Использование аденовирусного вектора для доставки и регулируемой экспрессии гена интерлейкина-10 in vivo тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Мягков, Алексей Витальевич

• Мягков, Алексей Витальевич
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мягков, Алексей Витальевич

Содержание

Содержание ____________________ -2

Список использованных сокращений__5

Введение_________________

Обзор литературы _______9

Основные мишени генной терапии аутоиммунных заболеваний.__9

Экспрессия противовоспалительных цитокинов___9

Блокирование лиганд-рецепторных взаимодействий__10

Блокирование межклеточных взаимодействий_12

Подавление активации факторов транскрипции__14

Элиминация патогенных клеток______

Восстановление поврежденной ткани_17

Методы доставки генетического материала__18

Использование чистой ДНК__18

Комплексы ДНК с полимерами__18

Вирусные системы доставки ___20

Ретровируеы ___________

Аденовирусы____23

Аденоассоциированные вирусы (ААВ)___

Сравнительная характеристика экспериментальных моделей ревматоидного

артрита ______________25

Адъювант-индуцированный артрит____26

Коппаген-индуцированный артрит_

Протеогликан-ивдуцированный артрит__28

Материалы и методы_30

Аденовирусные векторы_30

Модель ревматоидного артрита_31

Получение первичных синовиоцитов__31

Измерение активности люциферазы_32

Определение активности промотора СЗ-компонента комплемента в первичных синовиоцитах in vitro, под действием LPS и про-воспалнтельных иитокинов__33

Анализ экспрессии гена интерлейкина-10 первичными синовиоцитамн, инфицированными аденовирусным вектором AdC3/IL-W_34

Определение биологической активности интерлейкина-10 по его влиянию на ДНК связывающую и транскрипционную активность NF-kB_35

Анализ активности промотора СЗ-компонента комплемента in vivo_38

Инъекция аденовирусных векторов, содержащих ген интерлейкина-10_39

Сбор внутрисуставной жидкости_40

Определение содержания IL-10 во внутрисуставной жидкости_40

Измерение диаметра суставов_

Подсчёт числа клеток во внутрисуставной жидкости_41

Определение концентрации интерлейкина-6 и интерлейкина-1 во

внутрисуставной жидкости__41

Результаты_42

Активность промотора СЗ-компонента комплемента в первичных крысиных синовиоцитах регулируется липополисахаридом и про-воспалительными цитокинами_42

Активность промотора СЗ-компонента комплемента in vivo в суставах

животных после индукции экспериментального артрита_48

Регулируемая экспрессия гена интерлейкина-10, доставленного аденовирусным вектором AdC3/IL-10 in vivo._49

Терапевтический эффект экспрессии гена IL-10, доставленного в составе аденовирусного вектора AdC3/IL-10 в модели экспериментального артрита

Обсуждение полученных. результатов ______i_ ^

Выводы_75

Список литературы__77

Список использованных сокращений

ААВ аденоассоциированные вирусы

ПААГ полиакриламидный гель

РА ревматоидный артрит

PC рассеянный склероз

СКВ системная красная волчанка

ФСБ фосфатно-солевой буфер

Ad адено

CMV цитомегаловирус

IL-ip итерлейкин-1 бета

IL-6 ингерлейкин-б

IL-10 интерлейкин-10

LPS липополисахарид

Pro промотор

TNFa фактор некроза опухоли альфа

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование аденовирусного вектора для доставки и регулируемой экспрессии гена интерлейкина-10 in vivo»

Введение

Современной медицине известно более 80 аутоиммунных заболеваний, различающихся по своим клиническим проявлениям. Их общим свойством является наличие иммунного ответа против собственных антигенов, что приводит к развитию воспалительной реакции и разрушению тканей. В связи с этим, ингабирование иммунного ответа и регенерация повреждённых тканей служат основными стратегиями лечения аутоиммунных заболеваний.

В настоящее время известно много естественных белковых иммунорегуляторов которые способны специфически подавлять развитие иммунного ответа [Sozzani, S. et al. 1998; Geissler, К. 1996;]. Рекомбинантные формы природных иммуномодуляторов уже применяют в клинической практике, однако их использование ограничено нестабильностью и иммуногенностью подобных соединений [Asnis, L.A. an dm Gaspari, A.A. 1995;]. Кроме того их биологическая активность намного ниже по сравнению с природными молекулами. Также немаловажным фактором является высокая себестоимость таких терапевтических препаратов.

Генная терапия является новым перспективным методом лечения многих заболеваний включая аутоиммунные [Anderson. W.F. 1998; Chen, Y. 1998; Mathisen, P.M. and Tuohy, V.K. 1998;]. В основе данного метода лежит идея доставки «терапевтических» генов in vivo, что служит альтернативой использованию рекомбинантных белков. Для доставки «терапевтических генов

в клетки организма используют разные способы среди которых широкое распространение получила доставка генетического материала с помощью вирусных векторов [Anderson, W.F. 1998;], которые являются наиболее эффективными векторами, известными в настоящее время.

Одной из основных проблем генной терапии является создание векторов, позволяющих регулировать экспрессию доставленных in vivo терапевтических трансгенов. Известно, что аутоиммунные заболевания характеризуются наличием фаз острого воспаления, чередующихся с периодами относительной ремиссии. Постоянно высокая продукция терапевтических белков в организме может приводить к нарушению функциональной активности иммунной системы, делающему неприемлемым данный способ лечения.

