Иммунологическая эффективность противоопухолевых вакцин тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Бармашов, Александр Евгеньевич

• Бармашов, Александр Евгеньевич
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Бармашов, Александр Евгеньевич

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Иммунотерапия онкологических заболеваний

1.2. Клеточный противоопухолевый иммунитет

1.3. Гуморальный противоопухолевый иммунитет

1.4. Методы исследования иммунного ответа

1.4.1. Иммуноцитохимическая реакция

1.4.2. Проточная цитометрия

1.4.3. Метод ЕЬКРОТ

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Материалы и реактивы

2.2. Оборудование

2.3. Методы исследования

Глава 3. Результаты исследований

3.1. Оценка Т-клеточного иммунного ответа методом ЕЫБРОТ у больных меланомой, получающих противоопухолевую вакцину

Мелавак

3.2. Оценка Т-клеточного иммунного ответа методом Е1Л8РОТ

у больных меланомой, получающих дендритноклеточную противоопухолевую вакцину

3.3. Оценка гуморального иммунного ответа у больных меланомой, получающих противоопухолевые вакцины

3.4. Сравнение Т-клеточного иммунного ответа у больных, получа-

ющих дендритноклеточную вакцину, с некоторыми клиническими

показателями

Глава 4.0бсуждение результатов исследований

ВЫВОДЫ

Список литературы

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИИ

АПК Антиген-презентирующая клетка

AT Антитело

БЦЖ Аттенуированные микобактерии Кальметта-Жерена

ГЗТ Гиперчувствительность замедленного типа

ГМ-КСФ Гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор

ДК Дендритная клетка

ИЛ Интерлейкин

ИФН-у Интерферон-гамма

МКА Моноклональное антитело

МПК Мононуклеарные клетки периферической крови

ОАА Опухолеассоциированные антигены

ОЛ Опухолевый лизат

ФГА Фитогемагглютинин

ФИЦХ Флуоресцентный иммуноцитохимический анализ

ФНО-а Фактор некроза опухоли альфа

ЦТ Л Цитотоксический Т-лимфоцит

ADCC Антителозависимая клеточная цитотоксичность

CD Кластер дифференцировки

ELISPOT Enzyme-Linked ImmunoSpot — твердофазная модификация метода иммуноферментного анализа

FITC Флуоресцеинизотиоцианат

HLA Человеческий лейкоцитарный антиген

IT AM Активационная последовательность иммунных рецепторов

МНС Главный комплекс гистосовместимости

PBS Phosphate buffered saline - фосфатно-солевой буфер

РЕ Фикоэритрин

TGF Трансформирующий фактор роста

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунологическая эффективность противоопухолевых вакцин»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы.

Важной проблемой медицины является разработка новых методов борьбы со злокачественными новообразованиями у людей. Одно из направлений этой работы - биотерапия, где при лечении больных используются различные цитокины, интерфероны, моноклональные антитела, а также разные противоопухолевые вакцины. В онкологической клинике проходят испытания цельноклеточные, пептидные, генномодифицированные и дентритноклеточные вакцины.

Первоначально в вакцинотерапии рака применяли цельноклеточную вакцину. Однако не было получено воспроизводимого терапевтического эффекта при лечении больных данными препаратами [94, 128, 165]. Методы генной инженерии позволяют вводить в опухолевые клетки гены, отвечающие за синтез антигенов или цитокинов, что повышает их иммуногенность [71, 134, 103]. Аналогичные показатели клинического ответа наблюдаются при использовании вакцин на основе дендритных клеток [131, 135, 151]. В ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН созданы и прошли I и II фазы клинических испытаний генномодифицированная и дендритноклеточная вакцины. Цель создания подобного рода препаратов заключается в том, чтобы путем активации клеточного и в меньшей степени гуморального иммунных ответов повысить эффективность лечения злокачественных новообразований. Эти вакцины были оценены по объективным клиническим результатам, тогда как оценка иммунологических ответов проводилась не в полном объеме.

По данным литературы клинический и иммунологический ответы на

вакцинотерапию неоднозначны [69]. Иммунологические ответы проявляются

в большем проценте случаев, чем ответы клинические. В основном

определяют Т-клеточный ответ на вакцинотерапию, а гуморальный ответ не

исследуется. Однако вакцинотерапия может вызывать как активацию Т-

5

хелперов 1 типа, ответственных за Т-клеточный иммунный ответ, так и 2 типа, отвечающих за гуморальный ответ. Эти вопросы не были решены во время проведения I и II фаз клинического исследования вакцин. По этой причине необходимо раскрыть степень выраженности иммунного ответа на фоне вакцинации. Есть исследования, которые отдельно изучают цитокиновый профиль, клеточный и гуморальный противоопухолевые иммунные ответы. Но на данный момент в России не представлено ни одной работы, сопоставляющей с помощью разных методов вышеуказанные звенья иммунитета у онкологических больных в процессе иммунизации. Целью работы является изучить иммунологическую эффективность двух противоопухолевых вакцин (Мелавак и дендритноклеточную) с помощью нескольких методов, касающихся как клеточного, так и гуморального иммунных ответов.

Вакцины на основе нагруженных опухолевым лизатом дендритных клеток и облученных опухолевых предназначены для активации эффекторного звена иммунитета для уничтожения опухоли. Идея создания данной вакцины основана на сведениях о взаимодействии клеток иммунной системы и антиген-презентации. Дендритная клетка представляет фрагмент антигена в комплексе с молекулами НЬА-АВС и НЬЛ-ЭЯ как Т-хэлперам, так и Т-киллерам, чем запускает каскад реакций, направленных на уничтожение клеток-мишеней. Предполагается, что и презентация опухолевых пептидов в иммуногенном комплексе будет способствовать специфической активации Т-лимфоцитов и, в конечном счете, реализации их цитотоксического действия на опухоль [5, 13, 19]. Это, впрочем, не исключает активации и неспецифического противоопухолевого иммунного ответа [2, 6, 14, 22, 43, 51].

Определение взаимосвязи между звеньями иммунитета и клиническими показателями, равно как и степени выраженности иммунного ответа при использовании цельноклеточных противоопухолевых вакцин является актуальной проблемой онкологии.

Цель работы

Оценить иммунологическую вакцины и вакцины Мелавак.

эффективность

дендритноклеточной

Задачи исследования

1. Оценить Т-клеточный противоопухолевый иммунитет методом ЕЫБРОТ у больных меланомой, получающих вакцинотерапию.

2. Оценить гуморальный противоопухолевый иммунитет у больных меланомой по образованию антител к опухолеассоциированным антигенам в процессе вакцинотерапии.

3. Изучить корреляцию между степенью иммунного ответа и клиническими параметрами у вакцинированных больных меланомой.

4. Определить прогностическую значимость иммунологического ответа у больных меланомой, получающих вакцинотерапию, на течение заболевания.

Научная новизна

Впервые одновременно оценены гуморальный и клеточный иммунный ответы у больных меланомой, получивших дендритноклеточную вакцину и вакцину Мелавак. Т-клеточный противоопухолевый иммунитет изучен методом ЕЫБРОТ, а гуморальный противоопухолевый иммунитет -по образованию антител к опухолеассоциированным антигенам. Изучена корреляция между степенью иммунного ответа и клиническими параметрами у вакцинированных больных меланомой. Определена прогностическая значимость иммунологического ответа у вакинированных больных меланомой.

Научно-практическая значимость

Полученные результаты являются основанием для применения противоопухолевых цельноклеточных вакцин в клинической практике.

Применение метода ЕЫЗРОТ позволяет прогнозировать течение онкологических заболеваний на фоне вакцинотерапии.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 7 научных работ в журналах рекомендованных ВАК РФ: 3 статьи и 4 тезисов конференций.

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 124 страницах машинописного текста, включая библиографию и иллюстрации. Состоит из введения, литературного обзора, общей характеристики материалов и методов исследования, главы описания собственных исследований, главы обсуждения результатов и выводов. Список литературы включает 200 источников, в том числе 169 публикаций зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 24 рисунками и сопровождается 11 таблицами.

Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ИММУНОТЕРАПИЯ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Актуальной проблемой медицины является разработка новых терапевтических методов борьбы с злокачественными новообразованиями у людей. Одним из направлений этой работы является биотерапия [4, 5]. Спектр используемых в биотерапии препаратов и способов их применения широк. В настоящий момент в клинике применяют препараты на основе моноклональных антител (МКА) (Герцептин и др.) [108, 139], цитокины (разные семейства интерлейкинов, интерфероны и др.) [11, 12, 167]. Проходят разные стадии клинических испытаний противоопухолевые вакцины [117, 135, 172].

Важной составной частью биотерапии является иммунотерапия. Главным ее отличием от других биотерапевтических подходов является направленость на стимуляцию противоопухолевого иммунитета пациентов [6, 7]. К иммунотерапии относят применение противоопухолевых вакцин, иммуностимуляторов и цитокинов [11, 73, 116, 193]. К противоопухолевым вакцинам принадлежат вакцины на основе цельных или лизированных опухолевых клеток [22, 122], дендритные клетки, нагруженные опухолевыми антигенами [2, 145], дендритомы (слитые дендритные/опухолевые клетки) [8, 37], лимфокинактивированные лимфоциты [104], а также лимфоциты, выделенные из опухолевого инфильтрата (TIL-терапия) [109] и др.

Классифицируют противоопухолевые вакцины по разным категориям: по способу доставки антигена, по диапозону применения, по природе антигена.

По способу доставки вакцинотерапию разделяют на четыре основных

типа.

1. Иммунизация проводится посредством генной конструкции, кодирующей тот или иной опухолевый антиген.

2. Для введения используют сам антиген (пептиды, белок или лизат из опухолевых клеток).

3. Вводят облученные опухолевые клетки (главным образом, модифицированные).

4. В качестве вакцины применяют дендритные клетки, нагруженные антигенами опухоли.

Довольно редко в клинической практике применяется генетическая конструкция, кодирующая опухолевый антиген [68]. Суть данного подхода заключается во внедрении гена с помощью вирусного вектора в клетку, после чего происходит синтез соответствующего опухолевого белка, его переработка до отдельных пептидных фрагментов и представление их в комплексе с молекулами МНС I класса. После этого он распознается иммунокомпетентными клетками.

