Иммунокоррекция экспериментального туберкулеза у мышей с помощью воздействия на Т-супрессоры тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Батридинова, Зульфия Мударисовна

• Батридинова, Зульфия Мударисовна
• кандидат биологических наук
• 1991

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Батридинова, Зульфия Мударисовна

ВВЕДЕНИЕ

Глава I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Иммунный ответ при туберкулезе 8 1.1.1, Клеточный иммунный ответ 9 I. 1.2. Иммуносупрессия и анергия

1.1.3. Адъювантный эффект

1.1.4. Иммунохимия антигенов и молекулярная иммунология

1.1.5. Иммунодиагностика

1.1.6. Иммуногенётика '

1.2. Анергия и супрессия иммуирго. ответа при микобактериальных инфекциях

1.2.1. Лепра

1.2.2. Туберкулез

1.2.3. Клинические аспекты анергии

1.2.4. Супрессия ответа при экспериментальной

BCG - инфекции и туберкулезе

1.2.5. Другие виды микобактерий

Глава II МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

11.1. Животные

11.2. Заражение и вакцинация

11.3. Антитела 35 И.4. Спленэктомия мышей

11.5. Обработка мышей циклофосфамидом

11.6. Реакция ГЗТ (туберкулиновая проба)

11.7. Пролиферативные тесты

Глава V ПОКАЗАТЕЛИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОГО ИММУНИТЕТА И .ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ТУБЕРКУЛЕЗА У СПЛЕНЭКТОМИ-РОВАННЫХ МЫШЕЙ

Глава VI ВЛИЯНИЕ ЦИКЛОФОСФАМИДА НА ТЕЧЕНИЕ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ТУБЕРКУЛЕЗА

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунокоррекция экспериментального туберкулеза у мышей с помощью воздействия на Т-супрессоры»

Актуальность проблемы. Течение хронической туберкулезной инфекции сопровождается выраженными изменениями иммунологического статуса организма-хозяина (Авербах М.М. и др., 1985, Biozzi G.et. al., 1985). Эти изменения оказывают решающее влияние на исход заболевания и во многом определяются регуляцией иммунного ответа, осуществляемой лимфоидными клетками, среди которых существенная роль принадлежит Т-супрессорам.

Данная субпопуляция иммунокомпетентных клеток ответственна, в частности, за поддержание иммунологического гомеостаза организма, поскольку ею регулируются фагоцитоз, гранулёмообра-зование, толерантность, иммунный ответ (Kaufmann S., 1989), т.е. механизмы естественной и приобретенной резистентности при туберкулезе.

В то же время, активация Т-супрессоров, характерная для прогрессирующего течения туберкулеза, приводит к неспособности организма развивать эффективный иммунный ответ против возбудителя (Lagrange P., Hurtrel В., 1988). В связи с этим разработка методов специфического и неспецифического воздействия на эту субпопуляцию клеток с целью их элиминации или блокирования может оказаться одним из путей коррекции иммунологических нарушений и явиться чрезвычайно перспективным подходом для лечения ряда хронических инфекционных заболеваний, в том числе туберкулеза.

Цель работы. Целью настоящего исследования является анализ иммунокорригирующей и протективной эффективности различных специфических и неспецифических воздействий на Т-лимфоциты-супрессоры при экспериментальном туберкулезе у мышей.

Задачи работы. Для достижения указанной цели в работе были поставлены следующие задачи:

1. Оценить выраженность противотуберкулезного иммунитета и степень резистентности к туберкулезной инфекции при воздействии на Т-супрессоры с помощью антисыворотки к их поверхностным маркерам.

2. Установить характер влияния на течение экспериментального туберкулеза и иммунный статус мышей спленэктомии, выполненной в различные сроки после заражения мышей.

3. Рассмотреть особенности изменения тех же параметров после введения зараженным мышам циклофосфамида.

Научная новизна. В работе впервые разработана система анализа различных воздействий, влияющих на количественное содержание и функциональную активность Т-супрессоров при экспериментальном туберкулезе.

Разработан новый подход к получению и применены антисыворотки против генетического маркера Т-супрессоров. Дано теоретическое обоснование их назначения на различных этапах экспериментального туберкулеза и в определенных дозах.

Обоснованы возможности применения неспецифических воздействий, обладающих преимущественным эффектом на систему Т-супрессоров. Установлены пределы эффективности их использования при туберкулезной инфекции у мышей.

Во всех экспериментах помимо анализа специфического воздействия на Т-супрессоры показан характер изменения показателей противотуберкулезного иммунитета in vivo и in vitro, что позволяет судить о степени иммуномодулирующих свойств каждого воздействия.

Практическая значимость. Проведенные исследования выявили конкретные практические перспективы использования ряда специфических и неспецифических воздействий в качестве иммуно-корригирующих средств с учетом их преимущественного влияния на субпопуляцию Т-лимфоцитов-супрессоров. Это имеет важное научно-практическое значение, если иметь в виду роль и место супрессорных механизмов в развитии и поддержании туберкулезной инфекции.

До настоящего времени, по существу, не обосновано применение подобных иммуномодулирующих средств в качестве корректоров иммуннодефицитных состояний, развивающихся на определенных стадиях туберкулезного процесса, в то время как их назначение существенно влияет на иммунный статус и степень протекции при экспериментальном туберкулезе.

Положения, выносимые на защиту.

1. При экспериментальном туберкулезе у мышей нарастает активность супрессорных клеток, главным образом, Т-лимфоцитов.

2. С помощью многократного введения высокоспецифической алло-антисыворотки против генетического маркера Т-супрессоров (анти -1 - Jk) удается усилить показатели противотуберкулезного иммунитета и достоверно пролонгировать жизнь мышей, зараженных вирулентными М. туберкулеза.