Одним из способов регуляции экспрессии введённых терапевтических агентов является использование векторов, несущих в своём составе трансген под контролем промоторов, чувствительных к антибиотикам (тетрациклин, рапамицин) [Allgood, V.E. and Eastman, Е.М. 1997; Miller, N. and Whelan, J. 1997;]. В этом случае экспрессия терапевтического гена в организме полностью зависит or введения данных антибиотиков.

Альтернативным подходом является создание векторов, в которых экспрессия терапевтических генов находится под контролем промоторов, активирующихся при развитии воспалительной реакции в организме. В ар лей (Valley) и соавторами был сконструирован аденовирусный вектор, несущий промотор СЗ-компонента комплемента [Valley, A.W. et al. 1997;,]. Данный

промотор содержит участки связывания для факторов транскрипции активирующихся под действием про-воспалительных цитокинов (IL-ip, IL-6) [Kawamura. N. et al. 1992;], и таким образом потенциально возможно, что экспрессия генов, находящихся под контролем промотора СЗ-компонента комплемента, может регулироваться под действием про-воспалительных цитокинов. Полученные результаты указывают на возможность автономной регуляции экспрессии терапевтических генов, доставленных гп vivo в составе такого вектора [Miagkov, A.V. et al. 1998;].

Целью данной работы являлось изучение биологической активности аденовирусного вектора, несущего терапевтический ген под контролем промотора СЗ-компонента комплемента.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Мягков, Алексей Витальевич, 1998 год

Список литературы

1. Adcock, I. M. 1997. //Transcription factors as activators of gene transcription: AP-1 and NF- kappa B. /Monaldi. Arch. ChestDis. 52:pp.l78-186.

2. Adorini, L., J. C. Guery, and S. Trembleau. 1996. //Manipulation of the Thl/Th2 cell balance: an approach to treat human autoimmune diseases? / Autoimmunity. 23:pp.53-68.

3. Allen, T. M., C. Hansen, F. Martin, C. Redemann, and A. Yau-Young. 1991. //Liposomes containing synthetic lipid derivatives of poly(ethylene glycol) show-prolonged circulation half-lives in vivo. / Biochim. Biophys. Acta 1066:pp.29-36.

4. Allgood, V. E. and E. M. Eastman. 1997. /./Chimeric receptors as gene switches. / Citrr. Opin. Biotechnol. 8:pp.474-479.

5. Ally, B. A., T. S. Hawley, K. J. McKall-Faienza. T. M. Kundig, S. U. Oehen, H. Pircher, R. G. Hawley, and P. S. Ohashi. 1995. //Prevention of autoimmune disease by retroviral-mediated gene therapy. ¡J. Immunol. 155:pp.5404-5408.

6. .Anderson. W. F. 1998. //Human gene therapy. / Nature 392:pp.25-30.

7. Apparailfy, F., C. Verwaerde, C. Jacquet, C. Auriault, J. Sany, and C, Jorgensen. 1998. //Adenovirus-Mediated Transfer of Viral IL-10 Gene Inhibits Murine Collagen-Induced Arthritis. / J. Immunol. 16Q:pp.5213-5220.

8. Arend, W. P. and J. M. Dayer. 1995. ..'/Inhibition of the production and effects of interleukin-1 and tumor necrosis factor alpha in rheumatoid arthritis. / Arthritis Rheum. 38:pp. 151-160.

9. Arima, T., A. Rehman, W. F. Hickey, and M. W. Flye. 1996. . /Inhibition by CTLA4Ig of experimental allergic encephalomyelitis. I J. Immunol. 156:pp.4916-4924.

10. Asahara, H., K. Fujisawa, T. Kobata, T. Hasunuma, T. Maeda, M. Asanuma, N. Ogawa, I I. Inoue, T. Sumida. and K. Nishioka. 1997. /'/Direct evidence of high DNA binding activity of transcription factor AP- 1 in rheumatoid arthritis synovium. / Arthritis Rheum. 40:pp.912-918.

11. Asms, L. A. and A. A. Gaspari. 1995. /./Cutaneous reactions to recombinant cytokine therapy. / J. Am. Acad. Dermatol 33:pp.393-410; quiz 410-2.

12. Bakker, A. C., L. A. Joosten, O. J. Arntz, M. M. Helsen, A. M. Bendele, F. A. van de Loo, and W. B. van den Berg. 1997. //Prevention of murine collagen-induced arthritis in the knee and ipsilateral paw by local expression of human

interleukin-1 receptor antagonist protein in the knee. / Arthritis Rheum. 40:pp.893-900.

13. Baldwin, A. S., Jr. 1990. '/Analysis of Sequence-Specific DNA-Binding Proteins by the Gel Mobility Shift Assay. / DNA and Protein Engineering Techniques. G. T. Merlino, editor, pp.73-88.

14. Baldwin, A. S., Jr. 1996. //The NF-kappa B and I kappa B proteins; new discoveries and insights. ! Annu. Rev. Immunol 14:649-83:pp.649-683.

15. Banchereau, J., F. Bazan, D. Blanchard, F. Briere, J. P. Galizzi, C. van Kooten, Y. J. Liu, F. Rousset, and S. Saeland. 1994. //The CI)40 antigen and its ligand. ¡Annu. Rev. Immunol 12:881-922:pp.881-922.

16. Barnes, P. J. 1997. / Nuclear factor-kappa B. / Int. J. Biochem. Cell Biol. 29:pp. 867-870.

17. Barnes, P. J. and I. M. Adcock. 1997. //NF-kappa B: a pivotal role in asthma and a new target for therapy. / Trends. Pharmacol. Sci. 18:pp.46-50.