После того, как антиген введен в организм, он захватывается антиген-презентирующими клетками (АПК), процессируется и затем представляется в виде пептидов, находящихся в комплексе с молекулами главного комплекса гистосовместимости (МНС). Особенность применения опухолевых пептидов заключается в том, что они способны напрямую взаимодействовать с аллельными МНС на поверхности клеток пациента без предварительного захвата и переработки АПК (с последующим представлением Т-лимфоцитам) [184]. По своей природе применяемые антигены подразделяют на синтетические [147], нативные [122] или рекомбинантные [106]. Синтетическим путем получают пептиды опухолеассоциированных антигенов. Под «нативными антигенами» понимают, как правило, лизат (ОЛ), полученный из клеток опухоли больного [52]. Рекомбинантные антигены получают при трансфекции гена, кодирующего соответствующий белок, в бактерию с последующей наработкой данного белка и очисткой.

Вакцины на основе цельных опухолевых клеток представляют собой

10

аутологичные или аллогенные опухолевые клетки, которые облучают и вводят вместе с иммунологическим адъювантом(ами) для привлечения антиген-презентирующих клеток хозяина [14, 87, 91].

Традиционным адъювантом, который положительно зарекомендовал себя в такого рода исследованиях, являются живые аттенуированные микобактерии Кальметта-Жерена (вакцина БЦЖ) [91].

Кроме того, используют геномодифицированные вакцины [17, 20, 54]. Геномодифицированные вакцины на основе аутологичных или аллогенных опухолевых клеток получают путем трансфекции этих клеток различными генами (последовательностями экзогенной ДНК), которые вызывают экспрессию или синтез молекул цитокинов или других белков, активирующих иммунный ответ или обладающих токсическим действием в отношении клеток опухоли. Например, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ) вызывает положительный хемотаксис и активацию моноцитов и гранулоцитов крови, а также тканевых макрофагов [75, 159]. Трансфекция опухолевых клеток геном, кодирующим данный цитокин, производится при приготовлениии вакцин Gvax [186], Мелавак [3, 18] и ряда других. Разрушенные клеточные фрагменты цельноклеточной вакцины (образующиеся после естественной гибели) захватываются макрофагами, незрелыми дендритными клетками и происходит презентации опухолевых пептидов с молекулами HLA-ABC и HLA-DR Т-киллерам и Т-хэлперам для реализации противоопухолевого иммуного ответа [158]. Таким образом, достигается двоякое действие: к опухолевым клеткам привлекаются антиген-презентирующие клетки, а в результате захвата разрушенных клеточных фрагментов и процессирования пептидов происходит активация иммунного ответа против данных антигенов опухоли.

Вакцинация облученными опухолевыми клетками изучалась на

нескольких животных моделей начиная с 70-х гг XX века. Ученые Hanna et

al. (1978) изучали действие данной вакцины на гепатоцеллюлярной

11

карциноме гвинейских свинок в сочетании с адъювантом БЦЖ. В этом исследовании был зафиксирован протективный эффект вакцины против последующего введения необлученных сингенных опухолевых клеток [82, 83].

Hoover et al. (1993) проводил клинические испытания с пациентами II/III стадии колоректального рака, которым также вводились аутологичные облученные опухолевые клетки [91]. Среди пациентов получающих иммунизацию процент смертности составлял 34,1% против 48,7% в контрольной группе. Подобное исследование проводилось Baars et al. (2000) при лечение больных с метастатической меланомой кожи [38]. 5-летняя выживаемость больных, получающих вакцину, составила 45% против 35 и 20% (в зависимости от стадии заболевания) у пациентов, которым проводилось только хирургическое лечение.

Использование аутологичной цельноклеточной вакцины на основе

опухолевых клеток имеет ряд недостатков. Во-первых, не во всех случаях

удается получить стабильную клеточную линию из опухолевого материала

больных. Во-вторых, обычно время ее получение достигает несколько

месяцев с сопутствующими трудностями трансфекции и получения клонов с

высоким уровнем секреции цитокина. В случае применения аллогенной

вакцины устраняется проблема, связанная с трудностью и длительностью

получения клеточной линии, однако возникает опасность отторжения

трансплантата. Всех указанных недостатков лишены аллогенные опухолевые

клетки, лишенные молекул главного комплекса гистосовместимости I и II

классов, так как в этом случае не происходит активации

трансплантационного иммунитета и предполагается наличие

противоопухолевого в результате захвата клеточных фрагментов опухоли

макрофагами и незрелыми дендритными клетками. Такой подход

осуществлен при изготовлении вакцин Gvax и Мелавак [3, 21]. Другой

способ устранения сложностей при введении аллогенной вакцины - это

введение пациентам разных опухолевых линий. Данный подход был

12

реализован, в частности, при создании вакцины Canvaxin [129], представляющая собой 3 клеточные линии меланомы. Культуральные клетки меланомы используют и при создании отечественных противоопухолевых вакцин [18].

Клиническая эффективность аллогенных геномодифицированных цельноклеточных вакцин находится в диапозоне от 12% до 20% [112]. В одной из работ при введении данной вакцины наблюдалось развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), что говорит о стимуляции специфического противоопухолевого иммунитета [75]. В этом же исследовании показано увеличение титра IgG и IgM на определенных этапах вакцинации у больных, получающих ГМ-КСФ-секретирующую цельноклеточную вакцину по сравнению с больными, получающих вакцину без экспрессии данного цитокина. При этом было зафиксировано увеличение эозинофилов и базофилов в периферической крови, а также уменьшение числа моноцитов. Полученные данные свидетельствуют о развитии гуморального, но не клеточного иммунитета.

Открытие дендритных клеток относится к 1973 году, где в научной

работе Steinman они были описаны и охарактеризованы [168]. Несмотря на

это, их особенности и функциональные свойства стали изучаться только в 90-

х гг. XX века [40, 148]. Дендритные клетки - профессиональные, наиболее

мощные антиген-презентирующие клетки, благодаря которым запускается

целенаправленный иммунологический ответ [65, 152]. На основании

сведений об их функциональной активности, разработке метода

культивирования in vitro, дендритные клетки стали рассматривать в качестве

перспективной противоопухолевой вакцины [43, 72, 146]. При создании

вакцины на основе дендритных клеток, как правило, выделяют моноциты

периферической крови, добавлют к ним ИЛ-4 и ГМ-КСФ для получения

незрелых ДК; далее инкубируют с опухолевым антигеном (так называемая

«нагрузка») и добавляют ФНО-а и простогландин Е2 для терминальной

дифференцировки в зрелые ДК. Существуют разные способы «нагрузки»

13

опухолевыми антигенами дендритных клеток.

1. Содержание дендритных клеток с нативными или синтетическими пептидами, непосредственно взаимодействующих с молекулами главного комплекса гистосовместимости [191].

2. Инкубация дендритных клеток с опухолевым лизатом, который представляет собой смесь белков, полученных при разрушении, лизировании опухолевых клеток [85].

3. «Нагрузка» рекомбинантными опухолевыми антигенами дендритных клеток [174].

4. Трансфицирование дендритных клеток ДНК и РНК, содержащими гены опухолевых антигенов [44].

5. Захват и переработка убитых опухолевых клеток дендритными клетками [60].

6. Получение дендритом - слитых дендритных клеток с опухолевыми [37].

Действие дендритноклеточных вакцин изучается при разных нозологиях: раке мочевого пузыря, колоректальном раке, меланоме, нейроглиоме и др. [2, 13, 16, 30]

В исследовании Wheeler et al. (2008) изучалось действие дендритноклеточной вакцины у больных глиобластомой. У иммунизированных пациентов было большим время до прогрессирования, чем у неполучавших вакцину. Значения составили 308 ± 55 дней и 167 ± 22 дней соответственно. Время общей выживаемости данных пациентов также было выше у группы, которой вводилась вакцина: 642 ±61 дней против 430 ± 50 дней. Показано увеличение эндогенной выработки ИФН-у в процессе иммунизации [188].

В работе Ansary et al. (2013) был отмечен частичный ответ на

дендритноклеточную вакцину у 2 пациентов из 15 (13,3%), стабильное

течение заболевания - у 9 пациентов (60%) и прогрессирование

зафиксировано у 4 пациентов (26,7%). В процессе иммунотерапии было

14

установлено статистически значимое увеличение СБ8+ клеток в периферической крови, что говорит об активации Т-клеточного иммунного ответа [33].

В клиническое исследование Магкошюг (2012) е1 а1. были включены 24 больных III стадии меланомы. 3-х летняя общая выживаемость составила 68,2% в группе больных, иммунизированных вакциной на основе дендритных клеток, против 25,7% в группе контроля. Разница значений безрецидивной выживаемости в этих группах не достигла статистической значимости. Увеличение числа ИФН-у-продуцирующих клеток было отмечено в процессе вакцинотерапии у 13 из 19 больных [121].

Уап Тепс1е1оо е1 а1. (2010) также было установлено увеличение ИФН-у-секретирующих клеток (сразу двумя методами) у больных острым миелоидным лейкозом в процессе иммунотерапии дендритноклеточной вакциной при сопутствующем клиническом ответе [181].

В работе ОБЬка е1 а1. (2012) было изучено действие дендритноклеточной вакцины у 24 пациентов с метастатической меланомой. Отмечен 1 случай с частичной ремиссией; 7 случаев стабильного течения заболевания и 16 случаев прогрессирования. У 18 больных (75% пациентов) показано методом ЕЫБРОТ увеличение ИФН-у-продуцирующих клеток в процессе терапии данной вакциной [135].

В некоторых других клинических испытаниях I и II стадии опухолевого процесса, вакцины на основе дендритных клеток продемонстировали от 20 до 60% общего клинического ответа с повышением ряда иммунологических параметров [197].

Несмотря на большое количество исследований клинической и иммунологической эффективности противоопухолевых вакцин в научных центрах мира, до сих пор не представлено ни одной работы касающейся комплексной оценки иммунологической эффективности отечественных цельноклеточных вакцин, противоопухолевой направленности.

1.2. КЛЕТОЧНЫЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ИММУНИТЕТ

Возникшая опухоль постоянно находится во взаимодействии с разными системами организма, не исключая и иммунную систему. Почти все клетки как врожденного, так и приобретенного иммунитета реагируют на опухоль, что вызывает иногда прямо противоположные последствия, которые варьируют в разных случаях от полного уничтожения опухоли до значительного усиления ее метастазирования. Достойно внимания то, что те же самые клетки, которые подавляют рост опухоли, иногда способствуют ее дальнейшему развитию. Судя по всему, не существует таких типов клеток, которые реализовывали бы только один из вариантов указанных действий. С другой стороны, касаясь опухоли, невозможно однозначно утверждать о ее чувствительности к противоопухолевой активности клеток иммунной системы или, наоборот, об ее полной резистентности.