3. Спленэктомия, выполненная через 14 дней после заражения мышей М. туберкулеза, способствует снижению супрессорной активности Т-лимфоцитов и макрофагов, главным образом, за счет элиминации значительной части пула этих клеток и достоверно пролонгирует жизнь экспериментальных животных.,

4. Обработка циклофосфамидом мышей, зараженных туберкулезом, хотя и обладает антисупрессорным действием, но в результате негативного влияния циклофосфамида на процесс гранулёмообра7 зования и регуляцию специфических воспалительных реакций, приводит к ускоренному развитию тяжелой формы экспериментальной туберкулезной инфекции.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на V Конференции молодых ученых НИИ фтизиатрии и пульмонологии МЗ Уз ССР (1989) и на Конференции молодых ученых и специалистов филиала Института иммунологии МЗ СССР (1990).

Диссертация апробирована на Ученом Совете НИИ фтизиатрии и пульмонологии МЗ УзССР 21 июня 1990 года.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 102 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов, использованных в работе, 4 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, включающего 16 отечественных и 129 иностранных работ. Диссертация иллюстрирована 5 рисунками и 10 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Батридинова, Зульфия Мударисовна

ВЫВОДЫ: При туберкулезной инфекции у мышей происходит активация суп-рессорных иммунокомпетентных клеток. В их число входят макрофаги и Т-супрессоры, причем последние, по крайней мере в селезенке зараженных животных, играют ведущую роль в подавлении иммунного ответа.

2. Существенную роль в общем супрессорном эффекте туберкулезной инфекции играют Т-супрессоры - индукторы с фенотипом CD4+CD8" I - J+. Эти клетки подавляют не только пролиферативный ответ в реакциях in vitro, но и гиперчувствительность замедленного типа in vivo.

3. Полученные "новым методом аллоантисыворотки к рецепторной детерминанте супрессорных клеток I - J являются высокоактивными и специфическими. Их воздействие на популяцию Т-супрессоров - индукторов приводит к отмене ингибирующего действия последних в тестах in vitro. j

4. Аллоантисыворотка анти - I - Jk - при ее введении зараженным животным обладает выраженным иммунотерапевтическим действием в отношении туберкулезной инфекции. Этот эффект, вероятно, связан со стимуляцией клеточных иммунологических механизмов при отсутствии синтеза антител к антигенам микобактерий.

5. Спленэктомия у зараженных туберкулезом мышей оказывает благоприятное влияние на течение экспериментального туберкулеза. Наиболее выражен этот эффект при спленэктомии через 2 недели после заражения, что связано с удалением значительной части локализо

83 ванной в селезенке эффекторной популяции Т-супрессоров и супрессорных макрофагов.

6. Антисупрессорное действие циклофосфамида касается не только пролиферативного ответа in vitro, но и синтеза антител к микобактериям и воспалительных процессов в органах. Вместе с тем, он не действует на супрессию гиперчувствительности замедленного типа. Суммарный эффект циклофосфамида весьма неблагоприятен для течения туберкулезной инфекции у мышей.

84

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Супрессорные механизмы играют важную роль в регуляции противоинфекционного иммунитета при заражении самыми разнообразными патогенами, но, пожалуй, в наибольшей степени при инфекциях с внутриклеточной локализацией возбудителя. В большинстве работ,как правило, установлен сам факт супрессии иммунного ответа при отдельных инфекциях, в меньшем количестве исследований изучены механизмы супрессии и участвующие в ней субпопуляции лимфоидных клеток и почти нет данных о возможности регуляции течения инфекционного процесса путем селективного влияния на клетки-супре-ссоры.

При экспериментальном туберкулезе выполнены лишь единичные исследования, посвященные данному аспекту регуляции противоинфекционного иммунитета и то, главным образом, касающиеся иммуногенетических вариантов воздействия с помощью специфических антисывороток против маркеров Т-лимфоцитов-супрессоров (Апт А.С. и др., 1984; Авербах М.М. и др., 1985).

Но и этот раздел выполнен в основном для анализа механизмов индукции специфического иммунного ответа при заражении туберкулезом, а не для испытания возможностей применения антисывороток в качестве иммуномодулирующих средств. Еще меньше данных о влиянии на течение экспериментального туберкулеза других способов преимущественной элиминации Т-лимфоцитов-супрессоров, в частности с помощью спленэктомии, выполненной после заражения мышей или обработки мышей циклофосфамидом.

Поэтому целью нашего исследования был сравнительный анализ эффективности различных воздействий на Т-лимфоциты-супрессоры при экспериментальном туберкулезе у мышей.

Были изучены 3 способа воздействия на Т-супрессоры:

- с помощью курса лечения специфической аллоантисывороткой к поверхностным маркерам Т-лимфоцитов-супрессоров;

- путем спленэктомии экспериментальных животных в разные сроки после их заражения туберкулезом;

- в результате обработки зараженных животных циклофосфамидом, иммуно-депрессантом преимущественно действующим на клетки-супр-ессоры.

Для решения этих задач исследования были выполнены на мышах различных линий, главным образом CBA/Sto, зараженных вирулентными М. туберкулеза H37Rv или вакцинированных с помощью BCG. В качестве критериев эффективности предложенных методов воздействия на Т-супрессоры использованы иммунологические тесты in vivo и in vitro, оценивающие показатели клеточного и гуморального иммунитета и характер выживаемости животных.

Но прежде чем оценить эффективность того или иного метода воздействия на Т-супрессоры, необходимо было продемонстрировать уровень супрессии иммунного ответа при туберкулезе у мышей.

Для получения прямых доказательств развития супрессорных механизмов в результате заражения мышей туберкулезом и выяснения природы этих клеток были выполнены эксперименты с сингенным адоптивным переносом спленоцитов от заражженных вирулентными микобактериями мышей вакцинированным животным. Перенос осуществлялся как необработанной суспензией, так и с предварительной обработкой клеточной суспензии антииммуноглобулиновой сывороткой и антисывороткой против маркера Т-лимфоцитов. Кроме того, были использованы 2 способа истощения макрофагов в популяции клеток-суп-рессоров - абсорбцией на пластике и удаление фагоцитов с помощью карбонильного железа.

Полученные данные позволили сделать вывод, что иммуносупрессия возникает при любом ответе зараженного животного на микобактериаль-ные антигены, но прогрессирование болезни сопровождается нарастанием активности супрессорных клеток, причем главным образом Т-лимфоцитов-супрессоров, так как обработка переносимой взвеси антисывороткой против маркера Т-лимфоцитов Thy 1 полностью отменяла супрессию.