18. Barnes, P. J. and M. Karin. 1997. //Nuclear factor-kappaB: a pivotal transcription factor in chronic inflammatory diseases. ! K Engl J. Med. 336 :pp. 10661071.

19. Bessis, N., G. Chioccliia, G. Kollias, A. Minty, C. Foumier, D. Fradelizi, and M. C. Boissier. 1998. //Modulation of proinflammatory cytokine production in tumour necrosis factor-alpha (TNF-alpha)-transgenic mice by treatment with cells engineered to secrete IL-4, IL-10 or IL-13. / Clin. Exp. Immunol. lll:pp.391-396.

20. Billingham, M. E. J. 1995. //Adjuvant arthritis: the first model. / Mechanism and models in rheumatoid arthritis. B. Henderson. J. C. W. Edwards, and E. R. Pettipher, editors. Academic Press, London, San Diego, New York, Boston, Sydney, Tokyo, Toronto, pp.389-410.

21. Blackham, A., J. W. Burns, J. B. Farmer, H. Radziwonik, and J. Westwick. 1977. //An X-rav analysis of adjuvant arthritis in the rat. The effect of prednisolone and indomethacin. i Agents Actions 7:pp.145-151.

22. Bradford, M. M. 1976. /'Rapid and sensitive method for the quantitation of microgram, quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding, i Anal. Biochem. 72:pp.248-254.

23. Cassatella, M. A., L. Meda, S. Bonora, M. Ceska, and G. Constantin. 1993. /'Interleukin 10 (IL-10) inhibits the release of proinflammatory cytokines from human polymorphonuclear leukocytes. Evidence for an autocrine role of tumor necrosis factor and IL-1 beta in mediating the production of IL-8 triggered by lipopolysaccharide. i J. Exp. Med. 178:pp.2207-2211.

24. Chen, H. H., L. M. Mack, R. Kelly, M. Ontell, S. Kochanek, and P. R. Clemens. 1997. //Persistence in muscle of an adenoviral vector that lacks all viral genes. iProc. Natl. Acad. Set U. S. A. 94:pp. 1645-1650.

25. Chen, L. Z., G. M. Hochwald, C. Huang, G. Dakin, H. Tao, C. Cheng, W. J. Simmons, G. Dranoff, and G. J. Thorbecke. 1998. //Gene therapy in allergic encephalomyelitis using myelin basic protein- specific T cells engineered to express latent transforming growth factor-beta 1. / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 95:pp.l2516-12521.

26. Chen, Y. 1998. //Autoimmunity, immunologic tolerance, and gene therapy. i Immunol. Res. 17:pp.33-40.

27. Chemajovsky, Y., G. Adams, K. Triantaphyllopoulos, M. F. Ledda, and O. L. Podhajcer. 1997. //Pathogenic lymphoid cells engineered to express TGF beta 1 ameliorate disease in a collagen-induced arthritis model. / Gene Ther. 4:pp.553-559.

28. Chemajovsky, Y., A. Atmenkov, C. Herman, K. Triantaphyllopoulos, D. Gould, H. Dreja, S. P. Moyes, J. L. Croxford, R. A. Mageed, O. L. Podhajcer, and D. Baker. 1998. //Gene therapy for rheumatoid arthritis. Theoretical considerations. /

Drugs Aging 12 :pp. 29-41.

29. Conrad, C. K., S. S. Allen, S. A. Afione, T. C. Reynolds, S. E. Beck, M. Fee-Maki, X. Barrazza-Ortiz, R. Adams, F. B. Askin, B. J. Carter, W. B. Guggino,

and T. R. Flotte. 1996. //Safety of single-dose administration of an adeno-associated virus (AAV)- CFTR vector in the primate lung. / Gene Ther. 3:pp.658-668.

30. Croxford, J. I... K. Triantaphyllopoulos, O. L. Podhajcer, M. Feldmann, D. Baker, and Y. Chemajovsky. 1998. //Cytokine gene therapy in experimental allergic encephalomyelitis by injection of plasmid DNA-cationic liposome complex into the central nervous system. I J, Immunol 160:pp.5181-5187.

31. Daikh, D. I., B. K. Finck, P. S. Linsley, D. Hollenbaugh, and D. Wofsy. 1997. / Long-term inhibition of murine lupus by brief simultaneous blockade of the

B7/CD28 and CD40/gp39 costimulation pathways. I J. Immunol. 159:pp.3104-3108.

32. Davis, S. S. 1997. //Biomedical applications of nanotechnology--implications for drag targeting and gene therapy. / Trends. Biotechnol. 15:pp.217-224.

33. de Vries, J. E. 1995. '/Immunosuppressive and anti-inflammatory properties of interleukin 10. / Ann. Med. 27:pp.537-541.

34. Dokter, W. H. A., S. B. Koopmans, and E. Vellenga. 1996. //Effects of IL-10 and IL-4 on LPS-induced transcription factors (AP-1, NF-BL6 and NF-kappa B) which are involved in IL-6 regulation. / Leukemia 10:pp.1308-1316.

35. Doughty, L, A., K. D. Patrene, C. H. Evans, S. S. Boggs, and P. D. Robbins. 1997. /Constitutive systemic expression of IL-IRa or soluble TNF receptor

by genetically modified hematopoietic cells suppresses LPS induction of IL- 6 and IL-10. / Gene Ther. 4:pp.252-257.

36. Durie, F. II., R. A. Fava, T. M. Foy, A. Aruffo, J. A. Ledbetter, and R. J. Noelle. 1993. //Prevention of collagen-induced arthritis with an antibody to gp39, the ligand for CD40. / Science 26l:pp. 1328-1330.