Важное значение во взаимодействии иммунокомпетентных клеток с опухолью имеют стресс-индуцированные молекулы, к которым относятся MICA и MICB, принадлежащие к неканоничесим молекулам гистосовместимости [187]. MICA и MICB представлены на поверхности опухолевых клеток и распознаются NKG2D, рецептором всех NK-клеток, части цитотоксических сфТ-лимфоцитов и ряда у5Т-лимфоцитов [39].

В результате связывания рецептора NKG2d, эксперессированного на поверхности лимфоцитов, со стресс-индуцированными молекулами клеток-мишеней возникает импульс, улавливаемый адаптерными молекулами. Затем происходит последующая передача сигнала, конечным итогом которой является индукция эффекторного действия Т-клеток [187].

Вторым сигналом для осуществления лизиса клетки-мишени цитотоксическим Т-лимфоцитом является наличие молекул МНС I класса на ее поверхности в комплексе с характерными для опухоли пептидами (опухолеспецифическими или опухолеассоциированными). В случае осуществления киллерной функции NK-клетками необходимо отсутствие

молекул МНС (или пониженная их экспрессия) и присутствие опухолевых антигенов [138].

Первоначальная реакция иммунокомпетентных клеток на распознавание опухолевых включает в себя секрецию цитокинов воспаления, главным образом интерферона-у [107] и фактора некроза опухолей (ФНО) альфа [119]. Макрофаги при распознавании опухоли выделяют ФНО-а, а у5Т-лимфоциты и 1ЧК-клетки секретирует по большей части у-интерферон [163].

Вырабатываемые цитокины привлекают значительную часть клеток иммунной системы в опухоль. При начальных стадиях роста опухоли в ней обнаруживают инфильтрат, включающий в себя макрофаги, ЫК-клетки и №СТ-лимфоциты [79]. Здесь посредством их действия происходит элиминация большого числа опухолевых клеток при сохранении, в силу разных причин, части клеток, избежавших лизиса и фагоцитоза.

Несмотря на явное противоопухолевое действие иммунной системы на ранних стадиях ее взаимодействия со злокачественными клеткамиодновременно вырабатывается устойчивость опухолевых клеток к иммунологическим реакциям, направленных против них. Основополагающим признаком запуска данного процесса служит появление в клетках опухоли мРНК трансформирующего фактора роста бета (ТСБ-Р) [141]. Этот цитокин участвует в одном из определяющих механизмов, за счет которых опухолевые клетки подавляют активность иммунных реакций [42].

ТОБ-Р, секретируемый клетками опухоли, снижает активность и фагоцитоз находящихся в опухоли макрофагов и производит их трансформацию в фенотип М2. В этом функциональном состоянии клетки ориентированы на поддержание развития опухоли [141].

На следующем этапе в опухоль направляются предшественники ДК, незрелые СБ4+ и СБ8+ Т-лимфоциты [200]. Мигрировав в опухоль, незрелые предшественники ДК осуществляют пиноцитоз и фагоцитоз разных молекул и клеточных фрагментов, находящихся во внеклеточном пространстве [156].

Процесс созревания АПК подразумевает два параллельно происходящих события - увеличение презентирующей способности клеток и миграцию в регионарные лимфоузлы. Миграция АПК осуществляется за счет экспрессирующегося на поверхности клеток рецептора CCR8, улавливающего хемокин CCL1, который осуществляет таксис АПК в лимфатический узел.

NF-кВ, относящийся к транскрипционным факторам, активируется в клетках после передачи сигналов с рецепторов ФНО-а, что обеспечивает экспрессию генов, посредством которых осуществляется миграция и усиление презентирующей способности клеток [120].

В процессе кросс-презентации пептиды опухолевых антигенов представляются в комплексе с молекулами МНС I и II классов, в результате чего АПК, мигрировавшие в лимфатические узлы, способны праймировать как CD4+ Т-лимфоциты, так и Т-киллеры (ЦТЛ) [53].

После прайминга из Т-клеток формируются две популяции Т-лимфоцитов (CD4+ клетки-хэлперы и цитотоксические Т-лимфоциты), несущие на своей поверхности молекулу-корецептор CD 8. Каждая популяция Т-лимфоцитов обладает противоопухолевым действием. Относящиеся к CD4+ клеткам Th2-клетки обладают опосредованным противоопухолевым эффектом за счет стимуляции созревания и формирования эффекторных клеток (в том числе путем секреции ИЛ-2) (рис. 1) [29]. Другая часть клеток (CD8+ ЦТЛ и CD4+ Thl) осуществляет процессы непосредственно в области опухолевой ткани. Таким образом, для реализации противоопухолевого действия этим клеткам существенно важна миграция в опухоль.

Цитотоксические Т-лимфоциты, экспрессирующие корецептор CD8, служат главными эффекторами приобретенного противоопухолевого иммунитета [155].

Функция Thl заключается в обучении Т-киллеров для реализации последними их цитотолитического действия [31].

Вторым способом реализации противоопухолевого действия CD4+ Thl

18

!РЫу

Рисунок 1 [31]. 1Ь-2-зависимая пролиферация СВ8+ Т-клеток клона, вовлекаемого в иммунный ответ.

На примере СВ8+ Т-клеток проиллюстрированы механизмы пролиферативной экспансии антпгенспецифического клона. Презентация приводит к активации распознавших антиген СИ4+ и СР8+ Т-клеток. Основной продукт активации (1Ь-2) в большем количестве выделяют С04+ Т-клетки. С08+ Т-лимфоциты используют его для размножения до численности, необходимой для обеспечения эффективного иммунного ответа.

является инициация гиперчувствительности замедленного типа, что приводит к активации макрофагов в очагах опухолевого роста. Процесс базируется на том, что инфильтрирующие опухоль макрофаги, поглощают некоторые опухолевые антигены и представляют их фрагменты в контексте с молекулами МНС II класса. После проникновения ТЫ клеток в опухоль, происходит распознавание Т-клеточным рецептором иммуногенного комплекса на поверхности макрофагов, после чего начинается синтез хэлперными клетками 1 типа интерферона-у и других цитокинов, способствующих стимуляции активности макрофагов [177]. Активированные макрофаги более динамично и целенаправленно поглощают злокачественные клетки.

СП8+ Т-лимфоциты осуществляют непосредственный лизис опухолевых

клеток, а также клеток эндотелия, располагающихся в опухолевой строме

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бармашов, Александр Евгеньевич, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Агеенко, А.И. Иммунитет и терапия экспериментальных опухолей /А.И. Агеенко, С.П. Гордиенко, О.Г. Саканделидзе. - Кишенев: Штиинца, 1982. -310 с.

2. Бажанов, С.П. Специфическая противоопухолевая иммунотерапия в

комплексном лечении больных со злокачественными супратенториальными глиомами / С.П. Бажанов, В.Е. Олюшин, А.Ю. Улитин, Б.И. Сафаров, Д.М. Ростовцев // Сибирский онкологический журнал. - 2009. - 6. - С.23-27

3.Бармашов, А.Е. Оценка специфического противоопухолевого иммунитета методом ELISPOT у больных, получающих вакцину «Мелавак» / А.Е. Бармашов, К.Д. Никитин, И.Н. Михайлова, Л.Ф. Морозова, А.Н. Иншаков, К.А. Барышников, Л.В. Демидов, А.Ю. Барышников // Российский биотерапевтический журнал. - 2010. - 3. — С.37-40

4. Барышников А.Ю. Биотерапия злокачественных новообразований //

«Экспериментальная онкология на рубеже веков». - М.: издательская группа РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, - 2003. Глава 24. С.543-549.

5. Барышников А.Ю. Вакцинотерапия // Детская онкология (национальное

руководство) / М.Д. Алиев, А.Ю. Барышников, В.Г. Поляков, Г.Л. Менткевич, С.А. Маякова - Москва: Практическая медицина.- 2012. -С. 251 -261

6. Барышников, А.Ю. Взаимоотношение опухоли и иммунной системы

организма/ А.Ю. Барышников // Практическая онкология. - 2003. - 3. -С.127-130.

7. Барышников, А.Ю. Принципы и практика вакцинотерапии рака / А.Ю.

Барышников // Бюллетень СО РАМН. -2004. - 2. - С.59

8. Барышников, А.Ю. Сравнительное исследование иммуногенности

противоопухолевых вакцин на основе дендритных клеток и дендритом in vitro / А.Ю. Барышников, К.Д. Никитин, А.Н. Никифорова, М.В. Рубцова // Аллергология и иммунология. — 2009. — 3. — С. 361-363.

9. Бережной, А.Е. Получение стабильной линии клеток меланомы человека,

секретирующей ГМ-КСФ / А.Е. Бережной, С.С. Ларин, О.С. Бурова, Л.Ф. Морозова, И.Н. Михайлова, С.Л. Киселев, Л.В. Демидов, А.Ю. Барышников // Российский биотерапевтический журнал.-2005.-Т.4№1.-С.6-7

Ю.Галактионов, В.Г. Иммунология / В.Г. Галактионов - Москва: Academia. - 2004 г. - 523 с.

11. Гершанович M.JL: Применение интерлейкина-2 (Пролейкина, Алдеслейкина) в онкологической практике / M.JI. Гершанович // Вопросы онкологии. - 2003. - 49. - С.776.

12. Кадагидзе, З.Г. Цитокины / З.Г. Кадагидзе // Практическая Онкология. -2003.-Vol. 4.-С.131.

13. Лукашина, М.И. Вакцинация больных колоректальным раком аутологичными дендритными клетками / М.И. Лукашина, В.А Алиев, A.B. Смирнова // Сборник тезисов. Дом ученых «Биотехнология и онкология». Санкт-Петербург . - 29-31 мая 2005. - С. 115

14. Манина, И.В. Доклинические исследования иммунотерапии меланомы кожи с помощью цельноклеточных противоопухолевых вакцин, секретирующих GM-CSF / И.В. Манина, Н.М. Перетолчина, Н.С. Сапрыкина, A.M. Козлов, И.Н. Михайлова, А.Ю. Барышников // Российский биотерапевтический журнал. -2010.-3.-С. 14-19.

15.Михайленко, A.A., Руководство по клинической иммунологии, аллергологии, иммуногенетике и иммунофармакологии / A.A. Михайленко, В.И. Коненков, Г.А. Базанов, В.И. Покровский - Москва: Триада, - 2005.