В то же время удаление фагоцитов из переносимой взвеси спле-ноцитов приводит к некоторому, но далеко не полному повышению пролиферативной активности тестируемых клеток. Это доказывает, что в супрессии специфического противотуберкулезного иммунного ответа макрофаги-супрессоры играют определенную, но далеко не главную роль, а подавление ГЗТ и пролиферативной активности лимфоцитов осуществляется в основном за счет Т-лимфоцитов-супрессоров.

Получив данные о существенной роли Т-лимфоцитов-супрессоров в регуляции противотуберкулезного иммунитета и для проверки гипотезы о необходимости блокады (или элиминации) этой субпопуляции Т-клеток на определенных этапах туберкулезной инфекции, нами были применены три способа воздействия на эти клетки, используя разные точки приложения:

- против маркеров-предшественников Т-супрессоров (с помощью анти -I-J- сыворотки);

- за счет удаления значительной части уже сформировавшейся эффек-торной популяции супрессорных клеток (спленэктомия мышей в определенные сроки после их заражения туберкулезом);

- путем иммунохимического воздействия на всю популяцию Т-лимфоцитов-супрессоров (обработка животных циклофосфамидом);

Для оценки первого варианта воздействия на Т-супрессоры были получены высокоэффективные антисыворотки против аллелей I - J и

I - Js. Два вида антисыворотки использовали для проверки аллельной специфичности полученных I - J - сывороток.

Прежде чем назначать антисыворотки in vivo, необходимо было провести ряд абсорбции, особенно для того, чтобы исключить наличие в антисыворотке антиидиотипических антител. Для этого полученные антисыворотки абсорбировали клетками линии мышей-реципиентов, на которых индуцирован такой же идиотип как на клетках линии-донора, т.е. использовали для абсорбции клетки линии-реципиента, у которых предварительно индуцирована иммуносупрессия эритроцитами барана. В результате были получены анти - I - J - сыворотки, в которых были истощены антиидиотипические антитела. к

•Для проверки иммунотерапевтического эффекта анти - I - J - сыворотки мы применили шестикратное введение антител по сравнению с двукратным, использованным ранее (Апт А.С. и др., 19846). Подобный способ введения обладал более выраженным антисупрессорным эффектом, особенно специфическим в отношении клеточного ответа на PPD. Это приводило к определенному усилению клеточного иммунного ответа in vivo и in vitro у зараженных мышей и некоторому увеличению срока жизни животных, хотя в заключительной фазе болезни происходило полное подавление ответа на шестикратном и двукратном введении антител. Важно отметить, что при подобном лечении усиления показателей гуморального иммунитета не было. Следует подчеркнуть, что в обоих случаях и срок жизни мышей, и показатели клеточного иммунитета были достоверно выше, чем у зараженных необработанных мышей.

Как мы уже отмечали, не существенные различия шести- и двукратного введения анти -1 - Jk -сыворотки могут быть связаны, с одной стороны, с тем, что наиболее важную антисупрессорную роль играет воздействие на индукторную популяцию Т- супрессоров или даже их предшественников, а с другой стороны, многократное введение анти - I - J антител приводит к развитию ответа на сами антитела, нейтрализуя их действие.

Как бы то ни было, подобный способ иммунотерапии оказался эффективным и, с нашей точки зрения, весьма перспективным в качестве возможного патогенетического средства лечения туберкулеза.

Также весьма позитивные результаты дали исследования, выполненные по анализу выраженности показателей противотуберкулезного иммунитета и особенностей течения инфекции у спленэктомированных мышей. Но эффективность этого метода была весьма различной в зависимости от сроков, когда после заражения животных было выполнено удаление селезенки.

Если показатели противотуберкулезного иммунитета и выживаемости мышей, спленэктомированных через три и семь дней после заражения мало отличаются от интактных зараженных животных, то при спленэк-томии через 14 дней после заражения выявляются достоверные различия. Прежде всего это касается показателей клеточного иммунитета, которые были значительно выше, чем у интактных зараженных мышей.

Достоверно различалась в сравниваемых группах и выживаемость мышей. Средний период жизни животных, спленэктомированных через 14 дней после заражения, был достоверно выше, чем у интактных зараженных животных (56,3± 3,4 и 43,8± 1,2 дня соответственно).

Таким образом, спленэктомия, выполненная через 14 дней после заражения мышей туберкулезом, т.е. в период существенного увеличения в организме зараженных туберкулезом животных супрессор-ных эффекторных клеток, главным образом Т-лимфоцитов, в значительной степени локализующихся в селезенке, обладает выраженным положительным иммуномодулирующим действием. Другими словами, спленэктомия эффективна тогда, когда необходимо удалить по возможности большую часть эффекторных Т-лимфоцитов-супрессоров, которых не удалить другим способом.

В то же время суммарный эффект лечения зараженных туберкулезом мышей циклофосфамидом оказался негативным несмотря на то, что циклофосфамид обладает антисупрессорным эффектом. Но наряду с отменой супресии, за счет действия на предшественники Т-супрессоров, циклофосфамид сокращает срок жизни зараженных животных. Как мы уже отмечали, причиной этого могут быть побочные эффекты цикло-фосфамида, приводящие, в частности, к нарушению развития специфических гранулем, с одной стороны, и вовлечению в иммунный ответ тех клеточных популяций, которые оказывают повреждающее действие на различные ткани организма-хозяина.

Кроме того, наряду с незначительным усилением клеточного иммунного ответа отмечено достоверное возрастание уровня специфических противотуберкулезных антител, что является неблагоприятным прогностическим признаком при туберкулезе. Возможно, это связано с разной чувствительностью Т-супрессоров, регулирующих ГЗТ и антителообразование к циклофосфамиду.

Следовательно, можно предположить, что введение циклофосфамида нарушает регуляцию воспалительного процесса в инфицированных органах, что приводит в результате элиминации Т-супрессоров к гиперпродукции антител и подавлению клеточных иммунологических реакций.