37. Dusetti, N. J., E. M. Ortiz, G. V. Mallo, J. C. Dagom, and J. L. lovanna. 1995. //Pancreatitis-associated protein I (PAP I), an acute phase protein induced by cytokines. Identification of two functional interleukin-6 response elements in the rat PAP I promoter region. ¡J. Biol. Chem. 270:pp.22417-22421.

38. Dusetti, N. J., S. Vasseur, E. M. Ortiz, H. Romeo, J. C. Dagom, O. Burr one, and J. L. lovanna. 1997. //The pancreatitis-associated protein I promoter allows targeting to the pancreas of a foreign gene, whose expression is up-regulated during pancreatic inflammation. / J. Biol. Chem. 272:pp. 5800-5804.

39. Erlandsson Harris, II., M. Liljestrom, and L. Klareskog. 1997. /'Characteristics of synovial fluid effusion in collagen-induced arthritis (CIA) in the DA rat; a comparison of histology and antibody reactivities in an experimental chronic

arthritis model and rheumatoid arthritis (RA). / Clin. Exp. Immunol. 107:pp.480-484.

40. Esser, R. E,, S. A. Stimpson, W. J. Cromartie, and J. H. Schwab. 1985. //Reactivation of streptococcal cell wall-induced arthritis by homologous and heterologous cell wall polymers. / Arthritis Rheum. 28 :pp. 1402-1411.

41. Evans, C. H., P. D. Robbins, S. C. Ghivizzani, J. II. Herndon, R. Kang, A. B. Bahnson, J. A. Barranger, E. M. Elders, S. Gay, M. M. Tomaino, M. C. Wasko, S. C. Watkins, T. L. Whiteside, J. C. Glotioso, M. T. Lotze, and T. M. Wright. 1996. //Clinical trial to assess the safety, feasibility, and efficacy of transferring a potentially anti-arthritic cytokine gene to human joints with rheumatoid arthritis. / Hum. Gene Ther. 7:pp. 1261-1280.

42. Evans, C. H., J. D. Whalen, S. C. Ghivizzani, and P. D. Robbins. 1998. //Gene therapy in autoimmune diseases. I Ann. Rheum. Dis. 57:pp. 125-127.

43. Evans, C. H. and P. D. Robbins. 1994. //The interleukin-1 receptor antagonist and its delivery by gene transfer. / Receptor. 4:pp.9-15.

44. Evans, C. H. and P. D. Robbins. 1995. '/ Arthritis. / Mol Cell Biol. Hum. Dis. Ser. 5:252-60:pp.252-260.

45. Evans, C. H. and P. D. Robbins. 1996. //Pathways to gene therapy in rheumatoid arthritis. / Curr. Opin. Rheumatol. 8:pp.230-234.

46. Feldmann, M., F. M. Brennan, and R. N. Maini. 1996. //Role of cytokines in rheumatoid arthritis.! Annu. Rev. Immunol. 14:397-440:pp.397-440.

47. Fiorentino, D. F., M. W. Bond, and T. R. Mosmann. 1989. //Two types of mouse T helper cell. IV. Th2 clones secrete a factor that inhibits cytokine production by Thl clones. ¡J. Exp. Med. l70:pp.2081-2095.

48. Foster, C. A. 1996. //VC AM-1/alpha 4-integrin adhesion pathway: therapeutic target for allergic inflammatory disorders. / J. Allergy Clin. Immunol. 98:pp.S270-7.

49. French, M. B., J. Allison, D. S. Cram, H. E. Thomas, M. Dempsey-Collier, A. Silva, H. M. Georgiou, T. W. Kay, L. C. Harrison, and A. M. Lew. 1997. / Transgenic expression of mouse proinsulin II prevents diabetes in nonobese diabetic mice. / Diabetes 46:pp.34-39.

50. Fuseler, J. W., E. M. Cornier, J. M. Davis, R. E. Wolf, and M. B. Grisham. 1997. / Cytokine and nitric oxide production in the acute phase of bacterial cell wall-induced arthritis, i Inflammation 21 :pp.l 13-131.

51. Geissler, K. 1996. / 'Current: status of clinical development of interleukin-

10. / Curr. Opin. Hematol. 3:pp.203-208.

52. Ghivizzani, S. C., E. R. Lechman, C. Tio, K. M. Mule, S. Chada, J. E. MeCormaek, C, I I. Evans, and P. D. Robbins. 1997. //Direct retrovirus-mediated gene transfer to the synovium of the rabbit knee: implications for arthritis gene therapy. / Gene Ther. 4:pp.977-982.

53. Ghivizzani, S. C., E. R. Lechman, R. Kang, C. Tio, J. Kolls, C. H. Evans, and P. D. Robbins. 1998. '/Direct adenovirus-mediated gene transfer of interleukin 1 and tumor necrosis factor alpha soluble receptors to rabbit knees with experimental arthritis has local and distal anti-arthritic effects. / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 95:pp.4613-4618.

54. Greenfield, E. A., K. A. Nguyen, and V. K. Kuchroo. 1998. //CD28/B7 costimulation: a review. / Crit. Rev. Immunol. 18:pp.389-418.

55. Gutierrez-Ramos, J. C., J. L. Andrew, Y. Revilla, E. Vinuela, and C. Martinez. 1990. //"Recovery from autoimmunity of MRL/lpr mice after infection with an interleukin-2/vaccinia recombinant virus. / Nature 346:pp.271-274.