16. Михайлова, И.Н. Вакцинотерапия метастатической меланомы с использованием дендритных клеток: клиническое исследование I/II фазы / И.Н. Михайлова, H.H. Петенко, Г.З. Чкадуа, Л.Ю. Вишнякова, Е.В. Огородникова, Е.А. Черемушкин, К.С. Титов, С.А. Хатырев, Т.К. Харатишвили, К.А. Парсункова, М.Д. Алиев, А.Ю. Барышников, JI.B. Демидов // Российский биотерапевтический журнал. - 2007. - 2. - С. 3943

П.Михайлова, И.Н. Вакцинотерапия диссеминированной меланомы геномодифицированными клетками / И.Н. Михайлова, О.С. Бурова, М.И. Лукашина, Л.Ф. Морозова, И.А. Утяшев, H.H. Петенко, К.А. Барышников,. П.В. Иванов, К.А. Парсункова, Е.А. Черемушкин, Л.В. Демидов, А.Ю. Барышников // Материалы 15-ой Международной конференции «СПИД, рак и общественное здоровье» 22-26 мая 2006. Русский журнал «СПИД, рак и общественное здоровье». - 2006. -2. -С.25.

18. Михайлова, И.Н. Клеточные линии меланомы - основа для создания противоопухолевых вакцин / И.Н. Михайлова, М.И. Лукашина, А.Ю. Барышников, О.С. Бурова, Л.Ф. Морозова, Т.Н. Палкина, A.A. Козлов,

106

В.А. Голубева, Е.А. Черемушкин, М.Б. Дорошенко, Л.В. Демидов, С.Л. Киселев, С.С. Ларин, Г.П. Георгиев // Вестник Российской Академии Медицинских Наук. - 2005. - 7. - С. 37-40.

19. Михайлова, И.Н. Клеточные линии меланомы / И.Н. Михайлова, Д.А. Ковалевский, О.С. Бурова, М.И. Лукашина, Л.Ф. Морозова, В.А. Голубева, H.H. Петенко, Е.А. Черемушкин, Л.В. Демидов, А.Ю. Барышников, С.Л. Киселев, С.С. Ларин, Г.П. Георгиев, Р.Ш. Бибилашвили // Материалы V Симпозиума «Биологические основы терапии онкологических заболеваний». Вопросы гематологии, онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2006. - 4. - С. 15.

20. Михайлова, И.Н. Клинические испытания аутологичной вакцины на основе опухолевых клеток, модифицированных геном tag-7 / И.Н. Михайлова, Л.В. Демидов, А.Ю. Барышников, О.С. Бурова, Л.Ф. Морозова, Г.Ю. Харкевич, Т.Н. Палкина, А.А Козлов, A.A. Вайнсон, З.Г. Кадагидзе, Т.Н. Заботина, A.A. Буркова, М.Б. Дорошенко, С.А. Хатырев, Д.А. Носов, A.M. Гарин, С.А. Тюляндин, С.Л. Киселев, С.С. Ларин, Г.П. Георгиев // Сибирский онкологический журнал. - 2005. - 1. - С. 23-27.

21. Михайлова, И.Н. Патент на изобретение «клеточной линии Mel Kor» / И.Н. Михайлова, А.Ю. Барышников, Л.Ф. Морозова, О.С. Бурова, Л.В. Демидов, A.M. Козлов, С.С. Ларин, Г.П. Георгиев, Г.Н. Ворожцов, Н.В. Гнучев. № 2287578. Российский патент июнь 2006.

22. Михайлова, И.Н. Первая фаза клинических испытаний противоопухолевой геномодифицированой вакцины. Оценка иммунного статуса / И.Н. Михайлова, К.А. Барышников, О.С. Бурова, М.И. Лукашина, А.Л. Смирнова, H.H. Петенко, И.А. Утяшев, Л.В. Демидов, А.Ю. Барышников //Российский биотерапевтический журнал. - 2006. -№3. - С. 51-54.

23. Михайлова, Л. М. Доклиническое токсикологическое изучение противоопухолевой вакцины Мелавак / Л. М. Михайлова, Н. П. Ермакова, И. Б. Меркулова, О. И. Коняева, Е. Л. Членова, Н. Ю. Кульбачевская, Т. В. Абрамова, А. И. Мишин // Материалы VI Всероссийской научно-практической конференции "Отечественные противоопухолевые препараты». Российский биотерапевтический журнал. - 2007. №1.

24. Новиков, В. В. Иммунология / В. В.Новиков, Н. А. Добротина, А. А. Бабаев.- Нижний Новгород: Изд-во ННГУ им. Н. И. Лобачевского.-2004.-212 с.

25. Петров, Р.В. Иммунология / Р.В. Петров. - М.: Медицина, 1987. - 415 с.

26. Петров, Р.В. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, В.М. Манько, А.А. Михайлова - Л.: Медицина. - 1981. -311 с.

27. Сергеева, Н.С. Значение уровня сывороточного белка S-100 при меланоме / Н.С. Сергеева, М.П. Мишунина, И.А. Силина и др. // Российский онкологический журнал. - 2007. - № 4. - С.13-16.

28. Суровцева, М.А. Клинико-иммунологическая эффективность вакцинотерапии при диссеминированной меланоме кожи / М.А. Суровцева, А.А. Шишков, Г.В. Селедцова, В.А. Козлов // 2009. - № 6 (36). - С. 1218.

29. Телетаева, Г.М. Цитокины и противоопухолевый иммунитет / Г.М. Телетаева // Практическая онкология. - 2007. - № 4.- С.211-218

30. Шоуа, А.Б. Предварительные результаты использования вакцин на основе аутологичных дендритных клеток, нагруженных опухолевыми антигенами in vitro, в лечении рака мочевого пузыря / А.Б. Шоуа, Н.Ф. Сергиенко, Н.В.Ситников, Г.З. Чкадуа // Урология. - 2008. - 5. - С. 5457.

31. Ярилин, А.А. Иммунология / А.А. Ярилин. - Москва: ГЭОТАР-Медиа. -2010.-752 с.

32. Altman, J.D. Phenotypic analysis of antigen-specific T lymphocytes / J.D. Altman, P.A. Moss, P.J. Goulder, D.H. Barouch, M.G. McHeyzer-Williams, J.I. Bell, A.J. McMichael, M.M. Davis // Science. - 1996. - Vol.274 (5284). P.94-96.

33.Ansary E.M., Immunotherapy by autologous dendritic cell vaccine in patients with advanced НСС/ E.M. Ansary, S. Mogawer, S.A. Elhamid, S. Alwakil, F. Aboelkasem, H.E. Sabaawy, O.J. Abdelhalim // Cancer Res Clin Oncol. - 2013. - Vol.l39(l). - P.39-48

34. Ardon, H. Integration of autologous dendritic cell-based immunotherapy in the primary treatment for patients with newly diagnosed glioblastoma multiforme: a pilot study / H. Ardon, S. Van Gool, I.S Lopes., W. Maes et al. // J Neurooncol. - 2010. - Vol.99(2). - P.261-72.

35. Ascoli, V. Utility of HBME-1 immunostaining in serous effusions / V. Ascoli, C. Carnovale-Scalzo, S. Taccogna, F. Nardi // Cytopathology. -1997.-Vol.8.-P.328-335.

36. Augustine, J.J. T-cell immune monitoring by the ELISPOT assay for interferon gamma / J.J. Augustine, D.E. Hricik // Clin Chim Acta. -2012. -Vol. 413(17-18). - P.1359-1363

37. Avigan, D. Dendritic/tumor fusion cells as cancer vaccines / D. Avigan, J. Rosenblatt, D. Kufe // Semin Oncol. - 2012. - Vol.39. - P.287-295.

38. Baars, A. Skin tests predict survival after autologous tumor cell vaccination in metastatic melanoma: experience in 81 patients / A. Baars, A.M. Claessen, A. van den Eertwegh, H.E. Gall, A.G. Stam, S. Meijer, G. Giaccone, C.J. Meijer, RJ. Scheper, VJ. Wagsta, J.B. Vermorken, H.M. Pinedo // Ann Oncol. - 2000. - Vol. 11. - P. 965-970

39. Bae, D.S. Importance of NKG2D-NKG2D ligands interaction for cytolytic activity of natural killer cell / D.S. Bae, Y.K. Hwang, J.K. Lee // Cell Immunol. -2012. - Vol.276(l-2). - P. 122-127.

40. Banchereau, J. Dendritic cells and the control of immunity / J. Banchereau, R.M. Steinman // Nature. - 1998. - Vol.392. - P. 245

41. Bassarova, A.V. D2-40 is not a specific marker for cells of mesothelial origin in serious effusions / A.V. Bassarova, J.M. Nesland, B, Davidson // Am J Surg Pathol. - 2006. - Vol.30. - P.878-882.

42. Beatty, P.L. Tumor immunology: basic and clinical advances / P.L. Beatty, S. Cascio, E. Lutz // Cancer Res. - 2011. Vol.l(13). - P.4338-4343.

43. Bender, A. Improved methods for the generation of dendritic cells from nonproliferating progenitors in human blood / A. Bender, M. Sapp, G. Schuler // J. Immunol. Methods. - 1996. - Vol.196. - P. 121

44. Benencia, F. Whole tumor antigen vaccination using dendritic cells: comparison of RNA electroporation and pulsing with UV-irradiated tumor cells / F. Benencia, M. C. Courr'eges, G. Coukos. // Journal of Translational Medicine. -2008. - Vol. 6. - P. 21

45. Berd, D. Immunopharmacologcal analysis of an autologous, hapten- modified human melanoma vaccine / D. Berd, T. Sato, H.C. Maguire, J. Kairys, M.J. Mastrangelo // J Clin Oncol. - 2004. - Vol. 22. - P.403-415.

46. Bonamico, M. Radioimmunoassay to detect antitransglutaminase autoantibodies is the most sensitive and specific screening method for celiac disease / M. Bonamico, C.Tiberti, A. Picarelli, P. Mariani, D. Rossi, E. Cipolletta, M. Greco, M.D. Tola, L. Sabbatella, B. Carabba, F.M. Magliocca, P. Strisciuglio, U. Di Mario // Am J Gastroenterol. - 2001. - Vol. 96(5). -P.1536-1540.

47. Bonfrer, J.M. The luminescence immunoassay S-100: a sensitive test to measure circulating S-100: its prognostic value in malignant melanoma / J.M. Bonfrer, C.C. Korse, O.E. Nieweg et al. // British Journal of Cancer -1998. - Vol. 77( 12). - P. 2210-2214.

48. Brooks, S.A. Basic immunocytochemistry for light microscopy / S.A. Brooks // Methods Mol Med. -2001. - Vol.57. - P. 13-39.