Таким образом, циклофосфамид, хотя и обладает антисупрессорным действием, не может использоваться в качестве иммуномодулятора при туберкулезе.

Мы сравнили три метода достаточно избирательного действия на Т-лимфоциты - супрессоры, принципиально отличающиеся как по своему характеру, так и точкам приложения по отношению к различным субпопуляциям Т-супрессоров. Так, антисыворотка против маркеров Т-супрес

81 соров действует, главным образом, на индукторную фазу образования этих клеток, циклофосфамид - на клетки-предшественники Т-супрессо-ров, а спленэктомия зараженных туберкулезом мышей удаляет эффек-торную популяцию Т- супрессоров. Эффект при этом весьма различен. В то время каканти -1 - J - сыворотка и спленэктомия суммарно обладают положительным эффектом, обработка животных циклофосфамидом оказывает отрицательное действие и этот метод не может быть рекомендован для дальнейшего анализа и возможного практического применения. В то же время весьма перспективным представляется комбинированное применение спленэктомии и антисыворотки против маркеров Т- супрессоров, что требует дальнейших экспериментальных исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Батридинова, Зульфия Мударисовна, 1991 год

1. Авербах М.М., Мороз A.M., Апт А.С., Никоненко Б.В., Имму-ногенетика инфекционных заболеваний — М: Медицина, 1985. — 253 с.

2. Авербах М.М., Седин Г.З., Литвинов В.И., Мороз A.M., Павлова В.Т. — Методика определения местной реакции на туберкулин у мышей // Пробл. туб. — 1978. — № 5. — С. 68-70.

3. Апт А. С. Экспрессия генов класса II в регуляторных популяциях Т-лимфоцитов мыши и возможный механизм генетической рестрикции на области I комплекса Н-2 // Генетика. — 1987. —Т. 23, № 12. —С. 2098-2103.

4. АптА.С., Мороз A.M., Абрамова З.П. и др. Влияние специфической аллоантисыворотки Т-супрессоров на сопротивляемость мышей к туберкулезной инфекции // Бюлл. экспер. биол. мед. — 1983. Ns5.— С. 78-81.

5. АптА.С., Мороз A.M., Никоненко Б.В.Абрамова З.П.Авербах М. М. Воздействие специфической аллоантисыворотки против Т-супрессоров на показатели клеточного иммунитета при экспериментальном туберкулезе у мышей // Иммунология. — 1984. — № 5. — С. 26-28.

6. АптА.С., Никоненко Б.В., Авербах М.М. Два типа экспрессии продукта аллеля l-Jk комплекса'Н-2 на лимфоидных клетках мышей // Иммунология. — 1984. — N2 1. — С. 37-40.

7. Апт А.С., Никоненко Б.В., Мороз A.M., Авербах М.М. Способкполучения антисыворотки против антигенной детерминанты I-J рецептора Т-супрессоров: Авт. свид-во № 1470059, 1988.

8. Anf A.C., Мороз A.M., Никоненко Б.В., Авербах М.М. Генетический анализ факторов, детерминирующих воспри-имчивость ктуберкулезу // Бюлл. эксп. биол. мед. —1982. — №12. — С. 83-85.

9. Гильбурд Б.Ш. Выделение аффинной хроматографией мико-бактериального антигена и его использование в серодиагностике туберкулеза: Автореф. дис. канд. мед. наук. — М, 1987. — 18 с.

10. Дик Дж. Иммуногологические аспекты инфекционных заболеваний М.: Медицина, 1982. — 574 с.

11. Крамник И.Б. Взаимодействие иммунокомпетентных клеток легкого при экспериментальном туберкулезе у мышей //Сборник трудов ЦНИИ туберкулеза Минздрава СССР. — М., 1990. — Т. 52. — С. 131-134.

12. Крамник И.Б., Апт А.С., Мороз A.M. Супрессия иммунного ответа клетками легкого при экспериментальном туберкулезе // Бюлл. эксп. биол. мед. — 1990. — № 7. — С. 77-80.

13. Крамник И.Б., Мороз A.M., Апт А.С. Клеточные меха- низмы супрессии пролиферации Т-лимфоцитов клетками легкого при экспериментальном туберкулезе // Бюлл. эксп. биол. мед. — 1990.— № 8. — С. 172-176.

14. Плохинский Н.А. Биометрия. — М.: МГУ, 1970—367 с.

15. Поспелов Л.Е., Серова Л.Д., Маленко А.Ф, Литви-нов В. И. Изучение связи распределения антигенов локуса DR системы HLA и туберкулеза в различных популяциях // Пробл. туб. — 1987. — № 10. — С. 54-56.

16. Alkan S. Antigen-induced proliferation assay for mouse T lymphocytes. Response to a monovalent antigen // Eur. J. Immunol.1978. — V. 8, № 7. — P. 112-118.

17. Allison A. Mechanisms by which activated macrophages inhibit lymphocyte responses // Immunol. Rev. — 1978. — V.40, № 4. — P. 3-24.

18. Amlot P., Hayes A. Impaired human antibody response to the thymus-independent antigen DNP- Ficoll, after splenectomy // Lancet.— 1985. — N2 8. — P. 1008-1011.

19. Anacker R., List R., Mann R., Wiedbrauk D. Antigenic heterogeneity in high-and low-virulence strains of Rickettsia vickettsia revealed by monoclonal antibodies // Infec. Immun.— 1986. — V. 51.1. P. 653-665.

20. Bennett J., Marsh J. Relationship of BCG-inlucel suppressor cells to hemapoietic precursor cells // Cancer Res. — 1980. — V. 40.1. P. 80-85.

21. Bloom B. Learning from leprosy: A perspection on immunology and the third world // J. Immunol. — 1986. —V. 137, N2 5. — P. 1-10.

22. Bothamley G., Beck J., Scheuder G., D'Amaro J., de Vries R., Kardjito Т., Jvanyi J. Association of tuberculosis and M tuberculosisspecific antibody levels with HLA // J. Infect. Dis. — 1989. — V. 159, № 3. — P. 549-555.