56. Handel, M. L., L. B. McMorrow, and E. M. Gravallese. 1995. /Nuclear factor-kappa B in rheumatoid synovium. Localization of p50 and p65. / Arthritis Rheum. 38:pp.l 762-1770.

57. Herold, K. C., V. Vezvs, A. Koons, D. Lenschow, C. Thompson, and J. A. Bluestone. 1997. //CD28/B7 costimulation regulates autoimmune diabetes induced with multiple low doses of streptozotocin. I J. Immunol. 158:pp.984-991.

58. Ilorellou, P. and J. Mallet. 1997. //Gene therapy for Parkinson's disease. /

Mol Neurobiol. 15:pp.241-256.

59. Hudson, L. and F. C. Hay. 1989. / Practical Immunology. / Blackwell Scientific Publications, Oxford.

60. Ilan, Y., G. Droguett, N. R. Chowdhury, Y. Li, K. Sengupta, N. R. Thummala, A. Davidson, J. R. Chowdhuiy, and M. S. Horwitz. 1997. //Insertion of the adenoviral E3 region into a recombinant viral vector prevents antiviral humoral and cellular immune responses and permits long-term gene expression. / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 94:pp.2587-2592.

61. Isomaki, P. and J. Punnonen. 1997. //Pro- and anti-inflammatory cytokines in rheumatoid arthritis, i Ann. Med. 29:pp.499-507.

62. Iwahashi, H., N. Itch, K. Yamagata, A. Itnagawa, H. Nakajima, K. Tomita, M. Moriwaki, M. Waguri, K. Yamamoto, J. Miyagawa, M. Namba, T. Hanafusa, and Y. Matsuzawa. 1998. / Molecular mechanisms of pancreatic beta-cell, destruction in autoimmune diabetes: potential targets for preventive therapy. / Cytokines. Cell Mol. Ther. 4:pp.45-51.

63. Johnson, R. J., H. lida, С. E. Alpers, M. W. Majesky, S. M. Schwartz, P. Pritzi, K. Gordon, and A. M. Gown. 1991. //Expression of smooth muscle cell phenotype by rat mesangial cells in immune complex nephritis. Alpha-smooth muscle actin is a marker of mesangial cell proliferation. / J. Clin. Invest. 87:pp.847-858.

64. Jooss, K., L. A. Turka, and J. M. Wilson. 1998. //Blunting of immune responses to adenoviral vectors in mouse liver and lung with CTLA4Ig. i Gene Ther. 5:pp.309-319.

65. Juan, T. S., D. R. Wilson, M. D. Wilde, and G. J. Darlington. 1993. //Participation of the transcription factor С ЕВР delta in the acute- phase regulation of the human gene for complement component C3. / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 90 :pp.2584-2588.

66. Kafri, Т., U. Blomer, D. A. Peterson, F. H. Gage, and I. M. Verma. 1997. //Sustained expression of genes delivered directly into liver and muscle by lentiviral vectors. I Nat. Genet. 17:pp.314-317.

67. Kalden, J. R. and B. Manger. 1998. //Biologic agents in the treatment of inflammatory rheumatic diseases. / Curr. Opin. Rheumatol. 10:pp. 174-178.

68. Kasama, T., R. M. Strieter, N. W. Lukacs, M. D. Burdick, and S. L. Kunkel. 1994. /Regulation of neutrophil-derived ohemokine expression by IL-10. / J. Immunol. 152:pp.3559-3569.

69. Kawamura, N., L. Singer, R. A. Wetsel, and H. R. Colten. 1992. //Cis-and trans-acting elements required for constitutive and cytokine- regulated expression of the mouse complement C3 gene. / Biochem. J. 283:pp.705-712.

70. Kitamura, M. and I I. Kavvachi. 1997. '/Creation of an In vivo cytosensor using engineered mesangial cells. Automatic sensing of glomerular inflammation controls transgene activity. I J. Clin. Invest. 100:pp.1394-1399.

71. Koj, A. 1996. -Initiation of acute phase response and synthesis of cytokines. / Biochim. Biophys. Acta 1317:pp.84-94.

72. Kramer, R., Y. Zhang, J. Gehrmann, R. Gold, H. Thoenen, and H. Wekerle. 1995. //Gene transfer through the blood-nerve barrier: NGF-engineered

neuritogenic T lymphocytes attenuate experimental autoimmune neuritis. / Nat. Med. l:pp. 1162-1166.

73. Kunzendorf, U., T. Pohl, S. Bulfone-Paus, H. Krause, E. Ziegler, A. Onu, and A. Disller. 1996. //Immunomodulation in experimental and clinical nephrology using chimeric proteins. / Kidney Blood Press. Res. 19:pp.201-204.

74. Laemmli, U. K. 1970. //Cleavage of structural proteins during the assemble of the head of bacteriophage T4. / Nature 227:pp.680-685.

75. Lalani, I., K. Bhol, and A. R. Ahmed. 1997. //Interleukm-10: biology, role in inflammation and autoimmunity. ¡Ann. Allergy Asthma Immunol 79:pp.469-483.

76. Le, C. II., A. G. Nicolson, A. Morales, and K. L. Sewell. 1997. //Suppression of collagen-induced arthritis through adenovirus-mediated transfer of a modified tumor necrosis factor alpha rcceptor gene. / Arthritis Rheum. 40:pp.l662-1669.

77. Lee, K. D., K. Hong, and D. Papahadjopoulos. 1992. //Recognition of liposomes by cells: in vitro binding and endocytosis mediated by specific lipid headgroups and surface charge density. I Biochim. Biophys. Acta 1103:pp. 185-197.