49. Butterfield, L. Adenovirus MART-1-engineered autologous dendritic cell vaccine for metastatic melanoma / L.H. Butterfield, B. Comin-Anduix, L. Vujanovic, Y. Lee, V.B. Dissette, J.Q. Yang, H.T. Vu, E. Seja, D.K.Oseguera, D.M. Potter, J.A. Glaspy, J.S. Economou, A. Ribas // J Immunother. - 2008. - Vol. 31(3). - P.294-309

50. Byrne, W.L. Targeting regulatory T cells in cancer / W.L. Byrne, K.H. Mills, J.A. Lederer, G.C. O'Sullivan // Cancer Res. - 2011. - Vol.l5;71(22). -P.6915

51. Camarero, J. Cancer immunotherapy products: regulatory aspects in the European Union / J. Camarero , S. Ruiz // Human Vaccines & Immunotherapeutics. - 2012. - Vol.8. - P.l-6.

52. Chang, A.A. phase I trial of tumor lysate-pulsed dendritic cells in the treatment of advanced cancer / A.A. Chang, B. Redman, J. Whitfield, et al. // Clin. Cancer Res. - 2002. - Vol.8. - P. 1021

53. Chaplin, D.D. Overview of the immune response / D.D. Chaplin // J Allergy Clin Immunol. - 2010. - Vol. 125(2 Suppl 2). -P.3-23.

54. Chiang, C.L. Whole tumor antigen vaccines / C.L. Chiang, F. Benencia, G. Coukos // Semin Immunol. - 2010. - Vol.22(3). - P. 132-143.

55. Chung, M.H. Humoral immune response to a therapeutic polyvalent cancer vaccine after complete resection of thick primary melanoma and sentinel lymphadenectomy / M.H. Chung, R.K. Gupta, E. Hsueh, R. Essner, W. Ye et al. // J. Clin Oncol. - 2003. -21:313-319.

56. Colleoni, M. Neoadjuvant therapy for ER-positive breast cancers / M. Colleoni, E. Montagna // Ann Oncol. - 2012. - Suppl 10. - P.243-248.

57. Coons, A.H. Immunological properties of an antibody containing a fluorescent group / A.H. Coons, H.J. Creech, R.N. Jones // Proc Soc Exp Biol. - 1941. - Vol. 47. - P.200-202

58. Coons, A.H. Studies on antibody production I. A. method for the histochemical demonstration of specific antibody and its application to a

study of the hyperimmune rabbit / A.H. Coons, E.H. Leduc, J.M. Connolly // J Exp Med. - 1955. - Vol.102. -P.49-60

59. Coulter, W. H. High speed automatic blood cell counter and analyzer / W. H. Coulter // Proc. Natl. Electron. Conf. - 1956. - Vol. 12. - P.1034-1040.

60. Courr'eges, M. C. Preparation of apoptotic tumor cells with replication-incompetent HSV augments the efficacy of dendritic cell vaccines / Courr'eges, M. C. Benencia, F. Conejo-Garc'ia, J. R.L. Zhang, G. Coukos // Cancer Gene Therapy. - 2006. - Vol. 13. - P.182-193

61. Czerkinsky C. A solid-phase enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assay for enumeration of specific antibody-secreting cells. / C. Czerkinsky, L. Nilsson, H. Nygren, O. Ouchterlony, A. Tarkowski // J Immunol Methods. — 1983.-65(1-2): 109-121

62. Czerkinsky, C. Reverse ELISPOT assay for clonal analysis of cytokine production. I. Enumeration of gamma-interferon-secreting cells / G. Andersson, H.-P. Ekre, L.-A. Nilsson, L.Klareskog, O. Ouchterlony // J. Immunol. Methods. - 1988. - Vol. 110. P. 29-36.

63. Czerkinsky, C. A novel two colour ELISPOT assay. I. Simultaneous detection of distinct types of antibody-secreting cells / C. Czerkinsky, Z. Moldoveanu, J. Mestecky, , L. A. Nilsson, O. Ouchterlony // J. Immunol. Methods. - 1988. Vol. 115. - P.31-37.

64. Davidson, B. The diagnostic and molecular characteristics of malignant mesothelioma and ovarian / peritoneal serous carcinoma / B. Davidson // Cytopathology. - 2011. - Vol.22. - P.5-21

65. Derek, N.J. Dendritic cells: unique leukocyte populations which control the primary immune response / N.J. Derek, Hart // Blood. - 1997. - Vol.90. -P.3245

66. Derek, N.J. Detection of chromium allergy by cellular in vitro methods / M. Lindemann, F. Rietschel, M. Zabel, H. Grosse-Wilde // Clin Exp Allergy. -2008. - Vol. 38(9). - P. 1468-1475

67. Djureen-Martenson, E. Use of serum S-100 as a marker for prognosis and in the follow up of malignant melanoma / E. Djureen-Martenson, L.O. Hansson, B. Nilsson et al. // XXIXISOBM - 2001 - Meeting. - P. 44.

68. Donnelly, J. Antigen presentation and DNA vaccines / J. Donnelly, M. Liu, J. Ulmer // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 2000. - P. 162-190

69. Draube, A. Dendritic cell based tumor vaccination in prostate and renal cell cancer: a systematic review and meta-analysis / A. Draube, N. KleinGonzalez, S. Mattheus, C. Brillant, M.Hellmich, A. Engert, M.von Bergwelt-Baildon // PLoS One. -2011. - Vol.6(4). - P. 18801.

70. Duffy, M.J. Tumor Markers in Clinical Practice: A Review Focusing on Common Solid Cancers / M.J. Duffy // Med Princ Pract. 2012 May 15. [Epub ahead of print]

71. Dummer, R. GVAX (Cell Genesys) // Curr Opin Investig Drugs.- 2001. -Vol. 2(6). - P.844-848.

72. Duperrier, K. Distinct subsets of dendritic cells resembling dermal DCs can be generated in vitro from monocytes, in the presence of different serum supplements / K. Duperrier, A. Eljaafari, C. Dezutter-Dambuyant, et al. // J. Immunol. Methods. - 2000. -Vol. 238. - P.l 19

73. Ellebaek, E. Immunotherapy for metastatic colorectal cancer: present status and new options / E. Ellebaek, Andersen M.H., Svane I.M., P.T. Straten // Scand J Gastroenterol. - 2012. - Vol. 47(3). - P. 315-324.

74. Engvall, E. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G. / E.Engvall, P. Perlmann // Immunochemistry. -1971. - Vol.8(9). - P.871-4.

75. Faries, M. B. Impact of GM-CSF on vaccination with an allogeneic whole-cell melanoma vaccine / M. B. Faries, E. C. Hsueh, X. Ye, M. Hoban, D. L. Morton // Clin Cancer Res. - 2009. - Vol. 15(22). - P. 7029-703

76. Fuse, S. Simultaneous analysis of in vivo CD8+ T cell cytotoxicity against multiple epitopes using multicolor flow cytometry / S. Fuse, E. Underwood // Immunol Invest. - 2007. - Vol.36. - P. 829-845.

77. Gelderman, K. A. Complement function in mAb-mediated cancer immunotherapy / K. A. Gelderman, S. Tomlinson, G. D. Ross, A. Gorter // Trends in Immunology. - 2004. - Vol. 25, no. 3, pp. 158-164

78. Gerritsen, W.R. Biochemical and immunologic correlates of clinical response in a combination trial of the GM-CSF-gene transduced allogeneic prostate cancer immunotherapy and ipilimumab in patients with metastatic hormone-refractory prostate cancer (mHRPC) / W.R. Gerritsen, van den A.Eertwegh, T.D. de Gruijl, G.Giaccone, R.J. Scheper, N. Sacks, T. Harding, I. Lowy, E. Stankevich, K. Hege // ASCO Meeting Abstr. -2007.-Vol. 25.-P. 5120

79. Glas, R. Recruitment and activation of natural killer (NK) cells in vivo determined by the target cell phenotype. An adaptive component of NK cellmediated responses / R. Glas, L. Franksson, C. Une, M.L. Eloranta, C. Ohlen, A. Orn, K. Karre // J Exp Med. - 2000. - Vol. 191. - P.129-38.

80. Grossman, W.J. Human T regulatory cells can use the perforin pathway to cause autologous target cell death / W.J. Grossman, J.W. Verbsky, W. Barchet, M. Colonna, J.P. Atkinson, T.J. Ley // Immunity. - 2004. - Vol.21. -P.589 -601

81. Hale, M. B. Stage dependent aberrant regulation of cytokine-STAT signaling in murine systemic lupus erythematosus / M. Hale, P. O. Krutzik, S.S. Samra, J. M Crane, G. P. Nolan // PLoS One. - 2009. - Vol.4, - P.6756.

82. Hanna, M.G. Immunotherapy of established micrometastases with a bacillus Calmette-Guerin tumour cell vaccine / M.G. Hanna, L.C. Peters // Cancer Res. - 1978. - Vol. 38. - P.204-209

83. Hanna, M.G., Active specific immunotherapy of residual micrometastases: an evaluation of sources, doses and ratios of BCG with tumour cells Brandhorst / M.G. Hanna, L.C. Peters // Cancer Immunol Immunother. -1979.-Vol. 7. -P.165-173

84. Harriman W.D. Multiplexed ELISPOT assay / W.D. Harriman, E.J. Collarini, R.G. Cromer, A. Dutta, M. Strandh, F. Zhang, L.M. Kauvar // J Immunol Methods. - 2009. Vol. 341(1-2). - P. 127-134

85. Hatfield, P. Optimization of dendritic cell loading with tumor cell lysates for cancer immunotherapy / P. A. Hatfield, E. Merrick, E. West et al. // Journal of Immunotherapy. - 2008. - Vol. 31. - P. 620-632

86. Hawley, T. S. Flow Cytometry Protocols / T. S.Hawley, R. G. Hawley // Methods in Molecular Biology. - 2011. - Vol. 699. - 486 p.

87. Hege, K.M. GM-CSF gene- modified cancer cell immunotherapies: of mice and men / K.M. Hege, K. Jooss, D. Pardoll // Int Rev Immunol - 2006 -Vol. 25. - P.321-352

88. Heussner, A.H. Development and Characterization of a Monoclonal Antibody against Ochratoxin B and Its Application in ELISA Toxins (Basel) / A.H. Heussner, S. Ausländer, D.R. Dietrich. - 2010. - Vol.2(6). - P. 15821594.

89. Hombrink, P. High-throughput identification of potential minor histocompatibility antigens by MHC tetramer-based screening: feasibility and limitations / P. Hombrink, S.R. Hadrup, A. Bakker, M.G. Kester, J.H.

