch. Biocliern.-l 984.-Vol.228.-P.604-611.

111. Medina V, Kesner L. Purification of nonantibiotic insulinase inhibitors from bacitracin.//BiochemMed Metab Biol. 1993. - Apr;49 (2). - P.255-264.

112. Mirsky I.A., Broh-Kahn R.H. Insulin degradation //Ibid.-1949.-Vol.20.-P.l-9.

113. Mirsky I.A., Perisutti G., Diengott D. Studies on inhibitors of the insulin protease.//Proc.Soc.Exp.Biol.Med. .-1955.-V.88. P.76-78 .

114. Misbin RI, Almira EC, Cleman MW. Insulin degradation in serum of a patient with apparent insulin resistance.//! Clin Endocrinol Metab. 1981. - Feb. -V.52 (2). - P.177-180.

115. Misbin RI, Almira EC Degradation of insulin and insulin-like growth factors by enzyme purified from human erythrocytes. Comparison of degradation products observed with A14- and B26- 125I.monoiodoinsulin.//Diabetes. -1989.-Feb;38 (2). P.152-158.

116. Misbin RI, Almira EC, Duckworth WC. Inhibition of insulin degradation by insulin-like growth factors.// Endocrinology. 1983. - Oct;113 (4). - P.1525-1527.

117. Muir A, Offord RE, Davies JG. The identification of a major product of the degradation of insulin by 'insulin proteinase' (EC 3.4.22.11).// Biochem J. -1986. Aug 1;237 (3). - P.631-637.

118. Neal GW, Kitabchi AE. Insulin degradation by human skeletal muscleV/Biochim Biophys Acta.-1982.-Nov 24;719 (2).-P.259-266.

119. Nerurkar.S.G.,Gambhir K.K. Insulin-degrading neutral cysteine proteinase.// Clin Chem. . 1981. - vol. 27,N 3,P. 607-608.

120. Ng FM, Zhu SQ, Cui DF, Fan L, Huang YD, Zhang YS. Structure and activity of the B-chain of insulin. //Biochem Int.- 1989 Feb;18 (2) .-P. 373-381

121. Nikolaeva Mia, Parkliimovicli RM, Zaraiskii AV Alloxan cytotoxicity.-P. a new aspect of the problem.//Probl Endokrinol (Mosk) .-1986.-May;32 (3). -P.75-80.

122. Novelli EL, Rodrigues NL, Ribas Ozonas В Nickel chloride and alloxan. I. Determination of glucose, insulin and superoxide dismutase in blood and pancreas of rats.//Acta Physiol Pharmacol Latinoam.-1987;37 (3). P.377-393.

123. Oakley B.R, Kirch D.R., Morris N.R. // Anal.bioch. 1980, 105,p.361-366

124. Ohgaku S, Kobayashi M, Iwasaki M, Maegawa H, Shigeta Y Effect of age and sex on insulin binding to human erythrocytes.//Endocrinol Jpn 1981 Oct;28 (5). P.623-630

125. Ogawa W, Shii K, Yonezawa K, Baba S, Yokono K. Affinity purification of insulin-degrading enzyme and its endogenous inhibitor from rat liver. //J Biol Chem. 1992. - Jan 15;V.267. N.2. - P.1310-1316.174

126. Okamoto M, Kuzuya H, Seino Y, Ikeda M, Imura H Insulin binding toerythrocytes in diabetic patients .//Endocrinol Jpn 1981 Apr;28 (2). P. 169173

127. Okamoto M., Kuzuya H., Seino Y., Ikea M . Imura H. Insulin binding of erythrocytes in hypoinsulinemic diabetics and itsrelationship to metabolic states.//Endocrinol Jpn 1981 Oct;28 (5):615-622

128. Okamoto M, Kuzuya H, Kuo P, Imura H Insulin receptors on erythrocytes and hepatocytes from streptozotocin induced diabetic rats.//Endocrinol Jpn 1982 Oct;29 (5):623-630

129. Perlman RK, Gelim BD, Kuo WL, Rosner MR Functional analysis ofconserved residues in the active site of insulin-degrading enzyme.//J Biol Chem Mol Endocrinol 1990 Oct;4 (10):1580-1591

130. Perlman RK, Rosner MR Identification of zinc ligands of the insulin-degrading enzyme.//J Biol Chem.-1994.-Dec 30.-V.269 (52). P.33140-33145.

131. Pilistine S.J.,Varandani P.T. Degradation of porcine relaxin by glutathione-insulin transhydrogenase and a neutral peptidase.//Molec.cell.endocr.-1986.-Vol.46.-P.43-52.

132. Posner BI, Kahn MN, Bergeron JJ Internalization of insulin.-P. structures involved and significance.//AdvExp MedBiol. -1985. -V.189. P.159-173.