78. Lei, D., M. Lehmann, J. E. Shellito, S. Nelson, A. Siegling, H. D. Voile, and J. K. Kolls. 1996. //Nondepleting anti-CD4 antibody treatment prolongs lung-directed El- deleted adenovirus-mediated gene expression in rats. / Hum. Gene Ther. 7:pp.2273-2279.

79. Lentsch, A. B., T. P. Shanley, V. Sarma, and P. A. Ward. 1997. //In vivo suppression of NF-kappa B and preservation of I kappa B alpha by interleukin-10 and interleukin-13. /J. Clin. Invest. 100:pp.2443-2448.

80. Li, S. and L. Huang. 1997. //In vivo gene transfer via intravenous administration of cationic lipid- protamine-DNA (LPD) complexes. / Gene Ther. 4:pp.891-900.

81. Link, H. 1998. //The cytokine storm in multiple sclerosis. I Mult. Scler. 4:pp.l2-15.

82. Maini, R. N., M. Elliott, F. M. Brennan, R. O. Williams, and M. Feldmann. 1997. //TNF blockade in rheumatoid arthritis: implications for therapy and pathogenesis.!APMIS 105:pp.257-263.

83. Makarov, S. S., J. C. Olsen, W. N. Johnston, J. H. Schwab, S. K. Anderle, R. R. Brown, and J. S. Haskill. 1995. //Retrovirus mediated in vivo gene transfer to synovium in bacterial cell wall-induced arthritis in rats. / Gene Ther. 2:pp.424-428.

84. Makarov, S. S., J. C, Olsen, W. N. Johnston, S. K. Anderle, R. R. Brown, A. S. Baldwin,Jr., J. S. Haskill, and J. H. Schwab. 1996. //Suppression of experimental arthritis by gene transfer of interleukin 1 receptor antagonist cDNA. I

Proc. Natl Acad. Sci. U. S. A. 93 :pp.402-406.

85. Makarov, S. S. and A. S. Baldwin, Jr. 1996. //Local suppression of NFkB inhibits experimental arthritis in rats. / Arthritis Rheum. 39:pp.563

86. Malone, D. G., J. W. Verbsky, and P. W. Dolan. 1991. //A lavage method for dynamic intraarticular monitoring of animal joints in situ: quantification and release kinetics of histamine after selective synovial mast cell activation by diverse secretagogues. ¡J. Lab. Clin. Med. 118:pp.269-279.

87. Mathisen, P. M., M. Yu, J. M. Johnson, J. A. Drazba, and V. K. Tuohy. 1997. //Treatment of experimental autoimmune encephalomyelitis with genetically modified memory T cells. /</. Exp. Med. 186:pp. 159-164.

88. Mathisen, P. M. and V. K. Tuohy. 1998. .//Gene therapy in the treatment of autoimmune disease. / Immunol Today 19:pp.103-105.

89. Meyer, O., D. Kirpotin, K. Hong, B. Sternberg, J. W. Park, M. C. Woodle, and D. Papahadjopoulos. 1998. '/Catiomc liposomes coated with polyethylene glycol as carriers for oligonucleotides. / J. Biol Chem. 273:pp. 15621-15627.

90. Miagkov, A. V., A. W. Varley, I. G. Kharitonenkov, R. S. Munford, and S. S. Makarov. 1998. //Inflammation-regulated expression of IL-1G inhibits the recurrence of streptococcal cell wall (SCW)-induced arthritis in rat. ¡Arthritis Rheum.

91. Miller, N. and J. Whelan. 1997. //Progress in transcriptionally targeted and regulatable vectors for genetic therapy. I Hum. Gene Ther. 8:pp.803-815.

92. Mitanchez, D., R. Chen, J. F. Massias, A. Porteu, A. Mignon, X. Bertagna. and A. Kahn. 1998. //Regulated expression of mature human insulin in the liver of transgenic mice. / FEES Lett, 421:pp.285-289.

93. Mori, A., A. L. Klibanov, V. P. TorcMin, and L. Huang. 1991. //Influence of the steric barrier activity of amphipathic poly(ethvleneglycol) and ganglioside GM1 on the circulation time of liposomes and on the target binding of immunoliposomes in vivo, i FEES Lett. 284:pp.263-266.

94. Moritani, M., K. Yoshimoto, S. Ii, M. Kondo, H. Ivvahana, T. Yamaoka, T. Sano, N. Nakano, H. Kikutani, and M. Itakura. 1996. .//Prevention of adoptively transferred diabetes in nonobese diabetic mice with IL-10-transduced islet-specific Thl' lymphocytes. A gene therapy model for autoimmune diabetes. / J. Clin. Invest. 98:pp. 1851-1859.

95. Morsy, M. A., M. Gu. S. Motzel, J. Zhao, J. Lin, Q. Su, H. Allen, L. Franlin, R. J. Parks, F. L. Graham, S. Kochanek, A. J. Bett, and C. T. Caskey. 1998. //An adenoviral vector deleted for all viral coding sequences results in enhanced safety and extended expression of a leptin transgene. / Proc. Natl Acad. Set U. S. A. 95 :pp. 7866-7871.

96. Mosmann, T. R. and K. W. Moore. 1991. //The role of IL-10 in crossregulation of Ti ll and TH2 responses. / Immunol Today 12:pp.A49-53.

97. Muller-Ladner, U. 1996. //Molecular and cellular interactions in rheumatoid synovium. / Curr. Opin. Rheumatol 8:pp.210-220.