Falkenburg, P.A. von dem Borne, T.N. Schumacher, M.H. Heemskerk // PLoS One. - 2011. - Vol.6(8). - P. 22523

90. Hoos, A. Improved Endpoints for Cancer Immunotherapy Trials. / A. Hoos, Eggermont, S. Janetzki, J. Wolchok, et al. // J Natl Cancer Inst. - 2010. - Vol. 102(18).-P. 1388-1397

91. Hoover, H.C. Adjuvant active specfic immunotherapy for human colorectal cancer: 6.5-year median follow-up of a phase III prospectively randomized trial / H.C. Hoover, J.S. Brandhorst, L.C. Peters, M.G. Surdyke, Y. Takeshita, J. Madariaga, L.R. Muenz, M.G. Hanna // J Clin Oncol. -1993. - 11. - P. 390-399.

92. Howe, J.G. A sensitive immunoblotting method for measuring protein synthesis initiation factor levels in lysates of Escherichia coli / J.G. Howe, J.W. Hershey// J Biol Chem. - 1981. - Vol.256(24). - P. 12836-12839.

93. Hristov, M. A flow cytometric protocol for enumeration of endothelial progenitor cells and monocyte subsets in human blood / M. Hristov, S. Schmitz, F. Nauwelaers, C. Weber // J Immunol Methods. -2012. -Vol.381(l-2). - P. 9-13.

94. Hsueh, E.C., Prolonged survival after complete resection of disseminated melanoma and active immunotherapy with a therapeutic cancer vaccine / E.C.Hsueh, R. Essner, L.J.Foshag et al. // J Clin Oncol. - 2002. - Vol. 20 (23).-P. 4549 -4554

95. Hsueh, E.C. Antigen-based immunotherapy of melanoma: Canvaxin therapeutic polyvalent cancer vaccine / E.C. Hsueh, D.L. Morton // Seminars in Cancer Biology. - 2003. - Vol. 13. P.401^107

96. Jago, C.B. Differential expression of CTLA-4 among T cell subsets / Jago, C.B., J. Yates, N.O.Camara, R.I. Lechler, G. Lombardi // Clin Exp Immunol. -2004.- Vol. 136. - P.463 - 471

97. Jahan-Tigh, R.R. Flow cytometry / R.R. Jahan-Tigh, C.Ryan, G. Obermoser, K. Schwarzenberger // J Invest Dermatol. - 2012. - Vol. 132(10)

98. Janeway, C.A. Immunobiology / C.A. Janeway, P. Travers, M. Walport, M. Shlomchik. - Garland Science. - 2001.

99. Jung, T. Detection of intracellular cytokines by flow cytometry / T. Jung, U. Schauer, C. Heusser, C. Neumann, C. Rieger // J Immunol Methods. - 1993. -159(1-2).-P.197-207.

100. Kalyuzhny, A. E. Handbook of ELISPOT / A. E. Kalyuzhny // Methods in Molecular Biology. - 2012. - Vol. 792. - 261 p.

101. Kalyuzhny, A. E. Handbook of ELISPOT / A. E. Kalyuzhny // Methods in Molecular Biology. - 2005.- Vol. 302-322 p.

102. Kamentsky, L. A. Spectrophotometer: New instrument for ultrarapid cell analysis / L. A. Kamentsky, M. R. Melamed // Science. - 1965. - Vol.150. -P. 630-631.

103. Karan, D. Combination immunotherapy with prostate GVAX and ipilimumab: safety and toxicity / D. Karan, P. Van Veldhuizen // Immunotherapy. - 2012. -Vol. 4(6). - 577-580.

104. Kato, M. Lymphokine-activated killer cell therapy combined with highdose glucocorticoid showed clinical efficacy towards advanced lung carcinoma / M. Kato, S. Goto, G. Soma // Anticancer Res. - 2010. -Vol.30(8).-P.3125-3128.

105. Khan, A.N. An epigenetic vaccine model active in the prevention and treatment of melanoma / A.N. Khan, W.J. Magner, T.B. Tomasi // J Transl Med. - 2007. - Vol.10. - P. 5:64

106. Kruit, W.H. Phase 1/2 study of subcutaneous and intradermal immunization with a recombinant MAGE-3 protein in patients with detectable metastatic melanoma / W.H. Kruit, H.H. van Ojik, V.G. Brichard, B. Escudier, T. Dorval, B. Dreno et al. // Int J Cancer . - 2005. - Vol. 117. - P.596-604

107. Kryczek, I. Cutting edge: IFN-gamma enables APC to promote memory Thl7 and abate Thl cell development /1. Kryczek, S. Wei, W. Gong, X. Shu, W. Szeliga, L. Vatan, L.Chen, G. Wang, W. // J Immunol. - 2008. - Vol. 181(9).-P.5842-5846

108. Kubo, M. Combination of adoptive immunotherapy with Herceptin for patients with HER2-expressing breast cancer / M. Kubo, T. Morisaki, H. Kuroki, et al. // Anticancer Res. - 2003. - Vol. 23. - P.4443

109. Kvistborg, P. TIL therapy broadens the tumor-reactive CD8(+) T cell compartment in melanoma patients / P. Kvistborg, C.J. Shu, B. Heemskerk, M. Fankhauser, C.A. Thrue, M. Toebes, N. van Rooij, C. Linnemann, M.M. van Buuren, J.H. Urbanus, J.B. Beltman, P. Straten, Y.F. Li, P.F. Robbins, M.J. Besser, J. Schachter, G.G. Kenter, M.E. Dudley, S.A. Rosenberg, J.B. Haanen, S.R. Hadrup, T.N. Schumacher // Oncoimmunology. - 2012. - 1(4). -P.409-418.

110. Lecuroux, C. Kidney transplantation in an elite HIV controller: limited impact of immunosuppressive therapy on viro-immunological status / C. Lecuroux, O. Lambotte, A. Saez-Cirion, C. Barbet, S.Y. Shin, F. Boufassa, F. Bastides, Y.J. Lebranchu // Infect. - 2012. - Vol. 64(6). P. 630-633.

111. Lee Y.S. T lymphocytes derived from human cord blood provide effective antitumor immunotherapy against a human tumor / Y.S. Lee, T.S. Kim, D.K. Kim // BMC Cancer. - 2011. - Vol. 11. - P. 225.

112. Lens, M. The role of vaccine therapy in the treatment of melanoma / M. Lens // Expert Opin Biol Ther. - 2008. Vol. 8(3). - P.315-323.

113. Li, Y. The activation and dynamics of cytokine expression by CD4(+) T cells and AIDS progression in HIV-1-infected Chinese individuals / Li, Y. W. Ling, H. Xu, M. Wang, C. Wu // Microb Pathog. - 2012. [Epub ahead of print]

114. Li, H. Vaccination with allogeneic GM-CSF gene-modified lung cancer cells: antitumor activity comparing with that induced by autologous vaccine / H. Li, H.J. Jiang, M.Q. Ma, F. Wei, X.M. An, X.B Ren // Cancer Biother Radiopharm. - 2007. - Vol.22(6). - P.790-798.

115. Liang, B. Regulatory T cells inhibit dendritic cells by lymphocyte activation gene-3 engagement of MHC class II / B. Liang, C. Workman, J. Lee, C. Chew, B.M. Dale, L. Colonna, M. Flores, N. Li, E. Schweighoffer, S. Greenberg, V. Tybulewicz, D. Vignali, R. Clynes // J Immunol. - 2008. -Vol.180.-P.5916-5926

116. Lodge, P. Dendritic cell-based immunotherapy of prostate cancer: immune monitoring of a phase II clinical trial / P. Lodge, L. Jones, R. Bader, et al. // Cancer Research. - 2000. - Vol. 60. - P.829

117. Lubaroff, D.M. Prostate cancer vaccines in clinical trials / D.M.Lubaroff // Expert Rev Vaccines. - 2012. - Vol. 11(7. - P. 857-868.

118. Mace, T.A. Effector CD8+ T cell IFN-y production and cytotoxicity are enhanced by mild hyperthermia / T.A. Mace, L. Zhong, K.M. Kokolus, E.A. Repasky // Int J Hyperthermia. - 2012. - Vol. 28(1). P. 9-18

119. Mantovani, A. Cancer-related inflammation / A. Mantovani, P. Allavena, A.Sica, F. Balkwill // Nature. - 2008. - Vol.454. - P.436-444.

120. Mantovani, A. Macrophages, innate immunity and cancer: balance, tolerance, and diversity / A. Mantovani, A .Sica // Curr Opin Immunol. -2010.- Vol.22(2).-P. 231-237

121. Markowicz, S. Adjuvant vaccination with melanoma antigen-pulsed dendritic cells in stage III melanoma patients / S. Markowicz, Z.I. Nowecki, P. Rutkowski, A.W. Lipkowski, M. Biernacka, A. Jakubowska-Mucka, T. Switaj, A. Misicka, H. Skurzak, H. Polowniak-Pracka // J.Med Oncol. - 2012. - Vol.29(4). - P.2966-2977

122. May, M. Ten-year survival analysis for renal carcinoma patients treated with an autologous tumour lysate vaccine in an adjuvant setting / May M., S. Brookman-May, B. Hoschke, C. Gilfrich, F. Kendel, S. Baxmann, S.Wittke, S.T. Kiessig, K. Miller, M. Johannsen // Cancer Immunol Immunother. -2010. -Vol. 59(5). - P.687-695.

123. Menetrier-Caux, C.Targeting regulatory T cells / C. Menetrier-Caux, T. Curiel, J. Faget, M. Manuel, C. Caux, W. Zou // Targ Oncol. - 2012. - Vol. 7. -P. 15-28

124. Misra, N. Cutting edge: human CD4 + CD25+ T cells restrain the maturation and antigen-presenting function of dendritic cells / N. Misra, J. Bayry, S. Lacroix-Desmazes, M.D. Kazatchkine, S.V. Kaveri // J Immunol. -2004.-Vol. 172.-P. 4676-4680

125. Mitchell, M.S. Active specific immunotherapy for melanoma: phase I trial of allogeneic lysates and a novel adjuvant / M.S. Mitchell, J Kan-Mitchell, R.A. Kempf, W. Harel, H.Y. Shau, S. Lind // Cancer Res. - 1988. - Vol. 48. -P.5883-5893.

126. Moldavan, A. Photo-electric technique for the counting of microscopical cells / A. Moldavan // Science. - 1934. - Vol.80. - P. 188-189.