133. Potemkin V. Endokrinology. 1989. - Стр.96-97.

134. Rawlings ND, Barrett AJ Homologues of insulinase, a new superfamily of metalloendopeptidases.//Biochem J.-1991.-Apr 15.-V.275 (Pt 2). P.389-391.175

135. Reiser M, Bernstein HG, Ansorge S, Dorn A Proteolytic degradation of insulinand glucagon in rat brain during ontogenesis.//Acta Histochem.- 1987;82 (1).-P.35-39.

136. Robinson TJ, Archer JA, Gambhir KK, Hollis VW Jr, Carter L, Bradley С Erythrocytes.-P. a new cell type for the evaluation of insulin receptor defects in diabetic humans.//Science 1979 Jul 13;205 (4402). P.200-202

137. Rose K, Savoy LA, Muir AV, Davies JG, Offord RE, Turcatti G. Insulin proteinase liberates from glucagon a fragment known to have enhanced activity against Ca2+ + Mg2+-dependent ATPase.// Biochem J 1988 Dec 15;256 (3). -P.847-851.

138. Roth RA, Mesirow ML, Yokono K, Baba S.Degradation of insulin-like growth factors I and II by a human insulin degrading enzyme.//Endocr Res . 1984. -V.10 (2). - P.101-112.

139. Ryan MP, Duckworth WC. Partial characterization of an endogenous inhibitor of a calcium-dependent form of insulin protease.// Biochem Biophys Res Commun. 1983. - Oct 14;116 (1). - P. 195-203.

140. Ryan MP, Peavy DE, Frank BH, Duckworth WC. The degradation of monoiodotyrosyl insulin isomers by insulin protease.//Endocrinology.-1984.-Aug; 115 (2).-P.591-599.

141. Safavi A, Miller ВС, Cottam L, Hersh LB Identification of gamma-endoфhin-generating enzyme as insulin-degrading enzyme.//Biochemistry.-1996.-Nov 12;35 (45). P.14318-14325.

142. Savoy LA, Muir AV, Davies JG, Offord RE. Insulin proteinase. //J Biol Chem. 1993,- Oct 15;V.268.N.29. - P.21538-21544.176

143. Seabright PJ, Smith GD The characterisation of insulin degradation products in endosomes.//Biochem Soc Trans.-1995.-Feb;23 (1).-P.1S.

144. Seta KA, Roth RA Overexpression of insulin degrading enzyme: cellular localization and effects on insulin signaling. //Biochem Biophys Res Commun. 1997,- Feb 3; V.231.N.1. - P.167-171.

145. Shearer JD, Coulter CF, Engeland WC, Roth RA, Caldwell MD. Insulm is degraded extracellularly in wounds by insulin-degrading enzyme (EC34.24.56).//Am J Physiol.-1997.-Oct;273 (4 Pt 1) P.E657-E664

146. Shii К Production of monoclonal antibodies to an insulin degrading enzyme and affinity purification of the enzyme.//Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi. -1987. Jim 20;63 (6). - P.782-797.

147. Shii K., Baba S.,Yokono K.et al. Covalent linkage of 1251-insulin to a cytosolic insulin-degrading enzyme.// J.Biol.Chem.-1985.-Vol.260.-P.6503-6506.

148. Shii К, Roth RA. Inhibition of insulin degradation by hepatoma cells after microinjection of monoclonal antibodies to a specific cytosolic protease.//Proc Natl Acad Sci USA.- 1986. Jun;83 (12). - P.4147-4151.

149. Shii K, Yokono K, Baba S, Roth RA. Purification and characterization of insulin-degrading enzyme from human erythrocytes.//Diabetes. 1986. -Jun;V.35.N.6. - P.675-683.

150. Snehalatha C, Timothy H, Mohan V, Ramachandran A, Viswanathan M. Immunoreactive insulin and insulin degrading enzymes in erythrocytes. A preliminary report.// J Assoc Physicians India. 1990. - Aug;38 (8). -P.558-561.

151. Sodoyez JC, Sodoyez-GofTaux F, Goff MM, Zimmerman AE, Arquilla ER 127-1.- or carrier-free 123I-monoiodoinsulin. //J Biol Chem 1975. Jun 10 V.250N.11. . - P:4268-4277.

152. Sologub LI, Paskovskaia IS, Sukhorskaia IE The breakdown of insulin by the enzymes of animal and human cells.//Probl Endokrinol (Mosk) .-1990.-Mar;36 (2). P.90-95.