23. Bourassa D., Forget A., felletier M., Skamene E., Turcotte R. Cellular immune response to Mycobacterium bovis (BCG) in genetically susceptible and resistant congenic mouse strains // Clin. Exp. Immunol. — 1985. — V. 62, № 11. — P. 31-39.

24. Buchanan Т., Nomaguchi H., Anderson D., et al. Characterization of antibody-reactive epitopes on the 65 — kilodalton protein of Mycobacterium leprae // Infect. Immun. — 1987. — V. 55. — P. 1000-1006.

25. Bullock W., Carlson E., Gershon R. The evolution of immunosuppressive cell populations in experimental mycobacterial infection // J. Immunol. — 1978. — V. 120. — P. 1709-1716.

26. Buschman E., Apt A., Nikonenko В., Movoz A., Aver- bakh M., Skamene E. Genetic aspects of innate resistance and aquired immunity to mycobacteria in inbred mice // Springer Semin. Immunopathol. — 1988. — V. 10. —P. 319-336.

27. Campa M., Beredettini G., Marelli P. В and T lymphocytes regulated by idiotype anti-idiotype inferactions inhibit delayel-type hypersensitivity to BCG in mice // Cellular Immunol. —1986. — V. 98. — P. 93-103.

28. Chase M. The cellular transfer of cutaneous hypersensitivity to tuberculin // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. — 1945. — V. 59. — P. 134-159.

29. Chensue S., Boros D. Population dynamics of T and В lymphocytes in the lymphoid organs, circulation, and granulomas of mice infected with Schistosoma mansoni // Am. J. Trop. Med. Hyg. — 1979. — V. 28, № 2. — P. 291 — 299

30. Coates S., Hansen D., Schecter G. et al. Identification of Mycobacterium tuberculosis antigens in Seibert fractions by immunoblotting // J. Clin. Microbiol. — 1986. — V. 24, N2 2. — P. 126-130.

31. Cobbold S., Jayasuriya A., Nash A. et al. Therapy with monoclonal antibocdies by elimination of T-cell subsets in vivo. // Nature. — 1984. — V. 312, N2 1. — P. 548-551.

32. Colizzi V. In vivo and in vitro administration of inter- leukin-2 -containing preparations reverses T-cell unresponsiveness in M. bovis BCG infected mice // Infec. Immun. — 1984. —V. 45, № 8. — P. 25-28.

33. Collins F. The immunology of tuberculosis. // Am. J. Rev. Resp. Dis. — 1982. — V. 125, suppl. 3. — P. 42-49.

34. Collins F., Cunningham D. Systemic Mycobacterium kansasii infection and regulation of the alloantigenic response // Infect. Immun. — 198! — V. 32. — P. 614-624.

35. Daniel T. The immunology of tuberculosis // Clin. Chest Med.1980. — V. ! — P. 189-20!

36. Daniel Т., Oxtoby M., Pinto E., Moreno E. The immune spectrum in patients with pulmonary tuberculosis// Am. Rev. Resp. Dis. — 198!1. V. 123. — P. 556-559.

37. Ellner J. Immunoregulatory function of mononuclear phagocytes in tuberculosis. // In: M. Berdinelli, H. Friedman (eds.) Mycobacterium tuberculosis: Interaction with the Immune System. Plenum Press.: N. Y. and Lond., 1988. — P. 243-262.

38. Ellner J. Barnes P., Wallis R., Modlin R. The immunology of tuberculous pleurisy // Semin. Respir. Infect. — 1988. — V. 3, №4. — P. 335-342.

39. Ellner J., Wallis R. Immunologic aspects of mycobacterial infections // Rev. Infect. Dis. — 1989. — V. 11, supple 2. — P. 455-459.

40. Ellouz F. Adam A., Ciorbaru R., Lederer E. Minimal structural requirments foradjuvant activity of bacterial peptidoglycan derivatives // Biochem. Biophys. Res. Commun.—1974.— V. 59. —P. 1317-1325.

41. Engers H., Abe M. Bloom B. et al. Results of Warld Health Organization sponsored workshop on monoclonal antibodies to Mycobacteria // lufect. Immun. — 1985. — V. 48. — P. 603-626.

42. Engers H., Houba V., Bennedsen J. et al. Results of a World Health Organization sponsored workshop to characterize antigens recoguized by mucobacteria-specific monoclonal antibodies // Infect. Immun. — 1986. — V. 51. — P. 718-741.

43. Enguar E., Perlman P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G // Immunochemistry. — 1971. — V. 8. — P. 871-874.

44. Fevrier M., Birrien J., Leclerc C. et al. The macrophage, target cell of the synthetic adjuvant MDP // Eur. J. Immunol. — 1978. — V. 8. — P. 558-562.

45. Forget A., Benoit J., Turcotte R., Gusewchartand N. En hancement activity of anti-mycobacterial sera in experimental

46. Mycobacterium bovis (BCG) infection in mice // lufect. Immun. — 1976. — V. 13. — P. 1301-1312.

47. Grieco M., Chmel N. Acute disseminated tuberculosis, as a diagnostic problem. A clinical study based on twenty-eight cases // Am. Rev. Resp. Dis. — 1974 — V. 109.' — P. 554-560.

48. Gros P., Skamene E., Forget A. Cellular mechanisms of genetically controlled host resistance to Mycobacterium bovis (BCG) in mice // J. Immunol. — 1983. — V. 131. — P. 1966-1970.

49. Haregewoin A., Longley J., Bjune G. et al. The role of IL-2 in thespecific unresponsiveness of lepromatous leprosy to Mycobacteriumleprae: Studies in vitro and in vivo // Immunol. Letters. — 1985. —V. 11. —P. 249-252.

50. Hayes C., Bach F. T-cell-specific murine la antigens: serology of l-J and 1-Е subregion specificities. // J. Exp. Med. — 1978. — V. 148, № 3. — P. 692-703.

51. Hoffenbach A., Lagrange P., Bach M. Deficit of interleukin 2 production associated witn impaired T cell proliferative responses in Mycobacterium lepraemurium infection. // Infect. Immun. — 1983. — V.39. —P. 109-116.