127. Morton, D.L. Prolonged survival of patients receiving active immunotherapy with Canvaxin therapeutic polyvalent vaccine after complete resection of melanoma metastatic to regional lymph nodes / D.L. Morton, E.C.Hsueh, R.Essner, et al. // Ann Surg. - 2002. - Vol. 236 (4). - P.438 -448

128. Morton, D.L. Prolongation of survival in metastatic melanoma after active specific immunotherapy with a new polyvalent melanoma vaccine / D.L. Morton, Foshag LJ, Hoon DS, Nizze JA,Famatiga E, Wanek LA et al. // Ann Surg. - 1992. - Vol. 216. - 463-482.

129. Motl, S.E. Technology evaluation: Canvaxin, John Wayne Cancer Institute/CancerVax / S.E. Motl // Curr Opin Mol Ther. - 2004. Vol. 6(1). P.104-111

130. Nausch, N. NKG2D ligands in tumor immunity / N. Nausch, A. Cerwenka // Oncogene. -2008. Vol.27(45). -P.5944-5958.

131. Nestle, F.O. Vaccination of melanoma patients with peptide- or tumor lysate-pulsed dendritic cells / F.O. Nestle, S. Alijagic, M.Gilliet, Y. Sun, S. Grabbe, R. Dummer et al. // Nat Med. - 1998. - Vol. 4. - P. 328-332.

132. Nilsson, C. Optimal blood mononuclear cell isolation procedures for gamma interferon enzyme-linked immunospot testing of healthy Swedish and Tanzanian subjects / C. Nilsson, S. Aboud, K. Karlen, B. Hejdeman, W. Urassa, Biberfeld // Clin Vaccine Immunol. - 2008. -Vol. 15(4). - P.585-589

133. Oliver, C. Immunocytochemical Methods and Protocols / C. Oliver, M.C. Jamur (eds.) // Methods in Molecular Biology. - 2010. - Vol. 588. - P.416

134. O'Rourke, M.G. Immunotherapy, including gene therapy, for metastatic melanoma / M.G. O'Rourke, C.W. Schmidt, T.R. O'Rourke, K.A. Ellem // Aust N Z J Surg. -1997. - Vol. 67(12). - P.834-841.

135. Oshita, C. Dendritic cell-based vaccination in metastatic melanoma patients: Phase II clinical trial / C. Oshita, M. Takikawa, A. Kume, H. Miyata, T. Ashizawa, A. Iizuka, Y. Kiyohara, S. Yoshikawa, R. Tanosaki, N. Yamazaki, A. Yamamoto, K. Takesako, K. Yamaguchi, Y. Akiyama // Oncol Rep. - 2012. - Vol.28. - P . 1-8.

136. Palmer, D.H. A phase II study of adoptive immunotherapy using dendritic cells pulsed with tumor lysate in patients with hepatocellular carcinoma/ D.H. Palmer, R.S. Midgley, N. Mirza, E.E. Torr, F. Ahmed et al. // Hepatology. —

2009. - Vol.49(l). - P. 124-32

137. Park, J. Single-color multitarget flow cytometry using monoclonal antibodies labeled with different intensities of the same fluorochrome / J. Park, K. Han // Ann Lab Med. - 2012. - Vol. 32(3). P. 171-176.

138. Patil, S. Natural killer cells—new understanding of basic biology may lead to more e ff ective allogeneic haematopoietic stem cell transplantation: Review / S. Patil, T. Schwarer // Internal Medicine Journal. - 2009. - Vol. 39. P.639-647

139. Plosker, GL. Rituximab: a review of its use in non-Hodgkin's lymphoma and chronic lymphocytic leukaemia / GL. Plosker and D.P. Figgitt // Drugs. -2003.-Vol. 63.-P. 803.

140. Polak, J.M. Introduction to Immunocytochemistry / J.M. Polak, S. VanNoorden // BIOS Scientific - UK: Oxford. - 2003. - P. 196

141. Quach, H. Mechanism of action of immunomodulatory drugs (IMiDS) in multiple myeloma / H. Quach, D. Ritchie, A. K. Stewart et al. // Leukemia. -

2010.-Vol. 24. - P.22-32

142. Rasul A.E. Simultaneous detection of the two main proliferation driving EBV encoded proteins, EBNA-2 and LMP-1 in single B cells / A.E. Rasul, N. Nagy, E. Sohlberg, M. Adori, H.E. Claesson, G. Klein, E. Klein // J Immunol Methods. - 2012. - Vol. 385. - P. 60-70

143. Reilly, R.T. The collaboration of both humoral and cellular HER-2/neu-targeted immune responses is required for the complete eradication of HER-2/neu-expressing tumors / R.T. Reilly, J.P. Machiels, L.A.Emens, A.M. Ercolini, F.I. Okoye, R.Y Lei, D. Weintraub, E.M. Jaffee // Cancer Research. -2001.-Vol. 61.-P.880-883.

144. Richardson, P. G. Monoclonal antibodies in the treatment of multiple myeloma / P. G. Richardson, S. Lonial, A. J. Jakubowiak, J. L. Harousseau, K. C. Anderson // British Journal of Haematology. - 2011.

145. Ridolfl, L. Dendritic cell-based vaccine in advanced melanoma: update of clinical outcome / L. Ridolfl, M. Petrini, L. Fiammenghi, A.M. Granato, V. Ancarani, E. Pancisi, C. Brolli, M. Selva, E. Scarpi, L. Valmorri, S.V. Nicoletti, M. Guidoboni, A. Riccobon, R. Ridolfl // Melanoma Res. - 2011. Vol. 21(6). -P.524-529.

146. Romani, N. Generation of mature dendritic cells from human blood - an improved method with special regard to clinical applicability / N. Romani, D. Reider, M. Heuer et al. // J. Immunol. Methods. - 1996. - Vol.196. - P. 137

147. Rosenberg, S.A. Immunologic and therapeutic evaluation of a synthetic peptide vaccine for the treatment of patients with metastatic melanoma / S.A. Rosenberg, J.C. Yang, D.J. Schwartzentruber, P. Hwu, F.M. Marincola, S.L. Topalian et al. // Nat Med. - 1998. - Vol.4. - P.321-327

148. Sallusto, F. Dendritic cells use macropinocytosis and the mannose receptor to concentrate macromolecules in the major histocompatibility complex class II compartment: downregulation by cytokines and bacterial products / F. Sallusto, M. Cella, C. Danieli, et al. // J. Exp. Med. - 1995. - Vol.182. -P.389

149. Sander, I. Development and application of mold antigen-specific enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) to quantify airborne antigen exposure / I. Sander, E. Zahradnik, V. van Kampen, S. Kespohl, H. Stubel, G. Fischer, T. Briming, J. Btinger, M. Raulf-Heimsoth // J Toxicol Environ Health. - 2012. -Vol. 75(19-20).- 1185-1193.

150. Sanz, L. Antibody-based antiangiogenic cancer therapy / L. Sanz, L. Alvarez-Vallina // Expert Opin Ther Targets. - 2005. - Vol. 9. - P. 1235-1245.

151. Schadendorf, D. Dacarbazine (DTIC) versus vaccination with autologous peptide-pulsed dendritic cells (DC) in first-line treatment of patients with metastatic melanoma: a randomized phase III trial of the DC study group of the DeCOG / D. Schadendorf, S. Ugurel, B. Schuler-Thurner, F.O. Nestle, A.Enk, E.B. Brocker et al. // Ann Oncol. - 2006. - Vol.17. - P.563-570

152. Schreurs, M. Dendritic cells break tolerance and induce protective immunity against a melanocyte differentiation antigen in an autologous melanoma model / M. Schreurs, A. Eggert, A. de Boer, et al. // Cancer Res. -2000.-Vol. 60. P. 6995

153. Sedgwick, J. D. A solid-phase immunoenzymatic technique for the enumeration of specific antibody-secreting cells / J. D. Sedgwick, and P. G. Holt // J. Immunol. Methods. - 1983. Vol.57. -P. 301-309.

154. Shakes, D.C. Immunofluorescence microscopy / D.C. Shakes, D.M. Miller, M.L. Nonet // Methods Cell Biol. - 2012. - Vol.107. - P.35-66.

155. Shanker, A. Cooperativity of adaptive and innate immunity: implications for cancer therapy / A. Shanker, Marincola F.M. // Cancer Immunol Immunother. -2011. - Vol.60(8): 1061-1074

156. Shurin, G.V. Loss of new chemokine CXCL14 in tumor tissue is associated with low infiltration by dendritic cells (DC), while restoration of human CXCL14 expression in tumor cells causes attraction of DC both in vitro and in vivo / G.V. Shurin, R.L. Ferris, I.L. Tourkova, L. Perez, A. Lokshin, L. Balkir, B. Collins, G.S. Chatta, M.R. Shurin. // J Immunol. - 2005. - Vol. 174. - P.5490-5498.

157. Sigal, L.H. Basic science for the clinician 58: IgG subclasses / L.H. Sigal // J Clin Rheumatol. — 2012. - Vol. 18(6). -P.316-318.

158. Simmons, A.D. Li В., GM-CSF-secreting cancer immunotherapies: preclinical analysis of the mechanism of action / A.D. Simmons, M. Gonzalez-Edick ,et al. // Cancer Immunol. Immunother. - 2007. - Vol. 56(10).-P. 1653 -1665.

159. Simons, J. Bioactivity of autologous irradiated renal cell carcinoma vaccines generated by ex vivo granulocyte-macrophage colony-stimulating factor gene transfer / J. Simons, E. Jaffee, C. Weber // Cancer Res. - 1997. Vol. 57.-P. 1537-1546.

160. Skoog, L. Immunocytochemistry: an indispensable technique in routine cytology / L. Skoog, E. Tani.// Cytopathology. - 2011. - 22(4). - P. 215-229

161. Smith, S. M. Human CD8+ CTL specific for the mycobacterial major secreted antigen 85A / S. M. Smith, R. Brookes, M. R. Klein, A. S. Malin, Lukey, P. T., King, A. S. et al. // J. Immunol. -2000. - Vol.165. - P.7088-7095.

162. Smolewski, P. Detection of caspases activation by fluorochrome-labeled inhibitors: multiparameter analysis by laser scanning cytometry / P. Smolewski, E. Bedner, L. Du, T.-C. Hsieh, W.M. Wu, D.J. Phelps, Z. Darzynkiewicz // Cytometry. - 2001. - Vol. 44. - P.73-82.