153. Soman VR, DeFronzo RA Direct evidence for downregulation of insulin receptors by physiologic hyperinsulinemia in man.//Diabetes 1980 Feb;29 (2). P. 159-163

154. Sonne O. Increased inhibitory potency of free fatty acid-poor albumin on the released and activity of insulin-degrading enzymes from isolated rat adipocytes and hepatocytes.//Anal Biochem. 1985. - Nov 15;151 (1). -P.109-117

155. Standi E, Kolb HJ. Insulin degrading enzyme activity and insulin binding of erythrocytes in normal subjects and Type 2 (non-insulin-dependent) diabetic patients.//Diabetologia. 1984. - Jul;27 (1). - P.17-22.

156. Stoppelli MP, Garcia JV, Decker SJ, Rosner MR .Developmental regulation of an insulin-degrading enzyme from Drosophila melanogaster.// Proc Natl Acad Sci USA.- 1988. May;85 (10) . -P.3469-3473.

157. Striffler JS Insulin clearance and microsomal glutathione-insulin transhydrogenase in perfused livers of fed and fasted rats.// Diabete Metab.-1987.-Nov;13 (6). P.582-590.

158. Takeuchi F, Seta KA, Omura S, Roth RA. Insulin degradation by Madin-Darby canine kidney cells expressing the insulin receptor.//Diabetes Res Clin Pract.- 1997.-Aug;37 (2) .- P.81-90.

159. Taylor SI, Accili D, Haft CR, Hone J, Imai Y, Levy-Toledano R, Quon MJ, Suzuki Y, Wertheimer E Mechanisms of hormone resistance: lessons from insulin-resistant patients.//Acta Paediatr Suppl. 1994. - Apr. V.399. - P. 95104.

160. Thomas JH, Clark NV, Davey PG, Huddy CL, James J The effect of streptozotocin diabetes on insulin binding by isolated rat kidneytubules.//Biochim Biophys Acta . 1985. - Feb 21;844 (2):240-246.

161. Thomas JH, Varandani PT. Insulin degradation. XXV. Glutathione-insulin transhydrogenase activity of rat liver and kidney during the development of streptozotocin-diabetes.//Biochim Biophys Acta. 1979. - Mar 16. - V.567 (1). -P.88-95.

162. Tikhonova NE, Kuchuk EM. The effect of altitude on insulin binding by erythrocytes in experimental alloxan diabetes.//Vopr Med Kliim. 1988 . -May. - V.34 (3).-P.67-71.

163. Varandani PT, Organisciak DT, Nafz MA. The occurrence of glutathione-insulin transhydrogenase in the retina. // Invest Ophthalmol Vis Sci. 1982. -Jun;V.22.N.6. -P.715-719.

164. Varandani PT, Shroyer LA Identification of an insulin fragment produced by an insulin degrading enzyme,neutral thiopeptidase.//Mol Cell Endocrinol.-1987.-Apr;50 (3).-P.171-175.

165. Varley JM, Davies JG, Shire D, Offord RE. Engineered rat insulin I analogue having a B16 Туг/Asp replacement exhibits unchanged susceptibility to cleavage by insulin proteinase.// Eur J Biochem.-1988.-Jan 15;171 (1-2). -P.351-354.

166. Veena R Agarwal, Rastogi A.K. Insulin binding parameters in erythrocytes of alloxan induced diabetic rats. // Indian Jornal of Experimental Biology Vol. 25,May 1987,pp. 343-344 ,

167. Ward GM, Harrison LC Structure of the human erythrocyte insulin receptor.//Diabetes 1986 Jan;35 (1). P.101-105

168. Werlen RC, Offord RE, Rose К Preparation and characterization of novel substrates of insulin proteinase (EC 3.4.99.45).//Biochem J.-1994.-Sep 15;302 (Pt 3). P.907-911.

169. Whittaker J, Hammond VA. Taylor R, Alberti KG Effects of monensin on insulin interactions with isolated hepatocytes. Evidence for inhibition of receptor recycling and insulin degradation.//Biochem J. -1986. Mar 1;234 (2) . - P.463-468.

170. Williams FG, Johnson DE, Bauer GE. 125I.-vivo: evidence that a neutral thiol-protease mediates rapid intracellular insulin degradation.//Metabolism. -1990. Mar;39 (3). - P.231-241.

171. Yonezawa K., Nippon Naibunpi, Gakkai Zasslii. Biochemical characteristics of an initial degradation product of insulin by insulin-degrading enzyme// Mol Endocrinol. 1988. - Nov 20;64 (11) . - P.l 140-1156.

172. Yonezawa K, Yokono K, Shii K, Hari J, Yaso S, Amano K, Sakamoto T, Kawase Y, Akiyama H, Nagata M, et al. Insulin-degrading enzyme is capable of degrading receptor-bound insulin.// Biochem Biophys Res Comun. 1988. -Jan 29;150 (2). - P.605-614.

173. Yonezawa K, Yokono K, Yaso S, Hari J, Amano K, Kawase Y, Sakamoto T, Shii K, Imamura Y, Baba S Degradation of insulin by insulin-degrading