52. Holt P. Down-regulation of immune responses in the lower respiratory tract: the role of alveolar macrophages. // Clin. Exp. Immunol. — 1986. — V. 63, № 2. — P. 261-270.

53. Holt P., Corrier D., De Loach J. Suppressive and enhancing effect of T-2 toxin on murine lymphocyte activation and interleukin 2 production. // Immunopharmacol. Immunotoxicol. — 1988. —V. 10, № 3. — P. 365-385.

54. Isenberg D., Maddison P., Swana G. et al. Profile of autoantibodies in the serum of patients with tuberculosis, kiebsiellaand other Gram-negative infections // Clin. Exp. Immunol. — 1987. — V. 67.— P. 516-530.

55. Ivany J., Morris J., Keen M. Studies with monoclonal antibodies to mycobacteria // In: Macario A., Macario E. (eds.) Monoclonal Fntibodies againstn bacteria. Acad. Press.: N. Y., 1985. — V. 1. — P. 59-90.

56. Ivanyi J.Sharp K., JackettP., BothamleyG. Immunological study of the defined constituents of mycobacteria // Springer Seminar Immunopathol. — 1988. — V. 10. — P. 279-300.

57. Jaffe M., Rabson A. Suppression of L.I.F. production in vitro but not blastogenesis in patients with tuberculosis meningitis. // Clin. Immunol. Immunopathol. — 1981. —V. 18. — P. 245-253.

58. Kadival G., Chaparas S. Production, characterization and species specificity of five monoclonal antibodies to Mucobacterium tuberculosis. // J. Clin. Microbiol. — 1987. —V. 25. — P. 76-89.

59. Kakinuma M., Опое K., Yasumizu R., Yamamoto K. Strain differences in lung granuloma formation in response to a BCG cell-wall vaccine in mice. Failure of antigen presentation by low-responder macrophages. // Immunology. — 1983. — V. 50. — P. 423-430.

60. Kallin В., Nilsson O. Effect of splenectomy dn the development of experimental autoimmune encephalomyelitis in rats with different genetic background. // Inf. Archs allergy appl. Immun. — 1985. — V. 76. — P. 200-204.

61. Kaplan G., Cohn Z. Cellular immunity in lepramatous and tuberculoid leprosy. // Immunol. Letters. — 1985. — V. 11. — P. 205-209.

62. Kaplan G., Meinstein D., Steinman R. et al. An analysis of in vitro Tcell responsiveness in lepromatous leprosy. // J. Exp. Med. — 1985. — V. 162. — P. 917-929.

63. Kaufmann S. In vitro analysis of the cellular mechanisms involved in immunity to tuberculosis. // Rev. Infect. Dis. — 1989. — V. 11, Suppl. 2. — P. 5448-5454.

64. Kaufmann S., Flesch I. The role of T cell-macrophage interactions in tuberculosis. // Springer Semin. Immunopathol. — 1988. — V. 10. — P. 337-358.

65. Kingston A., Salgame P., Mitchison N., Colston M. Immunological activity of a 14 kilodalton recombinant protein of Mycobacterium tuberculosis H37Rv // Infect. Immun. — 1987. — V. 55. —P. 3149-3159.

66. Kleinhenz M., Ellner J. Immunoregulatory adherent cells in human tuberculosis: Radiation-sensitive antigenspecific suppression by monocytes. //J. Infect. Dis. — 1985. — V. 152. — P. 171-176.

67. Klimpel G., Henney C. BCG-induced suppressor cells. I. Demonstration of a macrophadelike suppressor cells that inhibits cytotoxic T cell generation in vitro. // J. Immunol. — 1978. — V. 120.1. P. 563-569.

68. Leclerc C., Bourgeois E., Chedid L. Demonstration of muramyl dipeptide (MDP) — indused T suppressor cells responsible for MDP immunosuppressive activity. // Eur. J. Immunol. — 1982. —V. 12. — P. 249-252.

69. Lowy I. Bona C., Chedid L. Target cells tor the activity of a synthetic adjuvant: Muramyldipeptide // Cell. Immunol. — 1977. — V. 29. — P. 195-199.

70. Mackaness G. The monocyte in cellular immunology // Semin. Hematol. — 1970. — V. 7. — P. 172-204.

71. McMurray D., Echeverri A. Cell-mediated immunity in anergic patients with pulmonary tuberculosis // Am. J. Resp. Dis. — 1978. — V. 118.—P. 827-834.

72. Mehra V., Convit J., Rubinstei A., Bloom B. Activated suppressor T cells in leprosy //J. Immunol. — 1982. — V. 129. —P. 1946-1951.

73. Merser C., Sinay P., Adam A. Total synthesis and adjuvant activity of bacterial peptidoglycan derivatives // Biochem. Biophys. Res. Commun. — 1975. — V. 66. — P. 1315-1322

74. Minden P., McClatchy J., Farr R. Shared antigens between heterologous bacterial species // Intect. Immun. — 1972. — V. 6. — P. 574-582.

75. Modlin R., Kato H., Mehra V. et al. Genetically restricted suppressor T cell clones derived from lepramatous leprosy lesions // Nature. — 1986. a. — V. 322. — P. 459-462.

76. Modlin R., Mehra V., Jordan R. et al. Supressor T lymphocytes trom lepromatous leprosy skin lesions // J. Immunol. — 1986. — V. 137. — P. 2831-3837.

77. Modlin R., Rea T. Immunopathology of leprosy granulomas // Springer Semin. Immunopathol., 1988. — V. 10. — P. 359-374.

78. Moore V. Regulation and fharmacology of granulomatous inflammation // In: M. Bendinelly, H. Friedman (eds.). Mycobacterium tuberculosis: Interaction with the Immune System. Plenum Press.: N. Y. and Lond., 1988. — P. 137-150.

79. Moore V., Mondloch V., Pedersen G., Schrier D., Allen E. Strain variation in BCG-induced chronic pulmonary inflammation in mice: control by a cyclophosphamide-sensitive thymus-derived suppressor cell. // J. Immunol. — 198! — V. 127, N2 ! — P. 339-342.