163. Soloski, M.J. Recognition of tumor cells by the innate immune system / M.J. Soloski // Curr. Opin. Immunol. - 2001. - Vol. 13. - P. 154-162

164. Somekawa, S. TmemlOO, an ALK1 receptor signaling-dependent gene essential for arterial endothelium differentiation and vascular morphogenesis / S. Somekawa, K. Imagawa, H. Hayashi, M. Sakabe, T. Ioka, G.E. Sato, K. Inada, T. Iwamoto, T. Mori, S. Uemura, O. Nakagawa, Y. Saito // Proc Natl Acad Sci USA. - 2012. -Vol. 109(30). - P. 12064-12069

165. Sondak, V.K. Adjuvant immunotherapy of resected, intermediate-thickness, node-negative melanoma with an allogeneic tumor vaccine: overall results of a randomized trial of the Southwest Oncology Group / V.K. Sondak, P.Y. Liu, R.J. Tuthill, R.A. Kempf, J.M. Unger, J.A. Sosman et al. // J Clin Oncol. - 2002. - Vol. 20. - P. 2058-2066.

166. Stark, J. Interferon-alpha and chemohormonal therapy for patients with advanced melanoma: final results of a phase I-II study of the Cancer Biotherapy Research Group and the Mid-Atlantic Oncology Program Dillman / J. Stark, R. Schulof, et al. // Cancer. - 1998. - 82. - P. 1677.

167. Steele, J.C. Phase I/II trial of a dendritic cell vaccine transfected with DNA encoding melan A and gplOO for patients with metastatic melanoma / J.C. Steele, A. Rao, J.R. Marsden, C.J. Armstrong et al. // Gene Ther. - 2011. -Vol.l8(6). -P.584-93.

168. Steinman, R. Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice: I. morphology, quantitation, tissue distribution / R. Steinman, Z. Cohn // J. Exp. Med. - 1973. - Vol.137. - P. 1142

169. Tada, F. Phase I/II study of immunotherapy using tumor antigen-pulsed dendritic cells in patients with hepatocellular carcinoma / F. Tada, M. Abe, M. Hirooka, Y.

170. Ikeda, Y. Hiasa, Y. Lee et al. // Int J Oncol. - 2012. - Vol. 41(5). - P.1601-1609.

171. Thomas, A. Immunotherapies for non-small-cell lung cancer and mesothelioma / A. Thomas, R.Hassan // Lancet Oncol. - 2012. - Thomas, A. Vol.l3(7). -P.301-310.

172. Thomas, S.K. Lymphoma vaccine therapy: next steps after a positive, controlled phase III clinical trial / S.K. Thomas, L.W. Kwak // Semin Oncol. - 2012. - Vol. 39(3). - P. 253-262.

173. Thurner, B. Vaccination with Mage-3A1 peptide-pulsed mature, monocyte-derived dendritic cells expands specific cytotoxic T cells and induces regression of some metastases in advanced stage IV melanoma / B. Thurner, I. Haendle, C. Roder et al. // J. Exp. Med. - 1999. - Vol.190. - P. 1669

174. Tokunaga, N. Human monocyte-derived dendritic cells pulsed with wildtype p53 protein efficiently induce CTLs against p53 overexpressing human cancer cells / N. Tokunaga, T. Murakami, Y. Endo, et al // Clin. Cancer Res. -2005.-Vol.11.-P.1312

175. Trepiakas, R. Vaccination with autologous dendritic cells pulsed with multiple tumor antigens for treatment of patients with malignant melanoma: results from a phase I/II trial / R. Trepiakas, A. Berntsen, S.R. Hadrup, J. Bj0rn, P.F. Geertsen, et al. // Cytotherapy. - 2010. - Vol. 12(6). P. 721-734

176. Tripathy A.S. Cytokine profiles, CTL response and T cell frequencies in the peripheral blood of acute patients and individuals recovered from hepatitis E infection / A.S. Tripathy, R. Das, S.B. Rathod, V.A. Arankalle // PLoS One. -2012.-Vol. 7(2):e31822

177. Tsung, K. Macrophages as effector cells in interleukin 12-induced T cell-dependent tumor rejection / K. Tsung, J.P. Dolan, Y.L. Tsung, J.A. Norton // Cancer Res. - 2002. - Vol. 62. - P.5069-5075.

178. Tute, R.M. Flow cytometry and its use in the diagnosis and management of mature lymphoid malignancies / R.M. Tute // Histopathology. - 2011. -Vol.58(l). - P.90-105.

179. Uehara, K. Patterns of failure after multimodal treatments for high-grade glioma: effectiveness of MIB-1 labeling index / K. Uehara, T. Sasayama, D. Miyawaki, H. Nishimura, K. Yoshida, Y. Okamoto, N. Mukumoto, H. Akasaka, M. Nishihara, O. Fujii, T. Soejima, K. Sugimura, E. Kohmura, R. Sasaki // Radiat Oncol. - 2012. - Vol.7. - P. 104

180. Utiger, R.D. Extraction and radioimmunoassay of growth hormone in human serum / R.D. Utiger // J Clin Endocrinol Metab. - 1964. - Vol.24. -P.60-67.

181. Van Tendeloo, V.F. Induction of complete and molecular remissions in acute myeloid leukemia by Wilms ' tumor 1 antigen-targeted dendritic cell vaccination / V.F. Van Tendeloo, A.V. de Velde, A. Van Driessche, N. Cools//Proc Natl Acad Sci USA. - 2010.-Vol.107.-P.13824 - 13829.

182. Wallace, P. K. Tracking antigen-driven responses by flow cytometry: monitoring proliferation by dye dilution / P. K. Wallace, J. D. Tario, J. L. Fisher, S. S.

183. Wallace, M. S. Ernstoff, K. A. Muirhead // Cytometry. - 2008. - Vol. - 73. -P. 1019-1034

184. Wang, F. Phase I trial of a MART-1 peptide vaccine with incomplete Freund's adjuvant for resected high-risk melanoma / F. Wang, E. Bade,

C.Kuniyoshi, et al.: // Clin.. Cancer Res. - 1999. - Vol. 5. - P.2756.

185. Wang, Z.P., J. Pan, Y.H. Huang // Mol Med Report. - 2011. - Vol.4(3). - P. 425-429

186. Ward, J.E. GVAX: an allogeneic, whole-cell, GM-CSF-secreting cellular immunotherapy for the treatment of prostate cancer / J.E. Ward,

D.G. McNeel // Expert Opin. Biol. Ther. - 2007. - Vol. 7(12). - P. 18931902

187. Weiss-Steider, B. Expression of MICA, MICB and NKG2D in human leukemic myelomonocytic and cervical cancer cells / B.Weiss-Steider, I. Soto-Cruz, C.A. Martinez-Campos, J.F. Mendoza-Rincon // J Exp Clin Cancer Res. - 2011. Vol.10. - P. 30:37.

188. Wheeler, C.J. Vaccination elicits correlated immune and clinical responses in glioblastoma multiforme patients / C.J. Wheeler, K.L. Black, G. Liu, M. Mazer, X.X. Zhang, S. Pepkowitz, D. Goldfinger, H. Ng, D. Irvin, J.S. Yu // Cancer Res. - 2008. - Vol.68(14). - P.5955-5964.

189. Whiteside, T.L. Immune monitoring of clinical trials with biotherapies / Whiteside, T.L. // Adv Clin Chem. - 2008. - Vol.45. - P. 75-97.

190. Whiteside, T.L. The role of death receptor ligands in shaping tumor microenvironment / T.L. Whiteside // Immunol Invest. - 2007. - Vol.36. -P.25-46.

191. Yamaguchi, S. Dendritic cell-based vaccines suppress metastatic liver tumor via activation of local innate and acquired immunity / S. Yamaguchi, T. Tatsumi, T. Takehara et al. // Cancer Immunology,Immunotherapy. - 2008. -Vol. 57.-P. 1861-1869

192. Yang, E.J. Enzyme-linked immunosorbent assay of IL-8 production in response to silver nanoparticles / E.J. Yang, J. Jang, D.H. Lim, I.H. Choi // Methods Mol Biol. - 2012. - Vol. 926. P. 131-139.

193. Yang, J.C. Melanoma vaccines / J.C. Yang // Cancer J. - 2011. - Vol. 17(5). -P.277-282

194. Yoshitomi, M. Personalized peptide vaccination for advanced biliary tract cancer: IL-6, nutritional status and pre-existing antigen-specific immunity as possible biomarkers for patient prognosis / M. Yoshitomi, S. Yutani, S. Matsueda, T. Ioji, N. Komatsu, S. Shichijo, A. Yamada, K. Itoh, T. Sasada, H. Kinoshita / Exp Ther Med. - 2012. - Vol. 3(3). - P.463-469

195. Yuan, Y. Tenascin-X is anovel diagnostic marker of malignant mesothelioma / Y. Yuan, D.A. Nymoen, T. H. Satvnes et al. // Am J Surg Pathol. -2009. - Vol.33. -P.1673-1682

196. Zeestraten, E.C. Addition of interferon-alpha to the p53-SLP(®) vaccine results in increased production of interferon-gamma in vaccinated colorectal cancer patients: A phase I/II clinical trial / E.C. Zeestraten, F.M. Speetjens, M.J. Welters et al. // Int J Cancer. - 2012 Sep 5.. [Epub ahead of print].

197. Zhang, S. Review: dendritic cell-based vaccine in the treatment of patients with advanced melanoma / S. Zhang, Q. Wang, B. Miao // Cancer Biother Radiopharm. - 2007. - Vol.22 (4). - P.501 - 507

198. Zhang, C. Establishment of reverse direct ELISA and its application in screening high-affinity monoclonal antibodies / C. Zhang, R. Li, Y. Li, C. Song, Z. Liu, Y. Zhang, Z. Xu, R. Zhuang, J. Yi, A. Yang, K. Yang, B. Jin // Hybridoma (Larchmt). - 2012. - Vol. 31(4). -P. 284-288

199. Zhao, J.J. Double labeling and comparison of fluorescence intensity and photostability between quantum dots and FITC in oral tumors / J.J. Zhao, J. Chen, Z.P. Wang, J. Pan, Y.H. Huang // Mol Med Report. - 2011. - Vol.4(3). -P. 425-429

200. Zijlmans, H.J. Role of tumor-derived proinflammatory cytokines GM-CSF, TNF-alpha, and IL-12 in the migration and differentiation of antigen-presenting cells in cervical carcinoma / H.J. Zijlmans, G.J. Fleuren, H.J. Baelde, P.H. Eilers, G.G. Renter, A. Gorter // Cancer. - 2006. - Vol. 109. -P.556 - 565