98. Muller-Ladner, U., R. E. Gay, and S. Gay. 1997a. //Cellular pathways of joint destruction. / Curr. Opin. Rheumatol. 9:pp.213-220.

99. Muller-Ladner, U., C. R. Roberts, B. N. Franklin, R. E. Gay, P. D. Robbins, C. H. Evans, and S. Gay. 1997b. / Human IL-IRa gene transfer into human synovial fibroblasts is chondroprotective. / J. Immunol 158 :pp.3492-3498.

100. Muraille, E. and O. Leo. 1998. //Revisiting the Thl/Th2 paradigm. / Scand. J. Immunol 47:pp.l-9.

101. Murphy, J. E., S. Zhou, K. Giese, L. T. Williams, J. A. Escobedo, and V. J. Dwarki. 1997. //Long-term correction of obesity and diabetes in genetically obese mice by a single intramuscular injection of recombinant adeno-associated virus encoding mouse leptin. / Proc. Natl Acad. Sci. U. S. A. 94:pp. 13921-13926.

102. Nagata, S. 1997. /'Apoptosis by death factor. / Cell 88:pp.355-365.

103. Nita, I., S. C. Ghivizzani, J. Galea-Lauri, G. Bandara, H. I. Georgescu, P. D. Robbins, and C. H. Evans. 1996. //Direct gene delivery to synovium. An

evaluation of potential vectors in vitro and in vivo. / Arthritis Rheum. 39 :pp. 820-828.

104. O'Garra. A., L. Steinman, and K. Gijbels. 1997. //CD4+ T-cell subsets in autoimmunity. / Curr. Opin. Immunol. 9:pp.872-883.

105. Okamoto, K., H. Asahara, T. Kobayashi, H. Matsuno, T. Ilasunuma, T. Kobata, T. Sumida, and K. Nishioka. 1998. //Induction of apoptosis in the rheumatoid synovium by Fas ligand gene transfer. I Gene Ther. 5:pp.331-338.

106. Olsson, T. 1995. //Critical influences of the cytokine orchestration on the outcome of myelin antigen-specific T-cell autoimmunity in experimental autoimmune

encephalomyelitis and multiple sclerosis. / Immunol. Rev. 144:245-68:pp.245-268.

107. Otani, K.. I. Nita, W. Macaulav, H. I. Georgescu. P. D. Robbins, and C. H. Evans. 1996. / Suppression of antigen-induced arthritis in rabbits by ex vivo gene therapy. ! J. Immunol. 156;pp.3558-3562.

108. Pelletier, J. P., J. P. Caron, C. Evans, P. D. Robbins, H. I. Georgescu, D. Jovanovic, J. C, Femandes, and J. Martel-Pelletier. 1997. //In vivo suppression of early experimental osteoarthritis by interleukin- 1 receptor antagonist using gene therapy. ! Arthritis Rheum. 40:pp. 1012-1019.

109. Pennline. K. J., E. Roque-Gaffney, and M. Monahan. 1994. //Recombinant human IL-10 prevents the onset of diabetes in the nonobese diabetic mouse. I Clin. Immunol. Immunopathol. 71 :pp. 169-175.

110. Poeschla, E. M., F. Wong-Staal, and D. J. Looney. 1998. .//Efficient transduction of nondividing human cells by feline immunodeficiency virus lentiviral vectors. / Nat. Med. 4:pp.354-357.

111. Raz, E., J. Dudler, M. Lotz, S. M. Baird, C. C, Berry, R. A. Eisenberg, and D. A. Carson. 1995. //Modulation of disease activity in murine systemic lupus erythematosus by cytokine gene delivery. / Lupus. 4:pp.286-292.

112. Romagnani, S. 1991, //Type 1 T helper and type 2 T helper cells: functions, regulation and role in protection and disease. I Int. J. Clin. Lab. Res. 21 :pp. 152-158.

113. Romano, G., P. P. Claudio, H. E. Kaiser, and A. Giordano. 1998.

//"Recent advances, prospects and problems in designing new strategies for oligonucleotide and gene delivery in therapy. I In Vivo. 12:pp.59-67.

114. Rott, O., B. Fleischer, and E. Cash. 1994. //Interleukin-10 prevents experimental allergic encephalomyelitis in rats. / Eur. J. Immunol. 24:pp. 1434-1440.

115. Rudin, C. M., J. Van Dongen, and C. B. Thompson. 1996. //Apoptotic signaling in lymphocytes. / Curr. Opin. Hematol. 3:pp.35-40.

116. Saggio, I., L. Ciapponi. R. Savino, G. Ciliberto, and M. Perricaudet. 1997. .//Adenovirus-mediated gene transfer of a human IL-6 antagonist. / Gene Ther. 4:pp.839-845.

117. Sakata, K., A. Sakata, L. Kong, H. Dang, and N. Talal. 1998. //Role of Fas/FasL interaction in physiology and pathology: the good and the bad. I Clin. Immunol. Immunopathol. 87:pp.l-7.

118. Samoilova, E. B., J. L. Horton, H. Zhang, and Y. Chen. 1997. //CD40L blockade prevents autoimmune encephalomyelitis and hampers Till but not TH2

pathway of T cell differentiation. I J. Mol. Med. 75:pp.603-608.

119. Sen, R. and D. Baltimore. 1986. //Multiple nuclear factors interact with the immunoglobulin enhancer sequences. / Cell 46:pp. 705-716.

120. Shiozawa, S., K. Shimizu, K. Tanaka, and K. Ilino. 1997. Studies on the contribution of c-fos AP-1 to arthritic joint destruction. / J. Clin. Invest. 99:pp. 1210-1216.