80. Muller I., Cobbold S., Waldmann H., Kanfmann S. Impaired resistance to Mycobacterium tuberculosis intection after selective in vivo depletion of L3T4+ and Ly2+T cell // Infect. Immun. — 1987. — V. 55. — P. 2037-204!

81. Muller I., Mayer V., Brinkmann V., Kaufmann S. Autoreactive T cell clones trom Mycobacterium bovis BCG infected mice. I. Phenotype, specificity and in vitro function // Immunobiology. — 1986. — V. 17! — P. 366-378.

82. Nakamura R., Nakamura Y., Nagayama A., Tokunaga T. I-J-positive cloned macrophages as the accessory cells for the induction of cuppressor T cells in vitro // Immunol. Res. — 1986. — V. 5. — P. 106-116.

83. Nakamura R., Tokunaga Т., Induction of suppressor T cells in delayed-type hypersensitivity to Mycobacterium bovis BCG in low-responder mice // Infect. Immun. — 1980. — V. 28. — P. 331-335.

84. Nakamura R., Tokunaga T. Suppressor cells in mycobacterial infection // In: M. Bendenelli, H. Friedman (eds.). Mycobacterium tuberculosis: interaction with the Immune System. Plenum Press.: N. Y. and Lond., 1988. — P. 227-241.

85. Nash D., Douglas J. Anergy in active tuberculosis: A comparison between positive and negative reactors and an evaluation of 5 TU and 250 TU test doses // Chest. — 1980. — V. 77. — P. 32-37.

86. Nath I., Jayaraman J., Satish M. et al. Inhibition of interleukin 2 production by adherent cell factors from lepramatous leprosy patiens // Clin. Exp. Immunol. — 1984. — V. 58. — P. 531-538.

87. Nathan C., Murray H., Wiebe M., Rubin B. Identification of interferon as the lymphokine that activates human oxidative metabolism and antimicrobial activity. // J. Exp. Med. — 1983. — V. 158. — P. 670-691.

88. Nickonenko В., Apt A., Moroz A., Averbakh M. Genetic analysis of susceptibility of mice to H37Rv tuberculosis infection: sensitivity versus relative resistance // Progr. Leuc. Biol. — 1985. —V. 3. — P. 291-299.

89. Oliveira DM Mitchison N. Immune suppression genes. // Clin. Exp. Immunol. — 1989. — V. 75, №2. — P. 167-177.

90. Orme I. The kinetiks of emergence and loss of mediator T lymphocytes acquired in response to infection with Mycobacterium tuberculosis // J. Immunol. — 1987. — V. 138. — P. 293-297.

91. Orme I. Anergy in experimental mouse models of mycobacterial infection /7 In : M. Bendinelli, H. Friedman (eds.). Mycobacteriumtuberculosis: Interaction with the Immune System. Plenum Press.: N. Y. and Lond., 1988. — P. 207-225.

92. Orme I., Collins F. Protection against Mycobacterium tuberculosis infection by adoptive immunotherapy: requirment for T cell deficient recipients//J. Exp. Med. —1983. —V. 158. —P. 74-92.

93. Orme I., Collins F. Passive transfer of tuberculin sensitivity from anergic mice // Infect. Immun. — 1984. — V. 46. — P. 850-853.

94. Ottenhoff Т., Elferink D., Klatser P., de Vries R. Cloned suppressor T cells from a lepromatous leprosy patient suppress Mycobacterium leprae reactive helper T cells // Nature. — 1.986. — V. 322, № 6. — P. 462-464.

95. Patel P. Antibacterial resistance in mice infected with Mycobacterium lepraemurium // Clin. Exp. Immunol. —1981. — V. 45.1. P. 654-661.

96. Pedrazzini Т., Hug K., Louis J. Importance of L3T4+ and Lyt2+ cells in the immunologic control of infection with M. bovis (BCG) in mice. Assessment by elimination of T cell subsets in vivo //J. Immunol. — 1987. — V. 139. — P. 2032-2037.

97. Piessens W. Introduction to the immunology of tuberculosis // Rev. Infect Dis. — 1989. — № 11. — Suppl. 2. — P. 436-442.

98. Pincus J., Gordon R. A microassay for the detection of murine H-2 antigens // Transplantation. — 1971. — V. 12. — P. 509-513.

99. Preston P. Macrophages and protective immunity in Mycobacterium lepraemurium infections in a "resistant" (C57BI) and a "susceptible" (BALB/c) mouse strain // Clin. Exp. Immunol. — 1982.1. V. 47, №2. — P. 243-252.

100. Ridley D., Jopling W. Classification of leprosy according to immunity. A five group system // Inf. J. Leprosy. — 1966. — V. 69. — p. 442-444.

101. Rook G. An integrated view of immunology of the mycobacterioses in guinea pigs, mice and men // In: C. Ratledge, J. Stanford (eds.) Biology of Mycobacteria. Academic Press.: London, 1983. —V. 2.— P. 279-319.

102. Rook G., Champion В., Steele J. et al. l-A-restricted activation by T cell lines of anti-tuberculous activity in murine macrophages // Clin. Exp. Immun. — 1985. — V. 59. — P 414-423.

103. Sada E., Ruiz-Palacios G. L'opez-Vidal Y., Ponce de Le'on S. Detection of mucobacterial antigens in cerebrospinal fluid of patiens with tuberculosis meningitis by ELISA. // Lancet. — 1983. — N2 2. — 651-652.

104. Salgame P., Mahadevan P., Anita N. Mechanism of immunodepression in leprosy: Presence of suppressor factor (s) from macrophages of lepramatous patients // Infect. Immun. — 1983. — V. 40. — P. 1119-1126.

105. Schurr E., Buschman E., Malo D., Gros P., Skamene E. Immunogenetics of mycobacterial infections: mouse-human homologies // J. Infect. Dis. — 1990. — V. 161, N2 4. — P. 634-639.