121. Sokol, L. and J. T. Prchal. 1995. //Human genome—chromosome no. 19.

/ Cas. Let Cesk. 134:pp.625-629.

122. Song, X. Y., M. Gu, W. W. Jin, D. M. Klinman, and S. M. Wahl. 1998. . Plasmid DNA encoding transforming growth factor-beta 1 suppresses chronic disease

in a streptococcal cell wall-induced arthritis model. / J. Clin. Invest. 101 :pp.2615-

2621.

123. Sozzani, S., R. Bonecchi, G. D'Amico. W. Luini, S. Bernasconi, P. Allavena, and A. Mantovani. 1998. //Old and new chemokines. Pharmacological regulation of chemokine production and receptor expression: mini-review. / J. Chemother. 10:pp. 142-145.

124. Stimpson, S. A., R. E. Esser, P. B. Carter, R. B. Sartor, W. J. Cromartie, and J. H. Schwab. 1987. //Lipopolysaccharide induces recurrence of arthritis in rat joints previously injured by peptidoglycan-polysaccharide. / J. Exp. Med. 165:pp. 1688-1702.

125. Suda, T. and S. Nagata. 1997. //Why do defects in the Fas-Fas ligand system cause autoimmunity'? / J. Allergy Clin. Immunol. 100:pp.S97-101.

126. Trentham, D, E., A. S. Townes, and A. H. Kang. 1977. //Autoimmunity to type II collagen an experimental model of arthritis. / J. Exp. Med. 146:pp. 857-868.

127. Trentham, D. E. and R. Dynesius-Trenthman. 1995. //Collagen-induced arthiitis. / Mechanism and models in rheumatoid arthritis. J. C. W. Edwards, B. Henderson, and E. R. Pettipher, editors. Academic Press, London, San Diego, New York, Boston, Sydney, Tokyo, Toronto, pp.447-456.

128. van den Broek, M. F., M. C. van Bruggen, S. A. Stimpson, A. J. Severijnen, L. B. van de Putte, and W. B. van den Berg. 1990. / Flare-up reaction of streptococcal cell wall induced arthritis in Lewis and F344 rats: the role of T lymphocytes. / Clin. Exp. Immunol. 79:pp.297-306.

129. Van der Meide, P. H. and H. Schellekens. 1996. //Cytokines and the immune response. / Biotherapy 8:pp.243-249.

130. Vailey, A. W., M. G. Coulthard, R. S. Meidell, R. D. Gerard, and R. S. Munford. 1995. //Inflammation-induced recombinant protein expression in vivo using promoters from acute-phase protein genes. / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 92:pp. 5346-5350.

131. Varley, A. W., S. M. Geiszler, R. B. Gaynor, and R. S. Munford. 1997. //A two-component expression system that responds to inflammatory stimuli in vivo. / Nat. Biotechnol. 15:pp. 1002-1006.

132. Verma, I. M. and N. Somia. 1997. //Gene therapy — promises, problems and prospects. / Nature 389:pp.239-242.

133. Wakisaka, S., N. Suzuki, N. Saito, T. Ochi, and T. Sakane. 1998. //Possible correction of abnormal rheumatoid arthritis synovial cell function by jun D transfection in vitro. / Arthritis Rheum. 4l:pp.470-481.

134. Walmsley, M., P. D. Katsikis, E. Abney, S. Рапу, R. O. Williams, R. N. Maim, and M. Feldmann. 1996. Interleukin-10 inhibition of the progression of established collagen- induced arthritis. / Arthritis Rheum. 39:pp.495-503.

135. Whalen, J. D., E. R. Lechman, R. Kang, C. Tio, J. Kolls, and С. H. Evans. 1997. //Periarticular gene therpy with viral LL-10 can prevent collagen- induced artiiiitis in mice. / Arthritis Rheum. 40p. SI58

136. Winter, W. E., D. V. House, and D. Schatz. 1997. /Pharmacological approaches to the prevention of autoimmune diabetes. / Drugs 53:pp.943-956.

137. Wooley, P. H. 1995. //Irrammogenetics of animal models of rheumatoid arthritis. / Mechanism and models in rheumatoid arthritis. J. C. W. Edwards, B. Henderson, and E. R. Pettipher, editors. Academic Press, London, San Diego, New York, Boston, Sydney, Tokyo. Toronto, pp.373-387.

138. Wyss-Coray, Т., D. Mauri-Hellweg, K. Baumann, F. Bettens, R. Gronow, and W. J. Pichler. 1993. /'/The B7 adhesion molecule is expressed on activated human T cells: functional involvement in T-T cell interactions. / Eur. J. Immunol. 23:pp.2175-2180.

139. Yovandich, J., B. O'MalleyJr., M. Sikes, and F. D. Ledley. 1995. //Gene transfer to synovial cells by intra-articular administration of plasmid DNA. / Hum. Gene Ther. 6:pp.603-610.

140. Zhang, II., Y. Yang. J. L. Horton, E. B. Samoilova, T. A. Judge, L. A. Turka, J. M. Wilson, and Y. Chen. 1997. /Amelioration of collagen-induced arthritis by CD95 (Apo-l'Fas)-ligand gene transfer. I J. Clin. Invest. 100:pp. 1951-1957.

141. Zufferey, R., D. Nagy, R. J. Mandel, L. Naldini, and D. Trono. 1997. /'Multiply attenuated lentiviral vector achieves efficient gene delivery in vivo. / Nat. Biotechnol. 15:pp.871-875.