106. Scordamaglia A., Bagnasco M., Canonica G. Immune response to Mycobacteria // In: M. Bendinelli, H. Friedman (eds.) Mucobacterium tuberculosis: Interactions with the Immune System. Plenum Press.: N. Y. and Lond., 1988. — P. 81-98.

107. Scott G., Russel D., Boughton C., Vincin D. Untreated leprosy probability for shifts in Ridley-Jopling classification // Int. J. Leprosy — 1976.—V. 44.— P. 110-121.

108. Shoenfield Y., Vilner Y., Coates A. et al.Monoclonalfantituberculosis antibodies react with DNA and monoclonal anti-DNA autoantibodies react with M. Tuberculosis // Clin. Exp. Immunol. — 1987. — V. 66. — P. 255-266.

109. Singh S., Mehra N., Dingley H. et al. Human leukocyte antigen (HLA)-linked control of susceptibility to pulmonary tuberculosis and association with HLA-DR types // J. Inf. Dis., 1983. — V. 148. — P. 676-684.

110. Skamene E., Gros P., Forget A. et al. Genetic regulation of resistance to intracellular pathogens // Nature. — 1982. — V. 297. — P. 506-509.

111. Stach J., Gros P., Forget A., Skamene E. Phenotypic expression of genetically-controlled natural resistance to Mycobacterium bovis (BCG) // J. Immunol. — 1984. — V. 132. — P. 888-893.

112. Straus E., Wu N., Quraishi M., Levine S. Clinical applications of the radioimmunoassay of secretory tuberculin protein // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1981. — V. 78. — P. 3214-3217.

113. Sultzer B. Polyclonal lymphocyte activation by M. tuberculosis and its products // In: Bendinelli M., Friedman H. (eds.) Mycobacterium tuberculosis: Interaction with the Immune System. Plenum Press.: N. Y. and Lond., 1988. — P. 277-303.

114. Tandon A., Saxena R., Saxena K. Diagnostic potentialities of enzyme-linked immunosorbent assay in tuberculosis using purified tuberculin antigen // Tubercle. — 1980. — V. 61. — P. 87-89.

115. Taniguchi M., Sumida T. "I-J" as an idiotypic marker on the antigen-specific suppressor T cell factor // Immunol. Rev. — 1985. — V. 83. — P. 125-150.

116. Thole J., Keulen W., De Bruyn J. et al. Characterization, sequence determination and immunogenicity of a 64-kilodalton protein of M. bovis BCG-expressed in E. coli K-12 // Infect. Immun. — 1987.1. V. 55. — P. 1466-1473.

117. Toossi Z., Kleinhenz M., Ellner J. Defective interleukin-2 production and responsiveness in human tuberculosis // J. Exp. Med.1986. — V. 163. — P. 1162-1172.

118. Tsuynguchi I., Shiratsuchi H., Teraoka 0., Hirano T. Increase in T cells bearing IgG Fc receptor in periferal blood of patients with tuberculosis by in vitro stimulation with PPD // Am. Rev. Resp. Dis.1980. — V. 121. — P. 951-959.

119. Turcotte R. Evidence for two distinct populations of suppressor cells in the spleensof Mycobacterium bovis BCG-sensitized mice // Infect. Immun. — 1981. — V. 34. — P. 315-322.

120. Turcotte R., Legault D. Mechanisms underlying the depressed production of interleukin-2 in spleen and lymph node cell cultures of mice'infected with Mycobacterium bovis BCG // Infect. Immun. — 1986 —V. 56. —P. 826-831.

121. Tweardy D., Schacter В., Ellener J. Association of altered dynamics of monocyte surface expression of human leukocyte antigen-DR with immunosuppression in tuberculosis // J. Infect. Dis.1984. — V. 149. — P. 31-37.

122. Wadee A., Sher G., Rabson A. Production of a suppressor factor by human adherent cells treated with mycobacteria // J. Immunol. — 1980. — V. 125. — P. 1380-1386.

123. Waltenbaugh C., Sun L., Lei H. Regulation of immune responses by I-J gene products. VI. Recognition of 1-Е molecules by l-J-bearing suppressor factors // J. Exp. Med. — 1986. —V. 163, N 1.1. P. 797-811.

124. Warren К. Modulation of immunopathology and disease in schistosomiasis // Am. J. Trop. Med. Hyg. — 1978. — V, 26, N2 6. — P. 113-119.

125. Watson J. Leprosy: understanding protective immunity. // Immunology today. — 1989. — V. 10. — P. 218-22!

126. Watson S., Collins F. The specificity of suppressor T cells induced by chronic M. avium infection in mice // Clin. Exp. Immunol. — 1980. — V. 43. — P. 10-19.

127. Worsaae A., Ljungqvist L., Haslov K. et al. Allergenic and blastogenic reactivity of three antigens from M. tuberculosis in sensitized guinea pigs // Infect. Immun. — 1987. — V. 55. — P. 2922-2929.

128. Yamada H., Martin P., Bean M. et al. Monoclonal antibody 9.3 and anti-CD11 antibodies define reciprocal subsets of lymphocytes // Eur. J. Immunol. — 1985 —V. 15. —P. 1164-1168.

129. Yanez M., Coppola M., Russo D. et. al. Determination of mycobacterial antigens in sputum by enzyme immunoassay // J. Clin, Microbiol. — 1986. — V. 23. — P. 822-825.

130. Young D., Kent L., Young R. Screening of recombinant mycobacterial DNA library with polyclonal antiserum and molecular weight analysis of expressed antigens // Infect. Immun. — 1987. — V. 55. —P. 1421-1436.102

131. Young D., Lathigra R., Hendrix R. et. al. Stress proteuns are immune targets in leprosy and tuberculosis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1988. — V. 85. — P. 4267-4270.

132. ZeitzS., OstowJ., Van Arsdel P. Humoral and cellular immunity in anergic tuberculosis patients //J. Allergy Clin. Immunol. — 1974. — V. 53. — P. 20-26.

133. Zwilling В., Johnson S., Vespa L., Kwagriewski M. BCG inaection induced continuous l-A expression in BCG resistant mice // Progr. Leukocyte Biol. — 1985. — V. 3. — P. 299-308.